CN102793673A - 一种小檗碱磷脂复合物固体分散体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种小檗碱磷脂复合物固体分散体及其制备方法，属于制药领域。小檗碱脂溶性低，透膜吸收能力差，且为P-糖蛋白(P-gp)底物，吸收受到胃肠上皮细胞的外排作用，导致其口服生物利用度极低，因此需采用一种有效方法用以提高小檗碱的脂溶性，同时能抑制其P-糖蛋白的外排，从而促进药物吸收。本发明的小檗碱磷脂复合物固体分散体由小檗碱、磷脂、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、二氧化硅按一定的重量比组成，可有效提高小檗碱的脂溶性，抑制P-gp的外排作用，促进药物在胃肠道吸收，提高生物利用度；并且具有较好的稳定性和流动性，制备方法简便，有较大的工业化前景。

Description

一种小檗碱磷脂复合物固体分散体及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种小檗碱磷脂复合物固体分散体及其制备方法，尤其涉及一种以TPGS和二氧化硅为混合载体的小檗碱磷脂复合物固体分散体，属于制药领域。 

背景技术

小檗碱(Berberine)是中药黄连中的一种主要成分，还主要存在于黄柏、三颗针等其它植物中。小檗碱为一种季铵生物碱，其分子式为C₂₀H₁₈NO₄，化学结构式如下所示： 

小檗碱的药理活性十分丰富，临床上应用最多的是小檗碱的抗菌、抗炎作用，近年来不断有文献报道，小檗碱吸收入血后还可达到抗心律失常、抗肿瘤、抗高血压、治疗糖尿病的作用。尽管小檗碱的药理学活性较多，但小檗碱的脂溶性低，透过脂质生物膜的能力较差，且小檗碱是P-糖蛋白的底物，易受外排而回流到肠腔，导致小檗碱吸收较差[张燕，朱华旭，郭立玮.在体单向肠灌流模型研究小檗碱及其在复方配伍环境中的大鼠肠吸收特性，药学学报[J]，2012，47(2)：233-238.]。有文献报道小檗碱的口服生物利用度小于5％[Zuo，F.，Nakamura，N.，Akao，T.，Hattori，M.，2006.Pharmacokinetics of berberine and its main metabolites in conventional and pseudo germ-free rats determined by liquid chromatography/ion trap mass spectrometry.Drug.Metab.Dispos.34，2064-2072.]，这直接导致小檗碱的相关临床用途受到很大的限制。 

磷脂复合物最早是由意大利学者在研究脂质体时意外发现的一种新的载药系统。其可有效改变母体药物的理化性质，提升药物的脂溶性，增加其药物透过细胞膜的能力，促进药物的吸收，提高生物利用度。已成功被制备成磷脂复合物的包括水飞蓟宾、姜黄素、苦参素和黄岑苷等中药活性成分，且体内药动学研究证实磷脂复合物可有效促进药物的吸收，提高血药浓度和口服生物利用度。[刘安昌，赵丽霞，翟光喜等，姜黄素磷脂复合物的制备及其形成机制研究，中国中药杂志[J]，2008，33(17)：2112-2117.]另 外，也已经有文献报道将小檗碱和大豆卵磷脂在一定条件下反应后可成功制备盐酸小檗碱磷脂复合物，并有效提高了药物的脂溶性[左巨波，尚京川.盐酸小檗碱磷脂复合物的制备和理化性质研究.中国新药杂志[J]，2009；18(14)：1372-1376.]。但制备成盐酸小檗碱磷脂复合物后随之带来的还有水溶性的下降，溶出速率的变慢，而且复合物非常的粘稠，流动性极差，限制了实际的工业化生产，以及开发成其他制剂的前景。因此，在制备成磷脂复合物以后有必要寻找一些能有效改善复合物的水溶性、溶出度以及流动性的相关技术。 

固体分散体是提高药物溶出的有效方法之一，通过使用水溶性的载体材料，使药物高度分散在其中，增加与溶出介质的有效接触面积，从而可达到增加溶解度和溶出度，促进吸收的作用。 

维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)是一种两亲性的非离子型表面活性剂，具有乳化增溶作用，可将其作为固体分散体的载体，促进药物的溶解，加快溶出，从而提高药物吸收。有文献报道，以TPGS为载体制成的呋塞米固体分散体有效增加了原药的溶解度和溶出度[Sang-Chul S.，Jin K.Physicochemical characterization of solid dispersion of furosemide with TPGS.Int J Pharm[J].2003；251：79-84.]。近年来，TPGS最受关注的应用在于其抑制P-糖蛋白的作用，体外Caco-2细胞研究中发现转运受P-糖蛋白阻滞的药物如紫杉醇、秋水仙碱等与TPGS合用后，都明显减少了细胞的外排[Manthena V.S.V.，Ramesh P.Enhanced oral paclitaxel absorption with vitamin E-TPGS：Effect on solubility and permeability in vitro，in situ and in vivo.Eur J Pharm Sci[J].2005；25：445-453.]。 

TPGS作为药用辅料的安全性也有一定的保证，Eastman公司的研究人员发现，成年大鼠口服TPGS维生素E琥珀酸酯和聚乙二醇1000的LD₅₀值均超过7g/kg。国外TPGS作为药用辅料已有产品成功上市，如GEN-ERASE^TM(安普那韦)口服液和胶囊。而且TPGS在体内可生物降解，比一般的非离子表面活性剂更安全。 

因此，以TPGS为固体分散体的载体材料可提高复合物的溶解度、溶出度，还可抑制药物的外排作用，具有很大的意义。但TPGS在实际应用中有一定的局限。由于TPGS为较软的蜡状物，以其为载体材料制备所得的固体分散体的流动性非常差，在实际的工业化大生产中有很大的限制。虽然已有一些文献报道将TPGS与PVPVA或Poloxamer等同时作为固体分散体的载体予以改善流动性，但效果并不佳。[Sandrien J.，Sophie N.，Hector N.，et al.Formulation and characterization of ternary solid dispersions made up of Itraconazole and two excipients，TPGS 1000 and PVPVA 64，that were selected based on a  supersaturation screening study.Eur J Pharm Biopharm.2008，69：158-166.]。因此，开发一种新的技术以提高TPGS作为固体分散体载体的流动性显得极为必要。 

二氧化硅是一种化学性质稳定的材料，为白色固体或粉末状，质轻、松软、多孔、有较大的比表面积，吸附性强，可将药物等吸附于其表面之上，或者吸附到孔隙中，起到保护药物免受外界条件影响，从而提高药物稳定性的作用。由于较大的比表面积，有利于分散药物，增大药物的溶出表面积，加快溶出。另外，二氧化硅在药剂学中还通常被用作助流剂以提高粒子的流动性，便于工业化大生产。 

因此，以二氧化硅与TPGS共同作为固体分散体的载体材料，不但可以分散磷脂复合物，加快溶出，而且可以通过将磷脂复合物、TPGS包覆在二氧化硅的表面或吸附在孔隙中，形成疏松的结构，有效提高固体分散体的机械流动性。另一方面，本发明在制备研究过程中比较了几种不同性能的二氧化硅，意外发现美国GRACE的 

具有改善固体分散体稳定性的作用。美国GRACE的 

是一种性能良好的医用、食品级的内部多孔的二氧化硅材料，它的平均粒径仅为3μm，吸附量可以达到280g/100g，孔隙率1.6ml/g，pH值接近人体的pH，为6.5，适用于在药物中作为载体。 

本发明中磷脂复合物的制备方法为溶剂法，而固体分散体的制备方法也可以为溶剂法。因此为提高工业化生产的简便和效率，直接采用一步法制备磷脂复合物的固体分散体，即以溶剂法制备磷脂复合物后直接加入固体分散体的载体材料，搅拌溶解、混合均匀后，再以溶剂-冷冻干燥法、或溶剂-减压干燥法，又或者是喷雾干燥法等易于实现工业化大生产的方法制备固体分散体。溶剂-冷冻干燥法的具体过程为：将反应后的混合液置于-20℃的冰箱预冻12h，迅速转移入冷冻干燥机内，真空条件下冷冻干燥48h。溶剂-减压干燥法为：将反应结束的混合液置于旋转蒸发仪上，40℃下减压蒸发去除反应溶剂，残留物在室温下继续减压干燥过夜。溶剂-喷雾干燥法利用高压泵，以70～200大气压的压力，将混合液通过雾化器(喷枪)，聚化成10～200μm的雾状微粒与热空气直接接触，进行热交换，短时间完成干燥，迅速又简便。 

综上所述，将小檗碱制成磷脂复合物后可以提高药物的脂溶性，增加透膜能力，促进吸收；进一步制成以TPGS和二氧化硅为载体的固体分散体不但可以增加药物溶解度，加快药物的溶出，且能抑制P-糖蛋白的外排，促进药物吸收；二氧化硅又可以提高固体分散体的稳定性，保证产品质量，更可以很大程度地提升磷脂复合物固体分散体的流动性，有望制成其它制剂，且制备方法简便，可操作性强，易于实现工业化大生产。 

经文献调研，目前仅有将盐酸小檗碱制成磷脂复合物的报道，但尚未发现有将小檗碱制成磷脂复合物固体分散体以提高生物利用度的报道。虽有以PVP或PEG为载体材料制备其他磷脂复合物固体分散体的报道，但制得的固体分散体流动性差，工业化前景小。且以既具有抑制P-糖蛋白外排作用又具有载体分散功能的TPGS并联合分散功能极其良好的二氧化硅共为固体分散载体材料制备磷脂复合物固体分散体的技术尚未见报道。 

发明内容

为了解决小檗碱的体内吸收和生物利用度差，并结合改善产品的稳定性、流动性，提升工业化大生产的前景，本发明提供了一种小檗碱磷脂复合物固体分散体及其制备方法。 

本发明解决上述问题所采用的技术方案为： 

一种小檗碱磷脂复合物固体分散体，其特征在于由小檗碱、磷脂、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯和二氧化硅组成。 

其中，小檗碱和磷脂的重量比为1∶2～1∶8；小檗碱和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1∶1～1∶5；二氧化硅占固体分散体中的重量≤10％。 

其中，所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂中的一种或几种的混合物。 

其中，所述的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯为TPGS 200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000中的一种或几种的混合物。 

其中，所述的二氧化硅是美国GRACE的 

一种小檗碱磷脂复合物固体分散体的制备方法，其特征在于包括下述工艺步骤： 

将小檗碱和磷脂溶于无水乙醇中，40℃下磁力搅拌反应2h；加入维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，搅拌；加入二氧化硅，搅拌，干燥，即得小檗碱磷脂复合物固体分散体。 

本发明提供的小檗碱磷脂复合物固体分散体具有以下优点：1)小檗碱与磷脂形成复合物，有效增加小檗碱的脂溶性，可提高透膜性能，促进药物吸收。2)以TPGS为载体，将小檗碱磷脂复合物进一步制成固体分散体，高度分散了复合物，有效增加小檗碱磷脂复合物与溶出介质的接触面积，TPGS也可以通过形成胶束包裹磷脂复合物，从而提高溶解度和溶出速度。3)固体分散体的载体TPGS具有P-gp的外排抑制作用，可以有效的抑制P-gp对小檗碱的外排作用，促进药物的吸收，提高生物利用度。4)同时以二氧化硅为载体材料制备所得的磷脂复合物固体分散体具有较好的机械流动性，利于工业化大生产。5)美国GRACE的 型号的二氧化硅可有效提高产品 的稳定性和质量。6)该小檗碱磷脂复合物的制备工艺简单，操作简便，易于实现工业化大生产。 

附图说明

图1：差示扫描量热分析图：小檗碱(A)、磷脂(B)、小檗碱与磷脂的物理混合物(1∶5，w/w)(C)、小檗碱磷脂复合物(1∶5，w/w)(D) 

图2：扫描电子显微镜图：小檗碱(A)、磷脂和TPGS、二氧化硅的混合物(B)、小檗碱和磷脂、TPGS、二氧化硅的物理混合物(1∶5∶5，w/w/w，10％SiO2，w/w)(C)、小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶5，w/w/w，10％SiO₂，w/w)(D) 

图3：小檗碱磷脂复合物(BPC)、小檗碱磷脂复合物与TPGS、二氧化硅的物理混合物(PM)(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)、小檗碱磷脂复合物固体分散体(BPC-SD，1∶5∶1，1∶5∶3，1∶5∶5，w/w/w，10％SiO₂，w/w)的累积溶出曲线(n＝6)

下面再以实施例对本发明加以进一步的说明，同时结合实验例加以说明并验证本发明及其优势。 

具体实施方案

实施例1 

处方：小檗碱50mg，磷脂100mg，TPGS 50mg，二氧化硅6mg 

制备工艺：取小檗碱50mg，磷脂100mg，溶于100ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 50mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入6mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。采用溶剂-减压干燥法，将反应结束的混合液置于旋转蒸发仪上，40℃下减压蒸发去除反应溶剂，残留物在室温下继续减压干燥过夜。最终得质量比为1∶2∶1的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有3％的二氧化硅。 

实施例2 

处方：小檗碱50mg，磷脂150mg，TPGS 100mg，二氧化硅15mg 

制备工艺：取小檗碱50mg，磷脂150mg，溶于100ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 100mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入15mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。同样采用溶剂-减压干燥法去除反应溶剂乙醇。最终得到质量比为1∶3∶2的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有5％的二氧化硅。 

实施例3 

处方：小檗碱50mg，磷脂200mg，TPGS 250mg，二氧化硅25.0mg 

制备工艺：取小檗碱50mg，磷脂200mg，溶于100ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 250mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入25.0mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。采用溶剂-冷冻干燥法，将反应后的混合液置于-20℃的冰箱预冻12h，迅速转移入冷冻干燥机内，真空条件下冷冻干燥48h。最终得到质量比为1∶4∶5的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有5％的二氧化硅。 

实施例4 

处方：小檗碱50mg，磷脂250mg，TPGS 150mg，二氧化硅31.5mg 

制备工艺：取小檗碱50mg，磷脂250mg，溶于100ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 150mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入31.5mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。同样采用溶剂-冷冻干燥法去除反应溶剂乙醇。最终得到质量比为1∶5∶3的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有7％的二氧化硅。 

实施例5 

处方：小檗碱25mg，磷脂150mg，TPGS 100mg，二氧化硅24.8mg 

制备工艺：取小檗碱25mg，磷脂150mg，溶于50ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 100mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入24.8mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。采用溶剂-喷雾干燥法，以70～200大气压的压力，将混合液通过雾化器(喷枪)，聚化成10～200μm的雾状微粒与热空气直接接触，进行热交换，短时间完成干燥，最终得到质量比为1∶6∶4的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有9％的二氧化硅。 

实施例6 

处方：小檗碱25mg，磷脂175mg，TPGS 125mg，二氧化硅32.5mg 

制备工艺：取小檗碱25mg，磷脂175mg，溶于50ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回流反应2h后，加入TPGS 125mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入32.5mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。同样采用溶剂-喷雾干燥法，最终得到质量比为1∶7∶5的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有10％的二氧化硅。 

实施例7 

处方：小檗碱25mg，磷脂200mg，TPGS 125mg，二氧化硅35.0mg 

制备工艺：取小檗碱25mg，磷脂200mg，溶于50ml的乙醇中，40℃下磁力搅拌回 流反应2h后，加入TPGS 125mg，溶于乙醇中，搅拌溶解均匀后，加入35.0mg的二氧化硅，搅拌30min，使充分接触，混合均一。同样采用溶剂-喷雾干燥法，得到质量比为1∶8∶5的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其中含有10％的二氧化硅。 

实验例1 

DSC验证小檗碱磷脂复合物的形成：称取小檗碱原料药、磷脂、物理混合物和磷脂复合物(都是1∶5的重量比，药物含量与原料药的取量相同)适量，以10℃/min的升温速率加热，温度范围50～250℃，氮气保护下进行DS℃分析。结果如图1所示。从图中可以看出，磷脂仅在221.3℃有一个熔融峰，在小檗碱的DSC图中，78.0和126.5℃两个峰为小檗碱的失水峰，其熔融峰为192.5℃，且发生了晶型的转化，新的晶型在205.5℃生成。复合物的图谱中小檗碱的药物峰消失，仅剩下一个新的在211.4℃的熔融峰，该峰较单纯的磷脂的熔融峰温度降低一些，可能是因为磷脂的极性端与小檗碱复合后，其疏水链的有序性降低，导致熔融温度降低。而药物熔融峰的消失表明药物可能以无定形的形式分散在了磷脂中。物理混合物的图谱与复合物相似，小檗碱的熔融峰也消失了，这可能是因为在温度升高的过程中，磷脂逐渐液化，成为小檗碱分散溶解的一个良溶媒，使得小檗碱在高温下高度分散甚至溶散在磷脂中，导致了药物峰的消失。总而言之，在复合物中，小檗碱以区别于原料药晶体的形式分散在磷脂中，形成了磷脂复合物。 

实验例2 

小檗碱磷脂复合物溶解度的测定：称取过量的小檗碱原料药、小檗碱磷脂的物理混合物(1∶5，w/w)和小檗碱磷脂复合物(1∶5，w/w)，加入到适量的水及正辛醇中，每个样品在每种介质中制备3份，置于恒温振荡器内，37±1℃下，100rpm震荡24h，静置数小时后，样品转移入离心管内，3000rpm离心10min，取上清液过0.45um微孔滤膜，以乙醇为稀释剂和空白对照，在351nm处测定紫外吸光度，以外标法计算浓度，并算出小檗碱原料药、物理混合物(1∶5，w/w)和小檗碱磷脂复合物(1∶5，w/w)的溶解度。结果如表1所示。 

表1水、正辛醇中的溶解度测定(n＝3，mean±SD) 

由表中数据可知，将小檗碱制成磷脂复合物以后显著提升了小檗碱原料药在正辛醇中的溶解度，即亲脂性大大提升了，且增加亲脂性的效果显著优于单纯的物理混合物，也间接证明了制备成磷脂复合物较单纯物理混合物的优异性。但是制成磷脂复合物之后，水溶性比原药有所降低，这可能导致在体内溶出过慢，生物利用度的降低，可见后续制备成固体分散体以增加溶解度和溶出速度的设计是完全有必要性的。 

实验例3 

小檗碱磷脂复合物油水分配系数(P_o/w)的测定：P_o/w的测定采用正辛醇-水经典摇瓶法。(正辛醇溶解度参数与生物膜的溶解度21.07(J/cm³)^1/2一致) 

精密称定小檗碱原料药及复合物(1∶5，w/w)适量，分别用正辛醇饱和的水及水饱和的正辛醇溶解和稀释，配置成500ug/mL的小檗碱水溶液(供试液1)和500ug/ml的复合物的正辛醇溶液(供试液2)。取5mL供试液1与等体积的水饱和的正辛醇混合，另取5mL的供试液2与等体积的正辛醇饱和的水混合，分别置于锥形瓶中(每个样品制备3份)，封口，置于恒温振荡器内，37±0.1℃下，100rpm震荡24h，静置数小时后，都取水相3ml移入离心管内，3000rpm离心10min，取上清液过0.45um微孔滤膜，取一定体积滤液用乙醇适当稀释后，以乙醇为空白，在351nm处紫外检测吸光度，外标法计算水相中的药物浓度C_w。将供试液1、2中的浓度定为C_总，则分配后油相中的浓度为C_总-C_w，分配系数的计算公式分别为： 

P_o/w＝(C_总-C_w)/C_w

C_总为分配前供试液1或2中的药物浓度，C_w为分配后水相中的药物浓度。 

结果测得小檗碱原料药的P_o/w为0.25±0.07，而小檗碱磷脂复合物的油水分配系数为8.75±1.96，可见制成磷脂复合物以后，油水分配系数显著提高，即脂溶性大大提高，可以有效增强药物透过生物膜的能力，从而促进吸收。 

实验例4 

扫描电子显微镜观察固体分散体的形成：取小檗碱原料药；磷脂、TPGS和二氧化硅的物理混合物；小檗碱和磷脂、TPGS、二氧化硅的物理混合物(1∶5∶5，w/w/w，10％SiO₂，w/w)；小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶5，w/w/w，10％SiO₂，w/w)进行扫描电子显微镜观测，将样品放大5000倍，观测样品的表面形态的变化。结果如图2所示。从图中可以发现小檗碱原料药是以棱柱状的晶体形式存在的，磷脂和载体都是无定形的，在小檗碱与磷脂、混合载体的物理混合物中仍然可以发现小檗碱的晶状结构，但 是在小檗碱磷脂复合物的固体分散体中，小檗碱的棱柱状晶体结构消失，即小檗碱以无定形的形式均一的分散在固体分散体的载体材料中。因此在固体分散体中的小檗碱无需打破晶格能，就可以快速的溶解出，使溶出加快，溶解度增大。 

实验例5 

固体分散体溶解度测定：称取过量的小檗碱原料药(Ber)、1∶5(w/w)的磷脂复合物(BPC)和不同TPGS比例的小檗碱磷脂复合物固体分散体(BPC-SD，分别为1∶5∶1、1∶5∶3、1∶5∶5，w/w/w，都为10％SiO₂，w/w)加入到适量的水中，置于恒温振荡器内，37±0.1℃下，100rpm震荡24h，静置数小时后，样品转移入离心管内，3000rpm离心10min，取上清液过0.45um微孔滤膜，滤液适当稀释后，紫外检测药物的含量。计算溶解度，结果如表2所示。可见固体分散体中的小檗碱明显比磷脂复合物中的溶解度要高，且比小檗碱原料药还要高，即TPGS和二氧化硅为载体的固体分散体有效提高了药物的溶解度，而且随着TPGS比例的增加，其溶解度越高。 

表2Ber、BPC和BPC-SD在水中的溶解度(n＝3，mean±SD) 

实验例6 

小檗碱磷脂复合物固体分散体溶出度的测定：将脱气的1000ml去离子水加入到溶出杯内，预热30min后，取含有25mgBer量的不同处方的BPC-SD、物理混合物、BPC置于转篮内，以120r/min，37±0.1℃下开始计时考察，分别于5、10、20、30、45、60、90、120min时取样5ml，并迅速补入5mL同温的溶出介质，样品用0.45um的微孔滤膜过滤，续滤液用水稀释后紫外检测样品的浓度。制作药物的累积溶出曲线，结果如图3所示。可见将小檗碱磷脂复合物制备成固体分散体后可显著地提升复合物中小檗碱的溶出速度，在45min内可溶出70％以上，120min可几乎全部溶出。而且固体分散体加速溶出的效果比物理混合物显著要好，即简单的将复合物与TPGS、二氧化硅混合在一起 并不能达到显著加快溶出的效果。另一方面，在二氧化硅含量都为10％时，固体分散体中TPGS的比例越高，溶出越快。即制成固体分散体后可显著加快药物的溶出。克服磷脂复合物溶出过慢的缺陷。 

实验例7 

不同二氧化硅对固体分散体稳定性比较：取单纯以TPGS为载体材料的固体分散体(1∶5∶3，w/w/w)、含有不同类型的二氧化硅的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)置于药品稳定性试验箱内，由于磷脂复合物对温度较为敏感，TPGS的熔点仅为39℃，根据《中国药典》2010年版中稳定性指导原则，设定温度25±2℃，相对湿度60±10％，光照4500lx±500lx。分别在第1、2、3、6个月末取部分固体分散体，观察样品性状，并检测与磷脂复合的小檗碱的含量。 

磷脂在外界条件的影响下可能发生氧化降解，导致磷脂与小檗碱之间的作用力断开，小檗碱以游离的形式析出来，直接导致了复合物中小檗碱含量的降低，影响产品的脂溶性和透膜能力。因此在考察稳定性实验时，应重点检测复合物中小檗碱含量的变化。由于小檗碱和二氧化硅都不溶于氯仿，而小檗碱磷脂复合物可溶于氯仿，因此将取出的固体分散体样品先溶于10ml氯仿中，使小檗碱磷脂复合物充分溶解于其中，而游离的小檗碱和不溶的二氧化硅沉淀下来，过0.45μm滤膜，以氯仿洗涤沉淀3次，每次1ml，洗涤液与滤液合并，摇匀，以紫外分光光度法，氯仿为空白，在最大吸收波长351nm处测定紫外吸光度(在该波长处TPGS和磷脂对小檗碱的检测无干扰)。以外标法计算与磷脂复合的小檗碱的含量。 

考察的二氧化硅类型分别为：国产微粉硅胶(安徽山河)、日本德山的FM-30、瓦克二氧化硅T40、美国GRACE的 

德国德固赛的 

结果见表3～表7所示。 

表3不含有SiO₂的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w)稳定性研究 

表4二氧化硅为国产微粉硅胶(安徽山河)制备的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)稳定性研究 

表5二氧化硅为日本德山的FM-30制备的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)稳定性研究 

表6二氧化硅为瓦克二氧化硅T40制备的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)稳定性研究 

表7二氧化硅为美国GRACE的 

制备的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)稳定性研究 

表8二氧化硅为德国德固赛的 

制备的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶3，w/w/w，10％SiO₂，w/w)稳定性研究 

根据表中数据可知单纯以TPGS为载体材料制备的固体分散体受到温度、湿度和光照的影响较大，发生了软化、药物分布不均一，有细小颗粒物析出，与磷脂复合的小檗碱含量降低的变化。而分别含有国产微粉硅胶(安徽山河)、日本德山的FM-30、瓦克二氧化硅T40、德国德固赛的 

这四种二氧化硅的固体分散体也受到外界条件一定的影响，发生粉末颜色变深，有深黄色粉末、颗粒物析出，与磷脂复合的小檗碱含量降低。这主要可能是因为，这四种二氧化硅表面性能不佳或孔隙率较低，导致不能充分的将复合物吸附入孔隙中以保护磷脂，又或者是复合物与其吸附性能的方面的差异，因而在外界条件的影响下，磷脂被氧化或降解，导致磷脂与小檗碱之间的作用 力断开，小檗碱以游离的形式析出来，因此发现的细小的颗粒物可能为析出的小檗碱，这也直接导致了复合物中小檗碱含量的降低。以美国GRACE的 

代替其他类型的二氧化硅，与TPGS为混合载体制备所得的固体分散体受到温度、湿度和光照的影响极小，6个月内，几乎没有游离的小檗碱析出，即小檗碱与磷脂的复合量几乎没有变化。这种差异性主要是因为美国GRACE的 表面性能良好，孔隙率极高，使得大部分磷脂复合物可以被吸附进入孔隙内，受到保护，相对而言不易受外界条件的影响而被氧化降解，因此可以保证与小檗碱之间的作用力不受破坏，使得磷脂复合物更为稳定，小檗碱不会以游离的形式析出。因而，美国GRACE的 

在保证固体分散体稳定性方面是最佳的选择。 

实验例8 

小檗碱磷脂复合物固体分散体流动性测定：以注入法，用粉末流动性测试仪测定固体分散体的流动性。测定粉体层的高度和圆盘半径，计算tanθ＝高度/半径，θ角即休止角越小说明摩擦力越小，流动性越好，一般认为休止角≤30°时流动性好，休止角≤40°时可以满足生产过程中流动性的需求，测得结果如下表8所示。 

可见以TPGS和美国GRACE的 

型号的二氧化硅为载体制备所得的固体分散体的流动性比单纯以TPGS为载体材料制备的固体分散体的流动性都要好，且二氧化硅的含量越高，流动性越好，10％的二氧化硅时，制备的固体分散体的流动性最佳，休止角小于30°。而含有7％、9％的二氧化硅的BPC-SD的休止角小于40°，也可以达到工业化生产的要求。可见二氧化硅的加入使得固体分散体的流动性得到很大的提升，利于工业化的生产。 

表9流动性测定结果 

实验例9 

小檗碱磷脂复合物固体分散体大鼠在体单向肠灌流的研究：将雄性SD大鼠分成4组，每组6只，实验前12h禁食，自由饮水。第一组在大鼠十二指肠在体单向肠灌流50μg/ml的小檗碱原料药，第二组在十二指肠灌流含小檗碱50ug/ml的小檗碱磷脂复合物(1∶5)溶液，第三组在十二指肠灌流含小檗碱50ug/ml的小檗碱磷脂复合物和150ug/ml维拉帕米的肠灌流液，第四组在十二指肠灌流含小檗碱50ug/ml的小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶1)肠灌流液，紫外检测药物被吸收的量，计算吸收速率常数和有效通透系数。结果见表9所示。可见，与原料药相比，小檗碱磷脂复合物可以显著性的增加小檗碱原料药的吸收，K_a和P_eff都提升了接近2倍，这主要是因为小檗碱磷脂复合物有效提高了药物的细胞膜通透能力，帮助药物被动扩散进入小肠上皮细胞，促进吸收。另一方面，维拉帕米显著性促进小檗碱磷脂复合物的吸收，可见小檗碱磷脂复合物仍然为P-糖蛋白的底物，而TPGS为载体的固体分散体的K_a和P_eff分别为0.0584±0.0027min^-1，0.00587±0.00031cm/min，比单一的磷脂复合物的K_a和P_eff进一步提升，表明固体分散体促进磷脂复合物在十二指肠的吸收。因此可以总结出TPGS可以在一定程度上抑制P-糖蛋白的外排作用，从而促进药物的吸收。 

表10小檗碱、小檗碱磷脂复合物、小檗碱磷脂复合物与维拉帕米、小檗碱磷脂复合物固体分散体的肠灌流液在十二指肠的吸收参数(n＝6，mean±SD) 

^*代表与Ber组的吸收参数有显著性差异，p＞0.05。 

实验例10 

小檗碱磷脂复合物固体分散体生物利用度研究： 

实验动物：雄性SD大鼠12只，体重200-300g。 

给药方案：将大鼠随机分为两组，禁食12h后两组分别灌胃给予小檗碱和小檗碱磷脂复合物固体分散体(1∶5∶5，w/w/w，10％SiO₂，w/w)，给药剂量分别为相当于小檗碱50mg/kg。 

样品采集：于给药前及服药后15、30、45、60、75、90、120、180、240、300、360、420min由眼眶取血0.5ml，置于肝素化的离心管内，4000rpm离心10min，取血浆，于-20℃冰箱内保存至分析。 

血浆样品处理：取0.2ml血浆样品，置于离心管中，加入0.4ml乙腈，涡旋振荡2min，12000rpm离心10min，取上清液0.4ml于另一离心管中，50℃水浴中氮气吹干残留物加0.2ml流动相复溶，涡旋振荡1min，12000rpm离心10min，取20μl上清液进HPLC分析。 

色谱条件：色谱柱：Hypersil ODS(150mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05mol/l磷酸氢二钾＝60∶40(v/v)；检测波长：345nm；流速：1ml/min；柱温：25℃；进样量：20μl。 

方法评价：以小檗碱考察线性关系，小檗碱的线性范围：0.1～5μg/ml(r＝0.9991)。专属性考察表明血浆中的内源性物质并不干扰检测结果。该方法小檗碱低、中、高三种浓度的回收率分别为93.89％，97.32％，95.53％，提取回收率分别为94.77％，96.84％，95.39％，日内、日间RSD分别为2.7％，1.9％，2.4％；2.9％，2.4％，1.8％。 

利用3p97药动学软件处理测得的药-时数据，计算相应的药动学参数t_max、c_max及AUC。以小檗碱原料药为参比计算小檗碱磷脂复合物固体分散体的相对生物利用度Fr(Fr＝AUC受试制剂/AUC参比制剂×100％)。结果见表11所示。 

表11小檗碱、小檗碱磷脂复合物固体分散体的药动学及生物利用度数据(n＝6，mean±SD) 

从表中的数据可以看出，固体分散体的吸收峰时间略提前，峰浓度为小檗碱原料药的4.04倍，AUC也提高，相对生物利用度为389.24±6.03％，可见将小檗碱制成小檗碱磷脂复合物固体分散体后大大提高了生物利用度，达到了促进药物吸收的目的。 

Claims (6)

1.一种小檗碱磷脂复合物固体分散体，其特征在于含有小檗碱、磷脂、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯和二氧化硅。

2.根据权利要求1所述的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其特征在于所述小檗碱和磷脂的重量比为1∶2～1∶8；小檗碱和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比为1∶1～1∶5；二氧化硅占固体分散体中的重量≤10％。

3.根据权利要求1或2所述的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其特征在于其所述的磷脂为天然磷脂、合成磷脂中的一种或几种的混合物。

4.根据权利要求1或2所述的小檗碱磷脂复合物固体分散体，其特征在于其所述的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯为TPGS 200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000中的一种或几种的混合物。

5.根据权利要求1或2所述的二氧化硅是美国GRACE的

6.权利要求1或2所述的小檗碱磷脂复合物固体分散体的制备方法，其特征在于包括下述工艺步骤：

将小檗碱和磷脂溶于无水乙醇中，40℃下磁力搅拌反应2h；加入维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，搅拌；加入二氧化硅，搅拌，干燥，即得小檗碱磷脂复合物固体分散体。

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