CN104126506A - 一种美国红火箭紫薇的组织培养方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种美国红火箭紫薇的组织培养方法,包括消毒灭菌、初代培养、继代培养、生根培养和炼苗移栽。以美国紫薇当年生嫩枝条为外植体,经过无菌接种于诱芽培养基上,形成丛生芽后,利用丛生芽再进行继代培养,然后转接到生根培养基上进行生根诱导形成生根苗,生根苗经过炼苗驯化得到再生植株。本发明的方法使美国紫薇的繁殖更为容易,打破了季节与气候的限制,繁殖周期缩短,再生植株成活率得到提高。

Description

一种美国红火箭紫薇的组织培养方法
技术领域
[0001] 本发明涉及植物无性繁殖领域,具体涉及一种美国红火箭紫薇的组织培养方法。
背景技术
[0002] 美国红火箭紫薇是紫薇中花色最鲜红的品种之一,花鲜红如国旗,花簇可达24英寸,花量大,花色艳丽,片植的色块开花时一片火海。花在晴热天为猩红色,多云凉爽天花色略淡,可能有白色斑,新叶微红,老叶绿色略带红晕,叶芽在开花前为深红色,开花时变成樱桃红。6月初始花,可连续开到霜降,花期进行修剪,可多次开花。适应性广,抗逆性强。适合于孤植、丛植,培植为花篱,可制作盆景和桩景。美国红火箭紫薇的组织培养方法是常用的培育繁殖方法,但是现有的组织培养方法存活率较低,容易受季节限制。
发明内容
[0003] 发明目的:为了克服现有技术中存在的不足,本发明提供一种美国红火箭紫薇的组织培养方法法。
[0004] 技术方案:为实现上述目的,本发明提供的一种美国红火箭紫薇的组织培养方法,包括以下步骤:
O消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条,用漂白粉浸泡10分钟后,流水冲洗20分钟,在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟,再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟,倒去灭菌液,用预先准备好的无菌水冲洗4〜5遍,浙干水后,将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上;
2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上,培养25〜30天左右,接种培养基成份为:MS基本培养基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5 〜7g/L,PH 值控制在 5.5〜5.8 ;
3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5〜7g/L,PH值5.6〜5.7,MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15〜20分钟,在温度25±2。。,光照强度20001uX,每日光照12小时,至28〜32天,小芽基部形成愈伤组织,并形成丛生芽,丛生小芽达到l_2cm。一般第一次继代培养时增殖率2〜3倍左右,经2〜3次继代培养后增殖倍数可达到4-5倍左右。
[0005] 4)生根培养:当小苗长至2〜3 cm时,转移到生根培养基上培养:生根培养基配方为 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L,温度控制在 25 〜28V’ pH控制在5.5〜5.7 ;光照强度为lOOOlux,每日光照10-12小时。一般15-20天左右可见白色短根形成,经20-25天左右,即可进行炼苗移栽。
5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗,先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3〜5天,然后进行温床过渡移栽。过渡苗床(即温床)建在普通单体的塑料大棚内。移栽的过程中尽量减少伤根,并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液。控制温度在2(Γ30度,过渡移栽48〜52天,可以上盆移栽。
[0006] 有益效果:本发明的方法使美国紫薇的繁殖更为容易,打破了季节与气候的限制,繁殖周期缩短,再生植株成活率得到提高,成活率能够达到95%以上。
具体实施方式
[0007] 下面结合实施例对本发明作更进一步的说明。
[0008] 一种美国红火箭紫薇的组织培养方法,包括以下步骤:
O消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条,用漂白粉浸泡10分钟后,流水冲洗20分钟,在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟,再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟,倒去灭菌液,用预先准备好的无菌水冲洗4〜5遍,浙干水后,将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上;
2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上,培养25〜30天左右,接种培养基成份为:MS基本培养基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5 〜7g/L,PH 值 5.5 左右;
3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5〜7g/L,PH值5.6左右,MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15〜20分钟,在温度25±2°C,光照强度20001uX,每日光照12小时,至30天左右,小芽基部形成愈伤组织,并形成丛生芽,丛生小芽达到l_2cm。一般第一次继代培养时增殖率2〜3倍左右,经2〜3次继代培养后增殖倍数可达到4-5倍左右。
[0009] 4)生根培养:当小苗长至2〜3 cm时,转移到生根培养基上培养:生根培养基配方为 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L,温度控制在 25 〜28°C,光照强度为lOOOlux,每日光照10-12小时。一般15-20天左右可见白色短根形成,经20-25天左右,即可进行炼苗移栽。
5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗,先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3〜5天,然后进行温床过渡移栽。过渡苗床(即温床)建在普通单体的塑料大棚内。移栽的过程中尽量减少伤根,并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液。控制温度在2(Γ30度,过渡移栽50天左右,可以上盆移栽。
[0010] 上述步骤相同,每个阶段的培养基配方如下:
进行接种培养时接种培养基为=MS基本培养基,附加2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5g/L,PH 值 5.5 ;
继代培养基组分:MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖 30g/L +琼脂 7g/L,PH 值 5.6 ; 生根培养基配方为1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L。
[0011] 选取1000株植株进行组织培养,最终成活978株,成活率达到97.8%。
[0012] 以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出:对于本技术领域的技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种美国红火箭紫薇的组织培养方法,其特征在于:包括以下步骤: 1)消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条,用漂白粉浸泡10分钟后,流水冲洗20分钟,在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟,再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟,倒去灭菌液,用预先准备好的无菌水冲洗4〜5遍,浙干水后,将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上; 2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上,培养25〜30天; 3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5〜7g/L,PH值5.6〜5.7,MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15〜20分钟,在温度25±2。。,光照强度20001uX,每日光照12小时,至28〜32天,小芽基部形成愈伤组织,并形成丛生芽,丛生小芽达到l_2cm ; 4)生根培养:当小苗长至2〜3 cm时,转移到生根培养基上培养,温度控制在25〜28°C,光照强度为lOOOlux,每日光照10-12小时经20-25天; 5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗,先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3〜5天,然后进行温床过渡移栽,过渡温床建在普通单体的塑料大棚内,移栽的过程中尽量减少伤根,并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液,控制温度在2(Γ30度,过渡移栽48〜52天,上盆移栽。
2.根据权利要求1所述的美国红叶紫薇的嫁接繁殖技术,其特征在于:所述接种培养基成份为=MS 基本培养基,附加 2,4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂5〜7g/L,PH值5.5〜5.8。
3.根据权利要求1所述的美国红火箭紫薇的组织培养方法,其特征在于:所述生根培养基的配方为1/3重量含量的MS基本培养基,附加NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L, PH值为5.5〜5.7。
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