TW202019916A - 使用鈣蛋白酶(calpain)抑制劑治療肝纖維化之方法 - Google Patents

使用鈣蛋白酶(calpain)抑制劑治療肝纖維化之方法 Download PDF

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夏琳 林
帕哈 亞伯拉罕
瑪麗亞 福恩特斯
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美商布萊德治療公司
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Abstract

本文揭示藉由向有需要之個體投與鈣蛋白酶抑制劑來治療肝纖維化之方法。

Description

使用鈣蛋白酶(CALPAIN)抑制劑治療肝纖維化之方法
本申請案係關於醫藥化學、生物化學及醫學領域。更特定言之，本發明係關於鈣蛋白酶抑制劑及其作為治療劑之用途。
纖維化增生性病症為導致顯著罹病率及死亡率之器官損傷之主要促成因素。肝纖維化為急性或慢性肝損傷之結果。其可為對代謝、病毒或有毒刺激等等之反應。鈣蛋白酶抑制可潛在地有益於多種肝纖維化疾病。
原發性硬化性膽管炎(PSC)為罕見的慢性進展性疾病，其特徵在於發炎及隨後破壞肝內及肝外膽管。隨時間推移，患者罹患肝纖維化及肝硬化，其最終可導致肝衰竭。PSC亦導致結腸直腸癌、肝膽癌及膽囊癌之比率增加(Kumar等人，2016Clin Med Insights Gastroenterol. 9：25-29)。流行病學研究指示，在美國可能存在多達50,000個罹患PSC之個體(Ali等人,2015.Intractable Rare Dis Res. 4(1):1-6)，但由於難以恰當地診斷無症狀患者，通常推測會低估發病率(Eksteen, 2014.Br Med Bull. 110(1):89-98)。疾病管理主要需要對症治療(例如，瘙癢及疲乏之對症治療)，但不存在經FDA批准用以治療PSC之藥劑且尚無療法顯示能夠不斷減緩疾病進展。有效延遲疾病進展之抗纖維化劑將對患有PSC之個體具有極大益處。
原發性膽道膽管炎(PBC；先前稱為原發性膽汁性肝硬化)為一種自體免疫疾病，其特徵在於小葉間膽管逐漸破壞。雖然致病源未知，但膽管損壞導致有毒膽酸之積聚，最後導致纖維化、肝硬化及最終肝衰竭。PBC不成比例地折磨女性(以約10:1之性別比)，其中當患者無症狀時，通常會在40至60歲之間診斷出來(Selmi等人2004.J Clin Gastroenterol. 38:264-271)。雖然未治療之初期疾病可能在4至6年內進展至肝硬化，但疾病進展高度變化且難以預測(Washington 2007,Modern Pathol. 20:S15-S30)。流行病學因地理位置而異，且常常引用之Mayo研究估計每100 K 40個PBC患者之美國發病率轉變成了每120-130 K之美國發病率(Kim等人2000.Gastroenterol. 119:1631-1636)。熊去氧膽酸(UDCA)為通用的且為針對PBC之標準第一線治療，使得約50%之患者病情穩定。美國在2016年批准奧貝膽酸(OCA)(一種由Intercept Pharmaceuticals開發之膽酸FXR促效劑)用於對UDCA反應不充分或對UDCA不耐受之患者。雖然OCA有效改善許多此等患者之肝臟組織結構，但其使用導致LDL含量增加及瘙癢(Neuschwander-Tetri等人 2015,Lancet. 385:956-65)，為開發中之未來產品留下機會。
肝硬化為肝纖維化晚期，其特徵在於彌漫性結節性再生、肝臟結構之崩塌及顯著肝脈管架構變形。此功能架構喪失直接引起門靜脈高血壓增加，其自身為併發症之主要驅動因素，該等併發症包括腹水、肝性腦病及靜脈曲張形成(Tsochatzis等人2014,Lancet . 383:1749-1761；Goldberg及Chopra, 2017,UpToDate Cirrhosis in adults: Overview of complications, general management, and prognosis)。一旦患者出現嚴重併發症，則認為其代償失調，之後對於許多患者之唯一治療為肝臟移植。除NASH、PBC及PSC以外，存在大量的肝硬化病因，包括酒精性肝病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、自體免疫性肝炎、乳糜瀉、慢性病毒性肝炎、血色素沉著症、特發性門脈纖維化及威爾遜病(Wilson disease)(Goldberg及Chopra, 2016,UpToDate Cirrhosis in adults: Etiologies, clinical manifestations, and diagnosis)。目前缺乏針對肝硬化患者之有效治療，但存在延遲進展及逆轉肝臟退化/纖維化之機會。對於已去除肝病驅動因素及驅動因素保持活性的患者，此情況可達到。第一組包括已展現持續病毒反應之病毒性患者(HCV、HBV)或保持節制之酒精性肝炎患者。因為不存在持續損害，此等患者理論上將經最佳定位為在治療期後展現改善肝纖維化。具有持續有效驅動肝臟退化之致病源之患者一直得益於延遲疾病進展、併發症出現、至代償失調之轉變及末期肝衰竭的療法。
據估計，美國及歐洲之群體中之多達三分之一患有稱為非酒精性脂肪肝病(NAFLD)之病況，其特徵在於脂肪變性或肝臟中脂肪之過度積聚(Wree等人2013. Nat. Rev.Gastroenterol. Hepatol. 10: 627-636；Blachier等人 2012. J.Hepatol. 58: 593-608)。許多此等個體由於尚未完全理解之原因而在之後罹患肝炎或脂肪變性肝炎。約10-20%之NAFLD患者罹患稱為非酒精性脂肪變性肝炎或NASH之此病況，在美國為大約1至2千萬個個體(Schattenburg等人 2011.Curr Opin Lipidol. 22:479-488)。曾患慢性肝炎之個體常常會罹患肝纖維化，最終之風險為肝硬化、肝細胞癌及肝衰竭。基於當前推測，預測到2020年NASH會變為肝臟移植之主要原因(Wree, 2013)。令人遺憾的是，尚無可用於阻止或治療肝纖維化之療法。
本文揭示一種治療疾病或病症之方法，該疾病或病症選自由以下組成之群：原發性硬化性膽管炎、原發性膽道膽管炎、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪變性肝炎及肝硬化；該方法包含向有需要之個體以單一藥劑形式或與其他藥劑組合投與一或多種鈣蛋白酶抑制劑。用於組合之藥劑之實例包括(但不限於)VAP-1抑制劑、ASBT抑制劑、雙重CCR2/5拮抗劑、抗膽汁鬱積性膽酸、FXR促效劑、FGFR1c/4促效劑、CCL24抑制劑、奧貝膽酸(obeticholic acid)、艾拉雷諾(elafibranor)、森尼維若(cenicriviroc)、司隆色替(selonsertib)、菸鹼酸受體促效劑、SGLT2抑制劑及FGF21模擬劑。
在一些實施例中，該肝硬化可由一或多種選自由以下組成之群的病況造成：酒精性肝病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、自體免疫性肝炎、乳糜瀉、慢性病毒肝炎、血色素沉著症、特發性門脈纖維化及威爾遜病。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為如本文所描述之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式I、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII、式VIII或式IX中任一者之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑為表1a、表1b、表2、表3或表4中所列之化合物。
定義
除非另有定義，否則本文中所使用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同之含義。所有專利、申請案、公開之申請案及其他出版物以全文引用之方式併入。除非另有說明，否則在本文中關於一個術語存在多個定義之情況下，以此部分中之定義為準。
如本文所用之「個體」意謂人類或非人類哺乳動物，例如犬、貓、小鼠、大鼠、奶牛、綿羊、豬、山羊、非人類靈長類動物或鳥類，例如雞，以及任何其他脊椎動物或無脊椎動物。
術語「哺乳動物」以其常見生物學意義使用。因此，其特定言之包括(但不限於)靈長類動物，包括猿猴(黑猩猩、猿、猴)及人類、牛、馬、綿羊、山羊、豬、家兔、犬、貓、大鼠及小鼠，但亦包括許多其他物種。
如本文所用之「有效量」或「治療有效量」係指在一定程度上有效緩解疾病或病況或降低疾病或病況的一或多種症狀發作的可能性且包括治癒疾病或病況的治療劑之量。「治癒」意謂疾病或病況的症狀消除；然而即使在實現治癒之後亦可能存在某些長期或永久性作用(諸如大規模組織損傷)。
如本文所用之「治療」係指針對預防性及/或治療目的投與醫藥組合物。術語「防治性治療」係指治療尚未展現疾病或病況之症狀但易患特定疾病或病況或處於特定疾病或病況風險下的個體，從而該治療降低患者將罹患疾病或病況的可能性。術語「治療性治療」係指向已患有疾病或病況之個體投與治療且可包括抑制疾病或病症或遏制其發展或改善或減輕疾病或病症之病因。
如本文所用，術語「前藥」係指活體內轉化為親本藥物之藥劑。前藥常常適用，因為在一些情況下，其可比親本藥物更容易投與。其可例如藉由經口投與而為生物可用，而親本藥物則不行。前藥亦可具有優於親本藥物之於醫藥組合物中之改良溶解性。前藥之一實例為(但不限於)以酯(「前藥」)形式投與以促進穿過細胞膜(其中水溶性對移動性不利)傳遞，但一旦進入細胞內(其中水溶性有益)則代謝水解為羧酸(活性實體)的化合物。前藥之另一實例可為鍵結至酸基之短肽(聚胺基酸)，其中肽發生代謝而顯露活性部分。選擇及製備合適前藥衍生物之習知程序描述於例如Design of Prodrugs , (H. Bundgaard編, Elsevier, 1985)中，其在此以全文引用之方式併入本文中。
如本文所用，術語「前藥酯」係指藉由添加在生理學條件下水解的若干酯形成基團中之任一者形成的本文所揭示之化合物的衍生物。前藥酯基之實例包括特戊醯氧基甲基、乙醯氧基甲基、酞基、茚滿基及甲氧基甲基以及此項技術中已知的其他此類基團，包括(5-R-2-側氧基-1,3-二氧雜環戊烯-4-基)甲基。前藥酯基之其他實例可見於例如T. Higuchi及V. Stella, 「Pro-drugs as Novel Delivery Systems」, 第14卷, A.C.S. Symposium Series, American Chemical Society (1975)；及「Bioreversible Carriers in Drug Design: Theory and Application」, E. B. Roche編, Pergamon Press: New York, 14-21 (1987) (提供適用作含有羧基之化合物的前藥的酯之實例)中。上文所提及之參考文獻中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
本文所揭示之化合物的「代謝物」包括將化合物引入至生物學環境之後產生的活性物質。
「溶劑合物」係指藉由溶劑與本文所描述之化合物、代謝物或其鹽相互作用形成的化合物。適合溶劑合物為醫藥學上可接受之溶劑合物，包括水合物。
術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留化合物之生物有效性及特性，在生物學或其他方面不會不適用於醫藥學之鹽。在多數情況下，本文之化合物能夠藉助於胺基及/或羧基或其類似基團之存在形成酸鹽及/或鹼鹽。醫藥學上可接受之酸加成鹽可用無機酸及有機酸形成。可衍生鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物。可衍生鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸及其類似酸。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可用無機鹼及有機鹼形成。可衍生鹽之無機鹼包括例如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁及其類似鹽；尤其較佳為銨、鉀、鈉、鈣及鎂鹽。可衍生鹽之有機鹼包括例如一級、二級及三級胺、經取代之胺(包括天然存在之經取代之胺)、環胺、鹼性離子交換樹脂及其類似物，特定言之諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺及乙醇胺。許多此類鹽為此項技術中已知的，如WO 87/05297, Johnston等人, 1987年9月11日公開(以全文引用之方式併入本文中)中所描述。
如本文所用，「a」及「b」為整數的「Ca 至Cb 」或「Ca-b 」係指指定基團中的碳原子數。亦即，該基團可含有「a」至「b」(包括端點)個碳原子。因此，舉例而言，「C1 至C4 烷基」或「C1-4 烷基」係指具有1至4個碳的所有烷基，亦即CH3 -、CH3 CH2 -、CH3 CH2 CH2 -、(CH3 )2 CH-、CH3 CH2 CH2 CH2 -、CH3 CH2 CH(CH3 )-及(CH3 )3 C-。
如本文所用，術語「鹵素」或「鹵基」意謂元素週期表之第7列的放射性-穩定原子中之任一者，例如氟、氯、溴或碘，較佳為氟及氯。
如本文所用，「烷基」係指完全飽和(亦即不含雙鍵或參鍵)之直鏈或分支鏈烴鏈。烷基可具有1至20個碳原子(每當出現在本文中時，諸如「1至20」之數值範圍係指給定範圍中之各整數；例如，「1至20個碳原子」意謂烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等，直至並包括20個碳原子組成，但本發明定義亦覆蓋未指定數值範圍之術語「烷基」之存在。烷基亦可為具有1至9個碳原子之中等尺寸烷基。烷基亦可為具有1至4個碳原子的低碳烷基。化合物之烷基可命名為「C1-4 烷基」或類似名稱。僅舉例而言，「C1-4 烷基」指示烷基鏈中存在一至四個碳原子，亦即烷基鏈係選自由以下組成之群：甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。典型烷基包括(但不限於)甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、己基及其類似基團。
如本文所用，「鹵烷基」係指用鹵素取代一或多個氫的在鏈中具有1至12個碳原子之直鏈或分支鏈烷基。鹵烷基之實例包括(但不限於)-CF3 、-CHF2 、-CH2 F、-CH2 CF3 、-CH2 CHF2 、-CH2 CH2 F、-CH2 CH2 Cl、-CH2 CF2 CF3 及根據一般熟習此項技術者及本文所提供之教示內容將視為等效於前述實例中之任一者之其他基團。
如本文所用，「烷氧基」係指式-OR，其中R為如上文所定義之烷基，諸如「C1-9 烷氧基」，包括(但不限於)甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(異丙氧基)、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基及其類似基團。
如本文所用，「聚乙二醇」係指式
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，其中n為大於一之整數且R為氫或烷基。重複單元「n」之數目可藉由參照成員數目指定。因此，舉例而言，「2員至5員聚乙二醇」係指n為選自二至五之整數。在一些實施例中，R選自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(異丙氧基)、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。
如本文所用，「雜烷基」係指主鏈中含有一或多個雜原子(亦即除碳以外的元素，包括但不限於氮、氧及硫)之直鏈或分支鏈烴鏈。雜烷基可具有1至20個碳原子，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍的術語「雜烷基」的存在。雜烷基亦可為具有1至9個碳原子的中等尺寸雜烷基。雜烷基亦可為具有1至4個碳原子的低碳雜烷基。在各種實施例中，雜烷基可具有1至4個雜原子、1至3個雜原子、1或2個雜原子或1個雜原子。化合物之雜烷基可命名為「C1-4 雜烷基」或類似名稱。雜烷基可含有一或多個雜原子。僅舉例而言，「C1-4 雜烷基」指示雜烷基鏈中存在一至四個碳原子且鏈之主鏈中存在額外一或多個雜原子。
術語「芳族」係指具有共軛π電子系統之環或環系統，且包括碳環芳族(例如苯基)及雜環芳基(例如吡啶)兩者。術語包括單環或稠合環多環(亦即共用相鄰原子對之環)基團，其限制條件為整個環系統為芳族環。
如本文所用，「芳基」係指僅在環主鏈中含有碳的芳族環或環系統(亦即共用兩個相鄰碳原子之兩個或兩個以上稠合環)。當芳基為環系統時，該系統中之每一個環為芳族環。芳基可具有6至18個碳原子，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍之術語「芳基」之存在。在一些實施例中，芳基具有6至10個碳原子。芳基可命名為「C6-10 芳基」、「C6 或C10 芳基」或類似名稱。芳基之實例包括(但不限於)苯基、萘基、薁基及蒽基。
如本文所用，「芳氧基」及「芳基硫基」係指RO-及RS-，其中R為如上文所定義之芳基，諸如「C6-10 芳氧基」或「C6-10 芳基硫基」及其類似基團，包括(但不限於)苯氧基。
「芳烷基」或「芳基烷基」為作為取代基經伸烷基連接之芳基，如「C7-14 芳烷基」及其類似基團，包括(但不限於)苯甲基、2-苯基乙基、3-苯基丙基及萘基烷基。在一些情況下，伸烷基為低碳伸烷基(亦即C1-4 伸烷基)。
如本文所用，「雜芳基」係指在環主鏈中含有一或多個雜原子(亦即除碳以外的元素，包括但不限於氮、氧及硫)之芳族環或環系統(亦即共用兩個相鄰原子之兩個或兩個以上稠合環)。當雜芳基為環系統時，該系統中之每一個環為芳族環。雜芳基可具有5至18個環成員(亦即構成環主鏈之原子，包括碳原子及雜原子的數目)，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍之術語「雜芳基」的存在。在一些實施例中，雜芳基具有5至10個環成員或5至7個環成員。雜芳基可命名為「5員至7員雜芳基」、「5員至10員雜芳基」或類似名稱。在各種實施例中，雜烷基含有1至4個雜原子、1至3個雜原子、1至2個雜原子或1個雜原子。舉例而言，在各種實施例中，雜芳基含有1至4個氮原子、1至3個氮原子、1至2個氮原子、2個氮原子及1個硫或氧原子、1個氮原子及1個硫或氧原子或1個硫或氧原子。雜芳基環之實例包括(但不限於)呋喃基、噻吩基、酞嗪基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、異噻唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、吲哚基、異吲哚基及苯并噻吩基。
「雜芳烷基」或「雜芳基烷基」為作為取代基經伸烷基連接之雜芳基。實例包括(但不限於)2-噻吩基甲基、3-噻吩基甲基、呋喃基甲基、噻吩基乙基、吡咯基烷基、吡啶基烷基、異噁唑基烷基及咪唑基烷基。在一些情況下，伸烷基為低碳伸烷基(亦即C1-4 伸烷基)。
如本文所用，「碳環基」意謂環系統主鏈中僅含有碳原子的非芳族環或環系統。當碳環基為環系統時，兩個或兩個以上環可以稠合、橋連或螺連接方式接合在一起。碳環基可具有任何飽和度，其限制條件為環系統中的至少一個環不為芳族環。因此，碳環基包括環烷基、環烯基及環炔基。碳環基可具有3至20個碳原子，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍之術語「碳環基」的存在。碳環基亦可為具有3至10個碳原子之中等尺寸碳環基。碳環基亦可為具有3至6個碳原子的碳環基。碳環基可命名為「C3-6 碳環基」或類似名稱。碳環基環之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯基、2,3-二氫-茚、雙環[2.2.2]辛烷基、金剛烷基及螺[4.4]壬烷基。
「(碳環基)烷基」為作為取代基經伸烷基連接之碳環基，諸如「C4-10 (碳環基)烷基」及其類似基團，包括(但不限於)環丙基甲基、環丁基甲基、環丙基乙基、環丙基丁基、環丁基乙基、環丙基異丙基、環戊基甲基、環戊基乙基、環己基甲基、環己基乙基、環庚基甲基及其類似基團。在一些情況下，伸烷基為低碳伸烷基。
如本文所用，「環烷基」意謂完全飽和碳環基環或環系統。實例包括環丙基、環丁基、環戊基及環己基。
如本文所用，「環烯基」意謂具有至少一個雙鍵的碳環基環或環系統，其中環系統中沒有環為芳族環。實例為環己烯基。
如本文所用，「雜環基」意謂環主鏈中含有至少一個雜原子的非芳族環或環系統。雜環基可以稠合、橋連或螺連接方式接合在一起。雜環基可具有任何飽和度，其限制條件為環系統中的至少一個環不為芳族環。雜原子可存在於環系統中之非芳族或芳族環中。雜環基可具有3至20個環成員(亦即構成環主鏈之原子，包括碳原子及雜原子的數目)，但本發明定義亦涵蓋未指定數值範圍之術語「雜環基」的存在。雜環基亦可為具有3至10個環成員的中等尺寸雜環基。雜環基亦可為具有3至6個環成員的雜環基。雜環基可命名為「3員至6員雜環基」或類似名稱。
在各種實施例中，雜環基含有1至4個雜原子、1至3個雜原子、1至2個雜原子或1個雜原子。舉例而言，在各種實施例中，雜環基含有1至4個氮原子、1至3個氮原子、1至2個氮原子、2個氮原子及1個硫或氧原子、1個氮原子及1個硫或氧原子或1個硫或氧原子。在較佳六員單環雜環基中，雜原子係選自O、N或S中之一個至三個，且在較佳五員單環雜環基中，雜原子係選自一個或兩個選自O、N或S之雜原子。雜環基環之實例包括(但不限於)氮雜卓基、吖啶基、咔唑基、噌啉基、二氧戊環基、咪唑啉基、咪唑啶基、嗎啉基、環氧乙烷基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚基、哌啶基、哌嗪基、二側氧基哌嗪基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、吡咯啶二酮基、4-哌啶酮基、吡唑啉基、吡唑啶基、1,3-二氧雜環己烯基、1,3-二噁烷基、1,4-二氧雜環己烯基、1,4-二噁烷基、1,3-氧硫雜環己烷基、1,4-噁噻𠯤基、1,4-氧硫雜環己烷基、2H -1,2-噁嗪基、三噁烷基、六氫-1,3,5-三嗪基、1,3-間二氧雜環戊烯基、1,3-二氧戊環基、1,3-二硫雜環戊烯基、1,3-二硫雜環戊烷基、異噁唑啉基、異噁唑啶基、噁唑啉基、噁唑啶基、噁唑啶酮基、噻唑啉基、噻唑啶基、1,3-氧硫雜環戊烷基、吲哚啉基、異吲哚啉基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、四氫噻吩基、四氫硫代哌喃基、四氫-1,4-噻嗪基、噻嗎啉基、二氫苯并呋喃基、苯并咪唑啶基及四氫喹啉。
「(雜環基)烷基」為作為取代基經伸烷基連接之雜環基。實例包括(但不限於)咪唑啉基甲基及吲哚啉基乙基。
如本文所用，「醯基」係指-C(=O)R，其中R為氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。非限制性實例包括甲醯基、乙醯基、丙醯基、苯甲醯基及丙烯醯基。
「O-羧基」係指「-OC(=O)R」基團，其中R係選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「C-羧基」係指「-C(=O)OR」基團，其中R係選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。非限制性實例包括羧基(亦即-C(=O)OH)。
「氰基」係指「-CN」基團。
「氰酸酯基」係指「-OCN」基團。
「異氰酸酯基」係指「-NCO」基團。
「硫氰基」係指「-SCN」基團。
「異硫氰基」係指「-NCS」基團。
「亞磺醯基」係指「-S(=O)R」基團，其中R係選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「磺醯基」係指「-SO2 R」基團，其中R係選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「S-磺醯胺基」係指「-SO2 NRA RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「N-磺醯胺基」係指「-N(RA )SO2 RB 」基團，其中RA 及Rb 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「O-胺甲醯基」係指「-OC(=O)NRA RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「N-胺甲醯基」係指「-N(RA )OC(=O)RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「O-硫胺甲醯基」係指「-OC(=S)NRA RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「N-胺甲醯基」係指「-N(RA )OC(=O)RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「C-醯胺基」係指「-C(=O)NRA RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「N-醯胺基」係指「-N(RA )C(=O)RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「胺基」係指「-NRA RB 」基團，其中RA 及RB 各獨立地選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及5員至10員雜環基，如本文所定義。
「胺基烷基」係指經伸烷基連接之胺基。
「烷氧基烷基」係指經伸烷基連接之烷氧基，諸如「C2-8 烷氧基烷基」及其類似基團。
如本文所用，「天然胺基酸側鏈」係指天然存在之胺基酸的側鏈取代基。天然存在之胺基酸具有連接至α-碳的取代基。天然存在之胺基酸包括精胺酸、離胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸、半胱胺酸、甲硫胺酸、色胺酸、丙胺酸、異白胺酸、白胺酸、苯丙胺酸、纈胺酸、脯胺酸及甘胺酸。
如本文所用，「非天然胺基酸側鏈」係指非天然存在之胺基酸的側鏈取代基。非天然胺基酸包括β-胺基酸(β3 及β2 )、高胺基酸、脯胺酸及丙酮酸衍生物、經3-取代丙胺酸衍生物、甘胺酸衍生物、經環取代苯丙胺酸及酪胺酸衍生物、線性核心胺基酸及N-甲基胺基酸。例示性非天然胺基酸可購自Sigma-Aldridge，列於「非天然胺基酸及衍生物」下。亦參見Travis S. Young及Peter G. Schultz, 「Beyond the Canonical 20 Amino Acids: Expanding the Genetic Lexicon,」 J. Biol. Chem. 2010 285: 11039-11044，其以全文引用之方式併入本文中。
如本文所用，經取代之基團衍生自未經取代之親本基團，其中已存在一或多個氫原子換成另一原子或基團。除非另有指示，否則當認為基團「經取代」時，意謂該基團經一或多個獨立地選自以下之取代基取代：C1 -C6 烷基、C1 -C6 烯基、C1 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、C3 -C7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、C3 -C7 碳環基-C1 -C6 烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜環基-C1 -C6 -烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、芳基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、芳基(C1 -C6 )烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜芳基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜芳基(C1 -C6 )烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、鹵基、氰基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷氧基(C1 -C6 )烷基(亦即醚)、芳氧基、硫氫基(巰基)、鹵基(C1 -C6 )烷基(例如-CF3 )、鹵基(C1 -C6 )烷氧基(例如-OCF3 )、C1 -C6 烷基硫基、芳基硫基、胺基、胺基(C1 -C6 )烷基、硝基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫胺甲醯基、N-硫胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、S-磺醯胺基、N-磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、醯基、氰酸酯基、異氰酸酯基、硫氰基、異硫氰基、亞磺醯基、磺醯基及側氧基(=O)。每當描述基團「視情況經取代」時，該基團可經上述取代基取代。
在一些實施例中，經取代之基團經一或多個個別地且獨立地選自C1 -C4 烷基、胺基、羥基及鹵素之取代基取代。
應理解某些基團命名慣例可視上下文而定包括單基團或二基團。舉例而言，當取代基需要與分子其餘部分之兩個連接點時，應理解取代基為二基團。舉例而言，鑑別為烷基的需要兩個連接點之取代基包括諸如-CH2 -、-CH2 CH2 -、-CH2 CH(CH3 )CH2 -及其類似基團之二基團。其他基團命名慣例明確指定基團為二基團，諸如「伸烷基」或「伸烯基」。
當兩個R基團據稱「與其所連接之原子一起」形成環(例如碳環基、雜環基、芳基或雜芳基環)時，意謂原子及兩個R基團之整體單元為所述環。環不另外受限於個別地採用時之各R基團之定義。舉例而言，當存在以下子結構：
Figure 02_image005
且R1 及R2 定義為選自由氫及烷基組成之群，或R1 及R2 與其所連接之氮一起形成雜環基時，意謂R1 及R2 可選自氫或烷基，或者子結構具有結構：
Figure 02_image007
其中環A為含有所描繪之氮的雜環基環。
類似地，當兩個「相鄰」R基團據稱「與其所連接之原子一起」形成環時，意謂原子、插入鍵及兩個R基團之整體單元為所述環。舉例而言，當存在以下子結構：
Figure 02_image009
且R1 及R2 定義為選自由氫及烷基組成之群，或R1 及R2 與其所連接之原子一起形成芳基或碳環基時，意謂R1 及R2 可選自氫或烷基，或者子結構具有結構：
Figure 02_image011
其中A為含有所描繪之雙鍵的芳環或碳環基。
除非另有指示，否則每當取代基經描繪為二基團(亦即與分子之其餘部分具有兩個連接點)時，應理解，取代基可以任何方向組態連接。因此，舉例而言，描繪為-AE-或
Figure 02_image013
之取代基包括經定向使得A 在分子之最左連接點處連接之取代基以及A 在分子之最右連接點處連接的情況。
如本文所用，子結構：
Figure 02_image015
意謂A8 原子可在環或環系統A1 內的任何環原子位置中。該子結構：
Figure 02_image017
意謂A8 原子處於與由*指定之連接點緊鄰的環原子位置(即α)中。
如本文所用，化學基團之「電子等排體」為展現相同或類似特性之其他化學基團。舉例而言，四唑為羧酸之電子等排體，因為其模擬羧酸之特性，儘管其具有極不同的分子式。四唑為羧酸的許多可能等排替代物之一。涵蓋之其他羧酸電子等排體包括-SO3 H、-SO2 HNR、-PO2 (R)2 、-PO3 (R)2 、-CONHNHSO2 R、-COHNSO2 R及-CONRCN，其中R係選自氫、C1-6 烷基、C2-6 烯基、C2-6 炔基、C3-7 碳環基、C6-10 芳基、5員至10員雜芳基及3至10員雜環基，如本文所定義。另外，羧酸電子等排體可包括含有呈任何化學穩定氧化態之CH2 、O、S或N之任何組合的5員至7員碳環或雜環，其中該環結構之任何原子視情況在一或多個位置經取代。以下結構為所涵蓋碳環及雜環電子等排體之非限制性實例。該環結構之原子可視情況在一或多個位置處經如上文所定義之R取代。
Figure 02_image019
亦預期當向羧酸電子等排體添加化學取代基時，化合物保留羧酸電子等排體之特性。預期當羧酸電子等排體視情況經一或多個選自如上文所定義之R的部分取代時，則選擇取代及取代位置使得其不會消除化合物之羧酸等排特性。類似地，亦預期，若一或多個R取代基將破壞化合物之羧酸等排特性，則此類取代基在碳環或雜環羧酸電子等排體上的佈置並非在維持化合物之羧酸等排特性或為化合物之羧酸等排特性不可或缺的一或多個原子處之取代。
亦涵蓋在本說明書中未特定例示之其他羧酸電子等排體。
術語「藥劑」或「測試劑」包括任何物質、分子、元素、化合物、實體或其組合。其包括(但不限於)例如蛋白質、多肽、肽或模擬劑、較小有機分子、多糖、聚核苷酸及其類似物。其可為天然產物、合成化合物或化合物，或兩種或兩種以上物質的組合。除非另有規定，否則術語「藥劑」、「物質」及「化合物」在本文中可互換地使用。
本文所用之術語「類似物」係指結構上與參考分子類似但已按靶向及控制方式藉由用替代取代基置換參考分子之特定取代基進行改質的分子。相較於參考分子，熟習此項技術者將預期類似物展現相同、類似或改良之效用。為了鑑別具有改良特徵(諸如針對目標分子之較高結合親和力)之已知化合物的變化形式合成及篩選類似物為醫藥化學領域熟知的方法。治療方法
在一些實施例中，本文所揭示之化合物為鈣蛋白酶抑制劑。在一些實施例中，化合物可有效地充當CAPN1、CAPN2及/或CAPN9抑制劑。一些實施例提供醫藥組合物，其包含本文所揭示之一或多種化合物及醫藥學上可接受之賦形劑。
一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療肝纖維化的方法。
一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療原發性硬化性膽管炎的方法。一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療原發性膽道膽管炎的方法。一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療非酒精性脂肪肝病的方法。一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療非酒精性脂肪變性肝炎的方法。
一些實施例提供一種用有效量之一或多種如本文所揭示之化合物治療肝硬化的方法。在一些實施例中，肝硬化由選自由以下組成之群的病況中之一或多者造成：酒精性肝病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、自體免疫性肝炎、乳糜瀉、慢性病毒肝炎、血色素沉著症、特發性門脈纖維化及威爾遜病。
在一些實施例中，個體為哺乳動物。在一些特定實施例中，個體為人類。
其他實施例包括向有需要之個體投與化合物之組合。組合可包括本文所描述之化合物、組合物、醫藥組合物與額外藥劑。
一些實施例包括共同投與本文所描述之化合物、組合物及/或醫藥組合物與額外藥劑。「共同投與」意謂兩種或兩種以上藥劑可同時發現於患者之血流中，無論實際上投與之時間或方式。在一個實施例中，藥劑係同時投與的。在一個此類實施例中，組合投與係藉由將藥劑組合在單一劑型中來實現。在另一實施例中，藥劑係依序投與的。在一個實施例中，藥劑係經相同途徑，諸如經口投與的。在另一實施例中，藥劑係經不同途徑投與的，諸如一種經口投與且另一種靜脈內投與。
一些實施例包括本文所描述之化合物、組合物及/或醫藥組合物與額外藥劑之組合，諸如消炎劑，包括糖皮質激素、鎮痛劑(例如布洛芬(ibuprofen))、阿司匹林(aspirin)及調節Th2免疫反應之藥劑；免疫抑制劑，包括甲胺喋呤(methotrexate)、黴酚酸酯、環磷醯胺(cyclophosphamide)、環孢靈(cyclosporine)、沙立度胺(thalidomide)、泊利度胺(pomalidomide)、來氟米特(leflunomide)、羥氯喹(hydroxychloroquine)、硫唑嘌呤(azathioprine)、可溶性牛軟骨；血管擴張劑，包括內皮素受體拮抗劑、前列環素類似物、硝苯地平(nifedipine)及西地那非(sildenafil)；IL-6受體拮抗劑；選擇性及非選擇性酪胺酸激酶抑制劑；Wnt路徑調節劑；PPAR活化劑；凋亡蛋白酶-3抑制劑；LPA受體拮抗劑；B細胞消耗劑；CCR2拮抗劑；吡非尼酮(pirfenidone)；大麻素受體促效劑；ROCK抑制劑；miRNA靶向劑；鐸樣受體拮抗劑；CTGF靶向劑；NADPH氧化酶抑制劑；類胰蛋白酶抑制劑；TGFD抑制劑；鬆弛素受體促效劑；及自體性脂肪產生的再生細胞。
在本文所提供之一些實施例中，本文所描述之鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種選自由以下組成之群的額外藥劑組合投與：VAP-1抑制劑、ASBT抑制劑、雙重CCR2/5拮抗劑、抗膽汁鬱積性膽酸、FXR促效劑、FGFR1c/4促效劑、間質幹細胞(MSC)細胞療法、CCL24抑制劑及CCL11抑制劑。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種額外前述藥劑組合用於治療原發性硬化性膽管炎(PSC)之方法中，該方法包含向有需要之個體投與鈣蛋白酶抑制劑與一或多種額外前述藥劑之組合。
在本文所提供之一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種選自由以下組成之群的額外藥劑組合投與：奧貝膽酸、艾拉雷諾、森尼維若、司隆色替、菸鹼酸受體促效劑、SGLT2抑制劑、VAP-1抑制劑、FGF21模擬劑、腺苷A3受體促效劑、mTOT調節劑、FXR促效劑、半乳糖凝集素-3抑制劑、ABCA1活化劑、SCD1抑制劑、ACC抑制劑、I型NK T細胞抑制劑、pan-PPAR促效劑、DGAT2抑制劑、PPARα促效劑、甲狀腺激素R-b促效劑、5-LO/LT抑制劑、鹽皮質激素受體拮抗劑、FGF19模擬劑、凋亡蛋白酶抑制劑、GLP-1R促效劑、SIRT1/AMP促效劑、ACC抑制劑、己酮糖激酶抑制劑、GLP-1R促效劑、ASBT抑制劑、DGAT2/CYP2E1抑制劑、TLR4拮抗劑、甲狀腺激素R-b促效劑、IFN-γ受體拮抗劑、CB1拮抗劑、FGF21配體、P2Y13受體促效劑、CCL24抑制劑、MCH受體-1拮抗劑、PPARα,δ促效劑、DPP-4抑制劑、LXR拮抗劑、GLP1R促效劑、伊紅趨素-1抑制劑、β-克洛素(β-klotho)/FGFR1c促效劑、LOXL2抑制劑、AMPK活化劑、miR-103/107抑制劑、炎性體抑制劑、CD3拮抗劑及組織蛋白酶B抑制劑。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種額外前述藥劑組合用於治療非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)之方法中，該方法包含向有需要之個體投與鈣蛋白酶抑制劑與一或多種額外前述藥劑之組合。投與及醫藥組合物
化合物以治療有效劑量投與。儘管人類劑量程度尚未針對本文所描述之化合物最佳化，但一般而言，每日劑量可為約0.25 mg/kg體重至約120 mg/kg體重或更多、約0.5 mg/kg體重或更低至約70 mg/kg體重、約1.0 mg/kg體重至約50 mg/kg體重，或約1.5 mg/kg體重至約10 mg/kg體重。因此，對於向70 kg個體投與，劑量範圍將為約毫克/天至約8000毫克/天、約35毫克/天或更低至約7000毫克/天或更多、約70毫克/天至約6000毫克/天、約100毫克/天至約5000毫克/天，或約200毫克/天至約3000毫克/天。所投與活性組合物之量當然應取決於所治療之個體及疾病病狀、病痛之嚴重度、投與方式及時程以及處方醫師之判斷。
本文所揭示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的投與可經針對起類似效用之藥劑的任何公認投與模式進行，包括(但不限於)經口、皮下、靜脈內、鼻內、局部、經皮、腹膜內、肌肉內、肺內、經陰道、經直腸或眼內。經口及非經腸投與慣用於治療為較佳實施例之主題的適應症。
如上文所描述使用之化合物可調配成適用於治療此等病況之醫藥組合物。使用標準醫藥調配技術，諸如以全文引用之方式併入本文中之Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 第21版, Lippincott Williams & Wilkins (2005)中所揭示之彼等技術。因此，一些實施例包括醫藥組合物，其包含：(a)安全及治療有效量之本文所描述之化合物(包括其對映異構體、非對映異構體、互變異構體、多晶型物及溶劑合物)，或其醫藥學上可接受之鹽；以及(b)醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或其組合。
除如上文所描述使用之所選化合物以外，一些實施例包括含有醫藥學上可接受之載劑的組合物。術語「醫藥學上可接受之載劑」或「醫藥學上可接受之賦形劑」包括任何及全部溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑，及其類似物。此類介質及藥劑用於醫藥活性物質之用途為此項技術中所熟知。除非任何習知介質或藥劑與活性成分不相容，否則預期其於治療組合物中之用途。另外，可包括如此項技術中常用之各種佐劑。在醫藥組合物中包括各種組分之考慮因素描述於例如以全文引用的方式併入本文中之Gilman等人(編) (1990); Goodman and Gilman's:  The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第8版, Pergamon Press中。
可充當醫藥學上可接受之載劑或其組分的物質之一些實例為：糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及甲基纖維素；粉末狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；固體潤滑劑，諸如硬脂酸及硬脂酸鎂；硫酸鈣；植物油，諸如花生油、棉籽油、芝麻油、橄欖油、玉米油及可可油；多元醇，諸如丙二醇、丙三醇、山梨糖醇、甘露糖醇及聚乙二醇；褐藻酸；乳化劑，諸如TWEENS；潤濕劑，諸如月桂基硫酸鈉；著色劑；調味劑；制錠劑、穩定劑；抗氧化劑；防腐劑；無熱原質水；等張鹽水；以及磷酸鹽緩衝溶液。
打算與本發明化合物結合使用的醫藥學上可接受之載劑的選擇基本上藉由化合物待投與的方式來確定。
本文所描述之組合物較佳以單位劑型提供。如本文所用，「單位劑型」為含有適合於根據良好醫學實踐以單一劑量向動物、較佳哺乳動物個體投與之量的化合物的組合物。然而，單一或單位劑型之製劑不暗示劑型每天投與一次或在每個療法時程中投與一次。此此類劑型涵蓋每天投與一次、兩次、三次或更多次且可以輸注形式在一段時間(例如，約30分鐘至約2至6小時)內投與、或以連續輸注形式投與，且可在療法時程期間給予一次以上，但不特別排除單次投與。熟練技術人員將認識到調配不特別涵蓋療法的整個時程且此類決策將由熟習治療而非調配技術的技術者作出。
如上文所描述使用之組合物可為適合於多種投與途徑的多種形式中之任一者，投與途徑例如經口、經鼻、經直腸、局部(包括經皮)、經眼、腦內、顱內、鞘內、動脈內、靜脈內、肌肉內或其他非經腸投與途徑。熟練技術人員將瞭解經口及經鼻組合物包含藉由吸入投與且使用可用方法製備之組合物。視所要特定投與途徑而定，可使用此項技術中熟知的多種醫藥學上可接受之載劑。醫藥學上可接受之載劑包括例如固體或液體填充劑、稀釋劑、增溶劑、表面活性劑及囊封物質。可包括視情況存在之醫藥活性材料，其實質上不干擾化合物的抑制活性。結合化合物使用的載劑之量足以根據單位劑量之化合物提供用於投與的實際量之物質。用於製備適用於本文所描述之方法之劑型的技術及組合物描述於以下全部以引用之方式併入本文中的參考文獻中：Modern Pharmaceutics, 第4版, 第9章及第10章(編者Banker及Rhodes, 2002)；Lieberman等人, Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989)；以及Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 第8版 (2004)。
可使用各種經口劑型，包括諸如錠劑、膠囊、顆粒及散裝粉末之固體形式。錠劑可經壓製、錠劑研磨、包覆腸溶包衣、包覆糖衣、包覆膜衣或多次壓製，含有適合黏合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調味劑、引流劑及熔融劑。液體經口劑型包括水溶液、乳液、懸浮液、溶液及/或自非起泡顆粒復原之懸浮液及自起泡顆粒復原之起泡製劑，含有適合溶劑、防腐劑、乳化劑、懸浮劑、稀釋劑、甜味劑、熔融劑、著色劑及調味劑。
適合於製備用於經口投與之單位劑型的醫藥學上可接受之載劑為此項技術中所熟知。錠劑通常包含習知醫藥學上相容的佐劑，作為惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、甘露糖醇、乳糖及纖維素；黏合劑，諸如澱粉、明膠及蔗糖；崩解劑，諸如澱粉、褐藻酸及交聯羧甲基纖維素；潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸及滑石。諸如二氧化矽之助流劑可用於改善粉末混合物之流動特徵。可針對外觀添加諸如FD&C染料之著色劑。諸如阿斯巴甜糖、糖精、薄荷醇、胡椒薄荷及水果調味劑之甜味劑及調味劑適用於咀嚼錠劑之佐劑。膠囊通常包含一或多種上文揭示之固體稀釋劑。載劑組分之選擇取決於次要考慮因素，如口味、成本及存放穩定性，其不關鍵且熟習此項技術者容易選擇。
經口組合物亦包括液體溶液、乳液、懸浮液及其類似物。適合於製備此類組合物之醫藥學上可接受之載劑為此項技術中所熟知。用於糖漿、酏劑、乳液及懸浮液之載劑之典型組分包括乙醇、丙三醇、丙二醇、聚乙二醇、液體蔗糖、山梨糖醇及水。針對懸浮液，典型懸浮劑包括甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、AVICEL RC-591、黃蓍膠及褐藻酸鈉；典型潤濕劑包括卵磷脂及聚山梨醇酯80；且典型防腐劑包括對羥基苯甲酸甲酯及苯甲酸鈉。經口液體組合物亦可含有一或多種組分，諸如上文揭示之甜味劑、調味劑及著色劑。
此類組合物亦可藉由習知方法，通常使用pH或時間相依包衣包覆，使得本發明化合物在胃腸道中於所要局部施用附近釋放，或在多個時間釋放來延長所要作用。此類劑型通常包括(但不限於)以下中之一或多者：鄰苯二甲酸乙酸纖維素、聚乙酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、乙基纖維素、Eudragit包衣、蠟及蟲膠。
本文所描述之組合物可視情況包括其他藥物活性劑。
適用於實現本發明化合物之全身遞送之其他組合物包括舌下、經頰及經鼻劑型。此類組合物通常包含以下中之一或多者：可溶性填充劑物質，諸如蔗糖、山梨糖醇及甘露糖醇；以及黏合劑，諸如阿拉伯膠、微晶纖維素、羧甲基纖維素及羥丙基甲基纖維素。亦可包括上文所揭示之助流劑、潤滑劑、甜味劑、著色劑、抗氧化劑及調味劑。
調配用於局部眼部使用之液體組合物經調配成使得其可局部投與至眼睛。儘可能地使舒適度最大，但有時調配考慮因素(例如藥物穩定性)可能會迫使其低於最佳舒適度。在無法使舒適度最大的情況下，液體應調配成使得該液體為患者可耐受以供局部眼部使用的。另外，眼部可接受液體應經包裝用於單次使用，或含有防腐劑以防止在多次使用時發生污染。
對於眼部施用，通常使用生理鹽水溶液作為主要媒劑製備溶液或藥劑。眼用溶液較佳應使用適當緩衝液系統維持在舒適pH下。調配物亦可含有習知的醫藥學上可接受之防腐劑、穩定劑及界面活性劑。
可用於本文所揭示之醫藥組合物中的防腐劑包括(但不限於)氯化苯甲烴銨、PHMB、氯丁醇、硫柳汞、苯汞、乙酸酯及硝酸苯汞。適用界面活性劑為例如Tween 80。同樣，各種適用媒劑可用於本文揭示之眼用製劑中。此等媒劑包括(但不限於)聚乙烯醇、普維酮(povidone)、羥丙基甲基纖維素、泊洛沙姆(poloxamer)、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素及純化水。
可按需要或便利添加張力調節劑。其包括(但不限於)鹽、特定言之氯化鈉、氯化鉀、甘露糖醇及丙三醇，或任何其他適合眼部可接受張力調節劑。
可使用用於調節pH之各種緩衝劑及方式，只要所得製劑為眼部可接受即可。對於許多組合物，pH將介於4與9之間。因此，緩衝劑包括乙酸鹽緩衝劑、檸檬酸鹽緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑及硼酸鹽緩衝劑。酸或鹼可用於按需要調節此等調配物之pH。
類似地，眼部可接受抗氧化劑包括(但不限於)偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙醯半胱胺酸、丁基化羥基甲氧苯及丁基化羥基甲苯。
可包括在眼用製劑中之其他賦形劑組分為螯合劑。適用螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉，但其他螯合劑亦可代替或與其結合使用。
對於局部使用，採用含有本文所揭示之化合物的乳膏、軟膏、凝膠、溶液或懸浮液等。局部調配物一般可包含醫藥載劑、共溶劑、乳化劑、滲透增強劑、防腐系統及潤膚劑。
對於靜脈內投與，本文所描述之化合物及組合物可溶解或分散於醫藥學上可接受之稀釋劑中，諸如鹽水或右旋糖溶液。可包括適合賦形劑來實現所要pH，該等賦形劑包括(但不限於)NaOH、碳酸鈉、乙酸鈉、HCl及檸檬酸。在各種實施例中，最終組合物之pH範圍為2至8，或較佳為4至7。抗氧化劑賦形劑可包括亞硫酸氫鈉、丙酮亞硫酸氫鈉、甲醛鈉、次硫酸鹽、硫脲及EDTA。最終靜脈內組合物中存在的適合賦形劑的其他非限制性實例可包括磷酸鈉或磷酸鉀、檸檬酸、酒石酸、明膠及碳水化合物，諸如右旋糖、甘露糖醇及聚葡萄糖。其他可接受賦形劑描述於Powell等人, Compendium of Excipients for Parenteral Formulations,PDA J Pharm Sci and Tech 1998 ,52 238-311及Nema等人, Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions,PDA J Pharm Sci and Tech 2011 ,65 287-332中，其皆以全文引用之方式併入本文中。亦可包括抗微生物劑來實現抑菌或抑真菌溶液，包括(但不限於)硝酸苯汞、硫柳汞、苄索氯銨、氯化苯甲烴銨、酚類、甲酚及氯丁醇。
用於靜脈內投與之組合物可以一或多種固體形式提供給照護者，該(等)固體在即將投與之前用諸如滅菌水、鹽水或右旋糖水溶液之適合稀釋劑復原。在其他實施例中，組合物以準備非經腸投與之溶液提供。在其他實施例中，組合物以在投與之前進一步稀釋的溶液提供。在包括投與本文所描述之化合物與另一藥劑之組合的實施例中，組合可以混合物形式提供給照護者，或照護者可在投與之前混合兩種藥劑，或兩種藥劑可分開投與。
本文所描述之活性化合物的實際劑量取決於特定化合物及待治療之病況；適當劑量之選擇完全處於熟練技術人員的知識範圍內。
若視需要，本文所描述之化合物及組合物可提供於含有一或多個含有活性成分之單位劑型的包裝或施配器裝置中。此類包裝或裝置可例如包含金屬或塑膠箔，諸如泡殼包裝，或玻璃及橡膠塞，諸如小瓶中之橡膠塞。包裝或施配器裝置可附有投與說明書。亦可製備調配於相容醫藥載劑中之本文所描述之化合物及組合物，將其置於適當容器中且標記用於治療指定病況。
調配物中之化合物的量可在熟習此項技術者所用之全範圍內變化。通常，以重量百分比(wt%)計，調配物將含有基於全部調配物約0.01-99.99 wt%本發明技術之化合物，其餘為一或多種適合醫藥賦形劑。較佳地，化合物以約1-80 wt%之含量存在。下文描述代表性醫藥調配物。調配物實例
以下為含有式I化合物之代表性醫藥調配物。調配物實例 1-- 錠劑調配物
緊密混合以下成分且壓製成單一刻痕錠劑。 成分                                                    量/錠劑，mg 本文所揭示之化合物                                  400 玉米澱粉                                                  50 交聯羧甲基纖維素鈉                                  25 乳糖                                                        120 硬脂酸鎂                                                   5調配物實例 2-- 膠囊調配物
緊密混合以下成分且裝載至硬殼明膠膠囊中。 成分                                               量/膠囊，mg 本文所揭示之化合物                             200 噴霧乾燥之乳糖                                   148 硬脂酸鎂                                            2調配物實例 3-- 懸浮液調配物
混合以下成分以形成經口投與之懸浮液。 成分                                               量 本文所揭示之化合物                         1.0 g 反丁烯二酸                                     0.5 g 氯化鈉                                            2.0 g 對羥基苯甲酸甲酯                            0.15 g 對羥基苯甲酸丙酯                            0.05 g 粒化糖                                            25.0 g 山梨糖醇(70%溶液)                          13.00 g Veegum K (Vanderbilt Co.)                    1.0 g 調味劑                                            0.035 mL 著色劑                                            0.5 mg 蒸餾水                                            適量以達到100 mL調配物實例 4-- 可注射調配物
混合以下成分以形成可注射調配物。 成分                                             量 本文所揭示之化合物                    0.2 mg-20 mg 乙酸鈉緩衝溶液，0.4 M               2.0 mL HCl (1N)或NaOH (1N)               適量以達到適合pH 水(經蒸餾，無菌)                        適量以達到20 mL調配物實例 5-- 栓劑調配物
總重量2.5 g之栓劑藉由混合本發明技術之化合物與Witepsol® H-15 (飽和植物脂肪酸之三酸甘油酯；Riches-Nelson, Inc., New York)製備，且具有以下組成： 成分                                               量 本文所揭示之化合物                         500 mg Witepsol® H-15                                   其餘化合物
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自具有式I結構之化合物：
Figure 02_image021
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A1 係選自由以下組成之群：視情況經取代之5員至10員雜環基，其限制條件為該5員至10員雜環基不經側氧基取代；視情況經取代之5員、8員或9員雜芳基；以及視情況經取代之C3-10 碳環基； A2 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基、-CR2 -、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A4 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-4 烷基、-(CR2 )n -S-(CR2 )n -、-(CR2 )n -S(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -SO2 -(CR2 )n -、-(CR2 )n- O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=S)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NR-(CR2 )n -、-(CR2 )n -CH=CH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -OC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)-(CR2 )n -及單鍵； 當A2 及A4 為單鍵時，A3 直接連接至A8 ； A3 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基；或若A2 係選自視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基，則A3 係選自由以下組成之群：氫、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-C≡CH及視情況經取代之2員至5員聚乙二醇； A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、及視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R8 所連接之碳； A8 為A1 之環成員且係選自由C、CH及N組成之群； R8 係選自由以下組成之群：-COR1 、-CN、-CH=CHSO2 R及-CH2 NO2 ； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
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； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及視情況經取代之5員至10員雜芳基；且 R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自具有式II結構之化合物：
Figure 02_image029
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A1 係選自由以下組成之群：視情況經取代之5員至10員雜環基，其限制條件為該6員至10員雜環基不經側氧基取代；視情況經取代之5員、8員或9員雜芳基；以及視情況經取代之C3-10 碳環基； A2 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-CR2 -、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A4 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-4 烷基、-(CR2 )n -S-(CR2 )n -、-(CR2 )n -S(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -SO2 -(CR2 )n -、-(CR2 )n- O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=S)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NR-(CR2 )n -、-(CR2 )n -CH=CH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -OC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)-(CR2 )n -及單鍵； 當A2 及A4 為單鍵時，A3 直接連接至A8 ； A3 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基；或若A2 係選自視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基，則A3 係選自由以下組成之群：氫、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-C≡CH及視情況經取代之2員至5員聚乙二醇； G為視情況經取代之C3 至C7 碳環基或視情況經取代之4員至7員雜環基； A8 為A1 之環成員且係選自由C及N組成之群； R8 係選自由以下組成之群：-COR1 、-CN、-CH=CHSO2 R、-CH2 NO2 ； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
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； R14 為鹵基；且 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基；R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且各n獨立地經選擇為0至3之整數。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式III結構之化合物：
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或其醫藥學上可接受之鹽，其中： P2 為視情況經取代之環狀部分，其尺寸及組態使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，P2 之至少一個原子與選自由以下組成之群的至少一個鈣蛋白酶9 P2袋部分形成非極性相互作用且在距其5Å或更近的範圍內：Gly190、Phe233、Gly253、His254以及Ala255； L1 為一鍵或由1至25個選自由以下組成之群的原子組成之部分：碳、氧、氮、氫及硫； P3 為視情況經取代之環狀部分，其經L1 定位且尺寸及組態使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，P3 之至少一個原子與選自由以下組成之群的至少一個鈣蛋白酶9 P3袋部分形成非極性相互作用且在距其5Å或更近的範圍內：Gly189、Gly190、Ser191、Thr236以及Gly253； R10 為側氧基且經P2 定位使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，R10 與鈣蛋白酶9 Gly190醯胺形成極性相互作用且在距其4Å或更近的範圍內； R11 為氮且經其所鍵結之碳定位使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，R11 與鈣蛋白酶9 Gly253羰基形成極性相互作用且在距其4Å或更近的範圍內； L2 為一鍵或由1至25個選自由以下組成之群的原子組成之部分：碳、氧、氮、氫及硫； P1 為經L2 定位之部分且尺寸及組態使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，P1 之至少一個原子與選自由以下組成之群的至少一個鈣蛋白酶9 P1袋部分形成非極性相互作用且在距其5Å或更近的範圍內：Gly95、Lys188、Gly189及Ser242； R9 為經其所連接之碳定位的部分，使得當化合物結合至鈣蛋白酶9時，R9 之至少一個原子與選自由以下組成之群的至少一個鈣蛋白酶9部分形成極性相互作用且在距其4Å或更近的範圍內：Gln91、Cys97及His254；且 R6 係選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由下表1a及表1b中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組成的群。 表 1a
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表 1b
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式I至式III及/或表1a及表1b之化合物可根據描述於全文以引用之方式併入本文中的國際公開案第WO 2018/064119號中之方法製備。
在本文所提供之一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式IV結構之化合物：
Figure 02_image297
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A1 係選自由以下組成之群：經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之9員至14員雜芳基、視情況經取代之9員至14員雜環基及視情況經取代之9員至14員碳環基， 其中當A1 為經取代之C6-10 芳基時；該芳基經一或多個選自由以下組成之群的部分取代：Cl、F、Br、Ph、乙炔、環丙基、CN、羥基、苯基、視情況經鹵基取代之C1-4 烷基及視情況經鹵基取代之C1- C6 烷氧基； A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R8 所連接之碳； R8 係選自由以下組成之群：-COR1 、-CN、-CH=CHSO2 R、-CH2 NO2 ； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、 -C(F)=CHCH2 CH3 、
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Figure 02_image301
Figure 02_image303
；且 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經一或多個R13 取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及視情況經取代之5員至10員雜芳基；且 R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 R13 係獨立地選自C1 -C6 烷基、C1 -C6 烯基、C1 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、C3 -C7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、C3 -C7 碳環基-C1 -C6 烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜環基-C1 -C6 烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、芳基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、芳基(C1 -C6 )烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜芳基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、5員至10員雜芳基(C1 -C6 )烷基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)、鹵基、氰基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷氧基(C1 -C6 )烷基(亦即醚)、芳氧基、硫氫基(巰基)、鹵基(C1 -C6 )烷基(例如-CF3 )、鹵基(C1 -C6 )烷氧基(例如-OCF3 )、C1 -C6 烷基硫基、芳基硫基、胺基、胺基(C1 -C6 )烷基、硝基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫胺甲醯基、N-硫胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、S-磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、醯基、氰酸酯基、異氰酸酯基、硫氰基、異硫氰基、亞磺醯基、磺醯基及側氧基(=O)。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由下表2中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組成的群。表 2
Figure 02_image305
Figure 02_image307
Figure 02_image309
Figure 02_image311
或其醫藥學上可接受之鹽。
式IV及/或表2之化合物可根據描述於本文所提供之實例中之方法製備。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式V結構之化合物：
Figure 02_image313
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A1 係選自由以下組成之群：視情況經取代之5員至10員雜環基；視情況經取代之5員、8員或9員雜芳基；及視情況經取代之C3-10 碳環基； A2 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-CR2 -、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A4 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-4 烷基、-(CR2 )n -S-(CR2 )n -、-(CR2 )n -S(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -SO2 -(CR2 )n -、-(CR2 )n- O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=S)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NR-(CR2 )n -、-(CR2 )n -CH=CH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -OC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)-(CR2 )n -及單鍵； 當A2 及A4 為單鍵時，A3 直接連接至A8 ； A3 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基；或若A2 係選自視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基，則A3 係選自由以下組成之群：氫、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-C≡CH及視情況經取代之2員至5員聚乙二醇； A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R8 所連接之碳； A8 為A1 之環成員且係選自由C及N組成之群； R係獨立地選自-H、鹵基、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基； R2 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基； R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 各n獨立地經選擇為0至3之整數。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式VI結構之化合物：
Figure 02_image315
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R6 所連接之碳； Y係選自由NR5 及S組成之群； X及Z各獨立地選自由C(R4 )及N組成之群； J係選自由O及S組成之群； 各R4 係獨立地選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基、C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、C1-6 鹵烷基及C1-6 鹵烷氧基取代)、鹵基、羥基及C1-6 烷氧基；且 R5 係選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基及C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、-COOR2 、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
Figure 02_image317
Figure 02_image319
Figure 02_image321
； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基； R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 各n獨立地經選擇為0至3之整數；且其中化合物不選自由以下組成之群：
Figure 02_image323
Figure 02_image325
。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式VII結構之化合物：
Figure 02_image327
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、- NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R6 所連接之碳； Y係選自由NR5 及S組成之群； X及Z各獨立地選自由C(R4 )及N組成之群； J係選自由O及S組成之群； 各R4 係獨立地選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基、C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、C1-6 鹵烷基及C1-6 鹵烷氧基取代)、鹵基、羥基及C1-6 烷氧基；且 R5 係選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基及C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、-COOR2 、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
Figure 02_image329
Figure 02_image331
Figure 02_image333
； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基； R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 各n獨立地經選擇為0至3之整數；且其中化合物不選自由以下組成之群：
Figure 02_image335
Figure 02_image337
Figure 02_image339
。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式VIII結構之化合物：
Figure 02_image341
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R6 所連接之碳； Y係選自由以下組成之群：NR5 、O、S及SO2 ； X及Z各獨立地選自由C(R4 )及N組成之群； J係選自由O及S組成之群； 各R4 係獨立地選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基、C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、C1-6 鹵烷基及C1-6 鹵烷氧基取代)、鹵基、羥基及C1-6 烷氧基；且 R5 係選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基及C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、-COOR2 、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
Figure 02_image343
Figure 02_image345
Figure 02_image347
； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基； R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 各n獨立地經選擇為0至3之整數。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為具有式IX結構之化合物：
Figure 02_image349
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R6 所連接之碳； Y係選自由以下組成之群：NR5 、O、S及SO2 ； X及Z各獨立地選自由C(R4 )及N組成之群； J係選自由O及S組成之群； 各R4 係獨立地選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基、C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1-6 烷基、C1-6 烷氧基、C1-6 鹵烷基及C1-6 鹵烷氧基取代)、鹵基、羥基及C1-6 烷氧基；且 R5 係選自由以下組成之群：-H、C1-4 烷基、C1-4 鹵烷基及C3-7 碳環基(視情況經鹵基、C1 -C6 烷基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 鹵烷基及C1 -C6 鹵烷氧基取代)； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、-COOR2 、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
Figure 02_image351
Figure 02_image353
Figure 02_image355
； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之C6-10 芳基(C1 -C6 )烷基及視情況經取代之5員至10員雜芳基； R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基；且 各n獨立地經選擇為0至3之整數。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由下表4中所列之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組成的群。表 4
Figure 02_image357
Figure 02_image359
Figure 02_image361
Figure 02_image363
Figure 02_image365
Figure 02_image367
Figure 02_image369
式V至式IX及表4之化合物可根據描述於本文所提供之實例中之方法製備。
在一些實施例中，本文提供一種治療疾病或病症之方法，該疾病或病症選自由以下組成之群：原發性硬化性膽管炎、原發性膽道膽管炎、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪變性肝炎及肝硬化；該方法包含向有需要之個體投與一或多種鈣蛋白酶抑制劑。
在一些實施例中，肝硬化由選自由以下組成之群的病況中之一或多者造成：酒精性肝病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、自體免疫性肝炎、乳糜瀉、慢性病毒肝炎、血色素沉著症、特發性門脈纖維化及威爾遜病。
在一些實施例中，一或多種鈣蛋白酶抑制劑可為本文所揭示之化合物。在一些實施例中，一或多種鈣蛋白酶抑制劑可為式I、式II、式III、式IV、式V、式VI、式VII、式VIII或式IX中任一者之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式I化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式II化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式III化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式IV化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式V化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式VI化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式VII化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式VIII化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為式IX化合物。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為表1a、表1b、表2、表3及表4中之任一者中所列之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為表1a或表1b中所列之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為表2中所列之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為表3中所列之化合物。在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可為表4中所列之化合物。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由以下組成之群：
Figure 02_image371
Figure 02_image373
或其醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由以下組成之群：
Figure 02_image375
或其醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可選自由以下組成之群：
Figure 02_image377
或其醫藥學上可接受之鹽。
在一些實施例中，一或多種鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種選自由以下組成之群的額外藥劑組合投與：VAP-1抑制劑、ASBT抑制劑、雙重CCR2/5拮抗劑、抗膽汁鬱積性膽酸、FXR促效劑、FGFR1c/4促效劑、間質幹細胞(MSC)細胞療法、CCL24抑制劑及CCL11抑制劑。在一些實施例中，一或多種鈣蛋白酶抑制劑及一或多種額外前述藥劑可用於治療個體之原發性硬化性膽管炎。
在一些實施例中，鈣蛋白酶抑制劑可與一或多種選自由以下組成之群的額外藥劑組合投與：奧貝膽酸、艾拉雷諾、森尼維若、司隆色替、菸鹼酸受體促效劑、SGLT2抑制劑、VAP-1抑制劑、FGF21模擬劑、腺苷A3受體促效劑、mTOT調節劑、FXR促效劑、半乳糖凝集素-3抑制劑、ABCA1活化劑、SCD1抑制劑、ACC抑制劑、I型NK T細胞抑制劑、pan-PPAR促效劑、DGAT2抑制劑、PPARα促效劑、甲狀腺激素R-b促效劑、5-LO/LT抑制劑、鹽皮質激素受體拮抗劑、FGF19模擬劑、凋亡蛋白酶抑制劑、GLP-1R促效劑、SIRT1/AMP促效劑、ACC抑制劑、己酮糖激酶抑制劑、GLP-1R促效劑、ASBT抑制劑、DGAT2/CYP2E1抑制劑、TLR4拮抗劑、甲狀腺激素R-b促效劑、IFN-γ受體拮抗劑、CB1拮抗劑、FGF21配體、P2Y13受體促效劑、CCL24抑制劑、MCH受體-1拮抗劑、PPARα,δ促效劑、DPP-4抑制劑、LXR拮抗劑、GLP1R促效劑、伊紅趨素-1抑制劑、β-克洛素(β-klotho)/FGFR1c促效劑、LOXL2抑制劑、AMPK活化劑、miR-103/107抑制劑、炎性體抑制劑、CD3拮抗劑及組織蛋白酶B抑制劑。在一些實施例中，一或多種鈣蛋白酶抑制劑及一或多種額外前述藥劑可用於治療個體之非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)。
出於說明性目的而包括以下實例。當然，該等實例不應解釋為特別限制本發明之範疇。此等實例在申請專利範圍之範疇內的變化形式處於熟習此項技術者之領域內，且視為屬於如本文描述及主張的本發明範疇內。讀者將認識到，熟悉本發明且熟習此項技術之熟練技術人員不需詳盡實例即能夠製備及使用本文所描述之主題。以下實例將進一步描述本發明，且僅用於說明之目的，且不應視為限制性的。 實例
熟練技術人員將顯而易知，製備與本文主張之化合物有關的前驅體及官能基之方法一般描述於文獻中。在此等反應中，亦可使用本身為一般熟習此項技術者已知但未更詳細地提及之變體。涉及文獻及本發明之熟練技術人員經充分裝備以製備任何該等化合物。
應認識到，有機化學技術之熟練技術人員可容易地在不經進一步指導之情況下進行操作，亦即此完全在進行此等操作之熟練技術人員的範疇及實踐內。此等包括羰基化合物還原成其對應醇、氧化、醯化、親電及親核芳族取代、醚化、酯化及皂化及其類似者。此等操作論述於標準文本中，諸如March Advanced Organic Chemistry (Wiley), Carey及Sundberg, Advanced Organic Chemistry(以全文引用之方式併入本文中)及其類似物。除非另有規定，否則全部本發明中間化合物不經進一步純化即可使用。
熟練技術人員將容易瞭解某些反應最佳在分子中的其他官能基經遮蔽或保護時進行，因此避免任何非所需副反應及/或提高反應產率。熟練技術人員通常利用保護基來實現此類產率提高或避免非所需反應。此等反應見於文獻中且亦完全處於熟練技術人員之範疇內。許多此等操作之實例可見於例如T. Greene及P. Wuts Protecting Groups in Organic Synthesis, 第4版, John Wiley & Sons (2007)中，其以全文引用之方式併入本文中。
提供以下實例流程來指導讀者，且表示用於製備本文例示之化合物的較佳方法。此等方法不為限制性的，且將顯而易見可採用其他途徑來製備此等化合物。此類方法特別包括基於固相之化學性質，包括組合化學。熟練技術人員經充分裝備以藉由文獻及本發明給定之彼等方法製備此等化合物。下文描繪之合成流程中所用的化合物編號僅用於彼等特定流程，且不應視為本申請案之其他部分中的相同編號或與本申請案之其他部分的相同編號混淆。
本文所用之商標僅為實例且反映本發明所用之說明性材料。熟練技術人員將認識到可預期批次、製造製程及其類似者中的變化。因此，實例及其中所用之商標為非限制性的，且其不打算為限制性的，但僅為熟練技術人員可選擇執行本發明之一或多個實施例之方式的說明。
以下縮寫具有指定含義：
Figure 108122979-A0304-0001
提供下文所示之實例流程來指導讀者，且總體而言表示用於製備本文涵蓋之化合物的實例方法。此外，用於製備本文所描述之化合物的其他方法根據以下反應流程及實例將容易為一般熟習此項技術者顯而易知。除非另有指示，否則全部變數均如上文所定義。
實例部分I、部分II及部分III具有獨立編號之實例及化合物編號。對發現於實例部分I、部分II及部分III中之任一者中的化合物編號或實例編號之提及係指彼特定部分之化合物及實例。實例部分 I 實施例1 (S )-N-(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,6-二氯苯甲醯胺(1)
Figure 02_image379
向化合物2,6-二氯苯甲酸(300 mg，1.57 mmol)及化合物1A (366.1 mg，1.59 mmol)於DMF (8 mL)之溶液中添加HBTU (714.8 mg，1.88 mmol)。在25℃下攪拌混合物0.1小時，且隨後添加DIEA (204.9 mg，1.59 mmol)。在25℃攪拌所得混合物1小時。將反應混合物用EtOAc (100 mL)稀釋，依次用1 N HCl (20 mL)、飽和NaHCO3 (50 mL×2)、水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粉色固體，藉由用DCM (1 mL)及PE (10 mL)之混合物濕磨將其純化，得到呈淺粉色固體之化合物1B (380 mg，產率：65.91%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 )δ 8.67 - 8.32 (m, 1H), 7.42 - 7.25 (m, 6H), 7.23 -7.09 (m, 4H), 5.78 - 5.71 (m, 1H), 4.64 - 4.40 (m, 1H), 4.14 - 4.07 (m, 0.7H), 3.79 - 3.75 (m, 0.4H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.65 - 2.57 (m, 1H)。
在N2 下向化合物1B (100 mg，272.3 μmol)於DCM (15 mL)及DMSO (1 mL)中之混合物中一次性添加DMP (808.5 mg，1.91 mmol)，且隨後在25℃下攪拌混合物1小時。用飽和NaHCO3 (15 mL)及飽和Na2 S2 O3 (15 mL)淬滅混合物。將混合物攪拌0.5小時，用二氯甲烷(50 mL)稀釋。將有機層用水(20 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到白色固體，藉由用2-異丙氧基丙烷(5 mL)濕磨將其純化，得到呈白色固體之化合物1 (60 mg，產率：60.33%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 9.20 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 3H), 7.33 - 7.27 (m, 4H), 7.25 - 7.19 (m, 1H), 5.58 - 5.50 (m, 1H), 3.24-3.17 (m, 1H), 2.84 - 2.74 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 364.9。 實例2 (S )-2,6-二氯-N-(4-(環丙胺基)-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)苯甲醯胺(2)
Figure 02_image381
遵循實例1之程序使用對應中間物2A 及2,6-二氯苯甲酸製備化合物2。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 )δ 9.23 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.89 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 7.45 - 7.36 (m,3H), 7.31 - 7.25 (m, 4H), 7.22 - 7.18 (m, 1H), 5.53 - 5.42 (m, 1H), 3.22 - 3.15 (m, 1H), 2.81 - 2.74 (m, 2H), 0.69 - 0.58 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 405.1。 實例3 (S )-N-(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,4,6-三氟苯甲醯胺(3)
Figure 02_image383
遵循實例1之程序使用對應中間物1A 及2,4,6-三氟苯甲酸製備化合物3 。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 9.19 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.30 - 7.19 (m, 7H), 5.41 - 5.34 (m, 1H), 3.17 (dd,J = 3.4, 14.0 Hz, 1H), 2.75 (dd,J = 10.0, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 351.1。 實例4 (S )-N-(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-氟苯甲醯胺(4)
Figure 02_image385
遵循實例1之程序使用對應中間物1A 及4-氟苯甲酸製備化合物4 。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 )δ 8.89 (br d,J = 7.0 Hz, 1H), 8.09 (br s, 1H), 7.90 - 7.78 (m, 3H), 7.35 - 7.18 (m, 7H), 5.35 (br s, 1H), 3.21 (br d,J = 11.5 Hz, 1H), 2.96 - 2.85 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 315.1。 實例5N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-9H -二苯并哌喃-9-甲醯胺(5)
Figure 02_image387
向化合物5A (250 mg，1.11 mmol)及化合物1A (305.9 mg，1.33 mmol，HCl)於DMF (3 mL)中之混合物中添加HBTU (502.9 mg，1.33 mmol)，持續0.1 h，隨後添加DIEA (571.3 mg，4.42 mmol)，在N2 氛圍下在25℃下攪拌混合物1小時。藉由製備型HPLC (鹼性條件)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物5B (210 mg)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 8.56 - 8.26 (m, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 1H), 7.41 - 7.26 (m, 9H), 7.07 (br d,J =9.8 Hz, 2H), 6.89 - 6.75 (m, 1H), 6.69 - 6.39 (m, 1H), 6.12 - 5.90 (m, 1H), 5.05 - 4.91 (m, 1 H)4.35 - 4.18 (m, 1H), 3.95 - 3.82 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 2.78 - 2.63 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 403.2。
使化合物5B (110 mg，273.33 μmol)於DMSO (4 mL)及DCM (6 mL)中之混合物脫氣且用N2 吹掃3次，且隨後在0℃下添加DMP (347.8 mg，819.99 μmol)，在N2 氛圍下在0℃下攪拌混合物3小時。用飽和NaHCO3 (80 mL)及飽和Na2 S2 O3 (80 mL)淬滅混合物。攪拌混合物0.5小時。用飽和NaHCO3 (100 mL×2)、水(100 mL×2)及鹽水(100 mL)洗滌有機層。合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮濾液，得到殘餘物。藉由自2-異丙氧基丙烷(10 mL)再結晶來純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物5 (80 mg，185.58 μmol)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 )δ 8.98 - 8.91 (m, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 2H), 7.27 - 7.17 (m, 5H), 7.27 - 7.17 (m, 1H), 7.09 - 7.02 (m, 3H), 6.95 - 6.90 (m, 1H), 6.86 - 6.82 (m, 1H), 5.20 - 5.13 (m, 1H), 5.00 (s, 1H), 3.24 - 3.17 (m, 1H), 2.82 - 2.74 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 401.0。 實例6N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-10H -啡噁嗪-10-甲醯胺(6)
Figure 02_image389
向10H -啡噁嗪(1 g，5.46 mmol)於DCM (8 mL)及H2 O (4 mL)中之混合物中添加NaOH (327.5 mg，8.19 mmol)及TBAI (403.2 mg，1.09 mmol)，且隨後添加氯甲酸4-硝基苯酯(1.32 g，6.55 mmol)，在25℃下攪拌混合物0.5小時。在混合物中添加H2 O (50 mL)，隨後用CH2 Cl2 (30 mL×3)萃取，合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，獲得粗產物。藉由管柱層析(SiO2 ，石油醚/乙酸乙酯=1/0至1:1)純化殘餘物，得到呈黃色固體之化合物6A (380 mg，產率：19.98%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 )δ 8.42 - 8.28 (m, 2H), 8.12 (d,J = 9.2 Hz, 2H), 7.81 - 7.63 (m, 3H), 7.33 - 7.20 (m, 3H), 6.94 (d,J = 9.2 Hz, 2H)。
向化合物6A (380 mg，1.09 mmol)於DMF(5 mL)中之溶液中添加Et3 N (331.2 mg，3.27 mmol)，隨後添加化合物1A (302 mg，1.31 mmol，HCl)且在55℃下攪拌混合物12 h。其藉由製備型HPLC (鹼性條件)純化，得到呈灰色固體之化合物6B (50 mg，產率：11.28%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.37 - 7.27 (m, 4H), 7.21 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 2H), 7.07 - 7.02 (m, 2H), 7.00 - 6.84 (m, 5H), 6.28 - 5.93 (m, 1H), 5.72 - 5.39 (m, 2H), 4.35 - 4.14 (m, 2H), 3.46 - 3.16 (m, 1H), 3.11 - 2.99 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 404.1。
在0℃下於N2 下向化合物6B (50 mg，123.9 μmol)於DCM (10 mL)及DMSO (1 mL)中之混合物中一次性添加DMP (368 mg，867.6 μmol)，且隨後在N2 氛圍下在25℃下攪拌混合物20小時。將混合物用飽和NaHCO3 (15 mL)及飽和Na2 S2 O3 (15 mL)淬滅且攪拌20 min，隨後用二氯甲烷(100 mL)稀釋。攪拌混合物20 min且用水(20 mL×2)洗滌。合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到粗產物，藉由用DCM (1 mL)及PE (10 mL)之混合物濕磨將其純化，得到呈黃色固體之化合物6 (12.3 mg，產率：24.19%)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 7.30 - 7.24 (m, 5H), 7.15 - 6.93 (m, 8H), 6.71 (br s, 1H), 5.74 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 5.47 - 5.38 (m, 2H), 3.39 - 3.29 (m, 1H), 3.00 - 2.94 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 366.1。 實例7N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)二苯并[b ,e ][1,4]二氧雜環己烯-1-甲醯胺(7)
Figure 02_image391
於N2 下向鄰苯二酚(100 mg，908 μmol)及2,3-二氟苯甲腈(126 mg，908 μmol)於DMF (2.7 mL)及甲苯(900 μL)中之混合物中一次性添加K2 CO3 (377 mg，2.7 mmol)。於N2 下在130℃下攪拌混合物12小時。濃縮反應混合物以移除甲苯。將殘餘物倒入水(20 mL)中且攪拌10 min。過濾懸浮液且用H2 O (3 mL)洗滌濾餅，得到呈黃色固體之化合物7A (140 mg，產率：73.7%)。產物不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 7.17 (dd,J = 1.4, 7.8 Hz, 1H), 7.05 (dd,J = 1.5, 8.2 Hz, 1H), 7.01 - 6.93 (m, 4H), 6.90 - 6.85 (m, 1H)。
向化合物7A (140 mg，669 μmol)於乙二醇(3 mL)及H2 O (1 mL)中之混合物中添加KOH (188 mg，3.4 mmol)。在130℃下攪拌混合物12小時。加水(20 mL)。用HCl水溶液(1 M)將混合物調節至pH為約5。過濾懸浮液且用H2 O (3 mL)洗滌濾餅，得到呈白色固體之化合物7B (130 mg，產率：85.1%)。產物不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 13.12 (br s, 1H), 7.33 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.13 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 7.05 - 6.92 (m, 5H)。
向化合物7B (120 mg，526 μmol)、化合物1A (133 mg，578 μmol)及HBTU (239 mg，631 μmol)於DMF (3 mL)中之混合物中添加DIPEA (272 mg，2.10 mmol)，在15℃下攪拌混合物0.5小時。將固體過濾且用甲醇(5 mL×3)洗滌，得到呈白色固體之化合物7C (130 mg，產率：61.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 8.15 (br dd,J = 8.9, 17.7 Hz, 1H), 7.45 - 7.34 (m, 2H), 7.34 - 7.24 (m, 4H), 7.23 - 7.09 (m, 3H), 7.08 - 6.95 (m, 5H), 6.17 - 5.85 (m, 1H), 4.67 - 4.53 (m, 1H), 4.13 - 3.90 (m, 1H), 3.00 - 2.74 (m, 2H)。
將化合物7C (60 mg，148 μmol)及DMP (252 mg，593 μmol)於DCM (15 mL)、DMSO (2 mL)中之混合物在15℃下攪拌1小時。將混合物用DCM (20 mL)稀釋，用飽和NaHCO3 (20 mL)、飽和Na2 S2 O3 (20 mL)淬滅且攪拌20 min，用DCM (20 mL×4)萃取混合物，將合併之有機相用水(20 mL)、鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。於異丙基醚(10 mL)中攪拌殘餘物20 min，過濾且乾燥固體，得到呈白色固體之化合物7 (35.3 mg，產率：59.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 8.61 (br d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.17 (br s, 1H), 7.91 (br s, 1H), 7.37 - 7.21 (m, 5H), 7.16 - 7.07 (m, 2H), 7.07 - 6.97 (m, 4H), 6.78 - 6.72 (m, 1H), 5.52 - 5.43 (m, 1H), 3.26 (br dd,J = 4.1, 14.0 Hz, 1H), 3.00 (br dd,J = 9.2, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 403.1。 實例8N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-9H -咔唑-9-甲醯胺(8)
Figure 02_image393
遵循實例6 之程序使用中間物1A 及9H- 咔唑製備化合物8 。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 8.83 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.16 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.61 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 -7.26 (m, 10H), 5.57 - 5.44 (m, 1H), 3.39 (s, 1H), 3.01 -2.83 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 386.1。 實例9N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)二苯并[b,d ]呋喃-4-甲醯胺(9)
Figure 02_image395
將二苯并[b,d]呋喃(5.00 g，29.73 mmol)溶解於THF (25 ml)中且在攪拌下冷卻至-78℃，在攪拌下逐滴添加t- BuLi (12.0 ml，62.50 mmol，2.50 M己烷溶液)，得到橙黃色沈澱物。完全添加後，使混合物升溫至室溫且攪拌3 h。隨後將橙褐色溶液冷卻至-78℃且倒入覆蓋有無水MTBE之過量CO2 上。使所得白色沈澱物在室溫下靜置1 h。將產物萃取至2 M NaOH中且將所得水相用濃HCl再酸化，之後萃取至乙酸乙酯中。此有機相隨後經硫酸鈉乾燥，過濾且減壓蒸發溶劑，得到呈白色固體之化合物9A (1.30 g，20.61%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ 13.32 (br s, 1H), 8.42 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 8.22 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.81 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 7.53 -7.49 (m, 1H), 7.47 - 7.44 (m, 1H)。MS(ESI)m/z (M+1)+ 213.0。
於N2 下在25℃下向化合物9A (200 mg，942.51 μmol)及化合物1A (261 mg，1.13 mmol，HCl)於DMF (4 mL)中之混合物中一次性添加HBTU (536 mg，1.41 mmol)。在25℃下攪拌混合物0.1小時，且隨後添加DIEA (365 mg，2.83 mmol，494 μL)。在25℃下攪拌所得混合物3小時。藉由製備型HPLC (鹼性條件)純化混合物，得到呈白色固體之化合物9B (160 mg，43.39%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 )δ 8.32 -8.27 (m, 1H), 8.22 - 8.18 (m, 1H), 8.15 - 7.89 (m, 1H), 7.91 - 7.79 (m, 2H), 7.61- 7.57 (m, 1H), 7.50-7.43 (m, 4H), 7.35 - 7.18 (m, 6H), 6.26 - 5.97 (m, 1H), 4.68 - 4.57 (m, 1H), 4.18 - 4.16 (m, 1H), 3.93 - 3.92 (m, 1H)。MS(ESI)m/z (M+1)+ 389.1。
在N2 氛圍下向化合物9B (150 mg，386.18 μmol)於DMSO (4 mL)及CH2 Cl2 (4 mL)中之溶液中添加DMP (491 mg，1.16 mmol)，在0℃下攪拌混合物1.5小時。用飽和NaHCO3 (20 mL)及飽和Na2 S2 O3 (20 mL)淬滅混合物。將混合物攪拌0.5小時，用二氯甲烷(100 mL)稀釋。將有機層用NaHCO3 (30 mL×3)、水(20 mL×3)及鹽水(30 mL×3)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮濾液，得到殘餘物。藉由於異丙基醚(12 mL)中濕磨來純化產物，得到呈白色固體之化合物9 (30 mg，20.10%產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 8.19 - 8.17 (m, 2H), 8.08 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 7.97 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (s, 2H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.34 (s, 5H), 6.85 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 5.61 (s, 1H), 3.54-3.52 (m, 1H), 3.20 - 3.40 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 387.0。 實例10N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-9H -芴-9-甲醯胺(10)
Figure 02_image397
遵循實例6 之程序使用中間物1A 及9H- 芴-9-甲酸製備化合物10 。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 7.81 - 7.76 (m, 2H), 7.61 - 7.50 (m, 2H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.37 - 7.30 (m, 2H), 7.18 - 7.04 (m, 3H), 6.72 - 6.60 (m, 3H), 5.72 (br s, 1H), 5.46 - 5.29 (m, 2H), 4.76 (s, 1H), 3.24 - 3.14 (m, 1H), 2.99 - 2.90 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 385.1。 實例11N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-9-甲基-9H -咔唑-4-甲醯胺(11)
Figure 02_image399
向1H- 吲哚-4-甲酸甲酯(2 g，11.4 mmol)及2,5-二甲氧基四氫呋喃(1.96 g，14.9 mmol)於MeOH (50 mL)中之混合物中添加TsOH.H2 O (1.09 g，5.71 mmol)。在65℃下攪拌反應混合物16小時。濃縮反應混合物。藉由矽膠管柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20:1至5:1)純化粗產物，得到呈黃色固體之化合物11A (220 mg，產率：4.28%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 8.78 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.19 (br s, 1H), 7.80 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.55 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.23 - 7.15 (m, 2H), 4.00 (s, 3H)。
在0℃下向化合物11A (200 mg，888 μmol)於DMF (2 mL)中之溶液添加NaH (53.3 mg，1.33 mmol，60%)。在0℃下攪拌反應混合物0.5小時。隨後將MeI (252 mg，1.78 mmol)添加至反應混合物。在攪拌下使反應混合物升溫至15℃後保持16小時。將飽和NH4 Cl (10 mL)添加至反應混合物。用EtOAc (10 mL×2)萃取產物。將合併之有機層濃縮且藉由製備型TLC (PE:EA =5:1，Rf =0.6)純化，得到呈黃色固體之化合物11B (150 mg，產率：70.6%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 8.90 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.89 (dd,J = 0.9, 7.5 Hz, 1H), 7.64 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 2H), 7.46 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.92 (s, 3H)。
向化合物11B (150 mg，627 μmol)於MeOH (5 mL)及H2 O (1.00 mL)中之溶液中添加NaOH (50.2 mg，1.25 mmol)。在50℃下攪拌反應混合物16小時。逐滴添加1 M HCl直至pH為約6為止。蒸發溶劑，得到呈白色固體之粗化合物11C (140 mg，粗產物)。粗產物不經純化即用於下一步驟中。
向化合物11C (140 mg，622 μmol)及中間物1A (143 mg，622 μmol，HCl鹽)於DMF (2 mL)中之混合物中添加HBTU (354 mg，932 μmol)及DIEA (241 mg，1.86 mmol)。在15℃下攪拌反應混合物16小時。過濾反應混合物。藉由製備型HPLC (FA)純化粗產物，得到呈白色固體之化合物11D (160 mg，產率：64.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.27 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.97 - 7.86 (m, 1H), 7.67 (dd,J = 5.3, 7.8 Hz, 1H), 7.55 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.51 - 7.14 (m, 10H), 7.05 (q,J = 7.7 Hz, 1H), 7.09 - 7.00 (m, 1H), 5.91 - 5.77 (m, 1H), 4.83 - 4.67 (m, 1H), 4.22 - 3.99 (m, 1H), 3.88 (d,J = 2.4 Hz, 3H), 3.07 - 2.77 (m, 2H)。
向化合物11D (140 mg，349 μmol)於DCM (20 mL)中之溶液添加DMP (592 mg，1.39 mmol)。隨後在15℃下攪拌反應混合物16小時。將混合物用DCM (20 mL)稀釋，藉由在15℃下添加飽和NaHCO3 (30 mL)及飽和Na2 S2 O3 (30 mL)淬滅，且隨後攪拌混合物直至溶液澄清為止，且用DCM (30 mL×2)萃取。將合併之有機層用H2 O (20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。藉由於異丙基醚溶劑(10 mL)中濕磨純化殘餘物。過濾且乾燥混合物，得到呈白色固體之化合物11 (84.2 mg，產率：60.5%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 )δ 8.26 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.46 - 7.30 (m, 4H), 7.21 - 7.07 (m, 7H), 6.74 (br s, 1H), 6.54 (br d,J = 7.0 Hz, 1H), 5.80 (dt,J = 5.2, 7.2 Hz, 1H), 5.46 (br s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.51 (dd,J = 5.1, 14.2 Hz, 1H), 3.23 (dd,J = 7.6, 14.2 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 400.1。 實例12N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-9-甲基-9H -咔唑-1-甲醯胺(12)
Figure 02_image401
在0℃下向2-胺基苯甲酸甲酯(10 g，66.15 mmol)於HCl (100 mL)中之溶液中逐滴添加NaNO2 (4.66 g，67.48 mmol)於H2 O (100 mL)中之溶液。在0℃下攪拌混合物0.5 h。隨後添加SnCl2 .2H2 O (29.85 g，132.31 mmol)於HCl (50 mL)中之溶液。在25℃下攪拌混合物2 h。將固體過濾，用H2 O (200 mL)洗滌，收集並真空乾燥，得到呈白色固體之化合物12A (7.8 g，產率：56.56%)。
將化合物12A (2 9.87 mmol)於AcOH (20 mL)中之溶液加熱至80℃。隨後將環己酮(970 mg，9.87 mmol)逐滴添加至溶液。隨後將溶液加熱至100℃且攪拌2 h。將反應物冷卻至室溫且添加H2 O (20 mL)。將固體過濾，收集並真空乾燥，得到呈紫色固體之化合物12B (1.3 g，產率：49.69%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 229.9。
向化合物12B (1.3 g，5.67 mmol)於甲苯(40 mL)中之溶液中一次性添加DDQ (1.54 g，6.80 mmol)。在100℃下攪拌混合物12 h。過濾固體。收集濾液且濃縮。藉由管柱(PE:EA =5:1)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體之化合物12C (360 mg，產率：28.19%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz):δ 9.92 (br. s, 1H), 8.29 - 8.22 (m, 1H), 8.13 - 8.05 (m, 2H), 7.59 - 7.44 (m, 2H), 7.30 - 7.20 (m, 2H), 4.03 (s, 3H)。
向化合物12C (360 mg，1.60 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中分批添加NaH (320 mg，7.99 mmol，60%純度)，接著添加CH3 I (0.2 mL，3.20 mmol)。在25℃下攪拌混合物12 h。將混合物用1 N HCl淬滅直至pH為約4為止，用H2 O (30 mL)稀釋，用EtOAc (20 mL×3)萃取。收集有機物，用鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色油狀物之化合物12D (380 mg，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。MS (ESI)m/z (M+H)+ 239.8。
向化合物12D (380 mg，1.59 mmol)於THF (3 mL)、MeOH (3 mL)及H2 O (3 mL)中之溶液中添加LiOH.H2 O (335 mg，7.94 mmol)。在25℃下攪拌混合物48 h。將混合物用1 N HCl酸化至pH為約4，用H2 O (20 mL)稀釋，用EtOAc (15 mL×2)萃取。收集有機物，用鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由SFC (管柱：AD (250 mm×30 mm，5 μm)；移動相：[0.1% NH3 H2 O/EtOH])(RT：6.114 min)純化殘餘物。收集且濃縮純溶離份。將殘餘物溶解於H2 O (10 mL)中，用1 N HCl酸化至pH為約4。用EtOAc (15 mL×2)萃取混合物。收集有機物，用鹽水(20 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈白色固體之化合物12E (310 mg，產率：86.66%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz):δ 8.36 - 8.29 (m, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 2H), 7.55 - 7.45 (m, 2H), 7.34 - 7.22 (m, 2H), 4.02 (s, 3H)。
向化合物12E (310 mg，1.38 mmol)及中間物1A (477 mg，2.06 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加DIEA (0.6 mL，3.44 mmol)、HOBt (56 mg，412.89 μmol)及EDCI (396 mg，2.06 mmol)。在25℃下攪拌混合物48 h。真空移除溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc (40 mL)中，用1 N HCl (40 mL)洗滌。收集有機物，用飽和NaHCO3 (40 mL)、鹽水(40 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由製備型HPLC (中性)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物12F (320 mg，產率：57.40%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 401.9。
向化合物12F (150 mg，373.64 μmol)於DCM (20 mL)及DMSO (3 mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(476 mg，1.12 mmol)。在25℃下攪拌混合物2 h。將反應物用DCM (30 mL)稀釋，用10% Na2 S2 O3 水溶液及飽和NaHCO3 之溶液(v/v=1/1)(60 mL)淬滅。將固體過濾、收集、用H2 O (10 mL)洗滌。將固體過濾，收集並真空乾燥，得到呈白色固體之化合物12 (28 mg，產率：18.05%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 400.1。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 9.16 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 8.26 - 8.22 (m, 1H), 8.20 (br. s, 1H), 8.15 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.91 (br. s, 1H), 7.57 - 7.52 (m, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 4H), 7.28 - 7.16 (m, 4H), 5.55 - 5.48 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.30 - 3.24 (m, 1H), 2.87 - 2.78 (m, 1H)。 實例13N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氯-1-萘甲醯胺(13)
Figure 02_image403
將DMF (1.67 g，22.85 mmol，1.76 mL)冷卻至0℃，逐滴添加POCl3 (2.5 mL，26.74 mmol)。在0℃下攪拌混合物 0.5 h。然後添加DCM (10 mL)。在15℃下攪拌混合物2 h。隨後添加3,4-二氫萘-2(1H )-酮(1 g，6.84 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液。在15℃下攪拌混合物12 h。將反應物用DCM (20 mL)稀釋，小心滴加H2 O (30 mL)淬滅反應。收集有機物，用飽和NaHCO3 (30 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由管柱(PE:EA =10:1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之化合物13A (940 mg，產率：71.33%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz):δ 10.47 (s, 1H), 8.04 - 7.99 (m, 1H), 7.25 - 7.05 (m, 3H), 2.92 - 2.84 (m, 4H)。
將化合物13A (500 mg，2.60 mmol)及DDQ (590 mg，2.60 mmol)於甲苯(20 mL)中之溶液在90℃下攪拌12 h。隨後再添加DDQ (590 mg，2.60 mmol)。在90℃下攪拌混合物48 h。過濾固體。收集濾液且濃縮。藉由管柱(PE:EA =10:1)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物13B (380 mg，產率：57.60%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz):δ 10.91 (s, 1H), 9.16 - 9.13 (m, 1H), 8.02 - 7.55 (m, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 7.70 - 7.62 (m, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 1H), 7.55 - 7.45 (m, 1H)。
在0℃下向化合物13B (380 mg，1.99 mmol)及DMSO (0.19 mL，2.41 mmol)於CH3 CN (10 mL)及H2 O (0.3 mL)中之溶液中逐滴添加H2 SO4 (0.06 mL，1.10 mmol)。添加後，添加NaClO2 (270 mg，2.99 mmol)於H2 O (1.7 mL)中之溶液。在0℃下攪拌混合物2 h。將混合物用H2 O (10 mL)洗滌，用EtOAc (15 mL×2)萃取。收集有機物，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由SFC (0.1% NH3 H2 O EtOH)(RT：2.304 min)純化粗產物。收集主峰且濃縮。將殘餘物溶解於H2 O (10 mL)中，用1 N HCl酸化至pH為約4，用EtOAc (15 mL×2)萃取。收集有機物，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈淺黃色固體之化合物13C (270 mg，產率：65.55%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz):δ 8.05 - 7.96 (m, 1H), 7.95 - 7.80 (m, 2H), 7.68 - 7.45 (m, 3H)。
向化合物13C (260 mg，1.26 mmol)及中間物1A (436 mg，1.89 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加DIEA (0.55 mL，3.15 mmol)、HOBt (52 mg，377.50 μmol)及EDCI (362 mg，1.89 mmol)。在25℃下攪拌混合物12 h。真空移除溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc (30 mL)中，用1N HCl (30 mL)洗滌。收集有機物，用飽和NaHCO3 (30 mL)、鹽水(30 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物13D (160 mg，產率：31.42%)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 404.9。
向化合物13D (160 mg，417.93 μmol)於DCM (20 mL)及DMSO (3 mL)中之溶液中添加DMP (532 mg，1.25 mmol)。在25℃下攪拌混合物40 min。將混合物用DCM (20 mL)稀釋，用10% Na2 S2 O3 水溶液及飽和NaHCO3 之溶液(v/v=1/1)(80 mL)淬滅。收集有機物，用H2 O (40 mL×5)洗滌，收集並濃縮。用CH3 CN (8 mL)洗滌殘餘物。將固體過濾，收集並真空乾燥，得到呈白色固體之化合物13 (65 mg，產率：38.84%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 381.1。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 9.30 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.33 (br. s, 1H), 8.09 - 7.97 (m, 3H), 7.70 - 7.30 (m, 9H), 5.77 - 5.68 (m, 1H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 2.89 - 2.77 (m, 1H)。 實例14 化合物14至36之一般合成合成流程 A ：
Figure 02_image405
向酸A-2 (1當量)於DMF中之混合物中添加HBTU (1.5當量)，接著添加TEA (3當量)。在20℃下攪拌反應混合物5 min且添加中間物1A (1當量)。將反應混合物攪拌3 h，用水稀釋且過濾。將粗產物與EtOAc一起攪拌30 min且過濾，得到呈灰白色固體之化合物A-3 。
向化合物A-2 (1當量)於DCM及DMSO中之溶液中添加DMP (2當量)。在20℃下攪拌反應混合物2小時。將反應混合物用DCM (10 mL)稀釋，在20℃下用飽和NaHCO3 及10% Na2 S2 O3 水溶液淬滅，攪拌30 min且用DCM (10 mL×2)萃取。將合併之有機層用H2 O (10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粗產物。藉由急驟層析使用EtOAc/己烷純化粗產物，得到所要產物A-1 。合成流程 B ：
Figure 02_image407
在0℃下向酸B-2 (1當量)於DMF中之混合物中添加HOBt (1當量)，接著添加TEA (3當量)。在0℃下攪拌反應混合物5 min且添加中間物1A (1當量)。將反應混合物攪拌3 h，用水稀釋且過濾。將粗產物與EtOAc一起攪拌30 min且過濾，得到呈灰白色固體之化合物A-3 。
向化合物A-3 (1當量)於DCM及DMSO中之溶液中添加DMP (2當量)。在20℃下攪拌反應混合物2小時。將反應混合物用DCM (10 mL)稀釋，在20℃下用飽和NaHCO3 及10% Na2 S2 O3 水溶液淬滅，攪拌30 min且用DCM (10 mL×2)萃取。將合併之有機層用H2 O (10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到粗產物。藉由急驟層析使用EtOAc/己烷純化粗產物，得到所要產物A-1 。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-溴-6-氯苯甲醯胺(14)
Figure 02_image409
化合物14 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.17 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.33 - 7.18 (m, 6H), 5.52 (m, 1H), 3.18 (dd, 1H), 2.79 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 410.9。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,6-二氟苯甲醯胺(15)
Figure 02_image411
化合物15 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.2 (d, 0.6H), 8.25 (d, 0.4 H), 8.15 (s, 0.6H), 7.87 (s, 0.6H), 7.55 - 7.35 (m, 1.4H), 7.3 - 7.1 (m, 7.4 H), 5.41 (m, 0.6H), 4.47 (m, 0.4 H), 3.18 (dd, 0.6H), 3.04 (dd, 0.4 H), 2.78 (dd, 0.6 H), 2.59 (dd, 0.4 H), ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 332.3。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氟-6-(三氟甲基)苯甲醯胺(16)
Figure 02_image413
化合物16 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.26 (d, 0.4H), 8.37 (d, 0.6 H), 8.16 (s, 0.4H), 7.87 (s, 0.4H), 7.7 - 7.1 (m, 9.2 H), 5.52 (m, 0.4H), 4.55 (m, 0.6 H), 3.2 -3.05 (m, 1H), 2.78 (dd, 0.4 H), 2.89 (dd, 0.6 H), ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 383.3。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-氯-2-甲氧基苯甲醯胺(17)
Figure 02_image415
化合物17 ：MS (ESI)m/z (M+H)+ 357。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,6-二甲氧基苯甲醯胺(18)
Figure 02_image417
化合物18 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.46 (d, 0.2H),  8.04 (s, 0.2 H), 7.93 (d, 0.8 H), 7.79 (s, 0.2 H), 7.4 - 7.1 (m, 7.6 H), 6.65 - 6.58 (m, 2H), 5.34 (m, 0.2H), 4.32 (m, 0.8 H), 3.63 (s, 6H), 3.08 (dd, 0.2 H), 2.96 (dd, 0.8 H), 2.89 (dd, 0.2 H), 2.68 (dd, 0.8 H), ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 357。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氯-6-(三氟甲基)苯甲醯胺(19)
Figure 02_image419
化合物19 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.2 (d, 1H), 8.2- 7.8 (m, 4H), 7.2 - 7 (m, 6H), 5.58 (m, 1H), 3.16 (dd, 1H), 2.78 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 399.4。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,6-雙(三氟甲基)苯甲醯胺(20)
Figure 02_image421
化合物20 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.25 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.6 (t, 1H), 7.3 - 7.2 (m, 5H), 5.63 (m, 1H), 3.1 (dd, 1H), 2.81 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 433.1。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-氯-[1,1'-聯苯]-2-甲醯胺(21)
Figure 02_image423
化合物21 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.06 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.8 (s, 1H), 7.5 - 7.1 (m, 13H), 5.34 (m, 1H), 2.98 (dd, 1H), 2.65 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 406.9。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,5-二氯苯甲醯胺(22)
Figure 02_image425
化合物22 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.99 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.3 - 7.1 (m, 6H), 5.28 (m, 1H), 3.16 (dd, 1H), 2.75 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 364.9。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-[1,1'-聯苯]-4-甲醯胺(23)
Figure 02_image427
化合物23 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.6-8.1 (m, 7H), 7-7.6 (m, 8H), 5.3 (m, 1H), 3.3 (d, 2H), 3.0 (m, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 373。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)苯并[d ][1,3]間二氧雜環戊烯-5-甲醯胺(24)
Figure 02_image429
化合物24 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.05-7.35 (m, 7H), 6.75-6.85 (m, 1H), 6.0 (m, 1H), 3.3 (d, 2H), 2.95-3.0 (m, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 341。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-氟苯甲醯胺(25)
Figure 02_image431
化合物25 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.9 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.51(d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.3 - 7.1 (m, 5H), 5.3 (m, 1H), 3.15 (dd, 1H), 2.84 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 314.9。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,3-二甲基苯甲醯胺 (26)
Figure 02_image433
化合物26 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.68 (d, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.34 - 6.9 (m, 8H), 5.33 (m, 1H), 3.16 (dd, 1H), 2.78 (dd, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.02 (s, 3H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 325.1。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氟-6-碘苯甲醯胺(27)
Figure 02_image435
化合物27 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.11 (d, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.3 - 7.1 (m, 7H), 5.44 (m, 1H), 3.1 (dd, 1H), 2.74 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 441。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-氟苯甲醯胺(28)
Figure 02_image437
化合物28 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.89 (d, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.9 - 7.7 (m, 3H),  7.4 - 7.1 (m, 7H), 5.34 (m, 1H), 3.2 (dd, 1H), 2.9 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 315。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氯-6-氟-3-甲氧基苯甲醯胺(29)
Figure 02_image439
化合物29 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.19 (d, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.3 - 7.1 (m, 7H), 5.46 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.18 (dd, 1H), 2.76 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 379.4。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-氯-6-氟-3-甲基苯甲醯胺(30)
Figure 02_image441
化合物30 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.18 (d, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.45 - 7.1 (m, 7H), 5.47 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.18 (dd, 1H), 2.76 (dd, 1H), 2.27 (s, 3H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 363.4。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-6-氯-2-氟-3-甲基苯甲醯胺(31)
Figure 02_image443
化合物31 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.18 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.45 - 7.1 (m, 7H), 5.46 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.18 (dd, 1H), 2.76 (dd, 1H), 2.2 (s, 3H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 363.2。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-氯-2-氟-6-(三氟甲基)苯甲醯胺(32)
Figure 02_image445
化合物32 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.35 (d, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.45 - 7.1 (m, 5H), 5.52 (m, 1H), 3.19 (dd, 1H), 2.77 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 417.3。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2,4-二氯-5-氟苯甲醯胺(33)
Figure 02_image447
化合物33 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.05 (d, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.35 - 7.2 (m, 6H), 5.36 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.21 (dd, 1H), 2.81 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 382.7。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-溴-2-氯苯甲醯胺(34)
Figure 02_image449
化合物34 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.05 (d, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.64 (dd, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.34 - 7.2 (m, 5H), 5.33 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.22 (dd, 1H), 2.8 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 409.2。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(35)
Figure 02_image451
化合物35 ：MS (ESI)m/z (M+H)+ 405。 (S )-N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-溴苯甲醯胺(36)
Figure 02_image453
化合物36 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.93 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.4 - 7.1 (m, 7H), 5.36 (m, 1H), 3.19 (dd, 1H), 2.81 (dd, 1H) ppm。MS (ESI)m/z (M+H)+ 374.9。 實例15 化合物37至48 5-氯-2-甲氧基-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(37)
Figure 02_image455
於N2 下在20℃下向5氯-2-甲氧基苯甲酸(300 mg，1.61 mmol)及2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽(362 mg，1.93 mmol，HCl)於DMF (15 mL)中之混合物中一次性添加HBTU (732 mg，1.93 mmol)。在20℃下攪拌混合物0.1 h。隨後向混合物添加DIPEA (1.04 g，8.04 mmol，1.4 mL)且在20℃下攪拌0.5 h。在0℃下用H2 O (50 mL)稀釋混合物並在0℃下攪拌0.5 h，且形成沈澱物，收集固體並真空乾燥，得到呈黃色固體之化合物37A (450 mg，產率：86.82%)。1 H-NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.11 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 7.50 (dd,J = 2.6, 8.8 Hz, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 4H), 7.21 - 7.14 (m, 2H), 4.12 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.06 - 2.86 (m, 2H), 2.69 - 2.69 (m, 1H), 2.84 - 2.68 (m, 1H)。MS (ESI) m/z (M+H)+ 320.0。
於N2 下在20℃下向化合物37A (150 mg，469.07 μmol)於DMSO (2 mL)及DCM (20 mL)中之混合物中一次性添加DMP (597 mg，1.41 mmol)。在20℃下攪拌混合物0.5 h。將反應混合物用DCM (20 mL)、飽和NaHCO3 (30 mL水溶液)及Na2 S2 O3 (10%水溶液，30 mL)稀釋，隨後攪拌15 min。分離各層。將有機層用水(150 mL×2)及鹽水(150 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且減壓濃縮，得到殘餘物。將殘餘物用EA (5 mL)及PE (25 mL)濕磨，形成沈澱物，收集固體並真空乾燥，得到呈黃色固體之化合物37 (75 mg，產率：49.96%)。1 H-NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 9.61 (s, 1H), 8.55 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 2.9 Hz, 1H), 7.54 (dd,J = 2.8, 8.9 Hz, 1H), 7.33 - 7.16 (m, 6H), 4.59 (dd,J = 5.1, 6.9, 9.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.22 (dd,J = 4.9, 13.9 Hz, 1H), 3.02 (dd,J = 9.0, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 317.9。 3-氯-2-氟-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-6-(三氟甲基)苯甲醯胺(38)
Figure 02_image457
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及3-氯-2-氟-6-(三氟甲基)苯甲酸製備化合物38 。獲得呈淺黃色固體之化合物38 (90 mg，產率58.0%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz)δ 9.58 (s, 1H), 9.38 (br d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.67 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 4H), 7.24 - 7.20 (m, 1H), 4.65 (ddd,J = 4.6, 7.4, 9.8 Hz, 1H), 3.25 (dd,J = 4.4, 14.4 Hz, 1H), 2.83 (dd,J = 9.9, 14.4 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 374.0。 2-氟-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-6-(三氟甲基)苯甲醯胺(39)
Figure 02_image459
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2-氟-6-(三氟甲基)苯甲酸製備化合物39 。獲得呈淺黃色固體之化合物39 (100 mg，產率33.2%)。1 H NMR (400MHz,CD3 CN)δ 9.63 (s, 1H), 7.67 - 7.55 (m, 2H), 7.45 (t,J = 8.7 Hz, 1H), 7.34 - 7.21 (m, 5H), 4.71 (ddd,J = 5.3, 7.4, 8.7 Hz, 1H), 3.28 (dd,J = 5.1, 14.4 Hz, 1H), 2.99 (dd,J = 8.7, 14.4 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 340.0。 2,6-二氟-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(40)
Figure 02_image461
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2,6-二氟苯甲酸製備化合物40 。獲得呈白色固體之化合物40 (100 mg，產率48.79%)。1 H NMR (400MHz, CD3 CN) δ 9.74 - 9.55 (m, 1H), 7.46 (tt,J = 6.6, 8.5 Hz, 1H), 7.35 - 7.22 (m, 5H), 7.09 - 6.95 (m, 1H), 4.69 (ddd,J = 4.9, 7.5, 9.0 Hz, 1H), 3.31 (dd,J = 4.9, 14.3 Hz, 1H), 2.99 (dd,J = 9.0, 14.3 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 289.9。 2-溴-6-氯-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(41)
Figure 02_image463
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2-溴-6-氯苯甲酸製備化合物41 。獲得呈白色固體之化合物41 (30 mg，產率15.9%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.69 (s, 1H), 9.06 (br s, 1H), 7.61 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.38 (m, 1H), 7.38 - 7.19 (m, 6H), 4.72 - 4.54 (m, 1H), 3.26 (dd,J = 4.5, 14.1 Hz, 1H), 2.93 (br dd,J = 9.4, 14.7 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 367.0。 2-氯-6-氟-3-甲基-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(42)
Figure 02_image465
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2-氯-6-氟-3-甲基苯甲酸製備化合物42 。獲得呈無色油狀物之化合物42 (80.6 mg，產率24.13%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 9.61 (s, 1H), 9.24 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.43 (ddd,J = 0.7, 6.2, 8.6 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 4.6 Hz, 4H), 7.24 - 7.16 (m, 2H), 4.55 (ddd,J = 4.4, 7.5, 10.1 Hz, 1H), 3.25 (dd,J = 4.3, 14.2 Hz, 1H), 2.85 (dd,J = 10.1, 14.3 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 320.1。 2-氯-6-氟-3-甲氧基-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(43)
Figure 02_image467
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2-氯-6-氟-3-甲氧基苯甲酸製備化合物43 。獲得呈淺黃色固體之化合物43 (125 mg，產率38.19%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6)δ 9.61 (s, 1H), 9.25 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.29 (d,J = 4.6 Hz, 4H), 7.27 - 7.19 (m, 3H), 4.54 (ddd,J = 4.3, 7.4, 10.1 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.25 (dd,J = 4.4, 14.3 Hz, 1H), 2.84 (dd,J = 10.1, 14.3 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 336.1。 2-氯-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-1-萘甲醯胺(44)
Figure 02_image469
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2-氯-1-萘甲酸製備化合物44 。獲得呈白色固體之化合物44 (65 mg，產率41.70%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.77 (s, 1H), 9.19 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 8.07 - 7.90 (m, 2H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 7.46 (br t,J = 7.4 Hz, 1H), 7.38 - 7.26 (m, 6H), 4.88 (ddd,J = 3.9, 7.6, 11.1 Hz, 1H), 3.40 - 3.36 (m, 1H), 2.82 (dd,J = 11.2, 14.3 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 338.1。 2,6-二氯-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)苯甲醯胺(45)
Figure 02_image471
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及2,6-二氯苯甲酸製備化合物45 。獲得呈無色油狀物之化合物45 (150 mg，產率45.47%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.66 (s, 1H), 9.05 (br d,J = 6.3 Hz, 1H), 7.50 - 7.37 (m, 3H), 7.34 - 7.18 (m, 5H), 4.61 (dt,J = 4.9, 8.5 Hz, 1H), 3.26 (dd,J = 4.8, 14.6 Hz, 1H), 2.91 (dd,J = 9.7, 14.4 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 322.0。N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)二苯并[B ,D ]呋喃-4-甲醯胺(46)
Figure 02_image473
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及二苯并[b,d]呋喃-4-甲酸(7B )製備化合物46 。獲得呈白色固體之化合物46 (90 mg，產率28.10%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 9.71 (s, 1H), 8.73 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 8.34 (dd,J = 1.3, 7.7 Hz, 1H), 8.25 - 8.17 (m, 1H), 7.85 (dd,J = 1.3, 7.7 Hz, 1H), 7.71 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.60 (ddd,J = 1.3, 7.3, 8.4 Hz, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.41 - 7.37 (m, 2H), 7.35 - 7.29 (m, 2H), 7.27 - 7.19 (m, 1H), 4.70 (ddd,J = 4.7, 7.2, 9.5 Hz, 1H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 3.10 (dd,J = 9.4, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 344.1。 9-甲基-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-9H -咔唑-4-甲醯胺(47)
Figure 02_image475
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及9-甲基-9H -咔唑-4-甲酸(11C )製備化合物47 。獲得呈淡黃色固體之化合物47 (55 mg，產率43.0%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.84 (s, 1H), 8.14 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.56 - 7.47 (m, 3H), 7.39 - 7.23 (m, 7H),7.16 (ddd,J = 2.1, 5.9, 8.1 Hz, 1H), 4.83 (ddd,J = 4.8, 7.7, 9.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.46 (dd,J = 4.8, 14.2 Hz, 1H), 3.08 (dd,J = 9.9, 14.2 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 357.1。 9-甲基-N -(1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-9H -咔唑-4-甲醯胺(48)
Figure 02_image477
遵循化合物37 之程序使用對應中間物2-胺基-3-苯基丙-1-醇鹽酸鹽及二苯并[b,e][1,4]二氧雜環己烯-1-甲酸(7B )製備化合物48 。獲得呈白色固體之化合物48 (110 mg，產率35.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.62 (s, 1H), 8.61 (br, d,J = 7.1 Hz, 1H), 7.27 (d,J = 4.4 Hz, 4H), 7.20 (br, dd,J = 4.3, 8.5 Hz, 1H), 7.12 (br, d,J = 7.7Hz, 1H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 7.02 - 6.94 (m, 4H), 6.74 - 6.69 (m, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 1H), 3.27 - 3.19 (m, 1H), 2.97 (dd,J = 9.6, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 360.1。 實例部分II實例 1 - 化合物 1 、 12 、 14 、 18 、 22 、 28 、 54 、 94 、 99 、 100 、 101 及 102 N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-7-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(1)
Figure 02_image479
向3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(0.5 g，1.79 mmol)及7-喹啉基硼酸(463 mg，2.68 mmol)於二噁烷(15 mL)及H2 O (1 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (494 mg，3.57 mmol)，隨後在N2 氛圍下添加Pd(dppf)Cl2 (261 mg，357.06 μmol)，在N2 氛圍下在80℃下攪拌混合物17 h。濃縮反應混合物以移除溶劑，隨後用EA (30 mL)稀釋且過濾，用EA (30 mL×2)洗滌，濃縮濾液，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO® ；4 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，20 mL/min之0~70%乙酸乙酯/石油醚梯度溶離劑)純化殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物1A (0.48 g，產率：91.4%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.94 (dd, J = 1.8, 4.2 Hz, 1H), 8.56 - 8.49 (m, 1H), 8.18 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.04 - 7.94 (m, 2H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 4.26 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 1.30 - 1.24 (m, 3H)。MS (ESI) m/z (M+H)+282.2。
向化合物1A (0.48 g，1.71 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加NaOH (341 mg，8.53 mmol)於H2 O (2 mL)中之溶液，在50℃下攪拌混合物18 h。濃縮反應混合物以移除MeOH，用水(10 mL)稀釋，用EA (20 mL)萃取，用1 N HCl將水相酸化至pH為約3，形成沈澱物，過濾並凍乾固體。獲得呈黃色固體之化合物1B (0.22 g，產率：50.9%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.10 (dd,J = 1.4, 4.7 Hz, 1H), 8.77 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.23 - 8.11 (m, 2H), 7.81 (dd,J = 4.6, 8.4 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 254.2。
向化合物1B (210 mg，829.20 μmol)、中間物1D (230 mg，997.01 μmol，HCl)於DMF (6 mL)中之混合物中添加DIEA (4.13 mmol，720 μL)，且隨後添加HBTU(377 mg，994.09 μmol)。在25℃下攪拌混合物1.5 h。將反應混合物添加於H2 O (40 mL，0℃)中，形成一定量黃色沈澱物，且隨後在0℃下攪拌15 min。H2 O (10 mL×2)用洗滌固體並凍乾。於DCM (3 mL)及PE (20 mL)中濕磨殘餘物，且隨後過濾。獲得呈黃色固體之化合物1C (190 mg，產率：50.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.90 (s, 1H), 8.39 - 8.30 (m, 2H), 8.19 - 8.07 (m, 1H), 7.95 - 7.83 (m, 2H), 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.56 - 7.46 (m, 1H), 7.41 - 7.11 (m, 7H), 5.92 - 5.74 (m, 1H), 4.58 - 4.41 (m, 1H), 4.12 - 4.03 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.85 (br d,J = 4.3 Hz, 1H), 3.19 - 2.74 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 430.2。
向化合物1C (0.19 g，442.41 μmol)於DMSO (10 mL)及DCM (60 mL)中之溶液中添加DMP (751 mg，1.77 mmol)，在25℃下攪拌混合物1.5 h。將反應混合物用DCM (20 mL)稀釋，隨後用飽和Na2 S2 O3 (60 mL)及飽和NaHCO3 (60 mL)淬滅，用DCM (50 mL×2)萃取，將有機層用水(100 mL×2)及鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥過濾且濃縮，得到殘餘物。於CH3 CN (3 mL)及異丙基醚(3 mL)中濕磨殘餘物，隨後過濾並凍乾。獲得呈淺黃色固體之化合物1 (30 mg，產率：15.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.89 (br s, 1H), 8.42 - 8.26 (m, 2H), 8.12 (br s, 1H), 8.00 - 7.43 (m, 5H), 7.33 - 6.76 (m, 6H), 5.43 - 4.51 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.21 (d,J = 14.1 Hz, 1H), 2.96 - 2.84 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 428.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2,3-二甲氧基苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(12)
如實例1 中使用對應硼酸或硼酸酯分別製備化合物12 、 14 、 18 、 22 、 28 、 54 、 94 、 99 、 100 、 101 及102 。獲得呈淺黃色固體之化合物12 (88 mg，產率：66.5%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.15 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.83 - 7.73 (m, 2H), 7.30 - 7.11 (m, 5H), 7.09 - 6.98 (m, 2H), 6.72 (dd,J = 1.5, 7.3 Hz, 1H), 5.42 - 5.15 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.10 (dd,J = 3.5, 14.1 Hz, 1H), 2.74 (dd,J = 9.5, 13.6 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 437.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-8-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(14)
獲得呈白色固體之化合物14 (90 mg，產率：53.7%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.64 (dd,J = 1.9, 4.1 Hz, 1H), 8.36 (dd,J = 1.8, 8.4 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.99 (dd,J = 1.5, 8.2 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.82 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.65 - 7.55 (m, 2H), 7.47 (dd,J = 4.1, 8.3 Hz, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 3H), 6.92 (dd,J = 2.0, 7.3 Hz, 2H), 5.13 - 5.05 (m, 1H), 3.94 - 3.85 (m, 3H), 2.94 (dd,J = 4.0, 13.9 Hz, 1H), 2.59 - 2.50 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 428.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-8-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(18)
獲得呈白色固體之化合物18 (80 mg，產率：54.7%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.67 - 8.60 (m, 1H), 8.56 (dd,J = 1.8, 4.2 Hz, 1H), 8.42 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.38 - 8.33 (m, 1H), 8.03 (dd,J = 1.3, 8.4 Hz, 1H), 7.95 - 7.77 (m, 2H), 7.76 - 7.69 (m, 2H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 7.46 (dd,J = 4.2, 8.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.16 (m, 3H), 7.10 (d,J = 6.8 Hz, 2H), 5.22 - 5.05 (m, 1H), 3.02 (dd,J = 3.6, 14.0 Hz, 1H), 2.64 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 464.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(異喹啉-8-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(22)
獲得呈白色固體之化合物22 (90 mg，產率：53.1%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.14 - 9.06 (m, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.51 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.29 (br s, 1H), 8.09 - 7.79 (m, 3H), 7.76 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.70 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.57 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 7.51 (br s, 1H), 7.25 - 7.12 (m, 5H), 5.36 - 5.07 (m, 1H), 3.16 (d,J = 4.5 Hz, 1H), 2.83 (dd,J = 9.2, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 464.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(2-甲基呋喃-3-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(28)
獲得呈白色固體之化合物28 (170 mg，產率：85.5%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.12 - 7.99 (m, 3H), 7.77 (s, 1H), 7.40 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.29 - 7.15 (m, 5H), 6.48 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 5.38 - 5.13 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.12 (dd,J = 3.9, 13.8 Hz, 1H), 2.79 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 381.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(異喹啉-8-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(54)
獲得呈白色固體之化合物54 (15 mg，產率：14.5%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.17 - 9.03 (m, 1H), 8.44 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 8.35 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.94 - 7.92 (m, 1H), 7.82 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 7.82 - 7.79 (m, 1H), 7.74 - 7.61 (m, 2H), 7.46 - 7.28 (m, 2H), 7.26 - 6.97 (m, 6H), 5.16 - 5.11 (m, 0.5H), 4.47 - 4.31 (m, 0.5H), 3.99 - 3.92 (m, 3H), 3.19 - 2.70 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 428.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-(二氟甲基)-4-(1H -吲唑-7-基)噁唑-5-甲醯胺(94)
使中間物衍生物7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H -吲唑及1-(二氟甲基)-3-碘-1H- 吡唑-4-甲酸乙酯經歷如關於化合物12 所描述之條件以得到化合物94 。獲得呈淡黃色固體之化合物94 (63 mg，產率：40.9%)：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.94 (br s, 1H), 8.91 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.19 - 8.12 (m, 2H), 8.01 - 7.84 (m, 2H), 7.81 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.75 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 7.31 (d,J = 4.3 Hz, 4H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 7.10 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 5.42 - 5.34 (m, 1H), 3.21 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 2.85 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ = 453.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(2-甲基-2H -吲唑-7-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(99)
使中間物衍生物(2-甲基-2H -吲唑-7-基)硼酸及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯經歷如關於化合物12 所描述之條件以得到化合物99 。獲得呈白色固體之化合物99 (70 mg，產率：23.4%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.41 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.93 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.80 - 7.74 (m, 2H), 7.18 - 7.05 (m, 5H), 6.82 - 6.78 (m, 2H), 5.25 - 5.18 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.92 - 3.87 (m, 3H), 3.01 - 2.95 (m, 1H), 2.47 - 2.41 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 431.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(1-異丙基-1H -吲唑-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(100)
使中間物衍生物1-異丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H -吲唑及1-(二氟甲基)-3-碘-1H- 吡唑-4-甲酸乙酯經歷如關於化合物12 所描述之條件以得到化合物100 。獲得呈白色固體之化合物100 (60 mg，產率：48.41%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ = 459.2。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.31 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 8.09 - 8.05 (m , 2H), 8.04 (br. s, 1H), 7.79 (br. s, 1H), 7.60 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 7.30 - 7.14 (m, 7H), 5.31 - 5.20 (m, 1H), 5.03 - 4.91 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.16 - 3.04 (m, 1H), 2.83 - 2.71 (m, 1H), 1.45 (d,J = 6.4 Hz, 6H)。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[B ]噻吩-7-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(101)
獲得呈白色固體之化合物101 (50 mg，產率：11.58%)：1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.96 (s, 1H), 7.92 (dd,J = 1.1, 7.9 Hz, 1H), 7.62 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.51 - 7.47 (m, 2H), 7.44 - 7.38 (m, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 3H), 7.00 (dd,J = 2.9, 6.7 Hz, 2H), 6.97 - 6.92 (m, 1H), 6.58 (br d,J = 6.8 Hz, 1H), 6.20 (br s, 1H), 5.37 (ddd,J = 4.8, 7.0, 8.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.93 (m, 3H), 3.17 (dd,J = 4.9, 13.9 Hz, 1H), 2.81 (dd,J = 8.7, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ =433.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[B ]噻吩-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(102)
獲得呈白色固體之化合物102 (100 mg，產率：71.0%)：1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.19 (s, 1H), 8.15 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.00 - 7.94 (m, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.67 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 7.37 - 7.15 (m, 8H), 5.31 - 5.14 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.11 (dd,J = 3.8, 13.8 Hz, 1H), 2.77 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 433.1。 實例2 - 化合物4、10、13、25、37、49及63N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(異喹啉-1-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(3)
Figure 02_image481
Figure 02_image483
向3-碘-1H- 吡唑-4-甲酸乙酯(20 g，75.18 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液中添加2-氯-2,2-二氟乙酸鈉(22.92 g，150.36 mmol)及Cs2 CO3 (48.99 g，150.36 mmol)。在100℃下攪拌混合物16 h。濃縮反應混合物，將殘餘物用H2 O (200 mL)稀釋且用EtOAc (100 mL×3)萃取。將合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO® ；X g SepaFlash® 矽膠急驟管柱，0%~10%~20%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑)純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物4A (9.1 g，產率：38.30%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.47 - 7.95 (m, 1H), 7.44 - 6.95 (m, 1H), 4.53 - 4.17 (m, 2H), 1.54 - 1.17 (m, 3H)。
在N2 氛圍下向化合物4A (500 mg，1.58 mmol)、1-溴異喹啉(329 mg，1.58 mmol)、CsF (480 mg，3.16 mmol)及B2 pin2 (603 mg，2.37 mmol)於甲苯(8 mL)及MeOH (8 mL)中之溶液中一次性添加Pd(OAc)2 (35.52 mg，158.21 μmol)及P(1-金剛烷基)2 Bu (57 mg，158.98 μmol)。在N2 氛圍下在80℃下攪拌混合物16小時。將反應混合物過濾且濃縮，將殘餘物用H2 O (10 mL)稀釋且用EA (10 mL×3)萃取。有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(PE:EA =5:1 至2:1 )純化殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物4B (80 mg，產率：12.1%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.64 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.90 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.83 - 7.75 (m, 2H), 7.74 - 7.68 (m, 1H), 7.55 (ddd,J = 1.1, 7.0, 8.4 Hz, 1H), 7.48 - 7.29 (m, 1H), 4.01 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 0.86 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 317.9。
向化合物4B (80 mg，252.14 μmol)於MeOH (10 mL)及H2 O (3 mL)中之溶液中添加NaOH (40 mg，1.00 mmol)。在50℃攪拌反應混合物16小時。將反應混合物濃縮，用水(10 mL)稀釋，用MTBE (10 mL)萃取，隨後用2 N HCl將水相酸化至pH為約2至3，並凍乾。隨後將殘餘物攪拌於溶液(DCM:MeOH=10:1)中，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈棕色固體之化合物4C (39 mg，產率：53.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.91 (s, 1H), 8.51 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 8.01 (t,J = 8.5 Hz, 2H), 7.98 - 7.85 (m, 2H), 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.62 (t,J = 7.7 Hz, 1H)。
向化合物4C (64 mg，221.27 μmol)及中間物1D (56 mg，242.75 μmol，HCl)於DMF (10 mL)中之溶液中添加HBTU (101 mg，266.32 μmol)，隨後添加DIEA (114 mg，882.06 μmol，153.64 μL)且在25℃下攪拌2小時。將反應混合物用水(40 mL)稀釋，用EA (30 mL×3)萃取，濃縮有機層，得到殘餘物。將殘餘物於PE:EA (10:1，20 mL)中濕磨且藉由過濾進行收集。獲得呈淡黃色固體之化合物4D (80 mg，產量：76.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.71 - 9.27 (m, 1H), 8.84 - 8.54 (m, 2H), 8.41 - 7.57 (m, 6H), 7.30 (br s, 1H), 7.16 - 6.62 (m, 6H), 6.17 - 5.76 (m, 1H), 4.52 - 4.23 (m, 1H), 3.93 - 3.75 (m, 1H), 2.85 - 2.67 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 466.1。
向化合物4D (80 mg，171.88 μmol)於DMSO (10 mL)及DCM (50 mL)中之溶液中添加DMP (292 mg，688.45 μmol)。在25℃下攪拌混合物3小時。將反應混合物用DCM (20 mL)稀釋，用飽和NaHCO3 (25 mL)及飽和Na2 S2 O3 (25 mL)淬滅，攪拌混合物10 min。將有機層用水(40 mL×2)、鹽水(40 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，隨後過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(PE:EA =1:1 至 0:1 )純化殘餘物。獲得呈淡黃色固體之化合物4 (25 mg，產量：29.9%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.81 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.37 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 8.28 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 8.14 - 7.97 (m, 3H), 7.92 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.83 (br d,J = 5.3 Hz, 2H), 7.72 - 7.66 (m, 1H), 7.06 - 6.92 (m, 5H), 5.46 - 5.36 (m, 1H), 3.15 (br dd,J = 4.5, 14.0 Hz, 1H), 2.88 (dd,J = 8.7, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 464.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(異喹啉-1-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(10)
分別如實例2 中使用對應甲酸製備化合物10 、 13 、 25 、 37 、 49 及63 。使用3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯獲得呈淡黃色固體之化合物10 (55 mg，產率：61.2%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 10.21 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.61 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.32 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 8.12 - 8.02 (m, 2H), 7.90 - 7.80 (m, 3H), 7.69 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 - 6.88 (m, 5H), 5.47 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.17 (dd,J = 4.7, 13.8 Hz, 1H), 2.91 (dd,J = 7.3, 14.3 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 428.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(喹喏啉-2-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(13)
使用3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯獲得呈白色固體之化合物13 (20 mg，產率：76.2%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.18 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 9.60 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.12 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 2H), 7.77 (dt,J = 1.3, 7.7 Hz, 1H), 7.65 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.01 - 6.93 (m, 4H), 6.90 - 6.79 (m, 1H), 5.79 - 5.74 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.29 - 3.18 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹喏啉-2-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(25)
獲得呈白色固體之化合物25 (20 mg，產率：52.2%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 10.80 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 9.51 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.23 - 7.82 (m, 5H), 7.78 (dt,J = 1.3, 7.6 Hz, 1H), 7.71 - 7.65 (m, 1H), 7.01 - 6.89 (m, 4H), 6.88 - 6.82 (m, 1H), 5.77 - 5.67 (m, 1H), 3.24 - 3.12 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 465.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(6,7-二甲氧基喹啉-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(37)
獲得呈淡黃色固體之化合物37 (15 mg，產率：47.2%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.62 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.35 - 8.23 (m, 1H), 7.71 (br d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.49 (br s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.26 - 7.17 (m, 5H), 7.10 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 5.27 - 5.18 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.16 - 3.21 (m, 1H), 2.75 - 2.81 (m, 1H)。MS (ESI) m/z (M+H)+ 488.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(喹唑啉-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(49)
使用3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯獲得呈白色固體之化合物49 (62 mg，產率：61.3%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 10.10 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.66 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.06 (d,J = 3.5 Hz, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 1H), 7.01 (s, 5H), 5.61 - 5.35 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.18 (dd,J = 5.0, 14.2 Hz, 1H), 2.99 (dd,J = 7.6, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹唑啉-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(63)
獲得呈淡黃色固體之化合物63 (28 mg，產率：73.3%)：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.51 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.23 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 8.18 - 7.99 (m, 4H), 7.90 - 7.80 (m, 1H), 7.79 - 7.71 (m, 1H), 7.14 - 7.03 (m, 5H), 5.36 (dt,J = 4.6, 7.9 Hz, 1H), 3.14 (dd,J = 4.2, 13.9 Hz, 1H), 2.89 (dd,J = 8.5, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 465.1。實例 3 N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(哌嗪-1-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺鹽酸鹽(2)
Figure 02_image485
向3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯(0.5 g，1.79 mmol)及哌嗪-1-甲酸第三丁酯(665 mg，3.57 mmol)於二噁烷(20 mL)中之溶液中添加S-Phos (147 mg，357.06 μmol)及Cs2 CO3 (1.16 g，3.57 mmol)，隨後在N2 氛圍下添加Pd(OAc)2 (40 mg，178.53 μmol)。在100℃下攪拌反應物17 h。將反應混合物過濾，用EA (30 mL×2)洗滌，濃縮濾液，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；4 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~10%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，20 mL/min)純化殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物2A (0.15 g，產率：22.8%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.75 (s, 1H), 4.24 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.61 - 3.54 (m, 4H), 3.30 - 3.20 (m, 4H), 1.47 (s, 9H), 1.32 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 339.1。
如實例1中所示將化合物2A 轉化成化合物2D 。獲得呈黃色固體之化合物2D (0.10 g，產率：72.2%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.30 - 7.84 (m, 4H), 7.30 - 7.17 (m, 3H), 7.07 (d,J = 7.1 Hz, 2H), 5.57 - 5.44 (m, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 3H), 3.28 - 3.08 (m, 6H), 2.86 - 2.70 (m, 4H), 1.43 - 1.38 (m, 9H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 485.3。
向化合物2D (100 mg，206.38 μmol)於EtOAc (2 mL)中之溶液中添加HCl/EtOAc (4 M，4 mL)，在25℃攪拌混合物4 h。濃縮反應混合物，得到殘餘物。將殘餘物於CH3 CN (10 mL×2)中濕磨，且隨後濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物2 (75 mg，產率：94.3%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.35 (br s, 2H), 8.17 - 8.06 (m, 2H), 7.87 (br s, 1H), 7.32 - 7.12 (m, 5H), 5.53 - 5.29 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.28 - 2.86 (m, 10H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 385.2。實例 4 - 化合物 6 至 7 N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噻唑-7-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(7)
Figure 02_image487
向7-溴苯并[d]噻唑(900 mg，4.2 mmol)於二噁烷(20 mL)中之溶液中添加KOAc (843 mg，8.5 mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷) (1.07 g，4.2 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (307 mg，420 umol)。隨後在N2 氛圍下在90℃下攪拌混合物12 h。將反應物冷卻至室溫且過濾反應物。減壓濃縮經過濾溶液以移除溶劑。將H2 O (20 mL)添加至殘餘物，用EA (20 mL×3)萃取混合物。將合併之有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黑色油狀物之化合物6A (1.0 g，粗產物)，其直接用於下一步驟中。
使用如實例1 中所描述之程序將化合物6A 轉化成化合物6 。獲得呈白色固體之化合物6 (50 mg，產率：33%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 9.36 (s, 1H), 8.60 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.03 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.78 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.48 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 4H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 5.41 - 5.22 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.18 (dd,J = 3.8, 14.1 Hz, 1H), 2.83 (dd,J = 10.2, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 434.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噻唑-7-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(7)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物6A 及4A 轉化成化合物7 。獲得呈黃色固體之化合物7 (60 mg，產率：51.6%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 9.41 (s, 1H), 8.99 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.17 - 8.09 (m, 2H), 8.02 - 7.83 (m, 2H), 7.73 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.53 (t,J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 4H), 7.24 (br s, 1H), 5.42 - 5.32 (m, 1H), 3.21 (br dd,J = 3.3, 13.9 Hz, 1H), 2.82 (dd,J = 10.1, 13.5 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 470.1。 實例5 - 化合物32、62、69及61
Figure 02_image489
將K2 CO3 (5.26 g，38.06 mmol)添加至4-溴-1H -吲唑(5 g，25.38 mmol)於DMF (50 mL)中之混合物中。30 min後，添加MeI (18.2 g，128.22 mmol，8.0 mL)，且在25℃下攪拌混合物3 h。用H2 O (150 mL)及EA (50 mL)處理混合物。分離有機層且用EA (50 mL×2)萃取水層。將合併之有機層用鹽水(50 mL×2)洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(PE/EA=10/1至5/1)純化殘餘物，得到一對異構體。
獲得呈白色固體之異構體1 (化合物32A ，Rf =0.54，PE/EA=5/1)：4-溴-1-甲基-吲唑(3.2 g，59.8%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 7.98 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 7.67 - 7.65 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 4.04 (s, 3H)。
獲得呈無色黏性油狀物之異構體2 (化合物32B ，Rf =0.24，PE/EA=5/1)：4-溴-2-甲基-吲唑(1.3 g，24.3%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.37 (s, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 1H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 7.13 (dd,J =7.3, 8.6 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H)。
將KOAc (1.12 g，11.37 mmol)添加至化合物32A (1.2 g，5.69 mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)(2.17 g，8.53 mmol)於DMF (25 mL)中之混合物中，接著添加Pd(dppf)Cl2 .CH2 Cl2 (232 mg，284.09 μmol)。隨後使氮氣鼓泡通過混合物。將混合物加熱至85℃且攪拌12 h。用EA (75 mL)及鹽水(100 mL)處理混合物。經由矽藻土過濾混合物。將濾液轉移至分液漏斗。將有機層分離，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1)純化殘餘物，得到呈無色黏性油狀物之化合物32C (1.5 g，87.9%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.15 (d,J = 0.8 Hz, 1H), 7.79 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 7.41 (dd,J = 6.8, 8.5 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 1.35 (s, 12H)。
將KOAc (1.2 g，12.3 mmol)添加至化合物32B (1.3 g，6.2 mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)(2.4 g，9.3 mmol)於DMF (20 mL)中之混合物中。使N2 氣體鼓泡通過混合物。隨後添加Pd(dppf)Cl2 . CH2 Cl2 (253 mg，309.8 μmol)。在氮氣氛圍下在85℃下攪拌混合物12 h。用EA (50 mL)及鹽水(50 mL)稀釋混合物。經由矽藻土過濾混合物。將濾液轉移至分液漏斗。分離有機層且用EA (15 mL×2)萃取水層。將合併之有機層用鹽水(35 mL)洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析(PE/EA=5/1至2/1)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物32D (1.5 g，產率94.4%) MS (ESI)m/z (M+H)+ 259.2。
Figure 02_image491
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(1-甲基-1H -吲唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(32)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物32C 及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物32 。獲得呈淡黃色固體之化合物32 (60 mg，產率：60.0%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.38 (br d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.09 (br d,J = 9.5 Hz, 3H), 7.82 (br s, 1H), 7.61 - 7.53 (m, 1H), 7.35 - 7.19 (m, 7H), 5.38 - 5.25 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.15 (br dd,J = 3.4, 13.7 Hz, 1H), 2.81 (br dd,J = 10.2, 13.4 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 431.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(1-甲基-1H -吲唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(62)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物32C 及中間物4A 轉化成化合物62 。獲得呈白色固體之化合物62 (96 mg，產率：48.9%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.52 (s, 1H), 8.46 (d,J = 9.8 Hz, 1H), 8.18 - 7.70 (m, 3H), 7.69 - 7.51 (m, 2H), 7.42 - 7.33 (m, 2H), 7.31 - 7.19 (m, 5H), 5.45 - 5.28 (m, 1H), 4.11 - 4.04 (m, 3H), 3.21 (dd,J = 4.4, 14.2 Hz, 1H), 2.89 (dd,J = 9.4, 14.2 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 467.1。
Figure 02_image493
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(2-甲基-2H -吲唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(69)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物32D 及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物69 。獲得呈白色固體之化合物69 (230 mg，產率：69.7%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.39 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 6H), 7.15 (dd,J = 7.2, 8.4 Hz, 1H), 5.33 - 5.28 (m, 1H), 4.17 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.16 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 2.81 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 431.1。
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-甲基-2H -吲唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(61)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物32D 及中間物4A 轉化成化合物61 。獲得呈淡黃色固體之化合物61 (250 mg，產率：85.9%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.91 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.17 - 8.11 (m, 1H), 7.98 - 7.82 (m, 2H), 7.62 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.34 - 7.22 (m, 6H), 7.19 (dd,J = 7.2, 8.4 Hz, 1H), 5.40 - 5.32 (m, 1H), 4.21 - 4.09 (m, 3H), 3.25 - 3.17 (m, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ = 467.2。 實例6 - 化合物33至34、77
Figure 02_image495
將K2 CO3 (3.51 g，25.38 mmol)添加至7-溴-1H -吲唑(5 g，25.38 mmol)於DMF (50 mL)中之混合物中。30 min後，添加MeI (18.05 g，7.92 mL，127.17 mmol)，且在25℃下攪拌混合物3 h。藉由濾紙移除不溶性物質。真空濃縮濾液。用H2 O (50 mL)及EA (50 mL)處理殘餘物。將有機層分離，用鹽水(15 mL×2)洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析(PE/EA=10/1至3/1)純化殘餘物，得到一對異構體。
獲得呈無色油狀物之異構體1 (化合物33A ，Rf =0.54，PE/EA=5/1)：7-溴-1-甲基-1H -吲唑(2.85 g，53.2%產率)，其在靜置後變為白色固體。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.09 (s, 1H), 7.74 (dd,J = 0.9, 7.9 Hz, 1H), 7.56 (dd,J = 0.8, 7.4 Hz, 1H), 7.02 - 6.97 (m, 1H), 4.28 (s, 3H)。
獲得呈白色固體之異構體2 (化合物33B ，Rf =0.18，PE/EA=5/1)：7-溴-2-甲基-2H -吲唑(1.85 g，34.5%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.47 (s, 1H), 7.69 (dd,J = 0.7, 8.4 Hz, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 1H), 6.91 (dd,J = 7.3, 8.2 Hz, 1H), 4.17 (s, 3H)。
將KOAc (1.35 g，13.74 mmol)添加至化合物33A (1.45 g，6.87mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)(2.62 g，10.31 mmol)於DMF (25 mL)中之混合物中。使氮氣鼓泡通過混合物且添加Pd(dppf)Cl2 .CH2 Cl2 (280 mg，342.87 μmol)。隨後將混合物加熱至85℃且攪拌12 h。用EA (75 mL)及鹽水(100 mL)處理混合物。經由矽藻土過濾混合物。將濾液轉移至分液漏斗。將有機層分離，經MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=10/1至5/1)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物33C (1.7 g，90.1%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 7.99 (s, 1H), 7.89 (dd,J = 1.0, 7.0 Hz, 1H), 7.82 (dd,J = 1.3, 8.0 Hz, 1H), 7.13 (dd,J = 7.0, 8.0 Hz, 1H), 4.31 (s, 3H), 1.41 (s, 12H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 259.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(1-甲基-1H -吲唑-7-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(33)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物33C 及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物33 。獲得呈淡黃色固體之化合物33 (70 mg，產率：43.6%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.37 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.93 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.82 - 7.70 (m, 2H), 7.26 - 7.17 (m, 3H), 7.13 - 7.06 (m, 4H), 5.26 - 5.17 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.10 (br dd,J = 3.4, 13.9 Hz, 1H), 2.69 (br dd,J = 9.8, 13.8 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 431.2。
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(1-甲基-1H -吲唑-7-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(34)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物33C 及中間物4A 轉化成化合物34 。獲得呈白色固體之化合物34 (30 mg，產率：27.0%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.81 (s, 1H), 8.10 - 8.00 (m, 2H), 7.92 - 7.43 (m, 4H), 7.22 - 7.07 (m, 7H), 5.30 - 5.22 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.15 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 2.79 (dd,J = 9.4, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 467.2), 4.21 - 4.09 (m, 3H), 3.25 - 3.17 (m, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ = 467.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-甲基-2H -吲唑-7-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(77)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-2H -吲唑(使用與33C 相同之程序自中間物33B 製備)及中間物4A 轉化成化合物77 。獲得呈白色固體之化合物77 (30 mg，產率：42.6%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.59 (s, 1H), 8.40 - 8.35 (m, 2H), 8.05 - 7.88 (m, 2H), 7.77 - 7.73 (m, 2H), 7.22 - 7.11 (m, 4H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 7.00 - 6.95 (m, 2H), 5.25 - 5.18 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.06 - 2.99 (m, 1H), 2.61 - 2.53 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 467.2。 實例7 - 化合物17、31、51、70、24、26及55
Figure 02_image497
向3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯(1 g，3.57 mmol)於MeOH (15 mL)中之溶液中添加NaOH (714 mg，17.85 mmol)於H2 O (2 mL)中之溶液，在50℃下攪拌混合物1 h。濃縮反應混合物以移除MeOH，隨後用水(30 mL)稀釋，用1 N HCl酸化至pH為約3，形成沈澱物，過濾固體且真空乾燥。殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。獲得呈白色固體之化合物17A (850 mg，產率：94.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 12.45 (s, 1H), 8.31 - 8.08 (m, 1H), 3.96 - 3.76 (m, 3H)。
向化合物17A (0.85 g，3.37 mmol)及中間物1D (856 mg，3.71 mmol，HCl)於DMF (20 mL)中之溶液中添加HBTU (1.53 g，4.05 mmol)及DIEA (13.49 mmol，2.35 mL)，在25℃下攪拌混合物1 h。在0℃下用水(50 mL)稀釋反應混合物，形成沈澱物，且過濾固體並真空乾燥。殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。獲得呈白色固體之化合物17B (1.2 g，產率：83.0%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.13 (s, 1H), 7.62 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 7.33 (s, 2H), 7.29 - 7.17 (m, 4H), 7.16 - 7.09 (m, 1H), 5.87 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.56 - 4.36 (m, 1H), 4.01 (dd,J = 3.3, 5.7 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.89 - 2.62 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.0。
向化合物17B (1.2 g，2.80 mmol)及(3-甲氧基羰基苯基)硼酸(756 mg，4.20 mmol)於二噁烷(30 mL)及H2 O (3 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (775 mg，5.60 mmol)，隨後在N2 氛圍下添加Pd(dppf)Cl2 (205 mg，280.23 μmol)，在80℃下攪拌混合物18 h。將反應混合物濃縮以移除溶劑，用EA (50 mL)稀釋，過濾且用EA (20 mL×2)洗滌，將濾液用水(50 mL×2)洗滌，隨後經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO® ；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~100%乙酸乙酯/石油醚梯度EA:MeOH= 10:1之溶離劑，30 mL/min)純化殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物17C (0.4 g，產率：32.7%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.29 (t,J = 1.7 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.90 - 7.80 (m, 2H), 7.77 - 7.74 (m, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 1H), 7.34 - 7.11 (m, 7H), 5.82 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 4.58 - 4.40 (m, 1H), 4.02 (dd,J = 3.5, 5.7 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.87 - 2.66 (m, 2H)。
向化合物17C (120 mg，274.94 μmol)於MeOH (3 mL)中之溶液中添加CH3 NH2 (549.88 μmol，8 mL)，隨後在℃℃下攪拌混合物40 h。將反應混合物濃縮以移除溶劑，用DCM (20 mL)稀釋且過濾，收集固體。藉由製備型HPLC (管柱：YMC-Actus Triart C18 100×30mm×5μm；移動相：[水(0.05% HCl)-ACN]；B%：10%-66%，8.5 min)純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物17D (60 mg，產率：49.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.43 (br d,J = 4.6 Hz, 1H), 8.08 (d,J = 18.1 Hz, 2H), 7.75 (dd,J = 8.6, 11.0 Hz, 2H), 7.58 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.41 - 7.11 (m, 8H), 4.47 (br s, 1H), 4.02 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.82 - 2.65 (m, 5H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 436.1。
向化合物17D (60 mg，137.78 μmol)於DMSO (3 mL)及DCM (50 mL)中之溶液中添加DMP (234 mg，551.12 μmol)，在25℃下攪拌混合物1 h。將反應混合物用DCM (20 mL)稀釋且藉由添加Na2 S2 O3 (飽和溶液30 mL)及NaHCO3 (飽和溶液30 mL)淬滅，用DCM (30 mL×2)萃取混合物。將合併之有機層用H2 O (50 mL)洗滌，隨後用鹽水(50 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到殘餘物。將殘餘物於CH3 CN中濕磨，過濾且真空乾燥固體。獲得呈白色固體之化合物17 (15 mg，產率：22.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.48 - 8.35 (m, 2H), 8.15 - 8.07 (m, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.74 (td,J = 1.5, 7.8 Hz, 1H), 7.64 (td,J = 1.4, 8.0 Hz, 1H), 7.36 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 7.32 - 7.17 (m, 5H), 5.30 - 5.24 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.15 (dd,J = 4.0, 13.9 Hz, 1H), 2.89 - 2.74 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 434.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噁唑-7-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(31)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯并[d]噁唑(使用與33C 相同之程序自7-溴苯并[d]噁唑製備)及中間物17B 轉化成化合物31 。獲得呈白色固體之化合物31 (60 mg，產率：60.2%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.61 (s, 1H), 8.44 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 - 7.74 (m, 2H), 7.47 - 7.43 (m, 1H), 7.39 - 7.20 (m, 6H), 5.26 - 5.19 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.86 - 2.79 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 418.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噻唑-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(51)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物苯并[d]噻唑-4-基硼酸(使用與33C 相同之程序自4-溴苯并[d]噻唑製備)及中間物17B 轉化成化合物51 。獲得呈淡黃色固體之化合物51 (75 mg，產率：69.6%)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 9.19 (s, 1H), 8.22 - 8.12 (m, 2H), 7.99 - 7.90 (m, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.51 - 7.42 (m, 2H), 7.27 - 7.15 (m, 3H), 7.13 - 7.06 (m, 2H), 5.22 - 5.06 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.11 - 2.94 (m, 1H), 2.80 - 2.63 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 434.1。
Figure 02_image499
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噻唑-4-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(70)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物苯并[d]噻唑-4-基硼酸(使用與33C 相同之程序自4-溴苯并[d]噻唑製備)及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物70 。獲得呈淡黃色固體之化合物70 (50 mg，產率：48.5%)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 9.14 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.52 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.20 - 8.16 (m, 1H), 8.11 - 7.87 (m, 2H), 7.79 - 7.69 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.27 - 7.13 (m, 5H), 5.16 - 5.07 (m, 1H), 3.04 (dd,J = 3.7, 13.9 Hz, 1H), 2.72 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 470.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(24)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物2-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物24 。獲得呈淺黃色固體之化合物24 (140 mg，產率：79.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.67 - 8.56 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.04 - 7.67 (m, 2H), 7.35 - 7.16 (m, 5H), 6.09 (s, 1H), 5.35 - 5.29 (m, 1H), 3.18 (dd,J = 4.0, 14.1 Hz, 1H), 2.81 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H), 2.20 (d,J = 12.1 Hz, 6H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 431.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-甲基呋喃-3-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(26)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基呋喃-3-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物26 。獲得呈淡黃色固體之化合物26 (128 mg，產率：95.87%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.63 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.11 - 7.67 (m, 3H), 7.44 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 7.30 - 7.22 (m, 4H), 7.22 - 7.15 (m, 1H), 6.49 (d,J = 1.8 Hz, 1H), 5.37 - 5.23 (m, 1H), 3.16 (dd,J = 3.6, 14.0 Hz, 1H), 2.79 (br dd,J = 10.1, 13.9 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 417.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(55)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物2-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷及中間物17B 轉化成化合物55 。獲得呈白色固體之化合物55 (22 mg，產率：26.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.09 - 8.03 (m, 2H), 8.01 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 2H), 7.25 - 7.17 (m, 3H), 6.13 - 6.02 (s, 1H), 5.28 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.15 (dd,J = 4.0, 13.9 Hz, 1H), 2.82 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H), 2.23 - 2.12 (m, 6H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 395.2。 實例8 - 化合物68及71
Figure 02_image501
合併參(三氟甲烷磺酸)釔(249 mg，0.5 mmol)及原甲酸三乙酯(15 mL，93.1 mmol)。向此混合物中添加2-胺基-3-溴苯酚(1.8 g，9.31 mmol)於DMSO (20 mL)及吡啶(1.5 mL，18.6 mmol)中之溶液。將反應混合物在60℃下於加熱塊中攪拌18 h。向混合物添加H2 O (200 mL)且用EA (50 mL)萃取。將有機相用鹽水(20 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮。藉由FCC (0-50% EA/PE)純化產物，得到呈紅色固體之化合物68A (1 g，產率51.7%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.96 (s, 1H), 7.90 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.73 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 198.0。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[D ]噁唑-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(68)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯并[d]噁唑(68B )(使用與33C 相同之程序自68A 製備)及中間物17B 轉化成化合物68 。獲得呈白色固體之化合物68 (10 mg，產率：6.7%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.52 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.73 (dd,J = 1.6, 7.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.46 (m, 3H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.25 - 7.15 (m, 3H), 7.08 (d,J = 6.3 Hz, 2H), 5.26 - 5.21 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.22 - 3.10 (m, 1H), 2.83 (dd,J = 8.5, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 418.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(苯并[d ]噁唑-4-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(71)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物68B 及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物71 。獲得呈淡黃色固體之化合物71 (124 mg，產率：77.99%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.65 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.10 - 7.88 (m, 2H), 7.79 (dd,J = 2.9, 6.4 Hz, 1H), 7.75 - 7.64 (m, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.30 - 7.14 (m, 5H), 5.30 - 5.21 (m, 1H), 3.17 - 3.12 (m, 1H), 2.87 (dd,J = 8.9, 14.2 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 454.1。 實例9 - 化合物35及50
Figure 02_image503
將TEA (1.5 mL，10.64 mmol)添加至2-胺基-3-溴苯酚(1 g，5.32 mmol)及CDI (1.72 g，10.64 mmol)於THF (20 mL)中之混合物中。在60℃下攪拌混合物18 h。蒸發反應混合物且用二氯甲烷(60 mL)稀釋。用1 M鹽酸(2×30 mL)及水(30 mL)洗滌有機層。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。獲得呈紅色固體之化合物35A (1.1 g，96.64%產率)，其直接用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.19 (br s, 1H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.08 - 7.01 (m, 1H)。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-甲基-3-(2-側氧基-2,3-二氫苯并[d ]噁唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(35)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)苯并[d]噁唑-2(3H )-酮(35B )(使用與33C 相同之程序自35A 製備)及中間物17B 轉化成化合物35 。獲得呈黃色固體之化合物35 (18 mg，產率：29.62%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.47 (br s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.55 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.36 - 7.21 (m, 5H), 7.18 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.06 (br t,J = 8.2 Hz, 2H), 6.96 (br d,J = 6.8 Hz, 1H), 6.25 (br s, 1H), 5.49 - 5.40 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 3H), 3.30 (dd,J = 4.8, 14.1 Hz, 1H), 2.93 (dd,J = 9.0, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 434.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-側氧基-2,3-二氫苯并[d ]噁唑-4-基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(50)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物35B 及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物50 。獲得呈白色固體之化合物50 (20 mg，產率：22.8%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.27 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.12 - 7.90 (m, 1H), 7.83 - 7.58 (m, 2H), 7.23 - 6.59 (m, 9H), 5.24 (s, 1H), 2.99 - 2.97 (m, 1H), 2.70 - 2.60 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 470.1。 實例10 - 化合物16
Figure 02_image505
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(1H -吲唑-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(16)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1H -吲唑(16A )(使用與33C 相同之程序自4-溴-1H -吲唑製備)及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物16 。獲得呈白色固體之化合物16 (60 mg，產率：77.4%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 13.05 (br s, 1H), 8.34 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.13 - 8.08 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 1H), 7.32 - 7.19 (m, 7H), 5.34 - 5.24 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.14 (dd,J = 3.8, 14.1 Hz, 1H), 2.80 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 417.1。 實例11 - 化合物39
Figure 02_image507
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(1H -吲唑-7-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(39)
在0℃下將NaH (406 mg，10.2 mmol，60%純度)添加至7-溴-1H-吲唑(1 g，5.1 mmol)於THF (15 mL)中之混合物中。在0℃攪拌混合物1 h，隨後添加SEM-Cl (1.35 mL，7.62 mmol)。添加後，使反應溫度緩慢上升至室溫(22℃)，且在22℃下攪拌混合物15 h。藉由添加飽和NH4 Cl溶液(30 mL)淬滅混合物。隨後用EA (3×25 mL)萃取混合物。合併之有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經無水MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1/0至8/1)純化殘餘物，得到呈黃色油狀物之化合物39A (1.1 g，產率66.2%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.26 (s, 1H), 7.85 (dd,J = 0.9, 7.9 Hz, 1H), 7.70 (dd,J = 0.9, 7.5 Hz, 1H), 7.13 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 5.99 (s, 2H), 3.52 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 0.78 (t,J = 7.8 Hz, 2H), -0.13 (s, 9H)。
使用如實例1 中所描述之程序將化合物7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H -吲唑(39B )(使用與33C 相同之程序自39A 製備)及3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物39F 。獲得呈黃色固體之化合物39F (203 mg，產率：70.49%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.31 (s, 1H), 8.19 - 8.16 (m, 1H), 7.86 - 7.80 (m, 1H), 7.71 - 7.50 (m, 2H), 7.25 - 7.13 (m, 6H), 7.01 (d,J = 7.3 Hz, 2H), 5.31 (s, 2H), 5.28 - 5.19 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.74 (dd,J = 8.5, 14.1 Hz, 1H), 0.90 - 0.83 (m, 3H), 0.57 (t,J = 8.0 Hz, 2H), -0.14 (s, 9H)。
將HCl/EtOAc (4 M，4 mL)添加至化合物39F (160 mg，0.3 mmol)之混合物中。在30℃下攪拌混合物3 h。過濾混合物且真空濃縮濾餅。獲得呈白色固體之化合物39 (66 mg，54.1%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.74 (s, 1H), 8.44 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.11 - 8.04 (m, 3H), 7.81 - 7.73 (m, 2H), 7.68 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 7.28 - 7.22 (m, 4H), 7.21 - 7.16 (m, 1H), 7.02 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 5.33 - 5.26 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.14 (dd,J = 3.9, 14.0 Hz, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ =417.1。 實例12 - 化合物9、47及48
Figure 02_image509
向3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯(4 g，14.28 mmol)及1H- 苯并[d]咪唑(2 g，16.93 mmol)於DMF (40 mL)中之溶液中添加Cs2 CO3 (9.31 g，28.57 mmol)、1H- 苯并三唑(340 mg，2.86 mmol)及CuI (272 mg，1.43 mmol)。於N2 下在110℃下攪拌混合物48 h。將混合物用H2 O (100 mL)稀釋，用EtOAc (150 mL)洗滌。收集水相，用1 N HCl調節至pH為約4，用EtOAc (300 mL)洗滌。收集水相且真空濃縮。用MeOH (40 mL)濕磨殘餘物。濾出固體。收集濾液且濃縮。藉由製備型HPLC (HCl)純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物9A (380 mg，產率：10.74%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 242.9。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(1H -苯并[D]咪唑-1-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(9)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物49A 及中間物1D 轉化成化合物9 。獲得呈白色固體之化合物9 (70 mg，產率：46.85%)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 417.1。1 HNMR (400MHz, DMSO-d6 )δ 8.61 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.02 (br. s, 1H), 7.77 (br. s, 1H), 7.71 - 7.65 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 7.30 - 7.16 (m, 7H), 5.29 - 5.20 (m, 1H), 4.00 - 3.91 (m, 3H), 3.18 - 3.09 (m, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 1H)。
Figure 02_image511
將4-氟苯-1,2-二胺(1 g，7.93 mmol)及HCOOH (10 mL)之混合物在90℃下攪拌2 h。用5 N NaOH將溶液調節至pH為約7。用EtOAc (50 mL×3)萃取混合物。收集有機物，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到呈棕色固體之化合物47A (1 g，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
使3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯及中間物47A 經歷如用於中間物9A之反應條件，且反應得到產物47B 及48A 。藉由製備型HPLC (HCl)純化產物，得到400 mg呈棕色固體之混合物，其藉由SFC (管柱：AD (250 mm×30 mm，5 μm)；移動相：[0.1%NH3 H2 O MEOH]；B%：25%-25%)，得到呈白色固體之化合物47B (100 mg，產率：2.61%)；呈白色固體之化合物48A (100 mg，產率：2.61%)，其藉由SFC再純化，得到48A (90 mg)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 260.9。
Figure 02_image513
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(6-氟-1H -苯并[D ]咪唑-1-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(47)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物47B 及中間物1D 轉化成化合物47 。獲得呈白色固體之化合物47 (50 mg，產率：48.0%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.42 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.33 - 8.27 (m, 1H), 7.72 (br s, 1H), 7.58 - 7.44 (m, 3H), 7.32 - 7.17 (m, 5H), 7.16 - 7.07 (m, 1H), 5.34 - 5.26 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.24 - 3.17 (m, 1H), 2.95 - 2.85 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 435.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(5-氟-1H -苯并[D ]咪唑-1-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(48)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物48A 及中間物1D 轉化成化合物48 。獲得呈白色固體之化合物48 (40 mg，產率：28.2%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.46 - 8.21 (m, 3H), 7.80 - 7.41 (m, 3H), 7.38 - 7.04 (m, 7H), 5.31 (br. s, 1H), 4.04 - 3.90 (m, 3H), 3.27 - 3.16 (m, 1H), 2.95 - 2.83 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 435.2。 實例13 - 化合物20及21
Figure 02_image515
向2-(呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1 g，5.15 mmol)於DMF (15 mL)中之溶液中添加NCS (723 mg，5.41 mmol)。在25℃下攪拌混合物4 h。將所得溶液用10% Na2 S2 O3 水溶液(50 mL)處理且用MTBE (50 mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(100 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。減壓移除溶劑後，藉由急驟矽膠層析(ISCO® ；12 g SepaFlash® 矽膠 急驟管柱 ，0~10% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度之溶離劑， 25 mL/min) 純化殘餘物。獲得呈無色油狀物之化合物20A (0.37 g，產率：31.4%)。獲得呈無色油狀物之化合物20B (0.13 g，產率：11.0%)。化合物20A 及化合物20B 之混合物：1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.92 (s, 1H), 7.34 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.78 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 4.23 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.27 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 254.9。
於N2 下向化合物70A (400 mg，861.69 μmol)及化合物20A (216 mg，945.38 μmol)以及化合物20B (80 mg，350.14 μmol)於二噁烷(20 mL)及H2 O (2 mL)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2 (70 mg，95.67 μmol)及K2 CO3 (300 mg，2.17 mmol)，且在N2 氛圍下在90℃下攪拌混合物16 h。濃縮反應混合物，並用EA (30 mL)及H2 O (40 mL)稀釋殘餘物，過濾，用EA (20 mL×2)萃取濾液，且隨後使有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由製備型TLC (SiO2 ，PE:EA = 1:2.5)純化殘餘物。隨後藉由製備型 HPLC (HCl條件；管柱：YMC-Actus Triart C18 100×30mm×5μm；移動相：[水(0.05% HCl)-ACN]；B%：30%-60%，10min)純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物20C (120 mg，產率：31.6%)。獲得呈白色固體之化合物21A (45 mg，產率：11.8%)。
化合物20C ：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.61 (s, 0.3H), 8.54 (s, 0.7H), 8.21 - 7.71 (m, 2H), 7.69 - 7.62 (m, 1H), 7.31 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 - 7.09 (m, 6H), 6.65 - 6.57 (m, 1H), 5.86 (d,J = 5.7 Hz, 0.7H), 5.75 (d,J = 5.7 Hz, 0.3H), 4.50 - 4.36 (m, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 0.7H), 3.87-3.83 (m, 0.3H), 2.91 - 2.69 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 439.0。
化合物21A ：1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.65 (s, 0.2H), 8.62 (s, 0.8H), 8.23 - 7.69 (m, 3H), 7.32 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.26 - 7.08 (m, 6H), 6.71 - 6.66 (m, 1H), 5.86 (d,J = 5.7 Hz, 0.8H), 5.74 (d,J = 6.0 Hz, 0.2H), 4.54 - 4.41 (m, 1H), 4.01 (dd,J = 3.5, 5.7 Hz, 0.8H), 3.88 (d,J = 5.3 Hz, 0.2H), 2.92 - 2.67 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 439.0。
Figure 02_image517
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2-氯呋喃-3-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(20)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物20C 轉化成化合物20 。獲得呈白色固體之化合物20 (90 mg，產率：70.6%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 - 7.71 (m, 3H), 7.67 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.30 - 7.22 (m, 4H), 7.21 - 7.14 (m, 1H), 6.66 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 5.38 - 5.21 (m, 1H), 3.15 (dd,J = 3.7, 13.9 Hz, 1H), 2.77 (dd,J = 10.0, 13.8 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 437.0。
Figure 02_image519
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(5-氯呋喃-3-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(21)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物21A 轉化成化合物21 。獲得呈白色固體之化合物21 (30 mg，產率：65.7%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.81 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.16 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.03 - 7.71 (m, 2H), 7.26 (d,J = 4.2 Hz, 4H), 7.20 - 7.16 (m, 1H), 6.74 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 5.36 - 5.23 (m, 1H), 3.17 (dd,J = 3.9, 14.0 Hz, 1H), 2.80 (dd,J = 10.3, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 437.1。 實例14 - 化合物36
Figure 02_image521
向2-(呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1 g，5.10 mmol)於DMF (15 mL)中之溶液中添加NCS (1.50 g，11.21 mmol)。在100℃下攪拌混合物2 h。將所得溶液用10% Na2 S2 O3 水溶液(50 mL)處理且用MTBE (50 mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(100 mL)洗滌且經Na2 SO4 乾燥。減壓移除溶劑後，藉由急驟矽膠層析(ISCO® ；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~10%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，20 mL/min)純化殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物36A (0.5 g，產率：37.0%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 6.45 - 6.23 (m, 1H), 1.31 (s, 12H)。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2,5-二氯呋喃-3-基)-1-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-甲醯胺(36)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物36A 及中間物70A (使用與17B 相同之程序自4A 製備)轉化成化合物36 。獲得呈白色固體之化合物36 (100 mg，產率：71.7%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.78 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.16 - 7.72 (m, 3H), 7.32 - 7.22 (m, 4H), 7.21 - 7.12 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.47 - 5.19 (m, 1H), 3.15 (dd,J = 3.6, 13.8 Hz, 1H), 2.76 (dd,J = 10.1, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 471.0。 實例15 - 化合物19及15
Figure 02_image523
於N2 下向2-(呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(500 mg，1.79 mmol)及3-呋喃基硼酸(250 mg，2.23 mmol)於二噁烷(20 mL)及H2 O (1 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (620 mg，4.49 mmol)及Pd(dppf)Cl2 (131 mg，179.03 μmol)。於N2 下在80℃下攪拌混合物16 h。濃縮反應混合物，且將殘餘物用EA (30 mL)及H2 O (30 mL)稀釋並過濾。用EA (20 mL)萃取濾液，且隨後使有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾並濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO® ； 24 g SepaFlash® 矽膠急驟管柱 ， 0~30% 乙酸乙酯 / 石油醚梯度之 溶離劑 ， 30 mL/min) 純化殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物19A (350 mg，產率：88.8%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.39 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.44 (t,J = 1.6 Hz, 1H), 6.95 (d,J = 1.3 Hz, 1H), 4.30 (q,J = 7.0 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 1.35 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 221.0。
向化合物19A (100 mg，454.08 μmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NCS (68 mg，509.24 μmol)。在25℃下攪拌混合物2 h。將反應物用H2 O (20 mL)稀釋，用EA (20 mL×2)萃取，有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到殘餘物。藉由製備型TLC (SiO2 ， PE:EA = 2:1 )純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物19B (70 mg，產率：60.5%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.92 (s, 1H), 7.34 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.78 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 4.23 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.27 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 254.9。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2-氯呋喃-3-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(19)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物19B 轉化成化合物19 。獲得呈白色固體之化合物19 (40 mg，產率：35.0%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.32 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.64 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.32 - 7.24 (m, 4H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 6.66 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 5.33 - 5.25 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.15 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 2.82 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 401.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(2,5-二氯呋喃-3-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(15)
Figure 02_image525
向化合物19A (50 mg，227.04 μmol)於DMF (2 mL)中之溶液中添加NCS (68 mg，509.24 μmol)。在100℃下攪拌混合物1.5 h。將反應物用H2 O (20 mL)稀釋，用EA (20 mL×2)萃取，有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到殘餘物。藉由製備型TLC (SiO2 ，PE:EA =2:1 )純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物15A (40 mg，產率60.9%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.93 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.34 - 4.18 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 1.31 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 289.0。
使用如實例1 中所描述之程序將化合物15A 轉化成化合物15 。獲得呈白色固體之化合物15 (35 mg，產率：47.2%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.40 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.29 - 7.21 (m, 4H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.35 - 5.19 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.12 (dd,J = 3.7, 13.9 Hz, 1H), 2.78 (dd,J = 10.1, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 435.0。 實例16 - 化合物23、3、46、52及79
Figure 02_image527
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(23)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-溴-1,2,5-噻二唑-3-甲酸甲酯及2-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷轉化成化合物23 。獲得呈白色固體之化合物23 (110 mg，產率：65.02%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.34 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.37 - 7.18 (m, 5H), 5.94 (s, 1H), 5.61 - 5.41 (m, 1H), 3.23 (dd,J = 3.5, 14.1 Hz, 1H), 2.85 (dd,J = 10.0, 14.0 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.18 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 399.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(4-氟苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(3)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-溴-1,2,5-噻二唑-3-甲酸甲酯及(4-氟苯基)硼酸轉化成化合物3。獲得呈白色固體之化合物3 (235 mg，產率：68.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.43 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.26 - 8.12 (m, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.34 - 7.16 (m, 7H), 5.56 - 5.38 (m, 1H), 3.24 (dd,J = 3.6, 14.0 Hz, 1H), 2.86 (dd,J = 10.3, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 399.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2-甲基呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(46)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-氯-1,2,5-噻二唑-3-甲酸乙酯及4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基呋喃-3-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷轉化成化合物46 。獲得呈淡黃色固體之化合物46 (45 mg，產率：42.84%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.34 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.46 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 4H), 7.22 (qd,J = 4.1, 8.7 Hz, 1H), 6.35 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 5.60 - 5.43 (m, 1H), 3.22 (dd,J = 3.5, 13.9 Hz, 1H), 2.85 (dd,J = 10.1, 14.1 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 385.1。
Figure 02_image529
向4-氯-1,2,5-噻二唑-3-甲酸乙酯(3.0 g，15.57 mmol)於二噁烷(50 mL)及H2 O (5 mL)中之溶液中添加Cs2 CO3 (15.2 g，46.72 mmol)及3-呋喃基硼酸(2.1 g，18.69 mmol)，使混合物脫氣且用N2 吹掃3次，隨後添加Pd(P(t-Bu)3 )2 (796 mg，1.56 mmol)。將混合物於N2 下在80℃下攪拌12小時且冷卻至室溫並濃縮，將殘餘物用H2 O (100 mL)稀釋且用EA (100 mL×3)萃取。將所獲得之有機相合併，用鹽水(50 mL×3)洗滌且經無水Na2 SO4 乾燥並過濾，且濃縮濾液，得到殘餘物，藉由矽膠管柱層析(PE:EA =1:0至10:1)將其純化，得到呈無色油狀物之化合物52A (2 g，產率57.3%)。1 H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ 8.44 (s, 1H), 7.51 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 7.03 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.50 (q,J = 6.8 Hz, 2H), 1.49 (t,J = 6.8 Hz, 3H)。
向化合物52A (1.5 g，6.69 mmol)於DCM(20 mL)中之溶液中添加NCS (1.0 g，7.49 mmol)。在25℃下攪拌混合物16小時。將反應物用H2 O (60 mL)稀釋且用EA (20 mL×3)萃取，將合併之有機相用Na2 S2 O3 (10%水溶液，20 mL)及鹽水(20 mL×3)洗滌並濃縮，得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(PE:EA =1:0至10:1)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之純化合物52B (330 mg，產率：19.5%)，且混合物由化合物52A 及化合物52C 組成(500 mg)。藉由製備型TLC (PE:EA =100:1，5次)純化由化合物52A 及化合物52C 組成之混合物，得到呈白色固體之化合物52C (135 mg，產率：7.8%)。化合物52B ：1 H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ 7.43 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 6.85 (d,J = 1.6 Hz, 1H), 4.60 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 1.42 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。化合物52C ：1 H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ 8.35 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.50 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 1.48 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。
Figure 02_image531
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(5-氯呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(52)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-(5氯呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酸乙酯(52C )轉化成化合物52 。獲得呈白色固體之化合物52 (60 mg，產率：62.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.37 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.06 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.32 - 7.18 (m, 5H), 6.81 (d,J = 1.1 Hz, 1H), 5.57 - 5.49 (m, 1H), 3.25 (dd,J = 3.9, 14.0 Hz, 1H), 2.89 (dd,J = 10.3, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 405.0。
Figure 02_image533
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2-氯呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(79)
使用如實例1 中所描述之程序將化合物4-(2-氯呋喃-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酸乙酯(52B )轉化成化合物79 。獲得呈淡黃色固體之化合物52 (50 mg，產率：52.3%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.37 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.73 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 7.32 - 7.17 (m, 5H), 6.59 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 5.56 - 5.47 (m, 1H), 3.29 - 3.18 (m, 1H), 2.88 (dd,J = 10.0, 14.0 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 405.0。 實例17 - 化合物85至86、57及82
Figure 02_image535
Figure 02_image537
N -(1-(噁唑-2-基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(85)
在0℃下向LiAlH4 (406.2 mg，10.70 mmol)於THF (20 mL)中之混合物中逐滴添加(1-(甲氧基(甲基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(3 g，9.73 mmol)於THF (20 mL)中之溶液。添加後，在0℃下攪拌混合物1 h。將EtOAc (6 mL)逐滴添加至反應混合物，將溫度維持於5℃以下，此後添加HCl (1 M，10 mL)。在分液漏斗中分離反應混合物，且用EtOAc (30 mL×2)萃取水溶液，將合併之有機相用HCl (1 M，30 mL×3)、飽和NaHCO3 (30 mL)及鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥。過濾且濃縮濾液，得到呈白色固體之化合物85A (2.3 g，產率：94.8%)。產物直接用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.52 (s, 1H), 7.40 - 7.10 (m, 6H), 4.15 - 4.00 (m, 1H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.75 - 2.65 (m, 1H), 1.31 (s, 9H)。
在氮氣下用BH3 .THF (1 M，2.41 mL)處理包含噁唑(166.2 mg，2.41 mmol)之THF (20 mL)溶液，且將混合物在5至15℃下攪拌30分鐘並在隨後冷卻至-70℃。逐滴添加含n-BuLi (2.5 M於環己烷中，1 mL)之溶液，且在-70℃下攪拌混合物30分鐘。添加含化合物85A (300 mg，1.20 mmol)之THF (10 mL)溶液，且攪拌混合物且升溫至室溫(5至15℃)，同時反應進行至完成(24 h後)。隨後將混合物冷卻至-78℃，藉由緩慢添加5%乙酸/乙醇(13.8 mL)淬滅，升溫至環境溫度(5至15℃)且攪拌18小時。減壓移除溶劑，將殘餘物用H2 O (15 mL)稀釋且用EtOAc (20 mL×3)萃取。合併有機相，用鹽水(30 mL)洗滌且濃縮，得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(PE:EA=1:0至0:1)純化殘餘物，得到呈無色油狀物之化合物85B (170 mg，產率：24.4%)。MS (ESI)m/z (M - Boc)+ 218.9。
將化合物85B (170 mg，533.97 μmol)於EtOAc (5 mL)中之混合物與HCl/EtOAc (4 M，10 mL)混合且在室溫(5至15℃)下攪拌1 h。減壓移除溶劑，得到呈白色固體之化合物85C (150 mg，粗產物，HCl)。產物直接用於下一步驟中。
將4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酸(121.4 mg，588.9 μmol)、化合物85C (150 mg，588.90 μmol，HCl)、DIEA (0.3 mL，1.77 mmol)及HBTU (245.67 mg，647.79 μmol)於DMF (10 mL)中之混合物在5至15℃下攪拌3 h。將反應物用H2 O (30 mL)稀釋，用EtOAc (30 mL×3)萃取。合併有機相且用HCl (1 M，30 mL)、飽和NaHCO3 水溶液(30 mL)、鹽水(30 mL×2)洗滌並濃縮，得到殘餘物。藉由製備型HPLC (HCl系統)純化來純化殘餘物，得到呈白色固體之化合物85D (50 mg，產率：20.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.02 - 8.83 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 - 7.16 (m, 12H), 4.88 - 4.74 (m, 1H), 4.64 - 4.49 (m, 1H), 3.20 - 2.77 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 407.0。
向化合物85D (50 mg，123.01 μmol)於DCM (20 mL)中之混合物中添加DMP (156.5 mg，369.04 μmol)且在室溫(5至15℃)下進行攪拌。1.5 h後，添加DMP (100 mg)，且在30℃下攪拌反應物過夜(16 H)。將反應物用DCM (20 mL)稀釋，用飽和Na2 S2 O3 水溶液(30 mL)淬滅且分離。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(20 mL)及鹽水(20 mL×3)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥。過濾且濃縮濾液。獲得呈淡黃色固體之化合物85 (40 mg，產率：62.3%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.68 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 2H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.41 - 7.22 (m, 7H), 5.74 - 5.66 (m, 1H), 3.41 - 3.36 (m, 1H), 3.06 - 2.95 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 405.1。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.88 (s, 1H), 7.73 - 7.66 (m, 3H), 7.47 - 7.38 (m, 4H), 7.32 - 7.22 (m, 3H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 5.99 (dt,J = 5.3, 7.8 Hz, 1H), 3.52 (dd,J = 5.1, 13.9 Hz, 1H), 3.26 (dd,J = 7.5, 14.1 Hz, 1H)。N -(1-(苯并[D ]噁唑-2-基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(86)
Figure 02_image539
在-10℃下向1,3-苯并噁唑(573.4 mg，4.81 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加i-PrMgCl (2.0 M，1.60 mL)，在-10℃下攪拌反應混合物1 h。隨後以於THF (20 mL)中之溶液形式添加化合物85A (400 mg，1.60 mmol)，且將反應混合物在-10℃下攪拌2 h，接著在5至15℃下攪拌12 h。濃縮反應物，且將殘餘物用EtOAc (60 mL)稀釋，用鹽水(30 mL×2)洗滌並濃縮，得到殘餘物。將殘餘物用EtOAc (100 mL)稀釋且用鹽水 (30 mL×3)洗滌，濃縮，得到粗產物。藉由矽膠管柱層析(PE:EA=1:0至5:1)純化粗產物，得到呈黃色油狀物之化合物86A (270 mg，產率：45%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.77 - 7.63 (m, 1H), 7.52 (dt, J = 2.6, 6.7 Hz, 1H), 7.41 - 7.30 (m, 4H), 7.26 - 7.13 (m, 3H), 5.11 - 4.88 (m, 2H), 4.53 - 4.19 (m, 2H), 3.08 (br. d, J=7.6 Hz, 1H), 3.00 - 2.83 (m, 1H), 1.43 - 1.27 (m, 9H)。MS (ESI)m/z (M+Na+ ) 391.0。
使用如關於化合物85 所描述之程序將化合物86A 轉化成化合物86 。獲得呈白色固體之化合物86 (180 mg，產率：78.53%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.78 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.04 (d,J = 8.1 Hz, 1H), 7.94 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.68 (t,J = 7.5 Hz, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 3H), 7.46 - 7.40 (m, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 6H), 7.27 - 7.21 (m, 1H), 5.89 - 5.79 (m, 1H), 3.49 (dd,J = 3.8, 14.1 Hz, 1H), 3.07 (dd,J = 9.9, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 455.0。N -(1-(噁唑-2-基胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(57)
Figure 02_image541
使用關於化合物85 所描述之條件使化合物(第三丁氧基羰基)苯丙胺酸及噁唑-2-胺偶合以得到中間物57A ，將其轉化成化合物57 。獲得呈白色固體之化合物57 (35 mg，產率：11.2%)1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.72 (br. s, 1H), 9.47 (br. d,J =7.7 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.51 (d,J =7.3 Hz, 2H), 7.46 - 7.36 (m, 3H), 7.36 - 7.22 (m, 5H), 7.15 (s, 1H), 5.00 - 4.80 (m, 1H), 3.25 - 3.10 (m, 1H), 3.05 - 2.93 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 420.2。N -(1-氰基-2-苯基乙基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(82)
Figure 02_image543
向2-苯乙醛(3 g，24.97 mmol，1.95 mL)於MeOH (70 mL)中之經攪拌溶液中添加含NH3 之MeOH (30 mL)及Ti(i-PrO)4 (10.64 g，37.45 mmol，11.05 mL)，且在15℃下攪拌所得溶液2 h。隨後向反應混合物添加TMSCN (4.46 g，44.94 mmol，5.62 mL)，隨後在15℃下攪拌反應混合物16 h。用水(150 mL)淬滅反應混合物，且過濾所得白色沈澱物。減壓濃縮濾液，用乙酸乙酯(50 mL×3)萃取且用鹽水(100 mL)洗滌有機相。有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮。獲得呈黃色油狀物之化合物82A (2 g，產率：54.8%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.36 - 7.20 (m, 5H), 4.03 - 3.85 (m, 1H), 3.00 - 2.80 (m, 2H), 2.38 (br s, 2H)
使用如關於化合物85 所描述之條件使化合物82A 與4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酸偶合，得到化合物82 。獲得呈白色固體之化合物82 (130 mg，產率：40.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.88 (br d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.61 - 7.46 (m, 3H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.20 (m, 5H), 5.25 (q,J = 7.8 Hz, 1H), 3.30 - 3.07 (m, 2H)。 實例18 - 化合物41、40、38、67、40、65、42、64、74及72
Figure 02_image545
向(1-氰基-1-羥基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(27 g，97.7 mmol)於二噁烷(150 mL)中之混合物中添加HCl (6 N，360 mL)。在100℃下攪拌混合物12 h。使水解反應物冷卻至室溫且隨後真空濃縮至120 mL。用NaOH (固體)將水相鹼化至pH為約11至12。經鹼化水相不經純化即用於下一步驟中。
向經鹼化化合物41A 水溶液(97.7 mmol)於H2 O (120 mL)中之混合物中添加二噁烷(60 mL)及(Boc)2 O (45 mL，195.9 mmol)，在25℃下攪拌12 h，同時用NaOH (2 M)將pH維持於10與11之間。減壓濃縮混合物以移除二噁烷。鹼化至pH為約12至13後，將水相用EA (80 mL×2)洗滌且用6 N HCl酸化至pH為約2至3，且隨後用EA (50 mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(50 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈淺紅色黏性液體之化合物41B (29.5 g，粗產物)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.32 - 7.14 (m, 6H), 6.73 - 6.35 (m, 1H), 4.00 - 3.83 (m, 2H), 2.87 - 2.75 (m, 1H), 2.74 - 2.66 (m, 1H), 1.32 - 1.24 (m, 9H)。
向化合物41B (11 g，37.3 mmol)於DMF (80 mL)中之混合物中添加K2 CO3 (10.3 g，74.5 mmol)，接著添加MeI (4.9 mL，78.9 mmol)。在25℃下攪拌混合物2 h。過濾混合物。減壓濃縮濾液且隨後用H2 O (200 mL)稀釋並用EA (50 mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(50 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈淺黃色固體之化合物41C (8.56 g，74.2%產率)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.33 - 7.11 (m, 5H), 6.84 - 5.99 (m, 1H), 5.91 - 5.34 (m, 1H), 4.03 - 3.80 (m, 2H), 3.64 - 3.52 (m, 3H), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 2.71 - 2.59 (m, 1H), 1.33 - 1.15 (m, 9H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 332.1, (M-Boc+H)+ 210.1。
向化合物41C (4 g，12.9 mmol)於EtOAc (10 mL)中之混合物中添加HCl/EtOAc (4 M，40 mL)。在25℃下攪拌混合物3 h。真空濃縮混合物。用EA (20 mL)濕磨殘餘物。收集固體且真空乾燥，得到呈白色固體之化合物41D (2.68 g，84.3%產率，HCl)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 8.27 (s, 3H), 7.41 - 7.17 (m, 5H), 6.71 - 6.34 (m, 1H), 4.53 - 3.93 (m, 1H), 3.77 - 3.60 (m, 1H), 3.59 (s, 2H), 3.27 (s, 1H), 3.11 - 2.82 (m, 2H)。 3-(1-環丙基-3-苯基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸甲酯(41)及3-(1-環丙基-3-苯基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸(60)
Figure 02_image547
向1-環丙基-3-苯基-1H -吡唑-4-甲酸(0.3 g，1.3 mmol)及中間物41D (387.5 mg，1.6 mmol，HCl)於DMF (10 mL)中之混合物中添加HBTU (500 mg，1.3 mmol)及DIEA (750 μL，4.31 mmol)。在25℃下攪拌混合物1 h。將混合物濃縮，且隨後用H2 O (100 mL)稀釋並用EA (30 mL×3)萃取。將合併之有機相用1 N HCl (30 mL)、飽和NaHCO3 (30 mL)、鹽水(30 mL×3)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈白色固體之化合物41E (0.55 g，99.7%產率)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ 8.10 - 7.99 (m, 1H), 7.96 - 7.67 (m, 1H), 7.57 - 7.45 (m, 2H), 7.33 - 7.13 (m, 8H), 5.96 - 5.55 (m, 1H), 4.52 - 4.33 (m, 1H), 4.16 - 4.07 (m, 1H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 3.63 - 3.51 (m, 3H), 2.97 - 2.68 (m, 2H), 1.14 - 0.96 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 420.1。
向化合物41E (0.54 g，1.3 mmol)於DCM (50 mL)中之混合物中添加DMP (1.6 g，3.9 mmol)。在25℃下攪拌混合物50 min。將反應物用DCM (20 mL)稀釋且藉由40 mL飽和Na2 S2 O3 溶液及40 mL飽和NaHCO3 溶液淬滅，並攪拌5 min。淬滅反應物後，將反應混合物倒入分液漏斗中且分離。用DCM (30 mL×2)萃取經分離之水相。將合併之有機相用鹽水(30 mL×2)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈淡黃色固體之化合物41 (0.51 g，產率93.6%)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ. 8.61 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.59 - 7.48 (m, 2H), 7.36 - 7.19 (m, 8H), 5.11 - 4.96 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.24 - 3.13 (m, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 1.12 - 0.98 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 418.2。
向化合物41 (0.15 g，359.3 μmol)於AcOH (2 mL)中之混合物中一次性添加HCl (12 M，2 mL)。在40℃下攪拌混合物1 h。將混合物用H2 O (50 mL)稀釋，且用EA (30 mL×3)萃取。將合併之有機相用鹽水(30 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮。藉由製備型HPLC (HCl條件)純化殘餘物，得到呈淡黃色固體之化合物60 (40 mg，產率27.6%)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ. 8.52 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 2H), 7.36 - 7.18 (m, 8H), 5.08 - 4.97 (m, 1H), 3.88 - 3.74 (m, 1H), 3.24 - 3.12 (m, 1H), 2.95 - 2.81 (m, 1H), 1.14 - 0.96 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 404.1。 2-側氧基-4-苯基-3-(4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺基)丁酸甲酯(38)及2-側氧基-4-苯基-3-(4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺基)丁酸(67)
Figure 02_image549
使用與用於化合物41 相同之程序自4-1,2,5-噻二唑-3-甲酸及中間物41D 製備化合物38 。獲得呈白色固體之化合物38 (0.440 g，產率88.4%)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 9.27 (br d,J = 6.0 Hz, 1H), 7.64 (br d,J = 7.0 Hz, 2H), 7.51 - 7.38 (m, 3H), 7.31 - 7.21 (m, 5H), 5.32 (ddd,J = 5.0, 7.5, 9.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.28 (dd,J = 4.9, 14.2 Hz, 1H), 3.03 - 2.98 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 396.1。
使用與用於化合物60 相同之程序自化合物38 製備化合物67 。獲得呈白色固體之化合物67 (0.123 g，產率82.89%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 7.84 (br d,J = 6.5 Hz, 1H), 7.63 - 7.59 (m, 2H), 7.53 - 7.42 (m, 3H), 7.35 - 7.24 (m, 5H), 5.40 (ddd,J = 4.8, 7.8, 9.0 Hz, 1H), 3.38 (dd,J = 4.8, 14.1 Hz, 1H), 3.04 (dd,J = 9.0, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 382.1。 3-(3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸甲酯(40)及3-(3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸(65)
Figure 02_image551
使用與用於化合物41 相同之程序自3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸及中間物41D 製備化合物40 。獲得呈黃色固體之化合物40 (0.520 g，產率87.1%)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.12 (br.s., 2H), 7.44 - 7.33 (m, 2H), 7.31 - 7.25 (m, 2H), 7.22 - 7.10 (m, 5H), 5.00 (br d,J = 6.5 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.17 (dd,J = 5.3, 14.1 Hz, 1H), 2.94 (br.dd,J = 8.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 410.1。
使用與用於化合物60 相同之程序自化合物40 製備化合物65 。獲得呈白色固體之化合物65 (60 mg，產率40.5%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 14.10 (s, 1H), 8.44 (d,J = 7.0 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.42 - 7.26 (m, 4H), 7.25 - 7.20 (m, 3H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.95 (ddd,J = 4.8, 6.8, 9.5 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.15 (dd,J = 4.6, 13.9 Hz, 1H), 2.87 (dd,J = 9.7, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 396.2。 3-(4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸甲酯(42)及3-(4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸(64)
Figure 02_image553
使用與用於化合物41 相同之程序自4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸及中間物41D 製備化合物42 。獲得呈淺黃色固體之化合物42 (0.290 g，產率67.0%)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ. 9.10 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 7.51 - 7.38 (m, 2H), 7.34 - 7.17 (m, 7H), 5.19 - 5.05 (m, 1H), 3.81 - 3.54 (m, 3H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.59 - 2.52 (m, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 411.1。
使用與用於化合物60 相同之程序自化合物42 製備化合物64 。獲得呈白色固體之化合物64 (40 mg，產率50.4%)。1 H NMR (CD3 CN-d3 , 400 MHz): δ 7.54 - 7.39 (m, 2H), 7.37 - 7.11 (m, 8H), 5.31 - 5.16 (m, 1H), 3.29 (dd,J = 5.0, 14.1 Hz, 1H), 3.00 (dd,J = 8.8, 14.1 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 397.2。 甲基-3-(3-(3-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸酯(74)及3-(3-(3-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺基)-2-側氧基-4-苯基丁酸(72)
Figure 02_image555
Figure 02_image557
使用與用於化合物41 相同之程序自4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸及中間物41D 製備化合物74 。獲得呈淺黃色固體之化合物74 (0.150 g，產率75.3%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.73 (d,J = 6.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.45 - 7.29 (m, 4H), 7.28 - 7.20 (m, 4H), 7.14 (dt,J =2.1, 8.4 Hz, 1H), 5.06 (ddd,J = 5.0, 6.8, 9.4 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.20 (dd,J = 4.9, 13.9 Hz, 1H), 2.91 (dd,J = 9.5, 13.7 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 410.1。
使用與用於化合物60 相同之程序自化合物74 製備化合物72 。獲得呈白色固體之化合物72 (50 mg，產率64.7%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.66 (br d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.44 (br d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.38 - 7.19 (m, 6H), 7.18 - 7.10 (m, 1H), 5.13 - 4.99 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 2.89 (dd,J = 9.8, 14.1 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 396.2。 實例19 - 化合物58、75、76、73、78、81、84、88、90、91、92、98及105
Figure 02_image559
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-甲基-4-(萘-1-基)噁唑-5-甲醯胺(58)
(燒瓶A)向1-萘甲酸(25 g，145.2 mmol)於CH3 CN (40 mL)中之混合物添加CDI (28.3 g，174.2 mmol)，在25℃下攪拌混合物2 h。(燒瓶B)向丙二酸乙酯鉀鹽(32.3 g，191.7 mmol)於CH3 CN (200 mL)中之混合物分批添加MgCl2 (15.2，64.0 mmol)及TEA (44.8 g，435.6 mmol)。在50℃攪拌反應混合物2 h。將燒瓶A中之溶液轉移至燒瓶B中之漿液中且在70℃下攪拌混合物12 h。用HCl (3 N，600 mL)淬滅反應混合物且減壓濃縮溶液以移除溶劑。用MTBE (150 mL×3)萃取所得濃縮物。將有機層用H2 O (150 mL×3)、飽和NaHCO3 (150 mL×3)及飽和NaCl (150 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈無色油狀物之化合物58A (18 g，46.9%產率)，其直接用於下一步驟中。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 8.59 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 8.19 - 8.15 (m, 2H), 8.03 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 3H), 4.31 (s, 2H), 4.09 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 1.11 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 243.1。
向化合物58A (18 g，74.3 mmol，1當量)於EtOH (150 mL)中於中之混合物中一次性添加NH4 OAc (45.8 g，594.4 mmol)。在90℃下攪拌混合物24 h。移除溶劑且減壓濃縮。將EA (100 ml)及H2 O (50 mL)添加至混合物中，分離有機層。用EA (50 mL×2)萃取水溶液，用水(100 ml×2)、飽的NaHCO3 (100 mL×2)、鹽水(100 mL×2)洗滌合併之有機層。隨後經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，減壓濃縮。藉由管柱層析(SiO2 ，石油醚 /乙基 =20 /1 至5/1) 純化粗產物，得到呈無色油狀物之化合物58B (16 g，81.2%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 8.21 (br. s, 1H), 8.13 - 8.06 (m, 1H), 8.02 - 7.95 (m, 2H), 7.61 - 7.42 (m, 5H), 4.51 (s, 1H), 4.08 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 1.21 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 242.0。
將吡啶(10 mL，124.3 mmol)添加至化合物58B (3 g，12.4 mmol)於甲苯(20 mL)中之經攪拌溶液中，且將混合物反應物冷卻至0℃。逐滴添加乙醯氯(6.7 mL，93.3 mmol)，且在氮氣氛圍下在0℃下攪拌混合物6 h。藉由LCMS監測化合物58B ，因此添加另外的乙醯氯(20 mL，279.8 mmol)至反應混合物中，且在氮氣氛圍下在0℃下攪拌混合物12 h。將反應物用鹽水(30 ml)淬滅，用EA (50 ml×3)萃取且經Na2 SO4 乾燥，且真空蒸發溶劑。藉由管柱層析(SiO2 ，PE/EA=20/1 至 5/1) 純化粗產物，得到呈白色固體之化合物58C (2.5 g，66.4%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 10.89 (s, 1H), 7.99 - 7.87 (m, 3H), 7.58 - 7.36 (m, 4H), 5.22 - 5.14 (m, 1H), 4.20 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.01 (s, 3H), 1.26 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 284.1。
[將雙(三氟乙醯氧基)碘]苯(986.6 mg，2.3 mmol)添加至化合物58C (0.5 g，1.8 mmol)於2,2,2-三氟乙醇(15 mL)中之經攪拌溶液中。在25℃下攪拌混合物30 min。用飽和NaHCO3 水溶液(20 ml)淬滅反應物，且將混合物用EtOAc (20 ml)稀釋且用EtOAc (20 ml×2)萃取。將有機層用水(15 ml×2)、鹽水(15 ml)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮。藉由管柱層析(SiO2 ，石油醚/乙酸乙酯=20/1 至 51) 純化粗產物，得到呈淡黃色固體之化合物58D (380 mg，74.2%產率)。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 8.02 (dd,J = 7.8, 14.6 Hz, 2H), 7.83 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.65 - 7.48 (m, 4H), 4.09 (q,J = 7.0 Hz, 2H), 2.62 (s, 3H), 0.98 (t,J = 7.0 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 282.0。
水解化合物58D 以得到中間物58E ，且使用如實例1 中所描述相同之程序使此中間物與中間物1D 反應，得到化合物58 。獲得呈黃色固體之化合物58 (0.140 g，產率64.8%)。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 8.63 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.97 (br d,J = 7.8 Hz, 2H), 7.86 - 7.76 (m, 2H), 7.58 - 7.42 (m, 4H), 7.32 - 7.18 (m, 5H), 5.37 - 5.27 (m, 1H), 3.15 (br dd,J = 3.4, 13.9 Hz, 1H), 2.94 (br dd,J = 9.8, 13.8 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 428.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(75)
使用與關於化合物58 所描述相同之程序自2-氟-3-甲氧基苯甲酸製備化合物75 ，得到化合物75 。獲得呈黃色固體之化合物75 (0.160 g，產率53.6%)。1 H NMR (DMSO-d 6 , 400MHz)δ 8.71 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.30 - 7.05 (m, 7H), 6.97 - 6.89 (m, 1H), 5.37 - 5.27 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.13 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 2.93 (dd,J = 9.8, 14.2 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 426.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2,6-二氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(76)
使用與關於化合物58 所描述相同之程序自2,6-二氟苯甲酸製備化合物76 ，得到化合物76 。獲得呈黃色固體之化合物76 (0.153 g，產率53.8%)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400MHz)δ 8.88 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.58 - 7.46 (m, 1H), 7.35 - 7.07 (m, 7H), 5.39 - 5.28 (m, 1H), 3.16 (dd,J = 3.5, 14.1 Hz, 1H), 2.96 (dd,J = 10.0, 14.2 Hz, 1H), 2.57 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 414.1。N -(4-胺基-1-(4-氟苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(73)
Figure 02_image561
使用與關於實例1 所描述相同之程序自4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸及中間物73A 製備化合物73 ，得到化合物73 。獲得呈白色固體之化合物73 (0.160 g，產率73.08%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.80 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.45 (q,J = 7.3 Hz, 2H), 7.33 - 7.25 (m, 2H), 7.24 - 7.17 (m, 2H), 7.11 (t,J = 8.8 Hz, 2H), 5.32 (s, 1H), 3.15 (dd,J = 3.4, 13.9 Hz, 1H), 3.02 - 2.87 (m, 1H), 2.55 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 414.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(78)
Figure 02_image563
使用與關於化合物58 所描述相同之程序自4-(2,5-二甲基呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲酸及中間物1D 製備化合物78 ，得到化合物78 。獲得呈白色固體之化合物78 (65 mg，產率40.9%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.60 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.14 - 8.04 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.29 - 7.23 (m, 4H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 6.57 (s, 1H), 5.39 - 5.34 (m, 1H), 3.16 (dd,J = 3.8, 13.8 Hz, 1H), 2.95 (dd,J = 9.8, 13.9 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.19 - 2.12 (m, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 396.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2,5-二氯呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(81)
Figure 02_image565
使用與關於化合物58D 所描述相同之程序自呋喃-3-甲酸製備化合物81A ，得到化合物81A 。獲得呈白色固體之化合物81A (1.28 g，產率64.2%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.37 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.13 - 7.07 (m, 1H), 4.43 (q,J = 7.3 Hz, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.43 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 221.9。
向化合物81A (300 mg，1.36 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NCS (580 mg，4.34 mmol)。在100℃下攪拌混合物6小時。將反應物用H2 O (30 mL)稀釋，用EA (20 mL×3)萃取，有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(PE:EA =10:1 至 5:1 )純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物81B (80 mg，產率：20.3%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 6.85 (s, 1H), 4.40 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.39 (br t,J = 7.1 Hz, 3H)。
水解化合物81B 以得到中間酸，使用如實例1 中所描述之相同程序使其與中間物1D 反應，得到化合物81 。獲得呈淡黃色固體之化合物81 (68 mg，產率88.3%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.93 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.27 - 7.24 (m, 4H), 7.19 - 7.15 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.42 - 5.31 (m, 1H), 3.22 - 3.13 (m, 1H), 2.96 - 2.89 (m, 1H), 2.50 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 436.0。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-2-甲基-4-(2-甲基呋喃-3-基)噁唑-5-甲醯胺(84)
Figure 02_image567
使用與關於化合物58 所描述相同之程序經由中間物84A 及84B 自2-甲基呋喃-3-甲酸製備化合物84 ，得到化合物84 。獲得呈白色固體之化合物84 (60 mg，產率37.52%)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 382.1。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.65 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 8.08 (br. s, 1H), 7.81 (br. s, 1H), 7.45 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.30 - 7.21 (m, 4H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 6.94 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 5.45 - 5.32 (m, 1H), 3.21 - 3.09 (m, 1H), 3.01 - 2.88 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.39 (s, 3H)。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(苯并[B ]噻吩-4-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(88)
Figure 02_image569
使用與關於化合物58 所描述相同之程序經由中間物88A 及88B 自苯并[b ]噻吩-4-甲酸製備化合物88 ，得到化合物88 。獲得呈黃色固體之化合物88 (110 mg，產率92.6%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.07 - 7.98 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.71 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 1H), 7.37 (d,J = 5.4 Hz, 1H), 7.32 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.30 - 7.16 (m, 5H), 5.38 - 5.28 (m, 1H), 3.14 (dd,J = 3.5, 13.8 Hz, 1H), 2.92 (dd,J = 9.9, 14.1 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ =434.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(2-氯呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(90)
Figure 02_image571
向化合物90A (400 mg，1.81 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NCS (266 mg，1.99 mmol)。在15℃下攪拌混合物16 h。隨後在25℃下攪拌混合物16 h。將反應物用H2 O (40 mL)稀釋，用EA (30 mL×2)萃取，有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(PE:EA =10:1 至 4:1 )純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物90B (300 mg，產率：64.9%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.37 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.98 (d,J = 2.2 Hz, 1H), 4.46 - 4.34 (m, 2H), 2.62 - 2.53 (m, 3H), 1.46 - 1.33 (m, 3H)。
水解化合物90B 以得到中間酸，使用如實例1 中所描述之相同程序使其與中間物1D 反應，得到化合物90 。獲得呈白色固體之化合物90 (90 mg，產率51.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.86 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 4H), 7.25 - 7.17 (m, 1H), 7.07 - 6.99 (m, 1H), 5.43 - 5.38 (m, 1H), 3.19 (dd,J = 3.8, 14.1 Hz, 1H), 2.97 (dd,J = 10.0, 13.9 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 402.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(苯并[B ]噻吩-7-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(91)
Figure 02_image573
使用與關於化合物58 所描述相同之程序經由中間物91A 及91B 自苯并[b ]噻吩-7-甲酸製備化合物91 ，得到化合物91 。獲得呈白色固體之化合物91 (15 mg，產率49.6%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.90 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.02 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 7.93 - 7.85 (m, 2H), 7.75 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 5.8 Hz, 1H), 7.39 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 3H), 7.25 - 7.16 (m, 2H), 5.45 - 5.41 (m, 1H), 3.20 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 2.98 (dd,J = 9.8, 13.8 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 434.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(5-氯呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(92)
Figure 02_image575
向化合物90A (400 mg，1.81 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液中添加NCS (266 mg，1.99 mmol)。在15℃下攪拌混合物16 h。隨後在25℃下攪拌混合物16 h。將反應物用H2 O (40 mL)稀釋，用EA (30 mL×2)萃取，有機相經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(PE:EA =10:1 至 4:1 )純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物92B (55 mg，產率：11.9%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.22 (s, 1H), 6.93 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 1.42 (t,J = 7.1 Hz, 3H)。
水解化合物92B 以得到中間酸，使用如實例1 中所描述之相同程序使其與中間物1D 反應，得到化合物92 。獲得呈白色固體之化合物92 (45 mg，產率61.3%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.90 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.33 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 4H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 7.02 (d,J = 1.0 Hz, 1H), 5.45 - 5.41 (m, 1H), 3.21 (dd,J = 3.9, 13.9 Hz, 1H), 3.00 (dd,J = 9.9, 14.1 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 402.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-4-(5-氯-2-甲基呋喃-3-基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(98)
Figure 02_image577
向化合物98A (100 mg，0.42 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加NCS (57 mg，0.42 mmol)。在20℃下攪拌混合物12 h。將混合物用H2 O (20 mL)洗滌，用EtOAc (15 mL×2)萃取。收集且濃縮有機物。藉由管柱(PE:EA =10:1)純化殘餘物，得到呈無色固體之化合物2 (60 mg，產率：52.34%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 6.94 (s, 1h), 4.34 - 4.27 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 1.31 - 1.27 (m, 3H)。
水解化合物98B 以得到中間酸，使用如實例1 中所描述之相同程序使其與中間物1D 反應，得到化合物98 。獲得呈淡黃色固體之化合物98 (80 mg，產率40.15%)。MS (ESI)m/z (M+1)+ 416.1。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 8.77 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.09 (br. s, 1H), 7.82 (br. s, 1H), 7.29 - 7.22 (m, 4H), 7.20 - 7.13 (m, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.41 - 5.32 (m, 1H), 3.20 - 3.12 (m, 1H), 3.00 - 2.89 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.41 (s, 3H)。 2-(5-(乙氧羰基)-2-甲基噁唑-4-基)-N,N,N-三甲基苯銨(105)
Figure 02_image579
使2-硝基苯甲酸經歷如關於化合物58 所描述之條件，得到化合物105A 。獲得呈黃色油狀物之化合物105A (480 mg，60.4% 產率)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.14 - 8.09 (m, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 2H), 4.21 - 4.13(m, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.17 - 1.11 (m, 3H)。
向化合物105A (200 mg，724.00 μmol)於EtOH (20 mL)中之溶液中添加Pd/C (45 mg，72.40 μmol，10%純度)及NH3 .H2 O (2.17 mmol，270 μL，30%純度)。在H2 氣球(15 psi)下在25℃下攪拌混合物1小時。過濾混合物且濃縮。藉由管柱層析(SiO2 ，石油醚 / 乙酸乙酯 = 2/1 至 0/1 )純化殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物105B (75 mg，42.1%產率)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.58 - 7.48 (m, 1H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 6.79 - 6.72 (m, 2H), 4.67 (br s, 2H), 4.37 - 4.30 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.34 - 1.28 (m, 3H)。
向化合物105B (120 mg，487.29 μmol)及MeI (2.77 g，19.49 mmol，1.21 mL)於丙酮(3 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (300 mg，2.17 mmol)。在40℃下攪拌混合物48 h，且添加MeI (2.77 g，19.49 mmol，1.21 mL)。在40℃下攪拌混合物48 h。過濾反應物，濃縮濾液。藉由製備型TLC (SiO2 ，DCM ：EA=1:1 )純化殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物105 (40 mg，27.2%產率)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.10 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 7.76 (t,J = 7.5 Hz, 1H), 7.64 (t,J = 7.4 Hz, 1H), 7.48 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 4.13 (q,J = 7.2 Hz, 2H), 3.74 - 3.47 (m, 9H), 2.61 (s, 3H), 1.06 (t,J = 7.0 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 433.1。 實例20 - 化合物80、83、87、89、95、96及97
Figure 02_image581
N -(4-胺基-1-(2-氟苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(80)
向2-胺基-3-(2-氟苯基)丙酸(5.77 g，31.50 mmol)於二噁烷(45 mL)中之溶液中添加含NaOH (1.95 g，48.82 mmol)之H2 O (12 mL)及含Boc2 O (8.66 g，39.69 mmol，9.12 mL)之二噁烷(15 mL)。在25℃下攪拌混合物20 h。減壓濃縮反應物且將H2 O (60 mL)添加至混合物。用HCl (0.5 M)處理水溶液，直至pH為約3，且用EA (50 mL×3)萃取反應物。將合併之有機層用H2 O (50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物80A (8.58 g，產率：96.2%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 12.66 (br s, 1H), 7.35 - 7.22 (m, 2H), 7.17 - 7.07 (m, 3H), 4.19 - 4.07 (m, 1H), 3.13 (br dd,J = 4.9, 13.9 Hz, 1H), 2.81 (br dd,J = 10.5, 13.7 Hz, 1H), 1.30 (s, 9H)。
向化合物80A (8.58 g，30.29 mmol)及N-甲氧基甲胺(4.14 g，42.41 mmol，HCl)、HOBt (4.50 g，33.32 mmol)於CHCl3 (100 mL)中之混合物中逐滴添加NMM (12.25 g，121.16 mmol，13.32 mL)。隨後將EDCI (8.13 g，42.41 mmol)添加至混合物，且在25℃下攪拌混合物18 h。減壓濃縮反應物。將H2 O (100 mL)及EA (100 mL)添加至混合物中，分離有機層。用EA (60 mL×2)萃取水層。將合併之有機層用HCl (0.5 M，100 mL)、飽和NaHCO3 (100 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物80B (9.26 g，產率：91.7%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.38 - 7.19 (m, 2H), 7.17 - 6.99 (m, 3H), 4.66 (br s, 1H), 3.67 (br s, 3H), 3.13 - 3.02 (m, 3H), 2.95 (br dd,J = 4.5, 13.6 Hz, 1H), 2.76 - 2.61 (m, 1H), 1.27 (s, 9H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 348.9。
於N2 氛圍下在0℃下向LiAlH4 (1.18 g，31.21 mmol)於THF (50 mL)中之溶液中逐滴添加化合物80B (9.26 g，28.37 mmol)於THF (100 mL)中之溶液。添加後，在0℃下攪拌混合物2 h。在0℃下向反應混合物添加EA (100 mL)及HCl (1 M，100 mL)。分離有機層且用EA (100 mL×2)萃取水層。用HCl (1 M，100 mL)、H2 O (100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌合併之有機層。合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物80C (5.65 g，產率：74.5%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.50 (s, 1H), 7.37 (br d,J = 7.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 2H), 7.16 - 7.08 (m, 2H), 4.03 (q,J = 6.8 Hz, 1H), 3.13 (br dd,J = 4.6, 13.9 Hz, 1H), 2.74 (br dd,J = 10.1, 13.6 Hz, 1H), 1.32 (s, 9H)。
在0℃下向化合物80C (2 g，7.48 mmol)及CsF (568 mg，3.74 mmol)於MeOH (50 mL)中之溶液中逐滴添加三甲基矽烷基甲腈(890.76 mg，8.98 mmol，1.12 mL)。將混合物升溫至20℃且攪拌5 h。將反應混合物濃縮，隨後用H2 O (30 mL)稀釋，用EA (30 mL×3)萃取，合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物80D (2.62 g，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.23 (br d,J = 7.6 Hz, 2H), 7.15 - 7.03 (m, 3H), 4.63 - 4.28 (m, 1H), 3.93 - 3.75 (m, 1H), 3.12 - 2.93 (m, 1H), 2.78 - 2.58 (m, 1H), 1.25 (s, 4.5H), 1.22 (s, 4.5H)。
向化合物80D (530 mg，1.80 mmol)於DMSO (10 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (498 mg，3.60 mmol)，且將H2 O2 (3.06 g，27.01 mmol，2.60 mL，30%純度)逐滴添加至混合物。在20℃下攪拌混合物3 h。將反應物用飽和Na2 S2 O3 溶液(20 mL)淬滅且用H2 O (30 mL)稀釋。將混合物用EA (40 mL×3)萃取，且將合併之有機層用H2 O (40 mL)、鹽水(40 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾，濃縮，得到殘餘物。獲得呈淡黃色固體之化合物80E (507 mg，產率：90.1%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.34 - 7.16 (m, 4H), 7.14 - 7.04 (m, 2H), 6.52 - 6.04 (m, 1H), 5.69 (dd,J = 6.0, 12.6 Hz, 1H), 4.04 (br d,J = 8.8 Hz, 1H), 3.94 - 3.74 (m, 1H), 2.90 - 2.61 (m, 2H), 1.24 (s, 9H)。
向化合物80E (1.39 g，4.45 mmol)於EtOAc (15 mL)中之溶液中添加HCl/EtOAc (4 M，15 mL)。在25℃下攪拌混合物2 h。過濾沈澱物且用EA (20 mL)洗滌濾餅。減壓乾燥固體。獲得呈淡黃色固體之化合物80F (933 mg，產率：84.3%，HCl)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.17 - 7.90 (m, 3H), 7.55 - 7.43 (m, 2H), 7.43 - 7.23 (m, 2H), 7.21 - 7.07 (m, 2H), 6.74 - 6.36 (m, 1H), 4.23 - 3.77 (m, 1H), 3.72 - 3.53 (m, 1H), 2.92 (br d,J = 7.1 Hz, 1H), 2.82 (br d,J = 7.1 Hz, 1H)。
使用與關於中間物58E 及1D 相同之條件使化合物80F 及4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸偶合且隨後使用如實例1 中所描述之程序得到化合物80 。獲得呈白色固體之化合物80 (95 mg，產率60.7%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.77 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.50 - 7.38 (m, 2H), 7.32 - 7.17 (m, 4H), 7.16 - 7.06 (m, 2H), 5.39 - 5.29 (m, 1H), 3.22 (br dd,J = 4.8, 14.3 Hz, 1H), 3.01 (dd,J = 9.0, 13.9 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 414.1。
Figure 02_image583
N -(4-胺基-1-(2-氯苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(83)
將化合物2-胺基-3-(2-氯苯基)丙酸轉化成中間物83F ，隨後使用與關於化合物80 相同之條件使其與4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物83 。獲得呈白色固體之化合物83 (120 mg，產率36%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.89 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 3H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 4H), 5.46 - 5.33 (m, 1H), 3.33 - 3.26 (m, 1H), 3.08 (dd,J = 9.8, 14.2 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 430.1。
Figure 02_image585
N -(4-胺基-1-(3-氟苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(87)
將化合物2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸轉化成中間物87F ，隨後使用與關於化合物80 相同之條件使其與4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物87 。獲得呈淺黃色固體之化合物87 (160 mg，產率55%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.87 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.25 - 7.17 (m, 2H), 7.13 - 7.01 (m, 3H), 5.42 - 5.27 (m, 1H), 3.19 (dd,J = 3.8, 14.1 Hz, 1H), 2.98 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 414.1。
Figure 02_image587
N -(4-胺基-1-(3-氯苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(89)
將化合物2-胺基-3-(3-氯苯基)丙酸轉化成中間物89F ，隨後使用與關於化合物80 相同之條件使其與4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物89 。獲得呈白色固體之化合物89 (70 mg，產率31.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.89 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.44 (q,J = 7.3 Hz, 2H), 7.35 - 7.25 (m, 3H), 7.25 - 7.16 (m, 3H), 5.37 - 5.26 (m, 1H), 3.17 (dd,J = 3.7, 13.9 Hz, 1H), 2.95 (dd,J = 10.0, 13.9 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 430.1。
Figure 02_image589
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-(4-(三氟甲基)苯基)丁-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(95)
將化合物2-胺基-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸轉化成中間物95F ，隨後使用與關於化合物80 相同之條件使其與3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物95 。獲得呈淡黃色固體之化合物96 (70 mg，產率55.13%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.92 (s, 1H), 7.61 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.47 - 7.37 (m, 2H), 7.34 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 1H), 6.96 (br s, 1H), 6.69 (br d,J = 6.8 Hz, 1H), 6.22 (br s, 1H), 5.40 - 5.32 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.31 (dd,J = 4.6, 14.2 Hz, 1H), 2.97 (dd,J = 8.9, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ =463.1。
Figure 02_image591
N -(4-胺基-1-(4-氯苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲醯胺(96)
將化合物2-胺基-3-(4-氯苯基)丙酸轉化成中間物96F ，隨後使用與關於化合物80 相同之條件使其與4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物96 。獲得呈白色固體之化合物96 (120 mg，產率77%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.86 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 7.31 - 7.26 (m, 2H), 7.24 - 7.18 (m, 2H), 5.37 - 5.26 (m, 1H), 3.16 (dd,J = 3.7, 14.2 Hz, 1H), 2.94 (dd,J = 10.0, 13.9 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 430.1。
Figure 02_image593
N -(4-胺基-1-(4-氯苯基)-3,4-二側氧基丁-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(97)
使用與關於化合物80 相同之條件使化合物3-胺基-4-(4-氯苯基)-2-羥基丁醯胺與3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸偶合且隨後進一步使用如實例1 中所描述之程序得到化合物97 。獲得呈白色固體之化合物97 (120 mg，產率65.3%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.28 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.41 - 7.30 (m, 4H), 7.28 - 7.24 (m, 2H), 7.19 - 7.09 (m, 2H), 5.29 - 5.11 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.11 (dd,J = 3.7, 13.9 Hz, 1H), 2.80 (dd,J = 10.1, 13.8 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.1。 實例21 - 化合物5及8
Figure 02_image595
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-(苯并[D ][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)異噁唑-4-甲醯胺(5)
燒瓶1：向苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-甲酸(2 g，12.04 mmol)於CH3 CN (15 mL)中之溶液中添加CDI (2.19 g，13.48 mmol)。在25℃下攪拌混合物4小時。
燒瓶2：經15 min向丙二酸乙酯鉀鹽(2.70 g，15.89 mmol)於CH3 CN (25 mL)中之溶液中分批添加MgCl2 (1.15 g，12.04 mmol)。在25℃下攪拌混合物0.5 h，隨後添加TEA (3.65 g，36.12 mmol)，且攪拌漿液0.5 h。將燒瓶1中之溶液轉移至燒瓶2中之漿液中。在25℃下攪拌混合物18 h。用3 N HCl (40 mL)淬滅反應混合物且減壓濃縮溶液。用MTBE (50 mL×2)萃取所得物。將有機層用H2 O (50 mL)、飽和NaHCO3 (50 mL)、飽和NaCl (50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮，得到呈黃色油狀物之化合物5A (2.1 g，73.9%產率)，其不經純化即用於下一步驟中。
將化合物5A (1.1 g，4.66 mmol)及DMFDMA (2.47 mL，18.63 mmol)於DMF (15 mL)中之混合物在80℃下攪拌3 h。真空濃縮混合物，得到呈棕色油狀物之化合物5B (1.2 g，88.5%產率)，其不經純化即用於下一步驟中。
將NaOAc (676 mg，8.24 mmol)添加至化合物5B (1.20 g，4.12 mmol)及羥胺鹽酸鹽(573 mg，8.24 mmol)於MeOH (7 mL)及MTBE (7 mL)中之混合物中。在25℃下攪拌混合物17 h。向混合物中添加飽和NH4 Cl (20 mL)且用MTBE(20 mL×2)萃取。將合併之有機相用鹽水(10 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮。藉由FCC (0-10% EA/PE)純化產物，得到呈白色固體之化合物5C (444 mg，41.3%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.07 (s, 1H), 7.29 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.03 - 6.97 (m, 1H), 6.13 (s, 2H), 4.24 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 1.21 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。
將HCl (12 M，5 mL)添加至化合物5C (244 mg，0.93 mmol)於AcOH(5 mL)中之混合物中。在118℃下攪拌混合物4.5 h。真空濃縮混合物。將H2 O (50 mL)添加至混合物，用DCM (50 mL)萃取混合物。將有機相用鹽水(30 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮，得到呈黃色固體之化合物5D (185 mg，84.9%產率)，其不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.96 (s, 1H), 7.28 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 7.11 (dd,J = 1.0, 7.8 Hz, 1H), 6.96 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 6.14 - 6.06 (m, 2H)。
使用與中間物58E 及1D 相同之條件使化合物5D 與 中間物1D 偶合且隨後使用如實例1中所描述之程序得到化合物5 。獲得呈淡黃色固體之化合物5 (40 mg，產率20.8%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.88 (br d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.08 (br s, 1H), 7.82 (br s, 1H), 7.30 - 7.17 (m, 5H), 7.07 (br dd,J = 7.7, 15.7 Hz, 2H), 6.92 - 6.86 (m, 1H), 6.03 - 5.86 (m, 2H), 5.31 (br s, 1H), 3.15 (br dd,J = 3.4, 13.6 Hz, 1H), 2.81 (br dd,J = 10.3, 13.8 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 408.1。
Figure 02_image597
N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-(2,2-二氟苯并[D ][1,3]間二氧雜環戊烯-4-基)異噁唑-4-甲醯胺(8)
使用關於化合物5 所描述之程序使化合物2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-4-甲酸轉化成中間物8D 且隨後使用如關於化合物58 所描述之程序使中間物8D 與中間物1D 偶合得到化合物8 。獲得呈白色固體之化合物8 (60 mg，產率54%)。1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ. 9.06 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.65 - 7.47 (m, 2H), 7.36 - 7.14 (m, 6H), 5.38 (s, 1H), 3.24 - 3.07 (m, 1H), 2.89 - 2.75 (m, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 444.1。 實例22 - 化合物11、27、30、29、45及59
Figure 02_image599
向2-氯喹唑啉(1 g，6.08 mmol)及K2 CO3 (1.00 g，7.24 mmol)之混合物中添加NH2 NH2 .H2 O (5 mL，85%純度)。在100℃下攪拌混合物0.5小時。用冰冷卻反應混合物且藉由過濾收集所得粗晶體。將晶體用冷水洗滌，風乾，得到殘餘物。將將殘餘物於PE (20 mL)中濕磨且藉由過濾收集。獲得呈黃色固體之化合物11A (490 mg，產率：50.4%)。
向化合物11A (490 mg，3.06 mmol)及2,4-二側氧基戊酸乙酯(484 mg，3.06 mmol)之溶液中添加HOAc (5 mL)。在100℃下攪拌混合物16 h。將混合物濃縮，用EA (25 mL)稀釋且過濾。將有機層用NaHCO3 (25 mL)、鹽水(25 mL×3)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，隨後過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由製備型TLC (PE:EA =1:1 )純化殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物11B (180 mg，產率：18.1%)。獲得呈黃色油狀物之化合物11C (110 mg，產率：11.3%)。
化合物11B ：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.69 (s, 1H), 8.23 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 8.12 - 8.03 (m, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 1H), 7.78 (dt,J = 1.0, 7.6 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.21 - 4.09 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.03 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 282.9。
化合物11C ：1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.79 (d,J = 0.7 Hz, 1H), 8.29 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.16 - 8.05 (m, 2H), 7.83 (ddd,J = 1.5, 6.4, 8.1 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 4.32 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.68 (d,J = 0.9 Hz, 3H), 1.32 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 282.9。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-甲基-1-(喹唑啉-2-基)-1H -吡唑-5-甲醯胺(11)
Figure 02_image601
使化合物11B 經歷如實例19 中所描述用於使中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物11 。獲得呈淡黃色固體之化合物11 (45 mg，產率41.4%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.51 (s, 1H), 9.11 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 8.19 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.09 - 7.98 (m, 2H), 7.88 - 7.79 (m, 2H), 7.75 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 7.28 - 7.16 (m, 5H), 6.58 (s, 1H), 5.43 - 5.15 (m, 1H), 3.13 (dd,J = 3.1, 14.1 Hz, 1H), 2.83 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-甲基-1-(喹唑啉-2-基)-1H -吡唑-3-甲醯胺(27)
Figure 02_image603
使化合物11C 經歷如實例19 中所描述用於將中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物27 。獲得呈淡黃色固體之化合物27 (28 mg，產率77.1%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.76 (s, 1H), 8.48 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 8.26 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 8.15 - 7.98 (m, 3H), 7.89 - 7.73 (m, 2H), 7.27 - 7.19 (m, 4H), 7.19 - 7.11 (m, 1H), 6.68 (s, 1H), 5.56 - 5.29 (m, 1H), 3.24 - 3.00 (m, 2H), 2.64 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 429.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-甲基-1-(5-苯基嘧啶-2-基)-1H -吡唑-5-甲醯胺(30)
Figure 02_image605
使用如關於化合物11 所描述之程序自2-氯-5-苯基嘧啶製備化合物30B 。隨後，使化合物30B 經歷如實例19 中所描述用於將中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物30 。獲得呈白色固體之化合物30 (130 mg，產率82.9%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.07 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 9.01 (s, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.84 - 7.79 (m, 3H), 7.58 - 7.44 (m, 3H), 7.28 - 7.21 (m, 4H), 7.15 - 7.10 (m, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.29 - 5.21 (m, 1H), 3.18 - 3.10 (m, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.26 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 455.1。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-甲基-1-(5-苯基嘧啶-2-基)-1H -吡唑-3-甲醯胺(29)
Figure 02_image607
使用如關於化合物11 所描述之程序自2-氯-5-苯基嘧啶製備化合物30C 。隨後，使化合物30C 經歷如實例19 中所描述用於使中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物29 。獲得呈白色固體之化合物29 (50 mg，產率33.8%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.25 (s, 2H), 8.12 (br s, 1H), 7.90 - 7.47 (m, 7H), 7.33 - 7.15 (m, 5H), 6.69 (s, 1H), 5.56 - 5.42 (m, 1H), 3.35 - 3.12 (m, 2H), 2.65 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 455.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-甲基-1-(4-苯基嘧啶-2-基)-1H -吡唑-5-甲醯胺(45)
Figure 02_image609
使用如關於化合物11 所描述之程序自2-氯-4-苯基嘧啶製備化合物45B 。隨後，使化合物45B 經歷如實例19 中所描述用於將中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物45 。獲得呈白色固體之化合物45 (110 mg，產率73.5%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 9.06 (d,J = 7.3 Hz, 1H), 8.78 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 8.12 - 8.05 (m, 3H), 8.00 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.58 - 7.46 (m, 3H), 7.25 - 7.13 (m, 5H), 6.55 (s, 1H), 5.44 - 5.36 (m, 1H), 3.11 (dd,J = 3.9, 14.0 Hz, 1H), 2.76 (dd,J = 9.9, 13.9 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 455.2。N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-5-甲基-1-(4-苯基嘧啶-2-基)-1H -吡唑-3-甲醯胺(59)
Figure 02_image611
使用如關於化合物11 所描述之程序自2-氯-4-苯基嘧啶製備化合物45C 。隨後，使化合物45C 經歷如實例19 中所描述用於使中間物58D 轉化成化合物58 之程序，得到化合物59 。獲得呈黃色固體之化合物59 (25 mg，產率11.9%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400MHz):δ 8.99 (d,J = 5.3 Hz, 1H), 8.29 - 8.25 (m, 2H), 8.10 (br d,J = 5.3 Hz, 2H), 7.82 (br s, 1H), 7.65 - 7.58 (m, 4H), 7.31 - 7.24 (m, 4H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 6.72 - 6.68 (m, 1H), 5.49 (dt,J = 4.9, 8.1 Hz, 1H), 3.29 (dd,J = 4.9, 14.2 Hz, 1H), 3.16 (br d,J = 5.5 Hz, 1H), 2.71 - 2.69 (m, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 455.1。實例 23 - 化合物 43 至 44 4-(4-((7,9-二側氧基-6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-亞基)-λ3 -碘基)苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酸甲酯(43)
Figure 02_image613
向4-溴-1,2,5-噻二唑-3-甲酸甲酯(2 g，8.97 mmol)及(4-胺基苯基)硼酸(1.60 g，11.66 mmol)於二噁烷(25 mL)及H2 O (2 mL)中之溶液中添加K2 CO3 (3.72 g，26.90 mmol)，在N2 氛圍下添加Pd(dppf)Cl2 (656 mg，896.67 μmol)，在N2 氛圍下在80℃下攪拌混合物18 h。濃縮反應混合物以移除溶劑，隨後用EA (50 mL)稀釋且過濾；濃縮有機層，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~30%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，30 mL/min)純化殘餘物。獲得呈淺黃色固體之化合物43A (1.3 g，產率：61.6%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.47 - 7.33 (m, 2H), 6.65 - 6.56 (m, 2H), 5.64 (s, 2H), 3.94 - 3.85 (m, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 236.1。
在0℃下將TsOH·H2 O (2.63 g，13.81 mmol)於H2 O (20 mL)中之溶液添加至化合物43A (1.3 g，5.53 mmol)於CH3 CN (30 mL)中之懸浮液，攪拌混合物30 min，隨後在0℃下將NaNO2 (572 mg，8.29 mmol)於H2 O (10 mL)及KI (1.38 g，8.29 mmol)於H2 O (10 mL)中之溶液逐滴添加至混合物，添加後在25℃下攪拌混合物16 h。藉由在0℃下添加飽和Na2 SO3 (約20 mL)淬滅混合物。真空濃縮混合物以移除CH3 CN。過濾反應物，真空乾燥濾餅。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~10%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，30 mL/min)純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物43B (1.4 g，產率：73.2%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.90 - 7.77 (m, 2H), 7.52 - 7.37 (m, 2H), 4.02 - 3.92 (s, 3H)。
將過硼酸鈉四水合物(4 g，26.00 mmol)分批添加至化合物43B (900 mg，2.60 mmol)於AcOH (15 mL)中之溶液中，在50℃下攪拌混合物10 h。將反應混合物用DCM (50 mL)稀釋，過濾，將濾液用水(100 mL)稀釋且用DCM (40 mL×2)萃取三次。合併之有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。於DCM:PE (1:15) (20 mL×3)中濕磨殘餘物。過濾且獲得濾餅。獲得呈淺黃色固體之化合物43C (590 mg，產率：48.9%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.26 - 8.15 (m, 2H), 7.89 - 7.84 (m, 2H), 4.05 - 3.98 (m, 3H), 2.10 - 2.00 (m, 6H)。
向化合物43C (590 mg，1.27 mmol)於EtOH (20 mL)中之溶液中添加Na2 CO3 (539 mg，5.08 mmol)於H2 O (10 mL)中之溶液，隨後添加6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-7,9-二酮(281 mg，1.65 mmol)，在20℃下攪拌混合物1 h。隨後將反應混合物用水(80 mL)稀釋且用DCM (50 mL×3)萃取。合併之有機萃取物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；4 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~100%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，20 mL/min)純化殘餘物。將產物(部分甲酯變為乙酯)溶解於MeOH (20 mL)中，隨後添加Na2 CO3 (100 mg)於H2 O (2 mL)中之溶液，在20℃下攪拌混合物4 h。隨後將反應混合物用水(50 mL)稀釋且用DCM (30 mL×3)萃取。將合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到所要產物。獲得呈淺黃色固體之化合物43 (130 mg，產率：19.9%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.02 - 7.92 (m, 2H), 7.86 - 7.75 (m, 2H), 4.04 - 3.90 (m, 3H), 2.24 - 2.15 (m, 4H), 1.85 - 1.78 (m, 4H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 537.0。 3-(4-((7,9-二側氧基-6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-亞基)-λ3 -碘基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(44)
Figure 02_image615
使用關於化合物43 所描述之程序將化合物3-碘-1-甲基-1H -吡唑-4-甲酸乙酯轉化成化合物44 。獲得呈淡黃色固體之化合物44 (120 mg，產率57.5%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.98 (s, 1H), 7.91 (s, 4H), 4.25 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 2.16 (t,J = 7.4 Hz, 4H), 1.82 - 1.77 (m, 4H), 1.29 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 546.9。實例 24 - 化合物 56 及 66 乙基-4-(4-((7,9-二側氧基-6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-亞基)-λ3 -碘基)苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸酯(56)
Figure 02_image617
(燒瓶A)向4-碘苯甲酸(25 g，100.80 mmol)於CH3 CN (300 mL)中之溶液中添加CDI (18.5 g，114.09 mmol)，在20℃下攪拌混合物2 h。同時，在燒瓶B中，向3-乙氧基-3-側氧基-丙酸酯鉀鹽(22.30 g，131.04 mmol)於CH3 CN (300 mL)中之溶液中添加MgCl2 (10.6 g，111.33 mmol)及TEA (301.75 mmol，42 mL)，在20℃下攪拌混合物2 h。隨後將燒瓶A之溶液轉移至燒瓶B，在20℃下攪拌混合物18 h。將反應混合物用H2 O (200 mL)稀釋，用HC1 (4 M)調節至pH為約4，用EA (300 mL×3)萃取，且將有機層合併並用NaHCO3 (水溶液) (500 mL)、鹽水(500 mL)洗滌。隨後有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色油狀物之化合物56A (31.5 g，產率：98.2%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.91 - 7.73 (m, 2H), 7.70 - 7.42 (m, 2H), 4.30 - 4.15 (m, 2H), 3.97 - 3.89 (m, 2H), 1.30 - 1.19 (m, 3H)。
向化合物56A (31.5 g，99.02 mmol)於EtOH (300 mL)中之溶液中添加NH4 OAc (20 g，259.46 mmol)，隨後在85℃下攪拌混合物18 h。將反應混合物濃縮以移除溶劑，隨後用水(150 mL)稀釋並用EA (100 mL×3)萃取，將有機層用飽和NaHCO3 (100 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；220 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~10%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，100 mL/min)純化殘餘物。獲得呈淺黃色固體之化合物56B (26 g，產率：71.5%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.86 - 7.75 (m, 2H), 7.44 - 7.34 (m, 2H), 4.77 (s, 1H), 4.05 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 1.19 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 317.9。
在0℃下向化合物56B (2 g，6.31 mmol)於DCE (20 mL)中之溶液中分批添加PhI(OAc)2 (2.44 g，7.57 mmol)，隨後在20℃下攪拌混合物1 h。將混合物冷卻至0℃，用飽和NaHCO3 (80 mL)洗滌，用DCM (30 mL)萃取水相，收集有機層，用H2 O (50 mL)洗滌，隨後經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；20 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~10%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，30 mL/min)純化殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物56C (220 mg，產率：8.2%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.84 - 7.80 (m, 2H), 7.16 - 7.12 (m, 2H), 4.13 - 4.06 (m, 2H), 1.88 (s, 3H), 1.19 - 1.15 (m, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 376.0。
將化合物56C (220 mg，586.42 μmol)於AcOH (2 mL)及DCE (1 mL)中之溶液在90℃下攪拌1 h。真空移除溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc (30 mL)中，用飽和NaHCO3 (30 mL)洗滌。收集且濃縮有機物，得到殘餘物。藉由製備型TLC (PE:EA =5:1)純化殘餘物。獲得呈淺黃色固體之化合物56D (110 mg，產率：52.5%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.86 - 7.72 (m, 4H), 4.39 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.38 (t,J = 7.2 Hz, 3H)
向化合物56D (0.4 g，1.12 mmol)於CHCl3 (8 mL)中之溶液中添加m -CPBA (314 mg，1.46 mmol，80%純度)，在20℃下攪拌混合物18 h。濃縮混合物，移除大部分溶劑，得到殘餘物。將殘餘物溶解於EtOH (15 mL)中，且向反應物添加含Na2 CO3 (475 mg，4.48 mmol)之H2 O (10 mL)，且隨後快速添加6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-7,9-二酮(248 mg，1.46 mmol)。隨後在20℃下攪拌反應混合物2 h。將殘餘物用水(100 mL)稀釋且用EA (50 mL×2)萃取。將合併之有機萃取物用鹽水(100 mL)洗滌且經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。藉由急驟矽膠層析(ISCO®；12 g SepaFlash®矽膠急驟管柱，0~100%乙酸乙酯/石油醚梯度之溶離劑，30 mL/min)純化殘餘物。獲得呈白色固體之化合物56 (190 mg，產率：30.7%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 8.25 - 8.09 (m, 2H), 7.97 - 7.85 (m, 2H), 4.40 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.21 - 2.12 (m, 4H), 1.84 - 1.75 (m, 4H), 1.39 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 548.1。 乙基-4-(2-((7,9-二側氧基-6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-亞基)-λ3 -碘基)苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酸酯(66)
Figure 02_image619
使用關於合成中間物58D 所描述之相同程序將化合物2-碘苯甲酸轉化成中間物66D 。此外，使用與關於化合物56 所描述相同之條件用6,10-二氧雜螺[4.5]癸烷-7,9-二酮處理中間物66D ，獲得最終化合物66 。獲得呈白色固體之化合物66 (90 mg，產率15.3%)。1 H NMR (CDCl3, 400MHz):δ 8.77 (dd,J = 1.8, 7.8 Hz, 1H), 7.67 (dd,J = 1.1, 8.2 Hz, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.54 - 7.48 (m, 1H), 4.46 (q,J = 7.1 Hz, 2H), 2.66 (s, 3H), 2.29 - 2.21 (m, 4H), 1.85 (td,J = 3.9, 7.1 Hz, 4H), 1.43 (t,J = 7.2 Hz, 3H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 548.0。實例 25 - 化合物 103 N -(4-胺基-3,4-二側氧基-1-丙基丁-2-基)-3-(1-異丙基-2-側氧基-2,3-二氫-1H -苯并[D ]咪唑-4-基)-1-甲基-1H -吡唑-4-甲醯胺(103)
Figure 02_image621
將1-溴-3-氟-2-硝基苯(4.5 g，20.45 mmol)及異丙基胺(1.21 g，20.45 mmol)於EtOH (20 mL)中之溶液在50℃下攪拌48 h。真空移除溶劑。藉由管柱(PE:EA =10:1)純化殘餘物，得到呈棕色油狀物之化合物103A (5 g，產率：94.34%)。
向化合物103A (5 g，19.30 mmol)於AcOH (60 mL)中之溶液中添加Fe (5.39 g，96.49 mmol)。在60℃下攪拌混合物1 h。真空移除溶劑。將殘餘物用飽和NaHCO3 (200 mL)洗滌，用EtOAc (100 mL×2)萃取。收集有機物，用鹽水(200 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾，且濃縮，得到呈棕色油狀物之化合物103B (4.4 g，粗產物)，其不經進一步純化即直接用於下一步驟。
向化合物103B (4.4 g，19.20 mmol)於THF (60 mL)中之溶液中添加TEA (5.4 mL，38.41 mmol)、CDI (6.23 g，38.41 mmol)。在20℃下攪拌混合物12 h。將混合物用H2 O (50 mL)洗滌，用EtOAc (50 mL×2)萃取。收集有機物且濃縮。藉由管柱(PE:EA =2:1)純化殘餘物，得到呈棕色固體之化合物103C (2.5 g，產率：51.03%)。
向化合物103C (400 mg，1.57 mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)(B2 Pin2 ) (398 mg，1.57 mmol)於二噁烷(10 mL)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2 (115 mg，156.79 μmol)、KOAc (462 mg，4.70 mmol)。於N2 下在90℃下攪拌混合物12 h。過濾溶液。收集濾液且濃縮。藉由管柱(PE:EA =2:1)純化殘餘物，得到呈淺棕色固體之化合物103D (398 mg，產率：84.00%)。
使用如實例1 中所描述之程序將化合物103D 及中間物103E 轉化成化合物103 。獲得呈白色固體之化合物103 (70 mg，產率：64.6%)。1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz):δ 9.96 (br s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.92 - 7.46 (m, 3H), 7.35 - 7.11 (m, 8H), 6.97 - 6.92 (m, 1H), 5.37 - 5.31 (m, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.21 - 3.16 (m, 1H), 2.90 - 2.84 (m, 1H), 1.49 (d,J = 7.2 Hz, 6H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 475.2。實例 26 - 化合物 93 及 104 N -(1-側氧基-3-苯基-1-(1H -四唑-5-基)丙烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(93)
Figure 02_image623
向(1-氰基-1-羥基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1 g，3.62 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液中添加吡啶(6.19 mmol，0.5 mL)，隨後逐滴添加乙醯氯(5.61 mmol，0.4 mL)，在10℃下攪拌混合物20 h。將反應混合物用DCM (20 mL)及水(50 mL)稀釋，用DCM (20 mL×2)萃取水相，將有機層用1 N HCl (30 mL)、飽和NaHCO3 (30 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物93A (1 g，產率：86.7%)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.36 - 7.27 (m, 3H), 7.22 - 7.16 (m, 2H), 5.42 - 5.33 (m, 1H), 4.70 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 4.32 (br s, 1H), 3.10 - 2.83 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.40 (s, 9H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 341.1。
向化合物93A (500 mg，1.57 mmol)、Et3 N. HCl (432 mg，3.14 mmol)於甲苯(15 mL)中之混合物中添加NaN3 (250 mg，3.85 mmol)，在110℃下攪拌混合物18 h。將反應混合物用甲苯(20 mL)稀釋且用水(50 mL×3)萃取，用濃HCl將合併之水層酸化至pH為約2，且用EA (30 mL×2)萃取，將有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。將殘餘物於EA (2 mL)及PE (20 mL)中濕磨兩次，過濾且真空乾燥。獲得呈淺黃色固體之化合物93B (500 mg，產率：74.4%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.33 - 7.16 (m, 6H), 7.02 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 6.01 - 5.89 (m, 1H), 4.23 - 4.16 (m, 1H), 2.86 - 2.64 (m, 2H), 2.21 - 2.10 (m, 3H), 1.26 - 1.18 (m, 9H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 362.2。
向化合物93B (400 mg，1.11 mmol)於MeOH (15 mL)中之溶液中添加含K2 CO3 (610 mg，4.41 mmol)之H2 O (3 mL)，在15℃下攪拌混合物4 h。濃縮反應混合物以移除MeOH，用水(20 mL)稀釋，用EA (20 mL)萃取，用濃HCl將水層酸化至pH為約2，用EA (20 mL×2)萃取，有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈淺黃色固體之化合物93C (420 mg，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 7.30 - 7.16 (m, 6H), 6.56 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 6.37 (br d,J = 4.0 Hz, 1H), 5.02 (t,J = 4.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.92 (m, 1H), 2.98 - 2.57 (m, 2H), 1.24 (s, 9H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 342.2。
向化合物93C (420 mg，1.32 mmol)於EA (3 mL)中之溶液中添加HCl/EtOAc (4 M，3 mL)，在15℃下攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物，得到殘餘物。將殘餘物於EA (3 mL)及PE (20 mL)中濕磨，過濾且真空乾燥。獲得呈淺黃色固體之化合物93D (300 mg，產率：89.2%，HCl)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 8.26 (br s, 3H), 7.39 - 7.12 (m, 6H), 5.03 (t,J = 4.5 Hz, 1H), 3.82 (s, 1H), 3.08 - 2.91 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+Na)+ 276.2
使用如實例17 中所描述之程序將化合物93D 及4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酸轉化成化合物93 。獲得呈白色固體之化合物93 (15 mg，產率：37.7%)。1 H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ 9.33 (br dd,J = 7.3, 16.8 Hz, 1H), 7.66 - 7.56 (m, 2H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.33 - 7.06 (m, 5H), 5.74 - 5.67 (m, 1H), 3.16 - 3.10 (m, 2H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 406.1。N -(1-側氧基-3-苯基-1-(1H -1,2,4-三唑-3-基)丙烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲醯胺(104)
Figure 02_image625
在0℃下向(1-氰基-1-羥基-3-苯基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(500 mg，1.81 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加咪唑(246 mg，3.62 mmol)及TBDMSiCl (2.90 mmol，0.35 mL)。在25℃下攪拌混合物12 h。將混合物用EA (200 mL)稀釋，用鹽水(200 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由管柱層析(SiO2 ，石油醚/乙酸乙酯 = 10/1至1/1)純化殘餘物。獲得呈無色油狀物之化合物104A (2.9 g)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ 7.36 - 7.14 (m, 6H), 4.75 - 4.61 (m, 1H), 4.10 - 3.97 (m, 1H), 3.20 - 2.70 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.00 - 0.83 (m, 9H), 0.26 - 0.08 (m, 6H)。
在0℃下向化合物104A (450 mg，1.15 mmol)及K2 CO3 (318 mg，2.30 mmol)於DMSO (10 mL)中之溶液中添加H2 O2 (23.04 mmol，2.21 mL，30%純度)，在15℃下攪拌混合物20 h。將反應混合物在冰水中用飽和Na2 S2 O3 (20 mL)緩慢淬滅，用水(30 mL)稀釋，用EtOAc (30 mL×3)萃取，將有機層用鹽水(30 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈無色油狀物之化合物104B (400 mg，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。
將化合物104B (400 mg，978.94 μmol)於1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(75.28 mmol，10 mL)中之溶液在30℃下攪拌1 h。將反應混合物在冰水中用水(50 mL)稀釋，用EA (20 mL×3)萃取，將有機層用鹽水(30 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物104C (420 mg，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。
向化合物104C (410 mg，884.22 μmol)於CH3 COOH (5 mL)中之溶液中添加NH2 NH2 . H2 O (884.22 μmol，0.43 mL)，在85℃下攪拌混合物1.5h。將反應混合物在冰水中用水(60 mL)稀釋，用EA (30 mL×3)萃取，將有機層用鹽水(80 mL×2)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物。獲得呈淺黃色油狀物之化合物104D (400 mg，粗產物)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (ESI)m/z (M+H)+ 433.3。
向化合物104D (400 mg，924.58 μmol)於EA (3 mL)中之溶液中添加HCl/EtOAc (4 M，4.62 mL)，在15℃下攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物，得到殘餘物。獲得呈黃色固體之化合物104E (350 mg，HCl)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。MS (ESI)m/z (M+H)+ 333.2。
使用如在實例17 中之肽偶合條件使化合物104E 與4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酸偶合，且隨後使用TBAF去除保護基，接著使用實例17 之程序氧化，獲得化合物104 。獲得呈白色固體之化合物104 (40 mg，產率：53.5%)。1 H NMR (400MHz, CD3 CN) δ 8.45 (s, 1H), 7.83 (d,J = 7.1 Hz, 1H), 7.66 - 7.55 (m, 2H), 7.49 - 7.36 (m, 3H), 7.34 - 7.16 (m, 6H), 5.92 - 5.87 (m, 1H), 3.45 (dd,J = 4.6, 14.2 Hz, 1H), 3.12 (dd,J = 8.6, 13.9 Hz, 1H)。MS (ESI)m/z (M+H)+ 405.1。 實例部分III實例 A 鈣蛋白酶抑制劑在肝纖維化模型中之功效CCL4 模型
進行此研究以評估本文所揭示之鈣蛋白酶化合物對雄性BALB/c小鼠中之四氯化碳(CCl4)誘發之肝纖維化之作用。藉由每週兩次投與CCl4，持續四周來在小鼠中誘發肝纖維化。在開始CCl4注射後第14天以治療性處理模式用本文所揭示之化合物處理經CCl4投與之動物且持續至研究結束。在最後一次CCl4投與之後96小時，亦即在CCl4投與之後第32天，研究終止。本文所描述之化合物顯示纖維化評分改善且與媒劑相比對肝臟酶、肝臟重量或體重無影響。肝纖維化之誘發
四氯化碳(CCl4)係購自Sigma (cat #319961)。為了誘發肝纖維化，以每公斤體重1 ml之劑量體積經由腹膜內(ip)注射向小鼠投與CCl4 (1:1，CCl4:礦物油)。在每一次CCl4投與當天，在投與CCl4之前對動物進行稱重且根據個別動物之體重調節劑量體積。每週兩次(亦即，每週一及週四，持續四週)在早晨處理後2小時向動物投與CCl4：礦物油。在首次CCl4注射後第28天接受最終CCl4注射。血液
在研究開始之前第4天，及在CCl4投與後第13天，在治療性處理開始之前一天，經由下頜下途徑對動物進行抽血。製備血漿並儲存於-20℃直至對其進行分析為止。在CCl4投與後第32天研究終止時，經由心臟穿刺對動物進行抽血。製備血清並儲存於-20℃直至裝運至合約公司以供進行肝臟酶面板分析為止。化合物之投與
處理化合物製備於甲基纖維素中以供經口管飼投與。在一個實例中，可投與以下式II-a化合物：
Figure 02_image627
Figure 02_image629
每週製備媒劑(0.5%甲基纖維素)。處理化合物每週一次在Aragen處製備且在室溫下儲存於暗處。經由經口途徑每天上午及下午投與總共100微升各化合物。在首次CCl4投與後第14天，動物接受處理且持續至研究結束。在接受最終處理後2至4小時內採集動物。採集
所有存活動物在最後CCl4投與之後大約96小時(亦即，在CCL4投與後第32天)以人道方式安樂死。將肝臟中葉固定至10% NBF中以供用於組織學，對剩餘肝葉進行稱量且速凍至兩個不同試管中。組織學分析
在偏光下檢查經天狼星紅(PSR)染色之載玻片。切片中之雙折射視為纖維化且根據以下主觀標度對其進行評分：0=在正常門脈區無纖維化；1=在小葉之間的細股中纖維化最小程度增加；2=在小葉之間的細股中之纖維化輕度增加且在壞死/礦化區中存在一定膠原蛋白雙折射；3=在小葉之間的細股中之纖維化中度增加，且在壞死//礦化區中存在輕度雙折射；4=小葉之間或壞死/礦化區中的纖維化顯著增加；5=纖維化嚴重增加。使用未配對t測試(GraphPad Prism軟體)進行統計分析。臨床觀測及體重
使用化合物405 作為測試化合物，以30 mg/kg BID或100 mg/kg BID投與，遵循上文所描述之程序。在每一次CCl4投與之前量測體重。基於個體體重調節CCl4劑量體積。投與CCl4之所有小鼠在研究第一週顯示體重減輕，隨後傾向於在研究之後一部分期間顯示體重逐步增加。與經鹽水處理之對照動物相比，經CCl4投與之動物顯示肝臟重量之顯著增加。與未投與CCl4之對照小鼠1.45+/-0.03 g相比，在用媒劑處理之動物中記錄2.24+/-0.06 g之平均肝臟重量(p＜0.0001)。纖維化
用PSR對肝臟切片染色且在偏光下觀測，顯示經CCl4處理之小鼠中之膠原蛋白積聚及交聯，從而確認化合物405 對纖維化之誘發(圖1)。用化合物405 處理顯示膠原蛋白纖維之長度及厚度減小。使用方法部分中所描述之標度分析切片。圖2概述各組之評分。當用化合物405 對經CCl4處理之小鼠給藥時，觀測到纖維化評分之統計學上顯著之降低。
以100 mg/kg一天兩次治療地給與化合物405 ，此模型中之纖維化明顯減少。結果表明化合物405 在肝纖維化中之抗纖維化作用。資料表明，鈣蛋白酶抑制劑本身或以組合形式在不同形式之肝纖維化中可具有有益作用。可在如NASH之疾病中特別考慮組合療法，在該疾病中抗纖維化劑與消炎劑或調節代謝組分之藥劑的組合可產生最大益處。實例 B 在正常及患病人類肝臟中之CAPN1、CAPN2及CAPN9表現
對正常及患病人類肝臟進行CAPN1、CAPN2及CAPN9的免疫組織化學(IHC)評估。所包括之疾病為脂肪肝、NASH、肝硬化、PBC及PSC。方法
使用針對CAPN1之單株抗體(Invitrogen/Thermo，純系MA3-940)、針對CAPN2之單株抗體(Biorbyt 305855，純系1381CT669.7.66.71)及針對CAPN9之單株抗體(Abnova H00010753-MO2， 純系3A6)偵測CAPN1。所有分析均藉由偵測含量豐富但受限制之對照蛋白質(胃腸黏膜中之細胞角質蛋白)控制，且各切片之IHC分析均以非免疫IgG及「非主要」陰性對照組為對照。完成三個分析且在各情況下，分析對照組在黏膜上皮細胞中提供細胞角質蛋白之預期模式。非免疫對照組產生可忽略程度之非特異性免疫反應性，其不干擾特異性CAPN-免疫反應性之判讀。
為評估抗體特異性，使用含有親本細胞株或表現重組人類CAPN2或CAPN9之細胞株之切片測試CAPN1、CAPN2及CAPN9抗體。在所測試條件下，CAPN1抗體不對任何細胞株進行染色。CAPN2及CAPN9抗體僅標記適當及預期之細胞株。免疫組織化學
除非另有說明，否則所有切片均使用4μm之厚度，且所有培育均在環境溫度下進行。切片經過脫蠟，於PT Link自動抗原收回系統中，使用pH6 (CAPN1及CAPN2)或pH9 (CAPN9) Flex Plus 3合1抗原修復緩衝劑，在97℃及自動加熱及冷卻下，回收抗原及再水合20 min。抗原回收後，將載玻片置於Flex緩衝液(50 mM Tris.HCl，300mM NaCl，0.1% Tween-20，pH 7.6)中且使其冷卻。隨後將載玻片裝載至Dako自動染色儀Plus中。隨後將切片與Flex Plus過氧化酶阻斷試劑一起培育，用Flex緩衝劑沖洗，接著與蛋白質阻斷試劑(DAKO，Cat# X0909)一起培育，再使用空氣噴槍排除。隨後將該等切片與在DAKO抗體稀釋劑(DAKO，Cat# K8006)中稀釋之初級抗體、同型及濃度均匹配之非免疫IgG、或僅抗體稀釋劑(無初級抗體)一起培育。在與各別初級抗體一起培育之後，在Flex緩衝劑中沖洗切片兩次，與Flex plus-HRP二級抗體一起培育，在Flex緩衝劑中沖洗兩次，且隨後與二胺基聯苯胺(DAB)受質一起培育。藉由用蒸餾水沖洗載玻片停止顯色反應。在色素形成之後，自Dako自動染色儀Plus取出切片且用蘇木精對其進行對比染色，在遞增之乙醇系列(90-99%)中脫水，在三種變化之二甲苯中澄清且在DePeX下滑動加蓋。包括證實結腸中之泛細胞角質蛋白(PCK)表現之分析對照以驗證抗小鼠Dako EnVision Flex plus-HRP及顯色試劑。亦包括「非主要」對照。分析染色切片，且使用Aperio ScanScope AT Turbo捕獲適合之數位影像。結果
與診斷為正常之組織相比，患病肝臟中CAPN1、CAPN2及CAPN9之表現及分佈顯著增加。此在患有纖維化或退化性變化(NASH、肝硬化、PBC、PSC)之組織中尤其顯著。一些經診斷為正常具有免疫反應性之切片通常具有疾病區域，其顯示CAPN1染色(具有脂肪變化或壞死及炎症之區域)增加。在正常及患病組織中之最廣泛多種細胞類型中觀測到CAPN1，而CAPN 2及CAPN9主要在膽管上皮中很大程度上調。CAPN1
與正常組織相比，疾病組織中之CAPN1反應性增加。CAPN1反應性廣泛且包括膽管上皮細胞、Kupfer細胞、巨噬細胞及肝細胞(圖3)。在膽管上皮細胞及Kuppfer細胞中觀測到最強染色。在NASH及肝硬化中發現免疫反應性之明顯增加，而脂肪肝樣本顯示較低免疫反應性。肝細胞及內皮細胞染色傾向於在患病切片中最強。在一些經診斷為正常之組織中，呈現最小脂肪變化之區域(圖3，底部中部)及壞死與發炎區域(圖3，右下方)顯示增加的CAPN1肝細胞染色。
與正常組織相比，PBC及PSC組織中之CAPN1反應性增加。在PBC及PSC樣本中，相較於PSC，CAPN1總染色一般在PBC樣本中更強(圖4)。在PSC中，觀測到膽管上皮之強染色。在具有嚴重發炎之個體中，免疫反應性幾乎隨處可見。CAPN2
雖然無論疾病狀態如何皆在膽管上皮細胞中出現CAPN2反應性，但與正常組織相比，CAPN2免疫反應性在患病組織中增加(圖5)。在具有發炎之患病肝臟中，發炎性細胞(主要為巨噬細胞)及內皮細胞可變地為CAPN2陽性的。鄰近於纖維化帶的肝細胞為CAPN2陽性，但朝向結節或葉片中心，陽性逐漸減小。
在PBC及PSC樣本中，與正常組織相比，CAPN2反應性增加。膽管上皮之CAPN2陽性強度變化在PBC與PSC之間無顯著差異(圖6)。在具有發炎之患病肝臟中，發炎性細胞(主要為巨噬細胞)及內皮細胞可變地為CAPN2陽性的。肝細胞在一些個體中為CAPN2陽性，具有廣泛變化性。具有最嚴重發炎之個體傾向於具有最強染色。CAPN9
無論疾病狀態，膽管上皮細胞中皆出現強CAPN9反應性(圖7)。然而，與正常組織相比，觀測到PBC及PSC組織中之CAPN9反應性增加。患病肝臟通常包括膽管增生，其增加總體CAPN9陽性細胞分佈。與健康肝臟相比，患病肝臟中之肝細胞具有輕度增加之CAPN9反應性。在診斷為正常之肝臟中，一些脂肪變化(脂肪變性)區域具有增加之肝細胞CAPN9反應性。許多切片在同型對照上觀測到輕度固有肝細胞色素。
在PBC及PSC樣本中，與正常組織相比，CAPN9反應性增加。膽管上皮細胞顯示強CAPN9反應性(圖8)。注意到PBC與PSC之間的差異極小。患病肝臟通常包括膽管增生，其增加總體CAPN9陽性細胞分佈。在退化肝細胞中，CAPN9反應性最強。實例 C NASH之動物模型
非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)之缺乏膽鹼、限定胺基酸之高脂膳食(CDAHFD)大鼠模型再現人類疾病之關鍵特徵。此模型用於檢查在CDAHFD大鼠模型中化合物405 (表1a中所示)之抗纖維化作用。
隨機分配雄性Wistar大鼠(Charles River Laboratories)以接受以下處理：第1組(n=8)充當健康對照並餵飼普通食物12週；第2組(n=8)充當疾病對照且餵飼CDAHFD並在CDAHFD後第5週開始每日一次(QD)接受媒劑甲基纖維素(MC)經口管飼處理，第3組(n=8)充當疾病對照且餵飼CDAHFD並在CDAHFD後第5週開始每日兩次(BID)接受媒劑甲基纖維素(MC)經口管飼處理，第4組(n=8)餵飼CDAHFD且在CDAHFD後第5週開始接受QD藉由化合物405 (200 mg/kg)之經口管飼處理，第5組(n=8)餵飼CDAHFD且在CDAHFD後第5週開始接受BID藉由化合物405 (100 mg/kg)之經口管飼處理，第6組(n=8)餵飼CDAHFD且在CDAHFD後第5週開始接受QD藉由化合物405 (60 mg/kg)之經口管飼處理，第7組(n=8)餵飼CDAHFD且在CDAHFD後第5週開始接受BID藉由化合物405 (30 mg/kg)之經口管飼處理。在研究結束時(12週)，收集肝臟組織及血清用於進一步分析。使用一部分肝臟進行組織學分析且將來自各個別動物之備用肝臟在液氮上速凍且儲存於-80℃下。收集血清以量測ALT。
在CDAHFD膳食5週後，餵飼CDAHFD之大鼠出現肝纖維化(F3)，截至12週進展為肝硬化(F4)(圖9A)。在此模型中，隨著纖維化進展，餵飼CDAHFD之大鼠中之α-SMA及膠原蛋白1a1表現隨時間推移逐漸增加(圖9B及圖9C)，喂飼CDAHFD之大鼠中之鈣蛋白酶2在肝臟中之表現增加(NC 1.00±0.14，2週4.34±1.38 **p＜0.001，6週3.50±0.90 *p＜0.05及12週，3.67±0.32 *p＜0.05，與NC相比)，而鈣蛋白酶1之表現在此研究過程內未改變(圖9D及圖9E)。大鼠肝臟中之鈣蛋白酶9表現不可藉由qPCR偵測。
與正常食物餵飼之大鼠相比，用CDAHFD餵飼之大鼠的體重降低。相對於媒劑(甲基纖維素)對照大鼠，用化合物405 (200 mg/kg及60 mg/kg)進行之QD處理未改變CDAHFD大鼠的體重。與正常食物相比，在用CDAHFD餵飼之大鼠中，肝臟重量及脾臟重量(以總重量之百分比形式)顯著更高(圖10A至圖10C)。與正常食物相比，在所有CDAHFD餵飼之大鼠中，包括ALT、AST及ALP之血液轉胺酶含量(U/L)顯著增加，然而，血清分析揭示與經媒劑處理之組(MC QD)相比，化合物405 未改變血液轉胺酶含量。與正常食物大鼠相比，所有CDAHFD大鼠之白蛋白含量降低，然而在所有CDAHFD餵飼之大鼠中，化合物405 未改變白蛋白含量(圖11A至圖11E)。總膽紅素無顯著變化。
在BID研究中，化合物405 (100 mg/kg及30 mg/kg)處理未影響CDAHFD大鼠的體重及脾臟重量(以總重量之百分比形式)。然而，在用化合物405 (MC BID 0.059±0.002%對100 mg/kg BID 0.066±0.008%及30 mg/kg BID 0.066±0.003% *p＜0.05)處理之後，肝臟重量(以總重量之百分比形式)增加(圖12A至圖12C)。與正常食物(NC)相比，包括丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)及ALP(鹼性磷酸酶)之血液轉胺酶(U/L)在CDAHFD餵飼之大鼠中之含量增加。但與媒劑處理組(MC BID)相比，化合物405 並未改變包括ALT、AST及ALP之血液轉胺酶(U/L)之含量。儘管與正常食物(NC)相比，CDAHFD大鼠中白蛋白含量降低，但化合物405 未改變CDAHFD餵飼之大鼠中的白蛋白含量(圖13A至圖13E)。總膽紅素無顯著變化。
代表性組織學樣本展現在12週時CDAHFD大鼠中之橋接纖維化(圖14)。使用膠原蛋白定量之多種方法比較處理組中肝纖維化之差異。藉由膠原蛋白比例面積(CPA)量測，與CDAHFD大鼠中之MC QD相比，化合物405 200 mg/kg QD顯著減少膠原蛋白沈積(11.28±3.50%對6.08±1.69%，**p＜0.05)(圖14A及圖14B)。亦使用羥基脯胺酸分析觀測到類似發現。化合物405 200 mg/kg QD處理顯著減少羥基脯胺酸(MC QD 731.3±165.9 nmol/L對200 mg/kg QD 495.1±113.9 nmol/L *p＜0.05) (圖14C)。如藉由CPA及羥基脯胺酸所量測，化合物405 60 mg/kg QD未顯著減少纖維化。然而，與MC處理之CDAHFD大鼠相比，在用化合物405 200及60 mg/kg QD處理之後，SMA (Acta2)蛋白質表現顯著降低(MC QD 5.82±0.67對200 mg/kg 1.7±0.58% **p＜0.01及60 mg/kg 2.40±1.16% *p＜0.01) (圖14A及圖14D)。脂肪變性之組織學分析顯示化合物405 處理QD未改變CDAHFD大鼠中之肝臟脂肪含量(圖14A及圖14E)。
在BID研究中，存在與化合物405 100 mg/kg BID減少CDAHFD餵飼之大鼠中之膠原蛋白沈積且顯著減少羥基脯胺酸之相同趨勢(MC BID 706.9±173.5 nmol/L對100 mg/kg BID 458.2±146 nmol/L *p＜0.05) (圖15C)。另外，化合物405 100 mg/kg BID顯著降低CDAHFD大鼠肝臟中之SMA (Acta2)蛋白質表現(MC BID 7.08±1.36%對100 mg/kg BID 2.01±1.14%，**p＜0.01) (圖15A及15D)。脂肪變性之組織學分析顯示化合物405 之BID處理未改變CDAHFD大鼠中之肝臟脂肪含量(圖15A及圖15E)。
mRNA表現分析顯示化合物405 200 mg/kg或60 mg/kg QD未顯著降低促纖維化或發炎性基因表現。(圖16A至圖16F)。藉由比較，化合物405 30 mg/kg BID減少SMA之表現(MC BID 73.65 ± 37.51對30 mg/kg 11.46 ± 2.02 **p＜ 0.01)，且化合物405 100及30 mg/kg BID皆減少Col1a1之表現((MC BID 106.6 ± 59.97對100 mg/kg 35.76 ± 33.84 **p＜ 0.01及30 mg/kg 13.37 ± 2.53 **p＜ 0.01)、CTGF之表現((MC BID 42.89 ± 32.82對100 mg/kg 3.84 ± 2.24 *p＜ 0.05及30 mg/kg 3.55 ± 1.35 **p＜0.01)及IL-6之表現(MC BID 54.89 ± 47.23對100 mg/kg 15.81 ± 9.01 **p＜ 0.01及30 mg/kg 2.80 ± 1.35 **p＜ 0.01) (圖17A至圖17D)。化合物405 之BID處理未改變鈣蛋白酶1及鈣蛋白酶2之表現(圖17E及圖17F)。實例 D PSC之動物模型
咸信模擬PSC之態樣之模型為mdr2-/-小鼠模型，因為該模型呈現獨特膽纖維化。PSC中上調CAPN 1、CAPN 2及CAPN 9之細胞-膽管上皮細胞似乎引起此模型中纖維化之出現。
在Mdr2 -/-小鼠中在易患纖維化之BALB/c背景下測試處理化合物，該等小鼠自發地出現加速之膽纖維化及早髮型門脈高血壓(Ikenaga, N.等人(2015) A new Mdr2-/- mouse model of sclerosing cholangitis with rapid fibrosis progression , early-onset portal hypertension and liver cancer.Am J. Pathology 185 (2), 325-34)。此等小鼠出現纖維化病變及膽管反應，起始於4週齡，在12週時繼續增加膠原蛋白沈積及肝硬化早期跡象。
在6週齡對Mdr2 -/-小鼠給藥，持續6週，且在第12週評估纖維化發展。在研究結束時之評估包括作為總體纖維化之量度的羥基脯胺酸、組織學分析及促纖維化基因(包括TGFß、原膠原、α-平滑肌肌動蛋白)之基因表現。
圖1展示用天狼星紅(Picrosirius Red；PSR)染色且使用偏光顯微術觀測之小鼠肝臟切片。
圖2概述來自經天狼星紅染色之肝臟切片的纖維化評分。
圖3展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(NASH、肝硬化、脂肪肝病)中之CAPN1的免疫組織化學評估。
圖4展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(PSC及PBC)中之CAPN1的免疫組織化學評估。
圖5展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(NASH、肝硬化、脂肪肝病)中之CAPN2的免疫組織化學評估。
圖6展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(PSC及PBC)中之CAPN2的免疫組織化學評估。
圖7展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(NASH、肝硬化、脂肪肝病)中之CAPN9的免疫組織化學評估。
圖8展示正常人類肝臟及患病人類肝臟(PSC及PBC)中之CAPN9的免疫組織化學評估。
圖9A展示餵飼缺乏膽鹼、限定胺基酸之高脂膳食(CDAHFD)的經蘇木素及伊紅(H&E)染色及天狼星紅染色之肝臟，圖9B至圖9E分別展示CDAHFD大鼠中平滑肌肌動蛋白(SMA)、膠原蛋白(Col1a1)、鈣蛋白酶1及鈣蛋白酶2之表現。
圖10A至圖10C分別展示在CDAFHD大鼠中每日一次投與化合物405 對體重、肝臟/體重比及脾臟/體重比之作用。
圖11A至圖1E展示在CDAFHD大鼠中每日一次投與化合物405 對丙胺酸轉移酶(ALT)含量(圖11A)、鹼性磷酸酶(ALP)含量(圖11B)、天冬胺酸轉胺酶(AST)含量(圖11C)、總膽紅素含量(圖11D)及總白蛋白含量(圖11E)之作用。
圖12A至圖12C分別展示在CDAFHD大鼠中每日兩次投與化合物405 對體重、肝臟/體重比及脾臟/體重比之作用。
圖13A至圖13E展示在CDAFHD大鼠中每日一次投與化合物405對ALT含量(圖13A)、ALP含量(圖13B)、AST含量(圖13C)、總膽紅素含量(圖13D)及總白蛋白含量(圖13E)之作用。
圖14A展示來自每日一次用200 mg/kg及60 mg/kg之化合物405 處理之CDAHFD大鼠的經H&E染色、經天狼星紅染色及經α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)染色之肝臟。圖14B至圖14E分別展示每日一次用200 mg/kg及60 mg/kg之化合物405 處理之CDAHFD大鼠中的膠原蛋白面積比例(CPA%)、羥基脯胺酸含量、α-SMA含量及脂肪變性百分比。
圖圖15A展示來自每日兩次用100 mg mg/kg及30 mg/kg化合物405 處理之CDAHFD大鼠的經H&E染色、經天狼星紅染色及經α-SMA染色之肝臟。圖15B至圖15E分別展示每日兩次用100 mg/kg及30 mg/kg之化合物405 處理之CDAHFD大鼠中的膠原蛋白CPA%、羥基脯胺酸含量、α-SMA含量及脂肪變性百分比。
圖16A至圖16F展示每日一次用200 mg/kg及60 mg/kg之化合物405 處理之CDAHFD大鼠中的促纖維化基因表現量。
圖17A至圖17F展示每日兩次用100 mg/kg及30 mg/kg之化合物405 處理之CDAHFD大鼠中的促纖維化基因表現量。
Figure 108122979-A0101-11-0001-1

Claims (25)

  1. 一種治療疾病或病症之方法，該疾病或病症選自由原發性硬化性膽管炎、原發性膽道膽管炎、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪變性肝炎及肝硬化組成之群；該方法包括向有此需要之個體投與一或多種鈣蛋白酶抑制劑，其中該鈣蛋白酶抑制劑為式I化合物：
    Figure 03_image001
    或其醫藥學上可接受之鹽，其中： A1 係選自由以下組成之群：視情況經取代之5員至10員雜環基，其限制條件為該5員至10員雜環基不經側氧基取代；視情況經取代之5員、8員或9員雜芳基；以及視情況經取代之C3-10 碳環基； A2 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基、-CR2 -、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A4 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-4 烷基、-(CR2 )n -S-(CR2 )n -、-(CR2 )n -S(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -SO2 -(CR2 )n -、-(CR2 )n -O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=S)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -C(=O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NR-(CR2 )n -、-(CR2 )n -CH=CH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -OC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(O)-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)NH-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)O-(CR2 )n -、-(CR2 )n -NHC(S)-(CR2 )n -及單鍵； 當A2 及A4 為單鍵時，A3 直接連接至A8 ； A3 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基；或若A2 係選自視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基及視情況經取代之C3-10 碳環基，則A3 係選自由以下組成之群：氫、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、-C≡CH及視情況經取代之2員至5員聚乙二醇； A5 係選自由以下組成之群：視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、-S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、及視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、視情況經取代之C2-8 烯基、視情況經取代之-O-C1-6 烷基、視情況經取代之-O C2-6 烯基、-OSO2 CF3 及任何天然或非天然胺基酸側鏈； A7 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3員至10員雜環基、視情況經取代之C3-10 碳環基、視情況經取代之C1-8 烷基、-S-、S(=O)-、-SO2 -、-O-、-C(=S)-、-C(=O)-、-NR-、-CH=CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-及單鍵； 當A5 及A7 為單鍵時，A6 直接連接至R8 所連接之碳； A8 為A1 之環成員且係選自由C、CH及N組成之群； R8 係選自由以下組成之群：-COR1 、-CN、-CH=CHSO2 R及-CH2 NO2 ； R1 係選自由以下組成之群：H、-OH、C1-4 鹵烷基、-COOH、-CH2 NO2 、-C(=O)NOR、-NH2 、-CONR2 R3 、-CH(CH3 )=CH2 、-CH(CF3 )NR2 R3 、-C(F)=CHCH2 CH3 、
    Figure 03_image632
    Figure 03_image634
    Figure 03_image636
    ； R14 為鹵基； 各R、R2 及R3 係獨立地選自-H、視情況經取代之C1-4 烷基、視情況經取代之C1-8 烷氧基烷基、視情況經取代之2員至5員聚乙二醇、視情況經取代之C3-7 碳環基、視情況經取代之5員至10員雜環基、視情況經取代之C6-10 芳基及視情況經取代之5員至10員雜芳基；且 R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基。
  2. 如請求項1之方法，其中A1 為視情況經取代之5員至10員雜環基，其限制條件為該5員至10員雜環基不經側氧基取代。
  3. 如請求項1或請求項2之方法，其中A1 為視情況經取代之呋喃基、視情況經取代之噻吩基、視情況經取代之酞嗪基、視情況經取代之吡咯基、視情況經取代之噁唑基、視情況經取代之噻唑基、視情況經取代之咪唑基、視情況經取代之吡唑基、視情況經取代之異噁唑基、視情況經取代之異噻唑基、視情況經取代之三唑基、視情況經取代之噻二唑基、視情況經取代之吡啶基、視情況經取代之噠嗪基、視情況經取代之嘧啶基、視情況經取代之吡嗪基、視情況經取代之三嗪基、視情況經取代之喹啉基、視情況經取代之異喹啉基、視情況經取代之苯并咪唑基、視情況經取代之苯并噁唑基、視情況經取代之苯并噻唑基、視情況經取代之吲哚基、視情況經取代之異吲哚基或視情況經取代之苯并噻吩基。
  4. 如請求項1至3中任一項之方法，其中A1 為視情況經取代之噁唑基、視情況經取代之噻唑基、視情況經取代之咪唑基、視情況經取代之吡唑基或視情況經取代之異噁唑基。
  5. 如請求項1之方法，其中A1 為視情況經取代之5員、8員或9員雜芳基。
  6. 如請求項1至5中任一項之方法，其中A2 為單鍵。
  7. 如請求項1至5中任一項之方法，其中A4 為單鍵。
  8. 如請求項1至7中任一項之方法，其中A3 係選自視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基。
  9. 如請求項8之方法，其中A3 為視情況經取代之C6-10 芳基。
  10. 如請求項9之方法，其中A3 為視情況經取代之苯基。
  11. 如請求項8之方法，其中A3 為視情況經取代之5員至10員雜芳基。
  12. 如請求項1至11中任一項之方法，其中A5 為視情況經取代之C1-8 烷基。
  13. 如請求項1至12中任一項之方法，其中A7 為單鍵。
  14. 如請求項1至13中任一項之方法，其中A6 係選自由以下組成之群：視情況經取代之C6-10 芳基、視情況經取代之5員至10員雜芳基、視情況經取代之3至10員雜環基及視情況經取代之C3-10 碳環基。
  15. 如請求項14之方法，其中A6 為視情況經取代之C6-10 芳基。
  16. 如請求項15之方法，其中A6 為視情況經取代之苯基。
  17. 如請求項14之方法，其中A6 為視情況經取代之5員至10員雜芳基。
  18. 如請求項1至17中任一項之方法，其中R8 為-COR1 且R1 係選自由-COOH、-C(=O)NOR或-CONR2 R3 組成之群。
  19. 如請求項18之方法，其中各R、R2 及R3 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基。
  20. 如請求項1至19中任一項之方法，其中R6 係獨立地選自-H及視情況經取代之C1-4 烷基。
  21. 一種治療疾病或病症之方法，該疾病或病症選自由原發性硬化性膽管炎、原發性膽道膽管炎、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪變性肝炎及肝硬化組成之群；該方法包括向有此需要之個體投與一或多種鈣蛋白酶抑制劑，其中該鈣蛋白酶抑制劑係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image638
    Figure 03_image640
    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
  22. 如請求項1至21中任一項之方法，其中該疾病或病症為非酒精性脂肪變性肝炎。
  23. 如請求項1至21中任一項之方法，其中該肝硬化係由一或多種選自由以下組成之群的病況造成：酒精性肝病、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、自體免疫性肝炎、乳糜瀉、慢性病毒肝炎、血色素沉著症、特發性門脈纖維化及威爾遜病(Wilson disease)。
  24. 如請求項1至23中任一項之方法，其中該鈣蛋白酶抑制劑係與選自由以下組成之群的一或多種額外藥劑組合投與：VAP-1抑制劑、ASBT抑制劑、雙重CCR2/5拮抗劑、抗膽汁鬱積性膽酸、FXR促效劑、FGFR1c/4促效劑、間質幹細胞(MSC)細胞療法、CCL24抑制劑及CCL11抑制劑；且其中該疾病或病症為原發性硬化性膽管炎。
  25. 如請求項1至23中任一項之方法，其中該鈣蛋白酶抑制劑係與一或多種選自由以下組成之群的額外藥劑組合投與：奧貝膽酸(obeticholic acid)、艾拉雷諾(elafibranor)、森尼維若(cenicriviroc)、司隆色替(selonsertib)、菸鹼酸受體促效劑、SGLT2抑制劑、VAP-1抑制劑、FGF21模擬劑、腺苷A3受體促效劑、mTOT調節劑、FXR促效劑、半乳糖凝集素-3抑制劑、ABCA1活化劑、SCD1抑制劑、ACC抑制劑、I型NK T細胞抑制劑、pan-PPAR促效劑、DGAT2抑制劑、PPARα促效劑、甲狀腺激素R-b促效劑、5-LO/LT抑制劑、鹽皮質激素受體拮抗劑、FGF19模擬劑、凋亡蛋白酶抑制劑、GLP-1R促效劑、SIRT1/AMP促效劑、ACC抑制劑、己酮糖激酶抑制劑、GLP-1R促效劑、ASBT抑制劑、DGAT2/CYP2E1抑制劑、TLR4拮抗劑、甲狀腺激素R-b促效劑、IFN-γ受體拮抗劑、CB1拮抗劑、FGF21配體、P2Y13受體促效劑、CCL24抑制劑、MCH受體-1拮抗劑、PPARα,δ促效劑、DPP-4抑制劑、LXR拮抗劑、GLP1R促效劑、伊紅趨素-1(eotaxin-1)抑制劑、β-克洛素(β-klotho)/FGFR1c促效劑、LOXL2抑制劑、AMPK活化劑、miR-103/107抑制劑、炎性體(inflammasome)抑制劑、CD3拮抗劑、及組織蛋白酶B抑制劑；且其中該疾病或病症為非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)。
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