CN104054902A - 一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，使用自制的育种培养基能够对四种菌种同时进行育种培养，后将所得菌液对豆粕进行发酵，育种和发酵的流程少，易于操作和实现大规模生产，发酵后的豆粕含水量较低，松散不粘稠，干燥时间短，降低了生产成本，并且采用较低温度烘干能使其中的益生菌保持生物活性。本发明使用产朊假丝酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌、双歧杆菌混合菌种对豆粕进行发酵生产，发酵豆粕含有大量的益生菌群，并且胰蛋白酶抑制剂得到有效去除，发酵豆粕作为动物饲料能够提高动物的免疫力，减少疾病的发生。采用本发明生产的发酵豆粕作为动物饲料，更易消化和吸收，可代替鱼粉用于水产饲料和猪、鸡饲料中。

Description

一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，具体涉及一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺。

背景技术

豆粕是大豆提取豆油后得到的一种副产品，是棉籽粕、花生粕、菜籽粕等12种动植物油粕饲料产品中产量最大，用途最广的一种，作为一种高蛋白质，豆粕是制作牲畜与家禽饲料的主要原料，广泛用于禽类和水产养殖业中。对豆粕进行生物发酵可除去豆粕中的抗营养因子，并且发酵后的豆粕含有大量的益生菌成分，具有较高的生物活性，可以改善动物肠道的微生物平衡，补充肠道大量的活性益生菌，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌的生长，提高畜禽的免疫力，减少疾病的发生。发酵豆粕的干燥是一个普遍存在的问题，采用高温干燥会使发酵豆粕中挥发性酸味物质等热敏性物质损失严重，降低产品的营养；低温干燥又会增大发酵成本，不利于规模化生产。

专利CN103315143A公开了低温干燥发酵豆粕的制备方法，混合菌种对湿豆粕和糖蜜进行发酵，后采用低温干燥处理发酵豆粕，由于发酵后的豆粕水分含量较大，采用低温干燥会大大提高发酵成本；专利CN102948614A公开了一种菌酶协同发酵豆粕制备活性饲用肽的方法，采用复合酶和复合菌种对含水分的豆粕进行分阶段控温发酵，发酵中未涉及菌种的培养，并且采用分阶段控温发酵，增加了发酵的工序。

发明内容

本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，本工艺采用固态发酵，干燥时间短，并且发酵豆粕中含有较多的粗蛋白、小分子活性肽和益生菌。

本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：用自制培养基对乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母进行扩大培养，用所得培养液、扩大培养后的成熟菌液与豆粕等原料混合后进行发酵生产，然后再经烘干粉碎后包装，步骤如下：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.0-3.0：1.5-1.8：2.0-3.0：0.5-1.0：0.3-0.4：0.015-0.020：0.5-0.8：180-220，加热至沸腾，调节pH值至4.5-5.5后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9×10⁵U-10×10⁵ U的糖化酶，55-65℃保温3-5小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95-100℃，保温0.5小时，后在5-10秒内降温至35-45℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌3-5%、双歧杆菌5-7%、枯草芽孢杆菌5-7%、产朊假丝酵母菌6-8%，接种后进行菌种发酵培养，四个恒化器的培养温度均为35-45℃，时间均为60-75小时，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.7-1.9L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为9-11亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕65-75%、乳酸菌菌液1.8-2.5%、双歧杆菌菌液1.8-2.5%、枯草芽孢杆菌菌液1.8-2.5%、产朊假丝酵母菌液1.8-2.5%、水15-25%和育种培养基2-3.5%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间60-80小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度50-60℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：菌种的接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母菌7%，培养温度为40℃，并且当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：豆粕发酵生产中原料的重量比例为：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：豆粕的发酵生产中，发酵温度为40℃，发酵时间72小时。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干。

进一步优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：步骤如下：

（1）菌种发酵液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U的糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母7%，接种后进行菌种发酵培养，培养温度为40℃，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，含枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.8L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度40℃，发酵时间72小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

本发明相比现有技术具有以下优点：

本发明提供了一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，本发明制备的一种育种培养基能够对四种菌种同时进行培养，便于调节物料的投放、时间、温度等工艺参数，有效保证菌种菌液中的活菌含量，减少了育种的操作和时间，易于实现大规模生产；并且对育种培养基进行灭菌处理后直接加入恒化器进行菌种的发酵培养，避免了育种培养基的污染，同时简化了发酵流程；在豆粕的发酵过程中添加育种培养基的营养物质能促进菌种进一步增殖，节约了发酵时间；发酵时采用的豆粕和其他物料的重量比，使发酵后豆粕的含水量较低，松散，不粘稠，易于烘干处理；采用较低温度烘干处理即可得到含水量较低的发酵豆粕，干燥时间短，降低了生产成本，采用较低温度烘干也保证了发酵豆粕中所含益生菌的生物活性。

本发明使用产朊假丝酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌、双歧杆菌混合菌种对豆粕进行发酵生产，使发酵豆粕含有大量的益生菌群，并且胰蛋白酶抑制剂得到有效去除，发酵豆粕作为动物饲料能够提高动物的免疫力，减少疾病的发生。

本发明采用混合菌种发酵，菌类的代谢产物如菌体蛋白和消化酶的加入可使粗蛋白含量提高12%左右，并且可改善饲料的适口性；发酵过程将大多数的大分子多肽降解成分子量小于1500Da的活性小肽，生物活性小肽的含量达到70%左右，能协调动物对各种养分的利用，提高机体的免疫能力，促进矿物质元素的吸收利用。

采用本发明生产的发酵豆粕作为动物饲料，更易消化和吸收，在水产饲料中可以等量替代50%鱼粉，在猪、鸡饲料中可全部替代鱼粉，也可添加其他产品如乳糖全部替代乳猪饲料中添加的乳清粉。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

本发明提供了一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，步骤如下：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.0-3.0：1.5-1.8：2.0-3.0：0.5-1.0：0.3-0.4：0.015-0.020：0.5-0.8：180-220，加热至沸腾，调节pH值至4.5-5.5后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9×10⁵U-10×10⁵ U的糖化酶，55-65℃保温3-5小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95-100℃，保温0.5小时，后在5-10秒内降温至35-45℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌3-5%、双歧杆菌5-7%、枯草芽孢杆菌5-7%、产朊假丝酵母菌6-8%，接种后进行菌种发酵培养，四个恒化器的培养温度均为35-45℃，时间均为60-75小时，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.7-1.9L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为9-11亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕65-75%、乳酸菌菌液1.8-2.5%、双歧杆菌菌液1.8-2.5%、枯草芽孢杆菌菌液1.8-2.5%、产朊假丝酵母菌液1.8-2.5%、水15-25%和育种培养基2-3.5%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间60-80小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度50-60℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：菌种的接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母菌7%，培养温度为40℃，并且当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：豆粕发酵生产中原料的重量比例为：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：豆粕的发酵生产中，发酵温度为40℃，发酵时间72小时。

优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干。

进一步优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺：步骤如下：

（1）菌种发酵液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U的糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母7%，接种后进行菌种发酵培养，培养温度为40℃，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，含枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.8L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度40℃，发酵时间72小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

本发明进一步优选的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，特定发酵物料配比和工艺条件参数，能使发酵豆粕的粗蛋白含量提高12.74%，分子量1500Da及以下的小肽组分达到71.14%，蛋白质消化率达到99%，胰蛋白酶抑制剂降低至70U/g，复合菌种达到430亿/g。

实施例1

本实施例包括以下步骤：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽2.5kg、蛋白胨1.7kg、琼脂2.5kg、柠檬酸钠0.8kg、磷酸二氢钾0.3kg、硫酸镁0.018kg、碳酸氢钠0.7kg和水190kg加入配料罐中，加热至沸腾，调节pH值至4.8后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9×10⁵U的糖化酶，65℃保温糖化3小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至100℃，保温0.5小时，后在6秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌5%、双歧杆菌7%、枯草芽孢杆菌7%、产朊假丝酵母8%，接种后进行菌种发酵培养，培养温度为38℃，时间为65小时，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，含枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.8L/min，得到乳酸菌菌液：活菌含量为9.5亿/克，双歧杆菌菌液：活菌含量为10.2亿/克，枯草芽孢杆菌菌液：活菌含量为9.8亿/克，产朊假丝酵母菌菌液：活菌含量为9.5亿/克；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下原料：豆粕650kg、乳酸菌菌液25kg、双歧杆菌菌液25kg、枯草芽孢杆菌菌液25kg、产朊假丝酵母菌液25kg、水220kg和育种培养基30kg，将上述称取的原料混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度45℃，发酵时间65小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕进入干燥机内温度50℃干燥至水分为10%，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

实施例2

本实施例包括以下步骤：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽2.4kg、蛋白胨1.6kg、琼脂2.4kg、柠檬酸钠0.8kg、磷酸二氢钾0.36kg、硫酸镁0.019kg、碳酸氢钠0.6kg和水200kg加入配料罐中，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U的糖化酶，60℃保温糖化4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母7%，接种后进行菌种发酵培养，其中乳酸菌和双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌菌进行好氧发酵培养，培养温度为40℃，得到乳酸菌菌液：活菌含量为10亿/克，双歧杆菌菌液：活菌含量为10亿/克，枯草芽孢杆菌菌液：活菌含量为10亿/克，产朊假丝酵母菌液：活菌含量为10亿/克；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下原料：豆粕710kg、乳酸菌成熟菌液20kg、双歧杆菌成熟菌液20kg、枯草芽孢杆菌成熟菌液20kg、产朊假丝酵母成熟菌液20kg、水180kg和育种培养基30kg，将上述称取的原料混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度40℃，发酵时间72小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕进入干燥机内温度55℃干燥至水分为9%，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

实施例3

本实施例包括以下步骤：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽3.0kg、蛋白胨1.5kg、琼脂2.0kg、柠檬酸钠0.5kg、磷酸二氢钾0.4kg、硫酸镁0.020kg、碳酸氢钠0.5kg和水210kg加入配料罐中，加热至沸腾，调节pH值至4.5后转入糖化罐中，向糖化罐中加入10×10⁵U糖化酶，55℃保温糖化4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在10秒内降温至45℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌3%、双歧杆菌5%、枯草芽孢杆菌5%、产朊假丝酵母6%，接种后进行菌种发酵培养，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，含枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.8L/min，培养温度为45℃，时间为65小时，得到乳酸菌菌液：活菌含量为10.5亿/克，双歧杆菌菌液：活菌含量为9.4亿/克，枯草芽孢杆菌菌液：活菌含量为9.8亿/克，产朊假丝酵母菌菌液：活菌含量为10.4亿/克；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下原料：豆粕700kg、乳酸菌成熟菌液20kg、双歧杆菌成熟菌液20kg、枯草芽孢杆菌成熟菌液20kg、产朊假丝酵母成熟菌液20kg、水190kg和育种培养基30kg，将上述称取的原料混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度45℃，发酵时间60小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕进入干燥机内温度60℃干燥至水分为9%，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

实验结果

其中，对照实验为没有经过发酵处理的豆粕原料。

表1，不同实施例对粗蛋白、分子量1500Da及以下的小肽组分、蛋白质消化率、胰蛋白酶抑制剂、复合菌含量的影响

检测项目	实施例1	实施例2	实施例3	对照实验
					粗蛋白（%）	55.20	55.84	55.40	43.10
分子量1500Da及以下的小肽组分（%）	70.42	71.14	70.48	0.5
					蛋白质消化率（%）	97	99	98	62
胰蛋白酶抑制剂（U/g）	85	70	80	1100
					复合菌（亿/g）	415	430	420	0

Claims (7)

1.一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：包含以下步骤：

（1）菌种菌液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.0-3.0：1.5-1.8：2.0-3.0：0.5-1.0：0.3-0.4：0.015-0.020：0.5-0.8：180-220，加热至沸腾，调节pH值至4.5-5.5后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9×10⁵U-10×10⁵ U的糖化酶，55-65℃保温3-5小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95-100℃，保温0.5小时，后在5-10秒内降温至35-45℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌3-5%、双歧杆菌5-7%、枯草芽孢杆菌5-7%、产朊假丝酵母菌6-8%，接种后进行菌种发酵培养，四个恒化器的培养温度均为35-45℃，时间均为60-75小时，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.7-1.9L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为9-11亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕65-75%、乳酸菌菌液1.8-2.5%、双歧杆菌菌液1.8-2.5%、枯草芽孢杆菌菌液1.8-2.5%、产朊假丝酵母菌液1.8-2.5%、水15-25%和育种培养基2-3.5%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度35-45℃，发酵时间60-80小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度50-60℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。

2.根据权利要求1所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中。

3.根据权利要求1所述的所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：菌种的接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母菌7%，培养温度为40℃，并且当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养。

4.根据权利要求1所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：豆粕发酵生产中原料的重量比例为：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%。

5.根据权利要求1所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：豆粕的发酵生产中，发酵温度为40℃，发酵时间72小时。

6.根据权利要求1所述的所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干。

7.根据权利要求1所述的所述的一种混合菌种固态发酵生产发酵豆粕的工艺，其特征在于：步骤如下：

（1）菌种发酵液的制备：

将下述原料：大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入配料罐中，所述原料的质量比为大麦芽：蛋白胨：琼脂：柠檬酸钠：磷酸二氢钾：硫酸镁：碳酸氢钠：水=2.4：1.6：2.4：0.8：0.36：0.019：0.6：200，加热至沸腾，调节pH值至5.0后转入糖化罐中，向糖化罐中加入9.6×10⁵U的糖化酶，60℃保温4小时，得糖化液，将所得糖化液转入流体加热器内升温至95℃，保温0.5小时，后在8秒内降温至40℃，得到育种培养基，并加入四个恒化器中；

将实验室培养好的乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母菌菌种用接种机分别接入四个恒化器中，每个恒化器接种一种菌种，菌种接种量按菌种体积与育种培养基体积的百分比计，分别为乳酸菌4%、双歧杆菌6%、枯草芽孢杆菌6%、产朊假丝酵母7%，接种后进行菌种发酵培养，培养温度为40℃，其中乳酸菌、双歧杆菌的恒化器进行密封发酵培养，含枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌的恒化器进行好氧发酵培养，通氧量为1.8L/min，对恒化器育种培养基中的活菌含量进行检测，当活菌含量为10亿/克时，停止该恒化器内菌种的培养，分别得到乳酸菌菌液、双歧杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、产朊假丝酵母菌菌液；

（2）豆粕的发酵生产：

称取以下质量百分比的原料：豆粕71%、乳酸菌菌液2%、双歧杆菌菌液2%、枯草芽孢杆菌菌液2%、产朊假丝酵母菌液2%、水18%、育种培养基3%，混合均匀，置于发酵装置内进行固体密闭无氧发酵，发酵温度40℃，发酵时间72小时，形成发酵豆粕；

（3）发酵豆粕的干燥、粉碎、包装：将发酵豆粕于干燥机内温度55℃烘干，用粉碎机粉碎，经螺旋输送机输出后包装。