CN102573871B

CN102573871B - 用于消炎消肿止痛的中草药组合物、制备方法及其应用

Info

Publication number: CN102573871B
Application number: CN200980161055.8A
Authority: CN
Inventors: 吴天赏; 周泰廷
Original assignee: Uni President Biotech Co Ltd
Current assignee: Uni President Biotech Co Ltd
Priority date: 2009-09-01
Filing date: 2009-09-01
Publication date: 2015-05-20
Anticipated expiration: 2029-09-01
Also published as: EP2474314A4; WO2011026267A1; EP2474314B1; CN102573871A; JP2013503114A; KR20120084723A; US20120164249A1; JP6039421B2; KR101445010B1; EP2474314A1; US8632828B2

Abstract

用于消炎消肿止痛的中草药组合物，该组合物含有第一类中药材和第二类中药材。第一类中药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄。第二类中药材为选自姜、乳香和没药中的一种、两种或三种。所述药物组合物的制备方法包括以下步骤：将所述第一类和第二类中药材与有机溶剂放入容器内，加热，过滤，然后将滤液浓缩成为浸膏。

Description

用于消炎消肿止痛的中草药组合物、制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及一种用于消炎消肿止痛的中草药组合物，更具体地，涉及一种用于消炎消肿止痛的中草药提取物、所述中草药提取物的制备方法及其应用。

背景技术

由于现代人的生活越来越紧张、忙碌，并且没有太多时间运动，再加上长期站着或坐着的结果。因此，现代人常常有许多文明病，例如神经或筋骨发炎、肌肉酸痛等症状。如果疏于治疗，则造成恶性循环、气血不顺。

自古以来，中国人将中草药应用于疾病治疗已有几千年经验，一直都以固本抗邪的方式治疗外来的疾病，并解决内在的发炎或酸痛问题，而使中草药得以延续至今。

目前，中草药业者为了迎合现代人的方便需求，纷纷研发出中草药贴布。该中草药贴布具有外用治疗方便性，只须贴敷在身体酸痛或不适的位置的皮肤上，通过使该中草药贴布的成分渗入人体皮肤内，慢慢将药效发挥出来。

万应膏自古以来都被用于治疗身体酸痛和不适等症状，因此在功效上已被长期认可，其配方组成为中草药中的川乌、木鳖子、草乌、生地黄、白蔹、白芨、肉桂、白芷、当归、赤芍、羌活、苦参、乌药、甘草、独活、元参、大黄等17种药材。然而，其中部分药材，例如川乌、木鳖子和草乌，目前已被证实具有毒性和皮肤刺激性，因此使用后容易造成皮肤不适，如下表1所示。

表1药材：川乌、木鳖子和草乌的药性及缺点

此外，古方万应膏多以麻油进行药材成分提取，容易因温度过高破坏药材内的成分，或有效成分提取不完整，质量管理不易以及成型时加入大量氧化锌而造成重金属残留的问题等。

因此，需要提供一种用于消炎消肿止痛的中草药组合物，以解决上述问题。

发明内容

本发明提供了一种用于消炎消肿止痛的中草药组合物，所述中草药组合物包括第一类药材和第二类药材；所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄；所述第二类药材为选自由姜、乳香和没药所构成的组中一种、两种或三种。

本发明还提供了一种中草药提取物，其中，所述提取物由包括下列步骤的制备过程制得：提供第一类药材和第二类药材，其中，所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，所述第一类药材为基础药材，且所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，所述第二类药材为添加药材；将所述第一和第二类药材与有机溶剂放入容器内，使所述第一和第二类药材与所述有机溶剂的重量百分比为1∶N，以形成第一混合液，其中N为介于3与12之间的数值；将所述第一混合液加热至第一预定温度并提取第一预定时间，以进行第1次提取；以及趁热过滤所述第一混合液，取第1次提取的滤液。

本发明还提供了一种中草药提取物的制备方法，其中，所述制备方法包括下列步骤：提供第一类药材和第二类药材，其中，所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，所述第一类药材为基础药材，且所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，所述第二类药材为添加药材；将所述第一和第二类药材与有机溶剂放入容器内，使所述中草药组合物与所述有机溶剂的重量百分比为1∶N，以形成第一混合液，其中N为介于3与12之间的数值；将所述第一混合液加热至第一预定温度并提取第一预定时间，以进行第1次提取；以及趁热过滤所述第一混合液，取第1次提取的滤液。

本发明还提供了所述中草药组合物的应用，例如，将所述中草药组合物用于中草药贴布、中草药药膏和内服制剂。

本发明提供的用于消炎消肿止痛的中草药组合物并不包含川乌、木鳖子、草乌、生地黄、白蔹、苦参和元参。因此，本发明的用于消炎消肿止痛的中草药组合物与万应膏的固有配方完全不同。而且，由于川乌、木鳖子和草乌已被证实具有毒性和皮肤刺激性，因此，本发明的中草药组合物不会有万应膏的固有配方的缺点。另外，与万应膏的固有配方相比，本发明的中草药组合物更包含了添加药材(如姜、乳香和没药)，以增加其疗效。

本发明选择对皮肤和人体无刺激、过敏性的有效中草药的处方组成；特殊的提取、制备方法及以动物试验法验证消炎消肿止痛的功效，与一般传统的万应膏和市售的中药贴布不同。下文将结合附图对本发明作详细说明。

附图说明

图1为表示本发明的第一实施方式的制备方法的流程图；

图2为表示本发明的第二实施方式的制备方法的流程图；

图3为表示具有本发明提供的中草药组合物的中草药贴布的立体示意图；

图4为表示具有本发明提供的中草药组合物的中草药喷剂的剖面示意图；

图5为表示具有本发明提供的中草药组合物的中草药药膏的立体示意图；

图6A至图6L为各种药材的HPLC分析的指纹图谱；

图7为本发明的中草药组合物的HPLC分析的指纹图谱；

图8为表示本发明的药材成分的浸膏透皮试验的HPLC分析结果的示意图；

图9表示用醋酸扭体法测定的小白鼠扭曲平均值；

图10表示用福尔马林实验法测定的小白鼠的舔足时间；

图11表示本发明的中草药贴布消炎消肿实验的结果。

具体实施方式

本发明提供了一种用于消炎消肿止痛的中草药组合物，所述中草药组合物包括第一类药材和第二类药材。所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药(例如赤芍)、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，且所述第一类药材为基础药材。所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，且所述第二类药材为添加药材。具体地，本发明的中草药组合物包括下表2的7种排列组合的药材。

表2

当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种时，则所述中草药组合物包含11味药材，每一味药材的重量百分比在9.09％±5％的范围内。当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的两种时，则所述中草药组合物包含12味药材，每一味药材的重量百分比在8.33％±5％的范围内。当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的三种时，则所述中草药组合物包含13味药材，每一味药材的重量百分比在7.69％±5％的范围内。

本发明的第一类药材为基础药材，而所述第二类药材为添加药材。表2的7种排列组合的药材，都可以获得本发明的疗效。在下文中，仅以第7种组合：中草药组合物包含有13味药材(也即白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄、姜、乳香和没药)为例进行说明，而其余6种组合也可以用类似的方式实施，不再赘述。

本发明的一种实施方式的用于消炎消肿止痛的中草药组合物的配方与万应膏的固有配方的比较如下表3所示。

表3

本发明的用于消炎消肿止痛的中草药组合物并不包含川乌、木鳖子、草乌、生地黄、白蔹、苦参和元参。因此，本发明的用于消炎消肿止痛的中草药组合物与万应膏的固有配方完全不同。而且，由于川乌、木鳖子和草乌已被证实具有毒性和皮肤刺激性，因此本发明的中草药组合物不会有万应膏的固有配方的缺点。另外，与万应膏的固有配方相比，本发明的中草药组合物更包含了添加药材(姜、乳香和没药)，以增加其疗效。

根据本发明的用于消炎消肿止痛的中草药组合物，其药材在文献中记载的功效如下表4所示。

表4

本发明的中草药提取物可以通过本发明的第一实施方式的制备方法制得。如图1所示，所述第一实施方式的制备方法包括下列步骤：在步骤100中，提供第一类药材和第二类药材，所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药(例如赤芍、白芍)、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，且所述第一类药材为基础药材；所述第二类药材为选自由姜(例如干姜、生姜)、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，且所述第二类药材为添加药材。在步骤102中，加入有机溶剂(例如甲醇、乙醇、丙酮、甲基乙基酮、煤油(石油醚)及己烷等中的一种或多种)，并将所述第一和第二类药材与所述有机溶剂放入第一容器(也即提取桶)内，使所述第一和第二类药材与所述有机溶剂的重量百分比为1∶N，以形成混合液，其中N为介于3与12之间的数值。优选情况下，N为8。在步骤104中，加热所述混合液至预定温度并提取预定时间，以进行提取，其中所述预定的温度介于30℃与100℃之间。当所述有机溶剂为乙醇(也即酒精)时，所述预定温度优选在介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。所述预定时间介于1与6小时之间。在步骤106中，趁热过滤所述混合液，取提取的滤液至第二容器(也即量杯)。在步骤108中，将提取的滤液浓缩至含水量为10-40重量％、所述有机溶剂的含量为3-30重量％的浸膏。优选情况下，将提取的滤液浓缩至含水量为10-20重量％、有机溶剂的含量为5-10重量％的浸膏。所述浸膏为中间产品，可以方便地运送和出售，以用于后续最终产品的制备中。在步骤110中，将提取的残渣从所述容器中移除。

本发明的中草药提取物也可以通过本发明的第二实施方式的制备方法制得。如图2所示，所述第二实施方式的制备方法包含下列步骤：在步骤200中，提供第一类药材和第二类药材，其中所述第一类药材包括白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，且所述第一类药材为基础药材；所述第二类药材为选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，且所述第二类药材为添加药材。在步骤202中，加入有机溶剂，并将所述第一和第二类药材与所述有机溶剂放入第一容器(也即提取桶)内，使所述第一和第二类药材与所述有机溶剂的重量百分比为1∶N，以形成第一混合液，其中N为介于3与12之间的数值。优选情况下，N为8。在步骤204中，将所述第一混合液加热至第一预定温度并提取第一预定时间，以进行第1次提取，其中所述第一预定温度介于30℃与100℃之间。当所述有机溶剂为乙醇时，所述第一预定温度优选在介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。所述第一预定时间介于1与6小时之间。在步骤206中，趁热过滤所述第一混合液，将第1次提取的滤液放入第二容器(也即量杯)。在步骤208中，保留第1次提取的残渣。在步骤210中，重新添加所述有机溶剂，使所述药材与所述有机溶剂的重量百分比回到1∶N，以形成第二混合液，其中N为介于3与12之间的数值。优选情况下，N为8。在步骤212中，将所述第二混合液加热至第二预定温度并提取第二预定时间，以进行第2次提取，其中所述第二预定温度介于30℃与100℃之间。当所述有机溶剂为乙醇时，所述第二预定温度介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。所述第二预定时间介于1与6小时之间。在步骤214中，趁热过滤所述第二混合液，取第2次提取的滤液。在步骤216中，混合第一次提取的滤液与第二次提取的滤液。在步骤218中，将所述混合滤液浓缩至含水量为10-40重量％、所述有机溶剂的含量为3-30重量％的浸膏。优选情况下，将混合滤液浓缩至含水量为10-20重量％、有机溶剂的含量为5-10重量％的浸膏。所述浸膏为中间产品，可以方便地运送和出售，以用于后续最终产品的制备中。在步骤220中，将第2次提取的残渣从所述容器中移除。

如图3所示，本发明的中草药提取物可以应用于中草药贴布300。所述中草药贴布300包括胶带层310和中草药药剂层320。所述中草药药剂层320位于所述胶带层310上。在本实施方式中，所述中草药药剂层含有稀释剂和本发明的中草药提取物的浸膏。所述中草药提取物的浸膏(中间产品)掺入所述稀释剂中，如此以形成所述中草药药剂层(最终产品)。所述稀释剂含有乙醇、水和水性黏胶。所述中草药贴布300具有中草药提取物的含量为50-3500毫克/14克(每片中草药贴布)。

如图4所示，本发明的中草药提取物可以应用于中草药喷剂。在本实施方式中，所述中草药喷剂400含有稀释剂和本发明的中草药提取物的浸膏。所述中草药提取物的浸膏(中间产品)掺入所述稀释剂中，如此以形成所述中草药喷剂(最终产品)。所述稀释剂包含乙醇、多醇类、水。所述中草药喷剂400具有中草药提取物的含量为10-500毫克/克。在另一个实施例中，所述中草药喷剂不须含有浓缩后的浸膏(中间产品)，而是含有浓缩前的提取滤液(也为中间产品)，如此减少了浓缩步骤，可以缩短制备的时间和降低制备的成本。

如图5所示，在本发明的这种实施方式中，中草药提取物可以应用于中草药药膏500，药膏又可以分为油膏、水性凝胶和乳膏。所述中草药药膏500含有稀释剂和本发明的中草药提取物的浸膏。所述中草药提取物的浸膏(中间产品)掺入所述稀释剂中，如此以形成所述中草药药膏(最终产品)。所述稀释剂中的油膏含有凡士林、白蜡油、非离子界面活性剂；水性凝胶则包含乙醇、水和非离子界面活性剂；乳膏则包含油脂、蜡和乳化剂。所述中草药药膏500具有中药提取物的含量均为10-500毫克/克。

而且，本发明的中草药提取物也可以应用于内服制剂，而内服制剂又可以分为散剂、丸剂和锭剂。在本实施例中，所述内服制剂含有稀释剂和本发明的中草药提取物的浸膏。所述中草药提取物的浸膏(中间产品)掺入所述稀释剂中，如此以形成所述内服制剂(最终产品)。散剂及丸剂的稀释剂含有淀粉和糖类(如糖或蜂蜜)；锭剂的稀释剂则主要含有结晶性纤维素。所述内服制剂具有中药提取物的含量为3-250毫克/克。

另外，上述中草药提取物含有下列9种主要指标成分：芍药苷(Paeoniflorin)、阿魏酸(Ferulic acid)、桂皮醛(Cinnamaldehyde)、甘草甜苷(Glycyrrhizin)、大黄酸(Rhein)、欧前胡素(Imperatorin)、蛇床子素(Osthol)、异欧前胡素(Isoimperatorin)和生姜酚(Gingerol)，其中，每1克所述中草药提取物中所含的指标成分的含量分别为：芍药苷(Paeoniflorin)为4.466-1.488毫克、阿魏酸(Ferulic acid)为0.382-0.127毫克、桂皮醛(Cinnamaldehyde)为2.159-0.720毫克、甘草甜苷(Glycyrrhizin)为9.677-3.226毫克、大黄酸(Rhein)为1.013-0.338毫克、欧前胡素(Imperatorin)为0.727-0.242毫克、蛇床子素(Osthol)为1.389-0.463毫克、异欧前胡素(Isoimperatorin)为0.709-0.236毫克和生姜酚(Gingerol)为0.144-0.432毫克。

以下通过测试例和测试数据对本发明作进一步说明。

测试例1

测试各药材提取浸膏对动物皮肤的刺激性：

将万应膏的固有配方和本发明的中草药组合物配方的各药材分别与浓度为95重量％的乙醇溶液以1∶8的重量比放入回流提取装置中，并在80℃下提取3小时，重复2次，收集2次提取液，然后分别进行过滤，并用减压浓缩机将过滤后的滤出液浓缩成浸膏。分别取25微升的浸膏以及阳性和阴性对照品给药于已剔除背毛的动物皮肤，经过24小时刺激后，观察并纪录贴后24、48和78小时后皮肤的反应，根据皮肤刺激性计分系统评分法(如下表5所示)和皮肤刺激性指标(Primary Dermal Irritation Index)(如下表6所示)，评估所述皮肤的刺激程度(如下表7所示)。

表5

皮肤刺激性计分系统评分法

表6

皮肤刺激性指标

表7

皮肤的刺激程度

备注：PC(阳性对照品)为1重量％的2，4-二硝基氯苯(2，4-Dinitrochlorobenzen)；NC(阴性对照品)为H₂O。

由表7可知，本发明的中草药组合物配方的部分药材虽然具有弱刺激性，但是本发明的浸膏不具有刺激性。然而，万应膏却具有中度刺激性。

测试例2

本发明的中草药组合物配方的药材的优选提取条件：

将本发明的中草药组合物配方中的13种药材以等比例或各种比例混合后，在不同条件下(温度、有机溶剂)进行提取和浓缩，经过适当稀释后进行高效液相层析法(HPLC)试验，并计算出(芍药、当归、肉桂、甘草、大黄、白芷、独活、羌活)指标成分的含量，比较不同条件的药材提取结果，筛选出最佳的药材提取条件，其结果如下表8所示。

表8

本发明的中草药组合物配方中的13种处方药材的不同提取条件：

代号	提取液	温度	药材与提取液比	提取时间
					PN-1	95重量％的乙醇	80℃(沸腾)	1∶8	2次各3小时
PN-2	75重量％的乙醇	80℃(沸腾)	1∶8	2次各3小时
					PN-3	50重量％的乙醇	80℃(沸腾)	1∶8	2次各3小时
PN-4	25重量％的乙醇	80℃(沸腾)	1∶8	2次各3小时
					PN-5	0重量％的乙醇	80℃(沸腾)	1∶8	2次各3小时
PN-7	95重量％的乙醇	50℃	1∶8	2次各3小时
					PN-8	95重量％的乙醇	0℃	1∶8	2次各3小时

以高效液相层析法(HPLC)计算出不同条件下，每1克处方药材的提取液内所含的指标成分的平均含量(n＝3次)，单位为毫克，其结果示于下表9中。由下表9可以看出，95重量％-50重量％的乙醇或温度越高，则可提取出更多的指标成分。

表9

测试例3

本发明的中草药组合物配方的各种药材的高效液相层析法(HPLC)分析图谱：

将各种药材分别取1克并添加95重量％的乙醇8克，放入回流提取装置中，在80℃下提取3小时，重复两次，收集两次提取液，然后分别进行过滤，并用减压浓缩机将过滤后的滤出液浓缩成浸膏，用甲醇(MeOH)定量至150.0毫升作为待测液，取10微升的待测液以高效液相层析法(HPLC)进行成分分析并建立如图6A至图6L所示的指纹图谱。

其中：图6A表示赤芍的HPLC指纹图谱，指标成分为芍药苷；

图6B表示当归的HPLC指纹图谱，指标成分为阿魏酸；

图6C表示肉桂的HPLC指纹图谱，指标成分为桂皮醛；

图6D表示甘草的HPLC指纹图谱，指标成分为甘草甜苷；

图6E表示大黄的HPLC指纹图谱，指标成分为大黄酸；

图6F表示白芷的HPLC指纹图谱，指标成分为欧前胡素或白芷素；

图6G表示独活的HPLC指纹图谱，指标成分为蛇床子素或欧花酚甲醚；

图6H表示羌活的HPLC指纹图谱，指标成分为异欧前胡素；

图6I表示干姜的HPLC指纹图谱；

图6J表示白芨HPLC指纹图谱；

图6K表示乳香HPLC指纹图谱；

图6L表示乌药的HPLC指纹图谱。

测试例4

本发明的中草药组合物配方的高效液相层析法(HPLC)分析图谱：

将本发明的中草药组合物配方中的各药材分别取1克并混合后为13克，然后加入浓度为95重量％的乙醇104克，放入回流提取装置中，在80℃下提取3小时，然后进行过滤并取出滤液，将所得残渣再按照以上步骤重复进行1次，收集2次提取液并进行过滤，用减压浓缩机将过滤后的滤出液浓缩成浸膏，用甲醇(MeOH)定量至150.0毫升作为待测液，取10微升的待测液以高效液相层析法(HPLC)进行成分分析并建立如图7所示的指纹图谱。

测试例5

本发明的药材成分的浸膏透皮试验：

试验动物为威斯达(Wistar)大白鼠(重量约250克)。试验期间，试验动物随意摄取饲料和饮水。试验样品为中草药组合物配方提取浓缩的浸膏。先使老鼠颈椎断离牺牲，再用电动剃毛器剃除腹部毛发，取下腹部皮肤。取下皮肤，内部用生理食盐水湿润后，夹在直式经皮吸收系统(Transdermal Franz Cell System)的盖帽区(Donor cell)和本体区(Receptor cell)之间，将测试样品分别溶于适当的溶剂中，并置于盖帽区内。本体区充满生理盐水(含20重量％的聚乙二醇400)，在37℃下恒温和在500 rpm固定速度搅拌下进行皮肤的穿透试验，并在3、6、12、24、36和72小时采样，针对中草药贴布的指标成分，将样本注入高效液相层析法(HPLC)中进行含量测定。

结果，高效液相层析法(HPLC)可检测到的透皮成分为当归、芍药、肉桂等药材的成分，且含有上述三种药材的指标成分，其HPLC指纹图谱如图8所示。

测试例6

本发明的中草药贴布的镇痛实验：

(1)醋酸扭体法：

原理：如果用化学物质刺激动物，例如用醋酸、缓激肽或K+等腹腔注射刺激腹膜或接触皮肤，以引起刺激化学敏感型接受体引发疼痛反应，表现腹部收缩内陷，后肢伸展，身体扭曲或蠕行等扭体表现。

试验动物为ICR小白鼠(雄性，6-8周龄)。试验期间，试验动物随意摄取饲料和饮水。并在试验前，禁食24小时。试验共分为3组，分别为阴性对照组(不含任何药物的药贴布)、阳性对照组(市售的引朵美洒辛(Indomethacin)或双氯芬酸钠(Diclofenacsodium)药贴布)和实验组(实验用4种不同剂量的药贴布)，每组12只。

小白鼠称重编号，然后将四肢固定于平板上并进行腹部剃毛后，将药贴布(2厘米×3厘米)贴于小白鼠的腹部上。3小时后去除药贴布(或不去除药贴布)，用0.6重量％的醋酸溶液(即20毫升/千克)进行腹腔注射。观察10分钟内，小白鼠的扭曲次数，并纪录其扭曲平均值，其结果如图9所示。

结果，本发明的中草药贴布的扭曲平均值小于阴性对照组(不含任何药物的药贴布)的扭曲平均值，因此，本发明的中草药贴布确实具有镇痛的疗效。

(2)福尔马林(formalin)实验法：

原理：在大鼠、鼷鼠的皮下注射稀释过的福尔马林，可以观察到中枢和周边神经系统的疼痛反应，这种福尔马林舔足实验最早是由Dubuisson和Dennis于1977年提出的，所述实验对许多类镇痛药物的筛选来说是一种有效且可靠的模型，当在人类皮肤的皮下注入福尔马林4-5分钟后，会引起强烈且尖锐的灼热感，接下来的30-60分钟则有持续的疼痛感，如果表现于鼷鼠，则由于足掌受到注入的福尔马林刺激引起疼痛而有舔足或顿足的行为表现，最初注入的福尔马林在0-5分钟造成的痛反应(initial pain)所花费的舔足时间称之为前期，主要是由于直接刺激痛觉反应接受体造成P物质(substance P)和缓激肽释放出而有痛反应；而在15-40分钟所花费的舔足时间则称之为后期，主要是由于发炎反应造成一些化学传递物如组织胺(histamine)、血清素(serotonin)、前列腺素(prostaglandin)和激肽(kinin)等，由受损组织细胞释放出而引起。总之，以福尔马林诱发小白鼠造成疼痛而有舔足的行为反应，可以对发炎性和非发炎性疼痛的镇痛药物活性和作用机理作有效的评估。另外，以福尔马林诱导产生的痛反应，其浓度大小占很重要因素，当在0.02-0.2重量％时仅诱导出前期舔足反应，以光学显微镜作组织鉴定，其改变微小；而在1重量％或更高的福尔马林浓度时可诱导出前期和后期舔足反应，若注入的福尔马林为5重量％，则30分钟后在组织鉴定上可发现有急生发炎反应，颗粒球破坏和肿胀均可以看到。

试验动物为ICR小白鼠(雄性，6-8周龄)。试验期间，试验动物随意摄取饲料和饮水。并在试验前禁食24小时。试验共分为3组，分别为阴性对照组(不含任何药物的药贴布)、阳性对照组(市售的引朵美洒辛或双氯芬酸钠药贴布)和实验组(实验用4种不同剂量的中草药贴布)，每组12只。

小白鼠称重编号，将药贴布(2厘米×3厘米)剪成四等份，贴于小白鼠的脚背上，再用透气胶带缠绕固定，3小时后去除药贴布，用当天配制的1重量％的福尔马林溶液在脚背的皮下注射20微升，计算0-5分钟和15-40分钟期间小鼠的舔足时间，其结果示于图10中。

结果，本发明的中草药贴布的舔足时间小于阴性对照组(不含任何药物的药贴布)的舔足时间，因此，本发明的中草药贴布确实具有镇痛的疗效。

测试例7

本发明的中草药贴布消炎消肿实验：

原理：γ-carrageenin注入足跖所引起的浮肿是双相性反应，注射γ-carrageenin后，在不同的时间有不同的物质释放而引起发炎肿胀，即0-1.5小时或20分钟至1小时内(第一阶段)组织胺、血清素和血小板活化因子(PAF，platelet activating factor)会游离出来；1.5-2.5小时(第二阶段)，激肽类物质会释放出来；2.5小时之后(第三阶段)会释放出前列腺素和白三烯素(leukotriens)而造成发炎肿胀。

试验动动为SD大白鼠(雄性，6-8周龄)。试验期间，试验动物随意摄取饲料和饮水。并在试验前禁食24小时。试验共分为3组，分别为阴性对照组(不含任何药物的药贴布)、阳性对照组(市售的引朵美洒辛或双氯芬酸钠药贴布)和实验组(实验用4种不同剂量的药贴布)，每组8只。

将大白鼠称重编号，并在大白鼠的足跖用签字笔划一条划量线。用肿胀测定仪先测量所述足跖的体积。先穿上束腹弹性绷带以避免老鼠咬掉中草药贴布。各组老鼠经过皮下注射0.1毫升的鹿角菜胶(Carrageenan，在生理盐水中10毫克/毫升)于足跖。阳性对照组和实验组将中草药贴布(2厘米×3厘米)贴于足跖，并用透气胶带缠绕固定，以肿胀测定仪量测量0、2、4、6和24小时的肿胀百分比(不同时间测定后需再更新中草药贴布)，观察各时间点的消肿情形并划出实验组与对照组的肿胀曲线是否有生物统计的差别，如图11所示。

结果，本发明的中草药贴布的浮肿百分比小于阴性对照组(不含任何药物的药贴布)的浮肿百分比，因此，本发明的中草药贴布确实具有消炎消肿的疗效。

虽然本发明已经描述了上述实施例，但是这些实施例并不是用来限定本发明，任何具有公知常识的本领域技术人员，在不脱离本发明的精神的范围内，应当可以作各种变动和修改。因此，本发明的保护范围应当以权利要求书所界定的范围为准。

Claims

1.一种中草药组合物，其特征在于，该中草药组合物由第一类药材和第二类药材组成：

第一类药材，所述第一类药材为白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄；以及

第二类药材，所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种。

2.根据权利要求1所述的中草药组合物，其中，当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种时，则所述中草药组合物包含11味药材，每一味药材的重量百分比在9.09%±5%的范围内。

3.根据权利要求1所述的中草药组合物，其中，当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的两种时，则所述中草药组合物包含12味药材，每一味药材的重量百分比在8.33%±5%的范围内。

4.根据权利要求1所述的中草药组合物，其中，当所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的三种时，则所述中草药组合物包含13味药材，每一味药材的重量百分比在7.69%±5%的范围内。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的中草药组合物，其中，所述第一类药材为基础药材，且所述第二类药材为添加药材。

6.一种中草药提取物，其特征在于，所述提取物由包括下列步骤的制备过程制得：

提供第一类药材和第二类药材，其中，所述第一类药材为白芨、肉桂、白芷、当归、芍药、羌活、乌药、甘草、独活、大黄，所述第一类药材为基础药材，且所述第二类药材选自由姜、乳香和没药所构成的组中的一种、两种或三种，所述第二类药材为添加药材；

将所述第一类药材和第二类药材与有机溶剂放入容器内，使所述第一类药材和第二类药材与所述有机溶剂的重量百分比为1：N，以形成第一混合液，其中N为介于3与12之间的数值；

将所述第一混合液加热至第一预定温度并提取第一预定时间，以进行第1次提取；以及

趁热过滤所述第一混合液，取第1次提取的滤液。

7.根据权利要求6所述的中草药提取物，其中，所述第一预定温度介于30℃与100℃之间。

8.根据权利要求6所述的中草药提取物，其中，所述第一预定温度介于所述有机溶剂的沸点加减5℃的范围内。

9.根据权利要求8所述的中草药提取物，其中，当所述有机溶剂为乙醇时，所述第一预定温度介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。

10.根据权利要求6所述的中草药提取物，其中，所述第一预定时间介于1与6小时之间。

11.根据权利要求6所述的中草药提取物，所述制备过程还包括下列步骤：

将第一次提取的滤液浓缩至含水量为10-40重量%、所述有机溶剂的含量为3-30重量%的浸膏。

12.根据权利要求11所述的中草药提取物，其中，所述含水量为10-20重量%，所述有机溶剂的含量为5-10重量%。

13.根据权利要求11所述的中草药提取物，所述制备过程还包括下列步骤：

保留第1次提取的残渣；

重新添加所述有机溶剂，使所述药材与所述有机溶剂的重量百分比回到1:N，以形成第二混合液，其中，N为介于3与12之间的数值；

将所述第二混合液加热至第二预定温度并提取第二预定时间，以进行第2次提取；以及

趁热过滤所述第二混合液，取第2次提取的滤液。

14.根据权利要求13所述的中草药提取物，其中，所述第二预定温度介于30℃与100℃之间。

15.根据权利要求13所述的中草药提取物，其中，所述第二预定温度介于所述有机溶剂的沸点加减5℃的范围内。

16.根据权利要求15所述的中草药提取物，其中，当所述有机溶剂为乙醇时，所述第二预定温度介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。

17.根据权利要求13所述的中草药提取物，其中，所述第二预定时间介于1与6小时之间。

18.根据权利要求13所述的中草药提取物，所述制备过程还包括下列步骤：

混合第一次提取的滤液与第二次提取的滤液，并将所述混合滤液浓缩至含水量为10-40重量%、所述有机溶剂的含量为3-30重量%的浸膏。

19.根据权利要求18所述的中草药提取物，其中，所述含水量为10-20重量%，所述有机溶剂的含量为5-10重量%。

20.根据权利要求18所述的中草药提取物，所述制备过程还包括下列步骤：

将第2次提取的残渣从所述容器中移除。

21.根据权利要求6所述的中草药提取物，其中，所述有机溶剂选自由甲醇、乙醇、丙酮、甲基乙基酮、煤油(石油醚)和己烷所构成的组中的至少一种。

22.根据权利要求6所述的中草药提取物，其中，N为8。

23.一种中草药提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括下列步骤：

将所述第一类药材和第二类药材与有机溶剂放入容器内，使所述中草药组合物与所述有机溶剂的重量百分比为1：N，以形成第一混合液，其中N为介于3与12之间的数值；

趁热过滤所述第一混合液，取第1次提取的滤液。

24.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述第一预定温度介于30℃与100℃之间。

25.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述第一预定温度介于所述有机溶剂的沸点加减5℃的范围内。

26.根据权利要求25所述的制备方法，其中，当所述有机溶剂为乙醇时，所述第一预定温度介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。

27.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述第一预定时间介于1与6小时之间。

28.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述制备方法还包括下列步骤：

29.根据权利要求28所述的制备方法，其中，所述含水量为10-20重量%，所述有机溶剂的含量为5-10重量%。

30.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述制备方法还包括下列步骤：

保留第1次提取的残渣；

趁热过滤所述第二混合液，取第2次提取的滤液。

31.根据权利要求30所述的制备方法，其中，所述有机溶剂的沸点为T℃，且所述第二预定温度介于30℃与100℃之间。

32.根据权利要求30所述的制备方法，其中，所述第二预定温度介于所述有机溶剂的沸点加减5℃的范围内。

33.根据权利要求32所述的制备方法，其中，当所述有机溶剂为乙醇时，所述第二预定温度介于乙醇的沸点加减5℃的范围内。

34.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述第一预定时间介于1与6小时之间。

35.根据权利要求30所述的制备方法，其中，所述制备方法还包括下列步骤：

混合第一次提取的滤液和第二次提取的滤液，并将所述混合滤液浓缩至含水量为10-40重量%、所述有机溶剂的含量为3-30重量%的浸膏。

36.根据权利要求35所述的制备方法，其中，所述含水量为10-20重量%，所述有机溶剂的含量为5-10重量%。

37.根据权利要求35所述的制备方法，其中，所述制备方法还包括下列步骤：

将所述第2次提取的残渣从所述容器中移除。

38.根据权利要求23所述的制备方法，其中，所述有机溶剂选自由甲醇、乙醇、丙酮、甲基乙基酮、煤油(石油醚)和己烷所构成的组中的至少一种。

39.根据权利要求23所述的制备方法，其中，N为8。

40.一种中草药贴布，其特征在于，所述中草药贴布包括：

胶帯层；以及

设置于所述胶帯层上的中草药药剂层，其中，所述中草药药剂层含有权利要求11中所述的浸膏。

41.根据权利要求40所述的中草药贴布，其中，所述中草药药剂层还含有稀释剂，且所述浸膏掺入所述稀释剂中。

42.根据权利要求41所述的中草药贴布，其中，所述稀释剂包含乙醇、水和水性粘胶。

43.根据权利要求42所述的中草药贴布，其中，所述中草药贴布具有的中草药提取物的含量为50-3500毫克/14克。

44.一种中草药贴布，其特征在于，所述中草药贴布包括：

胶帯层；以及

设置于所述胶帯层上的中草药药剂层，其中，所述中草药药剂层含有权利要求18中所述的浸膏。

45.根据权利要求44所述的中草药贴布，其中，所述中草药药剂层还含有稀释剂，且所述浸膏掺入所述稀释剂中。

46.根据权利要求45所述的中草药贴布，其中，所述稀释剂包含乙醇、水和水性粘胶。

47.根据权利要求46所述的中草药贴布，其中，所述中草药贴布具有的中草药提取物的含量为50-3500毫克/14克。

48.一种中草药喷剂，其特征在于，所述中草药喷剂含有权利要求6中所述的提取滤液。

49.根据权利要求48所述的中草药喷剂，其中，所述中草药喷剂还含有：

稀释剂，其中，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

50.根据权利要求49所述的中草药喷剂，其中，所述稀释剂包含乙醇、多醇类、水。

51.根据权利要求50所述的中草药喷剂，其中，所述中草药喷剂具有的中草药提取物的含量为10-500毫克/克。

52.一种中草药喷剂，其特征在于，所述中草药喷剂含有权利要求11中所述的浸膏。

53.根据权利要求52所述的中草药喷剂，其中，所述中草药喷剂还含有：

稀释剂，其中，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

54.根据权利要求53所述的中草药喷剂，其中，所述稀释剂含有乙醇、多醇类、水。

55.根据权利要求54所述的中草药喷剂，其中，所述中草药喷剂具有的中草药提取物的含量为10-500毫克/克。

56.一种中草药药膏，其特征在于，所述中草药药膏含有权利要求11中所述的浸膏。

57.根据权利要求56所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏还含有：

稀释剂，其中，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

58.根据权利要求57所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏为油膏、水性凝胶和乳膏中的一种。

59.根据权利要求58所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏具有的中草药提取物的含量为10-500毫克/克。

60.一种中草药药膏，其中，所述中草药药膏含有权利要求18中所述的浸膏。

61.根据权利要求60所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏还含有：

稀释剂，其中，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

62.根据权利要求61所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏为油膏、水性凝胶和乳膏中的一种。

63.根据权利要求62所述的中草药药膏，其中，所述中草药药膏具有中药提取物的含量为10-500毫克/克。

64.一种内服制剂，其特征在于，所述内服制剂含有权利要求11中所述的浸膏。

65.根据权利要求64所述的内服制剂，其中，所述内服制剂还含有：

稀释剂，其中，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

66.根据权利要求65所述的内服制剂，其中，所述内服制剂为散剂、丸剂和锭剂中的一种。

67.根据权利要求66所述的内服制剂，其中，所述内服制剂具有的中草药提取物的含量为3-250毫克/克。

68.一种内服制剂，其中，所述内服制剂含有权利要求18中所述的浸膏。

69.根据权利要求68所述的内服制剂，其中，所述内服制剂还含有稀释剂，所述浸膏掺入所述稀释剂中。

70.根据权利要求69所述的内服制剂，其中，所述内服制剂为散剂、丸剂和锭剂中的一种。

71.根据权利要求70所述的内服制剂，其中，所述内服制剂具有的中草药提取物的含量为3-250毫克/克。

72.一种中草药提取物，其中，所述中草药提取物包含下列9种指标成分：

芍药苷、阿魏酸、桂皮醛、甘草甜苷、大黄酸、欧前胡素、蛇床子素、异欧前胡素和生姜酚。

73.根据权利要求72所述的中草药提取物，其中，每1克所述中草药提取物内所含的指标成分的含量分别为：芍药苷为4.466-1.488毫克、阿魏酸为0.382-0.127毫克、桂皮醛为2.159-0.720毫克、甘草甜苷为9.677-3.226毫克、大黄酸为1.013-0.338毫克、欧前胡素为0.727-0.242毫克、蛇床子素为1.389-0.463毫克、异欧前胡素为0.709-0.236毫克和生姜酚为0.144-0.432毫克。