CN101479275A - 2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺hiv蛋白酶抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及2－(取代的－氨基)－苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物，它们作为蛋白酶抑制剂，尤其是广谱HIV蛋白酶抑制剂的应用，它们的制备方法以及含有它们的药物组合物和诊断试剂盒。本发明还涉及所述2－(取代的－氨基)－苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物与另外的抗逆转录病毒剂的联用。本发明还涉及所述2－(取代的－氨基)－苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物作为参照化合物或试剂在测定中的应用。

Description

2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺HIV蛋白酶抑制剂

本发明涉及2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物，它们作为蛋白酶抑制剂、尤其是广谱HIV蛋白酶抑制剂的应用，它们的制备方法以及含有它们的药物组合物和诊断试剂盒。本发明还涉及所述2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物与另外的抗逆转录病毒剂的组合。本发明还涉及2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺化合物及其衍生物作为参照化合物或试剂在测定中的应用。

已知导致获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病毒有不同的名称，包括T-淋巴细胞病毒III(HTLV-III)或淋巴结病相关病毒(LAV)或AIDS相关病毒(ARV)或人体免疫缺陷病毒(HIV)。迄今为止，已确认两个不同的家族，即HIV-1和HIV-2。下文中，使用HIV统称这些病毒。

在逆转录病毒生命周期中的关键途径之一是通过天冬氨酸蛋白酶处理多聚蛋白前体。例如HIV病毒gag-pol蛋白质由HIV蛋白酶处理。通过天冬氨酸蛋白酶前体多聚蛋白正确处理是感染性病毒装配所需要的，因此使得天冬氨酸蛋白酶成为抗病毒治疗的有吸引力的靶标。特别地，对于HIV治疗，HIV蛋白酶是有吸引力的靶标。

HIV蛋白酶抑制剂(PI)一般与其它抗HIV化合物，例如核苷逆转录酶抑制剂(NRTI)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTI)、融合抑制剂例如T-20或其它蛋白酶抑制剂联合给药AIDS患者。尽管事实上这些抗逆转录病毒非常有用，但它们有一个共同的局限性，即在HIV中的靶向酶能够以这样的方式突变，使得已知药物对这些突变HIV病毒变得低效或甚至无效。或者，换句话说，HIV对现有药物产生不断增强的耐药性。

逆转录病毒，尤其是HIV对抑制剂的耐药性是治疗失败的主要原因。例如接受抗HIV联合治疗的一半患者对治疗没有充分的反应，主要是由于病毒对一种或多种所用药物的耐药性。此外，还显示耐药性病毒被带到新感染的个体，导致严重限制了这些首次使用此药物的患者的治疗选择。因此，本领域需要用于逆转录病毒治疗，更特别是AIDS治疗的新化合物。本领域特别迫切需要不仅对野生型HIV有活性，而且对日益普遍的耐药性HIV也有活性的化合物。

通常采用联合治疗方案给药的已知抗逆转录病毒剂最终会导致上述的耐药性。这通常促使临床医生大幅增加活性药物的血浆水平，以便使所述抗逆转录病毒药对突变HIV重新获得有效性。其结果会造成药物负担的不必要的不断增加，大幅增加血浆水平还可能会导致对处方治疗的不顺应性风险增加。因此，具有对广泛的HIV突变体显示活性的化合物不仅是重要的，而且在对广泛的突变HIV病毒株的抗突变体HIV病毒的活性和抗野生型HIV病毒的活性之间的比率(也定义为耐药性倍数或FR)存在很小变化或没有变化也是很重要的。从而患者可保持长期的相同联合治疗方案，因为突变体HIV病毒对活性成分的敏感的几率将提高。

发现对野生型和多种突变体具有高效力的化合物也很重要，因为如果治疗水平保持在最低，药物负担会降低。降低该药物负担的一种方式是发现具有良好生物可利用度，即有利的药物动力学和代谢曲线的抗HIV化合物，使得日剂量可最小，从而也使服用的药物量最少。

良好的抗HIV化合物的另一个重要特性是抑制剂的血浆蛋白质结合对其功效具有最小的或甚至无影响。

迄今，一些蛋白酶抑制剂已经上市或正在开发中。

虽然市售的蛋白酶抑制剂具有良好特性，但是对能够抵抗在折叠耐药性(fold resistance)方面具有很小变化的广谱HIV突变体，具有良好生物利用度，即有利药代动力学和代谢特性，并且对其效力的归因于血浆蛋白结合的影响很小或没有影响，另外在人类中表现出尽可能小的副作用的新蛋白酶抑制剂，具有持续的高医疗需求。

令人惊奇的是，发现本发明2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺化合物及衍生物具有有利的药理学和药代动力学特性。

此外，它们不仅对野生型HIV具有活性，而且对各种对已知蛋白酶抑制剂显示耐药性的突变HIV显示出广谱活性。

本发明化合物不会引起像皮肤病例如红斑和/或浮肿之类的所谓过敏性反应。

本发明涉及具有式(I)的作为蛋白酶抑制剂的2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺化合物及衍生物

其盐、立体异构体形式和立体异构体混合物，其中

R是在一个或多个环原子上任选被下列基团取代的哌啶或吡咯烷环：C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基-C_1-6烷基、-C(＝O)-C_1-6烷基-氨基-C_1-6烷基、-C(＝O)-C_1-6烷基-Het¹、-C(＝O)-C_1-6烷基-Het²、苄基、苯基或者被Het²取代的C_1-6烷基，其中

Het¹，作为基团或基团的部分，定义为优选具有3-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的饱和或部分不饱和的单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、乙酰基、氧代基、任选单或二取代的氨基、任选单或二取代的氨基烷基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基和具有3-14个环原子的饱和或部分不饱和单环、双环或三环的环或杂环；并且其中

Het²，作为基团或基团的部分，定义为优选具有3-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的芳族单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：任选被C_3-7环烷基取代的C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、任选单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基、Het¹和具有3-12个环原子的芳族单环、双环或三环的环或杂环。

值得关注的本发明化合物是其中R是在环中的N-原子上被C_3-7环烷基取代的哌啶环的那些化合物。

优选的化合物是其中所述C_3-7环烷基是C₅-环烷基的那些化合物。

最优选的是具有式(II)的化合物

此外本发明还涉及药物组合物和制备所述药物组合物的方法，所述药物组合物含有有效量的至少一种式(I)或(II)化合物以及常规的可药用赋形剂和辅料。

药物制剂通常含有按重量计0.1至90％的式(I或II)化合物。药物制剂可以按本领域技术人员已知的方法制备，为此目的，将至少一种式(I或II)化合物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅料和，如果需要，与其它药物活性化合物组合制成合适的给药形式或剂量形式，然后，将其用作人药或兽药的药物。

含有本发明化合物的药物可采用例如包括悬浮液、胶囊、片剂、小囊、溶液、悬浮液、乳液口服给药；采用例如皮下、静脉内、肌内、胸腔内注射或输液技术肠胃外给药；采用栓剂直肠给药；阴道内给药；通过吸入或局部给药。优选的给药方法取决于个体的情况，例如所治疗疾病的具体进程。优选口服给药。

本领域技术人员根据其专业知识熟悉适用于所需药物制剂的辅料。除了溶剂之外，也可以使用凝胶形成剂、栓剂基质、片剂辅料和其它活性化合物载体、抗氧剂、分散剂、乳化剂、消泡剂、调味剂、防腐剂、增溶剂、用于获得贮存效果的试剂、缓冲剂或着色剂。

对于口服给药形式，本发明的化合物与合适的添加剂，例如赋形剂、稳定剂或惰性稀释剂混合，通过常规方法制成合适的给药形式，例如片剂、包衣片剂、硬胶囊、水性、醇性或油性溶液。合适的惰性载体的实例是阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，尤其是玉米淀粉。在些情况下，可作为干和湿颗粒均可进行制备。合适的含油赋形剂或溶剂是植物或动物油，例如向日葵油或鳕肝油。用于含水或含醇溶液的合适溶剂是水、乙醇、糖溶液或它们的混合物。聚乙二醇和聚丙二醇也用作用于其它的给药形式的其它辅料。

对于皮下或静脉内注射，活性化合物，如果需要，与其适应的常规物质一起，例如增溶剂、乳化剂或其它辅料制成溶液、悬浮液或乳液。式(I)或(II)化合物也可冻干，得到的冻干物质用于例如生产注射或输液制剂。合适的溶剂是例如水、生理盐水溶液或醇，例如乙醇、丙醇、甘油，此外还可以是糖溶液，例如葡萄糖或甘露糖醇溶液或上述各种溶剂的混合物。

用于以气雾剂或喷雾剂形式给药的合适药物制剂是例如在可药用的溶剂，例如乙醇或水或这些溶剂的混合物中的式(I或II)化合物或其生理学可接受的盐的溶液、悬浮液或乳液。如果需要，制剂还可另外含有其它药物辅料，例如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及推进剂。这种制剂通常含有浓度为按重量计约0.1至50％，尤其是约0.3至3％的活性化合物。

由于其有利的药理学性质，尤其是对多药耐药性HIV蛋白酶的活性，本发明化合物可用于HIV感染的个体的治疗或这些个体的预防。

预防处理在个体经受高风险病毒接触的情况下是有利的，如在个体与存在高风险病毒传播的感染个体接触的情况下发生。作为举例，所述化合物的预防给药在健康护理工作者接触于来自HIV感染个体的血液的场合或在潜在接触于HIV个体的高风险活动中工作的个体的其它场合将是有利的。

通常，本发明的化合物可用于治疗感染了其存在是由蛋白酶介导或依赖于蛋白酶的病毒的温血动物。可以由本发明化合物预防或治疗的病症包括但不限于，治疗多种HIV感染的状态：AIDS、ARC(AIDS相关综合征)，有症状和无症状，实际或潜在接触于HIV。本发明化合物可用于治疗在怀疑接触于HIV，例如通过输血、体液交换、咬伤、意外针扎或在手术过程中接触于患者血液后的HIV感染。术语预防包括预防HIV感染和预防HIV感染后发展为AIDS。

本发明的化合物或其任何衍生物可用作对抗上述症状的药物。所述作为药物或治疗方法的用途包括向HIV感染的受试者系统给药有效量以对抗与HIV和其它病原性逆转录病毒有关的病症，尤其是HIV-1。因此，本发明的化合物可用于制备用于治疗与HIV和其它病原性逆转录病毒相关病症的药物，尤其是用于治疗感染多药耐药性HIV病毒的患者的药物。

可以将抗逆转录病毒化合物和本发明化合物的联合用作药物。因此，本发明还涉及含有(a)本发明(式(I或II))化合物，和(b)另一种抗逆转录病毒化合物的产品或组合物，作为组合制剂同时、分别或顺次使用，用于治疗逆转录病毒感染，尤其是治疗多药耐药性逆转录病毒感染。因此，为了对抗或治疗HIV感染或与HIV感染相关的感染或疾病，例如获得性免疫缺陷综合征(AIDS)或AIDS相关综合征(ARC)，本发明的化合物可与例如以下药物组联合给药：结合抑制剂、融合抑制剂、共受体结合抑制剂、RT抑制剂、核苷RTI、核苷酸RTI、NNRTI、RNAseH抑制剂、TAT抑制剂、整合酶抑制剂、蛋白酶抑制剂或糖基化抑制剂。

本发明的化合物还可在向患者施用药物后与代谢调节剂联合给药。这些调节剂包括干扰细胞色素，例如细胞色素P450代谢的化合物。某些调节剂抑制细胞色素P450。已知细胞色素P450存在若干同功酶，其中之一是细胞色素P450 3A4。利托那韦是经细胞色素P450的代谢调节剂的实例。对细胞色素P450有作用的有意义的趣化合物包括含有噻唑基、咪唑基或吡啶基部分的化合物。不同制剂中的联合治疗可同时、分开或顺次给药。或者，该联合可作为单一的制剂给药，其中活性成分从所述制剂同时或分开释放。

这种调节剂可以与本发明化合物以相同或不同的速率给药。优选地，这种调节剂与本发明化合物的重量比(调节剂：本发明的化合物)是1:1或更低，更优选比率是1:3或更低，合适的比率是1:10或更低，更加合适的比率是1:30或更低。

联合可提供协同效果，从而可预防、明显减少或完全消除病毒传染性和相关症状。式(I或II)化合物与另一种作为细胞色素P₄₅₀抑制剂的HIV蛋白酶抑制剂的联合可以添加的方式协同或拮抗地作用。这可在测量两种不同比率的HIV蛋白酶抑制剂的效力的实验中评估，结果可根据Chou和Talalay在(Adv.Enzyme Regul.22：27-55，1984)中描述方法以等效剂量分析(isobologram)绘曲线图。两种抑制剂间的协同将表示更有效的组合治疗，但不增加有害的副作用。

本发明的部分是利托那韦或其可药用盐与化合物I或II、优选化合物II(其被细胞色素P450代谢)的组合在制备用于在人类中抑制或治疗HIV感染或AIDS的药物中的应用，其中相对于在单独给药时化合物I或II的药代动力学，利托那韦的量足以改善所述化合物I或II在患者中的药代动力学。

本发明的另一方面涉及包含有效量的式(I或II)化合物的试剂盒或容器，其用作在测定抑制HIV蛋白酶、HIV生长或两者的潜在药物能力的试验或检测中的标准或试剂。本发明的这一方面可发现在药物研究过程中的应用。

本发明化合物可在耐药性发展的疾病例如HIV的临床处理中用于表型耐药性监测试验，例如已知的重组病毒试验。尤其有用的耐药性监测系统是称为Antivirogram^TM的重组病毒试验。Antivirogram^TM是高度自动化、高通量、第二代重组病毒试验，其可测量本发明化合物的易感性，尤其是病毒易感性。(Hertogs K，de BethunemP，miller V等，Antimicrob Agents Chemother，1998；42(2)：269-276)。

每当术语“取代的”用于定义式(I或II)化合物时，它是指表示在用“取代的”表达的原子上一个或多个氢原子被选自所述基团取代，其前提是不超过所述原子的正常化合价，和取代得到化学稳定的化合物，即化合物足以稳定以由反应混合物分离至有用的纯度程度，并配制为治疗剂。

用于本文作为基团或基团的部分的术语“卤代”或“卤素”通常为氟、氯、溴或碘。

作为基团或基团部分的术语“C_1-6烷基”定义具有1-6个碳原子的直链和支链饱和烃基，例如甲基、乙基、丙基、丁基和2-甲基-丙基等、戊基、己基、2-甲基丁基、3-甲基戊基等。

作为基团或基团部分的术语“C_3-7环烷基”通常是环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。

如本文所用的术语(＝O)与和其相连的碳原子形成羰基部分。

如果任何变量(例如卤素或C_1-4烷基)在任何构成中出现一次以上时，每一定义是独立的。

Het¹，作为基团或基团的部分，定义为优选具有1-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的饱和或部分不饱和的单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、乙酰基、氧代基、任选单或二取代的氨基、任选单或二取代的氨基烷基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基和具有3-14个环原子的饱和或部分不饱和单环、双环或三环的环或杂环。

Het²，作为基团或基团的部分，定义为优选具有1-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的芳族单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：可任选被C_3-7环烷基取代的C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、任选单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基、Het¹和具有3-12个环原子的芳族单环、双环或三环的环或杂环。

术语“芳基”是指衍生自简单芳环的任何官能团或取代基。有更具体的术语，例如苯基，描述未被取代的芳基和芳基的子集(以及任意取代的基团)，但是＂芳基＂是出于略语和概况的原因使用的。

对于治疗应用，式(I)或(II)化合物的盐是其中抗衡离子是制药学或生理学可接受的盐。然而，发现具有制药学不可接受的抗衡离子的盐也可用于例如制备或纯化式(I)或(II)的药学可接受的化合物。所有盐，无论是否是药学上可接受，均包括在本发明的范围内。

用于本发明的化合物的药学可接受的或生理学可容忍的加成盐形式可方便地用合适的酸，比如例如无机酸，例如氢卤酸，例如盐酸或氢溴酸；硫酸、半硫酸、硝酸、磷酸等酸；或有机酸，例如乙酸、天冬氨酸、十二烷基磺酸、庚酸、己酸、烟酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟基水杨酸等酸来制备。

相反，可通过用合适的碱处理所述酸加成盐形式将其转化为游离碱形式。

含有酸性质子的式(I)或(II)化合物也可通过用合适的有机和无机碱处理将其转化为其无毒金属或胺加成盐。合适的碱盐形式包括，例如铵盐、碱金属和碱土金属盐，例如锂、钠、钾、镁、钙盐等，有机碱的盐，例如苄星青霉素、N-甲基-D-葡糖胺、海巴青霉素(hydrabamine)盐和与氨基酸的盐，例如精氨酸、赖氨酸等。

相反，可通过用合适的酸处理所述碱加成盐形式将其转化为游离酸形式。

术语“盐”还包括本发明化合物能够形成的水合物和溶剂加成形式。这种形式的实例是例如水合物、醇合物等。

用于本发明的化合物还可存在其式(I)或(II)的N-氧化物形式，其中一个或若干个氮原子被氧化成所谓的N-氧化物。为得到所述的N-氧化物，可将式(I或II)化合物按照本领域已知的用于转化三价氮为其N-氧化物形式的方法转化为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应通常可以通过使式(I或II)的原料与相应的有机或无机过氧化物反应进行。合适的无机过氧化物包括，例如过氧化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，例如过氧化钠、过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸，比如例如过苯甲酸或卤代过苯甲酸，例如3-氯过苯甲酸，过氧链烷酸例如过乙酸，烷基氢过氧化物例如叔丁基氢过氧化物。合适的溶剂是例如水，低级链烷醇例如乙醇等，烃例如甲苯，酮例如2-丁酮，卤代烃例如二氯甲烷和这些溶剂的混合物。

术语“化合物或具有式(I)或(II)的化合物”，或者任何类似的术语例如“化合物或本发明化合物”等，意指还包括式(I)或(II)化合物可以形成的任何前药。本文所用术语“前药”意指包括像酯、酰胺和磷酸盐之类的任何药理学可接受的衍生物，这样所得体内生物转变的产物是如式(I)或(II)定义的化合物或相关药物。在此引入Goodman和Gilman描述前药的参考文献(The Pharmacological Basis of Therapeutics，8^thed，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，“Biotransformation of Drugs”，p13-15)。前药优选具有极好的水溶性、高生物利用度并且在体内易于代谢为活性抑制剂。用于本发明化合物的前药通过以在常规操作中或在体内裂解成母化合物的方式来修饰化合物中存在的官能团来制备。

优选的是在体内可水解并且由具有羟基或羧基的那些式(I)或(II)化合物衍生的可药用酯。体内可水解酯是在人或动物体内被水解而产生母酸或醇的酯。有关羟基的适宜的可药用酯包括C_1-6烷氧基甲基酯，例如甲氧基甲基酯，C_1-6烷酰基氧基甲基酯例如新戊酰基氧基甲基酯，2-苯并[c]呋喃酮基酯，C_3-8环烷氧基羰基氧基C_1-6烷基酯例如1-环己基羰基氧基乙基；1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲基；和C_1-6烷氧基羰基氧基乙基酯例如1-甲氧基羰基氧基乙基，其可以在本发明化合物中的任何羧基上形成。

含有羟基的式(I)或(II)化合物的体内可水解酯包括无机酯例如磷酸酯和α-酰氧基烷基酯和相关的化合物，其作为酯在体内水解的结果，裂解为母羟基。α-烷酰基烷基的实例包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰基氧基-甲氧基。有关羟基的体内可水解酯形成基团的选择包括烷酰基、苯甲酰基、苯基乙酰基和取代的苯甲酰基和苯基乙酰基、烷氧基羰基(形成烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(形成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上的取代基的实例包括从环氮原子经由亚乙基连接到苯甲酰基环的3或4位上的吗啉代和哌嗪子基。烷酰基酯例如是任何C_1-30烷酰基酯，尤其C_8-30烷酰基酯，更尤其C_10-24烷酰基酯，另外尤其C_16-20烷酰基酯，其中烷基部分可以具有一个或多个双键。烷酰基酯的实例是癸酸酯、棕榈酸酯和硬脂酸酯。

术语“化合物或具有式(I)或(II)的化合物”，或者任何类似的术语例如“化合物或本发明化合物”等，还意指包括给予药物后在体内形成的任何代谢物。按照本发明的代谢物的一些实例包括但不限于，(a)其中式(I)或(II)化合物含有甲基，其羟基甲基衍生物；(b)其中式(I)或(II)化合物含有烷氧基，其羟基衍生物；(c)其中式(I)或(II)化合物含有叔氨基，其仲氨基衍生物；(d)其中式(I)或(II)化合物含有仲氨基，其伯胺衍生物；(e)其中式(I)或(II)化合物含有苯基部分，其酚衍生物；(f)其中式(I)或(II)化合物含有酰胺基，其羧酸衍生物。

本发明还意图包括本发明化合物中存在的原子的任何同位素。例如，氢的同位素包括氚和氘，碳的同位素包括C-13和C-14。

用于本发明的化合物还存在其互变异构体形式。这种形式虽然没有在上述通式中明确指出，但也包括在本发明的范围内。

用于本发明的化合物还存在其立体化学异构体形式，定义由相同原子通过相同顺序的键构成，但具有不同三维结构的所有可能的化合物，它们是不可互换的。除非另外提及或拍出，化合物的化学命名包括了化合物可能具有的所有可能的立体化学异构体的混合物。所述混合物可含有所述化合物的基本分子结构的所有非对映体和/或对映体。用于本发明化合物的所有立体异构体形式，无论纯形式或彼此混合物的形式，均包含在本发明的范围内，包括任何外消旋混合物或外消旋体。

本文提及的化合物和中间体的纯立体异构体形式定义为基本上没有其它所述化合物或中间体的相同基本分子结构的其它对映体或非对映体形式。特别地，术语‘立体异构体纯’指具有立体异构体过量至少80％(即至少90％的一种异构体和最多10％的其它可能的异构体)至100％立体异构体过量(即100％的一种异构体和没有其它异构体)的化合物或中间体，更特别地，具有立体异构体过量90％至100％，更特别是，具有立体异构体过量是94％至100％，最特别是具有立体异构体过量97％至100％的化合物或中间体。术语‘对映纯’和‘非对映纯’应以类似的方式理解，但它们分别指正讨论的对映体过量和非对映体过量。

用于本发明的化合物和中间体的纯立体异构体形式可以通过采用已知方法得到。例如，通过用旋光活性的酸或碱将其非对映体盐选择性结晶，可以将对映体相互分离。其实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯甲酰基酒石酸和樟脑磺酸。或者，对映体可通过使用手性固定相的色谱技术分离。所述纯立体化学异构体形式还可由合适原料的相应纯立体化学异构体形式得到，前提是，该反应立体有择地发生。如果需要特定的立体异构体，所述化合物优选可通过立体有择制备方法合成。这些方法将有利地采用对映纯的原料。

式(I或II)的非对映外消旋体可通过常规方法分离得到。可以有利地采用的合适的物理分离方法是例如选择性结晶和色谱法，例如柱色谱法。

对本领域技术人员显而易见的是，式(I)或(II)化合物含有5个不对称中心，因此可存在不同的立体异构体形式。在如下式(I)中，用星号(*)表示了两个不对称中心。

可存在于式(I)化合物中的每个不对称中心的绝对构型可用立体化学术语R和S表示，该R和S符号相应于在Pure Appl.Chem.1976，45，11-30中描述的规则。同样可适用于式(II)。

实施例部分

一般实验方法

NMR光谱用对¹H在400mHz操作的Btuker Avance 400光谱仪记录，使用CDCl₃作溶剂。在每种情况下，将四甲基甲硅烷(TMS)用作内标。化学位移以ppm表示，并且J值以Hz表示。多重性使用以下缩写表示：d代表双重峰、t代表三重峰、m代表多重峰等。为了简明起见，选择完全表征(包括NMR)化合物的每一个亚类的一个代表性实例。低分辨率质谱(LRMS)在离子阱(ThermoFinnigan LCQ Deca)或飞行时间(Waters LCT)质谱仪上进行，其采用正向模式的电喷雾离子化(ESI)。所有试剂购自商业来源(Acros，Aldrich，Fluorochem，...)并直接使用。柱色谱法用60

硅胶，60-200μm(ROCC)进行。薄层色谱法用硅胶60F254板(Merck)进行。分析HPLC用配备Waters 996光电二极管阵列-检测器的Waters Alliance 2795(泵+自动取样器)(系统1和系统2)。为检测最终产物的纯度，使用两种色谱系统。系统1：柱：Waters Xterra MS C18，(3.5μm，4.60mm×100mm)，流动相A：20mM CH₃COONH₄和5％ CH₃CN在水中的混合物，流动相B：CH₃CN。分析在55℃下用1.5mL/min流速采用如下梯度进行：0min：95％ A，5.4min：5％ A，7.2min：5％ A，在每种情况下，注射10μl的1mM溶液。两次运行之间的平衡时间为1.8分钟。以单一波长(λ_max)检测洗脱峰。系统2：柱：Waters SunFire C18，(3.5μm，4.60mm×100mm)，流动相A：10mM HCOONH₄和0.1％HCOOH在H₂O中的溶液，流动相B：CH₃CN。分析在55℃下进行，使用1.5mL/min的流速，使用以下梯度：0min：95％ A，5.4min：5％ A，7.2min：5％ A。以单一波长(λ_max)探测洗脱峰。给出化合物的每一个亚类的代表性实例的保留时间，并用分钟报告。完全描述一种代表性实例(种类A中的化合物7)的合成。采用已经描述的相同方法，合成其它化合物(分别在种类A和B、C和D中)。

反应方案1.合成{1-苄基-3-[(2-氨基-苯并噻唑-6-磺酰基)-异丁基-氨基]-2-羟基-丙基}-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯衍生物5-25。

(i)RNH₃ ⁺Cl^-Et₃N，THF/10％Na₂CO₃。

反应方案2.合成氯化1-环戊基-哌啶-4-基-铵(4)。

(ii)碘-环戊烷，K₂CO₃，CH₃CN；(iii)HCl/i-PrOH，CH₃OH。

实施例1

反应方案2的化学反应的描述

(1-环戊基-哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(3)

该化合物是由可以从市场上买到的哌啶-4-基-氨基甲酸叔丁酯(2)(5g，25mmol，1equiv)制备的，将其溶解在乙腈(150mL)中，然后加入碘-环戊烷(9.79g，50mmol，2equiv)和K₂CO₃(3.45g，25mmol，1equiv)。将溶液在室温搅拌48小时。由于反应不完全，所以把碘环戊烷(1.70g，8.69mmol，0.35equiv)和K₂CO₃(1g，7.25mmol，0.29equiv)加到溶液中。将溶液于室温搅拌几个小时。将溶液用硅藻土垫过滤，并将滤液减压蒸发，获得3(6.70g，25mmol，定量)。LRMS(ES+)：m/z 269。

氯化1-环戊基-哌啶-4-基-铵(4)

把(1-环戊基-哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(3)(6.70g，25mmol，1equiv)溶解在甲醇(30mL)中，然后加入6N HCl在异丙醇中的溶液(10mL)。将该溶液搅拌24小时。由于反应不完全，所以将6N HCl在异丙醇中的溶液(10mL)和甲醇(50mL)加到溶液中。将该溶液再搅拌24小时。LC-MS指示反应完全。把四氢呋喃(20mL)、6N HCl在异丙醇中的溶液(10mL)和甲醇(200mL)中的6N HCl加到溶液中。将该溶液于室温搅拌72小时。把溶液减压蒸发，获得4(4.20g，25mmol，定量)。LRMS(ES+)：m/z 169。

实施例2

反应方案1的化学反应的描述

制备化合物(1-苄基-3-{[2-(1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯(7)(种类A)

把{1-苄基-2-羟基-3-[异丁基-(2-甲磺酰基-苯并噻唑-6-磺酰基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯(1)^1，2(10g，15mmol，1equiv)、氯化1-环戊基-哌啶-4-基-铵(4)(6.02g，25mmol，1.67equiv)和三乙胺(6.10g，60mmol，4equiv)溶解在四氢呋喃(200mL)中，然后加入10％ Na₂CO₃在水中的溶液(50mL)。将溶液于室温搅拌48小时。将有机层分离并用饱和NaHCO₃溶液洗涤。将有机层用MgSO₄干燥，过滤并减压蒸发。将粗产物通过柱色谱法纯化，用二氯甲烷：氨在甲醇中的溶液(7N)(100-95:5)洗脱，获得本标题化合物(4.45g，15mmol，39％)。LRMS(ES+)：m/z 756[M+H]⁺；HPLC(洗脱1)(290nm)t_R4.16min，97.11％；¹H-NMR(CDCl₃)0.87(d，3H，J＝6.48，CH₃)，0.92(d，3H，J＝6.50，CH₃)，1.33-1.51(m，4H，CH₂(2x)(环戊基))，1.51-1.77(m，6H，CH₂(2x)(哌啶)和CH₂，H4)，1.77-1.96(m，5H，CH₂(2x)(环戊基)和CH(异丁基))，2.09-2.28(m，4H，CH₂(2x)(哌啶))，2.43-2.59(m，1H，CH(环戊基))，2.72-2.85(m，1H，OH)，2.85-2.92(m，1H，CH，H3a)，2.92-3.12(m，5H，CH(哌啶)和CH₂-N和CH₂(异丁基))，3.20(dd，2H，J＝8.63和J＝15.16，C₆H₅CH₂的CH₂)，3.58-3.79(m，3H，CH₂，H5和CH₂，H2)，3.79-3.91(m，3H，CH₂，H2和CH-NH和CH-OH)，4.90-5.10(m，2H，CH，H3和NH)，5.42-5.59(m，1H，NH)，5.62(d，1H，J＝5.04，CH，H6a)，7.12-7.32(m，5H，C₆H₅)，7.52(d，1H，J＝8.54，CH(苯并噻唑))，7.67(dd，1H，J＝0.99和J＝8.47，CH(苯并噻唑))，7.95-8.02(brs，1H，CH(苯并噻唑))。

¹Surleraux，D.L.N.G.等人.广谱2-(取代的-氨基)-苯并噻唑磺酰胺HIV蛋白酶抑制剂/PCT Int.Apl.2002，WO2002083657。

²Surleraux，D.L.N.G.等人.对于多药耐药性病毒有活性的HIV-1蛋白酶抑制剂的设计；J.Med.Chem.2005，48，1965-1973。

制备化合物(1-苄基-3-{[2-(1-苄基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯(11)(种类B)

LRMS(ES+)：m/z 778[M+H]⁺；HPLC(系统1)(296nm)t_R 4.92min，95.51％；HPLC(系统2)(296nm)t_R 3.65min，95.41％；¹H-NMR(CDCl₃)δ 0.90(d，3H，J＝6.52，CH₃)，0.97(d，3H，J＝6.55，CH₃)，1.55-1.71(m，6H，CH₂(2x)(哌啶)和CH₂，H4)，1.71-1.99(m，1H，CH(异丁基))，2.09-2.19(m，2H，CH₂(哌啶))，2.19-2.35(m，2H，CH₂(哌啶))，2.70-2.93(m，3H，CH(哌啶)和CH，H3a和OH)，2.93-3.12(m，4H，CH₂-N和CH₂(异丁基))，3.12-3.29(m，2H，C₆H₅CH₂的CH₂)，3.58(s，2H，C₆H₅CH₂)，3.61-3.81(m，3H，CH₂，H5和CH₂，H2)，3.81-3.92(m，3H，CH₂，H2和CH-NH和CH-OH)，4.91-5.11(m，2H，CH，H3和NH)，5.49-5.61(m，1H，NH)，5.62(d，1H，J＝5.15，CH，H6a)，7.08-7.41(m，10H，C₆H₅)，7.55(d，1H，J＝8.55，CH(苯并噻唑))，7.67(dd，1H，J＝1.63和J＝8.56，CH(苯并噻唑))，7.92-8.10(m，1H，CH(苯并噻唑))。

制备化合物[1-苄基-2-羟基-3-(异丁基-{2-[1-(2-甲氧基-乙基)-吡咯烷-3-基氨基]-苯并噻唑-6-磺酰基}-氨基)-丙基]-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯(17)(种类C)

LRMS(ES+)：m/z 732[M+H]⁺；HPLC(系统1)(286nm)t_R 4.06min，89.02％；HPLC(系统2)(286nm)t_R 3.42min，87.19％；¹H-NMR(CDCl₃)δ0.89(d，3H，J＝6.49，CH₃)，0.95(d，3H，J＝6.56，CH₃)，1.55-1.72(m，2H，CH₂，H4)，1.75-2.03(m，3H，CH(异丁基)和CH₂(吡咯烷))，2.31-2.50(m，6H，CH₂(2x)(吡咯烷)和CH₂)，2.75-2.87(m，1H，OH)，2.87-3.12(m，8H，CH₂-N和CH₂(异丁基)和CH，H3a和CH(吡咯烷)和CH₂)，3.12-3.27(m，2H，CH₂ of C₆H₅CH₂)，3.38(s，3H，CH₃)，3.60-3.75(m，3H，CH2，H5和CH₂，H2)，3.81-4.05(m，3H，CH₂，H2和CH-NH和CH-OH)，4.92-5.08(m，2H，CH，H3和NH)，5.62(d，1H，J＝5.15，CH，H6a)，6.30-6.42(m，1H，NH)，7.12-7.40(m，5H，C₆H₅)，7.57(d，1H，J＝8.54，CH(苯并噻唑))，7.68(dd，1H，J＝1.96和J＝6.61，CH(苯并噻唑))，8.00(d，1H，J＝1.57，CH(苯并噻唑))。

制备化合物(1-苄基-2-羟基-3-{异丁基-[2-(1-吡啶-3-基甲基-吡咯烷-3-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-氨基}-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯(21)(种类D)

LRMS(ES+)：m/z 765[M+H]⁺；HPLC(系统1)(286nm)t_R 4.28min，95.18％；HPLC(系统2)(286nm)t_R 3.40min，94.56％；¹H-NMR(CDCl₃)δ 0.88(d，3H，J＝6.34，CH₃)，0.90(d，3H，J＝6.38，CH₃)，1.50-1.65(m，2H，CH₂，H4)，1.65-1.98(m，3H，CH(异丁基)和CH₂(吡咯烷))，2.20-2.52(m，4H，CH₂(2x)(吡咯烷))，2.75-3.28(m，11H，CH，H3a和OH和CH₂-N和CH₂(异丁基)和CH(吡咯烷)和CH₂ of C₆H₅CH₂和CH₂)，3.55-3.75(m，3H，CH₂，H5和CH₂，H2)，3.75-4.05(m，3H，CH₂，H2和CH-NH和CH-OH)，4.90-5.10(m，2H，CH，H3和NH)，5.65(d，1H，J＝4.50，CH，H6a)，6.18-6.49(m，1H，NH)，7.12-7.40(m，6H，C₆H₅和CH(吡啶))，7.50-7.60(m，1H，CH(苯并噻唑))，7.60-7.75(m，2H，CH(苯并噻唑)和CH(吡啶))，7.91-8.08(m，1H，CH(苯并噻唑))，8.40-8.65(m，2H，CH(吡啶))。

制备的化合物(no’s.5-25)描述于表1并分别划分为种类A、B、C和D。

表1

实施例3

本发明化合物的病毒学性质

在用MT4-LTR-EGFP细胞的细胞试验中测定所述化合物的抗病毒活性。试验表明这些化合物表现出对野生型实验室HIV病毒株(WTIIIB-2-001)的有效抗HIV活性。

由于耐药性HIV病毒株出现的增加，测定本发明的化合物对具有一些突变的临床分离的HIV病毒株的有效性。这些突变体与耐药性蛋白酶抑制剂结合，导致药物显示对目前商业获得的药物，例如沙奎那韦、利托那韦、奈非那韦、茚地那普和安普那韦不同程度的表型交叉耐药性。编号为A、B、C和D的病毒株包含如下表2中所示的突变体。

表2

 

A	V003I，L010I，V032T，L033M，E035D，S037Y，M046I，R057R/K，Q058E，L063P，K070T，A071V，I072V，I084V，L089V
		B	V003I，V032I，L035D，M036I，S037N，K043T，M046I，I047V，I050V，K055R，I057K，I062V，L063P，A071L，V082I，I085V，L090M，I093L
D	V003I L010I I013V G016A/G L019I L033F S037N M046I I050V F053LI054V K055R L063P A071V G073C V077I/V V082A L090M
		C	V003I L010F I013V V032T S037N M046I I047V I050V L063P A071VI084V L089V T091A Q092R

根据如下方法进行细胞测定。HIV或模拟感染的MT4-LTR-EGFP细胞在各种浓度的本发明化合物存在下培养3天。感染后，病毒tat蛋白质激活GFP受体。在培养周期结束时，测量GFP信号。在病毒对照样品(不存在任何抑制剂)中，得到最大荧光信号。监测化合物对病毒感染细胞的抑制活性，用EC₅₀表示。这些数值表示保护50％细胞不受病毒感染所需的化合物的量(表3)。

如在该表中所看到的那样，本发明化合物可以有效抑制多种突变病毒株。

表3

病毒株

 

化合物编号	WT-IIIB-2-001pEC50	ApEC50	BpEC50	CpEC50	DpEC50
						5	7.72	7.89	7.57	5.38	7.86
6	8.31	7.84	7.58	5.46	7.86
						7	7.88	7.93	7.70	5.54	7.87
8	7.44	6.65	7.00	5.25	NA
						9	6.56	6.99	6.59	5.00	6.99
10	6.53	6.84	6.52	5.11	6.62
						11	8.60	7.65	7.47	5.24	7.73
12	8.34	8.26	7.71	5.19	8.27
						13	8.18	8.06	7.94	6.04	7.98
14	7.85	7.85	7.78	5.90	7.84
						15	8.24	8.38	7.71	5.46	8.24
16	6.82	5.93	5.89	5.90	NA
						17	7.73	7.88	7.77	5.47	NA
18	7.76	7.61	7.24	5.32	NA
						19	8.42	7.84	7.33	5.35	7.75
20	8.27	8.23	7.84	5.59	8.12
						21	7.95	8.31	7.84	5.74	8.15
22	7.71	NA	7.77	6.19	NA
						23	7.97	8.56	7.56	5.36	8.27
24	8.22	7.91	7.70	5.08	7.89
						25	5.77	5.59	5.04	<4.49	5.41

实施例4

生物利用度

用于肠内吸收的Caco-2渗透性试验

根据由Augustijns等(Augustijns等，(1998).Int.J.of Pharm，166，45-54)描述的Caco-2试验方案评价不同化合物的渗透性，其中，使传代数在32-45之间的Caco-2细胞在24孔细胞培养板上生长21至25天。通过测量经上皮电阻(TEER)检查细胞间层的完整性。该测试在pH7.4和100μM供体化合物浓度下进行。

在不同DH水平下的水溶性

在热动力条件下模拟肠胃溶液中的平衡溶解性是化合物在胃和肠的不同部分中溶解性特征的良好度量。模拟胃液(SGF)(不含胃蛋白酶)设定为pH1.5。模拟肠液(SIF)(不含胆汁盐)设定为pH5、pH6.5、pH7和pH7.5。实验方案采用96孔平底微滴板，其中在每个孔中加入1mg化合物(在甲醇中的储备溶液)，蒸发至干。将化合物重新溶解在SGF和SIF中，用水平振荡装置上在37℃培养过夜。过滤后，用UV-分光光度法测量化合物的浓度。

蛋白质结合分析：

已知人类血清蛋白质如白蛋白(HAS)或α-1酸糖蛋白质(AAG)结合许多药物，导致这些化合物的功效可能降低。为测定本发明的化合物是否将受这些结合的不利影响，在人类血清存在下测量化合物的抗HIV活性，从而评价蛋白酶抑制剂结合那些蛋白质的功效。

在大鼠中的口服利用率：

将化合物在DMSO、PEG400或40％环糊精水溶液中配制成20mg/ml溶液或悬浮液。对大多数大鼠实验(雄性或雌性)，形成3个剂量组：1/使用DMSO制剂的单腹膜内(IP)剂量20mg/kg；2/使用PEG400制剂的单口服剂量，20mg/kg和3/使用PEG400制剂的单口服剂量20mg/kg。在给药后以规定的时间间隔采集血样，用LC-MS生物分析法测定血清中的药物浓度。血清浓度表示为ng/mg，可测量在30分钟(30’)和3小时(180’)时的血清浓度，因为这些数值反映吸收程度(30’)和消除速度(180’)。

提高系统生物利用度

对于所述类型的化合物(蛋白酶抑制剂)，已知代谢降低过程的抑制可通过降低肝的通过代谢和从血浆代谢清除来显示增加系统利用率。该‘大幅增加’原理可应用于临床药物的药理学作用。该原理还在大鼠或狗中通过同时给药抑制Cyt-P450代谢酶的化合物来研究。已知的阻断剂是例如利托那韦和酮康唑。在大鼠和狗中5mg/kg利托那韦的单口服剂量可导致系统利用度增加。

本发明化合物的过敏试验

在狗中进行发生红斑和水肿的试验。采用单剂量、提高剂量研究设计的适宜的制剂，口服给药Beagle狗具有结构式(II)的化合物。为了达到高全身暴露，联合给药一种所谓的增强剂化合物(利托那韦，RTV)。给药后在规定的时间间隔采集血样。在治疗期间和随访(至少24小时)中每日至少一次记录临床征象。症状分为1-3级，0为没有症状，1为轻度，2为中度，3为严重，4为非常严重。特别注意红斑和水肿的发生。

用LC-MS/MS方法测定狗中的具有式(II)的化合物的浓度。将原始数据用来计算作为系统接触的量度指标的标准药代动力学参数(例如AUC)。将具有式(II)的化合物的系统暴露与具有结构式(III)的参照化合物的暴露比较，该参照化合物采用在狗中的类似的单剂量试验，没有增强剂(利托那韦)。

下表提供了具有(II)的化合物与具有式(III)的化合物在这些狗中的比较血浆暴露，以及对红斑和水肿的相关观察。

令人惊奇的是，发现采用单剂量给药试验的具有结构式II的化合物没有在狗中引起红斑和/或水肿，然而具有式(III)的化合物却引起了这些临床征象。

 

化合物	剂量(mg/kg)	AUC(ng.h/ml)	红斑/水肿
				具有式(II)的化合物+RTV*	204080	7747**23016**23016**	否否否
具有式(III)的参照化合物	104080120	47-2383319-50887366-1599810204-27507	否否是是

^*RTV：联合给药利托那韦(‘增强剂’)以提高具有式(II)的化合物的接触

^*从4个动物计算的平均AUC

化合物III红斑/水肿作用与化合物II特性的比较

化合物III：

在Beagle狗中进行的单剂量递增/五天重复剂量毒性耐受性试验中，在以80mg/kg/天的高剂量连续五天治疗后，用化合物III治疗的两个雄性性中的一个和两个雌性中的一个显示一般的红斑。

在Beagle狗中进行的28天耐受性试验中，用化合物III治疗的大多数动物在所有剂量水平上易于发生严重发红(红斑；一般的或有斑点的)。在40mg/kg/天的低剂量水平，这些症状在试验的第三周开始出现；对于80和120mg/kg/天的剂量水平，这些作用在试验之初出现。在大多数情况下，红斑伴随头部、下垂的上嘴唇、眼部和/或耳部的肿胀(水肿)，在有些情况下伴随头部、鼻部、颈部区域、腹部、耳部和/或腿部的瘤状肿胀。这些结果在给药后短暂发生，在性质上是短暂的，在给药后的大约1-2个小时达到高峰，然后消失。在这些反应中具有很大的个体间变异，并且没有剂量反应关系。弄清红斑的原因的机械学的研究不能说明基于组织胺的作用机制。

在Beagle狗中用化合物III进行的口服3个月毒性研究中，在整个治疗期间，发现在以120mg/kg/天给药的多数动物易于发生严重的皮肤发红，并且伴随肿胀。在某些情况下，作为红斑和/或瘤状肿胀开始的这些症状发展为扩散性/一般性红斑和肿胀。症状主要见之于薄的/毛稀疏的部位包括耳部、眼眶周围和腹部等处。结果是短暂的，在给药约一个小时后最严重，给药4小时后消失或严重程度降低。治疗5周后，以40mg/kg/天给药的四个雄性中的一个显示一般性的红斑。在以10mg/kg/天给药的任何动物中没有观察到红斑或水肿。

化合物II：

在单剂量递增/5天重复剂量毒性试验中，将Beagle狗以40-最高144mg/kg/天的剂量用本发明化合物II治疗。在试验中在任何动物没有观察到水肿或红斑的迹象。

在Beagle狗中以5、20和40mg/kg/天的剂量水平用化合物II进行随后一个月的毒性试验中，在试验期间既没有发现红斑，也没有发现水肿。

因此，在长达一个月的毒性试验中，如通过临床观察所观测到，在Beagle狗中口服给药化合物III产生红斑和水肿。虽然这些结果的发生率似乎随着给药期间的延长和剂量水平的增加而提高，但是在结果的严重性方面具有很大的个体间差异。相反，在Beagle狗中长达一个月的毒性试验中，口服给药化合物II没有引起红斑和/或水肿。

喂食的雄性Beagle狗中以10或40mg/kg剂量单一口服给药化合物II 后的化合物II的药代动力学和利托那韦的增强作用

进行本试验，以便在比雄性Beagle狗中在单一口服给药10和40mg/kg后，研究化合物II的血浆药代动力学，并评估利托那韦(以每日两次给药10mg/kg)对化合物II的生物利用度的影响。

将Beagle狗(7-11kg体重)在喂食后给药。通过强饲口服溶液剂给药化合物II和利托那韦。所有动物首先单独接受化合物II，并且在一周的冲刷后，在早上联合给药利托那韦和化合物II。在晚上和次日早上再给药利托那韦给药。将血浆取样以测定化合物II和利托那韦浓度，直到给药化合物II32小时后为止。

试验结果证明在狗中利托那韦对于化合物II是有效的药代动力学增强剂。在每日两次联合给药10mg/kg利托那韦后，化合物II的总血浆接触(AUC)和峰值血浆浓度(C_max)显著提高，如表4中所详细描述，并且图1表示与利托那韦联合给药和不与利托那韦联合给药的化合物II的平均血浆浓度时间曲线图。

表4：在Beagle狗中，以10-40mg/kg与利托那韦联合给药和不与利托那韦联合给药的化合物II的相对生物利用度(F_rel)

AUC增加10倍以上，然而C_max增加4-7倍。后者表明在利托那韦存在下改善的吸收和化合物II的降低的首过效应。AUC的更高增加表明主要的利托那韦作用是降低化合物II的消除速度。

包膜片剂

片芯的制备

将100g活性成分(即式(I)化合物)、570g乳糖和200g淀粉充分混合，随后用5g十二烷基硫酸钠和10g聚乙烯吡咯烷酮在约200ml水中的溶液润湿。将湿粉末混合物过筛、干燥和再次过筛。然后，加入100g微晶纤维素和15g氢化植物油。将所有组分充分混合，压制成片剂，得到10.000片，每片含有10mg活性成分。

包衣

向10g甲基纤维素在75ml变性乙醇中的溶液中加入5g乙基纤维素在150ml二氯甲烷中的溶液。随后加入75ml二氯甲烷和2.5ml 1，2，3-丙三醇。将10g聚乙二醇熔化，并溶解在75ml二氯甲烷中，将后面的溶液加入前面的溶液中，然后，加入2.5g十八烷酸镁、5g聚乙烯吡咯烷酮和30ml浓色素悬浮液，全部均匀。在包衣装置中用如此得到的混合物对片芯进行包衣。

Claims (15)

1.具有式(I)的化合物

其盐、立体异构体形式或立体异构体混合物，其中

R是在一个或多个环原子上任选被下列基团取代的哌啶或吡咯烷环：C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基-C_1-6烷基、-C(＝O)-C_1-6烷基-氨基-C_1-6烷基、-C(＝O)-C_1-6烷基-Het¹、-C(＝O)-C_1-6烷基-Het²、苄基、苯基或者被Het²取代的C_1-6烷基，其中

Het¹，作为基团或基团的部分，定义为优选具有3-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的饱和或部分不饱和的单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、乙酰基、氧代基、任选单或二取代的氨基、任选单或二取代的氨基烷基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基和具有3-14个环原子的饱和或部分不饱和单环、双环或三环的环或杂环；并且其中Het²，作为基团或基团的部分，定义为优选具有3-14个环原子、更优选5-10个环原子且更优选5-6个环原子的芳族单环、双环或三环杂环，所述杂环含有一个或多个选自氮、氧或硫的作为环原子的杂原子，并且在一个或多个氮和/或碳原子上任选被下列基团取代：任选被C_3-7环烷基取代的C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷基、卤素、羟基、任选单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤代C_1-6烷基、羧基、C_1-6烷氧基羰基、C_3-7环烷基、任选单或二取代的氨基羰基、甲硫基、甲基磺酰基、芳基、Het¹和具有3-12个环原子的芳族单环、双环或三环的环或杂环。

2.权利要求1的化合物，其中R是在环中的N原子上被C_3-7环烷基取代的哌啶。

3.权利要求2的化合物，其中C_3-7环烷基是C₅-环烷基。

4.具有式(II)的权利要求3的化合物

5.具有化学名称(1-苄基-3-{[2-(1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。

6.包含有效量的至少一种权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物和可药用赋形剂的药物组合物。

7.制备权利要求6的药物组合物的方法。

8.用作药物的权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物。

9.在感染逆转录病毒的哺乳动物中抑制多药耐药性蛋白酶的方法，该方法包括向有此需要的所述哺乳动物给药蛋白酶抑制量的权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物。

10.在哺乳动物中治疗或抵抗与多药耐药性逆转录病毒感染有关的感染或疾病的方法，该方法包括向所述哺乳动物给药有效量的至少一种权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物。

11.抑制多药耐药性逆转录病毒复制的方法，该方法包括将逆转录病毒与有效量的至少一种权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物接触。

12.权利要求1-5中任何一项权利要求的化合物在制备用于治疗或抵抗与多药耐药性逆转录病毒感染有关的感染或疾病的药物中的应用。

13.组合物，所述组合物包含至少(a)权利要求1-5中的式(I)或(II)化合物，(b)第二抗逆转录病毒剂，所述式(I)或(II)化合物与所述第二抗逆转录病毒剂是同时、分别或依次使用。

14.权利要求13的组合物，其中所述第二抗逆转录病毒剂是利托那韦。

15.权利要求14的组合物，其中式II化合物是(1-苄基-3-{[2-(1-环戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-异丁基-氨基}-2-羟基-丙基)-氨基甲酸六氢-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。

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