BRPI0710510A2 - compostos indazol e processos para inibição de cdc7 - Google Patents

Abstract

<B>COMPOSTOS INDAZOL E PROCESSOS PARA INIBIçãO DE CDC7<D>. Novos compostos capazes de atuarem como inibidores de CDC7 são providos. Os compostos são úteis tanto sozinhos como em combinação com pelo menos um agente terapêutico adicional, na profilaxia ou tratamento de doenças mediadas por CDC7, tal como câncer. Os compostos têm a Fórmula (1) ou (II), onde os valores das variáveis são aqui definidos (1), (II).

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOS-TOS INDAZOL E PROCESSOS PARA INIBIÇÃO DE CDC7".

Novos compostos capazes de atuarem como inibidores deCDC7 são providos. Os compostos são úteis tanto sozinhos como em com-binação com pelo menos um agente terapêutico adicional, na profilaxia outratamento de doenças mediadas por CDC7, tal como câncer. Os compostostêm a Fórmula (I) ou (II), onde os valores das variáveis são aqui definidos (I),(II).

Referência(s) - Cruzada(s) a Pedido(s) de Patente RelacionadoEste pedido de patente reivindica o benefício de pedido provisó-rio U.S. N° 60/793 691 depositado em 19 de abril de 2006.Campo da Invenção

Esta invenção refere-se a inibidores de CDC7 e provê novoscompostos, composições dos novos compostos junto com carreadores far-fb

maceuticamente aceitáveis, e usos dos novos compostos, tanto sozinhoscomo em combinação com pelo menos um adicional agente terapêutico, naprofilaxia ou tratamento de doenças mediadas por CDC7, como câncer.Antecedentes

Em eucariotes, replicação de ADN é estritamente regulada du-rante o ciclo de célula e ocorre somente uma vez e somente durante fase S(revisto por Bell e Dutta, "DNA replication in eukariotic cells", Annu Ver Bio-chem 71:333-74 (2002)). Replicação de ADN é iniciada através de formaçãode um complexo pré-replicação (pré-RC) em origens de replicação duranteG1. Após formação de complexo o pré-RC é convertido em um complexo deiniciação pela atividade em concerto de duas cinases de fase-S,Cdk2/ciclinaE e CDC7/Dbf4, também conhecida como Hskl ou CDC7L1.Hskl é o homólogo CDC7 de S. pombe. Através de pesquisa de bases dedados de EST para seqüências similares àquelas de CDC7 e Hsk1, Jiangand Hunter identificaram um ADNc CDC7 humano parcial (Jiang and Hunter,"Identification and characterization of a human protein kinase related to bud-ding yeast CDC7p" PNAS 23:94(26): 14320-5 (1997)). Eles usaram o ADNcparcial para isolar um ADNc de inteiro comprimento a partir de uma bibliote-ca de células HeLa. A proteína CDC7 humana de 574 aminoácidos previstacontem os 11 sub-domínios conservados encontrados em todas as proteínasserina / treonina cinases assim como 3 seqüências adicionais (inserçõescinase) entre sub-domínios I e II, Vll e VIII, e X e XI. Os domínios cinase deCDC7 de S. cerevisiae e humana compartilham 44% de identidade de se-qüência de proteína. CDC7 humana tem uma massa molecular de 64 kD e épredominantemente localizada no núcleo. Hess et al., "A human homolog ofthe yeast CDC7 gene is overexpressed in some tumors and transformed celllines" Gene 211(1):133-40 (1998) reportou que CDC7L1 foi expressa emmuitos tecidos normais, mas foi superexpressa em todas as linhas de célulastransformadas testadas e em certos tipos de tumor.

CDC7, uma serina / treonina cinase, desempenha um papel es-sencial em iniciação de replicação de ADN em células eucarióticas (Jiang etal., EMBO J 18:5703 (1999)). Após montagem do complexo de pré-replicação para a região de replicação, a CDC7 cinase fosforila proteínasMCM (manutenção de minicromossoma) e permite recrutamento de CDC45e ADN polimerase pelo que iniciando replicação de ADN Kim et al., MutationResearch 532:29 (2003)). CDC7 requer associação com um de seus cofato-res, ASK (também conhecido como DBF4) ou ASKL1 (também conhecidocomo Drf 1), para ativação de cinase (Ogino et al. J Biol Chem 276:31376(2001); Sato et al., Genes to Cells 8:451 (2003); Montagnoli et al., EMBO J21:3171 (2002); Yoshizawa - Sugata et al., J Biol Chem 280, 13062 (2005)).Camundongos deficientes para CDC7 morrem entre dia 3,5 e 6,5 indicandoque CDC7 é essencial para desenvolvimento embriônico inicial (Kim et al.,EMBO J 21:2168 (2002)). Nocaute condicional de CDC7 em linhas de célu-las ES de camundongo (CDC7-/-tg) revelou imediata inibição de proliferaçãode células, rápida cessação de síntese de ADN e impedimento de progres-são de fase S (Kim et al. (2002)). CDC7 foi implicada em sinalização de pon-to de checagem de dano em ADN em resposta a tratamento com Etoposidaou interrupções de fita simples de ADN (Costanzo et al., J Mol Cell 11:203(2003)). Um papel para CDC7 em resposta para dano de ADN é suportadopela observação de que células ES de camundongo esgotadas de CDC7acumulam foci RAD51 no núcleo (Kim et al.V(2002)). Supressão de CDC7 emlevedura resulta em hipersensitividade para tratamento com hidroxi uréia(Weinreich et al., EMBO J 18:5334 (1999)).

A serina / treonina CDC7desempenha um importante papel nainiciação de replicação de ADN e recentemente foi implicada em sinalizaçãode ponto de checagem de fase S (revisto em Kim, Yamada and Masai,"Functions of mammalian CDC7 kinase in initiation / monitoring of DNA repli-cation and development" Mutat Res 532 (1-2) : 29 - 40 (2003)). A CDC7forma um complexo com D bf 4, sua subunidade reguladora também conhe-cida como ASK para gerar uma Ser / Thr cinase ativa. Atividade CDC7 /Dbf4 é requerida para iniciação de replicação de ADN e subseqüente transi-ção em fase-S do ciclo de célula. Uma segunda proteína ativadora de CDC7chamada Drfl ou ASKL1 foi identificada em células humanas, e parece estarenvolvida em progressão de ambas fases SeM (Montagnoli et al., "Drf1, anovel regulatory subunit for human CDC7 kinase" EMBO J 21 (12) : 3171-81(2002); Yoshizawa-Sugata, "A second human Dbf4 / ASK-related protein,Drf 1 / ASKL1, is required for efficient progression of S e M phases" BiolChem 280 (13) : 13062-70(2005)). Camundongos nocaute CDC7 são letaisembriônicos entre E 3.5 e E 6.5 (Kim et al., "Inactivation od CDC7 kinase inmouse ES cells results in S-phase arrest and p53-dependent cell death"EMBO J 21 (9) : 2168-79 (2002)). Entretanto, as análises de linhas de célu-las ES nocautes CDC7 condicional assim como Dbf4 condicional revelaramos papéis essenciais de ambas proteínas em proliferação de célula mamífe-ra e síntese de ADN (Kim et al., "Hypomorphic mutation in na essential cell-cycle kinase causes growth retardation and impaired spermatogenesis" EM-BO J 22 (19) : 5260-72 (2003); Yamashita et al., "Functional analyses ofmouse ASK, an activation subunit for CDC7 kinase, using conditional ASKknockout ES Cells" Genes Cells 10(6): 551-63 (2005)).

Replicação de ADN inicia através de montagem de um complexode pré-replicação (pré-RC) sobre origens marcadas por um complexo dereconhecimento de origem de seis membros (ORC) durante fase G1 do ciclode célula. Ligação de Cdc6 e Cdtl facilita a carga do complexo de manuten-ção de minicromossoma (MCM) sobre o ORC. O complexo hetero hexâmeroMCM 2-7 é considerado ser um bom candidato para funcionar como a heli-case que desenrola ADN em frente do garfo de replicação durante fase-Sembora até hoje somente o complexo MCM467 purificado tenha sido de-monstrado ter atividade helicase in vitro (Lei et al., "Initiating DNA synthesis:from recruiting to activating the MCM complex" Cell Sci 114 (Pt 8) : 1447 -54 (2001); Schechter et al., "DNA unwinding is na Mcm complex - depen-dent and ATP hydrolysis-dependent process" J Biol Chem 279 (44) : 45586-93 (2004)). Proteínas MCM são os princiapis substratos fisiológicos deCDC7. Em S. cerevisiae uma mutação em MCM5 bob-1 foi mostrada contor-nar o requisito para atividade CDC7 / Dbf4 cinase (Hardy et al., "MCM5 / cdc46 - bobl bypasses the requirement for the S phase activator CDC7p"PNAS 94 (7) : 3151-5 (1997)). Entre as seis subunidades que formam ocomplexo MCM 2-7, MCM2, MCM4 e MCM6 foram mostradas serem subs-tratos diretos de CDC7 in vitro e em células. Análise de mapeamento de fos-fopeptídeo marcado com rádio tríptico bidimensional de MCM2 fosforiladapor CDC / Dbf4 revelou sete sítios de fosforilação in vitro (Jiang et al.,"Mammalian CDC7 - Dbf4 protein kinase complex is essential for initiation ofDNA replication" EMBO J 18 (20 : 5703-13 1999). Recentemente sítios defosforilação CDC7 sobre MCM2 foram mapeados para abranger os resíduosS40, S50 e S108 (Montagnoli et al., "Identification of Mcm2 phosphorilationsites by S-phase-regulating kinases" J Biol Chem 281 (15) : 10281-90(2006)). Resíduos adicionais, tal como resíduo S53, foram identificados se-rem fosforilados por CDC7 in vitro e in vivo (Cho et al., "CDC7 kinase phos-phorylates serinas residues adjacent to acidic amino acids in the minichro-mosome maintenance 2 protein" PNAS 103 (31): 11521-6 (2006); Tsuji T etal., "Essential role of phosforylation of MCM2 by CDC7 / Dbf4 in the initiationof DNA replication in mammalian cells" Mol Biol Cell 17 (10) : 4459-72(2006)). Ainda, MCM2 também pode ser fosforilada por uma outra cinase defase-S, Cdk2 / CycE1 durante replicação de ADN e através de cinases deponto de checagem relacionadas -Rad3 e ATM (ATR) e ATM em resposta atensão geno-tóxica {Cortez et al., "Minichromosome maintenance proteinsare direct targets of the ATM and ATR checkpoint kinases" PNAS 101(27) :10078-83 (2004); Yoo et al., "Mcm2 is a direct substrate of ATM and ATRduring DNA damage and DNA replication checkpoint responses" J Biol Chem279 (51) : 53353-64 (2004)). Recentemente foi reportado que CDC7 mediafosforilação de MCM4 e MCM6 (Sheu and Stillman, "CDC7 - Dbf4 phos-phorylates MCM proteins via a docking site-mediated mechanism to promoteS phase progression" Mol Cell 24 (1): 101-13 ((2006); Masai H et al., "Phos-phorylation of MCM4 by CDC7 kinase facilitates its interaction with Cdc45 onthe chromatin" J Biol Chem 281 (51) : 39249-61 (2006)). Embora a relevân-cia e redundância funcional entre sítios de fosforilação permaneçam a seremelucidados, fosforilação de proteínas MCM por CDC7 em geral promoveprogressão de fase S.

Recentemente, CDC7 emergiu como um alvo atraente para te-rapia de câncer. Esgotamento de CDC7 usando oligonucleotídeos siRNAresulta em indução de apoptose em linhas de células de câncer enquantocélulas fibroblastos de derme são poupadas) Montagnoli et al., Câncer Res64, 7110 (2004)). Ainda, sítios de fosforilação mediados por CDC7 sobreMCM2, MCM4 e MCM6 em células de tumor foram identificados, mas a rele-vância funcional daqueles sítios permanece a ser determinada (Montagnoliet al., J of Biol Chem 281 : 10281 (2006); Tsuji et al., Mol Biol Cell 17:4459-4472 (2006); Masai et al., J Biol Chem 281 : 39249-39261 (2006); Sheu etal., Mol Cell 24 : 101-113 (2006)). Há evidência de que o complexo CDC7 /Dbf4 é um alvo da resposta de ponto de checagem S para tensão genotóxi-ca. Em S. cerevisae tratado-HU, Rad53 fosforila Dbf4 resultando em umaremoção do complexo cinase da cromatina e em inibição de atividade deCDC7 / Dbf4 cinase. Supressão de CDC7 resulta em hiper-sensitividade HU(Weinreich M and Stillman B, 1999). Ainda, extratos de ovo de Xenopus tra-tados com Etoposida, um inibidor de Topoisomerase II usado na clínica co-mo agente anticâncer, resultaram em ativação de um ponto de checagem dedano de ADN que requereu ATR, bloqueando atividade CDC7 / Dbf4 cinase(Costanzo 2003). Isto é contrário a dados recentes indicando que a CDC7 /Dbf4 cinase é ativa durante tensão de replicação e contribui parã hiper-fosforilação de MCM2 em resposta a tratamento com HU e Etoposida (TencaP. et al. 2007). Ainda esgotamento de CDC7 usando siRNA na presença

Mutações relacionadas com doença no gene supressor de tumorMen 1 foram identificadas que bloqueiam a interação de menina com Dbf4,um cofator requerido para atividade CDC7 cinase, pelo que contribuindo pa-ra a doença "neoplasia endócrina múltipla tipo I (MEN1) (Schnepp RW et al.,2004). Ainda, níveis de expressão mais aumentados de CDC7 em amostrasde tecido de câncer de mama, em particular amostras negativas ER e PR,foram detectados baseado em análises de micro-arranjo em-casa (in-house).Esta informação pode ser usada para identificar uma população pacientesuscetível a inibição de CDC7.

Embora o papel de CDC7 em regulação de ponto de checagemde fase-S não seja completamente entendido, há evidência sugerindo queum inibidor de CDC7 mostrará eficácia em pacientes de câncer sozinho ecomo terapia de combinação com agentes quimioterapêuticos afetando re-plicação de ADN. Entretanto, até agora não existem específicos inibidoresde CDC7 aprovados para o tratamento de câncer.

Da mesma maneira, há uma necessidade de inibidores potentese específicos de CDC7 que sejam moléculas pequenas de baixo peso mole-cular, assim como processos para seleção de tais compostos. Processos detratamento de doenças mediadas por CDC7, como câncer também são par-ticularmente desejáveis.

A presente invenção provê potentes e específicos inibidores deCDC7 que são moléculas pequenas de baixo peso molecular. Assim, foramprovidos, de acordo com um aspecto da invenção, compostos de fórmula (I):

<formula>formula see original document page 7</formula>

onde X é N ou CR7;Y é N ou CR4;

R1 é selecionado do grupo consistindo em H, halo, alquila, alquila substituí-do, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, amino, e amino substituído;

R2 é selecionado do grupo consistindo em alquila, alquila substituído, alcoxi,alcoxi substituído, amino, amino substituído, ariloxi, ariloxi substituído, heteroariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído,hetero cicliloxi, hetero cicliloxi substituído, arila, arila substituído, hetero arila,hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila, ehetero ciclila substituído;

R3 é H, alquila, alquila substituído, arila ou arila substituído;

R4, R6, R7 β R8 são selecionados independentemente do grupo consistindoem H, halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, a-mino, e amino substituído;

R5 é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H, sulfonila, sulfonila substituído,sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,hetero ciclila e hetero ciclila substituído; ou

um seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

onde R4, R6, e R7 são independentemente selecionados do grupo consistin-do em H, halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído,amino, e amino substituído;

Em outras realizações, novos compostos são providos de Fórmula (II):

<formula>formula see original document page 8</formula>R5 é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H, sulfonila, sulfonila substituído,sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,hetero ciclila, e hetero ciclila substituído; R9, R10, R11, R12, e R13 são independentemente selecionados do grupo con-sistindo em H, alquila, alquila substituído, alcoxi, alcoxi substituído, acila, acilamino, aciloxi, amino, amino substituído, amino carbonila, amino tiocarboni-la, amino carbonil amino, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, aminosulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonil amino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro,SO3H, sulfonila, sulfonila substituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquiltio substituído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila, hetero ciclila substituído,ariloxi, ariloxi substituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alqui- loxi, ciclo alquiloxi substituído, hetero cicliloxi, e hetero cicliloxi substituído;ou

um seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

Em outros aspectos, a presente invenção provê processos parao tratamento de distúrbios relacionados com CDC7 em um sujeito humano ou animal em necessidade de tal tratamento compreendendo administraçãoao dito sujeito de uma quantidade de um composto de fórmula (I) ou (II) efe-tiva para inibir atividade de CDC7 no sujeito.

Em outros aspectos, o distúrbio relacionado com CDC7 é câncere a presente invenção provê processos para tratamento de câncer em umsujeito humano ou animal em necessidade de tal tratamento compreendendoadministração ao dito sujeito de uma quantidade efetiva de um composto defórmula (I) ou (II) para reduzir ou prevenir crescimento de tumor no sujeito.Cânceres representativos tratáveis de acordo com a invenção incluem, masnão são limitados a, carcinoma tais como carcinomas de bexiga, mama, có-lon, rim, fígado, pulmão, incluindo câncer de pulmão de célula pequena, esô-fago, vesícula biliar, ovário, pâncreas, estômago, cérvice, tiróide, próstata, ede pele, incluindo carcinoma de célula escamosa; tumores hematopoiéticosde linhagem linfóide, incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leuce-mia linfoblástica aguda, Iinfoma de célula-B, Iinfoma de célula-T, Iinfoma deHodgkin, linfoma não-Hodgkin, Iinfoma de célula peluda, e linfoma de Bur-kett; tumores hematopiéticos de linhagem mielóide, incluindo leucemias mie-logenosas aguda e crônica, síndrome mielodisplástica, e leucemia promiélo-cítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrossarcoma e rabdomi-ossarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astro-citoma, neuroblastoma, glioma e schwannomas; e outros tumores incluindomelanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xeroderma pigmen-tosum, ceratoxantoma, câncer folicular de tiróide e sarcoma de Kaposi.

Ainda em outros aspectos, a presente invenção provê processospara tratamento de distúrbios relacionados a CDC7 em um sujeito humanoou animal em necessidade de tal tratamento compreendendo administraçãoao dito sujeito de uma quantidade efetiva de um composto de fórmula (I) ou(II) para reduzir ou prevenir crescimento de tumor no sujeito em combinaçãocom pelo menos um adicional agente para o tratamento de câncer.

Ainda em outros aspectos, a presente invenção provê composi-ções terapêuticas compreendendo pelo menos um composto de fórmula (I)ou (II) em combinação com um ou mais adicionais agentes para o tratamen-to de câncer, como são comumente empregados em terapia de câncer.

Ainda em outros aspectos, a presente invenção provê um com-posto de fórmula (I) ou (II) para uso como um composto farmacêutico. A pre-sente invenção ainda provê o uso de um composto de fórmula (I) ou (II) nafabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.

Uma outra realização provê um processo de seleção para inibi-ção de atividade de CDC7 através de um composto compreendendo exposi-ção de MCM2, CDC7 e ATP ao composto, e monitoração para fosforilâçãóde MCM2. Em uma realização mais particular, o processo compreende mo-nitoração para fosforilação de Serl 08 sobre MCM2, como descrito no Exemplo 80.

Outros objetos, características e vantagens da presente inven-ção tornar-se-ão aparentes a partir da seguinte descrição detalhada. Deveser entendido, entretanto, que a descrição detalhada e os específicos exem-plos, embora indicando realizações preferidas da invenção, são dados so-mente a título de ilustração, uma vez que várias mudanças e modificaçõesdentro do espírito e escopo da invenção tornar-se-ão visíveis para aquelesversados na técnica a partir desta descrição detalhada.

Descrição Detalhada

A presente invenção refere-se a uma nova classe de modulado-res de CDC7 de molécula pequena. Estes compostos podem ser formuladosem composições farmacêuticas e são úteis em inibição de CDC7 em um su-jeito humano ou animal, e no tratamento de doenças mediadas por CDC7,como câncer.

Uma realização da invenção provê novos compostos compreen-dendo 4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona. Em uma realização mais par-ticular a dita 4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona é uma 4-(1H-indazol-5-il)-6-fenil pirimidin-2 (1H)-ona substituída ou não-substituída. Em uma outrarealização o composto tem a fórmula (I) ou (II). Em uma realização mais par-ticular o composto é um inibidor de CDC7. Em uma outra sua realização, ocomposto é um inibidor de CDC7 e é administrado a um paciente, mais par-ticularmente, um paciente com câncer, ainda mais particular, um câncercompreendendo células expressando CDC7.

Uma outra realização da invenção provê novos compostos deFórmula (I):

<formula>formula see original document page 11</formula>onde X é N ou CR7;

Y é N ou CR8;

Z é N ou CR4;

R1 é selecionado do grupo consistindo em H, halo, alquila, alquila substituí-do, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, amino, e amino substituído;R2 é selecionado do grupo consistindo em alquila, alquila substituído, alcoxi,alcoxi substituído, amino, amino substituído, ariloxi, ariloxi substituído, heteroariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído,hetero cicliloxi, hetero cicliloxi substituído, arila, arila substituído, hetero arila,hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila ehetero ciclila substituído;

R3 é H, alquila, alquila substituído, arila ou arila substituído;R4, Re, R7 e Re são selecionados independentemente do grupo consistindoem H, halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, a -mino e amino substituído;

Rs é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H, sulfonila, sulfonila substituído,sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,hetero ciclila e hetero ciclila substituído; ouum seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

Em uma realização mais particular, X é CR7 e Z é CR4. Aindamais particularmente, R4 e R6 e R7 são H ou halo. Mais particularmente, R4,R6, e R7 são H.

Em uma outra realização mais particular, R1 é H, halo ou alquila.Mais particularmente, R1 é H.

Em uma outra realização mais particular, R2 é arila ou arila subs-tituído. Em uma outra realização mais particular, R2 é hetero arila ou heteroarila substituído. Em uma outra realização mais particular, R2 é ciclo alquilaou ciclo alquila substituído. Em uma outra realização mais particular, R2 éhetero ciclila ou hetero ciclila substituído. Em uma outra realização mais par-ticular, R2 é fenila ou fenila substituído.

Em uma outra realização mais particular, R3 é H ou alquila. Maisparticularmente, R3 é metila. Mais particularmente R3 é H.

Em uma outra realização mais particular, R5 é selecionado dogrupo consistindo em H, halo, hidroxi, alquila, alquila substituído, amino, a-mino substituído, alcoxi, e alcoxi substituído. Em uma outra realização maisparticular, R5 é H.

Em uma outra realização mais particular, Y é N. Em uma outrarealização mais particular, Z é N. Em uma outra realização mais particular, Yé CR8 e somente um de X e Z é N.

Uma outra realização da invenção prove novos compostos deFórmula (II):

<formula>formula see original document page 13</formula>

onde R4, R6. e R7 são selecionados independentemente do grupo consistin-do em H1 halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído,amino e amino substituído;

R5 é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H, sulfonila, sulfonila substituído,tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído, hetero ari-la, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclilae hetero ciclila substituído;R9, R-10, R11, R12, e R13 são independentemente selecionados do grupo con-sistindo em H, alquila, alquila substituído, alcoxi, alcoxi substituído, acila, acilamino, aciloxi, amino, amino substituído, amino carbonila, amino tiocarboni-la, amino carbonil amino, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, aminosulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonil amino, amidino, carboxila, carboxiléster, (carboxil éster) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro,SO3H, sulfonila, sulfonila substituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio* alquiltio substituído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila, hetero ciclila substituído,ariloxi, ariloxi substituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alqui-loxi, ciclo alquiloxi substituído, hetero cicliloxi e hetero cicliloxi substituído; ouum seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

Em uma outra realização mais particular pelo menos um de Rg,R10, R11, R12, e R13 é alcoxi. Em uma outra realização, pelo menos um de Rg,R10, Rn, R12, e R13 é halo, alquila, ou alquila substituído.

Em uma outra realização mais particular, Rn é selecionado dogrupo consistindo em halo, alquila, alquila substituído, alcoxi, alcoxi substitu-ído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila,ciclo alquila substituído, hetero ciclila, hetero ciclila substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alqui-loxi substituído, hetero cicliloxi, e hetero cicliloxi substituído.

Em uma outra realização mais particular, R4, R6, e R7 são H ouhalo. Ainda mais particularmente, R4, R6 e R7 são H.

Em uma outra realização mais particular, R5 é selecionado dogrupo consistindo em H, halo, hidroxi, alquila, alquila substituído, amino, a -mino substituído, alcoxi, e alcoxi substituído. Ainda mais particular, R5 é H.

Em uma outra realização mais particular, o composto é selecio-nado do grupo consistindo em 6-(3-flúor fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2(1H)-ona, 6-(2-flúor-4-metoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(2,5-dimetoxi fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(3-flúor-4-metoxi fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(4-etil fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(3,4-dimetoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il)pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-[3-triflúor metil) fenil] pirimidin-2(1H)-ona, 6-(2-flúor fenil)-4-(1H-indazol—5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(3-clorofenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-fenil piri-midin-2 (1H)-ona, 6-[3-(benziloxi) fenil]-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-morfolin-4-il fenil) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1 H-indazol-5-il)-6-(4-fenoxi fenil) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-[4-(benziloxi) fenil]-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-piperazin-1-ilfenil) pirimidin-2 (1H)-ona, ou um seu estereoisômero, tautômero ou sal far-maceuticamente aceitável.

Uma outra realização da presente invenção provê uma composi-ção farmacêutica compreendendo um composto de fórmulas (I) ou (II) e umexcipiente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

Uma outra realização da presente invenção provê processos detratamento de sujeitos humanos e animais sofrendo de um distúrbio relacio-nado com cdc7 compreendendo administração ao sujeito de uma quantidadeefetiva de um composto da invenção para inibir atividade de CDC7 no sujei-to. Em uma sua realização mais particular, o distúrbio relacionado a cdc7 éum distúrbio câncer, e a invenção provê processos de tratamento de um su-jeito humano ou animal em necessidade de tal tratamento compreendendoadministração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente efetiva de umcomposto de fórmula (I) ou (II), tanto sozinho como em combinação com ou-tros agentes anticâncer. Em outros aspectos, a presente invenção provêprocessos para tratamento de distúrbios relacionados a CDC7 em um sujeitohumano ou animal em necessidade de tal tratamento compreendendo admi-nistração ao dito sujeito de uma quantidade efetiva de um composto de fór-mula (I) ou (II) para reduzir ou prevenir crescimento de tumor no sujeito. Ain-da em outros aspectos, a presente invenção provê processos para tratamen-to de distúrbios relacionados a CDC7 em um sujeito humano ou animal emnecessidade de tal tratamento compreendendo administração ao dito sujeitode uma quantidade efetiva de um com posto de fórmula (I) ou (II) para redu-zir ou prevenir crescimento de tumor no sujeito em combinação com pelomenos um agente adicional para o tratamento de câncer. Um número deapropriados agentes anticâncer a serem usados como compostos terapêuti-cos de combinação são contemplados para uso nos processos da presenteinvenção, como é a seguir descrito em detalhes. Ainda mais em particular, ocâncer compreende células que expressam CDC7.

Uma outra realização da presente invenção provê um processode inibição de fosforilação de MCM, mais particularmente MCM2, compreen-dendo exposição de MCM ou MCM2, CDC7 e ATP a um composto de qual-quer uma das realizações anteriores. Em uma realização mais particular,fosforilação de Ser40 e/ou Ser108 é inibida sobre MCM2.

Uma outra realização da presente invenção provê uso de umcomposto de fórmula (I) ou (II) como um composto farmacêutico, particular-mente para o tratamento de câncer. Em outras realizações, a presente in-venção provê o uso de um composto de fórmula (I) ou (II) na fabricação deum medicamento para o tratamento de câncer.

Uma outra realização da presente invenção provê um processode seleção para inibição de atividade de CDC7 por um composto compreen-dendo MCM2, CDC7 e ATP a um composto, e monitoração para fosforilaçãode Ser108 sobre MCM2.

Uma outra realização provê um processo de identificação de ati-vidade cinase de CDC7 compreendendo monitoração de fosforilação deSer108 sobre MCM2, onde fosforilação de Ser108 indica atividade de CDC7.Uma realização mais particular ainda provê monitoração para fosforilação deSer40 sobre MCM2. Em uma realização mais particular, o dito processo deidentificação de atividade de CDC7 é para a identificação de um inibidor deCDC7. Em uma realização mais particular, o dito processo de identificaçãode atividade de CDC7 é para identificação de um paciente em necessidadede um inibidor de CDC7. Ainda mais particularmente, o dito paciente estásofrendo de câncer.

Uma outra realização provê um processo para seleção de inibi-dores de CDC7 compreendendo: exposição de um potencial inibidor a CDC7e MCM2 e monitoração para fosforilação de Ser108 sobre MCM2, onde odito inibidor de CDC7 é identificado por reduzida fosforilação de Ser108 so-bre MCM2. Uma realização mais particular compreende exposição de poten-cial inibidor a CDC7, MCM2 e ATP. Em uma realização mais particular a ditareduzida fosforilação de Serl 08 sobre MCM2 é identificada por reduzido es-gotamento de ATP.

A presente invenção provê composições farmacêuticas compre-endendo pelo menos um composto inibidor de CDC7 (por exemplo, umcomposto de fórmulas (I) ou (II) junto com um carreador farmaceuticamenteaceitável apropriado para administração a um sujeito humano ou animal,tanto sozinho ou junto com outros agentes anticâncer.

Em uma realização, a presente invenção provê processos detratamento de sujeitos humanos ou animais sofrendo de uma doença prolife-rativa celular, tal como câncer. Cânceres representativos tratáveis de acordocom a invenção incluem, mas não são limitados a, carcinoma tal como carci-nomas de bexiga, mama, cólon, rim, fígado, fígado, pulmão, incluindo câncerde pulmão de célula pequena, esôfago, vesícuía biliar, ovário, pâncreas, es-tômago, cérvice, tiróide, próstata, e de pele, incluindo carcinoma de célulaescamosa; tumores hematopoiéticos de linhagem linfóide, incluindo leucemi-a, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de célulaB, linfoma de célula T, linfoma de Hodgkin, linfoma não-Hodgkin, linfoma decélula peluda e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos de linhagemmielóide, incluindo leucemias mielógenas aguda e crônica, síndrome mielo-displástica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, in-cluindo fibrossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervosocentral e periférico, incluindo astrocitoma, neuroblastoma; glioma e schwan-nomas; e outros tumores incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma,osteossarcoma, xeroderma pigmentosum, ceratoxantoma, câncer folicular detiróide e sarcoma de Kaposi. A presente invenção provê processos de trata-mento de um sujeito humano ou animal em necessidade de tal tratamento,compreendendo administração ao sujeito de uma quantidade terapeutica-mente efetiva de um composto inibidor de CDC7 de fórmulas (I) ou (II), tantosozinho como em combinação com outros agentes anticâncer.

Em particular, composições serão tanto formuladas juntas comouma combinação terapêutica como administradas separadamente. Agentesanticâncer para uso com a invenção incluem, mas não são limitadas a, umou mais do seguinte mostrado abaixo:

A. Inibidores de Cinase

Inibidores de cinase para uso como agentes anticâncer em con-

junção com as composições da presente invenção incluem inibidores de ci-nases receptoras de fator de crescimento de epiderme (EGFR) tais comoquinazolinas de molécula pequena, por exemplo, gefitinibe (US 5457105, US5616582, e US 5770599), ZD-6474 (WO 01/32651), erlotinibe (Tarceva, US5 747 498 e WO 98/30347), e Iapatinibe (US 6 727 256 e WO 02/02552);inibidores de cinase receptora de fator de crescimento endotelial vacular(VEGFR), incluindo SU-11248 (Sutent, WO 01/60814), SU 5416 (US 5 883113 e WO 99/61422), SU 6668 (US 5 883 113 e WO 99/61422), CHIR-258(US 6 605 617 e US 6 774 237), vatalanibe ou PTK-787 (US 6 258 812),VEGF-Trap (WO 02/57423), B43-Genisteína (WO 09606116), fenretinida (p-hidroxi fenil amina de ácido retinóico) (US 4 323 581), IM-862 (WO02/62826), bevacizumabe ou Avastina (WO 94/10202), KRN-951, 3-[5-(metilsulfonil piperadina metil) indolil] quinolona, AG-13736 e AG-13925, pirrol[2,1-f][1,2,4] triazinas, ZK-304709, Veglina, VMDA-3601, EG-004, CEP-701 (US5621 100), Cand5 (WO 04/09769); inibidores de Erb2 tirosina cinase comopertuzumabe (WO 01/00245), trastuzumabe e rituximabe; inibidores de Aktproteína cinase, como RX-0201; inibidores de proteína cinase C (PKC), co-mo LY-317615 (WO 95/17182), e perifosina (US 2003171303); inibidores deRaf/Map/MEK/Ras cinase incluindo sorafenibe (BAY 43-9006), ARQ-350RP,LErafAON, BMS-354825 AMG-548, e outros mostrados em WO 03/82272;inibidores de cinase de receptor de fator de crescimento dè fibroblasto (FG-FR); inibidores de cinase dependente de célula (CDK), incluindo CYC-202 ouroscovitina (WO 97/20842 e WO 99/02162); inibidores de cinase receptor defator de crescimento derivado de plaqueta (PGFR) tais como CHIR-258, 3G3mAb, AG-13736, SU-11248 e SU 6668; e inibidores de Bcr-Abl cinase e pro-teínas de fusão como STI-571 ou Gleevec (imatinibe).

B. Anti-estrogêniosAgentes que têm por alvo estrogênio para uso em terapia anti-câncer em conjunção com as composições da presente invenção incluemModuladores de Receptor de Estrogênio seletivos (SERMs) incluindo tamoxi-feno, toremifeno, raloxifeno; inibidores de aromatase incluindo Arimidex ouanastrazol; Reguladores Descendentes de Receptor de Estrogênio (ERDs)incluindo Faslodex ou fulvestrante.

C. Anti-androgênios

Agentes que têm por alvo androgênio para uso em terapia anti-câncer em conjunção com as composições da presente invenção incluem flutamida, bicalutamida, finasterida, aminoglutetamida, cetoconazol, e corti-costeróides.

D. Outros Inibidores

Outros inibidores para uso como agentes anticâncer em conjun-ção com as composições da presente invenção incluem inibidores de proteí- na farnesil transferase incluindo tipifarnibe ou R-115777 (US 2003134846 eWO 97/21701), BMS-214662, AZD-3409, e FTI-277; inibidores de topisome-rase incluindo merbarone e difiomotecano (BN-80915); inibidores de proteínade haste cinesina mitótica (KSP) incluindo SB-743921 e MKI-833; modulado-res de protease como bortezomibe ou Velcade(US 5 780 454), XL-784; e inibidores de ciclo oxigenase 2 (COX-2) incluindo drogas antiinflamatóriasnão-esteroidais I (NSAIDs).

E. Drogas Quimioterapêuticas de Câncer

Particulares agentes quimioterapêuticos para uso como agentesanticâncer em conjunção com as composições da presente invenção inclu- em anastrozole (Arimidex), bicalutamida (Casodex), sulfato de bleomicina(Blenoxane), busulfano (Myleran), injeção busulfano (Busulfex), capecitabina(Xeloda), N4-pentoxi carbonil-5-desoxi-5-flúor citidina, carboplatina (Paraplâ-tin), carmustina (BiCNU)1 clorambucil (Leukeran), cisplatina (Platinõl), cladri-bina (Leustatina), ciclo fosfamida (Cytoxan ou Neosar), citarabina, citosina arabinosídeo (Cytosar-U), injeção de Iipossoma de citarabina (DepoCyt),dacarbazina (DTIC-Dome), dactinomicina (Actinomicina D, Cosmegan), clo-ridrato de daunorubicina (Cerubidina), injeção de Iipossoma de citrato dedaunorubicina (DaunoXome), dexametasona, docetaxel (Taxotere, US2004073044), cloridrato de doxorubicina (Adriamicina, Rubex), etoposida(Vepesid)1 fosfato de fludarabina (FIudara)1 5-flúor uracila (Adrucil, Efudrx),flutamida (EuIexin)1 tezaeitabina, Gemcitabina (diflúor desoxi citidina), hidroxiuréia (Hydrea), Idarubicina (Idamicina), ifosfamida (IFEX)1 irinotecano((Camptosar)1 L-asparaginase (ELSPAR), Ieucovorina cálcio, melfalam (Alke-ran), 6-mercapto purina (Purinethol), metotrexato (Folex), mitoxantrona (No-vantrona), milotarg, paclitaxel (Taxol), phoenix (Yttrium90/MX-DTPA), pen-tostatina, polifeprosan 20 com implante de carmustina (Gliadel), citrato detamoxifeno (Nolvadex), teniposida (Vumon), 6-tioguanina, tiotepa, tirapaza-mina (Tirazone)1 cloridrato de topotecano para injeção (Hycamptin), vinblas-tina (Velban), vincristina (Oncovin)1 e vinorelbina (Navelbine).

F. Agentes Alquilantes

Agentes alquilantes para uso em conjunção com as composi-ções da presente invenção para compostos terapêuticos anticâncer incluemVNP-40101M ou cloretizina, oxaliplatina (US 4 169 846, WO 03/24978 e WO03/04505), giufosfamida, mafosfamida, etopofos (US 5 041 424), prednimus-tina; treosulfano; bussulfano; irofluveno (acil fulveno); penclomedina; pirazolacridina (PD-115934); 06-benzil guanina; decitabina (5-aza-2-desoxi citidi-na); brostalicina; mitomicina C (MitoExtra); TLK-286 (Telcyta); temozolomida;trabectedina (US 5 478 932); AP-5280 (formulação platinada de cisplatina);porfiromicina; e clearazida (mecloretamina).

G. Agentes Quelantes

Agentes quelantes para uso em conjunção com as composiçõesda presente invenção para compostos terapêuticos anticâncer incluem tetratiomolibdato (WO 01/60814); RP-697; Quimérico T84.66 (CT84.66); gadofos-veset (Vasovist); deferoxamina; e bleomicina opcionalmente em combinaçãocom eletroporação (EPT).

H. Modificadores de Resposta Biológica

Modificadores de resposta biológica, tais como moduladores i-munes, para uso em conjunção com as composições da presente invençãopara terapêuticos anticâncer incluem staurosporina e seus análogos macro-cíclicos, incluindo UCN-01, CEP-701 e midostaurina (ver, WO 02/30941, WO97/07081, WO 89/07105, US 5 621 100, WO 93/07153, WO 01/04125, WO02/30941, WO 93/08809, WO 94/06799, WO 00/27422, WO 96/13506 e WO88/07045; squalamina (WO 01/79255); DA-9601 (WO 98/04541 e US 6 025387); alemtuzumabe; interferons Por exemplo, IFN-a, IFN-b, etc.); interleuci-nas, especificamente IL-2 ou aldesleucina assim como IL-1, IL-3, IL-4, IL-5,IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, e suas variantes biológicas ativastendo seqüências de aminoácidos maiores que 70% da seqüência humananativa; altretamina (Hexalen); SU 101 ou Ieflunomida (WO 04/06834 e US 6331 555); imidazoquinolinas tais como resiquimode e imiquimode (US 4 689338, 5 389 640, 5 268 376, 4 929 624, 5 266 575, 5 352 784, 5 494 916, 5482 936, 5 346 905, 5 395 937, 5 238 944 e 5 525 612); e SMIPs, incluindobenzazóis, antraquinonas, tio semicarbazonas, e triptantrinas (WO 04/87153,WO 04/64759, e WO 04/60308).

I. Vacinas de Câncer:

Vacinas anticâncer para uso em conjunção com as composiçõesda presente invenção incluem Avicina (Tetrahedron Letters 26, 1974, 2269-70); oregovomabe (OvaRex); Theratope (STn-KLH); vacinas melanoma; sé-ries GI-4000 (GI-4014, GI-4015, e GI-4016), que são direcionadas para cincomutações na proteína Ras; Glio Vax-1; Mela Vax; Advexina ou INGN-201WO 95/12660); Sig/E7/LAMP-1, codificando HPV-16 E7; Vacina MAGE-3 ouM3TK (WO 94/05304); HER-2VAX; ACTIVE, que estimula células-T especí-ficas para tumores; vacina de câncer GM-CSF; e vacinas baseadas em mo-nocitogenes de Listeria.

J. Terapia Anti-Sentido

Agentes anticâncer para uso em conjunção com as composiçõesda presente invenção também incluem composições anti-sentido, tais comoAEG-35156 (GEM-640); AP-12009 e AP-11014 oligonucleotídeos anti-sentido específicos para TGF-beta2); AVI-4126; AVI-4557; AVI-4472; obli-mersen (Genasense); JFS2; aprinocarsen (WO 97/29780); GTI-2040 (R2ribonucleotídeo redutase ARNm anti-sentido oligo) (WO 98/05769); GTI-2501 (WO 98/05769); oligo desoxi nucleotídeos anti-sentido c-Raf encapsu-lados em lipossoma (LErafAON) (WO 98/43095); e Sirna-027 (terapêuticobaseado em RNAi tendo por alvo ARNm VEGFR-1).

Os compostos da invenção também podem ser combinados emuma composição farmacêutica com substâncias drogas anti-histamina oubroncodilatadoras. Tais drogas broncodilatadoras incluem anticolinérgicos ouagentes anti-muscarínicos, em particular brometo de ipatropium, brometo deoxitropium, e brometo de tiotropium, e agonistas de β-2-adreno receptor taiscomo salbutamol, terbutalina, salmeteròl e, especialmente, formoterol. Subs-tâncias drogas anti-histamina co-terapêutica incluem cloridrato de cetirizina,fumarato de clemastina, prometazina, loratadina, desloratadina, difenidrami-na e cloridrato de fexofenadina.

Os compostos da invenção também podem ser combinados emuma composição farmacêutica com compostos que são úteis para o trata-mento de uma doença trombolítica, doença do coração, acidente vascularcerebral, etc., (por exmeplo, aspirina, streptocinase, ativador de plasminogê-nio de tecido, urocinase, anticoagulantes, drogas anti-plaqueta (por exemplo,PLAVIX; bissulfato de clopidogrel), uma estatina (por exemplo, LlPITOR ouAtorvastatina cálcio), ZOCOR (Simvastatina), CRESTOR (Rosuvastatina),etc.), um bloqueador Beta (por exemplo, Atenolol), NORVASC (besilato deanlodipina), e um inibidor de ACE (por exemplo, lisinopril).

Os compostos da invenção também podem ser combinados emuma composição farmacêutica com compostos que são úteis para o trata-mento de agentes anti-hipertensão tais como, inibidores de ACE, agentes dediminuição de lipídeo tais como estatinas, LIPITOR (Atorvastatina cálcio),bloqueadores de canal de cálcio como NORVASC (besilato de anlodipina).Os compostos da presente invenção também podem ser usados em combi-nação com fibratos, beta - bloqueadores, inibidores de NEPI, antagonistasde receptor de angiotensina-2 e inibidores de agregação de plaqueta.

Para o tratamento de doenças inflamatórias, incluindo artritereumatóide, os compostos da invenção podem ser combinados com agentestais como inibidores de TNF-α tais como anticorpos monoclonais anti-TNF-a(como REMICADE, CDP-870) e D2E7 (HUMIRA) e moléculas de fusão deimunoglobulina receptora de TNF (tal como ENBREL), IL-IRa solúvel ouantagonistas de receptor, inibidores de IL-1 (por exemplo, KINERET ou inibi-dores de ICE)agentes antiinflamatórios não-esteroidais (NSAIDS), piroxicam,diclofenaco, naproxeno, flurbiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno, ibuprofeno,fenamatos, ácido mefenâmico, indometacina, sulindac, apazona, pirazolo-nas, fenil butazona, aspirina, inibidores de COX-2 (tais como CELEBREX(celecoxibe), PREXIGE (Iumiracoxibe)Jnibidores de metaloprotease (prefe-rivelmente inibidores seletivos de MMP-13), inibidores de p2x7, inibidores deα2δ, NEUROTINA, pregabalina, metotrexato de baixa dose, leflunomida, hi-droxicloroquina, d-penicilamina, auranofina ou ouro parenteral ou oral.

Os compostos da invenção também podem ser usados em com-binação com os agentes terapêuticos existentes para o tratamento de osteo-artrite. Agentes apropriados para serem usados em combinação incluemagentes antiinflamatórios não-esteroidais padrões (daqui por dianteNSAID's) tais como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiônicos como napro-xeno, flurbiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno, e ibuprofeno, fenamatos taiscomo ácido mefenâmico, indometacina, sulindac, apazona, pirazolonas co-mo fenil butazona, salicilatos como aspirina, inibidores de COX-2 como cele-coxibe, valdecoxibe, lumiracoxibe, e etoricoxibe, analgésicos e terapias intra-articular tais como corticosteróides e ácidos hialurônicos como hyalgano esynvisc.

Os compostos da invenção também podem ser usados em com-binação com agentes antivirais como Viracept, AZT, aciclovir e famciclovir, ecompostos anti-sepsia como Valante.

Os compostos da presente invenção também podem ser usadosem combinação com agentes de CNS tais como antidepressivos (sertralina),drogas anti-Parkinsonianas (como deprenil, L-dopa, Requipe, Mirapex, inibi-dores de MAOB como selegina e rasagilina, inibidores de comP, como Tas-mar, inibidores de A-2, inibidores de retomada de dopamina, antagonistas deNMDA, agonistas de nicotina, agonistas de dopamina, e inibidores de oxidonítrico neuronal sintase), e drogas anti-Alzheimer como donepezil, tacrina,inibidores de α2β, NEUROTIN, pregabalina, inibidores de COX-2, propentofi-lina ou metrifonato.

Os compostos da presente invenção também podem ser usadosem combinação com agentes de osteoporose como EVISTA (cloridrato deraloxifeno), droloxifeno, Iasofoxifeno ou fosomax e agentes imuno-supressores tais como FK-506 e rapamicina.

Em um outro aspecto da invenção, kits que incluem um ou maiscompostos da invenção são providos. Kits representativos incluem um com-posto inibidor de CDC7 da invenção (por exemplo, um composto de fórmulas(I)-(II)) e uma inserção de embalagem ou outra etiquetagem incluindo instru-ções para tratamento de uma doença proliferativa celular através de admi-nistração de uma quantidade do composto inibidora de CDC7.

Um outro aspecto da invenção provê sítios de fosforilação CDC7funcionalmente importantes sobre MCM2. Genericamente, um mecanismo éprovido através do qual fosforilação mediada por CDC7 do complexo MCMcontribui para ativação de origem. Na direção desta meta, uma análise deta-lhada dos específicos sítios sobre MCM2 fosforilada pelo complexo CDC7 /Dbf4 usando separação de peptídeo e espectrometria de massa tandem foirealizada. Uma análise in vitro foi feita de modo a ter suficientes peptídeospara render um "mapa" de primeira passo de sítios de fosforilação específi-cos putativos. Subseqüente verificação mostrou que estes mesmos sítiossão fosforilados in vivo usando nocaute mediado por RNAi de Dbf4 em célu-las de câncer de pulmão A549. O fluxo de trabalho in vitro para in vivo e me-todologia de análise são suficientemente genéricas de modo que outrossubstratos cinase de interesse podem ser mapeados e validados.

Mapeamento de sítio de fosforilação usando proteômicos e es-pectrometria de massa continua a apresentar um desafio devido a relativa-mente baixa abundância de fosfopeptídeos. Por isso, muitos estudos focali-zaram sobre o enriquecimento de fosfopeptídeos usando cromatografia dequelação de metal tal como IMAC-Fe ou IMAC-Ga. (Posewitz, Anal. Chém.71:2883-2892 (1999). Entretanto estes processos sofrem de pobre capaci-dade devido a ligação não-específica de peptídeos ácidos. Tipicamente, so-mente os fosfopeptídeos mais abundantes são capturados, mesmo em pro-teínas "modelos" como caseína ou ovalbumina.

Mais recentemente, Beausoleil et al., "Large-scale characteriza-tion of HeLa cell nuclear phosphoproteins" PNAS 101 (33): 12130-12135(2004) descreveram um novo processo para enriquecer fosfopeptídeos quese baseia no diferencial de carga entre peptídeos trípticos fosforilados e não-modificados. Usando cromatografia de troca de cátion forte em baixo pH,fosfopeptídeos podem ser separados. As resultantes frações foram entãoseparadas sobre LCMS de fase reversa. Usando esta abordagem, fosfopro-teínas nucleares em células HeLa foram caracterizadas e foram verificados 2002 sítios de fosforilação de 967 proteínas. Esta abordagem em grandeescala permitiu a identificação automatizada de cinco sítios de fosforilaçãosobre MCM2 em células HeLa.

Um aspecto mais particular da invenção provê uma caracteriza-ção detalhada e completa dos sítios de fosforilação sobre uma proteína sim- pies usando espectrometria de massa, seguida por confirmação de Westernblotting dos sítios encontrados. Por isso, um processo de baixa produtivida-de que emprega HPLC de fase reversa fora de linha seguida por espectro-metria de massa tanem MALDI-qTOF sobre cada uma das frações de HPLCfoi usado (Krokhin et al., "MALDI QqTOF MS combined off-line HPLC for characterization of protein primary structure and post-translational modificati-ons" J Biomol Tech 16(4)429-440 (2005)). Enriquecimento de fosfopeptídeosnão é requerido, por isso peptídeos não são especificamente excluídos deanálises. Usando esta metodologia, a identificação de sítios de fosforilaçãosobre MCM2 in vitro e in vivo que são especificamente mediados pelo com- plexo de CDC7 / Dbf4 cinase é descrita. Aproximadamente 75% de cobertu-ra de seqüência de MCM2 imuno - purificada de inteiro comprimento in vivofoi obtida. Em adição aos sítios previamente encontrados por outros estudos,um novo sítio mediado por CDC7 / Dbf4 foi identificado (S108). Este sítio foipreviamente verificado ser fosforilado por ATR em resposta a dano de ADN. Entretanto, nossas verificações demonstram que na ausência de dano deADN exógeno, S108 sobre MCM2 é fosforilada pelo heterodímero CDC7 /Dbf4.As seguintes definições de termos são usadas neste relatóriodescritivo e reivindicações.

"Alquila" refere-se a grupos hidrocarbila alifáticos saturados mo-novalentes tendo de 1 a 10 átomos de carbono e preferivelmente 1 a 6 áto-mos de carbono. Este termo inclui, a título de exemplo, grupos hidrocarbilalineares e ramificados tais como metila (CH3-), etila (CH3CH2-), n-propila(CH3CH2CH2-), isopropila ((CH3)2CH-), n-butila (CH3CH2CH2CH2-), isobutila((CH3)2CHCH2-), s-butila ((CH3)(CH3CH2)CH-), t-butila ((CH3)3C-), n-pentila(CH3CH2CH2CH2CH2-), e neopentila (((CH3)3CCH2-).

"Alquila substituído" refere-se a um grupo alquila tendo de 1 a 5,preferivelmente 1 a 3, ou mais preferivelmente 1 a 2 substituintes seleciona-dos do grupo consistindo em alcoxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aci-loxi, amino, amino substituído, amino carbonila, amino tiocarbonila, aminocarbonil amino, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, amino sulfonila,amino sulfoniloxi, amino sulfonil amino, amidino, arila, arila substituído, arilo-xi, ariloxi substituído, aril tio, aril tio substituído, carboxila, carboxil éster,(carboxil éster) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, ciclo alquila, ciclo alquilasubstituído, ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído, ciclo alquil tio, ciclo al-quil tio substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, ciclo alquenilo-xi, ciclo alqueniloxi substituído, ciclo alquenil tio, ciclo alquenil tio substituído,guanidino, guanidino substituído, halo, hidroxi, hetero arila, hetero arila subs-tituído hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, hetero aril tio, hetero aril tiosubstituído, hetero cíclico, heterocíclico substituídohetero cicliloxi, heterocicliloxi substituído, hetero ciclil tio, hetero ciclil tio substituído, nitro, SO3H,sulfonila substituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, e alquil tio substituído,onde os ditos substituintes são aqui definidos.

"Alcoxi" refere-se ao grupo -O-alquila onde alquila é aqui defini-do. Alcoxi inclui, a título de exemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, t-butoxi, sec-butoxi e n-pentoxi.

"Alcoxi substituído" refere-se ao grupo -O- (alquila substituído)onde alquila substituído é aqui definido.

"Acila" refere-se aos grupos H-C-(O)-, alquil-C(O)-, alquil substi-tuído-C(O)-, alquenil-C(O)-, alquenil substituído-C(O)-, alquinil-C(O)-, alquinilsubstituído-C(O)-, ciclo alquil-C(O)-, ciclo alquil substituído-C(O)-, ciclo al-quenil-C(O)-, ciclo alquenil substituído-C(O)-, aril-C(O)-, aril substituído-C(O)-, hetero aril-C(O)-, hetero aril substituído-C(O)-, hetero cíclico-C(O)-, ehetero cíclico substituído-C(O)-, onde alquila, alquila substituído, alquenila,alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquilasubstituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituídosão como aqui definidos. Acila inclui o grupo "acetila" CH3C(O)-.

"Acil amino" refere-se aos grupos -NRC(O) alquila, -NRC(O) al-quila substituído, -NRC(O) ciclo alquila, -NRC(O) ciclo alquila substituído, -NRC(O) ciclo alquenila, -NRC(O) ciclo alquenila substituído, -NRC(O) alque-nila, -NRC(O) alquenila substituído, -NRC(O) alquinila, -NRC(O) alquinilasubstituído, -NRC(O) arila, -NRC(O) arila substituído, -NRC(O) hetero arila, -NRC(O) hetero arila substituído, -NRC(O) hetero cíclico, e -NRC(O) heterocíclico substituído onde R é hidrogênio ou alquila e onde alquila, alquilasubstituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído são como aqui definidos.

"Aciloxi" refere-se aos grupos alquil-C(O)O-, alquil-C(O)O- subs-tituído, alquenil-C(O)O-, alquenil substituído-C(O)O-, alquinil-C(O)O-, alquinilSubStituido-C(O)O-, aril-C(O)O-, aril substituído-C(O)O-, ciclo alquil-C(O)O-,ciclo alquil substituído—C(O)O-, ciclo alquenil-C(O)O-, ciclo alquenil substitu-ído-C(O)O-, hetero aril-C(O)O-, hetero aril substituído-C(O)O-, hetero cíclico-C(O)O-, e hetero cíclico substituído-C(O)O- onde alquila, alquila substituído,alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila,ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arilasubstituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cícli-co substituído são como aqui definidos.

"Amino" refere-se ao grupo -NH2.

"Amino substituído" refere-se ao grupo -NR'R" onde R' e R" sãoselecionados independentemente do grupo consistindo em hidrogênio, alqui-Ia1 alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinilasubstituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, cicloalquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arila substituído,hetero cíclico, hetero cíclico substituído, -SO2-alquila, -SO2-alquila substituí-do, -SO2-alquenila, -SO2 alquenila substituído, -SO2 ciclo alquila, -SO2 cicloalquila substituído, -SO2 ciclo alquenila, -SO2 ciclo alquenila substituído, -SO2 arila, -SO2 arila substituído, -SO2 hetero arila, -SO2 hetero arila substitu-ído,, -SO2 hetero cíclico e -SO2 hetero cíclico substituído e onde R' e R" es-tão opcionalmente ligados, junto com o nitrogênio ligado aos mesmos paraformação de um grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, contantoque R' e R" não sejam ambos hidrogênio, e onde alquila, alquila substituído,alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila,ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arilasubstituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cícli-co substituído são como aqui definidos. Quando R' é hidrogênio e R" é alqui-la, o grupo amino substituído é algumas vezes aqui referido como alquil ami-no. Quando R' e R" são alquila, o grupo amino substituído é algumas vezesaqui referido como dialquil amino. Quando referindo a um amino mono -substituído, é pretendido que tanto R' como R" seja hidrogmas não ambos.Quando referindo a um amino di-substituído, é pretendido que nem R1 nemR" é hidrogênio.

"Amino carbonila" refere-se ao grupo -C(O)NR10Rn onde R10 eR11 são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidrogê-nio, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, al-quinila substituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituí-do, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arila substi-tuído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído e onde R10 e Rn estão op-cionalmente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formação deum grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alquilasubstituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído como aqui definido.

"Amino tiocarbonila" refere-se ao grupo -C(S)NR10Ri 1 onde Ri0e Rn são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidro-gênio, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila,alquinila substituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arilasubstituído, hetero cíclico, e hetero cíclico substituído e onde R-io e Rn estãoopcionalmente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formaçãode um grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alqui-la substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído são como aqui definidos.

"Amino carbonil amino" refere-se ao grupo -NRC(O)NRioRnonde R é hidrogênio ou alquila e Ri0 e Rn são selecionados independente-mente do grupo consistindo em hidrogênio, alquila, alquila substituído, al-quenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila subs-tituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenilasubstituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cícli-co substituído e onde Rio e Rn estão opcionalmente ligados com o nitrogê-nio ligado aos mesmos para formação de um grupo hetero cíclico ou heterocíclico substituído, e onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenilasubstituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substitu- ido, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, heteroarila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído sãocomo aqui definidos.

"Amino tiocarbonil amino" refere-se ao grupo -NRC(S)NRi0Rnonde R é hidrogênio ou alquila e Rio e Rn são selecionados independente-mente do grupo consistindo em hidrogênio, alquila, alquila substituído, al-quenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila subs-tituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenilasubstituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cícli-co substituído e onde R10 e R11 estão opcionalmente ligados com o nitrogê-nio ligado aos mesmos para formação de um grupo hetero cíclico ou heterocíclico substituído, e onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenilasubstituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substitu-ído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, heteroarila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído sãocomo aqui definidos.

"Amino carboniloxi" refere-se ao grupo -O-C(O)NR10R11 onde R10e R11 são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidro-gênio, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila,alquinila substituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arilasubstituído, hetero cíclico, e hetero cíclico substituído e onde R10 e R11 estãoopcionalmente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formaçãode um grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alqui-la substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído são como aqui definidos.

"Amino sulfonila" refere-se ao grupo -SO2NR10R11 onde R10 e R11são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidrogênio,alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinilasubstituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, cicloalquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arila substituído,hetero cíclico, e hetero cíclico substituído e onde R10 e R11 estão opcional-mente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formação de umgrupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alquilasubstituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído são como aqui definidos."Amino sulfoniloxi" refere-se ao grupo -O-SO2NRi0Rh onde Ri0e Rn são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidro-gênio, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila,alquinila substituído, ariia, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arilasubstituído, hetero cíclico, e hetero cíclico substituído e onde R10 e Rn estãoopcionalmente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formaçãode um grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alqui-la substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclicoe hetero cíclico substituído são como aqui definidos.

"Amino sulfonil amino" refere-se ao grupo -NR-SO2NR10Rii ondeR é hidrogênio ou alquila e Ri0 e Rn são selecionados independentementedo grupo consistindo em hidrogênio, alquila, alquila substituído, alquenila,alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, arila, arila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cíclico subs-tituído e onde R-ιο e Rn estão opcionalmente ligados com o nitrogênio ligadoaos mesmos para formação de um grupo hetero cíclico ou hetero cíclicosubstituído, e onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituí-do, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, cicloalquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, hetero arila, he-tero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído são como a-qui definidos.

"Amidino" refere-se ao grupo -C(=NR12)RioRii onde Ri0, Rn eR12 são selecionados independentemente do grupo consistindo em hidrogê-nio, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, al-quinila substituído, arila, arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituí-do, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, hetero arila, hetero arila substi-tuído, hetero cíclico, e hetero cíclico substituído e onde Ri0 e Rn estão op-cionalmente ligados com o nitrogênio ligado aos mesmos para formação deum grupo hetero cíclico ou hetero cíclico substituído, e onde alquila, alquilasubstituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituí-do, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído são como aqui definidos.

"Arila" ou "Ar" refere-se a um grupo carbocíclico aromático mo-novalente de 6 a 14 átomos de carbono tendo um anel simples (por exem-plo, fenila) ou anéis condensados múltiplos (por exemplo, naftila ou antrila)cujos anéis condensados podem ou não ser aromáticos (por exmeplo, 2- benzoxazolinona, 2H -1,4-benzoxazin-3 (4H)-ona-7-ila, e semelhantes) con-tanto que o ponto de ligação esteja em um átomo de carbono aromático.Grupos arila preferidos incluem fenila e naftila.

"Arila substituído" refere-se a grupos arila que são substituídoscom 1 a 5, preferivelmente 1 a 3, ou mais preferivelmente 1 a 2 substituintes selecionados do grupo consistindo em alquila, alquila substituído, alquenila,alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, alcoxi, alcoxi substituí-do, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído, amino carbonila, ami-no tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonil amino, amino car-boniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonil amino, amidino, arila, arila substituído, ariloxi, ariloxi substituído, aril tio, aril tio substituído,carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxil éster) oxi, ciano,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alquilòxi substituí-do, ciclo alquil tio, ciclo alquil tio substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenilasubstituído, ciclo alqueniloxi, ciclo alqueniloxi substituído, ciclo alquenil tio, ciclo alquenil tio substituído, guanidino, guanidino substituído, halo, hidroxi,hetero arila, hetero arila substituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído,hetero aril tio, hetero aril tio substituído, heterocíclico, heterocíclico substituí-do, hetero cicliloxi, hetero cicliloxi substituído, hetero ciclil tio, hetero ciclil tiosubstituído, nitro, SO3H, sulfonila substituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquiltio, e alquil tio substituído, onde os ditos substituintes são aqui definidos.

"Ariloxi" refere-se ao grupo -O-arila, onde arila é como aqui defi-nido, que inclui, a título de exemplo, fenoxi e naftoxi."Ariloxi substituído" refere-se ao grupo -0-(arila substituído) on-de arila substituído é como aqui definido.

"Aril tio" refere-se ao grupo -S-arila, onde arila é como aqui defi-nido.

"Aril tio substituído" refere-se ao grupo -S-(arila substituído), on-de arila substituído é como aqui definido.

"Alquenila" refere-se ao grupo alquenila tendo de 2 a 6 átomosde carbono e preferivelmente 2 a 4 átomos de carbono e tendo pelo menos 1e preferivelmente de 1 a 2 sítios de insaturação alquenila. Tais grupos são exemplificados por vinila, alila e but-3-em-1 -ila.

"Alquenila substituído" refere-se a grupos alquenila tendo de 1 a3 substituintes, e preferivelmente 1 a 2 substituintes, selecionados do grupoconsistindo em alcoxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino,amino substituído, amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil ami-no, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfo-niloxi, amino sulfonil amino, amidino, arila, arila substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, aril tio, aril tio substituído, carboxila, carboxil éster, (carboxil és-ter) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído, ciclo alquil tio, ciclo alquil tio substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, ciclo alqueniloxi, ciclo al-queniloxi substituído, ciclo alquenil tio, ciclo alquenil tio substituído, guanidi-no, guanidino substituído, halo, hidroxi, hetero arila, hetero arila substituído,hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, hetero aril tio, hetero aril tio substitu-ído, heterocíclico, heterocíclico substituído, hetero cicliloxi, hetero cicliloxisubstituído, hetero ciclil tio, hetero ciclil tio substituído, nitro, SO3H, sulfonilasubstituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, e alquil tio substituído, onde osditos substituintes são aqui definidos e com a condição de que qualquersubstituição hidroxi não está ligada a um átomo de carbono vinila (insatura-do).

"Alquinila" refere-se a grupos alquinila tendo de 2 a 6 átomos decarbono e preferivelmente 2 a 3 átomos de carbono e tendo pelo menos 1 epreferivelmente de 1 a 2 sítios de insaturação alquinila."Alquinila substituído" refere-se a grupos alquinila tendo de 1 a 3substituintes, e preferivelmente 1 a 2 substituintes, selecionados do grupoconsistindo em alcoxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino,amino substituído, amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil ami-no, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfo-niloxi, amino sulfonil amino, amidino, arila, arila substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, aril tio, aril tio substituído, carboxila, carboxil éster, (carboxil és-ter) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído, ciclo alquil tio, ciclo alquil tio substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, ciclo alqueniloxi, ciclo al-queniloxi substituído, ciclo alquenil tio, ciclo alquenil tio substituído, guanidi-no, guanidino substituído, halo, hidroxi, hetero arila, hetero arila substituído,hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, hetero aril tio, hetero aril tio substitu-ído, heterocíclico, heterocíclico substituído, hetero cicliloxi, hetero cicliloxisubstituído, hetero ciclil tio, hetero ciclil tio substituído, nitro, SO3H, sulfonilasubstituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, e alquil tio substituído, onde osditos substituintes são aqui definidos, e com a condição de que qualquersubstituição hidroxi não é ligada a um átomo de carbono acetilênico.

"Carbonila" refere-se ao grupo divalente -C(O)- que é equivalen-te a -C(=0)-.

"Carboxila" ou "carboxi" refere-se a -COOH ou seus sais.

"Carboxil éster" ou "carboxi éster" refere-se aos grupos -C(O)O-alquila, -C(0)0-alquila substituído, -C(0)0-alquenila, -C(0)0-alquenila subs-tituído, -C(0)0-alquinila, -C(0)0-alquinila substituído, -C(0)0-arila, -C(O)O-arila substituído, -C(0)0-ciclo alquila, -C(0)0-ciclo alquila substituído, -C(0)0-ciclo alquenila, -C(0)0-ciclo alquenila substituído, -C(0)0-hetero ari-la, -C(0)0-hetero arila substituído, -C(0)0-heterocíclico e -C(0)0-heterocíclico substituído onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila subs-tituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila, substituído, hetero ari-la, hetero arila substituído, hetero ccilico, e hetero cíclico substituído sãocomo aqui definidos."Carboxil éster) amino" refere-se ao grupo -NR-C(O)OaIquiIa1 -NR-C(0)0-alquila substituído, -NR-C(0)0-alquenila, -NR-C(0)0-alquenilasubstituído, -NR-C(0)0-alquinila, -NR-C(0)0-alquinila substituído, -NR-C(0)0-arila, -NR-C(0)0-arila substituído, -NR-C(0)0-ciclo alquila, -NR-C(O)O-Cido alquila substituído, -NR-C(0)0-ciclo alquenila, -NR-C(O)O-Cidoalquenila substituído, -NR-C(0)0-hetero arila, -NR-C(0)0-hetero arila substi-tuído, -NR-C(0)0-hetero cíclico, e -NR-C(0)0-hetero cíclico substituídoconde R é alquila ou hidrogênio, e onde alquila, alquila substituído, alquenila,alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquilasubstituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico, e hetero cíclico substituí-do são como aqui definidos.

"Inibidor de CDC7" é aqui usado para referir-se a um compostoque exibe uma IC5o com relação a atividade CDC7 de não mais que cerca de100 μΜ e mais tipicamente não mais que cerca de 50 μΜ, como medida noensaio in vitro de inibição de CDC7 / DBF4, como descrito no Exemplo 79,aqui abaixo. A "IC5o" é aquela concentração de inibidor que reduz a atividadede uma enzima (por exemplo, Raf cinase) para nível meio - máximo. Com-postos representativos da presente invenção foram verificados exibirem ati-vidade inibidora contra CDC7. Compostos da presente invenção preferivel-mente exibem uma IC50 com relação de CDC7 de não mais que cerca de 10μΜ, mais preferivelmente, não mais que cerca de 5 μΜ, mesmo mais prefe-rivelmente não mais que cerca de 1 μΜ, e mais preferivelmente não maisque cerca de 200 nM, como medida no ensaio de CDC7 aqui descrito.

"(carboxil éster) oxi" refere-se ao grupo -0-C(0)0-alquila, -O-C(0)0-alquila substituído, -0-C(0)0-alquenila, -0-C(0)0-alquenila substitu-ído, -0-C(0)0-alquinila, -0-C(0)0-alquinila substituído, -0-C(0)0-arila, -O-C(0)0-arila substituído, -0-C(0)0-ciclo alquila, -0-C(0)0-ciclo alquila subs-tituído, -O-C(O)O-Ciclo alquenila, -0-C(0)0-ciclo alquenila substituído, -O-C(0)0-hetero arila, -0-C(0)0-hetero arila substituído, -0-C(0)0-hetero cí-clico, e -0-C(0)0-hetero cíclico substituído onde alquila, alquila substituído,alquenila, alquenila substituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila,ciclo alquila substituído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arilasubstituído, hetero arila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cícli-co substituído são como aqui definidos.

"Ciano" refere-se ao grupo -CN."Ciclo alquila" refere-se a grupos alquila cíclicos de 3 a 10 áto-

mos de carbono tendo anéis cíclicos simples ou múltiplos incluindo sistemasde anéis fundidos, com ponte e spiro. Exemplos de apropriados grupos cicloalquila incluem adamantila, ciclo propila, ciclo butila, ciclo pentila, e ciclo octi-la.

"Ciclo alquenila" refere-se a grupos alquila cíclicos não-aromáticos de 3 a 10 átomos de carbono tendo anéis cíclicos simples oumúltiplos e tendo pelo menos uma insaturação de anel >C=C< e preferivel-mente de 1 a 2 sítios de insaturação de anel >C=C<.

"Ciclo alquila substituído" e "ciclo alquenila substituído" referem-se a um grupo ciclo alquila ou ciclo alquenila tendo de 1 a 5 ou preferivel-mente de 1 a 3 substituintes selecionados do grupo consistindo em oxo, tio-na, alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila, al-quimia substituído, alcoxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino,amino substituído, amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil ami-no, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfo-niloxi, amino sulfonil amino, amidino, arila, arila substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, aril tio, aril tio substituído, carboxila, carboxil éster, (carboxil és-ter) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído, ciclo alquil tio, ciclo alquil tio substi-tuído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, ciclo alqueniloxi, ciclo al-queniloxi substituído, ciclo alquenil tio, ciclo alquenil tio substituído, guanidi-no, guanidino substituído, halo, hidroxi, hetero arila, hetero arila substituído,hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, hetero aril tio, hetero aril tio substitu-ído, hetero cíclico, hetero cíclico substituído, hetero cicliloxi, hetero cicliloxisubstituído, hetero ciclil tio, hetero ciclil tio substituído, nitro, SO3H, sulfonilasubstituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, e alquil tio substituído, onde osditos substituintes são aqui definidos.do).

"Ciclo alquiloxi" refere-se a -O-ciclo alquila.

"Ciclo alquiloxi substituído" refere-se a -0-(ciclo alquila substituí-

"Ciclo alquil tio" refere-se a -S-ciclo alquila.

"Ciclo alquil tio substituído" refere-se a -S-(ciclo alquila substituído).

"Ciclo alqueniloxi" refere-se a -O-ciclo alquenila.

"Ciclo alqueniloxi substituído" refere-se a -0-(ciclo alquenila substituído).

"Ciclo alquenil tio" refere-se a -S-ciclo alquenila.

"Ciclo alquenil tio substituído" refere-se a -S-(ciclo alquenilasubstituído).

"Guanidino" refere-se ao grupo -NHC(=NH)NH2.

"Guanidino substituído" refere-se a -NRi3C(=NR13)N(Ri3)2 ondecada R13 é independentemente selecionado do grupo consistindo em hidro-gênio, alquila, alquila substituído, arila, arila substituído, hetero arila, heteroarila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído e dois grupos R13ligados a um átomo de nitrogênio guanidino comum são opcionalmente liga-dos com o nitrogênio ligados aos mesmos para formação de um grupo hete-ro cíclico ou hetero cíclico substituído, contanto que pelo menos um R13 nãoseja hidrogênio, e onde os ditos substituintes são como aqui definidos.

"Halo" ou "halogênio" refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo.

"Hidroxi" ou "hidroxila" refere-se ao grupo -OH.

"Hetero arila" refere-se a um grupo aromático de 1 a 10 átomosde carbono e 1 a 4 heteroátomos selecionados do grupo consistindo em oxi-gênio, nitrogênio e enxofre dentro do anel. Tais grupos hetero arila podemter um anel simples (por exmeplo, piridinila ou furila) ou múltiplos anéis con-densados (por exmeplo, indolizinila ou benzotienila) onde os anéis conden-sados podem ou não ser aromáticos e/ou conterem um heteroátomo contan-to que o ponto de ligação seja atravérs de um átomo do grupo hetero arilaaromático. Em uma realização, o átomo(s) de nitrogênio e/ou enxofre dogrupo hetero arila é opcionalmente oxidado para prover as metades N-óxido(Ν Ο), sulfinila ou sulfonila. Hetero arilas preferidos incluem piridinila, pir-rolila, indolila, tiofenila, e furanila.

"Hetero arila substituído" refere-se a grupos hetero arila que sãosubstituídos com 1 a 5, preferivelmente 1 a 3, ou mais preferivelmente 1 a 2substituintes selecionados do grupo consistindo no mesmo grupo de substi-tuintes definidos para arila substituído.

"Hetero ariloxi" refere-se a -O-hetero arila.

"Hetero ariloxi substituído" refere-se ao grupo -O-(hetero arilasubstituído).

"Hetero aril tio" refere-se ao grupo -S-hetero arila.

"Hetero aril tio substituído" refere-se ao grupo -S-(hetero arilasubstituído).

"Hetero ciclo" ou "hetero cíclico" ou "hetero ciclo alquila" ou "he-tero ciclila" refere-se a um grupo saturado ou insaturado tendo um anel sim-pies ou anéis múltiplos condensados, incluindo sistemas de anéis fundidos,com ponte e spiro, de 1 a 10 átomos de carbono e de 1 a 4 hetero átomosselecionados do grupo consistindo em nitrogênio, enxofre ou oxigênio dentrodo anel onde, em sistemas de anéis fundidos, um ou mais do anéis pode serciclo alquila, arila ou hetero arila contanto que o ponto de ligação seja atra-vés de anel não-aromático. Em uma realização, o átomo(s) de nitrogênioe/ou enxofre do grupo heterocíclico é opcionalmente oxidado para prover asmetades N-óxido, sulfinila, sulfonila.

"Hetero cíclico substituído" ou "hetero ciclo alquila substituído"ou "hetero ciclila substituído" refere-se a grupos hetero ciclila que são substi-tuídos com 1 a 5 ou preferivelmente 1 a 3 dos mesmos substituintes comodefinidos para ciclo alquila substituído.

"Hetero cicliloxi" refere-se ao grupo -O-hetero ciclila.

"Hetero cicliloxi substituído" refere-se ao grupo -O-(hetero ciclilasubstituído).

"Hetero ciclil tio" refere-se ao grupo -S-hetero ciclila.

"Hetero ciclil tio substituído" refere-se ao grupo -S-(hetero ciclilasubstituído).Exemplos de hetero ciclo e hetero arilas incluem, mas não sãolimitados a, azetidina, pirrol, imidazol, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina,piridazina, indolizina, isoindol, indol, diidroindol, indazol, purina, quinolizina,isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftil piridina, quinoxalina, quinazolina, cino-lina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, fenantrolina, isotia-zol, fenazina, isoxazol, fenoxazina, fenotiazina, imidazolidina, imidazolina,piperidina, piperazina, indolina, ftalimida, 1,2,3,4-tetraidro isoquinolina,4,5,6,7-tetraidro benzo[b]tiofeno, tiazol, tiazolidina, tiofeno, benzo[b]tiofeno,morfolinila, tiomorfolinila (também referida como tiamorfolinila), 1,1-dioxotiomorfolinila, piperidinila, pirrolidina e tetraidrofuranila.

"Nitro" refere-se ao grupo -NO2.

"Oxo" refere-se ao átomo (=0) ou (-0-).

"Spiro ciclila" refere-se a grupo cíclico saturado divalente de 3 a10 átomos de carbono tendo um anel ciclo alquila ou hetero ciclila com umaunião spiro ( a união formada por um átomo simples que é o único membrocomum dos anéis) como exemplificado pela seguinte estrutura:

"Sulfonila" refere-se ao grupo divalente -S(O)2-.

"Sulfonila substituído" refere-se ao grupo -S02-alquila, -SO2-alquila substituído, , -S02-alquenila, -S02-alquenila substituído, -S02-cicloalquila, -S02-ciclo alquila substituídoi, -S02-ciclo alquenila, -S02-ciclo alque-nila substituído, -S02-arila, -S02-arila substituído, -S02-hetero arila, -SO2-hetero arila substituído, -S02-hetero cíclico, -S02-hetero cíclico substituído,onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, alquinila,alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo alquenila,ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arilasubstituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído são como aqui defini-dos. Sulfonila substituído inclui grupos tais como metil-S02-, fenil-S02, e 4-metil fenil-S02-.

"Sulfoniloxi" refere-se ao grupo -0S02-alquila, -0S02-alquilasubstituído, -0S02-alquenila, -OSCVaIqueniIa substituído, -OSO2-CiClo alqui-la, -OSO2-Ciclo alquila substituído, -OSO2-CÍCI0 alquenila, -OSO2CiClo alque-nila substituído, -0S02-arila, -0S02-arila substituído, -0S02-hetero arila, -OSO2-hetero arila substituído, -OSO2-Iietero cíclico, -OS02-hetero cíclicosubstituído, onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído,alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, ciclo al-quenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, hetero arila, heteroarila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído são como aquidefinidos.

"Tioacila" refere-se aos grupos H-C(S)-, alquil-C(S)-, alquil subs-tituído-C(S)-, alquenil-C(S)-, alquenil substituído-C(S)-, alquinil-C(S)-, alquinilsubstituído-C(S)-, ciclo alquil-C(S)-, ciclo alquil substituído-C(S)-, ciclo al-quenil-C(S)-, ciclo alquenil substituído-C(S)-, aril-C(S)-, aril substituído-C(S)-,hetero aril-C(S)-, hetero aril substituído-C(S)-, hetero cíclico-C(S)-, e heterocíclico substituído-C(S)-, onde alquila, alquila substituído, alquenila, alquenilasubstituído, alquinila, alquinila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substitu-ído, ciclo alquenila, ciclo alquenila substituído, arila, arila substituído, heteroarila, hetero arila substituído, hetero cíclico e hetero cíclico substituído sãocomo aqui definidos.

"Tiol" refere-se ao grupo -SH.

"Tiocarbonila" refere-se ao grupo divalente -C(S)- que é equiva-lente a -C(=S)-.

"Tiona" refere-se ao átomo (=S).

"Alquil tio" refere-se ao grupo -S-alquila onde alquila é como aquidefinido.

"Alquil tio substituído" refere-se ao grupo -S-(alquila substituído)onde alquila substituído é como aqui definido.

"Estereoisômero" ou "estéreo-isômeros" refere-se a compostosque diferem na quiralidade de um ou mais dos centros estéreos. Estéreo-isômeros incluem enantiômeros e diastereômeros.

"Tautômero" refere-se a formas alternativas de um compostoque diferem na posição de um próton, tal como enol-1-ceto e tautômerosimina - enamina, ou as formas tautoméricas de grupos hetero arila contendoum átomo de anel ligado a ambas, uma metade -NH- de anel e uma metade=N- de anel tais como pirazóis, imidazóis, benzimidazóis, triazóis, e tetra-zóis.

"Homólogo" refere-se a uma seqüência tendo pelo menos 50%de homologia, ou pelo menos 60% de homologia, ou pelo menos 70% dehomologia, ou pelo menos 80% de homologia, ou pelo menos 85% de homo-logia, ou pelo menos 90% de homologia, ou pelo menos 95% de homologia,ou pelo menos 96% de homologia, ou pelo menos 97% de homologia, oupelo menos 98% de homologia, ou pelo menos 99% de homologia à referidaseqüência.

"Paciente" refere-se a mamíferos e inclui mamíferos humanos enão-humanos.

"Sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a sais farmaceuti-camente aceitáveis de um composto, cujos sais são derivados de uma vari-edade de contra íons orgânicos e inorgânicos bem conhecidos na técnica eincluem, somente por exemplo, sódio, potássio, cálcio, magnésio, amônio etetra alquil amônio; e quando a molécula contem uma funcionalidade básica,sais de ácidos orgânicos ou inorgânicos, como cloridrato, bromidrato, tartara-, 20 to, mesilato, acetato, maleato, e oxalato.

"Tratando" ou "tratamento" de uma doença em um paciente refe-re-se a 1) prevenir ocorrência de doença em um paciente que é predispostoou ainda não mostra sintomas da doença; 2) inibir a doença ou impedir seudesenvolvimento; ou 3) melhorar ou causar regresão da doença.

A menos que indicado de outro modo, a nomenclatura de substi-tuintes que n~soa são explicitamente aqui definidos é obtida através de no-meação de porção terminal da funcionalidade seguida pela funcionalidadeadjacente na direção do ponto de ligação. Por exemplo, o substituinte "arilalquiloxi carbonila" refere-se ao grupo (aril)-(alquil)-0-C(0)-.

É entendido que em todos os grupos substituídos definidos aci-ma, polímeros obtidos através de definição de substituintes com ainda subs-tituintes para eles próprios (por exmeplo, arila substituído tendo um grupoarila substituído como um substituinte que é ele próprio substituído com umgrupo arila substituído, que é ainda substituído com um grupo arila substituí-do, etc.) não são aqui pretendidos para inclusão. Em tais casos, o númeromáximo de tais substituições é três. Por exemplo, substituições seriais degrupos arila substituídos com dois outros grupos arila substituídos são limi-tadas a -arila substituído-(arila substituído)- arila substituído.

Os compostos da invenção são úteis in vitro ou in vivo em inibi-ção de crescimento de células de câncer. Os compostos podem ser usadossozinhos ou em composições junto com um carreador ou excipiente farma-ceuticamente aceitável. Composições farmacêuticas da presente invençãocompreendem uma quantidade terapeuticamente efetiva de um compostoinibidor de CDC7 aqui descrito formulada junto com um ou mais carreadoresfarmaceuticamente aceitáveis. Como aqui usado, o termo "carreador farma-ceuticamente aceitável" significa um material de enchimento, diluente, mate-rial encapsulante ou auxiliar de formulação não-tóxico, inerte, sólido, semi -sólido ou líquido de qualquer tipo. Alguns exemplos de materiais que podemservir como carreadores farmaceuticamente aceitáveis estão açúcares comolactose, glicose e sucrose; amidos como amido de milho e amido de batata;celulose e seus derivados como sódio carboxi metil celulose, etil celulose eacetato de celulose; tragacanto pulverizada; malte; gelatina; talco; excipien-tes como manteiga de cacau e ceras de supositório; óleos como óleo deamendoim, óleo de semente de algodão; óleo de açafrão; óleo de sésamo;óleo de oliva; óleo de milho e óleo de soja; glicóis; como um propileno glicol;ésteres como oleato de etila e Iaurato de etila; agar; agentes tamponantescomo hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; águaisneta de pirogênio; solução salina isotônica; solução de Ringer; álcool etíli-co, e soluções tampões de fosfato, assim como outros lubrificantes compatí-veis não-tóxicos como Iauril sulfato de sódio e estearato de magnésio, assimcomo agentes corantes, agentes de liberação, agentes de revestimento, a-doçantes, agentes aromatizantes e perfume, preservativos e antioxidantestambém podem estar presentes na composição, de acordo com o julgamen-to do formulador. Outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis são des-critos em "RemingtorVs Pharmaceutical Sciences", Mack Pub. Co., New Jer-sey, 1991, aqui incorporado por referência.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados ahumanos e outros animais oralmente, parenteralmente, sublingualmente,através de aerossol ou inalação de espargimento, retalmente, intra-cisternalmente, intra-vaginalmente, intraperitonealmente, bucalmente, outopicamente em dosagem de formulações unitárias contendo convencionaiscarreadores, adjuvantes e veículos não-tóxicos, farmaceuticamente aceitá-veis como desejado. Administração tópica também pode envolver o uso deadministração transdérmica tal como emplastros transdérmicos ou dispositi-vos de ionoforese. O termo parenteral como aqui usado inclui injeções sub-cutâneas, intravenosas, intramusculares, intra-externa, ou técnicas de infu-são.

Processos de formulação são bem conhecidos na técnica e sãomostrados, por exemplo, em Remington: The Science and Practice of Phar-macy, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 19th Edition (1995). Compo-sições farmacêuticas para uso na presente invenção podem estar na formade soluções ou suspensões líquidas estéreis, não-pirogênicas, cápsulas re-vestidas, supositórios, pulverizados liofilizados, emplastros transdérmicos ououtras formas conhecidas na técnica.

Preparações injetáveis, por exemplo, suspensões oleaginosasou aquosas injetáveis, estéreis, podem ser formuladas de acordo com a téc-nica conhecida usando apropriados agentes de suspensão e agentes dis-persantes ou umectantes. A preparação injetável estéril também pode seruma solução, suspensão ou emulsão injetável estéril em um diluente ou sol-vente parenteralmente aceitável, por exemplo, como uma solução em 1,3-propanodiol ou 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis quepodem ser empregados estão água, solução de Ringer, solução de cloretode sódio isotônica e U.S.P.. Em adição, óleos estéreis, fixos, são convencio-nalmente empregados como um solvente ou meio de suspensão. Para estepropósito qualquer óleo fixo suave pode ser empregado incluindo mono- oudi-glicerídeos sintéticos. Em adição, ácidos graxos como ácido oléico encon-tram uso na preparação de injetáveis. As formulações injetáveis podem seresterilizadas, por exemplo, através de filtração através de um filtro de reten-ção de bactérias, ou através de incorporação de agnetes esterilizantes naforma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou disper-sas em água estéril ou outro meio injetável estéril antes de uso.

De modo a prolongar o efeito de uma droga, é freqüentementedesejável diminuir a absorção da droga a partir de injeção subcutânea ouintramuscular. Isto pode ser realizado através do uso de uma suspensãolíquida de material cristalino ou amorfo com pobre solubilidade em água. Ataxa de absorção da droga então depende de sua taxa de dissolução que,por sua vez, pode depender de tamanho de cristal e forma cristlaina. Alterna-tivamente, absorção retarada de uma forma de droga administrada parente-ralmente pode ser realizada através de dissolução ou suspensão de drogaem um veículo óleo. Formas depósito injetáveis são fabricadas através deformação de matrizes de microcápsulas da droga em polímeros biodegradá-veis como polilactídeo - poliglicolídeo. Dependendo da razão de droga parapolímero e a natureza do particular polímero empregado, a taxa de liberaçãode droga pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveisincluem poli(orto ésteres) e poli(anidridos). Formulações injetáveis depósitostambém podem ser preparadas através de arraste de droga em Iipossomasou microemulsões, que são compatíveis com tecidos de corpo.

Composições para administração retal ou vaginal são preferi-velmente supositórios que podem ser preparados através de mistura decompostos desta invenção com excipientes ou carreadores não-irritantescomo manteiga de cacau, polietileno glicol ou uma cera de supositório quesejam sólidos em temperatura ambiente mas líquidos em temperatura docorpo e por isso fundem no reto ou cavidade vaginal e liberam o compostoativo.

Formas de dosagem sólidas para administração oral incluemcomprimidos, cápsulas, pílulas, pulverizados e grânulos. Em tais formas dedosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um excipi-ente ou carreador farmaceuticamente aceitável, inerte, tal como citrato desódio ou fosfato de di-cálcio e/ou materiais de enchimento diluidores comoamidos, lactose, sucrose, glicose manitol, e ácido silícico, b) ligantes, como,por exemplo, carboxi metil celulose, alginatos, gelatina, polivinil pirrolidona,sucrose e acácia, c) umectantes como glicerol, d) agentes desintegrantescomo agar-agar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido al-gínico, certos silicatos, e carbonato de sódio, e) solução de agentes de re-tardamento como parafina, f) aceleradores de absorção como compostos deamônio quaternários, g) agentes umectantes como, por exmeplo, álcool ace-tílico e monoestearato de glicerol, h) absorventes como caolin e argila ben-tonita, e i) lubrificantes como talco, estearato de cálcio, estearato de magné-sio, polietileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio, e suas misturas. No ca-so de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem também podecompreender agentes tamponantes.

Composições sólidas de um tipo similar também podem ser em·pregadas como materiais de enchimento em cápsulas de gelatina enchidasmacias e duras usando excipientes tais como lactose ou açúcar de leite as-sim como polietileno glicóis de alto peso molecular e semelhantes.

As formas de dosagem sólida de comprimidos, drágeas, cápsu-las, píluas, e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e conchascomo revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos natécnica de formulação farmacêutica. Elas podem opcionalmente conter a-gentes opacificantes e também podem ser de uma composição de modo queelas liberam o ingrediente(s) ativo somente, ou preferencialmente, em umacerta parte do trato intestinal, opcionalmente, em uma maneira retardada.

Exemplos de composições para embutir que podem ser usadas incluemsubstâncias poliméricas e ceras.

O composto ativo também pode estar em forma micro-encapsulada com um ou mais excipientes como notado acima. As formas dedosagem sólida de comprimidos, drágeas, cápsulas, píluas e grânulos po-dem ser preparadas com revestimentos e conchas como revestimentos enté-ricos, revestimentos de controle de liberação, e outros revestimentos bemconhecidos na técnica de formulação. Em tais formas de dosagem sólida ocomposto ativo pode ser misturado com pelo menos um diluente inerte comosucrose, Iactose ou amido. Tais formas de dosagem também podem com-preender, como é prática normal, adicionais substâncias outras que não di-luentes inertes, por exemplo, lubrificantes de formação de comprimido e ou-tros auxiliares de formação de comprimido como estearato de magnésio ecelulose micro - cristalina. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, asformas de dosagem também podem compreender agentes tamponantes.Elas opcionalmente podem conter agentes opacificantes e também podemser de uma composição de modo que ela libera o ingrediente(s) ativo so-mente, ou preferivelmente, em uma certa parte do trato intestinal, opcional-mente, em uma maneira retardada. Exemplos de composições para embutirque podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras.

Formas de dosagem líquida para administração oral incluememulsões farmaceuticamente aceitáveis, micro - emulsões, soluções, sus-pensões, xaropes e elixires. Em adição aos compostos ativos, as formas dedosagem líquida podem conter diluentes inertes comumente usados na téc-nica tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubili-zação e emulsificantes como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato deetila, EtOAc, álcool benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetil formamida, óleos (em particular, óleos de semente dealgodão, amendoim, milho, germe, oliva, mamona, e sésamo), glicerol, álco-ol tetraidro furfuríliço, polietileno glicóis, e ésteres de ácido graxo de sorbita-no, e suas misturas. Além de diluentes inertes, as composições orais tam-bém podem incluir adjuvantes tais como agnetes umectantes, agentes emul-sificantes e de suspensão, agentes adoçantes, aromatizantes e perfuman-tes.

Formas de dosagem para administração tópica ou transdérmicade um composto desta invenção incluem pomadas, pastas, cremes, loções,géis, pulverizados, soluções, espargimentos, inalantes ou emplastros. Ocomponente ativo é misturado sob condições estéreis com um carreadorfarmaceuticamente aceitável e quaisquer preservativos ou tampões neces-sários como podem ser requeridos. Formulações oftálmicas, gotas de ouvi-do, e semelhantes também são contemplados como estando dentro do es-copo desta invenção.

As pomadas, pastas, cremes e géis podem conter, em adição aum composto ativo desta invenção, excipientes tais como gorduras animaise vegetais, óleos, ceras, parafinas, amido, tragacanto, derivados de celulose,polietileno glicóis, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco e oxido de zinco,ou suas misturas.

Composições da invenção também podem ser formuladas paraliberação como um aerossol líquido ou pulverizado seco inalável. Formula-ções de aerossol líquido podem ser nebulizadas predominantemente emtamanhos de partículas que possam ser liberadas para o terminal e bronquí-olos respiratórios.

Formulações feitas aerossol da invenção podem ser liberadasusando um dispositivo de formação de aerossol, tal como um jato, placa po-rosa vibrante, ou nebulizador ultra-sônico, preferivelmente selecionado parapermitir a formação de partículas de aerossol tendo um diâmetro aerodinâ-mico mediano de massa predominantemente entre 1 a 5 μιτι. Ainda, A for-mulação preferivelmente tem resistência iônica de osmolaridade e concen-tração de cloreto balanceadas, e o menor volume que pode ser feito aeros-sol para liberar dose efetiva dos compostos da invenção para o sítio da in-fecção. Adicionalmente, a formulação feita aerossol preferivelmente não pre-judica a funcionalidade das vias aérease não causa indesejáveis efeitos co-laterais.

Compostos da invenção também podem ser formulados parauso como pulverizados tópicos e espargimentos que podem conter, em adi-ção aos compostos da invenção, excipientes tais como lactose, talco, ácidosilício, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio, e pulverizado de poliamida,ou misturas destas substâncias. Espargimentos adicionalmente podem con-ter usuais propelentes tais como cloro flúor hidrocarbonetos.

Emplastros transdérmicos têm a vantagem adicionada de provi-mento de liberação controlada de um composto para o corpo. Tais formas dedosagem podem ser fabricadas através de dissolução ou dispensamento decomposto no meio apropriado. Aperfeiçoadores de absorção também podemser usados para aumento de fluxo do composto através da pele. A taxa podeser controlada tanto através de provimento de uma membrana de controlede taxa como através de dispersão de composto em uma matriz de polímeroou gel. Os compostos da presente invenção também podem ser administra-dos na forma de lipossomas. Como é conhecido na técnica, Iipossomas sãogenericamente derivados de fosfolipídeos ou outras substâncias lipídeo. Li-possomas são formadas por cristais líquidos hidrartados mono- ou multi -lamelares que são dispersos em um meio aquoso. Qualquer lipídeo não-tóxico, fisiologicamente aceitável e metabolizável capaz de formar liposso-mas pode ser usado. As presentes composições em forma de Iipossomapodem conter, em adição a um composto da presente invenção, estabiliza-dores, preservativos, excipientes, e semelhantes. Os lipídeos preferidos sãoos fosfolipídeos e fosfatidil colinas (lecitinas), ambas, naturais e sintéticas.Processos para formação de lipossomas são conhecidos na técnica. Ver, porexemplo, Prescott (ed.), "Methods in Cell Biology", Volume XIV, AcademicPress, New York, 1976, p.33 et seq.

Quantidades efetivas dos compostos da invenção genericamen-te incluem qualquer quantidade suficiente para inibir detectavelmente ativi-dade de CDC7 através de qualquer um dos ensaios descritos aqui, atravésde outros ensaios de atividade de CDC7 conhecidos por aqueles versadosna técnica, ou através de detecção de uma inibição ou alívio de sintomas decâncer. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com osmateriais carreadores para produzir uma forma de dosagem simples variarádependendo do hospedeiro tratado e o particular modo de administração.Será entendido, entretanto, que o específico nível de dose para qualquerparticular paciente dependerá de uma variedade de fatores incluindo a ativi-dade do específico composto empregado, a idade, peso de corpo, saúdegeral, sexo, dieta, tempo de administração, rota de administração, taxa deexcreção, combinação de droga, e a severidade da particular doença so-frendo terapia. A quantidade terapeuticamente efetiva para uma dada situa-ção pode ser facilmente determinada através de experimentação de rotina eestá dentro do conhecimento e julgamento do médico comum.

De acordo com os processos de tratamento da presente inven-ção, crescimento de tumor é reduzido ou prevenido em um paciente tal comoum humano ou mamífero inferior através de administração ao paciente deuma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da invenção, emquantidades tais e por tal tempo como é necessário para obter o desejadoresultado. Por uma "quantidade terapeuticamente efetiva" de um compostoda invenção é pretendida uma quantidade suficiente do composto para tratarcrescimento de tumor, em uma razoável razão de benefício / risco aplicávela qualquer tratamento médico. Será entendido, entretanto, que a utilizaçãodiária total dos compostos e composições da presente invenção será decidi-da pelo médico atendente dentro do escopo de som de julgamento médico.

O específico nível de dose terapeuticamente efetiva para qualquer particularpaciente dependerá de uma variedade de fatores incluindo o distúrbio sendotratado e a severidade do distúrbio; a atividade do específico composto em-pregado; a específica composição empregada; a idade, peso de corpo, saú-de geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, rota de admi-nistração e a taxa de excreção do específico composto empregado; a dura-ção do tratamento; drogas usadas em combinação ou coincidentes com oespecífico composto empregado; e fatores semelhantes bem conhecidosnas técnicas médicas.

Para propósitos da presente invenção, uma dose terapeutica-mente efetiva genericamente será uma dose diária total administrada a umhospedeiro em uma dose simples ou dividida pode estar em quantidades,por exemplo, de 0,001 a 1000 mg/kg de peso de corpo diariamente e maispreferido de 1,0 a 30 mg/kg de peso de corpo diariamente. Composições dedosagem unitária podem conter tais quantidades de seus submúltiplos paraconstituir a dose diária. EM geral, regimes de tratamento de acordo com apresente invenção compreendem administração a um paciente em necessi-dade de tal tratamento de cerca de 10 mg a cerca de 2000 mg do compos-to(s) desta invenção por dia em dose simples ou múltiplas.

Em um outro aspecto da presente invenção, kits que incluem umou mais compostos da invenção são providos. Kits representativos incluemum composto inibidor de CDC7 de fórmulas (I) ou (II) e uma inserção de em-balagem ou outra etiquetagem incluindo instruções para tratamento de umadoença proliferativa celular através de administração de uma quantidade docomposto inibidora de CDC7.

O termo "kiT como aqui usado compreende um recipiente paraconter as composições farmacêuticas e também pode incluir recipientes di-vididos como uma garrafa divididaou uma embalagem de folha dividida. Orecipiente pode estar em qualquer forma convencional como conhecido natécnica a qual é fabricada de um material farmaceutícamente aceitável, porexemplo, um papel ou caixa de papelão, uma garrafa de vidro ou plástico oujarro, uma sacola re-selável (por exemplo, para reter um "reenchimento" decomprimidos para colocação em um diferente recipiente), ou uma embala-gem de bolha com doses individuais para prensagem fora da embalagem deacordo com uma programação terapêutica. O recipiente empregado podedepender da exata forma de dosagem envolvida, por exemplo, uma caixa depapelão convencional genericamente não será usada para reter uma sus-pensão líquida. É exeqüível que mais de um recipiente possa ser usado jun-to em uma embalagem simples para comercializar forma de dosagem sim-pies. Por exemplo, comprimidos podem ser contidos em uma garrafa que épor sua vez contida em uma caixa.

Um exemplo de um tal kit é uma assim chamada embalagem debolha. Embalagens de bolha são bem conhecidas na indústria de embala-gem e são amplamente usadas para a embalagem de formas de dosagemunitária farmacêutica (comprimidos, cápsulas, e semelhantes). Embalagensde bolha genericamente consistem em uma folha de um material relativa-mente rijo coberta com uma folha de um material plástico preferivelmentetransparente. Durante o processo de embalgem, recessos são formados nafolha plástica. Os recessos têm o tamanho e forma de comprimidos ou cáp-sulas individuais a serem embaladas ou podem ter o tamanho e forma paraacomodar múltiplos comprimidos e/ou cápsulas a serem embalados. A se-guir, os comprimidos ou cápsulas são colocados nos recessos de acordo e afolha de material relativamente rijo é selada contra a folha plástica na faceda folha que é oposta a partir da direção na qual os recessos foram forma-dos. Como um resultado, os comprimidos ou cápsulas são selados individu-almente ou selados coletivamente, como desejado, nos recessos entre afolha plástica e a folha. Preferivelmente a resistência da folha é tal que oscomprimidos ou cápsulas podem ser removidos da embalagem de bolha a-través de aplicação de pressão manual sobre os recessos pelo que uma a-bertura é formada na folha no local dos recessos. O comprimido ou cápsulaentão pode ser removido via dita abertura.

Os kits da presente invenção também podem compreender, emadição a um inibidor de CD7, um ou mais adicionais compostos farmaceuti-camente ativos. Preferivelmente1 o composto adicional é um outro agenteanticâncer descrito acima em um dos grupos A-J. Os adicionais compostospodem ser administrados na mesma forma de dosagem como o inibidor deCDC7 ou em diferentes formas de dosagem. Da mesma maneira, os adicio-nais compostos podem ser administrados ao mesmo tempo como o inibidorde CDC7 ou em tempos diferentes.

A presente invenção será mais facilmente entendida através dereferência aos seguintes exemplos, que são providos a título de ilustração enão são pretendidos serem Iimitantes da presente invenção.

Exemplos

Referindo-se aos exemplos que se seguem, compostos da presente inven-ção foram sintetizados usando os processos aqui descritos, ou outros pro-cessos, que são conhecidos na técnica.

Análise espectrométrica de massa foi realizada em um de doisinstrumentos de LCMS: um Waters System (Alliance HT HPLC e um Micro-mass ZQ mass séctrometer; Coluna: Eclipse XDB-C18, 2,1 χ 50 mm; siste-ma solvente: 5-95% (ou 35-95%, ou 65-95% ou 95-95%) acetonitrila em á-gua com 0,05% TFA; taxa de fluxo 0,8 mUminuto; faixa de peso molecular200-1500; voltagem de cone de 20 V; temperatura de coluna de 40°C) ou umHewlett Packard System (Series 1100 HPLC; Coluna: Eclipse XDB-C18, 2,1χ 50 mm; sistema solvente: 1-95% acetonitrila em água com 0,05% TFA;taxa de fluxo: 0,8 mL/ minuto; faixa de peso molecular 150-850; Voltagem decone de 50 V; temperatura de coluna de 30°C). Todas as massas foram re-portadas como aquelas dos íons parentes protonados.

Análise GCMS é realizada em um instrumento Hewlwtt Packard(HP6890 Series gás chromatograph com um detetor seletivo de massa 5973;volume de injetor: 1 μL; temperatura inicial de coluna: 50°C; temperatura fi-nal de coluna: 250°C; tempo de rampa: 20 minutos; taxa de fluxo de gás: 1mL / minuto; coluna: 5% fenil metil siloxano, Model No. HP 190915-443, di-mensões: 30,0 m χ 25 m χ 0,25 m).

Análise de ressonância nuclear magnética (NMR) é realizadasobre os compostos com um Varian 300 MHz NMR (Paio Alto, CA, USA). Areferência espectral é TMS ou o desvio químico conhecido do solvente. Al-gumas amostras de controle são corridas em temperaturas elevadas (porexemplo, 75°C) para promover aumentada solubilidade de amostra.

A pureza de alguns compostos da invenção é avaliada atravésde análise elementar (Desert Analytics, Tucson, AZ, USA).

Pontos de fusão são determinados em uma aparelhagem Labo-ratory Devices Mel-Temp (Holliston, MA, USA).

Separações preparativas são realizadas usando um sistema decromatografia Flash 40 e KP-Sil, 60 A (Biotage, Charlottesville, VA, USA), ouatravés de cromatografia de coluna instantânea usando material de empaco-tamento de sílica gel (230-400 mesh), ou através de HPLC usando um Wa-ters 2767 Sample Manager, coluna de fase reversa C-18, 30x50 mm, fluxode 75 mL /minuto. Solventes típicos empregados para o sistema Flash 40Biotage e cromatografia de coluna instantânea são diclorometano, metanol,acetato de etila, hexano, acetona, amônia aquosa (ou hidróxido de amônio),e trietil amina. Solventes típicos empregados para a HPLC de fase reversasão concentrações variáveis de acetonitrila e água com 0,1% de ácido triflú-or acético.

Deve ser entendido que os compostos orgânicos de acordo coma invenção podem exibir o fenômeno de tautomerismo. As estruturas quími-cas dentro deste relatório descritivo podem somente representar uma daspossíveis formas tautoméricas, deve ser entendido que a invenção abrangequalquer forma tautomérica da estrutura desenhada.

É entendido que a invenção não é limitada às realizações aquimostradas para ilustração, mas abrange todas tais suas formas como estan-do dentro do escopo da exposição acima.

Uma modificação da síntese de calcona pode ser realizada via adibromo calcona como mostrado no Esquema 1 (Dora et al., Journal of Hete-rocyclic Chemistry 20:691 -696 (1983)).

Esquema 1

<formula>formula see original document page 53</formula>

10 a) uréia, NaOEt, EtOH

Em adição a processos sintéticos para pirimidinonas que utilizamcalconas ou reações tipo Biginelli, pirimidinonas também podem ser sinteti-zadas a partir de acetilenos e uréia como mostrado no Esquema 2 (Sasaku-ra et al., Synthetic Communications 18:259-264 (1988), Lee et al., Tetrahe-15 dron 61:8705-8710 (2005); Dora et al., Journal of Heterocyclic Chemistry20:691-696 (1983) e Baddar et al. Journal of Heterocyclic Chemistry 13:257-268 (1976)).

Esquema 2

<formula>formula see original document page 53</formula>

4-aril-6-alquil pirimidinonas podem ser sintetizadas de dionasatravés de metodologia similar usada para sintetizar as 4,6-diaril pirimidino-nas (Esquema 3,<formula>formula see original document page 54</formula>

Heterociclos aromáticos são incorporados através de combina-ção de uma metil cetona hetero aromática e o indazol aldeído usando condi-ções ácidas padrões (uréia, HCl, i-PrOH, Esquema 4(a), Bhendkar et al., W.Oriental Journal of Chemistry 19:731-732 (2003)). Outras metodologias tam-bém existem para incorporação de heteroeiclos de anel de cinco membros(Esquema 4(b) e 4(e), Babu et al., Indian Journal of Pharmaceutieal Sciences66:647-652 (2004)).

Esquema 4<formula>formula see original document page 55</formula>

N-aril 4,6-dialquil pirimidinonas, N-alquil 4-alquil-6-aril pirimidino-nas e N-alquil 6-alquil-4-aril pirimidinonas também podem ser sintetizadas deN-aril ou N-alquil uréia e a correspondente diona como mostrado no Esque-ma 5 (George et al., New Journal of Chemistry 27:568-576 (2003)).

<formula>formula see original document page 55</formula>Pequenos grupos alquila em C-5 da pirimidinona podem ser in-troduzidos através de desprotonação e alquilação de uma diona (Esquema6, Cai WO 05121106 (2005), p. 71) ou através de reação de Wittig (Esque-ma 7, Marzinzik et al., Journal of Organic Chemistry 63:723-727 (1998)) pararender a correspondente calcona que ainda pode ser funcionalizada paraformar a desejada pirimidinona.

a) K2CO3, R'l, acetona , Δ, 6 h

b) Uréia, HCI/EtOH, Δ

R = alquila ou heterociclo alifático

R = alquila

Vários processos foram desenvolvidos que incorporam substitu-intes arila, alquila e hetero arila em C-4 e C-6 e metila em C-3 da piridona. Oesquema 8 exemplifica estes processos (8(a) Katritzky et al., Journal of Or-ganic Chemistry 62:6210-6214 (1997); 8(b) Wang et al., Synthesis 487-490(2003)).

Tabela 8

<table>table see original document page 56</column></row><table>

Além disso, piridonas N-alquiladas e piridonas substituídas emC3 ou C5 são acessíveis via a química de amino azabutadieno como mos-trado no Esquema 9

Esquema 9<formula>formula see original document page 57</formula>

Análogos de azaindol (ou 1 H-pirazol piridina) podem ser obtidosatravés de síntese de requisito de 5-bromo azaindóis a partir de bromo metilnitro piridinas (Esquema 10, Xie et al. WO 05092890 (2005) p. 300). Umavez os bromo azaindóis sejam sintetizados, a metodologia sintética é idênti-ca àquela das séries de 4-indazol-6-aril pirimidinona.

Esquema 10

<formula>formula see original document page 57</formula>

A posição C-3 do indazol pode ser substituída com grupos alqui-la como indicado no Esquema 11 (Li et al. US 2003/0199511 (2003), p. 120).Em adição a metila, outros reagentes de Grignard podem ser usados paraincorporação de outros grupos alquila e arila em C-3 do indazol tal comogrupos etila, propila, isopropila, fenila e alquila substituído e arila.

Esquema 11Outros substituintes em C-3 também podem ser incorporadostais como metoxi, heterociclos alifáticos como piperidina e heterociclos liga-dos com metileno como morfolina (Esquema 12, Allen et al., WO 9749698(1997) p. 84).

Esquema 12:

<formula>formula see original document page 58</formula>

Grupos alifáticos de cadeia mais longa também podem ser in-corporados em C-3 do indazol como esboçado no Esquema 13 (Sasakura etal., Synthetic Communications 18:259-264 (1988)).Esquema 13

<formula>formula see original document page 59</formula>

uréiauréia

R = N3 que pode ser ainda reduzido a NH2 e reagido com aldeídos e cetonaspara formação de amina substituídaExemplo 1

Síntese de 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-fenoxi fenil) pirimidin-2 (1H)-onaEtapa 1:

<formula>formula see original document page 59</formula>

1H-indazol-5-carbaldeído (2). Lítio n-butila (35,0 ml_, 87,5 mmo-les) foi lentamente adicionado a 5-bromo indazol (1, 4,98 g, 25,3 mmoles)em THF (60 mL) a -78°C. Após 30 minutos, a solução foi aquecida para -40°C por 30 minutos e então resfriada para -78°C. DMF (3,1 mL, 77,5 mmo- les) foi adicionada. Após 15 minutos, o frasco de reação foi removido do ba-nho de gelo / acetona e agitado em temperatura ambiente por 2,5 horas. Asolução foi rapidamente resfriada com H2O. A camada aquosa foi extraídacom EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura, secadasobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para render um óleo dourado. O material bruto foi purificado por cromatografia de coluna (0-100% EtOAc /hexanos) para render 2 como um sólido amarelo claro (1,91 g, 52% de ren-dimento). LCMS m/z 147,0 (MH+), R, 1,53 minutos.Referência para a síntese de 1H-indazol-5-carbaldeído:E. Piatnitski1 WO 2005/000813 p. 37.

Etapa 2

<formula>formula see original document page 60</formula>

4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-fenoxi fenil) pirimidin-2 (1H)-ona (3).

1H-indazol-5-carbaldeído (2, 0,27 g, 1,85 mmoles) e uréia (0,33g, 5,45 mmoles) foram agitados por toda noite em temperatura ambiente emi-PrOH (18 mL) e HCI (conc., 1,8 mL). Neste momento, a solução viscosa foidividida em nove porções iguais. A uma porção foi adicionada 4'-fenoxi ace-tofenona (0,0531 g, 0,25 mmoles) e adicional uréia. A reação foi aquecida a80°C por toda noite em um frasco selado. A mistura de reação foi então res-friada, concentrada e purificada por HPLC de fase reversa para render 3como o sal de TFA (9,6 mg, 99% de pureza). LCMS m/z 381,1 (MH+), Rt2,39 minutos.

Referência para Biginelli catalisada com ácido: Sedova et al.,Chem. Heterocyclic Compounds 40(2): 194-202 (2004).

Exemplos 2-16

Os compostos na seguinte tabela 1 foram sintetizados usandoos processos e procedimentos anteriores, e foram nomeados usando nomeACD para ChemSketch version 10,00 software (31 de agosto 2006) disponí-vel de Advanced Chemistry Development, Inc., 110 Yonge Street 14th Floor,Toronto, Ontario, Canadá.Tabela 1

6. 6-(4-etil fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1 H)-ona

7. 6-(3,4-dimetoxi fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

8. 4-( 1 H-indazol-5-il)-6-[3-triflúor metil) fenil] pirimidin-2(1H)-ona

9. 6-(2-flúor fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1 H)-ona

10. 6-(3-cloro fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1 H)-ona

11. 4-(1 H-indazol-5-il)-6-fenil pirimidin-2 (1 H)-ona

12. 6-[3-(benziloxi) fenil]-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-

ina

13. 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-morfolin-4-il fenil) pirimidin-2(1H)-ona

14. 4-(1 H-indazol-5-il)-6-(4-fenoxi fenil) pirimidin-2 (1 H)-ona

15. 6-[4-benziloxi) fenil]-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

16. 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-piperazin-1-il fenil) pirimidin-2

(1H)-ona

<table>table see original document page 61</column></row><table><table>table see original document page 62</column></row><table><table>table see original document page 63</column></row><table>

Os compostos na Tabela 1 foram sintetizados de acordo com osexemplos providos acima. Valores de inibição de CDC7 dos compostos fo-ram determinados de acordo com o Processo Biológico 1.

Como descrito no Exemplo 83 (ensaio in vitro de inibição deCDC7 / DBF4), cada um dos compostos de Tabela 1 exibiu um valor IC5o demenos que 1 μΜ com relação a inibição de CDC7 / DBF4. Muitos dos exme-plos de Tabela 1 exibiram valores de IC50 de menos que 0,1 μΜ e mesmomenos que 0,01 μΜ com relação a inibição de CDC7. Por esta razão, cadaum dos compostos é individualmente preferido e são preferidos como ummembro de um grupo.

Exemplos 17-80

Os compostos na seguinte Tabela 2 podem ser sintetizados u-sando os processos e procedimentos anteriores, e são nomeados usandoNome ACD para ChemSketch version 10.00 software (31 de agosto de2006) disponível de Advanced Chemistry Development, Inc., 110 Yonge S-treet 14th Floor, Toronto, Ontario, Canadá.

Tabela 2

<table>table see original document page 63</column></row><table><table>table see original document page 64</column></row><table><table>table see original document page 65</column></row><table><table>table see original document page 66</column></row><table><table>table see original document page 67</column></row><table><table>table see original document page 68</column></row><table><table>table see original document page 69</column></row><table><table>table see original document page 70</column></row><table><table>table see original document page 71</column></row><table><table>table see original document page 72</column></row><table>

25 6-(4-acetil piperazin-1-il)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

26 6-(1-acetil piperidin-4-il)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

27 6-fenil-4-(1H-pirazol[3,4-b] piridin-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

28 4-(3-metil-1H-indazol-5-il)-6-fenil] pirimidin-2 (1H)-ona

29 6-fenil-4-(3-fenil-1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

30 4-(1H-indazol-5-il)-1-metil-6-fenil pirimidin-2 (1H)-ona

31 6-(3-cloro fenil)-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

32 6-(2-flúor fenil)-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

33 6-ciclo hexil-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2 (1H)-ona

34 4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil-6-(tetraidro-2H-piran-4-il) pirimidin-2(1H)-ona

35 4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil-6-morfolin-4-il pirimidin-2 (1H)-ona

36 4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil-6-piperidin-1 -il pirimidin-2 (1H)-ona

37 4-(1H-indazol-5-il)-6-isopropil-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

38 6-benzil-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2 (1H)-ona

39 6-ciclo pentil-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

40 4-(1H-indazol-5-il)-1-metil-6-pirrolidin-1-il pirimidin-2 (1H)-ona

41 6-(4-acetil piperazin-1-il)-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2(1H)-ona

42 6-(1-acetil piperidin-4-il)-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2(1H)-ona

43 1 -metil-6-fenil-4-(1H-pirazol[3,4-b] piridin-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

44 1 -metil-6-fenil-4-(1H-pirazol[4,3-b] piridin-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

45 1 -metil-4-(3-metil-1H-indazol-5-il)-6-fenil pirimidin-2 (1H)-ona

46 6-(3-cloro fenil)-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

47 6-(2-flúor fenil)-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

48 6-ciclo hexil-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2 (1H)-ona

49 4-(1H-indazol-5-il)-1-metil-6-(tetraidro-2H-piran-4-il) pirimidin-2(1H)-ona

50 4-(1H-indazol-5-il)-1-metil-6-morfolin-4-il] pirimidin-2 (1H)-ona

51 4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil-6-piperidin-1 -il pirimidin-2 (1H)-ona

52 4-(1H-indazol-5-il)-6-isopropil-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

53 6-benzil-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2 (1H)-ona

54 6-ciclo pentil-4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil pirimidin-2 (1H)-ona

55 4-(1H-indazol-5-il)-1 -metil-6-pirrolidin-1 -il pirimidin-2 (1H)-ona

56 6-(4-acetil piperazin-1-il)-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2(1H)-ona

57 6-(1-acetil piperidin-4-il)-4-(1H-indazol-5-il)-1-metil pirimidin-2(1H)-ona

58 1-metil-6-fenil-4-(1H-pirazol[3,4-b] piridin-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

59 1-metil-6-fenil-4-(1H-pirazol[4,3-b] piridin-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

60 1 -metil-4-(3-metil-1 H-indazol-5-il)-6-fenil pirimidin-2 (1 H)-ona

61 6-isopropil-1-metil-4-(3-fenil-1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona

62 4-(1 H-indazol-5-il)-6-fenil piridin-2 (1 H)-ona

63 6-(3-cloro fenil)-4-(1 H-indazol-5il) piridin-2 (1 H)-ona

64 6-(2-flúor fenil)-4-(1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1 H)-ona

65 6-ciclo hexil-4-(1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1 H)-ona

66 4-(1 H-indazol-5-il)-6-(tetraidro-2H-piran-4-il) piridin-2 (1 H)-ona

67 4-(1 H-indazol-5-il)-6-morfolin-4-il piridin-2 (1 H)-ona

68 4-(1 H-indazol-5-il)-6-piperidin-1 -il piridin-2 (1 H)-ona

69 4-(1H-indazol-5-il)-6-isopropil piridin-2 (1H)-ona

70 6-benzil-4-(1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1 H)-ona

71 6-ciclo pentil-4-(1H-indazol-5-il) piridin-2 (1H)-ona

72 4-(1H-indazol-5-il)-6-pirrolidin-1-il piridin-2 (1H)-ona

73 6-(4-acetil piperazin-1 -il)-4-(1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1 H)-ona

74 6-(1-acetil piperidin-4-il)-4-(1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1H)-ona

75 6-fenil-4-(1H-pirazol[3,4-b] piridin-5-il) piridin-2 (1H)-ona

76 6-fenil-4-(1H-pirazol[4,3-b] piridin-5-il) piridin-2 (1H)-ona

77 4-(3-metil-1 H-indazol-5-il)-6-fenil piridin-2 (1 H)-ona

78 6-isopropil-4-(3-fenil-1 H-indazol-5-il) piridin-2 (1 H)-ona

Exemplo 79

Ensaio In Vitro de Inibição de CDC7 / DBF4

Uma reação cinase de 20,5 μΙ_ foi realizada sobre placas Opti-Plate-384 (PerkinElmer, 6007290) como se segue através de adição se-qüencial de: 0,5 μΙ_ de compostos testes da invenção em DMSO, 10 μΙ. deATP 0,5 μΜ em tampão de reação, 10 μΙ-de cdc7 / dbf4 (derivado de baculo-vírus) 2,2 nM, MCM-2 4,4 nM em um tampão de reação. A reação procedeupor 1 hora em temperatura ambiente sobre um agitador orbital. A reação foiterminada pela adição de 10 μΙ_ de tampão de detecção contendo pérolasdoadoras revestidas com Streptavidina e pérolas de receptor conjugadascom Proteína A (54 μρ/ιτιί), e anticorpo coelhodiluído 1:4000 contra fosfose-rina 108-MCM-2 (Bethyl Labs). A mistura foi incubada em temperatura ambi-ente por 4 horas no escuro. A placa foi então lida em um instrumento Perki-nElmer Fusion. O tampão de reação conteve Hepes 50 mM (pH 7,2-7,5),MgCI2 10 mM, ditiotreitol 1 mM (DTT), Ieupeptina (10 μς/mL), e albumina desoro bovino (BSA)(0,2 mg/mL). O tampão de deteção conteve Tris 25 mM(pH 7,5), NaCI 400 mM, EDTA 100 mM, BSA 0,3% e Tween 20 0,05%.

Compostos representativos da invenção que inibiram a reaçãocinase > 70% no ensaio cdc7 / dbf4 acima foram selecionados para aindaanálise e confirmação. Compostos testes foram diluídos em DMSO parauma concentração de 0,94 μΜ ou 1,39 uM e 0,5 uM de cada solução testefoi adicionado a cavidades para ensaio usando as condições e processos deensaio como descritos acima. A porcentagem de inibição dos compostostestes de Exemplos 2-16 foi determinada ser como mostrado na Tabela 3:

Tabela 3

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Exemplo 80

Ensaio de Modulação de Alvo MCM2 pS108 CDC7

Células são revestidas sobre placas de cultura de tecido de 96cavidades em 100 uls de meios de crescimento de células e incubadas portoda noite a 37°C. No dia seguinte compostos em concentrações variáveissão adicionados para renderem uma concentração de DMSO final de 0,5%.As células são incubadas com composto por 4 horas a 37°C, 5% CO2. Entãoas células são lavadas com tampão PBS1 Iisadas em 100 μL de tampão deIise de células e 25 μL de lisado de células são adicionados para separarplacas de 96 cavidades MSD1 um ponto, de alta ligação (Meso Scale Disco-very, MSD1 Gaithersburg, Maryland, USA) e incubadas a 4°C por 1 hora.Uma placa é usada para detectar MCM2 total usando o anticorpo anti-MCM2coelho Bethyl (BL248) e a outra placa é usada para detectar MCM2 fosfori-lada usando o anticorpo MCM2 anti-pSer108 coelho Bethyl (BL1539).

As cavidades são lavadas e incubadas com anticorpo primáriopor toda noite. Após uma etapa de lavagem o anticorpo secundário (anticor-po IgG MSD Sulfo-Tag marcado com Rutênio) é adicionado e incubado por 1hora a 4°C. As placas são lavadas 4 vezes com 1 χ tampão de lavagem MSDTris e tampão MSD Read é adicionado a cada cavidade (MSD Read Buffer $(4x) com tensoativo, diluir para 1,5x com água). As placas são lidas sobre oleito de placa MSD (Meso Scale Discovery) ElectroChemiLuminescent (E-CL). As leituras permitem a determinação de níveis de fosforilação sobreSer108 de MCM2 na presença ou ausência de agentes afetando atividadede CDC7 cinase em células.

Embora realizações ilustrativas tenham sido ilustradas e descri-tas, será apreciado que várias mudanças podem ser feitas ali sem se fugirdo espírito e escopo da invenção.

Claims (30)

1. Composto de Fórmula (I):<formula>formula see original document page 79</formula>onde X é N ou CR7;Y é N ou CR4;R1 é selecionado do grupo consistindo em H, halo, alquila, alquila substituí-do, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, amino, e amino substituído;R2 é selecionado do grupo consistindo em alquila, alquila substituído, alcoxi,alcoxi substituído, amino, amino substituído, ariloxi, ariloxi substituído, heteroariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alquiloxi substituído,hetero cicliloxi, hetero cicliloxi substituído, arila, arila substituído, hetero arila,hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila, ehetero ciclila substituído;R3 é H, alquila, alquila substituído, arila ou arila substituído;R4, Re, R7 e R8 são selecionados independentemente do grupo consistindoem H, halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substituído, a-mino, e amino substituído;R5 é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H, sulfonila, sulfonila substituído,sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,hetero ciclila e hetero ciclila substituído; ouum seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

2. Composto de Reivindicação 1, onde X é CR7 e Z é CR4.ido.

3. Composto de reivindicação 1, onde Ri é H.

4. Composto de reivindicação 1, onde Ffe é arila ou arila substitu-

5. Composto de reivindicação 1, onde R3 é H.

6. Composto de reivindicação 2, onde R4, R6, e R7 são H ou halo.

7. Composto de reivindicação 2, onde R4, R6. e R7 são H.

8. Composto de reivindicação 1, onde R5 é selecionado do grupoconsistindo em H, halo, hidroxi, alquila, alquila substituído, amino, aminosubstituído, alcoxi, e alcoxi substituído.

9. Composto de reivindicação 1, onde R5 é H.

10. Composto de reivindicação 1, onde R2 é fenila ou fenilasubstituído.

11. Composto de reivindicação 1, onde Y é N.

12. Composto de reivindicação 1, onde Y é CR8 e somente umd e X e Z é N.

13. Composto de Fórmula (II):<formula>formula see original document page 80</formula>onde R4, R6, e R7 são independentemente selecionados do grupo con-sistindo em H, halo, alquila, alquila substituído, hidroxi, alcoxi, alcoxi substi-tuído, amino, e amino substituído;R5 é selecionado do grupo consistindo em H, alquila, alquila substituído, al-coxi, alcoxi substituído, acila, acil amino, aciloxi, amino, amino substituído,amino carbonila, amino tiocarbonila, amino carbonil amino, amino tiocarbonilamino, amino carboniloxi, amino sulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonilamino, amidino, carboxila, carboxil éster, (carboxil éster) amino, (carboxiléster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, SO3H1 sulfonila, sulfonila substituído,sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquil tio substituído, arila, arila substituído,hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila, ciclo alquila substituído,hetero ciclila, e hetero ciclila substituído;R9, R10, R11, R12, e R13 são independentemente selecionados do grupo con-sistindo em H, alquila, alquila substituído, alcoxi, alcoxi substituído, acila, acilamino, aciloxi, amino, amino substituído, amino carbonila, amino tiocarboni-la, amino carbonil amino, amino tiocarbonil amino, amino carboniloxi, aminosulfonila, amino sulfoniloxi, amino sulfonil amino, amidino, carboxila, carboxiléster, (carboxil éster) amino, (carboxil éster) oxi, ciano, halo, hidroxi, nitro,SO3H, sulfonila, sulfonila substituído, sulfoniloxi, tioacila, tiol, alquil tio, alquiltio substituído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído,ciclo alquila, ciclo alquila substituído, hetero ciclila, hetero ciclila substituído,ariloxi, ariloxi substituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alqui-loxi, ciclo alquiloxi substituído, hetero cicliloxi, e hetero cicliloxi substituído;ouum seu estereoisômero, tautômero, ou sal farmaceuticamente aceitável.

14. Composto de reivindicação 13, onde pelo menos um de R9,R10, R11, R12, e R13 é alcoxi.

15. Composto de reivindicação 13, onde pelo menos um de R9,R10, R11, R12, e R13 é halo, alquila, ou alquila substituído.

16. Composto da reivindicação 13, onde Ri0 é selecionado dogrupo consistindo em halo, alquila, alquila substituído, alcoxi, alcoxi substitu-ído, arila, arila substituído, hetero arila, hetero arila substituído, ciclo alquila,ciclo alquila substituído, hetero ciclila, hetero ciclila substituído, ariloxi, ariloxisubstituído, hetero ariloxi, hetero ariloxi substituído, ciclo alquiloxi, ciclo alqui-loxi substituído, hetero cicliloxi, e hetero cicliloxi substituído.

17. Composto de reivindicação 13, onde R4, R6, e R7 são H ouhalo.

18. Composto de reivindicação 13, onde R4, R6 e R7 são H.

19. Composto de reivindicação 13, onde R5 é selecionado dogrupo consistindo em H, halo, hidroxi, alquila, alquila substituído, amino, a-mino substituído, alcoxi, e alcoxi substituído.

20. Composto de reivindicação 13, onde R5 é H.

21. Composto de reivindicação 1 selecionado do grupo consis-tindo em 6-(3-flúor fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(2-flúor-4-metoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(2,5-dimetoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(3-flúor-4-metoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(4-etil fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(3,4-dimetoxi fenil)-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-[3-triflúor metil) fenil] pirimidin-2 (1H)-ona, 6-(2-flúor fenil)-4-(1H-indazol—5-il) pirimidin-2(1H)-ona, 6-(3-cloro fenil)-4-(1H-indazol-5-il)pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-fenil pirimidin-2 (1H)-ona, 6-[3-(benziloxi) fenil]-4-(1 H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-morfolin-4-il fenil) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-fenoxi fenil)pirimidin-2 (1H)-ona, 6-[4-(benziloxi) fenil]-4-(1H-indazol-5-il) pirimidin-2 (1H)-ona, 4-(1H-indazol-5-il)-6-(4-piperazin-1-il fenil) pirimidin-2 (1H)-ona, ou umseu estereoisômero, tautômero ou sal farmaceuticamente aceitável.

22. Composto de reivindicação 21, onde somente um de X e Z éN.

23. Composição farmacêutica compreendendo um composto dequalquer uma das reivindicações 1-22 e um excipiente farmaceuticamenteaceitável.

24. Processo para tratamento de uma condição através de inibi-ção de atividade de CDC7 compreendendo administração a um paciente emnecessidade de tal tratamento de uma quantidade efetiva de um compostode qualquer uma das reivindicações 1-22.

25. Processo de reivindicação 24 onde a condição é câncer.

26. Processo de reivindicação 25 onde o câncer compreendecélulas que expressam CDC7.

27. Processo de inibição de fosforilação de MCM2, compreen-dendo exposição de MCM2, CDC7 e ATP a um composto de qualquer umade reivindicações 1 -22.

28. Uso de um composto de qualquer uma de reivindicações 1-como um composto farmacêutico.

29. Uso de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-- 22 para o tratamento de câncer.

30. Uso de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-22 na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer.