CN101628858A - 一种白藜芦醇的制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物制备领域,是一种白藜芦醇的制备工艺,解决了现有技术白藜芦醇的制备转化率低,产量低,产品品质不好的问题,制备工艺如下:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切片或粗粉,待用;将待用料加入解化池,加入酶解液,进行酶解;提取。本发明经反复的科学的研究改进,从酶解时间上比传统的缩短了一半,酶解量提高了一倍,转化率比传统的也提高了一倍,我们为这套工艺专门设计了酶解过程,从操作的便捷性、使用的有效性和转化的可靠性上都远远的超过传统的工艺,使得产成品质量更有效的得到保证和稳定,成本降低了一半。社会效益不言而喻。
Description
技术领域
本发明涉及药物制备领域,是一种白藜芦醇的制备工艺。
背景技术
白藜芦醇,又名虎杖甙元,英文名Resveratrol,分子式C14H12O3,分子量228.25为蓼科植物虎杖Polygonumcuspidatum Sieb.et Zucc.的根茎提取精制而来。无味、白色晶体粉末;难溶于水,易溶于乙醇,丙酮等有机溶剂。
白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂,可降低血液粘稠度,抑制血小板凝结和血管舒张,保持血液畅通,可预防癌症的发生及发展,具有抗动脉粥样硬化和冠心病,缺血性心脏病,高血脂的防治作用。还有抑制肿瘤、抗炎、抗过敏的作用,还具有雌激素样作用,可用于治疗乳腺癌等疾病。白藜芦醇分为顺式和反式,反式白藜芦醇的生理活性,稳定性等都较好。
现有技术通过很多工艺提取白藜芦醇,但是均存在缺陷,如直接通过醇或水进行提取,产量非常低,是属于已被淘汰的工艺;碱提取法:白藜芦醇属于多元酚类物质,具有弱酸性,在碱性条件下酚羟基可以转变成盐而使水溶性显著增加,再通过调节溶液PH值的方法使之沉淀而得以分离,从而富集提取白藜芦醇,但通过该方法常需要进行加热,破坏部分有效成分,而且获得的白藜芦醇苷较多,反式白藜芦醇含量低。
超声波提取法:超声波提取是一种物理破碎过程,对媒质主要产生独特的机械振动作用和空化作用,超声波提取效率高,时间短,但在大批量生产的过程中还有些技术需要进一步完善,而其用该方法提取的白藜芦醇中,也存在反式白藜芦醇含量低的问题。
现有技术中常用的是酶解法制备白藜芦醇,通过酶解使得白藜芦醇苷转化为白藜芦醇,尤其是反式白藜芦醇;但是,现有技术中的酶解方法往往耗时长,需要6小时-两天,甚至更长时间;转化率也稍差些,整个工艺需要进一步完善。
发明内容
本发明的一个目的是为解决上述现有技术提取时间长,转化率低的问题,提供一种白藜芦醇的制备工艺。
该工艺包括如下步骤:
1前处理:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切片或粗粉,待用。
2酶解:将待用料加入解化池,加入酶解液,进行酶解。
3提取。
所述的提取包括:
①浓缩过滤:将酶解好后的原料,转入提取罐,通过乙醇提取,将提取液回收浓缩过滤;
②萃取:将回收浓缩好后的液体按进行萃取,反复几次后并将有机相回收,得粗品;
③精制:将粗品通过乙醇反复重结晶;
④层析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥;
⑤再精制:将干燥物反复重结晶,得精品;
⑥干燥:精品减压干燥后得成品。
更进一步地说,该工艺包括如下步骤:
1前处理:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切厚度为0.5-3mm的片或20-40目粗粉,待用;
2酶解:将待用料加入解化池,按照与待用料质量比为1∶1-5的比例加入酶解液,调节PH值至3-5,进行酶解;
所述酶解液为0.05-5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.2-1份纤维素酶;
所述的酶解步骤还可以是:
将待用料加入解化池,加入质量比为1∶1的,浓度为0.05-0.1mol/L醋酸溶液,搅拌均匀,放置3-20分钟后,按照与待用料质量比为1∶1-5的比例加入酶解液,用浓度为0.1mol/L盐酸溶液调节PH值至3-5,,进行酶解;
按照与待用料质量比为1∶2-4的比例加入酶解液,所述酶解液为0.1-3%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.4-0.8份纤维素酶,0.1-0.3份乳酸菌。
按照与待用料质量比为1∶2.5-3.5的比例加入酶解液,所述酶解液为0.2-2.5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.5-0.7份纤维素酶,0.15-0.25份乳酸菌。
按照与待用料质量比为1∶3的比例加入酶解液,所述酶解液最优选为0.5-1%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.6份纤维素酶,0.2份乳酸菌。
所述浓度为0.05-0.1mol/L醋酸溶液优选醋酸含量为0.1mol/L的酿造醋溶液。
3提取
①浓缩过滤:酶解1.5-3小时后,将酶解后的原料,转入提取罐,通过2-5倍的有机溶液提取,将提取液回收浓缩过滤。
所述有机溶液为70-80%乙醇溶液。
所述的浓缩,是利用现有技术进行的,如加热浓缩,减压浓缩等工艺。
②萃取:将回收浓缩好后的液体与纯净水按1∶0.5-5的比例进行萃取,反复2-5次后并将有机相回收,得粗品。
③精制:将粗品通过乙醇反复重结晶2-5次。
④层析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥。
⑤再精制:将干燥物反复重结晶2-5次,得精品,
⑥干燥:精品减压干燥后得成品。
本发明的有益效果在于:
酶解是本工艺当中最具创新的地方,经反复的科学的研究改进,从酶解时间上比传统的缩短了一半,酶解量提高了一倍,转化率比传统的也提高了一倍,我们为这套工艺专门设计了酶解过程,从操作的便捷性、使用的有效性和转化的可靠性上都远远的超过传统的工艺,使得产成品质量更有效的得到保证和稳定,成本降低了一半。社会效益不言而喻。
组合酶溶液采用酒曲酶和纤维素酶共同作用,相互促进,使得酶解速度加快,转化率提高,尤其是采用醋酸溶液或乳酸溶液搅拌原料后进行酶解,并在组合酶溶液中添加了乳酸菌,更进一步地提高了生产效率和转化率,促使原料中的有效物质更多的转化为反式白藜芦醇,使得产品质量更进一步提高。经试验证明,采用醋酸溶液处理后,在酒曲酶,纤维素酶,乳酸菌共同作用下,酶解效果增强,酶解更为彻底,转化率大大提高。
本发明采用70-80%乙醇溶液进行提取,提取率获得很大的改善,而且溶剂无毒性,在生产过程中安全高效,更为环保。
具体实施方式
下面结合实施例来进一步说明本发明,但并不作为对本发明的限定。
实施例1
以10kg虎杖原料为例,将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切厚度为2mm的片待用;将待用料加入解化池,加入200kg酶解液,0.1mol/L盐酸溶液调节PH值至4,进行酶解;所述酶解液为1%的组合酶溶液,组合酶中包括1kg酒曲酶和1kg纤维素酶。
提取:①浓缩过滤:酶解2小时后,将酶解后的原料,转入提取罐,通过3倍的有机溶液提取,将提取液回收减压浓缩并过滤;所述有机溶液为75%乙醇溶液。②萃取:将回收浓缩好后的液体与纯净水按1∶1的比例进行萃取,反复4次后并将有机相回收,得粗品;③精制:将粗品通过乙醇反复重结晶3次;④层析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥;⑤再精制:将干燥物反复重结晶3次,得精品;⑥干燥:精品减压干燥后得成品。
实施例2
按照与待用料质量比为1∶3的比例加入酶解液,所述酶解液为0.6%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.5份纤维素酶,0.2份乳酸菌。其余同实施例1
实施例3
按照与待用料质量比为1∶2的比例加入酶解液,所述酶解液为1.5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.4份纤维素酶,0.1份乳酸菌。
实施例4
按照与待用料质量比为1∶2.5的比例加入酶解液,所述酶解液为质量百分浓度1.2%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.5份纤维素酶,0.25份乳酸菌。
实施例5
按照与待用料质量比为1∶3的比例加入酶解液,所述酶解液为质量百分浓度1%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.6份纤维素酶,0.2份乳酸菌。
实施例6
将原料10kg虎杖淋洗掉灰尘后,制成40目粗粉,待用;将待用料加入解化池,加入200L,浓度为0.1mol/L酿造醋溶液,搅拌均匀,放置5分钟后,按照与待用料质量比为1∶5的比例加入酶解液,用浓度为0.1mol/L盐酸溶液调节PH值至3,进行酶解;所述酶解液为质量百分浓度0.05%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.2-1份纤维素酶,还包括0.5份乳酸菌;所述提取步骤同实施例1。
实施例7
将10kg待用料加入解化池,加入100kg浓度为0.05mol/L乳酸溶液,搅拌均匀,放置10分钟后,加入100kg酶解液,用浓度为0.1mol/L盐酸溶液调节PH值至5,进行酶解;所述酶解液为质量百分浓度2.5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.5份纤维素酶,还包括0.2份乳酸菌;其余工艺同实施例1。
实施例8-15
以原料为10kg虎杖计,醋酸溶液浓度,酶解液浓度,酒曲酶、纤维素酶以及乳酸菌在酶解液中的份数如下表所示,其余工艺和参数同实施例1。
实施例8 | 实施例9 | 实施例10 | 实施例11 | 实施例12 | 实施例13 | 实施例14 | 实施例15 | |
醋酸溶液浓度(mol/L) | 0.05 | 0.1 | 0.07 | 0.08 | 0.06 | 0 | 0 | 0 |
组合酶用量 | 50kg | 25kg | 40kg | 30kg | 20kg | 15kg | 10kg | 35kg |
酶解液浓度(%) | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.5 | 0.4 | 2.5 | 3 | 1 |
酒曲酶(份) | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
纤维素酶(份) | 0.2 | 1 | 0.5 | 0.8 | 0.4 | 0.6 | 0.7 | 0.3 |
乳酸菌(份) | 0 | 0.5 | 0.2 | 0.3 | 0.1 | 0 | 0 | 0 |
实施例16
所述提取步骤如下操作:
①浓缩过滤:酶解1.5小时后,将酶解后的原料,转入提取罐,通过5倍的70%乙醇溶液提取,将提取液回收浓缩过滤;
②萃取:将回收浓缩好后的液体与纯净水按1∶0.5的比例进行萃取,反复5次后并将有机相回收,得粗品;
③精制:将粗品通过乙醇反复重结晶5次;
④层析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥。
⑤再精制:将干燥物反复重结晶2次,得精品;
⑥干燥:精品减压干燥后得成品。
实施例17
所述提取步骤如下操作:
①浓缩过滤:酶解3小时后,将酶解后的原料,转入提取罐,通过2倍的80%乙醇溶液提取,将提取液回收浓缩过滤;
②萃取:将回收浓缩好后的液体与纯净水按1∶5的比例进行萃取,反复2次后并将有机相回收,得粗品;
③精制:将粗品通过乙醇反复重结晶2次;
④层析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥。
⑤再精制:将干燥物反复重结晶5次,得精品;
⑥干燥:精品减压干燥后得成品。
本发明实施例中所述的干燥采用了常州市荣发干燥设备有限公司生产的干燥设备。
Claims (10)
1.一种白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,包括如下步骤:
1)前处理:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切片或制成粗粉,待用;
2)酶 解:将待用料加入解化池,加入酶解液,进行酶解;
3)提 取。
2.根据权利要求1所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,该工艺包括如下步骤:
1)前处理:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切厚度为0.5-3mm的片或20-40目粗粉,待用;
2)酶 解:将待用料加入解化池,按照与待用料质量比1∶1-5的比例加入酶解液,调节PH值至3-5,进行酶解;
所述酶解液为0.05-5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.2-1份纤维素酶;
3)提 取。
3.根据权利要求2所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,按照与待用料质量比1∶3的比例加入酶解液,所述酶解液为0.6%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.4份纤维素酶。
4.根据权利要求1所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,
该工艺包括如下步骤:
1)前处理:将原料虎杖淋洗掉灰尘后,切厚度为0.5-3mm的片或20-40目粗粉,待用;
2)酶 解:将待用料加入解化池,加入质量比为1∶1-5的,浓度为0-0.1mol/L醋酸或乳酸溶液,搅拌均匀,放置3-20分钟后,按照与待用料质量比为1∶1-5的比例加入酶解液,用浓度为0.1mol/L盐酸溶液调节PH值至3-5,进行酶解;
所述酶解液为0.05-5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶和0.2-1份纤维素酶,还包括0-0.5份乳酸菌;
3)提 取。
5.根据权利要求4所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,按照与待用料质量比为1∶2-4的比例加入酶解液,所述酶解液为0.1-3%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.4-0.8份纤维素酶,0.1-0.3份乳酸菌。
6.根据权利要求5所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,按照与待用料质量比为1∶2.5-3.5的比例加入酶解液,所述酶解液为0.2-2.5%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.5-0.7份纤维素酶,0.15-0.25份乳酸菌。
7.根据权利要求6所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,按照与待用料质量比为1∶3的比例加入酶解液,所述酶解液最优选为0.5-1%的组合酶溶液,所述的组合酶包括1份酒曲酶,0.6份纤维素酶,0.2份乳酸菌。
8.根据权利要求4所述自藜芦醇的制备工艺,其特征在于,所述醋酸溶液为醋酸含量0.1mol/L的酿造醋溶液。
9.根据权利要求1-8任一所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,所述的提取包括:
①浓缩过滤:将酶解好后的原料,转入提取罐,通过乙醇提取,将提取液回收浓缩过滤;
②萃 取:将回收浓缩好后的液体按进行萃取,反复几次后并将有机相回收,得粗品;
③精 制:将粗品通过乙醇反复重结晶;
④层 析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥;
⑤再精制:将干燥物反复重结晶,得精品;
⑥干 燥:精品减压干燥后得成品。
10.根据权利要求9所述白藜芦醇的制备工艺,其特征在于,
所述提 取步骤如下操作:
①浓缩过滤:酶解1.5-3小时后,将酶解后的原料,转入提取罐,通过2-5倍的70-80%乙醇溶液提取,将提取液回收浓缩过滤;
②萃 取:将回收浓缩好后的液体与纯净水按1∶0.5-5的比例进行萃取,反复2-5次后并将有机相回收,得粗品;
③精 制:将粗品通过乙醇反复重结晶2-5次;
④层 析:将反复重结晶的粗品用硅胶层析,乙酸乙酯洗脱,将洗脱液回收干燥;
⑤再精制:将干燥物反复重结晶2-5次,得精品;
⑥干 燥:精品减压干燥后得成品。
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Legal Events
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---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20100120 |