BRPI0711792A2 - tri e tetra-oligossacarìdeos aceitável como agentes de aglitinação para patógenos entéricos - Google Patents

Abstract

TRI E TETRA-OLIGOSSACARìDEOS ACEITáVEL COMO AGENTES DE AGLUTINAçáO PARA PATóGENOS ENTéRICOS. A presente invenção diz respeito à utilização de uma composição compreendendo um homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado a partir do grupo que comprende pentose, hexose, isómeros L ou D, ou uma forma, combinações, derivados oxidados, ou quaisquer misturas destes, como um agente de aglutinação para aglutinar patógenos entéricos. A presente invenção também fornece um método de controle e regulação do ecossistema microbiano no trato gastrointestinal de um sujeito na necessidade deste.

Description

TRI E TETRA-OLIGOSSACARÍDEOS ACEITÁVEL COMO AGENTES DE AGLUTINAÇÃO PARA PATÓGENOS ENTÉRICOS

Campo da invenção

Esta invenção se refere ao uso de tri- e tetra- oligosacarídeos ou os seus extratos ou derivados ou misturas destes, como agente de aglutinação de patógenos. Em especial se refere ao uso dê tri-e tetra-oligosacarídeos ou seus extratos ou derivados ou misturas, para melhorar o ecossistema microbiano no trato gastrointestinal do animal pela quantidade específica de patógenos entéricos seguido pela excreção específica, a fim de melhorar o ganho de peso, reduzir a conversão alimentar e melhorar, desta maneira, o valor alimentar, saúde e o bem-estar do animal.

Antecedente da Invenção

Nos sistemas modernos de criação de animais, o equilíbrio entre a flora intestinal e o animal hospedeiro é delicado, e a perturbação do equilíbrio (por exemplo, por infecção bacteriana) tem um impacto negativo no desempenho geral dos animais (Eckel, 1999). 0 conhecimento sobre os problemas de infecção intestinal microbiana na pecuária abre as portas para novas formas de influenciar os processos biorreguladores através de aditivos em alimentos para animais, diminuindo a freqüência de diarréia e até perdas, através da estabilização da flora intestinal. No passado, este problema de infecção foi parcialmente resolvido mediante o fornecimento de rações contendo antibióticos como promotores do crescimento.

Mas hoje, 50 anos, desde a descoberta dos tradicionais agentes antimicrobianos (ex.: penicilina), uma grande quantidade de bactérias estão agora resistentes a um, e, em muitos casos, a vários antimicrobianos (Guillot, 1989). Esta resistência se tornou fatal para milhares de pessoas em todos estes anos e resultou em altos custos médico/hospitalar (Barton, 1998). O problema da resistência antimicrobiana é global, mas é parcialmente causado, no mundo inteiro, pela aplicação de agentes antimicrobianos na alimentação animal, tendo em vista que a adição destes em formulações de alimentos resultou melhor desempenho (diminuição da conversão alimentar e maiores taxas de crescimento) (Dupont e Steele, 1987; Prescott, 1997) e porque mais da metade de todos o uso de antimicrobianos foi associada à produção animal (Aarestrup, 1999). Em alguns países, como por exemplo União Européia, esta situação levou a uma proibição de todos os agentes antimicrobianos, usados como promotores do crescimento em formulações de ração (Muirhead, 1998; Ross, 1999).

O problema com a maioria dos antimicrobianos tradicionais e outros promotores do crescimento atualmente usado é que eles atacam as bactérias em nível intracelular (Guillot, 1989). Isto é, eles inibem a enzima chave na síntese do composto usado para criar a célula. Sempre que o presente método é utilizado, as bactérias podem desenvolver a mutação das enzimas envolvidas ou podem desenvolver mecanismos para expulsar rapidamente o antimicrobiano para fora da célula. Alternativamente, eles podem desenvolver enzias, que diretamente degrada o antimicrobiano. (por exemplo β-lactamase) Neu et. al. , 1980; Chirica et. Al., 1998) . Por transferência plasmidial (via conjugação microbiana), a resistência pode ser rapidamente transferida de uma célula microbiana para outra (expansão da resistência) (Finland, 1971; Hedges e Jacob, 1974; Thompson, 1986; Hamilton, 1994)

Desde que o mundo inteiro deu uma resposta negativa sobre o uso dos antimicrobianos tradicionais (como promotores de crescimento) na alimentação de animais, pesquisas vêm sendo realizadas para desenvolver novos tipos de agentes antimicrobianos (natural) ou promotores do crescimento (principalmente com outro modo de ação) (Mazza, 1998). Durante a investigação de soluções alternativas para antimicrobianos (naturais), a atenção está hoje focada sobretudo no uso de diversos ácidos (orgânicos) (Eckel, 1997; Liang, 1997; Radecki et al., 1988), os novos probióticos ativos (Chiquette e Banchaar, 1998; Garriga et al., 1998; Tannock, 1999), prebióticos (Olsen, 1996; Bower et al. , 1998, Brown et al. , 1998; Iji e Tivey, 1998; Houdijk et al., 1999), algumas plantas (cebolas e alhos) e extratos de ervas (óleos essênciais) (De Koning e Hongbiao, 1999; Nielsen, 1999).

Hoje em dia, diferentes tipos de oligossacarídeos já são utilizados em diversas aplicações. Em algumas destas aplicações, os oligossacarídeos são ligados

(covalentemente) a um suporte ou veículo.

O documento W02006/022542 reivindica o uso combinado de oligossacarídeos e sacarídeo como galactoses digestívelis para a fabricação de uma composição a ser usada em um método para tratamento e/ou prevenção de infecção do trato respiratório e/ou doenças por infecção do trato respiratório, o dito método compreende administrar a composição por via oral em um mamífero, a dita composição compreende uma galactose possuindo oligossacarídeos digestível contendo pelo menos duas unidade de sacarídeos na posição terminal, das quais pelo menos uma unidade do sacarídeo na posição terminal são selecionadas a partir do grupo composto de glicose e galactose, e pelo menos um terminal é sacárideo selecionados entre o grupo constituído de galactose e fucose; e b) pelo menos 5% em peso do sacarídeo digestível como galactose baseado no peso seco total da composição, o dito sacárideo é selecionados do grupo composto de galactose e galactose digestível contendo sacárideo que contém pelo menos duas unidade de sacárideo na posição terminal, das quais pelo menos pelo menos uma unidade de sacárideo na posição terminal é selecionada a partir do grupo composto de glicose e galactose, e pelo menos um terminal de sacárideo é selecionado do grupo que consiste de galactose e fucose. A posologia é de 0,1 a 12 gramas de transgalactooligossacarídeos com um grau de polimerização entre 2 e 10 por 100 gramas de peso seco da composição.

O documento W02004/074496 relata um processo para a produção de um novo oligosacarídeo, o processo compreende combinar um substrato com a enzima a-galactosidase produzida por Lactobacillus. A invenção também está relacionada com o próprio oligosacarídeo e com as composições que o compreendem. A invenção também diz respeito ao uso do oligosacarídeo, bem como das composições que o compreendem, para aumentar as bactérias benéficas no trato gastrointestinal de um animal. O dito oligosacarídeo é composto por glicose e galactose.

O documento JP2002226496 fornece um método para obtenção de um oligosacarídeo através da hidrolização de um polissacarídeo sem adicionar um ácido e obter um agente anti-infecioso que contenha oligosacarídeo. Solução: Um sulfatado polissacarídeo é exemplificado por fucoidan hidrolisada pela passagem do polissacarídeo sulfatado através de uma coluna de resina de troca de cátion do tipo H que contém um grupo carboxilo e um grupo sulfatado como grupos de trocas seguidos de aquecimento para render o oligosacarídeo. O oligosacarídeo obtido pelo método é essencialmente composto por fucose e exibe atividade anti- infeciosa como um agente transmissor da doença contra Escherichia coli, Vibrio, . .., por uma função de prevenção de fungos patogênicos inerentes ao trato intestinal.

O documento CN1370784 descreve o processo de preparação de chitinamine oligosacarídeo que inclui a dissolução da chitinamine com ácido acético, acrescentando reação enzimática, adição de ácido clorídrico e atomização final. Este processo é caracterizado pela enzima adicionada compreender hemicelulase, celulase e β-amilase e a pressão reduzida de evaporação durante a reação. 0 processo degrada chitinamine em chitinamine oligosacarídeos com 2-12 chitinamines e peso molecular médio 1500. A chitinamine oligosacarídeo pode ser utilizada na inibição de tumor, prevenindo e tratando hepatoses, melhorando a função do trato intestinal, prevenindo e tratando doenças senis.

O documento JP2002121138 relata a produção de uma composição para profilaxia de doenças infecciosas do trato intestinal capazes de realizar a profilaxia das doenças infecciosas causadas por bactérias causadoras de doenças infecciosas do trato intestinal. Solução: Esta composição para a profilaxia de doenças infecciosas do trato intestinal compreende um ou mais tipos selecionado do grupo que consiste de oligosacarídeos derivados da gema de ovo da galinha, o oligosacarídeo ligado às proteínas e oligosacarídeo ligado aos peptídeos. A composição é especialmente sialiloligossacarídeos, sialiloligosacárideo sialiloligossacarídeos, proteínas e peptídeos. Além disso, a composição tem ações inibitórias sobre a aderência das bactérias causadoras de doenças infecciosas do trato intestinal de células hospedeiras.

A patente US6069137 descreve um método para o tratamento da diarréia do viajante mediada por enterotoxigênica por E. coli em um sujeito, cujo método compreende administrar a um sujeito na necessidade do tratamento, uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo uma seqüência oligosacarídeo selecionada do grupo que consiste de β-Gal (1-4) . β-GLC, . β.GaI (1- 3).β.GaINAc, β.GalNAc(1-4).β.Gal, β.Gal(1-3).β.Gal, β-Gal(1-3).Β.GalNAc (1-4).β.Gal e α.NeuAc(2-3).β.Gal covalentemente associadas às partículas de sílica derivadas, onde a dita seqüência do oligosacarídeo liga pelo menos um sorotipo de E. coli enterotoxigênica, e onde a dita composição é capaz de ser eliminada do trato gastrintestinal.

O documento EP1018342 descreve o uso de um agente na preparação de um medicamento para a prevenção ou tratamento de uma infecção entérica mediada por um SLT, onde o dito agente é um suporte sólido de afinidade inerte farmaceuticamente aceitável capaz de ser eliminado no trato gastrintestinal, cujo suporte tem uma afinidade a ligação covalentemente inerentes a este através de um braço- espaçante, onde o dito ligante é caracterizado como um oligosacarídeo contendo a subunidade aGal(1-4).PGal que liga o SLT, com a ressalva de que o dissacarídeo não faz parte de um aGal(1-4)ssGal(1-4).PGIcNAc trissacarídeo ou um aGal(1-4)ssGal(1-4).PGlc trissacarídeo.

O documento US593 93 97 descreve um método para o tratamento da cólera, desequilíbrio e diarréia causada pela infecção V. cholera em um sujeito, cujo método compreende administrar a um sujeito na necessidade do tratamento uma quantia eficaz de uma composição compreendendo uma seqüência oligosacarídeo covalentemente anexada a um sólido farmaceuticamente aceitável, através de um suporte inerte não peptidil compatível ao braço ligador, onde a dita seqüência de oligosacarídeo quando ligada ao dito sólido de suporte inerte seja capaz de ligar um ou mais sorotipos do V. cholerae, e naqual a dita composição é capaz de ser eliminada do trato gastrointestinal. 0 dito oligosacarídeo é um 1-3 oligosacarídeo.

Um objetivo da presente invenção é proporcionar uma gama de oligossacarídeos mais específica e mais ativa tendo melhores efeitos sobre o ecossistema microbiano no trato gastrointestinal. Mais particularmente, a invenção tem como objetivo fornecer uma gama específica de oligossacarídeos para seletivamente controlar e regular os ecossistemas microbianos no trato gastrointestinal de um sujeito na necessidade deste, por enumeração específica de patógenos entéricos seguido pela excreção específica destes. Quando aplicado em uma composição para animais (ração), acredita- se que a dita atividade surpreendentemente resulta em uma composição (ração) eficaz resultando em uma taxa de conversão alimentar melhor (sendo o peso de alimento consumido por kg por peso corporal ganho) e melhor valor de nutrição, saúde e bem-estar do animal.

RESUMO

O presente pedido de patente melhora o estado da arte por entre outras coisas em:

- outras estruturas de oligosacárideo bioativa, compreendendo principalmente sacarídeos pentoses (como a ribose, arabinose, xilose e lixose), sacarídeos hexoses (como alose, altrose, gulose, idose, talose e manose), ácido glucurônico, ácido galacturônico ou seus derivados e misturas

- bem definido e menor intervalo do grau de polimerização (3-4)

- baixa taxa de inclusão - sem a necessidade de suporte de veículo ou braço de vinculação

- somente atividade de aglutinação contra germes patogênicos.

A presente invenção se refere ao uso de trímeros e tetrâmeros de oligossacarídeos (também chamado tri-(oligo-) sacárideos e tetra-(oligo-)sacárideos) ou seus derivados, como novos agentes inovadores com capacidades de promover o crescimento.

Em um primeiro aspecto, a invenção diz respeito à utilização de uma composição compreendendo um homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de pentose, hexose, um isômero L ou D , ou uma forma α e β, combinações, derivados oxidados, ou qualquer mistura destes, como um agente de aglutinação para aglutinar os patógenos entéricos. A presente invenção prevê a utilização de um grupo selecionado de oligômeros sacárideos (oligossacarídeos) ou seus derivados. A presente invenção diz respeito ao uso de oligossacarídeos ou seus derivados tendo um baixo grau de oligomerização, e ainda mais em particular, a tri-e tetra-(oligo-)sacarídeos ou seus derivados. Vantajosamente, os presentes oligômeros sacárideos proporcionarão efeitos satisfatórios quando, como tais Eles não precisam de ser ligados (covalentemente) a qualquer tipo de suporte ou veículo. Além disso, outra vantagem é que o grupo seleto de oligômeros sacárideos mostra inclusão de taxas mais baixas, e é ativa apenas contra os patógenos entéricos.

De preferência a presente composição é um alimento líquido ou sólido para seletivamente controlar e regular o ecossistema microbiano no trato gastrointestinal de um sujeito na necessidade deste, o método compreende alimentar o dito sujeito com uma composição como definida aqui. A invenção prevê também um método de controle de diarréia em um sujeito na necessidade deste, o método compreende administrar a composição ao dito sujeito. Outro aspecto da invenção inclui um método para melhorar o ganho de peso e a redução da conversão alimentar dos animais na necessidade deste, o método compreende administrar ao dito animal, uma composição conforme definida aqui.

A presente invenção é pelo menos em parte baseada na observação de, fornecer ao animal tri- e tetra-(oligo-) sacarídeos ou extratos ou derivados como aditivo alimentar, as mudanças no ecossistema microbiano do trato gastrintestinal dos animais dos modos específicos a seguir.

A quantidade total dos patógenos entéricos é, em uma primeira fase surpreendentemente enumerada no lúmen do trato gastrointestinal (=desenvolvimento selectivo de patógenos entéricos dentro do trato gastrointestinal), evitando sua aderência à parede gastrointestinal, e em uma segunda fase, os patógenos entéricos enumerados são eliminados muito rapidamente (de preferência dentro de duas semanas após a aplicação do tri- e tetra- (oligo-) sacarídeos), a partir do trato gastrointestinal do animal. Os patógenos entéricos podem incluir bactérias patogênicas, fungos, leveduras e vírus.

Pela rápida eliminação de patógenos entéricos a partir do trato gastrointestinal, em segunda instância, melhores desempenhos dos animais são obtidos, refletindo no crescimento diário e na conversão alimentar. 0 efeito de promoção do crescimento tri- e tetra-(oligo-)sacárideos já é claramente visível em nível de eluição das cepas dos patógenos entéricos enriquecido a partir do trato gastrintestinal dos animais.

Descrição das figuras

A figura 1 ilustra o número de patógenos entéricos no trato gastrointestinal dos frangos em diferentes pontos de tempo após a alimentação.

A figura 2 mostra os resultados de um ensaio de aglutinação usando tri e/ou tetra-mannosacarídeo A) E. coli K88 e B) Lactobacillus amylovorus

Descrição detalhada da invenção

A presente invenção se refere a uma composição e a utilização da mesma como um agente de aglutinação para aglutinar os patógenos entéricos.

Mais particularmente, a presente composição compreende oligossacarídeos, e mais preferivelmente, homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de pentose, hexose, um isômero L ou D, uma forma α ou β, combinações, derivados oxidados, ou quaisquer misturas. O termo "oligossacarídeo" se refere a uma curta cadeia de moléculas de açúcar. O termo "oligômeros" é usado aqui para se referir aos compostos com mais de uma unidade monomêrica. 0 presente oligômeros na presente composição substancialmente compreendem trímero(s) e tetrâmero(s) dos compostos (oligo-)sacárideo, e mais particularmente a homotrímeros e/ou heterotrímeros.

Uma concentração de até cerca de 1%, de preferência um valor compreendido entre 0,01 e 0,2%, em peso, eventualmente combinados com outras matérias-primas ou outras substâncias promovedoras do crescimento, tais como antibióticos, probióticos, prebióticos, ácidos, ..., podem ser utilizados para alcançar este objetivo específico. 0,125 g / 100 g de alimento tem sido considerado particularmente adequado (veja os exemplos).

Conclusão, tri-e tetra-oligosacarídeos (ou os seus extratos ou derivados), em primeira instância provocar o crescimento de patógenos entéricos (favorecendo o crescimento de patógenos entéricos) seguido da eliminação da cepa de patógenos entéricos enumeradas.

A novidade da invenção é que tri- e tetra- oligosacarídeos (ou seus extratos ou derivados) são utilizáveis como um promotor de crescimento específico dos animais reprodutores, enquanto que a característica inovadora da invenção é a enumeração dos patógenos entéricos no trato gastrointestinal dos animais, antes da eliminação da enumeração dos patógenos entéricos. Como resultado, menos diarréia e melhores desempenhos são obtidos. Além disso, tendo em vista que os patógenos entéricos são excretados do animal, os animais obtidos são saudáveis. Os animais podem incluir aves (frango, ...) e mamíferos (suínos, ruminantes, animais de estimação, ..., mas também os seres humanos).

O efeito observado é obtido durante o trânsito normal do (eventualmente seco) tri- e tetra-oligosacarídeos (ou um extrato ou um derivado) através do trato gastrintestinal dos animais.

A presente invenção se refere a um método de utilização de uma composição ou tri- e tetra- oligosacarídeos ou os seus extratos ou derivados ou misturas destes, como definido aqui para melhorar o ecossistema microbiano no trato gastrintestinal dos animais por contagem específica de adesão previa dos patógenos entéricos, antes da sua excreção especifica, a fim de melhorar o ganho de peso, reduzir a conversão alimentar e desta forma melhorar o valor alimentar, saúde e bem-estar do animal (por exemplo, causando menos diarréia).

A presente invenção se refere a um método de utilização de uma composição ou tri-e/ou tetra- oligosacarídeos ou seus extratos ou derivados ou misturas, tal como definido aqui como promotor do crescimento específico em reprodução animal.

A presente invenção se refere a um método em que tri- e/ou tetra-oligosacarídeos são compostos de pentose sacarxdeos (tais como a ribose, arabinose, xilose e lixose), hexose sacarídeos (tal como alose, altrose, gulose, idose, e talose manose), ácido glucurônico, ácido galacturônico ou todos os seus derivados e combinações. Isto significa também que o tri- ou tetra-oligossacarídeos são homo- ou hetero-oligômeros.

A presente invenção se refere a um método no qual hexoses são ligadas entre si por ligações α ou β, ou uma combinação de ambas. A presente invenção se refere a um método em que os ácidos galacturônicos são ligadas entre si por ligações α ou β, ou uma combinação de ambas. A presente invenção se refere a um método em que as pentoses são ligadas entre si por ligações α ou β, ou uma combinação de ambas. A presente invenção relata um método em que o efeito observado é obtido durante o processo de digestão e o trânsito normal do tri- e tetra- oligosacarídeos no trato gastrointestinal do animal.

A presente invenção se refere a um método tri- e/ou tetra-oligo-sacarídeos ou seus extratos ou derivados ou misturas que são utilizados até cerca de 1%.

O método de acordo com o dito anteriormente, em que tri- e/ou tetra-oligo-sacarídeos ou seus extratos ou seus derivados ou suas misturas isoladamente ou em combinação com outras matérias primas ou outras substâncias promotoras do crescimento, tais como antibióticos, probiótico, prebióticos, ácidos, ... são utilizados.

A presente invenção se refere a um método em que tri- e/ou tetra-oligo-sacarídeos ou seus extratos ou seus derivados ou suas misturas são dosadso em base seca em 0,125 g / 100 g do alimento.

A presente invenção se refere a um método em que os patogéneos entéricos incluem as espécies Escherichia, Salmonella, Shigella, Klebsiellaf Erwinia, Yersinia, Campylobacter, Helicobacter, Vibrio, Pseudomona, assim como outras bactérias Gram-negativas.

A presente invenção se refere a um método em que entérico patogéneos incluir os patógenos entéricos são vírus selecionados a partir do grupo que inclui os gêneros Norovírus, Rotavírus, bem como outros vírus.

A presente invenção se refere a um método em que o animal é classificado como aves, (frangos, . ..) ou como mamíferos (porco, ruminante, animais de estimação, ...mas também humanos)

A presente invenção diz respeito a um método em que os oligosacarideos são fornecidos aos animais em uma fase sólida ou líquida.

Para que a presente invenção pode ser mais claramente entendida, a forma preferida será descrita com referência aos exemplos a seguir.

Exemplos

Exemplo 1: Influência dos tri e tetra- manooligossacarídeos sobre o ecossistema microbiano no trato gastrintestinal das aves de abate

3 χ 40 pintinhos com um dia de idade receberam a seguinte alimentação: alimento de controle, alimento de controle suplementados com 3 ppm de flavomicina e alimento de controle suplementados com 0,025% tri e/ou tetra-manno- oligossacarídeos. 0 alimento de controle foi uma mistura de alimento, composto por matérias-primas adequadas para a alimentação animal. Água e alimentos foram fornecidos a vontade. Os pintos foram contaminados por dia 2 com o conteúdo cécum de frangos de 3 semanas de idade (período mais crítico para problemas gastrointestinais). Em intervalos de tempos regulares, os frangos foram dissecados e os índices de patógenos entéricos no intestino delgado foram determinados pela contagem em placa Agar MacConkey. A figura 1 resume os resultados.

Na figura 1, fica claro que tri e/ou tetra- manooligossacarídeos durante há primeira semana tem um efeito positivo sobre o crescimento/sobrevivência das bactérias entéricas. Somente depois de uma semana, o índice de bactéria entérica no trato intestinal reduziu muito rapidamente, ainda que em um nível inferior do que o controle e tratamento com flavomicina.

Example 2: Influência do tri e/ou tetra- galacturônico-oligosaçarídeos sobre o desempenho do frango As mesmas condições experimentais foram aplicadas conforme descrito no experimento 1. Neste exemplo, o crescimento diário e a conversão alimentar foram controlados após 13 dias. Os resultados estão resumidos na tabela 1.

Table 1. Influência de tetra-oligosacarídeos sobre o desempenho do frango

<table>table see original document page 19</column></row><table>

Da tabela 1, pode-se concluir que a utilização de tri e/ou tetra-galacturônico-oligossacarídeos neste teste em particular gerou resultados semelhantes aos obtidos com promotores de crescimento tradicional (Flavomicina). No entanto, o modo de ação não é comparável (ver exemplo 1).

Exemplo 3: Influência do tri e/ou tetra- galacturônico-oligossacarídeos sobre o desempenho do leitão No início da experiência, 5 leitões foram alojados por curral. Em cada curral, um comedoro com ração sólida (ad libitum) foi instalado. Um bebebdoro foi instalado em cada curral. A temperatura inicial era de 28°C durante 10 dias após o desmame. Depois disso, a temperatura caiu para 25°C. Dietéticos não medicamentosos comerciais foram dados. Não medicamentosos significa que o leitão não recebeu quaisquer antibióticos terapêuticos antes e durante a experiência. As dietas foram fornecidas na forma de pelotas.

As dietas foram as seguintes: - Co: Controle de dieta

Tr: Controle de dieta + 0,125% Manno- oligosacarídeos

A desenvoltura da experiência foi a seguinte: 2 tratamentos (Co e Tr) χ 16 repetições χ 5 leitões

No início do julgamento, os leitões (cerca de 7 kg de peso corporal) foram distribuídos em diferentes currais por peso. Esta distribuição foi feita para ter um peso médio igual e um desvio padrão igual à média de peso para cada tratamento e curral. Em intervalos de tempos regulares, os leitões foram pesados e o consumo de alimento foi monitorado. Isso resultou do crescimento diário, ingestão alimentar diária e conversão alimentar (tabela 2).

Tabela 2. Desempenho zootécnico de leitões recebendo manooligossacarídeos.

<table>table see original document page 21</column></row><table>

Da tabela 2, pode-se concluir que os parâmetros zootécnicos dos leitões, melhoram fornecendo-lhes manooligossacarídeos.

Exemplo 4: Influência do tri- e/ou tetra- manooligossacarídeos no patógeno aglutinação

Tri e/ou tetra-manooligossacarídeos foram incubadas no estado líquido em uma dose de 0,025% em pH 7,0 com E. coli K88 e células de Lactobacillus amylovorus durante 10 minutos. Após 10 minutos, a aglutinação foi visualizada por meio de análise microscópica. A figura 2 mostra o resultado. Da figura 2 fica claro que tri e/ou tetra- manooligossacarídeos são capazes de aglutinar E. coli K88 e não as células Lactobacillus amylovorus. Isto significa que os germes patogênicos são aglutinados por tri e/ou tetra- manooligossacarídeos. Exemplo 5: Influência do grau de polimerização de xilooligossacarídeos no patógeno de aglutinação

Xilose, tri-xilooligossacarídeos, tetra-

xilooligossacarídeos, penta-xilooligossacarídeos, e deca- xilooligossacarídeos foram incubados em uma dose de 0,025% em pH 7,0 com E. coli K88 e células de Lactobacillus amylovorus durante 10 minutos. Após 10 minutos, a aglutinação foi visualizada por meio de análise microscópica. Ficou claro que a melhor aglutinação foi

obtida com tri-xilooligossacarídeos e tetra- xilooligossacarídeos. Isto significa que os germes patogênicos são preferencialmente aglutinados por tri e/ou tetra-xilooligossacarídeos.

Referências:

AARESTRUP, F.M. (1999) . Association between the consumption of antimicrobial agents in animal husbandry and the occurrence of resistant bactéria among food animais.

International Journal of Antimicrobial Agents, 12, 279- 285 .

BARTON, M.D. (1998) . Does the use of antibiotics in animais affect human health. Aust. Vet. J., 76, 177-180.

BOWER, C.K., DAESCHEL, M.A. AND MCGUIRE, J. (1998). Protein antimicrobial barriers to bacterial adhesion. J. Dairy Sci., 81_, 2771-2778. BROWN, I.L., WANG, X., TOPPING, D.L., PLAYNE, MJ. AND CONWAY, P.L. (1998). High amylose maize starch as a versatile prebiotic for use with probiotic bactéria. Food, 50, 603- 610.

CHIQUETTE, J. AND BANCHAAR, C. (1998). Effect of diet and probiotic addition on chemical composition of free and particle associated bacterial populations of the rumen.

Can. J. Anim. Sci., 78, 115-120.

CHIRICA, L.C., GURAY, T., GURAKAN, G.C. AND BOZOGLU, T.F. (1998). Characterisation of extracellular &#946;- lactamase from penieillin G-resistant eell of Streptococcus thermophilus.

J. Food Prot, 61, 896-898.

DE KONING, W. AND HONGBIAO, D. (1999) . Chinese herbs as feed additives. Feed Mix, 6(3), 17-18.

DUPONT, H. L. AND STEELE, J.H. (1987) . Use of antimicrobial agents in animal feeds: implications for human health. Rev. Infect. Dis., 9, 447-460.

ECKEL, B. (1997). Feed acids in piglet feeding. Feed magazine, 1, 28-31.

ECKEL, B. (1999). Probioties can improve intestinal microbe balance and feed hygiene.

Feed Tech, 3(7), 39-41.

FINLAND, M. (1971) . Changes in susceptibility of selected pathogenic bactéria to widely used antibiotics. Ann. NY Acad. Sci., 182, 5-20.

GARRIGA, M., PASCUAL, M., MONFORT, J.M. AND HUGAS, Μ. (1998). Selection of lactobacilli for chicken probiotic adjuncts. J. Appl. Microbiol., 84. 125-132.

GUILLOT, J. F. (1989). Apparition et evolution de Ia resistance bacterienne aux antibiotiques.

Ann. Rech. Vet, 20, 3-16.

HAMILTON, J.O.C. (1994). Who will stop the mutant microbes. Business Week, August 1, 52-53.

HEDGES, R.W. AND JACOB, A.E. (1974). Transposition of ampicillin resistance from RP4 to other replicons. MoI. Gen. Genet., 132, 31-40.

HOUDIJK, J.G.M., BOSCH, M.W., TAMMINGA, S., VERSTEGEN, M.W.A., BERENPAS, E. B. AND KNOOP, H. (1999). Apparent Ileal and Total-Traet nutrient digestion by pigs as affected by dietary nondigestible oligo-saccharides. J. Anim. Sci., 77, 148-158.

IJI, P.A. AND TIVEY, D. R. (1998). Natural and syntheti,c oligo-saccharides in broiler chicken diets. World1S Poultry Science Journal, 54, 129-143.

LIANG, C. (1997). Organic acids control harmful micro-organisms in poultry feed. Zootehnica International, January, 3 6-39.

MAZZA, G. (ed.) (1998). Functional Foods. Technomic Publishing Company, Pennsylvania. MUIRHEAD, S. (1998) . EU ban of antibiotics draws sharp criticism. Feedstuffs, 70, 1-4.

NEUi CH., RICHMOND, M., MITSUHASHI, S., NORD, C.E., ROSS, G.W., KNOWLES, J.R. AND SUTHERLAND, R. (1980).

&#946;-lactamase: a major form of bacterial resistance. In: Current chemotherapy and infectious diseases. Springer Verlag, Berlin, 19-25.

NIELSEN, P. E. (1999). Denmark1S approach to problem free feeding. Feed Mixi 6(5), 15-17.

OLSEN, R. (1996). Experience with mannanoligo- saccharides in commercial turkey production. Zootechnica International, August, 3 8-39.

PATENT WO/98/26787. Prebioties and probiotics.

PRESCOTT, J. F. (1997). Antibiotics: miracle drugs or pig food. Can. Vet. J., 38, 763-766.

RADECKI, S.V., JUHL, M. R. AND MILLER, E. R. (1988). Fumaric and citric acids as feed additives in starter pig diets: effect on performance and nutrient balance. J. Anim. Sci., 66, 2598-2605.

ROSS, I.W. (1999). Antibiotics in animal feed stocks and implications of the European Commission ban. Food Test Anal., 5, 8-10.

TANNOCK, G. W. (ed.) (1999). Probiotics: a criticai review. Horizon Scientific Press, Wymondham.

THOMPSON, R. (1986) . R plasmid transfer. J. Antimicrob. Chemother., 18, 13-23.

ZERIAL, Α., SKERLAVAJ, B., GENNARO, R. AND ROMEO, D. (1987). Inactivation of herpes virus by protein components of bovine neutrophil granules. Antivir. Res., 7, 341-352.

Claims (18)

1. Uso de uma composição como um agente de aglutinação para aglutinar patógenos entéricos, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita composição compreende homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado a partir do grupo que consiste de uma forma β de uma aldopentose selecionada do grupo que consiste de ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada do grupo que consiste de alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados; ou qualquer mistura destes, onde o dito homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero está ou estão presentes em uma quantidade de até 1% do peso seco da composição.

2. Uso de homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero, CARACTERIZADO pelo fato de ter um componente selecionado do grupo que consiste de uma forma β de uma aldopentose selecionada do grupo que consiste de ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada do grupo que consiste de alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados; ou quaisquer misturas destes, como agente de aglutinação para aglutinar patógenos entéricos.

3. Uso de acordo com as reivindicações 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que os ditos homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero são desprovidos de ligação covalentemente a um suporte ou veículo.

4. Uso de acordo com as reivindicações de 1 a 3, CARACTERIZADO por o dito componente ser ácido glucurônico e/ou ácido galacturônico.

5. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que as ditas aldopentoses, aldohexoses, combinações das mesmas, e seus derivados oxidados, são ligados entre si por meio de ligações β-glicosídicas.

6. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações -1, e 3 a 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o dito homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero está ou estão presentes em um valor compreendido entre 0,01 e 0,2% por peso seco da composição.

7. Uso de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 6, CARACTERIZADO pelo fato de que os ditos patógenos entéricos são bactérias selecionadas a partir do grupo que inclui as espécies Escherichial Salmonella, Shigella, Klehsiella, Erwinia, Yersinia, Campylobacter, Helicobacter, Vibrio, Pseudomona, assim como outras bactérias Gram- negativas.

8. Uso de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 6, CARACTERIZADO pelo fato de que os ditos patógenos entéricos são vírus selecionados a partir do grupo que inclui os gêneros Norovírus, Rotavírus, bem como outros vírus.

9. Uso de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que em combinação com um ou mais componentes adicionais selecionados do grupo que compreende antibióticos, probióticos, prebióticos, e/ou ácidos.

10. Uso de acordo com qualquer das reivindicações de -1 a 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita composição é utilizada na forma sólida ou líquida.

11. Uso de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita composição é uma composição alimentícia sólida ou líquida.

12. Composição alimentícia sólida ou líquida como definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita composição compreende homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de uma forma β de uma aldopentose selecionada a partir do grupo que inclui ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada a partir do grupo que inclui alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados, ou qualquer mistura destes, em que os ditos homotrímero, heterotrímero, hornotetramer e/ou heterotetrâmeros está ou estão presentes em uma quantidade de até 1% do peso seco da composição.

13. Método para seletivamente controlar e regular o ecossistema microbiano no trato gastrointestinal de um sujeito na necessidade deste, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de compreender alimentar o dito sujeito com uma composição de acordo com a reivindicação 12.

14. Método para o controle diarréia em um sujeito na necessidade deste, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de compreender administrar uma composição de acordo com reivindicação 12 ao dito sujeito.

15. Método para melhorar o ganho de peso e reduzir a taxa de conversão alimentar de um animal na necessidade do mesmo, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de compreender administrar uma composição de acordo com a reivindicação 12 ao dito animal.

16. Método para seletivamente controlar e regular o ecossitema microbiano no trato gastrointestinal de um sujeito na necessidade deste, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de que compreender alimentar o dito sujeito homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de uma forma β de uma aldopentose selecionada a partir do grupo que inclui ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada a partir do grupo que inclui alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados, ou qualquer mistura destes, tais como definidos em qualquer uma das reivindicações de 2 a 4.

17. Método de controle de diarréia em um sujeito na necessidade do mesmo, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de compreender administrar ao dito sujeito homotrímero, heterotrímero, hornotetramer e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de uma forma β de uma aldopentose selecionada a partir do grupo que inclui ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada a partir do grupo que inclui alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados, ou qualquer mistura destes, tais como definidos em qualquer uma das reivindicações de 2 a 5.

18. Método para melhorar o ganho em peso e reduzir a taxa de conversão alimentar de um animal na necessidade do mesmo, o método sendo CARACTERIZADO pelo fato de compreender administrar ao dito animal homotrímero, heterotrímero, homotetrâmero e/ou heterotetrâmero de um componente selecionado do grupo que consiste de forma β de uma aldopentose selecionada a partir do grupo que inclui ribose, arabinose, xilose, e lixose; uma forma β de uma aldohexose selecionada a partir do grupo que inclui alose, altrose, manose, gulose, idose, e talose; combinações; derivados oxidados, ou qualquer mistura destes, tais como definidos em qualquer uma das reivindicações de 2 a 5.