CN109655558B - 一种黑骨藤有效部位群的检测方法 - Google Patents

一种黑骨藤有效部位群的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种黑骨藤有效部位群的检测方法。本发明对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2的含量进行检测，所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为黑骨藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。

Description

一种黑骨藤有效部位群的检测方法
技术领域
本发明涉及一种黑骨藤有效部位群的检测方法，属于药品技术的领域。
背景技术
黑骨藤(Periploca forrestii Schltr.) 属于萝摩科(Asclepiadaceae)杠柳属Periploca )植物，收载于2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》，具有祛风除湿、活血通络、消痹止痛的功能，可舒筋活络、祛风除湿；主治风湿性关节 炎、跌打损伤、胃痛、消化不良、闭经、痢疾等。
黑骨藤是常用苗药之一，是黑骨藤追风活络胶囊、黑骨藤伸筋透骨液、黑骨藤伸筋透骨喷雾剂的重要组成药味。目前，黑骨藤仍执行的是2003 版《贵州省中药材、民族药材质量标准》，此标准中只有来源、性状、显微鉴别和理化鉴别等项目，没有对其药效成分进行定性和定量检测，难以控制药材及其成方制剂的质量，无法保证临床用药的安全性和有效性。然而，近几年对黑骨藤的研究多集中在化学成分、总皂苷、总黄酮的含量测定和药理作用等方面，未见关于绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2含量测定方法的研究报道。限制了对苗药黑骨藤的进一步开发利用。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种黑骨藤有效部位群的检测方法。本发明对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2的含量进行检测，所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为黑骨藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现：一种黑骨藤有效部位群的检测方法，所述检测方法是对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2进行含量测定。
前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述的对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2进行含量测定是：
对照品溶液的制备：精密称取对照品绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2，置于容量瓶中，溶解，摇匀，制成对照品溶液；
供试品溶液的制备：取黑骨藤有效部位群粉末，置于容量瓶中加色谱甲醇溶解并稀释，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，即得；
色谱条件：色谱柱为Xtimate C18，4.6×250 mm，5 μm；流动相：乙腈为A相，0.2 %磷酸水溶液为B相，梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280 nm；柱温30℃；
测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2峰的面积，计算，即得。
前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述的供试品溶液按下述步骤进行制备：
①取过40目筛的黑骨藤药材粉末100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间对应为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜；依次分别用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000 mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4~9℃冰箱中，得黑骨藤有效部位群粉末；
②取黑骨藤有效部位群粉末50mg，置于10 mL容量瓶中加70 %色谱甲醇溶解并稀释至刻度线，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，即得。
前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述对照品溶液这样制备：精密称取对照品绿原酸5.02 mg、隐绿原酸5.06 mg、新绿原酸5.13 mg、异绿原酸C5.23 mg和原花青素A25.38 mg，置于5 mL容量瓶中，溶解，摇匀，制成绿原酸质量浓度为1.004 mg/mL、隐绿原酸质量浓度为1.012 mg/mL、新绿原酸质量浓度为1.026 mg/mL、异绿原酸质量浓度为1.046mg/mL和原花青素A2质量浓度为1.076 mg/mLl的对照品溶液。
前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述的梯度洗脱是；流动相乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）；梯度洗脱程序为：0~15min，10%~10%A；15~30min，10%~18%A；30~45min，18%~18%A；45~50min，18%~20%A；50~55min，20%~20%A；55~65min，20%~21%A；65~80min，21%~21%A。
发明人进行了大量的实验，以下是本发明所述检测方法的研究
实验例：检测方法研究
1. 仪器与材料
1.1 仪器
见表1.
Figure 53189DEST_PATH_IMAGE001
1.2 材料
甲醇（色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司）；乙腈（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；磷酸（重庆川东集团有限公司）；甲醇（AR，天津市科密欧化学试剂有限公司）；乙醇（分析纯）；纯水（娃哈哈饮用纯净水，贵州娃哈哈饮料有限公司）；大孔树脂D101（北京慧德易科技有限责任公司）；薄层用硅胶（青岛海洋化工有限公司）；对照品：新绿原酸（批号：CHB170914、CHB160419）原绿原酸（批号：CHB170713）隐绿原酸（批号：CHB170828、CHB160404）异绿原酸C（批号：CHB160726、CHB-Y-102）原花青素A2（批号：CHB170612），对照品纯度均为：HPLC≥98 %，均买自成都克洛玛生物科技有限公司。药材共十批，来源信息见表2，由贵阳中医学院刘刚老师鉴定为萝藦科(Asclepiadaceae)杠柳属(Periploca)植物黑骨藤（Periploca forrestii Schltr.）的干燥根及根茎。
Figure 439170DEST_PATH_IMAGE002
2 方法
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称取对照品绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2各5.02mg、5.06 mg、5.13 mg、5.23 mg、5.38 mg，置于5 mL容量瓶中，溶解，摇匀，制成质量浓度分别为1.004 mg/mL、1.012 mg/mL、1.026 mg/mL、1.046 mg/mL、1.076 mg/mL的对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备
（1）取黑骨藤药材粉末（过40目筛）约100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间各为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜。依次用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4~9℃冰箱中，即得黑骨藤有效部位群粉末。
（2）精密取黑骨藤有效部位群粉末50.0 mg，置于10 mL容量瓶中加70 %色谱甲醇溶解并稀释至刻度线，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，按“2.2”色谱条件分析。其色谱图如图1至图4。
2.2 色谱条件
色谱柱为Xtimate C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相乙腈(A)-0.2 %磷酸水溶液(B)，按表3色谱条件进行梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280nm；柱温30℃。
Figure 812383DEST_PATH_IMAGE003
3. 方法学考察
3.1 线性关系考察
分别精密称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸C、原花青素A2对照品各10.00 mg、5.01 mg、5.00 mg、3.51 mg、5.00 mg，将新绿原酸加入1号25 mL的容量瓶中将隐绿原酸加入1号5 mL的容量瓶中，用70 %色谱甲醇溶液定容至刻度线，摇匀，备用。将绿原酸、异绿原酸C、原花青素A2加入1号10 mL容量瓶中，精密移取1号25 mL的容量瓶与1号5 mL的容量瓶中的对照品溶液各1 mL、2 mL加入1号10 mL容量瓶中，用70 %色谱甲醇溶液定容至刻度线，摇匀。再精密移取1号10 mL容量瓶中混合对照品溶液各1 mL，分别移取5次，加入5 mL、10 mL、25 mL、50 mL、100 mL容量瓶中，用70 %色谱甲醇溶液定容至刻度线，摇匀制成由高至低各个浓度梯度的混合对照品溶液。分别按“4.1”条件进样，以平均峰面积值Y为纵坐标，浓度（mg/mL）X为横坐标，计算回归方程，绘制标准曲线。试验结果见表4。
Figure 207592DEST_PATH_IMAGE004
3.2 精密度试验
精密吸取新绿原酸、异绿原酸C对照品溶液各1 mL分别加入已标记为1、2号的10mL容量瓶中，用70 %色谱甲醇溶液定容，摇匀待用。再精密取绿原酸、隐绿原酸、原花青素A2对照品溶液各3 mL、1 mL、2 mL均加入已标记为3号的10 mL容量瓶中，精密吸取1、2号容量瓶中的新绿原酸，异绿原酸C标准品溶液各1 mL、2 mL加入3号容量瓶中，用70 %色谱甲醇溶液定容，摇匀，制成一份新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸C、原花青素A2浓度分别为0.010 mg/mL、0.301 mg/mL、0.101 mg/mL、0.021 mg/mL、0.215 mg/mL的混合对照品溶液，按上述色谱条件，平行进样6次，测得各对照品的含量，分别计算其RSD值均小于3 % ，表明仪器精密度良好。试验结果见表5。
Figure 21964DEST_PATH_IMAGE005
3.3 稳定性试验
精密称取取批号为D1的黑骨藤药材有效部位群粉末1份，按“2.1.2（2）”项下条件制备，分别于0 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h、32 h、48 h按“2.2”项下条件分析，测定峰面积，RSD值均小于3 %，结果表明供试品中待测成分绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、原花青素A2、异绿原酸C在48 h内稳定。试验结果见表6。
Figure 313269DEST_PATH_IMAGE006
3.4 重复性试验
精密称取取批号为D1的黑骨藤药材有效部位群粉末，按“2.1.2（2）”项下的方法平行制备6份供试品溶液并测定其中待测成分的含量。试验结果见表7。各成分含量的RSD<3%，表明此方法具有较好的重复性。
Figure DEST_PATH_IMAGE007
3.5 加样回收率试验
精密称取黑骨藤药材有效部位群粉末6份：25.1 mg、25.1 mg、25.0 mg、25.1 mg、25.1 mg、25.1 mg，分别置于10 mL容量瓶中，按。精密称取对照品新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸C、原花青素A2各：7.85 mg、18.01 mg、8.76 mg、5.05 mg、7.92 mg，分别置于100 mL、10 mL、25 mL、50 mL、10 mL中，加70%色谱甲醇溶液定容至刻度线，摇匀，分别各移取1ml加入装有黑骨藤有效部位群粉末的容量瓶中，定容，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，制成含量各为：0.0785 mg、1.7990 mg、0.3504 mg、0.1010 mg、0.7920 mg的供试品溶液，按“2.2”色谱条件分析。试验结果见表8。
Figure 173777DEST_PATH_IMAGE008
4．样品测定
取龙宫、开阳、博信中草药行、銧铭药行、鸿源药行、惠水、王氏虫草行、安顺、黔陶与情隆10个不同产地的黑骨藤药材，按“2.1.2（1）（2）”项下方法制备，分别称取黑骨藤有效部位群细颗粒约50.0 mg，精密称定，制备供试品溶液，每个产地2份，每份进2针，按“2.2”项下色谱条件进行测定，按外标法计算每批有效部位群中5种成分的含量，试验结果见表9。
Figure DEST_PATH_IMAGE009
Figure 372677DEST_PATH_IMAGE010
Figure DEST_PATH_IMAGE011
5结果与结论
5.1色谱条件的确定
5.1.1 流动相的选择
高效液相色谱法流动相组成及配比影响被分析物的分离效果。试验通过改变流动相的组成及配比来确定最佳条件。通过比较乙腈-0.1 %磷酸水溶液、甲醇-0.2%磷酸水溶液、乙腈-0.1 %磷酸水溶液、乙腈-0.2 %磷酸水溶液，发现乙腈-0.2 %磷酸水溶液分离效果最好。因此，试验选用乙腈-0.2 %磷酸水溶液作为流动相。
5.1.2 波长的选择
为了使待测成分尽可能被完全检出，吸收峰最强，本实验对280 nm、285 nm、290nm、300 nm、320 nm、330 nm、360 nm不同波长进行了考察，结果表明酚酸类成分在330 nm下有最强吸收峰，固选择330 nm为4个酚酸成分的最适吸收波长。待测成分原花青素A2在280nm下有最强吸收峰，固选择280 nm为黄酮类化合物原花青素A2的最适吸收波长。在该波长测定时，色谱峰对称，干扰少。
5.1.3 柱温的选择
本实验通过同一条件下25℃、30℃、35℃、38℃时柱温的考察发现，在30℃时待测成分的含量、峰形、分离度、保留时间等都达到最好，固选择30℃为最适温度。
5.1.4 色谱条件
通过不同洗脱梯度的考察，发现色谱柱为Xtimate C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相乙腈(A)-0.2 %磷酸水溶液(B)，按表“1.3”色谱条件进行梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量为10 uL；检测波长330 nm、280 nm；柱温30℃时，待测成分的含量最高，峰形、分离度、保留时间等最好。
2. 考察部位的选择
药材通过水浴回流提取后上D101大孔吸附色谱柱进行纯化富集处理，富集得到水部位、70 %乙醇部位、95 %乙醇部位，本实验主要考察70 %乙醇有效部位化学成分，合并水部位与95 %乙醇部位作为阴性对比，发现黄酮类化合物原花青素A2全部富集于70 %乙醇部位，酚酸类化合物新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸C总体上大部分都富集于70 %乙醇部位，色谱图见下图图1-图4。据文献报道苗药黑骨藤具有抗风湿抗炎等多种作用，不同因为对苗药黑骨藤研究不够彻底，还不能确定黑骨藤中主要起到抗风湿抗炎的有效部位，酚酸类与黄酮类成分具有多种药理作用，其主要作用可能为抗炎抗风湿作用，固选择70%乙醇部位作为黑骨藤有效部位群的质量控制研究对象，为下一步药理研究实验提供依据。
结论：本发明所述方法专属性强，重现性、稳定性及精密度良好。所述检测方法能够同时测定绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2的含量，从源头上对产品质量进行控制，使产品质量达到稳定。且所述检测方法高效，快速，准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，能有效控制该产品的质量，确保药物的临床药效。
本发明的有益效果：本发明对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2的含量进行检测，所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为黑骨藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。
附图说明：
图1是混合对照品色谱图(360 nm)；其中，1.新绿原酸；2.绿原酸；3.隐绿原酸；4.异绿原酸C；
图2是供试品色谱图（360 nm）；其中，1.新绿原酸；2.绿原酸；3.隐绿原酸；4.异绿原酸C；
图3是混合对照品色谱图(280 nm)；其中1为花青素A2；
图4是供试品色谱图（280 nm）；其中，1.原花青素A2。
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
实施例1：
一种黑骨藤有效部位群的检测方法；包括对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2进行含量测定。具体测定方法为：
对照品溶液的制备：精密称取对照品绿原酸5.02 mg、隐绿原酸5.06 mg、新绿原酸5.13 mg、异绿原酸C5.23 mg和原花青素A25.38 mg，置于5 mL容量瓶中，溶解，摇匀，制成绿原酸质量浓度为1.004 mg/mL、隐绿原酸质量浓度为1.012 mg/mL、新绿原酸质量浓度为1.026 mg/mL、异绿原酸质量浓度为1.046 mg/mL和原花青素A2质量浓度为1.076 mg/mL的对照品溶液；
供试品溶液的制备：
①取过40目筛的黑骨藤药材粉末100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间对应为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜；依次分别用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000 mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4~9℃冰箱中，得黑骨藤有效部位群粉末；
②取黑骨藤有效部位群粉末50 mg，置于10 mL容量瓶中加70 %色谱甲醇溶解并稀释至刻度线，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，即得；
色谱条件：色谱柱为Xtimate 5 μm C18 Dim.4.6×250 mm ，5 μm；流动相：乙腈为A相，0.2 %磷酸水溶液为B相，梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280nm；柱温30℃；
测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2峰的面积，计算，即得。
所述的梯度洗脱是；按下表进行梯度洗脱：
Figure 510398DEST_PATH_IMAGE012

Claims (2)

1.一种黑骨藤有效部位群的检测方法，其特征在于：所述检测方法是对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2进行含量测定；
所述的对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2进行含量测定是：
对照品溶液的制备：精密称取对照品绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2，置于容量瓶中，溶解，摇匀，制成对照品溶液；
供试品溶液的制备：所述的供试品溶液按下述步骤进行制备：
①取过40目筛的黑骨藤药材粉末100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间对应为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜；依次用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000 mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4～9℃冰箱中，得黑骨藤有效部位群粉末；
②取黑骨藤有效部位群粉末50 mg，置于10 mL容量瓶中加70 %色谱甲醇溶解并稀释至刻度线，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，得供试品溶液；
色谱条件：色谱柱为Xtimate C18，4.6×250 mm，5 μm；流动相：乙腈为A相，0.2 %磷酸水溶液为B相，梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280 nm；柱温30℃；0～15min，10%→10%A；15～30min，10%→18%A；30～45min，18%→18%A；45～50min，18%→20%A；50～55min，20%→20%A；55～65min，20%→21%A；65～80min，21%→21%A；
测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A2峰的面积，计算，即得。
2.如权利要求1中所述的黑骨藤有效部位群的检测方法，其特征在于：所述对照品溶液这样制备：精密称取对照品绿原酸5.02 mg、隐绿原酸5.06 mg、新绿原酸5.13 mg、异绿原酸C5.23 mg和原花青素A25.38 mg，置于5 mL容量瓶中，溶解，摇匀，制成绿原酸质量浓度为1.004 mg/mL、隐绿原酸质量浓度为1.012 mg/mL、新绿原酸质量浓度为1.026 mg/mL、异绿原酸质量浓度为1.046 mg/mL和原花青素A2质量浓度为1.076 mg/mL的对照品溶液。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110702813B (zh) * 2019-10-23 2022-03-11 贵州中医药大学 一种苗药黑骨藤hplc指纹图谱研究及多成分含量测定方法
CN111398504A (zh) * 2020-04-20 2020-07-10 贵州中医药大学 黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类成分含量测定及聚类分析方法
CN113588839B (zh) * 2021-08-13 2022-07-12 贵州中医药大学 黑骨藤的检测方法、黑骨藤对照提取物的制备及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102028773A (zh) * 2010-11-29 2011-04-27 中国人民武装警察部队医学院 固公果根提取物的鉴别方法
WO2011128714A1 (en) * 2010-04-12 2011-10-20 Berkem S.A. Stabilised polyphenol derivatives, process for their manufacture, and uses thereof
CN103529137A (zh) * 2012-07-04 2014-01-22 成都康弘药业集团股份有限公司 一种药物组合物指纹图谱的测定方法
CN107607649A (zh) * 2017-09-17 2018-01-19 贵阳中医学院 一种黑骨藤的检测方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9492473B2 (en) * 2015-01-26 2016-11-15 Kaleido Biosciences, Inc. Glycan therapeutics and related methods thereof

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011128714A1 (en) * 2010-04-12 2011-10-20 Berkem S.A. Stabilised polyphenol derivatives, process for their manufacture, and uses thereof
CN102028773A (zh) * 2010-11-29 2011-04-27 中国人民武装警察部队医学院 固公果根提取物的鉴别方法
CN103529137A (zh) * 2012-07-04 2014-01-22 成都康弘药业集团股份有限公司 一种药物组合物指纹图谱的测定方法
CN107607649A (zh) * 2017-09-17 2018-01-19 贵阳中医学院 一种黑骨藤的检测方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
‘早酥’和‘南果梨’16个部位多酚物质组成及含量分析;张小双等;《中国农业科学》;20170201(第03期);第545-555页 *
Evolution of Phenolic Compounds Profile and Antioxidant Activity of Syrah Red and Sparkling Moscatel Wines Stored in Bottles of Different Colors;Joyce Fagundes de Souza等;《Beverages》;20180903;第4卷(第89期);第1-16页 *
俞学炜等.高效液相色谱法同时测定银蒲解毒片中7种主要成分的含量.《医药导报》.2018,第37卷(第10期), *
苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响;王霞等;《中国药房》;20171231;第28卷(第28期);第3950页第2.1小节 *
高效液相色谱法同时测定咖啡中的6种绿原酸;胡皓等;《食品安全质量检测学报》;20180430;第9卷(第7期);第1634-1643页 *
高效液相色谱法同时测定银蒲解毒片中7种主要成分的含量;俞学炜等;《医药导报》;20181031;第37卷(第10期);第1247-1250页摘要、第1-2小节 *

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