CN100408054C - 从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种从中药肉桂中提取制备α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，属于中草药制备及化学化工技术领域。本发明的要点是：首先采用超临界CO2流体萃取技术从中药肉桂中除去对α-葡萄糖苷酶无抑制活性的低极性组分，再用无水乙醇对萃余物进行固液振荡萃取，提取对α-葡萄糖苷酶具有很强抑制活性的有效部位。抑制剂的得率为4～6%。本发明工艺简单，操作方便，产物不含有害物质，对环境无污染。本发明方法所得的肉桂提取物，经试验表明，可以用于降血糖药物的开发。

Description

从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法
技术领域
本发明涉及一种从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，属于中草药制备及化学化工技术领域。
背景技术
肉桂，又名玉桂、桂皮等，为一种常用中药和食品辅料，对人体健康无毒副作用。中药肉桂来源于樟科植物肉桂的干燥树皮。肉桂具有补火助阳、引火归源、散寒止痛、活血通经之功效。近年来，发现肉桂还具有预防糖尿病的作用，但未见从肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂并进行降血糖作用的研究方面的报道。
目前曾有学者采用了超临界流体萃取技术在中药肉桂中萃取肉桂精油的研究报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法。
本发明方法的要点是：首先采用超临界流体萃取技术从中药肉桂中除去对α-葡萄糖苷酶无抑制活性的低极性组分，再用无水乙醇对萃余物进行固液萃取，提取对α-葡萄糖苷酶具有很强抑制活性的有效部位。
本发明涉及一种从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于具有以下的工艺过程和步骤：
a.将原料中药肉桂进行粉碎，并进行过筛，使通过40～80目筛；然后将该粉粒料放入超临界CO2流体萃取装置的萃取釜中萃取，超临界CO2流体以每小时25～30kg的流量流入萃取釜，萃取釜内的压力保持为20～30MPa，温度保持为35～45℃；
b.CO2流体进入分离釜I和分离釜II；分离釜I的压力为6～8MPa，温度为55～65℃；分离釜II的压力为6～7MPa，温度为35～45℃；在上述条件下，超临界CO2流体萃取2～3小时，最终在分离釜I和分离釜II中留下的物质为无抑制活性的组分，对萃取釜中留下的萃余物进行进一步处理；
c.在上述萃余物中加入无水乙醇在40～60℃温度下进行固液震荡萃取，震荡萃取60～80分钟，再重复一次，合并两次乙醇萃取液，用旋转蒸发器回收乙醇溶剂，最后得到对α-葡萄糖苷酶具有强抑制活性的有效部位。
本发明方法采用超临界流体萃取及乙醇提取的联合工艺，最终得到的α-葡萄糖苷酶抑制剂可以用于降血糖药物的开发。本发明工艺简单，操作方便，且产物不含对人体有害的溶剂残留，对环境也无污染。
具体实施方式
现将本发明的实施例叙述于后。
实施例1
本实施例中α-葡萄糖苷酶抑制剂提取的过程和步骤如下：
(1)首先将300g原料中药肉桂进行粉碎，并进行过筛，使通过80目筛；然后将该粉粒料放入超临界CO2流体萃取装置的萃取釜中萃取，超临界CO2流体以每小时25kg的流量流入萃取釜，萃取釜内的压力保持为25MPa，温度保持为40℃；
(2)CO2流体进入分离釜I和分离釜II；分离釜I的压力为6MPa，温度为55℃；分离釜II的压力为6MPa，温度为35℃；在上述条件下，超临界CO2流体萃取2小时，最终在分离釜I和分离釜II中留下的物质为无抑制活性的组分，计有15g，另作处理；而对原先萃取釜中留下的萃余物285g进行进一步处理；
(3)在上述萃余物中加入1000ml无水乙醇，在40℃温度下进行固液震荡萃取，震荡萃取60分钟，再重复一次，共计2小时，合并两次乙醇萃取液，用旋转蒸发器回收乙醇溶剂，最后得到对α-葡萄糖苷酶具有强抑制活性的有效部位，计有13.1g.
实施例2
本实施例的提取过程和步骤与上述实施例1完全相同。其步骤如下：
(1)首先将300g原料中药肉桂进行粉碎，并进行过筛，使通过60目筛；然后将该粉粒料放入超临界CO2流体萃取装置的萃取釜中萃取，超临界CO2流体以每小时30kg的流量流入萃取釜，萃取釜内的压力保持为30MPa，温度保持为45℃；
(2)CO2流体进入分离釜I和分离釜II；分离釜I的压力为8MPa，温度为65℃；分离釜II的压力为7MPa，温度为45℃；在上述条件下，超临界CO2流体萃取3小时，最终在分离釜I和分离釜II中留下的物质为无抑制活性的组分，计有16g，另作处理；而对萃取釜中留下的萃余物284g进行进一步处理；
(3)在上述萃余物中加入1000ml无水乙醇，在60℃温度下进行固液震荡萃取，震荡萃取75分钟，再重复一次，共计2.5小时，合并二次乙醇萃取液，用旋转蒸发器回收乙醇溶剂，最后得到对α-葡萄糖苷酶具有强抑制活性的有效部位，计有15.1g。
由上述实施例中所得的中药肉桂提取物在体外对α-葡萄糖苷酶的抑制试验叙述如下：
在试管中先后加入pH为6.8的磷酸钾缓冲液1.2ml、各胱甘肽(1mg/ml)50μl、一定量的肉桂提取物抑制剂、α-葡萄糖苷酶2μl、4-硝基苯-α-d-吡喃葡萄苯(0.116mol/L)50μl加入试管内混匀，于37℃保温10分钟后，加入10ml碳酸钠(0.1mol/L)终止液，按规定试验方法进行测试。最后结果如下表1所示：
表1中药肉桂超临界制备物对α-葡萄糖苷酶抑制活性
Figure C20061002328000051
肉桂超临界提取物对四氧嘧啶Alloxan诱导的糖尿病小鼠血糖值的影响试验叙述于下：
取昆明种小鼠，体重20～22g，禁食12h，腹腔注射Alloxan 200mg/kg，正常饲养3日后禁食12h，静脉窦眼眶取血，离心取血清测定血糖值，选取血糖值大于11.1mmol/L以上者进行实验。小鼠按血糖值均匀分配分组，小鼠共分5组，即阴性对照组、阳性对照组、肉桂超临界提取物高剂量组、中剂量组和低剂量组。阴性对照组用生理盐水灌胃，阳性对照组灌胃拜唐苹20mg/kg，高剂量组灌胃肉桂超临界提取物1g/kg，中剂量组灌胃肉桂超临界提取物0.5g/kg，低剂量细灌胃肉桂超临界提取物0.25g/kg，连续给药10天，末次给药后禁食12h，眼眶静脉窦取血，离心取血清，用葡萄糖氧化酶法测定血糖值。结果见表2。
表2肉桂超临界提取物对Alloxan诱导的糖尿病小鼠
组别     剂量(mg/kg)     样品数(N)   血糖值(mmol/L)
阴性对照组     0     12   31.74±11.82
阳性对照组     20     13   16.68±6.23<sup>*</sup>
肉桂超临界提取物低剂量组     250     12   13.26±7.99<sup>*</sup>
肉桂超临界提取物中剂量组     500     12   13.30±8.04<sup>*</sup>
肉桂超临界提取物高剂量组     1000     12   13.06±3.75<sup>*</sup>
从表2可以明显看出肉桂超临界提取物对Alloxan诱导的糖尿病小鼠的血糖值具有明显的降低作用。这说明它可用于降糖药物的开发。

Claims (1)

1. 一种从中药肉桂中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于具有以下的工艺过程和步骤：
a.将原料中药肉桂进行粉碎，并通过40～80目筛；然后将该粉粒料放入超临界CO2流体萃取装置的萃取釜中萃取，超临界CO2流体以每小时25～30kg的流量流入萃取釜，萃取釜内的压力保持为20～30MPa，温度保持为35～45℃；
b.CO2流体进入分离釜I和分离釜II；分离釜I的压力为6～8MPa，温度为55～65℃；分离釜II的压力为6～7MPa，温度为35～45℃；在上述条件下，超临界CO2流体萃取2～3小时，最终在分离釜I和分离釜II中留下的物质为无抑制活性的组分，对原先萃取釜中留下的萃余物进行进一步处理；
c.在上述萃余物中加入无水乙醇在40～60℃温度下进行固液震荡萃取，震荡萃取60～80分钟，再重复一次，合并两次乙醇萃取液，用旋转蒸发器回收乙醇溶剂，最后得到对α-葡萄糖苷酶具有强抑制活性的有效部位。
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草药中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂进展. 冯长根，陈凌，刘霞.中国医药报. 2006
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