CN101863946B - 一种从干罗汉果中提取高含量罗汉果甜甙v的方法 - Google Patents
一种从干罗汉果中提取高含量罗汉果甜甙v的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种从干罗汉果中提取高含量罗汉果甜甙V的方法，提取工艺包括如下步骤：提取、浓缩、过滤、吸附、脱色、浓缩干燥得含罗汉果甜甙V产品。本发明的方法是以干罗汉果为原料来生产，所得产品含量高，口感和颜色好，所采用工艺要求的设备简单，可连续生产且所用溶剂为乙醇和水，无污染。
Description
技术领域
发明涉及一种生物提取方法，特别涉及一种从干罗汉果中提取高含量罗汉果甜甙V的方法。
背景技术
罗汉果是葫芦科植物，罗汉果Momordica grosvenori Swingle的干燥成熟果实，秋季果实由嫩绿变黄绿色时采收。它是一种有药物作用的果实，它的主要成分罗汉果甜甙既可以入药也可以作为食品的甜味剂，其中其主要甜味的成分为罗汉果甜甙V，其甜度是蔗糖的300倍，常作为罗汉果提取物中含量测定的指标。
目前，提取罗汉果甜甙V的方法及报道很多，但都是以新鲜罗汉果为原料，通过水提酶解上柱纯化、水提薄膜浓缩提取等工艺来生产，生产既耗时又好能源，工艺复杂，控制要求严，对罗汉果生产有很大的局限性。特别是用新鲜罗汉果作为原料季节性较强，且鲜罗汉果不利于储藏和运输，当果实腐烂将不能用于生产，造成成本增高和浪费。
如采用干罗汉果为原料则可以克服上述存在的问题。目前以干罗汉果为原料来生产罗汉果甜甙的技术，因其风味、口感、颜色、含量都与以新鲜罗汉果原料生产出来的相距甚远，还无法达国内外市场的要求。
发明内容
本发明为克服现有技术中的不足，提供了一种从干罗汉果中提取高含量罗汉果甜甙V的方法。
本发明可实现用干罗汉果为原料生产高含量罗汉果甜甙V，具体提取工艺包括如下步骤
(1)提取：用水或乙醇回流提取，得提取液；
(2)浓缩：将提取液浓缩，得药液；
(3)过滤：将所得药液过滤；
(4)吸附：将过滤后的药液通过吸附树脂吸附；
(5)脱色；
(6)浓缩干燥得含罗汉果甜甙V产品。
本发明的优选方案中，所述步骤(1)为：用乙醇或水回流提取三次，每次提取时间为2小时，乙醇或水的每次加入量与干罗汉果原料的重量比为4∶1。所述乙醇的浓度优选为65％(65％的乙醇为乙醇的水溶液，在本发明中，如果没有特别说明，以下均同)。
水和不同乙醇浓度进行对比提取实验，实验采用100g干罗汉果原料，考查提取溶剂。见表1
表1不同提取剂实验
| 提取溶剂 | 提取次数 | 加溶剂量(单位是原料重量的重量倍数) | 提取出膏率 | 罗汉果甜甙V含量 |
| 水 | 3 | 4 | 40.28％ | 4.15％ |
| 20％乙醇 | 3 | 4 | 37.57％ | 4.69％ |
| 65％乙醇 | 3 | 4 | 25.2％ | 7.68％ |
| 85％乙醇 | 3 | 4 | 23.28％ | 6.95％ |
本发明的优选方案中，所述步骤(2)为：将步骤(1)中所得的提取液合并，浓缩至重量为所用干罗汉果原料重量的1至10倍，得药液。
本发明的优选方案中，步骤(4)中所述的吸附树脂为大孔吸附树脂。优选市售西安蓝晓科技有限公司生产的D-101、AB-8、XDA-6、LX-22、DM130树脂等。当进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；实验数据见表2
表2100g干罗汉果原料考查树脂型号实验数据
| 树脂型号 | 上药液量 | 树脂体积 | 65％乙醇洗脱 | 罗汉果甜甙V含量 |
| D-101 | 400ml | 500ml | 4.0g | 30.25％ |
| AB-8 | 400ml | 500ml | 4.6g | 35.48％ |
| XDA-6 | 400ml | 500ml | 3.8g | 31.26％ |
| LX-22 | 400ml | 500ml | 4.0g | 30.58％ |
| DM130 | 400ml | 500ml | 4.2g | 32.14％ |
本发明的优选方案中，步骤(5)脱色时所用脱色剂为脱色树脂如市售西安蓝晓科技有限公司LSA-700、活性炭、氧化铝。由于所用原料为干罗汉果，提取出药液颜色比较深，口感焦涩，我们通过研究，发现了较好的脱色剂。本发明的方法脱色效果要好，颜色、口感纯正，实验数据见表3。
表3 65％乙醇洗脱下来的药液考查脱色剂实验数据
| 脱色剂 | 药液量 | 脱色效果(产品外观) | 罗汉果甜甙V含量 |
| LSA-700 | 2000ml | 颜色明显变浅， | 52.61％ |
| 活性炭 | 2000ml | 颜色有所改善 | 38.34％ |
| 氧化铝 | 2000ml | 颜色变化较小 | 35.26％ |
本发明的方法所提取得到的产品中，罗汉果甜甙V含量在40％以上，优选方案中可达到60％以上。
本发明最优选的技术方案为：
(1)提取：将原料干罗汉果破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的20％乙醇回流提取三次，每次2小时；
(2)浓缩：合并三次乙醇提取液，经回收乙醇，浓缩，至药液重量为所用原料重量的4倍；
(3)过滤：经管式离心过滤，得滤液；可选用三足离心或管式离心机过滤，滤液至清澈透明为止；因为考虑药液能很好的上柱，澄清度好，我们优选用管式离心机过滤。
(4)吸附：将所得滤液进入D-101或AB-8大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
(5)脱色：将待脱色液上活性炭脱色树脂柱，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
(6)浓缩干燥：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后(可采用减压回收乙醇)，减压浓缩成稠膏，将稠膏喷雾干燥，得高含量的罗汉果甜甙V的浅黄白色产品。
本发明不但可实现从干罗汉果中提取得到高含量的罗汉果甜甙V产品，而且所得产品各项性能均优于现有技术中从新鲜罗汉果中提取所得产品，比如在风味、口感、颜色、含量上。具体对比如下：
| 原料 | 产品风味以甜度计 | 产品口感 | 产品颜色 | 罗汉果甜甙V含量 |
| 新鲜罗汉果 | 是蔗糖的250倍 | 有罗汉果的生味 | 浅黄色 | 40％ |
| 干罗汉果 | 是蔗糖的300倍 | 无生味，口感好 | 白色 | 60％ |
| 普通方法提取干罗汉果的产品 | 是蔗糖的100倍 | 有涩味，口感不好 | 棕黄色 | 15％ |
由上表可以看出，用此方法得到的干罗汉果提取物较新鲜罗汉果提取物，含量高，口感好，外观颜色好。本发明所得罗汉果甜甙V产品经测试，在含量、颜色、口感质量方面均优于目前市售的以新鲜罗汉果提取出来的罗汉果提取物产品。
本发明的罗汉果甜甙提取工艺优点：1、原料为以干罗汉果为原料来生产；
2、产品含量高，口感和颜色好；3、工艺要求的设备简单，可连续生产；4、所用溶剂为乙醇和水，无污染。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明的具体实施方式作进一步的描述：
实施例1：
1、提取：将干罗汉果100KG破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的20％乙醇回流提取三次，每次2小时；
2、浓缩：合并三次乙醇提取液，经回收乙醇，浓缩，至干果：浓缩液为1∶4，经管式离心过滤，取滤液为树脂上柱液；
3、上大孔吸附树脂柱：将上柱液进入D-101大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
4、脱色：将待脱色液上活性炭脱色树脂柱，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
5、浓缩：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后，减压浓缩成能喷雾干燥的稠膏即可；
6、将稠膏喷雾干燥得成品2.8KG，产品颜色为黄色粉末，罗汉果甜甙V含量为41.2％。
实施例2：
1、提取：将干罗汉果100KG破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的水回流提取三次，每次2小时；
2、浓缩：合并三次水提取液，经浓缩，至干果：浓缩液为1∶4，经管式离心过滤，取滤液为树脂上柱液；
3、上大孔吸附树脂柱：将上柱液进入AB-8大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
4、脱色：将待脱色液上LSA-700脱色树脂，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
5、浓缩：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后，减压浓缩成能喷雾干燥的稠膏即可；
6、将稠膏喷雾干燥得成品2.6KG，产品颜色为黄白色粉末，罗汉果甜甙V含量为40％。
实施例3：
1、提取：将干罗汉果100KG破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的65％乙醇回流提取三次，每次2小时；
2、浓缩：合并三次乙醇提取液，经回收乙醇，浓缩，至干果：浓缩液为1∶4，经管式离心过滤，取滤液为树脂上柱液；
3、上大孔吸附树脂柱：将上柱液进入AB-8大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
4、脱色：将待脱色液上LSA-700脱色树脂，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
5、浓缩：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后，减压浓缩成能喷雾干燥的稠膏即可；
6、将稠膏喷雾干燥得成品3.2KG，产品颜色为白色粉末，罗汉果甜甙V含量为60％。
实施例4：
1、提取：将干罗汉果100KG破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的65％乙醇回流提取三次，每次2小时；
2、浓缩：合并三次乙醇提取液，经回收乙醇，浓缩，至干果：浓缩液为1∶4，经管式离心过滤，取滤液为树脂上柱液；
3、上大孔吸附树脂柱：将上柱液进入DM-130大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
4、脱色：将待脱色液上LSA-700脱色树脂，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
5、浓缩：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后，减压浓缩成能喷雾干燥的稠膏即可；
6、将稠膏喷雾干燥得成品3.0KG，产品颜色为白色粉末，罗汉果甜甙V含量为43.25％。
Claims (6)
1.一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)提取：用乙醇或水回流提取三次，每次提取时间为2小时，乙醇或水的每次加入量与干罗汉果的重量比为4∶1；所述乙醇的浓度为20％-85％；
(2)浓缩：将提取液浓缩，得药液；
(3)过滤：将所得药液过滤；
(4)吸附：将过滤后的药液通过吸附树脂吸附；所述的吸附树脂为所述大孔型树脂柱为西安蓝晓科技有限公司生产的D-101、AB-8、XDA-6、LX-22、DM130树脂；
(5)脱色；
(6)浓缩干燥得含罗汉果甜甙V产品。
2.根据权利求1所述的一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于所述步骤(2)为：将步骤(1)中所得的提取液合并，浓缩至重量为所用干罗汉果重量的1至10倍，得药液。
3.根据权利求1所述的一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于步骤(4)中，是用D-101或AB-8大孔型树脂柱吸附，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液。
4.根据权利求1所述的一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于步骤(5)脱色时所用脱色剂为脱色树脂、活性炭或氧化铝。
5.根据权利求1-4中任一权利要求所述的一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于所述步骤(6)中，浓缩干燥得到的含罗汉果甜甙V产品中，罗汉果甜甙V含量在40％以上。
6.根据权利求1所述的一种从干罗汉果中提取罗汉果甜甙V的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)提取：将干罗汉果破碎后投入提取罐中，加4倍原料重量的20％乙醇回流提取三次，每次2小时；
(2)浓缩：合并三次乙醇提取液，经回收乙醇，浓缩，至至药液重量为所用原料重量的4倍；
(3)过滤：经管式离心过滤，得滤液；
(4)吸附：将所得滤液进入D-101大孔型树脂柱，进完药液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用4倍量树脂体积的20％乙醇洗脱，最后用4倍量树脂体积的65％乙醇解吸，收集65％乙醇解吸液作为待脱色液；
(5)脱色：将待脱色液上西安蓝晓科技有限公司生产的LSA-700树脂柱，然后用水洗脱树脂至无甜味即可，收集流出液和水洗脱液；
(6)浓缩干燥：将收集的流出液和水洗脱液经回收乙醇后，减压浓缩成稠膏，将稠膏喷雾干燥，得含罗汉果甜甙V产品。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
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| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
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Application publication date: 20101020 Assignee: Hunan Hill Pharmaceutical Research Co., Ltd. Assignor: Hunan Hill Pharmaceutical Co., Ltd. Contract record no.: 2013430000084 Denomination of invention: Method for extracting high-content mogroside V from dried momordica grosvenori swingle Granted publication date: 20120314 License type: Exclusive License Record date: 20130607 |
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| LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model | ||
| EC01 | Cancellation of recordation of patent licensing contract |
Assignee: Hunan Hill Pharmaceutical Research Co., Ltd. Assignor: Hunan Hill Pharmaceutical Co., Ltd. Contract record no.: 2013430000084 Date of cancellation: 20150121 |
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| LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120314 Termination date: 20210712 |
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |