CN101669979A - 滨蒿提取物及其生产方法和应用 - Google Patents
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Abstract
一种滨蒿提取物及其生产方法和应用。该滨蒿提取物含有25％至75％的黄酮类成分。该滨蒿提取物的生产方法为第一步，滨蒿的地上部分或全草以水或乙醇粗提；第二步，提取液过滤浓缩后加无水乙醇放置沉淀，滤除沉淀得到乙醇溶液；第三步，将所得乙醇溶液浓缩后调节pH值，上大孔树脂和/或聚酰胺树脂层析柱吸附；第四步，以10％至90％的乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液并合并；第五步，将所得洗脱液浓缩，回收乙醇，再减压干燥，即得到所需的滨蒿提取物。本发明滨蒿提取物经实验研究证明有显著的抗流感病毒、乙肝病毒和爱滋病毒作用，且口服给药安全，可用于制备治疗流感、乙型肝炎和爱滋病的广谱抗病毒药物。
Description
技术领域
本发明涉及从植物中提取的提取物及其生产方法和应用的技术领域，是一种滨蒿提取物及其生产方法和应用的技术领域。
背景技术
流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，在流行病学上表现为发病率高、起病迅速、传染力强并伴有一定的死亡率(婴幼儿及年老体弱、免疫或心肺功能不全者，感染流感病毒后常继发细菌性感染，特别易引起肺炎，常危及生命)。全球每年约有5亿人感染流感病毒，每10-30年就会爆发一次流感大流行，并由此带来巨大的社会负担和经济损失，可以说流感是人类社会迄今为止最大的瘟疫。
流感病毒分甲、乙、丙三个血清型，其中甲型流感病毒是引起流感的主要病原，乙型流感病毒感染呈散在爆发或小规模流行，丙型流感病毒致病力低、危害相对较小。流感病毒可使机体各个部分发生病理变化，病毒不仅在呼吸道上皮细胞内繁殖而引起流感，还可在呼吸道以外的组织内繁殖引起多系统的损害。流感病毒侵入呼吸道之后，大量繁殖并且因上呼吸道粘膜穿透性增高而进入血液，此时若机体免疫力较弱，当有大量病毒存在时，就不易被破坏和中和，可随血液循环传播至全身，在上皮及内皮组织内大量繁殖而引起各个组织发生病变，并因病毒酶性产物能损伤红血球膜和血管内皮细胞，以致引起极其严重的病变。
目前，接种流感疫苗是预防流感的主要方法，但由于流感病毒的基因突变率很高，原来有效的疫苗对新的变异株往往失效或无效，人类无法通过注射疫苗获得持久的免疫力。而新的变异株可能传播力更强，甚至引起大流行。针对流感病毒变异株，在新的疫苗产生之前，抗病毒药物对高危人群的保护尤为重要。
乙型肝炎是由乙肝病毒感染引起的传染性疾病，属世界性的流行病，我国是高地方流行区，在全球3.5亿乙肝病毒感染者中，中国人占三分之一。自六十年代起逐渐累积的慢性肝病已导致我国每年有数百万人死于肝硬化和原发性肝癌。乙型肝炎的流行不仅严重危害人类健康，而且引发了许多社会问题，乙肝病毒感染者因疾病恐慌、就业歧视、经济负担等多重压力，生存状态令人担忧。乙型肝炎的流行是当今最为突出的公共卫生问题之一，虽然近年来疫苗计划免疫已开始控制感染的扩散，但由于社会和经济方面的原因，全面普及计划免疫在我国还无法实现，因此，抗乙肝病毒药物有着巨大的市场空间。令人担忧的是，抗乙肝病毒药物的研发至今未取得理想的进展，乙型肝炎的防治已成为世界性的医学难题。到目前为止，在临床公认有效的抗乙肝药只有拉米夫定和干扰素。干扰素曾作为唯一的抗乙肝病毒药物历经20年，但其临床适应症窄，不能直接灭活病毒，停药后易复发；在适应症内进行规范治疗的情况下，也只有30％至50％的有效率，其中仍有近20％在停药后复发，而且几乎所有的用药者都可能发生不良反应；此外，价格昂贵、注射给药途径是其在临床难以推广的重要原因。1998年，拉米夫定在临床应用中被发现对乙肝病毒有显著的抑制作用，于是，在长期毒性和致癌性的动物实验数据尚不充分的情况下，就被美国食品药品监督管理局批准用于治疗乙型肝炎。拉米夫定口服吸收好，可特异性抑制乙肝病毒的复制，改善症状和体征，但其治疗周期长，费用高，且对病毒的抑制也是可逆的，停药后易反弹，甚至可导致病情恶化，长期应用后耐药率接近70％，近几年临床用量已逐渐下降。
目前已上市的中药抗乙肝制剂，大都是通过保肝降酶、免疫调节而发挥间接的治疗作用，虽可缓解症状、改善肝功能，但由于直接抗病毒作用弱，临床疗效均不理想。
爱滋病是由爱滋病毒感染引起的一种全身性免疫功能丧失综合症，人体感染爱滋病毒后免疫功能被逐渐破坏，最终继发危及生命的各类并发症。由于爱滋病疫苗的研制一直没有取得突破性的进展，这种疾病的扩散无法得到有效的控制，其在全球范围内的传播速度惊人，给人类健康造成巨大威胁。
鉴于艾滋病的严重危害，许多国家对抗艾滋病药物的研制非常重视，自九十年代起，以齐多夫定为代表的核苷类似物因对艾滋病毒有明显的抑制作用而陆续上市，在临床用于艾滋病的治疗。近年来国外开发上市的化学药也为数不少，并通过多种作用机制对控制艾滋病的发展起到一定了的作用，但临床疗效和安全性都不容乐观。在艾滋病疫苗的研制方面，虽然投入巨大，却历经挫折，目前成功的希望依然渺茫。
由于所有病毒均依赖宿主细胞进行复制和增殖，它们一方面干扰宿主细胞的代谢，一方面又与宿主共存亡，所以既能有效地杀灭病毒，同时又能使人体细胞免受伤害是现代科学还有待解决的难题。目前在国际上已得到广泛认可的抗病毒药中，利巴韦林对流感病毒有明显的抑制活性，干扰素和拉米夫定对乙肝病毒有明显的抑制作用，但在临床使用中均存在一些无法克服的问题，如适应症有限，疗效不理想、副作用大或易产生耐药性等；治疗艾滋病的主打药物齐多夫定有明显的骨髓抑制作用，长期服用后艾滋病毒可对其逐渐产生耐药性。可以说到目前为止，还没有一种理想的抗病毒药物上市。
病毒性疾病的防治已成为国际医学界的重大难题之一，特别是流感、乙型肝炎和艾滋病，更是人类长期以来一直无法有效控制的世界性瘟疫。因此，开发高效、广谱、低毒的抗病毒药物是迫切需要取得突破的科研课题。
与西药相比，中药在治疗病毒性疾病方面有其独到之处，有些中药成分不仅可直接抑制病毒的复制，还能通过调节机体免疫功能间接控制病情，并促进机体清除病毒。因此中药抗病毒研究在国际上越来越受重视。
滨蒿(Artemisia scoparia Waldst.et kit)为菊科蒿属植物，维吾尔名“西瓦克”，是维吾尔医传统用药，性质二级干热。具有清热解毒、开窍化痰、消败津、除积物等功效。据报道，滨蒿中含有多种化学成分，主要有黄酮、色原酮、香豆素、挥发油、有机酸、萜类等。
目前，从滨蒿及其同属植物中制备提取物，以开发抗病毒药物的研究在国内外未见报道，采用大孔树脂技术和/或聚酰胺树脂从滨蒿及其同属植物中分离纯化黄酮类成分的研究亦未见正式报道。
发明内容
本发明提供了一种应用于制备广谱抗病毒药物的滨蒿提取物及其生产方法和应用，其克服了现有技术之不足，其滨蒿提取物含有25％至75％的黄酮类成分；该滨蒿提取物的生产方法首次应用大孔树脂和/或聚酰胺树脂吸附分离技术从滨蒿粗提物中分离纯化滨蒿中的黄酮类成分；该滨蒿提取物特别适用于制备治疗流感和/或乙型肝炎和/或爱滋病等疾病的广谱抗病毒药物。
本发明的技术方案之一是通过以下方式得到的：一种应用于制备广谱抗病毒药物的滨蒿提取物，该滨蒿提取物含有25％至75％的黄酮类成份。
下面是对上述技术方案之一的进一步优化和/或选择：
该滨蒿提取物按下述步骤得到：
第一步，滨蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提，其中，水粗提为：将滨蒿地上部分或全草加8倍至10倍量水，在80℃至100℃下提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液；乙醇粗提为：将滨蒿地上部分或全草加8倍至10倍量30％至90％的乙醇，在60℃至80℃提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液；
第二步，将上述滤液浓缩至原体积的三分之一，加相当于浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇，放置沉淀12小时至24小时，滤除沉淀得到乙醇溶液；
第三步，将上述乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上大孔树脂和/或聚酰胺树脂层析柱吸附；其中，所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种；大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1进行混合；
第四步，以相当于3至8个层析柱体积的去离子水冲洗上述层析柱，再以10％至90％的乙醇为洗脱剂进行梯度洗脱，每浓度洗脱剂的用量相当于3至8个层析柱体积，流速为2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液并合并；
第五步，将上述合并后的乙醇洗脱液在60℃至90℃下浓缩，回收乙醇，再在50℃至80℃下减压干燥，即得到所需的滨蒿提取物。
本发明的技术方案之二是通过以下方式得到的：一种上述滨蒿提取物的生产方法按下述步骤进行：
第一步，滨蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提；第二步，加乙醇沉淀粗提物中的杂质；第三步，以大孔树脂和/或聚酰胺树脂吸附粗提物中的总黄酮，其中，所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种；大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1进行混合；第四步，用乙醇从大孔树脂和/或聚酰胺树脂上洗脱总黄酮得到洗脱液；第五步，将洗脱液浓缩并回收乙醇，再减压干燥，即得滨蒿提取物。
下面是对上述技术方案之二的进一步优化和/或选择：
在上述第一步中，将滨蒿的地上部分或全草加8倍量至10倍量水在80℃至100℃下提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液。或者，
在上述第一步中，将滨蒿的地上部分或全草加8倍量至10倍量30％至90％的乙醇在60℃至80℃提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液。
在上述第二步中，将滤液浓缩后加相当于浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇，放置沉淀12小时至24小时，滤除沉淀得到乙醇溶液。
在上述第三步中，将乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上大孔树脂层析柱吸附，其中，所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种。
或者，在上述第三步中，将乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱吸附。
或者，在上述第三步中，将乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱吸附；其中，所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种，大孔树脂与聚酰胺树脂按重量比1比1混合使用。
在上述第四步中，以相当于3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％至90％的乙醇为洗脱剂进行梯度洗脱，每浓度洗脱剂的用量相当于3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液并合并。
在上述第五步中，将合并的乙醇洗脱液在60℃至90℃下浓缩，并回收乙醇，再在50℃至80℃下减压干燥，即得到所需的滨蒿提取物。
本发明的技术方案之三是通过以下方式得到的：大孔树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用。
下面是对上述技术方案之三的进一步优化和/或选择：上述所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种。
本发明的技术方案之四是通过以下方式得到的：聚酰胺树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用。
本发明的技术方案之五是通过以下方式得到的：上述滨蒿提取物应用于制备广谱抗病毒药物。
下面是对上述技术方案之四的进一步优化和/或选择：
上述滨蒿提取物用于制备针对流感病毒和/或乙肝病毒和/或艾滋病毒的广谱抗病毒药物。
本发明滨蒿提取物具有显著的抗流感病毒、乙肝病毒及爱滋病毒作用，且口服给药安全，可用于制备广谱抗病毒药物；本发明首次提出滨蒿总黄酮提取物具有广谱抗病毒作用；并在该滨蒿提取物的生产方法中首次应用大孔树脂和/或聚酰胺树脂吸附分离技术，从滨蒿粗提物中富集滨蒿中的黄酮类成分，并得到总黄酮含量达25％至75％的提取物。该生产方法简单易行，工艺可靠，所得提取物中总黄酮含量稳定；生产中所使用的材料可通过乙醇回收和树脂再生循环利用，生产成本低，适合产业化。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据上述本发明的技术方案和实际情况来确定具体的实施方式。
下面结合实施例对本发明作进一步论述。
通过下述实施例对本发明滨蒿提取物进行详细说明：
实施例1：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例2：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例3：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，所用大孔吸附树脂选用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB-8等型号的大孔树脂中的一种。
实施例4：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例5：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例6：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例7：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例8：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例9：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例10：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例11：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例12：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例13：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例14：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例15：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，所用大孔吸附树脂选用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB 8等型号的大孔树脂中的一种。
实施例16：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例17：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例18：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例19：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例20：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例21：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例22：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例23：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例24：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例25：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例26：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例27：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，所用大孔吸附树脂选用D-201、D-301、HPD400、HPD600、AB-8等型号的大孔树脂中的一种。
实施例28：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例29：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例30：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例31：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例32：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例33：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例34：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例35：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例36：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例37：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例38：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例39：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例40：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例41：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例42：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例43：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例44：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例45：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例46：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例47：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例48：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例49：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例50：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例51：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，AB-8型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例52：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例53：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例54：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例55：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例56：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例57：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例58：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例59：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例60：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，HPD400型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例61：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例62：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例63：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例64：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例65：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例66：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例67：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例68：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例69：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例70：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例71：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例72：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，D-101型大孔树脂与聚酰胺树脂混合的比例按重量比为1比1。
实施例73：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例74：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水于80℃至100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为每小时2至5个层析柱体积，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例75：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量水100℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇放置沉淀12小时，滤除沉淀，滤液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速为2个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例76：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇于60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例77：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例78：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量30％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例79：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例80：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例81：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量50％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为5至10个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例82：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以50％、70％、90％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例83：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以30％、50％、70％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例84：滨蒿地上部分加8倍量至10倍量70％的乙醇60℃至80℃煮提两次，每次3小时，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的三分之一，加1倍量至2倍量无水乙醇放置沉淀24小时，滤除沉淀，浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上聚酰胺树脂层析柱，待上样液全部吸附后，以3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％、30％、50％的乙醇进行梯度洗脱，每浓度乙醇用量为3至8个层析柱体积，流速2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液，合并后于60℃至90℃浓缩，浓缩液再于50℃至80℃减压干燥，即得滨蒿提取物。
实施例85：对上述实施例1至60所得滨蒿提取物按下述方法进行总黄酮含量的测定：
对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的芦丁对照品50毫克，置25毫升容量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取10毫升，置100毫升容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得每毫升含0.2毫克无水芦丁的对照品溶液。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6毫升，分别置25毫升的容量瓶中，各加水至6毫升，加5％亚硝酸钠溶液1毫升，混匀，放置6分钟，再加入10％硝酸铝溶液1毫升，摇匀，放置6分钟，再加入氢氧化钠试液10毫升，加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，于500纳米处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
样品测定 分别精密称取上述实施例1至24所得滨蒿提取物样品1.0g，置100毫升的容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取10毫升，置100毫升的容量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取3毫升，置25毫升容量瓶中，加水至6毫升，加5％亚硝酸钠溶液1毫升，混匀，放置6分钟，再加入10％硝酸铝溶液1毫升，摇匀，放置6分钟，再加入氢氧化钠试液10毫升，加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，于500纳米处测定吸收度，从上述标准曲线上读出样品溶液中含无水芦丁的量，计算滨蒿提取物样品中总黄酮(以无水芦丁计)的含量，应在25％至75％的范围内。
在本发明中：首次提出大孔树脂和/或聚酰胺树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用。所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、HPD400、AB-8型大孔树脂中的一种；大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1混合。
通过以下实验例对本发明滨蒿提取物的广谱抗病毒作用进行说明：
实验例1本发明滨蒿提取物对流感病毒致细胞病变的抑制作用。
1.材料和方法：
1.1病毒株：流感甲型病毒(H3N2亚型粤防72243株)，流感乙型病毒(济防97-13株)，购自中国预防医学科学院病毒学研究所。
1.2实验样品：滨蒿提取物样品H1、H2、H3，为淡棕色至深棕色的浸膏粉，样品中总黄酮含量H1为25％、H2为50％、H3为75％，实验前均以高纯水配制成10mg/ml的原药液，过滤除菌后备用；阳性对照药利巴韦林，规格100mg/片，临床服用2片/次，3次/日，实验前用高纯水配制成10mg/ml的原药液，过滤除菌后备用。
2.方法与结果
样品对MDCK细胞毒性的测定：
样品H2、H2、H3和阳性对照原液均以培养液作2倍稀释，取1∶5至1∶320共7个稀释度，将各稀释度的药液分别加到已接种Hela细胞并长成单层的培养板中，100微升/孔，每浓度4个平行孔，同时设细胞对照。将培养板置37℃、5％CO2条件培养四天，每日观察细胞生长情况，以细胞不出现明显退变的最小稀释倍数为最大无毒浓度(TC0)。并按Reed-Muench法计算50％有毒浓度(TC50)，结果见表1。
样品对病毒致细胞病变的影响：
取已长成单层的MDCK细胞，接种流感甲型病毒10-5(50％细胞培养感染量CCID50的15倍)、流感乙型病毒10-2(CCID50的30倍)，于37℃吸附2小时后倾去病毒液，以不含血清的维持液洗细胞表面2次。实验设细胞对照组、病毒对照组和各样品不同稀释度的给药组，每组4个平行孔，细胞对照组、病毒对照组加等体积的维持液，给药组样品取TC0以下的5个倍比稀释度分别给药。37℃、5％CO2条件培养，每日观察细胞病变情况，细胞病变程度按六级标准判断(-：无病变；±：细胞病约占整个单层的10％以下；1：细胞病变约占整个单层的10％至25％；2：细胞病变约占整个单层的25％至50％；3：细胞病变约占整个单层的50％至75％；4：细胞病变约占整个单层的75％以上)。
当病毒对照组细胞病变为4时记录实验结果。按Reed-Muench法计算半数有效浓度EC50，并计算样品的选择指数TI(TC50/EC50)，结果见表2。
根据选择指数TI的计算结果，认为滨蒿提取物H1、H2、H3在体外细胞培养中对甲型流感病毒均有较强的抗病毒作用，对乙型流感病毒也有一定的抑制作用。本实验结果说明滨蒿提取物样品H1、H2、H3对流感病毒具有明显的抗病毒作用。
实验例2：本发明滨蒿提取物在小鼠口服的急性毒性测定
1.材料
1.1样品：滨蒿提取物H1、H2、H3，临用前均以蒸馏水配制成所需浓度的混悬液备用。
1.2动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22g，由新疆医科大学实验动物中心提供，合格证号：新医动字SYXK(新)2003-0001。
2.方法与结果
预试验 取小鼠30只，雌雄各半，禁食(不禁水)12小时，随机分为H1、H2、H3三个给药组，每组10只。样品H1、H2、H3分别配成最大给药浓度50％的混悬液，以40毫升/千克体重容量灌胃给药1次。观察24小时，未见死亡，且精神与活动状态无异常。
最大给药量的测定 取小鼠140只，雌雄各半，体重20.4±1.6g，随机分为对照组、H1小剂量组和大剂量组、H2小剂量组和大剂量组、H3小剂量组和大剂量组，每组20只，禁食(不禁水)12小时。样品均按预试浓度和体积给药，小剂量组给药1次，大剂量组给药2次(间隔6小时)，对照组给予等量蒸馏水。观察记录给药后14天内动物全身状况及局部反应，于第15天将各组动物称重后处死，作大体解剖检查，并对肉眼可见异常的器官进行组织病理学检查。
结果，观察期内对照组和给药组动物未出现死亡，外观体征、行为活动及饮食等均未见异常；实验结束时对照组体重为31.9±3.3g；滨蒿提取物H1小剂量组动物体重为31.7±3.2g，大剂量组体重为32.8±3.4g；H2小剂量组动物体重为31.6±2.8g，大剂量组体重为33.4±2.5g；H3小剂量组动物体重为32.3±2.7g，大剂量组体重为30.6±3.2g；且给药组体重与对照组比较均无显著性差异，大体解剖检查各给药组与对照组组织脏器比较均未发现有明显异常。
滨蒿提取物H1、H2、H3以最大给药量20g/kg给小鼠一日内灌胃给药，在规定的观察期内均未出现急性毒性反应，提示无明显急性毒性，用药安全。
实验例3：本发明滨蒿提取物对流感病毒致小鼠死亡的保护作用
测定流感病毒鼠肺适应株FM1的毒力，取感染后15天内小鼠死亡率在90％以上的浓度作为实验浓度。
取小鼠(体重20±1g)220只，随机分为11组，即病毒感染对照组、阳性对照组和H1三个剂量组、H2三个剂量组、H3三个剂量组，每组20只。各组小鼠以乙醚吸入法麻醉，流感病毒鼠肺适应株FM1以上述实验浓度感染小鼠。于感染前一天开始给药，每天一次，连续5天。记录感染后小鼠的死亡情况，计算死亡率、死亡保护率及平均存活天数、生命延长率，结果见表3。
死亡率＝死亡动物数/动物总数×100％
死亡保护率＝(感染对照组死亡率-实验组死亡率)/感染对照组死亡率
在感染病毒后15天内，样品H1、H2、H3给药组小鼠死亡率均低于病毒感染对照组，而平均存活天数则高于感染对照组，表明滨蒿提取物对小鼠流感病毒性肺炎模型均有明显的保护作用。
实验例1和实验例3的结果说明本发明滨蒿提取物具有明显的抗流感病毒作用。实验例2表明该提取物口服给药无明显急性毒性，用药安全。
实验例4：本发明滨蒿提取物对人乙肝病毒的抑制作用
1.实验材料
1.1样品：滨蒿提取物H1、H2、H3，实验前均以高纯水配制成10mg/ml原药液，过滤除菌后于4℃保存，临用时以培养液稀释成所需浓度给药；阳性对照药拉米夫定用高纯水配制成1mg/ml的原液，实验前以细胞培养液配成所需浓度给药。
1.2试剂：MEM培养基，GiBco，Invitrogen Corporation；胰酶，北京三博远志生物技术有限公司；小牛血清、HEPES，中国医科院生物医学工程研究所；乙肝病毒核酸定量检测试剂、cPCR-荧光探针，中山大学达安基因股份有限公司。
1.3细胞株：2.2.15细胞，乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆转染人肝癌细胞(Hep G2)的2.2.15细胞系，购自北京大学人民医院肝病中心，以含谷氨酰胺的MEM培养液于37℃，5％CO2条件下培养，大约一周传代一次。
2.方法及结果
细胞毒性的测定2.2.15细胞接种96孔培养板，待细胞长成单层时，吸弃上清，设细胞对照组和H1、H2、H3各6个浓度的给药组，每组4孔。各样品原液分别以培养液作2倍稀释，取1/5至1/320共7个稀释度，分别加样，细胞对照组加培养液，200μl/孔，于37℃、5％CO2条件培养，第4天各组换相应浓度的药液，第8天于显微镜下观察，以细胞病变CPE为指标，程度分为五级，完全破坏为4；75％为3；50％为2；25％为1；无病变为0。计算每浓度药液平均细胞病变程度和抑制百分率。观察最大无毒浓度TC0，并按Reed&Muench法计算半数有毒浓度TC50，结果见表4。
样品对乙肝病毒DNA复制的抑制作用 2.2.15细胞接种96孔细胞培养板(约10万个/毫升)，每孔200微升，37℃、5％CO2条件培养，待细胞长成单层后，设细胞对照组、拉米夫定(1微克/毫升)组、H1、H2、H3各四个浓度(均取TC0及其以下的3个2倍稀释度)，每浓度4孔，加样，200微升/孔，于37℃、5％CO2条件培养，第4天换一次药液，继续培养，于第8天收集细胞培养上清液，以荧光定量PCR法测定乙肝病毒DNA表达量(拷贝/毫升)，计算样品的抑制率。按Reed&Muench法计算半数有效浓度IC50，并计算选择指数SI，结果见表5。
抑制率(％)＝(对照组表达量均值-给药组表达量均值)/对照组表达量均值×100％
选择指数SI＝TC50/IC50
样品抑制乙肝病毒复制的选择指数(SI值大于2即认为有效)表明该提取物具有明显的抗乙肝病毒作用。
试验例5：本发明滨蒿提取物在人类嗜T淋巴细胞病毒I型感染的T细胞系MT-4细胞中对爱滋病毒HIV 1P24抗原的抑制作用
MT-4细胞悬液计数，用100CCID50的HIV-1 IIIB感染细胞，在37℃，5％CO2培养箱中吸附1.5小时。用无血清的1640培养液洗去未吸附病毒，用培养液将感染病毒的细胞配成2×105个细胞/毫升，接种于96孔细胞培养板内，每孔100微升；再分别加入3倍稀释的样品溶液和5倍稀释的阳性对照药齐多夫定(AZT)溶液100微升。每个稀释度重复3个孔，同时设细胞对照组和病毒对照组。培养板置于37℃、5％CO2饱和湿度培养箱内培养。4天后吸出上清，-20℃冻存，待测HIV-1P24抗原滴度，细胞加MTT染色测定样品对细胞的毒性。
MTT染色测定细胞毒性：上述培养板每孔加5毫克/毫升的MTT溶液10微升染色，37℃、5％CO2饱和湿度培养箱内培养4小时后，每孔加入100微升50％DMF-17％Triton X-100脱色液，置37℃下过夜，在酶标仪上测定波长为570纳米处的吸收度值，计算样品的半数有毒浓度(CC50)。
测定样品在细胞培养内抑制HIV-1P24抗原的EC50：将上述冻存的感染病毒的MT-4上清液融化后进行稀释，按预实验结果调整稀释比例。按照HIV-1P24抗原检测试剂盒说明测定HIV-1P24抗原滴度，加样组与病毒对照组比较，计算样品的EC50及选择指数TI(CC50/EC50)。结果见下表6。
本实验中阳性对照药齐多夫定为目前国际上公认有效的抗爱滋病毒药物，其对HIV-1P24抗原的抑制结果CC50、EC50及SI值符合文献报道，说明实验数据可信；滨蒿提取物H1、H2、H3对HIV-1 P24抗原抑制作用的选择指数SI表明本发明滨蒿提取物具有明显的抗爱滋病毒作用。
从以上实施例可以得出结论，本发明滨蒿提取物具有广谱抗病毒作用，可用于制备治疗流感、乙型肝炎和艾滋病的广谱抗病毒药物。
表1样品对MDCK培养细胞的TC0和TC50
| 样品 | 原液毫克/毫升 | TC0微克/毫升 | TC50微克/毫升 |
| H1 | 10 | 500 | 1256.4 |
| H2 | 10 | 250 | 676.3 |
| H3 | 10 | 125 | 357.9 |
| 利巴韦林 | 10 | 62.5 | 276.7 |
表2.滨蒿提取物对流感病毒的抑制作用
| 样品 | 病毒种 | EC50微克/毫升 | TI |
| H1 | 甲型 | 152.8 | 8.2 |
| 乙型 | 382.1 | 3.3 | |
| H2 | 甲型 | 54.5 | 12.4 |
| 乙型 | 117.8 | 5.7 | |
| H3 | 甲型 | 20.2 | 17.7 |
| 乙型 | 59.6 | 6.0 | |
| 利巴韦林 | 甲型 | 5.6 | 49.4 |
| 乙型 | 23.0 | 12.0 |
表3对流感病毒致小鼠死亡的保护作用
| 剂量g/kg/d | 动物数(只) | 死亡数(只) | 死亡保护率(％) | 平均存活天数生命延长率(天)(％) | |
| 病毒感染对照 | - | 20 | 19 | 9.6±2.0 | |
| 利巴韦林 | 77mg | 20 | 7 | 63.2 | 15.2±4.6**58.3 |
| H1 | 0.6 | 20 | 16 | 15.8 | 10.8±2.812.5 |
| 1.2 | 20 | 15 | 21.1 | 12.2±3.2*27.1 | |
| 2.4 | 20 | 13 | 31.6 | 13.7±3.4**42.7 | |
| H2 | 0.6 | 20 | 15 | 21.1 | 11.7±2.621.8 |
| 1.2 | 20 | 12 | 36.8 | 13.4±2.9*39.6 | |
| 2.4 | 20 | 11 | 42.1 | 14.2±3.5**47.9 | |
| H3 | 0.6 | 20 | 14 | 26.3 | 12.8±3.1*33.3 |
| 1.2 | 20 | 11 | 42.1 | 13.5±2.4*40.6 | |
| 2.4 | 20 | 9 | 52.6 | 14.8±3.7**54.2 |
表4样品在2.2.15细胞培养内的毒性
| 实验样品 | 原液浓度(毫克/毫升) | TC50(微克/毫升) | TC0(微克/毫升) |
| H1 | 10 | 1274.5 | 500 |
| H2 | 10 | 658.2 | 250 |
| H3 | 10 | 354.7 | 125 |
表5样品在2.2.15细胞培养中第8天对HBV-DNA的抑制作用
表6
| 样品 | CC50(微克/毫升) | EC50(微克/毫升) | SI |
| H1 | 1598.2 | 124.8 | 12.8 |
| H2 | 1047.5 | 39.8 | 26.3 |
| H3 | 851.6 | 26.9 | 31.7 |
| 齐多夫定 | 14.0 | 0.0085 | 1647 |
Claims (10)
1.一种用于制备广谱抗病毒药物的滨蒿提取物，其特征在于该滨蒿提取物含有25％至75％的黄酮类成分。
2.根据权利要求1所述的滨蒿提取物，其特征在于该提取物按下述步骤得到：
第一步，滨蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提，其中，水粗提为：将滨蒿地上部分或全草加8倍至10倍量水，在80℃至100℃下提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液；乙醇粗提为：将滨蒿地上部分或全草加8倍至10倍量30％至90％的乙醇，在60℃至80℃提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液；
第二步，将上述滤液浓缩至原体积的三分之一，加相当于浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇，放置沉淀12小时至24小时，滤除沉淀得到乙醇溶液；
第三步，将上述乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上大孔树脂和\或聚酰胺树脂层析柱吸附；其中，大孔树脂采用弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用HPD400、D-101、AB-8型弱极性大孔树脂中的一种。大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1进行混合；
第四步，以相当于3至8个层析柱体积的去离子水冲洗上述层析柱，再以10％至90％的乙醇为洗脱剂进行梯度洗脱，每浓度洗脱剂的用量相当于3至8个层析柱体积，流速为2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液并合并；
第五步，将上述合并后的乙醇洗脱液在60℃至90℃下浓缩，回收乙醇，再在50℃至80℃下减压干燥，即得所需的滨蒿提取物。
3.一种滨蒿提取物的生产方法，其特征在于该方法按下述步骤进行：
第一步，滨蒿地上部分或全草以水和/或乙醇粗提；第二步，加乙醇沉淀粗提物中的杂质；第三步，乙醇溶液浓缩后调节PH值，以大孔树脂和\或聚酰胺树脂吸附粗提物中的总黄酮；第四步，用乙醇从大孔树脂和\或聚酰胺树脂上洗脱总黄酮得到洗脱液；第五步，将洗脱液浓缩并回收乙醇，减压干燥，即得滨蒿提取物。其中，大孔树脂采用弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用HPD400、D-101、AB-8型弱极性大孔树脂中的一种；大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1进行混合。
4.根据权利要求3所述滨蒿提取物的生产方法，其特征在于在第一步中将滨蒿地上部分或全草加8倍量至10倍量的水，在60℃至80℃提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液。
5.根据权利要求3所述滨蒿提取物的生产方法，其特征在于在第一步中将滨蒿地上部分或全草加8倍量至10倍量30％至90％的乙醇，在60℃至80℃提取两次，每次2小时至3小时，过滤，合并滤液。
6.根据权利要求3或4或5所述的滨蒿提取物的生产方法，其特征在于在第二步中将滤液浓缩后加相当于浓缩液体积1倍量至2倍量的无水乙醇，放置沉淀12小时至24小时，滤除沉淀得到乙醇溶液；在第三步中将乙醇溶液浓缩后以稀盐酸调节PH值为3至6，上大孔树脂和\或聚酰胺树脂层析柱吸附；其中，所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用HPD400、D-101、AB-8型大孔树脂中的一种；大孔树脂与聚酰胺树脂混合使用时，按重量比1比1进行混合；在第四步中以相当于3至8个层析柱体积的去离子水冲洗层析柱，再以10％至90％的乙醇为洗脱剂进行梯度洗脱，每浓度洗脱剂的用量相当于3至8个层析柱体积，流速为2至5个层析柱体积/小时，收集乙醇洗脱液并合并；在第五步中将乙醇洗脱液在60℃至90℃下浓缩，回收乙醇，再在50℃至80℃下真空干燥，即得到所需的滨蒿提取物。
7.大孔树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用。
8.根据权力要求7所述大孔树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用，其特征在于所用大孔树脂为弱极性大孔树脂，弱极性大孔树脂选用D-101、DHPD400、AB-8型大孔树脂中的一种。
9.聚酰胺树脂在滨蒿提取物生产方法中的应用。
10.根据权利要求1所述的滨蒿提取物应用于制备广谱抗病毒药物，其特征在于该滨蒿提取物用于制备针对流感病毒和/或乙肝病毒和/或爱滋病毒的广谱抗病毒药物。
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