CN118005495A - 一种滨蒿提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本申请是关于一种滨蒿提取物及其制备方法和应用,滨蒿提取物的制备方法包括以下步骤:(1)取滨蒿或茵陈蒿的地上部分和/或全草作为提取原料,粉碎后,根据预设的料液比加入乙醇进行回流提取,得到提取液;(2)提取液中加入活性炭,过滤,得到过滤后液;(3)过滤后液经大孔树脂及硅胶柱层析纯化,然后经洗脱,蒸馏回收乙醇,干燥,即得滨蒿提取物。本发明的方法,对于对羟基苯乙酮的提取率为95%以上且滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的含量更高,达到98%以上。
Description
技术领域
本申请涉及植物提取技术领域,尤其涉及一种滨蒿提取物及其制备方法和应用。
背景技术
经研究发现,部分化学合成的防腐剂是导致人体皮肤产生刺激,发炎、过敏以及诱发癌症等的重要因素之一,具有一定的安全风险,国家对其用量有严格的限制。天然防腐剂虽然弥补了化学合成防腐剂最大的缺点:安全性不够高,但是天然防腐剂因其生物活性,稳定性较差,单一防腐效果较弱,提取工艺复杂,故开发及应用受到了极大的限制。
对羟基苯乙酮是一种天然提取物,天然存在于菊科植物滨蒿的茎、叶,茵陈蒿、萝藦科植物人参娃儿藤等植物的根中。现阶段,其被广泛用于化妆品领域。
对羟基苯乙酮作为滨蒿提取物的有效成分之一。目前,对于滨蒿提取物提取制备方法主要包括包水提、醇提以及有机物萃取等,但上述方法普遍存在着提取率较低,产物中对羟基苯乙酮的纯度较低、提取工艺复杂、有机物残留多等问题。例如公开号为CN101669979B中公开了一种《滨蒿提取物及其生产方法和应用》,该方法制备得到的滨蒿提取物含有25%至75%的黄酮类成分。该专利文献中的生产方法中明确记载了,该滨蒿提取物的生产方法第一步,滨蒿的地上部分或全草以水或乙醇粗提;第二步,提取液过滤浓缩后加无水乙醇放置沉淀,滤除沉淀得到乙醇溶液;第三步,将所得乙醇溶液浓缩后调节pH值,上大孔树脂和/或聚酰胺树脂层析柱吸附;第四步,以10%至90%的乙醇进行梯度洗脱,收集乙醇洗脱液并合并;第五步,将所得洗脱液浓缩,回收乙醇,再减压干燥,即得到所需的滨蒿提取物。从上面可以看出,该方法中在用水或乙醇粗提后,需先经过醇沉且调节pH值后,方利用树脂纯化。该工艺流程冗长,且制备得到的产物中黄酮类成分是25%至75%。
因此,如何简化提取流程,提高对羟基苯乙酮的提取率以及提高滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的含量一直是本领域技术人员亟待解决的技术问题。
发明内容
为解决或部分解决相关技术中存在的问题,本申请第一方面是提供一种滨蒿提取物的制备方法,该制备方法工艺流程简便,对羟基苯乙酮的提取率较高,且提取所得滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的含量更高。
本申请中的一种滨蒿提取物的制备方法,包括以下步骤:
(1)取滨蒿或茵陈蒿的地上部分和/或全草作为提取原料,粉碎后,根据预设的料液比加入乙醇进行回流提取,得到提取液;
(2)提取液中加入活性炭,过滤,得到过滤后液;
(3)过滤后液经由D101型和FL-3型串联构成的大孔树脂及硅胶柱层析纯化,然后经洗脱,蒸馏回收乙醇,干燥,即得滨蒿提取物。
可选的,在第一方面的一些实施方式中,所述步骤(1)中预设的料液比是指提取原料与乙醇的质量比为1:20。
可选的,在第一方面的一些实施方式中,所述活性炭的加入量为提取原料加入质量的0.5%~2%。
可选的,在第一方面的一些实施方式中,所述大孔树脂为D101型和FL-3型串联构成的大孔树脂。
本申请第二方面是提供一种由上述方法制备得到的滨蒿提取物,该滨蒿提取物中含有98%以上的对羟基苯乙酮。
本申请第三方面是提供一种将上述制备方法制备得到的滨蒿提取物应用于化妆品领域。
进一步地,将滨蒿提取物与丁二醇进行复配作为防腐剂应用于化妆品组合物中进行防腐,从而增加化妆品安全性及温和性。
进一步地,在化妆品组合物中丁二醇与滨蒿提取物的质量比为25-75:1。
本申请提供的技术方案可以包括以下有益效果:
本发明中的方法在提取时先使用乙醇进行回流提取,然后采用活性炭吸附,再经过大孔树脂及硅胶柱层析纯化,洗脱,即得到滨蒿提取物,按照所得滨蒿提取物计算对羟基苯乙酮的提取率为95%以上,同时滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的含量达到98%以上;上述提取方法操作简便,流程更短,不需要任何醇沉、调节pH的操作,因而更适合工业化大规模生产。
应当理解的是,以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的,并不能限制本申请。
附图说明
通过结合附图对本申请示例性实施方式进行更详细的描述,本申请的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显,其中,在本申请示例性实施方式中,相同的参考标号通常代表相同部件。
图1为实施例2中制备滨蒿提取物的工艺流程图。
图2为对羟基苯乙酮标准品的HPLC色谱图。
图3为实施例1所述的滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的HPLC色谱图。
图4为实施例2所述的滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的HPLC色谱图。
具体实施方式
下面将参照实施例更详细地描述本申请的实施方式。虽然实施例中显示了本申请的实施方式,然而应该理解,可以以各种形式实现本申请而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反,提供这些实施方式是为了使本申请更加透彻和完整,并且能够将本申请的范围完整地传达给本领域的技术人员。
实施例1
(1)将1kg滨蒿粉碎,用80%乙醇加热回流提取3次/1.5h,乙醇使用量为滨蒿使用量的20倍(w/w);需要说明的是,本申请中所涉及到的w/w均是指两者之间的质量比。
(2)在提取液中加入2%活性炭(w/w),静置2h,过滤收集合并滤液并回收乙醇,干燥,制得滨蒿提取物。
实施例2
本实施例中滨蒿提取物的制备方法,工艺流程如图1所示,具体包括如下步骤:
(1)将1kg滨蒿粉碎,用80%乙醇加热回流提取3次/1.5h,乙醇使用量为滨蒿加入量的20倍(w/w),在提取物中加入2%的活性炭,静置2h,过滤后收集合并滤液,回收乙醇,得到粗提物;
(2)将粗提物经过D101型和FL-3型串联的大孔树脂纯化,收集得到纯化液1并回收乙醇;
(3)将纯化液1加入一定量的硅胶,使样品均匀吸附在硅胶上,通过硅胶柱层析纯化,硅胶柱中硅胶添加量为待测物的3.5倍,先用纯水进行洗脱2-3次,再使用60%、70%、80%、90%的乙醇进行梯度洗脱,流动相流速为1mL/min,最后使用蒸馏回收乙醇,干燥,制得滨蒿提取物。
实施例3
本实施例与实施例2的区别在于,实施例3中不经过活性炭吸附,其余均同实施例2。其具体操作如下:
(1)将1kg滨蒿粉碎,用80%乙醇加热回流提取3次/1.5h,乙醇使用量为滨蒿加入量的20倍(w/w),过滤,收集合并滤液,回收乙醇,得到粗提物;
(2)将粗提物经过D101型和FL-3型串联的大孔树脂纯化,收集得到纯化液1并回收乙醇;
(3)将纯化液1加入一定量的硅胶,使样品均匀吸附在硅胶上,通过硅胶柱层析纯化,硅胶柱中硅胶添加量为待测物的3.5倍,先用纯水进行洗脱2-3次,再使用60%、70%、80%、90%的乙醇进行梯度洗脱,流动相流速为1mL/min,最后使用蒸馏回收乙醇,干燥,制得滨蒿提取物。
实施例4
本实施例与实施例2的区别在于,本实施例中的大孔树脂由AB-8和LD605串联构成,其余均相同。
对比例1
本对比例与实施例2的区别仅仅在于乙醇浓度不同
(1)将1kg滨蒿粉碎,用50%乙醇加热回流提取3次/1.5h,乙醇使用量为滨蒿加入量的20倍(w/w),在提取物中加入2%活性炭,静置2h,过滤收集合并滤液并回收乙醇,得到粗提物。
(2)将粗提物经过D101型和FL-3型串联的大孔树脂纯化,收集得到纯化液1并回收乙醇。
(3)在纯化液1中加入一定量硅胶,使样品均匀吸附在硅胶上,通过硅胶柱层析纯化,硅胶柱中硅胶添加量为待测物的3.5倍,先用纯水洗脱2-3次,再使用60%、70%、80%、90%的乙醇进行梯度洗脱,流动相流速为1mL/min,最后使用蒸馏回收乙醇,干燥,制得滨蒿提取物。
对比例2
本实施例与实施例2的区别在于本对比例仅采用单一的D101大孔树脂纯化,其具体操作如下:
(1)将1kg滨蒿粉碎,用80%乙醇加热回流提取3次/1.5h,乙醇使用量为滨蒿加入量的20倍(w/w),在提取物中加入2%活性炭,静置2h,过滤收集合并滤液并回收乙醇,得到粗提物。
(2)将粗提物经过D101大孔树脂纯化,得到纯化液1并回收乙醇。
(3)在纯化液1中加入一定量的硅胶,使样品均匀吸附在硅胶上,通过硅胶柱层析纯化,硅胶柱中硅胶添加量为待测物的3.5倍,先用纯水进行洗脱2-3次,再使用60%、70%、80%、90%的乙醇进行梯度洗脱,流动相流速为1mL/min,最后使用蒸馏回收乙醇,干燥,得到滨蒿提取物。
对比例3
本实施例与实施例2的区别在于本对比例仅采用单一的FL-3型大孔树脂纯化,其余均相同,制备得到滨蒿提取物。
分别对实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、对比例1、对比例2以及对比例3中所得滨蒿提取物的量进行统计,并对滨蒿提取物中对羟基苯乙酮的含量进行检测,计算对羟基苯乙酮的提取率。
其中,对羟基苯乙酮的含量具体检测按照如下操作进行:
(1)试验材料与试剂
对羟基苯乙酮标准品(桑普 PHA,纯度≥99.0%);甲醇(分析纯);磷酸二氢钾(分析纯)。
标准品制备:精密称取对羟基苯乙酮对照品10.00mg,用甲醇溶解后定容至100mL,得到100μg/mL的对照品储备液。
样品制备:精密称取待测样品150mg,加入10mL甲醇溶解定容,经0.22um滤膜过滤,即得供试溶液,备用。
(2)色谱条件
流动相0.0025mol/L磷酸二氢钾/水-甲醇溶液梯度洗脱。
流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:280nm;分析时间:18min;进样量:10μL。
(3)样品滨蒿提取物测定
将对照品储备液用甲醇稀释成1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.00μg/mL、50.00μg/mL、100.00μg/mL对照品工作液,按照色谱条件进行分析,绘制标准曲线(R2=0.9997)。
精密吸取供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,按照色谱条件进行分析,根据保留时间定性,峰面积外标法定量计算样品中对羟基苯乙酮含量。
不同实施例和对比例的统计和检测结果如下表1所示。其中,需要说明的是,表1中所述的提取率,具体指的是从提取原料中提取目标成份对羟基苯乙酮的提取率;而对于对羟基苯乙酮含量具体指的是得到的滨蒿提取物中对羟基苯乙酮含量的质量占比(w/w)。
表1 不同实施例和对比例的统计和检测结果
从表1的数据中可以看出,实施例2中的提取率和对羟基苯乙酮含量均为最高,究其原因在于实施例2中在提取时采用了活性炭吸附以及D101型和FL-3型串联构成的大孔树脂进行处理。上述结果说明在提取时使用活性炭吸附和D101型和FL-3型串联构成的大孔树脂是必须的,而其他组要么是没有采用活性炭进行吸附处理,要么是采用单一的树脂,使得要么是影响到整体的提取率,要么是影响到提取物中对羟基苯乙酮的含量。
进一步地,从图3、图4中可以看出,实施例1所述的滨蒿提取物含有较多的杂质,而通过实施例2所述的方法,杂质显著减少,所述滨蒿提取物中活性成分对羟基苯乙酮含量得到显著提升,这从表1的数据中也可以看出。
将实施例2所获得的滨蒿提取物与丁二醇进行复配,配比方案如表2所示:
表2 丁二醇与滨蒿提取物配比方案
将上述1、2、3、4组中滨蒿提取物与丁二醇复配后,进行防腐性能试验,试验细菌为大肠杆菌(Ec ATCC 8739)、金黄色葡萄球菌(Sa ATCC 6538)、铜绿假单胞菌(Pa ATCC9027),真菌为黑曲霉菌(Ab ATCC 16404)、白色念株菌(Ca ATCC 10231)。具体防腐性能试验操作如下:
细菌悬浊液的制备:
将培养18~24h的新鲜斜面培养物用生理盐水洗下,并以稀释液稀释至108CFU/ml的菌悬液。将3种细菌悬浊液等体积混合,4℃备用。
真菌悬浊液的制备:
分别将培养44~52h的白色念株菌,培养6~10天的黑曲霉用生理盐水洗下,并以稀释液稀释至108CFU/ml的菌悬液。将以上两种真菌悬浊液等体积混合,4℃备用。
样品接种:
称取测试样品两份各60克放入无菌样品瓶中,分别加入0.6ml(1%样品量)混合细菌悬浊液和0.6ml(1%样品量)混合真菌悬浊液,用玻璃棒搅拌混合或使用旋涡振荡器混合均匀,将样品置于22.5±2.5℃环境温度下保存,分别于0、7、14、21、28天检测样品中菌落数。实验结果如下表3所示:
表3 初始接种量与测试结果
从上表中可以看出,丁二醇与滨蒿提取物按照一定的比例复配后,对常见细菌和真菌具有不同程度的抑菌作用,顺利通过防腐性能试验。
进一步地,由于制备滨蒿提取物的原料来源于天然植物,安全性高,无刺激,因为完全可以应用在化妆品领域中作为防腐剂体系起到防腐的作用。
以上已经描述了本申请的各实施例,上述说明是示例性的,并非穷尽性的,并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下,对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择,旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术的改进,或者使本技术领域的其它普通技术人员能理解本文披露的各实施例。
Claims (8)
1.一种滨蒿提取物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)取滨蒿或茵陈蒿的地上部分和/或全草作为提取原料,粉碎后,根据预设的料液比加入乙醇进行回流提取,得到提取液;
(2)提取液中加入活性炭,过滤,得到过滤后液;
(3)过滤后液经由D101型和FL-3型串联构成的大孔树脂及硅胶柱层析纯化,然后经洗脱,蒸馏回收乙醇,干燥,即得滨蒿提取物。
2.根据权利要求1所述的一种滨蒿提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中预设的料液比是指提取原料与乙醇的质量比为1:20。
3.根据权利要求1所述的一种滨蒿提取物的制备方法,其特征在于:所述活性炭的加入量为提取原料加入质量的0.5%~2%。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的一种滨蒿提取物的制备方法制备得到的滨蒿提取物。
5.根据权利要求4中所述的滨蒿提取物,其特征在于:含有98%以上的对羟基苯乙酮。
6.根据权利要求5中所述的滨蒿提取物在化妆品领域中的应用。
7.根据权利要求6中所述的应用,其特征在于:将滨蒿提取物与丁二醇进行复配作为防腐剂应用于化妆品组合物中防腐。
8.根据权利要求7中所述的应用,其特征在于:所述化妆品组合物中丁二醇与滨蒿提取物的质量比为25-75:1。
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