CN101330930B - 心脏病治疗剂 - Google Patents

心脏病治疗剂 Download PDF

Info

Publication number
CN101330930B
CN101330930B CN2006800475324A CN200680047532A CN101330930B CN 101330930 B CN101330930 B CN 101330930B CN 2006800475324 A CN2006800475324 A CN 2006800475324A CN 200680047532 A CN200680047532 A CN 200680047532A CN 101330930 B CN101330930 B CN 101330930B
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
myocardial infarction
cell
receptor
inhibitor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN2006800475324A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101330930A (zh
Inventor
小原幸
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chugai Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN101330930A publication Critical patent/CN101330930A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101330930B publication Critical patent/CN101330930B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C07K16/248—IL-6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/14—Lymphokine; related peptides
    • Y10S930/141—Interleukin

Abstract

本发明人对于抗IL-6受体抗体改善心肌梗塞中梗塞区状态的效果，以及抑制心肌梗塞后左心室重塑的效果进行了研究。其结果为，通过给予抗IL-6受体抗体，从而在心肌梗塞区MPO活性的增加被显著抑制。另外，心肌MCP-1的表达在心肌梗塞区和非梗塞区被抑制。而且通过心脏超声波检查、组织学检查而明确心脏肥大被抑制。

Description

心脏病治疗剂
技术领域
本发明涉及含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞治疗剂及其应用。另外，本发明还涉及含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂及其应用。
背景技术
心肌梗塞是缺血性心脏病的一种，是由于动脉硬化等引起心脏冠状动脉收缩，冠状动脉血流量急剧减少或停止而引起心肌坏死的一种疾病。如果梗塞区域扩大、恶化，则会并发心力衰竭、缺血等引起的重度心律不齐，而增加对生命的威胁。
若心肌梗塞进行，则梗塞区的心肌细胞坏死、脱落，被胶原纤维等纤维组织替换。这种梗塞区缺乏收缩力，不能耐受伴随心收缩而上升的心内压，纤维壁薄且伸展。其结果，为了弥补这种功能降低，在非梗塞区导致心内腔肥大，左心室整体扩张。这种现象被称为左心室重塑，使心脏功能进一步降低，之后的患病率和死亡率增加。因此为了预后改善心肌梗塞症，尽早抑制进行中的左心室重塑是很重要的，期望构筑一种有效的治疗方法。
IL-6是一种细胞因子，也被称为B细胞刺激因子2(BSF2)或干扰素β2。IL-6是作为与B淋巴细胞的活化有关的分化因子被发现的(非专利文献1)，之后发现是一种影响各种细胞功能的多功能细胞因子(非专利文献2)。据报道IL-6可以诱导T淋巴细胞的成熟(非专利文献3)。
IL-6在细胞上通过两种蛋白质传导其生物学活性。一种是IL-6结合的分子量约80kD的配体结合性蛋白质的IL-6受体(非专利文献4、5)。IL-6受体，除了贯通细胞膜在细胞膜上表达的膜结合型之外，主要是作为由其细胞外区域构成的可溶性IL-6受体而存在。
另一种是与非配体结合性的信号转导相关的分子量约130kD的膜蛋白质gp130。IL-6与IL-6受体形成IL-6/IL-6受体复合体，然后通过与gp130结合，IL-6的生物学活性被传导到细胞内(非专利文献6)。
IL-6抑制剂是抑制IL-6的生物学活性传导的物质。迄今为止，已知有对抗IL-6的抗体(抗IL-6抗体)、对抗IL-6受体的抗体(抗IL-6受体抗体)、对抗gp130的抗体(抗gp130抗体)、IL-6变体、IL-6或IL-6受体部分肽等。
关于抗IL-6受体抗体，也有一些报道(非专利文献7、8，专利文献1～3)。其中之一已知有人源化PM-1抗体(专利文献4)，其是通过将小鼠抗体PM-1(非专利文献9)的互补决定区(CDR；complementaritydetermining region)移植入人抗体而得到的。
迄今为止，从IL-6对肌收缩性功能产生负面影响(非专利文献10)，或者IL-6和IL-6受体的过剩表达而使gp130活性恒定的小鼠发生心脏肥大(非专利文献11)等，可知其会影响心脏的功能和构造。IL-6在心肌梗塞后，在左心室、特别是再灌流的心肌梗塞的边界部分表达(非专利文献12)，其表达水平与心肌梗塞后的左心室(LV)的大小有关(非专利文献13)。另外，据报道在低氧压下心肌细胞产生IL-6(非专利文献14)，梗塞后重塑时，非肌肉细胞中的细胞因子表达在胞外基质变化中有控制作用(非专利文献15)。此外，关于心肌梗塞与IL-6的关系，有报道称通过IL-6介导而被活化的JAK/STAT系对心肌梗塞有保护作用(非专利文献16)。
另一方面，有报道称，在使用IL-6敲除小鼠的实验中，IL-6缺失对心肌梗塞的梗塞区域的大小或左心室重塑等没有影响(非专利文献17)。由此，心肌梗塞以及心肌梗塞后左心室重塑中的IL-6的作用并不清楚。
此外，本申请的发明相关的背景技术文献信息如下所示。
非专利文献1：Hirano，T.et al.，Nature(1986)324，73-76
非专利文献2：Akira，S.et al.，Adv.in Immunology(1993)54，1-78
非专利文献3：Lotz，M.et al.，J.Exp.Med.(1988)167，1253-1258
非专利文献4：Taga，T.et al.，J.Exp.Med.(1987)166，967-981
非专利文献5：Yamasaki，K.et al.，Science(1988)241，825-828
非专利文献6：Taga，T.et al.，Cell(1989)58，573-581
非专利文献7：Novick，D.et al.，Hybridoma(1991)10，137-146
非专利文献8：Huang，Y.W.et al.，Hybridoma(1993)12，621-630
非专利文献9：Hirata，Y.et al.，J.Immunol.(1989)143，2900-2906
非专利文献10：Finkel，M.S.et al.，Science(1992)257，387-389
非专利文献11：Hirota，H.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1995)92，4862-4866
非专利文献12：Gwechenberger，M.et al.，Circulation(1999)99，546-551
非专利文献13：Ono，K.et al.，Circulation(1998)98，149-156
非专利文献14：Yamauchi-Takihara，K.et al.，Circulation(1995)91，1520-1524
非专利文献15：Yue，P.et al.，Am.J.Physiol.(1998)275，H250-H258
非专利文献16：Negoro，S.et al.，Cardiovasc.Res.(2000)47，797-805
非专利文献17：Fuchs M.et al.，FASEB J.(2003)17，2118-2120
专利文献1：国际专利申请公开号WO 95-09873
专利文献2：法国专利申请公开号FR 2694767
专利文献3：美国专利号US 5216128
专利文献4：国际专利申请公开号WO 92-19759
发明内容
迄今为止，虽然表明IL-6与心肌梗塞以及心肌梗塞后的左心室重塑有关，但其详细的作用并不明确。另外，IL-6抑制剂的给药，在心肌梗塞以及心肌梗塞后的左心室重塑中有怎样的效果也不明确。
本发明即是鉴于这种情况完成的，其目的在于提供含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞治疗剂。另外，本发明还提供含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞后的左心室重塑的抑制剂。而且本发明还提供治疗心肌梗塞的方法以及抑制心肌梗塞后左心室重塑的方法，所述方法包括将IL-6抑制剂给予有心肌梗塞症状的对象的工序。
本发明人为了解决上述技术问题，对于抗IL-6受体抗体改善心肌梗塞中梗塞区域的状态的效果，以及抑制心肌梗塞后左心室重塑的效果进行了研究。
首先，本发明人将雄性Balb/c小鼠的左前降支结扎，制成心肌梗塞模型小鼠。然后，对该心肌梗塞模型小鼠腹腔内给予抗IL-6受体抗体(MR16-1)500μg。
其结果表明，在心肌梗塞区域，髓过氧化物酶(MPO)活性的增加被显著抑制。另外，还表明在抗IL-6受体抗体给药小鼠中，心肌MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1，monocyte chemoattractant protein-1)的表达在心肌梗塞区域以及非梗塞区域被抑制。而且，在心脏超声波检查、组织学检查中，抗IL-6受体抗体给药小鼠的心脏肥大被抑制。
即，本发明人通过给予抗IL-6受体抗体，初步发现可以改善心肌梗塞中梗塞区域的状态，抑制心肌梗塞后的左心室重塑，由此完成了本发明。
更具体地，本发明提供以下的[1]～[31]。
含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞治疗剂。
根据[1]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6的抗体。
根据[1]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6受体的抗体。
根据[2]或[3]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，抗体是单克隆抗体。
根据[2]或[3]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，抗体是抗人IL-6的抗体或者抗人IL-6受体的抗体。
根据[2]或[3]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，抗体是重组抗体。
根据[6]所述的心肌梗塞治疗剂，其特征在于，抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
含有IL-6抑制剂作为有效成分的心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂。
根据[8]所述的抑制剂，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6的抗体。
根据[8]所述的抑制剂，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6受体的抗体。
根据[9]或[10]所述的抑制剂，其特征在于，抗体是单克隆抗体。
根据[9]或[10]所述的抑制剂，其特征在于，抗体是抗人IL-6的抗体或者抗人IL-6受体的抗体。
根据[9]或[10]所述的抑制剂，其特征在于，抗体是重组抗体。
根据[13]所述的抑制剂，其特征在于，抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
根据[8]～[14]任一项所述的抑制剂，其用于心肌梗塞的治疗。
对对象治疗心肌梗塞的方法，其包含将IL-6抑制剂给予有心肌梗塞症状的对象的工序。
对对象抑制心肌梗塞后左心室重塑的方法，其包含将IL-6抑制剂给予有心肌梗塞症状的对象的工序。
根据[16]或[17]所述的方法，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6的抗体。
根据[16]或[17]所述的方法，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6受体的抗体。
根据[18]或[19]所述的方法，其特征在于，抗体是单克隆抗体。
根据[18]或[19]所述的方法，其特征在于，抗体是抗人IL-6的抗体或者抗人IL-6受体的抗体。
根据[18]或[19]所述的方法，其特征在于，抗体是重组抗体。
根据[22]所述的方法，其特征在于，抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
IL-6抑制剂在制造心肌梗塞治疗剂中的用途。
IL-6抑制剂在制造心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂中的用途。
根据[24]或[25]所述的用途，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6的抗体。
根据[24]或[25]所述的用途，其特征在于，IL-6抑制剂是识别IL-6受体的抗体。
根据[26]或[27]所述的用途，其特征在于，抗体是单克隆抗体。
根据[26]或[27]所述的用途，其特征在于，抗体是抗人IL-6的抗体或者抗人IL-6受体的抗体。
根据[26]或[27]所述的用途，其特征在于，抗体是重组抗体。
根据[30]所述的用途，其特征在于，抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
具体实施方式
本发明人发现：通过给予抗IL-6受体抗体，可以改善心肌梗塞中梗塞区域的状态，抑制心肌梗塞后的左心室重塑。本发明即是基于上述发现的发明。
本发明涉及心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂，它们含有IL-6抑制剂作为有效成分。
本发明中，“IL-6抑制剂”是指阻断IL-6介导的信号转导、抑制IL-6的生物学活性的物质。IL-6抑制剂优选为对IL-6、IL-6受体和gp130的任一结合具有抑制作用的物质。
作为本发明的IL-6抑制剂，例如可列举：抗IL-6抗体、抗IL-6受体抗体、抗gp130抗体、IL-6变体、可溶性IL-6受体变体或者IL-6或IL-6受体的部分肽，以及与它们显示同样活性的低分子物质，但并无特别地限定。作为本发明的IL-6抑制剂，可优选列举识别IL-6受体的抗体。
本发明中抗体的来源没有特别限定，可优选列举来源于哺乳动物的抗体，更优选列举来源于人的抗体。
本发明中使用的抗IL-6抗体，可以使用公知的方法作为多克隆或单克隆抗体而得到。作为本发明中使用的抗IL-6抗体，特别优选来源于哺乳动物的单克隆抗体。作为来源于哺乳动物的单克隆抗体有，杂交瘤中产生的抗体，以及通过基因工程方法，在以含有抗体基因的表达载体转化的宿主中产生的抗体。该抗体通过与IL-6结合，从而抑制IL-6与IL-6受体的结合，进而阻断IL-6的生物学活性向细胞内传达。
作为这种抗体，可以列举出MH166(Matsuda，T.et al.，Eur.J.Immunol.(1988)18，951-956)或SK2抗体(Sato，K.et al.，第21次日本免疫学会总会，学术纪录(1991)21，166)等。
产生抗IL-6抗体的杂交瘤，基本上可以使用公知技术，按如下所述进行制作。即，使用IL-6作为致敏性抗原(感作抗原)，将其按照通常的免疫方法进行免疫，根据通常的细胞融合法使所得免疫细胞与公知的亲细胞(parent cells)融合，使用通常的筛选法，筛选产生单克隆抗体的细胞，而进行制作。
具体地，可以按照如下所述制作抗IL-6抗体，例如，作为获得抗体的致敏性抗原使用的人IL-6，可以通过使用Eur.J.Biochem.(1987)168，543-550；J.Immunol.(1988)140，1534-1541或Agr.Biol.Chem.(1990)54，2685-2688中公开的IL-6基因/氨基酸序列而得到。
将IL-6的基因序列插入公知的表达载体系，使适当的宿主细胞进行转化后，用公知的方法从其宿主细胞中或培养上清液中纯化(精製)目标IL-6蛋白质，可以使用该纯化IL-6蛋白质作为致敏性抗原。另外，也可以使用IL-6蛋白质与其它的蛋白质的融合蛋白质作为致敏性抗原。
本发明中使用的抗IL-6受体抗体，可以使用公知的方法作为多克隆或单克隆抗体得到。作为本发明中使用的抗IL-6受体抗体，特别优选来源于哺乳动物的单克隆抗体。作为来源于哺乳动物的单克隆抗体有，杂交瘤中产生的抗体，以及通过基因工程方法，在以含有抗体基因的表达载体转化的宿主中产生的抗体。该抗体通过与IL-6受体结合，而抑制IL-6与IL-6受体结合，进而阻断IL-6的生物学活性向细胞内的传达。
作为这种抗体，可列举：MR16-1抗体(Tamura，T.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1993)90，11924-11928)、PM-1抗体(Hirata，Y.etal.，J.Immunol.(1989)143，2900-2906)、AUK12-20抗体、AUK64-7抗体或AUK146-15抗体(国际专利申情公开号WO 92-19759)等。其中，作为抗人IL-6受体优选的单克隆抗体，可示例PM-1抗体；另外作为抗小鼠IL-6受体优选的单克隆抗体，可列举MR16-1抗体。
产生抗IL-6受体单克隆抗体的杂交瘤，基本上可以使用公知技术，按如下所述进行制作。即，使用IL-6受体作为致敏性抗原，将其按照通常的免疫方法进行免疫，根据通常的细胞融合法使所得免疫细胞与公知的亲细胞融合，使用通常的筛选法，筛选产生单克隆抗体的细胞，而进行制作。
具体而言，可以按照如下所述制作抗IL-6受体抗体。例如，作为获得抗体的致敏性抗原使用的人IL-6受体、小鼠IL-6受体可以如下述那样得到：人IL-6受体可以使用欧洲专利申请公开号EP325474中公开的IL-6受体基因/氨基酸序列而得到；小鼠IL-6受体可以使用日本专利申请公开号特开平3-155795中公开的IL-6受体基因/氨基酸序列而得到。
IL-6受体蛋白质有在细胞膜上表达的和脱离细胞膜的(可溶性IL-6受体)(Yasukawa，K.et al.，J.Biochem.(1990)108，673-676)两种。可溶性IL-6受体实质上由结合在细胞膜上的IL-6受体的细胞外区域构成，在缺失跨细胞膜区域或缺失跨细胞膜区域和细胞内区域方面，与膜结合型IL-6受体不同。IL-6受体蛋白质，只要能用作本发明中所用的制作抗IL-6受体抗体的致敏性抗原，则可以使用任一种IL-6受体。
将IL-6受体的基因序列插入公知的表达载体系，使适当的宿主细胞转化后，用公知的方法从其宿主细胞中或培养上清液中精制目的物IL-6受体蛋白质，可以使用该纯化IL-6受体蛋白质作为致敏性抗原。另外，也可以使用表达IL-6受体的细胞或者IL-6受体蛋白质与其它蛋白质的融合蛋白质作为致敏性抗原。
本发明中使用的抗gp130抗体，可以使用公知的方法作为多克隆或单克隆抗体得到。作为本发明中使用的抗gp130抗体，特别优选来源于哺乳动物的单克隆抗体。作为来源于哺乳动物的单克隆抗体有，杂交瘤中产生的抗体，以及通过基因工程方法，在以含有抗体基因的表达载体转化的宿主中产生的抗体。该抗体通过与gp130结合，而抑制IL-6/IL-6受体复合体与gp130的结合，进而阻断IL-6的生物学活性向细胞内的传达。
作为这种抗体，可列举：AM64抗体(日本特开平3-219894)、4B11抗体以及2H4抗体(US 5571513)B-S12抗体和B-P8抗体(日本特开平8-291199)等。
产生抗gp130单克隆抗体的杂交瘤，基本上可以使用公知技术，按如下所述进行制作。即，使用gp130作为致敏性抗原，将其按照通常的免疫方法进行免疫，根据通常的细胞融合法使所得免疫细胞与公知的亲细胞融合，使用通常的筛选法，筛选产生单克隆抗体的细胞，而进行制作。
具体而言，可以按照如下所述制作单克隆抗体，例如，作为获得抗体的致敏性抗原所使用的gp130，可以通过使用欧洲专利申请公开号EP411946公开的gp130基因/氨基酸序列而得到。
将gp130的基因序列插入公知的表达载体系，使适当的宿主细胞转化后，用公知的方法从其宿主细胞中或培养上清液中精制目的物gp130蛋白质，可以使用该纯化gp130蛋白质作为致敏性抗原。另外，也可以使用表达gp130的细胞或者gp130蛋白质与其它蛋白质的融合蛋白质作为致敏性抗原。
作为用致敏性抗原来免疫的哺乳动物，没有特别地限定，但优选考虑与细胞融合中所使用的亲细胞的适合性后进行选择，一般使用啮齿类动物，例如小鼠、大鼠、仓鼠等。
用致敏性抗原对动物免疫，根据公知的方法进行。例如，作为一般的方法，通过在哺乳动物的腹腔内或皮下注射致敏性抗原而进行。具体而言，优选将致敏性抗原用PBS(磷酸缓冲盐)或生理盐水等稀释至适当量，根据需要，将悬浊的液体与通常的佐剂，例如弗氏完全佐剂适量混和，乳化后，每4-21天对哺乳动物多次给药。另外，致敏性抗原免疫时可以使用适当的载体。
如此进行免疫，确认血清中所需的抗体水平上升后，从哺乳动物中取出免疫细胞，进行细胞融合。作为用于细胞融合的优选的免疫细胞，特别列举脾细胞。
作为与前述免疫细胞融合的其他的亲细胞即哺乳动物的骨髓瘤细胞，可适当使用已经公知的细胞株，例如：P3X63Ag8.653(Kearney，J.F.et al.，J.Immunol(1979)123，1548-1550)、P3X63Ag8U.1(CurrentTopics in Microbiology and Immunology(1978)81，1-7)、NS-1(Kohler，G.and Milstein，C.，Eur.J.Immunol.(1976)6，511-519)、MPC-11(Margulies，D.H.et al.，Cell(1976)8，405-415)、SP2/0(Shulman，M.etal.，Nature(1978)276，269-270)、FO(de St.Groth，S.F.et al.，J.Immunol.Methods(1980)35，1-21)、S194(Trowbridge，I.S.，J.Exp.Med.(1978)148，313-323)、R210(Galfre，G.et al.，Nature(1979)277，131-133)等。
前述免疫细胞和骨髓瘤细胞的细胞融合基本上可以基于公知的方法，例如Milstein等的方法(Kohler，G.and Milstein，C.，MethodsEnzymol.(1981)73，3-46)等而进行。
更具体地，前述细胞融合例如可以在细胞融合促进剂的存在下在通常的营养培养液中实施。作为融合促进剂，例如可以使用聚乙二醇(PEG)、仙台病毒(HVJ)等，进而根据需要为了提高融合效率，也可以添加使用二甲基亚砜等辅助剂。
免疫细胞和骨髓瘤细胞的使用比例，例如相对于骨髓瘤细胞，优选免疫细胞为1～10倍。作为前述细胞融合中使用的培养液，例如可以使用适于前述骨髓瘤细胞株增殖的RPMI 1640培养液、MEM培养液、其他在该种细胞培养中使用的通常的培养液，而且也可以并用胎牛血清(FCS)等血清补充液。
细胞融合是，在前述培养液中将规定量的前述免疫细胞和骨髓瘤细胞充分混合，通常以30～60％(w/v)的浓度添加预先加热至37℃左右的PEG溶液，例如平均分子量1000～6000左右的PEG溶液，进行混合，从而形成目的物融合细胞(杂交瘤)。然后逐次添加适当的培养液，通过重复离心除去上清液的操作，从而可以除去不利于杂交瘤生长的细胞融合剂等。
该杂交瘤通过在通常的选择培养液，例如HAT培养液(含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷的培养液)中培养而进行选择。为了使目的物杂交瘤以外的细胞(非融合细胞)死亡，在该HAT培养液中的培养，需要持续充分的时间，通常持续数天～数周。然后，实施通常的极限稀释法，进行产生目的物抗体的杂交瘤的筛选以及克隆。
另外，除了对人以外的动物免疫抗原，得到上述杂交瘤以外，也可以在体外(in vitro)将人淋巴细胞用所需的抗原蛋白质或抗原表达细胞致敏，使致敏B淋巴细胞与人骨髓瘤细胞(例如U266)融合，可以得到与所需的抗原或抗原表达细胞具有结合活性的所需的人抗体(参照日本特公平1-59878)。另外，对具有人抗体基因的所有组成成分(レパ一トリ)的转基因动物给予抗原或抗原表达细胞，根据前述的方法也可以获得所需的人抗体(参照国际专利申请公开号WO93/12227，WO 92/03918，WO 94/02602，WO 94/25585，WO 96/34096，WO 96/33735)。
这样制作的产生单克隆抗体的杂交瘤可以在通常的培养液中进行继代培养，另外可以在液氮中长期保存。
从该杂交瘤获得单克隆抗体时，可以采用以下方法：将该杂交瘤按照通常的方法进行培养，作为其培养上清液而获得的方法；或者将杂交瘤给予与它具有适合性的哺乳动物并使增殖，作为其腹水而得到的方法等。前者的方法适于得到高纯度的抗体，另一方面，后者的方法适于抗体的大量生产。
例如，产生抗IL-6受体抗体的杂交瘤的制作，可以根据日本特开平3-139293中公开的方法进行。可以用以下方法进行：将产生PM-1抗体的杂交瘤注入到BALB/c小鼠的腹腔内得到腹水，从该腹水中精制PM-1抗体的方法；或者将本杂交瘤在适当的培养基，例如含有10％胎牛血清、5％BM-Condimed H1(Boehringer Mannheim制)的RPMI1640培养基、杂交瘤SFM培养基(GIBCO-BRL制)、PFHM-II培养基(GIBCO-BRL制)等中培养，从其培养上清液中精制PM-1抗体的方法。
本发明中，作为单克隆抗体，可以使用以下重组抗体：从杂交瘤中克隆抗体基因，插入适当的载体，将其导入宿主，使用基因重组技术而产生的重组抗体(例如参照Borrebaeck，C.A.K.and Larrick，J.W.，THERAPEUTIC MONOCLONAL ANTIBODIES，Published in theUnited Kingdom by MACMILLAN PUBLISHERS LTD.，1990)。
具体而言，从产生目标抗体的细胞(例如杂交瘤)中分离编码抗体的可变(V)区的mRNA。mRNA的分离，通过公知的方法，例如胍超速离心法(Chirgwin，J.M.et al.，Biochemistry(1979)18，5294-5299)、AGPC法(Chomczynski，P.et al.，Anal.Biochem.(1987)162，156-159)等制备总RNA，使用mRNA Purification Kit(Pharmacia制)等制备mRNA。另外通过使用QuickPrep mRNA Purification Kit(Pharmacia制)可以直接制备mRNA。
使用逆转录酶由得到的mRNA合成抗体V区的cDNA。cDNA的合成可以使用AMV逆转录酶第一链cDNA合成试剂盒(AMV ReverseTranscriptase First-strand cDNA Synthesis Kit)等进行。另外，进行cDNA的合成和扩增时，可以使用5’-RACE法(Frohman，M.A.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1988)85，8998-9002；Belyavsky，A.et al.，Nucleic Acids Res.(1989)17，2919-2932)，所述5’-RACE法使用5’-Ampli FINDER RACE Kit(Clontech制)和PCR。从得到的PCR产物中纯化目标DNA片段，与载体DNA连接。进而由此制成重组载体，导入大肠杆菌等并选择菌落，来制备所需的重组载体。通过公知的方法(例如脱氧法)来确认目标DNA的碱基序列。
如果得到作为目的物的编码抗体V区的DNA，则将其与编码所需的抗体恒定区(C区)的DNA连接，将其插入表达载体。或者也可以将编码抗体V区的DNA插入含有抗体C区的DNA的表达载体。
制造本发明中使用的抗体时，如后所述将抗体基因插入表达载体，以使其在表达控制区，例如增强子、启动子的控制下表达。然后，通过该表达载体可以转化宿主细胞、使抗体表达。
在本发明中，以降低对人的异种抗原性等作为目标，可以使用人为修饰(改变)的基因重组抗体，例如嵌合(Chimeric)抗体、人源化(Humanized)抗体、人(Human)抗体。这些修饰的抗体可以使用已知的方法进行制造。
嵌合抗体可通过下述方式得到：将编码如前述那样得到的抗体V区的DNA与编码人抗体C区的DNA连接，将其插入表达载体后，导入宿主使产生(参照欧洲专利申请公开号EP125023、国际专利申请公开号WO92-19759)。使用该公知的方法，可以得到对本发明有用的嵌合抗体。
人源化抗体也被称为重构(reshaped)人抗体或人型化抗体，其是将人以外的哺乳动物(例如小鼠)抗体的互补决定区(CDR)移植到人抗体的互补决定区的抗体，其通常的基因重组方法也是众所周知的(参照欧洲专利申请公开号EP125023、国际专利申请公开号WO92-19759)。
具体而言，通过PCR法由多个寡核苷酸合成DNA序列，所述DNA序列是以连接小鼠抗体的CDR与人抗体的构架区(FR；frameworkregion)的形式设计的，所述寡核苷酸是以在末端部具有重叠部分的形式制作的。将所得的DNA与编码人抗体C区的DNA连接，然后插入表达载体，将其导入宿主，以使产生而得到人源化抗体(参照欧洲专利申请公开号EP 239400、国际专利申请公开号WO92-19759)。
通过CDR连接的人抗体的FR是可以选择的，以便互补决定区形成良好的抗原结合部位。根据需要，可以取代抗体的可变区的构架区的氨基酸，以使重构人抗体的互补决定区形成适当的抗原结合部位，(Sato，K.et al.，Cancer Res.(1993)53，851-856)。
对于嵌合抗体、人源化抗体，使用人抗体C区。作为人抗体C区，可列举Cγ，例如可以使用Cγ1，Cγ2，Cγ3或Cγ4。另外，为了改善抗体或其生产的稳定性，还可以对人抗体C区进行修饰。
嵌合抗体由来源于人以外的哺乳动物的抗体的可变区和来源于人抗体的C区构成，另外人源化抗体由来源于人以外的哺乳动物的抗体的互补决定区和来源于人抗体的构架区以及C区构成，它们在人体内的抗原性低下，因此作为本发明中所用的抗体是有用的。
作为本发明中使用的人源化抗体的优选具体例，可列举人源化PM-1抗体(参照国际专利申请公开号WO92-19759)。
另外，作为获得人抗体的方法，除了如前所述的方法外，还已知使用人抗体文库，通过筛选而获得抗体的技术。例如还可以将人抗体的可变区作为单链抗体(scFv)，利用噬菌体展示法使其在噬菌体的表面表达，进而选择结合于抗原的噬菌体。如果解析所选择的噬菌体的基因，则可以决定结合于抗原的编码人抗体可变区的DNA序列。如果知道了结合于抗原的scFv的DNA序列，则可以制作含有该序列的适当的表达载体，并获得人抗体。这些方法已为人所知，可以参考WO92/01047、WO 92/20791、WO93/06213、WO 93/11236、WO 93/19172、WO 95/01438、WO 95/15388。
如前所述构筑的抗体基因可以通过公知的方法来表达。使用哺乳类细胞时，可以通过DNA或者含有DNA的载体来表达，所述DNA功能性地结合于常用的有用的启动子、所表达的抗体基因、其3’侧下游的聚腺苷酸信号(ポリAシグナル)。例如作为启动子/增强子，可列举人类巨细胞病毒即时早期启动子/增强子(human cytomegalovirusimmediate early promoter/enhancer)。
另外，作为其他可以用于本发明中使用的抗体表达的启动子/增强子，可以使用逆转录病毒、多瘤病毒、腺病毒、猿猴病毒40(SV40)等病毒启动子/增强子或者人延伸因子1α(HEF1α)等来源于哺乳类细胞的启动子/增强子。
例如使用SV40启动子/增强子时，根据Mulligan等人的方法(Mulligan，R.C.et al.，Nature(1979)277，108-114)可以容易地实施；或者，使用HEF1α启动子/增强子时，根据Mizushima等人的方法(Mizushima，S.and Nagata S.，Nucleic Acids Res.(1990)18，5322)可以容易地实施。
大肠杆菌的情况，可以使常用的有用的启动子、用于抗体分泌的信号序列、表达的抗体基因功能性结合而表达。例如作为启动子，可以列举出lacZ启动子、araB启动子。使用lacZ启动子时，可以按照Ward等人的方法(Ward，E.S.et al.，Nature(1989)341，544-546；Ward，E.S.et al.，FASEB J.(1992)6，2422-2427)；使用araB启动子时，可以按照Better等人的方法(Better，M.et al.，Science(1988)240，1041-1043)。
作为用于抗体分泌的信号序列，在大肠杆菌的周质中产生时，可以使用pelB信号序列(Lei，S.P.et al.，J.Bacteriol.(1987)169，4379-4383)。将周质中产生的抗体分离后，将抗体的构造适当重折叠(refold)后使用(例如参照WO96/30394)。
作为复制起点，可以使用来源于SV40、多瘤病毒、腺病毒、牛乳头瘤病毒(BPV)等的复制起点，而且为了扩增宿主细胞系中的基因拷贝数，表达载体可以含有氨基糖苷磷酸转移酶(APH)基因、胸苷激酶(TK)基因、大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(Ecogpt)基因、二氢叶酸还原酶(dhfr)基因等作为选择性标记。
为了制造本发明中使用的抗体，可以使用任意的产生系统(産生系)。用于抗体制造的产生系统有体外(in vitro)和体内(in vivo)的产生系统。作为体外的产生系统，可列举：使用真核细胞的产生系统或使用原核细胞的产生系统。
使用真核细胞时，有使用动物细胞、植物细胞或真菌细胞的产生系统。作为动物细胞，已知(1)哺乳类细胞，例如CHO、COS、骨髓瘤、BHK(幼仓鼠肾，baby hamster kidney)、HeLa、Vero等；(2)两栖类细胞，例如爪蟾卵母细胞(Xenopus oocyte)；或者(3)昆虫细胞，例如sf9、sf21、Tn5等。作为植物细胞，已知有来源于烟草(Nicotiana tabacum)的细胞，可以对其进行愈伤组织培养。作为真菌细胞，已知有酵母，例如酵母菌(Saccharomyces)属，例如酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)；线状菌，例如曲霉属(Aspergillus)，例如黑曲霉(Aspergillus niger)等。
使用原核细胞时，有使用细菌细胞的产生系统。作为细菌细胞，已知大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌。
通过下述方法得到抗体：利用转化将目标抗体基因导入这些细胞中，并在体外培养所转化的细胞。可以根据公知的方法进行培养。例如，作为培养液，可以使用DMEM、MEM、RPMI1640、IMDM，也可以并用胎牛血清(FCS)等血清补充液。另外，通过将导入有抗体基因的细胞移至动物的腹腔等，从而也可以在体内产生抗体。
另一方面，作为体内的产生系统，可以列举出使用动物的产生系统或使用植物的产生系统。使用动物时，有使用哺乳类动物、昆虫的产生系统等。
作为哺乳类动物，可以使用山羊、猪、绵羊、小鼠、牛等(Vicki Glaser，SPECTRUM Biotechnology Applications，1993)。另外，作为昆虫，可以使用蚕。使用植物时，例如可以使用烟草。
将抗体基因导入这些动物或植物中，在动物或植物体内产生抗体，并回收。例如，可以在编码蛋白质的基因中间插入抗体基因而作为融合基因制备，所述蛋白质是在山羊β酪蛋白之类的乳汁中固有产生的。将含有融合基因的DNA片段注入山羊的胚胎(所述融合基因中插入有抗体基因)，将该胚胎导入雌性的山羊。由接受胚胎的山羊生产的转基因山羊或其子孙所产生的乳汁得到所需的抗体。为了使含有所需抗体的乳汁量增加，也可以对转基因山羊使用适当的激素，其中所需抗体是由转基因山羊产生的。(Ebert，K.M.et al.，Bio/Technology(1994)12，699-702)。
另外，使用蚕时，使蚕感染插入有目标抗体基因的杆状病毒，由该蚕的体液得到所需的抗体(Maeda，S.et al.，Nature(1985)315，592-594)。而且，使用烟草时，将目标抗体基因插入植物表达用载体(例如pMON530)，将该载体导入根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)之类的细菌。使该细菌感染烟草(例如Nicotianatabacum)，从该烟草的叶子中得到所需的抗体(Julian，K.-C.Ma et al.，Eur.J.Immunol.(1994)24，131-138)。
如上所述利用体外或体内的产生系统产生抗体时，可以将编码抗体重链(H链)或轻链(L链)的DNA分别插入表达载体，使宿主同时转化；或者也可以将编码H链和L链的DNA插入单一的表达载体，使宿主转化(参照国际专利申请公开号WO 94-11523)。
本发明中使用的抗体，只要可以适用于本发明即可，可以是抗体的片段或其修饰物。例如，作为抗体的片段，可列举：Fab、F(ab’)2、Fv或用适当的连接体使H链和L链连接的单链Fv(scFv)。
具体而言，将抗体用酶(例如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶)进行处理，生成抗体片段，或者构筑编码这些抗体片段的基因，将其导入表达载体后，在适当的宿主细胞中表达(例如，参照Co，M.S.et al.，J.Immunol.(1994)152，2968-2976；Better，M.&Horwitz，A.H.，Methods inEnzymology(1989)178，476-496；Plueckthun，A.&Skerra，A.，Methodsin Enzymology(1989)178，497-515；Lamoyi，E.，Methods inEnzymology(1989)121，652-663；Rousseaux，J.et al.，Methods inEnzymology(1989)121，663-666；Bird，R.E.et al.，TIBTECH(1991)9，132-137)。
scFv通过连接抗体的H链V区和L链V区而得到。该scFv中，H链V区和L链V区通过连接体(优选通过肽连接体)进行连接(Huston，J.S.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1988)85，5879-5883)。scFv中的H链V区和L链V区也可以来源于作为上述抗体记载的任一种抗体。作为连接V区的肽连接体，例如可以使用由氨基酸12-19残基构成的任意单链肽。
编码scFv的DNA，可以通过以下方法获得：以编码前述抗体的H链或H链V区的DNA，以及编码L链或L链V区的DNA作为模板，将编码这些序列中所需的氨基酸序列的DNA部分，使用规定其两端的引物对，利用PCR法进行扩增，然后，进一步组合编码肽连接体部分的DNA以及为使其两端分别与H链、L链连接而规定的引物对，并进行扩增。
另外，一旦编码scFv的DNA被制成，就可以根据常法得到含有它们的表达载体以及由该表达载体而转化的宿主，另外，使用该宿主根据常法可以得到scFv。
这些抗体的片段，可以与前述同样来获得其基因并使其表达，再通过宿主而产生。本发明中所说的“抗体”中也包括这些抗体的片段。
作为抗体的修饰物，还可以使用与聚乙二醇(PEG)等各种分子结合的抗体。本发明中所说的“抗体”中也包括这些抗体修饰物。为了得到这样的抗体修饰物，可以通过对所得抗体实施化学修饰而得到。这些方法在该领域中是已经确立的。
如上述那样产生、表达的抗体，可以自细胞内外、宿主分离，并纯化至均一。本发明中所用的抗体的分离、纯化可以利用亲和色谱法进行。作为亲和色谱法中使用的柱，例如可列举：蛋白质A柱、蛋白质G柱。作为蛋白质A柱中所用的载体，例如可列举：HyperD、POROS、SepharoseF.F.等。另外可以使用通常的蛋白质所用的分离、纯化方法，并没有任何限定。
例如，可以适当选择、组合除上述亲和色谱法以外的色谱法、过滤、超滤、盐析、透析等，来分离、纯化本发明中使用的抗体。作为色谱法，例如可列举：离子交换色谱法、疏水色谱法、凝胶过滤等。这些色谱法适用于HPLC(高效液相色谱法，high performance liquidchromatography)。另外还可以使用反相HPLC(reverse phase HPLC)。
上述得到的抗体的浓度测定可以通过吸光度测定或ELISA等而进行。即，通过吸光度测定的情况下，用PBS(-)适当稀释后，测定280nm的吸光度，以1mg/ml作为1.35OD来计算。另外，使用ELISA的情况下，可以如下述那样进行测定。即，在96孔板(Nunc制)中加入用0.1M重碳酸缓冲液(pH 9.6)稀释至1μg/ml的山羊抗人IgG(TAG制)100μl，在4℃下孵化一晚，使抗体固相化。阻断后，添加适当稀释的本发明中所用抗体或含有抗体的样品，或者作为标准品的人IgG(CAPPEL制)100μl，在室温下孵化1小时。
洗净后，加入稀释5000倍的碱性磷酸酶标记抗人IgG(BIOSOURCE制)100μl，室温下孵化1小时。洗净后加入基质溶液，孵化后，使用微量培养板读数模型3550(MICROPLATE READER Model3550)(Bio-Rad制)测定405nm下的吸光度，算出目标抗体的浓度。
本发明中使用的IL-6变体是具有与IL-6受体的结合活性，且不传导IL-6的生物学活性的物质。即，IL-6变体与IL-6对IL-6受体竞争性结合，但不传导IL-6的生物学活性，因此可以阻断IL-6引起的信号传导。
IL-6变体通过取代IL-6的氨基酸序列的氨基酸残基而引入突变进而制得。构成IL-6变体的基础的IL-6，不管其来源，若考虑抗原性等，则优选为人IL-6。
具体而言，通过以下方法进行制备：将IL-6氨基酸序列使用公知的分子建模程序，例如WHATIF(Vriend et al.，J.Mol.Graphics(1990)8，52-56)来预测其二级结构，进而评价对取代的氨基酸残基全体的影响。决定适当的取代氨基酸残基后，以含有碱基序列的载体作为模板(所述碱基序列是编码人IL-6基因的碱基序列)，通过通常进行的PCR法引入突变，以使氨基酸被取代，从而得到编码IL-6变体的基因。根据需要将其插入适当的表达载体，基于前述重组抗体的表达、产生以及纯化方法可以得到IL-6变体。
作为IL-6变体的具体例，公开有Brakenhoff et al.，J.Biol.Chem.(1994)269，86-93，以及Savino et al.，EMBO J.(1994)13，1357-1367、WO 96-18648，WO 96-17869。
本发明中使用的IL-6部分肽或IL-6受体部分肽是分别具有与IL-6受体或IL-6的结合活性，且不传导IL-6的生物学活性的物质。即，IL-6部分肽或IL-6受体部分肽结合于IL-6受体或IL-6，通过捕捉它们，从而特异性地阻断IL-6与IL-6受体的结合。其结果为，由于不传导IL-6的生物学活性，因而阻断IL-6引起的信号传导。
IL-6部分肽或IL-6受体部分肽，是由IL-6或IL-6受体的氨基酸序列中与IL-6和IL-6受体的结合相关的区域的一部分或全部的氨基酸序列构成的肽。这种肽通常由10～80，优选20～50，更优选20～40个氨基酸残基构成。
IL-6部分肽或IL-6受体部分肽，可以通过通常公知的方法，例如基因工程方法或肽合成法进行制作，即在IL-6或IL-6受体的氨基酸序列中，确定与IL-6和IL-6受体结合相关的区域，以该确定区域的一部分或全部的氨基酸序列为基础的方法。
使用基因工程方法制作IL-6部分肽或IL-6受体部分肽时，将编码所需的肽的DNA序列插入表达载体，根据前述重组抗体的表达、产生以及纯化方法可以制得。
使用肽合成法制作IL-6部分肽或IL-6受体部分肽时，可以使用在肽合成中常用的方法，例如固相合成法或液相合成法。
具体而言，可以根据“续医药品的开发第14卷肽合成监修矢岛治明广川书店1991年”中记载的方法进行。作为固相合成法，例如可以使用以下方法：在不溶于有机溶剂的支撑体上结合对应于要合成的肽的C末端的氨基酸，通过交替重复以下的反应来拉伸肽链，所述反应为：将氨基酸按照从C末端到N末端方向的顺序使每个氨基酸进行缩合的反应，所述氨基酸是用适当的保护基保护α-氨基酸和侧链官能团的氨基酸；以及(2)使结合在树脂上的氨基酸或肽的α-氨基酸的该保护基脱离的反应。固相肽合成法根据所用的保护基的种类，大致分为Boc法和Fmoc法。
这样合成目标肽之后，进行脱保护反应以及从肽链的支撑体的切断反应。在与肽链的切断反应中，Boc法通常可以使用氟化氢或三氟甲磺酸；Fmoc法通常可以使用TFA。Boc法中，例如在氟化氢中在苯甲醚存在下，处理上述保护肽树脂。然后，进行保护基的脱离和从支撑体的切断，来回收肽。通过将其冷冻干燥而得到粗肽。另一方面，Fmoc法中，例如在TFA中按照与上述同样的操作进行脱保护反应和从肽链支撑体的切断反应。
得到的粗肽可以采用HPLC来分离、纯化。其溶出可以使用蛋白质纯化中常用的水-乙腈系溶剂，在最适条件下进行。分取对应于所得图谱的特性峰的组分，将其进行冷冻干燥。对于这样纯化的肽组分，通过质谱分析来进行分子量解析、氨基酸组成分析或氨基酸序列解析等，从而进行鉴定。
IL-6部分肽以及IL-6受体部分肽的具体例，已在日本特开平2-188600、日本特开平7-324097、日本特开平8-311098以及美国专利公报US5210075中公开。
本发明中使用的抗体，也可以是与聚乙二醇(PEG)、放射性物质、毒素等各种分子结合的共轭抗体(コンジユゲ一ト抗体)。这样的共轭抗体可以通过对所得到的抗体实施化学修饰而得到。另外，抗体的修饰方法在该领域中已经确立。本发明中的“抗体”中也包含这些共轭抗体。
本发明的心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂可以用于心肌梗塞的治疗。
在本发明中，“心肌梗塞治疗”是指抑制或预防心肌梗塞的症状以及心肌梗塞中并发的心力衰竭、缺血引起的重度心律不齐。
作为心肌梗塞中并发的症状，可列举：心律不齐(期外收缩、心室纤维性颤动、房室传导阻滞)、心力衰竭、乳头肌断裂、心破裂、心室瘤(作为左冠动脉前降支梗塞的结果在心尖部生成)、心肌梗塞后症候群等，本发明的“心肌梗塞治疗剂”也可以抑制、预防这些症状。
另外，在本发明中，“心肌梗塞后左心室重塑的抑制”是指抑制或预防心肌梗塞后用于弥补梗塞区的功能降低的心肌肥大(左心室全体扩张)。
该心肌肥大，是由于梗塞区的心肌细胞坏死、脱落，被置换成胶原纤维等纤维组织，纤维组织薄且伸展而引起的。因此抑制、预防“置成换梗塞区的胶原纤维”以及“纤维组织的伸展”，即改善梗塞区的状态，也包含在上述的“心肌梗塞后左心室重塑的抑制”中。
确认心肌梗塞的症状以及心肌梗塞后的左心室重塑是否被抑制，可以以心肌梗塞区以及非梗塞区的髓过氧化物酶(MPO)活性作为指标进行判断。已知髓过氧化物酶(MPO)是噬中性粒细胞的细胞内颗粒中存在的酶，如果有冠动脉疾病，则活性会显著地上升。随着梗塞区的扩大以及恶化(坏死等)，使MPO活性增加。即通过给予本发明的药物，从而在MPO活性被抑制的情况下，可以认为心肌梗塞的症状以及心肌梗塞后的左心室重塑被抑制。MPO活性可以根据公知的方法进行测定，例如可以列举出实施例中记载的测定方法。
另外，确认心肌梗塞的症状以及心肌梗塞后的左心室重塑是否被抑制，也可以以心肌梗塞区以及非梗塞区的MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1，monocyte chemoattractant protein-1)的表达作为指标进行判断。已知MCP-1是在心肌内诱导巨噬细胞，通过炎症性细胞因子的表达亢进而成为心力衰竭发病原因的趋化因子，使炎症活化、引起血管周围或心肌的纤维化。随着梗塞区的扩大以及恶化(坏死等)，MCP-1的表达增大。即，MCP-1的表达被抑制时，可以认为心肌梗塞的症状以及心肌梗塞后的左心室重塑被抑制。MCP-1的表达可以使用公知的蛋白质表达测定方法进行测定，例如可以列举出蛋白质印迹法或ELISA法等。
抑制MPO活性以及抑制MCP-1的表达，均意味着上述的“改善梗塞区的状态”。
进而，通过心脏超声波检查来测定左心室扩张末期径(径)以及射血分数，或者通过心脏组织的组织学检查来对心肌纤维化的程度或心肌细胞肥大进行定量评价，从而也可以判断心肌梗塞的症状以及心肌梗塞后的左心室重塑是否被抑制。这些可以通过公知的方法来实施。例如可以列举出实施例中记载的方法。
本发明中使用的IL-6抑制剂的IL-6信号转导抑制活性，可以通过通常使用的方法进行评价。具体而言，通过培养IL-6依存性人骨髓瘤株(S6B45，KPMM2)、人Lennert T淋巴瘤细胞株KT3、或IL-6依存性细胞MH60.BSF2，在其中添加IL-6，同时共存有IL-6抑制剂，从而可以测定IL-6依存性细胞的3H-胸腺嘧啶核苷摄取。另外，通过培养IL-6受体表达细胞U266，添加125I标记IL-6，同时加入IL-6抑制剂，从而测定结合于IL-6受体表达细胞的125I标记IL-6。上述检测系统中，除了存在IL-6抑制剂的组，还有不含IL-6抑制剂的阴性对照组，比较两者中得到的结果，则可以评价IL-6抑制剂的IL-6抑制活性。
如后述的实施例中所述，通过给予抗IL-6受体抗体，从而可以确认抑制心肌梗塞的症状和心肌梗塞后的左心室重塑，因此可知抗IL-6受体抗体等的IL-6抑制剂作为心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂是有用的。
本发明的心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑抑制剂的给药对象是哺乳动物。哺乳动物优选为人。
本发明的心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂，可以以药品的形态给药，可以口服或非口服的全身或局部给药。例如可以选择点滴等静脉内注射、肌肉内注射、腹腔内注射、皮下注射、栓剂、灌肠剂、口服肠溶制剂等，可以根据患者的年龄、症状等来选择适当的给药方法。有效给药量每次每1kg体重在0.01mg～100mg的范围内选择。或者每个患者选择1～1000mg，优选5～50mg的给药量。优选的给药量、给药方法，例如在抗IL-6受体抗体的情况下，血中游离抗体存在的程度的量为有效给药量，作为具体的例子，每1kg体重1个月(4周)0.5mg～40mg，优选1mg～20mg，分1次～数次给药，例如2次/周、1次/周、1次/2周、1次/4周等按照给药时间表用点滴等静脉注射、皮下注射等方法进行给药的方法。给药时间表，可以一边观察移植后的状态以及观察血液检查值的动向，一边进行延长给药间隔等调整，如从2次/周或1次/周调整为1次/2周、1次/3周、1次/4周。
在本发明中心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂中，也可以添加保存剂、稳定剂等制剂上容许的载体。制剂上容许的载体是指其自身可以是对上述心肌梗塞症状以及心肌梗塞后的左心室重塑具有抑制效果的材料，也可以是不具有该抑制效果的材料，可与上述药物同时给药的材料。另外，也可以是对心肌梗塞症状以及心肌梗塞后左心室重塑具有抑制效果的材料，通过与IL-6抑制剂并用，从而具有协同或相加的稳定效果的材料。
作为制剂上容许的材料，例如可列举：灭菌水、生理盐水、稳定剂、赋性剂、缓冲剂、防腐剂、表面活性剂、络合剂(EDTA等)、粘合剂等。
本发明中，作为表面活性剂可以列举出非离子表面活性剂，例如可以列举出以下物质作为典型的例子：失水山梨醇单辛酸酯、失水山梨醇单月桂酸酯、失水山梨醇单棕榈酸酯等失水山梨醇脂肪酸酯；单辛酸甘油酯、单肉豆蔻酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯等甘油脂肪酸酯；单硬脂酸十聚甘油酯、双硬脂酸十聚甘油酯、单亚油酸十聚甘油酯等聚甘油脂肪酸酯；聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇三油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇三硬脂酸酯等聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯；聚氧乙烯失水山梨醇四硬脂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇四油酸酯等聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯；聚氧乙烯甘油单硬脂酸酯等聚氧乙烯甘油脂肪酸酯；聚乙二醇二硬脂酸酯等聚乙二醇脂肪酸酯；聚氧乙烯月桂醚等聚氧乙烯烷基醚；聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯丙基醚、聚氧乙烯聚氧丙烯十六烷基醚等聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚；聚氧乙烯壬基酚醚等聚氧乙烯烷基酚醚；聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯硬化蓖麻油(聚氧乙烯氢化蓖麻油)等聚氧乙烯硬化蓖麻油；聚氧乙烯失水山梨醇蜂蜡等聚氧乙烯蜂蜡衍生物；聚氧乙烯羊毛脂等聚氧乙烯羊毛脂衍生物；聚氧乙烯硬脂酸酰胺等聚氧乙烯脂肪酸酰胺等具有HLB6～18的物质等。
另外，作为表面活性剂也可以列举出阴离子表面活性剂，例如可以列举出以下物质作为典型的例子：十六烷基硫酸钠、月桂基硫酸钠、油烯基硫酸钠等具有碳原子数10～18的烷基的烷基硫酸盐；聚氧乙烯月桂基硫酸钠等氧化乙烯的平均加成摩尔数为2～4、烷基碳原子数10～18的聚氧乙烯烷基醚硫酸盐；月桂基磺基琥珀酸酯钠等烷基碳原子数为8～18的烷基磺基琥珀酸酯盐；天然的表面活性剂，例如卵磷脂、甘油磷脂；神经鞘磷脂等鞘磷脂；碳原子数12～18的脂肪酸的蔗糖脂肪酸酯等。
本发明的药剂中可以组合添加这些表面活性剂的一种或两种以上。本发明的制剂中使用的优选的表面活性剂为聚山梨醇酯20，40，60或80等聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯，特别优选的是聚山梨醇酯20和80。另外，也优选以泊洛沙姆(Pluronic F-68(注册商标)等)为代表的聚氧乙烯聚氧丙烯二醇。
表面活性的添加量根据使用的表面活性剂的种类而不同，当为聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80时，一般为0.001～100mg/ml，优选为0.003～50mg/ml，进一步优选为0.005～2mg/ml。
作为本发明中的缓冲剂，可以列举出磷酸、柠檬酸缓冲液、醋酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、磷酸钾、葡萄糖酸、癸酸、去氧胆酸、水杨酸、三乙醇胺、富马酸等其他的有机酸等，或者碳酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris缓冲液)、组氨酸缓冲液、咪唑缓冲液等。
另外也可以通过溶解在溶液制剂领域中公知的水性缓冲液中来制备溶液制剂。缓冲液的浓度一般为1～500mM，优选为5～100mM，进一步优选为10～20mM。
另外，本发明的药剂也可以含有其他低分子量的多肽、血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白等蛋白质、氨基酸、多糖以及单糖等糖类或碳水化合物、糖醇。
作为本发明中的氨基酸，可以列举出碱性氨基酸，例如精氨酸、赖氨酸、组氨酸、鸟氨酸等或者这些氨基酸的无机盐(优选盐酸盐、磷酸盐的形式，即磷酸氨基酸)。使用游离氨基酸时，优选pH值通过添加适当的生理上容许的缓冲物质(例如无机酸，特别是盐酸、磷酸、硫酸、醋酸、蚁酸或者它们的盐)来进行调节。这种情况下使用磷酸盐时，特别是在获得稳定的冷冻干燥物方面是特别有利的。当制备物实质上不含有机酸(例如苹果酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸等)时或者不存在相应的阴离子(苹果酸离子、酒石酸离子、柠檬酸离子、琥珀酸离子、富马酸离子等)时，是特别有利。优选的氨基酸为精氨酸、赖氨酸、组氨酸或鸟氨酸。而且也可以使用酸性氨基酸，例如谷氨酸和天冬氨酸及其盐的形式(优选钠盐)；或者中性氨基酸，例如异亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸、丝氨酸，苏氨酸，缬氨酸，蛋氨酸，半胱氨酸或丙氨酸；或者芳香族氨基酸，例如苯基丙氨酸、酪氨酸、色氨酸或衍生物N-乙酰基色氨酸。
在本发明中，作为多糖以及单糖等糖类或碳水化合物，例如可列举：右旋糖苷、葡萄糖、果糖、乳糖、木糖、甘露糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖等。
在本发明中，作为糖醇，例如可列举：甘露醇、失水山梨醇、纤维醇等。
将本发明的药物制成注射用水溶液时，例如可以与含有生理盐水、葡萄糖或其他辅助药(例如D-失水山梨醇、D-甘露糖、D-甘露醇、氯化钠)的等渗液混合，另外该水溶液也可以与适当的溶解辅助剂(例如醇(乙醇等)、多元醇(丙二醇、PEG等)、非离子表面活性剂(聚山梨醇酯80、HCO-50)等)并用。
根据需要还可进一步含有稀释剂、溶解辅助剂、pH调节剂、无痛剂、含硫还原剂、抗氧化剂等。
本发明中，作为含硫还原剂，例如可列举：N-乙酰半胱氨酸、N-乙酰高半胱氨酸、硫辛酸、硫代二甘醇、硫代乙醇胺、硫代甘油、硫代失水山梨醇、巯基乙酸及其盐、硫代硫酸钠，谷胱甘肽以及碳原子数1～7的硫代直链烷酸等具有巯基的物质等。
另外，作为本发明中的抗氧化剂，例如可列举：异抗坏血酸、二丁基羟基甲苯、丁基羟基茴香醚、α-生育酚、生育酚乙酸酯、L-抗坏血酸及其盐、L-抗坏血酸棕榈酸酯、L-抗坏血酸硬脂酸酯、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、三戊基没食子酸酯、丙基没食子酸酯或乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、焦磷酸钠、偏磷酸钠等络合剂。
另外，根据需要，也可以通过封入微胶囊(羟甲纤维素、明胶、聚[甲基丙烯酸甲酯]等微胶囊)，制成胶体药物传递系统(脂质体、白蛋白微球、微乳、纳米粒和纳米胶囊等)(参照“Remington’s PharmaceuticalScience 16th edition”，Oslo Ed.，1980等)。而且将药物制成缓释制剂的方法也是公知的，也可适用于本发明(Langer et al.，J.Biomed.Mater.Res.1981，15：167-277；Langer，Chem.Tech.1982，12：98-105；美国专利第3,773,919号；欧洲专利申请公开(EP)第58,481号；Sidman et al.，Biopolymers 1983，22：547-556；EP第133,988号)。
所用的制剂上容许的载体，可根据剂型从上述中适宜选择或进行组合，但并不局限于这些。
本发明涉及对对象治疗心肌梗塞的方法以及抑制心肌梗塞后左心室重塑的方法，其中治疗方法包括将IL-6抑制剂给予有心肌梗塞症状的对象的工序。
在本发明中，“对象”是指给予本发明的心肌梗塞治疗剂以及心肌梗塞后左心室重塑抑制剂的生物体、该生物体体内的一部分。生物体没有特别地限定，包含动物(例如人、家畜动物种、野生动物)。
另外，“生物体体内的一部分”没有特别限定，可优选列举：心脏、心肌、心肌梗塞的梗塞区或非梗塞区等。
在本发明中，“给药”包括口服或者非口服给药。作为口服给药，可以列举出以口服制剂的形式给药，作为口服制剂，可以选择颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂或悬浊剂等剂型。
作为非口服给药，可以列举出以注射剂形式给药，作为注射剂，可以列举出皮下注射剂、肌肉注射剂或腹腔内注射剂等。另外，通过使用基因治疗方法将包含应给予的寡核苷酸的基因导入机体，可以达到本发明方法的效果。另外，本发明的药剂也可以对需实施处置的区域进行局部给药。例如也可以通过手术中的局部注入、使用导液管或本发明的编码肽的DNA的定向基因送递而进行给药。心肌梗塞发病时的处方，例如也可以与导液管手术法(PTCA、PCI)、血栓溶解疗法(PTCR)、冠状动脉旁路移植术(CABG)等同时平行地给予本发明的药剂。
实践本发明的方法时，本发明的药剂也可以与至少一种已知的化学疗法剂一起作为药学组合物的一部分进行给药。或者本发明的药剂与至少一种已知的免疫抑制剂同时给药。在一种方式中，本发明的药剂和已知的化学疗法剂可以实质上同时给药。
另外，本说明书中引用的全部背景技术文献作为参考包括在本说明书中。
实施例
下面，通过实施例进一步具体地说明本发明，但本发明并不局限于这些实施例。
[实施例1]制作心肌梗塞小鼠模型
对雄性Balb/c小鼠(25～30g)进行气管插管，安装人工呼吸器，在异氟烷0.5～1.0％的条件下进行吸入麻醉。从左侧开胸，结扎左前降支后闭胸。将小鼠分为MR16-1给药组(MR16-1组)和非给药组(对照组)，对MR16-1给药组腹腔注射500μg/只(body)的MR16-1。
[实施例2]MPO活性测定
心肌梗塞制成(冠状动脉结扎)2天后摘出小鼠心脏，分成梗塞区和非梗塞区并切碎。然后在切碎的心肌中加入10倍量的含0.5％十六烷基三甲基溴化铵的50mM KPO4缓冲液(pH 6.0)，均质化后(POLYTRON，KINEMATICAAG，Luzern，Switzerland)进行超声波粉碎。将提取液在13,000rpm、4℃下离心分离10分钟。将得到的上清液50μl与基质溶液1.45ml(50mM KPO4(pH 6.0)、0.167mg/ml邻联茴香胺二氢氯化物(o-dianisidine dihydrochloride)、0.005％H2O2)混合后，在460nm的吸光度下测定基质溶液颜色的变化(衰减系数(Extinction Coefficient)＝2.655)。
其结果为，心肌MPO活性在sham组心肌和心肌非梗塞区存在差异，但在心肌梗塞区显著增加至约4倍(非控制风险(control-non risk)0.037±0.006；控制风险(control-risk)0.122±0.035；p＜0.01)。而且在MR16-1给药组中，该心肌梗塞区的MPO活性增加被显著抑制(MR16-1-风险0.034±0.008；与控制风险(control-risk)相比p＜0.05)。
[实施例3]MCP-1表达测定
心肌梗塞制成2日后摘出小鼠的心脏，分成梗塞区和非梗塞区并切碎。在切碎的心室肌中加入裂解缓冲液(lysis buffer)(2×PBS，1％NP-40，0.5％去氧胆酸钠(sodium deoxycholate)，0.1％十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulphate)，1mM PMSF，1％蛋白酶抑制剂鸡尾酒(protease inhibitor cocktail)(/ナカライテスク))进行均质化。将这些提取液在13,000rpm、4℃下离心分离10分钟，将所得上清液制成总细胞裂解液(total cell lysate)，用Lowry法进行蛋白质定量。用12％聚丙烯酰胺凝胶分离等量的蛋白质溶液，转录到Immun-BlotTM PVDF膜上。之后使用抗MCP-1抗体(1∶30；IBL Co.)作为一次抗体，在4℃下过夜，进而使用山羊抗家兔(goat anti-rabbit)IgG(1∶400；细胞信号传导)作为二次抗体在室温下反应2小时，使用ECL(AmershamBioscience，Buckinghamshire，U.K.)的化学发光法检测MCP-1表达。使用计算机软件(Scion Image Frame Grabber Status)对照片进行图像解析。
其结果为，心肌MCP-1表达在对照组中心肌梗塞区、非梗塞区均增加，但在梗塞区更显著。而且，MCP-1给药组中在两区域该MCP-1增加均被抑制。
[实施例4]心脏超声波检查
心肌梗塞制成4周后，在麻醉下对心脏进行心脏超声波检查，测定左心室舒张末期径和左心室径缩短率(FS)。
其结果为，心肌梗塞制成4周后的心脏超声波检查中，左心室舒张末期径在对照组中比sham组显著增加。该左心室径的增加通过给予MR16-1而被显著抑制。而且FS通过制成心肌梗塞而减少，但通过给予MR16-1而显著改善(对照组18.5±2.9％对比MR16-1组28.5±1.8％；p＜0.05)。
[实施例5]组织学评价
心肌梗塞制成4周后摘出心脏，用4％多聚甲醛磷酸缓冲液固定，进行石蜡包埋。切薄后，进行Masson’s三色染色，对非梗塞区的心肌纤维化程度以及心肌短轴断面中的心肌细胞肥大进行定量评价。
其结果为，在心肌非梗塞区，对照组中发现心肌细胞的肥大、间质的纤维化，相对而言MR16-1给药组中这些症状被抑制。
工业适用性
心肌梗塞如果梗塞区扩大、恶化，则有时并发心力衰竭，或由缺血引起重度的心律不齐，对生命有很高的危险性。本发明的心肌梗塞治疗剂、心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂以及通过治疗或预防心肌梗塞的方法，从而可以对心肌梗塞中并发的症状进行抑制，进行有效地治疗。
认为心肌梗塞后左心室重塑的发病率也与梗塞区的大小有关，从心肌梗塞发病初期，改善梗塞区的状态，防止其扩大是很重要的。认为通过以本发明的IL-6抑制剂作为有效成分的药物从心肌梗塞初期开始对患者给药，从而可抑制心肌梗塞中并发的症状和左心室重塑。

Claims (6)

1.与IL-6受体结合而抑制IL-6与IL-6受体结合的抗体在制造心肌梗塞治疗剂中的用途。
2.与IL-6受体结合而抑制IL-6与IL-6受体结合的抗体在制造心肌梗塞后左心室重塑的抑制剂中的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，抗体是单克隆抗体。
4.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，抗体是抗人IL-6受体的抗体。
5.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，抗体是重组抗体。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。
CN2006800475324A 2005-10-21 2006-10-20 心脏病治疗剂 Active CN101330930B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005307349 2005-10-21
JP307349/2005 2005-10-21
PCT/JP2006/320905 WO2007046489A1 (ja) 2005-10-21 2006-10-20 心疾患治療剤

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101330930A CN101330930A (zh) 2008-12-24
CN101330930B true CN101330930B (zh) 2011-11-23

Family

ID=37962581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2006800475324A Active CN101330930B (zh) 2005-10-21 2006-10-20 心脏病治疗剂

Country Status (15)

Country Link
US (1) US8945558B2 (zh)
EP (1) EP1941908B1 (zh)
JP (1) JP5191235B2 (zh)
KR (1) KR101239051B1 (zh)
CN (1) CN101330930B (zh)
AR (1) AR058135A1 (zh)
AU (1) AU2006305119B2 (zh)
BR (1) BRPI0617664B8 (zh)
CA (1) CA2626688C (zh)
HK (1) HK1124534A1 (zh)
IL (1) IL190991A (zh)
NO (1) NO20082311L (zh)
RU (1) RU2450830C2 (zh)
WO (1) WO2007046489A1 (zh)
ZA (1) ZA200804238B (zh)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2011514T3 (da) 1997-03-21 2012-03-26 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Forebyggende eller terapeutisk middel til sensibiliserede-T-celle-medierede sygdomme omfattende IL-6-antagonist som en aktiv bestanddel
UA80091C2 (en) 2001-04-02 2007-08-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Remedies for infant chronic arthritis-relating diseases and still's disease which contain an interleukin-6 (il-6) antagonist
DK1475101T3 (da) 2002-02-14 2011-01-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antistof-holdige farmaceutiske opløsninger
GB2401040A (en) 2003-04-28 2004-11-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for treating interleukin-6 related diseases
EP3736295A1 (en) * 2004-03-24 2020-11-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Subtypes of humanized antibody against interleukin-6 receptor
US11660317B2 (en) 2004-11-08 2023-05-30 The Johns Hopkins University Compositions comprising cardiosphere-derived cells for use in cell therapy
EP3050963B1 (en) 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly
BRPI0617378B8 (pt) 2005-10-14 2022-09-20 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Uso de um inibidor de il-6 para produzir uma composição farmacêutica para suprimir dano a um ilhota transplantada depois do transplante de ilhota; e aperfeiçoar a viabilidade de uma ilhota em um transplante de ilhota
KR101239051B1 (ko) 2005-10-21 2013-03-04 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 심장질환 치료제
AR057582A1 (es) * 2005-11-15 2007-12-05 Nat Hospital Organization Agentes para suprimir la induccion de linfocitos t citotoxicos
TW200803894A (en) * 2005-11-25 2008-01-16 Univ Keio Prostate cancer therapeutic agents
AU2007208678B2 (en) * 2006-01-27 2013-01-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Therapeutic agents for diseases involving choroidal neovascularization
EP3345616A1 (en) 2006-03-31 2018-07-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody modification method for purifying bispecific antibody
IN2014DN10515A (zh) 2006-03-31 2015-08-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd
EP2025346B1 (en) * 2006-04-07 2016-08-10 Osaka University Muscle regeneration promoter
CL2008000188A1 (es) * 2007-01-23 2008-07-18 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente para suprimir la reaccion de rechazo cronica que comprende como ingrediente activo un inhibidor de il-6; y uso del inhibidor de il-6.
CA2700701C (en) 2007-09-26 2020-12-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in cdr
PL3059246T3 (pl) 2007-09-26 2018-11-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Zmodyfikowany region stały przeciwciała
ES2834741T3 (es) 2007-12-05 2021-06-18 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-NR10 y uso del mismo
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
SG189775A1 (en) 2008-04-11 2013-05-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly
TW201503898A (zh) 2008-06-05 2015-02-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 神經浸潤抑制劑
TWI440469B (zh) 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
TWI646193B (zh) 2009-03-19 2019-01-01 中外製藥股份有限公司 抗體恆定區域改變體
EP2409991B1 (en) 2009-03-19 2017-05-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody constant region variant
CN102459344A (zh) 2009-05-15 2012-05-16 中外制药株式会社 抗axl抗体
WO2011037158A1 (ja) 2009-09-24 2011-03-31 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
BR122022001178B1 (pt) 2009-10-26 2022-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Método para a produção de uma imunoglobulina glicosilada e seu uso
JP5889181B2 (ja) 2010-03-04 2016-03-22 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
WO2011149051A1 (ja) 2010-05-28 2011-12-01 中外製薬株式会社 抗腫瘍t細胞応答増強剤
US8580264B2 (en) 2010-11-08 2013-11-12 Genentech, Inc. Subcutaneously administered anti-IL-6 receptor antibody
CN103328632A (zh) 2010-11-30 2013-09-25 中外制药株式会社 与多分子的抗原重复结合的抗原结合分子
KR101178947B1 (ko) * 2011-04-29 2012-09-03 한국생명공학연구원 올레아놀린산 아세테이트를 유효성분으로 포함하는 ｔｌｒ 및 ｉｌ-6 매개성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물
US11286463B2 (en) 2012-03-08 2022-03-29 Advanced ReGen Medical Technologies, LLC Reprogramming of aged adult stem cells
US9828603B2 (en) 2012-08-13 2017-11-28 Cedars Sinai Medical Center Exosomes and micro-ribonucleic acids for tissue regeneration
US10782290B2 (en) 2013-06-11 2020-09-22 National Center Of Neurology And Psychiatry Method for predicting post-therapy prognosis of relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patient, and method for determining applicability of novel therapy
JP6563910B2 (ja) 2013-07-04 2019-08-21 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 血清サンプル中の抗薬物抗体を検出するための干渉抑制イムノアッセイ
SG10201803449VA (en) 2013-09-27 2018-05-30 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for producing polypeptide heteromultimer
US10772911B2 (en) 2013-12-20 2020-09-15 Advanced ReGen Medical Technologies, LLC Cell free compositions for cellular restoration and methods of making and using same
WO2015095794A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 Advanced ReGen Medical Technologies, LLC Compositions for cellular restoration and methods of making and using same
WO2016054591A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Cedars-Sinai Medical Center Cardiosphere-derived cells and exosomes secreted by such cells in the treatment of muscular dystrophy
WO2016136933A1 (ja) 2015-02-27 2016-09-01 中外製薬株式会社 Ｉｌ－６関連疾患治療用組成物
JP7082484B2 (ja) 2015-04-01 2022-06-08 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
EP3299810B1 (en) 2015-05-19 2021-07-07 National Center of Neurology and Psychiatry Method for determining application of novel therapy to multiple sclerosis (ms) patient
EP3329018B1 (en) * 2015-07-31 2021-03-31 Medimmune Limited Il-6 antagonists for use in treating hepcidin-mediated disorders
SG11201803989WA (en) 2015-12-28 2018-06-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for promoting efficiency of purification of fc region-containing polypeptide
US11253551B2 (en) 2016-01-11 2022-02-22 Cedars-Sinai Medical Center Cardiosphere-derived cells and exosomes secreted by such cells in the treatment of heart failure with preserved ejection fraction
WO2017147169A1 (en) 2016-02-22 2017-08-31 Ohio State Innovation Foundation Chemoprevention using controlled-release formulations of anti-interleukin 6 agents, synthetic vitamin a analogues or metabolites, and estradiol metabolites
CA3023468A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Advanced ReGen Medical Technologies, LLC Microrna compositions and methods of making and using same
WO2017210652A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Cedars-Sinai Medical Center Cdc-derived exosomes for treatment of ventricular tachyarrythmias
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
EP3515459A4 (en) * 2016-09-20 2020-08-05 Cedars-Sinai Medical Center CELLS DERIVED FROM CARDIOSPHERES AND THEIR EXTRACELLULAR VESICLES TO DELAY OR REVERSE AGING AND AGE-RELATED DISORDERS
US11033496B2 (en) 2017-03-17 2021-06-15 The Regents Of The University Of Michigan Nanoparticles for delivery of chemopreventive agents
WO2018195210A1 (en) 2017-04-19 2018-10-25 Cedars-Sinai Medical Center Methods and compositions for treating skeletal muscular dystrophy
EP3620531A4 (en) 2017-05-02 2021-03-17 National Center of Neurology and Psychiatry METHOD OF PREDICTION AND EVALUATION OF THERAPEUTIC EFFECT IN DISEASES RELATING TO IL-6 AND NEUTROPHILS
JP7235249B2 (ja) 2017-10-20 2023-03-08 学校法人兵庫医科大学 抗ｉｌ－６受容体抗体を含有する術後の癒着を抑制するための医薬組成物
EP3727351A4 (en) 2017-12-20 2021-10-06 Cedars-Sinai Medical Center MODIFIED EXTRACELLULAR VESICLES FOR IMPROVED TISSUE DELIVERY
EP3740576A4 (en) 2018-01-18 2021-10-20 Advanced Regen Medical Technologies, LLC THERAPEUTIC COMPOSITIONS AND THEIR PREPARATION AND USE METHODS
KR20200132938A (ko) 2018-03-15 2020-11-25 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 지카 바이러스에 대해 교차-반응성을 갖는 항-뎅기 바이러스 항체 및 사용 방법
US20220177978A1 (en) 2019-04-02 2022-06-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods of predicting and preventing cancer in patients having premalignant lesions
JPWO2022091375A1 (zh) 2020-10-30 2022-05-05

Family Cites Families (111)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5171840A (en) 1988-01-22 1992-12-15 Tadamitsu Kishimoto Receptor protein for human B cell stimulatory factor-2
US5670373A (en) * 1988-01-22 1997-09-23 Kishimoto; Tadamitsu Antibody to human interleukin-6 receptor
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
JP2914672B2 (ja) 1989-01-17 1999-07-05 中外製薬株式会社 Ｂｓｆ▲下２▼アンタゴニスト
US5216128A (en) * 1989-06-01 1993-06-01 Yeda Research And Development Co., Ltd. IFN-β2/IL-6 receptor its preparation and pharmaceutical compositions containing it
CA2021594C (en) 1989-07-20 2002-01-08 Tadamitsu Kishimoto Antibody to human interleukin-6 receptor
JP2898064B2 (ja) 1989-08-03 1999-05-31 忠三 岸本 ヒトｇｐ１３０蛋白質
JP2898040B2 (ja) 1990-01-26 1999-05-31 忠三 岸本 ｇｐ１３０蛋白質に対する抗体
US5210075A (en) 1990-02-16 1993-05-11 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Interleukin 6 antagonist peptides
DK0585287T3 (da) 1990-07-10 2000-04-17 Cambridge Antibody Tech Fremgangsmåde til fremstilling af specifikke bindingsparelementer
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
EP0546073B1 (en) 1990-08-29 1997-09-10 GenPharm International, Inc. production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
WO1994025585A1 (en) 1993-04-26 1994-11-10 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
TW205553B (zh) 1991-04-25 1993-05-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd
WO1993006213A1 (en) 1991-09-23 1993-04-01 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
AU673985B2 (en) 1991-11-08 1996-12-05 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University CD8 binding domain peptides
PT1024191E (pt) 1991-12-02 2008-12-22 Medical Res Council Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos
AU3328493A (en) 1991-12-17 1993-07-19 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
WO1993019172A1 (en) 1992-03-24 1993-09-30 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
EP0652950B1 (en) 1992-07-24 2007-12-19 Amgen Fremont Inc. Generation of xenogeneic antibodies
FR2694767B1 (fr) 1992-08-13 1994-10-21 Innotherapie Lab Sa Anticorps monoclonaux anti-IL6R, et leurs applications.
US5648267A (en) 1992-11-13 1997-07-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Impaired dominant selectable marker sequence and intronic insertion strategies for enhancement of expression of gene product and expression vector systems comprising same
JP3525221B2 (ja) * 1993-02-17 2004-05-10 味の素株式会社 免疫抑制剤
US5468772A (en) 1993-03-10 1995-11-21 Pharmagenesis, Inc. Tripterinin compound and method
JP3614183B2 (ja) 1993-05-31 2005-01-26 中外製薬株式会社 ヒトインターロイキン−６に対する再構成ヒト抗体
WO1994028159A1 (fr) 1993-05-31 1994-12-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anticorps humain reconstruit contre l'interleukine-6 humaine
GB9313509D0 (en) 1993-06-30 1993-08-11 Medical Res Council Chemisynthetic libraries
US5888510A (en) * 1993-07-21 1999-03-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
US6074643A (en) * 1993-09-09 2000-06-13 Cli Oncology, Inc. Site-directed chemotherapy of metastases
AU7967294A (en) 1993-10-06 1995-05-01 Board Of Regents, The University Of Texas System A monoclonal anti-human il-6 receptor antibody
AU690171B2 (en) 1993-12-03 1998-04-23 Medical Research Council Recombinant binding proteins and peptides
JPH07324097A (ja) 1994-05-30 1995-12-12 Daicel Chem Ind Ltd インターロイキン６拮抗剤、及びペプチド類または医薬として許容されるその塩類
US6083501A (en) 1994-06-07 2000-07-04 Toray Industries, Inc. Drug for prevention and therapy of diseases caused by fibrinoid formation or thrombus formation in the lung and model animals of the diseases
US8017121B2 (en) * 1994-06-30 2011-09-13 Chugai Seiyaku Kabushika Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
AU700819B2 (en) 1994-10-07 1999-01-14 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Rheumatoid arthritis remedy containing IL-6 antagonist as effective component
CZ296979B6 (cs) 1994-10-21 2006-08-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Farmaceutický prípravek pro prevenci nebo lécení Castlemanovy nemoci
IT1274350B (it) 1994-12-06 1997-07-17 Angeletti P Ist Richerche Bio Antagonisti di interleuchina-6(il-6) che consistono di forme solubili del ricettore alfa di il-6, mutate nell'interfaccia che si lega a gp 130
IT1274782B (it) 1994-12-14 1997-07-24 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodo per selezionare superagonisti, antagonisti e superantagonisti di ormoni del cui complesso recettoriale fa parte gp 130
ES2264135T3 (es) 1995-02-13 2006-12-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Inhibidor de la descomposicion de proteinas musculares que contienen anticuerpos frente al receptor de il-6.
AU5332196A (en) 1995-03-31 1996-10-16 Henrik Georg Bohr Method for protein folding
FR2733250B1 (fr) 1995-04-21 1997-07-04 Diaclone Anticorps monoclonaux anti-gp130, et leurs utilisations
JP4312259B2 (ja) 1995-04-27 2009-08-12 アムジェン フレモント インク． 免疫したゼノマウス（ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ）に由来するヒト抗体
AU2466895A (en) 1995-04-28 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
JPH08311098A (ja) 1995-05-22 1996-11-26 Daicel Chem Ind Ltd 新規ペプチド類およびそれを含有するインターロイキン６拮抗剤
US5571513A (en) 1995-05-31 1996-11-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Anti-gp130 monoclonal antibodies
RU2127117C1 (ru) 1996-06-26 1999-03-10 Филиппова Ольга Всеволодовна Способ лечения ишемической болезни сердца
GB9702944D0 (en) * 1997-02-13 1997-04-02 Univ Manchester Reducing fibrosis
DK2011514T3 (da) 1997-03-21 2012-03-26 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Forebyggende eller terapeutisk middel til sensibiliserede-T-celle-medierede sygdomme omfattende IL-6-antagonist som en aktiv bestanddel
PL192521B1 (pl) * 1997-05-17 2006-11-30 Biogen Idec Inc Zastosowanie przerywacza wiązania CD40:CD154 i kompozycja
US20020187150A1 (en) * 1997-08-15 2002-12-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventive and/or therapeutic agent for systemic lupus erythematosus comprising anti-IL-6 receptor antibody as an active ingredient
JPH11180873A (ja) 1997-12-22 1999-07-06 Kaken Shoyaku Kk ＮＦ−κＢ活性阻害剤
PT1074268E (pt) * 1998-03-17 2008-02-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agentes profilácticos ou terapêuticos para doenças intestinais inflamatórias contendo anticorpos antagonistas do receptor il-6
JP4698652B2 (ja) 1998-03-17 2011-06-08 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分として含有する炎症性腸疾患の予防又は治療剤
JP4799516B2 (ja) 1998-08-24 2011-10-26 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分として含有する膵炎の予防又は治療剤
EP1108435B1 (en) 1998-08-24 2007-01-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventives or remedies for pancreatitis containing anti-il-6 receptor antibodies as the active ingredient
US20030130212A1 (en) 1999-01-14 2003-07-10 Rossignol Daniel P. Administration of an anti-endotoxin drug by intravenous infusion
DE60023008T2 (de) 1999-07-16 2006-07-06 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd., Matsumoto Mittel zur verhinderung der chronischen abstossreaktion infolge einer organtransplantation
AU3162001A (en) 1999-12-21 2001-07-03 Id-Pharma Gmbh Medicament, a method for its production and the use thereof
US6413663B1 (en) 2000-06-29 2002-07-02 Graftech Inc. Fluid permeable flexible graphite fuel cell electrode
JP4776145B2 (ja) * 2000-10-25 2011-09-21 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分として含有する乾癬の予防又は治療剤
JP4889187B2 (ja) * 2000-10-27 2012-03-07 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分として含有する血中ｍｍｐ−３濃度低下剤
UA80091C2 (en) 2001-04-02 2007-08-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Remedies for infant chronic arthritis-relating diseases and still's disease which contain an interleukin-6 (il-6) antagonist
WO2004039826A1 (en) 2001-11-14 2004-05-13 Centocor, Inc. Anti-il-6 antibodies, compositions, methods and uses
FR2833011B1 (fr) * 2001-12-04 2004-10-29 Univ Claude Bernard Lyon Nouvelle proteine a activite inhibitrice de l'il-6
DE10231655A1 (de) 2002-07-12 2004-02-26 Blasticon Biotechnologische Forschung Gmbh Transplantat-Akzeptanz induzierende Zellen monozytären Ursprungs, sowie deren Herstellung und Verwendung
EP1572103A4 (en) 2002-11-15 2008-02-13 Centocor Inc ANTI-ANGIOGENIC USES OF IL-6 ANTAGONISTS
CA2505991C (en) * 2002-11-15 2018-02-27 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd25
CA2514997A1 (en) 2003-02-04 2004-08-26 Mohit Trikha Use of il-6 antagonists in combination with steroids to enhance apoptosis
CN100340294C (zh) 2003-02-24 2007-10-03 中外制药株式会社 含有白介素6拮抗剂的脊髓损伤治疗剂
US20040208876A1 (en) 2003-04-18 2004-10-21 Kim Kyung Jin Monoclonal antibodies to hepatocyte growth factor
GB2401040A (en) 2003-04-28 2004-11-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for treating interleukin-6 related diseases
CA2876822C (en) * 2003-08-27 2015-11-17 David Shima Combination therapy for the treatment of ocular neovascular disorders
CN1874991A (zh) * 2003-08-29 2006-12-06 小野药品工业株式会社 能够结合s1p受体的化合物及其药物用途
JP4960096B2 (ja) 2003-09-22 2012-06-27 ペントラコール ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｉｌ−６の生物学的効果を減じる化合物の使用
US20060193772A1 (en) * 2003-09-24 2006-08-31 Atsushi Ochiai Drugs for treating cancer
PL1690550T3 (pl) 2003-10-17 2013-01-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Środek do leczenia międzybłoniaka
KR100556660B1 (ko) 2003-11-11 2006-03-10 국립암센터 Ｈｇｆ의 중화가능 에피토프 및 이에 결합하는 중화 항체
AR048210A1 (es) 2003-12-19 2006-04-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Un agente preventivo para la vasculitis.
JP4609877B2 (ja) 2004-03-30 2011-01-12 塩野義製薬株式会社 慢性拒絶反応抑制剤
PL1772145T3 (pl) * 2004-07-16 2011-08-31 Kyorin Seiyaku Kk Sposób skutecznego stosowania leku i sposób dotyczący zapobiegania efektom ubocznym
BRPI0514138A (pt) * 2004-08-05 2008-05-27 Wyeth Corp método para tratar, melhorar, ou prevenir um distúrbio, proteìna de fusão, vetor, célula hospedeira recombinante, método para produzir uma proteìna de fusão, composição farmacêutica, e, métodos para transplantar/enxertar um órgão, tecido, célula ou grupo de células em um indivìduo mamìfero, e para tratar, prevenir ou melhorar rejeição de transplante/enxerto em um receptor de transplante/enxerto mamìfero
US7884196B2 (en) * 2004-10-06 2011-02-08 Oliver Lawless Vaccine composition comprising methylated DNA and immunomodulatory motifs
ES2557325T5 (es) 2004-12-28 2023-11-15 Innate Pharma Sa Anticuerpos monoclonales contra NKG2A
PE20061324A1 (es) 2005-04-29 2007-01-15 Centocor Inc Anticuerpos anti-il-6, composiciones, metodos y usos
BRPI0617378B8 (pt) 2005-10-14 2022-09-20 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Uso de um inibidor de il-6 para produzir uma composição farmacêutica para suprimir dano a um ilhota transplantada depois do transplante de ilhota; e aperfeiçoar a viabilidade de uma ilhota em um transplante de ilhota
KR101239051B1 (ko) 2005-10-21 2013-03-04 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 심장질환 치료제
AR057582A1 (es) 2005-11-15 2007-12-05 Nat Hospital Organization Agentes para suprimir la induccion de linfocitos t citotoxicos
TW200803894A (en) * 2005-11-25 2008-01-16 Univ Keio Prostate cancer therapeutic agents
AR057227A1 (es) 2005-12-09 2007-11-21 Centocor Inc Metodo para usar antagonistas de il6 con inhibidores del proteasoma
DK1966244T3 (da) 2005-12-30 2012-04-23 Merck Patent Gmbh Anti-il-6-antistoffer der forebygger bindingen af il-6 sammensat af il-6ralfa til gp130
AU2007208678B2 (en) 2006-01-27 2013-01-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Therapeutic agents for diseases involving choroidal neovascularization
EP2025346B1 (en) 2006-04-07 2016-08-10 Osaka University Muscle regeneration promoter
CA2652976C (en) 2006-06-02 2015-08-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity antibodies to human il-6 receptor
JP2010500876A (ja) 2006-08-18 2010-01-14 アブリンクス エン．ヴェー． Ｉｌ−６媒介性シグナル伝達に関連する疾患及び障害の治療のための、ｉｌ−６ｒに指向性を有するアミノ酸配列及びこれを含むポリペプチド
US20080081041A1 (en) * 2006-09-29 2008-04-03 Jeffrey Nemeth Method of Using IL6 Antagonists with Mitoxantrone for Prostate Cancer
CL2008000188A1 (es) 2007-01-23 2008-07-18 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente para suprimir la reaccion de rechazo cronica que comprende como ingrediente activo un inhibidor de il-6; y uso del inhibidor de il-6.
JP5833823B2 (ja) 2007-05-21 2015-12-16 アルダーバイオ・ホールディングズ・エルエルシー Ｉｌ−６に対する抗体およびその使用
WO2009010539A2 (en) 2007-07-19 2009-01-22 Ablynx. N.V. Receptor for interleukin-6 (il-6) from macaca fascicularis
AR068564A1 (es) * 2007-09-26 2009-11-18 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti- receptor de il-6 (interleuquina 6)
PL3059246T3 (pl) * 2007-09-26 2018-11-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Zmodyfikowany region stały przeciwciała
SG189775A1 (en) 2008-04-11 2013-05-31 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly
TW201503898A (zh) 2008-06-05 2015-02-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 神經浸潤抑制劑
TWI440469B (zh) 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
SG178190A1 (en) * 2009-07-31 2012-03-29 Shin Maeda Cancer metastasis inhibitor
JP5904552B2 (ja) 2010-05-28 2016-04-13 国立研究開発法人国立がん研究センター 膵癌治療剤
WO2011149051A1 (ja) * 2010-05-28 2011-12-01 中外製薬株式会社 抗腫瘍t細胞応答増強剤

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WO2004073741A1A1 2004.09.02

Also Published As

Publication number Publication date
IL190991A (en) 2013-09-30
AU2006305119B2 (en) 2012-12-20
JPWO2007046489A1 (ja) 2009-04-23
WO2007046489A1 (ja) 2007-04-26
AU2006305119A1 (en) 2007-04-26
AR058135A1 (es) 2008-01-23
RU2008120019A (ru) 2009-11-27
RU2450830C2 (ru) 2012-05-20
EP1941908B1 (en) 2015-08-19
CA2626688A1 (en) 2007-04-26
BRPI0617664B8 (pt) 2021-05-25
KR101239051B1 (ko) 2013-03-04
HK1124534A1 (en) 2009-07-17
NO20082311L (no) 2008-07-16
ZA200804238B (en) 2009-03-25
BRPI0617664A2 (pt) 2011-08-02
CN101330930A (zh) 2008-12-24
US8945558B2 (en) 2015-02-03
EP1941908A1 (en) 2008-07-09
BRPI0617664B1 (pt) 2021-04-13
US20090220500A1 (en) 2009-09-03
IL190991A0 (en) 2008-12-29
JP5191235B2 (ja) 2013-05-08
EP1941908A4 (en) 2010-01-06
KR20080064172A (ko) 2008-07-08
CA2626688C (en) 2017-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101330930B (zh) 心脏病治疗剂
CN101815532B (zh) 以白细胞介素6受体抑制剂为有效成分的移植物抗宿主病治疗剂
CN101646459B (zh) 慢性排斥反应抑制剂
CN101495146B (zh) 肌肉再生促进剂
CN102256623A (zh) 神经浸润抑制剂
TWI441647B (zh) 抑制細胞毒性ｔ細胞活化之藥劑
EP1967209B1 (en) Therapeutic agent for prostate cancer
CA2625773C (en) Inhibition of interleukin-6 (il-6) receptor promotes pancreatic islet transplantation
CN101370521A (zh) 伴有脉络膜血管生成的疾病的治疗药
EP2578233A1 (en) Therapeutic agent for pancreatic cancer
JP2010095445A (ja) Ｉｌ−６アンタゴニストを有効成分とする炎症性筋疾患治療剤
TW201940194A (zh) 含有il-6抑制劑的哮喘治療劑
MX2008005138A (en) Therapeutic agent for heart disease

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1124534

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1124534

Country of ref document: HK