CN103262796A - 一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，包括以下步骤：切取外植体并灭菌；初代培养：初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；继代培养：继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；生根培养：生根培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；洗掉培养基后保持温度和湿度进行炼苗移植。本发明简便易行、程序简单、工效高，能有效保持亲本的优良性状，该方法提高了组培苗的分化率，具有增殖速度快，生根率高、成活率高，成本低的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法。
背景技术
香石竹（Dianthus caryophyllus L）又名康乃馨，是石竹科Caryophyllaceae，石竹属多年生草本宿根植物。原产于北欧及南欧。该属约有80种植物，为英属爱尔兰、北欧及南欧的土产植物，喜阴凉、干燥、阳光充足及通风良好的生态环境。香石竹的耐寒性好，但耐热性却较差，最适生长温度为14～21℃，温度超过27℃或低于14℃时，植株生长缓慢。适宜栽植在富含腐殖质、排水良好的石灰质土壤，喜肥。
香石竹因其花色娇艳且具芳香、单朵花花期长，是世界名贵鲜花品种之一，市场前景广阔。盆栽香石竹, 盆上部分不超过25cm, 开花期间花色丰富、绚丽、明亮, 可摆在居室、窗台、阳台作为装饰及点缀。
传统生产上盆栽香石竹主要依靠侧芽扦插来扩大繁殖，在这种长期的营养繁殖过程中，易造成病毒侵染种源退化等问题，而且种子的有性繁殖又容易产生品种间杂交，造成花色混乱。
发明内容
本发明的目的即在于克服现有技术的不足，提供一种简便易行、程序简单、工效高，能有效保持亲本的优良性状，该方法提高了组培苗的分化率，具有增殖速度快，生根率高、成活率高，成本低的特点。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌，它又包括以下子步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗1h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为70%的酒精消毒35s；
（3）用无菌水冲洗4次，放入浓度为0.1%的升汞中灭菌8min；
（4）用无菌水冲洗4次，置于无菌纸上晾干。
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为1.5～2.5cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度1800～2200LX，光照时间15～20h，温度23～25℃，培育时间30～60d，初代培养可诱导丛生芽产生；
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为1.5～2.5cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为25～45d；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为5～7d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养2～5d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度和湿度，分别为18～28℃、55～65%，移植于腐殖土混合蛭石基质中，混合比例为1～2:1。
本发明的有益效果是：简便易行、程序简单、工效高，能有效保持亲本的优良性状；该方法使分化率达到100%，月增殖系数达到20以上，生根率达到100%，炼苗成活率达100%。
附图说明
图1为初代培养后外植体上长出丛生芽示意图；
图2为继代培养后外植体上长出大量丛生芽示意图；
图3为生根培养后得到的香石竹组培苗示意图；
图4为香石竹组培苗炼苗移植后室外生长状态示意图。
具体实施方式
下面结合具体实施例和附图进一步描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。
【实施例1】一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌，它又包括以下子步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗1h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为70%的酒精消毒35s；
（3）用无菌水冲洗4次，放入浓度为0.1%的升汞中灭菌8min；
（4）用无菌水冲洗4次，置于无菌纸上晾干。
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为1.5cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度2200LX，光照时间15h，温度23℃，培育时间60d，初代培养可诱导丛生芽产生，如图1所示。
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为1.5cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间25d，繁殖系数可达60以上，继代培养可诱导大量丛生芽产生，如图2所示；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为5d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗，如图3所示；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养2d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度18℃、湿度65%，移植于腐殖土混合蛭石基质中，混合比例为1:1，如图4所示，炼苗移植后的组培苗生长旺盛，长势良好。
【实施例2】一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌，它又包括以下子步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗2h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为75%的酒精消毒28s；
（3）用无菌水冲洗5次，放入浓度为0.2%的升汞中灭菌5min；
（4）用无菌水冲洗6次，置于无菌纸上晾干。
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为2.5cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度1800LX，光照时间20h，温度25℃，培育时间30d，初代培养可诱导丛生芽产，如图1所示。
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为1.5cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为45d，繁殖系数可达60以上，继代培养可诱导大量丛生芽产生，如图2所示；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为7d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗，如图3所示；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养5d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度28℃、湿度55%，移植于腐殖土混合蛭石基质中，混合比例为2:1，如图4所示，炼苗移植后的组培苗生长旺盛，长势良好。
【实施例3】一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌，它又包括以下子步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗1.5h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为72.5%的酒精消毒30s；
（3）用无菌水冲洗5次，放入浓度为0.15%的升汞中灭菌6min；
（4）用无菌水冲洗5次，置于无菌纸上晾干。
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为2cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度2000LX，光照时间18h，温度24℃，培育时间50d，初代培养可诱导丛生芽产生，如图1所示。
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为1.8cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为40d，繁殖系数可达60以上，继代培养可诱导大量丛生芽产生，如图2所示；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为6d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗，如图3所示；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养2.5d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度24℃、湿度60%，移植于腐殖土混合蛭石基质中，混合比例为1.5:1，如图4所示，炼苗移植后的组培苗生长旺盛，长势良好。
【实施例4】一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌，它又包括以下子步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗1h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为75%的酒精消毒28s；
（3）用无菌水冲洗6次，放入浓度为0.2%的升汞中灭菌5min；
（4）用无菌水冲洗5次，置于无菌纸上晾干。
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为2cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度2200LX，光照时间16h，温度25℃，培育时间30d，初代培养可诱导丛生芽产生，如图1所示。
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为2.3cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为40d，繁殖系数可达60以上，继代培养可诱导大量丛生芽产生，如图2所示；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为7d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗，如图3所示；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养3d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度20℃、湿度55%，移植于腐殖土混合蛭石基质中，混合比例为2:1，如图4所示，炼苗移植后的组培苗生长旺盛，长势良好。
Claims (3)
1.一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，其特征在于：它包括以下步骤：
S1：切取外植体并灭菌；
S2：初代培养：将灭菌后的侧芽切割成直径为1.5～2.5cm的带芽茎段，接种于初代培养基中培养，其中，初代培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培养条件为：光照强度1800～2200LX，光照时间15～20h，温度23～25℃，培育时间30～60d，初代培养可诱导丛生芽产生；
S3：继代培养：切割丛生芽，分成直径为1.5～2.5cm的带芽茎段，接种于继代培养基中培养，继代培养基为MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为25～45d；
S4：生根培养：将增殖后的不定芽转接于生根培养基中培养，生根培养基为MS+NAA 0.2mg/L+IAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，培育时间为5～7d，生根培养后得到生根强壮的香石竹组培苗；
S5：炼苗移植：将生根的组培苗丛培养室取出，置于室外培养2～5d，洗掉组培苗上的培养基，保持温度和湿度，分别为18～28℃、55～65%，移植于基质中。
2.根据权利要求1所述的一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，其特征在于：步骤S1中所述的切取外植体并灭菌的步骤包括以下步骤：
（1）选取无病害的盆栽香石竹侧芽，于流水中冲洗1～2h后，吸干水分；
（2）放入超净工作台，用浓度为70～75%的酒精消毒28～35s；
（3）用无菌水冲洗4～6次，放入浓度为0.1～0.2%的升汞中灭菌5～8min；
（4）用无菌水冲洗4～6次，置于无菌纸上晾干。
3.根据权利要求1所述的一种组织培养快速繁育盆栽香石竹的方法，其特征在于：步骤S5 中所述的移植基质为腐殖土混合蛭石，混合比例为1～2:1。
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