CN102086206B - 一类荧光探针及其制备方法和用途 - Google Patents

一类荧光探针及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一类荧光探针化合物及其制备方法和用途，该化合物具有通式I：其中：R1、R2、R3和R4各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、OR9、N(R9)2、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M；R5、R6、R7和R8各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、杂环基、卤代烷基、烷基氨基、酰氨基、OR9、N(R9)2、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M；R9为H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M；n、m各自为0-18的整数；M为H、K、Na、Li、NH4、NH3R10、NH2(R10)2、NH(R10)3或N(R10)4；R10为H、C1-6烷基或CH2CH2OH。该化合物适用于检测汞离子。

Description

一类荧光探针及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及适用于精细化工领域中检测汞离子用的荧光分子探针。 
背景技术
汞离子是对人体和环境最有威胁和毒害作用的金属离子之一。它对大脑、骨骼、肾脏以及中枢神经，免疫以及内分泌等系统都有不同程度的毒害作用。汞及其污染物可以通过火山喷发、采矿、固体废弃物焚化等方式污染大量的水、空气和土壤，并且可以进一步通过食物链富积于人体中，对人的健康有极大的损害。所以对于环境中低浓度汞离子的检测以及生物学研究已经成为近年来的研究热点。 
尽管对于金属离子的检测已经存在很多方法，比如原子吸收、电子顺磁共振等，但是这些方法都不能够对生物体内离子进行直观、实时检测，并且样品的预处理也比较复杂，所以其应用受到一定的限制。荧光探针具有灵敏度高、选择性好、反应时间快、能够进行实时区域离子检测，而受到普遍的重视。但是目前对于多数基于PET、ICT等络合机理的汞离子荧光分子探针来讲，各方面性能优良且可以在较低浓度下检测汞离子的荧光探针很少。由于汞离子的重原子效应会导致探针分子的荧光淬灭，以及在不同程度上会受到如铅离子、锌离子以及银离子等金属离子的干扰，所以人们选择用离子选择性的反应来克服以上提到的基于络合机理的荧光分子探针在灵敏度以及选择性的不足。 
已经报道的对于汞离子有选择性的荧光探针主要有以下几类：一是硫杂醚类汞离子荧光探针；二是脱硫类汞离子荧光探针。但是它们在其性能上还存在不足。硫杂醚类汞离子荧光探针是通过硫杂原子对汞离子的络合而产生光谱的变化，络合能力有限，不适合用于生理环境中低浓度汞离子的检测，因此这种探针的应用受到了一定的限制。参见Knut Rurack、UteResch-Genger、Monika Spieles和Julia L.Bricks的文章，发表于期刊Chem.Commun.，2000年，P2103-2104。脱硫类汞离子荧光探针是近年 来发展的一类探针，这类探针具有对pH不敏感、荧光增强比较大等优点。但是这类探针最大的不足就是需要提高检测温度并且要与过多量的汞进行竞争，此外也会受到银离子和铅离子的干扰。参见：Mi YoungChae和Anthony W.Czarnik的文章，发表于期刊J.Am.Chem.Soc.1992年，114，P9704-9705；Song K.C.、Kim J.S.、Park S.M.、Chung K.-C.、Ahn S.和Chang S.-K.的文章，发表于Org.Lett.2006年；8，P3413-3416。 
发明内容
由上述可知，本行业需求能够克服上述缺陷的检测汞离子用的探针。 
本发明改进了现有技术中的络合型汞离子荧光探针的结构和性能上的不足，设计并合成出适于检测低浓度汞离子以及活细胞内检测用的、性能优良的罗丹明荧光染料探针分子。 
申请人发现：汞离子能够促进本发明合成的罗丹明类探针分子水解为相应的罗丹明类染料，使整个分子的紫外吸收和荧光发射显著增强。由此，本发明的罗丹明探针分子能够用于检测环境中的ppb级浓度的汞离子、以及用于检测活细胞内汞离子的荧光成像。从而克服了现有技术中的上述缺点。 
本发明使用罗丹明荧光染料，通过汞离子诱导的络合以及随后的水解反应，使得整个分子的紫外吸收和荧光发射显著增强，变化肉眼可见。 
基于水解机理的罗丹明类探针由于在检测到汞离子后会在汞离子的促进下发生水解反应，水解产物为罗丹明B，荧光强度以及紫外吸收都显著增强。该识别反应条件温和，在室温下即可完成，并且这种探针在检测汞离子时受到外界因素的干扰较小，具有单一的选择性以及良好的抗干扰能力，尤其是可以避免硫化物的干扰。此外，该探针灵敏度很好，在ppb级浓度汞离子存在下荧光有明显的增强，并且荧光强度增加与汞离子的浓度呈现良好的线形关系。此外该探针分子可以在海水等水环境中对汞离子的检测，以及实现了在活细胞内对汞离子的荧光成像。 
本发明的汞离子检测用的罗丹明染料荧光探针具有下列结构通式I： 
Figure G2009101998457D00031
其中： 
R1、R2、R3和R4各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、OR9、N(R9)2、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
R5、R6、R7和R8各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、杂环基、卤代烷基、烷基氨基、酰氨基、OR9、N(R9)2、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
R9为H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
n、m各自为0-18的整数； 
M为H、K、Na、Li、NH4、NH3R10、NH2(R10)2、NH(R10)3或N(R10)4； 
R10为H、C1-6烷基或CH2CH2OH。 
在另一个方面，本发明还提供合成上述式I化合物的方法。该方法包括如下步骤： 
(1)使含有内酯环结构的式I’罗丹明类染料与水合肼反应，得到中间体II：将所述的式I’罗丹明类荧光染料加入醇溶剂中，室温搅拌，使该罗丹明染料均匀分散于醇溶剂中；再滴加化学计量过量的水合肼；滴加完毕后，加热，使溶剂回流并反应，直至反应液变为澄清；然后冷却到室温，蒸发去除溶剂，加入酸调至pH为2-5，搅拌同时加入碱溶液，调至pH达到9-10，出现大量沉淀；过滤并洗涤沉淀物，真空干燥后，重结晶提纯； 
(2)将步骤(1)中得到的中间体II与乙二醛反应，得到式III化合物：将中间体II加入反应容器中，再加入醇溶剂和化学计量过量的乙二醛，然后在室温下搅拌反应1-3小时，蒸发去除溶剂，重结晶提纯，得到式III化合物； 
Figure G2009101998457D00042
(3)将步骤(2)中得到的中间体III与具有R8取代基的苯胺化合物反应，得到式I化合物：将式III化合物加入反应容器中，再加入醇溶剂和过量的苯胺化合物，然后室温搅拌反应1-3小时，蒸去溶剂，重结晶提纯，得到式I化合物： 
Figure G2009101998457D00043
式I’中的R0为H或C1-6烷基，式I’和式I-III中的R1、R2、R3、R4、 R5、R6、R7、R8、R9、R10、n、m和M的定义如上所述。 
在另一个方面，本发明还提供上述式I化合物的缀合物。 
在另一个方面，本发明还提供使用上述式I化合物或其缀合物以检测汞离子的方法。 
在另一个方面，本发明还提供包含上述式I化合物或其缀合物的组合物。所述组合物也用于汞离子检测用。 
本发明的这些特征和优点以及其他特征和优点在参考以下附图和本发明的具体实施方式之后将变得显而易见。 
附图说明
图1是本发明实施例1的荧光分子探针RHg1对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg1的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图2是本发明的荧光探针分子RHg1的荧光强度和汞离子浓度的变化关系图。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。荧光探针分子RHg1的浓度是5μM，汞离子的浓度变化从小到大依次为0、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75和80微摩尔。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图3是本发明的荧光探针分子RHg1的荧光强度以及RHg1-汞离子络合物的荧光强度分别随pH变化的荧光发射图。横坐标为pH，纵坐标为荧光强度。荧光探针分子RHg1的浓度为5μM。用NaOH(1M)和HCl(1M)调节pH。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图4是各种金属离子对于本发明的荧光探针分子RHg1-汞离子络合物的干扰。黑色柱状图是加入除汞离子外其他金属离子时的荧光强度，白色柱状图为在此基础上再加入汞离子的荧光强度。荧光探针分子RHg1的浓度为5μM。横坐标各种金属离子浓度为50倍当量(汞离子为15倍当量)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图5是用本发明的荧光探针分子RHg1研究海水中ppb级浓度汞离子与荧光强度线形关系图。荧光探针分子RHg1的浓度为1微摩。横坐标为汞离子浓度，纵坐标为荧光强度比。所用仪器为荧光分光光度计，型号： LS 55。 
图6是在不同的缓冲溶剂体系中测试半胱氨酸(L-cysteine)对荧光探针RHg1识别汞离子的影响。荧光探针分子RHg1的浓度为3微摩，汞离子的浓度为200ppb(1微摩)。分别测试探针RHg1自身荧光强度，半胱氨酸加入探针后的荧光强度、汞离子加入探针后的荧光强度以及半胱氨酸和汞离子一起加入探针后的荧光强度，做柱状图对比。横坐标为不同缓冲溶剂：三羟基氨甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲溶液，N-2-羟乙基哌嗪-N-1-乙磺酸(HEPES)缓冲溶液和磷酸缓冲溶液，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图7是用本发明的荧光探针分子RHg1在Hela细胞中对汞离子的识别成像图。图(a)为RHg1加入培养好的Hela细胞中在37℃下培养基中培养30分钟后的图像；图(b)为向上述含探针的细胞培养液中加入汞离子后在37℃的条件下孵化30分钟后的图像；图(c)为图(b)的亮场成像图。荧光探针分子RHg1的浓度为10μM，汞离子浓度为10μM。激发光是WB510-570nm，仪器为Nikon eclipase TE 2000-5。 
图8是本发明的荧光探针分子对汞离子的识别机理。 
图9中的(1)和(2)分别是鉴别本发明的荧光探针分子在汞离子促进下水解后的产物为罗丹明B的核磁氢谱对比图、以及水解产物的高分辨图。其中(1)是水解产物和标准罗丹明B(Acros Organics，99％)的核磁对比图；(2)是水解产物的高分辨质谱图，TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H31N2O3 +：443.2335(罗丹明B的分子量)，Found：443.2339. 
图10是本发明实施例7的荧光分子探针RHg2对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg2的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图11是本发明的荧光分子探针RHg3对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg3的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图12是本发明的荧光分子探针RHg4对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg4的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量 (汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图13是本发明的荧光分子探针RHg5对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg5的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图14是本发明的荧光分子探针RHg6对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg6的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图15是本发明的荧光分子探针RHg7对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg7的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图16是本发明的荧光分子探针RHg8对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg8的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图17是本发明的荧光分子探针RHg9对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg9的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图18是本发明的荧光分子探针RHg10对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg10的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图19是本发明的荧光分子探针RHg11对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg11的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图20是本发明的荧光分子探针RHg12对汞离子的选择性荧光发射图。 荧光探针分子RHg12的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图21是本发明的荧光分子探针RHg13对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg13的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图22是本发明的荧光分子探针RHg14对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg14的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图23是本发明的荧光分子探针RHg15对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg15的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图24是本发明的荧光分子探针RHg16对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg16的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图25是本发明的荧光分子探针RHg17对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg17的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图26是本发明的荧光分子探针RHg18对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg18的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图27是本发明的荧光分子探针RHg19对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg19的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图28是本发明的荧光分子探针RHg20对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg20的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图29是本发明的荧光分子探针RHg21对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg21的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图30是本发明的荧光分子探针RHg22对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg22的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图31是本发明的荧光分子探针RHg23对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg23的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图32是本发明的荧光分子探针RHg24对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg24的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
图33是本发明的荧光分子探针RHg25对汞离子的选择性荧光发射图。荧光探针分子RHg25的浓度是5μM，各种金属离子的浓度是其50倍当量(汞离子为15倍当量)时的荧光发射光谱。横坐标为波长(nm)，纵坐标为荧光强度。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
具体实施方式
除另有说明外，本文中使用的术语具有以下含义。 
本文中使用的术语“烷基”包括直链烷基和支链烷基。如提及单个烷基如“丙基”，则只特指直链烷基，如提及单个支链烷基如“异丙基”，则只特指支链烷基。例如，“C1-6烷基”包括C1-4烷基、C1-3烷基、甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。类似的规则也适用于本说明书中使用的其 它基团。 
本文中使用的术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。 
本发明的化合物及其缀合物
在一个方面，本发明提供了具有下列结构通式I的罗丹明染料类荧光分子探针： 
Figure G2009101998457D00101
R1、R2、R3和R4各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、OR9、N(R9)2、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
R5、R6、R7和R8各自独立选自H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、杂环基、卤代烷基、烷基氨基、酰氨基、OR9、N(R9)2、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
R9为H、C1-18烷基、C1-18烷基取代的苯基、C1-18烷基取代的萘基、卤素、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 
n、m＝0-18； 
M为H、K、Na、Li、NH4、NH3R10、NH2(R10)2、NH(R10)3或N(R10)4； 
R10为H、C1-6烷基或CH2CH2OH。 
优选R1、R2、R3和R4各自独立选自H或C1-18烷基；再更优选R1、R2、R3和R4各自独立选自H或C1-12烷基；最优选R1、R2、R3和R4各自独立选自H或C1-6烷基。 
优选R5、R6、R7和R8各自独立选自H、C1-12烷基、C1-12烷基取代的苯基、C1-12烷基取代的萘基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、杂环基、卤代烷基、烷基氨基、酰氨基、OR9、N(R9)2、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M； 更优选R5、R6、R7和R8各自独立选自H、C1-6烷基、C1-6烷基取代的苯基、C1-6烷基取代的萘基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、杂环基、卤代烷基、烷基氨基、酰氨基、OR9、N(R9)2、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M。 
优选R9为H、C1-12烷基、C1-12烷基取代的苯基、C1-12烷基取代的萘基、卤素、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM或(CH2)mSO3M；更优选R9为H、C1-6烷基、C1-6烷基取代的苯基、C1-6烷基取代的萘基、卤素、CN、(CH2CH2O)nH、(CH2)mCOOM(CH2)mSO3M。 
优选n、m为0-12的整数；最优选n、m为0-6的整数。 
本发明化合物可直接用于汞离子的检测。或者，在一个实施方案中，本发明化合物可作为式I化合物的衍生物的形式使用，所述衍生物包括但不限于缀合物。 
本文中使用的“缀合物”是指本发明荧光探针分子通过共价键与其它分子连接而形成的化合物。 
包含本发明化合物或其缀合物的组合物也可以用于汞离子的检测。 
化合物的合成
在另一个方面，本发明还提供合成上述式I化合物的方法。 
该罗丹明染料类荧光分子探针的合成一般按照以下流程进行： 
(1)使含有内酯环结构的式I’罗丹明类染料与水合肼反应，得到中间体II：将所述的式I’罗丹明类荧光染料加入醇溶剂中，室温搅拌，使该罗丹明染料均匀分散于醇溶剂中；再滴加化学计量过量的水合肼；滴加完毕后，加热，使溶剂回流并反应，直至反应液变为澄清；然后冷却到室温，蒸发去除溶剂，加入酸调至pH为2-5，搅拌同时加入碱溶液，调至pH达到9-10，出现大量沉淀；过滤并洗涤沉淀物，真空干燥后，重结晶提纯产物。反应式如下所示。 
Figure G2009101998457D00121
式I’中的R0为H或C1-6烷基，式I’中的R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7的定义同上述化合物I中的定义。 
在反应过程中，式I’中的基团R0连同邻近的氧原子从结构式上脱除，形成水或醇。R0优选H或C1-4烷基，更优选H或C1-2烷基。 
其中所述的含有内酯环结构的罗丹明类染料优选而不局限于：罗丹明B，罗丹明110，罗丹明6G，罗丹明3GB，罗丹明3GO，罗丹明123等。 
所述的水合肼优选采用浓度为50％或85％的水溶液。这样的水合肼可以在市场上直接买到。 
所述的醇溶剂优选而不局限于：甲醇、乙醇、丙醇、和异丙醇。使用这些醇的优点是其沸点不高。其回流温度不高，便于进行回流和反应、也便于在反应后蒸发脱除。 
所述的室温一般指-15℃-40℃。 
罗丹明染料在室温下为固体，当其加入醇溶剂后，需要进行搅拌，优选剧烈搅拌，以使其均匀分散于醇溶剂中，优选完全溶解于醇溶剂中，以利于其与水合肼的反应。 
罗丹明染料分散或溶解于醇溶剂后，滴加水溶液形式的水合肼。水合肼的加入量优选相对于罗丹明染料过量，以利于反应进行。水合肼的加入量优选1-5倍过量。 
水合肼滴加完毕后，加热使溶剂回流并反应，直至反应液变为几乎澄清。优选加热使溶剂回流并反应的时间为1-3小时。然后，将反应液冷却到室温，蒸去溶剂。然后加入酸(优选盐酸)调至酸性(pH 2-5)，在搅拌同时加入碱溶液，优选碱性水溶液，更优选氢氧化钠水溶液，调至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并优选用去离子水洗涤滤饼3次。真空干燥后，优选用乙醇进行重结晶。做核磁和高分辨质谱表征。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H，NH2)(其他位置氢的化学位移因不同罗 丹明类染料不同而不同)。 
(2)将步骤(1)中得到的中间体II与乙二醛反应，得到中间体III：将中间体II加入反应容器中，再加入醇溶剂和化学计量过量的乙二醛，然后在室温下搅拌反应1-3小时，蒸发去除溶剂，重结晶提纯，得到中间体III化合物。反应式如下所示。 
Figure G2009101998457D00131
该步骤中的醇溶剂优选而不局限于：甲醇、乙醇、丙醇、和异丙醇。这些醇的沸点不高，便于进行回流和反应、也便于反应后的脱除。 
乙二醛优选采用浓度为40％的乙二醛水溶液，该水溶液可以直接从市场上买到。乙二醛的加入量优选相对于中间体II过量，以利于反应进行。乙二醛的加入量优选1-3倍过量。 
该步骤优选在惰性气体保护下进行反应，这样可以使产率更高。 
所述的室温一般指-15℃-40℃。 
反应时间优选1.5-2.5小时，更优选2小时。 
反应结束后，蒸去溶剂。优选用乙醇重结晶提纯产物。产物通过核磁和高分辨质谱进行表征。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：8.02(d，1H，＝CH-)，9.42(d，1H，O＝CH-)(其他位置氢的化学位移因不同罗丹明类染料不同而不同)。 
(3)将步骤(2)中得到的中间体III与具有取代基R8的苯胺化合物反应，得到产物式I化合物：将中间体III化合物加入反应容器中，再加入醇溶剂和过量的所述苯胺化合物，然后室温搅拌反应1-3小时，蒸去溶剂，重结晶提纯，得到式I化合物。反应式如下所示。 
Figure G2009101998457D00141
其中所述的醇溶剂优选而不局限于：甲醇、乙醇、丙醇、和异丙醇。 
苯胺化合物的加入量优选相对于中间体III过量，优选为1-1.5倍过量。 
该反应优选在惰性气体保护下进行，这样以利于产率更高。 
反应时间优选1.5-2.5小时，更优选2小时。 
所述的室温一般指-15℃-40℃。 
反应结束后，蒸去溶剂。优选减压蒸去溶剂。然后优选用乙醇重结晶提纯产物。产物由核磁和高分辨质谱表征。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：8.01(d，1H，-CH＝N-)，8.21(d，1H，N-N＝CH-)(其他位置氢的化学位移因不同罗丹明类染料不同而不同)。 
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、m、n、M、和R10的定义同上述式I化合物中的定义。 
所得荧光染料可通过本领域公知的分离和纯化技术回收，以达到需要的纯度。 
本发明中使用的各种原料均可市售获得，或者可通过本领域技术人员公知的方法或现有技术中公开的方法由本领域公知的原料简单地制备得到。 
应认识到，本发明化合物中的各种环取代基有一些可在上述步骤进行之前或刚完成后，通过标准的芳族取代反应来引入或通过常规的官能团修饰来产生，这包括在本发明的方法步骤方面。这种反应和修饰包括例如取代基通过芳族取代反应的引入、取代基的还原、取代基的烷基化和取代基的氧化。用于这些过程的试剂和反应条件是化学领域公知的。芳族取代反应的具体实例包括用浓硝酸引入硝基，用例如酰卤和路易斯酸(如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入酰基，用烷基卤和路易斯酸(如三氯化铝)在Friedel Crafts条件下引入烷基，和引入卤素基团。修饰的具体实 例包括通过例如用镍催化剂进行催化氢化或者用铁在盐酸存在下进行加热处理，将硝基还原成氨基；将烷硫基氧化成烷基亚磺酰基或烷基磺酰基。 
包含式I化合物的本发明荧光缀合物可通过本领域已知的常规方法合成。 
组合物
在再另一个方面，本发明还提供包含上述式I化合物或其缀合物的组合物，所述组合物用于汞离子的检测。 
本发明的组合物优选呈水溶液形式，或者在临用前用水配制为溶液形式。 
使用
在再另一个方面，本发明还提供使用上述式I化合物或其缀合物、或使用包含式I化合物或其缀合物的组合物，来检测汞离子的方法，该方法包括使用上述式I化合物或其缀合物或包含式I化合物的组合物检测样品中的汞离子。 
本发明的荧光探针化合物可以用于环境中检测汞离子，例如在环境水溶液中检测汞离子。也可以用于检测活细胞内汞离子的荧光成像。 
由于本发明化合物在活细胞内的应用比较特殊，下面特别进行具体的介绍。下面还简单介绍了该化合物在环境水溶液和海水中的应用。 
活细胞内应用： 
探针在细胞内探测汞离子性能的实验方法是将含有探针分子的中性缓冲液加入到培养好的细胞中，在37℃、含5％CO2的细胞培养箱中孵育0.5小时，用上述缓冲溶液或培养液充分洗涤后，用荧光显微镜成像得到空白图像。向上述含探针的细胞培养液中加入Hg(N03)2溶液(最终浓度为10μM)37℃、含5％CO2的细胞培养箱中孵育0.5小时，用培养液冲洗后，再进行荧光显微成像得到细胞内汞离子的分布图像，由此得到汞离子的存在、在细胞内的区域分布等信息。 
本发明化合物或其缀合物或其组合物在环境水溶液中应用方法，是本行业内的常规方法。具体是：是将定量探针溶解于定量有机溶剂或有机/水混合溶剂中，形成一定浓度的探针溶液。然后取一定量的探 针溶液加入到被测的含汞离子的水溶液环境体系中，作用10-30分钟后，取样进行荧光检测。 
本发明荧光探针在海水中的应用是：是将定量探针溶解于定量有机溶剂或有机/水混合溶剂中，形成一定浓度的探针溶液。然后取一定量的探针溶液加入到被测的海水体系中，作用10-30分钟后，取样进行荧光检测。 
效果
本发明涉及的探针分子具有极其重要的应用价值。特别是该系列探针分子对pH变化极不敏感，检测灵敏度高，对各种金属离子，阴离子以及硫化物都具有很好的抗干扰能力，并且可以实现在活细胞内汞离子的荧光成像，使得这类探针作为测定汞离子浓度变化的试剂是极其有用的。由以上描述以及本领域技术人员公知的常识，可了解本发明罗丹明类染料分子荧光探针的各种优点，包括但不限于以下： 
(1)本发明荧光探针分子，激发和发射光谱在可见区，荧光量子产率高，对溶剂极性不敏感，并且化学/光稳定性好。 
(2)本发明荧光探针分子的设计基于以汞离子引发探针分子开环以及水解为机理，探针分子络合汞离子前后荧光发射约有370倍的增长。荧光探针分子对汞离子有单一选择性，硫化物如半胱氨酸对检测几乎没有干扰。另外荧光探针分子对pH变化不敏感，在pH 4.9-7.7的范围内，pH变化对汞离子的荧光检测基本无影响。 
(3)本发明荧光探针分子可以在海水等实际水样体系中检测到ppb级汞离子浓度，并且有很好的线形关系。 
(4)探针分子细胞渗透性好，对细胞本身毒副作用小，可以实现活细胞内汞离子的荧光成像检测。 
实施例 
实施例1 
探针RHg1的合成： 
Figure G2009101998457D00171
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。 
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体RB1(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.31(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOF MS(ES)： m/z Calcd for C30H34N4O3 2+：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg1的合成： 
将中间体2(0.51g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和邻氨基苯酚(0.44g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg1(80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ：1.16(t，J＝20Hz，12H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，6.79(t，J＝8Hz，1H)，6.91(d，J＝8Hz，1H)，7.09(d，J＝20Hz，1H)，7.15(m，J＝12Hz，2H)，7.20(s，1H)，7.49(m，J＝36Hz，2H)，8.02(m，J＝20Hz，2H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：165.8，156.0，152.7，149.2，144.9，134.5，129.9，128.4，127.4，123.9，120.1，115.4，108.2.104.7，98.07，66.0，44.3，12.6；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC36H37N5O3Na+：610.2794，Found：610.2797 
实施例2 
探针RHg1对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg1评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg1加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，探针激发波长为510nm，探针发射波长580nm，测试结果显示于图1中。从图中可以看到，探针RHg1对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例3 
探针RHg1对pH的不敏感性： 
使用上述合成的化合物RHg1评价对pH的响应，对于化合物RHg1以及RHg1-汞离子分别在离子强度为0.1的水溶液中调节pH值为4.9左右，测定荧光强度后，加入碱液，使pH值缓慢增大至7.7，记录相应的荧光强度变化，测试结果显示于图3中。从图中可以看出探针RHg1在pH 4.9-7.7的范围内，pH变化对荧光发射基本没有影响。因此探针RHg1可用于此pH范围内汞离子的检 测。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例4 
探针RHg1对汞离子检测的灵敏度： 
使用上述合成的化合物RHg1评价对ppb级浓度的汞离子的响应。将化合物RHg1(1μM)加入到含有1-5ppb浓度汞离子的海水中，记录相应的荧光强度变化，测试及过显示于图5中。从图中可以看出探针RHg1，在1-5ppb的范围内荧光强度有明显增强，且荧光强度随汞离子浓度变化呈现很好的线形关系。因此探针RHg1可用于低浓度汞离子的检测。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例5 
半胱氨酸对探针RHg1检测汞离子的影响： 
测试化合物RHg1(3μM)背景荧光，然后将半胱氨酸(10μM)和汞离子(1μM)分别加入其中并测试荧光强度，最后测试RHg1，半胱氨酸和汞离子混合溶液的荧光强度，做出柱状图(图6)对比。从图6可以看到，半胱氨酸对于RHg1检测汞离子基本无影响。所用仪器是Nikoneclipase TE 2000-5。 
实施例6 
探针RHg1在活细胞内对汞离子的检测： 
使用上述合成的化合物RHg1加入培养好的Hela细胞中在37℃下在培养基中培养30分钟，此时的RHg1在活的Hela细胞中的荧光很弱(图7(a))。向上述含探针的细胞培养液中加入汞离子后在37℃的条件下孵化30分钟，此时在活的Hela细胞中的荧光变得很强(图7(b))。亮场成像证明含有RHg1以及汞离子的Hela细胞在整个过程中均可以观测到(图7(c))。所用仪器是Nikon eclipaseTE 2000-5。 
实施例7 
探针RHg2的合成： 
Figure G2009101998457D00201
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，12H)，3.31(q，8H)，3.60(s，2H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.47(d，J＝16Hz，1H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.5，66.0，98.0，103.8，108.1，123.9，124.0，127.50，128.62，134.97，147.22，149.1，152.6，165.8；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C38H32N4O2 +：456.2525，Found：456.2536.
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体2(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.311(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOFMS(ES)：m/z Calcd for C30H32N4O3 +：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg2的合成： 
将中间体2(0.51g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和邻甲基苯胺(0.44g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg1(80％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.16(t，J＝20Hz，12H)，2.35(s，3H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，7.09(m，3H)，7.25(m，2H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.6，19.7，44.3，68.0，103.1，109.9，114.8，122.2，126.4，127.2，130.5，132.7，139.5，146.5，151.8，163.0；TOF MS(ES)：m/z CalcdforC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例8 
探针RHg2对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg2评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg2加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图10中。从图中可以看到，探针RHg2对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外纳、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例9 
探针RHg3的合成： 
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，12H)，3.31(q，8H)，3.60(s，2H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.47(d，J＝16Hz，1H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.5，66.0，98.0，103.8，108.1，123.9，124.0，127.50，128.62，134.97，147.22，149.1，152.6，165.8；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C28H32N4O2 +：456.2525，Found：456.2536. 
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体2(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.31(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C30H32N4O3 +：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg3的合成 
将中间体2(0.51g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和和苯胺(0.44g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v5∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg3(80％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.16(t，J＝20Hz，12H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，7.09(m，2H)，7.31(m，4H)，7.447(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.3，68.0，103.1，109.9，114.8，122.3，128.0，130.1，132.7，139.5，145.6，147.5，149.0，151.8，463.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z CalcdforC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250.
实施例10 
探针RHg3对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg3评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg3加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图11中。从图中可以看到，探针RHg3对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外纳、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例11 
探针RHg4的合成： 
Figure DEST_PATH_GDA0000159440830000021
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化纳(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，12H)，3.31(q，8H)，3.60(s，2H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.47(d，J＝16Hz，1H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.5，66.0，98.0，103.8，108.1，123.9，124.0，127.50，128.62，134.97，147.22，149.1，152.6，165.8；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C28H32N4O2 +：456.2525，Found：456.2536. 
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体2(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.31(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C30H32N4O3 +：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg4的合成 
将中间体2(0.51g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-溴苯胺(0.68g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.49g的黄色固体RHg4(75％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.16(t，J＝20Hz，12H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，7.09(m，3H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.3，68.0，103.1，114.8，121.3，124.5，126.4，128.3，131.3，132.9，139.5，145.6，147.5，148.0，151.8，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcdfor C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例12 
探针RHg4对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg4评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg4加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图12中。从图中可以看到，探针RHg4对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号： LS 55。 
实施例13 
探针RHg5的合成： 
Figure G2009101998457D00261
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，12H)，3.31(q，8H)，3.60(s，2H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.47(d，J＝16Hz，1H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.5，66.0，98.0，103.8，108.1，123.9，124.0，127.50，128.62，134.97，147.22，149.1，152.6，165.8；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C28H32N4O2 +：456.2525， Found：456.2536. 
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体2(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.31(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C30H32N4O3 +：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg5的合成： 
将中间体2(0.50g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N-(4-氨基苯基)乙酰胺(0.6g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.46g的黄色固体RHg5(73％)。1H NMR(400MHzCDCl3)δ(ppm)：1.16(t，J＝20Hz，12H)，2.03(s，3H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，7.09(s，3H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，10.01(s，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.6，22.9，44.3，68.1，103.1，109.9，114.3，122.9，126.4，128.3，132.7，136.9，139.5，144.6，147.5，151.8，163.0，168.9，；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例14 
探针RHg5对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg5评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg5加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图13中。从图中可以看到，探针RHg5对汞 离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例15 
探针RHg6的合成： 
Figure G2009101998457D00281
(1)中间体3的合成 
将罗丹明B(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.63g目标产物，产率55.3％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，12H)，3.31(q，8H)，3.60(s，2H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.47(d，J＝16Hz，1H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.5，66.0，98.0，103.8，108.1，123.9，124.0，127.50，128.62，134.97， 147.22，149.1，152.6，165.8；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C28H32N4O2 +：456.2525，Found：456.2536. 
(2)中间体2的合成 
将中间体3(0.46g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体2(76％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.15(t，J＝16Hz，12H)，3.31(m，J＝12Hz，8H)，6.25(d，J＝8Hz，2H)，6.45(m，J＝20Hz，4H)，7.07(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.51(t，J＝16Hz，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.31，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，127.50，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49.；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C30H32N4O3 +：498.2631，Found：498.2618. 
(3)探针RHg6的合成： 
将中间体2(0.50g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和(2-(2-(4-氨基苯氧基)乙氧基)乙醇)(0.79g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.54g的黄色固体RHg6(80％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.16(t，J＝20Hz，12H)，3.33(m，J＝20Hz，8H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.46(s，2H)，6.52(d，J＝8Hz，2H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.6，44.3，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C22H16N4O3 +：384.1222，Found：384.1235. 
实施例16 
探针RHg6对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg6评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg6加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙 醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图14中。从图中可以看到，探针RHg6对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例17 
探针RHg7的合成： 
Figure G2009101998457D00301
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s， 2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg7的合成： 
将中间体4(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和苯胺(0.44g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v5∶1)，得到0.42g的黄色固体RHg7(80％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，7.09(m，2H)，7.31(m，4H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，44.9，68.0，103.1，109.9，114.8，120.6，122.3，128.0，130.1，132.7，139.5，145.6，147.5，149.0，151.8，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例18 
探针RHg7对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg7评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg7加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图15中。从图中可以看到，探针RHg7对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例19 
探针RHg8的合成： 
Figure G2009101998457D00321
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml 水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg8的合成： 
将中间体2(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-氨基苄腈(0.47g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.38g的黄色固体RHg8(78％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.47(m，6H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，44.9，68.0，103.1，109.9，111.1，115.7，120.6，123.0，126.4，128.3，131.3，133.5，139.5，145.6，147.5，151.8，153.3，163.0；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
买施例20 
探针RHg8对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg8评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg8加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图16中。从图中可以看到，探针RHg8对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例21 
探针RHg9的合成： 
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压 蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg9的合成： 
将中间体4(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N-(4-氨基苯基)乙酰胺(0.6g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.41g的黄色固体RHg9(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，2.03(s，3H)，3.14(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，7.09(s，3H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，10.01(s，1H)； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，22.9，44.9，68.1，103.1，109.9，114.3，120.6，122.9，126.4，128.3，132.7，136.9，139.5，144.6，147.5，151.8，163.0，168.9，； TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例22 
探针RHg9对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg9评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg9加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图17中。从图中可以看到，探针RHg9对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例23 
探针RHg10的合成： 
Figure G2009101998457D00361
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回 流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg10的合成： 
将中间体4(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N-苯基对苯二胺(4-Aminodiphenylamine)(0.74g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.52g的黄色固体RHg10(84％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，7.09(m，4H)，7.31(m，4H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，9.77(s，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，44.6，68.0，103.1， 109.9，114.8，118.3，119.1，120.4，123.2，126.4，128.3，129.7，131.3，132.7，138.0，138.5，139.5，145.6，147.5，151.7，163.0，168.0，；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例24 
探针RHg10对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg10评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg10加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图18中。从图中可以看到，探针RHg10对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例25 
探针RHg11的合成： 
Figure G2009101998457D00381
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，l H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg11的合成： 
将中间体4(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和对氨基苯乙酮(4-Aminoacetophenone)(0.54g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.43g的黄色固体RHg11(75％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，2.55(s，3H)，3.14(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，7.09(d，J＝8Hz， 1H)，7.47(m，4H)，7.95(m，3H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，29.3，44.6，68.0，103.1，109.9，114.8，120.9，122.2，126.4，128.0，128.3，130.1，132.7，135.2，139.5，145.6，147.5，151.8，153.4，163.0，168.0，199.8，；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例26 
探针RHg11对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg11评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg11加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图19中。从图中可以看到，探针RHg11对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例27 
探针RHg12的合成： 
Figure G2009101998457D00411
(1)中间体5的合成 
将罗丹明3GB(1.16g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.67g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C25H26N4O2 +：414.2056，Found：414.2072. 
(2)中间体4的合成 
将中间体5(0.41g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.42g的黄色固体4(77％)。1H NMR(400MHz CDCl3) δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.81(s，2H)，6.10(m，2H)，6.22(d，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，109.9，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，154.3，165.87，193.5；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC27H26N4O3 +：454.2005，Found：454.2014. 
(3)探针RHg12的合成： 
将中间体4(0.45g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N，N-二甲基对苯二胺(0.54g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.50g的黄色固体RHg12(88％)。1H NMR(400MHzCDCl3)δ(ppm)：1.25(t，6H)，1.97(s，3H)，3.13(s，6H)，3.44(t，4H)，5.81(s，2H)，6.01(s，2H)，6.10(m，1H)，6.27(s，2H)，6.83(m，2H)，7.09(m，3H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.9，20.1，40.2，44.9，68.0，103.1，109.9，114.8，115.6，120.9，123.2，126.4，128.3，131.3，132.7，138.5，139.5，145.6，147.5，148.1，151.8，163.0，168.0. 
实施例28 
探针RHg12对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg12评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg12加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图20中。从图中可以看到，探针RHg12对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例29 
探针RHg13的合成： 
(1)中间体7的合成 
将罗丹明6G(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.64g目标产物，产率60％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C26H28N4O2 +：428.2212，Found：428.2234. 
(2)中间体6的合成 
将中间体7(0.43g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.33g的黄色固体6(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3) δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H28N4O3 +：468.2161，Found：468.2178. 
(3)探针RHg13的合成： 
将中间体6(0.47g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-甲氧基苯胺(0.49g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.51g的黄色固体RHg13(89％)。1H NMR(400MHzCDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，3.77(s，3H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，7.09(m，3H)，7.20(d，J＝8Hz，2H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，55.8，68.0，100.0，115.6，119.9，123.3，128.7，132.7，139.5，141.3，142.6，147.5，159.1，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例30 
探针RHg13对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg13评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg13加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图21中。从图中可以看到，探针RHg13对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例31 
探针RHg14的合成： 
Figure G2009101998457D00451
(1)中间体7的合成 
将罗丹明6G(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.64g目标产物，产率60％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C26H28N4O2 +：428.2212，Found：428.2234. 
(2)中间体6的合成 
将中间体7(0.43g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃) /乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.33g的黄色固体6(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H28N4O3 +：468.2161，Found：468.2178. 
(3)探针RHg14的合成： 
将中间体6(0.47g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-氯甲基苯胺(0.56g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.49g的黄色固体RHg14(83％)。1H NMR(400MHzCDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，4.64(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.47(m，6H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，46.3，68.0，103.1，109.9，114.8，122.5，126.4，128.3，129.9，132.3，136.3，142.6，148.8，149.0，163.0；TOF MS(ES)：m/zCalcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例32 
探针RHg14对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg14评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg14加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图22中。从图中可以看到，探针RHg14对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例33 
探针RHg15的合成： 
(1)中间体7的合成 
将罗丹明6G(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.64g目标产物，产率60％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C26H28N4O2 +：428.2212，Found：428.2234. 
(2)中间体6的合成 
将中间体7(0.43g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.33g的黄色固体6(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H28N4O3 +：468.2161，Found：468.2178. 
(3)探针RHg15的合成： 
将中间体6(0.47g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-氨基苯甲酸(4-aminobenzoic acid)(0.55g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg15(80％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.18(d，J＝8Hz，2H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，12.79(s，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，68.0，100.1，114.8，119.9，122.2，126.4，128.7，131.6，139.5，142.6，147.5，148.8，154.2，163.0，168.0，169.3，；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例34 
探针RHg15对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg15评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg15加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图23中。从图中可以看到，探针RHg15对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、 钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例35 
探针RHg16的合成： 
Figure G2009101998457D00491
(1)中间体7的合成 
将罗丹明6G(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.64g目标产物，产率60％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97， 149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C26H28N4O2 +：428.2212，Found：428.2234. 
(2)中间体6的合成 
将中间体7(0.43g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.33g的黄色固体6(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H28N4O3 +：468.2161，Found：468.2178. 
(3)探针RHg16的合成： 
将中间体6(0.47g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和邻联甲苯胺(o-Tolidine)(0.85g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.49g的黄色固体RHg16(78％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.30(d，J＝8Hz，2H)，7.47(m，6H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，68.0，100.1，114.8，116.8，119.9，122.8，126.4，128.7，129.2，132.7，134.9，139.5，142.6，147.3，148.8，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例36 
探针RHg16对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg16评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物 RHg16加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图24中。从图中可以看到，探针RHg16对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例37 
探针RHg17的合成： 
(1)中间体7的合成 
将罗丹明6G(1.2g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.64g目标产物，产率60％。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)， 5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C26H28N4O2 +：428.2212，Found：428.2234. 
(2)中间体6的合成 
将中间体7(0.43g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.33g的黄色固体6(70％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.47(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，7.85(t，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC28H28N4O3 +：468.2161，Found：468.2178. 
(3)探针RHg17的合成： 
将中间体6(0.47g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N-苯基对苯二胺(4-Aminodiphenylamine)(0.74g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.53g的黄色固体RHg17(83％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.21(t，6H)，1.87(s，6H)，3.14(t，4H)，4.23(s，2H)，5.01(s，1H)，6.10(s，2H)，6.27(s，2H)，7.09(m，4H)，7.31(m，4H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，9.77(s，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，19.8，44.5，68.0，100.1，114.8，119.9，118.3，119.1，120.4，123.2，126.4，128.3，129.7，131.3，132.7，138.0，138.5，139.5，142.6，147.5，148.7，163.0，168.0，；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例38 
探针RHg17对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg17评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg17加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图25中。从图中可以看到，探针RHg17对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例39 
探针RHg18的合成： 
(1)中间体9的合成 
将罗丹明3GO(1.1g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压 蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.65g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C24H24N4O2 +：400.1899，Found：400.1886. 
(2)中间体8的合成 
将中间体9(0.40g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.35g的黄色固体8(79％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，2H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC26H24N4O3 +：440.1848，Found：440.1862. 
(3)探针RHg18的合成： 
将中间体8(0.44g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-溴苯胺(0.68g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.48g的黄色固体RHg18(81％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，5.85(s，2H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(d，J＝8Hz，2H)，7.09(m，3H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，68.0，103.1，114.8，121.3，124.5，126.4，128.3，131.3，132.9，139.5，145.6，147.5，148.0，151.8，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例40 
探针RHg18对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg18评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg18加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图26中。从图中可以看到，探针RHg18对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例41 
探针RHg19的合成： 
(1)中间体9的合成 
将罗丹明3GO(1.1g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回 流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.65g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C24H24N4O2 +：400.1899，Found：400.1886. 
(2)中间体8的合成 
将中间体9(0.40g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.35g的黄色固体8(79％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，2H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC26H24N4O3 +：440.1848，Found：440.1862. 
(3)探针RHg19的合成： 
将中间体8(0.44g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-甲氧基苯胺(0.49g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg19(87％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.77(s，3H)，5.85(s，2H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(d，J＝8Hz，2H)，7.09(m，3H)，7.20(d，J＝8Hz，2H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，55.8，68.0，103.0，109.9，115.6，123.3，128.7，132.7，139.5，141.3，145.6，147.5，159.1，163.0，168.0；TOF MS(ES)： m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例42 
探针RHg19对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg19评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg19加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图27中。从图中可以看到，探针RHg19对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例43 
探针RHg20的合成： 
Figure G2009101998457D00571
(1)中间体9的合成 
将罗丹明3GO(1.1g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。 室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.65g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C24H24N4O2 +：400.1899，Found：400.1886. 
(2)中间体8的合成 
将中间体9(0.40g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.35g的黄色固体8(79％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，2H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC26H24N4O3 +：440.1848，Found：440.1862. 
(3)探针RHg20的合成： 
将中间体8(0.44g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和(2-(2-(4-氨基苯氧基)乙氧基)乙醇(0.79g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.43g的黄色固体RHg20(70％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.56(t，2H)，3.70(t，2H)，3.79(t，2H)，4.11(t，2H)，4.78(s，1H)，5.85(s，2H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，61.3，68.0，70.0，72.6，103.1，115.7，122.9， 128.3，131.0，132.7，135.9，140.6，145.6，147.5，151.8，155.9，168.3；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C20H16N4O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例44 
探针RHg20对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg20评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg20加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图28中。从图中可以看到，探针RHg20对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例45 
探针RHg21的合成： 
Figure G2009101998457D00591
(1)中间体9的合成 
将罗丹明3GO(1.1g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.65g目标产物，产率65％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C24H24N4O2 +：400.1899，Found：400.1886. 
(2)中间体8的合成 
将中间体9(0.40g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.35g的黄色固体8(79％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.35(q，4H)，3.62(s，2H)，5.85(s，2H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC26H24N4O3 +：440.1848，Found：440.1862. 
(3)探针RHg21的合成： 
将中间体8(0.44g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和3-乙炔苯胺(3-Ethynylaniline)(0.47g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.40g的黄色固体RHg21(75％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：1.18(t，6H)，3.06(s，1H)，3.35(q，4H)，5.85(s，2H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(d，J＝8Hz，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.20(m，2H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34 (d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)，δ：12.7，44.5，68.0，79.9，82.3，103.1，109.9，114.8，122.0，124.0，126.4，127.8，128.3，129.7，130.8，131.3，132.7，139.5，145.6，147.5，148.6，151.8，163.0，；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC30H21N5O2 +：344.1273，Found：344.1250. 
实施例46 
探针RHg21对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg21评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg21加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图29中。从图中可以看到，探针RHg21对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例47 
探针RHg22的合成： 
Figure G2009101998457D00621
(1)中间体11的合成 
将罗丹明110(0.9g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.52g目标产物，产率60％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H17N4O2 +：345.1346，Found：345.1351. 
(2)中间体10的合成 
将中间体11(0.34g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.31g的黄色固体10(81％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)， 7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C22H17N4O3 +：385.1295，Found：385.1283. 
(3)探针RHg22的合成： 
将中间体10(0.38g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和2-(2-(4-氨基苯氧基)乙氧基)乙醇(0.79g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.44g的黄色固体RHg22(76％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：3.56(t，2H)，3.70(t，2H)，3.79(t，2H)，4.11(t，2H)，4.78(s，1H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：61.3，68.0，70.0，72.6，103.1，115.7，122.9，128.3，131.0，132.7，135.9，140.6，145.6，147.5，151.8，155.9，168.3；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C32H30N5O5 +：564.2241，Found：564.2259. 
实施例48 
探针RHg22对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg22评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg22加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图30中。从图中可以看到，探针RHg22对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例49 
探针RHg23的合成： 
Figure G2009101998457D00641
(1)中间体11的合成 
将罗丹明110(0.9g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.52g目标产物，产率60％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H17N4O2 +：345.1346，Found：345.1351. 
(2)中间体10的合成 
将中间体11(0.34g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.31g的黄色固体10(81％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)， 7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C22H17N4O3 +：385.1295，Found：385.1283. 
(3)探针RHg23的合成： 
将中间体10(0.38g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和4-氨基苯甲酸(4-aminobenzoic acid)(0.55g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 1∶1)，得到0.41g的黄色固体RHg23(82％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(d，J＝8Hz，2H)，7.09(d，J＝8Hz，1H)，7.47(m，4H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.18(d，J＝8Hz，2H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，12.79(s，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：68.0，103.1，109.9，114.8，122.2，126.4，128.7，131.6，139.5，145.6，147.5，151.8，154.2，163.0，168.0，169.3，；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C29H22N5O4 +：504.1666，Found：504.1685. 
实施例50 
探针RHg23对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg23评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg23加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图31中。从图中可以看到，探针RHg23对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例51 
探针RHg24的合成： 
Figure G2009101998457D00661
(1)中间体11的合成 
将罗丹明110(0.9g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.52g目标产物，产率60％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H17N4O2 +：345.1346，Found：345.1351. 
(2)中间体10的合成 
将中间体11(0.34g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.31g的黄色固体10(81％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)， 7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)； 13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C22H17N4O3 +：385.1295，Found：385.1283. 
(3)探针RHg24的合成： 
将中间体10(0.38g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和N-苯基对苯二胺(4-Aminodiphenylamine)(0.74g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 1∶1)，得到0.47g的黄色固体RHg24(83％)。 1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(m，4H)，7.09(m，4H)，7.31(m，4H)，7.47(m，2H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)，9.77(s，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：68.0，103.1，109.9，114.8，118.3，119.1，120.4，123.2，126.4，128.3，129.7，131.3，132.7，138.0，138.5，139.5，145.6，147.5，151.7，163.0，168.0，；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C34H27N6O2 +：551.2190，Found：551.2169. 
实施例52 
探针RHg24对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg24评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg24加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图32中。从图中可以看到，探针RHg24对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 
实施例53 
探针RHg25的合成： 
Figure G2009101998457D00681
(1)中间体11的合成 
将罗丹明110(0.9g，2.5mmol)加入装有30ml乙醇的100ml单口烧瓶中。室温下剧烈搅拌，再量取85％的水合肼3ml(过量)。滴加完毕后，空气中回流2小时。溶液颜色从深紫色先变为浅棕色最后到几乎澄清。冷却到室温，减压蒸去乙醇。然后加入50ml盐酸(1M)，得到红色溶液；搅拌同时加入70ml氢氧化钠(1M)，至pH达到9-10之间，出现大量沉淀。过滤，并用15ml水洗涤滤饼3次。真空干燥后，色谱柱分离得到0.52g目标产物，产率60％。1HNMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：3.62(s，2H)，5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)；13CNMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，149.21，152.64，152.87，165.87；TOF MS(ES)：m/z Calcd forC20H17N4O2 +：345.1346，Found：345.1351. 
(2)中间体10的合成 
将中间体11(0.34g，1.0mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和40％乙二醛水溶液(0.58g，4.0mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 5∶1)，得到0.31g的黄色固体10(81％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：5.85(s，4H)，6.14(d，J＝8Hz，2H)，6.25(m，4H)，7.10(d，J＝8Hz，1H)， 7.45(m，J＝8Hz，1H)，7.48(t，2H)，8.02(d，J＝8Hz，1H)，9.42(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：66.04，98.09，103.78，108.17，123.98，124.07，126.58，128.62，134.97，141.22，149.21，152.64，152.87，165.87，192.49；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C22H17N4O3 +：385.1295，Found：385.1283. 
(3)探针RHg25的合成： 
将中间体10(0.38g，1mmol)加入100mL的单口烧瓶中，再加入30mL无水乙醇和2-甲基-3-三氟甲基苯胺(2-Methyl-3-(trifluoromethyl)aniline)(0.47g，4mmol)(0.70g，4mmol)(过量)，然后在氮气保护下，室温搅拌2h，减压蒸去溶剂。硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚(bp 60-90℃)/乙酸乙酯(v/v 1∶1)，得到0.43g的黄色固体RHg25(80％)。1H NMR(400MHz CDCl3)δ(ppm)：2.35(s，3H)，5.85(s，4H)，6.27(d，J＝8Hz，2H)，6.44(s，2H)，6.54(d，J＝8Hz，2H)，7.00(m，1H)，7.09(m，2H)，7.47(m，2H)，7.30(d，J＝8Hz，1H)，7.95(d，J＝8Hz，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，8.34(d，J＝8Hz，1H)；13C NMR(400MHz，CDCl3)，δ：17.2，68.0，114.8，121.7，103.1，109.9，114.8，123.5，124.4，125.5，126.4，127.4，128.0，128.4，129.1，131.3，132.7，139.5，145.6，147.5，151.8，163.0，168.0；TOF MS(ES)：m/z Calcd for C30H23F3N5O2 +：542.1798，Found：542.1786. 
实施例54 
探针RHg25对汞离子选择性： 
使用上述合成的化合物RHg25评价对汞离子的选择性。将5μM的化合物RHg25加到50倍过量的各种金属离子(汞离子为15倍过量)的乙醇水溶液中(乙醇/水＝1/1，v/v)，测试结果显示于图33中。从图中可以看到，探针RHg25对汞离子具有很高的选择性，汞离子的加入产生很大的荧光和紫外的增强，另外钠、钾、钙、镁、铜等金属离子对检测没有干扰。所用仪器为荧光分光光度计，型号：LS 55。 

Claims (3)

1.一类荧光探针化合物，所述探针化合物具有如下结构通式I：
Figure FDA00002327557600011
其中：
R1、R2、R3和R4各自独立选自H或C1-6烷基；
R5、R6和R7各自独立选自H或C1-6烷基；
R8选自H、C1-6烷基、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、氯代甲基、OR9、N(R9)2、(CH2)mCOOM；
R9为H、C1-6烷基、(CH2CH2O)nH；
n、m各自为0-6的整数；
M为H、K、Na、Li、NH4。
2.如权利要求1所述的化合物，该化合物为：
Figure FDA00002327557600012
3.一种权利要求1或2所述的化合物的用途，用于检测汞离子。
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Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102492417A (zh) * 2011-12-07 2012-06-13 天津工业大学 一种汞离子荧光探针及制备方法
CN102516992A (zh) * 2011-12-07 2012-06-27 天津工业大学 一种检测Hg2+离子的荧光探针及其合成方法和用途
CN102634225B (zh) * 2012-03-24 2013-11-06 大连理工大学 5(6)取代的罗丹明异构体的拆分合成方法
CN102796395B (zh) * 2012-08-17 2013-11-06 大连理工大学 一类罗丹明荧光染料，其制备方法及应用
CN103012418B (zh) * 2012-12-04 2014-12-10 山东大学 一种含1,3,4-噁二唑结构单元的罗丹明B类pH荧光探针及应用
CN103102338B (zh) * 2012-12-28 2015-02-18 深圳先进技术研究院 生物巯基荧光探针、其制备方法及应用
CN103242327A (zh) * 2013-04-11 2013-08-14 天津师范大学 对N-甲基环戊醛基罗丹明6GpH荧光分子探针及其制备方法与用途
CN103242330B (zh) * 2013-04-11 2014-12-31 天津师范大学 苯基亚胺基罗丹明6g的氢离子探针化合物及其制备方法与应用
CN103232465A (zh) * 2013-04-11 2013-08-07 天津师范大学 二苯甲酮罗丹明6g酰肼西弗碱化合物的制备方法与用途
CN103242328A (zh) * 2013-04-11 2013-08-14 天津师范大学 对N-乙酰氨基苯基罗丹明6GpH荧光分子探针及其制备方法与用途
CN103242331A (zh) * 2013-04-11 2013-08-14 天津师范大学 含联苯基团的罗丹明6GpH荧光分子探针及其制备方法与用途
CN103232466A (zh) * 2013-04-11 2013-08-07 天津师范大学 4-羟基取代苯基亚胺型罗丹明6g荧光分子探针的制备方法与用途
CN103242329B (zh) * 2013-04-11 2015-04-29 天津师范大学 9-芴-N’-(罗丹明6G-酰肼)pH荧光分子探针及其制备方法与用途
CN103408563A (zh) * 2013-07-05 2013-11-27 安徽建筑大学 一种汞离子针对性检测的新型荧光探针及其制备方法及其用途
CN103436253B (zh) * 2013-08-19 2015-01-07 滨州医学院 一种检测亚铁离子的罗丹明荧光探针及其制备方法
CN103524516B (zh) * 2013-09-11 2015-08-19 江南大学 一种新型罗丹明类荧光探针
CN103570736B (zh) * 2013-11-05 2015-06-10 苏州大学 一种罗丹明-噁二唑衍生物、其制备方法及应用
CN103820103A (zh) * 2014-02-20 2014-05-28 东华大学 一种检测汞离子的反应型罗丹明荧光探针及其制备方法
CN103980297B (zh) * 2014-04-15 2016-11-23 大连大学 一种检测汞离子的多功能成像探针
CN104140431B (zh) * 2014-06-27 2017-04-26 江南大学 一种可检测、分离重金属离子的罗丹明类荧光探针及其制备方法
CN104479671B (zh) * 2014-12-12 2016-06-01 华南师范大学 用于检测水相介质和细胞内汞离子的罗丹明b双硫类荧光探针及制备与应用
CN105348293B (zh) * 2015-09-25 2018-06-26 海南医学院 一种基于罗丹明B衍生物的Al3+荧光探针的制备和应用
CN105385439B (zh) * 2015-12-01 2017-12-26 东华大学 检测汞离子的反应型罗丹明类荧光探针及其制备与应用
CN106565758B (zh) * 2016-09-30 2019-07-02 上海师范大学 一种可用于简便检测水中铜、汞和银离子的氟硼吡咯类探针及其合成方法
CN107603270A (zh) * 2017-09-14 2018-01-19 郑州乐业生物科技有限公司 一种安全的荧光染料及其制备方法
CN107652299B (zh) * 2017-10-25 2019-03-12 东南大学 一种基于罗丹明b衍生物的多通道荧光探针及制备方法与应用
CN108129540A (zh) * 2018-01-25 2018-06-08 南京工业大学 一种通过光调控精确检测细胞膜上汞离子的荧光探针及其应用
CN113880852B (zh) * 2021-09-08 2022-09-02 三峡大学 聚集诱导发光的吡喃并喹啉类红光材料及其应用
CN113984726B (zh) * 2021-10-20 2024-02-02 上海大学 一种氨基苯硼酸功能化磁珠/乙二醛修饰dna检测汞离子的方法
CN114249742B (zh) * 2021-11-22 2022-11-01 郑州大学 一种光气探针、荧光书写检测笔及其在光气检测中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1752750A (zh) * 2005-09-16 2006-03-29 厦门大学 检测水中汞离子的化学试剂及其制备方法
CN101135644A (zh) * 2007-08-16 2008-03-05 南京大学 一种汞离子荧光显色剂及检测方法、测定试纸及其用途
CN101302220A (zh) * 2007-05-08 2008-11-12 中国科学院化学研究所 N-苯甲酰基罗丹明b肼及其制备方法与应用
CN101368945A (zh) * 2007-08-15 2009-02-18 中国科学院理化技术研究所 检测细胞内汞离子的荧光探针及合成方法和用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1752750A (zh) * 2005-09-16 2006-03-29 厦门大学 检测水中汞离子的化学试剂及其制备方法
CN101302220A (zh) * 2007-05-08 2008-11-12 中国科学院化学研究所 N-苯甲酰基罗丹明b肼及其制备方法与应用
CN101368945A (zh) * 2007-08-15 2009-02-18 中国科学院理化技术研究所 检测细胞内汞离子的荧光探针及合成方法和用途
CN101135644A (zh) * 2007-08-16 2008-03-05 南京大学 一种汞离子荧光显色剂及检测方法、测定试纸及其用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Wu,Dayu et al..Highly Sensitive Fluorescent Probe for Selective Detection of Hg2+ in DMF Aqueous Media.《Inorganic Chemistry》.2007,第46卷(第5期),第1538-1540页. *
Wu,Jia-Sheng er al..Rhodamine-based Hg2+-selective chemodosimeter in aqueous solution Fluorescent OFF-ON.《ORGANIC LETTERS》.2007,第9卷(第5期),第907-910页. *
Yang,Young-Keun er al..A rhodamine-based fluorescent and colorimetric chemodosimeter for the rapid detection of Hg2+ ions in aqueous media.《J.AM.CHEM.SOC.》.2005,第127卷(第48期),第16760-16761页. *

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