CN102307566B

CN102307566B - 美白剂、抗老化剂和抗氧化剂

Info

Publication number: CN102307566B
Application number: CN2010800070216A
Authority: CN
Inventors: 铃木理香子; 长谷川圣高; 佐藤洁; 横井时也; 草苅健
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 2009-02-09
Filing date: 2010-02-03
Publication date: 2013-07-10
Anticipated expiration: 2030-02-03
Also published as: US20110286953A1; EP2394635A1; EP2394635B1; TWI466686B; CN102307566A; EP2394635A4; WO2010090001A1; KR101730189B1; TW201031433A; KR20110115128A; US9364423B2; JP2010180189A; HK1162138A1; JP5550839B2; US20130315850A1

Abstract

本发明的课题是提供具有优异的美白作用、在淡化日晒后的色素沉着、斑点、雀斑、黄褐斑等、美白方面具有优异的效果的美白剂，以及具有防止、抑制由活性氧(自由基)造成的皮肤老化和/或皮肤病的优异的自由基捕捉能力的、安全性高的抗氧化剂、抗老化剂。作为本发明的解决课题的方法是，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的美白剂、抗氧化剂和抗老化剂。

Description

美白剂、抗老化剂和抗氧化剂

技术领域

本发明涉及美白剂、抗老化剂和抗氧化剂，更详细地说，涉及包含植物提取物作为有效成分的美白剂、抗老化剂、抗氧化剂以及包含这些美白剂、抗老化剂、抗氧化剂的皮肤外用剂。

背景技术

关于皮肤的斑点等的发生机制尚存在部分不明，一般认为，由于激素的异常和/或日光中的紫外线的刺激而形成黑素，该黑素在皮肤内异常沉着。造成皮肤着色的该黑素在位于表皮与真皮之间的黑素细胞(melanocyte)内的黑素体(melanosome)中生产，生成的黑素通过渗透作用向相邻细胞扩散。

推定该黑素细胞内的生物化学反应如下。即，黑素的生成过程，是作为必需氨基酸的酪氨酸在作为酶的酪氨酸酶的作用下变成多巴醌(dopaquinone)，该多巴醌通过酶的或非酶的氧化作用变成黑色的黑素的过程。

关于抑制上述黑素的生成的美白剂，一直以来来源于植物的提取物由于可期待其安全性和/或对皮肤的刺激的稳定性，因而进行了各种开发(参考例如专利文献1～4)。

另一方面，紫外线会产生活性氧是公知的。在活性氧中，自由基型活性氧一旦与脂质等氧化性底物反应，就会诱发连锁的氧化反应。因此，成为自由基的活性氧会放大对皮肤等身体组织的损伤。

皮肤由于经常暴露于氧、紫外线，因而是由自由基造成的氧化应激损伤最大的组织。近年来，紫外线产生的各种活性氧引起皮脂、脂质的过氧化、蛋白变性、酶抑制等，从而短期地诱发皮肤炎症等。另外，认为长期地会造成老化和/或癌等。

另外，认为活性氧、过氧化脂质还与特应性皮炎、接触性皮炎、银屑病等皮肤病有关。由此可见，活性氧(自由基)与皮肤老化和/或皮肤病深刻相关。

具备捕捉自由基的能力的物质能够使自由基连锁反应抑制或停止，相当于被称为例如抗氧化剂的物质。

因此，配合有抗氧化剂的皮肤外用剂可以期待预防、改善由光氧化应激造成的皮肤老化(例如，斑点、皱纹、松弛等)的效果。另外，作为与自由基相关的各种皮肤病用皮肤外用剂，也可以期待预防、改善效果。

作为抗氧化剂已知的维生素E、维生素C是生物体内的自由基捕捉型抗氧化物质。另外，还已知BHT、BHA这样的合成抗氧化物质。另外，作为来源于植物的抗氧化剂，已报告香菇、金针菇、丛生口蘑、云芝、松蕈、灵芝、栓菌、滑菇、其他担子菌类的提取物(专利文献6～8)。而且，还报告了包含玄参科毛蕊花属植物的提取物的抗氧化剂(专利文献9)、包含紫草科破布木属植物的提取物的抗氧化剂(专利文献10)。

另外，专利文献5中作为含有芹菜素和/或穗花杉双黄酮的植物提取物之一列举了松叶蕨科松叶蕨的溶剂提取物。专利文献5中没有记载该植物提取物具有黑素生成促进作用的数据，因而在专利文献5中，松叶蕨的溶剂提取物本身的作用不明。本发明涉及松叶蕨提取物的黑素生成抑制作用、自由基捕捉型抗氧化作用，专利文献5的记载与本发明的内容完全不同。

专利文献1：日本特开平8-310939号公报

专利文献2：日本特开平7-89843号公报

专利文献3：日本特开平9-30954号公报

专利文献4：日本特开2003-73224号公报

专利文献5：日本特开平9-263534号公报

专利文献6：日本特开平5-317016号公报

专利文献7：日本特开平6-65575号公报

专利文献8：日本特开昭59-124984号公报

专利文献9：日本特开平11-171723号公报

专利文献10：日本特开平11-171720号公报

发明内容

发明所要解决的课题

如上所述，关于来源于植物的美白剂、抗老化剂，要求在新的植物中发现新的实现美白效果、抗老化效果的植物。本发明是针对这样的现有状况而做出的，目的是提供新的来源于植物的美白剂、抗老化剂和抗氧化剂。

用于解决课题的方法

本发明者们鉴于上述现状反复进行了锐意研究，结果发现，特定的植物提取物具有优异的美白作用和抗老化作用，从而完成了本发明。

本发明涉及一种美白剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

本发明涉及一种美白用皮肤外用剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

本发明涉及一种抗老化剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

本发明涉及一种抗老化用皮肤外用剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

本发明涉及一种抗氧化剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

本发明涉及一种抗氧化用皮肤外用剂，其特征在于，包含松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物。

发明的效果

本发明的美白剂具有优异的美白作用，在淡化日晒后的色素沉着、斑点、雀斑、黄褐斑等、美白的方面具有优异的效果。

本发明的抗老化剂和抗氧化剂具有防止、抑制活性氧(自由基)造成的皮肤老化和/或皮肤病的优异的自由基捕捉能力。

本发明的美白用皮肤外用剂通过涂抹于肌肤来发挥优异的美白效果，在淡化日晒后的色素沉着、斑点、雀斑、黄褐斑等、美白的方面具有优异的效果，安全性也高。

本发明的抗老化用皮肤外用剂和抗氧化用皮肤外用剂通过涂抹于肌肤来发挥优异的自由基捕捉能力，能够防止、抑制活性氧(自由基)造成的皮肤老化和/或皮肤病，安全性也高。

附图说明

图1是显示本发明的植物提取物的黑素生成抑制作用的结果的图。

图2是显示本发明的植物提取物的自由基清除作用的结果的图。

具体实施方式

以下对本发明进行详述。

本发明中使用的植物是属于松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)的植物，是蕨类植物的同类。作为松叶蕨属植物，已知松叶蕨(Psilotum nudum)、Psilotum complanatum、Psilotum flabellatum、Psilotum flaccidum、Psilotum triquetrum、Psilotum truncatum等。

作为在日本国内有分布的品种，可列举松叶蕨(Psilotum nudum)，松叶蕨广泛分布于日本中部以南、中国台湾、中国南部、东南亚等。在本发明中，作为属于松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)的植物，特别优选松叶蕨(Psilotum nudum)。

本发明的植物提取物具有美白作用、抗氧化作用、抗老化作用的报告到目前为止没有，均是由本发明者们首次发现的。

本发明中使用的松叶蕨属植物的提取物可以通过将全植株适当地干燥或粉碎之后用溶剂进行提取来获得。提取既可以在室温静置下进行，也可以根据需要通过加热、搅拌、加热回流来促进提取。所得的提取液可以直接使用，或适当进行过滤、浓缩、脱色等处理后使用。另外，还可以暂时除去溶剂然后再溶解到与提取所用的溶剂不同的溶剂中使用。还可以将所得的提取物通过活性炭和/或柱层析等进一步纯化后使用。

作为提取部位，除了可以使用全植株以外，还可以采集特定的部位进行提取。

本发明中使用的提取溶剂只要是通常用于提取的溶剂即可，特别是可以单独或组合使用甲醇、乙醇、1，3-丁二醇、丙二醇、双丙甘醇等醇类、含水醇类、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，特别优选甲醇、乙醇、1，3-丁二醇、丙酮等。另外，还可以将这些提取物通过溶剂分级、活性炭处理、柱层析等进行纯化后使用。

本发明的美白剂、抗氧化剂和抗老化剂以包含松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物为特征，但可以在不损害本发明的效果的范围内含有其他各种成分。

本发明的美白剂、抗老化剂可以配合在皮肤外用基剂中，制成美白用皮肤外用剂、或基于抗氧化作用的抗老化用皮肤外用剂。这些皮肤外用剂特别适合用于化妆料、药品、准药品等领域。

包含本发明的美白剂、抗老化剂的皮肤外用剂中的植物提取物的配合量，作为来源于松叶蕨属植物的成分的干燥残分，通常为0.00001质量％以上，优选为0.0001质量％以上。如果配合量过少，则不能充分发挥效果。上限在不损害本发明的效果的范围内不特别限定，但从即使过量配合也不能获得与增量相应的显著效果，而且有时还会对制剂设计和/或使用性等带来不良影响等方面出发，通常为10质量％以下，更优选为5质量％以下。

包含本发明的美白剂、抗老化剂的皮肤外用剂通过将本发明的美白剂、抗老化剂配合在皮肤外用基剂中来制造。皮肤外用剂中除了上述必需成分以外，可以在不损害本发明的效果的范围内根据需要适当配合通常用于化妆品、药品等皮肤外用剂的成分，例如保湿剂、抗氧化剂、油性成分、紫外线吸收剂、表面活性剂、增粘剂、醇类、粉末成分、颜料、水性成分、水、植物提取物类、各种皮肤营养剂等。

此外，还可以适当配合乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、柠檬酸钠、多磷酸钠、偏磷酸钠、葡糖酸等金属螯合剂、咖啡因、单宁、维拉帕米(Verapamil)、凝血酸及其衍生物、甘草提取物、光甘草定、火棘果实的热水提取物、各种生药、生育酚乙酸酯、甘草酸及其衍生物或其盐等药剂、维生素C、抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸、烷氧基水杨酸和/或其盐类等其他美白剂、葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖等糖类等。

包含本发明的美白剂、抗老化剂的皮肤外用剂在例如软膏、霜、乳液、洗剂、面膜、浴用剂等现有的皮肤外用剂中均可使用，不特别限制剂型。

本发明的美白剂、抗老化剂除了适用于如上所述的外用剂以外，还可以配合在食品中，通过摄取该食品，可期待由内发挥美白效果、抗老化效果。

实施例

以下列举实施例对本发明进一步进行详述，但本发明不受这些实施例任何限制。配合量只要不特别说明则用质量％表示。

首先，对于本实施例中使用的植物提取物的调制方法、关于黑素生成抑制效果、抗氧化效果的试验方法及其结果进行说明。

1.样品的调制

在本实施例中均使用冲绳产的植物，但不限于此。

(1)在松叶蕨的全植株7.4g中加入甲醇75mL，在室温浸渍7天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体1.360g。

(2)在松叶蕨的全植株1.04g中加入50％乙醇水溶液10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.18g。

(3)在松叶蕨的全植株1.02g中加入70％乙醇水溶液10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.21g。

(4)在松叶蕨的全植株1.03g中加入90％乙醇水溶液10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.21g。

(5)在松叶蕨的全植株1.05g中加入100％乙醇10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.15g。

(6)在松叶蕨的全植株1.00g中加入丙酮10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.072g。

(7)在松叶蕨的全植株1.01g中加入乙酸乙酯10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。将滤液的溶剂蒸馏除去，得到干燥固体0.067g。

(8)在松叶蕨的全植株1.00g中加入1，3-丁二醇10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。测定本提取物的蒸发残分(105℃、减压下6小时)，结果为6.3mg/g。

(9)在松叶蕨的全植株1.00g中加入双丙甘醇10ml，在室温一边搅拌一边提取3天，然后过滤。测定本提取物的蒸发残分(105℃、减压下6小时)，结果为5.3mg/g。

(10)使(1)所得的提取干固物1.0g在水50ml中分散、溶解，然后用乙酸乙酯50ml提取3次。将乙酸乙酯相进行浓缩，得到272mg的干燥物。将本品溶于丙酮并进行活性炭处理，然后过滤。将滤液浓缩，得到脱色物201mg(乙酸乙酯级分)。

2.黑素生成抑制效果试验方法及其结果

使用通过上述各种提取方法获得的松叶蕨提取物作为试验样品，按照以下方法测定、评价黑素生成抑制效果。

(1)细胞接种、试验物质的添加

将小鼠B16黑素瘤细胞以100,000细胞/孔接种于6孔板。第二天，添加试验物质溶液(在干燥物的情况下溶剂为DMSO)。

(2)细胞增殖试验

在添加试验物质溶液3天之后吸引除去培养基，然后添加含10％的阿尔玛蓝溶液的EMEM培养基1ml，在37℃使其反应。30分钟后将100μl移入96孔板，在激发波长544nm、测定波长590nm的条件下测定荧光。将该值作为细胞数的相对值，计算出添加试验物质的组相对于未添加试验物质的组(仅添加溶剂)的细胞数比率(％细胞数)。％细胞数越高，则意味着细胞毒性越低，将低于80％判断为“有毒性”。

(3)黑素量的测定

吸引除去培养基，使用缓冲液(磷酸缓冲液50mM、pH6.8)洗涤，然后添加1M NaOH溶解细胞，测定475nm的吸光度。将该值作为黑素量的相对值，计算出添加试验物质的组相对于未添加试验物质的组(仅添加溶剂)的黑素量比率(％)。黑素量比率越低，则意味着黑素生成抑制效果越高。

将使用各植物提取物的黑素量比率(％)的结果示于表1。表1以对照的黑素量为基准，用添加松叶蕨提取物的情况(提取干燥物换算浓度)的黑素量相对于对照的百分率来表示。以仅添加了不含植物提取物的溶剂的情况为对照。

[表1]

由表1可知，本发明中使用的植物提取物均具有优异的黑素抑制作用，作为美白剂是有用的。对除了表1以外的各种溶剂提取液进行了评价，结果确认了如图1所示的高美白效果。图1是将各溶剂提取液调整为终浓度0.04％(体积/体积)的结果。任一情况下均未发现细胞毒性。此外，对照中将仅各溶剂同样调整为0.04％(体积/体积)。

并且，由表2可知，甲醇提取物的乙酸乙酯分级物也显示高美白效果。

[表2]

如上可知，本发明中使用的植物提取物均具有优异的黑素生成抑制作用，作为美白剂是有用的。

3.抗氧化效果的评价及其结果

使用通过上述各种提取方法获得的松叶蕨提取物作为试验样品，按照以下方法测定、评价抗氧化效果。

(1)抗氧化效果的评价法(DPPH自由基清除分析，DPPH radical quenching assay)

将用二甲亚砜溶解的被检物质以10μl孔注入各96孔板，然后以90μl/孔添加1mmol/l的1，1-二苯基-2-苦基偕腙肼(1，1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)溶液。在室温放置10分钟，然后测定517nm的吸光度，根据吸光度的数据求出自由基量相对于对照的清除率(％)。其评价结果示于表3。

[表3]

DPPH自由基清除率(％)

由表3可知，在本发明中使用的植物提取物中，任一溶剂提取物均具有优异的自由基清除作用，作为抗氧化剂是有用的。对除了表3以外的各种溶剂提取液进行了评价，结果对于用1，3-丁二醇、双丙甘醇等多元醇类提取得到的提取物也确认了如图2所示的高抗氧化效果。图2是将各溶剂提取液调整为终浓度1％(体积/体积)的结果。在任一情况下均未发现细胞毒性。

由以上的结果可知，本发明的松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物显示优异的抗氧化效果，因而对人的肌肤也能发挥优异的抗氧化活性。因此，可以将该植物提取物配合在外用剂中，作为防止肌肤老化、维持年轻健康的肌肤状态的抗老化剂使用。

以下，将各种剂型的本发明的美白剂、抗老化剂的配合例作为处方例进行说明。当然，本发明并不受该处方例任何限定，而是由权利要求书的范围来特定。

各处方中的松叶蕨提取物含量作为除去提取溶剂后的干燥残分量表示。

Claims

1.用于制造美白剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物是松叶蕨(Psilotum nudum)。

3.用于制造美白用皮肤外用剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。

4.用于制造抗老化剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物是松叶蕨(Psilotum nudum)。

6.用于制造抗老化用皮肤外用剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。

7.用于制造抗氧化剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物是松叶蕨(Psilotum nudum)。

9.用于制造抗氧化用皮肤外用剂的松叶蕨科松叶蕨属(Psilotum)植物的提取物的应用，所述提取物是单独或组合使用醇、该醇的含水物、丙酮或乙酸乙酯而提取出的，所述醇是选自甲醇、乙醇、1,3-丁二醇、丙二醇和双丙甘醇中的1种或多种。