CN102028129A - 新型饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法和饲料添加剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种新型饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法和饲料添加剂，属于饲料添加剂领域。该霉菌毒素脱毒剂可用于受霉菌毒素污染的玉米、谷物等饲料原料及配合饲料的脱毒。该霉菌毒素脱毒剂由改性蒙脱石、酵母细胞壁和壳聚糖等组成，制备方法过程简单。本发明的新型饲料用霉菌毒素脱毒剂可有效去除玉米、谷物等饲料原料及饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T2毒素、呕吐毒素等多种霉菌毒素的污染，防止畜禽因食用霉菌毒素污染饲料引起的各种疾病的发生。本发明的霉菌毒素脱毒剂制备过程简单，质量稳定可控，使用方便、价格低廉，同时还具有补充营养物质、提高养殖动物机体抗病能力、不吸附饲料中营养元素等优点，保障养殖动物的健康、安全。

Description

新型饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法和饲料添加剂

技术领域

本发明涉及一种新型饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法和饲料添加剂，属于饲料添加剂领域。

背景技术

霉菌毒素对农作物的污染给食品工业、饲料工业和畜牧业生产带来了一系列不容忽视的问题。据统计，全世界每年约有25％的农作物受到霉菌毒素的污染，平均有2％的粮食由于霉变而不能食用，这是一笔极大的浪费。至于因霉变而对人畜引起的危害，更是难以统计。据联合国粮农组织估算，全世界由于霉菌毒素污染造成的损失，每年达数千亿美元。据估计，美国2002年食品、谷物、饲料工业因霉菌毒素污染造成的直接经济损失也高达14.4亿美元。在我国，2003～2005年三年对饲料原料及全价饲料的调查结果显示，霉菌毒素污染广泛存在，且多种霉菌毒素同时污染的情况非常普遍。霉菌毒素的污染足以给养殖业带来严重的经济损失。2003年末到2004年秋，由于养猪行业大量使用发霉玉米，动物出现多种传染病并发，养殖场疾病难以控制。根据调查，仅河南省死亡猪只就达1000万头，如果以平均每头100元计算，经济损失达10亿元；广西全区平均每头母猪少产仔2头，全区150万头母猪的产仔损失近5亿元。如果再计算饲料转化率低下，动物药品消耗增加，则2004年全国范围仅养猪业损失就在100亿元以上，如果加上家禽业实际损失，则2004年全国畜牧业的损失在150亿元以上。霉菌毒素污染已成为全球畜禽饲料和食品安全严重的威胁因素。

大多数情况下，霉菌毒素对饲料的污染是多种毒素的混合污染，在受霉菌毒素污染的饲料中，往往能同时检出玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和烟曲霉毒素等多种霉菌毒素超标。动物采食了霉菌毒素污染的饲料之后，表现出霉菌毒素中毒症状。如黄曲霉毒素会导致猪肝损伤、免疫抑制，黄疸等；玉米赤霉烯酮可导致猪假发情，流产和早产，外阴部肿胀和乳腺膨大；呕吐毒素会损害肠道，导致猪呕吐、拒食及采食量减少等。

目前，用来控制饲料中霉菌毒素的方法有很多，包括采用一些物理脱毒方法、化学脱毒方法及吸附剂吸附法，其中最常用方法是使用霉菌毒素吸附剂。在畜禽的消化道内，通过霉菌毒素吸附剂来降低霉菌毒素浓度而减少其进入血液和靶器官的机会，从而起到有效防止霉菌毒素产生毒害作用。脱霉剂的研究开发始于上个世纪五十年代，九十年代开始脱霉剂产品从各种途经进入我国市场。从03年开始，国内脱霉剂市场才真正的起步，而在此之后，脱霉剂得到越来越多的认可。脱霉剂的市场需求量差不多在10万吨左右，市场价值约几十亿元。

目前，市场上饲料脱霉剂种类很多，大多为黏土类吸附剂，其对霉菌毒素的吸附能力因黏土种类和来源的不同有所区别。此类黏土类吸附剂由于具有多重层状空间结构，在吸附霉菌毒素的同时，也会吸附营养物质，而且其吸附作用的选择性较强，不同种类的黏土只对几种或单一的霉菌毒素有吸附作用，所以在使用过程中存在着一些缺陷和弊端。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型饲料用霉菌毒素脱毒剂，可有效去除玉米、谷物等饲料原料及饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T2毒素、呕吐毒素等多种霉菌毒素的污染，防止畜禽因食用霉菌毒素污染饲料引起的各种疾病的发生，保障养殖动物的健康、安全。

本发明的另一目的在于提供该霉菌毒素脱毒剂的饲料添加剂。

本发明还提供了该霉菌毒素脱毒剂的制备方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明提供一种新型饲料用霉菌毒素脱毒剂，它由改性蒙脱石、酵母细胞壁、枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、壳聚糖7种原料组成。

本发明所用的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，可以是市售商品枯草芽孢杆菌，也可以通过自己培养获得，不影响本发明霉菌毒素脱毒剂的实施，但为更好的达到本发明的效果，枯草芽孢杆菌活菌数要求在200亿/克以上。本发明中所用的枯草芽孢杆菌购自湖北安琪生物集团有限公司。

其中，上述原料的重量配比如下：改性蒙脱石10-80份、酵母细胞壁10-80份、枯草芽孢杆菌1-40份、蛋氨酸1-40份、苯丙氨酸1-30份、BHT 1-20份、壳聚糖1-20份。

进一步，上述原料的重量配比是：改性蒙脱石20-70份、酵母细胞壁20-70份、枯草芽孢杆菌5-30份、蛋氨酸3-30份、苯丙氨酸5-25份、BHT 2-15份、壳聚糖3-15份。

更进一步，上述原料的重量配比是：改性蒙脱石25-60份、酵母细胞壁25-50份、枯草芽孢杆菌10-20份、蛋氨酸5-20份、苯丙氨酸10-20份、BHT 3-10份、壳聚糖5-12份。

本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂可作为饲料添加剂使用，用于受霉菌毒素污染的玉米、谷物等饲料原料及配合饲料等饲料的脱毒，防止畜禽因食霉菌毒素污染饲料引起的各种疾病的发生。本发明也提供了该饲料用霉菌毒素脱毒剂的饲料添加剂。

本发明还提供了该饲料用霉菌毒素脱毒剂的制备方法，它包括如下步骤：

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂中的各组分及其用量是申请人通过大量反复实践得来的，本发明的霉菌毒素脱毒剂，在组方上针对国内饲料原料及饲料中霉菌毒素污染情况，采用改性蒙脱石、酵母细胞壁为主，可有效去除玉米、谷物等饲料原料及饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T2毒素、呕吐毒素等多种霉菌毒素的污染；同时辅以添加一些营养元素，提高养殖动物的免疫水平和抗病能力，能有效的防治畜禽霉菌毒素中毒及相关疾病的发生，保障养殖动物的健康、安全。本发明的优点和积极效果在于：

1)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂为复合霉菌毒素脱毒剂，能有效去除污染饲料中玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T2毒素、黄曲霉毒素B1及烟曲霉毒素等多种霉菌毒素，解决了目前常见黏土类霉菌毒素吸附剂去除霉菌毒素单一、效率低下的问题；

2)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂脱毒能力强，能有效去除饲料中霉菌毒素对畜禽的危害，且脱毒后不易解吸，霉菌毒素去除更彻底；

3)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂脱毒效率高，使用量低；

4)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂不吸附营养元素，不影响畜禽正常生长；

5)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂添加了多种营养元素，能活化并增强免疫系统，提高养殖动物免疫机能，增强机体抗病能力；

6)本发明的饲料用霉菌毒素脱毒剂还能调节胃肠功能，促进肠道蠕动，吸收肠内有害物质，促进肠内有用菌的活化。

通过下列实施例将更具体的说明本发明，但是应理解所述实施例仅是为了说明本发明，而不是以任何方式限制本发明的范围。

具体实施方式

实施例1

改性蒙脱石60份、酵母细胞壁50份、枯草芽孢杆菌20份、蛋氨酸20份、苯丙氨酸20份、BHT 10份、壳聚糖12份。

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

实施例2

改性蒙脱石25份、酵母细胞壁25份、枯草芽孢杆菌20份、蛋氨酸5份、苯丙氨酸10份、BHT 10份、壳聚糖5份。

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

实施例3

改性蒙脱石60份、酵母细胞壁50份、蛋氨酸20份、BHT 3份、苯丙氨酸10-20份、壳聚糖10份。

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

实施例4

改性蒙脱石25份、酵母细胞壁25份、枯草芽孢杆菌15份、蛋氨酸5份、苯丙氨酸20份、BHT 10份、壳聚糖5份。

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

实施例5

改性蒙脱石50份、酵母细胞壁40份、枯草芽孢杆菌20份、蛋氨酸10份、苯丙氨酸15份、BHT 5份、壳聚糖12份。

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎(粉末通过九号筛)，再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。

观察例1

本发明实施例1制备的饲料用霉菌毒素脱毒剂对多种霉菌毒素的脱毒效果的观察

在实验室进行本发明实施例1饲料用霉菌毒素脱毒剂对霉菌毒素的脱毒效果试验。霉菌毒素分别为玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B₁(AFB₁)、呕吐毒素、T-2毒素、伏马毒素B₁，取离心管加入10ml以上霉菌毒素标准溶液(具体见表1)，再在离心管中加入本发明饲料用霉菌毒素脱毒剂样品25mg，使脱毒样品在溶液中的浓度为2.5mg/ml。同时设置空白组(未添加脱毒剂)和对照组(添加改性蒙脱石)，所有样品设2个重复。所有样品于37℃恒温水浴振荡器中以150r/min振荡吸附2h。而后，以3000r/min离心10min，收集上清液，测定上清液中各霉菌毒素的含量。按下列公式计算吸附量Q(ng/mg)和吸附率Y(％)。然后在剩余物中加入10ml pH 7.0的PBS缓冲溶液，于37℃、150r/min的恒温振荡水浴锅中振荡解吸30min，3000r/min离心10min，收集上清液，同上法测定上清液中各霉菌毒素的含量。与对照组校正后求累积解吸率R(％)。

公式一    Q＝V(C0-C1)/M

公式二    Y＝100×(C0-C1)/C0

公式三    R＝C2/(C0-C1)×100％

其中：V为溶液的体积(ml)；M为本发明饲料用霉菌毒素脱毒剂的用量(mg)；C0为吸附前各霉菌毒素的浓度(ng/ml)；C1为吸附后各霉菌毒素的浓度(ng/ml)；C2为解吸后各霉菌毒素的浓度(ng/ml)。

实验测定结果具体见表1。空白组对各霉菌毒素吸附率为0，对照组除AFB₁的吸附率在90％以上，其他均低于70％；试验组对各霉菌毒素的吸附率除T-2毒素为89.95％外，其他均在90.0％以上。结果表明本发明饲料用霉菌毒素脱毒剂对玉米赤霉烯酮、AFB₁、呕吐毒素、T-2毒素、伏马毒素B₁的去除效果都很好，且与毒素结合紧密，脱毒更为彻底，明显好于改性蒙脱石对各霉菌毒素的去除效果。

表1本发明实施例1饲料用霉菌毒素脱毒剂对各霉菌毒素的脱毒试验结果

注：试验组为本发明实施例1饲料用霉菌毒素脱毒剂组；

对照组为改性蒙脱石组；

空白组为未添加脱霉剂组。

观察例2

本发明实施例2制备的饲料用霉菌毒素脱毒剂对AFB₁污染饲料的饲喂试验观察

本实验在河北唐山玉田大北农养殖基地进行。试验动物为健康“杜×长×大”三元杂交猪120头，母猪与去势公猪各半，体重25.1±1.4kg。试验共分4组，每组设3个重复，每个重复10头(母猪与公猪各半)。第一组为空白对照组(C组)，饲喂基础日粮(基础日粮配方见表2)；第二组为试验对照组(N组)，饲喂添加0.5％改性蒙脱石的AFB₁污染饲料(AF_B1含量为0.1mg/kg饲料)；第三组为阳性对照组(P组)，饲喂AFB₁污染饲料；第四组为试验组(T组)，饲喂添加0.25％本发明实施例2饲料用霉菌毒素脱毒剂的AFB₁污染饲料(AFB₁含量为0.1mg/kg饲料)。

表2基础日粮配方

试验期间采用公母混群饲养。试验前对各试验猪进行打耳编号，对猪舍进行严格消毒。试验期间自由采食和饮水，试验持续90d，前45d饲喂生长期配方日粮，后45d饲喂肥育期配方日粮，试验期间每日观察猪体状态、行为并记录耗料量。饲养试验结束时称重，计算试验猪的平均日采食量(ADFI)、日增重(ADG)和料重比(F/G)。

试验期间，P组猪只表现出食欲不振、背毛粗糙，饲养过程中有8只猪发病并有2只死亡，其他组猪只均表现正常，未观察到发病及死亡。试验猪生长性能结果见表3。在日采食量方面，P组与其他三组均有极显著差异(P＜0.01)，其他三组间没有显著差异；在日增重方面，P组与其他三组均有极显著差异(P＜0.01)，其他三组间没有显著差异；在料重比方面，P组与其他三组均有显著差异(P＜0.05)，N组与C、T组也有显著差异。试验表明AFB₁显著降低了试验猪的日采食量，减少了日增重，提高了料重比；添加本发明实施例2饲料用霉菌毒素脱毒剂可保护猪免受AFB₁的影响，且效果明显好于改性蒙脱石。

表3生长性能表

观察例3

本发明实施例3制备的饲料用霉菌毒素脱毒剂对受玉米赤霉烯酮污染饲料饲喂小鼠的影响试验观察

试验在实验室中进行。取100只18±1.58g的健康小白鼠，随机分为5组，第1组为空白对照组，饲喂基础日粮(基础日粮配方见表4)；第2组为阳性对照组，饲喂添加玉米赤霉烯酮(ZEN)10mg/kg的基础日粮；第3组为试验对照组，饲喂添加改性蒙脱石(5g/kg)和ZEN 10mg/kg的基础日粮；第4组为试验组，饲喂添加本发明实施例3饲料用霉菌毒素脱毒剂(2g/kg)和玉米赤霉烯酮(ZEN)10mg/kg的基础日粮。试验期维持30d。试验期间小鼠自由采食、饮水，每3d更换一次垫料。饲养温度控制在18～22℃。试验试验至第10、20、30天，从各组随机取出4只小鼠，扑杀，并迅速取出子宫、脾脏和胸腺，分别称重，计算子宫、脾脏和胸腺指数。各指数计算公式如下：

子宫指数(mg/g)＝子宫重(mg)/体重(g)

脾脏指数(mg/g)＝脾脏重(mg)/体重(g)

胸腺指数(mg/g)＝胸腺重(mg)/体重(g)

表4基础日粮配方

试验结果具体见表5。第2组小鼠在饲喂20天后子宫指数即表现显著差异(P＜0.05)，该组小鼠子宫明显增大，而其他各组没有显著差异，但第3组小鼠子宫也有增大；脾脏指数在饲喂20天后，第2组小鼠也与其他各组有显著差异(P＜0.05)，其他各组没有显著差异；胸腺指数在饲喂30天后，第2组小鼠与第1、4组有显著差异(P＜0.05)，其他各组没有显著差异。

表5试验小鼠各器官指数情况          mg/g

以上实验结果表明，饲喂10mg/kg玉米赤霉烯酮能对小鼠子宫、脾脏及胸腺产生显著影响，尤其能使小鼠子宫明显肿大；饲喂改性蒙脱石能减轻玉米赤霉烯酮对小鼠的影响，但没有本发明实施例3饲料用霉菌毒素脱毒剂效果好，本发明实施例3饲料用霉菌毒素脱毒剂能有效解除玉米赤霉烯酮对小鼠子宫、脾脏及胸腺的影响，避免小鼠受玉米赤霉烯酮的毒害，保障小鼠的健康安全。

观察例4

本发明实施例4制备的饲料用霉菌毒素脱毒剂对仔猪部分免疫指标影响

试验选用28日龄断奶仔猪(杜×长×大)90头。试验共分为3组，第1组为空白组，饲喂保育仔猪基础日粮；第2组为试验组，饲喂添加本发明实施例4霉菌毒素脱毒剂(2g/kg)的保育仔猪基础日粮；第3组为对照组，饲喂添加美国辉瑞公司霉卫宝(4g/kg)的保育仔猪基础日粮。每组3个重复。试验持续30天，试验期间自由采食和自由饮水。试验结束时，检测仔猪血清内ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)和ALP(碱性磷酸酶)，以反映仔猪的肝功能及非特异性免疫水平。

表6为试验结束后各组仔猪血清中ALT、AST和ALP酶活性。ALT和AST是反应动物肝脏功能的重要指标。试验结果表明，添加本发明实施例4霉菌毒素脱毒剂可同时降低ALT和AST活性，改善肝脏功能，从而提高肝脏的解毒抗病能力。而对照组ALT和AST活性与空白组没有差异，说明其不能改善肝脏功能。ALP是一种重要的免疫相关酶，参与动物体的代谢调控，且是溶酶体酶的重要组成部分。试验结果表明，添加本发明实施例4霉菌毒素脱毒剂可大幅度提高ALP的活性，对照组则没有提高ALP的活性，说明本发明实施例4霉菌毒素脱毒剂可以明显改善仔猪的非特异性免疫水平，提高仔猪抗病能力。

表6仔猪血清中ALT、AST和ALP活性

Claims (6)

1.一种新型饲料用霉菌毒素脱毒剂，其特征在于它由改性蒙脱石、酵母细胞壁、枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）、壳聚糖7种原料组成。

2.权利要求1所述的霉菌毒素脱毒剂，其特征在于上述原料的重量配比如下：改性蒙脱石10-80份、酵母细胞壁10-80份、枯草芽孢杆菌1-40份、蛋氨酸1-40份、苯丙氨酸1-30份、BHT 1-20份、壳聚糖1-20份。

3.权利要求2所述的霉菌毒素脱毒剂，其特征在于所述原料的重量配比是：改性蒙脱石20-70份、酵母细胞壁20-70份、枯草芽孢杆菌5-30份、蛋氨酸3-30份、苯丙氨酸5-25份、BHT 2-15份、壳聚糖3-15份。

4.权利要求3所述的霉菌毒素脱毒剂，其特征在于所述原料的重量配比是：改性蒙脱石25-60份、酵母细胞壁25-50份、枯草芽孢杆菌10-20份、蛋氨酸5-20份、苯丙氨酸10-20份、BHT 3-10份、壳聚糖5-12份。

5.一种如权利要求1-4任一项所述的饲料用霉菌毒素脱毒剂的饲料添加剂。

6.一种如权利要求1~4任一项所述的饲料用霉菌毒素脱毒剂的制备方法，它包括如下步骤：

按重量配比称取各原料，先将改性蒙脱石、酵母细胞壁超微粉碎（粉末通过九号筛），再将BHT、壳聚糖与少量粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁均匀混合，再加入枯草芽孢杆菌、蛋氨酸、苯丙氨酸及剩余的粉碎后的改性蒙脱石、酵母细胞壁，均匀混合即得。