CN101580447A

CN101580447A - 绵茵陈中有机酸的分离富集方法

Info

Publication number: CN101580447A
Application number: CNA2009100531508A
Authority: CN
Inventors: 胡坪; 罗国安; 姜志宏; 孙慧; 张瑞; 祝付兰
Original assignee: East China University of Science and Technology
Current assignee: East China University of Science and Technology
Priority date: 2009-06-16
Filing date: 2009-06-16
Publication date: 2009-11-18

Abstract

本发明涉及一种绵茵陈中有机酸的分离富集方法，由乙醇进行提取浓缩后的绵茵陈提取物，经醇沉、浓缩、调节pH值后，用大孔吸附树脂吸附并以一定浓度的乙醇洗脱富集，减压浓缩干燥，得到有机酸富集物。本发明的优点：具有简单易行、产物中有机酸含量高、成本低廉和环境友好等特点。

Description

绵茵陈中有机酸的分离富集方法

【技术领域】

本发明涉及有机酸类化合物的富集方法，具体涉及从绵茵陈药材中富集有机酸类化合物的方法。

【背景技术】

茵陈为菊科植物滨蒿Artemisia scoparia Waldst.et Kit或茵陈蒿Artemisiacapillaries Thunb的干燥地上部分。春季幼苗高6～10cm时采收或秋季花蕾长成时采割，除去杂质及老茎，晒干。春季采收的习称“绵茵陈”，秋季采割的称“茵陈蒿”，我国现多以绵茵陈入药。茵陈性微寒，味微苦、辛，归肝、胆、脾、胃、膀胱经。清湿热，退黄疸。用于黄疸尿少，湿疮瘙痒；传染性黄疸型肝炎。

研究发现，茵陈中含有多种化学成分，如有机酸、黄酮、香豆素等，其中有机酸类化合物为绵茵陈中的主要成分，含量较高的有3-咖啡酰喹尼酸(绿原酸)、3，5-二咖啡酰喹尼酸、3，4-二咖啡酰喹尼酸等，这些有机酸具有抗菌解毒、消炎利胆等药理作用，是绵茵陈中的主要药效成分。

有机酸类化合物常用的纯化方法有溶剂萃取法、硅胶柱层析法等，这类方法需使用较多的有毒溶剂，增加了脱溶剂步骤，提出了更高的检测要求，增加了分离富集的成本。

大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合物，应用于工业脱色、环境保护、抗生素的提取分离等领域已近20年，近年来在中药有效组分(中药中一大类结构及性质相近的成分)或天然产物提取分离方面得到了广泛的应用，大孔树脂法也应用于茵陈提取物的纯化中(曾元儿等，绵茵陈提取液的大孔树脂静态吸附工艺影响因素考察，中成药，2007，29(2)：199-201；王凤云等，绵茵陈提取液的大孔树脂动态吸附工艺研究，中成药，2007，29(4)：509-511)；但其分离纯化的目标不明确。

【发明内容】

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种绵茵陈有机酸的分离富集方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，具体步骤为：

(1)将绵茵陈药材和质量百分比为0％～30％乙醇加入到提取设备中，加热回流提取0.5～2h，溶剂乙醇倍量为绵茵陈药材质量的10～25倍，提取1～3次，经过滤制得绵茵陈提取液，减压浓缩至绵茵陈药材体积的1～3倍；

(2)在步骤(1)制得绵茵陈提取液中加入乙醇，乙醇质量百分比为60～80％，放置过夜，时间为10～14h，离心，过滤得到清液，减压浓缩至绵茵陈药材体积的1～3倍，制得绵茵陈浓缩液；

(3)将步骤(2)制得绵茵陈浓缩液，用浓度为0.1～2mol/L的盐酸溶液调节绵茵陈浓缩液的pH至2～5，过滤，制得绵茵陈滤液；

(4)将步骤(3)制得绵茵陈滤液，经大孔吸附树脂吸附，先用2～3倍柱体积的水洗脱杂质并弃去清洗液，再用3～6倍柱体积、质量百分比为40～60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后，制得有机酸富集物；

所述的大孔吸附树脂为苯乙烯大孔吸附树脂；

最终，有机酸组分得率为1.7％，其中绿原酸含量为4.5％、3，5-二咖啡酰喹尼酸含量为1.3％，3，4-二咖啡酰喹尼酸的含量为1.4％。

与现有技术相比，本发明的积极效果是：

本发明采用大孔吸附树脂对绵茵陈中有机酸组分进行分离富集，制备工艺简单，成本低廉，环境友好，方法稳定，适合工业化生产。

【附图说明】

图1本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分的高效液相色谱图；

图2本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分中绿原酸的洗脱曲线；

图3本发明的实施例1绵茵陈有机酸组分中3，4-二咖啡酰喹尼酸的洗脱曲线。

【具体实施方式】

以下提供本发明绵茵陈中有机酸的分离富集方法的具体实施方式。

实施例1

绵茵陈药材50g，以其16倍量14％乙醇回流提取2小时，过滤。药渣再用16倍量14％乙醇溶液回流提取2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至1倍绵茵陈药材体积。加入95％乙醇，使溶液含醇量达70％，静置12h，离心、过滤，滤液减压浓缩至1倍绵茵陈药材体积。用0.5mol/L HCl调节pH至3.0，离心、过滤。

将已预处理好的HZ-816大孔树脂装入内径16mm，高800mm的玻璃柱内，加入上述制备得到的提取液50mL，经大孔树脂吸附，以3倍树脂床层体积的去离子水，1/2BV/h的流速洗去水溶性杂质；再以4倍床层体积50％乙醇，1/2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液。将上述洗脱液减压浓缩后，稠浸膏经60℃真空干燥，得绵茵陈有机酸组分的得率为1.7％，其中绿原酸含量为4.5％，3，5-二咖啡酰喹尼酸含量为1.3％，3，4-二咖啡酰喹尼酸含量为1.4％。

图1为绵茵陈有机酸组分的高效液相色谱图；具体为对照品对照及LC-MS鉴定结果，其中：1、2、4为绿原酸异构体，3为绿原酸，5、6、7为异绿原酸，8为3，5-二咖啡酰喹尼酸，9为3，4-二咖啡酰喹尼酸；图2为绵茵陈有机酸组分中绿原酸的洗脱曲线；图3为绵茵陈有机酸组分中3，4-二咖啡酰喹尼酸的洗脱曲线。

实施例2

绵茵陈2kg，以其16倍量14％乙醇回流提取2次，每次1小时，将所得的提取液浓缩至约1.5倍绵茵陈药材体积，加入95％乙醇，调节至含醇量为70％，静置过夜，过滤。滤液减压浓缩至1倍绵茵陈药材体积，用0.3mol/L HCl调节pH至2.5。离心。上清液立即以1/4BV/h流速上样，以3倍树脂体积的去离子水冲去杂质；再用3倍树脂体积50％的乙醇洗脱，收集洗脱液。将上述洗脱液于60℃以下减压浓缩至稠浸膏，然后于真空烘箱内60℃真空干燥至恒重，得绵茵陈有机酸粉末32g，收率为1.6％，其中绿原酸含量为4.7％，3，5-二咖啡酰喹尼酸含量为1.2％，3，4-二咖啡酰喹尼酸为1.3％。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围内。

Claims

1.一种绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，具体步骤为：

(2)在步骤(1)制得绵茵陈提取液中加入乙醇，乙醇质量百分比为60～80％，放置10～14h，离心，过滤得到清液，减压浓缩至绵茵陈药材体积的1～3倍，制得绵茵陈浓缩液；

(4)将步骤(3)制得绵茵陈滤液，经大孔吸附树脂吸附，先用2～3倍柱体积的水洗脱杂质并弃去清洗液，再用3～6倍柱体积、质量百分比为40～60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后，制得有机酸富集物。

2.如权利要求1所述的绵茵陈有机酸的分离富集方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂为苯乙烯大孔吸附树脂。