CN107115446A - 具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物及其制法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了提供具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物及其制法和应用,解决了现有技术中没有对重楼生物碱类成分的制备及利用的技术问题。该提取物由重楼药材经酸性溶液提取后,再碱化沉淀,将所述沉淀溶解上大孔树脂,用醇洗脱制得。该提取物的制备方法包括以下步骤:重楼药材加入酸性水溶液浸泡后加热提取,过滤,调节滤液的pH值至碱性,离心,收集沉淀;将沉淀加乙醇溶解,加入大孔吸附树脂吸附,然后依次用水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂柱,收集70%乙醇洗脱液;浓缩,低温干燥,即得。该提取物在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明工艺简便,操作简便,所得提取物抗肿瘤效果确切。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物及其制法和应用。
背景技术
重楼原名蚤休,始载于《神农本草经》,列为下品。重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花Parispolyphylla Smith var,chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎。秋季采挖,除去须根,洗净,晒干。主产于云南,四川、广西、陕西、江西、江苏等省区。重楼味苦,性微寒;有小毒。归肝经。具有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊的作用,用于疔疮痈肿,咽喉肿痛,毒蛇咬伤,跌扑伤痛,惊风抽搐。
重楼药材呈结节状扁圆柱形,略弯曲,长5~12cm,直径1.0~4.5cm。表面黄棕色或灰棕色,外皮脱落处呈白色;密具层状突起的粗环纹,一面结节明显,结节上具椭圆形凹陷茎痕,另一面有疏生的须根或疣状须根痕。顶端具鳞叶和茎的残基。质坚实,断面平坦,白色至浅棕色,粉性或角质。气微,味微苦、麻。
现代研究表明,重楼含有多种化学成分,主要为甾体皂苷类成分,约占总化合物数目的80%,并含有氨基酸、甾酮、蜕皮激素、黄酮苷等化合物。重楼具有抑制肿瘤及其减轻癌性疼痛的作用,其发挥作用的是皂苷类成分。未有研究表明重楼的生物碱类成分的生理活性。
因此,提供重楼生物碱类成分的抗肿瘤研究,为其综合利用提供依据,成为了本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是:提供具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物,解决了现有技术中没有对重楼生物碱类成分的制备及利用的技术问题。
本发明还提供了具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物的制备方法。
本发明的第三个目的在于提供重楼生物碱的提取物在制备具有抗肿瘤作用的药物中的应用。
本发明所述的具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物,该提取物由重楼药材经酸性溶液提取后,再碱化沉淀,将所述沉淀溶解上大孔树脂,用醇洗脱制得。
本发明所述的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:取重楼药材,加入酸性水溶液,浸泡后,加热提取,过滤,收集滤液备用;
步骤2:调节所述滤液的pH值至碱性,冷藏,静置,离心,收集沉淀,用水冲洗至洗出液呈中性;
步骤3:将洗涤至中性的沉淀加乙醇溶解后,加入大孔吸附树脂吸附24-48小时,过滤,收集大孔吸附树脂装柱,然后依次用水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液洗脱,收集70%乙醇洗脱液;
步骤4:将所述70%乙醇洗脱液浓缩,低温干燥,即得。
进一步地,取重楼药材,加入5倍药材质量的酸性水溶液,室温浸泡48-72小时后,于50-60℃加热提取3-5次,每次2-4小时,过滤,收集滤液备用;
进一步地,所述酸性水溶液为盐酸溶液,硫酸溶液,磷酸溶液中的一种,所述酸性水溶液中氢离子浓度为4-6mol/l。
进一步地,所述步骤2中调节滤液的PH值大于8。
进一步地,所述步骤2中调节滤液的PH值为10-14。
进一步地,所述大孔吸附树脂的型号为AB-8、D301或D201,其用量按每克重楼药材计,为0.02-0.04g。
进一步地,所述步骤3中的水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液的用量按每克重楼药材计为1-2ml,所述洗脱速度按每克大孔树脂计为0.2-0.4ml/min。
进一步地,所述步骤4中的低温干燥为冷冻干燥。
本发明所述的提取物在制备抗肿瘤药物中的用途。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明工艺简便,操作简便,所得提取物抗肿瘤效果确切。
本发明采用酸提碱沉法进行生物碱的提取与分离,再采用大孔吸附树脂进行吸附与分离,实现了重楼药材中生物碱的提取与纯化,工艺简单,操作简便,生产成本低,且对环境友好。
本发明所得提取物经药理试验结果表明,具有明显的抑制肿瘤作用,克服了只有重楼皂苷为重楼抑制肿瘤生长的技术偏见,为重楼的综合利用提供了依据。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,本发明的方式包括但不仅限于以下实施例。
实施例1
重楼生物碱提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:取重楼药材1000g,加入加入4mol/l盐酸溶液5000ml溶液,室温浸泡48小时后,于60℃加热提取5次,每次2小时,过滤,收集滤液备用;
步骤2:调节所述滤液的pH值为10-14,于4℃冷藏,静置24小时,离心,收集沉淀,用水冲洗至洗出液呈中性;
步骤3:将洗涤至中性的沉淀加乙醇溶解后,加入大孔吸附树脂40g吸附48小时,过滤,收集大孔吸附树脂装柱,然后依次用1000ml水、1000ml 30%乙醇水溶液、1000ml 50%乙醇水溶液、1000ml 70%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度按每克大孔树脂计为0.2ml/min收集70%乙醇洗脱液;
步骤4:将所述70%乙醇洗脱液浓缩冷冻干燥,得提取物24.5g。
实施例2
重楼生物碱提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:取重楼药材1000g,加入加入3mol/l硫酸溶液5000ml溶液,室温浸泡72小时后,于50℃加热提取3次,每次4小时,过滤,收集滤液备用;
步骤2:调节所述滤液的pH值为14,于4℃冷藏,静置48小时,离心,收集沉淀,用水冲洗至洗出液呈中性;
步骤3:将洗涤至中性的沉淀加乙醇溶解后,加入大孔吸附树脂20g吸附24小时,过滤,收集大孔吸附树脂装柱,然后依次用2000ml水、2000ml 30%乙醇水溶液、2000ml 50%乙醇水溶液、2000ml 70%乙醇水溶液洗脱,洗脱速度按每克大孔树脂计为0.4ml/min收集70%乙醇洗脱液;
步骤4:将所述70%乙醇洗脱液浓缩冷冻干燥,得提取物22.7g。
实施例3
重楼生物碱提取物的抗肿瘤作用。
受试样品:取实施例1所得提取物作为样品。
对照样品:阿霉素。
剂量选择与受试物给予方式:根据该样品的人体推荐用量,人口服推荐剂量为每人(成人)每日3次,每次50mg,成人体重按60kg计算,折合剂量为0.83mg/kgBW,设2.1mg/kgBW(低剂量组)、4.2mg/kgBW(中剂量组)、8.3mg/kgBW(高剂量组)(分别相当于人体推荐用量的2.5、5、10倍)剂量的试验组,同时设一个模型组对照组和一个空白对照组。
动物:SPF级BABLc小鼠,雌性,体重18.0-20.0g。
方法:将处于对数生长期的EMT-6细胞用0.25%的胰蛋白酶消化脱壁后,终止消化,加入RPMI-1640培养液,制成悬液,将悬液接种至小鼠左前肢腋窝皮下0.2ml/只,待肿瘤长到1cm3时剥离,剪碎,按比例加入生理盐水(1g:3ml),再在玻璃匀浆器内研磨,经80-100目筛网过滤制成单细胞悬液,用台盼蓝染色法计数活细胞数。将制备好的细胞悬液按0.2ml/只接种于50只BABLc小鼠左前腋窝下。小鼠随机分组,每组10只。试验药物分高、中、低组,对照药物组,空白模型组。于接种后的第二天开始给药,连续给药1周,于接种后第5天开始测量肿瘤体积,待模型组平均瘤重大于1.0g(瘤体积约为0.5cm3)时停止试验,处死小鼠并称重,剥取肿瘤,计算抑瘤率。
对EMT-6乳腺癌小鼠移植瘤体积的影响表
组别 | 5d | 6d | 7d | 8d | 9d |
样品低剂量 | 0.021±0.023 | 0.067±0.036** | 0.184±0.055** | 0.372±0.046** | 0.425±0.036** |
样品中剂量 | 0.030±0.019 | 0.074±0.041** | 0.215±0.074** | 0.399±0.051** | 0.439±0.048** |
样品高剂量 | 0.025±0.031 | 0.073±0.048** | 0.191±0.061** | 0.376±0.057** | 0.411±0.041** |
模型对照组 | 0.048±0.143 | 0.214±0.152 | 0.361±0.092 | 0.549±0.065 | 0.729±0.035 |
阳性对照组 | 0.009±0.029** | 0.026±0.021** | 0.108±0.077** | 0.247±0.099** | 0.366±0.058** |
注:**与模型组比较,P<0.01。
由上表可知,本发明具有抗肿瘤作用。
上述实施例仅为本发明的优选实施方式之一,不应当用于限制本发明的保护范围,但凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色,其所解决的技术问题仍然与本发明一致的,均应当包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.具有抗肿瘤作用的重楼生物碱的提取物,其特征在于:所述提取物由重楼药材经酸性溶液提取后,再碱化沉淀,将所述沉淀溶解上大孔树脂,用醇洗脱制得。
2.根据权利要求1所述的提取物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1:取重楼药材,加入酸性水溶液,浸泡后,加热提取,过滤,收集滤液备用;
步骤2:调节所述滤液的pH值至碱性,冷藏,静置,离心,收集沉淀,用水冲洗至洗出液呈中性;
步骤3:将洗涤至中性的沉淀加乙醇溶解后,加入大孔吸附树脂吸附24-48小时,过滤,收集大孔吸附树脂装柱,加入大孔吸附树脂吸附24-48小时,过滤,收集大孔吸附树脂装柱,然后依次用水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液洗脱,收集70%乙醇洗脱液;
步骤4:将所述70%乙醇洗脱液浓缩,低温干燥,即得。
3.根据权利要求2所述的提取物的制备方法,其特征在于:取重楼药材,加入5倍药材质量的酸性水溶液,室温浸泡48-72小时后,于50-60℃加热提取3-5次,每次2-4小时,过滤,收集滤液备用。
4.根据权利要求3所述的提取物的制备方法,其特征在于:所述酸性水溶液为盐酸溶液,硫酸溶液,磷酸溶液中的一种,所述酸性水溶液中氢离子浓度为4-6mol/l。
5.根据权利要求4所述的提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤2中调节滤液的PH值大于8。
6.根据权利要求5所述的提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤2中调节滤液的PH值为10-14。
7.根据权利要求6所述的提取物的制备方法,其特征在于:所述大孔吸附树脂的型号为AB-8、D301或D201,其用量按每克重楼药材计,为0.02-0.04g。
8.根据权利要求7所述的提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤3中的水、30%乙醇水溶液、50%乙醇水溶液、70%乙醇水溶液的用量按每克重楼药材计为1-2ml,所述洗脱速度按每克大孔树脂计为0.2-0.4ml/min。
9.根据权利要求8所述的的提取物的制备方法,其特征在于:所述步骤4中的低温干燥为冷冻干燥。
10.如权利要求1-9所述的提取物在制备抗肿瘤药物中的用途。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101361850A (zh) * | 2008-09-26 | 2009-02-11 | 广西医科大学 | 一种提取分离两面针总生物碱的方法 |
CN101433565A (zh) * | 2008-11-26 | 2009-05-20 | 上海中医药大学 | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物及其有效单体成分和它们的制备与应用 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101361850A (zh) * | 2008-09-26 | 2009-02-11 | 广西医科大学 | 一种提取分离两面针总生物碱的方法 |
CN101433565A (zh) * | 2008-11-26 | 2009-05-20 | 上海中医药大学 | 骆驼蓬属种子总生物碱提取物及其有效单体成分和它们的制备与应用 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
张亚茹等: "重楼活性化学成分与药理作用研究进展 ", 《亚太传统医药》 * |
张亚茹等: "重楼活性化学成分与药理作用研究进展", 《亚太传统医药》 * |
李立坤等: "天然植物中生物碱的提取及树脂法在其纯化中的应用", 《离子交换与吸附》 * |
李纯毅等: "生物碱的提取分离方法研究进展 ", 《内蒙古石油化工》 * |
李纯毅等: "生物碱的提取分离方法研究进展", 《内蒙古石油化工》 * |
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