CN102293934A - 一种金钗石斛饮片及加工方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种金钗石斛饮片及其加工的方法，所述金钗石斛饮片为将鲜金钗石斛斜切成厚度为0.01～3mm薄片，然后干燥即得金钗石斛饮片。金钗石斛饮片的加工经净选、清洗、切片、烘干的步骤实现。此金钗石斛饮片提高了金钗石斛饮片有效成分含量，患者服用方便、质量稳定、煎煮效率高、炮制方便减少了中间污染，改进了传统饮片和饮片炮制方法。
Description
技术领域：本发明属涉及金钗石斛金钗石斛饮片及加工方法，属于中药才加工领域。
背景技术：中药石斛具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳之功效，为传统名贵中药，其来源植物有40多种。金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.是2010版药典收载的石斛的来源之一，其化学成分含有多糖、生物碱和Stilbenoids类等。药理实验证明石斛的多糖类成分是石斛中具有免疫促进和抗肿瘤作用的活性成分。石斛生物碱也具有多种活性。
金钗石斛的传统饮片是将金钗石斛切段，2010版药典石斛饮片炮制的加工方法为：先去残根，洗净，切段，干燥，。但其过程繁琐，且笼统，对加工每个环节没有具体的量化指标。而且在金钗石斛切段后干燥困难，需沙炒，加工费时费力，金钗石斛传统饮片(切段)在患者煎煮过程中有效成分溶出率较低。金钗石斛饮片(切片)患者服用方便、提高有效成分含量、煎煮效率高、炮制方便减少了中间污染，改进了传统饮片和饮片炮制方法。
发明内容
本发明目的提供一种金钗石斛饮片，其解决了金钗石斛饮片煎煮效率低，质量不稳定、炮制过程复杂等技术缺陷，为使用金钗石斛饮片提供了更好的、提高有效成分含量、煎煮效率高、服用方便的金钗石斛中药饮片。
本发明另一目的提供上述饮片的制备加工方法。
本发明专利的目的是通过下面的技术方案实现的：一种中药饮片，其特征在于：该中药饮片是将鲜金钗石斛斜切成厚度为0.01～3mm薄片，然后干燥即得金钗石斛饮片。
上述金钗石斛中药饮片的加工制备方法，其特征在于：包括了一下顺序的工艺步骤：
(1)净选：取石斛鲜药材，去除杂草、须根和叶子。
(2)清洗：放2～3倍量的清水清洗1～3次，每次5～10分钟。
(3)切片：将鲜金钗石斛晾干后斜切成厚度为0.01～3mm薄片。
(4)干燥：将鲜金钗石斛切片干燥。
本发明具有以下优点：
1.本发明的金钗石斛饮片比传统可以提高浸出率5％～8％
2.本发明无需将金钗石斛沙炒，用鲜药材直接加工成，减少了加工过程中的二次污染。
3.本发明无需将金钗石斛沙炒，干燥需要温度较低，太阳晒就可以干燥。减少了40％加工成本，提高了4倍以上的生产效率。
4.提高了金钗石斛的使用率。传统方法由于加工时间过长，沙炒温度200以上，导致金钗石斛石斛碱、石斛多糖分解，使有效成分大大降低。降低金钗石斛产品的生物活性。
本发明由于无需沙炒，干燥需要温度也较低，价格时间段，生产效率提高。最大限度保留了金钗石斛的生物活性，提高了产品使用效率。
5.本发明加工操作简单，有利于金钗石斛的质量控制。
具体实施方式：
本发明的实施例1：金钗石斛药材的加工
(1)净选：取金钗石斛鲜药材，去除杂草、须根和叶子。(2)清洗：放2倍量的清水清洗1次，每次10分钟。(3)切片：将鲜金钗石斛药材斜切厚度为0.01mm的薄片。(4)干燥：将金钗石斛鲜药材切片，晾干，然后再放入70℃烘房烘烤3个小时，即得金钗石斛饮片。
本发明的实施例2：金钗石斛药材的加工
(2)净选：取金钗石斛鲜药材，去除杂草、须根和叶子。(2)清洗：放2倍量的清水清洗1次，每次10分钟。(3)切片：将鲜金钗石斛药材斜切成厚度为3mm的薄片。(4)干燥：将金钗石斛鲜药材切片，利用太阳能晒干。即得金钗石斛饮片。
(3)净选：取金钗石斛鲜药材，去除杂草、须根和叶子。(2)清洗：放2倍量的清水清洗1次，每次10分钟。(3)切片：将鲜金钗石斛药材斜切成厚度1mm薄片。(4)干燥：将金钗石斛鲜切片，利用太阳能晒干。即得金钗石斛饮片。
本发明制得的金钗石斛饮片有效成分含量测定
1实验材料与仪器
1.1仪器
安捷伦7890A型气相色谱仪(美国安捷伦公司)，安捷伦7683B进样器，安捷伦工作站；METTLER-AE240型1/10000电子分析天平(瑞士梅特勒公司)；微孔滤膜φ＝0.45μm(进口)。UV-2000紫外-可见分光光度计(日本，HITACHI)。无水葡萄糖对照品购自北京拜尔迪生物公司D-(+)-Glucose(批号G-8270，供含量测定用)。石斛碱对照品为本实验室自制(纯度大于98％)。浓硫酸、苯酚、乙醇、溴钾酚绿、氯仿、邻苯二甲酸氢钾、正丁醇、丙酮、乙醚均为分析纯(北京化工厂)。
1.2对照品及试剂
石斛碱对照品(北京中医药大学中药学院新药中心实验室自制纯度＞98％)，萘，甲醇，甲酸均为分析纯。
1.3样品来源及其处理方法：
以贵州赤水市旺隆镇鸭岭村及红花村石斛种植基地采集的金钗石斛为试验材料，9月份采集分析样品。采样的金钗石斛为2年生药材。将药材分别按照传统加工方法和本实施例1、实施例2、实施例3加工。
2总生物碱含量测定
2.1供试品溶液的制备和测定 取样品粉末(过四号筛)0.5g，精密称定，用2mL氨水浸润，密塞放置30min。精密加入氯仿10mL，称重，置水浴中加热回流2h，冷却后称重，补足减失重量，过滤。精密量取续滤液1mL，置于50mL量瓶中，用氯仿稀释至刻度。精密量取10mL，加入pH4.5缓冲液5.0mL和0.04％溴钾酚绿溶液1.0ml，剧烈振摇3min，静置30min，滤过，置比色皿中在415nm处测定吸光度。另取氯仿同样操作，作为空白对照。
2.2对照品溶液的制备 精密称取石斛碱对照品12.9mg，加氯仿制成每1ml含0.0129mg的溶液，即得。
2.3标准曲线的制备 精密量取石斛碱标准液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置于分液漏斗中，分别用氯仿稀释至10.0ml，加入pH4.5缓冲液5.0ml和0.04％溴钾酚绿溶液1.0ml，剧烈振摇3min，静置30min，滤过。另取氯仿同样操作，作为空白对照。照紫外-可见分光光度法(《中国药典》2005年版一部附录V A)在415nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以石斛碱浓度为横坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归，得到回归方程A＝0.1387C+0.00253。结果表明石斛碱在0.0129-0.0645mg内线性关系良好。
2.4精密度考察 精密量取供试液10mL，照标准曲线制备项下的方法测定其吸光度，重复5次，计算含量，结果平均含量为0.27％，RSD值为0.26。
2.5重复性考察 精密称取石斛样品粉末5份，按样品制备项下方法制备，精密量取10mL，按标准曲线制备项下方法测定其吸收度，计算含量，结果平均含量为0.28，RSD值为0.52。
2.6样品稳定性考察 称取样品，分别于制备后0，1，2，3，4，6，8h，精密量取10mL，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算含量，结果表明，样品在8h内稳定。
2.7加样回收实验 精密称取石斛样品粉末6份，每份约0.5g，分别精密加入对照品溶液1mL，按样品制备项下方法制备，精密量取10mL，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算含量。计算平均回收率为97.77％，RSD值为2.99，石斛中石斛碱的加样回收率见表1。
表1石斛中石斛碱的加样回收率(n＝6)
2.8含量测定结果见表2。
表2石斛药材中总生物碱含量(n＝6)
| 编号 | 总生物碱含量(％) |
| 1(传统加工方法) | 0.48 |
| 2(实施例1) | 0.61 |
| 3(实施例2) | 0.67 |
| 4(实施例3) | 0.64 |
根据以上测定结果，可以看出实施例1、实施例2、实施例3总生物碱含量以石斛碱计分别为0.61％、0.67％、0.64％比传统加工方法制得饮片总生物碱的含量高。
3.多糖测定
3.1石斛多糖的提取分离 取石斛药材粉末35.00g，置圆底烧瓶中，加石油醚(60-90℃)500mL，加热回流提取1h，过滤，挥干溶剂，滤渣以80％乙醇500mL回流提取1h，趁热过滤，挥干溶剂，滤渣置圆底烧瓶中，加蒸馏水500ml回流提取2次，每次1.5h，趁热过滤，减压浓缩至60mL，加入0.1％活性炭脱色，过滤，加入95％乙醇使溶液含醇量为80％，静置过夜，过滤，分出沉淀物溶于蒸馏水，Sevage法脱蛋白。上清液醇沉，沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤5次，每次用10mL。所得石斛多糖为白色粉末。
3.2对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品102.9mg，加水制成每1ml含葡萄糖0.1029mg的溶液，即得。
3.3标准曲线的制备 精密量取葡萄糖标准液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL，置于具塞试管中，分别加蒸馏水至2.0mL，再加5％苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0mL，盖好塞子，迅速摇匀放置5min，置水浴中加热15min，取出，冰水浴迅速冷却至室温。以蒸馏水为空白，照紫外-可见分光光度法(《中国药典》2010年版一部附录V A)在490nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归，得到回归方程A＝0.7087C-0.0071。结果表明葡萄糖在0.01029-0.1029mg内线性关系良好。
3.4精密度考察 精密量取供试液0.5mL，照标准曲线制备项下的方法测定其吸光度，计算含量，结果平均含量为8.58％，RSD值为0.85。
3.5重复性考察 精密称取石斛样品粉末5份，按样品制备项下方法制备，精密量取0.5mL，按标准曲线制备项下方法测定其吸收度，计算含量，结果平均含量为8.72％，RSD值为0.38。
3.6样品稳定性考察 称取样品，分别于制备后0，1，2，3，4，6，8h，精密量取0.5mL，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算含量，结果表明，样品在8h内稳定。
3.7加样回收实验 精密称取石斛样品粉末6份，每份约0.5g，分别精密加入一定量的金钗石斛多糖，按样品制备方法制备，精密量取0.5mL，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算平均回收率为95.35％，RSD值为2.46，石斛中多糖的加样回收率见表3。
表3石斛中多糖的加样回收率(n＝6)
3.8供试品溶液的制备和测定 取样品粉末(过四号筛)0.5g，精密称定，加80％乙醇100mL回流提取1h，趁热过滤，滤渣用80％热乙醇10mL洗涤三次，再用100mL蒸馏水回流提取3次，每次1.5h，趁热过滤，用热水洗涤滤渣和烧瓶，合并滤液和洗液，放冷，转移至500mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀。精密量取0.5mL，加蒸馏水至2.0mL，再加5％苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0mL，盖好塞子，迅速摇匀放置5min，置水浴中加热15min，取出，冰水浴迅速冷却至室温。以蒸馏水为空白，置比色皿中在490nm处测定吸光度。
3.9含量测定结果，见表4。
表4石斛药材中多糖含量
| 编号 | 多糖含量(％) |
| 1(传统加工方法) | 4.8 |
| 2(实施例1) | 11.50 |
| 3(实施例2) | 10.33 |
| 4(实施例3) | 10.12 |
根据以上测定结果，可以看出实施例1、实施例2、实施例3总石斛多糖以无水葡萄糖(C6H12O6)计分别为11.50％、10.33％、10.12％比传统加工方法制得饮片石斛多糖的含量4.8％要高。
4.石斛碱的测定(按照《中国药典》2010年版一部照气相色谱法(附录VI E)测定)
4.1色谱条件
弹性石英毛细管柱(柱长30m，内径0.25mm，膜厚度0.25μm)DB-1(100％二甲基聚硅氧烷)；程序升温；初始温度为80℃，以每分钟10℃的速率升温至250℃，保持10分钟；进样口温度为250℃，检测器为FID，温度为250℃，载气为N2，1ml/min；进样量为1ul，分流比为5∶1；氢气：30ml/min，空气：400ml/min，尾吹：30ml/min。
4.2校正因子测定
精密称取萘对照品25.2mg，加甲醇溶解稀释并定容至100ml，精密量取上述溶液25ml，用甲醇定容至250ml，作为内标溶液，浓度为25.2μg/ml。精密称取石斛碱对照品12.4mg，加甲醇溶解稀释并定容至50ml，精密量取5ml溶液，用甲醇定容至50ml，作为对照品溶液，浓度为24.8μg/ml。精密量取内标溶液1ml置5ml量瓶中，加对照品溶液至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，计算校正因子。F＝1.31
4.3供试品的制备
取本品(鲜品干燥后粉碎)粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，精密加入含0.05％甲酸的甲醇溶液50ml，密塞，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用含0.05％甲酸的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品。GC分析前用微孔滤膜过滤。
4.4标准曲线及其方法学考察
4.4.1标准曲线
分别精密吸取石斛碱对照溶液0.1，0.4，0.6，0.8，1ml于液相小瓶中，用氮吹仪吹干后，分别精密加1ml内标溶液溶解稀释，配置成2.48μg/ml，9.92μg/ml，14.88μg/ml，19.84μg/ml，24.8μg/ml的溶液，按上述气相色谱方法操作，进样量均为1ul，以浓度(μg/ml)为横坐标，峰面积比值(各浓度标准溶液峰面积/内标物峰面积)为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为y＝0.0307x-0.0256，r＝0.9998，表明石斛碱在2.48μg/ml～24.8μg/ml之间具有良好的线性关系。
4.4.1精密度实验
取样品溶液，连续进样5次，记录色谱峰面积比值(各浓度标准溶液峰面积/内标物峰面积)，RSD为1.48％。
4.4.1重现性实验
取同一样品，精密称取5份，按2.3项下方法制备供试品溶液，依法测定石斛碱百分含量，RSD为2.16％。
4.4.1稳定性实验
取上述供试品溶液，分别在0，3，6，9，12，24h分别进样，测得石斛碱百分含量，RSD为2.43％。
4.4.1加样回收率
精密称取上述已知含量的药材5份(2.75％)，分别精密添加一定量的石斛碱对照品，按2.3项下方法制备供试品溶液，计算其平均回收率，为95.1％，RSD为3.02％。
1样品测定
按上述方法对金钗石斛不同样品进行含量测定，结果见下表。
表5不同加工方法金钗石斛药材石斛碱含量
| 编号 | 石斛碱含量(％) |
| 1(传统加工方法) | 0.46 |
| 2(实施例1) | 0.57 |
| 3(实施例2) | 0.61 |
| 4(实施例3) | 0.53 |
根据以上测定结果，可以看出实施例1、实施例2、实施例3石斛碱分别为0.57％、0.61％、0.53％比传统加工方法制得饮片石斛多糖的含量0.46％要高。本发明制备的金钗石斛饮片中石斛碱的含量要比传统方法炮制的高。
Claims (12)
1.一种金钗石斛饮片，其特征在于：用金钗石斛鲜药材斜切成厚度为0.01～3mm的薄片，然后干燥金钗石斛饮片。
2.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：该金钗石斛饮片是在将鲜金钗石斛斜切薄成片以后在对其进行干燥。
3.一种金钗石斛饮片的制备加工方法，其特征在于：包括以下顺序工艺步骤：
(1)净选：取石斛鲜药材，去除杂草、须根和叶子。
(2)清洗：放2～3倍量的清水清洗1～3次，每次5～10分钟。
(3)切片：将鲜金钗石斛晾干后斜切成厚度为0.01～3mm的薄片。
(4)干燥：将鲜金钗石斛切片干燥后既得。
4.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.05～2.5mm。
5.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.1～2mm。
6.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.15～1.5mm。
7.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.2～1mm。
8.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.25～0.5mm。
9.根据权利要求1所述的一种金钗石斛的饮片，其特征在于：金钗石斛药材薄片厚度为0.3～0.5mm。
10.根据权利要求3所述一种金钗石斛饮片的制备加工方法，其特征在于：步骤(3)将鲜石斛斜切成片。
11.根据权利要求3所述一种金钗石斛饮片的制备加工方法，其特征在于：步骤(4)将鲜石斛切片干燥，干燥后金钗石斛切片水分不超过12％。
12.根据权利要求6所述一种金钗石斛饮片的制备加工方法，其特征在于：控制金钗石斛切片的方式包括：太阳能晒干或烘干、微波干燥、远红外干燥、热风循环烘箱干燥、带式干燥、转筒式烘干、或管式热风干燥。
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