CN102415337A - 一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法,包括无菌材料的获得,不定芽的诱导分化,不定芽的增殖,不定芽的生根,炼苗与穴盘移栽等步骤。与传统非洲菊的繁殖方法相比,本发明提高了非洲菊的繁殖速度和苗的整齐度,更好的保持了其母本优良性状。另外,采用穴盘移栽的无土育苗方法不仅减少了对土地资源的消耗,极大地提高了移栽成活率,而且避免了土传病菌通过种苗的传播危害,是一种适合非洲菊种苗工厂化生产的有效方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物组培穴盘苗的繁育方法,尤其涉及非洲菊组培穴盘苗的繁育方法。
背景技术
非洲菊又名扶郎花,其花朵硕大,花枝挺拔、花色丰富,姿态各异,装饰性强,产量高,瓶插寿命长,在适宜条件下可周年生产,是世界花卉市场上最重要的切花之一,占世界切花销售量的第5位。非洲菊作为大宗鲜切花种类,在我国占有重要地位,正受到越来越多人的喜爱,其栽培面积仅次于玫瑰、百合和康乃馨,生产上迫切需要优质非洲菊种苗。
非洲菊品种杂合性高,采用种子繁殖的后代易发生变异。一般采用分株和扦插等无性繁殖方法进行繁殖。但是分株和扦插的繁殖系数低,很难满足大规模生产需要。采用组织培养可以快速繁育种苗,并能保持母株的优良性状。目前非洲菊组织培养繁殖中,普遍存在外植体污染率高,不定芽的诱导分化率低,诱导周期长,组培苗移栽成活率低等问题,特别是用传统的苗床进行育苗,苗与苗之间易发生串根现象,起苗时根系极易受损伤,使之种植后缓苗时间长,成活率低。穴盘育苗与苗床培育的根系裸露的苗相比,提高了成苗率和更有效地利用了种植空间,具有生长期短,植株生长整齐,移植不易伤根,操作简单,节约劳动力,移植后缓苗期短,病害传播几率低等优点。经检索国内外未见报道非洲菊组培苗穴盘育苗技术。
发明内容
针对上述情况,本发明提供一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法,提高非洲菊的繁殖速度和苗的整齐度,更好的保持了其母本优良性状。
本发明是通过以下技术方案来实现的:
本发明提供的非洲菊组培穴盘苗繁育方法,其特征在于:
(1)无菌材料的获得
采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾,用自来水流水冲洗20min,然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中,依次用70%酒精浸泡30s,0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡8-10分钟,再用无菌水冲洗4-6遍后待用。
(2)不定芽的诱导分化
将步骤(1)得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片,再切掉花蕾表面小花及苞片基部,剩余花托部分,将花托切成4块,接种于不定芽诱导分化培养基上,将培养瓶置于温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天的条件下进行培养,1-2周后外植体膨大,3-4周后出现黄绿色愈伤组织,4-6周后可分化出不定芽。
(3)不定芽的增殖
将步骤(2)得到的不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,4周继代培养一次,增殖系数为3-6。
(4)不定芽的生根
将步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基上进行生根诱导培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,10天后生根率可达99%,生根数目平均3-4条/株,根长度为0.5-1.0cm。
(5)炼苗
将步骤(4)得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天。
(6)穴盘移栽
炼苗结束后,将组培苗从培养瓶内取出,洗净根部存留的培养基,避免伤害组培苗的幼根,然后移栽到盛有基质的穴盘中,穴盘填充的移栽基质含水量为60%-70%,移栽后覆塑料薄膜保温保湿。
(7)穴盘苗管理
组培苗移栽后保持白天温度20~30℃,夜间最低温度不低于12℃,湿度90%以上;10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件,移栽2周后开始施用肥料,在此条件下培养30-40天。
上述的不定芽诱导分化培养基是在1/2MS培养基中添加2.0-10.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
上述的不定芽增殖培养基是在MS培养基中添加0.5-2.0mg/L 6-苄基腺嘌呤或0-10.0mg/L激动素、0.1-0.5 mg/L吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
上述的不定芽生根培养基是在1/2MS培养基中添加0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸或0.05-0.5mg/L 吲哚丁酸或0.01-0.02mg/L 萘乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
上述的育苗穴盘规格为72~128孔,72孔穴盘口径38mm,高40mm,规格540mm×280mm;105孔穴盘口径33mm,高40mm,规格540mm×280mm;128孔穴盘口径30mm,高40mm,规格540mm×280mm。
上述的移栽基质配方为重量75%泥炭加25%蛭石。
上述移栽2周后施用肥料为氮、磷、钾复合肥,采用两种重量比例为20:10:20或14:0:14,两种比例氮磷钾复合肥分别用重量2000倍液交替施用。
本发明与传统非洲菊的繁殖方法相比,提高了非洲菊的繁殖速度和苗的整齐度,更好的保持了其母本优良性状,是一种适合非洲菊种苗工厂化生产的有效方法。
附图说明
图1 是非洲菊花托愈伤组织的诱导示意图片。
图2 是非洲菊花托外植体不定芽的分化示意图片。
图3 是非洲菊组培苗的继代增殖示意图片。
图4 是非洲菊组培苗的生根示意图片。
图5 是非洲菊组培生根苗的示意图片。
图6 是非洲菊组培生根苗移栽到穴盘示意图片。
图7 是非洲菊组培生根苗移栽到穴盘后生长50天示意图片。
图8 是非洲菊组培穴盘苗的示意图片。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
(1)无菌材料的获得
采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾,用自来水流水冲洗20min,然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中,依次用70%酒精浸泡30s,0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡8分钟,再用无菌水冲洗4-6遍后待用。
(2)不定芽的诱导分化
将步骤(1)得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片,再切掉花蕾表面小花及苞片基部,剩余花托部分,将花托切成4块,接种于不定芽诱导分化培养基上,将培养瓶置于温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天的条件下进行培养,1-2周后外植体膨大,3周后出现黄绿色愈伤组织(见图1),5周后可分化出不定芽(见图2)。
所述的不定芽诱导分化培养基是在1/2MS培养基中添加2.0-10.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
(3)不定芽的增殖
将步骤(2)得到的不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,4周继代培养一次(见图3),增殖系数为5。
所述的不定芽增殖培养基是在MS培养基中添加0.5-2.0mg/L 6-苄基腺嘌呤或0-10.0mg/L激动素、0.1-0.5 mg/L吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
(4)不定芽的生根
将步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基上进行生根诱导培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,10天后生根率可达99%,生根数目平均3-4条/株,根长度为0.5-1.0cm(见图4、5)。
所述的不定芽生根培养基是在1/2MS培养基中添加0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸或0.05-0.5mg/L 吲哚丁酸或0.01-0.02mg/L 萘乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
(5)炼苗
将步骤(4)得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天。
(6)穴盘移栽
炼苗结束后,将组培苗从培养瓶内取出,洗净根部存留的培养基,避免伤害组培苗的幼根,然后移栽到盛有基质的72孔的穴盘中(见图6),移栽基质为重量75%泥炭加25%蛭石,移栽基质的含水量为60%-70%,移栽后覆塑料薄膜保温保湿。
(7)穴盘苗管理
组培苗移栽后保持白天温度20~30℃,夜间最低温度不低于12℃,湿度90%以上;10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件,移栽2周后开始施用肥料,在此条件下培养30-40天(见图7、8)。施用的肥料为氮、磷、钾复合肥,采用两种比例为20:10:20或14:0:14,两种比例氮磷钾复合肥分别用重量2000倍液交替施用。
实施例2
(1)无菌材料的获得
采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾,用自来水流水冲洗20min,然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中,依次用70%酒精浸泡30s,0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡10分钟,再用无菌水冲洗6遍后待用。
(2)不定芽的诱导分化
将步骤(1)得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片,再切掉花蕾表面小花及苞片基部,剩余花托部分,将花托切成4块,接种于不定芽诱导分化培养基上(同实施例1),将培养瓶置于温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天的条件下进行培养,1-2周后外植体膨大,3周后出现黄绿色愈伤组织,5周后可分化出不定芽。
(3)不定芽的增殖
将步骤(2)得到的不定芽接种到增殖培养基(同实施例1)上进行增殖培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,4周继代培养一次,增殖系数为5。
(4)不定芽的生根
将步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基(同实施例1)上进行生根诱导培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,10天后生根率可达99%,生根数目平均3-4条/株,根长度为0.5-1.0cm。
(5)炼苗
将步骤(4)得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天。
(6)穴盘移栽
炼苗结束后,将组培苗从培养瓶内取出,洗净根部存留的培养基,避免伤害组培苗的幼根,然后移栽到盛有基质的105孔穴盘中,移栽基质为重量75%泥炭加25%蛭石,移栽基质的含水量为60%-70%,移栽后覆塑料薄膜保温保湿。
(7)穴盘苗管理
组培苗移栽后保持白天温度20~30℃,夜间最低温度不低于12℃,湿度90%以上;10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件,移栽2周后开始施用氮、磷、钾复合肥(同实施例1),在此条件下培养30-40天。
实施例3
(1)无菌材料的获得
采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾,用自来水流水冲洗20min,然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中,依次用70%酒精浸泡30s,0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡10分钟,再用无菌水冲洗4遍后待用。
(2)不定芽的诱导分化
将步骤(1)得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片,再切掉花蕾表面小花及苞片基部,剩余花托部分,将花托切成4块,接种于不定芽诱导分化培养基上(同实施例1),将培养瓶置于温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天的条件下进行培养,1-2周后外植体膨大,3周后出现黄绿色愈伤组织,5周后可分化出不定芽。
(3)不定芽的增殖
将步骤(2)得到的不定芽接种到增殖培养基(同实施例1)上进行增殖培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,4周继代培养一次,增殖系数为5。
(4)不定芽的生根
将步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基(同实施例1)上进行生根诱导培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,10天后生根率可达99%,生根数目平均3-4条/株,根长度为0.5-1.0cm。
(5)炼苗
将步骤(4)得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天。
(6)穴盘移栽
炼苗结束后,将组培苗从培养瓶内取出,洗净根部存留的培养基,避免伤害组培苗的幼根,然后移栽到盛有基质的128孔穴盘中,移栽基质为重量75%泥炭加25%蛭石,移栽基质的含水量为60%-70%,移栽后覆塑料薄膜保温保湿。
(7)穴盘苗管理
组培苗移栽后保持白天温度20~30℃,夜间最低温度不低于12℃,湿度90%以上;10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件,移栽2周后开始施用氮、磷、钾复合肥(同实施例1),在此条件下培养30-40天。
Claims (7)
1.一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)无菌材料的获得
采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾,用自来水流水冲洗20min,然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中,依次用70%酒精浸泡30s,0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡8-10分钟,再用无菌水冲洗4-6遍后待用;
(2)不定芽的诱导分化
将步骤(1)得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片,再切掉花蕾表面小花及苞片基部,剩余花托部分,将花托切成4块,接种于不定芽诱导分化培养基上,将培养瓶置于温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天的条件下进行培养,1-2周后外植体膨大,3-4周后出现黄绿色愈伤组织,4-6周后可分化出不定芽;
(3)不定芽的增殖
将步骤(2)得到的不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,4周继代培养一次,增殖系数为3-6;
(4)不定芽的生根
将步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基上进行生根诱导培养,培养室内温度25℃,光照强度1500-2500lx,光照时间14小时/天,10天后生根率可达99%,生根数目平均3-4条/株,根长度为0.5-1.0cm;
(5)炼苗
将步骤(4)得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天;
(6)穴盘移栽
炼苗结束后,将组培苗从培养瓶内取出,洗净根部存留的培养基,避免伤害组培苗的幼根,然后移栽到盛有基质的穴盘中,穴盘填充的移栽基质含水量为60%-70%,移栽后覆塑料薄膜保温保湿;
(7)穴盘苗管理
组培苗移栽后保持白天温度20~30℃,夜间最低温度不低于12℃,湿度90%以上;10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件,移栽2周后开始施用肥料,在此条件下培养30-40天。
2.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:所述的不定芽诱导分化培养基是在1/2MS培养基中添加2.0-10.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
3.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:所述的不定芽增殖培养基是在MS培养基中添加0.5-2.0mg/L 6-苄基腺嘌呤或0-10.0mg/L激动素、0.1-0.5 mg/L吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
4.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:所述的不定芽生根培养基是在1/2MS培养基中添加0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸或0.05-0.5mg/L 吲哚丁酸或0.01-0.02mg/L 萘乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉,调节pH为5.8-6.2。
5.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:所述的育苗穴盘规格为72~128孔。
6.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:移栽基质为重量75%泥炭加25%蛭石。
7.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法,其特征在于:移栽2周后施用肥料为氮、磷、钾复合肥,采用两种比例为20:10:20或14:0:14,两种比例氮磷钾复合肥分别用2000倍液交替施用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20120418 |