CN102525900A - 左乙拉西坦注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明设计一种左乙拉西坦注射液的处方及制备方法，其处方主要由活性成分左乙拉西坦及醋酸盐缓冲液、氯化钠及注射用水组成，该处方的制备方法包括称取各组分，搅拌溶解，加入0.05％～0.2％(W/V)的针用活性碳，加压过滤药液去除热原，调节溶液的pH值在5.0～6.0范围内，然后先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤，质检合格后灌装入5ml的西林瓶中，压盖密封。后在121℃，15分钟的终端灭菌条件下灭菌后即得。本发明生产的左乙拉西坦注射液无菌保证程度高，对于临床用药来说，安全性能得到更充分的保证。

Description

左乙拉西坦注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种左乙拉西坦注射液配比方法及全新的制备工艺，特别是本处方能采用终端灭菌条件进行灭菌，能保证本品的无菌程度，属于药物制剂领域。

背景技术

左乙拉西坦是一种新型的抗癫痫药物，与其他抗癫痫药物的结构不同，具有全新的抗癫痫机制。左乙拉西坦的确切抗癫痫机制尚不明，但与传统抗癫痫药物作用于离子通道或兴奋性、抑制性神经递质系统不同。左乙拉西坦几乎具备了较好的抗癫痫药物的所有药动学特性：生物利用度高、线性曲线、低蛋白结合率、无肝酶诱导作用。多种动物模型显示左乙拉西坦具有抗癫痫特性。

全球每年大约新发生200万例癫痫。其中发达国家中癫痫的发病率约为每年每十万人中有50人。同样，癫痫的发病率在发展中国家中也显著增高，为每十万人中有100人。我国约有900万癫痫患者，其中600万病人每年仍有发作，而且每年都会出现40万新发病例。

癫痫患者的死亡危险性大约是普通人群的二至四倍(死亡可能和基础疾病，自杀，事故或者癫痫状态有关)。根据国际抗癫痫联盟(ILAE)的调查，患有癫痫的年轻人的死亡率是正常年轻人的4倍。

理想的抗癫痫药物除有较好的疗效外，还应具备：生物利用度接近100％，达稳态时间快，药代动力学呈线性，服药最好1～2次/d，不与血浆蛋白结合，不经肝脏代谢，无药物相互作用等。

左乙拉西坦就是这样的一种新型抗癫痫药，且注射液可作为口服左乙拉西坦的补充剂型，当口服左乙拉西坦不可行时用于部分性癫痫发作及肌阵挛性癫痫患者少年肌阵挛性癫痫病。

左乙拉西坦由比利时UCB公司研发，于1999年左乙拉西坦片获FDA批准，从2004年开始，其以强势增长态势迈入全球畅销药行列。并且在此后几年，其全球销售继续稳步攀升尤其在2007和2008年其销售额均超过了10亿美元，分别达到14.07亿和18.64亿美元，成为了名副其实的重镑炸弹级产品。

左乙拉西坦良好的效果及安全性带动了众多剂型的开发上市，目前除了注射剂之外，均为口服剂型，有片剂、口服溶液、缓释片。国外多项大型临床试验均显示了左乙拉西坦注射液优良效果及良好的安全性。

本品目前在中国尚无上市，有部分厂家正在申请临床试验。专利CN200810116329.9公开了一种左乙拉西坦注射液的工艺，但是制备工艺属于无菌保证水平较低的非终端除菌工艺。专利CN200910086292.4也公开了一种左乙拉西坦注射液的处方及工艺，也属于无菌保证水平较低的非终端除菌工艺。在现在的中国市场，注射液的药害事件屡有发生，多数是因为无菌导致，因此非终端灭菌工艺不能保证左乙拉西坦注射液的临床安全性。

发明内容

为克服上述公开专利中除菌工艺的不足，本发明的目的在于提供一种左乙拉西坦注射液的处方，并猜测采用终端灭菌方法进行本品的制备，来提高本品的无菌保证程度和产品质量，以及临床使用的安全性。

本发明中，我们根据注射剂灭菌工艺的选择原则，选择了无菌水平保证程度较高的终端灭菌方法进行灭菌(过度杀灭法(F₀≥12)。本发明中，我们先制备了普通的左乙拉西坦注射液(辅料和处方参考公开的文献)，采用终端灭菌，在经受高温后注射液pH值升高，杂质变大，溶液颜色变黄，因此这个处方无法采用终端灭菌工艺来进行灭菌。

本发明中，我们需要对处方进行优选，以保证灭菌后产品质量不变。根据左乙拉西坦原料的性质：左乙拉西坦是白色结晶性粉末，极易溶于水，它在pH值5.0-6.0的范围内稳定性较好，超过此pH值杂质会明显增加，因此我们选择合适的处方及辅料，包括制备工艺，让溶液灭菌后pH值能在5.0～6.0这个范围内。

一般注射剂常用的缓冲系统大概包括弱碱和弱碱盐或弱酸和弱酸盐。通常用于注射剂的缓冲系统是醋酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和谷氨酸盐缓冲液。

典型制剂缓冲液的常用浓度和种类

No.	缓冲液	常用浓度，％
			1.	醋酸和醋酸盐，pH 3.5-5.7	1-2
2.	柠檬酸和柠檬酸盐，pH 2.5-6	1-5
			3.	磷酸和磷酸盐，pH 6-8.2	0.8-2
4.	谷氨酸，pH 8.2-10.2	1-2

本发明中，根据上述表格，我们选择了常用的醋酸盐缓冲液来调节本品溶液的pH值，缓冲液系统能调节溶液pH值是基于下述原理：主要是提供溶液中离子的平衡(根据下面提到的公式)，因此能提供溶液中稳定的pH值。

$\mathrm{B\; alkali}+\mathrm{II}+\⇔\mathrm{BH}+\mathrm{fixed\; acid}$

$\mathrm{HA\; acid}\⇔H++A-\mathrm{fixed\; alkali}$

我们选择了醋酸盐缓冲液还因为此缓冲液是注射液常用缓冲系统，且pH值能控制在左乙拉西坦的稳定范围之内。

本发明中，根据上述选择醋酸盐的原因，我们用醋酸盐缓冲液制备了左乙拉西坦注射液，采用121℃，15分钟终端灭菌，在经受高温后注射液pH值没有变化，溶液颜色也无变化，且杂质增加量微小，符合质量标准规定，因此初步来看，此工艺制备的产品质量可靠，方法可行。

本发明中，上述所述醋酸盐为：醋酸+醋酸钠单元，我们确定处方为每升注射液含有80-120克左乙拉西坦、1.2-2.5克醋酸钠和0.1克-0.3克醋酸、8克-10克氯化钠，其余为注射用水。

本发明的制备工艺如下步骤：

1)、按规定称取左乙拉西坦至配液罐中。

2)、按规定加入处方量75％的注射用水到上述配液罐中，混合至完全溶解。

3)、按规定称取醋酸钠到配液罐中混合至完全溶解。

4)、按规定称取醋酸到配液罐中混合至完全溶解。

5)、按规定称取氯化钠到配液罐中混合至完全溶解。

6)、加注射用水至处方量，混合。

7)、向溶液中加入0.05％(W/V)的针用活性炭，搅拌15分钟，加压使药液通过用外裹中性滤纸的1μm和0.45μm钛棒过滤器，滤除活性炭至稀配罐中。

8)、检查溶液的pH值，pH值应在.5.0～6.0范围内，如不在，使用醋酸适量进行调节。

9)、溶液先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤。

10)、滤液取样进行质量检测。

11)、在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶中，然后压盖密封。

12)、取西林瓶放在121℃，15分钟终端灭菌条件下灭菌，后取出放至室温即得。

本发明的制备步骤7)中采用0.05％-0.2％的针用活性碳过滤可除热原及色素，保证样品溶液的澄清无色及无细菌内毒素；采用的两次微孔滤膜精滤孔径为0.22μm，可保证本品的无菌，本发明的制备关键步骤应在百级净化的无菌条件下生产，特别是精滤、灌封，以保证本品的无菌水平。制备流程图见图1。

附图说明

图1为左乙拉西坦注射液工艺制备流程图

图2为安全性试验中血管刺激性试验药后14天左乙拉西坦注射液组(5cm)

图3为安全性试验中血管刺激性试验药后14天左乙拉西坦注射液组(1cm)

具体实施例

以下的实施例仅在于详细说明本发明，而不是限制本发明。

实施例1

处方

制备工艺

1)、按规定称取左乙拉西坦至配液罐中。

2)、按规定加入处方量75％的注射用水到上述配液罐中，混合至完全溶解。

3)、按规定称取醋酸钠到配液罐中混合至完全溶解。

4)、按规定称取醋酸到配液罐中混合至完全溶解。

5)、按规定称取氯化钠到配液罐中混合至完全溶解。

6)、加注射用水至处方量，混合。

7)、向溶液中加入0.05％(W/V)的针用活性炭，搅拌15分钟，加压使药液通过用外裹中性滤纸的1μm和0.45μm钛棒过滤器，滤除活性炭至稀配罐中。

8)、检查溶液的pH值，pH值应在.5.0～6.0范围内，如不在，使用醋酸适量进行调节。

9)、溶液先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤。

10)、滤液取样进行质量检测。

11)、在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶中，然后压盖密封。

12)、取西林瓶放在121℃，15分钟终端灭菌条件下灭菌，后取出放至室温即得。

实施例2

处方

1)、按规定称取左乙拉西坦至配液罐中。

2)、按规定加入处方量75％的注射用水到上述配液罐中，混合至完全溶解。

3)、按规定称取醋酸钠到配液罐中混合至完全溶解。

4)、按规定称取醋酸到配液罐中混合至完全溶解。

5)、按规定称取氯化钠到配液罐中混合至完全溶解。

6)、加注射用水至处方量，混合。

7)、向溶液中加入0.05％(W/V)的针用活性炭，搅拌15分钟，加压使药液通过用外裹中性滤纸的1μm和0.45μm钛棒过滤器，滤除活性炭至稀配罐中。

8)、检查溶液的pH值，pH值应在.5.0～6.0范围内，如不在，使用醋酸适量进行调节。

9)、溶液先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤。

10)、滤液取样进行质量检测。

11)、在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶中，然后压盖密封。

12)、取西林瓶放在121℃，15分钟终端灭菌条件下灭菌，后取出放至室温即得。

实施例3

处方

1)、按规定称取左乙拉西坦至配液罐中。

2)、按规定加入处方量75％的注射用水到上述配液罐中，混合至完全溶解。

3)、按规定称取醋酸钠到配液罐中混合至完全溶解。

4)、按规定称取醋酸到配液罐中混合至完全溶解。

5)、按规定称取氯化钠到配液罐中混合至完全溶解。

6)、加注射用水至处方量，混合。

7)、向溶液中加入0.1％(W/V)的针用活性炭，搅拌15分钟，加压使药液通过用外裹中性滤纸的1μm和0.45μm钛棒过滤器，滤除活性炭至稀配罐中。

8)、检查溶液的pH值，pH值应在.5.0～6.0范围内，如不在，使用醋酸适量进行调节。

9)、溶液先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤。

10)、滤液取样进行质量检测。

11)、在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶中，然后压盖密封。

12)、取西林瓶放在121℃，15分钟终端灭菌条件下灭菌，后取出放至室温即得。

实验例1

对本发明生产的左乙拉西坦注射液进行安全性试验。

本发明的左乙拉西坦注射液血管刺激性试验的研究资料如下：

1、试验目的

观察左乙拉西坦注射液静脉注射对家兔耳缘静脉的刺激性，为临床安全用药提供依据。

2、受试药品

实施例1所得左乙拉西坦注射液，规格：100mg/ml、0.9％氯化钠注射液、卵白蛋白。

3、受试动物

白色家兔，体重2.0-2.4kg，雌雄各半，饲养室温度24±1℃，相对湿度50-60％，自然通风。

4、剂量设计

试验前，根据左乙拉西坦注射液使用说明书确定剂量，取左乙拉西坦注射液，兔用剂量设计为0.5ml/kg，使用前用0.9％氯化钠注射液稀释即得，家兔耳缘静脉注射给予。

5、试验方法

家兔4只，采用同体左右侧自身对比法，左侧耳缘静脉作为受试药物组，另一侧作为氯化钠注射液对照组。左侧每日耳缘静脉注射受试药物氯化钠注射液10ml/kg，另一侧耳缘静脉亦每日注射10ml/kg氯化钠注射液，每日1次，连续3日，末次给药后48h，肉眼观察试验家兔耳缘静脉，并处死4只动物，剪取距注射部位1cm处和5cm处兔耳，置10％福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，HE染色。剩余动物继续观察注射部位静脉14天，于观察末期，处死剩余动物，剪取距注射部位1cm处和5cm处家兔耳缘静脉，放于10％福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，HE染色。光镜下观察给药后48小时及末次给药14天后对兔耳血管的刺激性反应。

5.1肉眼观察标准

观察注射部位兔耳静脉有无充血、水肿变性、硬结及坏死现象，记录病变程度及出现血管组织变化的家兔数目，血管充血及水肿程度分为0、I、II、III度，0度为无变化，I度为轻微变化，II度为明显变化，III度为严重变化。

5.2病理组织学检查标准

观察注射部位兔耳静脉血管扩张充血、血栓形成、水肿和炎性细胞浸润等改变，每项内容按病变程度分正常、轻、中、重，分别以-、+、++、+++表示。

6、试验结果

6.1肉眼观察结果

家兔末次给药后48小时肉眼观察给药侧与对照侧有充血、水肿等表现，但两组没有明显差别。末次给药后第14天，剩余家兔给药侧与注射用水对照侧均已恢复正常，无任何异常表现。

6.2病理组织学检查结果(见图2、3)

末次给药后48h，家兔双侧耳缘静脉给药1cm及5cm处均未见充血、水肿及出血，周围血管有轻度的炎性细胞浸润，未见硬结和坏死。给药后第14d，注射用水侧与给药侧均未见充血、出血、水肿及硬结和坏死等病理变化，对照侧与给药侧无明显的差异性，试验结果显示左乙拉西坦对家兔静脉血管没有明显的刺激性。

7、试验结论

本次试验条件下，左乙拉西坦对家兔耳缘静脉无明显局部刺激反应。

从以上安全性试验可知，本发明生产的左乙拉西坦安全性有保证。

Claims (6)

1.一种左乙拉西坦注射液的处方，含有活性成分左乙拉西坦，其特征在于每升注射液含有80-120克左乙拉西坦、1.2-2.5克醋酸钠和0.1克-0.3克醋酸、8克-10克氯化钠，其余为注射用水

2.如权利要求1所述的左乙拉西坦注射液的处方，其特征在于该方法包括如下步聚：

1)、按规定称取左乙拉西坦至配液罐中。

2)、按规定加入处方量75％的注射用水到上述配液罐中，混合至完全溶解。

3)、按规定称取醋酸钠到配液罐中混合至完全溶解。

4)、按规定称取醋酸到配液罐中混合至完全溶解。

5)、按规定称取氯化钠到配液罐中混合至完全溶解。

6)、加注射用水至处方量，混合。

7)、向溶液中加入0.05％(W/V)的针用活性炭，搅拌15分钟，加压使药液通过用外裹中性滤纸的1μm和0.45μm钛棒过滤器，滤除活性炭至稀配罐中。

8)、检查溶液的pH值，pH值应在.5.0～6.0范围内，如不在，使用醋酸适量进行调节。

9)、溶液先用0.45μm滤膜粗滤，再用0.22μm滤膜精滤。

10)、滤液取样进行质量检测。

11)、在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶中，然后压盖密封。

12)、取西林瓶放在121℃，15分钟终端灭菌条件下灭菌，后取出放至室温即得。

3.如权利要求1所述的左乙拉西坦注射液的处方，其特征在于该方法制得的溶液的pH值范围在5.0～6.0。

4.如权利要求1所述的左乙拉西坦注射液的处方，其特征在于该方法采用浓度为0.05％-0.2％(W/V)的针用活性碳去除热原。

5.如权利要求1所述的左乙拉西坦注射液的处方，其特征在于在氮气流保护下将溶液灌装入5ml的西林瓶。

6.如权利要求1所述的左乙拉西坦注射液的处方，其特征在于该方法采用121℃，15分钟的终端灭菌条件进行灭菌。

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