CN100571682C - 微粒的制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明的课题是发现一种溶剂，该溶剂能制造即使使用在卤代烃中溶解度低的药物、药物的含有率也高、不出现初期突释的微粒。本发明的微粒的制造方法是利用液中干燥法制造由生物分解性高分子构成、并且含有在卤代烃中溶解度低的药物的微粒的制造方法，在该方法中，作为溶解药物和生物体分解性高分子的溶剂，使用由第1溶剂：卤代烃、以及第2溶剂：对上述药物的溶解度大于或等于0.3%(W/V)的与水不混溶性有机溶剂构成的混合溶剂。

Description

微粒的制造方法

技术领域

本发明涉及微粒的制造方法。

背景技术

作为对于药物的控制释放有用的制剂，对以生物分解性高分子作为材料的微球或纳米球等微粒进行了很多研究。作为上述微粒的制造方法已知各种方法，其中之一为液中干燥法。

如Journal of Controlled Release，2，343-352，1985中所述，液中干燥法是下述方法：将药物和作为微粒材料的高分子溶解在挥发性的有机溶剂中，并将其加入水相，制成o/w型乳液，除去有机溶剂得到微粒。作为液中干燥法中使用的溶剂，优选具有挥发性和与水不混溶性的溶剂，广泛使用二氯甲烷、氯仿等卤代烃类溶剂。

还已知不使用卤代烃类溶剂的微粒制造方法。特表平9-505308号公报公开了使用酯、醇和酮中至少2种的混合溶剂的微粒制造方法，作为优选溶剂的例子，可以举出乙酸乙酯、苄醇、甲基乙基酮等。另外，在其实施例中，记载了使用乙酸乙酯和苄醇的混合溶剂的微粒制造例。

但是，从挥发性、乳液形成性和生物高分子的溶解性方面考虑，卤代烃类溶剂是优异的溶剂，所以期待在微粒的制造中使用卤代烃类溶剂。

但是，药物在卤代烃类溶剂中的溶解度低的情况下，将药物分散在卤代烃类溶剂中进行制造，在上述方法中，虽然包含在微粒中的药物含量高，但药物集中存在于微粒的外侧周边部，引起释放初期的过量释放(初期突释(initial burst))的问题。

所以，为了提高药物在油相中的溶解度，已知向卤代烃中添加甲醇、乙腈等与水混溶性溶剂(参见特开平4-46115号公报)。但是，在上述方法中，虽然能使药物溶解在溶剂中，但仍然不能得到足够的药物含量，而且出现初期突释。作为原因，可以举出由于甲醇、乙腈等溶剂与水混溶，因此造成在制造工序中药物向外水相的漏出增大，在得到的微粒中药物未均匀分散，以及得到的微粒为多孔质。

发明内容

如上所述，在使用卤代烃作为溶剂的液中干燥法中，如果使用在卤代烃中的溶解度低的药物，则药物的含有率变低，而且出现初期突释。所以，期待开发出一种溶剂，该溶剂适合制造即使使用在卤代烃中的溶解度低的药物、药物的含有率仍然高、而且不出现初期突释的微粒。

本发明人对利用液中干燥法制造由生物分解性高分子构成、且含有在卤代烃中溶解度低的药物的微粒的方法中使用的溶剂进行了深入研究，结果发现如果使用由下述溶剂构成的混合溶剂作为溶解药物、生物分解性高分子的溶剂，则能制造药物的含有率高、而且不出现初期突释、在长时间内药物以零级释放的微粒。构成上述混合溶剂的溶剂为：

第1溶剂：卤代烃、以及

第2溶剂：对上述药物的溶解度大于或等于0.3％(W/V)的与水不混溶性有机溶剂。

本发明是微粒的制造方法，该方法利用液中干燥法制造由生物体分解性高分子构成、且含有在卤代烃中的溶解度低的药物的微粒，其特征在于，在上述方法中，将药物和生物分解性高分子溶解在由卤代烃(第1溶剂)和对上述药物的溶解度大于或等于0.3％(W/V)的与水不混溶性有机溶剂(第2溶剂)构成的混合溶剂中。

本发明是适用于在卤代烃中溶解度低的药物的微粒的制造方法，具体而言药物在卤代烃中的溶解度小于0.1％(W/V)。作为上述药物的例子，可以举出倍他米松、地塞米松、泼尼松等类固醇剂或上述化合物的衍生物。

本发明中的第1溶剂是卤代烃，即，碳原子数为1～4的卤代烷，具体包括二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、2，2，2-三氯乙烷等。优选使用二氯甲烷和氯仿。

本发明的特征为在作为第1溶剂的卤代烃中，混合对药物的溶解度大于或等于0.3％(W/V)的与水不混溶性的第2溶剂。由此能使在卤代烃中溶解度低的药物溶解在油相中。药物在第2溶剂中的溶解度优选0.3～50％(W/V)，特别优选0.5～30％(W/V)。

而且，由于第2溶剂与乙腈或甲醇等不同，是与水不混溶性有机溶剂，因此能够抑制药物向水相漏出，使药物在微粒内均匀地分散。第2溶剂在水中的溶解度具体优选1.0～30％(V/V)。

第2溶剂只要根据作为对象的药物选择适当的与水不混溶性有机溶剂即可。例如，采用倍他米松等在卤代烃中溶解度低的类固醇的情况下，可以举出苄醇、苯乙醇等苯基烷基醇；甲基乙基酮、甲基丁基酮、甲基异丙基酮等酮类；苯胺；1-丁醇等。采用倍他米松的情况下特别优选苄醇。

对于第1溶剂和第2溶剂的混合比例，没有特别限定，根据药物的种类、药物的有效治疗浓度和释放时间等，可以适当改变，优选1∶20～20∶1，特别优选1∶1～1∶10。

作为本发明中的生物分解性高分子，可以使用聚乳酸、乳酸-乙醇酸共聚物(以下简称为PLGA)、乳酸-己内酯共聚物、聚酐、聚原酸酯、聚ε-己内酯、聚丙烯酰基氰基丙烯酸酯、聚羟基链烷酸酯、聚磷酸酯、聚氨基酸、聚α-羟基羧酸等。优选使用聚乳酸和PLGA。PLGA的乳酸和乙醇酸的比率优选10∶1～1∶10。

对于上述生物分解性高分子的重均分子量没有特别限定，根据包含在微粒中的药物的种类、药物的有效治疗浓度和药物的释放时间等适当选择。采用聚乳酸和PLGA的情况下优选5000～70000。

本发明制造的微粒是含有药物和生物分解性聚合物的微粒，例如，可以举出1个粒子中含有1个药物核的胶囊状微粒、1个粒子中含有多个药物核的多核胶囊状微粒、或药物溶解或分散在生物分解性聚合物中形成的微粒。微粒的粒径优选500nm～150μm。

下面就每个工序详细说明本发明的制造方法

将药物和生物分解性聚合物溶解在第1溶剂和第2溶剂的混合溶剂中，形成油相。上述溶液(即油相)中的药物浓度，例如为0.1～50％(W/V)，优选0.3～10％(W/V)。溶液中的生物分解性聚合物的浓度，例如为0.1～80％(W/V)，优选2～50％(W/V)。药物和聚合物的重量比根据药物的种类、微粒的必需药物含量而不同，但优选1∶20～1∶1。

将上述油相以一定的速度添加到外水相中，使用均质混合器进行分散、乳化，制造o/w型乳液。外水相的使用量通常为油相的10～400倍容量，优选50～200倍容量。可以在外水相中添加乳化剂。作为乳化剂，可以举出聚山梨酸酯80、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、卵磷脂等，特别优选聚乙烯醇。外水相中的乳化剂的浓度，例如为0.01～20％(W/V)，特别优选0.02～2％(W/V)。

油相的溶剂的除去可以利用通常使用的方法进行。例如，边用螺旋桨型搅拌器等搅拌得到的o/w型乳液，边放置、或加热、或吹入氮气等方法。另外，可以缓慢减压除去溶剂，也可以使用旋转蒸发器等边调节真空度边除去溶剂。将由此得到的微粒通过离心分离或过滤进行回收，用纯水洗涤，将其冷冻干燥，得到目的物。

由本发明的制造方法得到的微粒可以制剂化成各种剂型。作为上述剂型，包括注射剂、包埋剂、口服制剂、滴眼剂、经鼻给药制剂等，特别优选注射剂。可以利用广泛使用的注射剂的制剂技术配制注射剂。例如，可以将微粒和通常使用的添加剂加入到注射用蒸馏水中配制注射剂。作为添加剂，可以举出氯化钠等渗透压调节剂、磷酸钠等缓冲剂、聚山梨酸酯80等表面活性剂、甲基纤维素等增稠剂等。

利用本发明可以发挥以下效果。即，由下述“药物含量测定试验”和“体外释放试验”的结果可知，将在卤代烃中溶解度低的药物溶解在由卤代烃和对药物的溶解度大于或等于0.3％的与水不混溶性有机溶剂组成的混合溶剂中制造的微粒的药物含有率高，并且不出现初期突释，药物在长时间内以零级释放。

附图说明

图1是表示药物从制造例4中制造的微粒中释放的经时变化的曲线图。

具体实施方式

下面列举实施例详细说明本发明的制造方法，但本发明并不限定于下述例子。

制造例1

将倍他米松(0.05g)和重均分子量为20,000的乳酸-乙醇酸共聚物(0.25g)溶解在二氯甲烷(1mL)和苄醇(3mL)中。将得到的溶液滴加到400mL的2％聚乙烯醇水溶液中，利用小型均化器(POLYTRON，KINEMATICA社制，瑞士)混合约10分钟，制成O/W型乳液。然后边搅拌O/W型乳液，边除去二氯甲烷和苄醇，产生微粒，接下来利用离心分离机收集上述微粒。再次将其分散在蒸馏水中，进一步进行离心分离，洗涤除去游离的药物和分散剂等。利用冷冻干燥使收集的微粒完全脱溶剂、脱水后，制成粉末。由上述方法制得的微粒粒径(中位径)为14μm，药物含有率为11％，微粒回收率为71％，药物包封率为50％。

制造例2

除了将倍他米松(0.05g)和重均分子量为20,000的乳酸-乙醇酸共聚物(0.25g)溶解在二氯甲烷(1mL)和苯乙醇(3mL)中以外，进行与制造例1相同的操作。制得的微粒粒径(中位径)为16μm，药物含有率为8％，微粒回收率为74％，药物包封率为37％。

制造例3

将倍他米松(0.025g)和重均分子量为20,000的聚乳酸(0.25g)溶解在二氯甲烷(1mL)和苄醇(1.5mL)中，将得到的溶液滴加到200mL的2％聚乙烯醇水溶液中，除此之外，进行与制造例1相同的操作。得到的微粒的药物含有率为1.33％。

制造例4

除了将倍他米松(0.05g)和重均分子量为20,000的聚乳酸(0.25g)溶解在二氯甲烷(1mL)和苄醇(3mL)中以外，进行与制造例3相同的操作。得到的微粒的药物含有率为7.76％。

比较制造例1

除了将倍他米松(0.025g)和重均分子量为20,000的聚乳酸(0.25g)溶解在二氯甲烷(40mL)中，将得到的分散液滴加到200mL的2％聚乙烯醇水溶液中以外，进行与制造例1相同的操作，得到微粒。

比较制造例2

除了将倍他米松(0.05g)和重均分子量为20,000的乳酸-乙醇酸共聚物(0.25g)溶解在乙酸乙酯(1mL)和苄醇(3mL)中以外，进行与制造例1相同的操作。制得的微粒粒径(中位径)为15μm，药物含有率为14％，微粒回收率为66％，药物包封率为54％。

比较制造例3

除了将倍他米松(0.05g)和重均分子量为20,000的乳酸-乙醇酸共聚物(0.25g)溶解在甲酸乙酯(1mL)和苄醇(3mL)中以外，进行与制造例1相同的操作。制得的微粒粒径(中位径)为14μm，药物含有率为13％，微粒回收率为57％，药物包封率为43％。

药物含量测定试验

为了研究用于微粒制造的溶剂对微粒的药物含有率产生的影响，利用下面的方法测定制造例3和比较制造例1制造的微粒的药物含有率。

<药物含有率的测定方法>

将含有倍他米松的微粒(2mg)溶解在乙腈(1mL)中，向其中添加50mM磷酸钾/甲醇溶液至10mL。用过滤器(0.2μm)过滤上述混合物，收集滤液。用高效液相色谱定量收集的滤液，计算微粒中的倍他米松含有率。

<结果>

结果如表1所示。由表1可知，配制含有倍他米松的微粒时，利用将药物和聚合物只溶解在卤代烃中的普通方法得到的微粒(比较制造例1)的药物含有率低，而利用本发明的方法得到的微粒(制造例3)的药物含有率显著提高。

表1药物含有率(％)

	溶剂	药物含有率(％)
			制造例3	二氯甲烷/苄醇	1.33
比较制造例1	二氯甲烷	0.04

制造例3的药物含有率的值是5次测定值的平均值，比较制造例1的药物含有率的值是3次测定值的平均值。

体外释放试验(1)

为了研究用于微粒制造的溶剂对初期释放性产生的影响，测定了制造例1～2和比较制造例2～3制造的微粒的初期释放率。

<初期释放率的测定方法>

将微粒(4mg)放入0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)中振荡，一天后定量0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)中的倍他米松，测定体外药物初期释放性。

<结果>

结果如表2所示。由表2可知，利用本发明的方法得到的微粒(制造例1和2)的药物初期突释低于使用非卤素类溶剂和苯基烷基醇得到的微粒(比较制造例2和3)。

表2药物初期释放率(％)

	溶剂	初期释放率(％)
			制造例1	二氯甲烷/苄醇	11.43
制造例2	二氯甲烷/苯乙醇	9.05
			比较制造例2	乙酸乙酯/苄醇	24.06
比较制造例3	甲酸乙酯/苄醇	19.72

制造例1、比较制造例2和3的初期释放率的值是3次测定值的平均值，制造例2的初期释放率的值是1次测定值。

体外释放试验(2)

为了研究本发明的长期释放特性，经时测定制造例4制造的微粒的释放量。测定方法与上述体外释放试验(1)的方法相同，进行历时3个月的测定。

<结果>

结果如图1所示。由图1可知，利用本发明的方法得到的微粒没有出现初期突释，并且在3个月期间内药物进行零级释放。

产业上的可利用性

利用本发明能制造即使药物在卤代烃中的溶解度低、药物的含有率仍然高、并且不出现初期突释的微粒。

Claims (6)

1、一种微粒的制造方法，该方法利用液中干燥法制造由生物分解性高分子构成、并且含有在卤代烃中溶解度低的药物的微粒，其特征在于，在该方法中将药物和生物分解性高分子溶解在由下述溶剂构成的混合溶剂中，所述溶剂为：

第1溶剂：卤代烃，以及

第2溶剂：对上述药物的溶解度大于或等于0.3％(W/V)的与水不混溶性有机溶剂，

所述生物分解性高分子是聚乳酸、乳酸-乙醇酸共聚物、乳酸-己内酯共聚物、聚酐、聚原酸酯、聚ε-己内酯、聚丙烯酰基氰基丙烯酸酯、聚羟基链烷酸酯、聚磷酸酯、聚氨基酸或聚α-羟基羧酸，

所述在卤代烃中溶解度低的药物是类固醇，

所述第2溶剂是苄醇、苯乙醇、甲基乙基酮、甲基丁基酮、甲基异丙基酮、苯胺或1-丁醇。

2、如权利要求1所述的制造方法，其中所述类固醇是倍他米松、地塞米松、泼尼松。

3、如权利要求1所述的制造方法，其中生物分解性高分子是聚乳酸或乳酸-乙醇酸共聚物。

4、如权利要求1所述的制造方法，其中第1溶剂和第2溶剂的混合比为1∶20～20∶1。

5、如权利要求1所述的制造方法，其中第2溶剂是苄醇或苯乙醇。

6、如权利要求1所述的制造方法，其中，所述类固醇是倍他米松，第2溶剂是苄醇或苯乙醇。

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