BR112020026744A2 - Métodos para tratar fibrose hepática com o uso de inibidores de calpaína - Google Patents

Métodos para tratar fibrose hepática com o uso de inibidores de calpaína Download PDF

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BR112020026744A2
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Sharlene Lim
Prabha Ibrahim
Maria Fuentes
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Blade Therapeutics, Inc.
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Abstract

trata-se de métodos para tratar fibrose hepática através da administração de inibidores de calpaína a sujeitos com necessidade do mesmo.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “MÉTODOS
PARA TRATAR FIBROSE HEPÁTICA COM O USO DE INIBIDORES DE CALPAÍNA” Fundamentos Campo
[001] O presente pedido refere-se aos campos de química farmacêutica, bioquímica e medicina. Mais particularmente, a presente invenção se refere a inibidores de calpaína e seu uso como agentes terapêuticos.
Descrição
[002] Distúrbios fibroproliferativos são os principais contribuidores para deficiência de órgãos resultando em morbidade e mortalidade substanciais. Fibrose hepática é um resultado de lesões crônicas e agudas ao fígado. Isso poderia ser a resposta para estímulos metabólicos, virais, ou tóxicos, dentre outros. A inibição de calpaína pode ser potencialmente benéfica em doença fibrótica hepática múltipla.
[003] A colangite esclerosante primária (PSC) é uma rara doença progressiva crônica caracterizada por inflamação e destruição subsequente de dutos biliares intra e extra- hepáticos. Ao longo do tempo, pacientes desenvolvem fibrose hepática e cirrose, que, por fim, podem causar insuficiência hepática. PSC é também associado a taxas aumentadas de câncer colorretal, hepatobiliar e de vesícula biliar (Kumar et al.,
2016, Clin Med Insights Gastroenterol. 9:25-29). Estudos de epidemiologia indicam que pode haver até 50.000 indivíduos afligidos com PSC nos E.U.A (Ali et al., 2015. Intractable Rare Dis Res. 4(1):1-6), embora taxas de prevalência sejam geralmente presumidas como subestimadas devido à dificuldade de diagnosticar corretamente pacientes assintomáticos (Eksteen, 2014. Br Med Bull. 110(1):89-98). O gerenciamento de doença confere primariamente tratamento sintomático (por exemplo, de prurido e fadiga), mas não há agentes aprovados por FDA para tratar PSC, e nenhuma terapia foi mostrada para retardar de forma consistente o progresso da doença. Um agente antifibrótico que atrasa de modo eficaz o progresso da doença seria de tremendo benefício a indivíduos com PSC.
[004] A colangite biliar primária (PBC; anteriormente conhecida como cirrose biliar primária) é uma doença autoimune caracterizada pela destruição gradual de dutos biliares interlobulares. Embora a etiologia seja desconhecida, a degradação de duto biliar causa o acúmulo de ácidos biliares tóxicos, causando eventualmente fibrose, cirrose e, por fim, insuficiência hepática. PBC aflige desproporcionalmente mulheres (em uma razão de gênero de ~10:1), com diagnóstico tipicamente realizado entre 40 a 60 anos de idade quando pacientes são assintomáticos (Selmi et al. 2004. J Clin Gastroenterol. 38:264-271). O progresso de doença é altamente variável e difícil de prever, embora a doença de estágio precoce não tratado possa progredir para cirrose dentro de 4 a 6 anos (Washington 2007, Modern Pathol.
20:S15-S30). A epidemiologia varia por geografia, e um estudo de Mayo frequentemente citado estima uma taxa de prevalência nos E.U.A DE 40 pacientes com PBC / 100 K, que se traduz para uma prevalência nos E.U.A de 120 a 130 K (Kim et al.
2000. Gastroenterol. 119:1631-1636). Ácido ursodeoxicólico (UDCA) é genérico e é o tratamento de primeira linha padrão para PBC, resultando em estabilização de doença para ~50% dos pacientes. Ácido obeticólico (OCA), um agonista de FXR de ácido biliar desenvolvido pela Intercept Pharmaceuticals, foi aprovado nos E.U.A em 2016 em pacientes com resposta inadequada ou intolerante a UDCA. Embora OCA seja eficaz em aprimorar histologia de fígado em muitos desses pacientes, o uso é associado a níveis de LDL aumentados e prurido (Neuschwander-Tetri et al. 2015, Lancet. 385:956-65), deixando oportunidade para produtos futures em desenvolvimento.
[005] Cirrose hepática é um estágio tardio de fibrose hepática caracterizada por regeneração nodular difusa, colapso de estruturas hepáticas e distorção arquitetural de vasculatura hepática substancial. Essa perda de arquitetura funcional causa diretamente hipertensão de portal aumentada, que, por si só, é o acionador primário de complicações que incluem ascite, encefalopatia hepática e formação de varizes (Tsochatzis et al. 2014, Lancet.
383:1749-1761; Goldberg e Chopra, 2017, UpToDate Cirrhosis in adults: Overview of complications, general management, and prognosis). Uma vez que pacientes desenvolvem maiores complicações, os mesmos são considerados descompensados, depois dos quais o único tratamento para muitos pacientes é transplante de fígado. Adicionalmente a NASH, PBC, e PSC, há um grande número de causas de cirrose, incluindo doença de fígado alcóolico, deficiência de antitripsina alfa-1, hepatite autoimune, doença celíaca, hepatite viral crônica, hemocromatrose, fibrose portal idiopática, e doença de Wilson (Goldberg e Chopra, 2016, UpToDate Cirrhosis in adults: Etiologies, clinical manifestations, and diagnosis).
Há atualmente uma falta de tratamentos eficazes para pacientes cirróticos, mas existe oportunidade tanto ao progresso de atraso quanto à degeneração de fígado reverso/fibrose. Isso poderia ser abordado em ambos os pacientes nos quais o acionador de doença hepática foi removido e no qual o acionador permanece ativo. O primeiro grupo inclui pacientes virais (HCV, HBV) que exibiram uma resposta virológica prolongada ou pacientes com hepatite alcóolica que permanecem ausentes. Esses pacientes seriam teoricamente os mais bem posicionados para exibir fibrose hepática aprimorada após um período de tratamento devido à ausência de um insulto em curso. Pacientes com etiologias que continuam a acionar ativamente a degeneração de fígado se beneficiarão de uma terapia que atrasa o progresso de doença, atraso de complicações, transição para descompensação, e insuficiência hepática de estágio tardio.
[006] Estima-se que até um terço das populações nos E.U.A e Europa tem uma afecção denominada doença de gordura no fígado não alcóolica (NAFLD), que é caracterizada por esteatose, ou acúmulo excessivo de gordura no fígado (Wree et al. 2013. Nat. Rev. Gastroenterol. Hepatol. 10: 627–636; Blachier et al. 2012. J. Hepatol. 58: 593-608). Muitos desses indivíduos, por razões não totalmente entendidas, desenvolvem subsequentemente inflamação de fígado, ou esteato-hepatite. Essa afecção, chamada de esteatose hepática não alcóolica, ou NASH, se desenvolve em aproximadamente 10 a 20% dos pacientes com NAFLD, considerando aproximadamente 10 a 20 milhões de indivíduos nos E.U.A (Schattenburg et al. 2011. Curr Opin Lipidol.
22:479-488). Indivíduos que experimentam inflamação de fígado crônica frequentemente desenvolvem fibrose hepática, com eventuais riscos de cirrose, carcinoma hepatocelular e insuficiência hepática. Com base em projeções atuais, é previsto que NASH é prevista para superar a causa principal de transplante de fígado em 2020. (Wree, 2013). Infelizmente, não há terapias disponíveis para prevenir ou tratar fibrose hepática.
Sumário
[007] É revelado no presente documento um método de tratamento de uma doença ou distúrbio selecionado a partir do grupo que consiste em colangite esclerosante primária, colangite biliar primária, doença de gordura no fígado não alcóolica, esteatose hepática não alcóolica, e cirrose hepática; sendo que o método compreende administrar um ou mais inibidores de calpaína, tanto como um agente único como em combinação com outros agentes, a um sujeito em necessidade do mesmo. Exemplos de agentes para combinação incluem, porém, sem limitação, um inibidor de VAP-1, um inibidor de ASBT, um antagonista CCR2/5 dual, um ácido biliar anticoloestático, um agonista de FXR, um agonista FGFR1c/4, um inibidor de CCL24, ácido obeticólico, elafibranor, cenicriviroc, selonsertib, um agonista receptor de niacina, um inibidor de SGLT2 e um FGF21 mimético.
[008] Em algumas modalidades, a cirrose hepática pode ser causada por uma ou mais das afecções selecionadas a partir do grupo que consiste em doença de fígado alcóolico, deficiência de antitripsina alfa-1, hepatite autoimune, doença celíaca, hepatite viral crônica, hemocromatrose, fibrose portal idiopática, e doença de Wilson.
[009] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto conforme descrito no presente documento. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de qualquer uma dentre as Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII ou IX. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína é um composto listados na Tabela 1a, 1b, 2, 3, ou 4.
Breve Descrição dos Desenhos
[0010] A Figura 1 mostra seções de fígado de camundongo coloradas com Picrosirius Red (PSR) e vistas com uso de microscopia de luz polarizada.
[0011] A Figura 2 resume as pontuações de Fibrose de seções de fígado coloradas com Picrosirius Red.
[0012] A Figura 3 mostra a avaliação imuno- histoquímica de CAPN1 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (NASH, cirrose, doença de gordura no fígado).
[0013] A Figura 4 mostra a avaliação imuno- histoquímica de CAPN1 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (PSC e PBC).
[0014] A Figura 5 mostra a avaliação imuno- histoquímica de CAP2 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (NASH, cirrose, doença de gordura no fígado).
[0015] A Figura 6 mostra a avaliação imuno- histoquímica de CAPN2 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (PSC e PBC).
[0016] A Figura 7 mostra a avaliação imuno-
histoquímica de CAPN9 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (NASH, cirrose, doença de gordura no fígado).
[0017] A Figura 8 mostra a avaliação imuno- histoquímica de CAPN9 em fígado humano normal e em fígado humano com doença (PSC e PBC).
[0018] A Figura 9A mostra hematoxilina e fígado colorado com eosina (H&E) e colorado com Sirius Red alimentado com uma dieta com alto teor de gordura definida com aminoácido e deficiente com colina (CDAHFD), As Figuras 9B a 9E mostra a expressão de actina muscular suave (SMA), colágeno (Col1a1), Calpaína1, e Calpaína 2, respectivamente, em ratos com CDAHFD.
[0019] As Figuras 10A a 10C mostra os efeitos de administração de Composto 405 uma vez ao dia em ratos com CDAFHD em peso corporal, razão de fígado/peso corporal e razão de baço para peso corporal, respectivamente.
[0020] As Figuras 11A a 11E mostra os efeitos de administração de Composto 405 uma vez ao dia em ratos com CDAFHD em níveis de alanaina transfersase (ALT) (Figura 11A), níveis de fosfatase alcalina (ALP) (Figura 11B) , níveis de aspartato transaminase (AST) (Figura 11C), níveis de bilirrubina total (Figura 11D) e níveis de Albumina total (Figura 11E).
[0021] As Figuras 12A a 12C mostra os efeitos de administração de Composto 405 duas vezes por dia em ratos com CDAFHD em peso corporal, razão de fígado/peso corporal e razão de baço para peso corporal, respectivamente.
[0022] As Figuras 13A a 13E mostra os efeitos de administração de Composto 405 uma vez ao dia em ratos com CDAFHD em níveis de ALT (Figura 13A), níveis de ALP (Figura 13B), níveis de AST (Figura 13C), níveis de bilirrubina total (Figura 13D), e níveis de Albumina total (Figura 13E).
[0023] A Figura 14A mostra fígado colorado com actina muscular suave alfa (α-SMA) e colorado com Sirius Red e colorada com H&E de ratos com CDAHFD tratados com Composto 405 uma vez ao dia em 200 mg/kg e 60 mg/kg. As Figuras 14B a 14E mostra área proporcional de colágeno (CPA%), níveis de hidroxiprolina, níveis de α-SMA e percentagem de esteatose, respectivamente, em ratos com CDAHFD tratados com Composto 405 uma vez ao dia em 200 mg/kg e 60 mg/kg.
[0024] A Figura 15A mostra fígado colorado com α-SMA e colorado com Sirius Red e colorada com H&E de ratos com CDAHFD tratados com Composto 405 duas vezes ao dia em 100 mg/kg e 30 mg/kg. As Figuras 15B a 15E mostra colágeno CPA%, níveis de hidroxiprolina, níveis de α-SMA e percentagem de esteatose, respectivamente, em ratos com CDAHFD com Composto 405 duas vezes por dia em 100 mg/kg e 30 mg/kg.
[0025] As Figuras 16A a 16F mostra os níveis de expressão de gene pró-fibrótico em ratos com CDAHFD tratados com Composto 405 uma vez ao dia em 200 mg/kg e 60 mg/kg.
[0026] As Figuras 17A a 17F mostra os níveis de expressão de gene pró-fibrótico em ratos com CDAHFD tratados com composto 405 duas vezes por dia em 100 mg/kg e 30 mg/kg.
Descrição Detalhada Definições
[0027] A menos que definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado conforme é comumente entendido por um elemento de habilidade comum na técnica a qual esta revelação pertence. Todas as patentes, pedidos, pedidos publicados, e outras publicações são incorporados a título de referência em sua totalidade. No caso em que há uma pluralidade de definições para um termo no presente documento, aquelas nessa seção prevalecem a menos que declarado de outro modo.
[0028] “Sujeito” conforme usado no presente documento, significa um mamífero humano ou um mamífero não humano, por exemplo, um cão, um gato, um camundongo, um rato, uma vaca, uma ovelha, um porco, uma cabra, um primata não humano ou um pássaro, por exemplo, uma galinha, assim como qualquer outro vertebrado ou invertebrado.
[0029] O termo “mamífero” é usado em seu sentido biológico comum. Desse modo, o mesmo inclui especificamente, porém, sem limitação, primatas, incluindo símios
(chimpanzés, macacos de grande porte, macacos de pequeno ou médio porte) e humanos, gado bovino, cavalos, ovelha, cabras, suínos, coelhos, cães, gatos, ratos e camundongos, mas também inclui muitas outras espécies.
[0030] Uma “quantidade eficaz” ou uma “quantidade terapeuticamente eficaz” conforme usado no presente documento se refere a uma quantidade de um agente terapêutico que é eficaz para aliviar, em alguma extensão, ou reduzir a probabilidade de início, um ou mais dos sintomas de uma doença ou afecção, e inclui curar uma doença ou afecção.
“Curar” significa que os sintomas de uma doença ou afecção são eliminados; no entanto, determinados efeitos a longo prazo ou permanentes pode existir mesmo após uma cura ser obtida (tal como dano te tecido extensivo).
[0031] “Tratar” “tratamento”, ou “tratando” conforme usado no presente documento, se refere a administrar uma composição farmacêutica para fins profiláticos e/ou terapêuticos. O termo “tratamento profilático” se refere a tratar um sujeito que ainda não exibe sintomas de uma doença ou afecção, mas que é suscetível a, ou de outro modo em risco de, uma doença ou afecção particular, na qual tratamento reduz a probabilidade de que o paciente desenvolverá a doença ou afecção. O termo “tratamento terapêutico” se refere a administrar tratamento a um sujeito que já sofre de uma doença ou afecção, e pode incluir inibir a doença ou distúrbio ou deter seu desenvolvimento, ou melhorar ou aliviar a causa da doença ou distúrbio.
[0032] Conforme usado no presente documento, o termo “pró-fármaco” se refere a um agente que é convertido no fármaco precursor in vivo. Pró-fármacos são frequentemente úteis devido ao fato de que, em algumas situações, os mesmos podem ser mais fáceis de administrar do que o fármaco precursor. Os mesmos podem ser, por exemplo, biodisponíveis por administração oral enquanto o precursor não é. O pró- fármaco também pode ter solubilidade aprimorada em composições farmacêuticas sobre o fármaco precursor. Um exemplo, sem limitação, de um pró-fármaco seria um composto que é administrado como um éster (o “pró-fármaco”) para facilitar a transmissão através de uma membrana celular em que a solubilidade em água é prejudicial à mobilidade, mas que então é metabolicamente hidrolisada ao ácido carboxílico, a entidade ativa, uma vez dentro da célula em que a solubilidade em água é benéfica. Um exemplo adicional de um pró-fármaco pode ser um peptídeo curto (poliaminoácido) ligado a um grupo ácido em que o peptídeo é metabolizado para revelar a porção química ativa. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de derivados de pró-fármaco adequados são descritos, por exemplo, em Design of Prodrugs, (ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985), que é incorporado por meio deste ao presente documento a título de referência em sua totalidade.
[0033] Conforme usado no presente documento, o termo “éster de pró-fármaco” se refere a derivados dos compostos revelados no presente documento formados pela adição de qualquer de vários grupos de formação de éster que são hidrolisados sob condições fisiológicas. Exemplos de grupos éster de pró-fármaco incluem pivoiloximetila, acetoximetila, ftalidila, indanila e metoximetila, assim como outros tais grupos conhecidos na técnica, incluindo um grupo (5-R-2-oxo- 1,3-dioxolen-4-il)metila. Outros exemplos de grupos éster de pró-fármaco podem ser encontrados em, por exemplo, T. Higuchi e V. Stella, em "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol.
14, A.C.S. Symposium Series, Sociedade Americana de Química (1975); e "Bioreversible Carriers in Drug Design: Teoria e Aplicação", editado por E. B. Roche, Pergamon Press: New York, 14-21 (1987) (que fornece exemplos de ésteres úteis como pró-fármacos para compostos que contém grupos carboxila). Cada uma das referências mencionadas acima é incorporada ao presente documento a título de referência em sua totalidade.
[0034] “Metabólitos” dos compostos revelados no presente documento incluem espécies ativas que são produzidos mediante introdução dos compostos ao meio biológico.
[0035] “Solvato” se refere ao composto formado pela interação de um solvente e um composto descrito no presente documento, um metabolito, ou sal do mesmo. Solvatos adequados são solvatos farmaceuticamente aceitáveis incluindo hidratos.
[0036] O termo “sal farmaceuticamente aceitável” se refere a sais que retêm a eficácia biológica e propriedades de um composto, que não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis para uso em um produto farmacêutico. Em muitos casos, os compostos no presente documento têm capacidade de formar sais ácidos e/ou de base em virtude da presença de amino e/ou grupos carboxila ou grupos similares aos mesmos.
Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos.
Ácidos inorgânicos dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e similares.
Ácidos orgânicos dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido salicílico e similares. Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com bases inorgânicas e orgânicas. Bases inorgânicas das quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, sódio, potássio, lítio, amônio, cálcio, magnésio, ferro, zinco, cobre, manganês, alumínio e similares; são particularmente preferenciais o amônio, potássio, sódio, cálcio e sais de magnésio. Bases orgânicas das quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, aminas primárias, secundárias, e terciárias, aminas substituídas incluindo aminas substituídas de ocorrência natural, aminas cíclicas, resinas de troca iônica básicas e similares, especificamente tais como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina e etanolamina. Muitos tais sais são conhecidos na técnica, conforme descrito no documento nº WO 87/05297, Johnston et al., publicado em 11 de setembro de 1987 (incorporado a título de referência ao presente documento em sua totalidade).
[0037] Conforme usado no presente documento, “Ca a Cb” ou “Ca-b” no qual “a” e “b” são números inteiros se referem ao número de átomos de carbono no grupo especificado. Ou seja, o grupo pode conter de “a” a “b”, inclusivos, átomos de carbono. Desse modo, por exemplo, um grupo “C1 a C4 alquila” ou “C1-4 alquila” se refere a todos os grupos alquila que têm de 1 a 4 carbonos, ou seja, CH3-, CH3CH2-, CH3CH2CH2- , (CH3)2CH-, CH3CH2CH2CH2-, CH3CH2CH(CH3)- e (CH3)3C-.
[0038] O termo “halogênio” ou “halo,” conforme usado no presente documento, significa qualquer um dos átomos estáveis com rádio da coluna 7 da Tabela Periódica dos Elementos, por exemplo, flúor, cloro, bromo, ou iodo, com flúor e cloro sendo preferenciais.
[0039] Conforme usado no presente documento, “alquila” se refere a uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada que é totalmente saturada (isto é, não contém ligações duplas ou triplas). O grupo alquila pode ter 1 a 20 átomos de carbono (sempre que o mesmo aparecer no presente documento, uma faixa numérica, tal como “1 a 20” se refere a cada número inteiro na dada faixa; por exemplo, “1 a 20 átomos de carbono” significa que o grupo alquila pode consistir em 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., até e incluindo 20 átomos de carbono, embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “alquila” em que nenhuma faixa numérica é designada). O grupo alquila também pode ser uma alquila de tamanho médio que tem 1 a 9 átomos de carbono. O grupo alquila também poderia ser uma alquila inferior que tem 1 a 4 átomos de carbono. O grupo alquila dos compostos pode ser designado como “C1-4 alquila” ou designações similares. A título de exemplo somente, “C1-4 alquila” indica que há um a quatro átomos de carbono na cadeia de alquila, isto é, a cadeia de alquila é selecionada a partir do grupo que consiste em metila, etila, propila, iso-propila, n-butila,
iso-butila, sec-butila e t-butila. Grupos alquila típicos incluem, porém, sem limitação alguma, metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, butila terciária, pentila, hexila e similares.
[0040] Conforme usado no presente documento, “haloalquila” se refere a um grupo alquila de cadeia linear ou ramificada que tem de 1 a 12 átomos de carbono na cadeia, que substitui um ou mais hidrogênios com halogênios. Exemplos de grupos haloalquila incluem, porém, sem limitação, -CF3, - CHF2, -CH2F, -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH2CH2F, -CH2CH2Cl, -CH2CF2CF3 e outros grupos que em luz da habilidade comum na técnica e dos ensinamentos fornecidos no presente documento, seriam considerados equivalentes a qualquer um dos exemplos precedentes.
[0041] Conforme usado no presente documento, “alcóxi” se refere à fórmula –OR em que R é um alquila conforme é definido acima, tais como “C1-9 alcóxi”, incluindo, porém, sem limitação, metóxi, etóxi, n-propóxi, 1-metiletóxi (isopropóxi), n-butóxi, iso-butóxi, sec-butóxi, terc-butóxi e similares.
[0042] Conforme usado no presente documento, “polietileno glicol” se refere à Fórmula em que n é um número inteiro maior do que um e R é um hidrogênio ou alquila. O número de unidades de repetição “n” pode ser indicado referindo-se a um número de membros. Desse modo, por exemplo, “polietileno glicol com 2 a 5 membros” se refere a n sendo um número inteiro selecionado dentre dois a cinco.
Em algumas modalidades, R é selecionado dentre metóxi, etóxi, n-propóxi, 1-metiletóxi (isopropóxi), n-butóxi, iso-butóxi, sec-butóxi e terc-butóxi.
[0043] Conforme usado no presente documento, “heteroalquila” se refere a uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada que contêm um ou mais heteroátomos, que é, um elemento diferente de carbono, incluindo, porém, sem limitação, nitrogênio, oxigênio e enxofre, na cadeia principal. O grupo heteroalquila pode ter 1 a 20 átomos de carbono embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “heteroalquila” em que nenhuma faixa numérica é designada. O grupo heteroalquila também pode ser uma heteroalquila de tamanho médio que tem 1 a 9 átomos de carbono. O grupo heteroalquila também poderia ser uma heteroalquila inferior que tem 1 a 4 átomos de carbono. Em várias modalidades, a heteroalquila pode ter de 1 a 4 heteroátomos, de 1 a 3 heteroátomos, 1 ou 2 heteroátomos ou 1 heteroátomo. O grupo heteroalquila dos compostos pode ser designado como “C1-4 heteroalquila” ou designações similares.
O grupo heteroalquila pode conter um ou mais heteroátomos.
A título de exemplo somente, “C1-4 heteroalquila” indica que há um a quatro átomos de carbono na cadeia de heteroalquila e adicionalmente um ou mais heteroátomos na cadeia principal da cadeia.
[0044] O termo “aromático(a)(s)” se refere a um anel ou sistema anelar que tem um sistema de elétron de pi conjugado e inclui tanto grupos aromáticos carbocíclicos (por exemplo, fenila) quanto grupos aromáticos heterocíclicos (por exemplo, piridina). O termo inclui grupos monocíclicos ou policíclicos de anel fundido (isto é, anéis que compartilham pares adjacentes de átomos) fornecidos que o sistema anelar inteiro é aromático.
[0045] Conforme usado no presente documento, “arila” se refere a um anel aromático ou sistema anelar (isto é, dois ou mais anéis fundidos que compartilham dois átomos de carbono adjacentes) que contêm somente carbono na cadeia principal de anel. Quando a arila é um sistema anelar, cada anel no sistema é aromático. O grupo arila pode ter 6 a 18 átomos de carbono, embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “arila” em que nenhuma faixa numérica é designada. Em algumas modalidades, a grupo arila tem 6 a 10 átomos de carbono. O grupo arila pode ser designado como “C6-10 arila,” “C6 ou C10 arila,” ou designações similares.
Exemplos de arila grupos incluem, porém, sem limitação, fenila, naftila, azulenila e antracenila.
[0046] Conforme usado no presente documento, “arilóxi” e “ariltio” se refere a RO- e RS-, no qual R é uma arila conforme é definido acima, tal como “C6-10 arilóxi” ou “C6-10 ariltio” e similares, incluindo, porém, sem limitação, fenilóxi.
[0047] Uma “aralquila” ou “arilalquila” é um grupo arila conectado, como substituinte, por meio de um grupo alquileno, tal “C7-14 aralquila” e similares, incluindo, porém, sem limitação, benzila, 2-feniletila, 3-fenilpropila e naftilalquila. Em alguns casos, o grupo alquileno é um grupo alquileno inferior (isto é, um grupo C1-4 alquileno).
[0048] Conforme usado no presente documento, “heteroarila” se refere a um anel aromático ou sistema anelar (isto é, dois ou mais anéis fundidos que compartilham dois átomos adjacentes) que contêm (ou contém) um ou mais heteroátomos, ou seja, um elemento diferente de carbono, incluindo porém, sem limitação, nitrogênio, oxigênio e enxofre, na cadeia principal de anel. Quando a heteroarila é um sistema anelar, cada anel no sistema é aromático. O grupo heteroarila pode ter 5 a 18 membros anelares (isto é, o número de átomos que compõem a cadeia principal de anel, incluindo átomos de carbono e heteroátomos), embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “heteroarila” em que nenhuma faixa numérica é designada. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila tem 5 a 10 membros anelares ou 5 a 7 membros anelares. O grupo heteroarila pode ser designado como “heteroarila com 5 a 7 membros”,
“heteroarila com 5 a 10 membros”, ou designações similares.
Em várias modalidades, uma heteroarila contém de 1 a 4 heteroátomos, de 1 a 3 heteroátomos, de 1 a 2 heteroátomos ou 1 heteroátomo. Por exemplo, em várias modalidades, uma heteroarila contém 1 a 4 átomos de nitrogênio, 1 a 3 átomos de nitrogênio, 1 a 2 átomos de nitrogênio, 2 átomos de nitrogênio e 1 átomo de enxofre ou oxigênio, 1 átomo de nitrogênio e 1 átomo de enxofre ou oxigênio, ou 1 átomo de enxofre ou oxigênio. Exemplos de anéis de heteroarila incluem, porém, sem limitação, furila, tienila, ftalazinila, pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, triazolila, tiadiazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, triazinila, quinolinila, isoquinlinila, benzimidazolila, benzoxazolila, benzotiazolila, indolila, isoindolila e benzotienila.
[0049] Uma “heteroaralquila” ou “heteroarilalquila” é grupo heteroarila conectado, como substituinte, por meio de um grupo alquileno. Exemplos incluem, porém, sem limitação 2-tienilmetila, 3-tienilmetila, furilmetila, tieniletila, pirrolilalquila, piridilalquila, isoxazolilalquila e imidazolilalquila. Em alguns casos, o grupo alquileno é um grupo alquileno inferior (isto é, um grupo C1-4 alquileno).
[0050] Conforme usado no presente documento, “carbociclila” significa um anel cíclico não aromático ou sistema anelar que contém somente átomos de carbono na cadeia principal de sistema anelar. Quando a carbociclila é um sistema anelar, dois ou mais anéis podem ser unidos de maneira fundida, em ponte ou conectada em espiral.
Carbociclilas podem ter qualquer grau de saturação desde que pelo menos um anel em um sistema anelar não seja aromático.
Desse modo, carbociclilas incluem cicloalquilas, cicloalquenilas e cicloalquinilas. O grupo carbociclila pode ter 3 a 20 átomos de carbono, embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “carbociclila” em que nenhuma faixa numérica é designada. O grupo carbociclila também pode ser uma carbociclila de tamanho médio que tem 3 a 10 átomos de carbono. O grupo carbociclila também poderia ser uma carbociclila que tem 3 a 6 átomos de carbono. O grupo carbociclila pode ser designado como “C3-6 carbociclila” ou designações similares. Exemplos de anéis de carbociclila incluem, porém, sem limitação, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila, ciclohexenila, 2,3-di-hidro- indeno, biciclo[2.2.2]octanila, adamantila e espiro[4.4]nonanila.
[0051] Uma “(carbociclila)alquila” é um grupo carbociclila conectado, como substituinte, por meio de um grupo alquileno, tal como “C4-10 (carbociclila)alquila” e similares, incluindo, porém, sem limitação, ciclopropilmetila, ciclobutilmetila, ciclopropiletila,
ciclopropilbutila, ciclobutiletila, ciclopropilisopropila, ciclopentilmetila, ciclopentiletila, ciclohexilmetila, ciclohexiletila, cicloheptilmetila e similares. Em alguns casos, o grupo alquileno é um grupo alquileno inferior.
[0052] Conforme usado no presente documento, “cicloalquila” significa um anel de carbociclila totalmente saturado ou sistema anelar. Exemplos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclohexila.
[0053] Conforme usado no presente documento, “cicloalquenila” significa um anel de carbociclila ou sistema anelar que tem pelo menos uma ligação dupla, em que nenhum anel no sistema anelar é aromático. Um exemplo é ciclohexenila.
[0054] Conforme usado no presente documento, “heterociclila” significa um anel cíclico não aromático ou sistema anelar que contém pelo menos um heteroátomo na cadeia principal de anel. Heterociclilas podem ser unidas de maneira fundida, em ponte ou conectada em espiral. Heterociclilas podem ter qualquer grau de saturação desde que pelo menos um anel no sistema anelar não seja aromático. O heteroátomo (ou heteroátomos) pode estar presente tanto em um anel não aromático como em anel aromático no sistema anelar. O grupo heterociclila pode ter 3 a 20 membros anelares (isto é, o número de átomos que compõem a cadeia principal de anel, incluindo átomos de carbono e heteroátomos), embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “heterociclila” em que nenhuma faixa numérica é designada.
O grupo heterociclila também pode ser uma heterociclila de tamanho médio que tem 3 a 10 membros anelares. O grupo heterociclila também poderia ser uma heterociclila que tem 3 a 6 membros anelares. O grupo heterociclila pode ser designada como “heterociclila com 3 a 6 membros” ou designações similares.
[0055] Em várias modalidades, uma heterociclila contém de 1 a 4 heteroátomos, de 1 a 3 heteroátomos, de 1 a 2 heteroátomos ou 1 heteroátomo. Por exemplo, em várias modalidades, uma heterociclila contém 1 a 4 átomos de nitrogênio, 1 a 3 átomos de nitrogênio, 1 a 2 átomos de nitrogênio, 2 átomos de nitrogênio e 1 átomo de enxofre ou oxigênio, 1 átomo de nitrogênio e 1 átomo de enxofre ou oxigênio ou 1 átomo de enxofre ou oxigênio. Em heterociclilas monocíclicas com seis membros preferenciais, o heteroátomo (ou heteroátomos) é(são) selecionados dentre um até três dentre O, N ou S, e em heterociclilas monocíclicas com cinco membros preferenciais, o heteroátomo (ou heteroátomos) é(são) selecionado dentre um ou dois heteroátomos selecionados dentre O, N, ou S. Exemplos de anéis de heterociclila incluem, porém, sem limitação, azepinila, acridinila, carbazolila, cinolinila, dioxolanila, imidazolinila, imidazolidinila, morfolinila, oxiranila,
oxepanila, tiepanila, piperidinila, piperazinila, dioxopiperazinila, pirrolidinila, pirrolidonila, pirrolidionila, 4-piperidonila, pirazolinila, pirazolidinila, 1,3-dioxinila, 1,3-dioxanila, 1,4- dioxinila, 1,4-dioxanila, 1,3-oxatianila, 1,4-oxatinila, 1,4-oxathianila, 2H-1,2-oxazinila, trioxanila, hexahidro- 1,3,5-triazinila, 1,3-dioxolila, 1,3-dioxolanila, 1,3- ditiolila, 1,3-ditiolanila, isoxazolinila, isoxazolidinila, oxazolinila, oxazolidinila, oxazolidinonila, tiazolinila, tiazolidinila, 1,3-oxatiolanila, indolinila, isoindolinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, tetra- hidrotiofenila, tetra-hidrotiopiranila, tetra-hidro-1,4- tiazinila, tiamorfolinila, di-hidrobenzofuranila, benzimidazolidinila e tetra-hidroquinolina.
[0056] Uma “(heterociclila)alquila” é um grupo heterociclila conectado, como substituinte, por meio de um grupo alquileno. Exemplos incluem, porém, sem limitação, imidazolinilmetila e indoliniletila.
[0057] Conforme usado no presente documento, “acila” se refere a –C(=O)R, em que R é hidrogênio, C1-6 alquila, C2- 6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento. Exemplos não limitadores incluem formila, acetila, propanoila, benzoila e acrila.
[0058] Um grupo “O-carbóxi” se refere a um grupo “- OC(=O)R” no qual R é selecionado dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0059] Um grupo “C-carbóxi” se refere a um grupo “-C(=O)OR” no qual R é selecionado dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento. Um exemplo não limitador inclui carboxila (isto é, -C(=O)OH).
[0060] Um grupo “ciano” se refere a um grupo “-CN”.
[0061] Um grupo “cianato” se refere a um grupo “- OCN”.
[0062] Um grupo “isocianato” se refere a um grupo “-NCO”.
[0063] Um grupo “tiocianato” se refere a um grupo “-SCN”.
[0064] Um grupo “isotiocianato” se refere a um grupo “ -NCS”.
[0065] Um grupo “sulfinila” se refere a um grupo “-S(=O)R” no qual R é selecionado dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6- 10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0066] Um grupo “sulfonila” se refere a um grupo “- SO2R” no qual R é selecionado dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0067] Um grupo “S-sulfonamido” grupo se refere a um grupo “-SO2NRARB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6- 10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0068] Um grupo “N-sulfonamido” se refere a um grupo “-N(RA)SO2RB” no qual RA e Rb são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0069] Um grupo “O-carbamila” se refere a um grupo “-OC(=O)NRARB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0070] Um grupo “N-carbamila” se refere a um grupo “-N(RA)OC(=O)RB” no qual RA e RB são, cada um,
independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6- 10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0071] Um grupo “O-tiocarbamila” se refere a um grupo “-OC(=S)NRARB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0072] Um grupo “N-tiocarbamila” se refere a um grupo “-N(RA)OC(=S)RB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6- 10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0073] Um grupo “C-amido” se refere a um grupo “-C(=O)NRARB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0074] Um grupo “N-amido” se refere a um grupo “- N(RA)C(=O)RB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila,
C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0075] Um grupo “amino” grupo se refere a um grupo “-NRARB” no qual RA e RB são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros e heterociclila com 5 a 10 membros, conforme definido no presente documento.
[0076] Um grupo “aminoalquila” se refere a um grupo amino conectado por meio de um grupo alquileno.
[0077] Um grupo “alcoxialquila” se refere a um grupo alcóxi conectado por meio de um grupo alquileno, tal como uma “C2-8 alcoxialquila” e similares.
[0078] Conforme usado no presente documento, uma “cadeia lateral de aminoácido natural” se refere ao substituinte de cadeia lateral de um aminoácido de ocorrência natural. Aminoácidos de ocorrência natural têm um substituinte fixado ao α–carbono. Aminoácidos de ocorrência natural incluem Arginina, Lisina, Ácido aspártico, Ácido glutâmico, Glutamina, Asparagina, Histidina, Serina, Treonina, Tirosina, Cisteína, Metionina, Triptofano, Alanina, Isoleucina, Leucina, Fenilalanina, Valina, Prolina e Glicina.
[0079] Conforme usado no presente documento, uma
“cadeia lateral de aminoácido não natural” se refere ao substituinte de cadeia lateral de um aminoácido de ocorrência não natural. Aminoácidos de ocorrência não natural incluem β-aminoácidos (β3 e β2), Homoaminoácidos, derivados de Prolina e Ácido pirúvico, derivados de alanina 3- substituída, derivados de Glicina, Fenilalanina de anel substituído e derivados de Tirosina, aminoácidos de núcleo linear e aminoácidos de N-metila. Aminoácidos não naturais exemplificadores são disponíveis junto à Sigma-Aldridge, listados sob “aminoácidos não naturais & derivados”.
Consultar também, Travis S. Young e Peter G. Schultz, “Beyond the Canonical 20 Amino Acids: Expanding the Genetic Lexicon,” J. Biol. Chem. 2010 285: 11039-11044, que é incorporado a título de referência em sua totalidade.
[0080] Conforme usado no presente documento, um grupo substituído é derivado do grupo precursor não substituído no qual houve uma troca de um ou mais átomos de hidrogênio para outro átomo ou grupo. A menos que indicado de outro modo, quando um grupo é considerado como “substituído,” é dito que o grupo é substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados dentre C1- C6 alquila, C1-C6 alquenila, C1-C6 alquinila, C1-C6 heteroalquila, C3-C7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), C3-C7-carbociclila-C1-C6-alquila
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), heteroacila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-
C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), heteroacil-C1-C6-alquila com 5 a 10 membros
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), arila
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), arila(C1-
C6)alquila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi),
heteroarila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e
C1-C6 haloalcóxi), heteroarila(C1-C6)alquila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila,
C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila e C1-C6 haloalcóxi), halo,
ciano, hidróxi, C1-C6 alcóxi, C1-C6 alcóxi(C1-C6)alquila (isto é, éter), arilóxi, sulfidrila (mercapto), halo(C1-C6)alquila
(por exemplo, –CF3), halo(C1-C6)alcóxi (por exemplo, –OCF3),
C1-C6 alquiltio, ariltio, amino, amino(C1-C6)alquila, nitro,
O-carbamila, N-carbamila, O-tiocarbamila, N-tiocarbamila, C-
amido, N-amido, S-sulfonamido, N-sulfonamido, C-carbóxi, O-
carbóxi, acila, cianato, isocianato, tiocianato,
isotiocianato, sulfinila, sulfonila e oxo (=O). Onde um grupo for descrito como “opcionalmente substituído” que grupo pode ser substituído pelos substituintes acima.
[0081] Em algumas modalidades, o grupo (ou grupos) substituído é (são) substituído por um ou mais substituinte (ou substituintes) individual e independentemente selecionados dentre C1-C4 alquila, amino, hidróxi e halogênio.
[0082] Deve-se entender que determinadas convenções de nomeação de radical podem incluir tanto um radical mono como um radical di, dependendo do contexto. Por exemplo, em que um substituinte exige dois pontos de fixação ao resto da molécula, entende-se que o substituinte é um radical di. Por exemplo, um substituinte identificado como alquila que exige dois pontos de fixação inclui radicais di, tais como –CH2–, –CH2CH2–, –CH2CH(CH3)CH2– e similares. Outras convenções de nomeação de radical indicam claramente que o radical é um radical di, tal como “alquileno” ou “alquenileno”.
[0083] Quando é dito que dois grupos R formam um anel (por exemplo, um anel de carbociclila, heterociclila, arila ou heteroarila) “em conjunto com o átomo ao qual os mesmos são fixados” é dito que a unidade coletiva do átomo e os dois grupos R são o anel citado. O anel não é de outro modo limitado pela definição de cada R grupo quando tomados individualmente. Por exemplo, quando a substrutura a seguir está presente:
[0084] e R1 e R2 são definidos como selecionados a partir do grupo que consiste em hidrogênio e alquila, ou R1 e R2 em conjunto com o nitrogênio ao qual os mesmos são fixados formam uma heterociclila, é dito que R1 e R2 pode ser selecionado dentre hidrogênio ou alquila, ou alternativamente, a substrutura tem estrutura:
[0085] em que anel A é um anel de heterociclila que contém o nitrogênio retratado.
[0086] De modo similar, quando é dito que dois grupos R “adjacentes” formam um anel “em conjunto com os átomos aos quais os mesmos são fixados”, é dito que a unidade coletiva dos átomos, ligações de intervenção, e os dois grupos R são o anel citado. Por exemplo, quando a substrutura a seguir está presente:
[0087] e R1 e R2 são definidos como selecionados a partir do grupo que consiste em hidrogênio e alquila, ou R1 e R2 em conjunto com os átomos aos quais os mesmos são fixados formam uma arila ou carbociclila, é dito que R1 e R2 pode ser selecionado dentre hidrogênio ou alquila, ou alternativamente, a substrutura tem estrutura:
[0088] em que A é um anel de arila ou uma carbociclila que contém a ligação dupla retratada.
[0089] Onde um substituinte for retratado como um radical di (isto é, tem dois pontos de fixação ao resto da molécula), deve-se entender que o substituinte pode ser fixado em qualquer configuração direcional a menos que indicado de outro modo. Desse modo, por exemplo, um
A substituinte retratado como –AE– ou E inclui o substituinte que é orientado de modo que o A seja fixado no ponto de fixação mais à esquerda da molécula assim como o caso no qual A é fixado no ponto de fixação mais à direita da molécula.
[0090] Conforme usado no presente documento, a substrutura:
significa que o átomo A8 pode estar em qualquer posição de átomo de anel dentro do anel ou sistema anelar A1. A substrutura: significa que o átomo de A8 está na posição de átomo de anel imediatamente adjacente (isto é, alfa) ao ponto de fixação indicado por *.
[0091] Conforme usado no presente documento, "isósteros" de um grupo químico são outros grupos químicos que exibem as mesmas propriedades ou propriedades similares.
Por exemplo, tetrazol é um isóstero de ácido carboxílico devido ao fato de que o mesmo simula as propriedades de ácido carboxílico mesmo que ambos tenham fórmulas moleculares muito diferentes. Tetrazol é uma das muitas substituições isostéricas possíveis para ácido carboxílico. Outros isósteros de ácido carboxílico contemplados incluem -SO3H, - SO2HNR, -PO2(R)2, -PO3(R)2, -CONHNHSO2R, -COHNSO2R e –CONRCN, em que R é selecionado dentre hidrogênio, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C3-7 carbociclila, C6-10 arila, heteroarila com 5 a 10 membros, e heterociclila com 3 a 10 membros, conforme definido no presente documento. Além disso, isósteros de ácido carboxílico podem incluir carbociclos ou heterociclos com 5 a 7 membros que contêm qualquer combinação de CH2, O, S, ou N in qualquer estado de oxidação quimicamente estável, em que quaisquer dos átomos da dita estrutura de anel são opcionalmente substituídos em uma ou mais posições. As seguintes estruturas são exemplos não limitadores de isósteros carbocíclicos e heterocíclicos contemplados. Os átomos da dita estrutura de anel podem ser opcionalmente substituídos em uma ou mais posições com R conforme definido acima.
[0092] É também contemplado que, quando substituintes químicos são adicionados a um isóstero carboxílico, o composto retém as propriedades de um isóstero carboxílico. É contemplado que, quando um isóstero carboxílico é opcionalmente substituído por uma ou mais porções químicas selecionadas dentre R conforme definido acima, então a substituição e a posição de substituição são selecionadas de modo que o mesmo elimine as propriedades isostéricas de ácido carboxílico do composto. De modo similar, é contemplado que a colocação de um ou mais substituintes de R mediante um isóstero de ácido carboxílico ou heterocíclico não é uma substituição em um ou mais átomos que mantêm (ou mantém) ou é/são integrais às propriedades isostéricas de ácido carboxílico do composto, se tal substituinte (ou substituintes) destruiria as propriedades isostéricas de ácido carboxílico do composto.
[0093] Outros isósteros de ácido carboxílico não especificamente exemplificados neste relatório descritivo são também contemplados.
[0094] O termo “agente” ou “agente de teste” inclui qualquer substância, molécula, elemento, composto, entidade, ou uma combinação dos mesmos. O mesmo inclui, porém, sem limitação, por exemplo, proteína, polipeptídeo, peptídeo ou mimético, pequena molécula orgânica, polissacarídeo, polinucleotídeo e similares. O mesmo pode ser um produto natural, um composto sintético, ou um composto químico, ou uma combinação de duas ou mais substâncias. A menos que especificado de outro modo, os termos “agente”, “substância”, e “composto” são usados de modo intercambiável no presente documento.
[0095] O termo “análogo” é usado no presente documento para se referir a uma molécula que se assemelha estruturalmente a uma molécula de referência, mas que foi modificada maneira alvejada e controlada, substituindo-se um substituinte específico da molécula de referência com um substituinte alternado. Em comparação à molécula de referência, um análogo seria esperado, por um especialista no assunto, para exibir a mesma utilidade, utilidade similar ou aprimorada. A síntese e triagem de análogos, para identificar variantes de compostos conhecidos que tem características aprimoradas (como maior afinidade de ligação para uma molécula alvo) é uma abordagem que é conhecida na química farmacêutica.
Métodos de Tratamento
[0096] Em algumas modalidades, os compostos revelados no presente documento são inibidores de calpaína.
Em algumas modalidades, os compostos podem atuar de modo eficaz como inibidores de CAPN1, CAPN2 e/ou CAPN9. Algumas modalidades fornecem composições farmacêuticas que compreendem um ou mais compostos revelados no presente documento e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0097] Algumas modalidades fornecem um método para tratar fibrose hepática com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento.
[0098] Algumas modalidades fornecem um método para tratar colangite esclerosante primária com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento. Algumas modalidades fornecem um método para tratar colangite biliar primária com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento. Algumas modalidades fornecem um método para tratar doença de gordura no fígado não alcóolica com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento. Algumas modalidades fornecem um método para tratar esteatose hepática não alcóolica com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento.
[0099] Algumas modalidades fornecem um método para tratar cirrose hepática com uma quantidade eficaz de um ou mais compostos conforme revelado no presente documento. Em algumas modalidades, a cirrose hepática é causada por uma ou mais dentre as afecções selecionadas a partir do grupo que consiste em doença de fígado alcóolico, deficiência de antitripsina alfa-1, hepatite autoimune, doença celíaca, hepatite viral crônica, hemocromatrose, fibrose portal idiopática, e doença de Wilson.
[00100] Em algumas modalidades, o sujeito é um mamífero. Em algumas modalidades específicas, o sujeito é um humano.
[00101] Modalidades adicionais incluem administrar uma combinação de compostos a um sujeito em necessidade dos mesmos. Uma combinação pode incluir um composto, composição, composição farmacêutica descrita no presente documento com um medicamento adicional.
[00102] Algumas modalidades incluem coadministrar um composto, composição, e/ou composição farmacêutica descrita no presente documento, com um medicamento adicional. Por “coadministração,” significa que os dois ou mais agentes podem ser constatados na corrente sanguínea do paciente ao mesmo tempo, independentemente de quando ou como os mesmos são realmente administrados. Em uma modalidade, os agentes são administrados simultaneamente. Em tal modalidade, a administração em combinação é concluída combinando-se os agentes em uma única forma de dosagem. Em outra modalidade, os agentes são administrados sequencialmente. Em uma modalidade os agentes são administrados através da mesma rota, tal como oralmente. Em outra modalidade, os agentes são administrados através de diferentes rotas, tais como uma que é administrada oralmente e outra sendo administrada i.v.
[00103] Algumas modalidades incluem uma combinação dos compostos, composições e/ou composições farmacêuticas descritas no presente documento com um agente adicional, tal como anti-inflamatórios incluindo glicocorticoides, analgésicos (por exemplo ibuprofeno), aspirina, e agentes que modulam uma resposta imune a Th2, imunossupressores que incluem metotrexato, micofenolato, ciclofosfamida, ciclosporina, talidomida, pomalidomida, leflunomida, hidroxicloroquina, azatioprina, cartilagem bovina solúvel,
vasodilatadores incluindo antagonistas receptores de endotelina, análogos de prostaciclina, nifedipina e sildenafil, antagonistas receptores de IL-6, inibidores de quinase de tirosina seletivos e não seletivos, moduladores de por meio de Wnt, ativadores de PPAR, inibidores de caspase-3, antagonistas receptores de LPA, agentes de esgotamento de célula B, antagonistas de CCR2, pirfenidona, agonistas receptores de canabinoide, inibidores de ROCK, agentes de alvejamento de miRNA, antagonistas receptores do tipo toll, agentes de alvejamento de CTGF, inibidores de oxidase de NADPH, inibidores de triptase, inibidores de TGFD, agonistas receptores de relaxina, e células regenerativas derivadas adiposas autólogas.
[00104] Em algumas modalidades descritas no presente documento, o inibidor de calpaína descrito no presente documento pode ser administrado em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em um inibidor de VAP-1, um Inibidor de ASBT, um antagonista CCR2/5 dual, um ácido biliar anticoloestático, um agonista de FXR, um agonista FGFR1c/4, terapia de célula de célula-tronco mesenquimal (MSC), um Inibidor de CCL24 e um Inibidor de CCL11. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser usado em combinação com um ou mais agentes supracitados adicionais em um método de tratamento de colangite esclerosante primária (PSC), sendo que o método compreende administrar o inibidor de calpaína em combinação com um ou mais agentes supracitados adicionais a um sujeito em necessidade do mesmo.
[00105] Em algumas modalidades fornecidas no presente documento, o inibidor de calpaína descrito no presente documento pode ser administrado em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em ácido obeticólico, elafibranor, cenicriviroc, selonsertib, um agonista receptor de niacina, um inibidor de SGLT2, um inibidor de VAP-1, um FGF21 mimético, um agonista receptor de adenosina A3, um modulador de mTOT, um agonista de FXR, um inibidor de galectina-3, um ativador de ABCA1, um inibidor de SCD1, um inibidor de ACC, um inibidor de célula T NK Tipo I, um agonista de pan-PPAR, um inibidor de DGAT2, um agonista de PPARalfa, um agonista de R-b de hormônio de tireoide, um inibidor de 5-LO/LT, um agonista receptor de mineralocorticoide, um FGF19 mimético, um inibidor de caspase, um agonista de GLP-1R, um agonista de SIRT1/AMP, um inibidor de ACC, um inibidor de ceto-hexoquinase, um agonista GLP-1R, um inibidor de ASBT, um inibidor de DGAT2/CYP2E1, um antagonista de TLR4, um agonista de R-b de hormônio de tireoide, um antagonista receptor de IFN-gama, um antagonista de CB1, um ligante de FGF21, um antagonista receptor de P2Y13, um inibidor de CCL24, um antagonista receptor-1 de MCH, aPPARalfa, agonista de delta, um inibidor de DPP-4, antagonista de aLXR, um agonista de GLP1R, um inibidor de eotaxina-1, um agonista de beta-klotho/FGFR1c, um inibidor de LOXL2, um ativador de AMPK, um inibidor de miR-103/107, um inibidor de inflamassoma, um antagonista de CD3 e um inibidor de catepsina B. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser usado em combinação com um ou mais agentes supracitados adicionais em um método de tratamento de esteatose hepática não alcóolica (NASH), sendo que o método compreende administrar o inibidor de calpaína em combinação com um ou mais agentes supracitados adicionais a um sujeito em necessidade do mesmo.
Administração e Composições farmacêuticas
[00106] Os compostos são administrados em uma dosagem terapeuticamente eficaz. Embora níveis de dosagem humano têm ainda de ser otimizados para os compostos descritos no presente documento, geralmente, uma dosagem diária pode ser de cerca de 0,25 mg/kg a cerca de 120 mg/kg ou mais de peso corporal, de cerca de 0,5 mg/kg ou menos a cerca de 70 mg/kg, de cerca de 1,0 mg/kg a cerca de 50 mg/kg de peso corporal, ou de cerca de 1,5 mg/kg a cerca de 10 mg/kg de peso corporal.
Desse modo, para administração a uma pessoa de 70 kg, a faixa de dosagem seria de cerca de 17 mg por dia a cerca de 8000 mg por dia, de cerca de 35 mg por dia ou menos a cerca de
7.000 mg por dia ou mais, de cerca de 70 mg por dia a cerca de 6.000 mg por dia, de cerca de 100 mg por dia a cerca de
5.000 mg por dia, ou de cerca de 200 mg a cerca de 3.000 mg por dia. A quantidade de composto ativo administrado será, evidentemente, dependente do sujeito e estado da doença a ser tratada, a severidade da aflição, a maneira e programação de administração e o julgamento do médico da prescrição.
[00107] Administração dos compostos revelados no presente documento ou os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser por meio de qualquer um dos modos aceitos de administração para agentes que servem utilidades similares incluindo, porém, sem limitação, oralmente, modo subcutâneo, intravenoso, intranasal, tópica, transdérmica, intraperitoneal, intramuscular, intrapulmonar, vaginal, retal ou intraocular. As administrações orais ou parenterais são comuns em tratar as indicações que são o sujeito das modalidades preferenciais.
[00108] Os compostos úteis conforme descrito acima podem ser formulados em composições farmacêuticas para uso no tratamento dessas afecções. Técnicas de formulação farmacêutica padrão são usadas, tais como aquelas reveladas em Remington’s The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005), incorporados a título de referência em sua totalidade. Consequentemente, algumas modalidades incluem composições farmacêuticas que compreendem: (a) uma quantidade segura e terapeuticamente eficaz de um composto descrito no presente documento
(incluindo enantiômeros, diastereoisômeros, tautômeros, polimorfos, e solvatos dos mesmos), ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; e (b) um carreador farmaceuticamente aceitável, diluente, excipiente ou combinação dos mesmos.
[00109] Adicionalmente ao composto selecionado útil conforme descrito acima, modalidades come incluem composições que contêm um carreador farmaceuticamente aceitável. O termo “carreador farmaceuticamente aceitável” ou “excipiente farmaceuticamente aceitável” inclui quaisquer e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e de atraso de absorção e similares. O uso de tais meios e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é conhecido na técnica. Exceto à medida que quaisquer meios convencionais ou agentes sejam incompatíveis com o ingrediente ativo, seu uso nas composições terapêuticas é contemplado. Além disso, vários adjuvantes tais como são comumente usados na técnica podem ser incluídos.
Considerações para a inclusão de vários componentes em composições farmacêuticas são descritos, por exemplo, em Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman e Gilman’s: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8º Ed., Pergamon Press, que é incorporado ao presente documento a título de referência em sua totalidade.
[00110] Alguns exemplos de substâncias, que podem servir como carreadores ou componentes farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, são açúcares, tais como lactose, glucose e sacarose; amidos, tais como amido de milho e amido de batata; celulose e seus derivados, tais como celulose de carboxila de sódio, celulose de etila, e celulose de metila; goma adragante em pó; malta; gelatina; talco; lubrificantes sólidos, tais como ácido esteárico e estearato de magnésio; sulfato de cálcio; óleos vegetais, tais como óleo de amendoim, óleo de algodão, óleo de sésamo, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de theobroma; polióis, tais como propileno glicol, glicerina, sorbitol, manitol, e polietileno glicol; ácido algínico; emulsificantes, tais como os TWEENS; agentes de umidificação, tais como sulfato de laurila de sódio; agentes de coloração; agentes flavorizantes; agentes de formação de tabletes, estabilizantes; antioxidantes; conservantes; água livre de pirogênio; salino isotônico e soluções de tampão de fosfato.
[00111] A escolha de um carreador farmaceuticamente aceitável a ser usado em conjunto com o sujeito composto é basicamente determinada por meio que o composto deve ser administrado.
[00112] As composições descritas no presente documento são preferencialmente fornecidas em forma de dosagem unitária. Conforme usado no presente documento, uma
"forma de dosagem unitária" é uma composição que contém uma quantidade de um composto que é adequada para administração a um animal, preferencialmente mamífero sujeito, em uma dose única, de acordo com prática médica satisfatória. A preparação de uma forma de dosagem única ou unitária, no entanto, não implica que a forma de dosagem é administrada uma vez por dia ou uma vez por curso de terapia. Tais formas de dosagem são contempladas para serem administradas uma vez, duas vezes, três vezes ou mais por dia e podem ser administradas como infusão por um período de tempo (por exemplo, de cerca de 30 minutos a cerca de 2 a 6 horas), ou administradas como uma infusão contínua, e pode ser dada mais do que uma vez durante um curso de terapia, embora uma única administração não seja especificamente excluída. O especialista no assunto reconhecerá que a formulação não contempla especificamente o curso inteiro de terapia e tais decisões são deixadas para aqueles especialistas no assunto de tratamento em vez de formulação.
[00113] As composições úteis conforme descrito acima pode estar em qualquer dentre uma variedade de formas adequadas para uma variedade de rotas para administração, por exemplo, para rota oral, nasal, retal, tópica (incluindo transdérmica), ocular, intracerebral, intracraniana, intratecal, intra-arterial, intravenosa, intramuscular, ou outras rotas parentais de administração. O especialista no assunto verificará que composições orais e nasais compreendem composições que são administradas por inalação, e produzidas com uso de metodologias disponíveis. Dependendo da rota particular de administração desejada, uma variedade de carreadores farmaceuticamente aceitáveis conhecidos na técnica pode ser usada. Carreadores farmaceuticamente aceitáveis incluem, por exemplo, cargas sólidas ou líquidas, diluentes, hidrotropias, agentes ativos de superfície, e substâncias de encapsulação. Materiais farmaceuticamente ativas opcionais podem ser incluídos, que não interferem substancialmente com a atividade inibitória do composto. A quantidade de carreador empregado em conjunto com o composto é suficiente para fornecer uma quantidade prática de material para administração por dose de unidade do composto. Técnicas e composições para produzir formas de dosagem úteis nos métodos descritos no presente documento são descritos nas referências a seguir, todas incorporadas a título de referência ao presente documento: Modern Pharmaceutics, 4º Ed., Capítulos 9 e 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002); Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989); and Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8a Edição (2004).
[00114] Várias formas de dosagem orais podem ser usadas, incluindo tais formas sólidas como tabletes, cápsulas, grânulos e pós a granel. Tabletes podem ser comprimidos, triturados de tablete, ligantes de revestimento entérico, revestidos com açúcar, revestidos com filme, ou de múltiplos comprimidos, contendo ligantes adequados, lubrificantes, diluentes, agentes desintegrantes, agentes de coloração, agentes flavorizantes, agentes de indução de fluxo e agentes de fusão. Formas de dosagem orais líquidas incluem soluções aquosas, emulsões, suspensões, soluções e/ou suspensões reconstituídas de grânulos não efervescentes, e preparações efervescentes reconstituídas a partir de grânulos efervescentes, que contém solventes adequados, conservantes, agentes emulsificantes, agentes de suspensão, diluentes, adoçantes, agentes de fusão, agentes de coloração e agentes flavorizantes.
[00115] O carreador farmaceuticamente aceitável adequado para a preparação de formas de dosagem unitária para administração peroral é conhecida na técnica. Tabletes tipicamente compreendem adjuvantes farmaceuticamente compatíveis convencionais como diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, manitol, lactose e celulose; ligantes tais como amido, gelatina e sacarose; desintegrantes tais como amido, ácido algínico e croscarmelose; lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico e talco. Agentes antiaderentes tais como dióxido de silício podem ser usados para aprimorar características de fluxo da mistura em pó. Agentes de coloração, tais como os corantes FD&C, podem ser adicionados para aparição. Adoçantes e agentes flavorizantes, tais como aspartame, sacarina, mentol, hortelã, e sabores de fruta, são adjuvantes úteis para tabletes mastigáveis. Cápsulas compreendem tipicamente um ou mais diluentes sólidos revelados acima. A seleção de componentes de carreador depende de considerações secundárias como gosto, custo, e estabilidade em prateleira, que não são cruciais, e pode ser prontamente realizada por um especialista no assunto.
[00116] Composições perorais também incluem soluções líquidas, emulsões, suspensões e similares. Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis adequados para preparação de tais composições são conhecidos na técnica. Componentes típicos de carreadores para xaropes, elixires, emulsões e suspensões incluem etanol, glicerol, propileno glicol, polietileno glicol, sacarose líquida, sorbitol e água. Para uma suspensão, agentes de suspensão típicos incluem celulose de metila, celulose de carboxila de sódio, AVICEL RC-591, goma adragante e alginato de sódio; agentes de umidificação típicos incluem lecitina e polisorbato 80; e conservantes típicos incluem parabeno de metila e benzoato de sódio.
Composições líquidas perorais também pode conter um ou mais componentes, tais como adoçantes, agentes flavorizantes e agentes colorantes revelados acima.
[00117] Tais composições também podem ser revestidas por métodos convencionais, tipicamente com revestimentos dependentes de pH ou tempo, de modo que o sujeito composto seja liberado no trato gastrointestinal nos arredores da aplicação tópica desejada, ou em vários períodos para estender a ação desejada. Tais formas de dosagem incluem tipicamente, porém, sem limitação, um ou mais dentre ftalato de acetato de celulose, ftalato de polivinilacetato, ftalato de celulose de metila de hidroxipropila, celulose de etila, revestimentos de Eudragit, ceras e goma laca.
[00118] Composições descritas no presente documento podem incluir opcionalmente outros ativos de fármacos.
[00119] Outras composições úteis para atingir entrega sistêmica dos compostos sujeitos incluem formas de dosagem sublingual, bucal e nasal. Tais composições tipicamente compreendem um ou mais dentre substâncias de carga solúveis, tais como sacarose, sorbitol e manitol; e ligantes, tais como acácia, celulose microcristalina, celulose de carboximetila e celulose de metila de hidroxipropila.
Agentes antiaderentes, lubrificantes, adoçantes, agentes colorantes, antioxidantes e agentes flavorizantes revelados acima também podem ser incluídos.
[00120] Uma composição líquida, que é formulada para uso oftálmico tópico, é formulada de modo que a mesma possa ser administrada de modo tópico ao olho. O conforto deve ser maximizado o máximo possível, embora algumas vezes as considerações de formulação (por exemplo, estabilidade de fármaco) pode necessitar menos do que conforto ideal. No caso em que conforto não pode ser maximizado, o líquido deve ser formulado de modo que o líquido seja tolerável ao paciente para uso oftálmico tópico. Adicionalmente, um líquido oftalmicamente aceitável deve ser tanto embalado para uso único, ou conter um conservante para prevenir contaminação por múltiplos usos.
[00121] Para aplicação oftálmica, soluções ou medicamentos são frequentemente preparados com uso de uma solução salina fisiológica como um veículo principal.
Soluções oftálmicas devem ser preferencialmente mantidas em um pH confortável com um sistema de tampão apropriado. As formulações também podem conter conservantes farmaceuticamente aceitáveis, estabilizantes e tensoativos convencionais.
[00122] Conservantes que podem ser usados nas composições farmacêuticas reveladas no presente documento incluem, porém, sem limitação, cloreto de benzalcônio, PHMB, clorobutanol, timerosal, acetato fenilmercúrico e nitrato fenilmercúrico. Um tensoativo útil é, por exemplo, Tween 80.
De modo similar, vários veículos úteis podem ser usados nas preparações oftálmicas reveladas no presente documento.
Esses veículos, incluem, porém, sem limitação, álcool polivinílico, povidona, celulose de metila de hidroxipropila, poloxâmeros, celulose de carboximetila, celulose de hidroxietila e água purificada.
[00123] Ajustadores de tonicidade podem ser adicionados conforme necessário ou conveniente. Os mesmos incluem, porém, sem limitação, sais, particularmente, cloreto de sódio, cloreto de potássio, manitol e glicerina, ou qualquer outro ajustador de tonicidade oftalmicamente aceitável adequado.
[00124] Vários tampões e meios para ajustar pH podem ser usados tão logo a preparação resultante é oftalmicamente aceitável. Para muitas composições, o pH será entre 4 e 9.
Consequentemente, tampões incluem tampões de acetato, tampões de citrato, tampões de fosfato e tampões de borato.
Ácidos ou bases podem ser usados para ajustar o pH dessas formulações conforme necessário.
[00125] Em uma veia similar, um antioxidante oftalmicamente aceitável inclui, porém, sem limitação, metabisulfeto de sódio, tiossulfato de sódio, acetilcisteina, hidroxianisol butilado e hidroxitolueno butilado.
[00126] Outros componentes de excipiente, que podem ser incluídos nas preparações oftálmicas, são agentes quelantes. Um agente quelante útil é edetato de dissódio, embora outros agentes quelantes também possam ser usados no lugar ou em conjunto com o mesmo.
[00127] Para uso tópico, cremes, unguentos, géis, soluções ou suspensões, etc., que contêm o composto revelado no presente documento são empregados. Formulações tópicas podem ser geralmente compreendidos por um carreador farmacêutico, cossolvente, emulsificante, intensificador de penetração, sistema de conservantes e emoliente.
[00128] Para administração intravenosa, os compostos e composições descritos no presente documento podem ser dissolvidos ou dispersos em um diluente farmaceuticamente aceitável, tal como um salino ou solução de dextrose.
Excipientes adequados podem ser incluídos para alcançar o pH desejado, incluindo, porém, sem limitação, NaOH, carbonato de sódio, acetato de sódio, HCl e ácido cítrico. Em várias modalidades, o pH da composição final varia de 2 a 8, ou preferencialmente de 4 a 7. Excipientes antioxidantes podem incluir bissulfeto de sódio, bissulfeto de sódio de acetona, formaldeído de sódio, sulfoxilato, tiourea e EDTA. Outros exemplos não limitadores de excipientes adequados encontrados na composição intravenosa final podem incluir sódio ou fosfatos de potássio, ácido cítrico, ácido tartárico, gelatina e carboidratos, tais como dextrose, manitol e dextrano. Excipientes aceitáveis adicionais são descritos em Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci e Tech 1998, 52 238-311 e Nema et al., Excipients and Their Role in Approved
Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci e Tech 2011, 65 287-332, ambos os quais são incorporados ao presente documento a título de referência em sua totalidade. Agentes antimicrobianos também podem ser incluídos para alcançar uma solução bacteriostática ou fungistática, incluindo, porém, sem limitação, nitrato fenilmercúrico, timerosal, cloreto de benzetônio, cloreto de benzalcônio, fenol, cresol e clorobutanol.
[00129] As composições para administração intravenosa podem ser fornecidas a cuidadores na forma de um ou mais sólidos que são reconstituídos com um diluente adequado, tal como água estéril, salino ou dextrose em água pouco tempo antes da administração. Em outras modalidades, as composições são fornecidas em solução pronta para administração parenteral. Em ainda outras modalidades, as composições são fornecidas em uma solução que é adicionalmente diluído antes da administração. Em modalidades que incluem administrar uma combinação de um composto descrito no presente documento e outro agente, a combinação pode ser fornecida a cuidadores como uma mistura, ou os cuidadores podem misturar os dois agentes antes da administração, ou os dois agentes podem ser administrados separadamente.
[00130] A dose real dos compostos ativos descritos no presente documento depende do composto específico, e na afecção a ser tratada; a seleção da dose apropriada está dentro do conhecimento do especialista no assunto.
[00131] Os compostos e composições descritos no presente documento, se for desejado, pode ser apresentado em um pacote ou dispositivo dispensador que contém uma ou mais formas de dosagem unitária que contêm o ingrediente ativo.
Tal pacote ou dispositivo pode, por exemplo, compreender metal ou folha plástica, tais como um pacote tipo blister, ou vidro e tampas de borracha tais como em frascos. O pacote ou dispositivo dispensador pode ser acompanhado por instruções para administração. Compostos e composições descritos no presente documento são formulados em um carreador farmacêutico compatível também podem ser preparados, colocados em um recipiente apropriado, e marcado para tratamento de uma afecção indicada.
[00132] A quantidade de o composto em uma formulação pode variar dentro da faixa total empregada pelos especialistas no assunto. Tipicamente, a formulação conterá, em uma base de porcentagem em peso (% em peso), de cerca de 0,01 a 99,99% em peso de um composto da presente tecnologia com base na formulação total, com o saldo sendo um ou mais excipientes farmacêuticos adequados. Preferencialmente, o composto está presente em um nível de cerca de 1 a 80 % em peso. Formulações farmacêuticas representativas são descritas abaixo.
Exemplos de Formulação
[00133] Há seguir, há formulações farmacêuticas representativas que contêm um composto de Fórmula I.
Exemplo de Formulação 1 -- Formulação de Tablete
[00134] Os ingredientes a seguir são misturados intimamente e prensados em tabletes pontuados únicos.
Quantidade Ingrediente por tablete, mg Compostos revelados no 400 presente documento Amido de milho 50 Sódio de croscarmelose 25 Lactose 120 Estearato de magnésio 5 Exemplo de Formulação 2 -- Formulação de Cápsula
[00135] Os ingredientes a seguir são misturados intimamente e carregados em uma cápsula de gelatina de carcaça -dura.
Quantidade Ingrediente por cápsula, mg Compostos revelados no 200 presente documento lactose, seco por aspersão 148 Estearato de magnésio 2 Exemplo de Formulação 3 -- Formulação de suspensão
[00136] Os ingredientes a seguir são misturados para formar uma suspensão para administração oral.
Ingrediente Quantidade Compostos revelados no 1,0 g presente documento ácido fumárico 0,5 g cloreto de sódio 2,0 g parabeno de metila 0,15 g Parareno de propila 0,05 g Açúcar granulado 25,0 g sorbitol (solução a 70%) 13,00 g Veegum K (Vanderbilt Co.) 1,0 g Flavorização 0,035 ml colorações 0,5 mg Água destilada q.s. a 100 ml Exemplo de Formulação 4 -- Formulação injetável
[00137] Os ingredientes a seguir são misturadas para formar uma formulação injetável.
Ingrediente Quantidade Compostos revelados no 0,2 mg-20 mg presente documento solução de tampão de acetato 2,0 ml de sódio, 0,4 M HCl (1N) ou NaOH (1N) q.s. ao pH adequado água (destilada, estéril) q.s. a 20 ml Exemplo de Formulação 5 -- Formulação de Supositório
[00138] Um supositório de peso total de 2,5 g é preparado misturando-se o composto da presente tecnologia com Witepsol® H-15 (triglicerídeos de ácido graxo vegetal saturado; Riches-Nelson, Inc., Nova Iorque), e tem a seguinte composição:
Ingrediente Quantidade Compostos revelados no 500 mg presente documento Witepsol® H-15 saldo Compostos
[00139] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado dentre um composto que tem a estrutura da Fórmula I:
[00140] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00141] A1 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída desde que a heteroacila com 5 a 10 membros não seja substituída por oxo, heteroarila com 5, 8 ou 9 membros opcionalmente substituída , e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída;
[00142] A2 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída,
heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -CR2-, -S-, - S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)-, -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -C≡C-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, - NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00143] A4 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -4 alquila opcionalmente substituída, -(CR2)n-S-(CR2)n-, -(CR2)n-S(=O)- (CR2)n-, -(CR2)n-SO2-(CR2)n-, -(CR2)n-O-(CR2)n-, -(CR2)n-C(=S)- (CR2)n-, -(CR2)n-C(=O)-(CR2)n-, -(CR2)n-NR-(CR2)n-, -(CR2)n- CH=CH-(CR2)n-, -(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)NH- (CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-, - (CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-, -(CR2)n- NHC(S)-(CR2)n-, e de ligação única;
[00144] quando A2 e A4 são de ligação única, A3 é diretamente fixado a A8;
[00145] A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, ou se A2 for selecionado dentre heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, então A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída,-C≡CH e polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído;
[00146] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00147] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00148] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00149] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R8 é fixado;
[00150] A8 é um membro anelar de A1 e selecionado a partir do grupo que consiste em C, CH e N;
[00151] R8 é selecionado a partir do grupo que consiste em -COR1, -CN, -CH=CHSO2R e -CH2NO2;
[00152] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, - C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3, -C(F)=CHCH2CH3, , , ,
, , , , , , , , , , e ;
[00153] R14 é halo;
[00154] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H,
[00155] C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída; e
[00156] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída.
[00157] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado dentre um composto que tem a estrutura de Fórmula II:
[00158] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00159] A1 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída desde que a heteroacila com 6 a 10 membros não seja substituída por oxo, heteroarila com 5, 8 ou 9 membros opcionalmente substituída , e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída;
[00160] A2 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -CR2-, -S-, - S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)-, -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -C≡C-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, - NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00161] A4 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -4 alquila opcionalmente substituída, -(CR2)n-S-(CR2)n-, -(CR2)n-S(=O)- (CR2)n-, -(CR2)n-SO2-(CR2)n-, -(CR2)n-O-(CR2)n-, -(CR2)n-C(=S)- (CR2)n-, -(CR2)n-C(=O)-(CR2)n-, -(CR2)n-NR-(CR2)n-, -(CR2)n- CH=CH-(CR2)n-, -(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)NH- (CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-, - (CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-, -(CR2)n- NHC(S)-(CR2)n-, e de ligação única;
[00162] quando A2 e A4 são de ligação única, A3 é diretamente fixado a A8;
[00163] A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, ou se A2 for selecionado dentre heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, então A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -C≡CH, e polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído;
[00164] G é uma C3 a C7 carbociclila opcionalmente substituída ou uma heterociclila com 4 a 7 membros opcionalmente substituída;
[00165] A8 é um membro anelar de A1 e é selecionado a partir do grupo que consiste em C e N;
[00166] R8 é selecionado a partir do grupo que consiste em -COR1, -CN, -CH=CHSO2R, -CH2NO2;
[00167] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, - C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00168] R14 é halo; e
[00169] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída,
heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 arila(C1- C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída; R6 é independentemente selecionada dentre –H e C 1 -4 alquila opcionalmente substituída; e cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3.
[00170] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula III:
[00171] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00172] P2 é uma porção química cíclica opcionalmente substituída que tem um tamanho e configuração de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, pelo menos um átomo de P2 forme uma interação não polar com, e está dentro de 5 Å ou menos de, pelo menos uma porção química de bolso 9 P2 de calpaína selecionada a partir do grupo que consiste em Gly190, Phe233, Gly253, His254 e Ala255;
[00173] L1 é uma ligação ou uma porção química que consiste em 1 a 25 átomos selecionados a partir do grupo que consiste em carbono, oxigênio, nitrogênio, hidrogênio e enxofre;
[00174] P3 é uma porção química cíclica opcionalmente substituída posicionada por L1 e que tem um tamanho e configuração de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, pelo menos um átomo de P3 forme uma interação não polar com, e está dentro de 5 Å ou menos de, pelo menos uma porção química de bolso P3 de calpaína 9 selecionada a partir do grupo que consiste em Gly189, Gly190, Ser191, Thr236 e Gly253;
[00175] R10 é oxo e é posicionado por P2 de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, R10 forme uma interação polar com, e esteja dentro de 4 Å ou menos de, amida de Gly190 de calpaína 9;
[00176] R11 é nitrogênio e é posicionado pelos carbonos aos quais o mesmo é ligado de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, R11 forme uma interação polar com, e esteja dentro de 4 Å ou menos de carbonila de Gly253 de calpaína 9;
[00177] L2 é uma ligação ou uma porção química que consiste em 1 a 25 átomos selecionados a partir do grupo que consiste em carbono, oxigênio, nitrogênio, hidrogênio e enxofre;
[00178] P1 é uma porção química posicionada por L2 e que tem um tamanho e configuração de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, pelo menos um átomo de P1 forme uma interação não polar com, e esteja dentro de 5 Å ou menos de, pelo menos uma porção química de bolso P1 de calpaína 9 selecionada a partir do grupo que consiste em Gly95, Lys188, Gly189 e Ser242;
[00179] R9 é uma porção química posicionada pelo carbono ao qual a mesma é fixada de modo que, mediante ligação do composto a calpaína 9, pelo menos um átomo de R9 forme uma interação polar com, e esteja dentro de 4 Å ou menos de, pelo menos uma porção química de calpaína 9 selecionada a partir do grupo que consiste em Gln91, Cys97, e His254; e
[00180] R6 é selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída.
[00181] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste nos compostos listados nas Tabelas 1a e 1b abaixo, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.
Tabela 1a
Tabela 1b
[00182] Os compostos de Fórmulas I-III e/ou Tabelas
1a e 1b podem ser preparados de acordo com os métodos descrito na Pub.
Internacional nº WO 2018/064119 cuja totalidade é incorporada a título de referência ao presente documento.
[00183] Em algumas modalidades fornecidas no presente documento, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula IV:
[00184] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00185] A1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila substituída, heteroarila com 9 a 14 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 9 a 14 membros opcionalmente substituída, e carbociclila com 9 a 14 membros opcionalmente substituída,
[00186] em que quando A1 é uma C6-10 arila substituída; a arila é substituída por uma ou mais porções químicas selecionada a partir do grupo que consiste em Cl, F, Br, Ph, acetileno, ciclopropila, CN, hidróxi, fenila, C1-4 alquila opcionalmente substituída por halo, e C1-C6 alcóxi opcionalmente substituída por halo;
[00187] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00188] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00189] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00190] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R8 é fixado;
[00191] R8 é selecionado a partir do grupo que consiste em -COR1, -CN, -CH=CHSO2R, -CH2NO2;
[00192] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, - C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00193] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída por um ou mais R13, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída; e
[00194] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00195] R13 é independentemente selecionado dentre C1- C6 alquila, C1-C6 alquenila, C1-C6 alquinila, C1-C6 heteroalquila, C3-C7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e
C1-C6 haloalcóxi), C3-C7-carbociclila-C1-C6-alquila
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), heteroacila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-
C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), heteroacil-C1-C6-alquila com 5 a 10 membros
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), arila
(opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), arila(C1-
C6)alquila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi),
heteroarila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e
C1-C6 haloalcóxi), heteroarila(C1-C6)alquila com 5 a 10 membros (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila,
C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila e C1-C6 haloalcóxi), halo,
ciano, hidróxi, C1-C6 alcóxi, C1-C6 alcóxi(C1-C6)alquila (isto é, éter), arilóxi, sulfidrila (mercapto), halo(C1-C6)alquila
(por exemplo, –CF3), halo(C1-C6)alcóxi (por exemplo, –OCF3),
C1-C6 alquiltio, ariltio, amino, amino(C1-C6)alquila, nitro,
O-carbamila, N-carbamila, O-tiocarbamila, N-tiocarbamila, C-
amido, N-amido, S-sulfonamido, C-carbóxi, O-carbóxi, acila,
cianato, isocianato, tiocianato, isotiocianato, sulfinila, sulfonila e oxo (=O).
[00196] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste nos compostos listados na Tabela 2 abaixo, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
Tabela 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00197] Os compostos de Fórmula IV e/ou da Tabela 2 podem ser preparados de acordo com os métodos descritos nos Exemplos fornecidos no presente documento.
[00198] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula V:
[00199] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00200] A1 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída; heterociclila com 5, 8 ou 9 membros opcionalmente substituída; e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída;
[00201] A2 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -CR2-, -S-, - S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)-, -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -C≡C-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, - NHC(S)O-, -NHC(S)- e ligação única;
[00202] A4 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -4 alquila opcionalmente substituída, -(CR2)n-S-(CR2)n-, -(CR2)n-S(=O)- (CR2)n-, -(CR2)n-SO2-(CR2)n-, -(CR2)n-O-(CR2)n-, -(CR2)n-C(=S)- (CR2)n-, -(CR2)n-C(=O)-(CR2)n-, -(CR2)n-NR-(CR2)n-, -(CR2)n- CH=CH-(CR2)n-, -(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)NH- (CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-, - (CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-, -(CR2)n- NHC(S)-(CR2)n- e de ligação única;
[00203] quando A2 e A4 são de ligação única, A3 é diretamente fixado a A8;
[00204] A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, ou se A2 for selecionado dentre heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, então A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -C≡CH, e polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído;
[00205] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00206] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00207] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00208] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R8 é fixado;
[00209] A8 é um membro anelar de A1 e é selecionado a partir do grupo que consiste em C e N;
[00210] R é independentemente selecionado dentre –H, halo, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída;
[00211] R2 é independentemente selecionado dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída e C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída;
[00212] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00213] cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3.
[00214] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula VI,
[00215] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00216] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00217] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00218] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00219] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R6 é fixado;
[00220] Y é selecionado a partir do grupo que consiste em NR5, e S;
[00221] X e Z são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em C(R4) e N;
[00222] J é selecionado a partir do grupo que consiste em O e S;
[00223] cada R4 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), halo, hidróxi e C1-C6 alcóxi; e
[00224] R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, e C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi);
[00225] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, -COOR2, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, -C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00226] R14 é halo;
[00227] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída;
[00228] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00229] cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3; e em que o composto não é selecionado a partir do grupo que consiste em
, , , e .
[00230] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula VII,
[00231] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00232] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída,
C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00233] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00234] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00235] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R6 é fixado;
[00236] Y é selecionado a partir do grupo que consiste em NR5, e S;
[00237] X e Z são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em C(R4) e N;
[00238] J é selecionado a partir do grupo que consiste em O e S;
[00239] cada R4 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), halo, hidróxi e C1-C6 alcóxi; e
[00240] R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, e C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi);
[00241] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, -COOR2, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, -C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00242] R14 é halo;
[00243] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída;
[00244] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00245] cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3; e em que o composto não é selecionado a partir do grupo que consiste em
, , , , , e .
[00246] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula VIII:
[00247] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00248] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00249] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00250] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00251] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R6 é fixado;
[00252] Y é selecionado a partir do grupo que consiste em NR5, O, S e SO2;
[00253] X e Z são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em C(R4) e N;
[00254] J é selecionado a partir do grupo que consiste em O e S;
[00255] cada R4 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), halo, hidróxi e C1-C6 alcóxi; e
[00256] R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, e C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi);
[00257] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, -COOR2, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, -C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00258] R14 é halo;
[00259] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída;
[00260] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00261] cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3.
[00262] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto que tem a estrutura de Fórmula
IX:
[00263] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00264] A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00265] A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3, e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
[00266] A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C 1 -8 alquila opcionalmente substituída, -S-, S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)- , -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)-, e de ligação única;
[00267] quando A5 e A7 são de ligação única, A6 é diretamente fixado ao carbono ao qual R6 é fixado;
[00268] Y é selecionado a partir do grupo que consiste em NR5, O, S e SO2;
[00269] X e Z são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em C(R4) e N;
[00270] J é selecionado a partir do grupo que consiste em O e S;
[00271] cada R4 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi), halo, hidróxi e C1-C6 alcóxi; e
[00272] R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em –H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, e C3-7 carbociclila (opcionalmente substituída por halo, C1-C6 alquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 haloalquila, e C1-C6 haloalcóxi);
[00273] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -OH, -COOR2, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, -C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3, -CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
[00274] R14 é halo;
[00275] cada R, R2 , e R3 são independentemente selecionados dentre –H, C1-4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietileno glicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, C6-10 aril(C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída;
[00276] R6 é independentemente selecionado dentre –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída; e
[00277] cada n é independentemente selecionado para ser um número inteiro de 0 a 3.
[00278] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste nos compostos listados na Tabela 4 abaixo, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
Tabela 4
[00279] Os compostos de Fórmula V a IX e Tabela 4 podem ser preparados de acordo com os métodos descritos nos Exemplos fornecidos no presente documento.
[00280] Em algumas modalidades, é fornecido no presente documento um método de tratamento de uma doença ou distúrbio selecionado a partir do grupo que consiste em colangite esclerosante primária, colangite biliar primária, doença de gordura no fígado não alcóolica, esteatose hepática não alcóolica, e cirrose hepática; sendo que o método compreende administrar um ou mais inibidores de calpaína a um sujeito em necessidade do mesmo.
[00281] Em algumas modalidades, a cirrose hepática é causada por uma ou mais dentre as afecções selecionadas a partir do grupo que consiste em doença de fígado alcóolico, deficiência de antitripsina alfa-1, hepatite autoimune, doença celíaca, hepatite viral crônica, hemocromatrose, fibrose portal idiopática, e doença de Wilson.
[00282] Em algumas modalidades, os um ou mais inibidores de calpaína podem ser um composto revelado no presente documento. Em algumas modalidades, os um ou mais inibidores de calpaína podem ser um composto de qualquer uma dentre as Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII ou IX.
Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula I. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula II. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula III. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula IV. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula V. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula VI. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula VII. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula VIII. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto de Fórmula IX.
[00283] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto listado em qualquer uma dentre as Tabelas 1a, 1b, 2, 3, e 4. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto listado na Tabela 1a ou 1b. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto listado na Tabela 2. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto listado na Tabela 3. Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser um composto listado na Tabela 4.
[00284] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em:
F O O
O O N N NH2 H N NH2
N O N H
N O •HCl
O F O N
N H N H2 N O
O O N
N H S N H2 N O
[00285] ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[00286] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em:
[00287] ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[00288] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em:
O O N N H S N HO O
[00289] ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[00290] Em algumas modalidades, os um ou mais inibidores de calpaína podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em um inibidor de VAP-1, um Inibidor de ASBT, um antagonista CCR2/5 dual, um ácido biliar anticoloestático, um agonista de FXR, um agonista FGFR1c/4, terapia de célula de célula-tronco mesenquimal (MSC), um Inibidor de CCL24 e um Inibidor de CCL11. Em algumas modalidades, os um ou mais inibidores de calpaína e os um ou mais agentes supracitados adicionais podem ser usados para tratar colangite esclerosante primária em um sujeito.
[00291] Em algumas modalidades, o inibidor de calpaína pode ser administrado em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em ácido obeticólico, elafibranor, cenicriviroc,
selonsertib, um agonista receptor de niacina, um inibidor de
SGLT2, um inibidor de VAP-1, um FGF21 mimético, um agonista receptor de adenosina A3, um modulador de mTOT, um agonista de FXR, um inibidor de galectina-3, um ativador de ABCA1, um inibidor de SCD1, um inibidor de ACC, um inibidor de célula
T NK Tipo I, um agonista de pan-PPAR, um inibidor de DGAT2,
um agonista de PPARalfa, um agonista de R-b de hormônio de tireoide, um inibidor de 5-LO/LT, um agonista receptor de mineralocorticoide, um FGF19 mimético, um inibidor de caspase, um agonista de GLP-1R, um agonista de SIRT1/AMP, um inibidor de ACC, um inibidor de ceto-hexoquinase, um agonista
GLP-1R, um inibidor de ASBT, um inibidor de DGAT2/CYP2E1, um antagonista de TLR4, um agonista de R-b de hormônio de tireoide, um antagonista receptor de IFN-gama, um antagonista de CB1, um ligante de FGF21, um antagonista receptor de P2Y13, um inibidor de CCL24, um antagonista receptor-1 de MCH, aPPARalfa, agonista de delta, um inibidor de DPP-4, antagonista de aLXR, um agonista de GLP1R, um inibidor de eotaxina-1, um agonista de beta-klotho/FGFR1c,
um inibidor de LOXL2, um ativador de AMPK, um inibidor de miR-103/107, um inibidor de inflamassoma, um antagonista de
CD3, e um inibidor de catepsina B.
Em algumas modalidades,
os um ou mais inibidores de calpaína e os um ou mais agentes supracitados adicionais podem ser usados para tratar esteatose hepática não alcóolica (NASH) em um sujeito.
[00292] Os exemplos a seguir são incluídos para fins ilustrativos. Evidentemente, os exemplos não devem ser interpretados como especificadores do escopo da revelação.
Variações desses exemplos dentro do escopo das reivindicações estão dentro da competência de um especialista no assunto e são considerados como dentro do escopo da revelação conforme descrito, e reivindicado no presente documento. O leitor reconhecerá que o especialista, provido da presente revelação e habilidade na técnica é capaz de preparar e usar a matéria descrita no presente documento sem exemplos exaustivos. Os exemplos a seguir descreverão a presente revelação, e são usados para os propósitos de ilustração somente, e não devem ser considerados como limitadores.
Exemplos
[00293] Será evidente ao especialista no assunto que métodos para preparar precursores e funcionalidade relacionada aos compostos reivindicados no presente documento são geralmente descritos na literatura. Nessas reações, é também possível fazer uso de variantes que são por si só conhecidos pelos elementos de habilidade comum nessa técnica, mas não são mencionados em mais detalhes. O especialista no assunto, dada a literatura e essa revelação, é equipado para preparar quaisquer dos compostos.
[00294] É reconhecido que o especialista no assunto de química orgânica pode realizar prontamente manipulações sem direção adicional, ou seja, está dentro do escopo e prática do especialista no assunto realizar essas manipulações. As mesmas incluem redução de compostos de carbonila aos seus álcoois correspondentes, oxidações, acilações, substituições aromáticas, tanto eterificação electrofílica quanto eterificação nucleofílica, esterificação e saponificação e similares. Essas manipulações são discutidas em textos padrão tais como March Advanced Organic Chemistry (Wiley), Carey and Sundberg, Advanced Organic Chemistry (incorporados ao presente documento a título de referência em sua totalidade) e similares. Todos os compostos intermediários da presente invenção foram usados sem purificação adicional a menos que especificado de outro modo.
[00295] O especialista no assunto verificará prontamente que determinadas reações são mais bem realizadas quando outra funcionalidade é mascarada ou protegida na molécula, evitando assim quaisquer reações colaterais indesejáveis e/ou aumentando o rendimento da reação.
Frequentemente o especialista no assunto utiliza grupos de proteção para concluir tais rendimentos aumentados ou para evitar as reações indesejadas. Essas reações são encontradas na literatura e estão também dentro do escopo do especialista no assunto. Exemplos de muitas dessas manipulações podem ser encontradas, por exemplo, em T. Greene e P. Wuts Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a Ed., John Wiley & Sons (2007), incorporado ao presente documento a título de referência em sua totalidade.
[00296] Os esquemas exemplificadores a seguir são fornecidos para a orientação do leitor, e representam métodos preferenciais para produzir os compostos exemplificados no presente documento. Esses métodos não são limitadores, e será evidente que outras rotas podem ser empregadas para preparar esses compostos. Tais métodos especificamente incluem químicas à base de fase sólida, incluindo química combinatória. O especialista no assunto é totalmente equipado para preparar esses compostos por aqueles métodos dada a literatura e essa revelação. As numerações de composto usadas nos esquemas sintéticos retratados abaixo são destinadas para aqueles esquemas específicos somente, e não devem ser interpretados como as mesmas numerações ou confundidos com as mesmas em outras seções da aplicação.
[00297] Marcas registradas usadas no presente documento são exemplos somente e refletem materiais ilustrativos usados no tempo da invenção. O especialista no assunto reconhecerá que variações de lote, processos de fabricação, e similares, são esperados. Portanto os exemplos e as marcas registradas usadas nos mesmos são não limitadores, e os mesmos não se destinam a serem limitadoras, mas são meramente uma ilustração de como um artesão versado pode escolher realizar uma ou mais das modalidades da invenção.
[00298] As abreviações a seguir têm os significados indicados: DCM = diclorometano DIEA = N,N-Di-isopropiletilamina DIPEA = N,N-Di-isopropiletilamina DMF = N,N-dimetilformamida DMP = Periodinano de Dess Martin DNs = dinitrossulfonila ESBL = β-lactamase de espectro estendido EtOAc = acetato de etila EA = acetato de etila FCC = Cromatografia de Coluna Flash FDPP = Difenilfosfinato de Pentaflurofenila HATU = hexafluorofosfato de 2-(7-aza-1H- benzotriazol-1-il)-1,1,3,3- tetrametilurônio MeCN = acetonitrila NMR = ressonância magnética nuclear PE = Éter de Petróleo Prep = preparatório(a)(s) Py = piridina Sat. = aquoso saturado TBDMSCl = cloreto de terc-butildimetilsilila TBS = terc-butildimetilsilila TFA = ácido trifluoroacético THF = tetra-hidrofurano TLC = cromatografia de camada fina
[00299] Os esquemas exemplificadores mostrados abaixo são fornecidos para a orientação do leitor, e representam coletivamente um método exemplificador para produzir os compostos abrangidos no presente documento. Além disso, outros métodos para preparar compostos descritos no presente documento serão prontamente evidentes ao elemento de habilidade comum na técnica em luz dos esquemas de reação a seguir e exemplos. A menos que indicado de outro modo, todas as variáveis são conforme definido acima.
[00300] As seções de Exemplo I, II, e III têm, independentemente, Exemplos numerados e números de compostos. Referências aos números de composto ou números de Exemplo encontrados em qualquer uma das Seções de Exemplo I, II, e III se referem aos compostos e Exemplos dessa seção particular.
Seção de Exemplo I Exemplo 1 (S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-fenilbutan-2-il)-2,6- Diclorobenzamida (1)
[00301] A uma solução de composto ácido 2,6-
diclorobenzoico (300 mg, 1,57 mmol) e composto 1A (366,1 mg,
1,59 mmol) em DMF (8 ml) foi adicionado HBTU (714,8 mg, 1,88 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 0,1 hora, e então
DIEA (204,9 mg, 1,59 mmol) foi adicionada.
A mistura resultante foi agitada a 25 ºC por 1 hora.
A mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 ml), lavada sucessivamente com 1N HCl (20 ml), NaHCO3 sat. (50 ml x 2), água (50 ml) e salmoura (50 ml), seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar um sólido rosado,
que foi purificado por trituração com uma mistura de DCM (1 ml) e PE (10 ml) para gerar o composto 1B (380 mg, rendimento:
65,91%) como um sólido rosado claro. 1H NMR (400 MHz, DMSO-
d6) δ 8,67 a 8,32 (m, 1H), 7,42 a 7,25 (m, 6H), 7,23 a 7,09
(m, 4H), 5,78 a 5,71 (m, 1H), 4,64 a 4,40 (m, 1H), 4,14 a
4,07 (m, 0,7H), 3,79 a 3,75 (m, 0,4H), 2,88 a 2,76 (m, 1H),
2,65 a 2,57 (m, 1H).
[00302] A uma mistura de composto 1B (100 mg, 272,3 umol) em DCM (15 ml) e DMSO (1 ml) foi adicionado DMP (808,5 mg, 1,91 mmol) em uma porção sob N2, e então a mistura foi agitada a 25 ºC por 1 hora. A mistura foi terminada bruscamente com NaHCO3 sat. (15 ml) e Na2S2O3 sat. (15 ml). A mistura foi agitada por 0,5 hora, diluída com diclorometano (50 ml). A camada orgânica foi lavada com água (20 ml x 2), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar um sólido branco, que foi purificado por trituração com 2-isopropoxipropano (5 ml) para proporcionar o composto 1 (60 mg, rendimento: 60,33%) como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,20 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,47 a 7,39 (m, 3H), 7,33 a 7,27 (m, 4H), 7,25 a 7,19 (m, 1H), 5,58 a 5,50 (m, 1H), 3,24 a 3,17 (m, 1H), 2,84 a 2,74 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+1)+ 364,9.
Exemplo 2 (S)-2,6-Dicloro-N-(4-(Ciclopropilamino)-3,4-Dioxo-1- Fenilbutan-2-il)Benzamida (2)
[00303] O composto 2 foi preparado seguindo o procedimento do Exemplo 1 com uso do intermediário 2A correspondente e ácido 2,6-diclorobenzoico. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,23 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,89 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,45 a 7,36 (m, 3H), 7,31 a 7,25 (m, 4H), 7,22 a 7,18 (m, 1H), 5,53 a 5,42 (m, 1H), 3,22 a 3,15 (m, 1H), 2,81 a 2,74 (m, 2H), 0,69 a 0,58 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+1)+ 405,1.
Exemplo 3 (S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,4,6- Trifluorobenzamida (3)
[00304] O composto 3 foi preparado seguindo o procedimento do Exemplo 1 com uso do intermediário 1A correspondente e ácido 2,4,6-trifluorobenzoico. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,19 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,30 a 7,19 (m, 7H), 5,41 a 5,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 3,4, 14,0 Hz, 1H), 2,75 (dd, J = 10,0, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 351,1.
Exemplo 4 (S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4- Fluorobenzamida (4)
[00305] O composto 4 foi preparado seguindo o procedimento do Exemplo 1 com uso do intermediário 1A correspondente e ácido 4-fluorobenzoico. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (br d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,09 (br s, 1H), 7,90 a 7,78 (m, 3H), 7,35 a 7,18 (m, 7H), 5,35 (br s, 1H), 3,21 (br d, J = 11,5 Hz, 1H), 2,96 a 2,85 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 315,1.
Exemplo 5 N-(4-amino-3,4-dioxo-1-fenilbutan-2-il)-9H-xanteno-9- carboxamida (5)
[00306] Uma mistura de composto 5A (250 mg, 1,11 mmol) e composto 1A (305,9 mg, 1,33 mmol, HCl) em DMF (3 ml) foi adicionado HBTU (502,9 mg, 1,33 mmol) para 0,1h, então foi adicionada DIEA (571,3 mg, 4,42 mmol), a mistura foi agitada a 25 ºC por 1 hora sob atmosfera de N2. O resíduo foi purificado por HPLC preparatório (condição básica) para proporcionar o composto 5B (210 mg) como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,56 a 8,26 (m, 1H), 7,64 a 7,55 (m, 1H), 7,41 a 7,26 (m, 9H), 7,07 (br d, J=9,8 Hz, 2H), 6,89 a 6,75 (m, 1H), 6,69 a 6,39 (m, 1H), 6,12 a 5,90 (m, 1H), 5,05 a 4,91 (m, 1 H)4,35 a 4,18 (m, 1H), 3,95 a 3,82 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,78 a 2,63 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 403,2.
[00307] Uma mistura de composto 5B (110 mg, 273,33 umol) em DMSO (4 ml) e DCM (6 ml) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e então foi adicionado DMP (347,8 mg, 819,99 umol) a 0 ºC, a mistura foi agitada a 0 ºC por 3 horas sob atmosfera de N2 . A mistura foi terminada bruscamente com NaHCO3 sat. (80 ml) e Na2S2O3 sat. (80 ml). A mistura foi agitada por 0,5 hora. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 sat.(100 ml x 2), água (100 ml x 2) e salmoura (100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por recristalização de 2-isopropoxipropano (10 ml). O composto 5 (80 mg, 185,58 umol) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,98 a 8,91 (m, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,33 a 7,27 (m, 2H), 7,27 a 7,17 (m, 5H), 7,27 a 7,17 (m, 1H), 7,09 a 7,02 (m, 3H), 6,95 a 6,90 (m, 1H), 6,86 a 6,82 (m, 1H), 5,20 a 5,13 (m, 1H), 5,00 (s, 1H), 3,24 a 3,17 (m, 1H), 2,82 a 2,74 (m, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 401,0.
Exemplo 6 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-10H- Fenoxazina-10-Carboxamida (6)
[00308] Uma mistura de 10H-fenoxazina (1 g, 5,46 mmol)
em DCM (8 ml) e H2O (4 ml) foi adicionado NaOH (327,5 mg,
8,19 mmol) e TBAI (403,2 mg, 1,09 mmol), e então carbonocloridato de 4-nitrofenila (1,32 g, 6,55 mmol) foi adicionado na mistura foi agitado a 25 ºC por 0,5 hora.
H2O
(50 ml) foi adicionado na mistura, então extraído com
CH2Cl2(30 ml x 3), as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, anidro filtrado e concentrado sob pressão reduzida para obter o produto bruto.
O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/acetato de etila=1/0 a 1:1) para proporcionar o composto 6A (380 mg,
rendimento: 19,98%) como sólido amarelo. 1H NMR (400MHz,
DMSO-d6) δ 8,42 a 8,28 (m, 2H), 8,12 (d, J = 9,2 Hz, 2H),
7,81 a 7,63 (m, 3H), 7,33 a 7,20 (m, 3H), 6,94 (d, J = 9,2 Hz, 2H).
[00309] A uma solução de composto 6A (380 mg, 1,09 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado Et3N (331,2 mg, 3,27 mmol), então composto 1A (302 mg, 1,31 mmol, HCl) foi adicionado e a mistura foi agitada a 55 ºC por 12 h. O mesmo foi purificado por pré-HPLC (condição básica) para proporcionar o composto 6B (50 mg, rendimento: 11,28%) como sólido acinzentado. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,37 a 7,27 (m, 4H), 7,21 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,16 a 7,09 (m, 2H), 7,07 a 7,02 (m, 2H), 7,00 a 6,84 (m, 5H), 6,28 a 5,93 (m, 1H), 5,72 a 5,39 (m, 2H), 4,35 a 4,14 (m, 2H), 3,46 a 3,16 (m, 1H), 3,11 a 2,99 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 404,1.
[00310] A uma mistura de composto 6B (50 mg, 123,9 umol) em DCM (10 ml) e DMSO (1 ml), foi adicionado DMP (368 mg, 867,6 umol) em uma porção a 0 ºC sob N2, e então a mistura foi agitada a 25 ºC para 20 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi terminada bruscamente com NaHCO3 sat. (15 ml) e Na2S2O3 (15 ml), e agitado por 20 min, então diluído com diclorometano (100 ml). A mistura foi agitada por 20 min e lavado com água (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para gerar o produto bruto, que foi purificado por trituração com uma mistura de DCM (1 ml) e PE (10 ml) para proporcionar o composto 6 (12,3 mg, rendimento: 24,19%) como sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,30 a 7,24 (m, 5H), 7,15 a 6,93 (m, 8H), 6,71 (br s, 1H), 5,74 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,47 a 5,38 (m, 2H), 3,39 a 3,29 (m, 1H), 3,00 a 2,94 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 366,1.
Exemplo 7 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2- il)Dibenzo[B,E][1,4]Dioxina-1-Carboxamida (7)
[00311] A uma mistura de pirocatecol (100 mg, 908 umol) e 2,3-difluorobenzonitrila (126 mg, 908 umol) em DMF (2,7 ml) e tolueno (900 ul), foi adicionado K2CO3 (377 mg, 2,7 mmol) em uma porção sob N2. A mistura foi agitada a 130 ºC por 12 horas sob N2. A mistura de reação foi concentrada para remover tolueno. O resíduo foi despejado em água (20 ml) e agitado por 10 min. A suspensão foi filtrada e o bolo de filtrado foi lavado com H2O (3 ml) para gerar o composto 7A (140 mg, rendimento: 73,7%) como um sólido amarelo. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,17 (dd, J = 1,4, 7,8 Hz, 1H), 7,05 (dd, J = 1,5, 8,2 Hz, 1H), 7,01 a 6,93 (m, 4H), 6,90 a 6,85 (m, 1H).
[00312] A uma mistura de composto 7A (140 mg, 669 umol) em etanediol (3 ml) e H2O (1 ml), foi adicionado KOH (188 mg, 3,4 mmol). A mistura foi agitada a 130 ºC por 12 horas. Água (20 ml) foi adicionada. A mistura foi ajustada para pH ~ 5 com HCl aquoso (1M). A suspensão foi filtrada e o bolo de filtrado foi lavado com H2O (3 ml) para gerar o composto 7B (130 mg, rendimento: 85,1%) como um sólido branco. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 13,12 (br s, 1H), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,05 a 6,92 (m, 5H).
[00313] A uma mistura de composto 7B (120 mg, 526 umol), composto 1A (133 mg, 578 umol) e HBTU (239 mg, 631 umol) em DMF (3 ml), foi adicionada DIPEA (272 mg, 2,10 mmol), a mistura foi agitada a 15 ºC para 0,5 h. O sólido foi filtrado e lavado com metanol (5 ml x 3) para gerar o composto 7C (130 mg, rendimento: 61,1%) como sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,15 (br dd, J = 8,9, 17,7 Hz, 1H), 7,45 a 7,34 (m, 2H), 7,34 a 7,24 (m, 4H), 7,23 a 7,09
(m, 3H), 7,08 a 6,95 (m, 5H), 6,17 a 5,85 (m, 1H), 4,67 a 4,53 (m, 1H), 4,13 a 3,90 (m, 1H), 3,00 a 2,74 (m, 2H).
[00314] Uma mistura de composto 7C (60 mg, 148 umol) e DMP (252 mg, 593 umol) em DCM (15 ml), DMSO (2 ml) foi agitada a 15 ºC por 1 h. A mistura foi diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente com NaHCO3 sat. (20 ml), Na2S2O3 sat. (20 ml) e agitada por 20 min, a mistura foi extraída com DCM (20 ml x 4), a fase orgânica combinada foi lavada com água (20 ml), salmoura (20 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi agitado em éter isopropílico (10 ml) por 20 min, o sólido foi filtrado e seco para gerar o composto 7 (35,3 mg, rendimento: 59,1%) como sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,61 (br d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,17 (br s, 1H), 7,91 (br s, 1H), 7,37 a 7,21 (m, 5H), 7,16 a 7,07 (m, 2H), 7,07 a 6,97 (m, 4H), 6,78 a 6,72 (m, 1H), 5,52 a 5,43 (m, 1H), 3,26 (br dd, J = 4,1, 14,0 Hz, 1H), 3,00 (br dd, J = 9,2, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 403,1.
Exemplo 8 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-9H-Carbazol-9- Carboxamida (8)
[00315] O composto 8 foi preparado seguindo o procedimento do Exemplo 6 com uso do intermediário 1A e 9H- carbazol. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,83 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,48 a 7,26 (m, 10H), 5,57 a 5,44 (m, 1H), 3,39 (s, 1H), 3,01 a 2,83 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+1)+ 386,1.
Exemplo 9 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2- il)Dibenzo[B,D]Furan-4-Carboxamida (9)
[00316] Dibenzo[b,d]furano (5,00 g, 29,73 mmol) foi dissolvido em THF (25 ml) e resfriado para -78 ºC com agitação, t-Buli (12,0 ml, 62,50 mmol de uma solução de 2,50M em hexanos) foi adicionado em gotas com agitação para gerar um precipitado amarelo-alaranjado. Após adição completa, a mistura foi permitida a aquecer à temperatura ambiente e agitada por 3 h. A solução marrom-alaranjada foi então resfriada para -78 ºC e despejada em CO2 em excesso (s) coberto com MTBE anidro. O precipitado branco resultante foi permitido a permanecer em temperatura ambiente por 1 h. O produto foi extraído em 2M de NaOH e a fase aquosa resultante reacidificado com HCl concentrado antes da extração em acetato de etila. Essa fase orgânica foi então seca em sulfato de sódio, filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para gerar o composto 9A (1,30 g, 20,61% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13,32 (br s, 1H), 8,42 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 a 7,54 (m, 1H), 7,53 a 7,49 (m, 1H), 7,47 a 7,44 (m, 1H). MS(ESI) m/z (M+1)+ 213,0.
[00317] A uma mistura de composto 9A (200 mg, 942,51 umol) e composto 1A (261 mg, 1,13 mmol, HCl) em DMF (4 ml), foi adicionado HBTU (536 mg, 1,41 mmol) em uma porção a 25 ºC sob N2. A mistura foi agitada a 25 ºC por 0,1 hora, e então DIEA (365 mg, 2,83 mmol, 494 ul) foi adicionada. A mistura resultante foi agitada a 25 ºC por 3 h. A mistura foi purificada por HPLC preparatório (condição básica) para proporcionar o composto 9B (160 mg, 43,39% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,32 a 8,27 (m, 1H), 8,22 a 8,18 (m, 1H), 8,15 a 7,89 (m, 1H), 7,91 a 7,79 (m, 2H), 7,61 a 7,57 (m, 1H), 7,50 a 7,43 (m, 4H), 7,35 a 7,18 (m, 6H), 6,26 a 5,97 (m, 1H), 4,68 a 4,57 (m, 1H), 4,18 a 4,16 (m, 1H), 3,93 a 3,92 (m, 1H). MS(ESI) m/z (M+1)+ 389,1.
[00318] A uma solução de composto 9B (150 mg, 386,18 umol) em DMSO (4 ml) e CH2Cl2 (4 ml), foi adicionado DMP (491 mg, 1,16 mmol) sob atmosfera de N2, a mistura foi agitada a 0 ºC por 1,5 hora. A mistura foi terminada bruscamente com NaHCO3 (20 ml) e Na2S2O3 sat. (20 ml). A mistura foi agitada por 0,5 hora, diluída com diclorometano (100 ml). A camada orgânica foi lavada com NaHCO3(30 ml x 3), água (20 ml x 3) e salmoura (30 ml x 3), seca em Na2SO4, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para gerar o resíduo.
O produto foi purificado por trituração em éter isopropílico (12 ml) para proporcionar o composto 9 (30 mg, 20,10% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,19 a 8,17 (m, 2H), 8,08 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (s, 2H), 7,47 a 7,40 (m, 2H), 7,34 (s, 5H), 6,85 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,61 (s, 1H), 3,54 a 3,52 (m, 1H), 3,20 a 3,40 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+1)+ 387,0.
Exemplo 10 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-9H-Fluoreno-9- Carboxamida (10)
[00319] O composto 10 foi preparado seguindo o procedimento do Exemplo 6 com uso do intermediário 1A e ácido 9H-fluoreno-9-carboxílico. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,81 a 7,76 (m, 2H), 7,61 a 7,50 (m, 2H), 7,48 a 7,41 (m, 2H), 7,37 a 7,30 (m, 2H), 7,18 a 7,04 (m, 3H), 6,72 a 6,60 (m, 3H), 5,72 (br s, 1H), 5,46 a 5,29 (m, 2H), 4,76 (s, 1H), 3,24 a 3,14 (m, 1H), 2,99 a 2,90 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 385,1.
Exemplo 11 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-9-Metil-9H- Carbazol-4-Carboxamida (11)
[00320] A uma mistura de 1H-indol-4-carboxilato de metila (2 g, 11,4 mmol) e 2,5-dimetoxitetrahidrofurano (1,96 g, 14,9 mmol) em MeOH (50 ml), foi adicionado TsOH.H2O (1,09 g, 5,71 mmol). A mistura de reação foi agitada em 65 ºC por 16 h. As misturas de reação foram concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (éter de petróleo: acetato de etila = 20:1 ~ 5:1) para gerar o composto 11A (220 mg, rendimento: 4,28%) como sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,19 (br s, 1H), 7,80 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,42 a 7,36 (m, 2H), 7,23 a 7,15 (m, 2H), 4,00 (s, 3H).
[00321] A uma solução de composto 11A (200 mg, 888 umol) em DMF (2 ml), foi adicionado NaH (53,3 mg, 1,33 mmol,
60%) a 0 ºC. A mistura de reação foi agitada a 0 ºC por 0,5 h. Então MeI (252 mg, 1,78 mmol) foi adicionado à mistura de reação. A mistura de reação foi permitida a aquecer a 15 ºC com agitação por 16 h. NH4Cl saturado (10 ml) foi adicionado à mistura de reação. O produto foi extraído com EtOAc (10 ml x 2). A camada orgânica combinada foi concentrada e purificada por TLC preparatório (PE: EA = 5:1, Rf = 0,6) para gerar o composto 11B (150 mg, rendimento: 70,6%) como sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,89 (dd, J = 0,9, 7,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,58 a 7,51 (m, 2H), 7,46 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,33 a 7,29 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 3,92 (s, 3H).
[00322] A uma solução de composto 11B (150 mg, 627 umol) em MeOH (5 ml) e H2O (1,00 ml), foi adicionado NaOH (50,2 mg, 1,25 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 ºC por 16 h. 1M de HCl foi adicionado em gotas até pH ~ 6.
O solvente foi evaporado para gerar composto bruto 11C (140 mg, bruto) como sólido branco. O produto bruto foi usado na próxima etapa sem purificação.
[00323] A Uma mistura de composto 11C (140 mg, 622 umol) e intermediário 1A (143 mg, 622 umol, HCl sal) em DMF (2 ml), foi adicionado HBTU (354 mg, 932 umol) e DIEA (241 mg, 1,86 mmol). A mistura de reação foi agitada em 15 ºC por 16 h. A mistura de reação foi filtrada. O produto bruto foi purificado por prep-HPLC (FA) para gerar o composto 11D (160 mg, rendimento: 64,1%) como sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,97 a 7,86 (m, 1H), 7,67 (dd, J = 5,3, 7,8 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,51 a 7,14 (m, 10H), 7,05 (q, J = 7,7 Hz, 1H), 7,09 a 7,00 (m, 1H), 5,91 a 5,77 (m, 1H), 4,83 a 4,67 (m, 1H), 4,22 a 3,99 (m, 1H), 3,88 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 3,07 a 2,77 (m, 2H).
[00324] A uma solução de composto 11D (140 mg, 349 umol) em DCM (20 ml) foi adicionado DMP (592 mg, 1,39 mmol).
Então a mistura de reação foi agitada a 15 ºC por 16 h. A mistura foi diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente por adição de NaHCO3 sat. (30 ml) e Na2S2O3 sat. (30 ml) a 15 ºC, e então a mistura foi agitada até que a solução fosse clara, e extraída com DCM (30 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (20 ml) e salmoura (20 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por trituração em solvente de éter isopropílico (10 ml). A mistura foi filtrada e seca para gerar o composto 11 (84,2 mg, rendimento: 60,5%) como sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,26 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,46 a 7,30 (m, 4H), 7,21 a 7,07 (m, 7H), 6,74 (br s, 1H), 6,54 (br d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,80 (dt, J = 5,2, 7,2 Hz, 1H), 5,46 (br s, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 (dd, J = 5,1, 14,2 Hz, 1H), 3,23 (dd, J = 7,6, 14,2 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+400,1.
Exemplo 12
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-9-Metil-9H- Carbazol-1-Carboxamida (12)
[00325] A uma solução de 2-aminobenzoato de metila (10 g, 66,15 mmol) em HCl (100 ml) a 0 ºC foi adicionada uma solução de NaNO2 (4,66 g, 67,48 mmol) em H2O (100 ml) em gotas. A mistura foi agitada a 0 ºC por 0,5 h. Então, uma solução de SnCl2.2H2O (29,85 g, 132,31 mmol) em HCl (50 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h. O sólido foi filtrado, lavado com H2O (200 ml), coletado e seco a vácuo para proporcionar o composto 12A (7,8 g, rendimento: 56,56%) como sólido branco.
[00326] Uma solução de composto 12A (2 g, 9,87 mmol) em AcOH (20 ml) foi aquecido a 80 ºC. Então, ciclo-hexanona
(970 mg, 9,87 mmol) foi adicionado à solução em gotas. Então, a solução foi aquecida para 100 ºC e agitada por 2 h. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e H2O (20 ml) foi adicionada. O sólido foi filtrado, coletado e seco a vácuo para gerar o composto 12B (1,3 g, rendimento: 49,69%) como sólido roxo. MS (ESI) m/z (M+H)+ 229,9.
[00327] A uma solução de composto 12B (1,3 g, 5,67 mmol) em tolueno (40 ml) foi adicionado DDQ (1,54 g, 6,80 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada a 100 ºC por 12 h. O sólido foi filtrado. O filtrado foi coletado e concentrado. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 5:1) para gerar o composto 12C (360 mg, rendimento: 28,19%) como sólido amarelo claro. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 9,92 (br. s, 1H), 8,29 a 8,22 (m, 1H), 8,13 a 8,05 (m, 2H), 7,59 a 7,44 (m, 2H), 7,30 a 7,20 (m, 2H), 4,03 (s, 3H).
[00328] A uma solução de composto 12C (360 mg, 1,60 mmol) em DMF (5 ml), foi adicionado NaH (320 mg, 7,99 mmol, pureza a 60%) em porções, seguido pela adição de CH3I (0,2 ml, 3,20 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 12 h. A mistura foi terminada bruscamente com 1N de HCl até pH ~ 4, diluída com H2O (30 ml), extraída com EtOAc (20 ml x 3). Os orgânicos foram coletados, lavados com salmoura (20 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados para gerar o composto 12D (380 mg, bruto) como óleo amarelo, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional.
MS (ESI) m/z (M+H)+ 239,8.
[00329] A uma solução de composto 12D (380 mg, 1,59 mmol) em THF (3 ml), MeOH (3 ml), e H2O (3 ml), foi adicionado LiOH.H2O (335 mg, 7,94 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 48 h. A mistura foi acidificada com 1N HCl para pH ~ 4, diluída com H2O (20 ml), extraída com EtOAc (15 ml x 2). Os orgânicos foram coletados, lavados com salmoura (20 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por SFC (coluna: AD (250 mm x 30 mm, 5 um); fase móvel: [NH3H2O/EtOH a 0,1%]) (RT: 6,114 min). A fração pura foi coletada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em H2O (10 ml), acidificado com 1N HCl a pH ~ 4. A mistura foi extraída com EtOAc (15 ml x 2). Os orgânicos foram coletados, lavados com salmoura (20 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados para gerar o composto 12E (310 mg, rendimento: 86,66%) como sólido branco. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8,36 a 8,29 (m, 1H), 8,14 a 8,06 (m, 2H), 7,55 a 7,45 (m, 2H), 7,34 a 7,22 (m, 2H), 4,02 (s, 3H).
[00330] A uma solução de composto 12E (310 mg, 1,38 mmol) e intermediário 1A (477 mg, 2,06 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionada DIEA (0,6 ml, 3,44 mmol), HOBt (56 mg, 412,89 umol) e EDCI (396 mg, 2,06 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 48 h. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (40 ml), lavado com 1N HCl (40 ml). Os orgânicos foram coletados, lavados com NaHCO3 saturado (40 ml), salmoura (40 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por prep-HPLC (Neutral) para gerar o composto 12F (320 mg, rendimento: 57,40%) como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+H)+ 401,9.
[00331] A uma solução de composto 12F (150 mg, 373,64 umol) em DCM (20 ml) e DMSO (3 ml), foi adicionado PERIODINANO DE DESS-MARTIN (476 mg, 1,12 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h. A reação foi diluída com DCM (30 ml), terminada bruscamente com uma solução de Na2S2O3 aquoso a 10% e NaHCO3 saturado (v/v = 1/1) (60 ml). O sólido foi filtrado, coletado, lavado com H2O (10 ml). O sólido foi filtrado, coletado, e seco a vácuo para gerar o composto 12 (28 mg, rendimento: 18,05%) como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+H)+ 400,1. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,26 a 8,22 (m, 1H), 8,20 (br. s, 1H), 8,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,91 (br. s, 1H), 7,57 a 7,52 (m, 1H), 7,49 a 7,43 (m, 1H), 7,38 a 7,30 (m, 4H), 7,28 a 7,16 (m, 4H), 5,55 a 5,48 (m, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,30 a 3,24 (m, 1H), 2,87 a 2,78 (m, 1H).
Exemplo 13 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Cloro-1- Naftamida (13)
[00332] DMF (1,67 g, 22,85 mmol, 1,76 ml) foi resfriado para 0 ºC, POCl3 (2,5 ml, 26,74 mmol) foi adicionado em gotas. A mistura foi agitada a 0 ºC por 0,5 h.
Então DCM (10 ml) foi adicionado. A mistura foi agitada a 15 ºC por 2 h. Então uma solução de 3,4-di-hidronaftaleno-2(1H)- ona (1 g, 6,84 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada a 15 ºC por 12 h. A reação foi diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente com H2O (30 ml) em gotas cuidadosamente. Os orgânicos foram coletados, lavados com NaHCO3 saturado (30 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 10:1) para gerar o composto 13A (940 mg, rendimento: 71,33%) como óleo amarelo. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 10,47 (s, 1H), 8,04 a 7,99 (m, 1H), 7,25 a 7,05 (m, 3H), 2,92 a 2,84 (m, 4H).
[00333] A solução de composto 13A (500 mg, 2,60 mmol) e DDQ (590 mg, 2,60 mmol) em tolueno (20 ml) foi agitada a 90 ºC por 12 h. Então DDQ adicional (590 mg, 2,60 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada a 90 ºC por 48 h. O sólido foi filtrado. O filtrado foi coletado e concentrado. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 10:1) para gerar o composto 13B (380 mg, rendimento: 57,60%) como sólido branco. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 10,91 (s, 1H), 9,16 a 9,13 (m, 1H), 8,02 a 7,55 (m, 1H), 7,67 a 7,63 (m, 1H), 7,70 a 7,62 (m, 1H), 7,60 a 7,55 (m, 1H), 7,55 a 7,45 (m, 1H).
[00334] A uma solução de composto 13B (380 mg, 1,99 mmol) e DMSO (0,19 ml, 2,41 mmol) em CH3CN (10 ml) e H2O (0,3 ml) a 0 ºC foi adicionado H2SO4 (0,06 ml, 1,10 mmol) em gotas.
Após a adição, uma solução de NaClO2 (270 mg, 2,99 mmol) em H2O (1,7 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada a 0 ºC por 2 h. A mistura foi lavada com H2O (10 ml), extraída com EtOAc (15 ml x 2). Os orgânicos foram coletados, secos com Na2SO4, filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado por SFC (NH3H2O EtOH a 0,1%) (RT: 2,304 min). O pico principal foi coletado e concentrado. O resíduo foi dissolvido em H2O (10 ml), acidificado com 1N HCl para pH ~ 4, extraído com EtOAc (15 ml x 2). Os orgânicos foram coletados, secos com Na2SO4, filtrados e concentrados para gerar o composto 13C (270 mg, rendimento: 65,55%) como sólido amarelo claro. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8,05 a 7,96 (m,
1H), 7,95 a 7,80 (m, 2H), 7,68 a 7,45 (m, 3H).
[00335] A uma solução de composto 13C (260 mg, 1,26 mmol) e intermediário 1A (436 mg, 1,89 mmol) em DMF (10 ml), foi adicionada DIEA (0,55 ml, 3,15 mmol), HOBt (52 mg, 377,50 umol) e EDCI (362 mg, 1,89 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 12 h. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (30 ml), lavado com 1N de HCl (30 ml).
Os orgânicos foram coletados, lavados com NaHCO3 saturado (30 ml), salmoura (30 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por prep-HPLC para gerar o composto 13D (160 mg, rendimento: 31,42%) como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+Na)+ 404,9.
[00336] A uma solução de composto 13D (160 mg, 417,93 umol) em DCM (20 ml) e DMSO (3 ml), foi adicionado DMP (532 mg, 1,25 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 40 min. A mistura diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente com uma solução de Na2S2O3 aquoso a 10% e NaHCO3 (v/v = 1/1) saturado (80 ml). Os orgânicos foram coletados, lavados com H2O (40 ml x 5), coletados e concentrados. O resíduo foi lavado com CH3CN (8 ml). O sólido foi filtrado, coletado e seco a vácuo para gerar o composto 13 (65 mg, rendimento: 38,84%) como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+H)+ 381,1. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9,30 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,33 (br. s, 1H), 8,09 a 7,97 (m, 3H), 7,70 a 7,30 (m, 9H), 5,77 a 5,68 (m, 1H), 3,38 a 3,30 (m, 1H), 2,89 a 2,77 (m, 1H).
Exemplo 14 Síntese Geral de Compostos 14 a 36 Esquema Sintético A:
[00337] A uma mistura de ácido A-2 (1 equiv.) em DMF, foi adicionado HBTU (1,5 equiv.) seguido por TEA (3 equiv.).
A mistura de reação foi agitada a 20 ºC por 5 min. e intermediário 1A (1 equiv.) foi adicionado. A mistura de reação agitada por 3 h, diluída com água, e filtrada. Produto bruto foi agitado com EtOAc por 30 min e filtrado para proporcionar o composto A-3 como sólido esbranquiçado.
[00338] A uma solução de composto A-2 (1equiv) em DCM e DMSO, foi adicionado DMP (2 equiv.). A mistura de reação foi agitada a 20 ºC por 2 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (10 ml), terminada bruscamente com NaHCO3 sat. e Na2S2O3 aquoso a 10% a 20 ºC, agitado por 30 min e extraído com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (10 ml), salmoura (10 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para proporcionar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash com uso de EtOAc/ Hexano para proporcionar o produto desejado A-1.
Esquema Sintético B:
[00339] A uma mistura de cloreto ácido B-2 (1 equiv.) em DMF foi adicionado HOBt (1 equiv.) a 0 ºC seguido pela adição de TEA (3 equiv.). A mistura de reação foi agitada a 0 ºC por 5 min. e intermediário 1A (1 equiv.) foi adicionado.
A mistura de reação agitada por 3 h, diluída com água, e filtrada. Produto bruto foi agitado com EtOAc por 30 min e filtrado para proporcionar o composto A-3 como sólido esbranquiçado.
[00340] A uma solução de composto A-3 (1equiv) em DCM e DMSO, foi adicionado DMP (2 equiv.). A mistura de reação foi agitada a 20 ºC por 2 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (10 ml), terminada bruscamente com NaHCO3 sat., e Na2S2O3 aquoso a 10% a 20 ºC, e agitada por 30 min e extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (10 ml), salmoura (10 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para proporcionar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash com uso de EtOAc/ Hexano para proporcionar o produto desejado A-1.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Bromo-6- Clorobenzamida (14)
[00341] Composto 14: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,17 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,33 a 7,18 (m, 6H), 5,52 (m, 1H), 3,18 (dd, 1H), 2,79 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 410,9.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,6- Difluorobenzamida (15)
[00342] Composto 15: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,2 (d, 0,6H), 8,25 (d, 0,4 H), 8,15 (s, 0,6H), 7,87 (s, 0,6H), 7,55 a 7,35 (m, 1,4H), 7,3 a 7,1 (m, 7,4 H), 5,41 (m, 0,6H), 4,47 (m, 0,4 H), 3,18 (dd, 0,6H), 3,04 (dd, 0,4 H), 2,78 (dd, 0,6 H), 2,59 (dd, 0,4 H), ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 332,3.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Fluoro- 6-(Trifluorometil)Benzamida (16)
[00343] Composto 16: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,26 (d, 0,4H), 8,37 (d, 0,6 H), 8,16 (s, 0,4H), 7,87 (s, 0,4H), 7,7 a 7,1 (m, 9,2 H), 5,52 (m, 0,4H), 4,55 (m, 0,6 H), 3,2 -3,05 (m, 1H), 2,78 (dd, 0,4 H), 2,89 (dd, 0,6 H), ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 383,3.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Cloro-2- Metoxibenzamida (17)
[00344] Composto 17: MS (ESI) m/z (M+H)+ 357.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,6- Dimetoxibenzamida (18)
[00345] Composto 18: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,46 (d, 0,2H), 8,04 (s, 0,2 H), 7,93 (d, 0,8 H), 7,79 (s, 0,2 H), 7,4 a 7,1 (m, 7,6 H), 6,65 a 6,58 (m, 2H), 5,34 (m, 0,2H), 4,32 (m, 0,8 H), 3,63 (s, 6H), 3,08 (dd, 0,2 H), 2,96 (dd, 0,8 H), 2,89 (dd, 0,2 H), 2,68 (dd, 0,8 H), ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 357.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Cloro-6- (Trifluorometil)Benzamida (19)
[00346] Composto 19: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,2 (d, 1H), 8,2 a 7,8 (m, 4H), 7,2 a 7 (m, 6H), 5,58 (m, 1H), 3,16 (dd, 1H), 2,78 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 399,4.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,6- Bis(trifluorometil)Benzamida (20)
[00347] Composto 20: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,25 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,78 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,6 (t, 1H), 7,3 a 7,2 (m, 5H), 5,63 (m, 1H), 3,1 (dd, 1H), 2,81 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 433,1.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-Cloro- [1,1'-Bifenil]-2-Carboxamida (21)
[00348] Composto 21: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,06 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 7,5 a 7,1 (m, 13H), 5,34 (m, 1H), 2,98 (dd, 1H), 2,65 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 406,9.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,5- Diclorobenzamida (22)
[00349] Composto 22: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,99 (d, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,3 a 7,1 (m, 6H), 5,28 (m, 1H), 3,16 (dd, 1H), 2,75 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 364,9.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-[1,1'- Bifenil]-4-Carboxamida (23)
[00350] Composto 23: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,6 a 8,1 (m, 7H), 7 a 7,6 (m, 8H), 5,3 (m, 1H), 3,3 (d, 2H), 3,0 (m, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 373.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2- il)Benzo[D][1,3]Dioxol-5-Carboxamida (24)
[00351] Composto 24: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,05 a 7,35 (m, 7H), 6,75 a 6,85 (m, 1H), 6,0 (m, 1H), 3,3 (d, 2H), 2,95 a 3,0 (m, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 341.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- Fluorobenzamida (25)
[00352] Composto 25: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,9 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,51(d, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,33 (t, 1H), 7,3 a 7,1 (m, 5H), 5,3 (m, 1H), 3,15 (dd, 1H), 2,84 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 314,9.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,3- Dimetilbenzamida (26)
[00353] Composto 26: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,68 (d, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,34 a 6,9 (m, 8H), 5,33 (m, 1H), 3,16 (dd, 1H), 2,78 (dd, 1H), 2,21 (s, 3H), 2,02 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 325,1.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Fluoro- 6-Iodobenzamida (27)
[00354] Composto 27: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,11 (d, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,6 (d, 1H), 7,3 a 7,1 (m, 7H), 5,44 (m, 1H), 3,1 (dd, 1H), 2,74 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 441.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4- Fluorobenzamida (28)
[00355] Composto 28: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,89 (d, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,9 a 7,7 (m, 3H), 7,4 a 7,1 (m, 7H), 5,34 (m, 1H), 3,2 (dd, 1H), 2,9 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 315.
(S)-N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Cloro-6- Fluoro-3-Metoxibenzamida (29)
[00356] Composto 29: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,19 (d, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,3 a 7,1 (m, 7H), 5,46 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,18 (dd, 1H), 2,76 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 379,4.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Cloro-6- Fluoro-3-Metilbenzamida (30)
[00357] Composto 30: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,18 (d, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,45 a 7,1 (m, 7H), 5,47 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,18 (dd, 1H), 2,76 (dd, 1H), 2,27 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 363,4.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-6-Cloro-2- Fluoro-3-Metilbenzamida (31)
[00358] Composto 31: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,18 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,45 a 7,1 (m, 7H), 5,46 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,18 (dd, 1H), 2,76 (dd, 1H), 2,2 (s, 3H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 363,2.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-Cloro-2- Fluoro-6-(Trifluorometil)Benzamida (32)
[00359] Composto 32: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,35 (d, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,45 a 7,1 (m, 5H), 5,52 (m, 1H), 3,19 (dd, 1H), 2,77 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 417,3.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2,4- Dicloro-5-Fluorobenzamida (33)
[00360] Composto 33: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,05 (d, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,35 a 7,2 (m, 6H), 5,36 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,21 (dd, 1H), 2,81 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 382,7.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Bromo-2- Clorobenzamida (34)
[00361] Composto 34: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9,05 (d, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,64 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,34 a 7,2 (m, 5H), 5,33 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,22 (dd, 1H), 2,8 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 409,2.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Bromo-2- Metoxibenzamida (35)
[00362] Composto 35: MS (ESI) m/z (M+H)+ 405.
(S)-N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2- Bromobenzamida (36)
[00363] Composto 36: 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8,93 (d, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,41 (t, 1H), 7,4 a 7,1 (m, 7H), 5,36 (m, 1H), 3,19 (dd, 1H), 2,81 (dd, 1H) ppm. MS (ESI) m/z (M+H)+ 374,9.
Exemplo 15 Compostos 37 a 48 5-Cloro-2-Metoxi-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)Benzamida
(37)
[00364] A uma mistura de ácido 5-cloro-2- metoxibenzoico (300 mg, 1,61 mmol) e cloridrato de 2-amino- 3-fenilpropan-1-ol (362 mg, 1,93 mmol, HCl) em DMF (15 ml) foi adicionado HBTU (732 mg, 1,93 mmol) em uma porção a 20 ºC sob N2. A mistura foi agitada a 20 ºC por 0,1 h. Então à mistura foi adicionada DIPEA (1,04 g, 8,04 mmol, 1,4 ml) e agitada em 20 ºC por 0,5 h. A mistura foi diluída com H2O (50 ml) a 0 ºC e agitada a 0 ºC por 0,5 h, e o precipitado foi formado, o sólido foi coletado e foi seco a vácuo para gerar o composto 37A (450 mg, rendimento: 86,82%) como sólido amarelo. 1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,50 (dd, J = 2,6, 8,8 Hz, 1H), 7,31 a 7,24 (m, 4H), 7,21 a 7,14 (m, 2H), 4,12 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,06 a 2,86 (m, 2H), 2,69 a 2,69 (m, 1H), 2,84 a 2,68 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 320,0.
[00365] A uma mistura de composto 37A (150 mg, 469,07 umol) em DMSO (2 ml) e DCM (20 ml), foi adicionado DMP (597 mg, 1,41 mmol) em porção a 20 ºC sob N2. A mistura foi agitada a 20 ºC por 0,5 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml), NaHCO3 saturado aquoso(30 ml) e Na2S2O3 ( 10% aquoso, 30 ml), então agitado por 15 min. Camadas foram separadas.
As camadas orgânicas foram lavadas com água (150 ml x 2) e salmoura (150 ml), secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado com EA (5 ml) e PE (25 ml), precipitado foi formado, o sólido foi coletado e foi seco a vácuo para gerar o composto 37 (75 mg, rendimento: 49,96%) como um sólido amarelo. 1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 8,55 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 7,54 (dd, J = 2,8, 8,9 Hz, 1H), 7,33 a 7,16 (m, 6H), 4,59 (dd, J = 5,1, 6,9, 9,0 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,22 (dd, J = 4,9, 13,9 Hz, 1H), 3,02 (dd, J = 9,0, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 317,9.
3-Cloro-2-Fluoro-N-(1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)-6- (Trifluorometil)Benzamida (38)
[00366] O composto 38 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 3-cloro-2-fluoro-6-(trifluorometil)benzoico. O composto 38 (90 mg, rendimento 58,0%) foi obtido como um sólido amarelo claro 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 9,58 (s, 1H), 9,38 (br d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,92 a 7,88 (m, 1H), 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,33 a 7,27 (m, 4H), 7,24 a 7,20 (m, 1H), 4,65 (ddd, J = 4,6, 7,4, 9,8 Hz, 1H), 3,25 (dd, J = 4,4, 14,4 Hz, 1H), 2,83 (dd, J = 9,9, 14,4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 374,0.
2-Fluoro-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)-6- (Trifluorometil)Benzamida (39)
[00367] O composto 39 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2-fluoro-6-(trifluorometil)benzoico. O composto 39 (100 mg, rendimento 33,2%) foi obtido como um sólido amarelo claro 1H NMR (400MHz,CD3CN) δ 9,63 (s, 1H), 7,67 a 7,55 (m, 2H), 7,45 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 7,34 a 7,21 (m, 5H), 4,71
(ddd, J = 5,3, 7,4, 8,7 Hz, 1H), 3,28 (dd, J = 5,1, 14,4 Hz, 1H), 2,99 (dd, J = 8,7, 14,4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 340,0.
2,6-Difluoro-N-(1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)Benzamida (40)
[00368] O composto 40 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2,6-difluorobenzoico. O composto 40 (100 mg, rendimento 48,79%) foi obtido como um sólido branco 1H NMR (400MHz, CD3CN) δ 9,74 a 9,55 (m, 1H), 7,46 (tt, J = 6,6, 8,5 Hz, 1H), 7,35 a 7,22 (m, 5H), 7,09 a 6,95 (m, 1H), 4,69 (ddd, J = 4,9, 7,5, 9,0 Hz, 1H), 3,31 (dd, J = 4,9, 14,3 Hz, 1H), 2,99 (dd, J = 9,0, 14,3 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 289,9.
2-Bromo-6-Cloro-N-(1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)Benzamida (41)
[00369] O composto 41 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2-bromo-6-clorobenzoico. O composto 41 (30 mg, rendimento 15,9%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 9,06 (br s, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 a 7,38 (m, 1H), 7,38 a 7,19 (m, 6H), 4,72 a 4,54 (m, 1H), 3,26 (dd, J = 4,5, 14,1 Hz, 1H), 2,93 (br dd, J = 9,4, 14,7 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 367,0.
2-Cloro-6-Fluoro-3-Metil-N-(1-Oxo-3-Fenilpropan-2- il)Benzamida (42)
[00370] O composto 42 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2-cloro-6-fluoro-3-metilbenzoico. O composto 42 (80,6 mg, rendimento 24,13%) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 9,24 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,43 (ddd, J = 0,7, 6,2, 8,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 4,6 Hz, 4H), 7,24 a 7,16 (m, 2H), 4,55 (ddd, J = 4,4, 7,5, 10,1 Hz, 1H), 3,25 (dd, J = 4,3, 14,2 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 10,1, 14,3 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 320,1.
2-Cloro-6-Fluoro-3-Metoxi-N-(1-Oxo-3-Fenilpropan-2- il)Benzamida (43)
[00371] O composto 43 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2-cloro-6-fluoro-3-metoxibenzoico. O composto 43 (125 mg, rendimento 38,19%) foi obtido como um sólido amarelo claro. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,61 (s, 1H), 9,25 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 4,6 Hz, 4H), 7,27 a 7,19 (m, 3H), 4,54 (ddd, J = 4,3, 7,4, 10,1 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,25 (dd, J = 4,4, 14,3 Hz, 1H), 2,84 (dd, J = 10,1, 14,3 Hz,
1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 336,1.
2-Cloro-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)-1-Naftamida (44)
[00372] O composto 44 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2-cloro-1-naftoico. O composto 44 (65 mg, rendimento 41,70%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (s, 1H), 9,19 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,07 a 7,90 (m, 2H), 7,59 a 7,52 (m, 2H), 7,46 (br t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,38 a 7,26 (m, 6H), 4,88 (ddd, J = 3,9, 7,6, 11,1 Hz, 1H), 3,40 a 3,36 (m, 1H), 2,82 (dd, J = 11,2, 14,3 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 338,1.
2,6-Dicloro-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)Benzamida (45)
[00373] O composto 45 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 2,6-diclorobenzoico. O composto 45 (150 mg, rendimento 45,47%) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,66 (s, 1H), 9,05 (br d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,50 a 7,37 (m, 3H), 7,34 a 7,18 (m, 5H), 4,61 (dt, J = 4,9, 8,5 Hz, 1H), 3,26 (dd, J = 4,8, 14,6 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 9,7, 14,4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 322,0.
N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)Dibenzo[B,D]Furan-4- Carboxamida (46)
[00374] O composto 46 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido dibenzo[b,d]furan-4-carboxílico (7B). O composto 46 (90 mg, rendimento 28,10%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 8,73 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,34 (dd, J = 1,3, 7,7 Hz, 1H), 8,25 a 8,17 (m, 1H), 7,85 (dd, J = 1,3, 7,7 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,60 (ddd, J = 1,3, 7,3, 8,4 Hz, 1H), 7,53 a 7,44 (m, 2H), 7,41 a 7,37 (m, 2H), 7,35 a 7,29 (m, 2H), 7,27 a 7,19 (m, 1H), 4,70 (ddd, J = 4,7, 7,2, 9,5 Hz, 1H), 3,33 a 3,29 (m,
1H), 3,10 (dd, J = 9,4, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 344,1.
9-Metil-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)-9H-Carbazol-4- Carboxamida (47)
[00375] O composto 47 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido 9-metil-9H-carbazol-4-carboxílico (11C). O composto 47 (55 mg, rendimento 43,0%) foi obtido como um sólido amarelo pálido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,56 a 7,47 (m, 3H), 7,39 a 7,23 (m, 7H),7,16 (ddd, J = 2,1, 5,9, 8,1 Hz, 1H), 4,83 (ddd, J = 4,8, 7,7, 9,9 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,46 (dd, J = 4,8, 14,2 Hz, 1H), 3,08 (dd, J = 9,9, 14,2 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 357,1.
9-metil-N-(1-oxo-3-Fenilpropan-2-il)-9H-Carbazol-4- Carboxamida (48)
[00376] O composto 48 foi preparado seguindo o procedimento do composto 37 com uso do intermediário correspondente cloridrato de 2-amino-3-fenilpropan-1-ol e ácido dibenzo[b,e][1,4]dioxina-1-carboxílico (7B). O composto 48 (110 mg, rendimento 35,1%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,62 (s, 1H), 8,61 (br, d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 7,20 (br, dd, J = 4,3, 8,5 Hz, 1H), 7,12 (br, d, J = 7,7Hz, 1H), 7,09 a 7,04 (m, 1H), 7,02 a 6,94 (m, 4H), 6,74 a 6,69 (m, 1H), 4,64 a 4,56 (m, 1H), 3,27 a 3,19 (m, 1H), 2,97 (dd, J = 9,6, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 360,1.
Seção de Exemplo II Exemplo 1 - Compostos 1, 12, 14, 18, 22, 28, 54, 94, 99, 100, 101 e 102 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3- (Quinolin-7-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (1)
[00377] A uma solução de 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-
4-carboxilato de etila (0,5 g, 1,79 mmol) e ácido 7-
quinolilborônico (463 mg, 2,68 mmol) em dioxano (15 ml) e
H2O (1 ml) foi adicionado K2CO3 (494 mg, 3,57 mmol), então
Pd(dppf)Cl2 (261 mg, 357,06 umol) foi adicionado sob atmosfera de N2, a mistura foi agitada a 80 ºC por 17 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada para remover solvente, então diluída com EA (30 ml) e filtrada,
lavada com EA (30 ml x 2), o filtrado foi concentrado para gerar um resíduo.
O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 4g Coluna Flash de Sílica
SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/Éter de
Petróleo 0~70% @ 20 ml/min). O composto 1A (0,48 g,
rendimento: 91,4%) como óleo amarelo foi obtido. 1H NMR
(400MHz, CDCl3) δ 8,94 (dd, J = 1,8, 4,2 Hz, 1H), 8,56 a 8,49
(m, 1H), 8,18 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,04 a 7,94 (m, 2H), 7,85
(d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,44 a 7,37 (m, 1H), 4,26 (q, J = 7,1
Hz, 2H), 4,01 (s, 3H), 1,30 a 1,24 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+282,2.
[00378] A uma solução de composto 1A (0,48 g, 1,71 mmol) em MeOH (10 ml), foi adicionada a solução de NaOH (341 mg, 8,53 mmol) em H2O (2 ml), a mistura foi agitada a 50 ºC por 18 h. A mistura de reação foi concentrada para remover MeOH, diluída com água (10 ml), extraída com EA (20 ml), a fase aquosa foi acidificada com 1N HCl para pH ~ 3, o precipitado foi formado, o sólido foi filtrado e liofilizado.
O composto 1B (0,22 g, rendimento: 50,9%) como sólido amarelo foi obtido, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,10 (dd, J = 1,4, 4,7 Hz, 1H), 8,77 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,23 a 8,11 (m, 2H), 7,81 (dd, J = 4,6, 8,4 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 254,2.
[00379] A uma mistura de composto 1B (210 mg, 829,20 umol), intermediário 1D (230 mg, 997,01 umol, HCl) em DMF (6 ml), foi adicionada DIEA (4,13 mmol, 720 ul), e então adicionado HBTU (377 mg, 994,09 umol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 1,5 h. A mistura de reação foi adicionada em H2O (40 ml, 0 ºC), uma quantidade de precipitado amarelo foi formada, e então agitado a 0 ºC por 15 min. O sólido foi lavado com H2O (10 ml x 2) e liofilizado. O resíduo foi triturado em DCM (3 ml) e PE (20 ml), e então filtrado. O composto 1C (190 mg, rendimento: 50,8%) foi obtido como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,90 (s, 1H), 8,39 a 8,30 (m, 2H), 8,19 a 8,07 (m, 1H), 7,95 a 7,83 (m, 2H), 7,81 a 7,72 (m, 1H), 7,56 a 7,46 (m, 1H), 7,41 a 7,11 (m, 7H), 5,92 a 5,74 (m, 1H), 4,58 a 4,41 (m, 1H), 4,12 a 4,03 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,85 (br d, J = 4,3 Hz, 1H), 3,19 a 2,74 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 430,2.
[00380] A uma solução de composto 1C (0,19 g, 442,41 umol) em DMSO (10 ml) e DCM (60 ml) foi adicionado DMP (751 mg, 1,77 mmol), a mistura foi agitada a 25 ºC por 1,5 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml), então terminada bruscamente com Na2S2O3 saturado (60 ml) e NaHCO3 saturado (60 ml), extraído com DCM (50 ml x 2), as camadas orgânicas foram lavadas com água (100 ml x 2) e salmoura (100 ml x 2), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em CH3CN (3 ml) e éter isopropílico (3 ml), então filtrado e liofilizado. O composto 1 (30 mg, rendimento: 15,5%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (br s, 1H), 8,42 a 8,26 (m, 2H), 8,12 (br s, 1H), 8,00 a 7,43 (m, 5H), 7,33 a 6,76 (m, 6H), 5,43 a 4,51 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,21 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 2,96 a 2,84 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 428,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(2,3- Dimetoxifenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (12)
[00381] Os compostos 12, 14, 18, 22, 28, 54, 94, 99,
100, 101 e 102 foram preparados como no Exemplo 1 com uso do ácido borônico ou éster de boronato correspondentes, respectivamente. O composto 12 (88 mg, rendimento: 66,5%) como um sólido amarelo claro foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,15 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,83 a 7,73 (m, 2H), 7,30 a 7,11 (m, 5H), 7,09 a 6,98 (m, 2H), 6,72 (dd, J = 1,5, 7,3 Hz, 1H), 5,42 a 5,15 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,42 (s, 3H), 3,10 (dd, J = 3,5, 14,1 Hz, 1H), 2,74 (dd, J = 9,5, 13,6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 437,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3- (Quinolin-8-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (14)
[00382] O composto 14 (90 mg, rendimento: 53,7%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,64 (dd, J = 1,9, 4,1 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 1,8, 8,4 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,99 (dd, J = 1,5, 8,2 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,82 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,65 a 7,55 (m, 2H), 7,47 (dd, J = 4,1, 8,3 Hz, 1H), 7,19 a 7,11 (m, 3H), 6,92 (dd, J = 2,0, 7,3 Hz, 2H), 5,13 a 5,05 (m, 1H), 3,94 a 3,85 (m, 3H), 2,94 (dd, J = 4,0, 13,9 Hz, 1H), 2,59 a 2,50 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 428,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(Quinolin-8-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (18)
[00383] O composto 18 (80 mg, rendimento: 54,7%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,67 a 8,60 (m, 1H), 8,56 (dd, J = 1,8, 4,2 Hz, 1H), 8,42 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,38 a 8,33 (m, 1H), 8,03 (dd, J = 1,3, 8,4 Hz, 1H), 7,95 a 7,77 (m, 2H), 7,76 a 7,69 (m, 2H), 7,65 a 7,59 (m, 1H), 7,46 (dd, J = 4,2, 8,4 Hz, 1H), 7,26 a 7,16 (m, 3H), 7,10 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 5,22 a 5,05 (m, 1H), 3,02 (dd, J = 3,6, 14,0 Hz, 1H), 2,64 (dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 464,1.
N-(4-amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(Isoquinolin-8-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (22)
[00384] O composto 22 (90 mg, rendimento: 53,1%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,14 a 9,06 (m, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,51 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,29 (br s, 1H), 8,09 a 7,79 (m, 3H), 7,76 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,51 (br s, 1H), 7,25 a 7,12 (m, 5H), 5,36 a 5,07 (m, 1H), 3,16 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 2,83 (dd, J = 9,2, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 464,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(2- Metilfuran-3-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (28)
[00385] O composto 28 (170 mg, rendimento: 85,5%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,12 a 7,99 (m, 3H), 7,77 (s, 1H), 7,40 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,29 a 7,15 (m, 5H), 6,48 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,38 a 5,13 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,12 (dd, J = 3,9, 13,8 Hz, 1H), 2,79
(dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H), 2,19 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+381,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Isoquinolin-8-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (54)
[00386] O composto 54 (15 mg, rendimento: 14,5%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,17 a 9,03 (m, 1H), 8,44 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,94 a 7,92 (m, 1H), 7,82 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,82 a 7,79 (m, 1H), 7,74 a 7,61 (m, 2H), 7,46 a 7,28 (m, 2H), 7,26 a 6,97 (m, 6H), 5,16 a 5,11 (m, 0,5H), 4,47 a 4,31 (m, 0,5H), 3,99 a 3,92 (m, 3H), 3,19 a 2,70 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 428,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2- (Difluorometil)-4-(1H-Indazol-7-il)Oxazol-5-Carboxamida (94)
[00387] Derivados de intermediário 7-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2- (trimetilsilil)etóxi)metila)-1H-indazol e 1- (difluorometil)-3-iodo-1H-pirazol-4-carboxilato de etila foram submetidos a condições conforme descrito para o composto 12 para render o composto 94. O composto 94 (63 mg, rendimento: 40,9%) como um sólido amarelo pálido foi obtido: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,94 (br s, 1H), 8,91 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,19 a 8,12 (m, 2H), 8,01 a 7,84 (m, 2H), 7,81 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 7,3 Hz, 1H),
7,31 (d, J = 4,3 Hz, 4H), 7,26 a 7,22 (m, 1H), 7,10 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 5,42 a 5,34 (m, 1H), 3,21 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ = 453,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(2- Metil-2H-Indazol-7-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (99)
[00388] Derivados de intermediário de ácido (2-metil- 2H-indazol-7-il)borônico e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4- carboxilato de etila foram submetidos a condições conforme descrito para o composto 12 para render o composto 99. O composto 99 (70 mg, rendimento: 23,4%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,41 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,80 a 7,74 (m, 2H), 7,18 a 7,05 (m, 5H), 6,82 a 6,78 (m, 2H), 5,25 a 5,18 (m, 1H), 4,09 (s, 3H), 3,92 a 3,87 (m, 3H), 3,01 a 2,95 (m, 1H), 2,47 a 2,41 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 431,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(1- Isopropil-1H-Indazol-4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (100)
[00389] Derivados de intermediário 1-isopropil-4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol e 1-(difluorometil)-3-iodo-1H-pirazol-4-carboxilato de etila foram submetidos a condições conforme descrito para o composto 12 para render o composto 100. O composto 100 (60 mg, rendimento: 48,41%) como um sólido branco foi obtido. MS
(ESI) m/z (M+H)+ = 459,2. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,31 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,09 a 8,05 (m , 2H), 8,04 (br. s, 1H), 7,79 (br. s, 1H), 7,60 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,30 a 7,14 (m, 7H), 5,31 a 5,20 (m, 1H), 5,03 a 4,91 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,16 a 3,04 (m, 1H), 2,83 a 2,71 (m, 1H), 1,45 (d, J = 6,4 Hz, 6H).
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[b]Tiofen-7-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (101)
[00390] O composto 101 (50 mg, rendimento: 11,58%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,96 (s, 1H), 7,92 (dd, J = 1,1, 7,9 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,51 a 7,47 (m, 2H), 7,44 a 7,38 (m, 1H), 7,23 a 7,19 (m, 3H), 7,00 (dd, J = 2,9, 6,7 Hz, 2H), 6,97 a 6,92 (m, 1H), 6,58 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,20 (br s, 1H), 5,37 (ddd, J = 4,8, 7,0, 8,5 Hz, 1H), 3,99 a 3,93 (m, 3H), 3,17 (dd, J = 4,9, 13,9 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 8,7, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+=433,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[b]Tiofen-4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (102)
[00391] O composto 102 (100 mg, rendimento: 71,0%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,19 (s, 1H), 8,15 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,00 a 7,94 (m, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,67 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,37 a 7,15 (m, 8H), 5,31 a 5,14 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,11 (dd, J = 3,8, 13,8 Hz, 1H), 2,77 (dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 433,1.
Exemplo 2 - Compostos 4, 10, 13, 25, 37, 49 e 63 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(Isoquinolin-1-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (3)
[00392] A uma solução de 3-iodo-1H-pirazol-4- carboxilato de etila (20 g, 75,18 mmol) em DMF (100 ml), foi adicionado 2-cloro-2,2-difluoroacetato de sódio (22,92 g, 150,36 mmol) e Cs2CO3 (48,99 g, 150,36 mmol). A mistura foi agitada a 100 ºC por 16 h. A mistura de reação foi concentrada, o resíduo foi diluído com H2O (200 ml) e extraído com EtOAc (100 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (200 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; X g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, eluente de gradiente de acetato de etila/Éter de Petróleo a 0% ~ 10% ~20%). O composto 4A (9,1 g, rendimento: 38,30%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,47 a 7,95 (m, 1H), 7,44 a 6,95 (m, 1H), 4,53 a 4,17 (m, 2H), 1,54 a 1,17 (m, 3H).
[00393] A uma solução de composto 4A (500 mg, 1,58 mmol), 1-bromoisoquinolina (329 mg, 1,58 mmol), CsF (480 mg, 3,16 mmol), e B2pin2 (603 mg, 2,37 mmol) em tolueno (8 ml) e MeOH (8 ml) foi adicionado Pd(OAc)2 (35,52 mg, 158,21 umol) e P(1-adamantil)2Bu (57 mg, 158,98 umol) em uma porção sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 80 ºC por 16 h sob atmosfera de N2 . A mistura de reação foi filtrada e concentrada, o resíduo foi diluído com H2O (10 ml) e extraído com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (PE:EA = 5:1 a 2:1). O composto 4B (80 mg, rendimento: 12,1%) foi obtido como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,64 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,54 (s, 1H), 7,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,83 a 7,75 (m, 2H), 7,74 a 7,68 (m, 1H),
7,55 (ddd, J = 1,1, 7,0, 8,4 Hz, 1H), 7,48 a 7,29 (m, 1H), 4,01 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+317,9.
[00394] A uma solução de composto 4B (80 mg, 252,14 umol) em MeOH (10 ml) e H2O (3 ml) foi adicionado NaOH (40 mg, 1,00 mmol). A mistura foi agitada a 50 ºC por 16 h. A mistura de reação foi concentrada, diluída com água (10 ml), extraída com MTBE (10 ml), então a fase aquosa foi acidificada com 2N HCl para pH ~ 2 a 3, e liofilizada. Então o resíduo foi agitado na solução (DCM:MeOH = 10:1), filtrado e concentrado para gerar um resíduo. O composto 4C (39 mg, rendimento: 53,5%) foi obtido como um sólido marrom. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,91 (s, 1H), 8,51 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,01 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 7,98 a 7,85 (m, 2H), 7,81 a 7,72 (m, 1H), 7,62 (t, J = 7,7 Hz, 1H).
[00395] A uma solução de composto 4C (64 mg, 221,27 umol) e Intermediário 1D (56 mg, 242,75 umol, HCl) em DMF (10 ml) foi adicionado HBTU (101 mg, 266,32 umol), então foi adicionada DIEA (114 mg, 882,06 umol, 153,64 ul) e agitado a 25 ºC por 2 h. A mistura de reação foi diluída com água (40 ml), extraída com EA (30 ml x 3), as camadas orgânicas foram concentradas para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em PE: EA (10: 1, 20 ml) e coletado por filtração.
O composto 4D (80 mg, rendimento: 76,8%) foi obtido como um sólido amarelo pálido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,71 a 9,27
(m, 1H), 8,84 a 8,54 (m, 2H), 8,41 a 7,57 (m, 6H), 7,30 (br s, 1H), 7,16 a 6,62 (m, 6H), 6,17 a 5,76 (m, 1H), 4,52 a 4,23 (m, 1H), 3,93 a 3,75 (m, 1H), 2,85 a 2,67 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+466,1.
[00396] A uma solução de composto 4D (80 mg, 171,88 umol) em DMSO (10 ml) e DCM (50 ml) foi adicionado DMP (292 mg, 688,45 umol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 3 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente com NaHCO3 saturada (25 ml) e Na2S2O3 saturada (25 ml), a mistura foi agitada por 10 min. A camada orgânica foi lavada com água (40 ml x 2), salmoura (40 ml x 2), seca em Na2SO4, então filtrada e concentrada para gerar um resíduo.
O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (PE:EA = 1:1 a 0:1). O composto 4 (25 mg, rendimento: 29,9%) foi obtido como um sólido amarelo pálido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,81 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,37 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,14 a 7,97 (m, 3H), 7,92 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,83 (br d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,72 a 7,66 (m, 1H), 7,06 a 6,92 (m, 5H), 5,46 a 5,36 (m, 1H), 3,15 (br dd, J = 4,5, 14,0 Hz, 1H), 2,88 (dd, J = 8,7, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+464,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Isoquinolin-1-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (10)
[00397] Os compostos 10, 13, 25, 37, 49, e 63 foram preparados como no Exemplo 2 com uso do ácido carboxílico correspondente, respectivamente. 3-iodo-1-metil-1H-pirazol- 4-carboxilato de etila foi usado para obter o composto 10 (55 mg, rendimento: 61,2%) como um sólido amarelo pálido foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10,21 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,61 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,32 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,12 a 8,02 (m, 2H), 7,90 a 7,80 (m, 3H), 7,69 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,05 a 6,88 (m, 5H), 5,47 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,17 (dd, J = 4,7, 13,8 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 7,3, 14,3 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 428,2.
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3- (Quinoxalin-2-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (13)
[00398] 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila foi usado para obter o composto 13 (20 mg, rendimento: 76,2%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11,18 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,12 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,92 a 7,84 (m, 2H), 7,77 (dt, J = 1,3, 7,7 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,01 a 6,93 (m, 4H), 6,90 a 6,79 (m, 1H), 5,79 a 5,74 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,29 a 3,18 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 429,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(Quinoxalin-2-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (25)
[00399] O composto 25 (20 mg, rendimento: 52,2%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10,80
(d, J = 8,2 Hz, 1H), 9,51 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,23 a 7,82 (m, 5H), 7,78 (dt, J = 1,3, 7,6 Hz, 1H), 7,71 a 7,65 (m, 1H), 7,01 a 6,89 (m, 4H), 6,88 a 6,82 (m, 1H), 5,77 a 5,67 (m, 1H), 3,24 a 3,12 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 465,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(6,7- Dimetoxiquinolin-4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (37)
[00400] O composto 37 (15 mg, rendimento: 47,2%) como um sólido amarelo pálido foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO- d6) δ 8,62 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,35 a 8,23 (m, 1H), 7,71 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,65 (br s, 1H), 7,49 (br s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,26 a 7,17 (m, 5H), 7,10 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 5,27 a 5,18 (m, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,16 a 3,21 (m, 1H), 2,75 a 2,81 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 488,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3- (Quinazolin-4-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (49)
[00401] 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila foi usado para obter o composto 49 (62 mg, rendimento: 61,3%) como um sólido branco foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10,10 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,66 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,06 (d, J = 3,5 Hz, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,80 a 7,72 (m, 1H), 7,01 (s, 5H), 5,61 a 5,35 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,18 (dd, J = 5,0, 14,2 Hz, 1H), 2,99 (dd, J = 7,6, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z
(M+H)+ 429,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(Quinazolin-4-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (63)
[00402] O composto 63 (28 mg, rendimento: 73,3%) como um sólido amarelo pálido foi obtido: 1H NMR (400MHz, DMSO- d6) δ 9,51 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,18 a 7,99 (m, 4H), 7,90 a 7,80 (m, 1H), 7,79 a 7,71 (m, 1H), 7,14 a 7,03 (m, 5H), 5,36 (dt, J = 4,6, 7,9 Hz, 1H), 3,14 (dd, J = 4,2, 13,9 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 8,5, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 465,1.
Exemplo 3 Cloridrato de N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)- 1-Metil-3-(Piperazin-1-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (2)
[00403] A uma solução de 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-
4-carboxilato de etila (0,5 g, 1,79 mmol) e piperazina-1-
carboxilato de terc-butila (665 mg, 3,57 mmol) em dioxano
(20 ml) foi adicionado S-Fos (147 mg, 357,06 umol) e Cs2CO3
(1,16 g, 3,57 mmol), então, Pd(OAc)2 (40 mg, 178,53 umol)
foi adicionado sob atmosfera de N2. A reação foi agitada a
100 ºC para 17 h.
A mistura de reação foi filtrada, lavada com EA (30 ml x 2), o filtrado foi concentrado para gerar um resíduo.
O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 4g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®,
Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a
0~10% @ 20 ml/min). O composto 2A (0,15 g, rendimento: 22,8%)
como óleo amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ
7,75 (s, 1H), 4,24 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,61 a 3,54 (m, 4H), 3,30 a 3,20 (m, 4H), 1,47 (s, 9H), 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 339,1.
[00404] O composto 2A foi transformado em composto 2D conforme mostrado no Exemplo 1. O composto 2D (0,10 g, rendimento: 72,2%) como sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,30 a 7,84 (m, 4H), 7,30 a 7,17 (m, 3H), 7,07 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 5,57 a 5,44 (m, 1H), 3,76 a 3,67 (m, 3H), 3,28 a 3,08 (m, 6H), 2,86 a 2,70 (m, 4H), 1,43 a 1,38 (m, 9H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 485,3.
[00405] A uma solução de composto 2D (100 mg, 206,38 umol) em EtOAc (2 ml) foi adicionado HCl/EtOAc (4M, 4 ml), a mistura foi agitada a 25 ºC por 4 h. A mistura de reação foi concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em CH3CN (10 ml x 2), e então concentrado para gerar um resíduo. O composto 2 (75 mg, rendimento: 94,3%) como sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (br s, 2H), 8,17 a 8,06 (m, 2H), 7,87 (br s, 1H), 7,32 a 7,12 (m, 5H), 5,53 a 5,29 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,28 a 2,86 (m, 10H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 385,2.
Exemplo 4 - Compostos 6-7 N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Tiazol-7-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (7)
[00406] A uma solução de 7-bromobenzo[d]tiazol (900 mg, 4.2 mmol) em dioxano (20 ml), foi adicionado KOAc (843 mg, 8.5 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-
dioxaborolano) (1,07 g, 4,2 mmol), Pd(dppf)Cl2 (307 mg, 420 umol). Então, a mistura foi agitada a 90 ºC por 12 h sob atmosfera de N2 . A reação foi resfriada à temperatura ambiente e a reação foi filtrada.
O licor filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para remover solvente.
H2O
(20 ml) foi adicionado ao resíduo, a mistura foi extraída com EA (20 ml x 3). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 ml), seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar o composto 6A (1,0 g, bruto) como óleo negro que foi usado diretamente na próxima etapa.
[00407] O composto 6A foi convertido em composto 6 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 6 (50 mg, rendimento: 33%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 9,36 (s, 1H), 8,60 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,78 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,33 a 7,27 (m, 4H), 7,26 a 7,20 (m, 1H), 5,41 a 5,22 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,18 (dd, J = 3,8, 14,1 Hz, 1H), 2,83 (dd, J = 10,2, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 434,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Tiazol-7-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (7)
[00408] Os compostos 6A e 4A foram convertidos em composto 7 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 7 (60 mg, rendimento: 51,6%) como sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 9,41 (s, 1H), 8,99 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,17 a 8,09 (m, 2H), 8,02 a 7,83 (m, 2H), 7,73 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,53 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (s, 4H), 7,24 (br s, 1H), 5,42 a 5,32 (m, 1H), 3,21 (br dd, J = 3,3, 13,9 Hz, 1H), 2,82 (dd, J = 10,1, 13,5 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 470,1.
Exemplo 5 - Compostos 32, 62, 69 e 61
[00409] K2CO3 (5,26 g, 38,06 mmol) foi adicionado a uma mistura de 4-bromo-1H-indazol (5 g, 25,38 mmol) em DMF (50 ml). 30 min depois, MeI (18,2 g, 128,22 mmol, 8,0 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada a 25 ºC por 3 h. A mistura foi tratada com H2O (150 ml) e EA (50 ml). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EA (50 ml x 2). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 ml x 2), seca em MgSO4, filtrada e concentrada.
O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash em gel de sílica (PE/EA = 10/1 a 5/1) para proporcionar um par de isômeros.
[00410] Isômero 1 (Composto 32A, Rf = 0,54, PE/EA = 5/1): 4-bromo-1-metil-indazol (3,2 g, 59,8% de rendimento)
foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7,98 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,67 a 7,65 (m, 1H), 7,35 a 7,27 (m, 2H), 4,04 (s, 3H).
[00411] Isômero 2 (Composto 32B, Rf = 0,24, PE/EA = 5/1): 4-bromo-2-metil-indazol (1,3 g, 24,3% de rendimento) foi obtido como óleo pegajoso incolor. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,37 (s, 1H), 7,60 a 7,57 (m, 1H), 7,26 a 7,21 (m, 1H), 7,13 (dd, J=7,3, 8,6 Hz, 1H), 4,16 (s, 3H).
[00412] KOAc (1,12 g, 11,37 mmol) foi adicionado a uma mistura de composto 32A (1,2 g, 5,69 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2.17 g, 8.53 mmol) em DMF (25 ml), seguido por Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (232 mg, 284,09 umol). Então gás nitrogênio foi borbulhado através da mistura. A mistura foi aquecida a 85 ºC e agitada por 12 h. A mistura foi tratada com EA (75 ml) e salmoura (100 ml). A mistura foi filtrada através de Celite. O filtrado foi transferido para funil de separação. A camada orgânica foi separada, seca em MgSO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 5/1) para proporcionar o composto 32C (1,5 g, 87,9% de rendimento) como óleo pegajoso incolor. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,15 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,54 a 7,50 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 6,8, 8,5 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 1,35 (s, 12H).
[00413] KOAc (1,2 g, 12,3 mmol) foi adicionado à mistura de composto 32B (1,3 g, 6,2 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2.4 g, 9,3 mmol) em DMF (20 ml). Gás N2 foi borbulhado através da mistura. Então Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (253 mg, 309,8 umol) foi adicionado. A mistura foi agitada em 85 ºC por 12 h sob atmosfera de nitrogênio. A mistura foi diluída com EA (50 ml) e salmoura (50 ml). A mistura foi filtrada através de Celite. O filtrado foi transferido para funil de separação. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EA (15 ml x 2). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (35 ml), seca em MgSO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash em gel de sílica (PE/EA = 5/1 a 2/1) para proporcionar o composto 32D (1,5 g, rendimento 94,4%) como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+H)+ 259,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(1- Metil-1H-Indazol-4-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (32)
[00414] Os compostos 32C e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol- 4-carboxilato de etila foram convertidos em composto 32 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 32 (60 mg, rendimento: 60,0%) como sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,38 (br d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,09 (br d, J = 9,5 Hz, 3H), 7,82 (br s, 1H), 7,61 a 7,53 (m, 1H), 7,35 a 7,19 (m, 7H), 5,38 a 5,25 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 3,15 (br dd, J = 3,4, 13,7 Hz, 1H), 2,81 (br dd, J = 10,2, 13,4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 431,1. .
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(1-Metil-1H-Indazol-4-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (62)
[00415] Os compostos 32C e intermediário 4A foram convertidos em composto 62 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 62 (96 mg, rendimento: 48,9%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ8,52 (s, 1H), 8,46 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,18 a 7,70 (m, 3H), 7,69 a 7,51 (m, 2H), 7,42 a 7,33 (m, 2H), 7,31 a 7,19 (m, 5H), 5,45 a 5,28 (m, 1H), 4,11 a 4,04 (m, 3H), 3,21 (dd, J = 4,4, 14,2 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 9,4, 14,2 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 467,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(2- Metil-2H-Indazol-4-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (69)
[00416] Os compostos 32D e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol- 4-carboxilato de etila foram convertidos em composto 69 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 69 (230 mg, rendimento: 69,7%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,53 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,32 a 7,22 (m, 6H), 7,15 (dd, J = 7,2, 8,4 Hz, 1H), 5,33 a 5,28 (m, 1H), 4,17 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 3,16 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 431,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(2-Metil-2H-Indazol-4-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (61)
[00417] Os compostos 32D e intermediário 4A foram convertidos em composto 61 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 61 (250 mg, rendimento: 85,9%) como sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,91 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,17 a 8,11 (m, 1H), 7,98 a 7,82 (m, 2H), 7,62 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,34 a 7,22 (m, 6H), 7,19 (dd, J = 7,2, 8,4 Hz, 1H), 5,40 a 5,32 (m, 1H), 4,21 a 4,09 (m, 3H), 3,25 a 3,17 (m, 1H), 2,88 a 2,78 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ = 467,2.
Exemplo 6 - Compostos 33-34, 77
[00418] K2CO3 (3,51 g, 25.38 mmol) foi adicionado a uma mistura de 7-bromo-1H-indazol (5 g, 25,38 mmol) em DMF (50 ml). 30 min depois, MeI (18,05 g, 7,92 ml, 127,17 mmol,) foi adicionado e a mistura foi agitada a 25 ºC por 3 h. A substância insolúvel foi removida por filtro. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi tratado com H2O (50 ml) e EA (50 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (15 ml x 2), seca em MgSO4, filtrada e concentrada.
O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica (PE/EA = 10/1 a 3/1) para proporcionar um par de isômeros.
[00419] Isômero 1 (Composto 33A, Rf = 0,54, PE/EA = 5/1): 7-bromo-1-metil-1H-indazol (2,85 g, 53,2% de rendimento) foi obtido como óleo incolor, que se tornou sólido branco após repouso. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,09 (s, 1H), 7,74 (dd, J = 0,9, 7,9 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 0,8, 7,4 Hz, 1H), 7,02 a 6,97 (m, 1H), 4,28 (s, 3H).
[00420] Isômero 2 (Composto 33B, Rf = 0,18, PE/EA =
5/1): 7-bromo-2-metil-2H-indazol (1,85 g, 34,5% de rendimento) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,47 (s, 1H), 7,69 (dd, J = 0,7, 8,4 Hz, 1H), 7,49 a 7,44 (m, 1H), 6,91 (dd, J = 7,3, 8,2 Hz, 1H), 4,17 (s, 3H).
[00421] KOAc (1.35 g, 13.74 mmol) foi adicionado a uma mistura de composto 33A (1,45 g, 6,87 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,62 g, 10,31 mmol) em DMF (25 ml). Gás nitrogênio foi borbulhado através da mistura e Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (280 mg, 342,87 umol) foi adicionado. Então a mistura foi aquecida a 85 ºC e agitada por 12 h. A mistura foi tratada com EA (75 ml) e salmoura (100 ml). A mistura foi filtrada através de Celite. O filtrado foi transferido ao funil de separação. A camada orgânica foi separada, seca em MgSO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 5/1) para proporcionar o composto 33C (1,7 g, 90,1% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7,99 (s, 1H), 7,89 (dd, J = 1,0, 7,0 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 1,3, 8,0 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 7,0, 8,0 Hz, 1H), 4,31 (s, 3H), 1,41 (s, 12H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 259,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(1- Metil-1H-Indazol-7-il)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (33)
[00422] Os compostos 33C e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-
4-carboxilato de etila foram convertidos em composto 33 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 33 (70 mg, rendimento: 43,6%) como sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,37 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,82 a 7,70 (m, 2H), 7,26 a 7,17 (m, 3H), 7,13 a 7,06 (m, 4H), 5,26 a 5,17 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,46 (s, 3H), 3,10 (br dd, J = 3,4, 13,9 Hz, 1H), 2,69 (br dd, J = 9,8, 13,8 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 431,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(1-Metil-1H-Indazol-7-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (34)
[00423] Os compostos 33C e intermediário 4A foram convertidos em composto 34 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 34 (30 mg, rendimento: 27,0%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,81 (s, 1H), 8,10 a 8,00 (m, 2H), 7,92 a 7,43 (m, 4H), 7,22 a 7,07 (m, 7H), 5,30 a 5,22 (m, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,15 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,79 (dd, J = 9,4, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 467,2), 4,21 a 4,09 (m, 3H), 3,25 a 3,17 (m, 1H), 2,88 a 2,78 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ = 467,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(2-Metil-2H-Indazol-7-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (77)
[00424] Os compostos 2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2H-indazol (preparado a partir do intermediário 33B com uso do mesmo procedimento que 33C) e intermediário 4A foram convertidos em composto 77 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 77 (30 mg, rendimento: 42,6%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,59 (s, 1H), 8,40 a 8,35 (m, 2H), 8,05 a 7,88 (m, 2H), 7,77 a 7,73 (m, 2H), 7,22 a 7,11 (m, 4H), 7,08 a 7,02 (m, 1H), 7,00 a 6,95 (m, 2H), 5,25 a 5,18 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,06 a 2,99 (m, 1H), 2,61 a 2,53 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 467,2.
Exemplo 7 - Compostos 17, 31, 51, 70, 24, 26 e 55
[00425] A uma solução de 3-iodo-1-metil-1H-pirazol- 4-carboxilato de etila (1 g, 3,57 mmol) em MeOH (15 ml), foi adicionada a solução de NaOH (714 mg, 17,85 mmol) em H2O (2 ml), a mistura foi agitada a 50 ºC por 1 h. A mistura de reação foi concentrada para remover MeOH, então diluída com água (30 ml), acidificada com 1N de HCl para pH ~ 3, o precipitado foi formado, o sólido foi filtrado e seco a vácuo. O resíduo foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. O composto 17A (850 mg, rendimento: 94,5%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,31 a 8,08 (m, 1H), 3,96 a 3,76 (m, 3H).
[00426] A uma solução de composto 17A (0,85 g, 3,37 mmol) e Intermediário 1D (856 mg, 3,71 mmol, HCl) em DMF (20 ml), foi adicionado HBTU (1,53 g, 4,05 mmol) e DIEA (13,49 mmol, 2,35 ml), a mistura foi agitada a 25 ºC por 1 h. A mistura de reação foi diluída com água (50 ml) a 0 ºC, o precipitado foi formado, e o sólido foi filtrado e seco a vácuo. O resíduo foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. O composto 17B (1,2 g, rendimento: 83,0%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (s, 1H), 7,62 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,33 (s, 2H), 7,29 a 7,17 (m, 4H), 7,16 a 7,09 (m, 1H), 5,87 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,56 a 4,36 (m, 1H), 4,01 (dd, J = 3,3, 5,7 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,89 a 2,62 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+429,0.
[00427] A uma solução de composto 17B (1,2 g, 2,80 mmol) e ácido (3-metoxicarbonilfenil)borônico (756 mg, 4,20 mmol) em dioxano (30 ml) e H2O (3 ml) foi K2CO3 adicionado (775 mg, 5,60 mmol), então Pd(dppf)Cl2 (205 mg, 280,23 umol)
foi adicionado sob atmosfera N2, a mistura foi agitada a 80 ºC por 18 h. A mistura de reação foi concentrada para remover solvente, diluída com EA (50 ml), filtrada e lavada com EA (20 ml x 2), o filtrado foi lavado com água (50 ml x 2), então seco em Na2SO4, filtrado e concentrado para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/Éter de Petróleo 0~100% a EA: MeOH = 10: 1 @ 30 ml/min). O composto 17C (0,4 g, rendimento: 32,7%) como sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,29 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,90 a 7,80 (m, 2H), 7,77 a 7,74 (m, 1H), 7,46 a 7,39 (m, 1H), 7,34 a 7,11 (m, 7H), 5,82 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,58 a 4,40 (m, 1H), 4,02 (dd, J = 3,5, 5,7 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 2,87 a 2,66 (m, 2H).
[00428] A uma solução de composto 17C (120 mg, 274,94 umol) em MeOH (3 ml), foi adicionado CH3NH2 (549,88 umol, 8 ml), então a mistura foi agitada em 45 ºC por 40 h. A mistura de reação foi concentrada para remover solvente, diluído com DCM (20 ml) e filtrado, o sólido foi coletado. O resíduo foi purificado por HPLC preparatório (coluna: YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5um; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 10% a 66%, 8,5 min). O composto 17D (60 mg, rendimento 49,8%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,43 (br d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 18,1 Hz, 2H), 7,75
(dd, J = 8,6, 11,0 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,41 a 7,11 (m, 8H), 4,47 (br s, 1H), 4,02 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,82 a 2,65 (m, 5H). MS (ESI) m/z (M+H)+436,1.
[00429] A uma solução de composto 17D (60 mg, 137,78 umol) em DMSO (3 ml) e DCM (50 ml) foi adicionado DMP (234 mg, 551,12 umol), a mistura foi agitada a 25 ºC por 1 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml) e terminada bruscamente pela adição de Na2S2O3 (sat, 30 ml) e NaHCO3 (saturado em 30 ml), a mistura foi extraída com DCM (30 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (50 ml), então lavadas com salmoura (50 ml x 2), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em CH3CN, filtrado e o sólido foi seco a vácuo. O composto 17 (15 mg, rendimento: 22,8%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO- d6) δ 8,48 a 8,35 (m, 2H), 8,15 a 8,07 (m, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,74 (td, J = 1,5, 7,8 Hz, 1H), 7,64 (td, J = 1,4, 8,0 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,32 a 7,17 (m, 5H), 5,30 a 5,24 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,15 (dd, J = 4,0, 13,9 Hz, 1H), 2,89 a 2,74 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+H)+434,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Oxazol-7-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (31)
[00430] Os compostos 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol (preparado a partir de 7- bromobenzo[d]oxazol com uso do mesmo procedimento que 33C)
e intermediário 17B foram convertidos em composto 31 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 31 (60 mg, rendimento: 60,2%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,61 (s, 1H), 8,44 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,80 a 7,74 (m, 2H), 7,47 a 7,43 (m, 1H), 7,39 a 7,20 (m, 6H), 5,26 a 5,19 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,17 a 3,10 (m, 1H), 2,86 a 2,79 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+418,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Thiazol-4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (51)
[00431] Os compostos ácido benzo[d]tiazol-4- ilborônico (preparado a partir de 4-bromobenzo[d]tiazol com uso do mesmo procedimento que 33C) e intermediário 17B foram convertidos em composto 51 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 51 (75 mg, rendimento: 69,6%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9,19 (s, 1H), 8,22 a 8,12 (m, 2H), 7,99 a 7,90 (m, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,51 a 7,42 (m, 2H), 7,27 a 7,15 (m, 3H), 7,13 a 7,06 (m, 2H), 5,22 a 5,06 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,11 a 2,94 (m, 1H), 2,80 a 2,63 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 434,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Tiazol-4-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (70)
[00432] Os compostos ácido benzo[d]tiazol-4- ilborônico (preparado a partir de 4-bromobenzo[d]tiazol com uso do mesmo procedimento que 33C) e intermediário 70A (preparado a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 70 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 70 (50 mg, rendimento: 48,5%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9,14 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,52 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,20 a 8,16 (m, 1H), 8,11 a 7,87 (m, 2H), 7,79 a 7,69 (m, 1H), 7,50 a 7,44 (m, 2H), 7,27 a 7,13 (m, 5H), 5,16 a 5,07 (m, 1H), 3,04 (dd, J = 3,7, 13,9 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 470,1.
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-
(Difluorometil)-3-(2,5-Dimetilfuran-3-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (24)
[00433] Os compostos 2-(2,5-dimetilfuran-3-il)- 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano e intermediário 70A (preparado a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 24 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 24 (140 mg, rendimento: 79,8%) como um sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,67 a 8,56 (m, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,04 a 7,67 (m, 2H), 7,35 a 7,16 (m, 5H), 6,09 (s, 1H), 5,35 a 5,29 (m, 1H), 3,18 (dd, J = 4,0, 14,1 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H), 2,20 (d, J = 12,1 Hz, 6H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 431,1.
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(2-Metilfuran-3-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (26)
[00434] Os compostos 4,4,5,5-tetrametil-2-(2- metilfuran-3-il)-1,3,2-dioxaborolano e intermediário 70A (preparado a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 26 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 26 (128 mg, rendimento: 95,87%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,63 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,11 a 7,67 (m, 3H), 7,44 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,30 a 7,22 (m, 4H), 7,22 a 7,15 (m, 1H), 6,49 (d, J =
1,8 Hz, 1H), 5,37 a 5,23 (m, 1H), 3,16 (dd, J = 3,6, 14,0 Hz, 1H), 2,79 (br dd, J = 10,1, 13,9 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H).
MS (ESI) m/z (M+H)+417,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(2,5- Dimetilfuran-3-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (55)
[00435] Os compostos 2-(2,5-dimetilfuran-3-il)- 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano e intermediário 17B foram convertidos em composto 55 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 55 (22 mg, rendimento: 26,5%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,09 a 8,03 (m, 2H), 8,01 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,32 a 7,25 (m, 2H), 7,25 a 7,17 (m, 3H), 6,13 a 6,02 (s, 1H), 5,28 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,15 (dd, J = 4,0, 13,9 Hz, 1H), 2,82 (dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H), 2,23 a 2,12 (m, 6H). MS (ESI) m/z (M+H)+395,2.
Exemplo 8 - Compostos 68 e 71
[00436] tris (trifluorometanossulfonato) de ítrio
(249 mg, 0,5 mmol) e Trietilortoformato (15 ml, 93,1 mmol)
foram combinados.
A essa mistura, foi adicionada uma solução de 2-amino-3-bromofenol (1,8 g, 9,31 mmol) em DMSO (20 ml)
e Piridina (1,5 ml, 18,6 mmol). A mistura de reação foi agitada em um bloco térmico a 60 ºC por 18 h.
À mistura, foi adicionado H2O (200 ml) e extraída com EA (50 ml). A fase orgânica foi lavada com salmoura (20 ml) e seca em Na2SO4,
filtrada e concentrada sob vácuo.
O produto foi purificado por FCC (EA/PE a 0 a 50%) para proporcionar o composto 68A
(1 g, rendimento 51,7%) como um sólido vermelho. 1H NMR (400
MHz, DMSO-d6) δ 8,96 (s, 1H), 7,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,73
(d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 a 7,44 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+
198,0.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]oxazol-4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (68)
[00437] Os compostos 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol (68B) (preparado a partir de 68A com uso do mesmo procedimento que 33C) e intermediário 17B foram convertidos em composto 68 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 68 (10 mg, rendimento: 6,7%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,52 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 1,6, 7,7 Hz, 1H), 7,69 a 7,46 (m, 3H), 7,45 a 7,37 (m, 2H), 7,25 a 7,15 (m, 3H), 7,08 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 5,26 a 5,21 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,22 a 3,10 (m, 1H), 2,83 (dd, J = 8,5, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 418,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3- (Benzo[d]Oxazol-4-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (71)
[00438] Os compostos 68B e intermediário 70A (preparados a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 71 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 71 (124 mg, rendimento: 77,99%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,65 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,10 a 7,88 (m, 2H), 7,79 (dd, J = 2,9, 6,4 Hz, 1H), 7,75 a 7,64 (m, 1H), 7,53 a 7,44 (m, 2H), 7,30 a 7,14 (m, 5H), 5,30 a 5,21 (m, 1H), 3,17 a 3,12 (m,
1H), 2,87 (dd, J = 8,9, 14,2 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 454,1.
Exemplo 9 - Compostos 35 e 50
[00439] TEA (1,5 ml, 10,64 mmol) foi adicionada à mistura de 2-amino-3-bromofenol (1 g, 5,32 mmol) e CDI (1,72 g, 10,64 mmol) em THF (20 ml). A mistura foi agitada a 60 ºC por 18 h. A mistura de reação foi evaporada e diluída com diclorometano (60 ml). A camada orgânica foi lavada com 1M de ácido clorídrico (2 x 30 ml) e água (30 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. O composto 35A (1,1 g, 96,64% de rendimento) foi obtido como um sólido vermelho, que foi usado para a próxima etapa diretamente. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,19 (br s,
1H), 7,37 a 7,29 (m, 2H), 7,08 a 7,01 (m, 1H).
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1-Metil-3-(2- oxo-2,3-Dihidrobenzo[d]OXazol-4-il)-1H-Pirazol-4- Carboxamida (35)
[00440] Os compostos 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona (35B) (preparado a partir de 35A com uso do mesmo procedimento que 33C) e intermediário 17B foram convertidos em composto 35 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 35 (18 mg, rendimento: 29,62%) como um sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (br s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,36 a 7,21 (m, 5H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,06 (br t, J = 8,2 Hz, 2H), 6,96 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,25 (br s, 1H), 5,49 a 5,40 (m, 1H), 4,01 a 3,93 (m, 3H), 3,30 (dd, J = 4,8, 14,1 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 9,0, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 434,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-1- (Difluorometil)-3-(2-oxo-2,3-Dihidrobenzo[d]Oxazol-4-il)- 1H-Pirazol-4-Carboxamida (50)
[00441] Os compostos 35B e intermediário 70A (preparados a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 50 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 50 (20 mg, rendimento: 22,8%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,27 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,12 a 7,90 (m, 1H), 7,83 a 7,58 (m, 2H), 7,23 a 6,59 (m, 9H), 5,24 (s, 1H), 2,99 a 2,97 (m, 1H), 2,70 a 2,60 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 470,1.
Exemplo 10 - Composto 16 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(1H-Indazol- 4-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (16)
[00442] Os compostos 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (16A) (preparado a partir de 4-bromo-1H-indazol com uso do mesmo procedimento que 33C) e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila foram convertidos em composto 16 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 16 (60 mg, rendimento: 77,4%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6,
400MHz): δ 13,05 (br s, 1H), 8,34 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,13 a 8,08 (m, 2H), 8,06 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,52 a 7,45 (m, 1H), 7,32 a 7,19 (m, 7H), 5,34 a 5,24 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,14 (dd, J = 3,8, 14,1 Hz, 1H), 2,80 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 417,1.
Exemplo 11 - Composto 39 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(1H-Indazol- 7-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (39)
[00443] NaH (406 mg, 10,2 mmol, pureza a 60%) foi adicionado a uma mistura de 7-bromo-1H-indazol (1 g, 5,1 mmol) em THF (15 ml) a 0 ºC. A mistura foi agitada a 0 ºC por 1 h, então SEM-Cl (1,35 ml, 7,62 mmol) foi adicionado.
Após a adição, a temperatura de reação foi permitida a aumentar à temperatura ambiente (22 ºC) lentamente e a mistura foi agitada por 15 h a 22 ºC. A mistura foi terminada bruscamente com a adição de NH4Cl saturado (30 ml). Então a mistura foi extraída com EA (3 x 25 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 ml), seca em MgSO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 8/1) para proporcionar o composto 39A (1,1 g, rendimento 66,2%) como óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,26 (s, 1H), 7,85 (dd, J = 0,9, 7,9 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 0,9, 7,5 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 5,99 (s, 2H), 3,52 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 0,78 (t, J = 7,8 Hz, 2H), -0,13 (s, 9H).
[00444] Os compostos 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metila)-1H- indazol (39B) (preparado a partir de 39A com uso do mesmo procedimento que 33C) e 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4- carboxilato de etila foram convertidos em composto 39F com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 39F (203 mg, rendimento: 70,49%) como um sólido amarelo foi obtido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,31 (s, 1H), 8,19 a 8,16 (m, 1H), 7,86 a 7,80 (m, 1H), 7,71 a 7,50 (m, 2H), 7,25 a 7,13 (m, 6H), 7,01 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 5,31 (s,
2H), 5,28 a 5,19 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 2,74 (dd, J = 8,5, 14,1 Hz, 1H), 0,90 a 0,83 (m, 3H), 0,57 (t, J = 8,0 Hz, 2H), -0,14 (s, 9H).
[00445] HCl/EtOAc (4M, 4 ml) foi adicionado à mistura de composto 39F (160 mg, 0,3 mmol). A mistura foi agitada a 30 ºC por 3 h. A mistura foi filtrada e o bolo filtrado foi concentrado sob vácuo. O composto 39 (66 mg, 54,1% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,74 (s, 1H), 8,44 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,11 a 8,04 (m, 3H), 7,81 a 7,73 (m, 2H), 7,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,28 a 7,22 (m, 4H), 7,21 a 7,16 (m, 1H), 7,02 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,33 a 5,26 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,14 (dd, J = 3,9, 14,0 Hz, 1H), 2,85 a 2,75 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+=417,1.
Exemplo 12 - Compostos 9, 47 e 48
[00446] A uma solução de 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-
4-carboxilato de etila (4 g, 14,28 mmol) e 1H- benzo[d]imidazol (2 g, 16,93 mmol) em DMF (40 ml), foi adicionado Cs2CO3 (9,31 g, 28,57 mmol), 1H-benzotriazol (340 mg, 2,86 mmol) e CuI (272 mg, 1,43 mmol). A mistura foi agitada a 110 ºC por 48 h sob N2. A mistura foi diluída com H2O (100 ml), lavada com EtOAc (150 ml). A fase aquosa foi coletada, ajustada para pH ~ 4 com 1N HCl, lavada com EtOAc (300 ml). A fase aquosa foi coletada e concentrada a vácuo.
O resíduo foi triturado com MeOH (40 ml). O sólido foi filtrado. O filtrado foi coletado e concentrado. O resíduo foi purificado por HPLC preparatório (HCl) para gerar o composto 9A (380 mg, rendimento: 10,74%) como sólido branco.
MS (ESI) m/z (M+H)+242,9.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(1H- Benzo[d]Imidazol-1-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (9)
[00447] Os compostos 49A e intermediário 1D foram convertidos em composto 9 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 9 (70 mg, rendimento: 46,85%) como um sólido branco foi obtido. MS (ESI) m/z (M+H)+417,1. 1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,61 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,02 (br. s, 1H), 7,77 (br.
s, 1H), 7,71 a 7,65 (m, 1H), 7,50 a 7,43 (m, 1H), 7,30 a 7,16 (m, 7H), 5,29 a 5,20 (m, 1H), 4,00 a 3,91 (m, 3H), 3,18 a 3,09 (m, 1H), 2,85 a 2,75 (m, 1H).
[00448] Uma mistura de 4-fluorobenzeno-1,2-diamina (1 g, 7,93 mmol) e HCOOH (10 ml) foi agitada a 90 ºC por 2 h.
A solução foi ajustada para pH ~ 7 com 5N de NaOH. A mistura foi extraída com EtOAc (50 ml x 3). Os orgânicos foram coletados, secos com Na2SO4, filtrados e concentrados para gerar o composto 47A (1 g, bruto) como sólido marrom, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem purificação adicional.
[00449] 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila e intermediário 47A foram submetidos à reação condições as para intermediário 9A e a reação rendeu produtos 47B e 48A. O produto foi purificado por HPLC preparatório (HCl) para gerar 400 mg de mistura como sólido marrom, que foi repurificado por SFC (coluna: AD (250mm*30mm,5um);fase móvel: [NH3H2O a 0,1% MEOH];B%: 25% a 25%,min) para gerar o composto 47B (100 mg, rendimento: 2,61%) como sólido branco; composto 48A (100 mg, rendimento: 2,61%) como sólido branco, que foi repurificado por SFC para gerar 48A (90 mg). MS (ESI) m/z (M+H)+ 260,9.
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(6-Fluoro- 1H-Benzo[d]Imidazol-1-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (47)
[00450] Os compostos 47B e intermediário 1D foram convertidos em composto 47 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 47 (50 mg, rendimento: 48,0%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,42 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,33 a 8,27 (m, 1H), 7,72 (br s, 1H), 7,58 a 7,44 (m, 3H), 7,32 a 7,17 (m, 5H), 7,16 a 7,07 (m, 1H), 5,34 a 5,26 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,24 a 3,17 (m, 1H), 2,95 a 2,85 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 435,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(5-Fluoro- 1H-Benzo[d]Imidazol-1-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (48)
[00451] Os compostos 48A e intermediário 1D foram convertidos em composto 48 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 48 (40 mg, rendimento:
28,2%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,46 a 8,21 (m, 3H), 7,80 a 7,41 (m, 3H), 7,38 a 7,04 (m, 7H), 5,31 (br. s, 1H), 4,04 a 3,90 (m, 3H), 3,27 a 3,16 (m, 1H), 2,95 a 2,83 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 435,2.
Exemplo 13 - Compostos 20 e 21
[00452] A uma solução de 2-(furan-3-il)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1 g, 5,15 mmol) em DMF (15 ml), foi adicionado NCS (723 mg, 5,41 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 4 h. A solução resultante foi tratada com 10% Na2S2O3 aquoso (50 ml) e foi extraída com MTBE (50 ml x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (100 ml) e seca em Na2SO4. Após a remoção de solvente sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~10% @ 25 ml/min). O composto 20A (0,37 g, rendimento: 31,4%) foi obtido como um óleo incolor. O composto 20B (0,13 g, rendimento: 11,0%) foi obtido como um óleo incolor. A mistura de composto 20A e composto 20B. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,92 (s, 1H), 7,34 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,23 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 1,27 (t, J = 7,2 Hz, 3H).. MS (ESI) m/z (M+H)+254,9.
[00453] A uma solução de composto 70A (400 mg, 861,69 umol) e composto 20A (216 mg, 945,38 umol) e composto 20B (80 mg, 350,14 umol) em dioxano (20 ml) e H2O (2 ml) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (70 mg, 95,67 umol) e K2CO3 (300 mg, 2,17 mmol) sob N2, e a mistura foi agitada a 90 ºC por 16 h sob atmosfera N2. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi diluído com EA (30 ml) e H2O (40 ml), filtrado, o filtrado foi extraído com EA (20 ml x 2), e então a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparatório (SiO2, PE:EA = 1:2,5). Então o resíduo foi purificado por HPLC preparatório (condição de HCl; coluna: YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5um;fase móvel: [água(HCl a 0,05%)-ACN];B%: 30% a 60%,10 min). O composto 20C (120 mg, rendimento: 31,6%) foi obtido como um sólido branco. O composto 21A (45 mg, rendimento: 11,8%) foi obtido como um sólido branco.
[00454] Composto 20C: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,61 (s, 0,3H), 8,54 (s, 0,7H), 8,21 a 7,71 (m, 2H), 7,69 a 7,62 (m, 1H), 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,25 a 7,09 (m, 6H), 6,65 a 6,57 (m, 1H), 5,86 (d, J = 5,7 Hz, 0,7H), 5,75 (d, J = 5,7 Hz, 0,3H), 4,50 a 4,36 (m, 1H), 4,03 a 3,96 (m, 0,7H), 3,87 a 3,83 (m, 0,3H), 2,91 a 2,69 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+439,0.
[00455] Composto 21A: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,65 (s, 0,2H), 8,62 (s, 0,8H), 8,23 a 7,69 (m, 3H), 7,32 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,26 a 7,08 (m, 6H), 6,71 a 6,66 (m, 1H), 5,86 (d, J = 5,7 Hz, 0,8H), 5,74 (d, J = 6,0 Hz, 0,2H), 4,54 a 4,41 (m, 1H), 4,01 (dd, J = 3,5, 5,7 Hz, 0,8H), 3,88 (d, J = 5,3 Hz, 0,2H), 2,92 a 2,67 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+439,0.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(2- Clorofuran-3-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (20)
[00456] O composto 20C foi convertido em composto 20 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 20 (90 mg, rendimento: 70,6%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,73 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,13 a 7,71 (m, 3H), 7,67 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,30 a 7,22 (m, 4H), 7,21 a 7,14 (m, 1H), 6,66 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,38 a 5,21 (m, 1H), 3,15 (dd, J = 3,7, 13,9
Hz, 1H), 2,77 (dd, J = 10,0, 13,8 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+437,0.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(5- Clorofuran-3-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4-Carboxamida (21)
[00457] O composto 21A foi convertido em composto 21 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 21 (30 mg, rendimento: 65,7%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,81 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,16 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,03 a 7,71 (m, 2H), 7,26 (d, J = 4,2 Hz, 4H), 7,20 a 7,16 (m, 1H), 6,74 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,36 a 5,23 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 3,9, 14,0 Hz, 1H), 2,80 (dd, J = 10,3, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+437,1.
Exemplo 14 - Composto 36
[00458] A uma solução de 2-(furan-3-il)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1 g, 5,10 mmol) em DMF (15 ml), foi adicionado NCS (1,50 g, 11,21 mmol). A mistura foi agitada a 100 ºC por 2 h. A solução resultante foi tratada com 10% Na2S2O3 aq. a 10% (50 ml) e foi extraída com MTBE (50 ml x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (100 ml) e seca em Na2SO4. Após a remoção de solvente sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~10% @20 ml/min). O composto 36A (0,5 g, rendimento: 37,0%) foi obtido como um óleo amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 6,45 a 6,23 (m, 1H), 1,31 (s, 12H).
N-(4-Amino-3,4-dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(2,5- Diclorofuran-3-il)-1-(Difluorometil)-1H-Pirazol-4-
Carboxamida (36)
[00459] Os compostos 36A e intermediário 70A (preparados a partir de 4A com uso do mesmo procedimento que 17B) foram convertidos em composto 36 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 36 (100 mg, rendimento: 71,7%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,78 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,16 a 7,72 (m, 3H), 7,32 a 7,22 (m, 4H), 7,21 a 7,12 (m, 1H), 6,67 (s, 1H), 5,47 a 5,19 (m, 1H), 3,15 (dd, J = 3,6, 13,8 Hz, 1H), 2,76 (dd, J = 10,1, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+471,0.
Exemplo 15 - Compostos 19 e 15
[00460] A uma solução de 2-(furan-3-il)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (500 mg, 1,79 mmol) e ácido 3-furilborônico (250 mg, 2,23 mmol) em dioxano (20 ml) e H2O
(1 ml), foi adicionado K2CO3 (620 mg, 4,49 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (131 mg, 179,03 umol) sob N2. A mistura foi agitada a 80 ºC por 16 h sob N2. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi diluído com EA (30 ml) e H2O (30 ml), filtrada.
O filtrado foi extraído com EA (20 ml), e então a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 24 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0 a 30% @ 30 ml/min). O composto 19A (350 mg, rendimento: 88,8%) foi obtido como um óleo amarelo claro. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,39 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,44 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,30 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 1,35 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+221,0.
[00461] A uma solução de composto 19A (100 mg, 454,08 umol) em DMF (3 ml) foi adicionado NCS (68 mg, 509,24 umol).
A mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h. A reação foi diluída com H2O (20 ml), extraída com EA (20 ml x 2), a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparatório (SiO2, PE: EA = 2: 1). O composto 19B (70 mg, rendimento: 60,5%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,92 (s, 1H), 7,34 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,23 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 1,27 (t, J =
7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 254,9.
N-(4-amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(2- Clorofuran-3-il)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (19)
[00462] O composto 19B foi convertido em composto 19 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 19 (40 mg, rendimento: 35,0%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,32 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,32 a 7,24 (m, 4H), 7,23 a 7,19 (m, 1H), 6,66 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,33 a 5,25 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,15 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 2,82 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+401,1.
N-(4-amino-3,4-dioxo-1-fenilbutan-2-il)-3-(2,5- diclorofuran-3-il)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxamida (15)
[00463] A uma solução de composto 19A (50 mg, 227,04 umol) em DMF (2 ml), foi adicionado NCS (68 mg, 509,24 umol).
A mistura foi agitada a 100 ºC por 1,5 h. A reação foi diluída com H2O (20 ml), extraída com EA (20 ml x 2), a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparatório (SiO2, PE: EA = 2: 1). O composto 15A (40 mg, rendimento 60,9%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,93 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 4,34 a 4,18 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+289,0.
[00464] O composto 15A foi convertido em composto 15 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 15 (35 mg, rendimento: 47,2%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,40 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,29 a 7,21 (m, 4H), 7,20 a 7,15 (m, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,35 a 5,19 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,12 (dd, J = 3,7, 13,9 Hz, 1H), 2,78 (dd, J = 10,1, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+435,0.
Exemplo 16 - Compostos 23, 3, 46, 52, e 79
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2,5- Dimetilfuran-3-il)-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (23)
[00465] Os compostos 4-bromo-1,2,5-tiadiazol-3- carboxilato de metila e 2-(2,5-dimetilfuran-3-il)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano foram convertidos em composto 23 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1.
O composto 23 (110 mg, rendimento: 65,02%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,34 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,37 a 7,18 (m, 5H), 5,94 (s, 1H), 5,61 a 5,41 (m, 1H), 3,23 (dd, J = 3,5, 14,1 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 10,0, 14,0 Hz, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,18 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+399,1.
N-(4-amino-3,4-dioxo-1-fenilbutan-2-il)-4-(4- fluorofenil)-1,2,5-tiadiazol-3-carboxamida (3)
[00466] Os compostos 4-bromo-1,2,5-tiadiazol-3- carboxilato de metila e ácido (4-fluorofenil)borônico foram convertidos em composto 3 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 3 (235 mg, rendimento: 68,1%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,26 a 8,12 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,67 a 7,56 (m, 2H), 7,34 a 7,16 (m, 7H), 5,56 a 5,38 (m, 1H), 3,24 (dd, J = 3,6, 14,0 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 10,3, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+399,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2- Metilfuran-3-il)-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (46)
[00467] Os compostos 4-cloro-1,2,5-tiadiazol-3- carboxilato de etila e 4,4,5,5-tetrametil-2-(2-metilfuran- 3-il)-1,3,2-dioxaborolano foram convertidos em composto 46 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 46 (45 mg, rendimento: 42,84%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,34 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,46 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,32 a 7,25 (m, 4H), 7,22 (qd, J = 4,1, 8,7 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,60 a 5,43 (m, 1H), 3,22 (dd, J = 3,5, 13,9 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 10,1, 14,1 Hz, 1H), 2,40 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+385,1.
[00468] A uma solução de 4-cloro-1,2,5-tiadiazol-3-
carboxilato de etila (3,0 g, 15,57 mmol) em dioxano (50 ml) e H2O (5 ml), foi adicionado Cs2CO3 (15,2 g, 46,72 mmol) e ácido 3-furilborônico (2,1 g, 18,69 mmol), a mistura foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, então Pd(P(t- Bu)3)2 (796 mg, 1,56 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada a 80 ºC por 12 horas sob N2 e resfriada à temperatura ambiente e concentrada, o resíduo foi diluído com H2O (100 ml) e extraída com EA (100 ml x 3). A fase orgânica obtida foi combinada, lavada com salmoura (50 ml x 3) e seca em Na2SO4 anidro e filtrada e o filtrado foi concentrado para gerar um resíduo, que foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (PE: EA = 1: 0 a 10: 1) para gerar o composto 52A (2 g, rendimento 57,3%) como um óleo incolor. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8,44 (s, 1H), 7,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,50 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,49 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[00469] A uma solução de composto 52A (1,5 g, 6,69 mmol) em DMF (20 ml), foi adicionado NCS (1,0 g, 7,49 mmol).
A mistura foi agitada a 25 ºC por 16 horas. A reação foi diluída com H2O (60 ml) e extraída com EA (20 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com Na2S2O3 (10 % aq., 20 ml) e salmoura (20 ml x 3) e concentrada para gerar um resíduo.
O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (PE: EA = 1: 0 a 10: 1) para gerar composto 52B puro (330 mg, rendimento: 19,5%) como um óleo incolor e a mistura consiste em composto 52A e composto 52C (500 mg). A mistura consiste em composto 52A e composto 52C foi purificado por TLC preparatório (PE: EA = 100: 1, 5 vezes) para gerar o composto 52C (135 mg, rendimento: 7,8%) como um sólido branco. Composto 52B: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7,43 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,60 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Composto 52C: 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8,35 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,50 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,48 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(5- Clorofuran-3-il)-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (52)
[00470] O composto 4-(5-clorofuran-3-il)-1,2,5- tiadiazol-3-carboxilato de etila (52C) foi convertido em composto 52 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 52 (60 mg, rendimento: 62,8%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,37 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,06 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,32 a 7,18 (m, 5H), 6,81 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 5,57 a 5,49 (m, 1H), 3,25 (dd, J = 3,9, 14,0 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 10,3, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H) + 405,0.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2- Clorofuran-3-il)-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (79)
[00471] O composto 4-(2-clorofuran-3-il)-1,2,5- tiadiazol-3-carboxilato (52B) de etila foi convertido em composto 79 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 52 (50 mg, rendimento: 52,3%) como um sólido amarelo pálido foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,37 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,73 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,32 a 7,17 (m, 5H), 6,59 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,56 a 5,47 (m, 1H), 3,29 a 3,18 (m, 1H), 2,88 (dd, J = 10,0, 14,0 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H) + 405,0.
Exemplo 17 - Compostos 85-86, 57, e 82 N-(1-(Oxazol-2-il)-1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)-4-Fenil- 1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (85)
[00472] À mistura de LiAlH4 (406,2 mg, 10,70 mmol) em
THF (20 ml), solução de (1-(metoxi(metila)amino)-1-oxo-3- fenilpropan-2-il)carbamato de terc-butila (3 g, 9,73 mmol) em THF (20 ml) foi adicionado em gotas a 0 ºC sob atmosfera de N2. Após a adição, a mistura foi agitada a 0 ºC por 1 h.
EtOAc (6 ml) foi adicionado em gotas à mistura de reação mantendo a temperatura abaixo de 5 ºC, depois que HCl (1M, 10 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi separada em um funil de separação e o aquoso foi extraído com EtOAc (30 ml x 2), a fase orgânica combinada foi lavada com HCl (1M, 30 ml x 3), NaHCO3 sat. (30 ml) e salmoura (30 ml), seco em Na2SO4 anidro. Filtrado e o filtrado foi concentrado para gerar o composto 85A (2,3 g, rendimento: 94,8%) como um sólido branco. O produto foi usado diretamente na próxima etapa. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,52 (s, 1H), 7,40 a 7,10 (m, 6H), 4,15 a 4,00 (m, 1H), 3,13 a 3,05 (m, 1H), 2,75 a 2,65 (m, 1H), 1,31 (s, 9H).
[00473] Uma solução compreendida por oxazol (166,2 mg, 2,41 mmol) em THF (20 ml) foi tratada com BH3.THF (1 M, 2,41 ml) sob nitrogênio e a mistura foi agitada em 5 a 15 ºC por 30 minutos e então resfriada para -70 ºC. Uma solução compreendida por n-Buli (2,5M em ciclo-hexano, 1 ml) foi adicionado em gotas e a mistura foi agitada por 30 minutos a -70 ºC. Uma solução compreendida por composto 85A (300 mg, 1,20 mmol) em THF (10 ml) foi adicionada e a mistura foi agitada e permitida a aquecer à temperatura ambiente (5 a 15
ºC) enquanto a reação continuou até a conclusão (24 h após).
A mistura então foi resfriada para -78 ºC, terminada bruscamente adicionando-se lentamente ácido acético a 5 por cento em etanol (13,8 ml), permitida a aquecer à temperatura ambiente (5-15 ºC) e agitada por 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida, o resíduo foi diluído com H2O (15 ml) e extraído com EtOAc (20 ml x 3). A fase orgânica foi combinada, lavada com salmoura (30 ml) e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (PE:EA=1:0 a 0:1) para gerar o composto 85B (170 mg, rendimento: 24,4%) como um óleo incolor. MS (ESI) m/z (M a Boc)+218,9.
[00474] A mistura de composto 85B (170 mg, 533,97 umol) em EtOAc (5 ml) foi misturada com HCl/EtOAc (4M, 10 ml) e agitada em temperatura ambiente (5 a 15 ºC) por 1 h.
O solvente foi removido sob pressão reduzida para gerar o composto 85C (150 mg, bruto, HCl) como um sólido branco. O produto foi usado diretamente na próxima etapa.
[00475] A mistura de ácido 4-fenil-1,2,5-tiadiazol- 3-carboxílico (121,4 mg, 588,9 umol), composto 85C (150 mg, 588,90 umol, HCl), DIEA (0,3 ml, 1,77 mmol) e HBTU (245,67 mg, 647,79 umol) em DMF (10 ml) foi agitado em 5 a 15 ºC por 3 h. A reação foi diluída com H2O (30 ml), extraída com EtOAc (30 ml x 3). A fase orgânica foi combinada e lavada com HCl (1M, 30 ml), NaHCO3 sat. aq. (30 ml), salmoura (30 ml x 2) e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por purificação de HPLC preparatório (sistema HCl) para gerar o composto 85D (50 mg, rendimento: 20,8%) como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,02 a 8,83 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,52 a 7,16 (m, 12H), 4,88 a 4,74 (m, 1H), 4,64 a 4,49 (m, 1H), 3,20 a 2,77 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+407,0.
[00476] À mistura de composto 85D (50 mg, 123,01 umol) em DCM (20 ml), DMP (156,5 mg, 369,04 umol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente (5 a 15 ºC). Após 1,5 h, DMP (100 mg) foi adicionado e a reação foi agitada a 30 ºC de um dia para o outro (16 h). A reação foi diluída com DCM (20 ml), terminada bruscamente com Na2S2O3 sat. aquoso (30 ml) e separada. A fase orgânica foi lavada com NaHCO3 sat. aquosa (20 ml) e salmoura (20 ml x 3), seca em Na2SO4 anidro. Filtrado e o filtrado foi concentrado. O composto 85 (40 mg, rendimento: 62,3%) foi obtido como um sólido amarelo pálido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,68 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,58 a 7,52 (m, 2H), 7,49 a 7,42 (m, 1H), 7,41 a 7,22 (m, 7H), 5,74 a 5,66 (m, 1H), 3,41 a 3,36 (m, 1H), 3,06 a 2,95 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+405,1. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,88 (s, 1H), 7,73 a 7,66 (m, 3H), 7,47 a 7,38 (m, 4H), 7,32 a 7,22 (m, 3H), 7,19 a 7,13 (m, 2H), 5,99 (dt, J = 5,3, 7,8 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 5,1, 13,9 Hz, 1H), 3,26 (dd, J = 7,5, 14,1 Hz, 1H).
N-(1-(Benzo[d]Oxazol-2-il)-1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)- 4-Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (86)
[00477] A uma solução de 1,3-benzoxazol (573,4 mg, 4,81 mmol) em THF (20 ml) a -10 ºC foi adicionado i-PrMgCl (2,0 M, 1,60 ml), a mistura de reação foi agitada em -10 °C por 1 h. Então composto 85A (400 mg, 1,60 mmol) foi adicionado como uma solução em THF (20 ml) e a mistura de reação foi agitada a -10 ºC por 2 h seguidas por 12 h a 5 a 15 ºC. A reação foi concentrada e o resíduo foi diluído com EtOAc (60 ml), lavado com salmoura (30 ml x 2) e concentrado para gerar um resíduo. O resíduo foi diluído com EtOAc (100 ml) e lavado com salmoura (30 ml x 3), concentrado para gerar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de gel de sílica (PE: EA=1:0 a 5:1) para gerar o composto 86A (270 mg, rendimento: 45%) como um óleo amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,77 a 7,63 (m, 1H), 7,52 (dt, J = 2,6, 6,7 Hz, 1H), 7,41 a 7,30 (m, 4H), 7,26 a 7,13 (m, 3H), 5,11 a 4,88 (m, 2H), 4,53 a 4,19 (m, 2H), 3,08 (br. d, J=7,6 Hz, 1H), 3,00 a 2,83 (m, 1H), 1,43 a 1,27 (m, 9H). MS (ESI) m/z (M+Na+) 391,0.
[00478] O composto 86A foi convertido em composto 86 com uso de procedimentos conforme descrito como para o composto 85. O composto 86 (180 mg, rendimento: 78,53%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,78 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,60 a 7,52 (m, 3H), 7,46 a 7,40 (m, 1H), 7,40 a 7,28 (m, 6H), 7,27 a 7,21 (m, 1H), 5,89 a 5,79 (m, 1H), 3,49 (dd, J = 3,8, 14,1 Hz, 1H), 3,07 (dd, J = 9,9, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+455,0.
N-(1-(Oxazol-2-ilamino)-1-Oxo-3-Fenilpropan-2-il)-4- Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (57)
[00479] Os compostos (terc- butoxicarbonil)fenilalanina e oxazol-2-amina foram acoplados com uso de condições descritas para o composto 85 para render intermediário 57A que foi convertido em composto 57. O composto 57 (35 mg, rendimento: 11,2%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (br. s, 1H), 9,47 (br. d, J=7,7 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,51 (d, J=7,3 Hz, 2H), 7,46 a 7,36 (m, 3H), 7,36 a 7,22 (m, 5H), 7,15 (s, 1H), 5,00 a 4,80 (m, 1H), 3,25 a 3,10 (m, 1H), 3,05 a 2,93 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H) + 420,2.
N-(1-Ciano-2-Feniletil)-4-Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3- Carboxamida (82)
[00480] A uma solução agitada de 2-fenilacetaldeído (3 g, 24,97 mmol, 1,95 ml) em MeOH (70 ml), foi adicionado NH3 em MeOH (30 ml) e Ti(i-PrO)4 (10,64 g, 37,45 mmol, 11,05 ml) e a solução resultante foi agitada a 15 ºC por 2 h. À mistura de reação, foi então adicionado TMSCN (4,46 g, 44,94 mmol, 5,62 ml), então a mistura de reação foi agitada a 15 ºC por 16 h. A mistura de reação foi terminada bruscamente com água (150 ml), e o precipitado branco resultante foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, extraído com acetato de etila (50 ml x 3) e a fase orgânica foi lavada com salmoura (100 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O composto 82A (2 g, rendimento: 54,8%) foi obtido como um óleo amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,36 a 7,20 (m, 5H), 4,03 a 3,85 (m, 1H), 3,00 a 2,80 (m, 2H), 2,38 (br s, 2H)
[00481] O composto 82A foi acoplado com ácido 4-fenil- 1,2,5-tiadiazol-3-carboxílico com uso de condições conforme descrito para o composto 85 para render o composto 82. O composto 82 (130 mg, rendimento: 40,1%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,88 (br d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61 a 7,46 (m, 3H), 7,45 a 7,39 (m, 2H), 7,38 a 7,20 (m, 5H), 5,25 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 3,30 a 3,07 (m, 2H).
Exemplo 18 - Compostos 41, 40, 38, 67, 40, 65, 42, 64, 74 e 72
[00482] A uma mistura de (1-ciano-1-hidroxi-3- fenilpropan-2-il)carbamato de terc-butila (27 g, 97,7 mmol) em dioxano (150 ml) foi adicionado HCl (6 N, 360 ml). A mistura foi agitada a 100 ºC por 12 h. A reação de hidrólise foi permitida a resfriar à temperatura ambiente e então concentrada a 120 ml a vácuo. A fase aquosa foi alcalisada com NaOH (sólido) até que o pH seja ~ 11 a 12. A fase aquosa alcalisada foi usada na próxima etapa sem purificação.
[00483] A uma mistura do composto de solução aquosa alcalisada 41A (97,7 mmol) em H2O (120 ml) , foi adicionado dioxano (60 ml) e (Boc)2O (45 ml, 195,9 mmol), que foi agitado a 25 ºC por 12 h enquanto o pH foi mantido entre 10 e 11 com NaOH (2M). A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para mover dioxano. Depois de ser alcalisada para pH ~ 12 a 13, a fase aquosa foi lavada com EA (80 ml x 2) e acidificada com 6N HCl até que estivesse com pH ~ 2 a 3, e então extraído com EA (50 ml x 3). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo para proporcionar o composto 41B (29,5 g, bruto) como líquido pegajoso vermelho claro, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7,32 a 7,14 (m, 6H), 6,73 a 6,35 (m, 1H), 4,00 a 3,83 (m, 2H), 2,87 a 2,75 (m, 1H), 2,74 a 2,66 (m, 1H), 1,32 a 1,24 (m, 9H).
[00484] A uma mistura de composto 41B (11 g, 37,3 mmol) em DMF (80 ml) foi adicionado K2CO3 (10,3 g, 74,5 mmol), seguido por MeI (4,9 ml 78,9 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h. A mistura foi filtrada. Os filtrados foram concentrados sob pressão reduzida e então diluídos com H2O (200 ml) e extraídos com EA (50 ml x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo para proporcionar o composto
41C (8,56 g, 74,2% de rendimento) como sólido amarelo claro, que foi usada na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO- d6, 400 MHz): δ 7,33 a 7,11 (m, 5H), 6,84 a 5,99 (m, 1H), 5,91 a 5,34 (m, 1H), 4,03 a 3,80 (m, 2H), 3,64 a 3,52 (m, 3H), 2,86 a 2,75 (m, 1H), 2,71 a 2,59 (m, 1H), 1,33 a 1,15 (m, 9H). MS (ESI) m/z (M+Na)+ 332,1, (M-Boc+H)+ 210,1.
[00485] A uma mistura de composto 41C (4 g, 12,9 mmol) em EtOAc (10 ml), foi adicionado HCl/EtOAc (4M, 40 ml). A mistura foi agitada a 25 ºC por 3 h. A mistura foi concentrada a vácuo. O resíduo foi triturado com EA (20 ml). O sólido foi coletado e seco a vácuo para proporcionar o composto 41D (2,68 g, 84,3% de rendimento, HCl) como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,27 (s, 3H), 7,41 a 7,17 (m, 5H), 6,71 a 6,34 (m, 1H), 4,53 a 3,93 (m, 1H), 3,77 a 3,60 (m, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,27 (s, 1H), 3,11 a 2,82 (m, 2H).
3-(1-Ciclopropil-3-Fenil-1H-Pirazol-4-Carboxamido)-2- Oxo-4-Fenilbutanoato de Metila (41) e ácido 3-(1- Ciclopropil-3-Fenil-1H-Pirazol-4-Carboxamido)-2-Oxo-4- Fenilbutanoico (60)
[00486] A uma mistura de ácido 1-ciclopropil-3-fenil- 1H-pirazol-4-carboxílico (0,3 g, 1,3 mmol) e intermediário 41D (387,5 mg, 1,6 mmol, HCl) em DMF (10 ml) foi adicionado HBTU (500 mg, 1,3 mmol) e DIEA (750 ul, 4,31 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 1 h. A mistura foi concentrada, e então diluída com H2O (100 ml) e extraída com EA (30 ml x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com 1N HCl (30 ml), NaHCO3 saturado (30 ml), salmoura (30 ml x 3), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo para proporcionar o composto 41E (0,55 g, 99,7% de rendimento) como sólido branco, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,10 a 7,99 (m, 1H), 7,96 a 7,67 (m, 1H), 7,57 a 7,45 (m, 2H), 7,33 a 7,13 (m, 8H), 5,96 a 5,55 (m, 1H), 4,52 a 4,33 (m, 1H), 4,16 a 4,07 (m, 1H), 3,83 a 3,73 (m, 1H), 3,63 a 3,51 (m, 3H), 2,97 a 2,68 (m, 2H), 1,14 a 0,96 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 420,1.
[00487] A uma mistura de composto 41E (0,54 g, 1,3 mmol) em DCM (50 ml), foi adicionado DMP (1,6 g, 3,9 mmol).
A mistura foi agitada a 25 ºC por 50 min. A reação foi diluída com DCM (20 ml) e terminada bruscamente por 40 ml de solução de Na2S2O3 Sat. e 40 ml de solução de NaHCO3 saturada e agitada por 5 min. Após arrefecer bruscamente a reação, a mistura de reação foi despejada em funil separatório e separada. A fase aquosa separada foi extraída com DCM (30 ml x 2). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 ml x 2), seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada a vácuo para proporcionar o composto 41 (0,51 g, rendimento 93,6%) como sólido amarelo pálido, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ. 8,61 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,59 a 7,48 (m, 2H), 7,36 a 7,19 (m, 8H), 5,11 a 4,96 (m, 1H), 3,87 a 3,78 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,24 a 3,13 (m, 1H), 2,97 a 2,84 (m, 1H), 1,12 a 0,98 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 418,2.
[00488] A uma mistura de composto 41 (0,15 g, 359,3 umol) em AcOH (2 ml) foi adicionado HCl (12M, 2 ml) em uma porção. A mistura foi agitada a 40 ºC por 1 h. A mistura foi diluída com H2O (50 ml), e extraída com EA (30 ml x 3). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparatório (condição de HCl) para proporcionar o composto 60 (40 mg, rendimento 27,6%) como sólido amarelo pálido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ. 8,52 (d,
J = 7,3 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,60 a 7,50 (m, 2H), 7,36 a 7,18 (m, 8H), 5,08 a 4,97 (m, 1H), 3,88 a 3,74 (m, 1H), 3,24 a 3,12 (m, 1H), 2,95 a 2,81 (m, 1H), 1,14 a 0,96 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 404,1.
2-Oxo-4-Fenil-3-(4-Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3- Carboxamido)Butanoato de Metila (38) e ácido 2-Oxo-4-Fenil- 3-(4-Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamido)Butanoico (67)
[00489] O composto 38 foi preparado a partir de ácido 4-fenil-1,2,5-tiadiazol-3-carboxílico e intermediário 41D com uso do mesmo procedimento que para o composto 41. O composto 38 (0,440 g, rendimento 88,4%) foi obtido como sólido branco, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 9,27 (br d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,64 (br d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,51 a 7,38 (m, 3H), 7,31 a 7,21 (m, 5H), 5,32 (ddd, J = 5,0, 7,5, 9,1 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,28 (dd, J = 4,9, 14,2 Hz, 1H), 3,03 a 2,98 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 396,1.
[00490] O composto 67 foi preparado a partir de composto 38 com uso do mesmo procedimento que para o composto
60. O composto 67 (0,123 g, rendimento 82,89%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 7,84 (br d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,63 a 7,59 (m, 2H), 7,53 a 7,42 (m, 3H), 7,35 a 7,24 (m, 5H), 5,40 (ddd, J = 4,8, 7,8, 9,0 Hz, 1H), 3,38 (dd, J = 4,8, 14,1 Hz, 1H), 3,04 (dd, J = 9,0, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 382,1.
3-(3-(2-Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4- Carboxamido)-2-Oxo-4-Fenilbutanoato de Metila (40) e ácido 3-(3-(2-Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamido)-2- Oxo-4-Fenilbutanoico (65)
[00491] O composto 40 foi preparado a partir de ácido 3-(2-fluorofenil)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico e intermediário 41D com uso do mesmo procedimento que para o composto 41. O composto 40 (0,520 g, rendimento 87,1%) foi obtido como sólido amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,12 (br.s., 2H), 7,44 a 7,33 (m, 2H), 7,31 a 7,25 (m, 2H), 7,22 a 7,10 (m,
5H), 5,00 (br d, J = 6,5 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,17 (dd, J = 5,3, 14,1 Hz, 1H), 2,94 (br.dd, J = 8,9, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 410,1.
[00492] O composto 65 foi preparado a partir de composto 40 com uso do mesmo procedimento que para o composto
60. O composto 65 (60 mg, rendimento 40,5%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 14,10 (s, 1H), 8,44 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,42 a 7,26 (m, 4H), 7,25 a 7,20 (m, 3H), 7,19 a 7,12 (m, 2H), 4,95 (ddd, J = 4,8, 6,8, 9,5 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,15 (dd, J = 4,6, 13,9 Hz, 1H), 2,87 (dd, J = 9,7, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 396,2.
3-(4-(2-Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamido)-2- Oxo-4-Fenilbutanoato (42) de Metila e ácido 3-(4-(2- Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamido)-2-Oxo-4- Fenilbutanoico (64)
[00493] O composto 42 foi preparado a partir de ácido
4-(2-fluorofenil)-2-metiloxazol-5-carboxílico e intermediário 41D com uso do mesmo procedimento que para o composto 41. O composto 42 (0,290 g, rendimento 67,0%) foi obtido como sólido amarelo claro, que foi usado na próxima etapa sem purificação. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ. 9,10 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,51 a 7,38 (m, 2H), 7,34 a 7,17 (m, 7H), 5,19 a 5,05 (m, 1H), 3,81 a 3,54 (m, 3H), 3,24 a 3,15 (m, 1H), 3,03 a 2,92 (m, 1H), 2,59 a 2,52 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 411,1.
[00494] O composto 64 foi preparado a partir de composto 42 com uso do mesmo procedimento que para o composto
60. O composto 64 (40 mg, rendimento 50,4%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (CD3CN-d3, 400 MHz): δ 7,54 a 7,39 (m, 2H), 7,37 a 7,11 (m, 8H), 5,31 a 5,16 (m, 1H), 3,29 (dd, J = 5,0, 14,1 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 8,8, 14,1 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 397,2.
Metil-3-(3-(3-Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4- Carboxamido)-2-OXO-4-Fenilbutanoato (74) e ácido 3-(3-(3- Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamido)-2-OXO-4- Fenilbutanoico (72)
[00495] O composto 74 foi preparado a partir de ácido 4-(2-fluorofenil)-2-metiloxazol-5-carboxílico e intermediário 41D com uso do mesmo procedimento que para o composto 41. O composto 74 (0,150 g, rendimento 75,3%) foi obtido como sólido amarelo claro, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,73 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,45 a 7,29 (m, 4H), 7,28 a 7,20 (m, 4H), 7,14 (dt, J=2,1, 8,4 Hz, 1H), 5,06 (ddd, J = 5,0, 6,8, 9,4 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,20 (dd, J = 4,9, 13,9 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 9,5, 13,7 Hz, 1H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 410,1.
[00496] O composto 72 foi preparado a partir de composto 74 com uso do mesmo procedimento que para o composto
60. O composto 72 (50 mg, rendimento 64,7%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,66 (br d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,44 (br d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,38 a 7,19 (m, 6H), 7,18 a 7,10 (m, 1H), 5,13 a 4,99 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,24 a 3,15 (m, 1H), 2,89 (dd, J = 9,8, 14,1 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 396,2.
Exemplo 19 - Compostos 58, 75, 76, 73, 78, 81, 84, 88, 90, 91, 92, 98 e 105
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Metil-4- (Naftalen-1-il)Oxazol-5-Carboxamida (58)
[00497] (Frasco A) Uma mistura de ácido 1-naftoico (25 g, 145,2 mmol) in CH3CN (40 ml), foi adicionado CDI (28,3 g, 174,2 mmol), a mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h.
(Frasco B) Uma mistura de melonato de potássio de etila (32,3 g, 191,7 mmol) em CH3CN (200 ml), foi adicionado MgCl2 (15,2, 64,0 mmol) e TEA (44,8 g, 435,6 mmol) em porções. A mistura foi agitada a 50 ºC por 2 h. A solução no frasco A foi transferida para a pasta fluida no frasco B e a mistura foi agitada em 70 ºC por 12 h. A mistura de reação foi terminada bruscamente com HCl (3N, 600 ml) e a solução foi concentrada sob pressão reduzida para remover solvente. O concentrado resultante extraído com MTBE (150 ml x 3). A camada orgânica foi lavada com H2O (150 ml x 3), NaHCO3 saturado (150 ml x 3) e NaCl saturado (150 ml), seco em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para proporcionar o composto 58A (18 g, 46,9 % de rendimento) como óleo incolor, que foi usado diretamente na próxima etapa. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,19 a 8,15 (m, 2H), 8,03 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,68 a 7,58 (m, 3H), 4,31 (s, 2H), 4,09 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,11 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 243,1.
[00498] A uma mistura de composto 58A (18 g, 74,3 mmol, 1 eq) em EtOH (150 ml), foi adicionado NH4OAc (45,8 g, 594,4 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada a 90 ºC por 24 h. O solvente foi removido e concentrado sob pressão reduzida. EA (100 ml) e H2O (50 ml) foram adicionados à mistura, a camada orgânica foi separada. O aquoso foi extraído com EA (50 ml x 2), a camada orgânica combinada foi lavada com água (100 ml x 2), NaHCO3 saturado (100 ml x 2), salmoura (100 ml x 2). Então seco em Na2SO4 anidro, filtrado, concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/acetato de etila=20/1 a 5/1) para proporcionar o composto 58B (16 g, 81,2 % de rendimento) como óleo incolor. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,21 (br. s, 1H), 8,13 a 8,06 (m, 1H), 8,02 a 7,95 (m, 2H), 7,61 a 7,42 (m, 5H), 4,51 (s, 1H), 4,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 7,1 Hz, 3H). MS (ESI)
m/z (M+H)+ 242,0.
[00499] Piridina (10 ml, 124,3 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de composto 58B (3 g, 12,4 mmol) em tolueno (20 ml) e a mistura reação foi resfriada para 0 ºC.
Cloreto de acetila (6,7 ml, 93,3 mmol) foi adicionado em gotas, e a mistura foi agitada por 6 h a 0 ºC sob uma atmosfera de nitrogênio. O composto 58B foi monitorado por LCMS, então cloreto de acetila adicional (20 ml, 279,8 mmol) foi adicionado à mistura de reação e a mistura foi agitada por 12 h a 0 ºC sob uma atmosfera de nitrogênio. A reação foi terminada bruscamente com salmoura (30 ml), extraída com EA (50 ml x 3) e seca em Na2SO4, e o solvente foi evaporado a vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, PE/EA = 20/1 a 5/1) para proporcionar o composto 58C (2,5 g, 66,4% de rendimento) como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 10,89 (s, 1H), 7,99 a 7,87 (m, 3H), 7,58 a 7,36 (m, 4H), 5,22 a 5,14 (m, 1H), 4,20 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 284,1.
[00500] [Bis(trifluoroacetoxi)iodo]benzeno (986,6 mg, 2,3 mmol) foi adicionado em uma solução agitada de composto 58C (0,5 g, 1,8 mmol) em 2,2,2-trifluoroetanol (15 ml). A mistura foi agitada por 30 min a 25 ºC. A reação foi terminada bruscamente com NaHCO3 aquoso separado(20 ml) e a mistura diluída com EtOAc (20 ml) e extraído com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com água(15 ml x 2), salmoura(15 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo O produto bruto foi purificada por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/acetato de etila = 20/ 1 a 5/1) para proporcionar o composto 58D (380 mg, 74,2% de rendimento) como sólido amarelo pálido. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,02 (dd, J = 7,8, 14,6 Hz, 2H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,65 a 7,48 (m, 4H), 4,09 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,62 (s, 3H), 0,98 (t, J = 7,0 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 282,0.
[00501] O composto 58D foi hidrolisado para render intermediário 58E e o mesmo foi reagido com intermediário 1D com uso do mesmo procedimento conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 58. O composto 58 (0,140 g, rendimento 64,8%) foi obtido como sólido amarelo, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,63 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,97 (br d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,86 a 7,76 (m, 2H), 7,58 a 7,42 (m, 4H), 7,32 a 7,18 (m, 5H), 5,37 a 5,27 (m, 1H), 3,15 (br dd, J = 3,4, 13,9 Hz, 1H), 2,94 (br dd, J = 9,8, 13,8 Hz, 1H), 2,61 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 428,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2-Fluoro-3- Metóxifenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (75)
[00502] O composto 75 foi preparado a partir de ácido 2-fluoro-3-metoxibenzoico com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto
75. O composto 75 (0,160 g, rendimento 53,6%) foi obtido como sólido amarelo, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,71 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,30 a 7,05 (m, 7H), 6,97 a 6,89 (m, 1H), 5,37 a 5,27 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,13 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 9,8, 14,2 Hz, 1H), 2,51 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 426,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2,6- Difluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (76)
[00503] O composto 76 foi preparado a partir de ácido 2,6-difluorobenzoico com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto
76. O composto 76 (0,153 g, rendimento 53,8%) foi obtido como sólido amarelo, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ 8,88 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,58 a 7,46 (m, 1H), 7,35 a 7,07 (m, 7H), 5,39 a 5,28 (m, 1H), 3,16 (dd, J = 3,5, 14,1 Hz, 1H), 2,96 (dd, J = 10,0, 14,2 Hz, 1H), 2,57 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 414,1.
N-(4-Amino-1-(4-Fluorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4- (2-Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (73)
[00504] O composto 73 foi preparado a partir de ácido 4-(2-fluorofenil)-2-metiloxazol-5-carboxílico e intermediário 73A com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o Exemplo 1 para render o composto 73. O composto 73 (0,160 g, rendimento 73,08%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,80 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,45 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 7,33 a 7,25 (m, 2H), 7,24 a 7,17 (m, 2H), 7,11 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 5,32 (s, 1H), 3,15 (dd, J = 3,4, 13,9 Hz, 1H), 3,02 a 2,87 (m, 1H), 2,55 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 414,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2,5- Dimetilfuran-3-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (78)
[00505] O composto 78 foi preparado a partir de ácido 4-(2,5-dimetilfuran-3-il)-2-metiloxazol-5-carboxílico e intermediário 1D com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto 78. O composto 78 (65 mg, rendimento 40,9%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,60 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,14 a 8,04 (m, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,29 a 7,23 (m, 4H), 7,20 a 7,15 (m, 1H), 6,57 (s, 1H), 5,39 a 5,34 (m, 1H), 3,16 (dd, J = 3,8, 13,8 Hz, 1H), 2,95 (dd, J = 9,8, 13,9 Hz, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,19 a 2,12 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+396,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2,5- Diclorofuran-3-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (81)
[00506] O composto 81A foi preparado a partir de ácido furan-3-carboxílico com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58D para render o composto 81A. O composto 81A (1,28 g, rendimento 64,2%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,37 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,13 a 7,07 (m, 1H), 4,43 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,55 (s, 3H), 1,43 (t, J = 7,1 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+221,9.
[00507] A uma solução de composto 81A (300 mg, 1,36 mmol) em DMF (3 ml), foi adicionado NCS (580 mg, 4,34 mmol).
A mistura foi agitada a 100 ºC por 6 h. A reação foi diluída com H2O (30 ml), extraída com EA (20 ml x 3), a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (PE: EA = 10: 1 a 5: 1). O composto 81B (80 mg, rendimento: 20,3%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 6,85 (s, 1H), 4,40 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,39 (br t, J = 7,1 Hz, 3H).
[00508] O composto 81B foi hidrolisado para render o ácido intermediário que foi reagido com intermediário 1D com uso do mesmo procedimento conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 81. O composto 81 (68 mg, rendimento 88,3%) foi obtido como sólido amarelo pálido, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,27 a 7,24 (m, 4H), 7,19 a 7,15 (m, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,42 a 5,31 (m, 1H), 3,22 a 3,13 (m, 1H), 2,96 a 2,89 (m, 1H), 2,50 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+436,0.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-2-Metil-4-(2- Metilfuran-3-il)Oxazol-5-Carboxamida (84)
[00509] O composto 84 foi preparado a partir de ácido 2-metilfuran-3-carboxílico por meio de intermediários 84A e 84B com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto 84. O composto 84 (60 mg, rendimento 37,52%) foi obtido como sólido branco. MS (ESI) m/z (M+1)+ 382,1. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,65 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,08 (br. s, 1H), 7,81 (br. s, 1H), 7,45
(d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,30 a 7,21 (m, 4H), 7,21 a 7,13 (m, 1H), 6,94 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,45 a 5,32 (m, 1H), 3,21 a 3,09 (m, 1H), 3,01 a 2,88 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,39 (s, 3H).
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4- (Benzo[b]Tiofen-4-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (88)
[00510] O composto 88 foi preparado a partir de ácido benzo[b]tiofeno-4-carboxílico por meio de intermediários 88A e 88B com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto 88. O composto 88 (110 mg, rendimento 92,6%) foi obtido como sólido amarelo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,73 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,07 a 7,98 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,71 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,52 a 7,47 (m, 1H), 7,37 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,30 a 7,16 (m, 5H), 5,38 a 5,28 (m, 1H), 3,14 (dd, J = 3,5, 13,8 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 9,9, 14,1 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+=434,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(2- Clorofuran-3-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (90)
[00511] A uma solução de composto 90A (400 mg, 1,81 mmol) em DMF (3 ml), foi adicionado NCS (266 mg, 1,99 mmol).
A mistura foi agitada a 15 ºC por 16 h. Então a mistura foi agitada a 25 ºC por 16 h. A reação foi diluída com H2O (40 ml), extraída com EA (30 ml x 2), a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (PE: EA = 10:1 a 4: 1). O composto 90B (300 mg, rendimento: 64,9%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,37 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,46 a 4,34 (m, 2H), 2,62 a 2,53 (m, 3H), 1,46 a 1,33 (m, 3H).
[00512] O composto 90B foi hidrolisado para render o ácido intermediário que foi reagido com intermediário 1D com uso do mesmo procedimento conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 90. O composto 90 (90 mg, rendimento 51,8%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO- d6) δ 8,86 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,85 (s, 1H),
7,73 a 7,68 (m, 1H), 7,32 a 7,26 (m, 4H), 7,25 a 7,17 (m, 1H), 7,07 a 6,99 (m, 1H), 5,43 a 5,38 (m, 1H), 3,19 (dd, J = 3,8, 14,1 Hz, 1H), 2,97 (dd, J = 10,0, 13,9 Hz, 1H), 2,53 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+402,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4- (Benzo[b]Tiofen-7-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (91)
[00513] O composto 91 foi preparado a partir de ácido benzo[b]tiofeno-7-carboxílico por meio de intermediários 91A e 91B com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para o composto 58 para render o composto 91. O composto 91 (15 mg, rendimento 49,6%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,90 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,02 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,93 a 7,85 (m, 2H), 7,75 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,31 a 7,28 (m, 3H), 7,25 a 7,16 (m, 2H), 5,45 a 5,41 (m, 1H), 3,20 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 2,98 (dd, J = 9,8, 13,8 Hz, 1H), 2,62 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+434,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(5-
Clorofuran-3-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (92)
[00514] A uma solução de composto 90A (400 mg, 1,81 mmol) em DMF (3 ml), foi adicionado NCS (266 mg, 1,99 mmol).
A mistura foi agitada a 15 ºC por 16 h. Então a mistura foi agitada a 25 ºC por 16 h. A reação foi diluída com H2O (40 ml), extraída com EA (30 ml x 2), a fase orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (PE: EA = 10: 1 a 4: 1). O composto 92B (55 mg, rendimento: 11,9%) foi obtido como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,22 (s, 1H), 6,93 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 4,46 a 4,40 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,42 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[00515] O composto 92B foi hidrolisado para render o ácido intermediário que foi reagido com intermediário 1D com uso do mesmo procedimento conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 92. O composto 92 (45 mg, rendimento 61,3%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO-
d6) δ 8,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,33 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,34 a 7,27 (m, 4H), 7,24 a 7,16 (m, 1H), 7,02 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,45 a 5,41 (m, 1H), 3,21 (dd, J = 3,9, 13,9 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 9,9, 14,1 Hz, 1H), 2,53 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 402,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-4-(5-Cloro-2- Metilfuran-3-il)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (98)
[00516] A uma solução de composto 98A (100 mg, 0,42 mmol) em DMF (5 ml), foi adicionado NCS (57 mg, 0,42 mmol).
A mistura foi agitada a 20 ºC por 12 h. A mistura foi lavada com H2O (20 ml), extraída com EtOAc (15 ml x 2). Os orgânicos foram coletados e concentrados. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 10:1) para gerar o composto 2 (60 mg, rendimento: 52,34%) como sólido incolor. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 6,94 (s, 1h), 4,34 a 4,27 (m, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 1,31 a 1,27 (m, 3H).
[00517] O composto 98B foi hidrolisado para render o ácido intermediário que foi reagido com intermediário 1D com uso do mesmo procedimento conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 98. O composto 98 (80 mg, rendimento 40,15%) foi obtido como sólido amarelo claro, MS (ESI) m/z (M+1)+ 416,1. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,77 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,09 (br. s, 1H), 7,82 (br. s, 1H), 7,29 a 7,22 (m, 4H), 7,20 a 7,13 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 5,41 a 5,32 (m, 1H), 3,20 a 3,12 (m, 1H), 3,00 a 2,89 (m, 1H), 2,49 (s, 3H), 2,41 (s, 3H).
2-(5-(Ethoxycarbonil)-2-Metiloxazol-4-il)-N,N,N- Trimetilbenzenamínio (105)
[00518] Ácido 2-nitrobenzoico foi submetido a condições conforme descrito para o composto 58 para render o composto 105A. O composto 105A (480 mg, 60,4% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,14 a 8,09 (m, 1H), 7,87 a 7,80 (m, 1H), 7,78 a 7,70 (m, 2H), 4,21 a 4,13(m, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,17 a 1,11 (m, 3H).
[00519] A uma solução de composto 105A (200 mg, 724,00 umol) em EtOH (20 ml) foi adicionado Pd/C (45 mg, 72,40 umol, pureza a 10%) e NH3.H2O (2,17 mmol, 270 ul, pureza a 30%). A mistura foi agitada a 25 ºC por 1 h sob balão de H2 (0,10 Mpa (15 psi)). A mistura foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/acetato de etila = 2/1 a 0/1). O composto 105B (75 mg, 42,1% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,58 a 7,48 (m, 1H), 7,22 a 7,16 (m, 1H), 6,79 a 6,72 (m, 2H), 4,67 (br s, 2H), 4,37 a 4,30 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,34 a 1,28 (m, 3H).
[00520] A uma solução de composto 105B (120 mg, 487,29 umol) e MeI (2,77 g, 19,49 mmol, 1,21 ml) em acetona (3 ml), foi adicionado K2CO3 (300 mg, 2,17 mmol). A mistura foi agitada a 40 ºC por 48 h, e adicionado MeI (2,77 g, 19,49 mmol, 1,21 ml). A mistura foi agitada a 40 ºC por 48 h, A reação foi filtrada, o filtrado foi concentrado, o resíduo foi purificado por TLC preparatório (SiO2, DCM: EA = 1:1). O composto 105 (40 mg, 27,2% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,13 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,74 a 3,47 (m, 9H), 2,61 (s, 3H), 1,06 (t, J = 7,0 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 433,1.
Exemplo 20 - Compostos 80, 83, 87, 89, 95, 96 e 97
N-(4-Amino-1-(2-Fluorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4- (2-Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (80)
[00521] A uma solução de ácido 2-amino-3-(2- fluorofenil)propanoico (5,77 g, 31,50 mmol) em dioxano (45 ml), foi adicionado NaOH (1,95 g, 48,82 mmol) em H2O (12 ml) e Boc2O (8,66 g, 39,69 mmol, 9,12 ml) em dioxano (15 ml). A mistura foi agitada a 25 ºC por 20 h. A reação foi concentrada sob pressão reduzida e H2O (60 ml) foi adicionada à mistura.
O aquoso foi tratado com HCl (0,5M) até que tivesse pH ~ 3 e a reação foi extraída com EA (50 ml x 3). A camada orgânica combinada foi lavada com H2O (50 ml) e salmoura (50 ml), seca em Na2SO4 anidro, filtrada, concentrada para gerar um resíduo. O composto 80A (8,58 g, rendimento: 96,2%) foi obtido como um sólido amarelo que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12,66 (br s, 1H), 7,35 a 7,22 (m, 2H), 7,17 a 7,07 (m, 3H), 4,19 a 4,07 (m, 1H), 3,13 (br dd, J = 4,9, 13,9 Hz, 1H), 2,81 (br dd, J = 10,5, 13,7 Hz, 1H), 1,30 (s, 9H).
[00522] A uma mistura de composto 80A (8,58 g, 30,29 mmol) e N-metoximetanamina (4,14 g, 42,41 mmol, HCl), HOBt (4,50 g, 33,32 mmol) em CHCl3 (100 ml) foi adicionado NMM (12,25 g, 121,16 mmol, 13,32 ml) em gotas. Então EDCI (8,13 g, 42,41 mmol) foi adicionado à mistura e a mistura foi agitada a 25 ºC por 18 h. A reação foi concentrada sob pressão reduzida. H2O (100 ml) e EA (100 ml) foram adicionados à mistura, a camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com EA (60 ml x 2). A camada orgânica combinada foi lavada com HCl (0,5M, 100 ml), NaHCO3 saturado (100 ml), seca em Na2SO4 anidro, filtrada, concentrada sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O composto 80B (9,26 g, rendimento: 91,7%) foi obtido como um sólido amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,38 a 7,19 (m, 2H), 7,17 a 6,99 (m, 3H), 4,66 (br s, 1H), 3,67 (br s, 3H), 3,13 a 3,02 (m, 3H), 2,95 (br dd, J = 4,5, 13,6 Hz, 1H), 2,76 a 2,61 (m, 1H), 1,27 (s, 9H). MS (ESI) m/z (M+Na)+348,9.
[00523] A uma solução de LiAlH4 (1,18 g, 31,21 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado em gotas uma solução de composto 80B (9,26 g, 28,37 mmol) em THF (100 ml) a 0 ºC sob atmosfera de N2. Após a adição, a mistura foi agitada a 0 ºC por 2 h. À mistura de reação, foi adicionado EA (100 ml) e HCl (1M, 100 ml) a 0 ºC. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EA (100 ml x 2). A camada orgânica combinada foi lavada com HCl (1M, 100 ml), H2O (100 ml), salmoura (100 ml). A camada orgânica combinada foi seca em Na2SO4 anidro, filtrado, concentrado sob pressão reduzida para gerar um resíduo. Composto 80C (5,65 g, rendimento: 74,5%) foi obtido como um óleo amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 7,37 (br d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,31 a 7,22 (m, 2H), 7,16 a 7,08 (m, 2H), 4,03 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,13 (br dd, J = 4,6, 13,9 Hz, 1H), 2,74 (br dd, J = 10,1, 13,6 Hz, 1H), 1,32 (s, 9H).
[00524] A uma solução de composto 80C (2 g, 7,48 mmol) e CsF (568 mg, 3,74 mmol) em MeOH (50 ml), foi adicionado em gotas trimetilsililformonitrila (890,76 mg, 8,98 mmol, 1,12 ml) a 0 ºC. A mistura foi aquecida para 20 ºC e agitada por 5 h. A mistura de reação foi concentrada, então diluída com H2O (30 ml), extraída com EA (30 ml x 3), as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 80D (2,62 g, bruto) foi obtido como um óleo amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,23 (br d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,15 a 7,03 (m, 3H), 4,63 a 4,28 (m, 1H), 3,93 a 3,75 (m, 1H), 3,12 a 2,93 (m, 1H), 2,78 a 2,58 (m, 1H), 1,25 (s, 4,5H), 1,22 (s, 4,5H).
[00525] A uma solução de composto 80D (530 mg, 1,80 mmol) em DMSO (10 ml), foi adicionado K2CO3 (498 mg, 3,60 mmol) e H2O2 (3,06 g, 27,01 mmol, 2,60 ml, pureza a 30%) foi adicionado em gotas à mistura. A mistura foi agitada a 20 ºC por 3 h. A reação foi terminada bruscamente com Na2S2O3 saturado (20 ml) e diluída com H2O (30 ml). A mistura foi extraída com EA (40 ml x 3) e a camada orgânica combinada foi lavada com H2O (40 ml), salmoura (40 ml), seca em Na2SO4 anidro, filtrada, concentrada para gerar um resíduo. O composto 80E (507 mg, rendimento: 90,1%) foi obtido como um sólido amarelo pálido, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,34 a 7,16 (m, 4H), 7,14 a 7,04 (m, 2H), 6,52 a 6,04 (m, 1H), 5,69 (dd, J = 6,0, 12,6 Hz, 1H), 4,04 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,94 a 3,74 (m, 1H), 2,90 a 2,61 (m, 2H), 1,24 (s, 9H).
[00526] A uma solução de composto 80E (1,39 g, 4,45 mmol) em EtOAc (15 ml) foi adicionado HCl/EtOAc (4M, 15 ml).
A mistura foi agitada a 25 ºC por 2 h. O precipitado foi filtrado e o bolo filtrado foi lavado com EA (20 ml). O sólido foi seco sob pressão reduzida. Composto 80F (933 mg,
rendimento: 84,3%, HCl) foi obtido como um sólido amarelo pálido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,17 a 7,90 (m, 3H), 7,55 a 7,43 (m, 2H), 7,43 a 7,23 (m, 2H), 7,21 a 7,07 (m, 2H), 6,74 a 6,36 (m, 1H), 4,23 a 3,77 (m, 1H), 3,72 a 3,53 (m, 1H), 2,92 (br d, J = 7,1 Hz, 1H), 2,82 (br d, J = 7,1 Hz, 1H).
[00527] O composto 80F e ácido 4-(2-fluorofenil)-2- metiloxazol-5-carboxílico foram acoplados com uso das mesmas condições que para intermediários 58E e 1D e então usaram procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 80. O composto 80 (95 mg, rendimento 60,7%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,77 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,50 a 7,38 (m, 2H), 7,32 a 7,17 (m, 4H), 7,16 a 7,06 (m, 2H), 5,39 a 5,29 (m, 1H), 3,22 (br dd, J = 4,8, 14,3 Hz, 1H), 3,01 (dd, J = 9,0, 13,9 Hz, 1H), 2,53 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+414,1.
N-(4-Amino-1-(2-Clorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4-(2- Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (83)
[00528] O composto ácido 2-amino-3-(2- clorofenil)propanoico foi convertido em intermediário 83F que foi então acoplado a ácido 4-(2-fluorofenil)-2-
metiloxazol-5-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 83. O composto 83 (120 mg, rendimento 36%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,50 a 7,39 (m, 3H), 7,38 a 7,30 (m, 1H), 7,29 a 7,17 (m, 4H), 5,46 a 5,33 (m, 1H), 3,33 a 3,26 (m, 1H), 3,08 (dd, J = 9,8, 14,2 Hz, 1H), 2,54 (s, 3H).
MS (ESI) m/z (M+H)+ 430,1.
N-(4-Amino-1-(3-Fluorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4- (2-Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (87)
[00529] O composto ácido 2-amino-3-(3- fluorofenil)propanoico foi convertido em intermediário 87F que foi então acoplado com ácido 4-(2-fluorofenil)-2- metiloxazol-5-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 para render o composto 87. O composto 87 (160 mg, rendimento 55%) foi obtido como sólido amarelo claro, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,87 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,50 a 7,40 (m, 2H), 7,38 a 7,30 (m, 1H), 7,25 a 7,17 (m, 2H), 7,13 a 7,01 (m,
3H), 5,42 a 5,27 (m, 1H), 3,19 (dd, J = 3,8, 14,1 Hz, 1H), 2,98 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 414,1.
N-(4-Amino-1-(3-Clorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4-(2- Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (89)
[00530] O composto ácido 2-amino-3-(3- clorofenil)propanoico foi convertido em intermediário 89F que foi então acoplado a ácido 4-(2-fluorofenil)-2- metiloxazol-5-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 a rendimento composto 89. O composto 89 (70 mg, rendimento 31,5%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,44 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 7,35 a 7,25 (m, 3H), 7,25 a 7,16 (m, 3H), 5,37 a 5,26 (m, 1H), 3,17 (dd, J = 3,7, 13,9 Hz, 1H), 2,95 (dd, J = 10,0, 13,9 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 430,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-(4-(Trifluorometil)Fenil)Butan- 2-il)-3-(2-Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (95)
[00531] Composto ácido 2-amino-3-(4- (trifluorometil)fenil)propanoico foi convertido em intermediário 95F que foi então acoplado a ácido 3-(2- fluorofenil)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 a rendimento composto 95. O composto 96 (70 mg, rendimento 55,13%) foi obtido como sólido amarelo pálido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,92 (s, 1H), 7,61 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,47 a 7,37 (m, 2H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,25 a 7,18 (m, 1H), 7,16 a 7,09 (m, 1H), 6,96 (br s, 1H), 6,69 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,22 (br s, 1H), 5,40 a 5,32 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,31 (dd, J = 4,6, 14,2 Hz, 1H), 2,97 (dd, J = 8,9, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+=463,1.
N-(4-AMino-1-(4-Clorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-4-(2- Fluorofenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxamida (96)
[00532] O composto ácido 2-amino-3-(4- clorofenil)propanoico foi convertido em intermediário 96F que foi então acoplado a ácido 4-(2-fluorofenil)-2- metiloxazol-5-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 a rendimento composto 96. O composto 96 (120 mg, rendimento 77%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,86 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,48 a 7,41 (m, 2H), 7,38 a 7,33 (m, 2H), 7,31 a 7,26 (m, 2H), 7,24 a 7,18 (m, 2H), 5,37 a 5,26 (m, 1H), 3,16 (dd, J = 3,7, 14,2 Hz, 1H), 2,94 (dd, J = 10,0, 13,9 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 430,1.
N-(4-Amino-1-(4-Clorofenil)-3,4-Dioxobutan-2-il)-3-(2- Fluorofenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (97)
[00533] O composto 3-amino-4-(4-clorofenil)-2- hidroxibutanamida foi acoplado a ácido 3-(2-fluorofenil)-1- metil-1H-pirazol-4-carboxílico com uso das mesmas condições que para o composto 80 e então usou adicionalmente procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 a rendimento composto 97. O composto 97 (120 mg, rendimento 65,3%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,28 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,78 (s,
1H), 7,41 a 7,30 (m, 4H), 7,28 a 7,24 (m, 2H), 7,19 a 7,09 (m, 2H), 5,29 a 5,11 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,11 (dd, J = 3,7, 13,9 Hz, 1H), 2,80 (dd, J = 10,1, 13,8 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 429,1.
Exemplo 21 - Compostos 5 e 8 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5- (Benzo[d][1,3]Dioxol-4-il)Isoxazol-4-Carboxamida (5)
[00534] Frasco 1: A uma solução de ácido benzo[d][1,3]dioxol-4-carboxílico (2 g, 12,04 mmol) em CH3CN (15 ml), foi adicionado CDI (2,19 g, 13,48 mmol). A mistura foi agitada a 25 ºC por 4 h.
[00535] Frasco 2: A uma solução de melonato de potássio de etila (2,70 g, 15,89 mmol) em CH3CN (25 ml) foi adicionado MgCl2 (1,15 g, 12,04 mmol) em porções por 15 min.
A mistura foi agitada a 25 ºC por 0,5 h, então TEA (3,65 g,
36,12 mmol) foi adicionado e a pasta fluida foi agitada por 0,5 h. A solução no frasco 1 foi transferida para a pasta fluida no frasco 2. A mistura foi agitada a 25 ºC por 18 h.
A mistura de reação foi terminada bruscamente com 3N HCl (40 ml) e a solução foi concentrada sob pressão reduzida. O resultante foi extraído com MTBE (50 ml x 2). A camada orgânica foi lavada com H2O (50 ml), NaHCO3 saturado (50 ml), NaCl saturado (50 ml), seco em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar o composto 5A (2,1 g, 73,9% de rendimento) como um óleo amarelo, que foi usado para próxima etapa sem purificação.
[00536] Uma mistura de composto 5A (1,1 g, 4,66 mmol) e DMFDMA (2,47 ml, 18,63 mmol) em DMF (15 ml) foi agitada a 80 ºC por 3 h. A mistura foi concentrada sob vácuo para gerar o composto 5B (1,2 g, 88,5% de rendimento) como um óleo marrom, que foi usado para próxima etapa sem purificação.
[00537] NaOAc (676 mg, 8,24 mmol) foi adicionado à mistura de composto 5B (1,20 g, 4,12 mmol) e cloridrato de hidroxilamina (573 mg, 8,24 mmol) em MeOH (7 ml) e MTBE (7 ml). A mistura foi agitada a 25 ºC por 17 h. À mistura, foi adicionado NH4Cl saturado (20 ml) e extraído com MTBE (20 ml x 2). A fase orgânica combinada foi lavada em salmoura (10 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O produto foi purificado por FCC (0-10% EA/PE) para gerar o composto 5C (444 mg, 41,3% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,07 (s, 1H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,03 a 6,97 (m, 1H), 6,13 (s, 2H), 4,24 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[00538] HCl (12M, 5 ml) foi adicionado à mistura de composto 5C (244 mg, 0,93 mmol) em AcOH (5 ml). A mistura foi agitada em 118 ºC por 4,5 h. A mistura foi concentrada sob vácuo. H2O (50 ml) foi adicionado à mistura, a mistura foi extraída com DCM (50 ml). A fase orgânica foi lavada com salmoura (30 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para gerar o composto 5D (185 mg, 84,9% de rendimento) como um sólido amarelo, que foi usado para próxima etapa sem purificação. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,96 (s, 1H), 7,28 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 1,0, 7,8 Hz, 1H), 6,96 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,14 a 6,06 (m, 2H).
[00539] O composto 5D e intermediário 1D foram acoplados com uso das mesmas condições que para intermediários 58E e 1D e então usou procedimentos conforme descrito no Exemplo 1 a rendimento composto 5. O composto 5 (40 mg, rendimento 20,8%) foi obtido como sólido amarelo pálido. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,88 (br d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,08 (br s, 1H), 7,82 (br s, 1H), 7,30 a 7,17 (m, 5H), 7,07 (br dd, J = 7,7, 15,7 Hz, 2H), 6,92 a 6,86 (m, 1H), 6,03 a 5,86 (m, 2H), 5,31 (br s, 1H), 3,15 (br dd, J = 3,4, 13,6 Hz, 1H), 2,81 (br dd, J = 10,3, 13,8 Hz,
1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 408,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-(2,2- Difluorobenzo[d][1,3]Dioxol-4-il)Isoxazol-4-Carboxamida (8)
[00540] O composto ácido 2,2- difluorobenzo[d][1,3]dioxol-4-carboxílico foi convertido em intermediário 8D com uso de procedimentos conforme descrito para o composto 5 e então o intermediário 8D foi acoplado ao intermediário 1D com uso de procedimentos conforme descrito no composto 58 para render o composto 8. O composto 8 (60 mg, rendimento 54%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ. 9,06 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,65 a 7,47 (m, 2H), 7,36 a 7,14 (m, 6H), 5,38 (s, 1H), 3,24 a 3,07 (m, 1H), 2,89 a 2,75 (m, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 444,1.
Exemplo 22 a Compostos 11, 27, 30, 29, 45, e 59
[00541] A uma mistura de 2-cloroquinazolina (1 g, 6,08 mmol) e K2CO3 (1,00 g, 7,24 mmol), foi adicionado NH2NH2.H2O
(5 ml, pureza a 85%). A mistura foi agitada a 100 ºC por 0,5 h. A mistura de reação foi resfriada em gelo e os cristais brutos resultantes foram coletados por filtração. Os cristais foram lavados com água fria, secos em ar para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em PE (20 ml) e coletado por filtração. O composto 11A (490 mg, rendimento: 50,4%) foi obtido como um sólido amarelo.
[00542] A uma solução de composto 11A (490 mg, 3,06 mmol) e 2,4-dioxopentanoato de etila (484 mg, 3,06 mmol), foi adicionado HOAc (5 ml). A mistura foi agitada a 100 ºC por 16 h. A mistura foi concentrada, diluída com EA (25 ml) e filtrada. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 (25 ml), salmoura (25 ml x 3), seca em Na2SO4, então filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparatório (PE: EA = 1: 1). O composto 11B (180 mg, rendimento: 18,1%) foi obtido como um óleo amarelo. O composto 11C (110 mg, rendimento: 11,3%) foi obtido como um óleo amarelo.
[00543] Composto 11B: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,69 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,12 a 8,03 (m, 1H), 8,00 a 7,93 (m, 1H), 7,78 (dt, J = 1,0, 7,6 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,21 a 4,09 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,03 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+282,9.
[00544] Composto 11C: 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,79 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,16 a 8,05
(m, 2H), 7,83 (ddd, J = 1,5, 6,4, 8,1 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,32 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,68 (d, J = 0,9 Hz, 3H), 1,32 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+282,9.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-Metil-1- (Quinazolin-2-il)-1H-Pirazol-5-Carboxamida (11)
[00545] O composto 11B foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo 19 para render o composto
11. O composto 11 (45 mg, rendimento 41,4%) foi obtido como sólido amarelo pálido, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,51 (s, 1H), 9,11 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,09 a 7,98 (m, 2H), 7,88 a 7,79 (m, 2H), 7,75 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,28 a 7,16 (m, 5H), 6,58 (s, 1H), 5,43 a 5,15 (m, 1H), 3,13 (dd, J = 3,1, 14,1 Hz, 1H), 2,83 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+429,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Metil-1- (Quinazolin-2-il)-1H-Pirazol-3-Carboxamida (27)
[00546] O composto 11C foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo 19 para render o composto
27. O composto 27 (28 mg, rendimento 77,1%) foi obtido como sólido amarelo pálido, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,76 (s, 1H), 8,48 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,15 a 7,98 (m, 3H), 7,89 a 7,73 (m, 2H), 7,27 a 7,19 (m, 4H), 7,19 a 7,11 (m, 1H), 6,68 (s, 1H), 5,56 a 5,29 (m, 1H), 3,24 a 3,00 (m, 2H), 2,64 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+429,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-Metil-1-(5- Fenilpirimidin-2-il)-1H-Pirazol-5-Carboxamida (30)
[00547] O composto 30B foi preparado a partir de 2- cloro-5-fenilpirimidina com uso de procedimentos conforme descrito para o composto 11. Então, composto 30B foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo
19 para render o composto 30. O composto 30 (130 mg, rendimento 82,9%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,07 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 9,01 (s, 2H), 8,06 (s, 1H), 7,84 a 7,79 (m, 3H), 7,58 a 7,44 (m, 3H), 7,28 a 7,21 (m, 4H), 7,15 a 7,10 (m, 1H), 6,58 (s, 1H), 5,29 a 5,21 (m, 1H), 3,18 a 3,10 (m, 1H), 2,88 a 2,78 (m, 1H), 2,26 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 455,1.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Metil-1-(5- Fenilpirimidin-2-il)-1H-Pirazol-3-Carboxamida (29)
[00548] O composto 30C foi preparado a partir de 2- cloro-5-fenilpirimidina com uso de procedimentos conforme descrito para o composto 11. Então, o composto 30C foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo 19 para render o composto 29. O composto 29 (50 mg, rendimento 33,8%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,25 (s, 2H), 8,12 (br s, 1H), 7,90 a 7,47 (m, 7H), 7,33 a 7,15 (m, 5H), 6,69 (s, 1H), 5,56 a 5,42 (m, 1H), 3,35 a 3,12 (m, 2H), 2,65 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 455,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-Metil-1-(4-
Fenilpirimidin-2-il)-1H-Pirazol-5-Carboxamida (45)
[00549] O composto 45B foi preparado a partir de 2- cloro-4-fenilpirimidina com uso de procedimentos conforme descrito para o composto 11. Então, composto 45B foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo 19 para render o composto 45. O composto 45 (110 mg, rendimento 73,5%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 9,06 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 8,78 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,12 a 8,05 (m, 3H), 8,00 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,58 a 7,46 (m, 3H), 7,25 a 7,13 (m, 5H), 6,55 (s, 1H), 5,44 a 5,36 (m, 1H), 3,11 (dd, J = 3,9, 14,0 Hz, 1H), 2,76 (dd, J = 9,9, 13,9 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 455,2.
N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-5-Metil-1-(4- Fenilpirimidin-2-il)-1H-Pirazol-3-Carboxamida (59)
[00550] O composto 45C foi preparado a partir de 2-
cloro-4-fenilpirimidina com uso de procedimentos conforme descrito para o composto 11. Então, o composto 45C foi submetido a procedimentos conforme usado para converter intermediário 58D em composto 58 conforme descrito no Exemplo 19 para render o composto 59. O composto 59 (25 mg, rendimento 11,9%) foi obtido como sólido amarelo, 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8,99 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,29 a 8,25 (m, 2H), 8,10 (br d, J = 5,3 Hz, 2H), 7,82 (br s, 1H), 7,65 a 7,58 (m, 4H), 7,31 a 7,24 (m, 4H), 7,23 a 7,17 (m, 1H), 6,72 a 6,68 (m, 1H), 5,49 (dt, J = 4,9, 8,1 Hz, 1H), 3,29 (dd, J = 4,9, 14,2 Hz, 1H), 3,16 (br d, J = 5,5 Hz, 1H), 2,71 a 2,69 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 455,1.
Exemplo 23 - Compostos 43-44 4-(4-((7,9-Dioxo-6,10-Dioxaspiro[4.5]Decan-8-ilideno)- λ3-Iodanil)Fenil)-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxilato de Metila (43)
[00551] A uma solução de metila 4-bromo-1,2,5-
tiadiazol-3-carboxilato (2 g, 8,97 mmol) e ácido (4- aminofenil)borônico (1,60 g, 11,66 mmol) em dioxano (25 ml) e H2O (2 ml), foi adicionado K2CO3 (3,72 g, 26,90 mmol), Pd(dppf)Cl2 (656 mg, 896,67 umol) foi adicionado sob atmosfera de N2, a mistura foi agitada a 80 ºC por 18 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada para remover solvente, então diluída com EA (50 ml) e filtrada; as camadas orgânicas foram concentradas para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0 a 30% @ 30 ml/min). O composto 43A (1,3 g, rendimento: 61,6%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,47 a 7,33 (m, 2H), 6,65 a 6,56 (m, 2H), 5,64 (s, 2H), 3,94 a 3,85 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+236,1.
[00552] À uma solução de TsOH·H2O (2,63 g, 13,81 mmol) em H2O (20 ml), foi adicionada uma suspensão de composto 43A (1,3 g, 5,53 mmol) em CH3CN (30 ml) a 0 ºC, a mistura foi agitada por 30 min, então uma solução de NaNO2 (572 mg, 8,29 mmol) em H2O (10 ml) e KI (1,38 g, 8,29 mmol) em H2O (10 ml) foi adicionado em gotas à mistura a 0 ºC, Após a adição, a mistura foi agitada a 25 ºC por 16 h. A mistura foi terminada bruscamente pela adição de Na2SO3 saturado (~20 ml) a 0 ºC.
A mistura foi concentrada a vácuo para remover CH3CN. A reação foi filtrada, o bolo de filtro foi seco a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~10% @ 30 ml/min). O composto 43B (1,4 g, rendimento: 73,2%) como sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,90 a 7,77 (m, 2H), 7,52 a 7,37 (m, 2H), 4,02 a 3,92 (s, 3H).
[00553] Tetra-hidrato de perborato de sódio (4 g, 26,00 mmol) foi adicionado em porções a uma solução de composto 43B (900 mg, 2,60 mmol) em AcOH (15 ml), a mistura foi agitada a 50 ºC por 10 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (50 ml), filtrada, o filtrado foi diluído com água (100 ml), e extraído três vezes com DCM (40 ml x 2). Os extratos orgânicos combinados foram secos com Na2SO4, filtrado, e concentrados para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em DCM: PE (1: 15) (20 ml x 3). Filtrado e o bolo foi obtido. O composto 43C (590 mg, rendimento: 48,9%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,26 a 8,15 (m, 2H), 7,89 a 7,84 (m, 2H), 4,05 a 3,98 (m, 3H), 2,10 a 2,00 (m, 6H).
[00554] A uma solução de composto 43C (590 mg, 1,27 mmol) em EtOH (20 ml), foi adicionada a solução de Na2CO3 (539 mg, 5,08 mmol) em H2O (10 ml), então 6,10- dioxaspiro[4.5]decano-7,9-diona (281 mg, 1,65 mmol) foi adicionada, a mistura foi agitada a 20 ºC por 1 h. A mistura de reação foi então diluída com água (80 ml), e extraída com DCM (50 ml x 3). Os extratos orgânicos combinados foram secos com Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 4 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de 0 ~ 100% gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo @ 20 ml/min). O produto (Parte de Éster metílico foi mudada para Éster de etila) foi dissolvido em MeOH (20 ml), então uma solução de Na2CO3 (100 mg) em H2O (2 ml) foi adicionado, a mistura foi agitada a 20 ºC por 4 h. A mistura de reação foi então diluída com água (50 ml), e extraída com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtradas, e concentradas para gerar o produto desejado. O composto 43 (130 mg, rendimento: 19,9%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,02 a 7,92 (m, 2H), 7,86 a 7,75 (m, 2H), 4,04 a 3,90 (m, 3H), 2,24 a 2,15 (m, 4H), 1,85 a 1,78 (m, 4H). MS (ESI) m/z (M+Na)+537,0.
3-(4-((7,9-Dioxo-6,10-Dioxaspiro[4.5]Decan-8-ilideno)- λ3-Iodanil)Fenil)-1-Metil-1H-Pirazol-4-Carboxilato de etila (44)
[00555] O composto 3-iodo-1-metil-1H-pirazol-4- carboxilato de etila foi convertido no composto 44 com uso de procedimentos descritos para o composto 43. O composto 44 (120 mg, rendimento 57,5%) foi obtido como sólido amarelo pálido, 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,98 (s, 1H), 7,91 (s, 4H), 4,25 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,97 (s, 3H), 2,16 (t, J = 7,4 Hz, 4H), 1,82 a 1,77 (m, 4H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+Na)+546,9.
Exemplo 24 - Compostos 56 e 66 Etil-4-(4-((7,9-Dioxo-6,10-Dioxaspiro[4.5]Decan-8- ilideno)-λ3-Iodanil)Fenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxilato (56)
[00556] (Frasco A) A uma solução de ácido 4-
iodobenzoico (25 g, 100,80 mmol) em CH3CN (300 ml), foi adicionado CDI (18,5 g, 114,09 mmol), a mistura foi agitada a 20 ºC por 2 h.
Ao mesmo tempo, no Frasco B a uma solução de potássio; 3-etóxi-3-oxo-propanoato (22,30 g, 131,04 mmol)
em CH3CN (300 ml) foi adicionado MgCl2 (10,6 g, 111,33 mmol)
e TEA (301,75 mmol, 42 ml), a mistura foi agitada a 20 ºC por 2 h.
A solução de frasco A foi então transferida para o frasco B, a mistura foi agitada por 18 h a 20 ºC.
A mistura de reação foi diluída com H2O (200 ml), ajustada para pH ~ 4 com HC1 (4M), extraída com EA (300 ml x 3) e as camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com NaHCO3 (aq) (500 ml), salmoura (500 ml). E então a fase orgânica foi seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para gerar um resíduo.
O composto 56A (31,5 g, rendimento: 98,2%) como óleo amarelo foi obtido, que foi usada na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,91 a 7,73 (m, 2H), 7,70 a 7,42 (m, 2H), 4,30 a 4,15 (m, 2H), 3,97 a 3,89 (m, 2H), 1,30 a 1,19 (m, 3H).
[00557] A uma solução de composto 56A (31,5 g, 99,02 mmol) em EtOH (300 ml) foi adicionado NH4OAc (20 g, 259,46 mmol), então a mistura foi agitada a 85 ºC por 18 h. A mistura de reação foi concentrada para remover solvente, então diluída com água (150 ml) e extraída com EA (100 ml x 3), as camadas orgânicas foram lavadas com NaHCO3 saturado (100 ml x 2), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 220 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~10% @ 100 ml/min). O composto 56B (26 g, rendimento: 71,5%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,86 a 7,75 (m, 2H), 7,44 a 7,34 (m, 2H), 4,77 (s, 1H), 4,05 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+317,9.
[00558] A uma solução de composto 56B (2 g, 6,31 mmol) em DCE (20 ml), foi adicionado PhI(OAc)2 (2,44 g, 7,57 mmol) em porções a 0 ºC, então a mistura foi agitada a 20 ºC por 1 h. A mistura foi resfriada para 0 ºC, lavada com NaHCO3 saturado (80 ml), a fase aquosa foi extraída com DCM (30 ml), a camada orgânica foi coletada, lavada com H2O (50 ml), então seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 20 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~10% @ 30 ml/min). Composto 56C (220 mg, rendimento: 8,2%) como óleo amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,84 a 7,80 (m, 2H), 7,16 a 7,12 (m, 2H), 4,13 a 4,06 (m, 2H), 1,88 (s, 3H), 1,19 a 1,15 (m, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 376,0.
[00559] A solução de composto 56C (220 mg, 586,42 umol) em AcOH (2 ml) e DCE (1 ml) foi agitada a 90 ºC por 1 h. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (30 ml), lavado com NaHCO3 saturado. (30 ml). Os orgânicos foram coletados e concentrados para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparatório (PE: EA = 5: 1). O composto 56D (110 mg, rendimento: 52,5%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,86 a 7,72 (m, 4H), 4,39 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,57 (s, 3H), 1,38 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
[00560] A uma solução de composto 56D (0,4 g, 1,12 mmol) em CHCl3 (8 ml), foi adicionado m-CPBA (314 mg, 1,46 mmol, pureza a 80%), a mistura foi agitada a 20 ºC por 18 h.
A mistura foi concentrada para liberar a maior parte do solvente para gerar um resíduo. O resíduo foi dissolvido em EtOH (15 ml), e a reação foi adicionado Na2CO3 (475 mg, 4,48 mmol) em H2 O (10 ml), e então adicionado 6,10-
dioxaspiro[4.5]decano-7,9-diona (248 mg, 1,46 mmol) rapidamente. A mistura de reação foi então agitada em 20 ºC por 2 h. O resíduo foi diluído com água (100 ml) e extraído com EA (50 ml x 2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 ml) e secos com Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica flash (ISCO®; 12 g Coluna Flash de Sílica SepaFlash®, Eluente de gradiente de acetato de etila/éter de Petróleo a 0~100% @ 30 ml/min). O composto 56 (190 mg, rendimento: 30,7%) foi obtido como sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8,25 a 8,09 (m, 2H), 7,97 a 7,85 (m, 2H), 4,40 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,59 (s, 3H), 2,21 a 2,12 (m, 4H), 1,84 a 1,75 (m, 4H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+Na)+ 548,1.
Etil-4-(2-((7,9-Dioxo-6,10-Dioxaspiro[4,5]Decan-8- ilideno)-λ3 -Iodanil)Fenil)-2-Metiloxazol-5-Carboxilato (66)
[00561] O composto ácido 2-iodobenzoico foi convertido em intermediário 66D com uso dos mesmos procedimentos conforme descrito para síntese de intermediário 58D. Além disso, o intermediário 66D foi tratado com 6,10-dioxaspiro[4.5]decano-7,9-diona com uso das mesmas condições conforme descrito para o composto 56 para obter o composto final 66. O composto 66 (90 mg, rendimento 15,3%) foi obtido como sólido branco, 1H NMR (CDCl3, 400MHz): δ 8,77 (dd, J = 1,8, 7,8 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 1,1, 8,2 Hz, 1H), 7,61 a 7,55 (m, 1H), 7,54 a 7,48 (m, 1H), 4,46 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,29 a 2,21 (m, 4H), 1,85 (td, J = 3,9, 7,1 Hz, 4H), 1,43 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 548,0.
Exemplo 25 - Composto 103 N-(4-Amino-3,4-Dioxo-1-Fenilbutan-2-il)-3-(1- Isopropil-2-Oxo-2,3-Dihidro-1H-Benzo[d]Imidazol-4-il)-1- Metil-1H-Pirazol-4-Carboxamida (103)
[00562] A solução de 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzeno (4,5 g, 20,45 mmol) e isopropilamina (1,21 g, 20,45 mmol) em EtOH (20 ml) foi agitada em 50ºC por 48 h. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 10:1) para gerar o composto 103A (5 g, rendimento: 94,34%) como óleo marrom.
[00563] A uma solução de composto 103A (5 g, 19,30 mmol) em AcOH (60 ml), foi adicionado Fe (5,39 g, 96,49 mmol). A mistura foi agitada a 60 ºC por 1 h. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi lavado com NaHCO3 saturado (200 ml), extraído com EtOAc (100 ml x 2). Os orgânicos foram coletados, lavados com salmoura (200 ml), secos em com Na2SO4, filtrados e concentrados para gerar o composto 103B
(4,4 g, bruto) como óleo marrom, que foi usado diretamente para a próxima etapa sem adição.
[00564] A uma solução de composto 103B (4,4 g, 19,20 mmol) em THF (60 ml), foi adicionado TEA (5,4 ml, 38,41 mmol), CDI (6,23 g, 38,41 mmol). A mistura foi agitada a 20 ºC por 12 h. A mistura foi lavada com H2O (50 ml), extraída com EtOAc (50 ml x 2). Os orgânicos foram coletados e concentrados. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 2:1) para gerar o composto 103C (2,5 g, rendimento: 51,03%) como sólido marrom.
[00565] A uma solução de composto 103C (400 mg, 1,57 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (B2Pin2) (398 mg, 1,57 mmol) em dioxano (10 ml) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (115 mg, 156,79 umol), KOAc (462 mg, 4,70 mmol). A mistura foi agitada a 90 ºC por 12 h sob N2. A solução foi filtrada. O filtrado foi coletado e concentrado. O resíduo foi purificado por coluna (PE: EA = 2:1) para gerar o composto 103D (398 mg, rendimento: 84,00%) as light sólido marrom)
[00566] Os compostos 103D e o intermediário 103E foram convertidos em composto 103 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 1. O composto 103 (70 mg, rendimento: 64,6%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9,96 (br s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,92 a 7,46 (m, 3H), 7,35 a 7,11 (m, 8H), 6,97 a 6,92 (m, 1H), 5,37 a 5,31 (m,
1H), 4,65 a 4,57 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,21 a 3,16 (m, 1H), 2,90 a 2,84 (m, 1H), 1,49 (d, J = 7,2 Hz, 6H). MS (ESI) m/z (M+H)+ 475,2.
Exemplo 26 - Compostos 93 e 104 N-(1-Oxo-3-Fenil-1-(1H-Tetrazol-5-il)Propan-2-il)-4- Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (93)
[00567] A uma solução de (1-ciano-1-hidroxi-3- fenilpropan-2-il)carbamato de terc-butila (1 g, 3,62 mmol) em DCM (15 ml), foi adicionada Piridina (6,19 mmol, 0,5 ml), então cloreto de acetila (5,61 mmol, 0,4 ml) foi adicionado em gotas, a mistura foi agitada a 10 ºC por 20 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml) e água (50 ml), a fase aquosa foi extraída com DCM (20 ml x 2), as camadas orgânicas foram lavadas com 1N HCl (30 ml), NaHCO3 sat. (30 ml) e salmoura (50 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 93A (1 g, rendimento: 86,7%) como óleo amarelo claro foi obtido, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,36 a 7,27 (m, 3H), 7,22 a 7,16 (m, 2H), 5,42 a 5,33 (m, 1H), 4,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,32 (br s, 1H), 3,10 a 2,83 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,40 (s, 9H). MS (ESI) m/z (M+Na)+341,1.
[00568] A uma mistura de composto 93A (500 mg, 1,57 mmol), Et3N.HCl (432 mg, 3,14 mmol) em tolueno (15 ml) foi adicionado NaN3 (250 mg, 3,85 mmol), a mistura foi agitada em 110 ºC por 18 h. A mistura de reação foi diluída com tolueno (20 ml) e extraída com água (50 ml x 3), as camadas d' água combinadas foram acidificadas com HCl concentrado para pH ~ 2, e extraídas com EA (30 ml x 2), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (50 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em EA (2 ml) e PE (20 ml) duas vezes, filtrado e seco a vácuo. O composto 93B (500 mg, rendimento: 74,4%) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,33 a 7,16 (m, 6H), 7,02 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,01 a 5,89 (m, 1H), 4,23 a 4,16 (m, 1H), 2,86 a 2,64 (m, 2H), 2,21 a 2,10 (m, 3H), 1,26 a 1,18 (m, 9H). MS (ESI) m/z (M+H)+362,2.
[00569] A uma solução de composto 93B (400 mg, 1,11 mmol) em MeOH (15 ml), foi adicionado K2CO3 (610 mg, 4,41 mmol) em H2O (3 ml), a mistura foi agitada a 15 ºC por 4 h.
A mistura de reação foi concentrada para remover MeOH, diluída com água (20 ml), extraída com EA (20 ml), a camada aquosa foi acidificada com HCl concentrado para pH ~ 2, extraída com EA (20 ml x 2), as camadas orgânicas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 93C (420 mg, bruto) foi obtido como sólido amarelo claro, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7,30 a 7,16 (m, 6H), 6,56 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,37 (br d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,02 (t, J = 4,5 Hz, 1H), 3,99 a 3,92 (m, 1H), 2,98 a 2,57 (m, 2H), 1,24 (s, 9H). MS (ESI) m/z (M+Na)+342,2.
[00570] A uma solução de composto 93C (420 mg, 1,32 mmol) em EA (3 ml), foi adicionado HCl/EtOAc (4M, 3 ml), a mistura foi agitada a 15 ºC por 2 h. A mistura de reação foi concentrada para gerar um resíduo. O resíduo foi triturado em EA (3 ml) e PE (20 ml), filtrado e seco a vácuo. O composto 93D (300 mg, rendimento: 89,2%, HCl) como sólido amarelo claro foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8,26 (br s, 3H), 7,39 a 7,12 (m, 6H), 5,03 (t, J = 4,5 Hz, 1H), 3,82 (s, 1H), 3,08 a 2,91 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+Na)+276,2
[00571] Os compostos 93D e ácido 4-fenil-1,2,5- tiadiazol-3-carboxílico foram convertidos em composto 93 com uso de procedimentos conforme descrito no Exemplo 17. O composto 93 (15 mg, rendimento: 37,7%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9,33 (br dd, J = 7,3, 16,8 Hz, 1H), 7,66 a 7,56 (m, 2H), 7,49 a 7,42 (m, 1H), 7,42 a 7,34 (m, 2H), 7,33 a 7,06 (m, 5H), 5,74 a 5,67 (m, 1H), 3,16 a 3,10 (m, 2H). MS (ESI) m/z (M+H)+406,1.
N-(1-Oxo-3-Fenil-1-(1H-1,2,4-Triazol-3-il)Propan-2- il)-4-Fenil-1,2,5-Tiadiazol-3-Carboxamida (104)
[00572] A uma solução de (1-ciano-1-hidroxi-3- fenilpropan-2-il)carbamato de terc-butila (500 mg, 1,81 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado imidazol (246 mg, 3,62 mmol) e TBDMSiCl (2,90 mmol, 0,35 ml) a 0 ºC. A mistura foi agitada a 25 ºC por 12 h. A mistura foi diluída com EA (200 ml), lavada com salmoura (200 ml), seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (SiO2, Éter de Petróleo/ acetato de etila = 10/1 a
1/1). O composto 104A (2,9 g) foi obtido como um óleo incolor. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7,36 a 7,14 (m, 6H), 4,75 a 4,61 (m, 1H), 4,10 a 3,97 (m, 1H), 3,20 a 2,70 (m, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,00 a 0,83 (m, 9H), 0,26 a 0,08 (m, 6H).
[00573] A uma solução de composto 104A (450 mg, 1,15 mmol) e K2CO3 (318 mg, 2,30 mmol) em DMSO (10 ml) foi adicionado H2O2 (23,04 mmol, 2,21 ml, pureza a 30%) a 0 ºC, a mistura foi agitada a 15 ºC por 20 h. A mistura de reação foi terminada bruscamente com Na2S2O3 saturado (20 ml) lentamente em água gelada, diluída com água (30 ml), extraída com EtOAc (30 ml x 3), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 ml x 2), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 104B (400 mg, bruto) foi obtido como óleo incolor, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[00574] Uma solução de composto 104B (400 mg, 978,94 umol) em 1,1-dimetoxi-N,N-dimetil-metanamina (75,28 mmol, 10 ml) foi agitada a 30 ºC por 1 h. A mistura de reação foi diluída com água (50 ml) em água gelada, extraída com EA (20 ml x 3), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 ml x 2), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 104C (420 mg, bruto) foi obtido como óleo amarelo claro, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[00575] A uma solução de composto 104C (410 mg, 884,22 umol) em CH3COOH (5 ml) foi adicionado NH2NH2.H2O (884,22 umol, 0,43 ml), a mistura foi agitada a 85 ºC por 1,5 h. A mistura de reação foi diluída com água (60 ml) em água gelada, extraída com EA (30 ml x 3), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (80 ml x 2), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar um resíduo. O composto 104D (400 mg, bruto) foi obtido como óleo amarelo claro, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI) m/z (M+H)+433,3.
[00576] A uma solução de composto 104D (400 mg, 924,58 umol) em EA (3 ml) foi adicionada HCl/EtOAc (4M, 4,62 ml), a mistura foi agitada a 15 ºC por 2 h. A mistura de reação foi concentrada para gerar um resíduo. O composto 104E (350 mg, bruto, HCl) foi obtido como sólido amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. MS (ESI) m/z (M+H)+333,2.
[00577] Os compostos 104E e ácido 4-fenil-1,2,5- tiadiazol-3-carboxílico foram acoplados com uso de condições de acoplamento de peptídeo como no Exemplo 17 e então desproteção com uso de TBAF seguido por oxidação com uso de procedimento para o Exemplo 17 para obter o composto 104. O composto 104 (40 mg, rendimento: 53,5%) como um sólido branco foi obtido. 1H NMR (400MHz, CD3CN) δ 8,45 (s, 1H), 7,83 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,66 a 7,55 (m, 2H), 7,49 a 7,36 (m, 3H), 7,34 a 7,16 (m, 6H), 5,92 a 5,87 (m, 1H), 3,45 (dd, J = 4,6,
14,2 Hz, 1H), 3,12 (dd, J = 8,6, 13,9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z (M+H)+405,1.
Seção de Exemplo III Exemplo A Eficácia de Inibidores de Calpaína em um Modelo de Fibrose Hepática Modelo Ccl4
[00578] Esse estudo é realizado para avaliar os efeitos de compostos de calpaína revelados no presente documento em uma fibrose hepática induzida por Tetracloreto de Carbono (CCl4) em camundongos BALB/c machos. A fibrose hepática é induzida em camundongos pela administração de CCl4 duas vezes por semana por quatro semanas. Animais administrados com CCl4 são tratados com compostos revelados no presente documento em um modo de tratamento terapêutico no dia 14 após o início de injeção de CCl4 e continuou até o término de estudo. O estudo é terminado 96 horas seguindo a última administração de CCl4, isto é, no dia 32 após a administração de CCl4. Os compostos descritos no presente documento mostram um aprimoramento de pontuação de fibrose e nenhum efeito em enzimas do fígado, peso do fígado ou peso corporal em comparação ao veículo.
Indução de Fibrose Hepática
[00579] Tetracloreto de carbono (CCl4) é adquirido junto à Sigma (gato #319961). Para induzir fibrose hepática,
camundongos são administrados com CCl4 (1:1, CCl4:óleo mineral) por meio de injeção intraperitoneal (ip) em um volume de dose de 1 ml/kg de peso corporal. Em cada administração de CCl4 diária, animais são pesados antes da administração de CCl4 e o volume de dose é ajustado como por peso corporal de animal individual. Animais são administrados com CCl4: óleo mineral duas vezes por semana, isto é, toda a Segunda-feira e Terça-feira por quatro semanas, 2 horas após o tratamento matinal. A injeção final de CCl4 é recebida no dia 28 após a primeira injeção de CCl4.
Sangramento
[00580] Animais são sangrados por meio de toda submandibular no dia 4 antes da iniciação de estudo, e no dia 13, após a administração de CCl4, um dia antes de o tratamento terapêutico começar. Plasma é preparado e armazenado a -20 ºC até que o mesmo seja analisado. Mediante término de estudo no dia 32 após a administração de Ccl4, animais são sangrados por meio de punção cardíaca. Soro é preparado e armazenado a -20 ºC até ser enviado para contrato de empresa para análise de painel de enzima de fígado.
Administração de Compostos
[00581] Compostos de tratamento são preparados em metilcelulose para administração de gavagem oral. Em um exemplo, os seguintes compostos de Fórmula II-a podem ser administrados:
[00582] Veículo (0,5% metilcelulose) é preparado semanalmente. O composto de tratamento é preparado uma vez por semana em Aragen e armazenado em temperatura ambiente no escuro. Um total de 100 microlitros de cada composto é administrado AM e PM diariamente por meio de rota oral.
Animais recebem tratamento no dia 14 após a primeira administração de CCl4 e continuam até o término de estudo.
Animais são coletados dentro de 2 a 4 horas depois de receber tratamento final.
Coleta
[00583] Todos os animais sobreviventes são humanamente eutanizados em aproximadamente 96 horas seguindo a última administração de CCl4, isto é, no dia 32 após a administração com CCL4. O lóbulo mediano do fígado é fixado em NBF a 10% para histologia, os lóbulos restantes de fígado foram pesados e submetidos à congelação rápida em dois tubos diferentes.
Análise histológica
[00584] Slides coloridos com Picrosirius Red (PSR) são examinados sob luz polarizada. Birrefingência na seção é considerada fibrose e pontuada de acordo com a seguinte escala subjetiva: 0= sem fibrose acima das áreas de portais normais; 1= fibrose minimamente aumentada em fitas finas entre os lóbulos; 2= fibrose brandamente aumentada em fitas finas entre lóbulos e alguma birrefingência de colágeno em áreas de necrose/mineralização; 3= fibrose moderadamente aumentada em fitas finas entre lóbulos e birrefingência branda em áreas de necrose/mineralização; 4= fibrose notavelmente aumentada entre lóbulos ou em áreas de necrose/mineralização; 5= fibrose severamente aumentada.
Análise estatística foi realizada com uso de um teste t não pareado (software GraphPad Prism).
Observações Clínicas e Peso Corporal
[00585] Os procedimentos descritos acima foram seguidos com uso de Composto 405 como um composto de teste administrado em 30 mg/kg de BID ou 100 mg/kg de BID. Pesos corporais foram medidos antes de cada administração de CCl4.
Volume de dose de CCl4 foi ajustado com base em peso corporal individual. Todos os camundongos administrados com CCl4 mostraram perda de peso na primeira semana do estudo então tiveram tendência a mostrar um aumento corporal de pesos corporais durante a última parte do estudo. Os animais administrados com CCl4 mostraram aumento significativo de peso do fígado em comparação a animais de controle tratados com salino. O peso médio do fígado de 2,24+/- 0,06 g foi registrado em animais tratados com veículo em comparação a camundongos de controle administrados sem CC14 1,45+/-0,03 g (p<0,0001).
Fibrose
[00586] As seções de fígado coloradas com PSR e observadas sob luz polarizada mostraram acúmulo de colágeno e reticulação nos camundongos tratados com CCl4, confirmando a indução de fibrose pelo Composto 405 (Figura 1). O tratamento com Composto 405 mostrou uma diminuição do comprimento e espessura das fibras de colágeno. Seções foram analisadas com uso da balança descrita na seção de métodos.
A Figura 2 prossegue as pontuações para cada grupo. Uma redução estatisticamente significativa de pontuação de fibrose foi observada quando camundongos tratados com CCl4 foram dosados com o Composto 405.
[00587] O composto 405 dosado terapeuticamente em 100 mg/kg, duas vezes por dia, reduziu significativamente a fibrose nesse modelo. Os resultados sugerem um efeito antifibrótico de Composto 405 em fibrose hepática. Dados sugerem que inibidores de calpaína podem ter efeitos benéficos em diferentes formas de fibrose hepática tanto por si só como em combinação. As terapias de combinação podem ser especialmente consideradas em doenças como NASH, em que a combinação de agentes antifibróticos com anti-inflamatório ou agentes que modulam o componente metabólico poderia resultar em benefício máximo.
Exemplo B Expressão de Capn1, Capn2 e Capn9 em Fígado Humano Normal e com Doença
[00588] A avaliação imuno-histoquímica (IHC) de CAPN1, CAPN2, e CAPN9 é realizada em fígado humano normal e com doença. As doenças incluídas foram Gordura no Fígado, NASH, cirrose, PBC e PSC.
Metodologia
[00589] CAPN1 é detectado com uso de anticorpos monoclonais a CAPN1 (Invitrogen / Thermo, clone MA3-940), CAPN2 com uso de (Biorbyt 305855, clone 1381CT669.766.71) e CAPN9 (Abnova H00010753-MO2, clone 3A6). Todos os ensaios são controlados por meio da detecção de proteínas abundantes,
mas de controle restrito (citoqueratinas em mucosa gastrointestinal) e a análise de IHC de cada seção é controlada por meio de IgGs não imunes e controles negativos “não primários”. Três ensaios são concluídos e em cada caso, o controle de ensaio gera o padrão esperado de citoqueratinas em células epiteliais mucosais. Os controles não imunes geram níveis desprezíveis de imunointeratividade não específica que não interfere com a interpretação de imunorreatividade de CAPN específica.
[00590] Para avaliar a especificidade de anticorpo, anticorpos CAPN1, CAPN2 e CAPN9 são testados com uso de seções que contêm linhagens celulares parentais, ou linhagens celulares que expressam CAPN2 ou CAPN9 humano recombinante. Os anticorpos CAPN1 não coloram nenhuma linhagem celular sob as condições testadas. Os anticorpos CAPN2 e CAPN9 somente marcaram as linhagens celulares apropriadas e esperadas.
Imuno-histoquímica
[00591] Todas as seções são usadas em uma espessura de 4 µm e todas as incubações foram realizadas em temperatura ambiente a menos que declarado de outro modo. As seções foram desparafinizadas, tiveram antígeno recuperado e foram reidratadas com uso tanto de pH6 (CAPN1 e CAPN2) como de tampões de recuperação de antígeno 3 em 1 Flex Plus de pH9 (CAPN9) em um sistema de recuperação de antígeno automatizado
PT Link a 97 ºC por 20 min com aquecimento e resfriamento automáticos. Seguindo recuperação de antígeno, os slides foram colocados em tampão Flex (50 mM Tris.HCl, 300 mM de NaCl, Tween-20 a 0,1%, pH 7,6) e permitidos a resfriar. Os slides foram então carregados em um Dako Autostainer Plus.
As seções foram então incubadas com reagente de bloqueio de peroxidase Flex Plus, enxaguados com tampão Flex seguido por uma incubação com reagente de bloco de Proteína (DAKO, Cat # X0909), que foi removido por jato de ar. As seções foram então incubadas tanto com o anticorpo primário diluído em diluente de anticorpo DAKO (DAKO, Cat # K8006), o isotipo e IgG não imune de concentração combinada ou diluente de anticorpo por si só (não primário). Seguindo a incubação com os respectivos anticorpos primários, as seções foram enxaguadas duas vezes em tampão Flex, incubadas com Flex plus-HRP secundário, enxaguadas duas vezes em tampão Flex e então incubadas com substrato de diaminobenzidina (DAB). A reação cromogênica foi interrompida enxaguando-se os slides com água destilada. Seguindo a cromogênese, as seções foram removidas do Dako Autostainer Plus, contracoloradas com haematoxilina, desidratadas em uma série ascendente de etanol (90-99%), clareadas em três mudanças de xileno e então cobertas com lamela sob DePeX. Os controles de ensaio, que demonstram expressão de pan citoqueratina (PCK) em Cólon, foram incluídos para validar os reagentes Dako EnVision Flex plus-HRP anti-camundongo e cromogênicos. Um controle "não primário" foi também incluído. As seções coloradas foram analisadas, e imagens digitais adequadas capturadas, com uso de um Aperio ScanScope AT Turbo.
Resultados
[00592] A expressão e distribuição de CAPN1, 2, e 9 foram consideravelmente aumentadas em fígado com doença em comparação a tecidos diagnosticados como normal. Isso foi especialmente notável em tecidos com mudança fibrótica ou degenerativa (NASH, cirrose, PBC, PSC). Algumas seções diagnosticadas como normais com imunorreatividade tiveram frequentemente áreas de doença, que mostraram aumento de coloração de CAPN1 (áreas com mudança de gordura ou necrose e inflamação). CAPN1 foi observado na mais ampla variedade de tipos de célula em tecidos normais e com gordura, enquanto CAPN 2 e 9 foram fortemente regulados de modo ascendente em sua maioria no epitélio de duto biliar.
Capn1
[00593] A reatividade de CAPN1 foi aumentada em tecido com doença em comparação ao tecido normal. A reatividade de CAPN1 foi difundida e inclui células epiteliais de duto biliar, células de Kupfer, macrófagos e hepatócitos (Figura 3). Coloração mais forte foi observada em células epiteliais de duto biliar e células de Kuppfer. Um claro aumento de imunorreatividade foi constatado em NASH e cirrose enquanto as amostras de gordura no Fígado mostram imunorreatividade inferior. A coloração de hepatócito e de célula endotelial teve tendência de ser mais forte em seções com doença. Em algum tecido diagnosticado como normal, áreas que exibem mudança de gordura mínima (Figura 3, fundo intermediário), e áreas de necrose e inflamação (Figura 3, fundo à direita) mostra coloração de hepatócito de CAPN1 crescente.
[00594] A reatividade de CAPN1 foi aumentada em tecido de PBC e PSC em comparação ao tecido normal. Em amostras de PBC e PSC, a coloração geral de CAPN1 foi geralmente maior em amostras de PBC em comparação a PSC (Figura 4). Em PSC, a forte coloração do epitélio de duto biliar foi observada.
Em sujeitos com inflamação intensa, imunorreatividade foi quase obíqua.
Capn2
[00595] Embora a reatividade de CAPN2 tenha ocorrido em células epiteliais de duto biliar independentemente do estado da doença, a imunorreatividade de CAPN2 foi aumentada em tecido com doença em comparação a tecido normal (Figura 5). No fígado com doença com inflamação, células inflamatórias (predominantemente macrófagos) e células endoteliais foram variavelmente de CAPN2 positivo.
Hepatócitos adjacentes a bandas de fibrose foram de CAPN2 positivo com perda gradual direcionada ao centro dos nódulos ou lóbulos.
[00596] Em amostras de PBC e PSC, a reatividade de CAPN2 foi aumentada em comparação a tecido normal. duto biliar epitelial de CAPN2 positivo variou em intensidade sem diferenças consideráveis entre PBC e PSC (Figura 6). No fígado com doença com inflamação, células inflamatórias (predominantemente macrófagos) e células endoteliais foram variavelmente de CAPN2 positivo. Hepatócitos foram de CAPN2 positivo em alguns sujeitos com ampla variedade. Sujeitos com a maior inflamação teve tendência a ter a coloração mais intensa.
Capn9
[00597] A forte reatividade de CAPN9 ocorreu em células epiteliais de duto biliar independentemente do estado da doença (Figura 7). No entanto, reatividade de CAPN9 aumentada foi observada em tecido de PBC e PSC em comparação ao tecido normal. O fígado com doença incluiu tipicamente hiperplasia de duto biliar, que aumentou a distribuição de célula de CAPN positiva geral. Os hepatócitos em fígado com doença tiveram reatividade de CAPN9 brandamente aumentada em comparação ao fígado saudável. No fígado diagnosticado como normal, algumas áreas de mudança de gordura (esteatose) tiveram reatividade de CAPN9 hepatocelular aumentada. Muitas seções tiveram pigmento hepatocelular intrínseco brando observado em controles de isotipo.
[00598] Em amostras de PBC e PSC, a reatividade de
CAPN9 foi aumentada em comparação a tecido normal. As células epiteliais de duto biliar mostraram forte reatividade de CAPN9 (Figura 8). Pouca diferença foi notada entre PBC e PSC. O fígado com doença incluiu tipicamente hiperplasia de duto biliar, que aumentou a distribuição de célula de CAPN positiva geral. A reatividade de CAPN9 foi mais forte em hepatócitos degenerados.
Exemplo C Modelos de animal de Nash
[00599] Um modelo de dieta com alto teor de gordura definida com aminoácido e deficiente com colina (CDAHFD) de rato de esteatose hepática não alcóolica (NASH) reproduz recursos chave da doença humana. Esse modelo foi usado para examinar os efeitos antifibróticos do composto 405 (mostrado na Tabela 1a) no modelo de CDAHFD de rato.
[00600] Ratos Wistar machos (Charles River Laboratories) foram aleatoriamente designados para receber os seguintes tratamentos: Grupo 1 (n = 8) serviu como um controle saudável e foi alimentado com mastigação normal por 12 semanas; Grupo 2 (n = 8) serviu como um controle de doença e foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu uma vez ao dia (QD) tratamento de gavagem oral com veículo Metilcelulose (MC) começando na semana 5 após CDAHFD, Grupo 3 (n = 8) serviu como um controle de doença e foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu duas vezes por dia (BID) tratamento de gavagem oral com veículo Metilcelulose (MC) começando na semana 5 após CDAHFD, Grupo 4 (n = 8) foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu tratamento de gavagem oral de QD com Composto 405 (200 mg/kg) começando na semana 5 após CDAHFD, Grupo 5 (n = 8) foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu tratamento de gavagem oral de BID com Composto 405 (100 mg/kg) começando na semana 5 após CDAHFD, Grupo 6 (n = 8) foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu tratamento de gavagem oral de QD com Composto 405 (60 mg/kg) começando na semana 5 após CDAHFD, Grupo 7 (n = 8) foi alimentado com uma CDAHFD e recebeu tratamento de gavagem oral de BID com Composto 405 (30 mg/kg) começando na semana 5 após CDAHFD. Ao fim do estudo (12 semanas), o tecido de fígado e soro foi coletado para análise adicional. Uma parte do fígado foi usada para análise histológica e o fígado disponível de cada indivíduo animal foi submetido à congelação rápida em nitrogênio líquido e armazenado a -80 ºC. Soro foi coletado para medir ALT.
[00601] Ratos alimentados com CDAHFD desenvolveram fibrose hepática (F3) após 5 semanas de dieta de CDAHFD, que progrediu para cirrose (F4) em 12 semanas (Figura 9A). Nesse modelo como progresso de fibrose, α-SMA e expressão de collagen1a1 aumentam gradualmente ao longo do tempo em ratos alimentados com CDAHFD (Figuras 9B e 9C). A expressão de Calpaína 2 em fígado aumentou em ratos alimentados com CDAHFD
(NC 1,00 ± 0,14, 2 semanas 4,34 ± 1,38 **p< 0,001, 6 semanas 3,50 ± 0,90 *p < 0,05 e 12 semanas, 3,67 ± 0,32 *p < 0,05, em comparação a NC) enquanto a expressão de Calpaína 1 não mudou no curso desse estudo (Figura 9D e 9E). A expressão de calpaína 9 não foi detectável por qPCR em fígado de rato.
[00602] O peso corporal diminuiu em ratos alimentados com CDAHFD em comparação a ratos alimentados com mastigação normal. O tratamento de QD com Composto 405 (200 mg/kg e 60 mg/kg) não alterou o peso corporal em ratos com CDAHFD em relação aos ratos de controle de veículo (celulose de metila). O peso de fígado e peso de baço (como uma porcentagem de peso total) foram significativamente maiores em ratos alimentados com CDAHFD em comparação a mastigação normal (Figuras 10A a 10C). O nível de sangue transaminases (U/L) incluindo ALT, AST e ALP aumenta significativamente em todos os ratos alimentados com CDAHFD em comparação a mastigação normal, no entanto, a análise de soro revelou que, em comparação ao grupo tratado com veículo (QD de MC), o composto 405 não alterou o nível de sangue transaminases.
O nível de albumina diminui em todos os ratos com CDAHFD em comparação aos ratos de mastigação normal, no entanto, o Composto 405 não mudou os níveis de albumina em todos os ratos alimentados com CDAHFD (Figuras 11A a 11E). A bilirrubina total não mudou significativamente.
[00603] No estudo de BID, o tratamento com composto
405 (100 mg/kg e 30 mg/kg) não afetou o peso corporal e peso de baço (como porcentagem de peso total) em ratos com CDAHFD.
No entanto, o peso de fígado (como porcentagem de peso total) aumentou após o tratamento com composto 405 (BID de MC 0,059 ± 0,002% vs. 100 mg/kg de BID 0,066 ± 0,008% e 30 mg/kg de BID 0,066 ± 0,003% *p < 0,05) (Figuras 12A a 12C). O nível de sangue transaminases (U/L) incluindo alanina transaminase (ALT), aspartato transaminase (AST), e ALP (fosfatase alcalina) aumenta em ratos alimentados com CDAHFD em comparação à mastigação normal (NC). Mas, em comparação ao grupo tratado com veículo (BID de MC), o composto 405 não mudou o nível de sangue transaminases (U/L) incluindo ALT, AST e ALP. Apesar da diminuição de nível de albumina em ratos com CDAHFD em comparação à mastigação normal (NC), o composto 405 não alterou os níveis de albumina em ratos alimentados com CDAHFD (Figuras 13A a 13E). A bilirrubina total não mudou significativamente.
[00604] Amostras histológicas representativas revelam fibrose em ponte em ratos com CDAHFD em 12 semanas (Figura 14). Múltiplos métodos de quantificação de colágeno foram usados para comparar diferenças de fibrose hepática dentre grupos de tratamento. Por medição de área proporcional de colágeno (CPA), o composto 405 200 mg/kg de QD reduziu significativamente a deposição de colágeno conforme comparado a QD de MC em ratos com CDAHFD (11,28 ± 3,50% vs.
6,08 ± 1,69%, **p< 0,05 (Figuras 14A e 14B). Constatações similares foram também observadas com análise de hidroxiprolina. O tratamento de composto 405 200 mg/kg de QD reduziu significativamente a hidroxiprolina (QD de MC 731,3 ± 165,9 nmol/L vs. 200 mg/kg de QD 495,1 ± 113,9 nmol/L *p < 0,05) (Figura 14C). O composto 405 60 mg/kg QD não diminuiu significativamente a fibrose conforme medido por CPA e hidroxiprolina. No entanto, a expressão de proteína de SMA (Acta2) diminuiu significativamente após o tratamento tanto com Composto 405 200 quanto com 60 mg/kg de QD em comparação a ratos tratados com MC com CDAHFD (QD de MC 5,82 ± 0,67 vs.
200 mg/kg 1,7 ± 0,58% **p< 0,01 e 60 mg/kg 2,40 ± 1,16% **p< 0,01) (Figuras 14A e 14D). A análise histológica de esteatose mostrou que o QD de tratamento com composto 405 não mudou o teor de gordura no fígado em ratos com CDAHFD (Figuras 14A e 14E).
[00605] No estudo de BID, a mesma tendência estava presente visto que o Composto 405 100 mg/kg de BID reduziu a deposição de colágeno em ratos alimentados com CDAHFD e diminuiu significativamente a hidroxiprolina (BID de MC 706,9 ± 173,5 nmol/L vs. 100 mg/kg de BID 458,2 ± 146 nmol/L *p < 0,05) (Figura 15C). Além disso, o composto 405 100 mg/kg de BID diminuiu significativamente a expressão de proteína de SMA (Acta2) em fígados em ratos com CDAHFD (BID de MC 7,08 ± 1,36% vs. 100 mg/kg de BID 2,01 ± 1,14%, **p < 0,01)
(Figura 15A e 15D). A análise histológica de esteatose mostrou que o tratamento com BID do composto 405 não mudou o teor de gordura no fígado em ratos com CDAHFD (Figuras 15A e 15E).
[00606] A análise de expressão de mRNA mostrou que o composto 405 200 mg/kg ou 60 mg/kg de QD não diminuiu significativamente a expressão de gene pró-fibrótica ou inflamatória. (Figura 16A a 16F). Em comparação, o composto 405 30 mg/kg de BID diminuiu a expressão de SMA (BID de MC 73,65 ± 37,51 vs. 30 mg/kg 11,46 ± 2,02 **p< 0,01), e tanto o Composto 405 100 quanto 30 mg/kg de BID diminuíram a expressão de Col1a1 (BID de MC 106,6 ± 59,97 vs. 100 mg/kg 35,76 ± 33,84 **p< 0,01 e 30 mg/kg 13,37 ± 2,53 **p< 0,01), CTGF (BID de MC 42,89 ± 32,82 vs. 100 mg/kg 3,84 ± 2,24 *p< 0,05 e 30 mg/kg 3,55 ± 1,35 **p<0,01) e IL-6 (BID de MC 54,89 ± 47,23 vs. 100 mg/kg 15,81 ± 9,01 **p< 0,01 e 30 mg/kg 2,80 ± 1,35 **p< 0,01) (Figuras 17A a 17D). O tratamento com BID do composto 405 não mudou a expressão de Calpaína1 e Calpaína 2 (Figuras 17E e 17F).
Exemplo D Modelos de animal de Psc
[00607] Um modelo no qual se acredita que o mesmo mimetize aspectos de PSC é o modelo de camundongo mdr2 -/-, visto que o modelo apresenta fibrose biliar distintiva. As células que regulam de modo ascendente CAPN 1,2 e 9 em PSC,
as células epiteliais de duto biliar, parecem ser responsáveis pelo desenvolvimento de fibrose nesse modelo.
[00608] Os compostos de tratamento são testados nos camundongos Mdr2 −/− no contexto de BALB/c suscetível a fibrose, que desenvolveram espontaneamente fibrose biliar acelerada e hipertensão de portal de início precoce (Ikenaga, N. et al (2015) A new Mdr2-/- mouse model of sclerosing cholangitis with rapid fibrosis progression , early-onset portal hypertension and liver cancer. Am J. Pathology 185 (2), 325-34). Esses camundongos desenvolvem lesões fibróticas e reação ductular começando em 4 semanas de idade, continuando para aumentar a deposição de colágeno e sinais precoces de cirrose em 12 semanas.
[00609] Camundongos de Mdr2-/- são dosados em 6 semanas de idade por 6 semanas e o desenvolvimento de fibrose é avaliado na semana 12. A avaliação ao fim do estudo inclui hidroxiprolina como medida de fibrose geral, análise histológica e expressão de gene de genes pró-fibróticos, incluindo TGFß, procolágenos, actina de músculo α-liso.

Claims (25)

REIVINDICAÇÕES
1. Método para tratar uma doença ou distúrbio selecionado a partir do grupo que consiste em colangite esclerosante primária, colangite biliar primária, doença de gordura no fígado não alcoólica, esteatose hepática não alcoólica e cirrose hepática; sendo que o método é caracterizado pelo fato de que compreende administrar um ou mais inibidores de calpaína a um sujeito com necessidade do mesmo, em que inibidor de calpaína é um composto de Fórmula I: (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que: A1 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída desde que a heterociclila com 5 a 10 membros não seja substituída por oxo, heteroarila com 5, 8 ou 9 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída; A2 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, -CR2-, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-,
-C(=S)-, -C(=O)-, -NR-, -CH=CH-, -C≡C-, -OC(O)NH-, -
NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -
NHC(S)- e ligação única;
A4 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1 -4 alquila opcionalmente substituída, -(CR2)n-S-(CR2)n-, -(CR2)n-S(=O)-(CR2)n-, -(CR2)n-
SO2-(CR2)n-, -(CR2)n-O-(CR2)n-, -(CR2)n-C(=S)-(CR2)n-, -(CR2)n-
C(=O)-(CR2)n-, -(CR2)n-NR-(CR2)n-, -(CR2)n-CH=CH-(CR2)n-, -
(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)NH-(CR2)n-, -(CR2)n-
NHC(O)O-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)NH-
(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-, -(CR2)n-NHC(S)-(CR2)n- e ligação única;
quando A2 e A4 são de ligação única, A3 está fixado diretamente em A8;
A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, ou se A2 é selecionado a partir de heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída,
heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída e
C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, logo A3 é selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio,
C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída,-C≡CH, e polietilenoglicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído;
A5 é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída,
C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)-, -C(=O)-, -
NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -
NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)- e ligação única;
A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, C2-8 alquenila opcionalmente substituída, –O-C1-
6 alquila opcionalmente substituída, –O C2-6 alquenila opcionalmente substituída, -OSO2CF3 e qualquer cadeia lateral de aminoácido natural ou não natural;
A7 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída, C3-10 carbociclila opcionalmente substituída, C1-8 alquila opcionalmente substituída, -S-, -S(=O)-, -SO2-, -O-, -C(=S)-, -C(=O)-, -
NR-, -CH=CH-, -OC(O)NH-, -NHC(O)NH-, -NHC(O)O-, -NHC(O)-, -
NHC(S)NH-, -NHC(S)O-, -NHC(S)- e ligação única;
quando A5 e A7 são de ligação única, A6 está fixado diretamente ao carbono no qual R8 está fixado;
A8 é um membro anelar de A1 e é selecionado a partir do grupo que consiste em C, CH e N;
R8 é selecionado a partir do grupo que consiste em -
COR1, -CN, -CH=CHSO2R e -CH2NO2;
R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -
OH, C1-4 haloalquila, -COOH, -CH2NO2, -C(=O)NOR, -NH2, -CONR2R3,
-CH(CH3)=CH2, -CH(CF3)NR2R3,
-C(F)=CHCH2CH3, , , ,
, , , ,
, , , , , e ; R14 é halo; cada R, R2 e R3 são independentemente selecionados a partir de –H, C1 -4 alquila opcionalmente substituída, C1-8 alcoxialquila opcionalmente substituída, polietilenoglicol com 2 a 5 membros opcionalmente substituído, C3-7 carbociclila opcionalmente substituída, heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, C6-10 arila opcionalmente substituída e heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída; e R6 é independentemente selecionado a partir de –H e C1- 4 alquila opcionalmente substituída.
2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que A1 é heterociclila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída desde que a heterociclila com 5 a 10 membros não seja substituída com oxo.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que A1 é furila opcionalmente substituída, tienila opcionalmente substituída, ftalazinila opcionalmente substituída, pirrolila opcionalmente substituída, oxazolila opcionalmente substituída, tiazolila opcionalmente substituída, imidazolila opcionalmente substituída, pirazolila opcionalmente substituída, isoxazolila opcionalmente substituída, isotiazolila opcionalmente substituída, triazolila opcionalmente substituída, tiadizolila opcionalmente substituída, piridinila opcionalmente substituída, piridazinila opcionalmente substituída, pirimidinila opcionalmente substituída, pirazinila opcionalmente substituída, triazinila opcionalmente substituída, quinolinila opcionalmente substituída, isoquinlinila opcionalmente substituída, benzimidazolila opcionalmente substituída, benzoxazolila opcionalmente substituída, benzotiazolila opcionalmente substituída, indolila opcionalmente substituída, isoindolila opcionalmente substituída ou benzotienila opcionalmente substituída.
4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que A1 é oxazolila opcionalmente substituída, tiazolila opcionalmente substituída, imidazolila opcionalmente substituída, pirazolila opcionalmente substituída ou isoxazolila opcionalmente substituída.
5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que A1 é uma heteroarila com 5, 8 ou 9 membros opcionalmente substituída.
6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que A2 é uma ligação única.
7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que A4 é uma ligação única.
8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que A3 é selecionado a partir de C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída.
9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que A3 é C6-10 arila opcionalmente substituída.
10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que A3 é fenila opcionalmente substituída.
11. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que A3 é heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída.
12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que A5 é C1-8 alquila opcionalmente substituída.
13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que A7 é uma ligação única.
14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que A6 é selecionado a partir do grupo que consiste em C6-10 arila opcionalmente substituída, heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída, heterociclila com 3 a 10 membros opcionalmente substituída e C3-10 carbociclila opcionalmente substituída.
15. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que A6 é C6-10 arila opcionalmente substituída.
16. Método, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que A6 é fenila opcionalmente substituída.
17. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que A6 é heteroarila com 5 a 10 membros opcionalmente substituída.
18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que R8 é - COR1 e R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em - COOH, -C(=O)NOR ou -CONR2R3.
19. Método, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que cada R, R2 e R3 são independentemente selecionados a partir de –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída.
20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que R6 é independentemente selecionado a partir –H e C1-4 alquila opcionalmente substituída.
21. Método para tratar uma doença ou distúrbio selecionado a partir do grupo que consiste em colangite esclerosante primária, colangite biliar primária, doença de gordura no fígado não alcoólica, esteatose hepática não alcoólica e cirrose hepática; sendo que o método é caracterizado pelo fato de que compreende administrar um ou mais inibidores de calpaína a um sujeito com necessidade do mesmo, em que inibidor de calpaína é selecionado a partir do grupo que consiste em:
F
O O
O O N N NH2 H N NH2
N O N
H
N O •HCl
O
F
O
N
N H N H2 N O
O
O
N
N H S N H2 N O ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
22. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que a doença ou o distúrbio é esteatose hepática não alcoólica.
23. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que a cirrose hepática é causada por uma ou mais dentre as condições selecionadas a partir do grupo que consiste em doença hepática alcoólica, deficiência de alfa-1 antitripsina, hepatite autoimune, doença celíaca, hepatite crônica viral, hemocromatose, fibrose portal idiopática e doença de Wilson.
24. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que o inibidor de calpaína é administrado em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em um inibidor VAP-1, um inibidor ASBT, um antagonista CCR2/5 dual, um ácido biliar anticolestático, um agonista FXR, um agonista FGFR1c/4, células tronco mesenquimais (MSC) terapia celular, um inibidor CCL24 e um inibidor CCL11; e em que a doença ou distúrbio é colangite esclerosante primária.
25. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que o inibidor de calpaína é administrado em combinação com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em ácido obeticólico, elafibranor, cenicriviroc, selonsertibe, um agonista receptor de niacina, um inibidor SGLT2, um inibidor VAP-1, um FGF21 mimético, um agonista receptor A3 de adenosina, um modulador mTOT, um agonista
FXR, um inibidor de galectina-3, um ativador ABCA1, um inibidor SCD1, um inibidor ACC, um inibidor de células T NK de Tipo I, um agonista pan-PPAR, um inibidor DGAT2, um agonista PPARalfa, um agonista R-b de hormônio da tireoide,
um inibidor 5-LO/LT, um antagonista receptor de mineralocorticoide, um imitador de FGF19, um inibidor de caspase, um agonista GLP-1R, um agonista SIRT1/AMP, um inibidor ACC, um inibidor de ceto-hexoquinase, um agonista
GLP-1R, um inibidor ASBT, um inibidor DGAT2/CYP2E1, um antagonista TLR4, um agonista R-b de hormônio da tireoide,
um antagonismo receptor de IFN-gama, um antagonista CB1, um ligante FGF21, um agonista receptor P2Y13, um inibidor CCL24,
um antagonista MCH receptor-1, aPPARalfa, agonista delta, um inibidor DPP-4, antagonista aLXR, um agonista GLP1R, um inibidor de eotaxina-1, um agonista beta-klotho/FGFR1c, um inibidor LOXL2, um ativador AMPK, um inbididor miR-103/107,
um inibidor de inflamassoma, um antagonista CD3 e um inibidor de catepsina B; e em que a doença ou o distúrbio é esteatose hepática não alcoólica (NASH).
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