CN101773471A - 一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体及制备方法。脂质体粒径在90～120nm之间，其粒径均匀，表面富含有叶酸。原料质量份数比配比为：聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶米托蒽醌＝1∶1～2∶2～4∶0.5～1；O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶胆固醇的质量比为4～2∶1；采用反相乳液法聚合或采用薄膜分散法制备；整个制备过程简单快捷，制备周期短，制备的高分子脂质体对药物的包封率大于90％，载药率载高达9.0％；通过表面PEG的修饰，可使高分子脂质体不易被人体网状内皮系统捕捉，延长在体内的循环时间，同时增加高分子脂质体的生物利用度和生物相容性。
Description
技术领域
本发明涉及一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体及制备方法，属于药物技术领域。
背景技术
米托蒽醌(mitoxantrone)于1978年由Zee-Cheng和1979年由Murdock首次合成，是第二代蒽环类抗肿瘤药物，临床上多用于治疗白血病、乳腺癌、恶性淋巴瘤等。其作用机制是插入细胞DNA中，抑制癌细胞核酸合成而发挥抗癌作用，但其有较严重的骨髓抑制作用，且游离药物进入血后大部分(95％以上)与血浆蛋白结合。但是其大量应用时常引起严重的骨髓抑制和心肝肺的系统毒性，因而极大的限制了其临床应用。
脂质体是目前降低药物毒性常见的制剂手段之一，但是以传统的卵磷脂、胆固醇制备的常规脂质体在体内多被网状内皮系统(reticuloendothelial system，RES)吞噬，在血液循环中驻留时间较短。并且其物理化学稳定性差，储存和应用过程中容易发生融合聚集，包封药物容易泄漏；官能团少，不易进行表面修饰，无靶向性、功能单一；基因转染效率仍显著低于病毒载体等。近年来，开发新型脂质体的研究受到广泛关注。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有靶向性能，具有良好的缓控释功能，包封率高，稳定性好，粒径小，毒副作用小，缓释时间可调的一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体及制备方法。
具体技术方案如下：
一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体，其粒径在90～120nm之间，如图2的粒径分析测试结果所示。其粒径均匀，分散性好，很少发生熔合，团聚现象，如图1透射图片所示。表面富含有叶酸。
本发明的一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，其原料质量份数比配比为：
聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐(PEG-OQCMC)∶叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐(FA-OQCMC)∶O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐(OQCMC)∶米托蒽醌＝1∶1～2∶2～4∶0.5～1；O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶胆固醇的质量比为4～2∶1；
采用反相乳液法聚合时：制备步骤如下：
a.将聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、米托蒽醌溶于蒸馏水中，形成水相，待用；
b.将O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐，胆固醇，溶于二氯甲烷中，形成油相；
c.将油相在110～200w功率范围下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系；
d.将上述乳液在32～40℃下于旋转蒸发仪上以45～55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护，当有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30～50min，即得到产品。
采用薄膜分散法时：制备步骤如下：
a.将聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐，胆固醇，溶于二氯甲烷中；
b.将上面所述的混合物置于反应器中，在32～40℃下于旋转蒸发仪上以45～55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护；当反应器中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30～50min。
c.将米托蒽醌溶于蒸馏水中，之后将反应器取下，向反应器中加入米托蒽醌水溶液，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器以70～99w的功率进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到高分子脂质体溶液。
本发明的有益效果：
整个制备过程简单快捷，制备周期短，产率高。所制备的米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：粒径大小在90～120nm之间，粒径均匀，且可以根据制剂的组成成分，实验条件等进行调节进行调节；稳定好，可在水溶液中保存至少2个月；包封率高，载药能力强，制备的高分子脂质体对药物的包封率大于90％，载药率载高达9.0％；缓释性能明显，缓释时间可调，制备的米托蒽醌制剂相对于传统制剂而言具有明显的缓释效果，并且缓释时间可以根据制剂的组成成分，实验条件等进行调节。具有穿过靶组织内皮细胞的能力，可以被肿瘤细胞摄取进入细胞内，将所包含的米托蒽醌在细胞内释放，大大提高药物的利用效率。在多种肿瘤细胞(如卵巢癌、乳腺癌、肺癌，结直肠癌等)膜表面的叶酸受体活性和数量明显高于一般正常细胞，而制备的米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体表面富含有叶酸，利用叶酸与其受体的特异性结合的特点，可增加药物在病灶局部的浓度，提高疗效，降低毒副作用，达到靶向治疗的目的。通过表面PEG的修饰，可使高分子脂质体不易被人体网状内皮系统捕捉，延长在体内的循环时间，同时增加高分子脂质体的生物利用度和生物相容性。
总之，与现有的米托蒽醌制剂相比，本发明涉及的米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体具有粒径均匀可控，制剂稳定性好，制备工艺简单，载药率高，具有缓释功能等特点，适合大批量生产。
本发明所提供的脂质体(反向乳液聚合方法)主要质量指标见下表：
| 具体指标 | 高分子脂质体 | 传统脂质体 |
| 粒径 | 90nm～120nm | 500nm |
| 包封率 | ＞90％ | ＜90％ |
| 载药率 | 可达9.0％ | ＜8％ |
| 缓释时间 | 可达15d | ＜15d |
附图说明
图1：米托蒽醌纳米靶向缓释脂质体透射照片；
图2：米托蒽醌纳米靶向缓释脂质体粒度分析图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。
所述的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐(OQCMC)按照常津等提供的方法(申请(专利)号：200710056993.4)进行制备。将十八烷基二甲基叔胺12g置四口瓶中，加入60ml溶剂，剧烈搅拌，升温至55摄氏度，缓慢滴加环氧氯丙烷5.5g，保温回流数小时，减压蒸馏除去未反应的环氧氯丙烷及溶剂，得浅黄色膏状物二甲基环氧丙基十八烷基氯化铵。取水溶性羧甲基壳聚糖(粘均分子量10万，脱乙酰度80％)3.0g溶于浓度为42％(w/v)的氢氧化钠溶液100mL中，搅拌均匀后，加入异丙醇50mL，缓慢分批加入二甲基环氧丙基十八烷基氯化铵0.1mol，控制温度在80摄氏度-85摄氏度，搅拌48h。盐酸调pH＝7，无水丙酮洗涤，真空烘干得双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵。
所述的PEG-OQCMC，其制备过程中，各组分的含量为聚乙二醇PEG(2000Da)5.0g～10.0g；马来酸酐4.3～8.6g；N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)0.75～1.0g；羧基化的PEG 2.8～5.0g；二环己基碳二亚胺(DCC)0.3～0.5g；NHS-PEG质量4～8g；二甲基亚砜(DMSO)100～150mL；OQCMC质量3～5g。PEG-OQCMC制备过程如下：
a.PEG的羧基化：将PEG(2000Da)溶于40～80mL无水甲苯；将马来酸酐在通氮气保护的条件下，加入到四口瓶中，加热到70℃反应48～53h，过程持续搅拌。反应后减压蒸馏除去有机溶剂得到初步产品；加入乙醚萃取，减压蒸馏，得到产物羧基化的PEG。
b.PEG的活化：将羧基化的PEG与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)一起溶于40～60mL氯仿中，在冰浴，磁搅拌及氮气保护的条件下加入DCC，反应1～1.5h，再撤去冰浴，常温下反应24～30h；反应结束后，过滤。
c.PEG的提纯：将上述过滤后的滤液加入到50～70mL丙酮中，4℃条件下放置2h，析出固体，过滤；重复两次，除尽残留的NHS，放入真空烘箱过夜。得到提纯后的活化羧基化PEG(NHS-PEG)。
d.PEG-OQCMC的制备：将上述NHS-PEG溶于100～150mLDMSO；将实验室制备的OQCMC溶于100～150mL水中；两者混合，室温下搅拌反应24～30h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到产品。
所述的FA-OQCMC，其制备过程中，各组分的含量为：叶酸3～10g；；三乙胺1.8～5ml；NHS1.56～3g；NHS-FA 2.0～5.0g；OQCMC15～30mg。其制备过程如下：将叶酸溶于60～100mlDMSO溶液中，向其加入三乙胺，将NHS用一定量的DMSO溶解后加入到上述反应体系中避光反应12～20h以上。将产物过滤，得到黄色固体NHS-FA活性脂。取NHS-FA活性脂溶于50～80mlDMSO中，加入OQCMC。用Na2HPO4与NaOH缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1～1.5h。将最后产物透析24h，冻干即得FA-OQCMC。
实施例1
PEG改性OQCMC的实验过程：
a.PEG的羧基化：将PEG(2000Da)5.0g溶于40mL无水甲苯；再称马来酸酐4.3g，在通氮气保护的条件下，加入到四口瓶中，加热到70℃反应48，过程持续搅拌。反应后减压蒸馏除去有机溶剂得到初步产品；加入乙醚萃取，减压蒸馏，得到产物羧基化的PEG。
b.PEG的活化：称取NHS 0.75g，DCC质量0.3g备用；称取羧基化的PEG2.8g与NHS一起溶于40mL氯仿中，在冰浴，磁搅拌及氮气保护的条件下加入DCC，反应1h，再撤去冰浴，常温下反应24h；反应结束后，过滤。
c.PEG的提纯：将上述过滤后的滤液加入到50mL丙酮中，4℃条件下放置2h，析出固体，过滤；重复两次，除尽残留的NHS，放入真空烘箱过夜。得到提纯后的活化羧基化PEG(NHS-PEG)。
d.PEG-OQCMC的制备：称取上述NHS-PEG质量4g溶于100mLDMSO；称取实验室制备的OQCMC质量3g溶于100mL水中；两者混合，室温下搅拌反应24h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到产品。
FA-OQCMC制备过程如下：
将3g叶酸溶于60mlDMSO溶液中，向其加入1.8ml三乙胺，将1.56g NHS用一定量的DMSO溶解后加入到上述反应体系中避光反应12h。将产物过滤，得到黄色固体NHS-FA活性脂。取2.0g的NHS-FA活性脂溶于50mlDMSO中，加入15mg的OQCMC。用Na2HPO4与NaOH缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1h。将最后产物透析24h，冻干即得FA-OQCMC。
实施例2
PEG改性OQCMC的实验过程：
a.PEG的羧基化：将PEG(2000Da)7.0g溶于60mL无水甲苯；再称马来酸酐7.2g，在通氮气保护的条件下，加入到四口瓶中，加热到70℃反应50h，过程持续搅拌。反应后减压蒸馏除去有机溶剂得到初步产品；加入乙醚萃取，减压蒸馏，得到产物羧基化的PEG。
b.PEG的活化：称取NHS 0.8g，DCC质量0.4g备用；称取羧基化的PEG3.5g与NHS一起溶于50mL氯仿中，在冰浴，磁搅拌及氮气保护的条件下加入DCC，反应1.2h，再撤去冰浴，常温下反应28h；反应结束后，过滤。
c.PEG的提纯：将上述过滤后的滤液加入到60mL丙酮中，4℃条件下放置2h，析出固体，过滤；重复两次，除尽残留的NHS，放入真空烘箱过夜。得到提纯后的活化羧基化PEG(NHS-PEG)。
d.PEG-OQCMC的制备：称取上述NHS-PEG质量6g溶于120mLDMSO；称取实验室制备的OQCMC质量4g溶于120mL水中；两者混合，室温下搅拌反应26h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到产品。
FA-OQCMC制备过程如下：
将7g叶酸溶于80mlDMSO溶液中，向其加入3ml三乙胺，将2g NHS用一定量的DMSO溶解后加入到上述反应体系中避光反应18h。将产物过滤，得到黄色固体NHS-FA活性脂。取3g的NHS-FA活性脂溶于65mlDMSO中，加入20mg的OQCMC。用Na2HPO4与NaOH缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1～1.5h。将最后产物透析24h，冻干即得FA-OQCMC。
实施例3
PEG改性OQCMC的实验过程：
a.PEG的羧基化：将PEG(2000Da)10.0g溶于80mL无水甲苯；再称马来酸酐8.6g，在通氮气保护的条件下，加入到四口瓶中，加热到70℃反应53h，过程持续搅拌。反应后减压蒸馏除去有机溶剂得到初步产品；加入乙醚萃取，减压蒸馏，得到产物羧基化的PEG。
b.PEG的活化：称取NHS 1.0g，DCC质量0.5g备用；称取羧基化的PEG5.0g与NHS一起溶于60mL氯仿中，在冰浴，磁搅拌及氮气保护的条件下加入DCC，反应1.5h，再撤去冰浴，常温下反应30h；反应结束后，过滤。
c.PEG的提纯：将上述过滤后的滤液加入到70mL丙酮中，4℃条件下放置2h，析出固体，过滤；重复两次，除尽残留的NHS，放入真空烘箱过夜。得到提纯后的活化羧基化PEG(NHS-PEG)。
d.PEG-OQCMC的制备：称取上述NHS-PEG质量8g溶于150mLDMSO；称取实验室制备的OQCMC质量5g溶于150mL水中；两者混合，室温下搅拌反应30h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到产品。
FA-OQCMC制备过程如下：
将10g叶酸溶于100mlDMSO溶液中，向其加入5ml三乙胺，将3g NHS用一定量的DMSO溶解后加入到上述反应体系中避光反应20h。将产物过滤，得到黄色固体NHS-FA活性脂。取5.0g的NHS-FA活性脂溶于80mlDMSO中，加入30mg的OQCMC。用Na2HPO4与NaOH缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1.5h。将最后产物透析24h，冻干即得FA-OQCMC。
实施例4
称取1mgPEG-OQCMC，1mgFA-OQCMC，1mg米托蒽醌，溶于4.5ml的蒸馏水中，形成水相；取4mgOQCMC，1mg胆固醇，溶于2ml二氯甲烷中形成油相，将油相在130W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在32℃下于旋转蒸发仪上以45r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30min，即得到产品。重复组装2次。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为106.6nm，分散性好，载药率为8.5％，包封率为90.7％，体外缓释时间达到11天。
采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例5
称取10mgPEG-OQCMC，10mgFA-OQCMC，10mg米托蒽醌，溶于40ml的蒸馏水中，形成水相；取40mgOQCMC，10mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中形成油相，将油相在150W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸40min，即得到产品。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为90nm，分散性好，载药率为9.0％，包封率为95.0％，体外缓释时间达到14天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例6
称取15/3mgPEG-OQCMC，20/3mgFA-OQCMC，10/3mg米托蒽醌，溶于50ml的蒸馏水(或已经做好的高分子脂质体)中，形成水相；取40/3mgOQCMC，10/3mg胆固醇，溶于25ml二氯甲烷中形成油相，将油相在110W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸40min，即得到产品。重复组装3次。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为115.6nm，分散性好，载药率为9.0％，包封率为93.4％，体外缓释时间达到12天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例7
称取10/4mgPEG-OQCMC，20/4mgFA-OQCMC，10/4mg米托蒽醌，溶于40ml的蒸馏水(或已经做好的高分子脂质体)中，形成水相；取30/4mgOQCMC，10/4mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中形成油相，将油相在200W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在40℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30min，即得到产品。重复组装4次制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为107.3nm，分散性好，载药率为8.5％，包封率为94.5％，体外缓释时间达到13天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例8
称取16/2mgPEG-OQCMC，20/2mgFA-OQCMC，10/2mg米托蒽醌，溶于45ml的蒸馏水(或已经做好的高分子脂质体)中，形成水相；取35/2mgOQCMC，10/2mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中形成油相，将油相在130W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸40min，即得到产品。重复组装2次。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为106.6nm，分散性好，载药率为8.8％，包封率为90.0％，体外缓释时间达到11天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例9
称取30/3mgPEG-OQCMC，30/3mgFA-OQCMC，30/3mg米托蒽醌，溶于40ml的蒸馏水(或已经做好的高分子脂质体)中，形成水相；取120/3mgOQCMC，30/3mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中形成油相，将油相在180W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸50min，即得到产品。重复组装3次。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为109.5nm，分散性好，载药率为9.0％，包封率为93.4％，体外缓释时间达到15天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例10
称取40/4mgPEG-OQCMC，40/4mgFA-OQCMC，40/4mg米托蒽醌，溶于40ml的蒸馏水(或已经做好的高分子脂质体)中，形成水相；取160/4mgOQCMC，40/4mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中形成油相，将油相在200W功率下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系。将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30～50min，即得到产品。重复组装4次。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为110.4nm，分散性好，载药率为8.9％，包封率为94.2％，体外缓释时间达到15天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例11
称1mgPEG-OQCMC，1mg FA-OQCMC，4mgOQCMC，1mg胆固醇，溶于2ml二氯甲烷中。称取1mg米托蒽醌溶于4.5ml水中，待用。将该混合物置于茄形瓶中，在32℃下于旋转蒸发仪上以45r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30min。之后将茄形瓶取下，向茄形瓶中加入米托蒽醌水溶液，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器以70w的功率进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到高分子脂质体溶液。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为96.6nm，分散性好，载药率为8.5％，包封率为90.3％，体外缓释时间达到10天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例12
称10mgPEG-OQCMC，20mg FA-OQCMC，20mgOQCMC，10mg胆固醇，溶于20ml二氯甲烷中。称取5mg米托蒽醌溶于40ml水中，待用。将该混合物置于茄形瓶中，在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸40min。之后将茄形瓶取下，向茄形瓶中加入米托蒽醌水溶液，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器以80w的功率进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到高分子脂质体溶液。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为98.6nm，分散性好，载药率为8.5％，包封率为90.1％，体外缓释时间达到10天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
实施例13
称40mgPEG-OQCMC，60mg FA-OQCMC，120mgOQCMC，40mg胆固醇，溶于25ml二氯甲烷中。称取30mg米托蒽醌溶于50ml水中，待用。将该混合物置于茄形瓶中，在40℃下于旋转蒸发仪上以55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸50min。之后将茄形瓶取下，向茄形瓶中加入米托蒽醌水溶液，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器以99w的功率进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到高分子脂质体溶液。制备的米托蒽醌靶向缓释长循环脂质体粒径为120nm，分散性好，载药率为8.3％，包封率为91.0％，体外缓释时间达到10天。采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对样品进行对比分析，与未叶酸化的脂质体谱图相比，包覆米托蒽醌的脂质体谱图中出现了一个在1580cm-1附近的新的吸收锋，说明OQCMC的游离氨基和叶酸的COOH形成了酰胺。
Claims (3)
1.一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体，其特征其粒径在90～120nm之间，其粒径均匀，表面富含有叶酸。
2.一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，其特征是原料质量份数比配比为：聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶米托蒽醌＝1∶1～2∶2～4∶0.5～1；O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐∶胆固醇的质量比为4～2∶1；
采用反相乳液法聚合时：制备步骤如下：
a.将聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、米托蒽醌溶于蒸馏水中，形成水相，待用；
b.将O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐，胆固醇，溶于二氯甲烷中，形成油相；
c.将油相在110～200w功率范围下进行超声，加入水相，超声形成水油均匀的分散体系；
d.将上述乳液在32～40℃下于旋转蒸发仪上以45～55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护，当有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30～50min，即得到产品。
3.如权利要求2所述的一种米托蒽醌纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，其特征是采用薄膜分散法时：制备步骤如下：
a.将聚乙二醇修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、叶酸修饰的O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐、O-羧甲基壳聚糖十八烷基季铵盐，胆固醇，溶于二氯甲烷中；
b.将上面所述的混合物置于反应器中，在32～40℃下于旋转蒸发仪上以45～55r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护；当反应器中的有机溶剂完全挥发后，继续旋蒸30～50min。
c.将米托蒽醌溶于蒸馏水中，之后将反应器取下，向反应器中加入米托蒽醌水溶液，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器以70～99w的功率进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到高分子脂质体溶液。
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Cited By (5)
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|---|---|---|---|---|
| CN102058534A (zh) * | 2010-11-26 | 2011-05-18 | 天津大学 | 一种新型高分子脂质体及其制备方法 |
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1469735A (zh) * | 2000-10-16 | 2004-01-21 | ����˹��ҩ�﹫˾ | 米托蒽醌的脂质体制剂 |
| CN101020725A (zh) * | 2007-03-23 | 2007-08-22 | 天津大学 | 一类双亲性壳聚糖长链烷基季铵盐及其制备方法 |
| CN101239041A (zh) * | 2008-03-18 | 2008-08-13 | 天津大学 | 一种高分子脂质体及其应用 |
-
2010
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1469735A (zh) * | 2000-10-16 | 2004-01-21 | ����˹��ҩ�﹫˾ | 米托蒽醌的脂质体制剂 |
| CN101020725A (zh) * | 2007-03-23 | 2007-08-22 | 天津大学 | 一类双亲性壳聚糖长链烷基季铵盐及其制备方法 |
| CN101239041A (zh) * | 2008-03-18 | 2008-08-13 | 天津大学 | 一种高分子脂质体及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 《药学学报》 20020628 段逸松等 米托蒽醌长循环脂质体的制备及药代动力学的研究 465-468 1-3 第37卷, 第6期 2 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102058534A (zh) * | 2010-11-26 | 2011-05-18 | 天津大学 | 一种新型高分子脂质体及其制备方法 |
| CN102579355A (zh) * | 2012-03-19 | 2012-07-18 | 天津大学 | 米托蒽醌纳米磷酸氢钙制剂及其制备方法 |
| CN102631321A (zh) * | 2012-04-25 | 2012-08-15 | 天津大学 | 一种靶向长循环的高分子脂质体及其制备方法 |
| CN104971044A (zh) * | 2015-02-14 | 2015-10-14 | 吉林大学 | 一种米托蒽醌雌激素靶向peg修饰脂质体及其应用 |
| CN116650442B (zh) * | 2023-05-29 | 2024-01-19 | 广州市第一人民医院（广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院） | 载米托蒽醌的仿生纳米颗粒及其制备方法和应用 |
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