CN102060898B - 一种虫草素的提取方法 - Google Patents
一种虫草素的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102060898B CN102060898B CN 201110004151 CN201110004151A CN102060898B CN 102060898 B CN102060898 B CN 102060898B CN 201110004151 CN201110004151 CN 201110004151 CN 201110004151 A CN201110004151 A CN 201110004151A CN 102060898 B CN102060898 B CN 102060898B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cordycepin
- supernatant liquor
- extraction
- planetary ball
- powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Abstract
本发明公开了一种虫草素的提取方法。它是通过行星球磨法将冬虫夏草子实体研磨成粉末状，可使冬虫夏草粉末粒度达到0.1μm左右，从而增大颗粒的比表面积，有利于虫草素的溶出，利用超声溶解法，在合适的条件下，促进虫草素的溶解，提高提取率，再用活性炭和有机溶剂去除虫草素中色素，黄酮类化合物，多糖和蛋白质等杂质，得到了虫草素产品。相比现有提取虫草素的技术，利用本发明的虫草素提取方法其提取率可高达0.31‰以上，虫草素的纯度达到98％以上，并且本发明操作简便。因此本发明具有操作简便、虫草素提取效率高，纯度高的优点，为虫草素的有效利用创造了条件。
Description
技术领域：
本发明属于传统中药药理活性成分提取领域，具体涉及一种从人工冬虫夏草子实体中提取虫草素的方法。
背景技术：
虫草素又名虫草碱，其分子式是：C10N13H5O3，是冬虫夏草Cordyceps sinensis中的一类核苷类化合物，具有很好的抗真菌、细菌、病毒的活性，对链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪出血性败血症杆菌及葡萄球菌等病原菌的生长有抑制作用。同时虫草素还表现出抗HIV-I型病毒和选择性抑制梭菌属细菌活性。在治疗肿瘤时也发挥着很重要的作用。虫草素在冬虫夏草中的含量低，野生冬虫夏草的虫草素含量仅为5.4μg/g，人工冬虫夏草虫草素含量比野生冬虫夏草含量高，其中人工蛹虫草最高含量为4.71％。现在国际市场上虫草素价格昂贵，且在我国很少将虫草素作为有效地活性物质单独提取，而更多的是作为保健酒有效成分溶解的酒中，没有发挥出最大价值。我国人工栽培冬虫夏草数量巨大，提高虫草素的提取率具有巨大的市场前景。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种操作简便、虫草素提取率高、纯度高的虫草素的提取方法。
本发明通过行星球磨法将冬虫夏草子实体研磨成粉末状，可使冬虫夏草粉末粒度达到0.1μm左右，从而增大颗粒的比表面积，有利于虫草素的溶出，利用超声溶解法，在适宜的条件下，促进虫草素的溶解，提高提取率，再用活性炭和有机溶剂去除虫草素中色素，黄酮类化合物，多糖和蛋白质等杂质，使虫草素的纯度得到了提高，从而实现了本发明的目的。
本发明的虫草素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)粉碎：将干燥好的冬虫夏草Cordyceps sinensis子实体加入到行星球磨机中粉碎成粉末状；
(2)提取：将上一步骤制备的冬虫夏草子实体粉末加入到pH值为2～3的水中，粉末与水的质量体积比为1∶(10～20)g/mL，然后用超声波处理，处理温度为40～60℃，频率为30～50kHZ，处理时间为0.5～1h，处理完后，溶液经离心，收集上清液；
(3)纯化：在上清液中加入活性炭吸附色素直至上清液无颜色，然后将此上清液先用乙酸乙酯萃取，去除乙酸乙酯层，在剩余溶液中加入氯仿萃取，去除氯仿层，剩余液体经大孔树脂吸附层析，先用水洗脱至流出液无色，再用体积分数为30％～50％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，经干燥即得虫草素产品。
所述的步骤(1)中将干燥好的冬虫夏草子实体加入到行星球磨机中粉碎优选行星球磨机的研磨转速为300～500r/min，粉碎时间为0.5～1h，大小球个数比为1∶1，运行模式为交替模式。
所述的步骤(3)中在上清液中加入活性炭吸附色素，优选，活性炭与上清液的质量体积比为(10～30)∶1g/L。使用时，宜少量多次。
所述的步骤(3)中体积分数为30％～50％的乙醇水溶液，其pH值优选为5.0～6.0，这是因为虫草素含有碱性氮原子略微显碱性，用此溶液洗脱效率高。
本发明利用行星球磨法代替传统的中药粉碎机将冬虫夏草子实体研磨，可使冬虫夏草粉末粒度达到0.1μm左右，从而增大颗粒的比表面积，有利于虫草素的溶出，再在合适的条件下，利用超声溶解法促进虫草素的溶解，保护了虫草素的结构不被破坏，并提高了提取效率，再利用活性炭、乙酸乙酯和氯仿去除虫草素中色素，黄酮类化合物，多糖和蛋白质等杂质，使虫草素的纯度得到了提高，符合工业化生产要求。
相比现有提取虫草素的技术，利用本发明的虫草素提取方法其提取率可高达0j1‰以上，虫草素的纯度达到98％以上，并且本发明操作简便。
因此本发明具有操作简便、虫草素提取效率高，纯度高的优点，为虫草素的有效利用创造了条件。
具体实施方式：
以下是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
称取150g的干燥人工培养的冬虫夏草子实体，用力压碎后，加入到行星球磨机的250ml球磨灌中，调整转速为300r/min，氧化铝球个数为20(10大球和10小球)，采用正反交替研磨，交替时间5min，处理总时间为30min，得到冬虫夏草子实体粉末。将该粉末150g加入到1500ml的蒸馏水中，用0.1mol/LHCl调整pH为2，温度为50℃，用频率为30KHZ超声波处理1h，处理完后离心(3000r/min，10min)，收集上清液，在上清液中加入15g活性炭吸附色素，过滤，在滤液中再加入15g活性炭吸附色素，重复操作，直到上清液没有颜色为止，将此上清液先用300ml的乙酸乙酯在空化混悬萃取装置中萃取，弃去乙酸乙酯层，剩余液体再用300ml的氯仿在空化混悬萃取装置中萃取，弃去氯仿层，剩余液体上D101层析柱，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用pH为5.0的体积分数为30％的乙醇水溶液以3ml/min速度洗脱，收集洗脱液，真空干燥即得虫草素晶体，用高压液相色谱法鉴定虫草素纯度为：98.5％，提取率为0.34‰。
实施例2：
称取150g的干燥人工培养的冬虫夏草子实体，用力压碎后，加入到行星球磨机的250ml球磨灌中，调整转速为500r/min，氧化铝球个数为20(10大球和10小球)，采用正反交替研磨，交替时间5min，处理总时间为30min，得到冬虫夏草子实体粉末。将该150g粉末加入到1500ml的蒸馏水中，用0.1mol/LHCl调整pH为2.5，温度为40℃，用频率为50KHZ超声波处理45min，处理完后离心(3000r/min，10min)，收集上清液，在上清液中加入15g活性炭吸附色素，再过滤，在滤液中再加入15g活性炭吸附色素，重复操作，直到上清液没有颜色为止，将此上清液先用300ml的乙酸乙酯在空化混悬萃取装置中萃取，弃去乙酸乙酯层，剩余液体再用300ml的氯仿在空化混悬萃取装置中萃取，弃去氯仿层，剩余液体上D101层析柱，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用pH为6.0体积分数为50％的乙醇水溶液以3ml/min速度洗脱，收集洗脱液，真空干燥即得虫草素晶体，用高压液相色谱法鉴定虫草素纯度为：98.7％，提取率为0.32‰。
实施例3：
称取150g的干燥人工培养的冬虫夏草子实体，用力压碎后，加入到行星球磨机的250ml球磨灌中，调整转速为300r/min，氧化铝球个数为30(15大球和15小球)，采用正反交替研磨，交替时间5min，处理总时间为60min，得到冬虫夏草子实体粉末。将150g粉末加入到3000ml的蒸馏水中，用0.1mol/LHCl调整pH为3温度为50℃，用频率为50KHZ超声波处理45min，处理完后离心(3000r/min，10min)，收集上清液，在上清液中加入60g活性炭吸附色素，再过滤，在滤液中再加入60g活性炭吸附色素，重复操作，直到上清液没有颜色为止，将此上清液先用600ml的乙酸乙酯在空化混悬萃取装置中萃取，弃去乙酸乙酯层，剩余液体再用600ml的氯仿在空化混悬萃取装置中萃取，弃去氯仿层，剩余液体上D101层析柱，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用pH为6.0的体积分数为40％的乙醇水溶液以3ml/min速度洗脱，收集洗脱液，真空干燥即得虫草素晶体，用高压液相色谱法鉴定虫草素纯度为：98.4％，提取率为0.31‰。
实施例4：
称取150g的干燥人工培养的冬虫夏草子实体，用力压碎后，加入到行星球磨机的250ml球磨灌中，调整转速为300r/min，氧化铝球个数为20(10大球和10小球)，采用正反交替研磨，交替时间5min，处理总时间为30min，得到冬虫夏草子实体粉末。将150g粉末加入到2250ml的蒸馏水中，0.1mol/LHCl调整pH为3，温度为60℃，用频率为50KHZ超声波处理30min，处理完后离心(3000r/min，10min)，收集上清液，在上清液中加入30g活性炭吸附色素，再过滤，在滤液中再加入30g活性炭吸附色素，重复操作，直到上清液没有颜色为止，将此上清液先用400ml的乙酸乙酯在空化混悬萃取装置中萃取，弃去乙酸乙酯层，剩余液体再用400ml的氯仿在空化混悬萃取装置中萃取，弃去氯仿层，剩余液体上D101层析柱，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用pH为5.0的体积分数为30％的乙醇水溶液以5ml/min速度洗脱，收集洗脱液，真空干燥即得虫草素晶体，用高压液相色谱法鉴定虫草素纯度为：98.6％，提取率为0.34‰。
实施例5：
称取150g的干燥人工培养的冬虫夏草子实体，用力压碎后，加入到行星球磨机的250ml球磨灌中，调整转速为500r/min，氧化铝球个数为20(10大球和10小球)，采用正反交替研磨，交替时间5min，处理总时间为30min，得到冬虫夏草子实体粉末。将150g粉末加入到1500ml的蒸馏水中，用0.1mol/LHCl调整pH为2.5，温度为45℃，用频率为30KHZ超声波处理1h，处理完后离心(3000r/min，10min)，收集上清液，在上清液中加入45g活性炭吸附色素，再过滤，在滤液中再加入45g活性炭吸附色素，重复操作，直到上清液没有颜色为止，将此上清液先用300ml的乙酸乙酯在空化混悬萃取装置中萃取，弃去乙酸乙酯层，剩余液体再用300ml的氯仿在空化混悬萃取装置中萃取，弃去氯仿层，剩余液体上D101层析柱，先用蒸馏水洗脱至流出液无色，再用pH为5.5的体积分数为50％的乙醇水溶液以1ml/min速度洗脱，收集洗脱液，真空干燥即得虫草素晶体，用高压液相色谱法鉴定虫草素纯度为：98.0％，提取率为0.35‰。
Claims (3)
1.一种虫草素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）粉碎：将干燥好的冬虫夏草Cordyceps sinensis子实体加入到行星球磨机中粉碎成粉末状；
（2）提取：将上一步骤制备的冬虫夏草子实体粉末加入到pH值为2~3的水中，粉末与水的质量体积比为1：（10~20）g/mL，然后用超声波处理，处理温度为40~60℃，频率为30~50kHz，处理时间为0.5~1h，处理完后，溶液经离心，收集上清液；
（3）纯化：在上清液中加入活性炭吸附色素直至上清液无颜色，然后将此上清液先用乙酸乙酯萃取，去除乙酸乙酯层，在剩余溶液中加入氯仿萃取，去除氯仿层，剩余液体经大孔树脂吸附层析，先用水洗脱至流出液无色，再用体积分数为30%~50%，pH值为5.0~6.0的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，经干燥即得虫草素产品。
2.根据权利要求1所述的虫草素的提取方法，其特征在于，所述的步骤（1）中将干燥好的冬虫夏草子实体加入到行星球磨机中粉碎，其行星球磨机的研磨转速为300~500r/min，粉碎时间为0.5~1h，大小球个数比为1：1，运行模式为交替模式。
3.根据权利要求1所述的虫草素的提取方法，其特征在于，所述的步骤（3）中在上清液中加入活性炭吸附色素，其活性炭与上清液的质量体积比为（10~30）：1g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110004151 CN102060898B (zh) | 2011-01-10 | 2011-01-10 | 一种虫草素的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110004151 CN102060898B (zh) | 2011-01-10 | 2011-01-10 | 一种虫草素的提取方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102060898A CN102060898A (zh) | 2011-05-18 |
| CN102060898B true CN102060898B (zh) | 2013-05-08 |
Family
ID=43996417
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110004151 Expired - Fee Related CN102060898B (zh) | 2011-01-10 | 2011-01-10 | 一种虫草素的提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102060898B (zh) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103540476B (zh) * | 2012-07-09 | 2016-06-01 | 候圣文 | 利用蛹虫草冷渗法废弃滤液制造虫草保健酒的方法 |
| CN102872185B (zh) * | 2012-09-21 | 2014-05-07 | 大连民族学院 | 一种超声提取紫花苜蓿中香豆素的方法 |
| CN102936271B (zh) * | 2012-11-14 | 2015-04-22 | 石家庄藏诺生物股份有限公司 | 一种虫草素的提取方法 |
| CN103550262B (zh) * | 2013-11-01 | 2015-10-28 | 王颖 | 一种冬虫夏草精华物质的提取方法 |
| CN104664324A (zh) * | 2013-12-02 | 2015-06-03 | 于荣敏 | 人工培养蛹虫草子实体核苷有效部位制备方法和用途 |
| CN104926903B (zh) * | 2015-05-30 | 2018-05-01 | 北京汇林思生物科技有限公司 | 一种提取虫草中有效成分的方法 |
| CN105267253A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-01-27 | 西宁共进新材料科技有限公司 | 一种冬虫夏草提取物的提取方法 |
| CN105232585A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-01-13 | 西宁共进新材料科技有限公司 | 一种冬虫夏草提取物的提取方法 |
| CN105213436A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-01-06 | 西宁共进新材料科技有限公司 | 一种冬虫夏草提取物的提取方法 |
| CN105851244A (zh) * | 2016-05-25 | 2016-08-17 | 山西普德食品有限公司 | 一种虫草豆乳及其专用蛹虫草浓缩液 |
| CN105995287A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-10-12 | 合肥丰瑞隆生物科技有限公司 | 促消化饮料及其制备方法 |
| CN105942105A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-09-21 | 合肥丰瑞隆生物科技有限公司 | 蛹虫草饮料及其制备方法 |
| CN106071522A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-11-09 | 合肥丰瑞隆生物科技有限公司 | 润肺饮料及其制备方法 |
| CN106071521A (zh) * | 2016-06-01 | 2016-11-09 | 合肥丰瑞隆生物科技有限公司 | 提食欲饮料及其制备方法 |
| CN106188196A (zh) * | 2016-07-18 | 2016-12-07 | 唐翔 | 一种采用微切助互作技术辅助提取虫草素的方法 |
| CN106317148B (zh) * | 2016-07-29 | 2019-02-19 | 河北省科学院生物研究所 | 一种从蛹虫草中提取虫草素的方法 |
| CN111658679A (zh) * | 2019-03-08 | 2020-09-15 | 成都中医药大学 | 一种冬虫夏草提取物及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101508715A (zh) * | 2009-04-01 | 2009-08-19 | 江苏省农业科学院 | 一种蛹虫草中虫草素提取纯化方法 |
-
2011
- 2011-01-10 CN CN 201110004151 patent/CN102060898B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101508715A (zh) * | 2009-04-01 | 2009-08-19 | 江苏省农业科学院 | 一种蛹虫草中虫草素提取纯化方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 翁梁 等、.不同pH值提取液浸提虫草素研究.《食品科学》.2006,第27卷(第11期),第274-276页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102060898A (zh) | 2011-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102060898B (zh) | 一种虫草素的提取方法 | |
| CN103933092B (zh) | 一种复合酶提取鲜三七中三七总皂苷的方法 | |
| CN104341277B (zh) | 一种从虎杖中提取白藜芦醇的方法 | |
| CN103467617A (zh) | 一种连续逆流超声提取高纯度黄芪多糖的方法 | |
| CN103169771A (zh) | 从油橄榄果渣中提取含有山楂酸和齐墩果酸混合物的方法 | |
| CN102850419A (zh) | 一种从蛹虫草提取虫草素和多糖的方法 | |
| CN103804503A (zh) | 一种分步酶解提取浒苔多糖的方法 | |
| CN102617468A (zh) | 一种超声辅助提取高乌甲素的方法 | |
| CN101067146A (zh) | 甘草中主要化学成分的生物提取方法 | |
| CN102746355B (zh) | 一种提取和分离虫草素的方法 | |
| CN101037467A (zh) | 从枇杷叶中分离纯化熊果酸的方法 | |
| CN101108871A (zh) | 从大枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法 | |
| CN107936142A (zh) | 一种山核桃壳中木聚糖的提取方法 | |
| CN103446195A (zh) | 银杏叶提取物的制备方法 | |
| CN104072554A (zh) | 一种从鸡矢藤中提取鸡矢藤苷的方法 | |
| CN104982597B (zh) | 一种多功能复合速溶茶及其制备方法和用途 | |
| CN103408610A (zh) | 从梨树叶中提取熊果苷的方法 | |
| CN104926903A (zh) | 一种提取虫草中有效成分的方法 | |
| CN101375975A (zh) | 制备葡萄籽提取物的新方法 | |
| CN103893774A (zh) | 一种β-淀粉酶在提取三七总皂苷中的应用 | |
| CN103059086A (zh) | 一种蛹虫草固体培养基虫草素的提取纯化方法 | |
| CN103833805A (zh) | 一种甘草中甘草酸的精制工艺 | |
| CN105943576A (zh) | 一种刺五加的提取方法及刺五加保健品 | |
| CN103387501B (zh) | 一种制备高纯度l-辛弗林的方法 | |
| CN105218616A (zh) | 一种从蓝莓果实中提取熊果酸和齐墩果酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130508 Termination date: 20160110 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |