CN102972635B - 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 - Google Patents
一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102972635B CN102972635B CN201210494715.8A CN201210494715A CN102972635B CN 102972635 B CN102972635 B CN 102972635B CN 201210494715 A CN201210494715 A CN 201210494715A CN 102972635 B CN102972635 B CN 102972635B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- inoculated
- temperature
- order seed
- seed
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Abstract
一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法，是将发酵底物分别加水拌料，然后蒸煮灭菌；待温度降至28～35℃时，将混合菌液加入灭菌后的发酵底物中拌均匀，在恒温条件下好氧发酵；发酵底物发酵完毕后，混合后接入乳酸菌，然后进行二次发酵；发酵完毕的物料经低温烘干后进行粉碎即得所述微生物饲料添加剂成品。所述的发酵底物包括：胚芽粕、玉米喷浆纤维、菜粕以及米糠粕；所述的混合菌液为产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌和白地霉的菌液混合得到的混合菌液；所述的乳酸菌为植物乳杆菌，接种量为发酵底物重量的5～10%。
Description
技术领域
本发明是关于一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法，属于微生物饲料添加剂领域。
背景技术
随着畜牧养殖业的快速发展，人畜争粮的矛盾日趋突出，为了解决这一问题，世界各国科技界和工业界都在寻找和研究新的饲料资源，其中，益生菌固态发酵饲料尤其受到重视。应用益生菌固态发酵技术生产蛋白饲料、单细胞蛋白和菌体蛋白，不仅可以提供大量优质的饲料蛋白源，而且还能开发出具特殊功能的饲料添加剂。采用益生菌固态发酵技术处理粮食加工副产品如饼粕类和纤维类饲料原料，不但可以提高其消化利用率，同时还可以对原料中所含有的抗营养因子、农药残留及其他有毒有害物质起到有效的降解作用。积极利用粮食加工副产品为原料，进行益生菌固态发酵生产蛋白饲料，满足饲料业、养殖业的需求，缓解饲料供需矛盾，同时也能解决农副产品利用率低下造成的浪费。随着农业生物技术的发展，用生物技术特别是微生物发酵手段来处理粮食加工副产品，使其成为家畜绿色饲料来源，不仅能促进我国畜牧业的发展，而且也会改善农业生态环境，实现资源的充分利用，变废为宝。同时，近些年来由于抗生素饲料添加剂的滥用和动物的不规范饲养管理，饲料安全问题层出不穷。从2005年苏丹红事件到2008年三聚氰胺事件再到2011年的瘦肉精事件，接踵而来的饲料安全问题使我国畜牧业、养殖业以及乳品业不断受到重创，同时也使食品安全受到了严重的挑战和威胁。因此，要想从根本上保证食品安全，只有从食物链的角度综合考虑，才能获得彻底解决。而运用益生菌固态发酵技术生产的饲料产品因其所具备的营养丰富、促进快速生长、绿色环保等多种优点正受到广大养殖户的大力的推广和使用。
发明内容
本发明的目的在于，适应上述形式，提供一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法，其特征在于：
（1）将发酵底物分别加水拌料，然后蒸煮灭菌；
（2）灭菌后的发酵底物温度降至28～35℃时，将混合菌液加入灭菌后的发酵底物中拌均匀，在恒温条件下好氧发酵；
（3）发酵底物发酵完毕后，混合后接入乳酸菌，然后进行二次发酵；
（4）发酵完毕的物料经低温烘干后进行粉碎即得所述微生物饲料添加剂成品；
步骤（1）中，所述的发酵底物包括：胚芽粕、玉米喷浆纤维、菜粕以及米糠粕；
步骤（2）中，所述的混合菌液为产朊假丝酵母（Candida utilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和白地霉（Geotrichum candidum）的菌液混合得到的混合菌液；
步骤（3）中所述的乳酸菌为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），接种量为发酵底物重量的5～10%。
如上所述的方法，优选地，步骤（1）中所述的加水拌料，是对发酵底物按料水比1:1～2加水后进行拌料，拌料后发酵底物的水分在45～55%之间；
步骤（1）中所述的蒸煮灭菌，是在115～121℃、0.07～0.11MPa条件下蒸煮灭菌20～30min。
如上所述的方法，优选地，所述的产朊假丝酵母菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：麦芽汁培养基130.1g和蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115～121℃下灭菌15～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：玉米粉10kg、蔗糖蜜100kg、葡萄糖10kg、麦芽浸粉10kg、大豆蛋白胨5kg、MgSO4·7H2O1kg、KH2PO41.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，28～30℃下以100～130r/min振荡培养24～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌、培养24～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
如上所述的方法，优选地，所述的地衣芽孢杆菌菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、NaCl5g，蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、麸皮10kg、豆饼粉6kg、酵母浸粉5kg、MgSO4·7H2O0.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～70mL的比例接种入一级种子培养基中，30～32℃下以100～130r/min振荡培养24～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在30～32℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在30～32℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
如上所述的方法，优选地，所述的白地霉菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：5°Bé麦芽汁1000mL，PH自然，在温度115～121℃下灭菌20min～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、大豆蛋白胨5kg、酵母浸粉5kg、玉米粉10kg，无菌纯水1000L，PH自然，在温度115～121℃下灭菌20min～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，28～30℃、100～130r/min、振荡培养24h～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在28～30℃、通风量体积比1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
如上所述的方法，优选地，所述的植物乳杆菌菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：酪蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、酵母浸粉10g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、Tween801g、K2HPO42g、MgSO4·7H2O0.2g、MnSO4·H2O0.05g，蒸馏水1000mL混合均匀，pH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：全脂奶粉10kg、牛肉浸粉10kg、酵母浸粉10kg、葡萄糖5kg、乙酸钠5kg、柠檬酸铵2kg、Tween801kg、K2HPO42kg、MgSO4·7H2O0.2kg、MnSO4·H2O0.05kg，蒸馏水1000mL混合均匀，PH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基1000mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，35～37℃静置培养24h～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5%～10%的重量比接种到二级种子罐中，35～37℃静置培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5%～10%的重量比接种到发酵罐中，35～37℃静置培养24h～48h。
如上所述的方法，优选地，步骤（2）中，所述混合菌液中的3种菌液在各种发酵底物中的接种量和混合比例为：
胚芽粕中：产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌、白地霉的混合比例为1:1:1，按发酵底物重量的5～10%接种；
玉米喷浆纤维中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为2:4:4，按发酵底物重量的5～10%接种；
菜粕中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为4:1:5，按发酵底物重量的5～10%接种；
米糠粕中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为3:4:3，按发酵底物重量的5～10%接种；
步骤（2）中所述的好氧发酵，是将各种发酵底物接种后分别混合均匀后平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25～30cm，控制温度在28～32℃，相对湿度在85～90%的条件下发酵48～72h，发酵期间每隔24h将物料翻动一次。
如上所述的方法，优选地，步骤（3）中的各发酵底物首次发酵完毕后的混合，是按以下比例：
胚芽粕180～200重量份、玉米喷浆纤维180～200重量份、菜粕280～320重量份、米糠粕280～320重量份；
步骤（3）中所述的二次发酵，是将发酵底物接种植物乳杆菌后，均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25～30cm，控制温度在35～37℃，相对湿度在85～90%的条件下发酵24～48h，发酵过程中物料用塑料布全部苫盖进行厌氧发酵。
如上所述的方法，优选地，步骤（4）中所述的低温烘干的温度为100～120℃，所述烘干后物料的粉碎的粒度为至少95%通过80目筛且100%通过60目筛。
如上所述方法制备得到的微生物饲料添加剂。如上所述方法制备得到的微生物饲料添加剂，其中的粗蛋白质含量（DM）≥21.50%，真蛋白含量（DM）≥20.00%，粗纤维含量（DM）≤2.85%，硫代葡萄糖苷总量（DM）≤10.50μmol/g，粗灰分（DM）≤2%，地衣芽孢杆菌（CFU/g）≥8×108，产朊假丝酵母（CFU/g）≥2.5×108、白地霉（CFU/g）≥3.0×107、植物乳杆菌（CFU/g）≥8.0×108。
本发明的有益效果在于：
本发明选用性能优良的生产菌种，采用先进的益生菌固态发酵技术，以胚芽粕、菜粕、米糠粕、喷浆纤维为原料，经蒸煮、灭菌后分别接种由产朊假丝酵母（Candida utilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、白地霉（Geotrichum candidum）组成的混合菌液进行首次固态发酵，发酵完毕后将各种发酵原料按比例进行混合然后接入植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）再进行二次固态发酵，发酵完毕进行烘干、粉碎，从而能够获得优质的益生菌固态发酵饲料产品。
更具体地说，本发明提供的利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法具有以下优点：
1、利用本发明方法，经益生菌固态发酵后的杂粕粗蛋白和真蛋白等营养成分大幅提高，粗纤维、粗灰分以及某些抗营养因子得到了有效的降解，并且本发明的生产工艺简单、生产成本低，易于大规模工业化生产。
2、采用本发明方法，经益生菌固态发酵后的杂粕消化利用率较未发酵前有较大的提高，其中富含的有益菌活菌和菌体代谢产物为动物胃肠道微生物提供了充足的营养，同时对调节动物消化吸收功能起到了重要作用。
3、采用本发明方法生产的微生物饲料添加剂营养均衡、益生菌活菌数较高，本发明产品中的粗蛋白质含量（DM）≥21.50%，真蛋白含量（DM）≥20.00%，粗纤维含量（DM）≤2.85%，硫代葡萄糖苷总量（DM）≤10.50μmol/g，粗灰分（DM）≤2%，地衣芽孢杆菌（CFU/g）≥8×108，产朊假丝酵母（CFU/g）≥2.5×108、白地霉（CFU/g）≥3.0×107、植物乳杆菌（CFU/g）≥8.0×108。
附图说明
图1为本发明方法的流程示意图。
具体实施方式
以下通过具体实施例详细说明本发明的技术及特点，但这些实施例并非用以限定本发明的保护范围。
本发明以下实施例中所用产朊假丝酵母（Candida utilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、白地霉（Geotrichum candidum）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）是分别购买于中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）和中国农业微生物微生物保藏管理中心（ACCC）的野生菌种。保藏号分别为：CGMCC2.1180、ACCC11090、CGMCC2.0498、CGMCC1.555。
实施例1
参见图1，按照以下方法制备本实施例的益生菌固态发酵饲料：
1.分别准备胚芽粕1000kg、菜粕1000kg、米糠粕1000kg、喷浆纤维1000kg作为发酵底物，其中，胚芽粕经粗粉碎过40目筛。
2.发酵底物按料水比1:1进行加水拌料，将物料水分调节到50%左右，然后在121℃、0.11MPa条件下蒸煮灭菌30min。
3.将产朊假丝酵母（Candida utilis）、地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）、白地霉（Geotrichum candidum）和植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）分别按以下方法进行增菌培养和液态发酵：
（1）产朊假丝酵母（Candida utilis）
A.制备一级种子培养基：麦芽汁培养基130.1g，蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115℃下灭菌15min。
B.制备二级种子培养基和发酵培养基：玉米粉10kg、蔗糖蜜100kg、葡萄糖10kg、麦芽浸粉10kg、大豆蛋白胨5kg、MgSO4·7H2O1kg、KH2PO41.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
C.培养条件：
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/100mL的比例接种入一级种子培养基中，28℃、130r/min、振荡培养24h。
二级种子培养：10L自动种子发酵罐装二级种子培养基5L，将经所述一级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到二级种子罐中，28℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
液体发酵培养：50L自动发酵罐装发酵培养基25L，将经所述二级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到发酵罐中，28℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
（2）地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）
A.制备一级种子培养基：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、NaCl5g，蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
B.制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、麸皮10kg、豆饼粉6kg、酵母浸粉5kg、MgSO4·7H2O0.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
C.培养条件：
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50mL的比例接种入一级种子培养基中，30℃、130r/min、振荡培养24h。
二级种子培养：10L自动种子发酵罐装二级种子培养基5L，将经所述一级种子培养的菌液按照10%的重量比接种到二级种子罐中，30℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
液体发酵培养：50L自动种子发酵罐装发酵培养基25L，将经所述二级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到发酵罐中，30℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
（3）白地霉（Geotrichum candidum）
A.制备一级种子培养基：5°Bé麦芽汁1000mL，PH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
B.制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、大豆蛋白胨5kg、酵母浸粉5kg、玉米粉10kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
C.培养条件：
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50mL的比例接种入一级种子培养基中，30℃、130r/min、振荡培养24h。
二级种子培养：10L自动种子发酵罐装二级种子培养基5L，将经所述一级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到二级种子罐中，30℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
液体发酵培养：50L自动种子发酵罐装发酵培养基25L，将经所述二级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到发酵罐中，30℃、通风量体积比1:1、机械搅拌100r/min、培养24h。
（4）植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）
A.制备一级种子培养基：酪蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、酵母浸粉10g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、Tween801g、K2HPO42g、MgSO4·7H2O0.2g、MnSO4·H2O0.05g，蒸馏水1000mL混合均匀，pH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
B.制备二级种子培养基和发酵培养基：全脂奶粉10kg、牛肉浸粉10kg、酵母浸粉10kg、葡萄糖5kg、乙酸钠5kg、柠檬酸铵2kg、Tween801kg、K2HPO42kg、MgSO4·7H2O0.2kg、MnSO4·H2O0.05kg，蒸馏水1000mL混合均匀，pH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min。
C.培养条件：
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基1000mL，将菌种斜面按环/50mL的比例接种入一级种子培养基中，37℃静置培养24h。
二级种子培养：10L自动种子发酵罐装二级种子培养基5L，将经所述一级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到二级种子罐中，37℃静置培养24h。
液体发酵培养：50L自动种子发酵罐装发酵培养基25L，将经所述二级种子培养的菌液按照10%的质量比接种到发酵罐中，37℃静置培养24h。
4.在灭菌后的各种发酵底物温度降到30℃时，即开始进行接种，产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌和白地霉3种菌液在各种发酵底物中的接种量和混合比例为：
胚芽粕：产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌、白地霉混合比例1:1:1，按发酵底物重量百分比接种量10%。
玉米喷浆纤维：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母合比例2:4:4，按发酵底物重量百分比接种量10%。
菜粕：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母混合比例4:1:5，按发酵底物重量百分比接种量10%。
米糠粕：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母比例3:4:3，按发酵底物重量百分比接种量10%。
5.各种发酵底物接种后，分别混合均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25cm，控制温度30℃，相对湿度85～90%条件下发酵72h，发酵期间每隔24h将物料翻动一次。
6.各发酵底物首次发酵结束后，按以下比例配比并混合进行二次发酵：
胚芽粕200重量份、玉米喷浆纤维200重量份、菜粕300重量份、米糠粕300重量份。
二次发酵所用菌种为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），接种量为发酵底物重量的8%。
发酵条件：发酵底物接种植物乳杆菌后均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为30cm，控制温37℃，相对湿度85～90%条件下发酵48h，发酵过程中物料用塑料布全部苫盖进行厌氧发酵。
7.发酵完毕的物料经100℃低温烘干后进行细粉碎即得到微生物饲料添加剂成品，粉碎粒度为至少95%通过80目筛、100%通过60目筛。
8.按照以上方法制备得到的微生物饲料添加剂，粗蛋白质含量（DM）≥26.13%，真蛋白含量（DM）≥24.38%，粗纤维含量（DM）≤2.90%，硫代葡萄糖苷总量（DM）≤10.02μmol/g，粗灰分（DM）≤1.85%，地衣芽孢杆菌（CFU/g）≥1.5×109，产朊假丝酵母（CFU/g）≥6.0×108、白地霉（CFU/g）≥5.0×107、植物乳杆菌（CFU/g）≥5.0×108。底物发酵前和发酵后营养指标变化见表1。
表1底物发酵前与发酵后营养指标比对表
| 项目 | 发酵前 | 发酵后 |
| 粗蛋白（%） | 19.30 | 26.13 |
| 真蛋白（%） | 17.50 | 24.38 |
| 粗纤维（%） | 6.26 | 2.90 |
| 粗灰分（%） | 4.27 | 1.85 |
| 硫苷(μmol/g) | 21.00 | 10.02 |
| 产朊假丝酵母（CFU/g） | - | 6.0×108 |
| 白地霉（CFU/g） | - | 5.0×107 |
| 地衣芽孢杆菌（CFU/g） | - | 1.5×109 |
| 植物乳杆菌（CFU/g） | - | 5.0×108 |
实施例2
按照以下方法制备本实施例的益生菌固态发酵饲料：
1.分别准备胚芽粕1000kg、菜粕1000kg、米糠粕1000kg、喷浆纤维1000kg作为发酵底物，其中，胚芽粕经粗粉碎过40目筛。
2.发酵底物按料水比1:1进行加水拌料，将物料水分调节到50%左右，然后在121℃、0.11MPa条件下蒸煮灭菌30min。
3.将产朊假丝酵母（Candida utilis）、地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）、白地霉（Geotrichum candidum）和植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）分别按如实施例1所述的方法进行增菌培养和液态发酵。
4.在灭菌后的各种发酵底物温度降到30℃时，即开始进行接种，产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌和白地霉3种菌液在各种发酵底物中的接种量和混合比例为：
胚芽粕：产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌、白地霉混合比例1:1:1，按发酵底物重量百分比接种量6%。
玉米喷浆纤维：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母合比例2:4:4，按发酵底物重量百分比接种量6%。
菜粕：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母混合比例4:1:5，按发酵底物重量百分比接种量6%。
米糠粕：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母比例3:4:3，按发酵底物重量百分比接种量6%。
5.各种发酵底物接种后，分别混合均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25cm，控制温度30℃，相对湿度85～90%条件下发酵72h，发酵期间每隔24h将物料翻动一次。
6.各发酵底物首次发酵结束后，按以下比例配比并混合进行二次发酵：
胚芽粕180重量份、玉米喷浆纤维180重量份、菜粕320重量份、米糠粕320重量份。
二次发酵所用菌种为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），接种量为发酵底物重量的10%。
发酵条件：发酵底物接种植物乳杆菌后均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为30cm，控制温37℃，相对湿度85～90%条件下发酵48h，发酵过程中物料用塑料布全部苫盖进行厌氧发酵。
7.发酵完毕的物料经100℃低温烘干后进行细粉碎即得到微生物饲料添加剂成品，粉碎粒度为至少95%通过80目筛、100%通过60目筛。
8.按照以上方法制备得到的微生物饲料添加剂，粗蛋白质含量（DM）≥21.50%，真蛋白含量（DM）≥20.00%，粗纤维含量（DM）≤2.85%，硫代葡萄糖苷总量（DM）≤10.50μmol/g，粗灰分（DM）≤2%，地衣芽孢杆菌（CFU/g）≥8×108，产朊假丝酵母（CFU/g）≥2.5×108、白地霉（CFU/g）≥3.0×107、植物乳杆菌（CFU/g）≥8.0×108。底物发酵前和发酵后营养指标变化见表2。
表2底物发酵前与发酵后营养指标比对表
| 项目 | 发酵前 | 发酵后 |
| 粗蛋白（%） | 19.18 | 21.50 |
| 真蛋白（%） | 17.2 | 20.00 |
| 粗纤维（%） | 6.18 | 2.85 |
| 粗灰分（%） | 4.30 | 2.00 |
| 硫苷(μmol/g) | 22.40 | 10.50 |
| 产朊假丝酵母（CFU/g） | - | 2.5×108 |
| 白地霉（CFU/g） | - | 3.0×107 |
| 地衣芽孢杆菌（CFU/g） | - | 8×108 |
| 植物乳杆菌（CFU/g） | - | 8.0×108 |
Claims (8)
1.一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法，其特征在于，
（1）将发酵底物分别加水拌料，然后蒸煮灭菌；
（2）灭菌后的发酵底物温度降至28～35℃时，将混合菌液加入灭菌后的发酵底物中拌均匀，在恒温条件下好氧发酵；
（3）发酵底物发酵完毕后，混合后接入乳酸菌，然后进行二次发酵；
（4）发酵完毕的物料经低温烘干后进行粉碎即得所述微生物饲料添加剂成品；
步骤（1）中，所述的发酵底物包括：胚芽粕、玉米喷浆纤维、菜粕以及米糠粕；
步骤（2）中，所述的混合菌液为产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌和白地霉的菌液混合得到的混合菌液；所述混合菌液中的3种菌液在各种发酵底物中的接种量和混合比例为：
胚芽粕中：产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌、白地霉的混合比例为1:1:1，按发酵底物重量的5～10%接种；
玉米喷浆纤维中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为2:4:4，按发酵底物重量的5～10%接种；
菜粕中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为4:1:5，按发酵底物重量的5～10%接种；
米糠粕中：地衣芽孢杆菌、白地霉、产朊假丝酵母的混合比例为3:4:3，按发酵底物重量的5～10%接种；
步骤（2）中所述的好氧发酵，是将各种发酵底物接种后分别混合均匀后平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25～30cm，控制温度在28～32℃，相对湿度在85～90%的条件下发酵48～72h，发酵期间每隔24h将物料翻动一次；
步骤（3）中所述的乳酸菌为植物乳杆菌，接种量为发酵底物重量的5～10%，所述各发酵底物首次发酵完毕后的混合，是按以下比例：
胚芽粕180～200重量份、玉米喷浆纤维180～200重量份、菜粕280～320重量份、米糠粕280～320重量份；
所述的二次发酵，是将发酵底物接种植物乳杆菌后，均匀平铺在发酵床上，发酵物料堆高厚度为25～30cm，控制温度在35～37℃，相对湿度在85～90%的条件下发酵24～48h，发酵过程中物料用塑料布全部苫盖进行厌氧发酵。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的加水拌料，是对发酵底物按料水比1:1～2加水后进行拌料，拌料后发酵底物的水分在45～55%之间；
步骤（1）中所述的蒸煮灭菌，是在115～121℃、0.07～0.11MPa条件下蒸煮灭菌20～30min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的产朊假丝酵母菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：麦芽汁培养基130.1g和蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115～121℃下灭菌15～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：玉米粉10kg、蔗糖蜜100kg、葡萄糖10kg、麦芽浸粉10kg、大豆蛋白胨5kg、MgSO4·7H2O1kg、KH2PO41.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，28～30℃下以100～130r/min振荡培养24～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌、培养24～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的地衣芽孢杆菌菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、NaCl5g，蒸馏水1000mL混合均匀，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、麸皮10kg、豆饼粉6kg、酵母浸粉5kg、MgSO4·7H2O0.5kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～70mL的比例接种入一级种子培养基中，30～32℃下以100～130r/min振荡培养24～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在30～32℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在30～32℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的白地霉菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：5°Bé麦芽汁1000mL，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20min～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：葡萄糖10kg、大豆蛋白胨5kg、酵母浸粉5kg、玉米粉10kg，无菌纯水1000L，pH自然，在温度115～121℃下灭菌20min～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基500mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，28～30℃、100～130r/min、振荡培养24h～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到二级种子罐中，在28～30℃、通风量体积比为1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5～10%的重量比接种到发酵罐中，在28～30℃、通风量体积比1:0.5～1的条件下、以100～120r/min机械搅拌，培养24h～48h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的植物乳杆菌菌液是按以下方法制成的：
制备一级种子培养基：酪蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、酵母浸粉10g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、Tween801g、K2HPO42g、MgSO4·7H2O0.2g、MnSO4·H2O0.05g，蒸馏水1000mL混合均匀，pH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
制备二级种子培养基和发酵培养基：全脂奶粉10kg、牛肉浸粉10kg、酵母浸粉10kg、葡萄糖5kg、乙酸钠5kg、柠檬酸铵2kg、Tween801kg、K2HPO42kg、MgSO4·7H2O0.2kg、MnSO4·H2O0.05kg，蒸馏水1000mL混合均匀，PH6.8，在温度115～121℃下灭菌20～30min；
一级种子培养：1000mL三角瓶中装一级种子培养基1000mL，将菌种斜面按环/50～100mL的比例接种入一级种子培养基中，35～37℃静置培养24h～48h；
二级种子培养：将经所述一级种子培养的菌液按照5%～10%的重量比接种到二级种子罐中，35～37℃静置培养24h～48h；
液体发酵培养：将经所述二级种子培养的菌液按照5%～10%的重量比接种到发酵罐中，35～37℃静置培养24h～48h。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中所述的低温烘干的温度为100～120℃，所述烘干后物料的粉碎的粒度为至少95%通过80目筛且100%通过60目筛。
8.按照权利要求1～7中任一项所述方法制备得到的微生物饲料添加剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210494715.8A CN102972635B (zh) | 2012-11-28 | 2012-11-28 | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210494715.8A CN102972635B (zh) | 2012-11-28 | 2012-11-28 | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102972635A CN102972635A (zh) | 2013-03-20 |
| CN102972635B true CN102972635B (zh) | 2014-05-14 |
Family
ID=47847210
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210494715.8A Active CN102972635B (zh) | 2012-11-28 | 2012-11-28 | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102972635B (zh) |
Families Citing this family (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103478417A (zh) * | 2013-08-16 | 2014-01-01 | 宁波中瑞生物科技有限公司 | 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 |
| CN104413259A (zh) * | 2013-08-23 | 2015-03-18 | 李雷 | 一种秸秆果渣制作发酵饲料的方法 |
| CN104413295A (zh) * | 2013-09-06 | 2015-03-18 | 李雷 | 一种鲜玉米秸秆果渣制作肉羊发酵饲料的方法 |
| CN103829036A (zh) * | 2014-02-17 | 2014-06-04 | 郑州市中食农产品加工研究院 | 一种以玉米深加工副产品为原料生产微生态发酵饲料的方法 |
| CN103947850B (zh) * | 2014-03-13 | 2015-07-29 | 杭州启明星生物科技研究院有限公司 | 一种禽用异食癖调节剂及应用 |
| CN104397347B (zh) * | 2014-12-23 | 2018-05-08 | 中粮集团有限公司 | 一种菜粕发酵饲料及其制备方法 |
| CN104686791A (zh) * | 2015-02-03 | 2015-06-10 | 苏州亚太星原生物科技有限公司 | 一种利用微生物发酵处理的麸皮及其制备工艺 |
| CN104824363A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-12 | 河南双成生物科技有限公司 | 一种富含苏氨酸的高蛋白饲料生产方法 |
| CN104824365A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-12 | 河南双成生物科技有限公司 | 一种富含色氨酸的高蛋白饲料生产方法 |
| CN104920789A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-09-23 | 河南双成生物科技有限公司 | 一种富含精氨酸的高蛋白饲料生产方法 |
| CN104839444A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-19 | 河南双成生物科技有限公司 | 富含三种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法 |
| CN104839443A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-19 | 河南双成生物科技有限公司 | 富含四种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法 |
| CN104839445A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-19 | 河南双成生物科技有限公司 | 富含两种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法 |
| CN104824364A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-08-12 | 河南双成生物科技有限公司 | 富含五种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法 |
| CN104920791B (zh) * | 2015-05-29 | 2018-06-26 | 东莞市林氏生物技术股份有限公司 | 一种高消化率发酵鱼粉及其制备方法 |
| CN105815574A (zh) * | 2016-03-02 | 2016-08-03 | 湖北海宜生物科技有限公司 | 一种利用复合菌种对酵母生产废水和菜粕混合固体发酵生产生物蛋白饲料的方法 |
| CN107712266A (zh) * | 2016-08-10 | 2018-02-23 | 湖南山河美生物环保科技股份有限公司 | 二次发酵糟渣生产高活性高营养饲料的方法及使用方法 |
| CN106666077A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-05-17 | 四川省旺达饲料有限公司 | 一种果香型发酵米糠的制备方法 |
| CN107410673A (zh) * | 2017-08-26 | 2017-12-01 | 芜湖市丹洋现代农业科技发展有限公司 | 一种牡丹籽粕油制取饲料工艺 |
| CN108566873A (zh) * | 2018-06-13 | 2018-09-25 | 湖南泰谷生态工程有限公司 | 一种蔬菜无土栽培基质及其制备方法与应用 |
| CN108850550A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-11-23 | 天柱县森源米业有限责任公司 | 一种脱脂米糠多菌种发酵产品 |
| CN113099953B (zh) * | 2021-05-13 | 2023-03-21 | 张玉红 | 一种平菇及其液体菌种的半熟料接种工艺 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1283172C (zh) * | 2004-02-23 | 2006-11-08 | 中国农业科学院畜牧研究所 | 一种反刍动物专用双效微生物饲料添加剂及其制备 |
| CN101297677B (zh) * | 2008-06-16 | 2012-05-02 | 南昌大学 | 同步混菌发酵法对菜籽粕进行脱毒和菜籽蛋白改性的工艺 |
| CN101401614B (zh) * | 2008-10-30 | 2013-07-31 | 河南省龙腾高科实业有限公司 | 汽爆菜粕和棉粕进行多菌种发酵生产蛋白饲料及方法 |
| CN101720853A (zh) * | 2009-10-19 | 2010-06-09 | 李军训 | 益生菌两步法酵解蛋白饲料技术 |
| CN102389039B (zh) * | 2011-11-02 | 2014-01-08 | 宁波天邦股份有限公司 | 一种鲈鱼的配合饲料及制备方法 |
| CN102488084B (zh) * | 2011-12-10 | 2013-04-17 | 甘肃鑫盛源牧业科技有限公司 | 好氧混合菌发酵秸秆饼粕制备蛋白饲料的方法 |
| CN102696860B (zh) * | 2012-06-01 | 2014-04-09 | 江苏大学 | 基于醋糟和杂粕的一种高效低成本的微生物饲料蛋白 |
-
2012
- 2012-11-28 CN CN201210494715.8A patent/CN102972635B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102972635A (zh) | 2013-03-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102972635B (zh) | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 | |
| CN102987140B (zh) | 一种利用有益菌和植物纤维生产反刍动物新型饲料的方法 | |
| CN106222114B (zh) | 高效降解豆粕抗原蛋白的芽孢杆菌及菌酶混合发酵的方法 | |
| CN103250874B (zh) | 一种苹果渣发酵饲料的制备方法 | |
| CN104000006B (zh) | 一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法 | |
| CN103910547B (zh) | 食用菌培养基及其制备方法和食用菌培养方法 | |
| CN103168921A (zh) | 一种秸秆饲料的生产方法 | |
| CN104256057A (zh) | 一种利用酒精废液和作物秸秆制备饲料蛋白的方法 | |
| CN102696875A (zh) | 以木薯渣为原料制备生物饲料的方法 | |
| CN106889330A (zh) | 一种无抗育肥猪发酵饲料的生产方法 | |
| CN105325690A (zh) | 一种生物饲料及其制作方法 | |
| CN105918614A (zh) | 高效玉米秸秆生物饲料的集成化加工方法 | |
| CN103211084A (zh) | 富含生物酶的油茶籽粕发酵饲料的制备方法 | |
| CN102524544B (zh) | 一种采用酱油渣制备的饲用酶制剂及其制备方法 | |
| CN105918615A (zh) | 一种规模化稻麦秸秆微生物饲料的生产方法 | |
| CN104855680A (zh) | 白灵菇菌糠发酵饲料及其加工工艺 | |
| CN101912056A (zh) | 生猪饲养无药物残留的饲料配制方法 | |
| CN103820339A (zh) | 一种提高木薯渣蛋白水平的脱水固态组合菌剂及其制作方法 | |
| CN101194668B (zh) | 一种血粉生物改性肽蛋白的生产方法及应用 | |
| CN103156059B (zh) | 高蛋白低纤维玉米秸秆生物营养饲草的制备方法 | |
| CN106666129A (zh) | 酵母培养物在制备提高泌乳奶牛生产性能的饲料中的应用 | |
| CN104509683A (zh) | 一种竹笋壳复合发酵制作黄贮饲料的方法 | |
| CN108795812A (zh) | 一种堆肥用腐熟剂及其制备方法与应用 | |
| CN103947829A (zh) | 一种基于白酒糟和粕类复合发酵饲料的制备方法 | |
| CN106387505A (zh) | 一种利用牛粪发酵鱼饲料配方及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |