CN101433565A - 骆驼蓬属种子总生物碱提取物及其有效单体成分和它们的制备与应用 - Google Patents
骆驼蓬属种子总生物碱提取物及其有效单体成分和它们的制备与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101433565A CN101433565A CNA2008102033837A CN200810203383A CN101433565A CN 101433565 A CN101433565 A CN 101433565A CN A2008102033837 A CNA2008102033837 A CN A2008102033837A CN 200810203383 A CN200810203383 A CN 200810203383A CN 101433565 A CN101433565 A CN 101433565A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chemical compound
- total alkaloids
- preparation
- seed
- pegani harmalae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本发明公开了骆驼蓬属植物种子中总生物碱提取物及其有效成分的制备与应用。骆驼蓬属植物(包括骆驼蓬、多裂骆驼蓬和骆驼蒿)种子用乙醇加热回流提取、趁热溶解加入2-10%盐酸酸化、氨水碱化析出沉淀、经干燥后即得主要含去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的比例为0.18∶1-4.30∶1、总生物碱含量大于50%的总生物碱提取物。总生物碱提取物经色谱法分离得到去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱等10个有效单体成分。通过薄层色谱-生物自显影分析显示本发明制备的总生物碱提取物及其有效单体成分具有抗乙酰胆碱酯酶活性,可用于制备治疗抗乙酰胆碱酯酶活性药物与神经退行性疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及中药,具体涉及骆驼蓬属植物种子中总生物碱提取物及其有效单体成分和它们的制备与应用。
背景技术
骆驼蓬(Peganum harmalaL.)为蒺藜科(Zygophyllaceae)骆驼蓬属(Peganum)多年生草本植物,广布于旧大陆温带地区,在中国西北部拥有丰富的药材资源。其味辛苦,性凉,有毒,是维吾尔、蒙古族民间沿用已久的习用药材,已被列入维吾尔药卫生部药品标准(WS3-BW-0080-98),种子和全草均作药用,主治咳嗽气喘、无名肿痛等症。其种子中的化学成分早在1841年就有报道,主要是去氢骆驼蓬碱(Harmine,HAR)、骆驼蓬碱(Harmaline,HAL)、去甲骆驼蓬碱(Harmalol)及哈尔满(Harman)等生物碱,含量达3.92%-7.0%。骆驼蓬生物碱的药理作用比较广泛,具有抗菌、消炎、止痒、抗原虫及中枢神经系统、心血管系统和对肌肉离子通道等多方面药理作用。早在30年代HAR和HAL就作为单胺氧化酶(MAO)抑制剂用于巴金森氏病的治疗。中国自70代首次将骆驼蓬总碱制剂用于治疗消化道肿瘤,临床治疗21例有效率为85.7%。其抗癌作用引起广泛重视。国际上对它的研究主要集中在它对中枢神经系统和单胺氧化酶(MAO)的抑制作用方面。近年来研究发现,去氢骆驼蓬碱还具有辐射防护作用和抗包虫作用。骆驼蓬的抗肿瘤作用受到学者的重视,成为国内外研究的热点之一。中国专利文献CN1104507A、CN1220162A、CN1299664A等报道了骆驼蓬制剂及制备方法,CN1250560C、CN101229203A涉及到骆驼蓬总生物碱的制备方法和用途。目前已报道的骆驼蓬提取物制备方法主要有如下:
1)以5%的醋酸浸提骆驼蓬种子,用10%的氯化钠将醋酸盐转变为盐酸盐然后冷热反复处理得到骆驼蓬生物碱(Sanken.The Alkaloid.1952)
2)用乙醇渗漉,回收乙醇后的水液用乙醚脱脂,水层用氨水调pH6.5加入硫酸铵,用焦炭过滤,加入KI,再用含HI的焦炭处理,得到的生物碱盐再用10%的氨水处理得到骆驼蓬总生物碱(Brit.CA.1964.61:9365h)。
3)用5%的盐酸浸提,酸液用阳离子交换树脂交换,用氨水碱化树脂,再用乙醚、氯仿或无水乙醇洗脱得到骆驼蓬总生物碱(李春杰.新疆医学院学报,1987;10(1):27-30)。
4)用95%的乙醇回流提取,浓缩至糖浆状,用盐酸转溶,氯仿脱脂后的酸液用氨水碱化,析出沉淀,得到骆驼蓬总生物碱(利国威,中草药,198819(1):2-4)。
5)用氯仿氨水混合溶媒沉淀法分离提取骆驼蓬子中的生物碱得骆驼蓬总生物碱,并认为该法优于阳离子树脂法和氯仿提取法。(张学农,新疆医学院学报,1993;16(4):350-351)。
6)用乙醇提取,提取液用氯化汞处理后去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱以复合物沉淀下来,然后用H2S处理得到骆驼蓬生物碱(Munir,Fitoterapia,1995;66(1):73-76)。
7)用碱性乙醇浸润后回流提取,经碱化游离、甲酸乙酯、乙酸乙酯等回流分离、硅藻土与活性碳减压过滤、回收溶剂、烘干、再用醇溶液回流提取、然后用水沉、冷藏、板框过滤、喷雾干燥,得到骆驼蓬总生物碱(CN1250560C)。
8)采用二氧化碳超临界萃取脱脂、碱水冷浸除杂后再用酸性醇溶液提取,减压浓缩干燥后再用盐酸浸泡,过滤,滤液中加氨水碱化,冷藏、过滤、干燥即得骆驼蓬总生物碱。(CN101229203A)。
但上述方法有一些不足之处:1)法虽然工艺简单,但提取率不高,只分离去氢骆驼蓬碱而丢失了其它生物碱,且醋酸盐与盐酸盐转化不彻底;2)法用乙醚萃取脱脂,且使用KI和HI处理,增加了成本,不宜工业化生产。3)法用阳离子交换树脂处理生物碱,树脂再生及预处理复杂(易中毒不易再生),后续处理中用乙醚和氯仿,对环保不利。4)法用稀盐酸转溶时不易进行,因为骆驼蓬种子中含有大量粘液质、树脂、树胶、脂肪油等,用稀盐酸不能充分接触生物碱,即使搅拌也较困难,而且酸溶液过滤困难;5)法用氯仿氨水溶合溶媒萃取,对环保不利。6)法用到重金属(HgS)和H2S处理,易导致环境污染和重金属残留损害人体健康。7)法用碱液浸润提取,不易过滤,处理过程用有机溶剂,而且提取分离过程过于复杂。8)法用二氧化碳超临界萃取脱脂,工业化成本增加,且用酸性乙醇提取后不易过滤。而且上述方法提取过程后剩余的碱水液中仍然残留大量的生物碱,造成植物资源的大量浪费。因此,这些方法难以规模化实施。
另外,骆驼蓬属植物有骆驼蓬(P.harmala L.)、多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)、骆驼蒿(P.nigelastrum Beg.),它们种子中总生物碱含有去氢驼骆蓬碱(harmine)、骆驼蓬碱(harmaline)、鸭嘴花碱(vasicine)、脱氧鸭嘴花碱(deoxyvasicine)、鸭嘴花酮碱(vasicinone)、脱氧鸭嘴花酮碱(deoxyvasicinone)、哈马酚(harmalol)等成分。但目前仅局限于骆驼蓬的研究,未对骆驼蓬属多裂骆驼蓬和骆驼蒿加以利用。药理研究显示骆驼蓬具有抗癌、镇痛、消炎、杀菌、驱虫和抑制单胺氧化酶等多种生物活性。而现在多集中在抗肿瘤方面的研究和应用,对其它方面的作用未予深入。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处,研究设计方法简便,宜于工业化生产的骆驼蓬总生物碱的制备方法。
本发明提供一种骆驼蓬属种子中总生物碱提取物及其有效单体成分。
本发明所述骆驼蓬属植物种子为骆驼蓬(P.harmala L.)、多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)或骆驼蒿(P.nigelastrum Beg.)的种子。
本发明所述的总生物碱提取物的主要有效单体成分为去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱,含有化合物1(鸭嘴花酮碱,vasicinone)、化合物2(鸭嘴花碱,vasicine)、化合物3(去氢骆驼蓬碱,harmine)、化合物4(脱氧鸭嘴花酮碱,deoxyvasicinone)、化合物5(脱氧鸭嘴花碱,deoxyvasicine)、化合物6(骆驼蓬碱,harmaline)、化合物7(哈尔醇,harmol)、化合物8(哈马酚,harmalol)、化合物9(nigelastrine 1)、化合物10(nigelastrine 2)。其中nigelastrine 1和nigelastrine 2是本发明得到的新化合物。化合物结构如下:
化合物1 化合物2
鸭嘴花酮碱(vasicinone) 鸭嘴花碱(vasicine)
化合物3 化合物6
去氢骆驼蓬碱(harmine) 骆驼蓬碱(harmaline)
化合物4 化合物5
脱氧鸭嘴花酮碱(deoxyvasicinone) 脱氧鸭嘴花碱(deoxyvasicine)
化合物7 化合物8
哈尔醇(harmol) 哈马酚(harmalol)
化合物9 化合物10
nigelastrine 1 nigelastrine 2
化合物1—10的结构鉴定数据如下:
化合物1:白色短柱状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):203.6[M+](100);1H-NMR(400MHz,CDCl3.)δppm:8.30(1H,d,7-H),7.75(2H,m,4-H,5-H),7.49(1H,m,6-H),5.25(1H,q,3-H),4.37(1H,m,1-H),4.02(1H,m,1-H),2.67(1H,m,2-H),2.30(1H,m,2-H);13C-NMR(100MHz,CDCl3)δppm:29.4(2-C),43.4(1-C),71.9(3-C),121.0(3α-C),126.6(6-C),126.7(4-C),126.9(5-C),134.4(7-C),148.6(7α-C),160.3(4α-C),160.6(C=O)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为鸭嘴花酮碱(vasicinone)。
化合物2:白色针簇状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):189.6[M+](100);1H-NMR(400MHz,CDCl3)δppm:7.14(2H,m,4-H,5-H),6.97(1H,t,6-H),6.87(1H,d,7-H),4.75(1H,m,3-H),4.53(2H,d,8-H),3.48(1H,m,1-H),3.42(1H,m,1-H),2.38(1H,m,2-H),2.10(1H,m,2-H);13C-NMR(100MHz,CDCl3)δppm:29.6(2-C),47.2(1-C),48.5(8-C),71.4(3-C),121.0(3α-C),125.9(6-C),126.6(4-C),126.8(5-C),128.5(7-C),142.1(7α-C),163.7(4α-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为鸭嘴花碱(vasicine)。
化合物3:近无色棱柱结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):213.4[M+](100);1H-NMR(500MHz,CDCl3-CD3OD)δppm:8.16(1H,d,3-H),7.95(1H,d,5-H),7.71(1H,d,4-H),7.00(1H,d,8-H),6.88(1H,dd,6-H),3.92(3H,s,C7-OCH3),2.77(3H,s,C1-CH3);13C-NMR(100MHz,CDCl3-CD3OD)δppm:19.1(C1-CH3),55.4(C7-OCH3),94.7(8-C),109.3(6-C),112.1(12-C),115.4(4-C),122.4(5-C),128.6(11-C),134.8(10-C),137.3(3-C),140.9(13-C),142.3(1-C),160.7(7-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为去氢骆驼蓬碱(harmine)。
化合物4:白色针簇状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):187.7[M+](100);1H-NMR(400MHz,CDCl3.)δppm:8.29(1H,dd,7-H),7.73(1H,m,5-H),7.65(1H,dd,4-H),7.45(1H,m,6-H),4.22(2H,t,1-H),3.18(2H,t,3-H),2.29(2H,m,2-H);13C-NMR(100MHz,CDCl3.)δppm:19.6(2-C),32.5(3-C),46.5(1-C),120.6(3α-C),126.2(6-C),126.4(4-C),126.8(5-C),134.2(7-C),149.2(7α-C),151.0(4α-C),159.4(C=O)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为脱氧鸭嘴花酮碱(deoxyvasicinone)。
化合物5:白色针簇状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):173.6[M+](100);1H-NMR(500MHz,CD3OD)δppm:7.32(1H,m,7-H),7.24(2H,m,4-H,5-H),7.03(1H,m,6-H),4.85(2H,s,8-H),3.78(2H,t,1-H),3.07(2H,t,3-H),2.30(2H,m,2-H);13C-NMR(100MHz,CD3OD.)δppm:19.7(2-C),31.4(3-C),47.5(1-C),55.3(8-C),118.1(3α-C),118.4(6-C),128.4(4-C),128.5(5-C),130.7(7-C),132.6(7α-C),164.8(4α-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为脱氧鸭嘴花碱(deoxyvasicine)。
化合物6:鲜黄色块状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):215.4[M+](100);1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:11.13(1H,br.s,N-H),7.43(1H,d,5-H),6.86(1H,d,8-H),6.71(1H,d,6-H),3.79(3H,s,C7-OCH3),3.65(2H,t,3-H),2.69(2H,t,4-H),2.24(3H,s,C1-CH3);13C-NMR(100MHz,CDCl3.)δppm:19.1(C1-CH3),21.9(4-C),47.5(3-C),55.1(C7-OCH3),94.6(8-C),110.2(6-C),114.6(11-C),119.4(12-C),120.3(5-C),128.4(10-C),137.5(13-C),156.8(1-C),157.1(7-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为骆驼蓬碱(harmaline)。
化合物7:淡黄色针状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):199.6[M+](100);1H-NMR(400MHz,DMSO-d6.)δppm:11.22(1H,s,N-H),9.72(1H,br.s,C7-OH),8.11(1H,br.s,3-H),7.92(1H,d,J=8.5Hz,5-H),7.73(1H,d,J=4.8Hz,4-H),6.91(1H,d,J=1.8Hz,8-H),6.70(1H,dd,J=9.2Hz,6-H),2.69(3H,s,C1-CH3);13C-NMR(100MHz,CDCl3.)δppm:20.0(C1-CH3),96.5(8-C),109.6(6-C),111.6(4-C),113.7(12-C),122.4(5-C),127.5(11-C),134.5(10-C),137.2(3-C),140.7(1-C),142.3(13-C),158.2(7-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为哈尔醇(harmol)。
化合物8:白色针状结晶,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MSm/z(%):201.6[M+](100);1H-NMR(400MHz,CDCl3.)δppm:12.17(1H,s,N-H),10.18(1H,br.s,C7-OH),7.57(1H,d,J=8.8Hz,5-H),6.85(1H,d,J=1.8Hz,8-H),6.75(1H,dd,6-H),3.80(2H,t,3-H),3.11(2H,t,4-H),2.64(3H,s,C1-CH3);13C-NMR(100MHz,CDCl3.)δppm:18.3(C1-CH3),19.0(4-C),41.5(3-C),96.1(8-C),114.3(6-C),118.1(11-C),123.0(12-C),124.7(5-C),125.2(10-C),143.0(13-C),159.2(1-C),164.4(7-C)。以上光谱数据与文献报道相符,故该化合物结构鉴定为哈马酚(harmalol)。
化合物9:白色粉末,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MS m/z(%):383.5[M+](100);1H-NMR(500MHz,CD3OD.)δppm:8.23(1H,5-H),8.20(1H,4’-H),8.16(1H,6’-H),7.23(2H,7-H,8-H),7.13(1H,6-H),7.13(1H,6-H),7.03(1H,8’-H),6.96(1H,7’-H),6.87(1H,9’-H),5.09(1H,9-H),3.74(1H,11-H),3.09(3H,2’C-CH3),2.49(1H,10-H),2.08(1H,10-H);13C-NMR(100MHz,CD3OD.)δppm:17.4(C2-CH3),30.7(10-C),55.9(11-C),72.6(9-C),109.4(9’-C),114.4(7’-C),115.2(6’α-C),115.9(5’-C),118.0(8’-C),122.3(2-C),127.0(6’-C),128.5(6-C,8-C),128.7(7-C),130.6(5’α-C),131.7(2’α-C),132.7(4’α-C),135.0(5-C),145.5(5α-C),162.2(8α-C),165.1(C=O)。根据以上光谱数据,鉴定其结构并命名为nigelastrine 1。
化合物10:白色粉末,与Dragendorff试剂作用显橙红色。ESI-MS m/z(%):385.4[M+](100);1H-NMR(500MHz,CD3OD.)δppm:8.28(1H,5-H),8.20(1H,6’-H),7.21(2H,7-H,8-H),7.20(1H,6-H),7.00(1H,8’-H),6.90(1H,7’-H),6.86(1H,9’-H),5.18(1H,9-H),3.65(1H,11-H),3.21(1H,5’-H),3.09(3H,2’C-CH3),2.52(1H,10-H),1.91(1H,10-H);13C-NMR(100MHz,CD3OD.)δppm:17.1(C2-CH3),30.9(10-C),31.6(5’-C),56.0(11-C),57.8(4’-C),73.2(9-C),108.9(9’-C),114.7(7’-C),115.3(6’α-C),117.8(8’-C),122.3(2-C),127.2(6’-C),128.2(6-C,8-C),128.5(7-C),130.5(5’α-C),131.2(2’α-C),133.1(5-C),162.7(8α-C),164.2(C=O)。根据以上光谱数据,鉴定其结构并命名为nigelastrine 2。
本发明的另一目的是提供了骆驼蓬属植物种子中总生物碱提取物及其有效单体成分的制备方法,该方法包括下列步骤:
(一)制备总生物碱提取物:
(1)取骆驼蓬种子粉碎,加骆驼蓬种子8—10倍量w/v70%—90%的乙醇加热回流提取1—3次,每次2小时,过滤,合并滤液;
(2)在常压下或减压(压力-0.08—-0.1MPa),温度40-50℃条件下回收滤液中的乙醇至相对密度1.1—1.3的稠膏;
(3)趁热减压(温度40—50℃,压力-0.08—-0.1MPa)或趁热搅拌或超声溶解下加入1—3倍量药材重量的2-10%盐酸酸化(pH1—2)捏溶,冷却至室温,过滤;
(4)滤液加入浓氨水碱化,使pH值9.0—11.0,室温静置24小时,析出沉淀;
(5)沉淀经过滤后经减压(温度60—80℃、压力-0.08—-0.1MPa)或喷雾干燥(温度60—80℃)后即得总生物碱提取物。
(6)上述步骤(4)氨水碱化后的滤液,经大孔吸附树脂进一步吸附纯化制得主要成分为去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱不同比例的总生物碱含量在50%以上的提取物。其最佳条件:吸附pH值为9,吸附温度为30℃,上样流速为1.5BV·h-1,HAL饱和上样量为32.34mg·g-1;洗脱溶剂为70%乙醇,洗脱流速为1.5BV·h-1,洗脱用量为16.7BV。所述的大孔吸附树脂的型号为D101、LSA-21、LSA-10、LAS-8b、LSA-5b、XDA-1及其它类似型号和性质的树脂。其中以LSA-5b的效果最佳。
(二)有效单体成分的分离:
取上述步骤(5)制备的总生物碱14g,硅藻土拌样上硅胶柱,氯仿-甲醇(20∶1;10∶1;5∶1;1∶1;0∶1)梯度洗脱得不同流份A、B、C、D、E。流份A再经凝胶柱层析和薄层制备法及甲醇重结晶分离得到化合物1;流份B再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物2、3、4、5、6;流份C再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物7;流份D再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物8;流份E再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物9和化合物10。
本发明人利用波谱技术鉴定了上述10个化合物的结构,分别为化合物1(鸭嘴花酮碱,vasicinone)、化合物2(鸭嘴花碱,vasicine)、化合物3(去氢骆驼蓬碱,harmine)、化合物4(脱氧鸭嘴花酮碱,deoxyvasicinone)、化合物5(脱氧鸭嘴花碱,deoxyvasicine)、化合物6(骆驼蓬碱,harmaline)、化合物7(哈尔醇,harmol)、化合物8(哈马酚,harmalol)、化合物9(nigelastrine 1)、化合物10(nigelastrine 2)。其中nigelastrine 1和nigelastrine 2为新化合物。
本发明方法所述步骤(3)中“趁热减压(或趁热搅拌或超声溶解)下加入2-10%盐酸酸化捏溶”是关键步骤之一,可确保有效成分的充分溶解,并避免使用有机溶剂进行脱脂。
所述步骤(4)中“滤液加入氨水碱化使pH值9.0—11.0”是关键步骤之二,可以保证生物碱充分析出沉淀,提高产率。
所述步骤(6)的大孔吸附树脂法制备骆驼蓬总生物碱的的最佳条件是:最佳吸附pH值为9,最佳吸附温度为30℃,最佳上样流速为1.5BV·h-1,HAL饱和上样量为32.34mg·g-1;最佳的洗脱溶剂为70%乙醇,最佳洗脱流速为1.5BV·h-1,洗脱用量为16.7BV。所述的大孔吸附树脂的型号为D101、LSA-21、LSA-10、LAS-8b、LSA-5b、XDA-1及其它类似型号和性质的树脂。其中以LSA-5b的效果最佳。可进一步制得主要成分为去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱不同比例的总生物碱提取物,总生物碱含量在50%以上。大孔树脂适用于生产中富集纯化骆驼蓬总生物碱。
本发明方法得到的总生物碱主要含有去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱;其中去氢骆驼蓬碱的含量为41-59%,提取率达到38-86%;骆驼蓬碱的含量为12-24%,提取率达到16-50%。以两种生物碱之和为总生物碱计,总生物碱的提取率为30-70%,总生物碱的含量为50-83%。其中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的比例分别为0.18∶1—4.30∶1。
本发明方法使用无毒溶剂,操作流程简洁方便,提取结果较为理想,适合工业化生产。
本发明的又一目的在于提供骆驼蓬属植物种子总生物碱提取物及其有效单体成分在制备抗乙酰胆碱酯酶活性药物与治疗神经退行性疾病(帕金森氏症、抑郁症和老年痴呆症等)药物中的应用。
所述骆驼蓬属植物种子总生物碱提取物及其有效单体成分包括去氢驼骆蓬碱(harmine)、骆驼蓬碱(harmaline)、鸭嘴花碱(vasicine)、脱氧鸭嘴花碱(deoxyvasicine)、鸭嘴花酮碱(vasicinone)、脱氧鸭嘴花酮碱(deoxyvasicinone)、哈马酚(harmalol)、哈尔醇(harmol)、nigelastrine 1(新化合物)和nigelastrine 2(新化合物)等成分。其中以去氢驼骆蓬碱(harmine)和骆驼蓬碱(harmaline)的乙酰胆碱酯酶抑制活性最强,哈马酚(harmalol)、哈尔醇(harmol)、新化合物nigelastrine 1和nigelastrine 2次之。鸭嘴花碱(vasicine)、脱氧鸭嘴花碱(deoxyvasicine)、鸭嘴花酮碱(vasicinone)、脱氧鸭嘴花酮碱(deoxyvasicinone)较差。新化合物nigelastrine 1和nigelastrine 2分别是骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱与鸭嘴花酮碱缩合的二聚体,具有明显的结构特征。
由本发明上述1个或2个或多个化合物与药学上可以接受的载体或其它适宜的赋型剂相结合,按照常规方法制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的注射剂或其它剂型,可以在临床上用于抗乙酰胆碱酯酶活性药物与治疗神经退行性疾病(帕金森氏症、抑郁症和老年痴呆症等)的治疗。
本发明通过薄层色谱-生物自显影技术对骆驼蓬(P.harmala L.)或多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)或骆驼蒿(P.nigelastrum Beg.)的种子中具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的化合物进行了研究,并对不同的提取物和化合物抗乙酰胆碱酯酶的活性进行了评价。结果显示了由骆驼蓬(P.harmala L.)或多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)或骆驼蒿(P.nigelastrum Beg.)的种子制备的去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱比例分别为0.18∶1—4.30∶1的总生物碱提取物及其有效单体成分按任意比例配伍组成的混合物可作为活性成分在制备抗乙酰胆碱酯酶活性药物与神经退行性疾病(帕金森氏症、抑郁症和老年痴呆症等)治疗中的应用。
附图说明
图1骆驼蓬、多裂骆驼蓬、大籽骆驼蒿(sp)和骆驼蒿单体成分的薄层色谱—生物自显影图(可见光下检视)。S:由上至下分别为a:去氢骆驼蓬碱;d:骆驼蓬碱;1:骆驼蓬(P060901);2:骆驼蓬(P060809);3:骆驼蓬(P060801);4:多裂骆驼蓬(D060824);5:多裂骆驼蓬(D060828);6:多裂骆驼蓬(D060906);7:大籽骆驼蒿(sp)(H(sp)060906);8:大籽骆驼蒿(sp)(H(sp)060902);9:大籽骆驼蒿(sp)(H(sp)060827);10:骆驼蒿(H060906);11:骆驼蒿(H060903);12:骆驼蒿(H060905);
图2.单体化合物乙酰胆碱酯酶抑制作用的最低检测限测定
(a:加兰他敏;b:鸭嘴花酮碱;c:鸭嘴花碱;d:去氢骆驼蓬碱;e:脱氧鸭嘴花酮碱;f:脱氧鸭嘴花碱;g:骆驼蓬碱;h:哈尔醇;i:哈马酚;j:nigelastrine1;k:nigelastrine2;1:H-fei-e;C1:1mol/L;C2:0.1mol/L;C3:0.01mol/L;C4:0.001mol/L;C5:0.0001mol/L);
图3.骆驼蓬(P.harmala Linn)(a);多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)(b);大籽骆驼蒿(P.nigellastrum Bunge)(c)和骆驼蒿(P.nigellastrum Bunge)(d)的HPLC指纹图谱。化合物识别:峰2:鸭嘴花碱酮碱;峰3:脱氧鸭嘴花碱酮碱;峰8:脱氧鸭嘴花碱;峰10:鸭嘴花碱(+);峰11:鸭嘴花碱(-);峰13:哈马酚;峰16:哈尔醇;峰18:哈尔满;峰19:nigelastrine 1;峰20:nigelastrine 2;峰21:骆驼蓬碱;峰22:脱氢骆驼蓬碱
具体实施方式
实施例1、骆驼蓬(P.harmala L.)种子制备总生物碱提取物
取骆驼蓬种子粉碎成粗粉,取50g分别按表1中的条件加入8倍药材量(W/W)70—90%的乙醇加热回流提取1-3次,每次2小时,过滤,合并滤液,回收乙醇至稠膏,趁热减压(或趁热搅拌或超声溶解)下加入1、2、3倍于药材重量的2-10%盐酸酸化(pH值1.0—2.0)捏溶,冷却过滤,滤液加入氨水碱化使pH值9.0—11.0,沉淀经过滤后减压(真空、喷雾)干燥即得主要含有不同比例的脱氢骆驼蓬碱与骆驼蓬碱的总生物碱提取物(见下表1)。最优工艺为:取骆驼蓬种子粉碎,加8倍量85%的乙醇加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液,回收乙醇至稠膏,趁热减压(或趁热搅拌或超声溶解)下加入10%盐酸酸化捏溶,冷却过滤,滤液加入氨水碱化使pH值=11.0,沉淀经过滤后减压(真空、喷雾)干燥即得。实验10为最佳工艺,结果见表1。
表1 骆驼蓬总生物碱提取物的制备(n=3)
表中HAL为骆驼蓬碱,HAR为去氢骆驼蓬碱,总碱含量为两者之和。
实施例2、多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)和骆驼蒿(P.nigelastrum Beg.)种子总生物碱提取物的制备
按照实例1所述的最佳工艺,取50g多裂骆驼蓬种子粉碎,加8倍量85%的乙醇加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液,回收乙醇至稠膏,趁热减压(或趁热搅拌或超声溶解)下加入10%盐酸酸化捏溶,冷却过滤,滤液加入氨水碱化使pH值=11.0,沉淀经过滤后减压(真空、喷雾)干燥即得。制备得到多裂骆驼蓬(P.multisectum(Maxim.)Bobr)种子总生物碱提取物,结果见表2。
表2 多裂骆驼蓬总生物碱提取物的制备
按照实例1所述的最佳工艺,取骆驼蒿种子粉碎,加8倍量85%的乙醇加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液,回收乙醇至稠膏,趁热减压(或趁热搅拌或超声溶解)下加入10%盐酸酸化捏溶,冷却过滤,滤液加入氨水碱化使pH值=11.0,沉淀经过滤后减压(真空、喷雾)干燥即得。制备得到骆驼蒿(P.nigelastrumBeg.)种子总生物碱提取物,结果见表3。
表3 骆驼蒿总生物碱提取物的制备
实施例3、骆驼蓬总生物碱提取物中单体成分的分离与制备
取总生物碱14g,硅藻土拌样上硅胶柱,氯仿-甲醇(20∶1;10∶1;5∶1;1∶1;0∶1)梯度洗脱得不同流份A、B、C、D、E。流份A再经凝胶柱层析和薄层制备法及甲醇重结晶分离得到化合物1;流份B再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物2、3、4、5、6;流份C再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物7;流份D再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物8;流份E再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物9和化合物10。利用波谱技术参考文献鉴定了10个化合物的结构,分别为化合物1(鸭嘴花酮碱,vasicinone)、化合物2(鸭嘴花碱,vasicine)、化合物3(去氢骆驼蓬碱,harmine)、化合物4(脱氧鸭嘴花酮碱,deoxyvasicinone)、化合物5(脱氧鸭嘴花碱,deoxyvasicine)、化合物6(骆驼蓬碱,harmaline)、化合物7(哈尔醇,harmol)、化合物8(哈马酚,harmalol)、化合物9(nigelastrine 1)、化合物10(nigelastrine 2)。其中nigelastrine 1和nigelastrine 2为新化合物。
实施例4、骆驼蓬对乙酰胆碱酯酶的抑制作用
分别取骆驼蓬、多裂骆驼蓬和骆驼蒿种子样品,粉碎成细粉。分别称取粉末各0.05g,加入15ml甲醇,超声20min,过滤,5000min-1离心10min,取上清液作为供试品溶液。
吸取样品溶液各1.0μl,分别点于同一硅胶薄层板上。吸取去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的混合对照品溶液2μl,点于同一硅胶薄层板上。以乙酸乙酯-甲醇-氨水(10:1.5:0.5)为展开剂,展开、取出、干燥。薄层板C应用薄层色谱-生物自显影技术:将TLC板浸入装有0.05mol/L(pH=7.8)的Tris酶缓冲液的表面器皿中,取出,适当干燥。然后将TLC板放置在37℃的水槽中保温20分钟。将已浸过乙酰胆碱酯酶的TLC板再在5mlα-乙酸萘酯与20ml Fast Blue B Salt的混合溶液中浸板后,取出,适当干燥。TLC板在1~2min后显示紫色的背景,可见光下检视,拍摄照片见图1。
从图1中可以看出,去氢骆驼蓬碱(a)和骆驼蓬碱(d)是骆驼蓬药材的主要抗乙酰胆碱酯酶活性成分,其它生物碱亦显示出了抗乙酰胆碱酯酶活性。
实施例5、骆驼蓬提取物单体成分对乙酰胆碱酯酶的抑制作用
分别称取阳性对照药加兰他敏及从骆驼蓬中分离得到的化合物:鸭嘴花酮碱、鸭嘴花碱、去氢骆驼蓬碱、脱氧鸭嘴花酮碱、脱氧鸭嘴花碱、骆驼蓬碱、哈马酚、哈尔醇、新化合物nigelastrine 1、新化合物nigelastrine 2和化合物H-fei-e,加甲醇制成1mol/L的储备液。加甲醇进行稀释,分别制成0.1,0.01,0.001,0.0001mol/L的稀释液,在4℃保存。分别吸取上述化合物的不同浓度的系列样品溶液各1μl,点于同一薄层板上。薄层板应用薄层色谱-生物自显影技术,对各化合物的乙酰胆碱酯酶抑制活性的最低检测限进行测定和活性评价,在可见光下检视,拍摄照片见图2。
从图2可以看出,阳性对照药加兰他敏、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔醇对乙酰胆碱酯酶活性抑制作用的最低检测浓度均达到0.01mol/L,鸭嘴花碱、哈马酚的最低检测浓度达到0.1mol/L,鸭嘴花酮碱、脱氧鸭嘴花酮碱、脱氧鸭嘴花碱及新化合物nigelastrine 1、nigelastrine 2在1mol/L时显示出对乙酰胆碱酯酶的抑制活性,而化合物H-fei-e在浓度为1mol/L时没有表现出对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。实施例6骆驼蓬总生物碱提取物中单体成分的确证
取由骆驼蓬、多裂骆驼蓬和骆驼蒿种子制备得到的总生物碱提取物样品粉末0.1g,精密称定,置100mL具塞锥形瓶中,精密加入20%甲醇50mL,密塞,超声25min,放冷,静置,取上清液,以0.45μm的微孔滤膜滤过,即得,测定指纹图谱结果见图3。测定条件为:流动相为乙腈(A)-醋酸铵缓冲液(B),0min时4%A,70min时30%A的线性梯度;检测波长280nm;流速0.7mL·min-1,柱温30℃,理论塔板数按骆驼蓬碱计算应不低于2000。
从指纹图谱可以看出,骆驼蓬、多裂骆驼蓬和骆驼蒿的总生物碱提取物中均包含化合物1(鸭嘴花酮碱,vasicinone)、化合物2(鸭嘴花碱,vasicine)、化合物3(去氢骆驼蓬碱,harmine)、化合物4(脱氧鸭嘴花酮碱,deoxyvasicinone)、化合物5(脱氧鸭嘴花碱,deoxyvasicine)、化合物6(骆驼蓬碱,harmaline)、化合物7(哈尔醇,harmol)、化合物8(哈马酚,harmalol)、化合物9(nigelastrine 1)和化合物10(nigelastrine 2)。
Claims (10)
2、一种如权利要求1所述的骆驼蓬属种子中总生物碱提取物及其单体成分的制备方法,其特征在于该方法包括下列步骤:
(一)制备总生物碱提取物:
(1)取骆驼蓬种子粉碎,加骆驼蓬种子8—10倍量w/v70%—90%的乙醇加热回流提取1—3次,每次2小时,过滤,合并滤液;
(2)常压下或减压压力-0.08—-0.1MPa,温度40-50℃条件下,回收滤液中的乙醇至相对密度1.1—1.3的稠膏;
(3)趁热减压温度40—50℃,压力-0.08—-0.1Mpa或趁热搅拌或超声溶解下加入1—3倍量药材重量的2-10%盐酸酸化pH1—2、捏溶,冷却至室温,过滤;
(4)滤液加入浓氨水碱化,使pH值9.0—11.0,室温静置24小时,析出沉淀;
(5)沉淀经过滤后经减压温度60—80℃、压力-0.08—-0.1MPa或温度60—80℃喷雾干燥后,即得总生物碱提取物;
(二)单体成分的分离:
取上述步骤(5)制备的总生物碱,硅藻土拌样上硅胶柱,氯仿-甲醇20∶1;10∶1;5∶1;1∶1;0∶1(V/V)梯度洗脱得不同流份A、B、C、D、E;流份A再经凝胶柱层析和薄层制备法及甲醇重结晶分离得到化合物1;流份B再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物2、3、4、5、6;流份C再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物7;流份D再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物8;流份E再经凝胶柱层析和薄层制备法分离并经甲醇重结晶得到化合物9和化合物10。
3、根据权利要求2的制备方法:其特征在于所述步骤(4)氨水碱化后的滤液,经大孔吸附树脂进一步吸附纯化制得主要成分为去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱不同比例的总生物碱含量在50%以上的提取物;其吸附纯化条件:吸附pH值为9,吸附温度为30℃,上样流速为1.5BV·h-1,HAL饱和上样量为32.34mg·g-1;洗脱溶剂为70%乙醇,洗脱流速为1.5BV·h-1,洗脱用量为16.7BV。
4、根据权利要求3的方法:其特征在于所述大孔吸附树脂为D101、LSA-21、LSA-10、LAS-8b、LSA-5b或XDA-1。
5、根据权利要求3的方法:其特征在于所述大孔吸附树脂为LSA-5b。
6、根据权利要求1所述的一种骆驼蓬属种子中总生物碱提取物及其单体成分,其特征在于所述骆驼蓬属植物种子为骆驼蓬、多裂骆驼蓬或骆驼蒿的种子。
7、根据权利要求2所述的一种骆驼蓬属种子中总生物碱提取物及其单体成分的制备方法,其特征在于所述制得的总生物碱提取物中总生物碱的含量为50-83%;其中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱比例分别为0.18∶1—4.30∶1。
8、一种如权利要求1所述骆驼蓬属种子中总生物碱提取物在制备抗乙酰胆碱酯酶活性药物与神经退行性疾病治疗药物中的应用,其特征在于所述总生物碱提取物作为活性成分与药学上可以接受的载体相结合制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的注射剂或其它剂型。
9、一种如权利要求1所述骆驼蓬属种子中总生物碱提取物的单体成分在制备抗乙酰胆碱酯酶活性药物与神经退行性疾病治疗药物中的应用,其特征在于所述单体成分为化合物1鸭嘴花酮碱、化合物2鸭嘴花碱、化合物3去氢骆驼蓬碱、化合物4脱氧鸭嘴花酮碱、化合物5脱氧鸭嘴花碱、化合物6骆驼蓬碱、化合物7哈尔醇、化合物8哈马酚、化合物9nigelastrine 1、化合物10nigelastrine 2的1个或2个或多个化合物作为活性成分与药学上可以接受的载体相结合,按照常规方法制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的注射剂或其它剂型。
10、根据权利要求8或9的应用,其特征在于所述神经退行性疾病治疗药物为帕金森氏症、抑郁症或老年痴呆症治疗药物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200810203383 CN101433565B (zh) | 2008-11-26 | 2008-11-26 | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物和它们的制备 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 200810203383 CN101433565B (zh) | 2008-11-26 | 2008-11-26 | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物和它们的制备 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101433565A true CN101433565A (zh) | 2009-05-20 |
CN101433565B CN101433565B (zh) | 2013-06-05 |
Family
ID=40708307
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 200810203383 Active CN101433565B (zh) | 2008-11-26 | 2008-11-26 | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物和它们的制备 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101433565B (zh) |
Cited By (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102603732A (zh) * | 2011-01-25 | 2012-07-25 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种去氢骆驼蓬碱的制备方法 |
CN102636612A (zh) * | 2012-05-14 | 2012-08-15 | 上海中医药大学 | 一种分析骆驼蓬草中有效成分的方法 |
CN102980969A (zh) * | 2012-11-27 | 2013-03-20 | 上海中医药大学 | 一种脂肪酶抑制剂的筛选方法 |
CN103364519A (zh) * | 2012-03-31 | 2013-10-23 | 上海中医药大学 | 黄嘌呤氧化酶抑制剂和/或超氧阴离子清除剂的筛选方法 |
CN103417536A (zh) * | 2012-05-17 | 2013-12-04 | 复旦大学 | 哈尔醇在制备抗肿瘤药物中的应用 |
CN104230928A (zh) * | 2014-09-22 | 2014-12-24 | 石河子大学 | 一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法 |
CN104356138A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-02-18 | 上海中医药大学 | 一种鸭嘴花碱r型光学异构体及其制备方法和用途 |
CN104628731A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-20 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种微波辅助提取骆驼蓬生物碱的方法 |
CN104622919A (zh) * | 2015-01-16 | 2015-05-20 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种骆驼蓬的综合利用方法 |
CN105017259A (zh) * | 2015-06-08 | 2015-11-04 | 浙江大学 | 含有三氟甲基的喹唑啉酮衍生物及其制备方法和应用 |
CN105272986A (zh) * | 2015-06-15 | 2016-01-27 | 厦门医学高等专科学校 | 一种可抑制乙酰胆碱酯酶活性的化合物或其制备方法和应用 |
CN106719952A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-05-31 | 河池市金城江区科学技术情报研究所 | 提高桑树种子出芽率的浸种液及其制备方法 |
CN106797975A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-06-06 | 河池市金城江区科学技术情报研究所 | 用于桑树种子的多组分浸种液及其制备方法 |
CN107115446A (zh) * | 2017-04-17 | 2017-09-01 | 成都众宜坊农业开发有限公司 | 具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物及其制法和应用 |
CN107576740A (zh) * | 2017-09-13 | 2018-01-12 | 新疆维吾尔药业有限责任公司 | 检测骆驼蓬子中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的方法 |
CN109111452A (zh) * | 2018-07-06 | 2019-01-01 | 湖州展舒生物科技有限公司 | 鸭嘴花碱的制备方法 |
CN109232576A (zh) * | 2018-10-22 | 2019-01-18 | 信阳师范学院 | 7-取代脱氧鸭嘴花酮碱及其制备方法和应用 |
CN110755428A (zh) * | 2019-11-04 | 2020-02-07 | 五邑大学 | 骆驼蓬灵在制备降脂药物中的应用 |
CN113358528A (zh) * | 2021-06-08 | 2021-09-07 | 山东大学 | 一种基于悬滴法检测乙酰胆碱酯酶及其抑制剂的方法 |
CN114957292A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-30 | 江苏医药职业学院 | (±)-Peharmaline A衍生物及制备方法和应用 |
CN115417887A (zh) * | 2022-09-19 | 2022-12-02 | 延安大学 | 一种9-烷基双去氢骆驼蓬碱衍生物及其制备方法和应用 |
CN116751197A (zh) * | 2023-03-27 | 2023-09-15 | 中国科学院昆明植物研究所 | 卡波林生物碱或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用、卡波林生物碱药物组合物及应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19906975B4 (de) * | 1999-02-19 | 2004-04-15 | Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag | Arzneiform zur Behandlung von Alzheimer'scher Demenz |
DE10163667B4 (de) * | 2001-12-21 | 2006-10-26 | Hf Arzneimittelforschung Gmbh | Verwendung von Desoxypeganin zur Behandlung der klinischen Depression |
CN1250560C (zh) * | 2003-11-06 | 2006-04-12 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 骆驼蓬种子总生物碱的制备方法及应用 |
CN101229203A (zh) * | 2008-01-31 | 2008-07-30 | 新疆华世丹药物研究有限责任公司 | 一种骆驼蓬子有效部位及去氢骆驼蓬碱单体的制备方法及其用途 |
-
2008
- 2008-11-26 CN CN 200810203383 patent/CN101433565B/zh active Active
Cited By (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102603732A (zh) * | 2011-01-25 | 2012-07-25 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种去氢骆驼蓬碱的制备方法 |
CN103364519A (zh) * | 2012-03-31 | 2013-10-23 | 上海中医药大学 | 黄嘌呤氧化酶抑制剂和/或超氧阴离子清除剂的筛选方法 |
CN102636612A (zh) * | 2012-05-14 | 2012-08-15 | 上海中医药大学 | 一种分析骆驼蓬草中有效成分的方法 |
CN102636612B (zh) * | 2012-05-14 | 2013-12-11 | 上海中医药大学 | 一种分析骆驼蓬草中有效成分的方法 |
CN103417536A (zh) * | 2012-05-17 | 2013-12-04 | 复旦大学 | 哈尔醇在制备抗肿瘤药物中的应用 |
CN103417536B (zh) * | 2012-05-17 | 2015-08-26 | 复旦大学 | 哈尔醇在制备抗肿瘤药物中的应用 |
CN102980969A (zh) * | 2012-11-27 | 2013-03-20 | 上海中医药大学 | 一种脂肪酶抑制剂的筛选方法 |
CN104230928B (zh) * | 2014-09-22 | 2016-03-09 | 石河子大学 | 一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法 |
CN104230928A (zh) * | 2014-09-22 | 2014-12-24 | 石河子大学 | 一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法 |
CN104356138A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-02-18 | 上海中医药大学 | 一种鸭嘴花碱r型光学异构体及其制备方法和用途 |
CN104622919A (zh) * | 2015-01-16 | 2015-05-20 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种骆驼蓬的综合利用方法 |
CN104622919B (zh) * | 2015-01-16 | 2017-11-24 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种骆驼蓬的综合提取方法 |
CN104628731A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-20 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种微波辅助提取骆驼蓬生物碱的方法 |
CN104628731B (zh) * | 2015-01-27 | 2017-02-22 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 一种微波辅助提取骆驼蓬生物碱的方法 |
CN105017259A (zh) * | 2015-06-08 | 2015-11-04 | 浙江大学 | 含有三氟甲基的喹唑啉酮衍生物及其制备方法和应用 |
CN105017259B (zh) * | 2015-06-08 | 2017-07-21 | 浙江大学 | 含有三氟甲基的喹唑啉酮衍生物及其制备方法和应用 |
CN105272986A (zh) * | 2015-06-15 | 2016-01-27 | 厦门医学高等专科学校 | 一种可抑制乙酰胆碱酯酶活性的化合物或其制备方法和应用 |
CN106797975A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-06-06 | 河池市金城江区科学技术情报研究所 | 用于桑树种子的多组分浸种液及其制备方法 |
CN106719952A (zh) * | 2016-11-30 | 2017-05-31 | 河池市金城江区科学技术情报研究所 | 提高桑树种子出芽率的浸种液及其制备方法 |
CN107115446A (zh) * | 2017-04-17 | 2017-09-01 | 成都众宜坊农业开发有限公司 | 具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物及其制法和应用 |
CN107576740A (zh) * | 2017-09-13 | 2018-01-12 | 新疆维吾尔药业有限责任公司 | 检测骆驼蓬子中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的方法 |
CN109111452A (zh) * | 2018-07-06 | 2019-01-01 | 湖州展舒生物科技有限公司 | 鸭嘴花碱的制备方法 |
CN109232576B (zh) * | 2018-10-22 | 2020-07-17 | 信阳师范学院 | 7-取代脱氧鸭嘴花酮碱及其制备方法和应用 |
CN109232576A (zh) * | 2018-10-22 | 2019-01-18 | 信阳师范学院 | 7-取代脱氧鸭嘴花酮碱及其制备方法和应用 |
CN110755428A (zh) * | 2019-11-04 | 2020-02-07 | 五邑大学 | 骆驼蓬灵在制备降脂药物中的应用 |
CN113358528A (zh) * | 2021-06-08 | 2021-09-07 | 山东大学 | 一种基于悬滴法检测乙酰胆碱酯酶及其抑制剂的方法 |
CN114957292A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-30 | 江苏医药职业学院 | (±)-Peharmaline A衍生物及制备方法和应用 |
CN114957292B (zh) * | 2022-05-11 | 2023-06-23 | 江苏医药职业学院 | (±)-Peharmaline A衍生物及制备方法和应用 |
CN115417887A (zh) * | 2022-09-19 | 2022-12-02 | 延安大学 | 一种9-烷基双去氢骆驼蓬碱衍生物及其制备方法和应用 |
CN115417887B (zh) * | 2022-09-19 | 2024-02-13 | 延安大学 | 一种9-烷基双去氢骆驼蓬碱衍生物及其制备方法和应用 |
CN116751197A (zh) * | 2023-03-27 | 2023-09-15 | 中国科学院昆明植物研究所 | 卡波林生物碱或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用、卡波林生物碱药物组合物及应用 |
CN116751197B (zh) * | 2023-03-27 | 2024-04-12 | 中国科学院昆明植物研究所 | 卡波林生物碱或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用、卡波林生物碱药物组合物及应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101433565B (zh) | 2013-06-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101433565B (zh) | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物和它们的制备 | |
CN101849994B (zh) | 一种博落回提取物的制备方法 | |
EP3412679B1 (en) | Baicalin magnesium, preparation method thereof and application of same | |
CN101322758B (zh) | 利用复合酶生产酸枣仁提取物的方法 | |
CN105622517B (zh) | 一种同时从紫山药中提取色素、多糖、尿囊素的方法 | |
CN103087211A (zh) | 降低三七多糖灰分含量的方法 | |
CN102836202A (zh) | 一种甘草地上部分综合开发利用的方法 | |
EP2650301B1 (en) | Method for preparing albiflorin and paeoniflorin | |
CN101884655B (zh) | 一种三七花提取物的制备方法 | |
CN107445952B (zh) | 一种提取格兰地新和黄连碱的方法和应用 | |
CN102397267B (zh) | 一种制备盐酸青藤碱巴布剂的方法 | |
CN104311616B (zh) | 一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法 | |
CN102617583A (zh) | 一种快速从博落回中提取分离五种生物碱的新方法 | |
CN109265494B (zh) | 从滇山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法 | |
CN109776515A (zh) | 从扁桃叶中提取芒果苷的方法 | |
CN109912582A (zh) | 从芒果叶中提取芒果苷的方法 | |
CN113354697B (zh) | 一种分离纯化柳穿鱼叶苷和蒙花苷的方法 | |
Applezweig | Cinchona alkaloids prepared by ion exchange | |
CN101967505A (zh) | 一种二氢槲皮素的制备方法 | |
CN105037313B (zh) | 一种分离杨梅树皮中杨梅苷和儿茶素类化合物的方法 | |
CN102836280A (zh) | 枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法 | |
CN102327324A (zh) | 一种桑叶总碱提取物及其制备方法和其用途 | |
CN102786472B (zh) | 利用超临界萃取-结晶技术提取分离千层塔及其毛状根中石杉碱甲的方法 | |
CN106932499B (zh) | 一种藏药材酸藤果的检测方法 | |
CN109970838A (zh) | 一种长梗冬青苷的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |