CN101780042A - 一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体及其制备方法。本发明的一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，是由叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的结构；本发明利用壳聚糖衍生物作为辅料通过反相蒸发法或薄膜分散法制备了这种新型的紫杉醇制剂，制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径小于100nm，可以在血液中自由运行，具有穿过靶组织内皮细胞的能力，可以被肿瘤细胞摄取进入细胞内，将所包含的紫杉醇在细胞内释放，大大提高药物的利用效率。同时制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体表面还包覆着一层聚乙二醇(PEG)，PEG能够延长脂质体在血液中的驻留时间，被肝脾网状内皮系统摄取量减小，有利于肿瘤组织及病变部位的吸收。

Description

一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体的是涉及一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体及其制备方法。

背景技术

紫杉醇(Paclitaxel，PTX)是由红豆杉属植物提取的一种具有抗癌药物，对晚期卵巢癌、乳腺癌、肺癌等均有一定的疗效。但其水溶性极差，为了增加其溶解性，目前国内外商品化的紫杉醇制剂均采用同一配方，即在紫杉醇乙醇注射液中加入一种增溶剂聚氧乙基蓖麻油(Cremophorel)。但这类紫杉醇制剂自身存在着不可克服的缺陷，主要缺陷如下：

1.增溶剂聚氧乙基蓖麻油可产生过敏等副作用，给病人造成痛苦。制剂中的聚氧乙基蓖麻油会引起体内组织胺释放，给药后数分钟后病人可能出现药物性皮疹，呼吸急促，支气管痉挛，低血压等过敏反应。

2.制剂使用过程过于繁琐，不方便。由于含有聚氧乙基蓖麻油的紫杉醇制剂可能带来的过敏反应，在使用这类制剂之前，必须先服用抗过敏药物或注射抗过敏药物，使使用过程变得繁琐。并且这类制剂在临床使用过程中被稀释后放置24小时，就会析出颗粒性沉淀物，必须过滤除去颗粒性沉淀物，否则会给临床带来很大的危险。

3.紫杉醇利用效率低，毒性大，使用费用高。由于这类紫杉醇制剂缺乏靶向性，从而容易造成药物全身分布引起全身毒性，而肿瘤组织处的药物浓度低于杀伤浓度。临床上只能通过加大用药剂量来达到杀伤肿瘤细胞的目的，这样既增加了病人治疗所需的治疗费用同时增加了病人由于紫杉醇毒性而引起的痛苦。

4.传统的制剂在体内循环时间短。传统的紫杉醇制剂进入人体后容易被网状内皮系统(RES)的吞噬细胞捕获，将其从血液循环系统中清除，从而减少了达到肿瘤组织部位的药量。

5.传统的制剂不具有缓释功能，无法长时间维持有效的药物浓度。传统的紫杉醇制剂没有药物载体的保护和阻隔，直接通过静脉注射进入血液循环系统，很快被网状内皮系统(RES)清除，在血液中停留时间短，不利于肿瘤组织及病理部位的吸收。

发明内容

鉴于目前紫杉醇制剂存在的缺陷，为了更好的使紫杉醇更好的发挥临床治疗效果，本发明提供了一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体及其制备方法。本发明利用壳聚糖衍生物作为辅料通过反相蒸发法或薄膜分散法制备了这种新型的紫杉醇制剂，制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径小于100nm，可以在血液中自由运行，具有穿过靶组织内皮细胞的能力，可以被肿瘤细胞摄取进入细胞内，将所包含的紫杉醇在细胞内释放，大大提高药物的利用效率。制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体表面富含有叶酸，由于在多种肿瘤细胞(如卵巢癌、结肠直肠癌、肺癌、肾细胞癌等)膜表面叶酸受体的活性和数量明显高于一般正常细胞的特点，利用叶酸与其受体的特异性结合的特点，可增加药物在病灶局部的浓度，提高疗效，降低毒副作用，达到靶向治疗的目的。同时制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体表面还包覆着一层聚乙二醇(PEG)，PEG能够延长脂质体在血液中的驻留时间，被肝脾网状内皮系统摄取量减小，有利于肿瘤组织及病变部位的吸收。

本发明的一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，是由叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的结构：

本发明的一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，采用薄膜法：

(1)采用薄膜分散法制备紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的过程如下：称取5-50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5-20mg胆固醇和5-20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于5ml的二氯甲烷中；

(2)于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护；

(3)当茄形瓶中形成一层透明均匀的脂质膜后，继续旋蒸至二氯甲烷挥发干净；

(4)旋蒸完成之后将茄形瓶取下，再放到真空烘箱中充分干燥；

(5)充分干燥后，向茄形瓶中加入5ml去离子水或已经制备好的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体；

(6)重复步骤(1)-(5)0-4次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。

本发明的一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，采用反相蒸发法：

(1)采用反相蒸发法制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体过程如下：精确称取5-50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5-20mg胆固醇和5-20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于2ml的二氯甲烷中；

(2)向茄形瓶中加入5ml的去离子水或已经制备好的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，然后用探头式超声波发生器进行超声分散，直至形成半透明乳液；

(3)将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护；

(4)当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体；

(5)重复步骤(1)-(4)0-4次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。

其中原料可以采用如下方法制备：

双亲性壳聚糖衍生物的制备方法：

本发明所述的壳聚糖衍生物制备可按照常津等提供的专利方法(申请(专利)号：200710056993.4)进行制备。将十八烷基二甲基叔胺12g置四口瓶中，加入60ml溶剂，剧烈搅拌，升温至55摄氏度，缓慢滴加环氧氯丙烷5.5g，保温回流数小时，减压蒸馏除去未反应的环氧氯丙烷及溶剂，得浅黄色膏状物二甲基环氧丙基十八烷基氯化铵。取水溶性羧甲基壳聚糖(粘均分子量10万，脱乙酰度80％)3.0g溶于浓度为42％(w/v)的氢氧化钠溶液100mL中，搅拌均匀后，加入异丙醇50mL，缓慢分批加入二甲基环氧丙基十八烷基氯化铵0.1mol，控制温度在80摄氏度-85摄氏度，搅拌48h。盐酸调pH＝7，无水丙酮洗涤，真空烘干得双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵。

乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的制备方法中，各组分的质量为：

双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵：0.3-0.5g

单羧基化聚乙二醇质量：0.2-0.6g

偶联剂乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸(EDC)：1-1.5g

制备步骤为：称取制备的双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵质量0.3-0.5g溶于10mL水中；称取单羧基化聚乙二醇质量0.2-0.6g溶于10mL水中；两者混合均匀后加入偶联剂乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸(EDC)1-1.5g，室温下搅拌反应24h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到产品。

叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的制备方法中，各组分的质量为：

乙二醇修饰的壳聚糖衍生物：0.3-0.5g

叶酸：0.2-0.6g

偶联剂N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)：1-1.5g

制备步骤为：将0.2-0.6g叶酸溶于50ml二甲基亚砜溶液中，向其加入1.5ml三乙胺，将1-1.5g偶联剂N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)用一定量的二甲基亚砜溶解后加入到上述反应体系中避光反应12h以上。将产物过滤，得到黄色固体活化叶酸。取活化叶酸溶于25ml二甲基亚砜中，加入0.3-0.5g的乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。用磷酸氢二钠与氢氧化钠缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1h。将最后产物透析24h，冻干即得叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。

本发明的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，其组装次数可以为：0-4次。

通过调节以上各种条件使制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体具有不同的粒径，载药率，缓释时间等性能。

整个制备过程简单快捷，制备周期为1天，产率高。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：粒径大小在50到150纳米之间，粒径均匀；稳定好，可在水溶液中保存至少2个月；包封率高，载药能力强，制备的紫杉醇制剂对药物的包封率大于95％，载药率载高达8-10％；缓释性能明显，缓释时间可调，制备的紫杉醇制剂相对于对照组具有明显的缓释效果，并且缓释时间可以根据制剂的组成成分，制备方法等进行调节。

总之，与现有的紫杉醇制剂相比，本发明涉及的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体具有粒径均匀可控，制剂稳定性好，制备工艺简单，载药率高具有缓释功能等特点，适合大批量生产。

附图说明

图1：按照实施例4制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的投射电镜照片；

图2：按照实施例4制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的粒径分析。

具体实施方式

下面的实施例中将对本发明作进一步的阐述，但本发明不限于此。

实施例1：

叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的合成。称取制备的双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵质量0.3g溶于10mL水中；称取单羧基化聚乙二醇质量0.6g溶于10mL水中；两者混合均匀后加入偶联剂乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸(EDC)1.4g，室温下搅拌反应24h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。将0.6g叶酸溶于50ml二甲基亚砜溶液中，向其加入1.5ml三乙胺，将1.5g偶联剂N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)用一定量的二甲基亚砜溶解后加入到上述反应体系中避光反应12h以上。将产物过滤，得到黄色固体活化叶酸。取活化叶酸溶于25ml二甲基亚砜中，加入0.3g的乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。用磷酸氢二钠与氢氧化钠缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1h。将最后产物透析24h，冻干即得叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。

实施例2：

叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的合成。称取制备的双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵质量0.4g溶于10mL水中；称取单羧基化聚乙二醇质量0.2-0.6g溶于10mL水中；两者混合均匀后加入偶联剂乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸(EDC)1g，室温下搅拌反应24h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。将0.2g叶酸溶于50ml二甲基亚砜溶液中，向其加入1.5ml三乙胺，将1g偶联剂N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)用一定量的二甲基亚砜溶解后加入到上述反应体系中避光反应12h以上。将产物过滤，得到黄色固体活化叶酸。取活化叶酸溶于25ml二甲基亚砜中，加入0.4g的乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。用磷酸氢二钠与氢氧化钠缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1h。将最后产物透析24h，冻干即得叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。

实施例3：

叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的合成。称取制备的双亲性羧甲基壳聚糖十八烷基氯化铵质量0.5g溶于10mL水中；称取单羧基化聚乙二醇质量0.2-0.6g溶于10mL水中；两者混合均匀后加入偶联剂乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸(EDC)1.5g，室温下搅拌反应24h；反应结束后，用12000-14000的透析袋透析一周，最后过滤，冻干，得到乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。将0.4g叶酸溶于50ml二甲基亚砜溶液中，向其加入1.5ml三乙胺，将1.4g偶联剂N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)用一定量的二甲基亚砜溶解后加入到上述反应体系中避光反应12h以上。将产物过滤，得到黄色固体活化叶酸。取活化叶酸溶于25ml二甲基亚砜中，加入0.5g的乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。用磷酸氢二钠与氢氧化钠缓冲溶液调节反应体系的pH＝10，反应1h。将最后产物透析24h，冻干即得叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物。

实施例4：

薄膜法。(1)采用薄膜分散法制备CPL的过程如下：精确称取20mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、20mg胆固醇和15mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于5ml的二氯甲烷中。(2)于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(3)当茄形瓶中形成一层透明均匀的脂质膜后，继续旋蒸至二氯甲烷挥发干净。(4)旋蒸完成之后将茄形瓶取下，再放到真空烘箱中充分干燥。(5)充分干燥后，向茄形瓶中加入5ml去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5ml紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体(6)重复步骤(1)-(5)1次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为80nm，载药率为7.9％，体外缓释时间达到8天。实施例5：

薄膜法。(1)采用薄膜分散法制备紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的过程如下：精确称取50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、15mg胆固醇和5mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于5ml的二氯甲烷中。(2)于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(3)当茄形瓶中形成一层透明均匀的脂质膜后，继续旋蒸至二氯甲烷挥发干净。(4)旋蒸完成之后将茄形瓶取下，再放到真空烘箱中充分干燥。(5)充分干燥后，向茄形瓶中加入5ml去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5m1紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体(6)重复步骤(1)-(5)0次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为54nm，载药率为9.7％，体外缓释时间达到7天。制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的投射照片如图1，粒径分布如图2。

实施例6：

薄膜法。(1)采用薄膜分散法制备紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的过程如下：精确称取5mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5mg胆固醇和20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于5ml的二氯甲烷中。(2)于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(3)当茄形瓶中形成一层透明均匀的脂质膜后，继续旋蒸至二氯甲烷挥发干净。(4)旋蒸完成之后将茄形瓶取下，再放到真空烘箱中充分干燥。(5)充分干燥后，向茄形瓶中加入5ml去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5ml紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体(6)重复步骤(1)-(5)0次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为54nm，载药率为9.7％，体外缓释时间达到7天。制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的投射照片如图1，粒径分布如图2。

实施例7：

反相蒸发法。(1)采用反相蒸发法制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体过程如下：精确称取5mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、10mg胆固醇和10mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于2ml的二氯甲烷中。(2)向茄形瓶中加入5ml的去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5ml紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，然后用探头式超声波发生器对其进行超声分散，直至形成半透明乳液。(3)将上述乳液于旋转蒸发仪上进行旋蒸，，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(4)当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体。(5)重复步骤(1)-(4)4次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。如图2所示，制备的紫杉醇纳米靶向缓释常循环脂质体的粒径分析，有效粒径为55.7nm；多分散指数为0.195。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为150nm，载药率为8.5％，体外缓释时间达到15天。

实施例8：

反相蒸发法。(1)采用反相蒸发法制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体过程如下：精确称取35mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5mg胆固醇和20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于2ml的二氯甲烷中。(2)向茄形瓶中加入5ml的去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5ml紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，然后用探头式超声波发生器进行超声分散，直至形成半透明乳液。(3)将上述乳液于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(4)当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体。(5)重复步骤(1)-(4)2次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为104nm，载药率为8.7％，体外缓释时间达到14天。

实施例9：

反相蒸发法。(1)采用反相蒸发法制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体过程如下：精确称取50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、20mg胆固醇和5mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于2ml的二氯甲烷中。(2)向茄形瓶中加入5ml的去离子水(重复组装时将5ml去离子水换成制备好的5ml紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液)，然后用探头式超声波发生器进行超声分散，直至形成半透明乳液。(3)将上述乳液于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护。(4)当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体。(5)重复步骤(1)-(4)2次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。所制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的性能包括：制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体粒径为104nm，载药率为8.7％，体外缓释时间达到14天。

Claims (3)

1.一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，其特征是由叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物的结构：

2.一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，其特征是：

(1)采用薄膜分散法制备紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的过程如下：称取5-50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5-20mg胆固醇和5-20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于5ml的二氯甲烷中；

(2)于旋转蒸发仪上进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入氮气流加以保护；

(3)当茄形瓶中形成一层透明均匀的脂质膜后，继续旋蒸至二氯甲烷挥发干净；

(4)旋蒸完成之后将茄形瓶取下，再放到真空烘箱中充分干燥；

(5)充分干燥后，向茄形瓶中加入5ml去离子水或已经制备好的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，将脂质膜水化，然后用超声波清洗器进行超声分散，直至形成半透明乳液，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体；

(6)重复步骤(1)-(5)0-4次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。

3.一种紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体的制备方法，其特征是：

(1)采用反相蒸发法制备的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体过程如下：称取5-50mg的叶酸受体介导聚乙二醇修饰的壳聚糖衍生物、5-20mg胆固醇和5-20mg紫杉醇，加入到茄形瓶中，溶于2ml的二氯甲烷中；

(2)向茄形瓶中加入5ml的去离子水或已经制备好的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体，然后用探头式超声波发生器进行超声分散，直至形成半透明乳液；

(3)将上述乳液在35℃下于旋转蒸发仪上以50r/min的旋转速度进行旋蒸，同时向旋转蒸发仪中通入适当流速的氮气流加以保护；

(4)当茄形瓶中的有机溶剂完全挥发后，即得到紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体；

(5)重复步骤(1)-(4)0-4次，得到最终的紫杉醇纳米靶向缓释长循环脂质体溶液。

Images