CN103478417A - 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 - Google Patents
一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103478417A CN103478417A CN201310359106.6A CN201310359106A CN103478417A CN 103478417 A CN103478417 A CN 103478417A CN 201310359106 A CN201310359106 A CN 201310359106A CN 103478417 A CN103478417 A CN 103478417A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- liquid
- acidi lactici
- soybean meal
- inoculated
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 title claims abstract description 19
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 83
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 69
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 27
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 27
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 7
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 43
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 38
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 34
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 34
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 30
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 27
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 27
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 claims description 19
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 claims description 19
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 claims description 19
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims description 15
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 abstract description 9
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 abstract description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 6
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 6
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 abstract description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 3
- 108010083391 glycinin Proteins 0.000 abstract description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 3
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 abstract description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 abstract description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 abstract description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 abstract description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 abstract description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract 2
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 abstract 1
- 108700037728 Glycine max beta-conglycinin Proteins 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 abstract 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 abstract 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 abstract 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 abstract 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 abstract 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 abstract 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 12
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 12
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 8
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 6
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- KLOIYEQEVSIOOO-UHFFFAOYSA-N carbocromen Chemical compound CC1=C(CCN(CC)CC)C(=O)OC2=CC(OCC(=O)OCC)=CC=C21 KLOIYEQEVSIOOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 1
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000021393 food security Nutrition 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000019629 palatability Nutrition 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N spiromesifen Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1C(C(O1)=O)=C(OC(=O)CC(C)(C)C)C11CCCC1 GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Beans For Foods Or Fodder (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
本发明提供了一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，将枯草芽孢杆菌液、假丝酵母菌液和乳酸杆菌液混合得到的混合菌液接入到去皮豆粕，混合发酵；将乳酸杆菌液接入到发酵物中，混合，厌氧发酵，得到发酵豆粕。该方法能够满足好氧菌与厌氧菌的不同需求，可生产制备高品质的发酵豆粕，无化学添加剂，发酵过程中产生的各种消化酶、有机酸、中小分子蛋白（功能肽)、氨基酸、维生素、益生菌等也大大提高了豆粕的营养价值，制得的发酵豆粕含大豆肽≥16%、大豆球蛋白≤25mg/g、β-伴球蛋白≤20mg/g、乳酸≥3.5%、有益活菌总数≥2×109，微生物源性营养物有利于维持肠道组织结构，促进免疫功能，提高动物生产性能。
Description
技术领域
本发明涉及一种发酵方法，尤其涉及一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法以及发酵产物。
背景技术
由于目前饲料中添加抗生素的现象十分普遍，出于安全原因，许多国家禁止利用一些畜产品下脚料生产的肉骨粉等动物蛋白原料用于饲料，因此，从安全与成本角度考虑，将植物源蛋白作为动物蛋白原料的替代品已经成为一种趋势。但是，要高效利用植物源蛋白，需要解决影响消化吸收的抗营养因子、适口性等问题；同时在幼禽畜养殖防治下痢中，抗生素的使用严重威胁了我们的食品安全，因此，在饲料生产中，需要采用在功能上能够替代不良副作用添加剂的微生态添加剂产品。
发酵豆粕作为优质的生物发酵蛋白原料，在动物饲料中可部分或完全替代动物蛋白原料，且具有来源丰富、质量稳定、易保存和无动物源性饲料疫病传染的风险等特点，在动物饲料生产中已被广泛应用。例如CN20090916A公开了一种高效发酵剂进行豆粕发酵的工艺，高效豆粕发酵剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、酿酒酵母和产朊假丝酵母混合而成，将豆粕和玉米粉碎，菌种活化，将粉碎好的豆粕与发酵液用混合机混合均匀，将混合好的豆粕发酵装袋，进行发酵。该工艺消除或显著降低了豆粕中的抗营养因子的含量，能满足幼年动物健康成长，营养平衡，质优价廉的安全植物性蛋白饲料，能替代骨粉、鱼粉等动物性蛋自饲料。
然而传统固态发酵复合菌固态发酵过程中，多菌种同时接种无法同时满足不同菌发酵要求，造成发酵不彻底。多菌种组合固态整体发酵的关键控制点在于把握和控制好好氧与厌氧二个阶段，掌握好好氧向厌氧的转换。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足，提供一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，通过二次接种分时段发酵，满足好氧菌与厌氧菌的不同需求，发酵彻底。
本发明的第一个方面是提供一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，包括以下步骤：
步骤1，将枯草芽孢杆菌液、假丝酵母菌液和乳酸杆菌液混合得到混合菌液；
步骤2，将混合菌液接入到去皮豆粕，混合，通风发酵；
步骤3，将乳酸杆菌液接入到步骤2处理得到的发酵物中，混合，厌氧发酵，得到发酵豆粕。
步骤1得到混合菌液中枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌的比例优选为（1-5）:（1-5）:1，更优选为（2-3）:（2-3）:1，更优选为（2.2-2.8）:（2.2-2.8）:1，更优选为（2.4-2.6）:（2.4-2.6）:1。
步骤2中，混合菌液接入到去皮豆粕中的接种量为体积百分比0.5-15%，更优选为1-10%，更优选为1-5%，更优选2-4%。
步骤2中，发酵时间优选为10-40h，更优选为15-30h，更优选为18-25h，更优选为20-22h。
步骤3中，乳酸杆菌液接入到步骤2处理得到的发酵物中的接种量为体积百分比0.1-10%，更优选为0.5-8%，更优选为1-6%，更优选为1.5-4%，例如2%、2.5%、3%或3.5%。
步骤3中，厌氧发酵时间优选为为30-100h，更优选为35-80h，更优选为40-65h，更优选为45-50h，更优选为48-50h。
在本发明第一个方面的一个优选的实施例中，采用链带式发酵床进行发酵。
优选地，步骤2为：将混合菌液与去皮豆粕混合得到发酵基础料，将发酵基础料按10-50cm（优选20-45cm，更优选30-40cm）的厚度均匀摊铺在独立封闭的发酵床，起始温度控制在15-45℃（优选20-38℃，更优选20-30℃，更优选20-25℃），起始pH值为6.0-7.0（优选6.5-7.0），在链带式发酵床的第一层通风发酵。
优选地，步骤3为：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，将乳酸杆菌液均匀喷洒在步骤2处理得到的发酵物上，厌氧发酵25-60h（优选30-45h，更优选36-38h）后，再将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵。
优选地，步骤3中链带式发酵床的第二层和第三层与周围环境隔离，通过枯草芽孢杆菌和假丝酵母菌的发酵将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件。
所述枯草芽孢杆菌液制备优选为：将枯草芽孢杆菌保存菌种接种到NB培养基中，活化培养8-30h（更优选10-25h，更优选12-20h，更优选14-18h），将活化培养物以0.5-10%（更优选0.8-8%，更优选1-5%，更优选2-4%）的接种量接种于种子罐中，培养10-40h（更优选12-35h，更优选14-30h，更优选16-20h），得到枯草芽孢杆菌液。
所述假丝酵母菌液制备为：将假丝酵母菌保存菌种接种到YM培养基中，活化培养10-40h（更优选14-35h，更优选16-30h，更优选20-24h），将活化培养物以0.5-10%（更优选0.8-8%，更优选1-5%，更优选2-4%）的接种量接种于种子罐中，培养18-24h，得到假丝酵母菌液。
所述乳酸杆菌液制备为：将乳酸杆菌保存菌种接种到乳酸杆菌培养基中，厌氧活化培养15-50h（更优选18-42h，更优选24-36h），将活化培养物以0.5-10%（更优选0.8-8%，更优选1-5%，更优选2-4%）的接种量接种于种子罐中，厌氧培养10-40h（更优选14-35h，更优选16-30h，更优选20-24h），得到乳酸杆菌液。
优选地，按重量份数计，所述NB培养基的组成成分包括牛肉膏0.1-1份、蛋白胨0.5-3份、氯化钠0.1-1份、水50-200份，pH值为7.2-7.5。
优选地，按重量份数计，所述YM培养基的组成成分包括酵母粉0.8-6份、麦芽粉0.8-6份、蛋白胨1-10份、水50-200份。
优选地，按重量份数计，所述乳酸杆菌培养基组成成分包括蛋白胨5-20份、牛肉浸膏5-20份、酵母提取物1-10份、葡萄糖15-25份、吐温800.5-2份、柠檬酸氢二铵0.5-4份、MnSO4·H2O0.1-0.5份、MgSO4·7H2O0.5-4份、K2HPO40.5-4份、蒸馏水800-2000份，pH值为6.2-6.4。
在本发明第一个方面的一个优选的实施例中，还包括步骤4：将步骤3处理得到的发酵豆粕干燥、粉碎得到发酵豆粕成品。
优选地，发酵豆粕干燥是在通过40-75℃（更优选为45-68℃，更优选为50-60℃）烘干干燥的。
优选地，粉碎得到的发酵豆粕成品的颗粒大小为≤100目，更优选≤40目。
本发明的第二个方面是提供一种发酵豆粕，所述发酵豆粕采用上述方法制备而成。
本发明的第三个方面是提供一种发酵豆粕的复合菌种，所述包括枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌，且枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌的比例为（1-5）:（1-5）:1，优选为（2-3）:（2-3）:1，更优选为（2.2-2.8）:（2.2-2.8）:1，更优选为（2.4-2.6）:（2.4-2.6）:1。
本发明提供的二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法能够满足好氧菌与厌氧菌的不同需求，可生产制备高品质的发酵豆粕，无化学添加剂等影响豆粕蛋白功能性质，发酵过程中产生的各种消化酶、有机酸、中小分子蛋白（功能肽)、氨基酸、维生素、益生菌等也大大提高了豆粕的营养价值，采用本发明方法制得的发酵豆粕含大豆肽≥16%、大豆球蛋白≤25mg/g、β-伴球蛋白≤20mg/g、乳酸≥3.5%、有益活菌总数≥2×109，微生物源性营养物有利于维持肠道组织结构，促进免疫功能，提高动物生产性能。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式对本发明作进一步的描述，以更好地理解本发明。
实施例1
1、菌种活化：挑取斜面保存枯草芽孢杆菌，接种到NB种子培养基中，在35-37℃条件下，用150-170rpm摇床进行12-20h活化；挑取假丝酵母保存菌种，接种到YM种子培养基，用150-170rpm摇床进行20-24h活化；挑取乳酸杆菌保存菌种接种到乳酸杆菌培养基中，于35-39℃条件下静止培养24-36h活化；
2、菌种培养：枯草芽孢杆菌活化培养物以1%-5%接种量接种于种子罐中35-37℃，间歇通气培养16-20h；假丝酵母活化培养物以1%-5%接种量接种于种子罐中30-35℃、间歇通气培养18-24h；乳酸杆菌活化培养物以1%-5%接种量接种于种子罐中，35-39℃静置培养20-24h；
3、一次接种混合菌液：按枯草芽孢杆菌：假丝酵母菌：乳酸杆菌=（2-3）:（2-3）:1比例混合；
4、发酵车间一次接种：发酵原料为去皮豆粕，混合菌液按体积百分比5-6%的接种量接种到去皮豆粕，投入混合接种机中混合均匀，接种后的发酵基础料按厚度30-40cm，起始温度控制在20-25℃，起始pH值6.5-7.0，均匀摊铺在独立封闭的发酵床上进行发酵；
5、一次发酵控制：通过在链带式发酵床第一层通风制造适合好氧菌发酵的环境，4-6h料温达到40℃，发酵20h-22h，控制pH值为6.0-6.5，第一阶段发酵完成；
6、翻料并进行二次接种：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，乳酸杆菌菌液按体积百分比2%的接种量，均匀喷洒在物料；
7、二次发酵控制：发酵床第二层和第三层与周围环境隔断，通过好氧菌发酵迅速将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件，在发酵36-38h后，将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵；
8、烘干：厌氧发酵时间共进行到48-50h发酵完成，发酵后的全部产物移入低温烘干机中，进行烘干；烘干温度控制在50-60℃；
9、粉碎：烘干后的产物输送到逆流冷却器降温，粉碎，过40目筛；检测合格即成为发酵豆粕成品。
乳酸菌培养基：蛋白胨5-20g、牛肉浸膏5-20g、酵母提取物1-10g、葡萄糖15-25g、吐温800.5-2g、柠檬酸氢二铵0.5-4g、MnSO4·H2O0.1-0.5g、MgSO4·7H2O0.5-4g、K2HPO40.5-4g、蒸馏水800-2000mL，pH值为6.2-6.4。
NB培养基：牛肉膏0.1-1g、蛋白胨0.5-3g、氯化钠0.1-1g、水50-200mL，pH值为7.2-7.5。
YM培养基：酵母粉0.8-6g、麦芽粉0.8-6g、蛋白胨1-10g、水50-200mL。
实施例2
1、菌种活化：挑取斜面保存枯草芽孢杆菌，接种到NB种子培养基中，在36℃条件下，用160rpm摇床进行18h活化；挑取假丝酵母保存菌种，接种到YM种子培养基，用160rpm摇床进行22h活化；挑取乳酸杆菌保存菌种接种到乳酸杆菌培养基中，于37℃条件下静止培养30h活化；
2、菌种培养：枯草芽孢杆菌活化培养物以2%接种量接种于种子罐中36℃，间歇通气培养18h；假丝酵母活化培养物以2%接种量接种于种子罐中32℃、间歇通气培养20h；乳酸杆菌活化培养物以2%接种量接种于种子罐中，37℃静置培养22h；
3、一次接种混合菌液：按枯草芽孢杆菌：假丝酵母菌：乳酸杆菌=2.2:2.8:1的比例混合；
4、发酵车间一次接种：发酵原料为去皮豆粕，混合菌液按体积百分比5.5%的接种量接种到去皮豆粕，投入混合接种机中混合均匀，接种后的发酵基础料按厚度32cm，起始温度控制在22℃，起始pH值6.6，均匀摊铺在独立封闭的发酵床上进行发酵；
5、一次发酵控制：通过在链带式发酵床第一层通风制造适合好氧菌发酵的环境，4-6h料温达到40℃，发酵21h，控制pH值为6.0-6.5，第一阶段发酵完成；
6、翻料并进行二次接种：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，乳酸杆菌菌液按体积百分比2%的接种量，均匀喷洒在物料；
7、二次发酵控制：发酵床第二层和第三层与周围环境隔断，通过好氧菌发酵迅速将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件，在发酵37h后，将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵；
8、烘干：厌氧发酵时间共进行到50h时发酵完成，发酵后的全部产物移入低温烘干机中，进行烘干；烘干温度控制在55℃；
9、粉碎：烘干后的产物输送到逆流冷却器降温，粉碎，过40目筛；检测合格即成为发酵豆粕成品。
乳酸菌培养基：蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母提取物5g、葡萄糖20g、吐温801g、柠檬酸氢二铵2g、MnSO4·H2O0.25g、MgSO4·7H2O2g、K2HPO42g、蒸馏水1000mL，pH值为6.2-6.4。
NB培养基：牛肉膏0.5g、蛋白胨1.0g、氯化钠0.5g、蒸馏水100mL，pH值为7.2-7.5。
YM培养基：酵母粉3g、麦芽粉3g、蛋白胨5g、蒸馏水100mL。
实施例3
1、菌种活化：挑取斜面保存枯草芽孢杆菌，接种到NB种子培养基中，在35℃条件下，用165rpm摇床进行17h活化；挑取假丝酵母保存菌种，接种到YM种子培养基，用165rpm摇床进行23h活化；挑取乳酸杆菌保存菌种接种到乳酸杆菌培养基中，于38.5℃条件下静止培养33h活化；
2、菌种培养：枯草芽孢杆菌活化培养物以3%接种量接种于种子罐中36.5℃，间歇通气培养17h；假丝酵母活化培养物以3.2%接种量接种于种子罐中33℃、间歇通气培养21h；乳酸杆菌活化培养物以4%接种量接种于种子罐中，37.2℃静置培养22.5h；
3、一次接种混合菌液：按枯草芽孢杆菌：假丝酵母菌：乳酸杆菌=3:2.4:1比例混合；
4、发酵车间一次接种：发酵原料为去皮豆粕，混合菌液按体积百分比5.8%的接种量接种到去皮豆粕，投入混合接种机中混合均匀，接种后的发酵基础料按厚度37.5cm，起始温度控制在20-25℃，起始pH值6.5-7.0，均匀摊铺在独立封闭的发酵床上进行发酵；
5、一次发酵控制：通过在链带式发酵床第一层通风制造适合好氧菌发酵的环境，4-6h料温达到40℃，发酵21.8h，控制pH值为6.0-6.5，第一阶段发酵完成；
6、翻料并进行二次接种：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，乳酸杆菌菌液按体积百分比2%的接种量，均匀喷洒在物料；
7、二次发酵控制：发酵床第二层和第三层与周围环境隔断，通过好氧菌发酵迅速将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件，在发酵37.5h后，将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵；
8、烘干：厌氧发酵时间共进行到49h，发酵完成，发酵后的全部产物移入低温烘干机中，进行烘干；烘干温度控制在50-60℃；
9、粉碎：烘干后的产物输送到逆流冷却器降温，粉碎，过40目筛；检测合格即成为发酵豆粕成品。
乳酸菌培养基：蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母提取物5g、葡萄糖20g、吐温801g、柠檬酸氢二铵2g、MnSO4·H2O0.25g、MgSO4·7H2O2g、K2HPO42g、蒸馏水1000mL，pH值为6.2-6.4。
NB培养基：牛肉膏0.5g、蛋白胨1.0g、氯化钠0.5g、蒸馏水100mL，pH值为7.2-7.5。
YM培养基：酵母粉3g、麦芽粉3g、蛋白胨5g、蒸馏水100mL。
经检测上述实施例中所得发酵豆粕含大豆肽≥16%、大豆球蛋白≤25mg/g、β-伴球蛋白≤20mg/g、乳酸≥3.5%、有益活菌总数≥2×109。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (10)
1.一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，将枯草芽孢杆菌液、假丝酵母菌液和乳酸杆菌液混合得到混合菌液，混合菌液中枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌的比例为（1-5）:（1-5）:1；
步骤2，将混合菌液按体积百分比0.5-15%的接种量接入到去皮豆粕，混合，通风发酵10-40h；
步骤3，将乳酸杆菌液按体积百分比0.1-10%的接种量接入到步骤2处理得到的发酵物中，混合，厌氧发酵30-100h，得到发酵豆粕。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用链带式发酵床进行发酵，步骤2为：将混合菌液与去皮豆粕混合得到发酵基础料，将发酵基础料按10-50cm的厚度均匀摊铺在独立封闭的发酵床，起始温度控制在15-45℃，起始pH值为6.0-7.0，在链带式发酵床的第一层通风发酵。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3为：将链带式发酵床由第一层发到第二层的同时，将乳酸杆菌液均匀喷洒在步骤2处理得到的发酵物上，厌氧发酵25-60h后，再将发酵物由第二层翻到第三层，继续厌氧发酵。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤3中链带式发酵床的第二层和第三层与周围环境隔离，通过枯草芽孢杆菌和假丝酵母菌的发酵将环境调节到适合乳酸杆菌生长的条件。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌液制备为：将枯草芽孢杆菌保存菌种接种到NB培养基中，活化培养8-30h，将活化培养物以0.5-10%的接种量接种于种子罐中，培养10-40h，得到枯草芽孢杆菌液；
所述假丝酵母菌液制备为：将假丝酵母菌保存菌种接种到YM培养基中，活化培养10-40h，将活化培养物以0.5-10%的接种量接种于种子罐中，培养18-24h，得到假丝酵母菌液；
所述乳酸杆菌液制备为：将乳酸杆菌保存菌种接种到乳酸杆菌培养基中，厌氧活化培养15-50h，将活化培养物以0.5-10%的接种量接种于种子罐中，厌氧培养10-40h，得到乳酸杆菌液。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中将混合菌液按体积百分比5-6%的接种量接入到去皮豆粕。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3中将乳酸杆菌液按体积百分比2%的接种量接入到步骤2处理得到的发酵物中。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括步骤4：将步骤3处理得到的发酵豆粕干燥、粉碎得到发酵豆粕成品。
9.一种发酵豆粕，其特征在于，采用权利要求1所述的方法制备而成。
10.一种发酵豆粕的复合菌种，其特征在于，包括枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌，且枯草芽孢杆菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌的比例为（1-5）:（1-5）:1。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310359106.6A CN103478417A (zh) | 2013-08-16 | 2013-08-16 | 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310359106.6A CN103478417A (zh) | 2013-08-16 | 2013-08-16 | 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103478417A true CN103478417A (zh) | 2014-01-01 |
Family
ID=49819280
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310359106.6A Pending CN103478417A (zh) | 2013-08-16 | 2013-08-16 | 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103478417A (zh) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104000016A (zh) * | 2014-05-23 | 2014-08-27 | 惠州市智农生物科技有限公司 | 两段式豆粕动态发酵工艺 |
| CN104012755A (zh) * | 2014-06-12 | 2014-09-03 | 江南大学 | 一种两步发酵高效生产发酵豆粕的方法 |
| CN105010731A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-11-04 | 河南科技大学 | 一种植物蛋白混合物的制备方法 |
| CN105994968A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-10-12 | 东莞市林氏生物技术股份有限公司 | 一种利用益生菌生产鱼粉的方法及制得的鱼粉 |
| CN107343561A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-11-14 | 山东中阳生物科技有限公司 | 一种分步发酵制备生物活性饲料的方法 |
| CN107712272A (zh) * | 2017-10-30 | 2018-02-23 | 福建傲农生物科技集团股份有限公司 | 一种物料发酵工艺 |
| CN108077654A (zh) * | 2017-12-28 | 2018-05-29 | 广州海诚生物科技有限公司 | 一种鱼用发酵冷制粒饲料及其制备方法 |
| CN110651909A (zh) * | 2019-11-15 | 2020-01-07 | 吉林农业大学 | 一种植物源仔猪代乳粉及其应用 |
| WO2020133194A1 (zh) * | 2018-12-28 | 2020-07-02 | 上海源耀生物股份有限公司 | 一种多菌种分步发酵制备风味性发酵豆粕的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101107970A (zh) * | 2007-08-23 | 2008-01-23 | 辽宁省微生物科学研究院 | 生物型奶牛浓缩饲料及其制备方法 |
| CN102160595A (zh) * | 2011-02-22 | 2011-08-24 | 福建省新闽科生物科技开发有限公司 | 一种复合微生物发酵活性饲料的制备工艺 |
| CN102406134A (zh) * | 2011-12-02 | 2012-04-11 | 德清博仕佳生物科技有限公司 | 一种高消化率发酵豆粕的固态发酵方法 |
| CN102669424A (zh) * | 2012-06-05 | 2012-09-19 | 哈尔滨英瑞斯饲料有限责任公司 | 微生物固态发酵的生物饲料及其制备方法 |
| CN102972635A (zh) * | 2012-11-28 | 2013-03-20 | 张有聪 | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 |
-
2013
- 2013-08-16 CN CN201310359106.6A patent/CN103478417A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101107970A (zh) * | 2007-08-23 | 2008-01-23 | 辽宁省微生物科学研究院 | 生物型奶牛浓缩饲料及其制备方法 |
| CN102160595A (zh) * | 2011-02-22 | 2011-08-24 | 福建省新闽科生物科技开发有限公司 | 一种复合微生物发酵活性饲料的制备工艺 |
| CN102406134A (zh) * | 2011-12-02 | 2012-04-11 | 德清博仕佳生物科技有限公司 | 一种高消化率发酵豆粕的固态发酵方法 |
| CN102669424A (zh) * | 2012-06-05 | 2012-09-19 | 哈尔滨英瑞斯饲料有限责任公司 | 微生物固态发酵的生物饲料及其制备方法 |
| CN102972635A (zh) * | 2012-11-28 | 2013-03-20 | 张有聪 | 一种利用益生菌和杂粕生产微生物饲料添加剂的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 乔利: "固态发酵工艺参数对豆粕发酵品质的影响", 《万方数据》 * |
| 刘剑飞: "高活性发酵豆粕生产菌株筛选及其最佳发酵条件的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
| 朱平军: "多菌种固态生料仿生发酵豆粕的研究", 《万方数据》 * |
| 朱曦: "混合发酵去除豆粕中抗营养因子最佳发酵条件的探究", 《养殖与饲料》 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104000016A (zh) * | 2014-05-23 | 2014-08-27 | 惠州市智农生物科技有限公司 | 两段式豆粕动态发酵工艺 |
| CN104012755A (zh) * | 2014-06-12 | 2014-09-03 | 江南大学 | 一种两步发酵高效生产发酵豆粕的方法 |
| CN105010731A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-11-04 | 河南科技大学 | 一种植物蛋白混合物的制备方法 |
| CN105994968A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-10-12 | 东莞市林氏生物技术股份有限公司 | 一种利用益生菌生产鱼粉的方法及制得的鱼粉 |
| CN107343561A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-11-14 | 山东中阳生物科技有限公司 | 一种分步发酵制备生物活性饲料的方法 |
| CN107712272A (zh) * | 2017-10-30 | 2018-02-23 | 福建傲农生物科技集团股份有限公司 | 一种物料发酵工艺 |
| CN108077654A (zh) * | 2017-12-28 | 2018-05-29 | 广州海诚生物科技有限公司 | 一种鱼用发酵冷制粒饲料及其制备方法 |
| WO2020133194A1 (zh) * | 2018-12-28 | 2020-07-02 | 上海源耀生物股份有限公司 | 一种多菌种分步发酵制备风味性发酵豆粕的方法 |
| CN110651909A (zh) * | 2019-11-15 | 2020-01-07 | 吉林农业大学 | 一种植物源仔猪代乳粉及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103478417A (zh) | 一种二次接种分段固态发酵生产发酵豆粕的方法 | |
| CN101558823B (zh) | 一种猪禽用发酵液体饲料及其制备方法和应用 | |
| CN110037164A (zh) | 一种菌-酶协同发酵生产高小肽发酵豆粕的工艺 | |
| CN1279835C (zh) | 一种发酵法消除豆粕中抗营养因子的方法 | |
| CN106222114A (zh) | 高效降解豆粕抗原蛋白的芽孢杆菌及菌酶混合发酵的方法 | |
| CN104054902A (zh) | 一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺 | |
| CN102524535B (zh) | 一种饲用低聚肽添加剂及其制备方法 | |
| CN105494890A (zh) | 一种联合酶解法和发酵法提高菜籽粕饲用营养价值的方法 | |
| CN101912056B (zh) | 生猪饲养无药物残留的饲料配制方法 | |
| CN103355472A (zh) | 棉粕脱毒微生物发酵剂及其制备方法和应用 | |
| CN102422996B (zh) | 生长肥育猪前期微生物发酵无抗生素饲料 | |
| CN104186935B (zh) | 复合菌液发酵豆粕的方法 | |
| CN106107064A (zh) | 一种猪促生长冷制粒发酵饲料的生产工艺 | |
| CN101503669A (zh) | 用于生产无抗原豆粕的微生物菌剂及其制备方法 | |
| CN108142728A (zh) | 鱼用发酵饲料及其制备方法和应用 | |
| CN1422957A (zh) | 一种制造植物蛋白生物活性小肽的方法 | |
| CN106889306A (zh) | 一种饲料发酵剂及在饲料发酵上的应用 | |
| CN104247893A (zh) | 一种联合酶解法和发酵法制备奶牛增乳生物发酵肽的方法 | |
| CN105076715A (zh) | 利用废弃糟酶解多菌种发酵生产微生态发酵饲料添加剂的方法 | |
| CN106417900A (zh) | 一种饲料用豆粕的加工方法及应用 | |
| CN107712266A (zh) | 二次发酵糟渣生产高活性高营养饲料的方法及使用方法 | |
| CN101700105A (zh) | 奶牛用微生态饲料添加剂及制备方法 | |
| CN109418538A (zh) | 一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺 | |
| CN103156091B (zh) | 在低温条件下制作肉牛秸秆生物发酵营养饲草的方法 | |
| CN102630813A (zh) | 一种奶牛用益生菌混合制剂制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20160826 Address after: Chunxiao Beilun District Industrial Park 315830 Zhejiang city of Ningbo Province Applicant after: Ningbo Zhongrui Biotechnology Co., Ltd. Address before: Chunxiao Beilun District Industrial Park 315830 Zhejiang city of Ningbo Province Applicant before: Ningbo Zhongrui Biotechnology Co., Ltd. Applicant before: Ningbo Tesheng Biological Feed Co., Ltd. |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140101 |