CN104230736B - 一种抗炎、镇痛的药物及其制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域。本发明涉及一种2‑[(2,6‑二氯苯基)氨基]苯乙酸1‑(乙酰氧基)乙基酯的合成方法及其脂肪乳注射液的制备。双氯芬酸钠在碱性的催化剂存在的条件下与1‑溴乙基乙酸酯发生反应得到2‑[(2,6‑二氯苯基)氨基]苯乙酸1‑(乙酰氧基)乙基酯(简称双氯芬酸酯),其化学结构如下所示。本发明化合物为非甾体抗炎药,将其制备成脂肪乳注射液,可用于静脉注射。与国外上市的双氯芬酸钠可静脉注射制剂相比,双氯芬酸酯脂肪乳注射液不仅在使用时安全性高,而且其体内抗炎、镇痛效果更优。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,本发明涉及一种2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯及其合成方法,以及其脂肪乳注射液的制备。
背景技术
双氯芬酸钠(Diclofenac sodium,DS),化学名为2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,属于苯乙酸类非甾体抗炎药。其作用机制是通过抑制环氧化酶的活性进而阻断花生四烯酸转化为前列腺素(PGs),而产生镇痛、抗炎作用。同时与其他非选择性的非甾体抗炎药相比,由于DS对抑制50%环氧化酶-2活性所需的血药浓度(IC50)较低,并且在体外显示出对环氧化酶-1相似的抑制活性,所以其药效更好,副作用较低。目前市场上DS常见的剂型有很多,有可供口服的片剂、胶囊、丸剂以及外用的乳膏剂、搽剂、凝胶剂、栓剂,另外还有供肌肉注射的注射剂等,DS的各种制剂目前被广泛用于各种风湿、类风湿性关炎、神经炎、红斑狼疮、关节强直性脊椎炎的治疗。另外DS在各种急慢性关节炎和软组织风湿所致的疼痛,癌症痛、以及创伤后、术后的急性疼痛等的治疗中也有着非常广泛的应用。
晚期癌症患者以及外科手术后病人往往会经历突破性疼痛(breakthrough pain),该疼痛不仅让患者难以忍受,而且影响神经、免疫、内分泌系统之间的双向调控,抑制机体免疫功能,影响疾病的转归。在突破性疼痛的治疗中,DS作为具有镇痛作用的非甾体抗炎药,往往与阿片类药物进行联用,在不增加阿片类药物的用量与副作用的情况下,能显著提高镇痛效果。但是突破性疼痛发生的时间往往不确定并且疼痛持续时间也较短(30min-60min),非静脉给予镇痛药物往往起效慢,生物利用度也不高,,可能在药物达到镇痛所需血药浓度时,患者疼痛感已经消失,镇痛效果不明显(Anderson S K,Al Shaikh B A.Diclofenac in combination with opiate infusion after joint replacement surgery[J].Anaesthesia and intensive care,1991,19(4):535-538.)(DeNatale C E,Rosenberg A,Gharibo C.Rapid acting analgesics[J].Techniques in Regional Anesthesia and Pain Management,
2010,14(2):65-74.),而静脉注射制剂往往能直接达到药物作用所需浓度,所以将DS开发为安全、稳定并能迅速起效的静脉注射制剂,可能会成为广大经历突破性疼痛的患者在采取药物治疗时更优的制剂选择,另外DS在正常剂量下容易产生一些不良反应,主要是胃肠道刺激,而Bassotti等研究发现,治疗剂量下DS通过非肠道方式给药不会像口服给药那样影响胃肠道上端的运动机能,因此与口服相比,静脉注射DS引起的胃肠道不良反应会较轻(Bassotti G,Bucaneve G,Betti C,et al.Effects of parenteral diclofenac sodium on upper gastrointestinal motility after food in man.European journal of clinical pharmacology,1991,41(5):497-500),再加上对于一些进行了胃肠道手术而不能口服,或者口服非甾体抗炎药物有风险的患者,也可采用静脉给药方式,所以开发DS静脉注射制剂意义重大。
考虑到上述要求,Novartis公司开发了双氯芬酸钠注射液(ampoule75mg/3ml),由于双氯芬酸钠溶解度不高,在处方中采用大量丙二醇和苯甲醇对DS进行增溶,可用于静脉注射(Mazurek S,Szostak R.Quantitative determination of diclofenac sodium and aminophylline in injection solutions by FT-Raman spectroscopy[J].Journal of pharmaceutical andbiomedical analysis,2006,40(5):1235-1242.)。但是该制剂在临床使用时存在以下问题:由于采用有机溶媒溶解DS,在静脉注射前需要用大量的碱性生理盐水进行稀释,同时其需要缓慢的进行静脉输注来减少静脉炎的发生率,一般需要30-120分钟以上(详见ampoule说明书),所以患者药物使用的顺应性与安全性均较差。
中国专利CN200810101867.0,(公开号CN101244278A)公开了一种采用羟丙基-β-环糊精包合DS的静脉注射制剂,该发明提高了DS在水中的溶解度,降低了DS直接注射时对血管的刺激性,但是我们不得不指出的是:近年来有大量的文献报道静脉注射羟丙基-β-环糊精具有肾毒性以及导致骨质流失等(刘妍,程晓翔,郭传敏,等.大鼠腹腔和静脉给予羟丙基-β-环糊精毒性比较实验研究[J].现代药物与临床,2009,24(6):361-364.)(Rosseels M L A,Delaunois A G,Hanon E,et al.Hydroxypropyl-β-cyclodextrin impacts renal and systemic hemodynamics in the anesthetized dog[J].Regulatory Toxicology and Pharmacology,2013,67(3):351-359.)(Kantner I,Erben R G.Long-Term Parenteral Administration of2-Hydroxypropyl-β-Cyclodextrin Causes Bone Loss[J].Toxicologic pathology,2012,40(5):742-750.),所以含有 羟丙基-β-环糊精的DS注射剂在使用时仍然具有一定的安全隐患问题,而如何开发出更加安全,有效的DS静脉注射剂,仍是一项急待解决的难题。
目前,将难溶性药物包裹于脂肪乳中进行静脉给药这一技术得到了研究者们的大量关注。在临床上,也有大量的静脉注射用载药脂肪乳制剂得以应用,例如丙泊酚中长链脂肪乳,地塞米松棕榈酸酯注射液等等,这些制剂不仅提高了药物的溶解度,降低了药物静脉注射时的刺激性,还提高了药物的治疗效果(赵明明,苏敏,唐星.载药脂肪乳注射液的研究进展[J].沈阳药科大学学报,2010,27(12):1014-1022.)(Yokoyama K,Watanabe M.Limethason as a lipid microsphere preparation:An overview[J].Advanced drug delivery reviews,1996,20(2):195-201.)(王云,俞文军,张雯,等.丙泊酚中长链脂肪乳注射液静脉麻醉注射痛的临床观察[J].陕西医学杂志,2010(2):238-239.)。那么将DS制备为脂肪乳制剂可能不失为一种很好的DS静脉注射制剂,但是DS以及双氯芬酸在大豆油或者其他批准的可用于静脉注射油脂中溶解度都较低,如果将其直接制成脂肪乳剂,其载药量会很低。例如崔越等研究了双氯芬酸脂肪乳制剂,采用较多油相(20%,质量分数)制备的DS脂肪乳的药物含量也仅仅只有2.5mg/ml,并且该制剂处方中还还含有助乳化剂吐温-80以及泊洛沙姆188(崔越.双氯芬酸钠脂质微球注射液的研究[D].沈阳药科大学,2009.),而有报导表明,吐温-80有严重的致敏作用(罗霞,王青,周联,等.中药注射剂所含吐温-80与过敏反应关系的研究[J].药物不良反应杂志,2010,12(3):160-165.),所以该制剂在使用安全性上有待改善。双氯芬酸钠的临床所需剂量较大(75mg),上述研究的DS脂肪乳如用于给药,则起码需要30ml以上用量,这样大体积的制剂在使用时需要较长的输注时间,延迟镇痛效果的发挥,也影响患者的顺应性,另外从药物成本上来说也增加了辅料用量,增加了生产成本,提高了药物的价格,加重患者经济负担,并且目前DS脂肪乳制剂也未见上市。
发明内容
本发明目的是为了克服现有技术的缺陷,在DS基础上加以结构修饰,开发出一种非甾体抗炎药,该化合物脂溶性大大高于DS,制备成脂肪乳剂,载药量能大量提高,使用更加安全,其体内抗炎、镇痛效果优于国外上市的DS静脉注射剂。
本发明的主要技术方案是:对双氯芬酸钠(DS)结构修饰,获得新的化合物为2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯(简称双氯芬酸酯),是非甾体抗炎药双氯芬酸钠的衍生物。进一步研究表明,用双氯芬酸钠合成双氯芬酸酯步骤简单,药物产率高,合成的双氯芬酸酯具有很好的油溶性,可用于制备静脉注射用脂肪乳制剂,载药量高,安全高效。
本发明的第一方面,是提供了一种2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯(简称双氯芬酸酯),该化合物具有如下结构式:
本发明的第二方面,是提供了上述双氯芬酸酯的合成方法,该方法的的合成路线是:
即在取代反应条件和碱性的催化剂存在下,双氯芬酸钠与1-溴乙基乙酸酯反应合成本发明化合物。
所述的碱性的催化剂可选自碳酸氢钾、碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾等的一种或两种。
较优的,本发明化合物双氯芬酸酯,所述的合成方法以原料2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠1mol作为投料单位,其步骤如下:
1、反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入有机溶剂溶解,加入催化剂,在室温下搅拌。
本反应采用的有机溶剂优选为N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、丙酮中的一种或多种。本反应加入0.5~1L有机溶剂,优选0.8L。
本反应加入碱性的催化剂,加入量为0.1~1.2mol,优选1~1.1mol。室温下搅拌0.5~4小时,优选1~1.5小时。
2、反应液中滴加1.1~2.0mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应一段时间后升温至一定温度进行反应。
本反应中1-溴乙基乙酸酯加入量为1.1~2.0mol,优选1.2mol。室温反应时间为5~30分钟,优选20分钟。升温反应阶段的温度为30℃~80℃,优选55℃。升温后反应时间为0.5~8小时,优选4~5小时。
3、停止反应后,反应液中加入有机溶剂和水后,分离有机相,水洗涤后,用硫代硫酸钠水溶液洗涤,最后用饱和食盐水洗涤。
该萃取步骤中,选择乙酸乙酯、乙醚、甲基叔丁基醚中的一种或多种作为萃取剂。加入的溶剂的总量都为0.5~5L,优选2~3L。其中萃取剂与水的体积比为1:1~1.5,优选1:1.3。硫代硫酸钠水溶液的pH为9~11,优选10.2~10.5。
4、有机相旋转蒸发掉有机溶剂,粗品真空干燥后双氯芬酸酯。
本发明的第三方面,提供了含有上述化合物的脂肪乳注射液,克服上市双氯芬酸钠注射液存在的技术缺陷。
本发明提供的一种双氯芬酸酯,能够制成稳定、载药量高的静脉注射用脂肪乳剂。这种静脉注射脂肪乳剂具有高度的靶向作用,在体内代谢过程中能将药物聚集在炎性部位,具有更好的抗炎效果。这种双氯芬酸酯脂肪乳剂中双氯芬酸酯以脂质微球的形式分散,高温灭菌后平均乳粒粒径在170~300nm范围内,可以不经生理盐水等稀释直接静脉注射,使用方便,注射时无溶血性和刺激性。
本发明提供了一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,是由双氯芬酸酯、注射用油、精制卵磷脂、甘油、pH调节剂以及注射用水组成,各组分的配比为(以下百分比是指相对于注射液总体积而言的)。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的双氯芬酸酯为主药,其用量为0.5~2%克/毫升,优选用量为0.8~1.5%克/毫升,更优选为1%克 /毫升。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的注射用油选自注射用大豆油或注射用大豆油与注射用辛癸酸甘油三酯两者的混合物,用量为10%或20%克/毫升,优选用量为10%克/毫升。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的注射用油选自注射用大豆油、注射用大豆油与注射用辛癸酸甘油三酯两者的混合物,其中注射用大豆油在该混合物中的含量不得低于重量比的50%(克/克)。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的pH调节剂选自枸橼酸、盐酸、磷酸、醋酸、磷酸氢二钠、氢氧化钠中的一种或两种。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的pH调节剂调节pH为6.0~8.0,优选6.5~7.5。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,所述的制备方法为包括下列步骤:
1、称取适量的注射用油、精制蛋黄卵磷脂,混匀,置于水浴加热至55℃~80℃,搅拌或剪切使溶解,然后加入双氯芬酸酯在55℃~80℃下搅拌或剪切使溶解,制得油相。
该操作步骤中,其中卵磷脂是溶解在油相中,也可将卵磷脂分散在水相中。
2、将甘油分散在适量注射用水中,加热至55℃~80℃,得水相。
3、在55℃~80℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10~15min,得初乳。
4、这种混合乳化液再经过高压均质机,经过10000~15000psi均质压力进一步乳化,用注射用水定容,用pH调节剂调节pH至6.0~8.0。
5、过滤,分装,充氮,封口,灭菌121℃,灭菌15分钟,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
该操作步骤中,采用孔径0.45μm或0.8μm的囊式过滤器过滤。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,平均粒径170~300nm。
本发明的一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液,是一个终端的脂肪乳注射液,临床用药时直接静脉注射,无需配液过程,避免了交叉污染的风险,方便了临床用药。
本发明不仅提供了一种新型的双氯芬酸酯及其合成方法,并且成功制 备了安全、高效、载药量高的双氯芬酸酯脂肪乳注射液。本发明的双氯芬酸酯,其脂溶性比双氯芬酸钠高,体内抗炎、镇痛效果优于双氯芬酸钠;
其合成路线具有如下优点:
1、本合成原料为工业化产品,且成本低廉,性能稳定。
2、本合成路线简单,且对生产人员和生产设备要求低。
3、本合成产物纯度高、产率高,适合大批量生产,满足工业化生产需求。
本发明化合物制备成的静脉注射脂肪乳剂,经动物实验结果表明,该制剂起效迅速,作用显著,与国外上市的可静脉注射的双氯芬酸钠溶液相比,其使用更加安全,其抗炎、镇痛效果更优,并且具有一定的长效作用。
附图说明
图1为双氯芬酸酯的1HNMR谱图。
图2为双氯芬酸酯的MS(ESI)谱图。
图3为双氯芬酸酯脂肪乳注射液溶血性实验实效图。
图4为双氯芬酸钠注射液、双氯芬酸酯脂肪乳注射液血管刺激性实验组织切片图像,其中1-双氯芬酸钠注射液组;2-生理盐水对照组;3-双氯芬酸酯脂肪乳注射液组;4-空白乳剂对照组。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明,但本发明的实施不仅限于此。
实施例1:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入1L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入1.1mol碳酸钠作为催化剂,在室温下搅拌2小时后,滴加1.2mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应10分钟后升温至40℃,反应4小时后冷却至室温;加入3L乙酸乙酯和水的混合溶剂(乙酸乙酯:水1:1),分离有机相,用3L水洗涤后,用3L硫代硫酸钠水溶液(pH=10)洗涤,最后用3L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粗品,粗品真空干燥10小时除有机溶剂残留后得粘稠油状物质272.46g,该物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬 酸钠收率为92.0%。
该粘稠油状物质的1HNMR和MS(ESI)谱图分别如图1~2所示,对应的数据如下:
1HNMR(CDCl3,600MHz,ppm)δ:1.50(d,3H,J=5.4Hz,OCHCH 3 ),2.06(s,3H,CH 3 CO),3.81(d,1H,PhCH A HBCO,J=15.0Hz),3.86(d,1H,PhCHA H B CO,J=15.0Hz),6.57(m,1H,Ar-H),6.64(br s,1H,NH),6.91(q,1H,J=5.4Hz,OCHCH3),6.98(m,2H,Ar-H),7.14(m,1H,Ar-H),7.23(m,1H,Ar-H),7.34(m,2H,Ar-H)。
MS(ESI+)m/z:404(M+Na+,100%)。
实施例2:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入0.5L的N,N-二甲基甲酰胺与0.3L的丙酮溶解,加入1.2mol碳酸钾作为催化剂,在室温下搅拌4小时后,滴加1.5mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应30分钟后升温至80℃,反应8小时后冷却至室温;加入5L乙酸乙酯和水的混合溶剂(乙酸乙酯:水1.5:1),分离有机相,用5L水洗涤后,用5L硫代硫酸钠水溶液(pH=11)洗涤,最后用5L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥24小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质266.54g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为90.0%。
实施例3:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入0.5L的N,N-二甲基乙酰胺与0.3L的丙酮溶解,加入1mol碳酸钠作为催化剂,在室温下搅拌1小时后,滴加1.1mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应20分钟后升温至50℃,反应5小时后冷却至室温;加入4L乙酸乙酯和水的混合溶剂(乙酸乙酯:水1.2:1),分离有机相,用4L水洗涤后,用4L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.2)洗涤,最后用4L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥8小时除残留有机溶剂后,得粘稠油状物质268.02g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为90.5%。
实施例4:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入0.8L的丙酮溶解,加入0.5mol碳酸氢钠作为催化剂,在室温下搅拌0.5小时后,滴加1.1mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应5分钟后升温至30℃,反应0.5小时后冷却至室温;加入3L乙醚和水的混合溶剂(乙醚:水1.5:1),分离有机相,用3L水洗涤后,用3L硫代硫酸钠水溶液(pH=9)洗涤,最后用3L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥5小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质210.27g,经 1HNMR和MS(ESI)谱图证实该白色固体为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为71.0%。
实施例5:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入0.8L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入0.1mol碳酸氢钾作为催化剂,在室温下搅拌1.5小时后,滴加1.1mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应20分钟后升温至55℃,反应4.5小时后冷却至室温;加入0.5L乙酸乙酯、乙醚、甲基叔丁基醚和水的混合溶剂(混合有机溶剂:水1.3:1),分离有机相,用0.5L水洗涤后,用0.5L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.5)洗涤,最后用0.5L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥9小时除有机溶剂后,得粘稠油状物质181.54g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为61.3%。
实施例6:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入0.4L的N,N-二甲基乙酰胺、0.3L的N,N-二甲基乙酰胺及0.3L的丙酮溶解,加入0.5mol碳酸钠和0.5mol碳酸钾作为催化剂,在室温下搅拌1小时后,滴加1.1mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应20分钟后升温至55℃,反应4小时后冷却至室温;加入0.5L甲基叔丁基醚和水的混合溶剂(甲基叔丁基醚:水1.3:1),分离有机相,用2L水洗涤后,用2L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.2)洗涤,最后用2L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥8小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质275.72g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标 产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为93.1%。
实施例7:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入1L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入0.5mol碳酸钠、0.5mol碳酸钾及0.2mol碳酸氢钾作为催化剂,在室温下搅拌1.5小时后,滴加1.2mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应20分钟后升温至55℃,反应5小时后冷却至室温;加入2L乙酸乙酯和水的混合溶剂(乙酸乙酯:水1.3:1),分离有机相,用2L水洗涤后,用2L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.2)洗涤,最后用2L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥10小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质274.53g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该白色固体为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为92.7%。
实施例8:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入1L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入0.4mol碳酸氢钾和0.4mol碳酸氢钠作为催化剂,在室温下搅拌1.5小时后,滴加1.3mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应15分钟后升温至35℃,反应2小时后冷却至室温;加入2L乙酸乙酯和水的混合溶剂(乙酸乙酯:水1.3:1),分离有机相,用2L水洗涤后,用2L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.2)洗涤,最后用2L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥10小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质247.29g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为83.5%。
实施例9:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入1L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入1.1mol碳酸钠作为催化剂,在室温下搅拌3小时后,滴加1.1mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应15分钟后升温至50℃,反应4.5小时后冷却至室温;加入2L乙酸乙酯、乙醚和水的混合溶剂(混合有机溶剂:水1.3:1),分离有机相,用2L水洗涤后,用2L硫代硫酸钠水溶液(pH=10.4)洗涤,最后用2L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥9小时除有机溶剂残 留后,得粘稠油状物质270.12g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该白色固体为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为91.2%。
实施例10:本发明化合物制备例
在反应容器中加入1mol的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸钠,加入1L的N,N-二甲基乙酰胺溶解,加入1mol碳酸氢钾作为催化剂,在室温下搅拌1小时后,滴加1.2mol的1-溴乙基乙酸酯,室温反应20分钟后升温至55℃,反应4小时后冷却至室温;加入2.5L乙酸乙酯、甲基叔丁基醚和水的混合溶剂(混合有机溶剂:水1.5:1),分离有机相,用2.5L水洗涤后,用2.5L硫代硫酸钠水溶液(pH=11)洗涤,最后用2.5L饱和食盐水洗涤;有机相旋转蒸发掉有机溶剂后得粘稠油状粗品,粗品真空干燥7小时除有机溶剂残留后,得粘稠油状物质259.72g,经1HNMR和MS(ESI)谱图证实该粘稠油状物质为目标产物双氯芬酸-1-乙酰氧基乙酯,相对于原料双氯芬酸钠收率为87.7%。
实施例11:双氯芬酸酯与双氯芬酸钠的油水分配系数测定
双氯芬酸酯可用实施例1-10任一制备的样品;
双氯芬酸钠可购自江苏苏州第五制药厂有限公司;
pH7.4的磷酸盐缓冲液或者pH3.0的枸橼酸缓冲液与正辛醇以体积比1:1,1:2,2:1的比例进行混合,并置恒温水浴振荡器中,保持25℃,100rpm,振摇3天至平衡。取适量双氯芬酸钠原料或者双氯芬酸酯溶解于上述饱和的正辛醇—缓冲液体系中,置恒温水浴振荡器中,保持25℃,100rpm,振摇2天至溶解分配平衡。将上述溶液在25℃条件下静置24小时,分离正辛醇相与缓冲液相,经0.22μm滤膜过滤后,采用高效液相法对两相中药物含量进行测试。油水分配系数的logP值计算公式如下:
logp=log(正辛醇中药物溶解度/缓冲液中药物溶解度)
实验结果如表1所示:
表1双氯芬酸酯与双氯芬酸钠的油水分配系数测定
化合物 | 磷酸盐缓冲液中logp | 枸橼酸缓冲液中logp |
双氯芬酸钠 | 0.91 | 4.03 |
双氯芬酸酯 | 4.63 | 4.43 |
实验结果表明,新和成化合物双氯芬酸酯的脂溶性要远大于双氯芬酸 钠。
实施例12:本发明药物制剂实例--注射用油种类及用量的选择
制备载药脂肪乳剂,前提条件是主药应在注射用油中具有一定量的溶解度。否则无法制备出稳定的载药脂肪乳剂,本发明的双氯芬酸酯脂肪乳剂,拟是一种长期储存的载药脂肪乳剂,故一定要保证所选的注射用油对双氯芬酸酯有足够的溶解度。
分别称取双氯芬酸酯适量,将其置于70℃注射用大豆油、辛癸酸甘油三酯以及两者的混合液(重量比为1:1)中,制成50mg/g、80mg/g、100mg/g、120mg/g、150mg/g、180mg/g、200mg/g的浓度,加热搅拌。将溶解的药物溶液在4~6℃的冷藏条件下储存72小时后观察溶液变化。
在大豆油中当药物浓度达到150mg/g时溶液轻微浑浊,药物在大豆油中溶解度为120mg/g左右。在两者混合液中,当药物浓度达到180mg/kg时明显浑浊,表明药物在两者混合液中溶解度为150mg/g左右。在辛癸酸甘油三酯中,当药物浓度达到200mg/kg时轻微浑浊,表明药物在两者混合液中溶解度为180mg/g左右。
双氯芬酸酯在注射用大豆油中溶解度为120mg/g,在辛癸酸甘油三酯中溶解度更大,显示出其具有良好的脂溶性。市售的双氯芬酸钠的静脉注射液为75mg/3ml,其临床单次用量为75mg。通常载药脂肪乳剂含油量为10%(克/毫升),综上所述,注射用大豆油和辛癸酸甘油三酯都可以作为注射用油来制备双氯芬酸酯脂肪乳剂。
目前临床用的脂肪乳剂,注射用油含量大多为10%或20%克/毫升,考虑临床剂量,注射液用油的种类以及安全性,我们选用注射用油的用量为10%或20%克/毫升。
实施例13:本发明药物制剂实例--载药量的确定
根据上述双氯芬酸酯的溶解度、注射用油含量及临床用药的剂量,我们拟定双氯芬酸酯脂肪乳剂载药量为双氯芬酸酯5mg/ml~20mg/ml。
实施例14:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯0.5g、注射用大豆油10g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至55℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至55℃,得水相。在55℃下将油相缓缓注入水相中,同 时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过15000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸调节pH值为6.01。用0.8μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为5mg/ml;平均粒径170.3nm;pH值为5.55。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例15:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯0.8g、注射用大豆油10g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至64℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至64℃,得水相。在64℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过14000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸调节pH值为6.32。用0.8μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为8mg/ml;平均粒径171.7nm;pH值为5.89。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例16:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1g、注射用大豆油10g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至74℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至74℃,得水相。在74℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过11000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸调节pH值为6.11。用0.8μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为10mg/ml;平均粒径185.7nm;pH值为5.58。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例17:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1g、注射用大豆油10g,混匀,置于水浴加热至74℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加入精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,加热至74℃,得水相。在74℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压 均质机,经过10000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸调节pH值为6.10。用0.8μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为10mg/ml;平均粒径193.4nm;pH值为5.65。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例18:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1g、注射用大豆油5g、注射用中链油5g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至74℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至74℃,得水相。在74℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过10000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸和氢氧化钠调节pH值为6.51。用0.8μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为10mg/ml;平均粒径200.3nm;pH值为6.05。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例19:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯2g、注射用大豆油10g、注射用辛癸酸甘油三酯10g混匀,置于水浴加热至80℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加入精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,加热至80℃,得水相。在80℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切15min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过10000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用盐酸和氢氧化钠调节pH值为8.00。用0.45μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为19.9mg/ml;平均粒径195.4nm;pH值为7.62。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例20:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯2g、精制蛋黄卵磷脂1.2g、注射用大豆油20g混匀,置于水浴加热至75℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,混匀,加热至75℃,得水相。在75℃下将油相缓缓注入水相 中,同时维持高速剪切15min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过10000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用磷酸氢二钠调节pH值为7.03。用0.22μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为19.5mg/ml;平均粒径270.1nm;pH值为6.61。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例21:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1.5g、精制蛋黄卵磷脂1.2g、注射用大豆油5g、注射用辛癸酸甘油三酯5g混匀,置于水浴加热至74℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,混匀,加热至74℃,得水相。在74℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切15min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过13000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用枸橼酸调节pH值为6.03。用0.22μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为15mg/ml;平均粒径181.7nm;pH值为5.60。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例22:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1g、注射用大豆油10g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至74℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至74℃,得水相。在74℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切15min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过15000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用磷酸和磷酸氢二钠调节pH值为6.05。用0.45μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为10mg/ml;平均粒径170.3nm;pH值为5.45。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例23:本发明药物制剂实例
称取双氯芬酸酯1g、注射用大豆油10g、精制蛋黄卵磷脂1.2g,混匀,置于水浴加热至78℃,搅拌或剪切使溶解,制得油相。将甘油分散在适量注射用水中,加热至78℃,得水相。在78℃下将油相缓缓注入水相中,同 时维持高速剪切10min,得初乳。这种混合乳化液再经过高压均质机,经过12000psi压力下乳化3遍,用注射用水定容至100ml,用醋酸调节pH值为6.02。用0.22μm孔径的囊式过滤器过滤,分装,充氮,封口,121℃灭菌15min,即得一种双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
经测定,载药量为10mg/ml;平均粒径203.1nm;pH值为5.57。符合本发明的质量要求,临床用药时,可直接静脉注射。
实施例24:醋酸扭体法观察药物的镇痛作用(药物比较)
按文献(崔越.双氯芬酸钠脂质微球注射液的研究[D].沈阳药科大学,2009.)制备2mg/ml双氯芬酸钠脂肪乳注射液。双氯芬酸酯脂肪乳注射液按实施例16所制备。
ICR小鼠共30只,每组6只,分为空白组(生理盐水)、双氯芬酸钠脂肪乳注射液组(15mg/kg),双氯芬酸酯脂肪乳注射液低剂量组(9mg/kg)、中剂量组(18mg/kg,剂量相当于15mg/kg双氯芬酸钠)、高剂量组(36mg/kg)。每组雌雄各半,分别给予相应药物,30min后,腹腔注射新鲜配置的0.7%醋酸生理盐水溶液0.2mL,记录小鼠在30min内扭体次数,扭体现象为:腹部收缩成“S”形,躯干与后腿伸张、臀部高起及蠕行。结果见表2。
表2双氯芬酸钠脂肪乳注射液、双氯芬酸酯脂肪乳注射液对小鼠扭体次数的影响
组别 | 扭体次数 | 疼痛抑制率(%) |
空白组 | 41.33±7.39 | 0 |
双氯芬酸钠脂肪乳(15mg/kg) | 19.83±3.31* | 62.63 |
双氯芬酸酯脂肪乳(9mg/kg) | 24.67±8.82* | 57.23 |
双氯芬酸酯脂肪乳(18mg/kg) | 11.67±3.56*# | 73.07 |
双氯芬酸酯脂肪乳(36mg/kg) | 7.17±1.47*## | 83.49 |
与空白对照组相比:*P<0.001;与双氯芬酸钠组相比:#P<0.05;与双氯芬酸钠组相比##P<0.001。
实施例25:醋酸扭体法观察药物的镇痛作用(制剂比较)
ICR小鼠共30只,每组6只,分为空白组(生理盐水)、双氯芬酸钠注射液组(15mg/kg),双氯芬酸酯脂肪乳注射液低剂量组(9mg/kg)、中剂量组(18mg/kg,相当于15mg/kg双氯芬酸钠)、高剂量组(36mg/kg)。每组雌雄各半,分别给予相应药物,30min后,腹腔注射新鲜配置的0.7%醋 酸生理盐水溶液0.2mL,记录小鼠在30min内扭体次数,扭体现象为:腹部收缩成“S”形,躯干与后腿伸张、臀部高起及蠕行。结果见表3。
表3双氯芬酸钠溶液、双氯芬酸酯脂肪乳注射液对小鼠扭体次数的影响
组别 | 扭体次数 | 疼痛抑制率(%) |
空白组 | 49.50±9.65 | 0 |
双氯芬酸钠溶液(15mg/kg) | 18.50±4.18* | 62.63 |
双氯芬酸酯乳剂(9mg/kg) | 21.17±5.85* | 57.23 |
双氯芬酸酯乳剂(18mg/kg) | 13.33±2.73*# | 73.07 |
双氯芬酸酯乳剂(36mg/kg) | 8.17±1.47*## | 83.49 |
与空白对照组相比:*P<0.001;与溶液组相比:#P<0.05;与溶液组相比##P<0.001。
结论:双氯芬酸酯脂肪乳注射液具有明显的镇痛效果,在相同剂量下,双氯芬酸酯脂肪乳注射液镇痛能力强于双氯芬酸钠溶液,且具有显著性差异(P<0.05)。本实验说明,双氯芬酸酯脂肪乳注射液具有较强的镇痛效果。
结论:双氯芬酸酯脂肪乳注射液具有明显的镇痛效果,在相同剂量下,双氯芬酸酯脂肪乳注射液镇痛能力强于双氯芬酸钠脂肪乳注射液,且具有显著性差异(P<0.05)。本实验说明,双氯芬酸酯的镇痛效果要优于双氯芬酸钠。
实施例26:角叉菜胶致炎法观察药物的抗炎作用(药物比较)
按文献(崔越.双氯芬酸钠脂质微球注射液的研究[D].沈阳药科大学,2009.)制备2mg/ml双氯芬酸钠脂肪乳注射液以及双氯芬酸酯脂肪乳注射液。
取体重140~160g大鼠,雌雄各半,随机分组,每组6只。分为空白组(生理盐水)、双氯芬酸钠脂肪乳注射液组(10mg/kg),双氯芬酸酯脂肪乳注射液低剂量组(6mg/kg)、中剂量组(12mg/kg,剂量相当于10mg/kg双氯芬酸钠)、高剂量组(24mg/kg)。于每只大鼠右后足趾部皮下注射1%角叉菜胶生理盐水溶液0.1ml致炎,致炎半小时后,按上述各组剂量尾静脉给药,于给药后0.5,1,2,3,4,5h用容积法测左、右后足的容积。致炎前后的左右后足容积差值为足肿胀度,计算其肿胀率,结果见表4。
表4双氯芬酸钠脂肪乳注射液、双氯芬酸酯脂肪乳注射液对角叉菜胶致炎后大鼠足肿胀率
与空白组比较:*P<0.001,与双氯芬酸钠脂肪乳组比较#P<0.01;##P<0.001
结论:双氯芬酸钠脂肪乳注射液和双氯芬酸酯脂肪乳注射液起效比较快,开始时都具有快速而强烈的抗炎作用,而同时相同剂量的双氯芬酸酯脂肪乳注射液相比较于双氯芬酸钠脂肪乳注射液而言,显示出更强、更长的抗炎时间。实验结果表明双氯芬酸酯的抗炎效果强于双氯芬酸钠。
实施例27:角叉菜胶致炎法观察药物的抗炎作用(制剂比较)
取体重140~160g大鼠,雌雄各半,随机分组,每组6只。分为空白组(生理盐水)、双氯芬酸钠注射液组(10mg/kg),双氯芬酸酯脂肪乳注射液低剂量组(6mg/kg)、中剂量组(12mg/kg,相当于10mg/kg双氯芬酸钠溶液)、高剂量组(24mg/kg)。于每只大鼠右后足趾部皮下注射1%角叉菜胶生理盐水溶液0.1ml致炎,致炎半小时后,按上述各组剂量尾静脉给药,于给药后0.5,1,2,3,4,5h用容积法测左、右后足的容积。致炎前后的左右后足容积差值为足肿胀度,计算其肿胀率,结果见表5。
表5双氯芬酸钠注射液、双氯芬酸酯脂肪乳注射液对角叉菜胶致炎后大鼠足肿胀率
与空白组比较:*P<0.001,与溶液组比较#P<0.01;##P<0.001
结论:结果表明,双氯芬酸钠注射液和双氯芬酸酯脂肪乳注射液起效比较快,开始时都具有快速而强烈的抗炎作用,同时相同剂量的双氯芬酸酯脂肪乳注射液显示出更强的抗炎效果、更长的抗炎时间。
实施例28:双氯芬酸酯脂肪乳注射液溶血性研究
取新鲜兔血10ml,放入含玻璃珠的三角烧瓶中振摇10分钟,加入0.9%氯化钠溶液100ml,摇匀,1000r/min离心15分钟,除去上清液,沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠溶液按上述方法洗涤3次,至上清液不显红色。将所得红细胞用0.9%氯化钠溶液配成2%的混悬液,供试验用。取洁净试管7只,进行编号,1~5号管为供试品管,6号管为阴性对照管,7号管为阳性对照管。按表6所示依次加入2%红细胞悬液、0.9%氯化钠溶液或蒸馏水、实施例15制备的双氯芬酸酯脂肪乳注射液,混匀后,立即置37℃的恒温箱中进行温育,观察每个试管是否有血红细胞絮凝或者溶血现象,开始每隔15分钟观察1次,1小时后,每隔1小时观察1次,共观察3小时。3小时后实验实效图见图3。
表6双氯芬酸酯脂肪脂肪乳注射液溶血试验加样量
试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
2%红细胞悬液(ml) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
生理盐水(ml) | 2.0 | 2.1 | 2.2 | 2.3 | 2.4 | 2.5 | 0 |
蒸馏水(ml) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2.5 |
双氯芬酸酯脂肪乳注射液(ml) | 0.5 | 0.4 | 0.3 | 0.2 | 0.1 | 0 | 0 |
根据图3所示,7号试管内溶液呈澄明红色,表明阳性对照管有溶血发生,其他试管红细胞全部下沉,上清液体无色澄明,表明无溶血发生。实验表明双氯芬酸酯脂肪乳注射液无溶血性。
实施例29:双氯芬酸钠注射液与双氯芬酸酯脂肪乳注射液血管刺激性实验
取体重2.2~2.5kg家兔6只,雌雄各半,随机分为A、B两组,将双氯芬酸钠注射液用0.9%生理盐水稀释至一定浓度后按剂量5.2mg/kg于A组各家兔左耳缘静脉进行注射给药,给药体积统一为2.1ml,同时于右耳缘静脉注射2.1ml的0.9%生理盐水。B组各家兔于左耳缘静脉按剂量6.2mg/kg(相当于5.2mg/kg双氯芬酸钠)给予0.9%生理盐水稀释至一定浓度的按实施例15制备的双氯芬酸酯脂肪乳注射液2.1ml,同时于右耳缘静脉注射2.1ml的空白脂肪乳。两组各家兔每次给药时间均为90秒。给药24小时后取各组家兔双侧距注射部位向心端约0.5cm处耳缘静脉组织,置于10%多聚甲醛溶液中固定标本,然后取材,石蜡包埋切片,HE染色,光镜下进行组织病理学检查。
图4为部分组织切片图像,结果表明,A组家兔右侧耳缘静脉结构完整,血管内皮光滑,官腔内未见血栓,管周组织中未见出血、水肿以及炎细胞浸润,而A组家兔左侧耳缘静脉管周组织有水肿以及炎细胞浸润,表明实验条件下双氯芬酸钠注射液有严重的刺激性。B组家兔两侧耳缘静脉均结构完整,血管内皮光滑,官腔内未见血栓,管周组织中未见出血、水肿以及炎细胞浸润,说明实验条件下双氯芬酸酯脂肪乳注射液对血管未见明显的损伤和刺激。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明,但本发明创造并不限于所述实施例,熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可作出种种的等同的变型或替换,这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
Claims (8)
1.一种含有2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液,其特征在于,该脂肪乳注射液是由双氯芬酸酯、注射用油、精制卵磷脂、甘油、pH调节剂以及注射用水组成,各组分相对于注射液总体积的百分比如下:
所述的注射用油为注射用大豆油或注射用大豆油与辛癸酸甘油三酯的混合物;其中注射用大豆油在该混合物中的含量不得低于重量百分比的50%;
所述的精制卵磷脂为蛋黄卵磷脂;
所述的pH调节剂选自枸橼酸、盐酸、磷酸、醋酸、磷酸氢二钠、氢氧化钠中的一种或两种。
2.根据权利要求1所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液,其特征在于,所述的双氯芬酸酯为0.8~1.5%克/毫升。
3.根据权利要求1所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液,其特征在于,所述的双氯芬酸酯为1%克/毫升。
4.根据权利要求1所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液,其特征在于,所述的注射用油的用量为10%克/毫升。
5.根据权利要求1至4任一项所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液,其特征在于,所述的脂肪乳平均粒径为170~300nm。
6.如权利要求1至4任一项所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液的制备方法,其特征在于,该制备方法为:
称取适量的注射用油、精制蛋黄卵磷脂,混匀,并水浴加热至55℃~80℃,搅拌或剪切使溶解;然后加入双氯芬酸酯在55℃~80℃下搅拌或剪切使溶解,制得油相;将甘油分散在处方量的注射用水中,加热至55℃~80℃,得水相;在55℃~80℃下将油相缓缓注入水相中,同时维持高速剪切10~15min,得初乳;初乳再经过高压均质机,在10000~15000psi均质压力下进一步乳化,用pH调节剂调节pH,过滤,分装,充氮,封口,灭菌,即得。
7.根据权利要求6所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液的制备方法,其特征在于,所述的卵磷脂是溶解在油相中,或将卵磷脂分散在水相中。
8.根据权利要求6所述的2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸1-(乙酰氧基)乙基酯的脂肪乳注射液的制备方法,其特征在于,所述的过滤与灭菌分别为囊式过滤器过滤和高压蒸汽灭菌,其中囊式过滤器过滤孔径为0.45μm或0.8μm,高压蒸汽灭菌的温度为121℃,时间15分钟。
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