BRPI0712882A2 - pirrolopirimidinas para composições farmacêuticas - Google Patents

Abstract

PIRROLOPIRIMIDINAS PARA COMPOSIçõES FARMACêUTICAS. A presente invenção refere-se aos novos compostos de pirrolopirimidina e composições farmacêuticas compreendendo os ditos compostos de pirrolopirimidina. Além do mais, a presente invenção refere-se ao uso dos compostos de pirrolopirimidina da invenção para a produção de composições farmacêuticas para a profilaxia e/ou tratamento de doenças que podem ser influenciadas pela inibição da atividade de cinase de Mnk1 e/ou Mnk2 (Mnk2a ou Mnk2b) e/ou variantes das mesmas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "PIRROLOPIRI- MIDINAS PARA COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS". A presente invenção refere-se aos compostos de pirrolopirimidi- na e a novas composições farmacêuticas que compreendem os compostos de pirrolopirimidina.

Além do mais, a presente invenção refere-se ao uso dos com- postos de pirrolopirimidina da invenção para a produção de composições farmacêuticas para a profilaxia e/ou tratamento de doenças que podem ser influenciadas pela inibição da atividade de cinase de Mnkl (Mnkla ou MnK1b) e/ou Mnk2 (Mnk2a ou Mnk2b) ou ainda variantes das mesmas. Par- ticularmente, a presente invenção refere-se ao uso dos compostos de pirro- lopirimidina da invenção para a produção de composições farmacêuticas para a profilaxia e/ou terapia de doenças metabólicas, tais como diabetes, hiperlipidemia e obesidade, distúrbios hematopoiéticos e câncer e suas su- cessivas complicações e distúrbios associados com isso, como também in- flamações.

Doenças metabólicas são doenças causadas por um processo metabólico anormal e pode ou ser congênitas devido a uma anormalidade de enzima herdada ou adquirida devido a uma doença de um órgão endócrino ou insuficência de um órgão metabolicamente importante, tal com o fígado ou o pâncreas.

A presente invenção é mais particularmente dirigida para o tra- tamento e/ou profilaxia de doenças metabólicas em particular do metabolis- mo de lipídeo e carboidrato e as sucessivas complicações e distúrbios asso- ciados a esses.

Distúrbios de lipídeos cobrem um grupo de condições que cau- sam anormalidades no nível e metabolismo de lipídeos e lipoproteínas do plasma. Dessa maneira, as hiperlipidermias são de particular relevância clí- nica uma vez que elas constituem um fator de risco importante para o de- senvolvimento de aterosclerose e doenças vasculares subsequentes tais como doença cardíaca das coronárias.

A Diabetes mellitus é definida como uma hiperglicemia crônica associada com lesões resultantes nos órgãos e disfunções dos processos metabólicos. Dependendo de sua etiologia, uma se diferencia entre diversas formas de diabetes, que são devido a uma absoluta (falta ou diminuição da secreção de insulina) ou a uma relativa falta de insulina. A Diabetes mellitus Tipo I (IDDM, diabetes mellitus dependente de insulina) geralmente ocorre em adolescentes com menos de 20 anos de idade. Supõe-se que seja de etiologia autoimune, levando a uma insulite com a subsequente destruição das células beta das ilhotas de Langerhans, que são responsáveis pela sín- tese de insulina. Além disso, em diabetes autoimunes latentes em adultos (LADA; Diabetes Care. 8: 1460-1467, 2001) as células beta estão sendo destruídas devido ao ataque autoimune. A quantidade de insulina produzida pelas células das ilhotas pancreáticas restantes é muito baixa, resultando em níveis elevados de glicose no sangue (hiperglicemia). A Diabetes mellitus Tipo Il geralmente ocorre em uma idade mais avançada. Está, acima de tu- do, associada com uma resistência à insulina no fígado e nos músculos es- queletais, mas também com um defeito das ilhotas de Langerhans. Os altos níveis de glicose no sangue (e também altos níveis de lipídeo no sangue) por sua vez levam a uma deterioração da função das células beta e a um aumento em apoptose de células beta. A diabetes é uma doença muito incapacitante, porque os fárma- cos antidiabéticos comuns hoje não controlam os níveis de açúcar do san- gue suficientemente bem para completamente prevenir a ocorrência de ní- veis de açúcar no sangue altos e baixos. Por causa da faixa de níveis de açúcar no sangue serem tóxicas, elas causam complicações a longo prazo por exemplo retinopatia, renopatia, neuropatia e doença vascular periférica. Existe também um hospedeiro de codições relacionadas, tais como obesida- de, hipertensão, doença cardíaca e hiperlipidemia, às quais as pessoas com diabetes estão substancialmente em risco.

A obesidade é associada com um risco maior de acompanhar doenças tais como doenças cardiovasculares, hipertensão, diabetes, hiperli- pidemia e um aumento da mortalidade. Diabetes (resistência à insulina) e obesidade fazem parte da "síndrome metabólica" que é definida como a Ii- gação entre diversas doenças (também referida como síndrome X, síndrome de resistência à insulina, ou quarteto mortífero). Esses muitas vezes ocorrem nos mesmos pacientes e são os principais fatores de risco para o desenvol- vimento de diabetes tipo Il e doença cardiovascular. Tem sido sugerido que o controle de níveis de lipídeo e níveis de glicose é requerido para tratar a diabetes tipo II, doença cardíaca, e outras ocorrências da síndrome metabó- Iica (veja por exemplo, Diabetes 48: 1836-1841, 1999; JAMA 288: 2209-2716, 2002).

Em uma modalidade da presente invenção os compostos e as composiçãos da presente invenção são úteis para o tratamento e/ou profila- xia de doenças metabólicas do metabolismo de carboidrato e suas sucessi- vas complicações e distúrbios, tais como tolerância à glicose comprometida, diabetes (preferivelmente diabetes tipo II), complicações diabéticas tais co- mo gangrena diabética, artropatia diabética, osteopenia diabética, glomeros- clerose diabética, nefropatia diabética, dermopatia diabética, neuropatia dia- bética, catarata e retinopatia diabética, maculopatia diabética, síndrome dia- bético dos pésa, coma diabética com ou sem cetoacidose, coma diabético hiperosmolar, coma diabético hipoglicêmica, coma diabético hiperglicêmico, acidose diabética, cetoacidose diabética, glomerulonefrose intracapilar dia- bética, síndrome de Kimmelstiel-Wilson, amiotrofia diabética, neuropatia au- tonômica diabética, mononeuropatia diabética, polineuropatia diabética, an- giopatias diabéticas, angiopatia periférica diabética, úlcera diabética, artropa- tia diabética, ou obesidade em diabetes.

Em uma modalidade adicional os compostos e as composições da presente invenção são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de doenças metabólicas do metabolismo de lipídeo (isto é distúrbios de lipídeo) e suas sucessivas complicações e distúrbios tais como hipercolesterolemia, hiper- colesterolemia familiar, hiperlipoproteinemia de Fredrickson, hiperbetalipo- proteinemia, hiperlipideomia, hiperlipoproteinemia de tipo de proteína de densidade baixa [LDL], hipergliceridemia pura, hipergliceridemia endógena, hipercolesterolemia isolada, hipertrogliceridemia isolada, doenças cardiovas- culares tais como hipertensão, isquemia, varicose das veias, oclusão da veia retinal, aterosclerose, angina pectoris, infarto do miocárdio, estenocardia, hipertensão pulmonar, insuficiência cardíaca congestiva, glomerulopatia, distúrbios tubulointesticial, insuficiência renal, angiostenose, ou distúrbios cerebrovasculares, tal como apoplexia cerebral.

Em uma modalidade adicional da presente invenção os compos-

tos e composiçãos da presente invenção são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de distúrbios hematopoéticos e duas complicações conseqüentes e distúrbios tais como leucemia mieloide aguda (AML), Morbus Hodgkin, Iinfo- ma de Não-Hodgkin; doença hematopoética, leucemia não linfocítica aguda (ANLL)1 leucemia promielocítica aguda de doença mieloproliferativa (APL), leucemia mielomonocítica aguda (AMMoL), policitemia vera, linfoma, leuce- mia linfocítica aguda (ALL), leucemia linfocítica crônica (CCL)1 tumor de Wilm, ou Sarcoma de Ewing.

De acordo com a invenção, os compostos e composições da presente invenção são úteis em terapia de célula tronco hematopoética.

Em uma modalidade adicional da presente invenção os compos- tos e as composiçãos da presente invenção são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de câncer e sucessivas complicações e distúrbios tais como câncer do trato gastrointestinal superior, carcinoma pancreático, câncer de mama, câncer do cólon, carcinoma ovariano, carcinoma da cérvix, carcinoma do corpo, tumor do cérebro, câncer testicular, carcinoma laringeal, osteocarci- noma, câncer prostático, retinoblastoma, carcinoma do fígado, câncer do pulmão, neuroblastoma, carcinoma renal, carcinoma da tireóide, câncer eso- fageal, sarcoma do tecido mole, caquexia, ou dor. Além disso, a presente invenção refere-se ao uso de compostos

de pirrolopirimidina para a produção de composições farmacêuticas para a profilaxia e/ou terapia de doenças relacionadas à citocina.

Tais doenças são i.a. doenças inflamatórias, doenças autoimu- nes, distúrbios ósseos destrutivos, distúrbios proliferativos, doenças infec- ciosas, doenças neurodegenerativas, alergias, ou outras condições associa- das a citocinas proinflamatórias.

Doenças alérgicas e inflamatórias tais como inflamação aguda ou crônica, artrite inflamatória crônica, artrite reumatóide, psoríase, COPD, doença intestinal inflamatória, asma e choque séptico e suas sucessivas complicações e distúrbios associados a isso.

Doenças inflamatórias como artrite reumatóide, doenças pulmo- nares inflamatórias como COPD, doença intestinal inflamatória e psoríase afligem uma em três pessoas no curso de suas vidas. Não só essas doenças impõem imensos custos com os cuidados de saúde, mas também elas mui- tas vezes alejam e debilitam.

Embora a inflamação seja o processo patogênico que unifica essas doeças inflamatórias abaixo, a abordagem de tratamento atual é com- plexa e é geralmente específica para qualquer uma doença. Muitas das te- rapias atuais disponíveis hoje somente tratam os sintomas da doença e não a causa subjacente da inflamação.

As composições da presente invenção são úteis para o trata- mento e/ou profilaxia de doenças inflamatórias e sucessivates complicações e distúrbios, tais como inflamação aguda ou crônica, inflamação das juntas tais como artrite inflamatória crônica, artrite reumatóide, artrite psoríatica, osteoartrite, artrite reumatóide juvenil, síndrome de Reiter, artrite reumatóide traumática, artrite por rubéola, sinovite aguda e artrite gotosa; doenças in- flamatórias da pele tais como queimadura de sol, psoríase, psoríase eritro- dérmica, psoríase pustular, eczema, dermatite, formação de enxerto agudo ou crônico, dermatite atópica, dermatite de contato, urticaria e escleroderma; inflamação do trato gastrointestinal tal como doença intestinal inflamatória, doença de Crohn e condições relacionadas, colite ulcerativa, colite, e diverti- culite; nefrite, uretrite, salpingite, ooforite, endomiometrite, espondilite, Iupus eritematoso sistêmico e distúrbios relacionados, esclerose múltipla, asma, meningite, mielite, encefalomielite, encefalite, flebite, tromboflebite, doenças respiratórias tais como asma, bronquite, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), doença pulmonar inflamatória e síndrome de angústia respiratória de adulto, e rinite alérgica; endocardite, osteomielite, febre reumática, peri- cardite reumática, endocardite reumática, miocardite reumática, doença da válvula mitral reumática, doença da válvula aórtica reumática, prostatite, prostatocistite, espondoartropatias de espondilite anquilosante, sinovite, te- nosinovote, miosite, faringite, polimialgia reumática, tendonite ou bursite do ombro, gota, pseudogota, vasculites, doenças inflamatórias da tireoide sele- cionadas de tireoidite granulomatosa, tireoidite linfocítica, tireoidite fibrosa invasiva, tireoidite aguda; tireoidite de Hashimoto, doença de Kawasakil fe- nômeno de Raynaud, síndrome de Sjogren, doença neuroinflamatória, sép- sis, conjuntivite, queratite, iridociclite, neurite óptica, otite, linfoadenite, naso- faringite, sinusite, faringite, tonsilite, laringite, epiglotite, bronquite, pneumoni- te, estomatite, gingivite, esofagite, gastrite, peritonite, hepatite, colelitiase, colecistite, glomerulonefrite, síndrome de goodpasture, glomerulonefrite crescêntica, pancreatite, endomiometrite, miometrite, metrite, cervicite, en- docervicite, exocervicite, parametrite, tuberculose, vaginite, vulvite, silicose, sarcoidose, pneumoconiose, pirese, poliartropatia inflamatória, antropatia psoríatria, fibrose intestinal, bronquiectasia e artropatias enteropáticas. Além do mais, acredita-se também que as citocinas estão impli-

cadas na produção e desenvolvimento de vários distúrbios cardiovasculares e cerebrovasculares, tais como doença cardíaca congestiva, infarto do mio- cárdio, a formação de placas ateroscleróticas, hipertensão, agregação de plaqueta, angina, acidente cerebral vascular, doença de Alzheimer, lesão de reperfusão, lesão vascular incluindo restenose e doença vascular periférica, e, por exemplo, vários distúrbios de metabolismoósseo tal como osteoporose (incluindo osteoporose senil e pós-menopausa), doença de Paget, metásta- ses ósseas, hipercalcemia, hiperparatiroidismo, osteosclerose, osteoporose e periodontite, e as mudanças anormais no metabolismo ósseo que podem acompanhar a artrite reumatóide e a osteoartrite.

Produção excessiva de citocina também tem sido implicada em mediar certas complicações de infecções bacterianas, fúngicas e/ou virais tais como choque endotóxico, choque séptico síndrome de choque tóxico e em mediar certas complicações de cirurgia de CNS ou lesão tal como neuro- trauma e acidente cerebral vascular isquêmico.

Produção excessiva de citocina tem, além do mais, sido implica- da em mediar ou exacerbar o desenvolvimento de doenças envolvendo carti- Iagem ou reabsorção de músculo, fibrose pulmonar, cirrose, fibrose renal, a caquexia encontrda em certas doenças crônicas tais como doença maligna e síndrome de deficiência imune adquirida (AIDS), invasão de tumor e metás- tase de tumor e esclerose múltipla. O tratamento e/ou profilaxia dessas do- enças são também considerados pela presente invenção.

Adicionalmente, as composições inventivas podem ser usadas para tratar inflamação associada com doenças autoimunes incluindo, mas não limitadas a, lúpus eritematoso sistêmico, doença de Addison, doença poliglandular autoimune (também conhecida como síndrome poliglandular autoimune), glomerulonefrite, artrite reumatóide escleroderma, tireoidite crô- nica, doença de Graves, gastrite autoimune, diabetes, anemia hemolítica autoimune, glomerulonefrite, neutropenia autoimune de artrite reumatóide, trombocitopenia, dermatite atópica, hepatite ativa crônica, miastenia grave, esclerose múltipla, doença intestinal inflamatória, colite ulcerativa, doença de Crohn, psoríase, e enxerto vs. doença de hospedeiro.

Em uma modalidade adicional as composições da presente in- venção podem ser usadas para o tratamento e prevenção de doenças infec- ciosas tais como sépsis, choque séptico, Shiguelose, e Helicobacter pylori e doenças virais incluindo herpes simples tipo 1 (HSV-1), herpes simples tipo 2 (HSV-2), citomegalovirus, Epstein-Barr, vírus de imunodeficiência humana (HIV), infecção de hepatite aguda (incluindo hepatite A, hepatite B, e hepatite C), infecção por HIV e retinite de CMV, AIDS ou malignidade, malária, infec- ção micobacteriana e meningite. Esses também incluem infecções virais, por vírus da influenza, vírus de varicela-zoster (VZV), vírus de Epstein-Barr, her- pesvírus humano tipo 6 (HHV-6), herpesvírus humano tipo 7 (HHV-7), her- pesvírus humano tipo 8 (HHV-8), pseudorraiva e rinotraqueite.

As composições da presente invenção podem também ser usa- das topicamente no tratamento ou na profilaxia de estados de doença tópica mediada por ou exacerbada por produção excessiva de citocina, tais como juntas inflamadas, eczema, psoríase e outras condições de pele inflamató- rias tais como queimadura de sol; condições inflamatórias do olhos incluindo conjuntivite; pirese, dor e outras condições associadas com inflamação. A doença periodontal tem sido também implicada na produção de citocina, tópica e sistemicamente. Em conseqüência, o uso das composi- ções da presente invenção a fim de controlar a inflamação associada com a produção de citocina em tais doenças perorais, tais comogingivite e perio- dontite, é outro aspecto da presente invenção.

Finalmente, as composições da presente invenção podem tam- bém ser usadas para tratar ou prevenir doença neurodegenerativa selecio- nada de doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amio- trófica, doença de Huntington, isquemia cerebral ou doença neurodegenera- tiva causada por lesão traumática, neurotoxicidade de glutamato ou hipoxia.

Em uma modalidade preferida, as composições da presente in- venção podem ser usadas para tratar ou prevenir uma doença selecionada de inflamaão crônica ou aguda, artrite inflamatória crônica, artrite reumatói- de, psoríase, COPD, doença intestinal inflamatória, choque séptico, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla e asma.

Prcteínas cinases são enzimas importantes envolvidas na regu- Iagem de muitas funções celulares. O gene de LK6-serina/treonina-cinase de Drosophila melanogaster foi descrito com uma cinase de vida curta que pode se associar com microtúbulos (J. Cell Sei. 1997, 110(2): 209-219). A análise genética no desenvolvimento do olho de composto de Drosophila sugeriu um papel na modulação da via de sinal de RAS (Genetics 2000 156(3): 1219-1230). Os homólogos humanos mais próximos de Drosophila LK6-cinase são a cinase 2 que interage com a MAP-cinase (Mnk2, por exemplo as vari- antes Mnk2a e Mnk2b) e a cinase 1 que interage com MAP-cinase (MnkI) e variantes das mesmas. Essas cinases são principalmente localizadas no citoplasma. As Mnks são fosforiladas pelas cinses de p42 MAP Erkl e Erk2 e as cinases de p38-MAP. Essa fosforilação é disparada em resposta aos fatores de crescimento, ésteres de forbol e oncogenes tais como Ras e Mos, e por moléculas e citocinas que sinalizam a tensão. A fosforilação de proteí- nas de Mnk estimula sua atividade de cinase na direção do fator de iniciação eucariótica 4E (elF4E) (EMBO J. 16: 1909-1920, 1997; Mol Cell Biol 19,1871-1880, 1990; Mol Cell Biol 21, 743-754, 2001). A ruptura simultânea de ambos, os genes de Mnkl e Mnk2 em camundongos diminui a fsforilação basal e estimula a elF4E (Mol Cell Biol 24, 6539-6549, 2004). A fosforilação de elF4E resulta em uma regulagem da tradução da proteína (Mol Cell Biol22: 5500-5511, 2001).

Existem hipóteses diferentes que descrevem o modo de estimu-

lação da tradução da proteína por proteínas de Mnk. A maioria das publica- ções descreve um efeito estimulante positivo na tradução da proteína cap- dependente mediante a ativação das cinases interagindo com cinase de MAP. Dessa maneira, a ativação de proteínas de Mnk pode levar a uma es- timulação ou regulagem indireta da tradução de proteína, por exemplo, pelo efeito sobre a alfa 2 fosfolidase citosólica (BBA 1488:124-138, 2000).

O WO 03/037362 descreve uma ligação entre os genes Mnk de ser humano, particularmente as variantes dos genes Mnk2 de seres huma- nos, e doenças que estão associadas com a regulagem do peso corporal ou termogênese. É postulado que os genes Mnk de seres humanos, particular- mente as variantes de Mnk2, estão envolvidos em doenças tais como, por exemplo, doenças metabólicas incluindo obesidade, distúrbios alimentícios, caquexia, diabetes mellitus, hipertensão, doença cardíaca das coronárias, hipercolesterolemia, dislipideoemia, osteoartrite, pedras biliares, câncer dos genitais e apnéia do sono, e em doenças ligadas com a defesa de ROS1 tais como por exemplo diabetes mellitus e câncer. O WO 03/03762 além do mais descreve o uso de seqüências de ácido nucléico da família da cinase (Mnk) que interage com a cinase de MAP, e seqüências de aminoácidos que codi- ficam esses, e o uso dessas seqüências ou de efetores de ácidos nucléicos ou polipeptídeos de Mnk1 particularmente inibidores de Mnk e ativadores no diagnóstico, profilaxia ou terapia de doenças associadas com a regulagem do peso corporal ou termogênese.

O WO 02/103361 descreve o uso de cinase 2a e 2b (Mnk2a e Mnk2b) interagindo com a cinase MAP do ser humano em ensaios para a identificação de ingredientes farmacologicamente ativos, particularmente úteis para o tratamento de diabetes mellitus tipo 2. Além do mais, o WO02/103361 descreve também a profilaxia e/ou terapia de doenças associa- das com a resistência à insulina, através da modulação da expressão ou a atividade de Mnk2a ou Mnk2b. Separadamente dos peptídeos, peptidomimé- ticos, aminoácidos, análogos de aminoácidos, polinucleotídeos, análogos de polinucleotídeos, nucleotídeos e análogos de nucleotídeos, metil éster de ácido 4-hidroxibenzóico são descritos como uma substância que se vicula à proteína Mnk2 humana.

Inibidores de Mnk (referidos como CGP57380 e CGP052088) têm sido descritos (cf. Mol. Cell. Biol. 21, 5500, 2001; Mol Cell Biol Res Comm 3, 205, 2000; Genomics 69, 63, 2000). CGP052088 é um derivado de estaurosporina que tem um IC5o de 70 nM para inibição de atividade de ci- nase in vitro de Mnk1. CGP57380 é um seletivo de peso molecular baixo, inibidor não-citotóxico de Mnk2 (Mnk2a ou Mnk2b) ou de Mnkl: a adição de CGP57380 para células de cultura de célula, transfectadas com Mnk2 (Mnk2a ou Mnk2b) ou Mnkl mostrou uma forte redução de elF4E fosforilada.

A primeira evidência de um papel de Mnks na inflamação foi for- necida pelos estudos que demonstram a ativação de Mnkl por estímulos pró-inflamatórios. As citocinas TNFa e IL-Ιβ iniciam o processo de ativação de Mnkl in vitro (Fukunaga and Hunter, EMBO J 16(8): 1921-1933, 1997) e induzem a fosforilação do substrato de Mnk-específico elF4E in vivo (Ueda et al., Mol Cell Biol 24(15): 6539-6549, 2004). Além disso, a administração de lipopolissacarídeo (LPS), um estimulante potente da resposta inflamató- ria, induz a ativação de Mnkl e Mnk2 em camundongos, concomitante com uma fosforilação de seu substrato elF4E (Ueda et al., Mol Cell Biol 24(15):6539-6549, 2004).

Além disso, Mnkl tem sido apresentada como estando envolvido na regulagem da produção de citocinas pró-inflamatórias. Mnkl intensifica a expressão da quimiocina RANTES (Nikolcheva et al., J Clin Invest 110, 119-126, 2002). RANTES é um potente quimiotratante de monócitos, eosinófilos, basófilos e, células exterminadoras naturais. Ele ativa e induz a proliferação de linfócitos T, media a desgranulação de basófilos e induz a explosão respi- ratória em eosinófilos (Conti and DiGioacchino, Allergy Asthma Proc22(3): 133-7, 2001) Ambos, WO 2005/00385 e Buxade et al., Immunity 23: 177-189, Agosto de 2005 descrevem uma ligação entre Mnks e o controle da biossin- tese de TNFa. O mecanismo proposto é mediado por um elemento rico em AU regulador (ARE) no TNFa mRNA. Buxade et al. demonstram proteínas se vinculando e controlando a função de ARE para ser fosforilada por Mnkl e Mnk2. Especificamente a fosforilação mediada por Mnk da proteína de li- gação de ARE-, hnRNP A1 tem sido sugerida para intensificar a tradução da TNFa mRNA.

TNFa não é a única citocina regulada por um ARE. As AREs funcionais são também encontrados em transcrições de diversas interleuci- nas, interferonas e quimiocinas (Khabar, J Interf Citocina Res 25: 1-10, 2005). A fosforilação mediada por Mnk de proteínas de ligação de ARE têm dessa maneira o potencial para controlar a biossintese de citocinas em adi- ção àquela de TNFa.

A evidência atual demonstra Mnks como alvos a jusante de sina- lização inflamatória como também mediadoras da resposta inflamatória. Seu envolvimento na produção de TNFa, RANTES, e de citocinas potencialmen- te adicionais sugere a inibição de Mnks como estratégia para intervenção terapêutica anti-inflamatória.

O problema subjacente à presente invenção é prover inibidores de Mnkl e/ou Mnk2 potentes de seletivos que podem eficazmente com se- gurança ser usados para o tratamento de doenças metabólicas, doenças inflamatórias e suas sucessivas complicações e distúrbios.

Agora foi surpreendentemente descoberto que certos compostos de pirrolopirimidina são potentes inibidores das enzimas de cinase Mnkl e/ou Mnk2 e/ou variantes das mesmas, e como tal podem ser úteis na profi- Iaxia e/ou terapia de doenças que podem ser influenciadas pela inibição da atividade de cinase de Mnkl e/ou Mnk2 (Mnk2a or Mnk2b) e/ou variantes das mesmas.

Os compostos de pirrolopirimidina da presente invenção são compostos da fórmula geral (1): <formula>formula see original document page 0</formula> em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR-|a, CR-|aRib, CH(halo- gênio), C(halogênio)2, C=O, C(0)NR-|a, NH ou NR-|a, em que R-|a e Ru3 são C-|-6 alquila, C-j-g alquila C3.10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C-|-6 alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloalquila de 3 a 10 ele- mentos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, em que Ria e Rn3 são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg;

R-I é hidrogênio, Ο-μρ alquila, C-|.g alquila C3-10 cicloalquila, C3.10 cicloalquila, C-|-6 alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heteroci- cloalquila de 3 a 10 elementos de compreendendo pelo menos um heteroá- tomo selecionado de N, S e O, Ce-ΐο arila> C-|-6 alcIuila C6-10 ari,a> ^5-10

heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-|-6 alquila C5-10 heteroarila compreendendo pelo menos um hete- roátomo selecionado de N1 S e O, em que R-) é opcionalmente substituído com um ou mais Rg;

ou se X é NR-|a, CHR-Ja, C(0)NR-|a ou CR-|aR-|b. Ri pode for- mar um anel carbocíclico ou heterocíclico com R-ja e o átomo de N ou C ao

qual eles são ligados, que pode conter um ou mais heteroátomos adicionais selecionados de N, S e O, que podem ser substituídos com um ou mais Rg;

R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, C-|_6 alquila, C-|-6 alquila C3-10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, Ce-io arila- c1-6 aIQuiIa C6-10 arila» C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-|_6 alquila C5-10 heteroarila, compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, C-i.g alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos,

compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, hete- rocicloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroá- tomo selecionado de N, S e O, ou junto com os átomos de C aos quais eles estão ligados para formar uma C3.7 cicloalquila ou um grupo heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos, em que R2 e R3 são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg, R2 pode também ser Rg e R3 pode também ser R-jo;

R4 é hidrogênio, C1.4 alquila, uréia, tioureia ou acetila opcio- nalmente substituído com um ou mais Rg;

ou R4 pode formar um anel heterocíclico de 5 ou 6 elementos

com R-j ;

R5, Rg1 R7 e Rg são os mesmos ou diferentes e são indepen- dentemente selecionados de H ou Rg;

Rg é independentemente halogênio; CN; COOR11; ORf 1; C(O) N(R11R11a); S(O)2N(R11R11a); S(O)N(R11R11a); S(O)2R11; N(R11)S (O)2N(R11aR11b); SR11; N(R11R11a); OC(O)R11; N(R11)C(O)R11a; N(R11)S(O)2R11a; N(R11)S(O)R11a; N(R11)C(O)N(R11aR11b); N(R11)C (O)OR1Ia; OC(O)N(R11Riia); oxo (=0), em que o anel é pelo menos par- cialmente saturado; C(O)Ri1; C-)-6 alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; ou hete- rociclila, em que C1 .ρ alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; e heterociclila são opcionalmente substituídos com um ou mais R1O;

R1O é independentemente halogênio; CN; ORi1; S(O)2N (R11R11a): S(O)N(R11R11a); S(O)2R11; N(R11)S(O)2N(R11aR11b): SR11; N(R11R11a); OC(O)R11; N(R11)C(O)R11a; N(R11)S(O)2R11a; N(R11)S(O) R11a; N(R11)C(O)N(R11aR11b); N(R11)C(O)OR11a; OC(O)N(R11R11a); oxo (=0), em que o anel é pelo menos parcialmente saturado; C(O)Ri 1; C1.q alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; ou heterociclila, em que C1.β alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; e heterociclila são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg;

Rl-j, R1-Ja, R1Ib são independentemente selecionados do gru- po que consiste em hidrogênio, C1.ρ alquila, C1.q alquila C3-10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C^alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N1 S e O, heteroci- cloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, Cg-io arüa. heteroarila de 5 a 10 elementos com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O1 em que Rl1.Rl1a. R11b são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg;

R-|2 é hidrogênio, halogênio, OH, NH2, C(0)NH2 ou Ο-μρ alquila; R-|3 é hidrogênio, Ο-μρ alquila, C-) alquioxicarbonila, Ce-10 ari- loxicarbonila, Ορ-ΐο aralcoxicarbonila, carbamoíla ou acila:

ou um metabólito, pró-fármaco ou sal dos mesmos farmaceuti- camente aceitável.

Os compostos como definido na reivindicação 3 são particular- mente preferidos.

Modalidades adicionalmente preferidas são: Compostos, em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR1a, CR1aRib, CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O, C(O)NR1a, NH ou NR1a, em que R1a e R1b são Ci-6 alquila, C1^ alquila C3-10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C1^ alquila, heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, em que Ria e R1b são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg;

Ri é hidrogênio, C1^ alquila, C1^ alquila C3.10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C1^ alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, C6-io arila, C1^ alquila C6-io arila, C5-10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C1^ alquila C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo sele- cionado de N, S e O, em que R1 é opcionalmente substituído com um ou mais R9;

ou, se X é NRia, CHR1a, C(O)NR1a ou CR1aR1b, R1 podem formar um anel carbocíclico ou heterocíclico com R1a e o átomo de N ou C ao qual eles são ligados, que pode conter um ou mais heteroátomos adicionais selecionados de N, S e O, que pode ser substituído com um ou mais Rg;

R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemen- te selecionados de hidrogênio, metila, fenila, etila, propila, perfluorometila, ou formam junto com os átomos de C aos quais eles são ligados um anel car- bocíclico de 5 elementos;

R4 é hidrogênio ou C1.4 alquila;

R5, Re, R7 and R8 são os mesmos ou diferentes e são indepen- dentemente selecionados de hidrogênio, CONH2, CO2H, CO2CH3, Cl e F,

ou um metabólito, pró-fármaco ou sal dos mesmos farmaceuti- camente aceitável.

- Compostos, em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHRia, CR1aR1b, CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O1 C(O)NR1a, NH or NR1a, em que R1a e R1b são C1^ alquila;

R1 é hidrogênio, metila, etila, propila, butila, difluorometila, bromo- etila, 1,1,2,2-tetrafluoroetila, 1,1,1-trifluoropropila, perfluorometila, ciclopro- pilametila, ciclopentila, cicloexila, adamantila, norbonanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, fenila ou pirrolidin-3-ila substituído no nitrogênio com Rg;

ou se X é NR1a, R1 forma um grupo morfolino, um grupo pirrolidi- no ou um grupo piperidino junto com R1a e o átomo de N ao qual eles estão ligados, que pode ser substituído com -CH3 ou -C(O)OC4H9;

R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são hidrogênio, metila, fenila, etila, propila, perfluorometila independentemente selecionados, ou formam junto com os átomos de C aos quais eles são ligados um anel car- bocíclico de 5 elementos;

R4 é hidrogênio ou C1^ alquila;

R5, R6, R7 e R8 são os mesmos ou diferentes e são independen- temente selecionados de hidrogênio, CONH2, CO2H, CO2CH3, Cl e F;

ou um metabólito, pró-fármaco ou sal dos mesmos farmaceuti- camente aceitável.

- Compostos, em que R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são selecionados de metila, hidrogênio e perfluorometila.

- Compostos, em que X é uma ligação única, O, S1 SO2, CH2, CHR1a, CRiaRib, CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O, C(O)NRia, NH ou NRia, em que R1a e Rib são C1^ alquila;

Ri é hidrogênio, Ci-6 alquila, Ci-6 alquila C3-10 cicloalquila, C3.10 cicloalquila, heíerociclila de 5 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C6-io arila, Ci-6 alquila C6-io arila, C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N1 S e O, Ci-6 alquila C5 -io heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, em que Ri é opcionalmente substituí- do com um ou mais Rg;

ou se X é NRia, Ri pode formar um anel heterocíclico junto com Ria e o átomo de N ao qual eles são ligados, que pode conter um heteroá- tomo adicional selecionado de N, S e O, que podem ser substituídos com um ou mais R9;

R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, C1.4 alquila que podem ser opcionalmente subs- tituídos com um ou mais átomos de halogênio, um grupo acetila, uma uréia, uma hidroxila, um grupo fenila e um grupo amino, ou formam junto com os átomos de C aos quais eles são ligados um grupo C3-6 cicloalquila;

R4 é hidrogênio ou C1-4 alquila;

R5, Rei R7 e R8 são os mesmos ou diferentes e são independen- temente selecionados de hidrogênio, CO2H, CO2Ric, CONH2, CONHRid e halogênio, dessa maneira Ric e Rm são ci-6 alquila;

ou um metabólito, pró-fármaco ou sal dos mesmos farmaceuti- camente aceitável.

- Compostos, em que R4 é hidrogênio.

- Compostos, em que X é O ou uma ligação única.

- Compostos, em que o grupo cicloalquila é adamantila ou nor- bonanila, cicloexila ou ciclopentila.

- Compostos, em que o átomo de halogênio é selecionado de Cl,

Bre F. - Compostos, em que R5, Fta R7 e Re são hidrogênio.

- Compostos, em que pelo menos um de R5, R6, R7 e Rs é F, CONH2 ou CO2CH3.

- Compostos, em que Ri é hidrogênio, metila, etila, propila, buti- Ia, difluorometila, bromoetila, 1,1,2,2-tertrafluoroetila, 1,1,1-trifluoropropila, perfluorometila, ciclopropilametila, ciclopentila, cicloexila, adamantila, norbo- nanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, fenila ou pirrolidin-3-ila substituídos em nitrogênio com R9, em que Rg é como definido na reivindicação 1.

- Compostos, em que R4, R7 e Rg são hidrogênio.

- Compostos, em que Rg é C(O)NH2.

- Compostos, em que R4, R7 e R8 são hidrogênio e Rg é C(O) NH2.

-Compostos, em que R6 é C(O)NH2, Ri é selecionado de C3-7 cicloalquila, C1-6 alquila e um grupo heterocicloalquila de 3 a 10 ele- mentos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N,S e O e R-|2 é hidrogênio.

-Compostos, em que R6 é C(O)NH2, Ri é selecionado de C3-7 cicloalquila, C1-6 alquila e um grupo heterocicloalquila de 3 a 10 ele- mentos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N,S e Oe R4, R7, R8 e R12 são hidrogênio .

Compostos preferidos são selecionados de:

<formula>formula see original document page 18</formula> <formula>formula see original document page 19</formula> <formula>formula see original document page 20</formula>

Métodos típicos de preparar os compostos da invenção são des- critos abaixo na seção experimental.

O efeito inibidor potente dos compostos da invenção podem ser determinados por ensaios de enzima in vitro como descrito nos Exemplos com mais detalhes.

Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção de fórmula (1) podem ser formados com numerosos ácidos e bases orgâni- as e inorgânicas. Sais de adição de ácido exemplares includindo acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato, borato, butirato, citrato, canforato, canfersulfonato, ciclopentanopropionato, diglu- conato, dodecil sulfato, etano sulfonato, fumarato, glucoeptanoato, glicerofosfa- to, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, cloridrato, bromidrato, hidroiodeto, 2-hidroxietano sulfonato, lactato, maleato, metano sulfonato, 2-naftaleno sul- fonato, nicotinato, nitrato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenil sul- fonato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato, suc- cinato, sulfato, sulfonato, tartrato, tiocianato, tolueno sulfonato, tais como tosilato, undecanoato, ou os similares.

Porções contendo nitrogênio básico podem ser quaternizadas com tais agentes como haletos de alquila inferior, tais como cloreto, brometo e iodeto de metila, etila, propila, e butila; sulfatos de dialquila como sulfatos de dimetila, dietila, dibutila, e diamila, haletos de alquila de cadeia longa tais como cloreto, brometo e iodeto de decila, laurila, miristila e estearila, ou ha- letos de aralquila como brometos de benzila e fenetila ou outros. Produtos solúveis na água ou dispersíveis são desse modo obtidos.

Sais de adição básica farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, cátions baseados nos metais alcalinos e alcalinos terrosos tais como sais de sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio, alumínio e os similares, como também amônio não tóxico amônio quarternário, e cá- tions de amina, incluindo, mas não limitados a, amônio, tetrametilamônio, tetraetilamônio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilami- na e os similares. Outras aminas representativas úteis para a formação de sais de adição de base incluem benzazetina, dicicloexil amina, hidrabina, N- metil-D-glucamina, N-metil-D-glucamida, t-butil amina, dietilamina, etilendia- mina, etanolamina, dietanolamina, piperazina e os similares e sais com ami- noácidos tais como arginina, lisina, ou os similares.

Compostos da fórmula (1) podem estar presentes como tautô- meros. A presente invenção compreende todas as formas tautoméricas. A- lém disso, a presente invenção também compreende todos os estereoisôme- ros dos compostos de acordo com a invenção, incluindo seus enantiômeros e diastereômeros. Estereoisômeros individuais dos compostos de acordo com a invenção podem estar substancialmente presentes puros de outros isômeros, em admistura dos mesmos ou como racematos ou como estereoi- sômeros selecionados.

Como usado aqui a seguir o termo "metabólito" refere-se a (i) um produto de metabolismo, incluindo intermediários e produtos, (ii) qualquer substância envolvida em metabolismo (quer como um produto de metabo- lismo ou como necessário para metabolismo), ou (iii) qualquer substância produzida ou usada durante o metabolismo. Em particular ele refere-se ao produto final que permanece depois do metabolismo.

Como usado aqui a seguir o termo "pró-fármaco" refere-se a (i) uma forma inativa de um fármaco que exerce seus efeitos depois dos pro- cessos metabólicos dentro do corpo converte-a em uma forma usável ou ativa, ou (ii) uma substância que dá origem a um metabólito farmacologica- mene ativo, embora não seja ele mesmo ativo (isto é um precursor inativo).

Como usado aqui a seguir o termo "C 3_io cicloalquila" refere-se a um substituinte ou grupo alquila mono- ou policíclico carbocíclico que tem 3 a 10 átomos de anel, tais como ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexi- la, cicloeptila, ciclobutenila, ciclopentenila, ciclopentadienila, cicloexenila, cicloexadienila, cicloeptenila, cicloeptadienila, naftaleno ou iodeno de ciclo- eptatrienila peridrado, adamantila ou norbonanila e os similares.

O termo "C1-6 alquila" como usado aqui a seguir sozinho ou em combinação com outros termos tais como em alcóxi ou acila refere-se a um grupo alquila/alcóxi Ci_6, preferivelmente C1-4 linear ou ramificado tal como metila, etila, propila (iso-, n-), butila (iso-, n-, sec-, terc-), pentila, hexila, me· tóxi, etóxi, propóxi (iso-, n-), butóxi (iso-, n-, sec-, terc-), pentóxi, hexóxi; além do mais, o termo "C1-6 alquila" também inclui um grupo alquila que pode con- ter oxigênio na cadeia e pode ser substituído com halogênio para formar um éter ou grupo de éter halogênodo.

O termo "acila" como usado aqui a seguir refere-se a C-i-g, pre- ferivelmente um grupo carbonila C1-4 alquila.

O termo "halogênio" refere-se a um átomo de halogênio selecio- nado de flúor, cloro, bromo, iodo, preferivelmente flúor e cloro, mais preferi- velmente flúor.

O termo "arila" refere-se a um grupo mono- ou bicíclico aromáti- co que tem 6 a 10 átomos de carbono de cadeia principal, em que opcional- mente um dos anéis da estrutura bicíclica é aromático e o outro é um grupo carbocíclico, tal como fenila, 1-naftila, 2-naftila, indenila, indanila, azulenila, fluorenila, 1,2,3,4-tetraidronaftila.

O termo "heterociclila" refere-se a grupos heterociclila monocicli- cos saturados ou insaturados com 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, S e O, com o restante dos átomos de anel sendo átomos de carbono e tendo preferivelmente um número total de átomos de anel de 3 a 10, tais como morfolino, piperazinila, piperidinila, piridila, pirimidinila, tiazolila, indolila, imi- dazolila, oxadiazolila, tetrazolila, pirazinila, triazolila, tiofenila ou furanila.

O termo "heteroarila" refere-se a um grupo aromático mono- ou bicíclico com 1 a 4 heteroátomos selecionados de N, S e O, com o restante dos átomos de anel sendo átomos de carbono e tendo preferivelmente um número total de átomos de anel de 5 a 10. Exemplos sem limitação de gru- pos heteroarila são tais como benzofuranila, furila, tienila, benzotienila, tiazo- lila, imidazolila, oxazcüla, oxadiazolila, tiadiazolila, benzotiazolila, triazolila, tetrazolila, isoxazolila, isotiazolila, pirrolila, piranila, tetraidropiranila, pirazoli- la, piridila, quinolinila, isoquinolinila, purinila, carbazolila, benzoxazolila, ben- zamidazolila, indolila, isoindolila, pirazinila, diazinila, pirazina, triaziniltriazina, tetrazinila, tetrazolila, benzotiofenila, benzopiridila e benzimidazolila.

Em um aspecto adicional a presente invenção provê composi- ções farmacêuticas compreendendo um composto de pirrolopirimidina da presente invenção e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável.

A composição farmacêutica de acordo com a presente invenção pode ainda compreender um agente terapêutico adicional. Particularmente preferidas são as composiçãos, em que o agente terapêutico adicional é se- lecionado de antidiabéticos como insulina, análogos de insulina de atuação longa e curta, sulfoniluréias e outros antidiabéticos derivados de tiazolidindi- onas, agentes de diminuição de lipídeo tais como estatinas, fibratos, resinas de troca de íon, derivados de ácido nicotínico, ou inibidores de redutase de HMG-CoA, terapêuticos cardiovasculares tais como nitratos, anti-hipertensos tais como β-bloqueadores, inibidores de ACE, bloqueadores de canal de Ca, agonistas de receptor de angiotensina II, diuréticos, inibidores de agregação de trombócitos, ou agentes antineoplásticos tais como alcalóides, agentes alquilantes, antibióticos, ou antimetabólitos, ou agentes antiobesidade. Com- posições ainda preferidas são composições em que o agente terapêutico adicional é selecionado de um antagonista de histamina, um antagonista de bradiquinina, antagonista de serotonina, leucotrieno, um antiasmático, um NSAID, um antipirético, um corticosteroide, um antibiótico, um analgésico, um agente uricossúrico, agente quimioterápico, um agente antigota, um broncodilatador, um inibidor de ciclooxigenase-2, um esteroide, um inibidor de 5-lipoxigenase, um agente imunossupressor, um antagonista de leucotri- eno, um agente citostático, anticorpos ou fragmentos dos mesmos contra citocinas e partes (fragmentos) solúveis de receptores de citocina.

Mais particularmente preferidos são compostos tais como insuli- na de NPH humano, insulina de lente ou ultralente de ser humano, insulina Lispro, insulina Asptart, ou insulina Glargine, atenolol, bisoprolol, metoprolol, csmolol, celiprolol, talinolol, oxprenolol, pindolol, propanolol, bupropanolol, penbutolol, mepindolol, sotalol, certeolol, nadolol, carvedilol, nifedipina, ni- trendipina, amlodipina, nicardipina, nisoldipina, diltiazem, enalaprila, vera- pamila, galopamila, quinaprila, captoprila, lisinoprila, benazeprila, ramiprila, peridoprila, fosinoprila, trandolaprila, irbesatan, losartan, valsartan, telmisar- tan, eprosartan, olmesartan, hidroclorotiazida, piretanida, clorotalidona, me- frusida, furosemida, bendroflumetiazida, triamtereno, deidralazina, ácido ace- tilsalicílico, tirofiban-HCI, dipiramidol, triclopidina, iloprost-trometanol, eptifi- batida, clopidogrel, piratecam, abciximab, trapidil, simvastatina, bezafibrato, fenofibrato, gemfibrozil, etofilina, clofibrato, etofibrato, fluvastatina, Iovastati- na, pravastatina, colestiramida, colestipol-HCI, nicotinato de xantinol, nicoti- nato de inositol, acipimox, nebivolol, glicerolnitrato, mononitrato de isosorbi- da, dinitrato de isosorbida, tetranitrato de pentaeritritila, indapamida, cilaze- prila, urapidil, eprosartan, nilvadipina, metoprolol, doxazosina, molsidormina, moxaverina, acebutolol, prazosina, trapidil, clonidina, vinca alcalóides e aná- logos tais como vinblastina, vincristina, vindesina, vinorelbina, derivdos de podofilotoxina, etoposide, teniposide, agentes alquilante, uréias nitrosas, a- nálogos perdidos de N-, cicloplonfamida, estamustina, melfalana, ifosfamida, mitoxantron, idarrubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomi- cina, daptomicina, antimetabólitos tais como citarabina, fluorouracila, fluoroa- rabina, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, combinações tais como adri- amicina/daunorrubicina, tioguanina, capecitabina, combinações tais como adriamicina/daunorubicina, citosina arabinoside/citarabina, 4-HC, ou outras fosfamidas.

Outros compostos particularmente preferidos são compostos tais como clemastina, difenidramina, dimenidrinato, prometazina, cetirizina, as- temizol, levocabastina, loratidina, terfenadina, ácido acetilsalicílico, salicilato de sódio, salsalato, diflunisal, ácido salicílsalicílico, mesalazina, sulfasalazi- na, osalazina, acetaminofeno, indometacina, sulindac, etodolac, tolmetina, cetorolac, betametasona, budesonida, ácido cromoglicínico, dimeticona, si- meticona, domperidona, metoclopramida, acemetacina, oxaceprol, ibuprofe- no, naproxeno, cetoprofeno, flubriprofeno, fenoprofeno, oxaprozina, ácido mefenâmico, ácido meclcfenâmico, feilbutazcna, oxifenbutazona, azapropa- zona, nimesulida, metamizol, leflunamida, eforicoxib, lonazolac, misoprostol, paracetamol, aceclofenac, valdecoxib, parecoxib, celecoxib, propifenazona, codeina, oxapozina, dapsona, prednisona, prednisolona, triamcinolona, dexi- buprofeno, dexametasona, flunisolido, albuterol, salmeterol, terbutalina, teofi- lina, cafeína, naproxeno, sulfato de glucosamina, etanercepto, cetoprofeno, adalimumab, ácido hialurônico, indometacina, dimaleato de proglumetacina, hidroxicloroquina, cloroquina, infliximab, etofenamato, auranofina, ouro, clo- reto de [224Ra]radio, ácido tíaprofênico, dexquetoprofen(trometamol), clo- prednol, aurotioglicose de aurotiomalato de sódio, colquicina, alopurinol, probenecida, sulfinpirazona, benzbromarona, carbamazepina, Iornoxicam, fluorcortolon, diclofenac, efalizumab, idarrubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomicina, citarabina, fluorouracil, fluoroarabi- na, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, adriamidina/daunorrubicina, cito- sina arabinosida/citarabina, 4-HC, ou outras fosfamidas, penicilamina, uma preparação de ácido hialúronico, arteparon, glucosamina, MTX, fragmentos solúveis do receptor de TNF (tais como etanercepto (EnbreI)) e anticorpos contra TNF (tais como infliximab (Remicade), natalizumab (Tysabri) e adali- mumab (Humira)).

Será evidente para a pessoa de conhecimento comum na técni- ca que os compostos da invenção e o agente terapêutico adicional podem ser formulados em uma forma de dosagem única, ou podem estar presentes em formas de dosagem separadas, e podem ser administrados concomitan- temente (isto é ao mesmo tempo) ou seqüencialmente.

As composições farmacêuticas da presente invenção podem estar em qualquer forma apropriada para o método de administração preten- dido.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados oralmente, parenteralmente, tais como broncopulmonarmente, subcutanea- mente, intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, intrate- calmente, transdermicamente, transmucosalmente, subduralmente, local- mente ou topicamente através de iontoforese, sublingualmente, por atomiza- dor de inalação, aerossol ou retalmente, e os similares em formulações de unidade de dosagem opcionalmente compreendendo excipientes convencio- nais farmaceuticamente aceitáveis.

Os excipientes que podem ser usados na formulação de compo- sições farmacêuticas da presente invenção compreendem carreadores, veí- culos, diluentes, solventes tais como alcoóis monoídricos tais como etanol, isopropanol e alcoóis poliídricos tais como glicóis e óleos comestíveis tais como óleo de soja, óleo de coco, óleo de oliva, óleo de girassol, óleo de se- mente de algodão, ésteres oleosos tais como oleato de etila, miristato de isopropila; aglutinantes, adjuvantes, solubilizantes, agentes de espessamen- to, estabilizadores, desintergrantes, glidantes, agente lubrificantes, agentes de tamponagem, emulsificantes, agentes umectantes, agentes de suspen- são, agentes adoçantes, corantes, flavorizantes, agentes de revestimento, conservantes, antioxidantes, agentes de processamento, modificadores de distribuição de fármacos e intensificadores, tais como fosfato de cálcio, for- mulado de magnésio, talco, monossacarídeos, dissacarídeos, amido, gelati- na, celulose, metilcelulose, celulose de carboximetil de sódio, dextrose, hi- droxipropil-B-ciclodextrina, polivinilpirrolidona, ceras de fusão baixa, resinas de troca de íon.

Outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis são descritos em Remington1S Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1991).

Formas de dosagem para administração oral incluem comprimi- dos, cápsulas, pastilhas, pílulas, "wafers", grânulos, líquidos orais tais como xaropes, suspensões, soluções, emulsões, pó para reconstituição.

Formas de dosagem para administração parenteral incluem so- luções aquosas ou olaginosas ou emulsões para infusão, soluções aquosas ou olaginosas, suspensões ou emulsões para injeção, seringas pré- enchi- das e/ou pós para reconstituição.

Formas de dosagem para administração local/tópica compreen- dem insuflações, aerossóis, aerossóis medidos, sistema terapêutico trans- dérmico, emplastros medicados, supositórios retais, e/ou óvulo.

A quantidade do composto da presente invenção que pode ser combinada com os excipientes para formular uma forma de dosagem única vai variar mediante o hospedeiro tratado e o modo de administração em par- ticular.

As composições farmacêuticas da invenção podem ser produzi- das de uma maneira conhecida por si para a pessoa versada como descrito, por exemplo, em Remington1S Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Pu- blishing Co., New Jersey (1991).

Em um aspecto adicional da invenção o uso de um composto de pirrolopirimidina da presente invenção para a produção de uma composição farmacêutica para inibir a atividade da cinase de Mnkl ou Mnk2 (Mnk2a, Mnk2b) ou variantes adicionais das mesmas é provida, em particular para a profilaxia ou terapia de doenças metabólicas, distúrbios, hematopoiéticos, câncer e suas sucessivas complicações e distúrbios. Desse modo a profila- xia e terapia de doenças metabólicas do metabolismo de carboidrato e/ou lipídeo é preferida.

Doenças da invenção que são influenciadas pela inibição da ati- vidade de cinase de Mnkl e/ou Mnk2 (Mnk2a ou Mnk2b) e/ou variantes adi- cionais das mesmas incluem doenças relacionadas à regulagem de doenças metabólicas, tais como obesidade, distúrbios alimentícios, caquexia, diabe- tes mellitus, síndrome metabólico, hipertensão, doenças cardíacas das coro- nárias, hipercolesterolemia, dislipídemia, osteoartrite, pedras biliares e/ou apnéia do sono e doenças relacionadas aos compostos de oxigênio reativo (defesa de ROS) tais como diabetes mellitus, doenças neurodegenerativas e câncer.

As composições farmacêuticas da invenção são particularmente úteis para profilaxia e tratamento de obesidade, diabetes mellitus e outras doenças metabólicas do metabolismo de carboidrato e lipídeo, como deter- minado acima, em particular para diabetes mellitus e obesidade.

Dessa maneira, em uma modalidade mais preferida desta inven- ção, o uso de um composto de pirrolopirimidina para a produção de uma composição farmacêutica para a profilaxia ou terapia de doenças metabóli- cas é provida.

Como discutido acima, os compostos a as composiçãos da pre- sente invenção são úteis para o tratamento e/ou profilaxia de distúrbios he- matopoéticose suas sucessivas complicações e distúrbios, tais como leuce- mia mieloide aguda (AML), Morbus Hodgkin, Iinfoma de não-Hodgkin; doen- ça hematopoética, leucemia não linfótica aguda (ANLL), doença mieloprolife- rativa, leucemia promielocítica aguda (APL), leucemia mielomonocítica agu- da (AMMoL), policitemia vera, linfoma, leucemia linfocítica aguda (ALL), leu- cemia linfocítica crônica (CCL), tumor de Wilm, ou Sarcoma de Ewing. De acordo com a invenção, os compostos e composições da presente invenção são úteis em terapia de célula tronco hematopoética.

Em uma modalidade adicional da presente invenção os compos- tos e as composiçãos da presente invenção são úteis para tratamento e/ou profilaxia de câncer e sucessivas complicações e distúrbios tais como câncer do trato gastrointestinal superior, carcinoma pancreático, câncer de mama, câncer do cólon, carcinoma ovariano, carcinoma da cervix, carcinoma corpo- ral, tumor do cérebro, câncer testicular, carcinoma laringeal, osteocarcinoma, câncer da próstata, retinoblastoma, carcinoma do fígado, câncer do pulmão, neuroblastoma, carcinoma real, carcinoma da tireoide, câncer esofageal, sarcoma do tecidomole, caquexia, ou dor.

Em ainda um aspecto adicional da invenção o uso de um com- posto de pirrolopirimidina da invenção para a produção de uma composição farmacêutica para tratar ou prevenir um distúrbio mediado por citocina tal como uma doença inflamatória.

As composições farmacêuticas da invenção são dessa maneira úteis para profilaxia ou terapia de doenças inflamatórias, em particular infla- mação aguda ou crônica, artrite inflamatória crônica, artrite reumatóide, artri- te psoríatica, osteoartrite, artrite reumatóide juvenil, artrite gotosa; psoríase, psoríase eritrodérmica, psoríase pustular, doença intestinal inflamatória, do- ença de Crohn e condições relacionadas, colite ulcerativa, colite, diverticuli- te, nefrite, uretrite, salpingite, ooforite, endomiometrite, espondilite, Iupus eritematoso sistêmico e distúrbios relacionados, esclerose múltipla, asma, meningite, mielite, encefalomielite, encefalite, flebite, trombcflebite, doença obstrutiva crônica (COPD), doença pulmonar inflamatória, rinite alérgica, en- docardite, osteomielite, febre reumática, pericardite reumática, endocardite reumática, miocardite reumática, doença reumática da válvula mitral, doença reumática da válcula aórtica, prostatite, prostatocistite, espondoartropatias, espondilite anquilosante, sinovite, tenosinovote, miosite, faringite, polimialgia reumática, tendonite ou bursite do ombro, gota, pseudo gota, vasculitides, doenças inflamatórias da tireoide selecionadas de tireoidite granulomatosa, tireoidite linfocítica, tireoidite fibrosa invasiva, tireoidite aguda; tireoidite de Hashimoto, doença de Kawasaki, fenômeno de Raynaud, síndrome de Sjo- gren, doença neuroinflamatória, sépsis, conjuntivite, queratite, iridociclite, neurite óptica, otite, linfoadenite, nasofaringite, sinusite, faringite, tonsilite, laringite, epiglotite, bronquite, pneumonite, estomatite, gingivite, esofagite, gastrite, peritonite, hepatite, colelitiase, colecistite, glomerulonefrite, síndro- me de goodpasture, glomerulonefrite crescente, pancreatite, dermatite, en- domiometrite, miometrite, metrite, cervicite, endocervicite, exocervicite, pa- rametrite, tuberculose, vaginite, vulvite, silicose, sarcoidose, pneumoconiose, poliartropatiss inflamatórias, artropatias psoriátricas, fibrose intestinal, bron- quiectasia e artropatias enteropáticas.

Como já fixado acima, as composições da presente invenção são particularmente úteis para tratar ou prevenir uma doença selecionada de inflamação aguda ou crônica, artrite inflamatória crônica, artrite reumatóide, psoríase, COPD, doença intestinal inflamatória, choque séptico, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla e asma.

Dessa maneira, em uma modalidade mais preferida desta inven- ção, o uso de um composto de pirazolopirimidina para a produção de uma composição farmacêutica para a profilaxia ou terapia de doenças inflamató- rias selecionadas de inflamação aguda ou crônica, artrite inflamatória crôni- ca, artrite reumatóide, psoríase, COPD, doença intestinal inflamatória, cho- que séptico, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla e asma é provida.

Para a finalidade da presente invenção, uma dosagem terapeuti- camente eficaz vai geralmente ser de cerca de 1 a 500 mg/dia, preferivel- mente de cerca de 10 a cerca de 200 mg/dia, e mais preferivelmente de cer- ca de 10 a cerca de 100 mg/dia, que pode ser administrada em uma ou di- versas doses.

Será evidente, entretanto, que o nível de dose específico dos compostos da invenção para qualquer paciente em particular, dependerá de uma variedade de fatores tais como idade, sexo, peso corporal, condições gerais de saúde, dieta, resposta individual do paciente a ser tratado, hora da administração, gravidade da doença a ser tratada, a atividade do composto particular aplicado, forma de dosagem, modo de aplicação e medicação concomitante. A quantidade terapeuticamente eficaz para uma dada situa- ção será prontamente determinada pela experimentação de rotina e está dentro dos conhecimentos e julgamento do clínico ou médico comum. Exemplos

Exemplo 1: exemplos de preparação dos compostos da invenção

Métodos sintéticos gerais para os compostos da invenção, seus derivados e precursores A seguir, um método sintético geral é descrito.

ViaAE

<formula>formula see original document page 31</formula>

Ref: J. Med. Chem. 1996, 12, 2287 Formação de Pirrol

.3-Hidróxi-2-butanona (1,0 eq) e benzilamina (1,0 eq) foram dis- solvidos em tolueno (50 vol) e c.HCI (5 vol). A mistura foi aquecida a 105ÕC, sob condições Dean-Stark, por 3 horas. A reação foi depois deixada para ficar à temperatura ambiente por 16 horas. Malonitrila foi depois adicionada e a reação aquecida para refluxo por 16 horas. A reação foi deixada resfriar a temperatura ambiente e o solvente removido in vácuo. O resíduo resultan- te foi purificado por cromatografia de coluna para dar o produto desejado. Formação de Pirrolopirimidona

O pirazol (1,0 eq) foi dissolvido em ácido fórmico (10 vol) e a re- ação aquecida a 11 OeC por 16 horas. A reação foi deixada para resfriar a temperatura ambiente, diluída com água e extraída três vezes com acetato de etila. Os orgânicos foram combinados, secados em sulfato de magnésio e o solvente removido in vácuo. O resíduo resultante foi dissolvido em 1M KOH quente, depois neutralisado com ácido acético enquanto quente. O sol- vente foi depois removido in vácuo e o sólido resultante levado adiante para a próxima etapa sem purificação. C Io ração

Pirazolopirimidona (1,0 eq) foi dissolvida em oxicloreto de fósforo (18 vol), /V./V-dimetilanilina (3 vol) adicionado e a reação aquecida em refluxo por 5 horas. A reação foi deixada resfriar, o solvente removido in vácuo e o gelo partido despejado sobre o resíduo resultante. A solução aquosa foi extraída com 3 porções de dietil éter, os orgânicos combinados, secados sobre sulfato de magnésio e o solvente removido in vácuo para dar o produto desejado. Reação de SNAr

A amina (1,0 eq) e o derivado de 4-CI-pirimidina (1,0 eq) foram aquecidos a 60SC em IPA e um tubo lacrado por 4-18 horas. A reação foi depois deixada para resfriar a temperatura ambiente, e basificado para pH 9- .10 com 28% de solução de hidróxido de amônio. O precipitado resultante foi isolado por filtragem, lavado com água, secado sobre o concrecionador, la- vado com dietil éter, e secado in vácuo para dar o produto desejado. Notas Gerais:

• Se o grupo amina contém um ácido a reação não é basificada.

• As reaçãos são tipicamente realizadas em uma escala de 50 mg. em 2-3 ml de IPA para dar >10 mg do produto

• Se a reação não render um precipitado, o solvente é removi- do e o sólido é triturado com água para dar o produto desejado. ViaAF

<formula>formula see original document page 32</formula>

.7-Benzil-4-cloro-5,6-dimetil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina foi prepa- rado quanto a via AE.

Desbenzilacão

A pirrolopirimidina benzilada (1,0 eq) foi suspensa em tolueno (15 vol) em um tubo de pressão, cloreto de alumínio (7 eq) foi adicionado e a reação aquecida a 1202C por 4 horas. A reação foi deixada para resfriar e o solvente removido in vácuo. O resíduo resultante foi depois purificado por cromatografia de coluna.

Reação de SNAr

Quanto a via de AE

Exemplo 2. Ensaios de Polarização da Fluorescência de Cinase

Princípio do Ensaio: potência inibidora de compostos contra Mnkl, Mnk2a e outras cinases foram avaliadas com ensaios baseados em um formato conhecido daqueles versados na técnica como a polarização de fluorescência indireta (competitiva). O sistema de detecção de ensaio com- preende um pequeno fosfo-peptídeo fluoroforo rotulado (denominado ligan- do) ligado a um anticorpo fosfo-específico. O produto gerado pela reação de cinase compete com o ligando para a ligação do anticorpo. Com base no volume molecular maior do ligando ligado, que resulta em uma taxa de rota- ção mais baixa na solução, sua luz emitida tem um grau de polarização mais alto do que uma de ligando livre. Descrição do ensaio de cinase homogênea específica Exemplo 2a. Ensaio de cinase Mnkl e Mnk2a in vitro

Como uma fonte de enzima, Mnkl de ser humano e Mnk2a de ser humano foram expressas como proteínas de fusão de GST em E. coli, purificadas até >80% de homogeneidade por cromatografia de afinidade de glutationa e ativadas in vitro com ERK2 pré-ativado ERK2. Em resumo, as estruturas de leitura abertas de Mnkl e Mnk2a de ser humano foram amplia- das a partir de cDNA usando pares de prímeros dianteiros/reversos SEQ ID NO: 1 5'TTTAGGATCCGTATCTTCTCAAAAGTTGG / SEQ ID NO: 2 5' CTGGGTCGACTCAGAGTGCTGTGGGCGG e SEQ ID NO: 3 5'ACAGGGATCCGTGCAGAAGAAACCAGCC / SEQ ID NO: 4 5'GATGGTCGACTCAGGCGTGGTCTCCCACC (utilizados sítios de restrição sublinhados), respectivamente, e clonados nos sítios de BamHI e Sall do vetor pGEX-4T1 (Amersham, Sweden, cat. no. 27-4580-01). Esses traçados permitem a expressão procariótica de Mnkl ou Mnk2a como proteína de fusão com um marcador de S-transferase de gluta- diona de terminal N (GST), referido como GST-MnkI ou GST-Mnk2a. A ex- pressão e o procedimento de purificação a seguir foram idênticos para GST- Mnkl e GST-Mnk2a, referindo em geral a GST-Mnk, quando não distinguin- do entre as duas isoformas. A expressão de GST-Mnk foi em E. coli BL21 (Merck Biosciences, Alemanha, cat. no. 69449). As células foram colocdas para crescer em LB-BouiIIon (Merck, Alemanha, cat. no. 1.10285) suplemen- tadas com 100 pg/ml de ampicilina (Sigma, Alemanha, cat. no. A9518) a37°C. Quando a cultura alcançou uma densidade correspondente a um A6OO de 0,8, um volume igual de LB/ampicilina de gelo resfriado foi adicionado, a cultura transferida para 25°C e induzida por 4 horas com 1 mM de isopropila tiogalactoside (IPTG, Roth, Alemanha, cat. no. 2316.4). As células colhidas por centrifugação forame re-suspensas em 10 ml de tampão de Iise (50 mM de cloreto de tris(hidroximetil)aminometano (Tris/HCI, Sigma, Alemanha, cat. no. T5941) pH 7,5, 300 mM de cloreto de sódio (NaCI, Sigma, Alemanha, cat. no. S7653), 5% (peso/volume) de glicerol (Sigma, Alemanha, cat. no. G5516), 3 mM DTT de ditiotreitol (DTT, Sigma, Alemanha, cat. no. D9779)) de pétele de célula de peso úmido por grama. Lisatos foram preparados por ruptura de células com um sonifier e subsequente depuração por centrifuga- ção em 38000 g por 45 minutos a 4°C.

O Iisato foi aplicado a coluna de GSTPrep FF 16/10 (Amersham, Suécia, cat. no. 17-5234-01) equilibrado com tampão de lise. A remoção do material não-ligado foi com tampão de Iise com volumes de coluna 3 (CV). A depuração foi com 2 CV de tampão de depuração (50 mM Tris/HCI pH 7,5,300 mM NaCI, 5% (peso/volume) de glicerol, 20 mM de glutationa (Sigma, Alemanha, cat. no. G4251)). As frações de pico foram coaguladas e a prote- ína transferida no do tampão de armazengam (50 mM Tris/HCI pH 7,5, 200 mM NaCI, 0.1 mM de ácido de etileno glicol-bis(2-aminoetiléter)-N,N,N',N'- tetracético (EGTA, Aldrich, Alemanha, cat. no. 23,453-2), 1 mM DTT, 10% de (peso/volume) de glicerol, 0,5 M de sacarose (Sigma, Alemanha, cat. no. S0389) por filtragem de gel em uma coluna dessalinada de PD10 (Amer- sham, Suécia, cat. no. 17-0851-01). Aa alíquotas foram congeladas por cho- que em nitrogênio líquido e armazenadas a -80°C. A ativação de Mnkl e Mnk2a foi a uma concentração de 2,5 μΜ de GST-MnkI ou GST-Mnk2a purificada por incubação com 150 nM de NHis-ERK2 pré-ativado (veja ensaio de ERK2 para a preparação) e 50 μΜ de trifosfato de adenosina (ATP, Sigma, cat. no. A2699) em um tampão compreendendo 20 mM N-(2-hidroxietila) de ácido de piperazina-N'-(2- etanossulfônico) (HEPES, Fluka, Alemanha, cat. no 54459)/hidróxido de po- tássio (KOH, Roth, Alemanha, cat. no 6751.1) pH 7,4, 10 mM de cloreto de magnésio (MgCI2, Sigma, Alemanha, cat. no. M2670), 0,25 mM de DTT, .0,05% (peso/volume) de polioxietileno 20 esteariléter (Brij 78, Sigma, Ale- manha, cat. no. P4019) (tampão de HMDB) por 45 minutos a 30°C. Depois da incubação, a preparação foi aliquotada em amostras de uso único, conge- lamento por choque em nitrogênio líquido, armazenado a -80°C e utilizado para ensaios de cinase Mnkl ou Mnk2a como detalhado abaixo. A presença de cinase ativadora foi testada para não interferir com o ensaio da atividade de Mnk.

SUBSTRATO: um peptídeo de 12mer amidado no terminal car- bóxi com a seqüência

SEQ ID NO: 5 TATKSGSTTKNR, derivada da seqüência de aminoácidos ao redor da serina 209 do fator de iniciação da tradução eucariótica 4E (elF4E) foi sintetizado e purificado por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) para >95% (Thermo, Ale- manha). O resíduo de serina fosforilada por cinases de Mnk está sublinhado.

LIGANDO: o peptídeo TATKSG-pS-TTKNR, contendo um termi- nal de carbóxi amidado e conjugado no terminal de amino com oxazina deri- vada de fluorofor ilustrado abaixo foi sintetizado e usado como ligando.

<formula>formula see original document page 35</formula>

ANTICORPO: coelhos Brancos SPF da Nova Zelandia foram imunizados de acordo com os protocolos padrão com o peptídeo NH2- CTATKSG-pS-TTKNR-CONH2, acoplado a um conjugado hemocianina (K- LH). A fração da globulina imune G (IgG) foi purificada de soro de animais, reforçada pelas técnicas conhecidas na técnica. Em resumo, o soro foi sub- metido a cromatografia por afinidade A de proteína. O material depurado foi precipitado a 50% de sulfato de amônio saturado resfriado, as pételes dis- solvidas e dessalinadas. O material resultante foi apropriado para uso no ensaio descrito abaixo sem purificação específica de antígeno adicional.

PREPARAÇÃO DO ENSAIO: a inibição da atividade de cinase de Mnkl e Mnk2a foi avaliada com o mesmo sistema de ensaio, usando GST-MnkI ou GST-Mnk2a pré-ativada, respectivamente. A reação da cinase contém 30 μΜ de substrato de peptídeo, 20 μΜ ATP, 60 nM ligando e um de25 nM de Mnkl pré-ativado ou 2,5 nM pré-ativado Mnk2a. As condições do tampão de reação são 16 mM HEPES/KOH pH 7,4, 8 mM MgCI2, 0,4 mM DTT, 0,08 % (peso/volume) albumina de soro bovino (BSA, Sigma, Alema- nha, cat. no. A3059), 0,008% (peso/volume) Pluronic F127 (Sigma, Alema- nha, cat. no. P2443), 3% (v/v) DMSO (Applichem, Alemanha, cat. no. A3006). A reação de cinase é a 30°C durante 40 minutos. A reação de cina- se é terminada pela adição de volumes de reação de 0,67 de anticorpo de 1 μΜ em 20 mM HEPES/KOH pH 7,4, 50 mM de ácido etilaenodiaminatetracé- tico, sal dissódio (EDTA, Sigma, Alemanha, cat. no. E5134), 0,5 mM DTT,0,05% (peso/volume) monolauréiato de polioxietileno-sorbitan (Tween 20, Sigma, Alemanha, cat. no. P7949). Depois de 1 hora do tempo para equili- brar a temperatura ambiente, as amostras são submetidas a medição da polarização da fluorescência. A leitura da polarização da fluorescência foi gerada sobre uma leitura de multímodo Analyst AD (Dispositivos Molecula- res, Sunnyvale, CA, USA) equipado com um espelho dicróico DLRP650 (O- mega Opticals, Brattleboro, VT, USA, cat. no. XF2035), um filtro de banda de passagem 630AF50 (Omega Opticals, Brattleboro, VT, USA, cat. no. XF1069) na excitação e um filtro de banda de passagem 695AF55 no lado de emissão (Omega Opticals, Brattleboro, VT, USA, cat. no. XF3076). Exemplo 2b. Ensaio de cinase ERK2 in vitro

CINASE: como uma fonte de enzima, a ERK2 de ser humano foi expressa como proteína de fusão de hexa-histidina de terminal N em E. coli, purificada até >80% de homogeneidade por cromatografia de afinidade de íon imobilizada (IMAC) e ativada in vitro com um mutante constitutivamente ativo de MEK1. Resumindo, a estrutura de leitura de ERK2 de ser humano foi ampliada a partir de cDNA usando o par de prímeros avançado/reverso SEQ ID NO:6 5'AGCCGTÇGAÇGCGGCGGCGGCGGCGGCGGGC / SEQ ID N0:7 5TGACAAGÇTTAAGATCTGTATCCTGGCTGG (sítios de restrição utilizados estão sublinhados) e clonada nos sítios de Sall and Hindlll sites do vector pQE81L (Qiagen, Alemanha, cat. no. 32923). Es- sa estrutura permite a expressão procariótica de ERK2 como proteína de fusão com um marcador de hexa-histidina de terminal N, referido como NHis-ERK2. A expressão de NHis-ERK2 foi em E. coli BL21. As células cresceram em LB-BouiIIon suplementado com 100 pg/ml de ampicilina a .37°C. Quando a cultura tinha alcançado uma densidade correspondente a um A6OO de 0,8, um volume igual de resfriamento por gelo LB/ampicilina foi adicionado, a cultura transferida para 25°C e induzida por 4 horas com 1 mM IPTG. As células colhidas por centrifugação foram ressuspensas em um tampão de Iise de 10 ml (50 mM Tris/HCI pH 7,5, 300 mM NaCI, 5% (pe- so/volume) de glicerol, 10 mM de etanol β-mercapto (Sigma, Alemanha, cat. no. M3148) per gram de pétele de célula de peso úmido. Os Iisatos foram preparados por ruptura de células com um sonifier e subsequente depuração por centrifugação a 38000 g por 45 minutos a 4°C.

O Iisato foi aplicado para uma coluna contendo 25 ml de matriz de Ni-NTA Superflow (Qiagen, Alemanha, cat. no. 1018611) equilibrado com tampão de lise. A remoção do material não ligado foi com volumes de coluna .3 (CV) tampão de lavar (50 mM Tris/HCI pH 7,5, 300 mM NaCI1 5% (pe- so/volume) de glicerol, 10 mM de etanol β-mercapto, 20 mM de imidazol (Sigma, Alemanha, cat. no. I2399)/HCI pH 7.5). A depuração foi dentro de 2 CV de tampão de depuração (50 mM Tris/HCI pH 7,5, 300 mM NaCI, 5% (peso/volume) de glicerol, 300 mM de imidazol). As frações de pico foram coaguladas e a proteína transferida para dentro do tampão de armazena- mento (50 mM Tris/HCI pH 7,5, 200 mM NaCI, 0.1 mM EGTA, 1 mM DTT, .10% (peso/volume) de glicerol, 0,5 M de sacarose) através de filtragem por gel em uma coluna dessalinizada PD10. As alíquotas foram congeladas por choque em nitrogênio líquido e armazenadas a -80°C.

A estrutura de leitura aberta de MEK1 de ser humano foi amplia- da a partir de cDNA usando o par de prímeros avançado/reverso SEQ ID NO:8 5'GTCCGGATCCCCCAAGAAGAAGCCGACGCCC SEQ ID Ν0:9 5' TCCCGTCGACTTAGACGCCAGCAGCATGGG (sítios de restrição utilizados sublinhados) e clonados nos sítios de BamHI and Sall do vetor pQE80L (Qiagen, Alemanha, cat. no. 32923). Pelas técni- cas conhecidas na técnica, os códons de serina 212 e 214 foram mutageni- zados para codificar aspartato e glutamato. A elaboração da expressão re- sultante é referida como NHis-MEKI SSDE. Essa construção permite que a expressão procariótia de MEK1 como um mutante ativo constitutivamente. NHis-MEKI SSDE foi expresso e purificado sob as condições descritas para NHis-ERK2.

A ativação de NHis-ERK2 foi a uma concentração de 11,3 μΜ de enzima purificada por incubação com 1 μΜ de NHis-MEKI SSDE e 100 μΜ de ATP em um tampão compreendendo 20 mM de HEPES/KOH pH 7,4, 10 mM MgCI2, 0,25 mM DTT, 0,05% (peso/volume) de Brij 78 (tampão de HMDB) durante 20 minutos a 30°C. Depois da incubação, a preparação foi aliquotada em amostras de uso único, congeladas por choque em nitrogênio líquido, armazenada a -80°C e utilizada para ensaio de cinase de ERK2 co- mo detalhado abaixo, e para a ativação de Mnkl e Mnk2a como descrito acima. A presença de MEK1 SSDE foi testada para não interferir com o en- saio da atividade de ERK2.

SUBSTRATO: um peptídeo de17mer admitado do terinal carbóxi com a seqüência

SEQ ID N0:10 FFKNIVTPRTPPPSQGK

(síntese por Thermo, Alemanha), derivado da seqüência de aminoácidos ao redor de treonina 98 de proteína bássic de mielina (MBP) foi sintetizada e purificda por HPLC para >95%. O resíduo relevante fosforilado por ERK2 está sublinhado.

LIGANDO: o peptídeo KNIVTPR-pT-PPPS, contendo um termi- nal carbóxi amidado e conjugado no terminal de amino com fluorofore 5- carboxitetrametilrodamina (5-TAMRA) foi comprado de Thermo (Alemanha) e usado como ligando.

ANTICORPO: o anticorpo anti-fosfo-MBP (clone P12) foi com- prado de Upstate1 Waltham, MA, EUA (cat. no. 05-429). ESTRUTURA DO ENSAIO: a reação de cinase contém 60 μΜ de substrato de peptídeo, 10 μΜ ATP e 30 nM de NHis-ERK2 pré-ativada. As condições do tampão da reação são 16 mM HEPES/KOH pH 7,4, 8 mM MgCI2, 0,4 mM DTT, 0,08 % (peso/volume) de BSA, 0,008% (peso/volume) de F127 Plurônico, 3% (volume/volume) de DMSO.

A reação de cinase é a 30°C por 40 minutos. A reação de cinase é terminada pela adição de 0,67 volumes de reação de 5 nM de ligando e 50 nM de anticorpo em 20 mM de HEPES/KOH pH 7,4, 50 mM de EDTA, 0,5 mM de DTT, 0,05% (peso/volume) de Tween 20. Depois de um tempo de equilíbrio de 30 minutos a temperatura ambiente, as amostras são submeti- das à medição da polarização de fluorescência. A leitura da polarização de fluorescência foi gerada em uma leitora de multimodos Analyst AD (Molecu- lar Devices, Sunnyvale, CA, USA) equipada com um espelho dicrônico de561 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA, cat. no.42-000-0048), um filtro de banda de passagem de 550/10 nm (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EUA, cat. no. 42-000-0130) em excitação e um filtro de banda de pas- sagem de 580/10 nm (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EUA , cat. no. 42-000-0034) no lado de emissão.

Foi mostrado que o composto preferido em particular da inven- ção exibe valores de IC50 abaixo de 10 micromolares em ensaios de varre-

durabiológica in vitro para inibição de Mnk 1 e/ou Mnk 2 de atividade de ci- nase.

Sem estar sendo exaustivo, os princípios e métodos a seguir podem ser empregados para identificar e selecionar compostos terapêuticos para uso em tratar doenças e condições inflmatórias como considerado pela presente invenção como definido acima e nas reivindicações.

Como um princípio geral, um sistema que não foi exposto a um estímulo inflamatório é exposto a tal estímulo e ao composto terapêutico candidato. Tal sistema pode compreender células culturadas, ou componen- tes de células, ou órgãos ou tecidos isolados de animais. Alternativamente, os animais podem ser expostos a um estímulo inflamatório e o composto.

Especificamente, um grupo de controle recebe uma quantidade conhecida de estímulo inflamatório. Grupos de tratamento são expostos à mesma quantidadede estímulo inflamatório como também alíquotas do com- posto terapêutico candidato. As respostas inflamatórias em cada grupo são detectadas pelos meios convencionais conhecidos daqueles versados na técnica, e comparadas.

Em particular, os ensaios a seguir podem ser usados: Ensaio utilizando células mononucleares de sangue periférico (por exemplo Newton. J Leukoc Biol 39:299-311. 1986)

As células mononucleares de sangue periférico de ser humano são preparadas a partir do sangue periférico usando uma separação por densidade com "ficoll-hypaque" (modelo de gradiente para separar tumor de Waker) (Hansell et al., J Imm Métodos 145:105, 1991). As células são culturadas em meio apropriado e em densidade apropriada. Tal densidade pode ser de 105 a 106 células por cavidade de uma placa de 96-cavidades. Um meio de cultura apropriado poderá compreender 1640 RPMI suplemen- tadas com 10% de soro de bezerro fetal. As células são incubadas com dilu- ições em série dos compostos de teste durante um determinado tempo. Es- sa incubação é seguida por um estímulo inflamatório aplicados às células. Esse estímulo pode compreender LPS ou outro agente, ou uma combinação de agentes. Depois de ainda outra incubação, a sobrenadante é retirada do composto tratado e controla células e analiza as moléculas úteis para moni- torar a resposta inflamatória. Essa análise pode compreender a detecção e quantificação de citocinas (por exemplo, interleucinas, interferonas, fatores de necrose de tumor, quimiocinas), ou leucotrinas, ou prostaglandinas, ou seus derivados. A detecção pode ser com, por exemplo, ensaios imunossor- ventes de enzima-ligada comercialmente disponível (ELISAs). Ensaio para a Inibicão da Produção de Citocina em Camundonqos ou Ratos Estimulados por Lipopolissacarídeos

Injeção de lipopolissacarídeo (LPS) em camundongos e ratos induz uma liberação rápida de citocinas solúveis na periferia (por exemplo Wichterman et al., J Surg Res 29:189-201, 1980, Beutler 1992. Fatores de necrose de tumor: as moléculas e seu papel emergente na medicina. Raven Press, New York, N.Y.).

Antes da injeção de LPS, os compostos da invenção são dados ou oralmente ou por via subcutânea, ou via intravenosa. Os compostos po- dem ser agudos ou subagudos. Depois de um determinado tempo ou em diversos pontos do tempo a injeção de LPS, o sangue é retirado de animais e é analisado para níveis de citocina. Efeitos em composto tratado e animais tratados por simulação são comparados.

Ensaio para Inibicão de Artrite Adiuvante (Pearson, Proc Soc Exp Biol Med91:95-101, 1956)

Artrite adjuvante é uma doença inflamatória aguda induzida em certas cepas de ratos pela administração de microbactéria mortas pelo calor, dispersas em adjuvante de Freund incompleto. A doença é manifestada por grave entumescimento das juntas, principalmente dos joelhos e pés.

Grupos de tratamento e grupos de controle de ratos por exemplo ratos de Lewis, são imunizados com microbactéria de tuberculose de morta por aquecimento emulsificada em adjuvante de Freund incompleto. Depois disso, os grupos de controle recebem tratamento simulado, enquanto os grupos de tratamento recebem compostos da invenção. A administração porde ser oralmente, ou por via subcutânea ou por via intravenosa. O trata- mento pode ser agudo ou subagudo. Durante a fase do tratamento a pro- gressão da artrite é determinada por classificação dos membros inchados.

Os modelos animais a seguir podem ser utilizados como descrito acima pelo princípio de teste geral para identificar e selecionar compostos para as doenças e condições inflamatórias indicadas. Modelos Animais de Artrite inflamatória e reumatóide

Modelos animais que refletem a progressão da doença de artrite inflamatória e reumatóide têm sido revistos por Brand (Comp Med 55(2): 114-122, 2005). Especificamente modelos de artrite induzida por antígenos (Du- monde and Glynn, Br J Exp Pathol 43:373-383, 1962), artrite de adjuvantes (Pearson, Proc Soc Exp Biol Med 91:95-101, 1956), artrite de anticorpo (Te- rato et al., J Immunol 148:2103-2108, 1992) ou artrite induzida por colágeno (Trentham et al., J Exp Med 146:857-868,1977; Courtenay et al., Nature .283:666-668, 1980) podem ser empregados para selecionar compostos es- pecíficos da invenção.

Modelos Animais de Doenças Intestinais Inflamatórias e Distúrbios Relacio- nados

Modelos animais de doenças intestinais inflamatórias tais como doença de Crohn e colite ulcerativa têm sido revistos por Wirtz and Neurath (lnt J Colorectal Dis 15(3):144-60, 2000). Estados que refletem a patogênese de inflamação intestinal crônica podem ser induzidos pela administração de formaldeído em combinação com complexos imunes (Hodgson et al., Gut19:225-232, 1978; Mee etal., Gut 20:1-5, 1979), ácido acético (MacPherson and Pfeiffer, Digestion 17:135-150,1978), indometacina (Banerjee and Pe- ters, Gut 31:1358-1364, 1990;

Yamada et al., Inflamação 17:641-662, 1993), dextran sulfato de sódio (Okayasu et al., Gastroenterology 98:694-702, 1990), ou haptenos como ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS)/ ácido dinitrobenzeno sulfônico (DNBS) (Morris et al., Gastroenterology 96:795-803, 1989;

Elson et al., J Immunol 157:2174-2185, 1996; Neurath et al., J Exp Med 182:1281-1290, 1995; Yamada et al., Gastroenterology 102:1524-1534, 1992; Dohi et al., J Exp Med 189: 1169-1180, 1999) ou oxazolona (Ekstrom, Scand J Gastroenterol 33:174-179, 1998; Boirivant et al., J Exp Med 188:1929-1939,1998). Modelos Animais de Choque Séptico

Modelos animais de choque séptico expõem o espécime ao Iipo- polissacarídeo (LPS), à bctérias gram-negativas ou gram-positivas, ou com- binações das mesmas (Wichtermanet al., J Surg Res 29:189-201, 1980; Fink and Heard, J Surg Res 49(2):186-96, 1990). O modelo roedor de liga- ção e punção cecal (CLP) assemelha-se à situação da perfuração de intesti- no e infecção bacteriana misturada de origem intestinal (Baker et al., Surgery94:331-335, 1983). Modelos Animais de Psoríase

Para investir a adequação de compostos para o tratamento de psoríase, o modelo de xenotransplante de pele psoríatica de ser humano (Nickoloff, Arch Dermatol 135:1104-1110, 1999; Nickoloff1 J Invest Dermatol Symp Proc 5:67-73, 2000) pode ser utilizado. Modelos Animais de Asma Alérgica

Em um modelo roedor comumente empregado de animais de asma alérgica são sensitizadas para um antígeno (por exemplo, ovalbumina) e são subseqüentemente desafiados com o mesmo antígeno por inalação de um aerossol (por exemplo Fujitani et al., Am J Respir Crit Care Med 155:1890- .1894, 1997; Kanehiroet al.,. Am J RespirCrit Care Med 163:173-184, 2001; Henderson et al., Am J Respir Crit Care Med 165:108-116, 2002; Oh et al., J lmmunol 168: 1992-2000, 2002).

Claims (44)

1. Composto da fórmula geral (1) <formula>formula see original document page 44</formula> em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR-|a, CR-|aR-|b, CH (ha- logênio), C(halogênio)2, C=O1 C(O)NRia, NH ou NR1a- em cIue R1a e R1b são C-|.ρ alquila, C-j.q alquil C3-10 cicloalquila, C3.10 cicloalquila, C-|_6 al- quila, heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloalquila 3 a 10 elemen- tos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, em que R-|a e R-jb são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg; R-I é hidrogênio, C-|_6 alquila, C-|.6 alquil C3.10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C-|_6 alquil heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, Cg-io arila, C-^g alquil Ορ-ΐο ari'a> ^5-10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-|-6 alquil C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo sele- cionado de N, S e O, em que R-| é opcionalmente substituído com um ou mais Rg; ou se X é NRia, CHR-|a, C(O)NRia ou CR-|aRit>. R1 pode formar um anel carbocíclico ou heterocíclico com R-|a e o átomo de N ou C ao qual eles são ligados, que podem conter um ou mais heteroátomos adicionais selecionados de N, S e O, que podem ser substituídos com um ou mais Rg; r2 e R3 sao os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, C-|-6 alquila, C-j-g alquil C3-10 cicloalquila, C3.10 cicloalquila, Οβ-ΐο ari'a> C-I aIquiI Cg-io arila, C5-10 heteroarila compre- endendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-|_6 alquil C5-10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-i.g alquil heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N1 S e O, heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, ou junto com os átomos de C que eles são ligados para formar uma C3-7 cicloalquila ou um grupo heterocicloalquila de 3 a 10 elementos, em que R2 e R3 sãos opcionalmente substituídos com um ou mais Rg, R2 pode também ser Rgi e R3 pode também ser R1Q; R4 é hidrogênio, C1-4 alquila, uréia, tioureia ou acetila opcio- nalmente substituídos com um ou mais Rg; ou R4 pode formar um anel heterocíclico de 5 ou 6 elementos com R-|; R5, Rg, R7 e Rs são os mesmos ou diferentes e são indepen- dentemente selecionados de H ou Rg; Rg é independentemente halogênio; CN; COOR11; OR11; C(O) NiR11R11 a); S(O)2NiR1 ^11a); S(O)NiR1 ^11a); S(O)2R11; ISKR1Λ JS(O)2 N(R11aRl1b): SR11; N(R11R11a); OC(O)R11; N(R11)C(O)R11a; N(R11)S (O)2R11a; N(R11)S(O)R11a; N(R11)C(O)N(R11aR11b); N(R11)C(O)OR11a; 0C(0)N(R-| 1 R-J1a); oxo (=0), em que o anel é pelo menos parcialmente sa- turado; C(O)R11; C1-6 alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; ou heterociclila, em que C1.β alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; e heterociclila são opcionalmente substituídos com um ou mais R10; R1O é independentemente halogênio; CN; OR11; S(O)2N (R11R11 a): S(O)NiR1 ^11a); S(O)2R11; N(RnJS(O)2NfR1 la^Hb); SR11; N(R11R11a); OC(O)R11; N(R11)C(O)R11a; N(R11)S(O)2R11a; N(R11)S (O)R11a; N(R11)C(O)N(R11aR11b); N(R11)C(O)OR11a; OC(O)NiR11 R11a); oxo (=0), em que o anel é pelo menos parcialmente saturado; C(O)Ri1; C1.e alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; ou heterociclila, no qual C-|_6 alquila; fenila; C3.7 cicloalquila; e heterociclila are opcionalmente substituído com um ou mais Rg; R11l R11a, R1-Ib são independentemente selecionados consis- tindo em grupo de hidrogênio, C-|.g alquila, C-|.g alquil C3.10 cicloalquila, C3-10 cicloalquila, C-j.g alquil heterocicloalquila de 3 a 10 elementos com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heteroci- cloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C6-10 arila> heteroarila de 5 a 10 elementos com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, em que Rl 1 > Rua. Rllb sao opcionalmente substituídos com um ou mais Rg; R-12 é hidrogênio, halogênio, OH, NH2, C(0)NH2 ou C-|.g alquila; R-I3 é hidrogênio, C-|_g alquila, C-|.g alquioxicarbonila, Cg-10 ariloxicarbonila, Cg.·) o aralcoxicarbonila, carbamoíla ou acila: ou um metabólito, pró-fármaco ou sal do mesmo farmaceutica- mente aceitável.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é hidrogênio, C1-4 alquila, uréia, tioureia ou acetila opcio- nalmente substituído com um ou mais Rg, ou um metabólito, pró-fármaco ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, com a exceção dos compostos da fórmula geral (1), em que, - R2 e R3 são CH3, Ri2 e Ri3 são H, R4 é H, cada de R5 a R8 é H, X é uma ligação única e R1 é H; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H, R5, R7 e R8 são H, R6 é CH3, X é uma ligação única e R1 é H; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H, R6 and R8 são H, R5 e R7 são CH3; X é a ligação única e R1 é H; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H, R8 é CH3, X é uma ligação única, R1 é CH3, e R5, R6 e R7 são H; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H, e R5, R6, R7 são H; e ou R8 é C2H5 e X é uma ligação única e R-| é H, ou Rs é H e X é uma liga- ção única e R1 é C2H5; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H; R6 é C2H5 e R5, R7, R8 e R1 são H e X é a ligação única; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H; R6 é n-C4H9 e R5, R7, R8 e Ri são H e X é uma ligação única; - R2 e R3 são CH3l Ri2 e Ri3 são H, R4 é H; R8 é Cl e R5, R6, R? e Ri são H e X é uma ligação única; - R2 e R3 são CH3, R12 e Ri3 são H, R4 é H; R6 é Cl e R5, R7, Re e Ri são H e X é uma ligação única; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H1 R4 é H; R5 é Cl, R8 e R1 são H e X é uma ligação única, e uma de R5 e R7 é Cl e o outro é H; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H1 R4 é H; R8 é F, R5, R6, R7 e R1 são H e X é uma ligação única; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H; R6 é F, R5, R7, R8 e R-I são H e X é uma ligação única; - R2 e R3 são CH3, R12 e R13 são H, R4 é H; um de R5 e R7 é CH3 e o outro é H, R6 e R8 são H, R1 é H e X é uma ligação única; - R2 e R3 junto com os átomos de C aos quais eles são ligados formam uma Cg-cicloalquila; R12 e R13 são H, R4 é H; cada um de R5 e Rq é H; R-| é H e X é uma ligação única; - R2 e R3 junto com os átomos de C aos eles são ligados formam uma C6-cicloalquila, R12 e R13 são H, R4 é H; um de R5 a Rs e R1 é -CH3, os restantes são H, e X é uma ligação única; ou um metabólito, pró-fármaco ou um sal do mesmos farmaceu- ticamente aceitável.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR1a, CRiaRib, CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O, C(O)NR1a, NH ou NR1a, em que R1a e Rib são C1-6 alquila, Ci-6 alquil C3-10 cicloalquila, C3--Io cicloalquila, C-|.6 alquil heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um hete- roátomo selecionado de N, S e O, heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, em que R1a e R^ são opcionalmente substituídos com um ou mais Rg; R1 é hidrogênio, C1^ alquila, C1^ alquil C3.10 cicloalquila, C3.10 cicloalquila, C1^ alquila heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, heterocicloal- quila de 3 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo se- lecionado de N, S e O, C6-Io arila, Ci-6 alquil C6-io arila, C5-10 heteroarila com- preendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C-i-6 al- quila C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecio- nado de N, S e O, em que Ri é opcionalmente substituído com um ou mais R9; ou se X é NR1a, CHR1a, C(O)NR1a ou CR1aRib, Ri pode formar um anel carbocíclico ou heterocíclico com R1a e o átomo de N ou C ao qual eles são ligados, que pode conter um ou mais heteroátomos adicionais sele- cionados de N, S e O, que pode ser substituído com um ou mais R9; R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, metila, fenila, etila, propila, perfluorometila ou formam, junto com os átomos de C aos quais eles são ligados, um anel car- bocíclico de 5 elementos; R4 é hidrogênio ou C1.4 alquila; Rs. Re, R7 e R8 são os mesmos ou diferente e são independen- temente selecionados de hidrogênio, CONH2, CO2H, CO2CH3, Cl e F; Rg é como definido na reivindicação 1; ou um metabólito, pró-fármaco ou sal do mesmo farmaceutica- mente aceitável.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 4, em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR1a, CR1aRib, CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O, C(O)NR1a, NH or NRia, em que R1a e R1b são C1-6 alquila; Ri é hidrogênio, metila, etila, propila, butila, difluorometila, bro- moetila, 1,1,2,2-tetrafluoroetila, 1,1,1 -trifluoropropila, perfluorometila, ciclo- propilametila, ciclopentila, cicloexila, adamantila, norbonanila, tetraidrofurani- la, tetraidropiranila, fenila ou pirrolidin-3-ila substituída no nitrogênio com R9; ou se X é NR1a, R1 forma um grupo morfolino, um grupo pirrolidi- no ou um grupo piperidino junto com R1a e o átomo de N ao qual eles são ligados, que podem ser substituídos com -CH3 or -C(O)OCiiH9; R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, metila, fenila, etila, propila, perfluorometila, ou formam junto com o s átomos de C aos quais eles são ligados um anel car- bocíclico de 5 elementos; R4 é hidrogênio ou C1.4 alquila; R5, R6, R7 e Re são os mesmos ou diferentes e são independen- temente selecionados de hidrogênio, CONH2, CO2H, CO2CH3, Cl e F; Rg é como definido na reivindicação 1; ou um metabólito, pró-fármaco ou sal do mesmo farmaceutica- mente aceitável.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em que R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são selecionados de metila, hidrogênio e perfluorometila.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que X é uma ligação única, O, S, SO2, CH2, CHR1a, CRiaRib. CH(halogênio), C(halogênio)2, C=O, C(O)NR1a, NH ou NR1a, em que R1a e R1b são C1^ alquila; R1 é hidrogênio, C1^ alquila, C1^ alquil C3--Io cicloalquila, C3.-io cicloalquila, heterociclila de 5 a 10 elementos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C6-io arila, C1^ alquil Ce-ιο arila, C5-10 heteroarila compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado de N, S e O, C1^ alquil C5.10 heteroarila compreendendo pelo menos um he- teroátomo selecionado de N, S e O, em que R-i é opcionalmente substituído com um ou mais R9; ou se X é NR iai Ri podem formar um anel heterocíclico junto com R1a e o átomo de N ao qual eles são ligados, que pode conter um hete- roátomo adicional selecionado de N, S e O, que pode ser substituído com um ou mais Rg; R2 e R3 são os mesmos ou diferentes e são independentemente selecionados de hidrogênio, C1^ alquila que pode ser opcionalmente substi- tuída com um ou mais átomos de halogênio, um grupo acetila, uma uréia, uma hidroxila, um grupo fenila e um grupo amino, ou formar junto os átomos de C aos quais eles são ligados um grupo C3.6 cicloalquila; R4 é hidrogênio ou Ci-4 alquila; Rs, Re> R7 e Re são os mesmos ou diferentes e são independen- temente selecionados de hidrogênio, CO2H, CO2Ric. CONH2, CONHRid e halogênio, pelo que Ric e R1d são Ci-6 alquila; Rg é como definido na reivindicação 1; ou um metabólito, pró-fármaco ou sal do mesmo farmaceutica- mente aceitável.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, em que R4 é hidrogênio.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, em que X é O ou uma ligação única.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, em que o grupo cicloalquila é adamantila ou norbonanila, cicloexila ou ciclopentila.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que o átomo de halogênio é selecionado de Cl, Br e F.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que R5, Rô, R7 e R8 são hidrogênio.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que pelo menos um de R5, R6, R7 e R8 é F, CONH2 ou CO2CH3.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 13, em que Ri é hidrogênio, metila, etila, propila, butila, difluorometila, bro- moetila, 1,1,2,2-tetrafluoroetila, 1,1,1 -trifluoropropila, perfluorometila, ciclo- propilametila, ciclopentila, cicloexila, adamantila, norbonanila, tetraidrofurani- Ia, tetraidropiranila, fenila ou pirrolidin-3-ila substituída no nitrogênio com Rg, em que Rg é como definido na reivindicação 1.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R4, R7 e Rs são hidrogênio.

16. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou 15, em que Rg é C(0)NH2·

17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, 15 ou 16, em que Rg é C(0)NH2, Ri é selecionado de C3.7 cicloalquila, C-| alquila e um grupo heterocicloalquila de 3 a 10 elementos compreen- dendo pelo menos um heteroátomo selecionado deN, SeOeR^é hidro- gênio.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, selecionado de: <formula>formula see original document page 51</formula> <formula>formula see original document page 52</formula>

19.Composto de acordo com a revindição 18 selecionado de: <formula>formula see original document page 52</formula> <formula>formula see original document page 53</formula>

20. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19 e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável.

21. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 20, compreendendo ainda um agente terapêutico adicional.

22. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 21, em que o agente terapêutico adicional é selecionado de um agente antidia- béico, um agente de diminuição de lipídeo, um agente cardiovascular, um agente anti-hipertensivo, um agente diurético, um inibidor de agregação trombócita, um agente antineoplástico ou um agente antiobesidade.

23. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 21 ou 22, em que o agente terapêutico adicional é selecionado de insulina NPH humana, insulina de lente ou ultralente humana, insulina Lispro, insulina As- patart, ou insulina Glargine, atenolol, bisoprolol, metoprolol, esmolol, celipro- lol, talinolol, oxprenolol, pindolol, propanolol, bupropanolol, penbutolol, me- pindolol, sotalol, certeolol, nadolol, carvedilol, nifedipina, nitrendipina, amlo- dipina, nicardipina, nisoldipina, diltiazem, enalapril, verapamil, galopamil, quinapril, captopril, lisinopril, benazepril, ramipril, peridopril, fosinopril, trando- lapril, irbesatan, losartan, valsartan, telmisartan, eprosartan, olmesartan, hi- droclorotiazida, piretanid, clorotalidona, mefrusida, furosemida, bendroflume- tiazida, triamtereno, deidralazina, ácido acetilsalicílico, tirofiban-HCI, dipira- midol, triclopidina, iloprost-trometanol, eptifibatida, clopidogrel, piratecam, abciximab, trapidil, simvastatina, bezafibrato, fenofibrato, gemfibrozil, etofili- na, clofibrato, etofibrato, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, colestiramida, colestipol-HCI, xantinol nicotinato, inositol nicotinato, acipimox, nebivolol, glicerolnitrato, isosorbida mononitrato, isosorbida dinitrato, tetranitrato de penteritritila, indapamida, cilazepril, urapidil, eprosartano, nilvadipina, meto- prolol, doxazosina, molsidormina, moxaverina, acebutolol, prazosina, trapidil, clonidina, vinblastina, vincristina, vindesina vinorelbina, derivados de podofi- lotoxina, etoposid, teniposid, agentes alquilantes, uréias nitrosas, análogos de N-lost, cicloplonfamida, estamustina, melfalano, ifosfamida, mitoxantron, idarrubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomi- cina, citarabina, fluorouracil, fluoroarabina, gemcitabina, tioguanina, capeci- tabina, adriamidina/daunorrubicina, citosina arabinosid/citarabina, 4-HC, ou outras fosfamidas.

24. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 20 a 23, para administração oral, parenteral (por exemplo, broncopulmonar), local, ou tópica.

25. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19 para inibir a ativi- dade da atividade de cinase de Mnkl ou Mnk2 (Mnk2a, Mnk2b) ou variantes das mesmas.

26. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19 para a profilaxia ou terapia de doenças metabólicas, distúrbios hematopoiéticos e câncer e suas sucessivas complicações e doenças ou para o uso em terapia de célula tronco hematopoiética.

27. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 25 ou 26 para a profilaxia ou terapia de doenças metabólicas de metabolismo de carboidrato e/ou lipídeo e suas consecutivas complicações e distúrbios.

28. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 27 para a profilaxia ou terapia de doenças do metabolismo de carboidrato e su- as sucessivas complicações e distúrbios, selecionada de tolerância à glicose comprometida, diabetes mellitus tipo II, LADA, diabetes mellitus tipo I, obesi- dade, síndrome metabólico, distúrbios alimentícios, caquexia, osteoartrite, pedras biliares, complicações diabéticas tais como gangrena diabética, ar- tropatia diabética, osteopenia diabética, glomerosclerose diabética, nefropa- tia diabética, dermopatia diabética, neuropatia diabética, catarata diabética e retinopatia diabética, maculopatia diabética, síndrome diabético dos pés, coma diabética com ou sem cetoacidose, coma diabética hiperosmolar, co- ma diabética hipoglicêmica, coma diabética hiperglicêmica, acidose diabéti- ca, cetoacidose diabética, glomerulonefrose intracapilar, síndrome de Kim- melstiel-Wilson, amiotrofia diabética, neuropatia diabética autonômica, mo- noneuropatia diabética, polineuropatia diabética, neuropatia diabética auto- nômica, angiopatia diabética, angiopatia diabética periférica, úlcera diabéti- ca, artropatia diabética, ou obesidade em diabetes.

29. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 27 para o tratamento e/ou profilaxia de doenças metabólicas do metabolismo de lipídeo (isto é, distúrbios de lipídeo) e suas sucessivas complicações e dis- túrbios selecionados de hipercolesterolemia, hipercolesterolemia dislipidemia familiar, hiperlipoproteinemia de Fredrickson, hiperbetalipoproteinemia, hi- perlipidemia, hiperlipoproteinemia tipo lipoproteína de densidade baixa [LDL], hipergliceridemia pura, hipergliceridemia endógena, hipercolesterolemia iso- lada, hipertrogliceridemia isolada, doenças cardiovasculares selecionadas de hipertensão, isquemia, veias varicosadas, oclusão da veia retinal, doença cardíaca das coronárias, angina pectoris, infarto do miocárdio, estenocardia, hipertensão pulmonar, insuficiência cardíaca congestiva, glomerulopatia, distúrbios tubulointesticiais, insuficiência renal, angiostenose, distúrbios ce- rebrovasculares, ou apoplexia cerebral.

30. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 29 para a profilaxia ou terapia de diabetes mellitus tipo I ou diabetes mellitus tipo Il ou LADA e suas sucessivas complicações e distúrbios.

31. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 25 ou 26 para a profilaxia ou terapia de distúrbios hematopoiéticos.

32. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 28 ou 29 para a profilaxia ou terapia de diabetes mellitus tipo Il e suas sucessi- vas complicações e distúrbios.

33. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 25 ou 26 para a profilaxia ou terapia de obesidade.

34. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 33, em que a composição farmacêutica deve ser admi- nistrada para um paciente concomitantemente ou seqüencialmente em com- binação com um agente terapêutico adicional.

35. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 34, em que o agente terapêutico adicional é selecionado de um agente antidia- bético, um agente de diminuição de lipídeo, um agente cardiovascular, um agente anti-hipertensivo, um agente diurético, um inibidor de agregação trombocítica, um agente antineoplástico ou um agente antiobesidade.

36. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 34 ou 35, em que o agente terapêutico adicional é selecionado de insulina NPH humana, insulina de lente ou ultralente de ser humano, insulina Lispro, insu- lina Aspatart, ou insulina Glargine1 atenolol, bisoprolol, metoprolc!, esmolol, celiprolol, talinolol, oxprenolol, pindolol, propanolol, bupropanolol, penbutolol, mepindolol, sotalol, certeolol, nadolol, carvedilol, nifedipina, nitrendipina, a- mlodipina, nicardipina, nisoldipina, diltiazem, enalapril, verapamil, galopamil, quinapril, captopril, lisinopril, benazepril, ramipril, peridopril, fosinopril, trando- lapril, irbesatan, losartan, valsartan, telmisartan, eprosartan, olmesartan, hi- droclorotiazida, piretanid, clorotalidona, mefrusido, furosemido, bendroflume- tiazido, triamtereno, deidralazina, ácido acetilsalicílico, tirofiban-HCI, dipira- midol, triclopidina, iloprost-trometanol, eptifibatida, clopidogrel, piratecam, abciximab, trapidil, sinvastatina, bezafibrato, fenofibrate, gemfibrozil, etofili- na, clofibrato, etofibrato, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, colestiramida, colestipol-HCI, xantinol nicotinato, inositol nicotinato, acipimox, nebivolol, glicerolnitrato, isosorbida mononitrato, isosorbida dinitrato, tetranitrato de pentaeritritila, indapamida, cilazepril, urapidil, eprosartano, nilvadipina, meto- prolol, doxazosina, molsidormina, moxaverina, acebutolol, prazosina, trapidil, clonidina, vinblastina, vincristina, vindesina, vinorelbina, derivados de podofi- lotoxina, etoposid, teniposid, agentes alquilantes, uréias nitrosas, análogos N-lost, ciclofosfamida, estramustina, melfalan, ifosfamida, mitoxantron, idar- rubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomicina, citarabina, fluorouracil, fluoroarabina, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, adriamidina/daunorrubicina, citosina arabinosid/citarabina, 4-HC, ou outras fosfamidas.

37. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 36, em que a composição farmacêutica é adaptada para aplicação oral, parenteral (por exemplo, broncopulmonar), local ou tópica.

38. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19 para tratar ou prevenir distúrbios relacionados às citocinas.

39. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 38 em que a composição farmacêutica é para ser administrada para um pacien- te concomitantemente ou seqüencialmente em combinação com um agente terapêutico adicional.

40. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 39, em que agente terapêutico adicional é selecionado de um antagonista de histamina, um antagonista de bradiquinina, antagonista de serotonina, Ieuco- trieno, um antiasmático, um NSAID, um antipirético, um corticosteroide, um antibióico, um analgético, um agente uricossúrico, agente quimioterapêutico, um agente antigota, um broncodilator,um inibidor de ciclooxigenase-2, um esteroide, um inibidor 5-lipoxigenase, um agente imunossupressivo, um an- tagonista leucotriena, um agente citostático, anticorpos ou fragmentos dos mesmos contra citocinas e partes (fragmentos) solúveis de receptores de citocina.

41. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 39 ou 40, em que o gente terapêutico adicional é selecionado de clemastina, difenidramina, dimenidrinato, prometazina, cetirizina, astemizol, Ievocabasti- na, loratidina, terfenadina, ácido acetilsalicílico, salicilato de sódio, salsalato, diflunisal, ácido salicilsalicílico, mesalazina, sulfasalazina, osalazina, aceta- minofeno, indometacina, sulindac, etodolac, tolmetin, cetorolac, betametaso- na, budesonida, ácido cromoglicínico, dimeticona, simeticona, domperidona, metoclopramida, acemetacina, oxaceprol, ibuprofeno, naproxeno, cetoprofe- no, flubriprofeno, fenoprofeno, oxaprozina, ácido mefenâmico, ácido meclo- fenâmico, feilbutazona, oxifenbutazona, azapropazona, nimesulida, metami- zol, leflunamida, eforicoxib, lonazolac, misoprostol, paracetamol, aceclofe- nac, valdecoxib, parecoxib, celecoxib, propifenazona, codein, oxapozin, dap- son, prednisona, prednisolona, triamcinolona, dexibuprofen, dexametasona, flunisolida, albuterol, salmeterol, terbutalina, teofilina, cafeina, naproxen, sul- fato de glucosamina, etanercept, cetoprofeno, adalimumab, ácido hialurôni- co, indometacina, proglumetacina dimaleato, hidroxocloroquina, cloroquina, infliximab, etofenamato, auranofina, ouro, cloreto de [224Ra]rádio, ácido tia- profênico, dexcetoprofen(trometamol), cloprednol, aurotiomalato de sódio, aurotioglicose, colquicina, alopurinol, probenecid, sulfinpirazona, benzbroma- rona, carbamazepina, lornoxicam, fluorcortolon, diclofenac, efalizumab, idar- rubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomicina, citarabin, fluorouracil, fluoroarabina, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, adriamidina/daunorrubicina, citosina arabinosid/citarabina, 4-HC, ou outras fosfamidas, penicilamina, uma preparação de ácido hialurônico, arteparon, glucosamina, MTX, fragmentos solúveis do receptor de TNF e anticorpos contra TNF.

42. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 38 a 41, em que a doença relacionada à citocina é seleciona- da de inflamação aguda ou crônica, artrite, artrite inflamatória crônica, artrite reumatóide, artrite psoriática, osteoartrite, artrite reumatóide juvenil, artrite gotosa; psoríase, psoríase eritrodérmica, psoríase pustular, doença intestinal inflamatória, doença de Crohn e condições relacionadas, colite ulcerativa, colite, diverticulite, nefrite, uretrite, salpingite, ooforite, endomiometrite, es- pondilite, lúpus eritematoso sistêmico e distúrbios relacionados, esclerose múltipla, asma, meningite, mielite, encefalomielite, encefalite, flebite, trombo- flebite, doença obstrutiva crônica (COPD)1 doença pulmonar inflamatória, rinite alérgica, endocardite, osteomielite, febre reumática, pericardite reumá- tica, endocardite reumática, miocardite reumática, doença reumática da vál- vula, doença reumática da válvula aórtica, prostatite, prostatocistite, espon- doartropatias, espondilite anquilosante, sinovite, tenossinovite, miosite, farin- gite, polimialgia reumática, tendinite ou bursite do ombro, gota, pseudogota, vasculitides, doenças inflamatórias de tiroide selecionadas de tireoide granu- lomatosa, tireoide linfocítica, tiroide fibrosa invasiva, tireoidite aguda; tireoidi- te de Hashimoto, doença de Kawasaki, fenômeno de Raynaud, síndrome de Sjogren, doença neuroinflamatória, sépsis, conjuntivite, queratite, iridociclite, neurite óptica, otite, linfoadenite, nasofaringite, sinusite, faringite, tonsilite, laringíte, epiglotite, bronquite, pneumonite, estomatite, gingivite, esofagite, gastrite, peritonite, hepatite, colelitiase, colecistite, glomerulonefrite, síndro- me de goodpasture, glomerulonefrite crescentica, pancreatite, dermatite, en- domiometrite, miometrite, metrite, cervicite, endocervicite, exocervicite, pa- rametrite, tuberculose, vaginite, vulvite, silicose, sarcoidose, pneumoconiose, poIiartropatias inflamatórias, artropatias psoriátricas, fibrose intestinal, bron- quiectasia e artropatias enteropáticas.

43. Composição farmacêutica de acordo com reivindicação 42 para tratar ou prevenir inflamação aguda ou crônica, artrite inflamatcria crô- nica, artrite reumatóide, psoríase, COPD, doença intestinal inflamatória, choque séptico, doença de Crohn, colite ulcerativa, esclerose múltipla e as- ma.

44. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 43, em que a composição farmacêutica é adaptada para aplicação oral, parenteral (por exemplo broncopulmonar), local ou tópica.