BRPI0714863A2

BRPI0714863A2 - extrato de eucalipto, processo de preparo e utilizaÇÕes terapÊuticas do mesmo

Info

Publication number: BRPI0714863A2
Application number: BRPI0714863-1A
Authority: BR
Inventors: Christel Fiorini-Puybaret; Bernard Fabre; Cecile Chauvin; Philippe Joulia
Original assignee: Pf Medicament
Priority date: 2006-08-01
Filing date: 2007-07-27
Publication date: 2013-05-21
Also published as: AU2007283529A1; IL196788A0; CN101511378A; EP2049133A2; AR062165A1; MX2009000673A; TW200820961A; WO2008017752A3; NZ574429A; RU2445112C2; NO20090951L; TN2009000018A1; FR2904557B1; MA30592B1; KR20090034401A; JP2010500974A; UA99598C2; FR2904557A1; RU2009107166A; US20090324754A1

Abstract

EXTRATO DE EUCALIPTO, PROCESSO DE PREPARO E UTILIZAÇÕES TERAPÊUTICAS DO MESMO. A presente invenção refere-se à utilização de um extrato de Eucalipto para o preparo de um medicamento ou de um complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afecções ou patologias decorrentes de um distúrbio da recaptura de neuromediadores. A presente invenção também refere-se a um novo extrato enriquecido de Eucalipto, caracterizado pelo fato de que contém pelo menos um composto de fórmula (1) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras: na qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento e R2 representa um grupamento isobutila, <244>-butila ou <30>-isobutila; assim como o seu processo de preparo.

Description

15

20

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "EXTRATO DE EUCALIPTO, PROCESSO DE PREPARO E UTILIZAÇÕES TERAPÊU- TICAS DO MESMO".

A presente invenção refere-se à utilização de um extrato de Eu- calipto para o preparo de um medicamento ou de um complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afecções ou patologias de- correntes de um distúrbio da recaptura dos seguintes neuromediadores: do- pamina, serotonina e/ou noradrenalina. Preferencialmente, esse extrato é enriquecido em pelo menos um dos compostos da fórmula (I) ou de acordo com qualquer uma de suas formas diastereoisômeras:

R1

25

OHC

(!)

na qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento C=CH2, C-CH3 CH3 cCCH3

ΩΗ ' OH nu

um grupamento w , w ou w e R2 representa um grupa- mento isobutila, α-isobutila ou β-isobutila.

A presente invenção refere-se também à utilização de pelo me- nos um dos compostos da fórmula (I) acima para o preparo de um medica- mento ou de um complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou a pre- venção de afecções ou patologias decorrentes de um distúrbio da recaptura desses neuromediadores.

Existem numerosas espécies de Eucalipto (mais de 600), a mai- or parte nativa da Austrália e da Tasmânia, um pequeno número da Nova Guiné e do Leste da Malásia. Os Eucaliptos pertencem à família das Mirtá- ceas e encontram a origem de seu nome na forma característica de suas flores. Com efeito, a palavra Eucalipto significa "bem coberto" fazendo alu- são ao opérculo (formado das pétalas soldadas) cobrindo as etaminas das flores. São geralmente belas e grandes árvores que podem atingir 80 a 100 metros de altura em seu país de origem (Austrália), de 3 a 20 metros em climas mais temperados. Sua casca, lisa, se destaca em longas faixas de cor pálida a acinzentada. Elas são geralmente caracterizadas por um dimor- fismo foliar. No caso do Eucalyptus globulus Labill, as jovens folhas são ovais-oblongas, verde glauco, cercadas de azul, circundadas e sésseis, en- quanto que as folhas mais velhas são falciformes, verde-acinzentadas, pen- dentes, com petíola torcida e orientadas verticalmente (equivalência das du- as faces). Os botões florais são formados de um cálice, em forma de pirâmi- de quadrangular, coberto com um opérculo que se eleva quando da floração, deixando aparecer numerosas etaminas com longos filetes brancos e com anteras amarelas. Os frutos são cápsulas de 2 a 2,5 cm de diâmetro, con- tendo grãos negros ou acastanhados.

Em fitoterapia, três espécies são principalmente utilizadas na farmacopeia Européia: o Eucalyptus globulus Labill, O E. polybractea R.T. Baker e o Eucalyptus smithii R.T. Baker. Utilizam-se as folhas dos ramos os mais velhos (falciformes e petiolados), o óleo essencial e o eucaliptol que é oriundo deste.

As folhas de Eucalipto são tradicionalmente utilizadas por vias oral e local para tratar as afecções do sistema respiratório (bronquite, infla- mação da garganta, nariz entupido, resfriado...) ou em aplicação para cuidar de ferimentos, das úlceras da pele...

O óleo essencial de Eucalipto e o eucaliptol (ou 1,8-cineol) en- tram em numerosos preparos destinados a tratar as afecções das vias respi- ratórias, em razão de suas atividades antisséptica, mucolítica e expectoran- te. O óleo essencial é utilizado como repelente e em medicina veterinária.

As propriedades farmacológicas conhecidas do óleo essencial de Eucalipto são até hoje: as propriedades antimicrobiana, expectorante e béquica (WICHTL M. et ANTON R., 1999 - Plantas terapêuticas - 177-179), anti-inflamatória e antiasmástica (JUERGENS et al., 2003 - Anti-inflammato- ry activity of 1,8-cineol (eucaliptol) in bronchial asthma: a double-bind place- bo controlled trial - Respir. Med., 97 (3), 250-256), anti-diabética (SWANS- TON et al., 1990 - Traditional plant treatmentes for diabetes. Studies in nor- mal and streptozotocin diabetics rats - Diabetologia, 33 (8), 462-464), anti- histamínico (IKAWATI Z. and al., 2001 - Screening of severaI Indonesian medecinal plants for treir inhibitory effect on histamine release from RBL- 2H3cell - J. Ethnopharmacol., 75(2-3), 248-256), anticancéreuse (TAKASAKI et al, 2000 - Câncer chemopreventive activitv of euglobal-G1 from Ieaves of Eucalyptus grandis - CancerLett., 155(1): 61-65), antiviral (TAKASAKI e al., 1990 - Struetures of euglobal-G1 ,-G2 and G3 from Eucalyptus grandis, tree new inhibitors of Epstein vírus aetivation - Chem. Pharm. Buli. 38 (5), 1444- 1446) e anti-VIH (WICHTL M. ETAnton R., 1999 - Plantes thérapeutiques - 177-179).

De forma inesperada e surpreendente, a requerente colocou em evidência a utilização de um extrato de Eucalipto para o preparo de um me- dicamento ou complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à pre- venção das afecções ou patologias decorrentes de um distúrbio da recaptura de neuromediadores.

O domínio da presente invenção é, portanto, um extrato de Eu- calipto para o qual propriedades farmacológicas interessantes foram obser- vadas e, assim, novas utilizações em terapêuticas consideradas. A presente invenção não refere-se ao óleo essencial de Eucalipto como tal, para o qual uma bibliografia abundante foi destacada.

De forma vantajosa, o medicamento ou o complemento alimen- tar é destinado a tratar e/ou a prevenir patologias, decorrentes de um distúr- bio da recaptura de neuromediadores, escolhidas no grupo:

- doenças, afecções ou distúrbios neurológicos; - doenças, afecções ou distúrbios psiquiátricos;

- distúrbios da memória, da atenção e da vigilância, associados às doenças, afecções ou distúrbios neurológicos e psiquiátricos;

- distúrbios somáticos funcionais;

- a dependência das substâncias que viciam.

De forma preferida, o tratamento e/ou a prevenção dessas afec-

ções ou patologias consiste em uma inibição da recaptura dos neuromedia- dores. No sentido da presente invengao, entende-se por "neuromedia- dores": a dopamina e/ou a serotonina e/ou a noradrenalina.

Por "Eucalipto" entendem-se, no sentido da presente invengao, as especies pertencentes, de preferencia, aos subgeneros Eudesmia, Sym- phomyrtus e Corymbia e mais particularmente as seguintes especies: Eu- calyptus globulus L., Eucalyptus pulverulenta Sims, Eucalyptus kartzoffiana L.A.S. Johnson 1 Blaxell1 Eucalyptus macrocarpa Hook., Eucalyptus cinerea F. Muell. Ex. Benth., Eucalyptus dorrigoensis (BIakeIy) L.A.S. Johnson 1 K. D. Hill, Eucalyptus Ieptopoda Benth., Eucalyptus occidentalis Endl., Eucalyp- tus viridis R. T. Baker, Eucalyptus polybractea R. T. Baker et Eucalyptus smi- thii R.T. Baker.

Esses exemplos ilustram a presente invengao, sem, todavia, Ii- mitar ο seu alcance.

De forma vantajosa, ο extrato de Eucalipto e obtido a partir das folhas, flores, frutos, hastes; e preferencialmente das folhas de euca- lipto.

Vantajosamente, ο extrato de eucalipto utilizado, de acordo com a presente invengao, e caracterizado pelo fato de compreender pelo menos um composto da formula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoiso- meras.

Essa formula (I) engloba entre outros 4 compostos da familia dos macrocarpais; trata-se do:

-macrocarpal A: (5-((1R)-1-((11S,7R)-7-hidr0xi-3,3,7,11-tetrame- tiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3-

dicarbaldeido) no qual R1 forma com ο carbono, ao qual e ligado, ο grupa-

..OH0 C、3

ΠΙ-Ι

mento ^n e R2 representa um β-isobutila OH

Formula bruta: C^H40O6 Massa molecular: 472 g/mol.

Vantajosamente1 a fra^ao massica do macrocarpal A no extrato de eucalipto, de acordo com a presente invengao, e superior ou igual a 0,1% e estritamente inferior a 3%.

-macrocarpal B: (5-((1 S)-1 -((11 S，7R)-7-hidr0xi-3,3’7，11 -tetrame- tiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1，3- dicarbaldeido), no qual R1 forma com ο carbono, ao qual e ligado, ο grupa- Cf3

、DH

mento w e R2 representa uma a-isobutila.

OH

Formula bruta: CmH40O6

Massa molecular: 472 g/mol.

Vantajosamente1 a fragao massica do macrocarpal B no extrato de eucalipto, segundo a presente invengao, e superior ou igual a 0,1% e es- tritamente inferior a 3%.

- macrocarpal C: (5-((1 R)-1-((11S)-3,3,11-trimetil-7-metileno triciclo

(6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2’4,6-tri-hidroxibenzeno-1’3-dicarbal- deido), no qual R1 forma com ο carbono, ao qual e ligado, ο grupamento

C=CH2 e R2 representa uma β-isobutila. Formula bruta: C^sH38O5 Massa molecular: 454 g/mol.

Vantajosamente, a fragao massica do macrocarpal C no extrato de Eucalipto, de acordo com a presente invengao, e superior ou igual a 0,1 % e estritamente inferior a 3%.

-macrocarpal G: (5-(1-(3,3,11 ,-trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4) undec-11-il)-3-metilbutil)-2’4’6-tri-hidroxibenzeno-1’3-dicarbaldeido), no qual R1 forma com ο carbono, ao qual e ligado, um grupamento C=CH2 e R2 re- presenta uma isobutila.

Formula bruta: C^hb8O5

Massa molecular: 454 g/mol.

Vantajosamente, a fragao massica do macrocarpal G no extrato de Eucalipto, de acordo com a presente invengao, e superior ou igual a 0,1 % e estritamente inferior a 5%.

Esse extrato de eucalipto e obtido por um processo de extragao

realizado a partir de etapas classicas conhecidas do tecnico.

As folhas, as flores, os frutos, as hastes ou ο tronco de Eucalipto (Eucalyptus sp) ou uma mistura dessas partes sao moidos, depois extraidos com um solvente organico, podendo ser um alcano (pentano, hexano, hep- tano, octano, ciclo-hexano), um eter oxido (tetra-hidrofurano, dioxano, dietil eter), um ester (acetato de etila, acetato de isopropila), um alcool (metanol, etanol, propanol, isopropanol, butanol, octanol), uma cetona (metiletilcetona, metilisobutilcetona), um hidrocarboneto halogenado (cloroformio, diclorome- tano) ou uma mistura de agua e solvente(s) organico(s) missivel(is) na agua (uma mistura hidroalcoolica, por exemplo).

A extragao e realizada em uma proporgao planta-solvente com- preendida entre aproximadamente 1/1 e aproximadamente 1/20, e pode ser renovada 2 a 3 vezes. A temperatura do solvente de extragao pode ser igual a temperatura ambiente ou superior, podendo atingir a temperatura de ebuli- ?ao do solvente engajado. O tempo de contato da planta com ο solvente es- ta compreendido entre aproximadamente 30 minutos e aproximadamente 72 horas.

Procede-se, em seguida, a uma separagao solido-liquido, a plan- ta sendo separada do solvente por filtragem ou centrifugagao.

O filtrado obtido pode ser:

-colocado a seco diretamente por evaporagao total do solvente de extragao e constituir ο extrato final;

-ou mais ou menos concentrada. No caso de um solvente de extragao mista (mistura hidroalcoolica, por exemplo) a concentragao prosse- gue ate a evaporagao do solvente organico presente. No caso de um solven- te organico, uma quantidade de agua e adicionada ao concentrado obtido. Uma etapa de purificagao Iiquido-Iiquido e realizada, adicionando-se a fase aquosa um solvente nao miscivel podendo ser um alcano (do hexano, por exemplo), um eter oxido (dietil eter, por exemplo), um ester (acetato de etila, por exemplo), um alcool (butanol, por exemplo), uma cetona (metiletilcetona, por exemplo) ou um hidrocarboneto halogenado (cloroformio, por exemplo). Uma, duas ou tres extra?5es Iiquido-Iiquido sao feitas. As fases organicas reunidas podem ser secas sobre suIfato de sodio, antes da colocagao a se- co.

As solugoes obtidas sao concentradas sob vacuo e uma tempe- ratura compreendida entre a temperatura ambiente e a temperatura de ebu- ligao.

A secagem do extrato final e feita por Iiofilizagao ou por meios de secagem mais classicos conhecidos do tecnico (nebulizagao, estufa...). Pre- ferencialmente, as temperaturas de secagem nao ultrapassam 60°C aproxi- madamente.

O extrato pode ser estabilizado por adigao de um antioxidante como, por exemplo, ο acido ascorbico, ο acido citrico em quantidades com- preendidas entre aproximadamente 0,05 e aproximadamente 1 g para 100 g de extrato seco.

Um ponto inteiramente notavel da presente invengao reside no

fato de as propriedades farmacologicas de inibigao da recaptura dos neuro- mediadores do extrato de Eucaliptos serem tanto mais interessantes, quanto ο extrato e enriquecido em pelo menos um dos compostos de formula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisomeras. Assim, esse extrato de Eucalipto e preferencialmente enriqueci-

do em pelo menos 1 composto da formula (I).

Por "extrato de Eucalipto enriquecido em macrocarpal A", enten- de-se no sentido da presente invengao um extrato de Eucalipto, cuja fragao massica em macrocarpal A e superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais prefe- rencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 40% e ainda mais preferen- cialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%.

Por "extrato de Eucalipto enriquecido em macrocarpal B", enten- de-se, no sentido da presente invengao, um extrato de Eucalipto, cuja fragao massica em macrocarpal B e superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais prefe- rencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 40% e ainda mais preferen- cialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%.

Por "extrato de Eucalipto enriquecido em macrocarpal C", enten- de-se, no sentido da presente invengao, um extrato de Eucalipto, cuja fragao massica em macrocarpal C e superior ou igual a 3% e estritamente inferior a

90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais prefe- rencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 40% e ainda mais preferen- cialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%.

Por "extrato de Eucalipto enriquecido em macrocarpal G", en- tende-se, no sentido da presente invengao, um extrato de Eucalipto, cuja fragao massica em macrocarpal G e superior ou igual a 5% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 5% e inferior a 50%, mais preferencialmente superior ou igual a 5% e inferior a 40% e ainda mais preferencialmente superior ou igual a 5% e inferior a 20%.

A requerente mostrou a influencia de um extrato de Eucalipto sobre a recaptura da dopamina e/ou da noradrenalina e ou da serotonina.

Por suas propriedades farmacologicas de inibidor da recaptura desses neuromediadores, esse extrato e particularmente Citil ao prepare de um medicament。ou complement。alimentar destinado a tratar e/ou a preve- nir numerosas afecgSes ou patologias resultantes de um defeito de dopami- na e/ou serotonina e ou noradrenalina.

Dentre as afecgoes ou patologias que podem ser tratadas e/ou ou prevenidas com ο auxilio de um extrato de Eucalipto, segundo a presente invengao, convem citar a titulo de exemplos ilustrativos e nao Iimitativos -as doengas, afecgoes ou disturbios neurologicos: tais como as doengas neurodegenerativas (Mai de Alzheimer,

Coreia de Huntington, Mal de Parkinson, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo craniano), a esclerose lateral amiotrofica, as demencias sen is, as demencias fronto-temporais, as demencias vasculares, a enxaqueca, as dores neuropaticas de origem central; - as doengas, afecgoes ou distOrbios psiquiatricos:

tais como a depressao (endogena, resistente, reagente ou iatro- gena), ο estado depressivo, a esquizofrenia, ο transtorno bipolar, a ansieda- de generalizada, as doengas Iigadas ao estresse, as sindromes do panic。, os transtornos obsessionais compulsivos, as sindromes do estresse pos- traumatico, transtornos da aten?ao e da hiperatividade, os transtornos de condutas alimentares (notadamente a bulimia, a anorexia), a fobia (notada-

mente a agorafobia), ο autismo; - os transtornos da memória, da atenção e da vigilância associa- dos às doenças, afecções ou transtornos neurológicos e psiquiátricos;

- os transtornos somáticos funcionais:

tais como a síndrome de fadiga crônica, a fibromialgia, a síndrome do cólon irritável, os refluxos gastroesofágicos, a perda da libido, os disfuncio- namentos da ereção, as incontinências urinárias;

- a dependência das substâncias que viciam:

notadamente a nicotina, o álcool, os opiáceos, os canabinoides, os psicoestimulantes. Com efeito, o medicamento ou o complemento alimentar, de a-

cordo com a invenção, é vantajosamente destinado a induzir uma extinção da dependência da nicotina, do álcool, dos opiáceos, dos canabinoides, dos psicoestimulantes e para prevenir a recaída nos indivíduos abstinentes. O medicamento ou o complemento alimentar, de acordo com a invenção, é vantajosamente utilizado como tratamento de substituição as substâncias que viciam e para prevenir e/ou tratar a síndrome depressiva associada à liberação da dependência.

O técnico poderá identificar outras patologias, cujo tratamento necessita de uma inibição. A requerente precisa, no caso de forma não restritiva, de algu-

mas referências bibliográficas que lembram a ligação entre patologias e o respectivo tratamento com o auxílio de um inibidor triplo de recaptura de do- pamina e/ou serotonina e/ou noradrenalina. Um exemplo de cada "grupo" foi destacado.

A dopamina, a serotonina e a noradrenalina concorrem para o

desenvolvimento e a sobrevida dos neurônios (Lauder J.M.,Trends Neurosci, 1993, 16; 233). Certas patologias neurológicas, como o Mal de Parkinson (Hornykiewicz O., adv Cytopharmacol. 1971, 1; 369) resulta de uma defici- ência em dopamina; inibidores de monoamina oxidases, que aumentam as taxas de dopamina, serotonina e noradrenalina são utilizadas para tratar o Mal de Parkinson e de outras afecções neurológicas (Ebadi M., Curr Drug Targets, 2006, 7; 1513). O extrato de Eucalipto, de acordo com a presente invenção, pode, portanto, ser vantajosamente utilizado no tratamento dessas doenças neurológicas.

A depressão é uma patologia freqüente do humor, caracterizada pelo fato de apresentar sentimentos da tristeza intensa, pensamentos pes- simistas, de autodepreciação, freqüentemente acompanhada da perda de andar, de entusiasmo e de libido. A incapacidade de sentir prazer com expe- riências normalmente agradáveis, também conhecida pelo nome de anedo- nia, é também considerada como um sintoma freqüente na depressão. A depressão é atualmente tratada pelos inibidores seletivos da recaptura de serotonina, tais como fluoxetina, citalopram ou paroxetina, inibidores seleti- vos da recaptura de noradrenalina, tais como reboxetina, ou ainda inibidores mistos da recaptura de serotonina e noradrenalina, tais como milnacipram ou venlafaxina. Todavia, um papel importante foi atribuído aos neurônios dopa- minérgicos, projetando em uma região do cérebro denominada o núcleo a- cumbens, no prazer e na motivação (Koob G.F. Sem. Neurosci. 1992, 4, 139; Salamone J.D. Behav. Brain Res. 1994, 61, 117) os sintomas da de- pressão podem, portanto, ser vantajosamente tratados por um inibidor da recaptura da dopamina, da serotonina e da noradrenalina, tal como o extrato de Eucalipto, de acordo com a presente invenção. A absorção de substâncias que viciam, das quais a nicotina au-

menta as taxas extracelulares de dopamina no corpo estriado ventral no a- nimal (Di Chiara G et Imperato A. Proc. Natl Acad Sci USA. 1988, 85; 5274) e o homem (Brody e al., Am J Psychiatry, 2004, 161; 1211). A liberação da dependência tabágica pode ser acompanhada de uma síndrome depressiva (Wilhelm K et al., Drug Alcohol Ver, 2006, 25; 97). O extrato de Eucalipto, de acordo com a presente invenção, pode, portanto, ser vantajosamente utiliza- do como tratamento de substituição das substâncias que viciam, tais como a nicotina, e para prevenir ou tratar a síndrome depressiva associada à libera- ção da dependência.

Os distúrbios funcionais, ainda denominados simatrótopos, são

transtornos que referem-se às grandes funções fisiológicas, e que não seri- am devido a lesões orgânicas, mas à maneira de funcionar dos órgãos (figa- do, coração ...)· Os distúrbios somáticos funcionais podem estar na origem de uma doença que se declarará posteriormente. Dentre estes, a fibromial- gia é um transtorno que associa dores difusas ou localizadas, fadiga crônica, sintomas depressivos, transtornos de memória e de concentração (Rooks DS., Curr Opin Rheumatol. 2007, 19; 111). Os sintomas da fibromialgia são tratados por inibidores de recaptura mistos de noradrenalina/serotonina (Vit- ton O., Hum Psychopharmacol. 2004, 19 suppl 1:S27). A adição de uma componente, que favorece o tônus dopaminérgico, como no extrato de Euca- lipto, de acordo com a presente invenção, é vantajosa para o preparo de um medicamento ou complemento alimentar, destinado a tratar e/ou prevenir os distúrbios somáticos funcionais.

De forma vantajosa, esse medicamento se apresenta sob uma forma oral ou injetável.

Vantajosamente, a forma oral é escolhida dentre o grupo com- posto de comprimido, geleia, cápsula, preparados líquidos, tais como xaro- pes, soluções ingeríveis ou pós para suspensões ingeríveis.

De forma vantajosa, esse complemento alimentar (ou nutracêuti- co ou dietético) é acondicionado sob a forma de doses, a saber: as formas de apresentação, tais como geleias, pastilhas, comprimidos, pílulas e outras formas similares, assim como os sachês de pó, as ampolas de líquido, os frascos munidos de um conta-gotas e as outras formas análogas de prepa- rados líquidos ou em pó destinados a serem abrigados em unidades medi- das de pequena quantidade.

Os resultados, obtidos a partir de um extrato de Eucalipto enri- quecido em pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras, de acordo com a presente invenção, mos- tram que os benefícios da presente invenção podem ser estendidos a qual- quer composição à base de pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras, quer este seja obtido por via química, bioquímica ou a partir de um extrato vegetal.

A presente invenção também refere-se, portanto, à utilização de pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras para o preparo de um medicamento ou complemento ali- mentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afecções ou patologi- as neurológicas, psiquiátricas e distúrbios associados, síndromes somáticas funcionais e das dependências das substâncias que viciam, decorrentes de um distúrbio da recaptura dos neuromediadores. De forma preferida, o tra- tamento e/ou a prevenção dessas afecções ou patologias consiste em uma inibição da recaptura de neuromediadores.

Por suas propriedades farmacológicas de inibidor da recaptura desses neuromediadores, os compostos de fórmula (I) e suas formas diaste- reoisômeras são particularmente úteis ao preparo de um medicamento ou complemento alimentar destinado a tratar e/ou prevenir numerosas afecções ou patologias resultantes de um defeito de dopamina e/ou serotonina e/ou noradrenalina.

Dentre as afecções ou patologias que podem ser tratadas e/ou prevenidas com o auxílio desses compostos, de acordo com a presente in- venção, convém citar a título de exemplos ilustrativos e não limitativos:

- as doenças, afecções ou distúrbios neurológicos;

tais como as doenças neurodegenerativas (Mal de Alzheimer, Coréia de Huntington1 Mal de Parkinson, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo craniano), a esclerose lateral amiotrófica, as demências senis, as demências fronto-temporais, as demências vasculares, a enxaqueca, as dores neuropáticas de origem central;

- as doenças, afecções ou distúrbios psiquiátricos:

tais como a depressão (endógena, resistente, reagente ou iatró- gena), o estado depressivo, a esquizofrenia, o transtorno bipolar, a ansieda- de generalizada, as doenças ligadas ao estresse, as síndromes do pânico, os transtornos obsessionais compulsivos, as síndromes do estresse pós- traumático, transtornos da atenção e da hiperatividade, os transtornos de condutas alimentares (notadamente a bulimia, a anorexia), a fobia (notada- mente a agorafobia), o autismo;

- os transtornos da memória, da atenção e da vigilância associa- dos às doenças, afecções ou transtornos neurológicos e psiquiátricos; - os transtornos somáticos funcionais:

tais como a síndrome de fadiga crônica, a fibromialgia, a sín- drome do cólon irritável, os refluxos gastroesofágicos, a perda da libido, os disfuncionamentos da ereção, as incontinências urinárias;

- a dependências das substâncias que viciam:

notadamente a nicotina, o álcool, os opiáceos, os canabinoides, os psicoestimulantes.

Com efeito, o medicamento ou o complemento alimentar, de a- cordo com a invenção, é vantajosamente destinado a induzir a liberação da dependência da nicotina, do álcool, dos opiáceos, dos canabinoides, dos psicoestimulantes e a prevenir a recaída em indivíduos abstinentes. O medi- camento ou o complemento alimentar, de acordo com a invenção, é vantajo- samente utilizado como tratamento de substituição das substâncias que vici- am ou para prevenir ou a tratar a síndrome depressiva associada à liberação da dependência.

O técnico poderá identificar outras patologias, cujo tratamento necessita dessa inibição.

Vantajosamente, a presente invenção refere-se à utilização de macrocarpal A, macrocarpal B, macrocarpal C e/ou macrocarpal G para o preparo de um medicamento ou de um complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afecções ou patologias neurológicas, psi- quiátricas e distúrbios associados, síndromes somáticas funcionais e das dependências das substâncias que viciam, decorrentes de um distúrbio da recaptura da dopamina e/ou da serotonina e/ou da noradrenalina. Testes feitos com os compostos de fórmula (I) e suas formas

diastereoisômeras mostraram que esses compostos agem sobre a inibição de recaptura da dopamina e/ou da serotonina e/ou da noradrenalina.

De forma vantajosa, esse medicamento se apresenta sob uma forma oral ou injetável. Os compostos de fórmula (I) e suas formas diastereoisômeras,

de acordo com a presente invenção, podem ser obtidos por purificação de um extrato vegetal ou por síntese química ou bioquímica, tal como descrito em Total Synthesis of (-)-Macrocarpal C. Stereoselective Coupling Reaction with a Novel Hexasubstituted Benzeno Cr((C0)3 Complex as a Biomimetic Chiral Benzyl Cátion Equivalent/Tanaka, Tetsuaki; Mikamiyama, Hidenorí; Maeda, Kimiya; Iwata, Chuzo; In, Yasuko; Ishida, Toshimasa/Journal of Or- ganic Chemistry (1998), 63(26), 9782-9793.

Esses compostos podem ser isolados do "extrato de Eucalipto" ou do "extrato enriquecido em pelo menos um macrocarpal de fórmula (I)". As técnicas, que permitem sua purificação, são técnicas cromatográficas clássicas, para o técnico. Os extratos são fracionados sobre coluna prepara- tória, tendo por fase estacionária uma fase inversa, de preferência Symetry Shield®, 5 pm (Waters) e por fase móvel, uma mistura de acetonitrila/água/ ácido trifluoroacético nas proporções 95/5/0,1%.

A pureza em composto de fórmula (I) dessa fração é superior ou igual a 90%. Preferencialmente, a pureza em macrocarpal A, macrocarpal B, macrocarpal C e/ou macrocarpal G dessa fração é superior ou igual a 90%.

De acordo com a presente invenção, pode-se racionalmente considerar que o macrocarpal A, e/ou macrocarpal B, e/ou macrocarpal C e/ou macrocarpal G sejam utilizados para o preparo de um medicamento ou de um complemento alimentar destinado a tratar e/ou prevenir o superpeso ou a obesidade.

A presente invenção também refere-se a um extrato enriquecido de Eucalipto, caracterizado pelo fato de conter pelo menos um composto de fórmula (I) ou de qualquer uma de suas formas diastereoisômeras:

R1

na qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento C=CH2, C-CH3 ^CH3 cCCH3

OH ' OH OU

um grupamento , ou e R2 representa um grupa- mento isobutila, α-isobutila ou β-isobutila, e pelo fato de:

- a fração mássica em macrocarpal A ser superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a

40% e ainda mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%;

- a fração mássica em macrocarpal B ser superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 40% e ainda mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%;

- a fração mássica em macrocarpal C ser superior ou igual a 3%

e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 50%, mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 40% e ainda mais preferencialmente superior ou igual a 3% e inferior a 20%;

- e a fração mássica em macrocarpal G ser superior ou igual a 5% e estritamente inferior a 90%, preferencialmente superior ou igual a 5% e

inferior a 50%, mais preferencialmente superior ou igual a 5% e inferior a 40% e ainda mais preferencialmente superior ou igual a 5% e inferior a 20%.

De forma preferida, a presente invenção refere-se à utilização desse extrato enriquecido de Eucalipto como medicamento ou complemento alimentar.

A presente invenção refere-se, enfim, a um processo de preparo desse extrato enriquecido de Eucalipto.

O processo de obtenção desse extrato consiste nas seguintes

etapas:

- moagem de folhas e/ou de flores e/ou de frutos e/ou de hastes

e/ou de tronco de Eucalipto;

- pelo menos uma extração com um solvente orgânico ou uma mistura de água e de solvente(s) orgânico(s) miscível(is) na água.

A extração é feita em uma proporção de planta/solvente com- preendida entre aproximadamente 1/1 e aproximadamente 1/20, e pode ser renovada duas a três vezes. A temperatura do solvente de extração pode ser igual à temperatura ambiente ou superior, podendo atingir a temperatura de ebulição do solvente engajado. O tempo de contato da planta com o solvente está compreendido entre aproximadamente 30 minutos e aproximadamente 72 horas. De forma preferida, o solvente é escolhido no grupo composto de um alcano (pentano, hexano, heptano, octano, ciclo-hexano), um éter óxido (tetra-hidrofurano, dioxano, dietil éter), um éster (acetato de etila, acetato de isopropila), um álcool (metanol, etanol, propanol, isopropanol, butanol, octa- nol), uma cetona (metiletilcetona, metilisobutilcetona), um hidrocarboneto halogenado (clorofórmio, diclorometano) ou uma mistura de água e solven- te^) orgânico(s) miscível(is) na água (uma mistura hidroalcoólica, por exem- pio).

Preferencialmente, o solvente de extração é o diclorometano ou acetato de isopropila;

- no caso de um solvente de extração miscível com água, o fil- trado é colocado a seco, depois dissolvido em um solvente não miscível na

água.

No caso de um solvente não miscível com água, o filtrado é con- centrado.

- separação sólido/líquido por técnicas conhecidas do técnico.

Em um modo de realização preferida da invenção, uma ou várias

extrações líquido-líquido são realizadas por adição de uma base preferenci- almente carbonato de sódio (Na2CC>3). As fases aquosas básicas reunidas são acidificadas por adição de ácido, preferencialmente o ácido clorídrico (HCI), depois extraídas por uma a várias extrações líquido-líquido realizadas com um solvente não miscível com água. Vantajosamente, a acidificação leva à obtenção de um pH aproximadamente igual a 1.

As fases orgânicas reunidas podem ser secas sobre sulfato de sódio, depois concentradas sob vácuo a uma temperatura que varia da tem- peratura ambiente àquela de ebulição.

O concentrado é seco por meios de secagem clássicos (nebuli- zação, estufa...) a temperaturas que não ultrapassam 60°C, de preferência, e constitui o extrato enriquecido em macrocarpal G. Esse extrato pode ser estabilizado por adição de um antioxidante como, por exemplo, o ácido as- córbico ou o ácido cítrico em quantidades compreendidas entre 0,05 a 1 g para 100 g de extrato seco.

Em um modo de realização particular da invenção, o extrato de Eucalipto ou o extrato de Eucalipto dito "enriquecido em pelo menos um composto da fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisôme- ras" é também obtido por um processo de extração que utiliza um fluido su- percrítico como solvente de extração.

As folhas, as flores, os frutos, as hastes ou o tronco de Eucalipto (,Eucalyptus sp) ou uma mistura dessas partes são moídos ou não, depois

extraídos com um fluido supercrítico que pode ser o dióxido de carbono.

Uma primeira extração por C02 supercrítico, preferencialmente, é realizada nas seguintes condições:

- a temperatura do fluido está compreendida entre aproximada- mente 40°C e aproximadamente 80°C e preferencialmente entre aproxima-

damente 40°C e aproximadamente 60°C;

- sua pressão está compreendida entre aproximadamente 8 MPa (80 bárias) e aproximadamente 25 MPa (250 bárias) e preferencialmente entre aproximadamente 10 MPa (100 bárias) e aproximadamente 20 MPa (200 bárias);

- a duração de extração está compreendida entre uma hora a-

proximadamente e 6 horas aproximadamente;

- a vazão do fluido será adaptada pelo técnico, em função da quantidade de matéria a extrair e o tamanho da autoclave utilizada. De forma preferida, a vazão de CO2 utilização no processo, segundo a presente in-

venção, está compreendida entre 2 e 15 kg/hora, vantajosamente 8 a 12 kg/hora;

para uma quantidade de planta compreendida entre 200 e 1000 gramas, preferencialmente 500 gramas aproximadamente;

e para uma autoclave com capacidade compreendida entre 2 e

10 litros, preferencialmente com capacidade de 5 litros aproximadamente.

Quando dessa primeira etapa de extração, é possível acrescen- tar um cossolvente orgânico, da família dos álcoois (dos quais o etanol), éte- res óxido, ésteres ou uma mistura de dois ou vários desses solventes.

A planta assim extraída pode, em seguida, ser submetida a uma segunda extração de forma opcional. O fluido de extração é, preferencial- mente, o CO2 supercrítico com ou sem cossolvente. As condições operacio- nais são:

- a temperatura do fluido está compreendida entre aproximada- mente 40°C e aproximadamente 80°C, e preferencialmente entre aproxima- damente 40°C e aproximadamente 60°C;

- sua pressão está compreendida entre aproximadamente 8 MPa (80 bárias) e aproximadamente 25 MPa (250 bárias), e preferencialmente

entre aproximadamente 10 MPa (100 bárias) e aproximadamente 20 MPa (200 bárias);

- a vazão do fluido está compreendida entre 2 a 15 kg/hora, van- tajosamente 8 a 12 kg/hora;

para uma quantidade de planta compreendida entre 200 e 1000

gramas, preferencialmente 500 gramas aproximadamente;

e para uma autoclave com capacidade compreendida entre 2 e litros, preferencialmente com capacidade de 5 litros aproximadamente.

Vantajosamente, a extração é realizada em uma proporção mássica planta/cossolvente compreendida entre 1/0,1 e 1/5.

Essa segunda etapa de extração pode se renovada, se necessá- rio. A duração de extração está compreendida entre aproximadamente uma hora e aproximadamente 3 horas por etapa de extração adicional.

Procede-se, em seguida, à evaporação do extrato obtido. O técnico adaptará as condições operacionais desse processo

por fluido supercrítico para se obter um extrato de Eucalipto mais ou menos enriquecido.

A secagem do extrato final é realizada por liofilização ou por meios de secagem mais clássicos conhecidos do técnico (nebulização, estu- fa...). Preferencialmente, as temperaturas de secagem não ultrapassam 60°C aproximadamente.

O extrato pode ser estabilizado por adição de um antioxidante como, por exemplo, o ácido ascórbico, o ácido cítrico com quantidades com- preendidas entre aproximadamente 0,05 e aproximadamente 1 g para 100 g de extrato seco.

A invenção será melhor compreendida com o auxílio dos seguin- tes exemplos, que, todavia, não limitam o seu alcance. Exemplo 1: Preparo de um extrato de Eucalyptus globulus.

As folhas de Eucalyptus globulus são moídas, depois extraídas com 5 volumes de etanol à temperatura ambiente. O tempo de contato da planta com o solvente é de 48 horas. A planta é separada do solvente por filtragem.

O filtrado obtido é seco sob vácuo a uma temperatura de 60°C. O extrato assim obtido será utilizado para os testes in vitro apresentados no exemplo 5. O extrato obtido contém aproximadamente 0,65 g de macrocar- pal A, aproximadamente 0,7 de macrocarpal B, aproximadamente 0,4 g de macrocarpal C e aproximadamente 1 g de macrocarpal G para 100 g de ex- trato.

Exemplo 2: Preparo de um extrato de Eucalyptus globulus.

As folhas de Eucalyptus globulus são moídas, depois extraídas 3 vezes ao refluxo com 5 volumes de etanol 50% v/v. O tempo de contato da planta com o solvente é de 1 hora aproximadamente. A planta é separada do solvente por filtragem.

O filtrado obtido é concentrado até 0,5 volume. A purificação Ii- quido-líquido é realizada, adicionando-se diclorometano. Três extrações Ii- quido-líquido são realizadas. As fases orgânicas são reunidas e secas sobre sulfato de sódio. A secagem do extrato é realizada a 60°C sob vácuo.

O extrato assim obtido contém aproximadamente 1,3 g de ma- crocarpal A, aproximadamente 1,4 g de macrocarpal B, aproximadamente 0,8 g de macrocarpal C e aproximadamente 2 g de macrocarpal G para 100 g de extrato seco. Exemplo 3: Preparo de um extrato de Eucalyptus globulus.

As folhas de Eucalyptus globulus são moídas, depois extraídas ao refluxo 2 vezes com 5 volumes da mistura etanol-água 50% v/v durante uma hora aproximadamente.

A planta é separada do solvente por filtragem.

O filtrado obtido é concentrado, depois estabilizado pela adição de 0,1 g para 100 g de extrato seco de ácido cítrico.

O concentrado é congelado, depois seco por liofilização.

O extrato obtido contém aproximadamente 0,3 g de macrocarpal A, aproximadamente 0,35 g de macrocarpal B, aproximadamente 0,2 g de macrocarpal C e aproximadamente 0,5 g de macrocarpal G para 100 g de extrato seco. Exemplo 4

537 de folhas de eucalipto são moídas, depois colocadas em uma autoclave. Elas são extraídas durante 4 horas por CO2 supercrítico a 40°C, 15 MPa (150 bárias), com uma vazão de 10 kg/h.

As folhas assim extraídas são submetidas a uma segunda extra- ção por uma mistura de CO2 supercrítica/etanol a 15 MPa (150 bárias), 50°C. Engaja-se um volume de etanol para um peso de planta. Extrai-se as- sim durante 2 horas e 15 minutos, depois se secam as folhas por passagem de CO2 sozinho nas mesmas condições operacionais, durante 30 minutos.

Recuperam-se 273,7 g de extrato que são secos por evaporação do solvente. São obtidos assim 27,9 g de um extrato contendo 6,85 g de macrocarpal G para 100 g de extrato seco.

Exemplo 5: Avaliação do extrato de folhas de Eucalyptus globulus sobre a recaptura da serotonina, dopamina e noradrenalina.

Os testes foram realizados em sinapses de ratos in vitro. 1) Avaliação da recaptura da serotonina (ou 5-HT).

O protocolo utilizado para essa avaliação é aquele descrito em Perovic, S. and Muller W.E.G. 1995 - Pharmacological profile of hyperícum extract: effect on serotonin uptake by postsynaptic receptors, Arzneim- Forsch. DrugRes., 45:1145-1148. O princípio é o seguinte:

As sinapses oriundas de cérebros de rato são colocadas para incubar, durante 15 minutos a 37°C com 0,1 μΟί de [3H]-seronina em pre- sença ou na ausência (controle) do extrato de Eucalyptus globulus prepara- do segundo o exemplo 1 ou a imipramina (referência) em um tampão con- tendo NaCI a 118 mM, KCI a 5 mM, MgSO4 a 2,5 mM, NaH2PO4 a 1,2 mM, NaHCO3 a 25 mM, glicose a 11 mM, EGTA a 10 μΜ e ácido ascórbico a 50 μΜ (PH=7,4).

A atividade basal é determinada, incubando a mesma mistura durante 15 minutos a 37°C em presença de imipramina a 10 μΜ para blo- quear a recaptura.

Na seqüência da incubação, as amostram são filtradas rapida- mente sob vácuo através dos filtros em fibra de vidro (GB/B, Packard) e en- xaguadas duas vezes com tampão de incubação gelado para eliminar a [3H]- serotonina livre. Os filtros são secos e a radioatividade retida é medida por um computador de cintilação (Topcount, Packard) utilizando um coquetel de cintilação (Microscint O, Packard). Os resultados são expressos em percentagem de inibição de

recaptura da [3H]-serotonina do controle (cf. tabela 1) 2) Avaliação da recaptura da dopamina (ou DA)

O protocolo utilizado para essa avaliação é aquele descrito em Janowsky A. Berger P., Vocci F., Labarca R., Skolnick P., and Paul S.M., 1996 - Chareaterization of sodium - dependent [3HJGBR-12935 binding in brain : a radioligant for seletive Iabelling of the dopamine transport eomplex, J. Neuroehem., 46, 1272-1276.

O princípio é o seguinte:

O meio sináptico (sinapses de corpo estriado de rato) é colocado para incubar durante 15 minutos a 37°C com 0,1 pCi de [3H]-DA em presen- ça ou na ausência (controle) do extrato de Eucalyptus globulus preparado, de acordo com o exemplo 1, ou de GBR 1209 (referência) na solução- tampão (cf. recaptura da serotonina).

A atividade basal é determinada, incubando-se a mesma mistura durante 15 minutos a 37°C em presença de GBR 12909 a 10 μΜ para blo- quear a recaptura.

Na seqüência da incubação, as amostras são filtradas rapida- mente sob vácuo através dos filtros em fibra de vidro (GB/B, Packard) e en- xaguadas duas vezes com o tampão de incubação gelado para eliminar a [3H]-dopamina livre. Os filtros são secos e a radioatividade retida é medida por um computador de cintilação (Topcount, Packard) utilizando um coquetel de cintilação (Microscint O, Packard).

Os resultados são expressos em percentagem de inibição de recaptura da [3H]-serotonina do controle (cf. tabela 1) 3) Avaliação da recaptura da dopamina (ou NE)

O protocolo utilizado para essa avaliação é aquele descrito em Perovic, S. e Muller W.E.G., 1995 - Pharmacological profile of hypericum extract: effect on serotonin uptake by postsynaptic receptors, Arzneim- Forsch. GrugRes., 45: 1145-1148.

O princípio é o seguinte:

O meio sináptico (Sinapses de hipotálamos de rato) é colocado para incubar, durante 20 minutos a 37°C com 0,1 pCi de [3H]-NE em presen- ça ou na ausência (controle) do extrato de Eucalyptus globulus preparado segundo o exemplo 1 ou da protriptilina (referência) em uma solução-tampão (cf. recaptura da serotonina).

A atividade basal é determinada, incubando a mesma mistura durante 20 minutos a 37°C em presença de protriptilina a 10 μΜ para blo- quear a recaptura.

Na seqüência da incubação, as amostram são filtradas rapida- mente sob vácuo através dos filtros em fibra de vidro (GB/B, Packard) e en- xaguados duas vezes com tampão de incubação gelado para eliminar a [3H]- NE livre. Os filtros são secos e a radioatividade retida é medida por um com- putador de cintilação (Topcount, Packard) utilizando um coquetel de cintila- ção (Microscint O, Packard).

Os resultados são expressos em percentagem de inibição de recaptura da [3H]-noradrenalina do controle (cf. tabela 1). 4) Resultados

Os resultados são expressos em percentagem de inibição de recaptura do neuromediador avaliado (cf. tabela 1) Teste Concentrações (pg de extrato seco/ml de solução) % de inibição 1 3 Recaptura da serotonina 10 43 100 103 1 4 Recaptura da dopamina 10 91 100 102 1 -14 Recaptura da noradrenalina 10 11 100 101

Tabela 1: Avaliação do extrato de folhas de Eucalyptus Qlobulus sobre a re- captura da serotonina, dopamina e noradrenalina.

Observa-se uma inibição significativa da recaptura da serotonina e da dopamina a 10 pg/ml e dos três neurotransmissores a 100 Mg/ml.

Exemplo 6: Avaliação do extrato de folhas de Eucalyptus globulus enriqueci- do em macrocarpal G vs extrato de Eucalyptus sem macrocarpal G e vs ma- crocarpal G puro.

As folhas de Eucalyptus globulus são moídas, depois extraídas por 5 volumes de diclorometano. A extração é realizada duas vezes ao reflu- xo, durante uma hora. Procede-se, em seguida, a uma filtragem sob vácuo. Os filtrados reunidos são concentrados até dois volumes.

Três extrações líquido-líquido são realizadas por adição de um volume de carbonato de sódio (Na2CO3,) a 0,1 M.

A fase de diclorometano esgotada é conservada. Após secagem sobre sulfato de sódio, concentração e colocação a seco sob vácuo a 60°C, o resíduo obtido constitui "o extrato empobrecido em macrocarpal" (a fração mássica de macrocarpal G sendo inferior a 0,1%).

As fases aquosas básicas reunidas são acidificadas por adição de ácido clorídrico (HCI) a 1 M até a obtenção de um pH aproximadamente igual a 1, depois extraídas por 3 extrações líquido-líquido com diclorometa- no. As fases orgânicas são secas sobre sulfato de sódio, depois concentra- das e colocadas a seco sob vácuo a 60°C máximo. O resíduo seco obtido constitui "o extrato enriquecido em macrocarpal G". Este contém uma fração mássica de macrocarpal G de 7%.

O extrato enriquecido é fracionado sobre uma coluna preparató- ria tendo por fase estacionária uma fase inversa, Symetry Shields®, 5 μιπ (Waters) e, para fase móvel, uma mistura de acetonitrila/água/ácido trifluoro- acético nas proporções 95/5/0,1%.

A pureza em macrocarpal G da fração obtida é de aproximada- mente 97%.

O protocolo, em seguida, utilizado é idêntico àquele do exemplo 5 no que refere-se à avaliação da recaptura da serotonina. Os resultados obtidos estão listados na tabela 2 a seguir.

Teste Concentrações (pg de extrato seco/ml de solução) % de inibição Extrato enriquecido em macrocarpal G 15 101 Extrato empobrecido em macrocarpal G 15 37 Macrocarpal G 0,3 103,8

Tabela 2: Comparação da atividade de um "extrato enriquecido em macro- carpal G", de um "extrato sem macrocarpal G" e de uma fração enriquecida em macrocarpal G sobre a recaptura da serotonina.

Observa-se que a percentagem de inibição de recaptura da se-

rotonina é tanto mais significativa quanto mais elevado for o teor em macro- carpal G.

Exemplo 7: Determinação da concentração inibidora a 50% (CI50) do macro- carpal A, do macrocarpal B, do macrocarpal C e do macrocarpal G sobre a

recaptura dos neuromediadores comparativamente àquela da hiperforina.

Os protocolos seguidos são aqueles do exemplo 5. Eles foram repetidos para diferentes concentrações em macrocarpal A, B, C e G, e em hiperforina.

As curvas de inibição obtidas permitiram obter os valores de CI50

a seguir. Cl50 (Mg de extrato/ml de solução Teste Macrocarpal A Macrocarpal B Macrocarpal C Macrocarpal G Hiperforina Recaptura da serotonina 1,3 2,5 1,3 1,4 0,89 Recaptura da noradrenalina 1,8 >3,1 0,54 3,1 0,79 Recaptura da dopamina 0,71 1,5 0,68 0,35 0,23

Tabela 3: Determinação da concentração inibidora a 50% (CIsn) do macro- carpal A. macrocarpal B. macrocarpal C e macrocarpal G, e da hiperforina sobre a recaptura da serotonina, da noradrenalina e da dopamina.

Esses resultados permitiram colocar em evidência que os quatro compostos são portadores da atividade de inibição da recaptura de neuro- mediadores. Além disso, observa-se que os níveis de atividade desses qua- tro compostos são de ordem equivalente.

Claims

1. Utilização de um extrato de Eucalipto para o preparo de um medicamento ou de um complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afecções ou patologias neurológicas, psiquiátricas e distúrbios associados, síndromes somáticas funcionais e dependências das substâncias que viciam, decorrentes de um distúrbio da recaptura da dopa- mina e/ou da serotonina e/ou noradrenalina.

2. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o tratamento e/ou a prevenção dessas afecções ou patolo- gias neurológicas, psiquiátricas e distúrbios associados, das síndromes so- máticas funcionais e das dependências das substâncias que viciam consiste em uma inibição da recaptura da dopamina e/ou da serotonina e/ou da nora- drenalina.

3. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que esse extrato de Eucalipto compreende pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras: <formula>formula see original document page 28</formula> na qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento C=CH2, C^H3 ^CH3 cCCH3 um grupamento ^hi ^H ou oh e R2 representa um grupa- mento isobutila, α-isobutila ou β-isobutila.

4. Utilização, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (I) é o macrocarpal A: (5-((1R)-1- ((11 S,7R)-7-hidróxi-3,3,7,11 -tetrametiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11 -il)-3- metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com C^ 3 OH o carbono, ao qual é ligado, o grupamento wn e R2 representa uma β- isobutila; e de que sua fração mássica no extrato de Eucalipto é superior ou igual a 0,1% e estritamente inferior a 3%.

5. Utilização, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (I) é o macrocarpal B: (5-((1S)-1- ((11S,7R)-7-hidróxi-3,3,7,11-tetrametiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3- metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com <formula>formula see original document page 29</formula> o carbono, ao qual é ligado, o grupamento e R2 representa uma a- isobutila; e de que a fração mássica no extrato de Eucalipto é superior ou igual a 0,1% e estritamente inferior a 3%.

6. Utilização, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (I) é o macrocarpal C: (5-((1R)-1- ((11 S)-3,3,11 -trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)- 2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbo- no, ao qual é ligado, o grupamento C=CH2 e R2 representa uma β-isobutila; e de que a fração mássica no extrato de eucalipto é superior ou igual a 0,1% e estritamente inferior a 3%.

7. Utilização, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (I) é o macrocarpal G: (5-(1-(3,3,11 ,- trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidro- xibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento C=CH2 e R2 representa uma isobutila; e de que a fração mássica no extrato de Eucalipto é superior ou igual a 0,1% e estrita- mente inferior a 5%.

8. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de quevesse extrato de Eucalipto é enriquecido em pelo menos 1 composto de fórmula (I), tal como definido na reivindicação 3.

9. Utilização, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o extrato de eucalipto é enriquecido em macrocarpal A, es- se extrato enriquecido em macrocarpal A contendo uma fração mássica de macrocarpal A superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%.

10. Utilização, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o extrato de eucalipto é enriquecido em macrocarpal B, es- se extrato enriquecido em macrocarpal B contendo uma fração mássica de macrocarpal B superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%.

11. Utilização, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o extrato de eucalipto é enriquecido em macrocarpal C, es- se extrato enriquecido em macrocarpal C contendo uma fração mássica de macrocarpal C superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%.

12. Utilização, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o extrato de eucalipto é enriquecido em macrocarpal G, es- se extrato enriquecido em macrocarpal G contendo uma fração mássica de macrocarpal G superior ou igual a 5% e estritamente inferior a 90%.

13. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o extrato é oriundo de um Eucalipto escolhido dentre as es- pécies pertencentes aos subgêneros Eudesmia, Symphomyrtus e Corymbia e mais particularmente as seguintes espécies: Eucalyptus globulus L., Eu- calyptus pulverulenta Sims, Eucalyptus kartzoffiana L. A. S. Johnson 1 Bla- xell, Eucalyptus macrocarpa Hook., Eucalyptus cinerea F. Muell. Ex. Benth., Eucalyptus dorrigoensis (BIakeIy) L.A.S. Johnson 1 K. D. Hill, Eucalyptus Ieptopoda Benth., Eucalyptus oeeidentalis Endl., Eucalyptus viridis R. T. Ba- ker, Eucalyptus polybraetea R. T. Baker et Eucalyptus smithii R.T. Baker.

14. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o extrato de eucalipto é escolhido dentre o grupo composto de um extrato de folhas, de flores, de frutos, de hastes e de tronco de euca- lipto.

15. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a patologia ou a afecção neurológica, psiquiátrica ou distúr- bio associado, a síndrome somática funcional ou a dependência das subs- tâncias que viciam é selecionada no grupo que compreende: - doenças neurológicas, tais como as doenças neurodegenerati- vas (Mal de Alzheimer, Coréia de Huntington, Mal de Parkinson1 acidentes vasculares cerebrais, traumatismo craniano), a esclerose lateral amiotrófica, as demências senis, as demências fronto-temporais, as demências vascula- res, a enxaqueca, as dores neuropáticas de origem central; - as doenças psiquiátricas, tais como a depressão (endógena, resistente, reagente ou iatrógena), o estado depressivo, a esquizofrenia, o transtorno bipolar, a ansiedade generalizada, as doenças ligadas ao estres- se, as síndromes do pânico, os transtornos obsessionais compulsivos, as síndromes do estresse pós-traumático, transtornos da atenção e da hiperati- vidade, os transtornos de condutas alimentares (notadamente a bulimia, a anorexia), a fobia (notadamente a agorafobia), o autismo; - os transtornos da memória, da atenção e da vigilância associa- dos às doenças, afecções ou transtornos neurológicos e psiquiátricos; - as síndromes somáticas funcionais, tais como a síndrome de fadiga crônica, a fibromialgia, a síndrome do cólon irritável, os refluxos gas- troesofágicos, a perda da libido, os disfuncionamentos da ereção, as inconti- nências urinárias; - as dependências das substâncias que viciam, notadamente a nicotina, o álcool, os opiáceos, os canabinoides, os psicoestimulantes.

16. Utilização, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o medicamento está sob a forma oral ou injetável.

17. Utilização de pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras: <formula>formula see original document page 31</formula> na qual Ri forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento ^H <formula>formula see original document page 31</formula> C=CH2, um grupamento e R2 representa um grupamento isobutila, α-isobutila ou β-isobutila; para o preparo de um medicamento ou de uma complemento alimentar destinado ao tratamento e/ou à prevenção das afec- ções ou patologias neurológicas, psiquiátricas e distúrbios associados, sín- dromes somáticas funcionais e dependências das substâncias que viciam, decorrentes de um distúrbio da recaptura da dopamina e/ou da serotonina e/ou da noradrenalina.

18. Utilização, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o tratamento e/ou a prevenção das afecções ou patologi- as neurológicas, psiquiátricas e distúrbios associados, síndromes somáti- cas funcionais e dependências das substâncias que viciam consiste em uma inibição da recaptura da dopamina e/ou da serotonina e/ou da nora- drenalina.

19. Utilização, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (I) é: - o macrocarpal A (5-((1R)-1-((11S,7R)-7-hidróxi-3,3,7,11-tetra- metiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11 -il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno- 1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, o gru- <formula>formula see original document page 32</formula> pamento e R2 representa uma β-isobutila; - o macrocarpal B (5-((1S)-1-((11S,7R)-7-hidróxi-3,3,7,11-tetra- metiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno- 1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, o gru- <formula>formula see original document page 32</formula> pamento w , e R2 representa uma a-isobutila; - o macrocarpal C (5-((1R)-1-((11S)-3,3,11-trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11 -il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3- dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, o grupa- mento C=CH2 e R2 representa uma β-isobutila; - o macrocarpal G (5-(1-(3,3,11,-trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11 -il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3- dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um gru- pamento C=CH2 e R2 representa uma isobutila;

20. Utilização, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o macrocarpal A, o macrocarpal Β, o macrocarpal C ou o macrocarpal G é obtido por síntese química, bioquímica ou a partir de um extrato vegetal.

21. Utilização, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que a patologia ou a afecção neurológica, psiquiátrica ou distúr- bio associado, a síndrome somática funcional ou a dependência das subs- tâncias que viciam e selecionadas no grupo que compreende: - doenças neurológicas, tais como as doenças neurodegenerati- vas (Mal de Alzheimer, Coréia de Huntington, Mal de Parkinson, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo craniano), a esclerose lateral amiotrófica, as demências senis, as demências fronto-temporais, as demências vascula- res, a enxaqueca, as dores neuropáticas de origem central; - as doenças psiquiátricas, tais como a depressão (endógena, resistente, reagente ou iatrógena), o estado depressivo, a esquizofrenia, o transtorno bipolar, a ansiedade generalizada, as doenças ligadas ao estres- se, as síndromes do pânico, os transtornos obsessionais compulsivos, as síndromes do estresse pós-traumático, transtornos da atenção e da hiperati- vidade, os transtornos de condutas alimentares (notadamente a bulimia, a anorexia), a fobia (notadamente a agorafobia), o autismo; - os transtornos da memória, da atenção e da vigilância associa- dos às doenças, afecções ou transtornos neurológicos e psiquiátricos; - as síndromes somáticas funcionais, tais como a síndrome de fadiga crônica, a fibromialgia, a síndrome do cólon irritável, os refluxos gas- troesofágicos, a perda da libido, os disfuncionamentos da ereção, as inconti- nências urinárias; - as dependências das substâncias que viciam, notadamente a nicotina, o álcool, os opiáceos, os canabinoides, os psicoestimulantes.

22. Utilização, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o medicamento está sob a forma oral ou injetável.

23. Extrato de Eucalipto, caracterizado pelo fato de que conté pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer uma de suas formas diastereoisômeras: <formula>formula see original document page 34</formula> na qual Ri forma com o carbono, ao qual é ligado, um grupamento C=CH2, <formula>formula see original document page 34</formula> um grupamento wn, c^H ou ^n e R2 representa um grupa- mento isobutila, α-butila ou β-isobutila e pelo fato de que: - a fração mássica do macrocarpal A (5-((1R)-1-((11S,7R)-7- hidróxi-3,3,7,11 -tetrametiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6- tri-hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao <formula>formula see original document page 34</formula> qual é ligado, o grupamento e R2 representa uma β-isobutila, é su- perior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%; - a fração mássica do macrocarpal B (5-((1S)-1-((11S,7R)-7- hidróxi-3,3,7,11-tetrametiltriciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6- tri-hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao C^ 3 oh qual é ligado, o grupamento e R2 representa uma α-isobutila, é su- perior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%; - a fração mássica do macrocarpal C (5-((1R)-1-((11S)-3,3,11- trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri- hidroxibenzeno-1,3-dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, o grupamento C=CH2 e R2 representa uma β-isobutila, é superior ou igual a 3% e estritamente inferior a 90%; - e a fração do macrocarpal G (5-(1-(3,3,11,-trimetil-7-metileno triciclo (6.3.0.0(2,4)undec-11-il)-3-metilbutil)-2,4,6-tri-hidroxibenzeno-1,3- dicarbaldeído), no qual R1 forma com o carbono, ao qual é ligado, um gru- pamento C=CH2 e R2 representa uma isobutila, é superior ou igual a 5% e estritamente inferior a 90%.

24. Processo de preparo do extrato, de acordo com a reivindica- OH ção 23, caracterizado pelo fato de que compreende as seguintes etapas: - moagem de folhas e/ou de flores e/ou frutos e/ou de hastes e/ou de tronco de Eucaliptos; - pelo menos uma extração por um fluido supercrítico com ou sem cossolvente, recuperação do extrato e eventualmente secagem do ex- trato; ou pelo menos uma extração com um solvente orgânico ou uma mistura de água e de solvente orgânicos miscíveis na água, separação de sólido/líquido e enriquecimento do filtrado.

25. Processo, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o solvente orgânico é o diclorometano ou o acetato de iso- propila.

26. Processo, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a etapa de enriquecimento corresponde em pelo menos uma extração de líquido/líquido por acréscimo de uma base, uma acidifica- ção, depois pelo menos uma extração de líquido/líquido por solvente não miscível na água.