CN101678051B - 促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂及内脏脂肪蓄积抑制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂,以及一种促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品、饲料,其以乳杆菌属乳酸菌特别是以其中的加氏乳杆菌与瑞士乳杆菌的培养物或其菌体自身作为有效成分。另外本发明涉及一种内脏脂肪蓄积抑制剂及抑制内脏脂肪蓄积用饮食品,其以瑞士乳杆菌的培养物或其菌体自身作为有效成分。
Description
技术领域
本发明涉及一种促进血中脂连蛋白(adiponectin)浓度增加及/或抑制其减少的制剂,一种赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的新型饮食品,以及一种赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的新型饲料,均以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌,尤其是以其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)的培养物及/或菌体作为有效成分。通过摄取本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂,能促进血中脂连蛋白浓度的增加及/或抑制其减少。血中脂连蛋白浓度降低是与血栓症、胰岛素抵抗性、糖代谢异常、高血压等未来的循环系统疾病的发病相关的代谢综合症的原因,本发明对于其预防和治疗有效。
另外,本发明涉及一种以属于乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体作为有效成分的内脏脂肪蓄积抑制剂以及赋予了抑制内脏脂肪蓄积作用的新型饮食品。通过摄取本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂及抑制内脏脂肪蓄积用饮食品,能抑制内脏脂肪的蓄积。内脏脂肪的蓄积是与血栓症、胰岛素抵抗性、糖代谢异常、高血压等未来的循环系统疾病的发病相关的代谢综合症的原因,本发明对于其预防和治疗有效。
背景技术
近年来,伴随着生活习惯的欧美化,呈现糖尿病、高血压、 高脂血症、动脉硬化症这类生活习惯病的病情的人口不断增加。特别是心血管疾病与脑血管疾病导致的死亡约占死因的1/3,并且其数量正逐年增加,因此其对策已成为重大的课题。这些动脉硬化性疾病随着高血压、高脂血症、糖耐量异常等危险因子的集聚,其发病的危险度明显上升。该危险因子集聚的状态被称为代谢综合症,正得到越来越广泛的认识。根据对日本的12万企业劳动者的调查,即使仅为轻微症状,具有“肥胖”、“高血压”、“高血糖”、“高甘油三酯(中性脂肪)血症”、或“高胆固醇血症”这些危险因子中1个危险因子的人,心脏病的发病危险为正常人5倍,具有2个的人为10倍,同时具有3~4个的人甚至可达31倍。另外,根据厚生劳动省的调查报告,高血压患者数为3900万人,高脂血症为2200万人,糖尿病(含潜在患者)为1620万人,肥胖症为468万人,并且这些患者正逐年增加。
代谢综合症是指“是内脏脂肪的蓄积、以其为基础的胰岛素抵抗性及糖代谢异常、脂质代谢异常、高血压中的多种并发的多种危险因子综合症,是易于产生动脉硬化的病症”,伴随着内脏脂肪的蓄积的血中脂连蛋白浓度的降低正是代谢综合症与动脉硬化的根本的原因。脂肪组织作为生物体最大的分泌组织,产生着各种内分泌因子,与生物体内稳态的维持相关。然而,现已逐渐认识到内脏脂肪的过量蓄积可破坏内分泌因子的分泌平衡,引起各种病情。特别是纤溶酶原激活物抑制物(plasmino gen activator inhibitor,PAI-1)、肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF-α)、瘦蛋白(leptin)等内分泌因子分泌量随着内脏脂肪的蓄积而增加,会引起血栓症、胰岛素抵抗性、糖代谢异常、高血压等。
现在,用于减少内脏脂肪的手段有运动疗法、饮食疗法、行为疗法及药物疗法。其中关于药物疗法,开发了中枢性抑制 食欲的药物,此外还尝试了β3肾上腺素受体兴奋剂及抑制消化道的脂肪吸收的制剂等。然而,对于这些所谓的抗肥胖药对内脏脂肪尤其是肾脏周围的内脏脂肪的减少的有效性未被确认,可实现肾脏周围的内脏脂肪的减少的有效药物疗法尚未确立。而且,至今尚未确立能以日常的饮食的形态或作为补充剂摄取的饮食疗法。
另一方面,虽然脂肪组织特异分泌的脂连蛋白通常在血中以高浓度存在,但已知随着内脏脂肪的蓄积,其浓度减少。已知脂连蛋白具有抗糖尿病、抗动脉硬化、抗炎症作用、抗高血压等各种生理机能,促进血中脂连蛋白浓度的增加或抑制脂连蛋白浓度的减少,这在代谢综合症的预防和治疗上非常重要。
以往,也已采用了药物疗法作为针对代谢综合症的各个病情的对策。对于药物疗法,开发了中枢性抑制食欲的药物、β3肾上腺素受体兴奋剂、抑制消化道的脂肪吸收的制剂等。然而这些所谓的抗肥胖药,对于内脏脂肪减少的有效性未被确认,可实现内脏脂肪减少的有效药物疗法尚未确立。另外,存在需要处方及伴随有副作用等问题。此外,已知即便针对一种病情进行治疗,也会以其他的病情为原因而引起病情的恶化,因此需要对存在于这些状态的上游的脂肪细胞来源的内分泌因子的分泌平衡进行调整。因此起因于内脏脂肪的蓄积的代谢综合症的预防和治疗中,相对于药物疗法,更加重要的是运动疗法及饮食疗法等对日常生活进行纠正。因此,期待一种可日常摄取,且即便长期摄取安全性也较高,对起因于内脏脂肪蓄积的代谢综合症的预防和治疗有效的饮食品。
关于促进血中脂连蛋白浓度的增加的物质已公开有苹果提取物(例如,参照专利文献1。)、酒花苞叶(hop bract)提取物(例如,参照专利文献2。)、绿茶儿茶酸(例如,参照专利文献 3。)、米糠提取物(例如,参照专利文献4。)、姜黄根茎提取物(例如,参照专利文献5。)等多种植物来源的提取物。然而,这些物质的提取条件复杂,另外提取原料的获得也受到限制,未必能实现作为制剂及饮食品调配原料的稳定的供给。关于菌培养物及菌体自身具有促进脂连蛋白浓度的增加及/或抑制其减少的效果尚且未知。
已公开了含有米曲霉(Aspergillus oryzae)等真菌培养物、粪链球菌(Streptococcus faecalis)等乳酸菌培养物及酵母的防止内脏脂肪蓄积用组合物或治疗肥胖用组合物,用于防止内脏脂肪蓄积(例如,参照专利文献6)。然而,该方法中需3种分别培养后再混合,制造复杂,而本发明为单一菌的培养物或菌体,具有制造容易的优点。
已知加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)具有病原体感染防御作用(例如,参照专利文献7。)、炎症性肠病及肠易激综合征(irritable bowel syndrome)预防作用(例如,参照专利文献8。)、糖尿病并发症预防作用(例如,参照专利文献9。)、血清胆固醇上升抑制作用(例如,参照专利文献10。)、骨吸收抑制作用(例如,参照专利文献11。)、免疫增强作用(例如参照专利文献12。)等。然而,对于加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)的发酵物或其菌体自身具有促进血中脂连蛋白浓度增加作用及抑制其减少的作用则完全未知。
瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)自古以来就被用作有代表性的乳制品用乳酸菌发酵剂。瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)具有强蛋白分解活性,特别是具有高活性的菌体外蛋白酶对于乳品的发酵性有着重要的作用。即,菌体外蛋白酶分解乳蛋白质生成各种肽片段。生成的肽受肽酶类的作用,进一步成为低分子的肽。已知通过蛋白质分解酶类的作用,培养 基中生成的肽的一部分被摄入乳酸菌的菌体内,作为氮源而被利用。另一方面,有报道称培养基中生成的肽中,存在对作为血压上升作用的原因物质的血管紧张素转化酶(AngiotensinConverting Enzyme,以下称ACE)有抑制活性的物质(例如,参照非专利文献1。)。关于以抑制ACE的酶活性、抑制血压上升为目的的肽,已报道有乳蛋白质、大豆蛋白质或鱼肉蛋白质分解物等来源的多种有效肽,但使用瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)生产的发酵乳中的、具有ACE抑制活性的肽为Val-Pro-Pro与Ile-Pro-Pro,并且这些乳三肽(lacto-tripeptide)具有强降血压作用已通过采用自发性高血压大鼠(SHR)的实验得以确认(例如,参照非专利文献2。)。
此外,乳三肽除了降血压活性,还表现出具有压力缓和作用(例如,参照专利文献13、14。)。另外,已知瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)具有免疫激活作用(例如,参照专利文献15。)。然而,对于瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的发酵物或其菌体自身具有促进血中脂连蛋白浓度增加作用及抑制其减少的作用则完全未知。另外,对于瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体自身具有抑制内脏脂肪蓄积作用及促进内脏脂肪减少的作用也完全未知。
专利文献1:日本特开2006-193502号公报
专利文献2:日本特开2006-193501号公报
专利文献3:日本特开2006-131512号公报
专利文献4:日本特开2005-68132号公报
专利文献5:日本特开2005-60308号公报
专利文献6:日本特开2004-99539号公报
专利文献7:日本特开平8-268899号公报
专利文献8:日本特开2003-95963号公报
专利文献9:日本特开2003-252770号公报
专利文献10:日本特开2003-306436号公报
专利文献11:日本特开2004-315477号公报
专利文献12:日本特开2006-69993号公报
专利文献13:日本特开平10-45610号公报
专利文献14:日本特开平11-98978号公报
专利文献15:日本特开2006-76961号公报
非专利文献1:J.Dairy Sci.,78:777-783(1995)
非专利文献2:J.Dairy Sci.,78:1253-1257(1995)
发明内容
发明要解决的问颗
本发明的课题在于提供一种可日常地摄取,且通过摄取而促进血中脂连蛋白浓度的增加及/或抑制其减少、对代谢综合症的预防和治疗有效的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂,以及赋予了这些功能的饮食品及饲料。
另外,本发明的课题在于提供一种可日常摄取,且通过摄取而抑制内脏脂肪的蓄积,从而对代谢综合症的预防和治疗有效的内脏脂肪蓄积抑制剂及赋予了这些功能的饮食品。
用于解决问题的方案
本发明人等对于乳成分中的、可防止脂连蛋白的浓度降低的成分进行了精心研究,所述脂连蛋白在血液中的浓度一旦降低则患循环系统疾病的危险将增加。其结果发现,乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌特别是其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)及瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)的培养物或菌体自身具有极高的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用,进而完成了本发明。
另外,本发明人等对于各种微生物中的、可降低作为代谢综合症的原因的内脏脂肪的菌种进行了精心研究。其结果发现,乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌中,特别是瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体自身具有极高的抑制内脏脂肪蓄积作用,成功解决了上述课题,进而完成了本发明。
因此,本发明为包含下述方案的发明。
(1)一种促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂,其以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分。
(2)根据(1)所述的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂,其中乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)。
(3)一种促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品,其以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分。
(4)根据(3)所述的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品,其中乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)。
(5)一种促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饲料,其以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分。
(6)根据(5)所述的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饲料,其中乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)。
(7)一种内脏脂肪蓄积抑制剂,其以瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体作为有效成分。
(8)一种抑制内脏脂肪蓄积用饮食品,其以瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体作为有效成分。
发明的效果
本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂以及赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的饮食品、饲料,对由于血中脂连蛋白的降低而导致发病的代谢综合症的预防和治疗有效。另外,本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂以及赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的饮食品、饲料具有如下特征:使用乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌培养物或其菌体自身,特别是其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物或其菌体自身,因而可相对廉价地大量供给,且安全性极高。
另外,以本发明的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体作为有效成分的内脏脂肪蓄积抑制剂及抑制内脏脂肪蓄积用饮食品,对由于内脏脂肪的蓄积而导致发病的代谢综合症的预防和治疗有效。另外,本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂或饮食品有如下特征:使用瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)的培养物及/或其菌体自身,因而可相对廉价地大量供给,且无毒性及副作用,安全性极高。这样,可作为抑制内脏脂肪蓄积用的补充剂及抑制内脏脂肪蓄积用的饮食品而日常摄取,因而本发明极为有用。
具体实施方式
本发明人等从发酵乳及人来源的多种乳酸菌中,选择了胃酸耐受性高、低pH条件下的繁殖良好、显示出在人肠道中的高定居性、显示出人肠道细胞亲和性、具有胆汁酸耐受性、定居于肠道中、应用于食品中时存活率高、香味和物性也优良的菌株。其次从显示出在人肠道中的高定居性的乳酸菌中,设定了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的条件来进行选择,发现属于乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的、特别是其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的乳酸菌具有促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的效果。作为符合上述条件的菌株,可以从属于加氏乳杆菌的乳酸菌中选择加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055株、加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)JCM1131株及加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC19992株。予以说明,SBT2055株以保藏号FERM BP-10953保藏于独立行政法人产业技术综合研究所专利微生物保藏中心。另外,JCM1131株为独立行政法人理化学研究所的公开菌株,ATCC19992株为美国典型菌种保藏中心(American TypeCulture Collection)的公开菌株。
特别是加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055株与人肠道细胞具有高亲和性,经口给予时,可保持存活状态到达肠道内,另外,可长期停留在肠道内,通过在肠道内繁殖而作用于宿主,具有高活性的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的效果。从体外给予的属于加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)的乳酸菌定居于肠内,可显示如上所述的生理效果,这是完全未知的,是由本发明人等首次揭示的。此外本发明不受限于上述的菌株,即便是从人和发酵乳中分离的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri),不论活菌还是死菌体,只要是显示上 述作用的物质均可使用。另外,也可使用显示上述作用的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)的突变株。本发明的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)的培养基可采用乳培养基或含有乳成分的培养基、不含乳的半合成培养基等各种培养基。作为这种培养基可例举出将脱脂乳复原后经加热灭菌处理的复原脱脂乳培养基。
另一方面,作为符合上述条件的具有促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少效果的菌株,并且作为已确认对抑制内脏脂肪蓄积有效的菌株,可以从属于瑞士乳杆菌的乳酸菌中选择瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171株、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)ATCC10386株及瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)ATCC10797株。该情况下活菌及死菌均能期待得到本发明的效果。予以说明,SBT2171株以保藏编号FERM BP-5445保藏于独立行政法人产业技术综合研究所专利微生物保藏中心。另外,ATCC10386株及ATCC10797株为美国典型菌种保藏中心(American Type Culture Collection)的公开菌株。
这些乳杆菌属乳酸菌的培养法可采用静置培养或控制pH为恒定的中和培养(neutral culture),但只要为菌可良好繁殖的条件,则培养法不受特别限制。将按照乳酸菌培养的常规方法培养而得到的培养物通过离心分离等菌体收集手段分离而获得的菌体可直接作为本发明的有效成分使用。另外,菌体不仅可为已纯化分离的菌体,也可使用培养物、发酵物、悬浮物、其他的含菌体物及采用酶或物理手段处理菌体后得到的细胞质及细胞壁组分。予以说明,采用菌体自身作为有效成分的情况下,可为活菌及死菌的任意一种。
本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的 制剂、内脏脂肪蓄积抑制剂,以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或其菌体自身作为有效成分。此外,制剂化时除可适当混合制剂上允许的赋形剂、稳定剂、矫味剂等进行浓缩、冻干,也可加热干燥制成死菌体。也包括其干燥物、浓缩物、糊状物。另外,在不影响菌体及培养物的作用的范围内,可混合赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、矫味矫臭剂、悬浮剂、包衣剂、其他任意的药剂进行制剂化。剂型可为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、粉剂、糖浆剂等,期望将其经口给予。
另外,本发明为以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌特别是以其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)及瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的发酵物或其菌体自身作为有效成分的、赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的功能的饮食品,另外,为以瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的发酵物或其菌体自身作为有效成分的抑制内脏脂肪蓄积用饮食品。
本发明的赋予了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的饮食品可为乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌特别是其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)及瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物或发酵物或者其菌体自身,也可为配合了菌体、培养物或发酵物自身的饮食品。
抑制内脏脂肪蓄积用饮食品可为瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物或发酵物或者其菌体自身,也可为配合了菌体及培养物或发酵物自身的饮食品。
任意一种作为培养物或发酵物的形态优选酸奶及乳酪等发酵食品。菌体及培养物或发酵物可与任何饮食品进行调配,也可在饮食品的制造工序中添加于原料中。饮食品的例子可举出 乳饮料、发酵乳、果汁饮料、果冻、糖果、乳制品、蛋黄酱等蛋加工品、奶油蛋糕等点心和面包类等的食品。另外,可举出各种奶粉,以及调配在以婴儿、幼儿及低出生体重儿等为对象的营养组合物中的制品。利用活菌体的情况下,也可将乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌特别是其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)及/或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)的菌株自身、以及将上述乳酸菌的菌体发酵得到的发酵乳及乳酪作为原料使用,制成促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用以及抑制内脏脂肪蓄积用的面包或点心、蛋糕、布丁等。因其可日常摄取,且具有促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用或抑制内脏脂肪蓄积作用,因而对起因于血中脂连蛋白的降低或内脏脂肪蓄积的代谢综合症的预防和治疗有效。
此外,本发明为以乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌特别是以其中的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)及瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的发酵物或其菌体自身作为有效成分的、促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少或者赋予了抑制内脏脂肪蓄积功能的饲料。家畜用饲料的情况下,可与上述饮食品同样地将菌体、培养物或发酵物与任何饲料进行调配,也可在饲料的制造工序中添加于原料中。
本发明中,为了发挥促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用以及抑制内脏脂肪蓄积作用,对于成人的情况下,可调整调配量等使之满足每日摄取加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)及/或瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物10~200g或其菌体自身0.1~5000mg。乳酸菌的含有比例不受特别限定,可根据制造的便利性及优选的每日给予量等适当调节。例如剂型为液体的情况下,优选为1×105细胞/ml~1×1010细 胞/ml,为固体的情况下,优选为1×105细胞/g~1×1010细胞/g。以活菌给予的情况下,成人每人以108~1012cfu/日给予,即可发挥本发明的目的效果。通过这样摄取可使其在肠道内定居,并发挥期望的效果。
这些促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂或促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品、饲料具有促进血中脂连蛋白浓度的增加及/或抑制其减少的效果,因而对上述由于血中脂连蛋白浓度的降低而引起的各种病症的预防、治疗、改善非常有益。
另外,本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂或饮食品具有抑制内脏脂肪蓄积效果,因而对由于内脏脂肪蓄积而引起的各种病症的预防、治疗、改善非常有益。
本发明中采用的乳酸菌菌体自古以来就被用于发酵乳及乳酪的制造,本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂或促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品、饲料以及内脏脂肪蓄积抑制剂或饮食品还具有在安全性上不存在问题的特征。
以下,示出实施例及试验例对本发明进行更详细的说明,但其仅为示例,本发明不因此受任何限定。
实施例1
(加氏乳杆菌培养物粉末的制备1)
将复原脱脂乳培养基(含有13重量%脱脂奶粉、0.5重量%酵母提取物)在95℃下灭菌30分钟后接种加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055,在37℃培养16小时,将得到的培养物冻干,获得加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055的培养物粉末。其可直接作为本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂使用。
实施例2
(加氏乳杆菌培养物粉末的制备2)
将复原脱脂乳培养基(含有13重量%脱脂奶粉、0.5重量%酵母提取物)在95℃下灭菌30分钟后接种加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)JCM1131,在37℃培养16小时,将得到的培养物冻干,获得加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)JCM1131的培养物粉末。其可直接作为本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂使用。
〔试验例1〕
(加氏乳杆菌培养物的给予与血中脂连蛋白的测定)
使50只4周龄Fischer系雄性大鼠自由摄取对照食饲喂1周后,以每组10只分组,使1组继续自由摄取对照食,其他的组自由摄取调配了加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)JCM1131、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC19992、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)ATCC11578的试验食,饲喂4周后测定血中脂连蛋白浓度。予以说明,5组间未检测到体重、摄食量、粪重量的差别。
测定血中脂连蛋白浓度得到的结果如表1所示。由此可知,与对照食摄取组相比,加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)JCM1131、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC19992、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)ATCC11578食摄取组的血中脂连蛋白浓度显著地维持较高的值。即,确认了添加加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055、加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)JCM1131、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC19992、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)ATCC 11578的培养物粉末的食品可将血中脂连蛋白浓度维持为一定值。
[表1]血中脂连蛋白浓度的变化
由以上结果可知,添加了加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)的培养物粉末的食品具有抑制表示循环系统疾病的危险高的血中脂连蛋白浓度的降低、使其维持在合适的值的效果。
实施例3
(片剂的制造)
将加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055的液体培养物在4℃、以7000rpm离心分离15分钟后,用无菌水进行洗涤,重复此操作3次,得到洗涤菌体。将其冻干处理而得到菌体粉末。在该菌体粉末1份中混合脱脂奶粉4份,采用压片机按常规方法将该混合粉末以1g/片进行压片,制备含有200mg本发明的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055的菌体的片剂。
实施例4
(发酵乳的制造)
采用MRS液体培养基(Difco公司)培养加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055。将处于对数增殖期的各培养液按1%接种至添加了0.3%的酵母提取物的10%复原脱脂乳(115℃、灭菌20分钟)中,制成母发酵剂(mother culture)。在其中添加10%的复原脱脂乳,按2.5%添加在100℃下加热10 分钟后的酸奶混合物中而制备。在37℃下进行发酵,当乳酸酸度达到0.85时冷却,结束发酵,得到本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂用发酵乳。
实施例5
(散剂的制造)
将加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055接种至5LMRS液体培养基(Difco公司)后,在37℃下静置培养18小时。培养结束后,以7000rpm离心分离15分钟,得到培养液的1/50量的浓缩菌体。随后,将该浓缩菌体与含有10重量%脱脂奶粉、1重量%谷氨酸钠的分散介质等量混合,调整至pH7后进行冻干。得到的冻干物用60目的筛调整粒度,制得冻干菌末。依照第13次修正日本药典解说书制剂总则“散剂”的规定,在该冻干菌末1g中添加乳糖(日本药典)400g,马铃薯淀粉(日本药典)600g并混合均匀,得到本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用散剂。
实施例6
(棒状健康食品的制造)
在实施例1中得到的加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055的培养物粉末30g中添加维生素C与柠檬酸的等量混合物40g、砂糖100g、玉米淀粉与乳糖的等量混合物60g并混合。将混合物装入棒状袋中,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用棒状健康食品。
实施例7
(天然乳酪的制造)
将调整脂肪率后的原料乳在75℃下进行15秒板式加热灭菌后,冷取至30℃,添加0.01%氯化钙。随后,在该原料乳中添加0.7%市售的乳酸菌发酵剂(Christian Hansen公司制)及1% 加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)SBT2055,添加0.003%凝乳酶使乳凝固后,切割并搅拌至pH达到6.2~6.1,排出乳清,得到凝乳粒。再将该凝乳粒填装于模型内压榨并加盐,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用天然乳酪。
实施例8
(胶囊剂的制造)
按表2中所示的配方混合原料,造粒后充填至胶囊中,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用胶囊剂。
[表2]
实施例9
(饮料的制造)
按表3中所示的配方混合原料,充填至容器中后加热灭菌,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮料。
[表3]
实施例10
(低脂肪硬质天然乳酪的制造)
采用乳酪中的脂肪率调整为12~30%的原料乳,制成多种 低脂肪硬质天然乳酪。即,将调整脂肪率后的原料乳在75℃下进行15秒板式加热灭菌后,冷取至30℃,添加0.01%氯化钙。随后,在该原料乳中添加0.7%乳酸菌发酵剂(Christian Hansen公司制)及1%瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171,添加0.003%凝乳酶使乳凝固后,切割并搅拌至pH达到6.2~6.1,排出乳清,得到凝乳粒。再将该凝乳粒填装于模型内压榨并加盐,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用高达干酪型(Gouda Cheese type)低脂肪硬质天然乳酪。
实施例11
(发酵乳的制造)
采用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171进行发酵乳的制造。将用脱脂乳100g在37℃下培养12小时后的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171接种至新的同种培养基3kg中,在37℃下培养12小时。将培养结束后的乳全部作为发酵剂使用,使脱脂乳100kg在32℃下发酵20小时,得到本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用发酵乳。瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171的活菌数为8.2×108细胞/g。
实施例12
(酸奶饮料的制造)
在实施例11中得到的发酵乳43kg中添加砂糖4kg、水3kg、果胶0.15kg后进行均质化,得到50kg酸奶饮料。该酸奶饮料具有柔和的良好的风味,pH3.6,瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)SBT2171的活菌数为4.6×108细胞/g。
实施例13
(菌体的制备)
在与实施例11同样得到的发酵乳5kg中添加等量的水后,用 连续离心机在3500×g下离心分离20分钟,仅分离收集菌体。为除去沉淀物中含有的非菌体成分,添加1kg水后再次离心分离,重复该操作3次。最终收集到瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)SBT2171的菌体20g。其可直接作为本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂使用。
〔试验例2〕
(促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用的确认)
使用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的菌体,确认了促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少作用。动物试验如下进行:将4周龄Fischer系雄性大鼠以每组8只分组,分成给予调配了瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的饲料的组(菌体食组)与给予未调配菌体的饲料的组(对照食组)而进行。动物实验中,给予对照饲料直到饲喂后第4周为止,其后给予对照饲料或调配了瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的菌体饲料直到第8周为止。在第4周、第8周进行采血,采用小鼠/大鼠脂连蛋白ELISA试剂盒(大塚制药公司)测定血中脂连蛋白浓度。
结果如表4所示。由此可知,对照食组的血中脂连蛋白浓度随时间的推移而减少,与此相对,菌体食组则增加。即,可知通过摄取瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus),血中脂连蛋白浓度的增加受到促进,或其减少受到抑制。
[表4]
血中脂连蛋白浓度的变化
〔试验例3〕
(促进脂连蛋白增加及/或抑制其减少作用的确认)
使用实施例10中得到的乳酪,确认了促进脂连蛋白增加及/或抑制其减少作用。动物试验如下进行:将4周龄Fischer系大鼠以每组8只分组,分成给予调配了乳酪的饲料的组(乳酪食组)与给予未调配乳酪的对照饲料的组(对照食组)而进行。对照饲料采用乳酪蛋白作为蛋白质源,熔融奶油(butter oil)作为脂质源,在乳酪的成分分析结果(表5)的基础上进行调配,使一般成分、主要矿物质、维生素E(α-生育酚)的含有量与调配了乳酪的饲料相同。调配了乳酪的饲料中,蛋白质、脂质都仅由乳酪成分提供。
动物实验中,给予对照饲料直到饲喂后第4周为止,其后分为2组,给予对照饲料、乳酪饲料直到第8周为止。在第4周、第8周进行采血,采用小鼠/大鼠脂连蛋白ELISA试剂盒(大塚制药公司)测定血中脂连蛋白浓度。
[表5]
结果如表6所示。由此可知,对照食组的血中脂连蛋白浓度随时间的推移而减少,与此相对,乳酪食组中则增加。即,可知通过摄取用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)制造的乳酪,血中脂连蛋白浓度的增加受到促进,或其减少受到抑制。
[表6]
实施例14
(狗饲喂用饲料的制造)
按表7中所示的配方混合原料,制成本发明的促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用狗饲喂用饲料。
[表7]
实施例15
(ATCC10386株的菌体粉末剂的制造)
将复原脱脂乳培养基(含有13重量%脱脂奶粉、0.5重量% 酵母提取物)在95℃下灭菌30分钟后接种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)ATCC10386株,在37℃培养16小时,将得到的培养物冻干,获得瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)ATCC10386株的菌体培养物粉末。其可直接作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂使用。
实施例16
(ATCC10797株的菌体粉末剂的制造)
将复原脱脂乳培养基(含有13重量%脱脂奶粉、0.5重量%酵母提取物)在95℃下灭菌30分钟后接种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)ATCC10797株,在37℃培养16小时,将得到的培养物冻干,获得瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)ATCC10797株的菌体培养物粉末。其可直接作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂使用。
实施例17
(发酵乳的制造)
将用脱脂乳100g在37℃下培养12小时后的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)株接种至新的同种培养基3kg中,在37℃下培养12小时。将培养结束后的发酵乳全部作为发酵剂使用,使脱脂乳100kg在32℃下发酵20小时,得到本发明的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)株的发酵乳。瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)的活菌数为8.2×108个/g。其可直接作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂使用。
实施例18
(SBT2171株的菌体粉末的制造)
在与实施例17同样得到的培养物5kg中添加等量的水后,用 连续离心机在3500×g下离心分离20分钟,仅分离收集菌体。为除去沉淀物中含有的非菌体成分,添加1kg水后再次离心分离,重复该操作3次后,收集到瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)株的菌体20g。得到的洗涤菌体经冻干处理后获得菌体粉末。其可直接作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂使用。
实施例19
(SBT2171株的菌体粉末片剂的制造)
在实施例18中得到的菌体粉末1份中混合脱脂奶粉4份,采用压片机按常规方法将该混合粉末以1g/片进行压片,制备含有瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERMP-14381)株的菌体200mg的菌体粉末片剂。其可直接作为本发明的内脏脂肪蓄积抑制剂使用。
实施例20
(酸奶饮料的制造)
在实施例17中得到的发酵乳43kg中添加砂糖4kg、水3kg、果胶0.15kg后进行均质化,得到50kg本发明的抑制内脏脂肪蓄积用酸奶饮料。该酸奶饮料具有柔和的良好的风味,pH3.6,瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)的活菌数为4.6×108个/g。
实施例21
(乳酪的制造)
采用乳酪中的脂肪率调整为12~30%的原料乳,制成多种低脂肪硬质天然乳酪。即,将调整脂肪率后的原料乳在75℃下进行15秒板式加热灭菌后,冷取至30℃,添加0.01%氯化钙。随后,在该原料乳中添加0.7%市售的乳酸菌发酵剂(ChristianHansen公司制)及1%瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus) SBT2171(FERM P-14381),添加0.003%凝乳酶使乳凝固后,切割并搅拌至pH达到6.2~6.1,排出乳清,得到凝乳粒。再将该凝乳粒填装于模型内压榨并加盐,制成高达干酪型(GoudaCheese type)的低脂肪硬质天然乳酪。其可直接作为本发明的抑制内脏脂肪蓄积用食品使用。
〔试验例4〕
(抑制内脏脂肪蓄积作用的确认)
使用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)通过动物实验确认了抑制内脏脂肪蓄积作用。动物试验如下进行:将4周龄Fischer系雄性大鼠以每组8只分组,分为四组:给予调配了瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERM P-14381)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)ATCC10386及瑞士乳杆菌(LactobaCillus helveticus)ATCC10797的饲料的组(菌体食组)与给予未调配菌体的饲料的组(对照食组)。动物实验中,给予对照饲料直到饲喂后第4周为止,其后向对照食组继续给予对照饲料直到第8周为止,菌体食组分别给予调配了瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的菌体饲料直到第8周为止。第8周进行解剖,测定内脏脂肪(肠系膜、睾丸周围、肾周围、腹腔后壁)的量。
结果如表8所示。由此可知,与对照食组的内脏脂肪量相比,菌体食组总体显示低值。即,可知通过摄取瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus),内脏脂肪的蓄积受到抑制。
[表8]
内脏脂肪蓄积量
〔试验例5〕
(抑制内脏脂肪蓄积作用的确认)
使用实施例21中得到的乳酪确认了内脏脂肪蓄积抑制作用。动物试验如下进行:将4周龄Fischer系大鼠以每组8只分组,分为给予调配了乳酪的饲料的组(乳酪食组)与给予未调配乳酪的对照饲料的组(对照食组)。对照饲料采用乳酪蛋白作为蛋白质源,熔融奶油作为脂质源,在乳酪的成分分析结果(表5)的基础上进行调配,使一般成分、主要矿物质、维生素E(α-生育酚)的含有量与调配了乳酪的饲料相同。调配了乳酪的饲料中,蛋白质、脂质都仅由乳酪成分提供。动物实验中,将大鼠分为两组,分别给予对照饲料及乳酪调配饲料。然后,从分为2组时起的第8周将大鼠解剖,测定肠系膜、睾丸周围、肾周围、腹腔后壁各处的内脏脂肪蓄积量。
结果如表9所示。由此可知,与对照食组的内脏脂肪蓄积量相比,乳酪食组的内脏脂肪蓄积量总体显示低值。特别是肠系膜脂肪与对照食组相比显示出显著性的低值。即,可知通过摄取用瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)SBT2171(FERMP-14381)制造的乳酪,内脏脂肪,特别是肠系膜脂肪的蓄积受到抑制。
[表9]
实施例22
(胶囊剂的制造)
按表10中所示的配方混合原料,造粒后充填至胶囊中,制成赋予了抑制内脏脂肪蓄积作用的胶囊剂。
[表10]
实施例23
(饮料的制造)
按表11中所示的配方混合原料,充填至容器中后,加热灭菌制成本发明的抑制内脏脂肪蓄积用饮料。
[表11]
Claims (5)
1.一种乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体在制备促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少的制剂中的用途,所述制剂以乳杆菌属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分,其中,所述乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)。
2.一种乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体在制备促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饮食品中的用途,所述饮食品以乳杆菌属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分,其中,所述乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)。
3.一种乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌的培养物及/或菌体在制备促进血中脂连蛋白浓度增加及/或抑制其减少用饲料中的用途,所述饲料以乳杆菌属乳酸菌的培养物及/或菌体作为有效成分,其中,所述乳杆菌(Lactobacillus)属乳酸菌为加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)或瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)。
4.一种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体在制备内脏脂肪蓄积抑制剂中的用途,所述内脏脂肪蓄积抑制剂以瑞士乳杆菌的培养物及/或菌体作为有效成分。
5.一种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的培养物及/或菌体在制备抑制内脏脂肪蓄积用饮食品中的用途,所述饮食品以瑞士乳杆菌的培养物及/或菌体作为有效成分。
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