CN1286905A

CN1286905A - 非洲菊工厂化试管快繁方法

Info

Publication number: CN1286905A
Application number: CN 99118995
Authority: CN
Inventors: 李荣旗; 刘蕾; 王玉忠; 林翔鹰; 王敏
Original assignee: BEIJING JINXIUDADI AGRICULTURE Co Ltd
Current assignee: BEIJING JINXIUDADI AGRICULTURE Co Ltd
Priority date: 1999-09-07
Filing date: 1999-09-07
Publication date: 2001-03-14
Anticipated expiration: 2019-09-07
Also published as: CN1139318C

Abstract

本发明涉及一种非洲菊大规模工厂化试管快繁方法,包括以非洲菊幼小花蕾为外植体,对其进行脱分化及再分化的诱导,利用组培技术得到的试管成苗,通过使用100%蛭石作为基质,过渡一个月,再经过三至四个月的过渡培养,就可得到5－6片叶,株高10－13厘米的成株,半年后开花,可达销售水平的商品苗。本方法成本低,简便易行,节约土地,周期短见效快,后代遗传性稳定不会出现性状分离,可四季生产,是一种适于工厂化开发生产非洲菊鲜切花及盆栽花的有效方法。

Description

非洲菊工厂化试管快繁方法

本发明涉及试管内快速繁殖非洲菊微型种苗的方法。

非洲菊又名扶郎花是一种极具观赏价值的花卉，切花园艺品种很多有白、橙、红、黄、粉等多种颜色，四季常开。经检索国内外未见申报涉及非洲菊组培和工厂化育苗技术的专利。常规的繁殖方法有分株繁殖、播种繁殖，速度较慢不利于快速大面积生产，且播种繁殖易产生性状分离。

本发明目的在于提供一种适于非洲菊快速繁殖的方法，该方法具有繁殖速度快，适于大面积生产，性状稳定等特点。

本发明是这样实现的：它包括非洲菊组培试管苗的快繁过程和试管苗过渡培养过程。

上述的试管苗快繁过程包括非洲菊外植体的采集，外植体的消毒、接种，外植体的脱分化、再分化、试管苗的继代及试管苗的生根过程。组培试管苗的快繁过程包括：

1)、非洲菊外植体的采集：

于春秋两季选择萼片包裹未开放的花蕾，直径范围为0.1～2厘米，最适0.3～1厘米，生长健壮且无病虫侵害的植株花蕾为外植体，流水冲洗。

2)、外植体的消毒、接种：

A、外植体的消毒：用75％的酒精浸泡30秒～2分钟，然后用0.1％的新洁尔灭消毒5～15分钟，再用0.1％的升汞消毒3～10分钟，用无菌水冲洗4-5遍。

B、接种：培养基MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM上。

3)、外植体的脱分化、再分化及试管苗的继代。

A、花蕾脱分化：接种在MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM的培养基上，培养基最适为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，置于光下培养。一个月后，即产生愈伤组织。

B、愈伤组织再分化：愈伤组织接种在MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~5PPM培养基上，培养基最适为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，经过30~40天的培养，可转绿，产生半透明颗粒状生长点称之为球状体。

C、试管苗继代：出现球状体后立即将其转入MS+BA0.5~3PPM+NAA0.1~0.5PPM的生芽培养基上生成不定芽，当株高达1～3CM时可用上述培养基进行继代培养。

4)试管苗的生根

将株高2-3厘米，具有3-4片叶的健壮试管苗从分化培养基移至1/2MS+NAA0.3~2PPM或1/2MS+IBA0.1~1PPM培养基中进行生根，加少量活性炭(每升培养基中加0.5-1.5克)可提高生根效率。大约15天后基部即可生出3-5条根，长度0.2~2CM。

上述试管苗过渡培养过程指：

1)无菌苗过渡：选择已生根的无菌苗，转移至100％蛭石基质中继续培养，第一周弱光照射，湿度60～90％，温度控制在15-28℃。

2)经上述过渡的试管苗暴露到外界环境中，加强光照，每周施一次全营养液。营养液各元素浓度为，N：224PPM、P：42PPM、K：315PPM、Ca：162PPM、Mg：50、S：65PPM、Fe 3PPM、Mn：0.5PPM、B：0.5PPM、Cu：0.02、Zn：0.05、Mo：0.01。经过3-4个月的培养，可长成具有5-6片叶，株高10-13厘米的健壮植株。过渡成活后的试管苗也可定植于草炭∶马粪∶珍珠盐=3∶1∶1的营养土中，每周只需浇一次清水，半年施一次全营养液补肥。本发明的优点和效果1．本发明提供了一整套非洲菊种苗生产的工艺流程，可大规模开发种苗生产，简便易行，方便适用。2．采用组培快繁技术和无土栽培技术相结合，可以在温室内四季生产，节约土地。3．繁殖速度快效率高，一个月为一个周期，繁殖系数为3，是常规分株繁殖年产量的几万倍，单株组培苗成本仅0.2～0.3元，经济效益可观。4．无性繁殖观赏花卉，可完全继承原种优良的遗传性状，避免杂交后代常出现的性状分离现象，安全可靠。

以下为本发明的实施例：一．组培试管苗的快繁过程：1．外植体的采集：选择直径大小在0.3～1cm的非洲菊小花蕾(此时的花蕊由萼片包裹)作为培养材料，由于其叶片基生花朵位于叶片基部叶腋处离土较近，养护不精心时极易污染污物不易消毒处理，采集前可加适当的袋罩保持花蕾的清洁。2．材料清洁消毒处理：新采集的外植体流水冲洗表面污物，无菌消毒-75％医用酒精杀菌一分钟，在用0.1％新洁尔灭消毒10分钟，然后用0.1％升汞继续消毒5分钟，无菌水冲洗4～5次，无菌滤纸吸干材料表面水分。3．接种离体无菌培养脱分化：消毒接种用具，在洁净工作台上小心将非洲菊小花蕾外包裹的萼片剥除，露出内部花蕊并将其切分成0.2~0.3mm的小块接种于MS+BA10PPM+NAA0.5PPM的培养基上，一周就可启动花蕊胀大转绿，一个月后可见白色或乳白色半透明愈伤组织出现，并慢慢转绿。4．愈伤组织再分化：转绿后的愈伤组织待发现有绿色半透明球状体出现时立即转入MS+BA2PPM+NAA0.2PPM使胚性愈伤分化出苗。5．试管苗继代培养：成苗后的非洲菊株高2～3CM，可利用MS+BA1~3PPM+NAA0.1~0.5PPM继代培养以扩大基数，30天为一个周期，3倍增值。6．试管苗生根：株高2～3CM的健壮试管苗可进入生根培养，此时应使用1/2MS+NAA0.3~2PPM或1/2MS+IBA0.1~1PPM十五天后根长1CM以上可以过渡移栽。二．试管苗过渡培养过程：

生根后的组培苗移栽前先打开瓶盖练苗一天，然后从培养瓶中取出，小心洗净根部培养基可在蛭石中过渡一个月，其中每周浇一次全营养液，三十天后可定植入土或上盆。基质比例草炭∶马粪∶珍珠盐=3∶1∶1。非洲菊喜温暖，阳光充足，通风良好的环境最适温20～25。

Claims

1．非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于包括非洲菊组培试管苗的快繁过程和试管苗过渡培养过程。

2．根据权利要求1所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的试管苗快繁过程包括非洲菊外植体的采集，外植体的消毒、接种，外植体的脱分化、再分化、试管苗的继代及试管苗的生根过程。

3．根据权利要求1或2所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的试管苗快繁过程包括：

1)非洲菊外植体的采集：

生长健壮且无病虫侵害的非洲菊，在春秋季节开花时选择由萼片包裹未开放的花蕾作为接种材料，花蕾的直径范围为0.1～2厘米，流水冲洗。

2)外植体的消毒、接种：

外植体的消毒：用75％的酒精浸泡30秒～2分钟，然后用0.1％的新洁尔灭消毒5～15分钟，再用0.1％的升汞消毒3～10分钟，用无菌水冲洗4-5遍。无菌条件下将花蕾萼片剥除露出花蕊，将小花蕊切成0.2~0.3厘米小块，接种于培养基上诱导愈伤。

3)外植体的脱分化、再分化及试管苗的继代。

A．花蕾脱分化：消毒后的外植体接种在脱分化培养基上，脱分化培养基为MS+BA1~10PPM+NAA0.1~5PPM，置于光下培养。大约一个月左右，即可产生愈伤组织。

B．愈伤组织再分化：愈伤组织接种在MS+BA0.2~10PPM+NAA0.1~2PPM培养基上经过30~40天的培养，可转绿，产生半透明颗粒状生长点称之为球状体。

C．试管苗继代：出现球状体后立即将其转入MS+BA0.5~3PPM+NAA0.1~0.5的生芽培养基上生成不定芽丛，当主芽高达1～3CM时，可将芽丛切分用上述培养基进行继代培养。

3)试管苗的生根

将株高3-4厘米，具有3-4片叶的健壮试管苗从分化培养基移至1/2MS+NAA0.3~2PPM或1/2MS+IBA0.1~1PPM培养基中进行生根，加少量活性炭。10~15天后基部即可生出3-5条根，长度0.2~2CM。

4．根据权利要求1或2或3所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的试管苗快繁过程中作为外植体采集的花蕾的直径最适为0.3~1CM。

5．根据权利要求1或2或3所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的试管苗快繁过程中外植体的脱分化、再分化及试管苗的继代时，脱分化培养基最适浓度为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，愈伤组织接种的最佳培养基为MS+BA10PPM+NAA0.2PPM，生芽培养基最适为1/2MS+NAA0.5PPM。

6．根据权利要求1所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于过渡培养过程采用无土栽培方法，包括：

1)无菌苗过渡：选择已生根的无菌苗，转移至100％蛭石基质中继续培养，第一周弱光照射，湿度60～90％，温度控制在15~28℃。

2)经上述过渡的试管苗暴露到外界环境中，加强光照，保持湿润，每周施一次全营养液。

7．根据权利1或5中所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的过渡培养过程中，过渡成活后的试管苗也可定植于草炭∶马粪∶珍珠盐=3∶1∶1的营养土中，每周只需浇一次清水，半年施一次全营养液补肥。

8．根据权利1或6中所述的非洲菊工厂化试管快繁方法，其特征在于所述的过渡培养过程中，所施全营养液各元素浓度为：N：224PPM、P：42PPM、K：315PPM、Ca：162PPM、Mg：50、S：65PPM、Fe 3PPM、Mn：0.5PPM、B：0.5PPM、Cu ：0.02、Zn：0.05、Mo：0.01。