CN101337891A - 一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物、其制备方法及医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类新的一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物(I)、其制备方法、含它们的药物制剂及其作为抗血栓和抗脑缺血药物的用途。其中R、A的定义见说明书。

Description

一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物、其制备方法及医药用途

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类新的一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物、其制备方法、含它们的药物制剂及其作为抗血栓和抗脑缺血药物的用途。

背景技术

脑缺血又称缺血性脑卒中、缺血性脑中风或脑缺血损伤，是一种高致死的疾病，发病机制非常复杂。丁基苯酞(3-n-butylphthalide，NBP，III)据报道能作用于该病的多个环节，主要表现为抗血栓作用和改善脑微循环作用。其抗血栓作用仅与阿司匹林相当，有待加强。临床上为了取得更好的治疗效果，其与抗血栓药物合并用药。2-(1-羟正戊基)苯甲酸是丁基苯酞的开环产物，具有和丁苯酞相似的药理活性。(ACTA.Pharmacol.Sin.1998，19，49-57；DrugDevelopment Research.2004，63，174-180.)

一氧化氮(NO)是一种广泛存在于人体各种组织和细胞中的信使分子，它具有多种生理活性，特别是对于维持心脑血管功能方面起着重要的作用。它能抑制血小板的黏附和聚集，发挥抗血小板作用预防血栓的形成，同时也有文献报道，NO对脑缺血的早期治疗是有益的，因此开发一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物对脑缺血的治疗存在着潜在价值。(Thromb Haemost.2004，91，1035-1043；Nitric Oxide.2006，15，114-124.)

发明内容

本发明设计、合成了一系列NO供体型丁基苯酞衍生物。即依据前药原理，在2-(1-羟正戊基)苯甲酸(IV)的羧基上通过引入具有抗氧化作用的阿魏酸、对羟基桂皮酸等作为连接基团，拼接上NO供体。该类化合物在体内能释放出NO和丁基苯酞，增强抗脑缺血作用。并且，本发明还在2-(1-羟正戊基)苯甲酸的结构中引入含氮的碱性基团，可以和一般的可药用的酸成盐，使整个分子具有一定的水溶性，易于做成各种剂型。初步的药理试验显示本发明的NO供体型丁基苯酞衍生物具有明显抗血栓作用，并对其进一步研究了对脑缺血的治疗作用。

本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中：

A代表C₂～C₈烷基、C₂～C₈烯烃基、C₂～C₈炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂环或取代芳杂环。其中所述取代苯基是指被1个或多个选自于羟基、C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基、-CH＝CHCOO(CH₂)_n n＝2～6取代的苯基，各取代基可以相同或不同。所述芳杂基是指1至4个杂原子的5至7元芳香环，所述杂原子独立的选自O、S或N；所述取代芳杂基可任选1个或多个选自于C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基或卤素取代，各取代基可以相同或不同。

R代表二甲胺、二乙胺、吡咯、哌啶、吗啡啉、哌嗪、N-甲基哌嗪、N-乙基哌嗪、N-异丙基哌嗪、N-苯基哌嗪、N-苄基哌嗪、N-叔丁氧羰基哌嗪。

本发明优选的化合物为：A代表

n＝3～6或

n＝3～6，R代表二乙胺、吡咯、哌啶、吗啡啉、N-甲基哌嗪。

上述所述药学上可接受的盐主要指的是酸加成盐，这些酸可和通式(I)化合物加合成盐。所述酸是药学上可接受的酸包括但不限于下列酸：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸。

根据本发明，本发明化合物可根据以下反应路线制备：

上述反应式中R₁代表CH₃O或H；X代表Cl或Br；R₂代表C₂～C₈烷基、C₂～C₈烯烃基、C₂～C₈炔烃基；Y代表Cl，Br或OH；R₃代表1个或多个选自于羟基、C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基，各取代基可以相同或不同；A，R及n的定义如前。

该方法主要包括以下步骤：

邻甲酰基苯甲酸经格式试剂n-BuMgBr加成后，再用10％的盐酸溶液酸化，生成丁基苯酞(III)。化合物III再经皂化反应，在-10℃～0℃剧烈搅拌条件下用5％的盐酸溶液酸化至pH 2-3，析出白色固体用乙醚溶解，水层用乙醚萃取，合并有机层，0℃以下干燥，过滤，浓缩，以三乙胺和DMAP为缚酸剂，与氯乙酰氯在0℃以下反应得化合物V。化合物V在DCC，DMAP的作用下与通式II化合物脱水得到通式VI化合物，VI与硝酸银反应得通式VII化合物，VII以DMF为溶剂，室温下与相应的胺类反应得目标化合物I。

化合物V与含C₂～C₈烷基、C₂～C₈烯烃基、C₂～C₈炔烃基的二溴化物、二氯化物或二元醇反应得通式VIII化合物，VIII再经硝化反应得通式IX化合物，IX以DMF为溶剂，室温下与相应的胺类反应得目标化合物I。

化合物V与含有Cl，Br或OH同时有1个或多个选自于C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基，各取代基可以相同或不同的苯酚衍生物反应得通式X化合物，X再经硝化反应得通式XI化合物，XI以DMF为溶剂，室温下与相应的胺类反应得目标化合物I。

其中通式II化合物的制备为参考文献方法获得(Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters.2007，17，2979-2982.)。

产物I与药学上可用的酸加成盐即得通式I化合物的药学上可接受的盐。

根据本发明，中间体2-(1-氯乙酰氧正戊基)苯甲酸(V)还可根据以下反应路线制备(“一锅”反应)：

该方法主要包括以下步骤：

邻甲酰基苯甲酸经格式试剂n-BuMgBr加成后，直接滴加氯乙酰氯的乙醚溶液，室温搅拌2～8h后，蒸干乙醚，加四氢呋喃和10％盐酸的混合溶剂室温搅拌1～3h，减压蒸除THF，乙醚萃取，干燥，浓缩，柱层析得化合物V。

以下是本发明部分化合物的药理学实验及数据：

1、材料：

1.1实验动物

清洁级SD大鼠动物合格证：SCXK(苏)-2007-0001

1.2药物与试剂

ADP钠盐：Amersco公司进口分装；

肝素：Sigma公司进口分装；

TTC：国药集团化学试剂有限公司，批号：E20040922；

水合氯醛：国药集团化学试剂有限公司，批号：T20070403；

DMSO：上海凌峰化学试剂有限公司，批号：060727；

生理盐水：国营张家港市制药厂，批号：06062101。

1.3仪器：

QX-200全血血小板聚集仪：上海医大仪器厂；

电子天平：北京赛多利斯天平有限公司；

GZX-9030MBE型电热恒温鼓风干燥箱：上海博讯实业有限公司医疗设备厂。

1.4主要溶液配制

(1)抗血小板聚集试验用缓冲液：NaCl 8.0、MgCl₂·6H₂O 0.427g、CaCl₂ 0.2g、KCl 0.2g、D-Glu1.0g、NaHCO₃ 1.5g、NaH₂PO₄·2H₂O 0.065g、肝素2000U、0.1％迭氮钠1ml，用蒸馏水充分溶解，定容至1000mL，4℃保存备用。

(2)聚集剂ADP：精密称取1.7mgADP钠盐充分溶解于4ml上述缓冲液中。

(3)抗凝剂肝素：精密称取0.8mg肝素充分溶解于6ml生理盐水中。

(4)PBS缓冲液：NaCl 8.00g、KCl 0.20g、NaHPO₄·12H₂O 3.49g KH₂PO₄ 0.20g，用蒸馏水充分溶解，定容至1000mL，4℃保存备用。

(5)染色剂TTC：称取0.4g TTC充分溶解于10ml上述PBS缓冲液中，避光保存。

(6)受试化合物：用DMSO溶解，加生理盐水稀释至所需浓度。

2、方法与结果

2.1体外抗全血血小板聚集试验

2.1.1试验方法

将大鼠麻醉后颈动脉采血，以肝素(终浓度20μmol/ml)抗凝。开机预热30分钟，校正仪器。抗凝全血静置一小时后取0.5ml，缓慢注入装有0.5ml缓冲液的硅化试管中。加入20μlAsprin、NBP或受试药后(终浓度为50μM)，37℃孵育。5min后把搅拌珠放入试管，开始搅拌，并将电极插入试管，调零。将5μl聚集诱导剂ADP溶液(终浓度为5μM)加入试管血样中，同时进行测定。观察并记录5min内最大的电阻值，即为血小板聚集值。

2.2.2结果

数据均用均值±标准差(x±s)表示。用t检验进行组间显著性检验。p＜0.05表示有显著性差异，p＜0.01表示有非常显著性差异(下同)。

目标化合物体外抗血小板聚集试验结果见表1。由数据可知，本发明的NO供体型丁基苯酞衍生物均具有抗血小板聚集活性，其中I₃、I₄的活性明显强于阳性对照Aspirin和NBP。因此本发明中选择I₃、I₄进行了体内抗血栓试验。

Tab 1 The effect of NO donating-butylphthalide derivatives on the platelet aggregation inducedby ADP in vitro(n＝10，x±s)

Note：^*p＜0.05，^**p＜0.01 compared with control group

上述受试物代号对应的化合物结构见实施例

2.2大鼠动静脉旁路血栓形成试验

2.2.1试验方法

SD大鼠，雌雄各半，随机分组，分别为阴性对照组，Aspirin(30mg/kg)和NBP(30mg/kg)以及受试化合物I₃、I₄组(与NBP等摩尔剂量)。连续灌胃给药5天，末次给药后1小时将动物麻醉，分离右颈总动脉和左颈外静脉，在聚乙烯管的中段放入一根长6cm的丝线，以肝素生理盐水(50u/ml)充满管，插入分离出的血管中，开放血流15min后取出丝线称重，总重减去丝线重为血栓湿重。血栓抑制率的计算公式为：(受试药组血栓湿重-阴性对照组血栓湿重)/阴性对照组血栓湿重×100％。

2.2.2结果

结果见表2。与阴性对照组相比较，阳性对照组和NO供体型丁基苯酞衍生物I₃、I₄组能抑制血栓的形成，有显著的统计学差异。本发明中选择I₃进行了抗脑缺血的初步试验。

Tab 2 Effect of NO donating-butylphthalide derivatives on A-V bypass thrombosis on the thread segment in rats(n＝10，x±s)

Note：^**p＜0.01 compared with control group

2.3抗脑缺血试验

2.3.1TTC染色测定脑组织梗死面积

2.3.1.1试验方法

50只大鼠随机分为5组，分别为伪手术组、模型组、阳性药丁基苯酞对照组(20mg/kg)和受试药物I₃高、低剂量组(136.84mg/kg，68.42mg/kg，低剂量与阳性药丁基苯酞等摩尔量)，每组10只动物。采用预防给药方式，即大脑中动脉阻断手术前1小时腹腔注射给药。大鼠缺血再灌注24小时用戊巴比妥钠麻醉，快速断头取脑，去除嗅球、小脑和低位脑干，冠状切为5片，然后将脑片置于5ml含有1.5ml的4％TTC及0.1ml的1mol/L K₂HPO₄的溶液中，避光，37℃温孵30min，其间每隔7-8min翻动一次。经TTC染色后，正常脑组织呈玫瑰红色，梗死组织呈白色。染色后拍照保存，用计算机图像分析软件计算梗死面积。脑梗死面积百分比的计算公式为：梗死部分面积/全脑剖面面积×100％。

2.3.1.2试验结果

与模型组相比较，阳性对照NBP组和I₃高、低剂量组均能显著降低缺血再灌注后脑梗死的面积，并且I₃降低脑梗死面积的作用具有剂量依赖性。结果见表3。

Tab 3 Effect of Zm 18 on cerebral infarct size by TTC staining in focal cerebral ischemia in rats(n＝10，x±s)

Note：^*p＜0.01 compared with model group

2.3.2神经行为功能评分：

2.3.1.1试验方法

大鼠缺血再灌注24h后进行神经行为功能评分。评分标准为：0分，无神经损伤症状；1分，不能完全伸展健侧前爪；2分，向健侧转圈；3分，向健侧倾倒；4分，不能自发行走、意识丧失。

2.3.1.2试验结果

与模型组相比较，阳性对照NBP组和I₃高、低剂量组均能显著降低缺血再灌注后大鼠的神经行为功能评分，即能够改善动物的神经行为功能，并且I₃对动物神经行为功能的改善作用具有剂量依赖性。结果见表4。

Tab 4 Effect of Zm 18 on neurological deficit score in focal cerebral ischemia in rats(n＝10，x±s)

Note：^*p＜0.01 compared with model group

2.3.3脑含水量的测定

2.3.3.1试验方法

缺血再灌注24h后处死大鼠取出脑组织迅速称取重量，即为脑湿重。然后将脑组织置于105℃烘箱中24小时烘干并称取重量，即为脑干重。脑含水量的计算公式为：脑湿重-脑干重。

2.3.3.2试验结果

与模型组相比较，阳性对照NBP组和I₃高、低剂量组均能显著降低缺血再灌注后脑含水量，并且I₃降低脑含水量的作用具有剂量依赖性。结果见表5。

Tab 5 Effect of Zm 18 on neurological deficit score in focal cerebral ischemia in rats(n＝10，x±s)

Note：^*p＜0.01 compared with model group

2.4部分化合物体外一氧化氮释放试验

2.4.1试验方法

Greiss试剂的配制：磺胺4g，N-萘乙烯二胺盐酸盐0.2g，85％磷酸10mL，用蒸馏水溶解并定容至100mL。或按此比例配制到所需量。

目标化合物I₃、I₄、I₉先溶于二甲亚砜中(0.01mol/L)，再用磷酸缓冲液稀释。缓冲液里含有过量的半胱氨酸(5mmol/L)，混匀，受试物终浓度为10^-4mol/L。将溶液置于37℃水浴，于不同时间点取该溶液2mL与500μL Greiss试剂混合，室温放置10分钟，在540nm处测吸收值。一氧化氮释放量以其相当于氧化产物-亚硝酸盐(NO₂ ^-)的量μmol/L表示。

2.4.1试验结果

如图1(见说明书附图)所示，受试化合物均可以在体外不同程度的释放NO。释放量较多者分别为I₃、I₄。该结果提示：一氧化氮供体型丁基苯酞衍生物具有释放NO的能力，其发挥着协同的抗血栓作用，也相应的能增加抗脑缺血活性。

以上药理数据显示，本发明通式I化合物中一些化合物具有较强的抗血栓以及抗脑缺血的作用。

本发明还包括药物制剂，该制剂包含作为活性剂的通式(I)化合物或其药用盐或药学上可接受的载体。

上述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，是指一种或几种惰性的、非毒性的固体或液体填充物、稀释剂，助剂等。

本发明还涉及药物组合物，其包括至少一种式(I)化合物本身，或其与可药用的酸形成的盐，以及与一种或多种可药用赋型剂的组合。

具体实施方式：

实施例1

3-丁基苯酞(III)的制备

在100mL三颈瓶中加入1.5g(0.01mol)邻甲酰基苯甲酸和30mL Et₂O，N₂保护，搅拌溶解。-5℃下，滴入30mL含3.6g(22mmol)n-BuMgBr的乙醚悬浊液，滴毕，室温搅拌5h，用10mL饱和NH₄Cl溶液淬灭反应，加入15mL 10％盐酸，室温搅拌2h。分出有机相，水层用3×30mL乙醚萃取，合并有机层，Na₂SO₄干燥，浓缩，经柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝15∶1]得浅黄色油状物1.24g，收率75％。ESIMS(m/z)：213[M+Na]+；¹HNMR(CDCl₃)δ：0.93(t，3H，CH₃，J＝6.2Hz)，1.37-1.45(m，4H，2×CH₂)，1.86-1.89(m，2H，CH₂)，5.49(q，1H，CH，J＝12.3Hz)，7.37-7.39(m，1H，ArH，H-4)，7.56-7.5(m，2H，ArH)，8.05(d，1H，ArH，H-7，J＝6.5Hz)。

实施例2

2-(1-羟基正戊基)苯甲酸(IV)的制备

将1.24g(6.5mmol)III溶于含10mL甲醇的50mL单颈烧瓶中，加入10mL 2M NaOH溶液，50℃下搅拌1h，减压蒸除甲醇，加10mL蒸馏水稀释，冷却至-5℃，剧烈搅拌下用5％盐酸酸化至pH 2-3，乙醚萃取，Na₂SO₄干燥。0℃以下减压抽干乙醚得白色固体1.32g，收率90％。该产物不稳定，未经纯化直接投入下一步反应。

实施例3

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸(V)的制备

分别将1.04g(5mmol)IV，2mL三乙胺，0.5g DMAP和20mL二氯甲烷投入50mL二颈瓶中，-10℃-0℃下搅拌溶解，滴加氯乙酰氯1.2mL(15mmol)，保温搅拌5h。加水10mL，室温搅拌0.5h，分出有机层，Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩得腊状固体，正己烷重结晶，得白色针状晶体0.92g，收率65％。m.p.67-68℃；ESIMS：m/z 283[³⁵ClM-H⁺]，285[³⁷ClM-H⁺]；¹HNMR(300MHz，CDCl₃，δppm)：0.91(t，3H，CH₃，J＝6.9Hz)，1.32-1.41(m，4H，2×CH₂)，1.86-1.91(m，2H，CH₂)，4.11(s，2H，CH₂CO)，6.76-6.79(m，1H，CH)，7.36-7.42(m，1H，ArH，H-4)，7.56-7.62(m，2H)，8.08(d，1H，ArH，H-7，J＝8.1Hz)，10.89(s，br，1H，COOH)；IR(KBr，v)：1412，1691，1734，2958，3450cm^-1；

实施例4

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-{2-甲氧基-4-[2-(4-溴丁氧羰基)烯基]}苯基酯(VI₁)的制备

将0.28g(1mmol)化合物V，0.22g(1.1mmol)DCC和0.33g(1mmol)2-甲氧基-4-[2-(4-溴丁氧羰基)烯基]苯酚(II₁)置于10mL茄形瓶中，加入8mL二氯甲烷溶解，加入少量DMAP，室温搅拌6h。过滤，减压浓缩，经柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝7∶1]得无色油状物0.5g，收率85％；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ：0.85(t，3H，CH₃，J＝5.6Hz)，1.26-1.34(m，4H，2×CH₂)，1.79-1.84(m，2H，CH₂)，1.97-2.01(m，2H，CH₂)，2.09(s，3H，COCH₃)，3.46(t，2H，CH₂Br，J＝4.5Hz)，3.89(s，3H，OCH₃)，4.09(s，2H，CH₂CO)，4.25(t，2H，OCH₂，J＝6.2Hz)，6.41(d，1H，CH＝，J＝15.9Hz)，6.56-6.59(m，1H，CH)，7.16-7.26(m，3H，ArH)，7.36-7.40(m，1H，ArH)，7.58(d，J＝3.9Hz，2H，ArH)7.68(d，1H，CH＝，J＝16.0Hz)，8.13(d，J＝8.3Hz，1H，ArH)。

实施例5

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-{2-甲氧基-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)烯基]}苯基酯(VII₁)的制备

将0.59g(1mmol)VI₁，6mL乙腈和0.34g(2mmol)硝酸银加入10mL茄形瓶中，50℃避光加热搅拌8h，冷至室温，过滤，减压浓缩，经柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝6∶1]得无色油状物0.46g，收率60％。

ESIMS：m/z 595[³⁵ClM+NH₄ ⁺]，597[³⁷ClM+NH₄ ⁺]；

实施例6

[2-(1-吗啉基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-{2-甲氧基-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)乙烯基]}苯酯(I₁)的制备

将0.58g(1mmol)VII₁和0.28mL(2mmol)三乙胺溶于5mL DMF中，加入2mmol吗啡啉。混合物室温下搅拌8h，反应结束后，搅拌条件下将其倾倒入50mL的冰水混合物中，再用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，合并有机层，Na₂SO₄干燥，过滤，减压浓缩，经柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝4∶1]得白色固体0.47g，收率74％，m.p.69-71℃。ESIMS：646[M+NH₄]⁺；¹HNMR(CDCl₃，300MHz)δ；0.85(t，3H，CH₃，J＝7.1Hz)，1.33-1.41(m，4H，2×CH₂)，1.75-1.81(m，6H，3×CH₂)，2.41-2.48(m，4H，2×NCH₂)，3.75(t，4H，2×CH₂O，J＝4.6Hz)，3.85(s，3H，OCH₃)，4.21(s，2H，CH₂)，4.23(t，2H，CH₂ONO₂，J＝6.2Hz)，4.61(t，2H，OCH₂，J＝6.1Hz)，6.60-6.63(m，1H，CH，)，6.65(d，1H，＝CH，J＝16.0Hz)，7.32(d，1H，ArH，J＝8.3Hz)，7.36(d，1H，ArH，J＝2.5Hz)，7.64(m，1H，ArH)，7.69(d，1H，＝CH，J＝16.0Hz)，7.72-7.76(m，3H，ArH)，8.08-8.11(m，1H，ArH)；IR(KBr)v：3073，2958，1741，1632cm^-1；

实施例7

[2-(1-哌啶基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-{2-甲氧基-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)乙烯基]}苯酯(I₂)的制备

参照I₁的制备方法，用化合物VII₁与哌啶反应制得白色固体，收率70％，m.p.70-72℃。ESIMS：m/z 627[M+H⁺]；¹H-NMR(CDCl₃，300MHz)，δ(ppm)：0.83(t，3H，J＝5.2Hz，CH₃)，1.23-1.45(m，8H)，1.60-1.66(m，4H)，1.77-1.85(m，4H)，2.65-2.68(m，4H，2×NCH₂)，3.30-3.41(m，2H，COCH₂)，3.86(s，3H，OCH₃)，4.39(t，3H，J＝3.9Hz，CH₂O)，4.43(t，3H，J＝3.7Hz，CH₂ONO₂)，6.54(d，1H，J＝16.2Hz，CH＝)，6.59-6.61(q，1H，J＝12.3Hz，CH)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H，ArH)，7.41(d，J＝2.0Hz，1H，ArH)，7.51(m，1H，ArH)，7.68(d，J＝16.0Hz，1H，＝CH)，7.73-7.78(m，3H，ArH)，8.02-8.03(m，1H，ArH)，10.49(s，1H，NH⁺)；IR(KBr，v)：704，1207，1633，1742，2872，2956，3064cm^-1.

实施例8

[2-(1-二乙胺基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-{2-甲氧基-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)乙烯基]}苯酯(I₃)的制备

参照I₁的制备方法，用化合物VII₁与哌啶反应制得白色固体，收率70％，m.p.72-74℃。ESIMS：632[M+NH₄]⁺；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ：0.85(t，J＝7.2Hz，3H，CH₃)，1.18(t，J＝7.1Hz，6H，2×CH₃)，1.35-1.41(m，4H，2×CH₂)，1.78-1.82(m，6H，3×CH₂)，2.43-2.46(m，4H，2×NCH₂)，3.26-3.39(s，2H，CH₂)，3.87(s，3H，OCH₃)，4.21(t，J＝6.1Hz，2H，CH₂ONO₂)，4.60(t，J＝6.2Hz，2H，OCH₂)，6.60-6.63(m，1H，CH)，6.76(d，J＝16.0Hz，1H，＝CH)，7.31(d，J＝8.1Hz，1H，ArH)，7.38(d，J＝2.0Hz，1H，ArH)，7.62(m，1H，ArH)，7.68(d，J＝16.0Hz，1H，＝CH)，7.71-7.75(m，3H，ArH)，8.10-8.11(m，1H，ArH)；IR(KBr)v：3071，2949，1747，1633cm^-1；

实施例9

[2-(1-二乙胺基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)乙烯基]苯酯(I₄)的制备参照I₁的制备方法，将化合物V与4-[2-(4-溴丁氧羰基)烯基]苯酚(II₄)缩合得中间体2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-{4-[2-(4-溴丁氧羰基)烯基]}苯基酯(VI₄)，VI₄经与硝银反应后，再与二乙胺反应得白色固体，收率68％，m.p.66-68℃。ESIMS：m/z 585[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.86(t，3H，J＝7.1Hz，CH₃)，1.04(t，6H，J＝7.1Hz，2×CH₃)，1.27-1.45(m，4H)，1.84-1.89(m，6H)，2.62-2.65(m，4H，2×NCH₂)，3.33-3.45(m，2H，COCH₂)，4.25(t，2H，J＝5.7Hz，CH₂O)，4.51(t，2H，J＝5.8Hz，CH₂ONO₂)，6.43(d，1H，J＝15.9Hz，CH＝)，6.62-6.65(m，1H，CH)，7.28-7.42(m，3H，ArH)，7.56-7.62(m，4H，ArH)，7.70(d，1H，J＝15.9Hz，CH＝)，8.12(d，1H，J＝7.5Hz，ArH)；IR(KBr，v)：885，1165，1630，1738，2858，2957，3064cm^-1.

实施例10

[2-(1-吗啉基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-4-[2-(4-硝氧丁氧羰基)乙烯基]苯酯(I₅)的制备参照I₄的制备方法，得白色固体，收率67％，m.p.62-64℃。ESIMS：m/z 599[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.86(t，3H，J＝6.7Hz，CH₃)，1.23-1.45(m，4H)，1.86-1.97(m，6H)，2.55-2.59(m，4H，2×NCH₂)，3.19-3.32(m，2H，COCH₂)，3.72(t，4H，J＝3.9Hz，CH₂OCH₂)，4.26(t，2H，J＝5.7Hz，CH₂O)，4.51(t，2H，J＝5.7Hz，CH₂ONO₂)，6.43(d，1H，J＝15.9Hz，CH＝)，6.63-6.67(m，1H，CH)，7.28-7.43(m，3H，ArH)，7.59-7.63(m，4H，ArH)，7.70(d，1H，J＝15.9Hz，CH＝)，8.12(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：856，1166，1631，1739，2859，2951，3068cm^-1.

实施例11

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-4-溴丁酯(VIII₁)的制备

在50mL单颈烧瓶中加入1.14g(4mmol)化合物V，1，4-二溴丁烷1.9mL(16mmol)，2mL三乙胺和20mL丙酮，加热回流5h。冷至室温，过滤，浓缩，柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝20∶1]得无色油状物1.4g，收率85％。产物未经鉴定直接投入下一步反应。

实施例12

[2-(1-二乙胺基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-(4-硝氧)丁酯(I₆)的制备

参照I₁的制备方法，由IX₁与硝酸银反应制得中间体2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-4-硝氧丁酯(IX₁)，IX₁再与二乙胺缩合得无色油状物，收率68％。ESIMS：m/z 439[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.89(t，3H，J＝7.1Hz，CH₃)，1.08(t，6H，J＝6.7Hz，2×CH₃)，1.25-1.46(m，4H)，1.82-1.89(m，6H)，2.51(t，4H，J＝9.0Hz，2×NCH₂)，3.15-3.28(m，2H，COCH₂)，4.33-4.53(m，4H，CH₂O，CH₂ONO₂)，6.57-6.61(m，1H，CH)，7.28-7.36(m，2H，ArH)，7.50(d，1H，J＝3.9Hz，ArH)，8.11(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：863，1282，1621，1721，2859，2969cm^-1.

实施例13

[2-(1-吗啉基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-(4-硝氧)丁酯(I₇)的制备

参照I₁的制备方法，由IX₁与吗啡啉缩合得无色油状物，收率69％。ESIMS：m/z 453[M+H⁺]；

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.89(t，3H，J＝6.7Hz，CH₃)，1.26-1.47(m，4H)，1.82-1.92(m，6H)，2.53-2.56(m，4H，2×NCH₂)，3.17-3.31(m，2H，COCH₂)，3.71(t，4H，J＝4.5Hz，CH₂OCH₂)，4.33-4.55(m，4H，CH₂O，CH₂ONO₂)，6.58-6.61(m，1H，CH)，7.28-7.35(m，2H，ArH)，7.51(d，1H，J＝3.9Hz，ArH)，8.12(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：866，1280，1629，1719，2859.2959cm^-1.

实施例14

[2-(1-哌啶基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-(4-硝氧)丁酯(I₈)的制备

参照I₁的制备方法，由IX₁与哌啶缩合得无色油状物，收率68％。ESIMS：m/z 451[M+NH₄ ⁺]；

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.88(t，3H，J＝6.7Hz，CH₃)，1.32-1.52(m，4H)，1.66-1.93(m，6H)，2.07-2.09(m，2H)，2.62-2.66(m，4H，2×NCH₂)，3.07-3.11(m，2H，COCH₂)，4.31-4.61(m，4H，CH₂O，CH₂ONO₂)，6.53-6.57(m，1H，CH)，7.46-7.48(m，1H，ArH)，7.67-7.71(m，2H，ArH)，1.88(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：759，1250，1633，1722，2861，2927cm^-1.

实施例15

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-4-(2-羟乙基)苯酯(X₁)的制备

参照VI₁的制备方法，由化合物V与对羟基苯乙醇缩合得无色油状物，收率75％。

ESIMS：m/z 403[³⁵ClM-H⁺]，405[³⁷ClM-H⁺]；

实施例16

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸-4-(2-硝氧乙基)苯酯(XI₁)的制备

在10mL茄形瓶中加入0.8g(2mmo1)X₁和5mL冰醋酸，搅拌溶解，滴加0.6mL发烟硝酸和0.2mL醋酸酐的混合溶液，滴毕，室温搅拌5h。将反应混合物倾入40mL冰水混合物中，剧烈搅拌，用饱和NaHCO₃溶液调pH值至中性，乙酸乙酯(3×40mL)萃取。合并有机层，Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，经柱层析[石油醚∶乙酸乙酯(v∶v)＝9∶1]得浅黄色固体0.74g，收率82％，m.p.56-58℃。ESIMS：m/z 467[³⁵ClM+NH₄ ⁺]，469[³⁷ClM+]H₄ ⁺]；

实施例17

[2-(1-二乙胺基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-[4-(2-硝氧乙基)]苯酯(I₉)的制备

参照I₁的制备方法，由XI₁与二乙胺缩合制得淡黄色固体，收率72％，m.p.61-63℃。ESIMS：m/z 487[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.85(t，3H，J＝7.1Hz，CH₃)，1.04(t，6H，J＝7.1Hz，2×CH₃)，1.26-1.44(m，4H)，1.83-1.88(m，2H)，2.63-2.67(m，4H，2×NCH₂)，3.05(t，2H，J＝6.9Hz，CH₂Ph)，3.32-3.44(m，2H，COCH₂)，4.65(t，2H，J＝7.1Hz，CH₂ONO₂)，6.61-6.64(m，1H，CH)，7.20-7.32(m，4H，ArH)，7.37-7.42(m，1H，ArH)，7.59(d，2H，J＝3.9Hz，ArH)，8.12(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：759，1179，1632，1738，2852，2923cm^-1.

实施例18

[2-(1-哌啶基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-[4-(2-硝氧乙基)]苯酯(I₁₀)的制备

参照I₁的制备方法，由XI₁与哌啶缩合制得淡黄色固体，收率70％，m.p.62-64℃。ESIMS：m/z499[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.85(t，3H，J＝7.1Hz，CH₃)，1.25-1.43(m，6H)，1.51-1.63(m，4H)，1.83-1.91(m，2H)，2.46-2.50(m，4H，2×NCH₂)，3.05(t，2H，J＝7.1Hz，CH₂Ph)，3.17-3.30(m，2H，COCH₂)，4.65(t，2H，J＝7.1Hz，CH₂ONO₂)，6.61-6.64(m，1H，CH)，7.20-7.31(m，4H，ArH)，7.36-7.41(m，1H，ArH)，7.54-7.59(m，1H，ArH)，8.12(d，1H，J＝7.5Hz，ArH)；IR(KBr，v)：873，1279，1632，1738，2857，2934cm^-1.

实施例19

[2-(1-吗啉基乙酰氧)正戊基]苯甲酸-[4-(2-硝氧乙基)]苯酯(I₁₁)的制备

参照I₁的制备方法，由XI₁与吗啡啉缩合制得淡黄色固体，收率71％，m.p.58-60℃。ESIMS：m/z 501[M+H⁺]；¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ(ppm)：0.85(t，3H，J＝7.1Hz，CH₃)，1.23-1.48(m，4H)，1.84-1.92(m，2H)，2.52-2.56(m，4H，2×NCH₂)，3.05(t，2H，J＝7.1Hz，CH₂Ph)，3.18-3.26(m，2H，COCH₂)，3.73(t，2H，J＝4.5Hz，CH₂O)，4.65(t，2H，J＝7.1Hz，CH₂ONO₂)，6.63-6.67(q，1H，CH)，7.20-7.32(m，4H，ArH)，7.37-7.44(m，1H，ArH)，7.57-7.62(m，1H，ArH)，8.12(d，1H，J＝7.8Hz，ArH)；IR(KBr，v)：868，1279，1631，1738，2858，2958cm^-1.

实施例20

2-(1-氯乙酰氧基正戊基)苯甲酸(V)的制备(“一锅”反应)

在100mL三颈瓶中加入1.5g(10mmol)邻甲酰基苯甲酸和30mLEt₂O，N₂保护，搅拌溶解。-5℃下，滴入30mL含3.6g(22mmol)n-BuMgBr的乙醚悬浊液，滴毕，室温搅拌5h，滴加氯乙酰氯2.4mL(30mmol)，室温搅拌5h，蒸干乙醚，加四氢呋喃和10％盐酸的混合溶剂(体积比1∶2)50mL室温搅拌1h，减压蒸除THF，乙醚萃取，干燥，浓缩，柱层析[石油醚/乙酸乙酯/乙酸(V∶V∶V＝10∶1∶0.2)]浓缩物经正己烷重结晶，得白色针状晶体V。收率75％。波谱数据如前述。

附图说明：

图1是本发明化合物I₃、I₄和I₉体外NO释放结果

Claims (6)

1.通式(I)的NO供体型丁基苯酞衍生物、其药学上可接受的盐、溶剂合物或多晶型物：

其中：

A代表C₂～C₈烷基、C₂～C₈烯烃基、C₂～C₈炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂环或取代芳杂环。其中所述取代苯基是指被1个或多个选自于羟基、C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基、-CH＝CHCOO(CH₂)_nn＝2～6取代的苯基，各取代基可以相同或不同。所述芳杂基是指1至4个杂原子的5至7元芳香环，所述杂原子独立的选自O、S或N；所述取代芳杂基可任选1个或多个选自于C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基或卤素取代，各取代基可以相同或不同。

R代表二甲胺、二乙胺、吡咯、哌啶、吗啡啉、哌嗪、N-甲基哌嗪、N-乙基哌嗪、N-异丙基哌嗪、N-苯基哌嗪、N-苄基哌嗪、N-叔丁氧羰基哌嗪。

2.权利要求1的NO供体型丁基苯酞衍生物，A代表或

代表二乙胺、吡咯、哌啶、吗啡啉、N-甲基哌嗪。

3.权利要求1或2的NO供体型丁基苯酞衍生物的制备方法，包括：

R、A的定义如权利要求1和2。R₁代表CH₃O或H；X代表Cl或Br；R₂代表C₂～C₈烷基、C₂～C₈烯烃基、C₂～C₈炔烃基；Y代表Cl，Br或OH；R₃代表1个或多个选自于羟基、C₁～C₆烷基、C₁～C₆烷氧基，各取代基可以相同或不同；

4.权利要求1的四氢异喹啉衍生物，其中药学上可接受的盐是通式I化合物与下列酸形成的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸。

5.药物组合物，含有治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。

6.权利要求1或2的NO供体型丁基苯酞衍生物或其药学上可接受的盐用于制备抗血栓或抗脑缺血药物的用途。