CN112261939A - 粒酶b定向成像和疗法 - Google Patents

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CN112261939A
CN112261939A CN201980021902.4A CN201980021902A CN112261939A CN 112261939 A CN112261939 A CN 112261939A CN 201980021902 A CN201980021902 A CN 201980021902A CN 112261939 A CN112261939 A CN 112261939A
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G·M·比尔克尔
T·A·凯利
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Abstract

本申请提供了用于使粒酶B成像的杂环化合物。还提供了使粒酶B成像的方法、联合疗法和包含粒酶B显像剂的套装产品。

Description

粒酶B定向成像和疗法
相关申请
本申请要求2018年2月13日提交的美国临时申请号62/629,949和2018年8月29日提交的美国临时申请号62/724,433的权益，这两件专利申请的全部内容通过引用并入本申请。
技术领域
本公开涉及可用于成像技术的化合物，且更具体地涉及可用于采用医学成像(包括正电子发射体层摄影术)使粒酶B成像的化合物。
背景
粒酶B为在细胞免疫应答过程中细胞毒性淋巴细胞(CTL)通过胞吐作用释放的丝氨酸蛋白酶，并且与FAS/FASL途径一起代表两种主要机制之一，通过该机制T细胞介导癌细胞死亡。在T细胞与其靶标之间形成的免疫突触处粒酶B与成孔蛋白穿孔素一起释放。然后一部分释放的粒酶B主要通过穿孔素-孔进入癌细胞，在其中它激活多种底物，导致半胱天冬酶级联活化。
概述
本申请提供下式I-VIII的杂环化合物及其作为显像剂或疗法(二者均涉及粒酶B)的用途。
在一方面，本公开涉及式I的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000021
其中：
m为0、1或2；
n为1、2或3；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且各自C6-10芳基和HET任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4，条件是当X为CH2时，R1和R2的至少一个为-NR10R12，且R10和R12的至少一个为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET。
在一方面，本公开涉及式II的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000041
其中：
所有变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式III的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000042
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式IV的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000043
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式V的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000051
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式VI的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000052
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式VII的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000061
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一方面，本公开涉及式VIII的化合物或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体：
Figure BDA0002699152330000062
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在一些方面，本公开涉及式I-VIII任一个的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为CH2；R1和R2的至少一个为-NR10R12；R10和R12的至少一个为-C(O)C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET，其中-C(O)C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代。
在其它方面，本公开涉及式I-VIII任一个的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为O、S、SO2和NR4；R10选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代；R12选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代。优选地，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，例如顺磁性离子、x-射线显像剂、荧光团和放射性同位素。
在一些方面，顺磁性离子选自铬(III)、锰(II)、铁(III)、铁(II)、钴(II)、镍(II)、铜(II)、钕(III)、钐(III)、镱(III)、钆(III)、钒(II)、铽(III)、镝(III)、钬(III)和铒(III)。
在一些方面，射线显像剂选自镧(III)、金(III)、铅(II)、铋(III)和碘化x-射线显像剂。
在一些方面，荧光团选自Alexa 350、Alexa 430、AMCA、BODIPY630/650、BODIPY650/665、BODIPY-FL、BODPY-R6G、13BODLPY-TMR、BODLPY-TRX、级联蓝、Cy3、Cy5，6-FAM、异硫氰酸荧光素、HEX、6-JOE、俄勒冈绿488、俄勒冈绿500、俄勒冈绿514、量子点、太平洋蓝、REG、若丹明绿、若丹明红、肾造影剂、ROX、TAMRA、TET、四甲基若丹明、德克萨斯红、AF 350、405、AF532、AF488、AF647、AF680、AF750、Cy5、Cy5.5、Cy7、吲哚花青绿(ICG)、绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)和dsRED。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含1、2或3个独立选择的荧光团。
在一些方面，放射性同位素选自3H、11C、14C、18F、32P、35S、36Cl、51Cr、52Fe、57Co、58Co、59Fe、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、75Se、76Br、77Br、89Zr、90Y、99mTc、111In、123I、124I、125I、131I、152Eu、153Sm、166Ho、177Lu，186Re、188Re、201Tl、203Pb、210At、211At、212Bi、213Bi和225Ac。
在优选的方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含18F。
在一些方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，其选自PET显像剂、SPECT显像剂、和计算机体层摄影显像剂。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个为PET或SPECT显像剂。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个为包含放射性同位素的PET或SPECT显像剂，所述放射性同位素选自3H、11C、14C、18F、35S、52Fe、58Co、64Cu、68Ga、76Br、77Br、89Zr、111In、123I、124I、125I、131I、186Re、188Re、201Tl。
在一个优选的方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含含有18F的PET显像剂。
在一些方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个还包含螯合剂。
在一些实施方案中，所述的螯合剂选自1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-4,7-二乙酸(NODA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-1-戊二酸-4,7-二乙酸(NODAGA)、乙二铵四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、环己基-1,2-二胺四乙酸(CDTA)、乙二醇-O,O'-双(2-氨基乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、N,N-双(羟基苄基)-乙二胺-N,N'-二乙酸(HBED)、三乙烯四胺羟化四甲胺六乙酸(TTHA)、羟基乙二胺三乙酸(HEDTA)和1,4,8,11-四氮杂环十四烷-N,N',N",N"'-四乙酸(TETA)、1,4,7,10-四氮杂-1,4,7,10-四-(2-氨基甲酰基甲基)-环十二烷(TCMC)和去铁胺B(DFO)。在一些实施方案中，所述的螯合剂选自1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-4,7-二乙酸(NODA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)和1,4,7-三氮杂环壬烷-1-戊二酸-4,7-二乙酸(NODAGA)。在一些实施方案中，所述的螯合剂为1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)。
在一些方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，其包含顺磁性离子、x-射线显像剂、荧光团和放射性同位素的一种或多种，且式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐结合粒酶B。
在一些方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含放射性同位素，且式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐结合粒酶B。
在优选的方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含18F，且式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐结合粒酶B。
在一方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐结合粒酶B。
在另一方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为粒酶B的不可逆结合剂。
在一些方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为粒酶B的抑制剂。
本申请还提供了使受试者的粒酶B成像的方法，它包括：
i)向受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，并且
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此使受试者中的粒酶B显像。
本申请还提供了使细胞或组织样品中的免疫应答成像的方法，它包括：
i)使细胞或组织样品接触有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，并且
ii)用适合的成像技术给细胞或组织样品成像，由此使细胞或组织样品中的免疫应答显像。
本申请还提供了使受试者中的免疫应答成像的方法，它包括：
i)向受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，并且
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此使受试者中的免疫应答显像。
本申请还提供了在受试者中监测疾病治疗的方法，它包括：
i)向受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，并且
ii)用适合的成像技术使受试者成像。
本申请还提供了在受试者的治疗中监测免疫应答的方法，它包括：
i)向受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，并且
ii)用适合的成像技术使受试者成像。
在一些实施方案中，所述的方法还包括施用治疗剂，典型地在步骤i)之前。在一些实施方案中，施用治疗剂诱导细胞或组织样品或受试者的免疫应答。
在一些实施方案中，所述的治疗剂选自抗炎药、类固醇类、免疫治疗剂、化疗剂和治疗性抗体。在一些实施方案中，所述的治疗剂为化疗剂。
在一些实施方案中，所述的疾病选自自身免疫疾病、炎性障碍、皮肤病、癌症和心血管疾病。在一些实施方案中，所述的疾病为癌症。在一些实施方案中，所述的癌症选自脑癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、肺癌、淋巴瘤、黑素瘤、膀胱癌、肾细胞癌、发性骨髓瘤、胰腺癌和前列腺癌。在一些实施方案中，所述的癌症为结肠癌。在一些实施方案中，所述的癌症为黑素瘤。
在一些实施方案中，所述的疾病选自移植物抗宿主病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、桥本甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、I型糖尿病、眼色素层炎、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓炎、肾小球肾炎、风湿热、感染后血管球性肾炎、银屑病、异位性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、脉管炎、红斑、皮肤嗜酸性细胞增多症、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与贝切特病相关的眼色素层炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦溃疡、巩膜炎、格雷夫斯眼病、伏格特-小柳-原田三氏综合征、结节病、花粉过敏、可逆阻塞性气道疾病、支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、慢性或难治性哮喘、迟发性哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、局部缺血和血栓形成导致的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠疾病、坏死性小肠结肠炎、与热烧伤相关的肠损害、腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增多症、克罗恩病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、古德帕斯彻氏综合征、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、多发性肌炎、格-巴二氏综合征、梅尼埃病、多神经炎、多神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯红细胞再生障碍、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼细胞贫血、红细胞发生不能、骨质疏松症、肉瘤样病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肌炎、寻常性白斑病、寻常鳞癣、光敏性敏感性、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥样硬化、主动脉炎综合征、结节性多发性动脉炎、心肌病、硬皮病、韦格纳坏死性肉芽肿、干燥综合征、肥胖病、嗜曙红细胞筋膜炎、牙龈、牙周组织、牙槽骨、牙骨质损害、肾小球肾炎、男性型秃发、通过防止拔毛的老年性脱发、通过提供毛发发生和/或促进毛发发生和毛发生长的老年性脱发、肌营养不良症、脓皮病、赛杂瑞综合征、阿狄森病、器官的缺血性再灌注损伤、移植病、缺血性疾病、内毒素性休克、假膜性结肠炎、因药物或放射导致的结肠炎、缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、因肺-氧或药物导致的毒素病、肺癌、肺气肿、白内障、铁尘肺、色素性视网膜炎、老年性黄斑变性、玻璃体瘢痕、角膜碱烧伤、多形红斑皮炎、线性IgA大疱性皮炎和充血性皮炎、牙龈炎、牙周炎、脓毒症、胰腺炎、衰老、癌发生、癌转移和低气压病、组胺或白三烯-C4释放伴发病、贝切特病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬变、硬化性胆管炎、部分肝切除、急性肝坏死、因毒素导致的坏死、病毒性肝炎、休克、缺氧症、B-病毒性肝炎、非甲/非乙型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝功能衰竭、暴发性肝功能衰竭、迟发性肝功能衰竭、慢加急性肝衰竭、巨细胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、老年性痴呆、创伤、慢性细菌感染、淋巴样来源的恶性肿瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞淋巴瘤。在一些实施方案中，所述的疾病选自系统性红斑性狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠疾病、胆汁性肝硬化、眼色素层炎、多发性硬化、克罗恩病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、结节病、银屑病、自身免疫性肌炎、韦格纳肉芽肿病、鱼鳞病、格雷夫斯眼病、哮喘、硬皮病和干燥综合征。在一些实施方案中，所述的疾病选自骨髓排斥、器官移植排斥和移植物抗宿主病。
详细描述
近年来，癌症免疫疗法代表了癌症疗法的重大进步。定向于免疫检查点的抗体，例如程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)已获批准，对某些患者有积极的结果。免疫肿瘤学领域的研究仍在继续，其中策略包括研发中的CAR-T细胞、疫苗、小分子和抗体。尽管有这些疗法的希望，但它们不是万能药。这些免疫疗法可能会伴有严重的不良反应，它们代价高昂，并且应答率典型地为20-50％，这意味着大多数患者对疗法无应答。此外，使用常规方法确定单个患者对治疗的反应可能具有挑战性，因为这种反应通常与免疫细胞浸润有关，这种浸润可以使响应的肿瘤在使用解剖学成像(例如CT、MRI)时显然增长，并且显示使用FDG-PET成像的亲和力增强，这归因于代谢活跃的免疫细胞的流入。考虑到当前成像技术的局限性，针对癌症免疫疗法的临床研究典型地将总体生存期作为其研究终点，而不是无进展生存期。
粒酶B为细胞毒性T细胞活性的下游标志物，可以用作评估癌症免疫疗法功效的新型生物标志物。不仅对于CTL存在或不存在，而且作为也整合CTL活性的测度的活跃T细胞释放的效应蛋白，可以评估肿瘤中粒酶B的表达，从而解释评估使得CTL存在的评价难以完成的T细胞耗尽的问题。因此，本申请提供了新颖的粒酶B特异性显像剂。
化合物
本公开涉及结合粒酶B并且可以用于诊断和治疗目的(特别是作为显像剂)的化合物。所述化合物具有I-VIII或是其药学上可接受的盐。
式I的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000131
其中：
m为0、1或2；
n为1、2或3；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4，条件是当X为CH2时，R1和R2的至少一个为-NR10R12，且R10和R12的至少一个为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET。
式II的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000151
其中：
所有变量如式(I)中所定义。
式III的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000161
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
式IV的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000162
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
式V的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000163
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
式VI的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000171
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
式VII的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000172
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
式VIII的化合物或其药学上可接受的盐如下：
Figure BDA0002699152330000181
其中：
n为1或2，且所有其他变量如式(I)中所定义。
在式I-VIII的一些实施方案中，m为0，且n为0；m为0，且n为1、2或3；m为1，且n为1、2或3；m为2，且n为1、2或3；m为1或2，且n为0；m为1或2，且n为2；或m为1或2，且n为3。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-N(R10 R12)，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、苯基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且苯基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自C1-6烷基、C3-6环烷基、苯基、吡啶基、2-氧代吡咯烷和-NR10R12，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个基团取代，所述基团独立地选自卤素和羟基；以及苯基、吡啶基和2-氧代吡咯烷，其任选地被1、2或3个基团取代，所述基团独立地选自卤素、羟基和C1-4烷基，其任选地被1、2或3个卤素基团取代。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自C1-6烷基、C3-6环烷基、苯基、吡啶基、2-氧代吡咯烷和-N(R10 R12)，其中C1-6烷基和C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个基团取代，所述基团独立地选自卤素和羟基；以及苯基、吡啶基和2-氧代吡咯烷，其任选地被1、2或3个基团取代，所述基团独立地选自卤素、羟基和C1-4烷基，其任选地被1、2或3个卤素基团取代。
在一些实施方案中，R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
在一些实施方案中，R3选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R3为H。在一些实施方案中，R3为C1-4烷基。在一些实施方案中，R3为C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R4各自选自H、卤素、C1-6烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R4各自独立地为H或C1-4烷基。在一些实施方案中，R4各自为H。
在一些实施方案中，R5各自选自H、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R5各自独立地为H或C1-4烷基。在一些实施方案中，R5各自为H。
在一些实施方案中，R6各自选自H、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R6各自独立地为H或C1-4烷基。在一些实施方案中，R6各自为H。
在一些实施方案中，R7各自选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R7为H。在一些实施方案中，R7为C1-4烷基。在一些实施方案中，R7为C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R8’、R8各自选自H、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，在一些实施方案中，R8’、R8各自独立地为H或C1-4烷基。在一些实施方案中，R8’、R8各自为H。
在一些实施方案中，R3、R4、R5、R6、R7、R8’和R8各自为H。
在一些实施方案中，R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET基团。在一些实施方案中，R9为未取代的HET基团。在一些实施方案中，R9为HET基团，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，R9选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、异噁唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-三唑基和四唑基。在一些实施方案中，R9选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、异噁唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-三唑基和四唑基，它们各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R10选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基、任选地被1、2或3个卤素基团取代的C1-4烷基。优选地，C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代。
在一些实施方案中，R10选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基、任选地被N(R11)2取代的-C(O)C1-4烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、苯并噻吩基和苯基，所述苯基任选地被1、2或3个氧代基团取代。
在一些实施方案中，R10选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基，且其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氧代基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代，并且任选地被1、2或3个氧代基团取代。在具体的实施方案中，R10为-C(O)CH2-O-CH2-CH2-F。
在一些实施方案中，R10为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和1、2或3个氧代基团。在这样的实施方案中，HET优选地为5-10元杂环烷基或5-10元杂芳基，其任选如本申请中所述被取代。
在一些实施方案中，R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。
在一些实施方案中，R12选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基、任选地被1、2或3个卤素基团取代的C1-4烷基。优选地，C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代。
在一些实施方案中，R12选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基、任选地被N(R11)2取代的-C(O)C1-4烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、苯并噻吩基和苯基，所述苯基任选地被1、2或3个氧代基团取代。
在一些实施方案中，R12选自氢、C1-4烷基和-C(O)C1-4烷基；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基，且其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氧代基团取代。优选地，-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代，并且任选地被1、2或3个氧代基团取代。在具体的实施方案中，R12为-C(O)CH2-O-CH2-CH2-F。
在一些实施方案中，R12为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团。在这样的实施方案中，HET优选地为5-10元杂环烷基或5-10元杂芳基，其任选如本申请中所述被取代。
在一些实施方案中，R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET。在一些实施方案中，R13、R13’和R13”各自为H。
在一些实施方案中，X为CH2；R1和R2的至少一个为-NR10R12；且R10和R12的至少一个为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET。
在一些实施方案中，HET各自为独立选择的单环5-6元杂芳基、8-10元双环杂芳基、单环4-6元杂环烷基或双环8-10元杂环烷基，它们各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团。
在一些实施方案中，HET各自独立地选自苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、噁唑基、吡嗪基、吡唑基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、四唑基、1,4-二噁烷基、六氢吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，它们各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团。
优选地，在式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐中，R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。如果期望，R1、R2、R5和R9的两个、三个或全部可以包含显像剂。
适合的显像剂选自顺磁性离子、x-射线显像剂、荧光团和放射性同位素。
适合的顺磁性离子包括铬(III)、锰(II)、铁(III)、铁(II)、钴(II)、镍(II)、铜(II)、钕(III)、钐(III)、镱(III)、钆(III)、钒(II)、铽(III)、镝(III)、钬(III)和铒(III)。顺磁性离子直接或间接地(例如通过螯合剂)结合至本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐。
适合的x-射线显像剂包括镧(III)、金(III)、铅(II)、铋(III)和碘化x-射线显像剂(例如泛影酸，碘克沙酸盐，甲泛影酸盐，碘帕醇，碘海醇，碘昔兰，碘普罗胺，碘克沙醇和碘佛钾)。
适合的荧光团包括Alexa 350、Alexa 430、AMCA、BODIPY 630/650、BODIPY 650/665、BODIPY-FL、BODPY-R6G、13BODLPY-TMR、BODLPY-TRX、级联蓝、Cy3、Cy5，6-FAM、异硫氰酸荧光素、HEX、6-JOE、俄勒冈绿488、俄勒冈绿500、俄勒冈绿514、量子点、太平洋蓝、REG、若丹明绿、若丹明红、肾造影剂、ROX、TAMRA、TET、四甲基若丹明、德克萨斯红、AF 350、405、AF532、AF488、AF647、AF680、AF750、Cy5、Cy5.5、Cy7、吲哚花青绿(ICG)、绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)和dsRED。
本申请中提供的放射性同位素可用作本申请中提供的方法的一种或多种中的显像剂。此外，本申请中提供的放射性同位素还可以用于一种或多种治疗应用，例如，当以治疗有效量施用于受试者时。例如，当以低浓度(例如5mCi)施用于受试者时，131I和64Cu可以用作显像剂(例如作为无毒性和/或非治疗性放射性同位素)，并且当以较高浓度施用于受试者时，还可以用作治疗剂(即作为毒性放射性同位素和/或治疗性放射性同位素)。
适合的放射性同位素包括3H、11C、14C、18F、32P、35S、36Cl、51Cr、52Fe、57Co、58Co、59Fe、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、75Se、76Br、77Br、89Zr、90Y、99mTc、111In、123I、124I、125I、131I、152Eu、153Sm、166Ho、177Lu、186Re、188Re、201Tl、203Pb、210At、211At、212BI、213Bi和225Ac。放射性同位素直接或间接(例如通过螯合剂)结合至本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐。
在本公开的优选方面，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含18F。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂，其选自正电子发射体层摄影术(PET)显像剂、单光子发射计算体层摄影(SPECT)显像剂和计算机体层摄影显像剂。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET或SPECT显像剂。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET显像剂。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为SPECT显像剂。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为计算机体层摄影显像剂。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为放射性同位素计算机体层摄影显像剂。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET或SPECT显像剂，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含一种或多种放射性同位素，其选自3H、11C、14C、18F、32P、35S、52Fe、58Co、64Cu、68Ga、76Br、77Br、89Zr、111In、123I、124I、125I、131I、186Re、188Re和201Tl。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET或SPECT显像剂，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含1、2或3个放射性同位素，其选自3H、11C、14C、18F、32P、35S、52Fe、58Co、64Cu、68Ga、76Br、77Br、89Zr、111In、123I、124I、125I、131I、186Re、188Re和201Tl。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET或SPECT显像剂，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含一种放射性同位素，其选自3H、11C、14C、18F、32P、35S、52Fe、58Co、64Cu、68Ga、76Br、77Br、89Zr、111In、123I、124I、125I、131I、186Re、188Re和201Tl。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET或SPECT显像剂，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含68Ga。
在一个优选的实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐为PET显像剂，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含18F。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个还包含一种或多种螯合剂。
适合的螯合剂包括，但不限于1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)，1,4,7-三氮杂环壬烷-4,7-二乙酸(NODA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-1-戊二酸-4,7-二乙酸(NODAGA)、乙二铵四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、环己基-1,2-二胺四乙酸(CDTA)、乙二醇-O,O'-双(2-氨基乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、N,N-双(羟基苄基)-乙二胺-N,N'-二乙酸(HBED)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、羟基乙二胺三乙酸(HEDTA)和1,4,8,11-四氮杂环十四烷-N,N',N",N"'-四乙酸(TETA)，1,4,7,10-四氮杂-1,4,7,10-四-(2-氨基甲酰基甲基)-环十二烷(TCMC)和去铁胺B(DFO)。在一些实施方案中，所述的螯合剂选自1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-4,7-二乙酸(NODA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-1-戊二酸-4,7-二乙酸(NODAGA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、环己基-1,2-二胺四乙酸(CDTA)、乙二醇-O,O'-双(2-氨基乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、N,N-双(羟基苄基)-乙二胺-N,N'-二乙酸(HBED)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、羟基乙二胺三乙酸(HEDTA)和1,4,8,11-四氮杂环十四烷-N,N',N",N"'-四乙酸(TETA)、1,4,7,10-四氮杂-1,4,7,10-四-(2-氨基甲酰基甲基)-环十二烷(TCMC)和去铁胺B(DFO)。在一些实施方案中，所述的螯合剂选自1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-4,7-二乙酸(NODA)、1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)和1,4,7-三氮杂环壬烷-1-戊二酸-4,7-二乙酸(NODAGA)。在一些实施方案中，所述的螯合剂为1,4,7-三氮杂环壬烷三乙酸(NOTA)。
合成
正如可以理解的，本申请中提供的化合物，包括其盐，可以采用已知的有机合成技术制备，并且可以根据许多可能的合成路线任一路线及进行合成。
本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐可以通过如下方案中所述的路线制备。用于这类合成的适合的保护基可以在上述文本以及McOmie，ProtectiveGroups in Organic Chemistry，(1973)：98中找到。
如本申请其它部分中所述，另外的反应可能是必要的，以便形成分子内键限制构型。
方案I：
Figure BDA0002699152330000261
可以按照一般方案I合成本公开的一些化合物，其中化合物1可以与适当被保护的氨基酸偶联，然后在吲哚氮上环化以形成化合物2。然后可以将化合物2的酯水解，然后形成酰胺以形成化合物3。化合物3的Boc脱保护后，可以使用适当的酸形成酰胺键，形成最终化合物4。
方案II：
Figure BDA0002699152330000271
本公开的其他化合物可以按照一般方案II合成，其中化合物5可以与适当的胺偶联以形成化合物6。然后可以将化合物6与适当的被保护的氨基酸偶联，然后将其环化以形成化合物7。可以先对化合物7脱保护，再与适当的酸偶联，得到最终化合物8。
显像剂
许多适合的显像剂是本领域中已知的(例如参见美国专利5,021,236；4,938,948；以及4,472,509，其公开内容通过引用整体并入本申请)。本申请中提供的放射性标记的式I-VIII化合物或其药学上可接受的盐可以根据本领域中熟知的方法制备。作为实例，本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐可以通过本申请中提供的双官能螯合剂(例如NOTA、NODA、DOTA或NODAGA)或其类似衍生物的放射性金属化而用68Ga标记。
用于将放射性同位素掺入有机化合物的合成方法是本领域中熟知的，并且本领域普通技术人员将容易认识到适用于本申请中提供的化合物的其他方法。
本领域技术人员将认识到，所述的方法并非可以合成本申请中提供的化合物的排他性方式，并且有广泛多种有机合成反应可利用，用于潜在用于合成本申请中提供的化合物。本领域技术人员知晓如何选择和实施适合的合成路线。可以通过参考文献鉴定原料、中间体和产物的适合合成方法，包括参考来源，例如：Advances in HeterocyclicChemistry，第1-107卷(Elsevier，1963-2012)；Journal of Heterocyclic Chemistry第1-49卷(Journal of Heterocyclic Chemistry，1964-2012)；Carreira,等人(Ed.)Scienceof Synthesis，第1-48卷(2001-2010)和Knowledge Updates KU2010/1-4；2011/1-4；2012/1-2(Thieme，2001-2012)；Katritzky,等人(Ed.)Comprehensive Organic FunctionalGroup Transformations，(Pergamon Press，1996)；Katritzky等人(Ed.)；ComprehensiveOrganic Functional Group Transformations II(Elsevier，第2版，2004)；Katritzky等人(Ed.)，Comprehensive Heterocyclic Chemistry(Pergamon Press，1984)；Katritzky等人，Comprehensive Heterocyclic Chemistry II、(Pergamon Press，1996)；Smith等人，March's Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure，第6版(Wiley，2007)；Trost等人(Ed.)，Comprehensive Organic Synthesi s(Pergamon Press，1991)。
用于制备本申请中所述的化合物的反应可以在适合的溶剂中进行，有机合成领域的技术人员可以容易地选择适合的溶剂。适合的溶剂在进行反应的温度下(例如，温度范围可以从溶剂的冷冻温度到溶剂的沸腾温度)与原料(反应物)、中间体或产物基本不发生反应。给定的反应可以在一种溶剂或超过一种溶剂的混合物中进行。根据特定的反应步骤的不同，本领域技术人员可以选择用于特定反应步骤的适合溶剂。
本申请中所述化合物的制备可涉及各种化学基团的保护和脱保护。本领域技术人员可以容易地确定是否需要保护和脱保护以及选择适合的保护基。保护基的化学成分可以在例如T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Group in Organic Synthesis，第3版，Wiley&Sons，Inc.，New York(1999)中找到。
可以根据本领域已知的任何适合的方法来监测反应。例如，可以通过光谱法，例如核磁共振光谱法(例如1H或13C)，红外光谱法，分光光度法(例如UV-可见)，质谱法或色谱法(例如高效液相色谱法(HPLC))，液相色谱-质谱(LCMS)或薄层色谱(TLC)。化合物可以由本领域技术人员通过多种方法纯化，包括高效液相色谱法(HPLC)和正相二氧化硅色谱法。
定义
在本说明书的不同地方，描述了二价连接取代基。特别意图是各个二价连接取代基包括该连接取代基的正向和反向形式。例如，-NR(CR’R”)n-包括-NR(CR’R”)n-和-(CR’R”)nNR-。如果该结构明确需要连接基，则对该基团列出的马库什变量应理解为连接基。
术语“n元”，其中n为整数，典型地描述成环原子数为n的部分中的成环原子数。例如，哌啶基为6元杂环烷基环的实例，吡咯基为5元杂芳基环的实例，吡啶基为6元杂芳基环的实例，且1,2,3,4-四氢萘为一个10元环烷基的实例。
在通篇定义中，术语“Cn-m”表示包括端点的范围，其中n和m为整数，且表示碳数。实例包括C1-4、C1-6等。
如本申请中所用，术语“Cn-m烷基”单独使用或与其他术语联用是指饱和烃基，其可以为直链或支链的，具有n至m个碳。烷基部分的实例包括，但不限于化学基团，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基；高级同系物，例如2-甲基-1-丁基、正戊基、3-戊基、正己基、1,2,2-三甲基丙基等。在一些实施方案中，烷基包含1-6个碳原子，1-4个碳原子，1-3个碳原子，或1-2个碳原子。在一些实施方案中，C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代。优选地，C1-4烷基任选地被1、2或3个氟基团取代。
如本申请中所用，术语“Cn-m烷氧基”单独使用或与其他术语联用是指式-O-烷基的基团，其中烷基具有n至m个碳。实例烷氧基基团包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正-丙氧基和异丙氧基)、叔丁氧基等。在一些实施方案中，烷基具有1-6、1-4或1-3个碳原子。
如本申请中所用，术语“氨基”是指式-NH2的基团。
如本申请中所用，术语“芳基”单独地使用或与其他术语联用是指芳族烃基，其可以为单环或多环(例如具有2、3或4个稠合环)。术语“Cn-m芳基”是指具有n至m个环碳原子的芳基。芳基基团包括，例如苯基、萘基、蒽基、菲基、茚满基、茚基等。在一些实施方案中，芳基基团具有6至约20个碳原子，6至约15个碳原子或6至约10个碳原子。在一些实施方案中，芳基为取代或未取代的苯基。
如本申请中所用，“环烷基”是指非芳族环烃，包括环状烷基和/或烯基基团。环烷基基团可以包括单环或多环(例如具有2、3或4个稠合环)基团和螺环。环烷基基团可以具有3、4、5、6、7、8、9或10个成环碳(C3-10)。环烷基的成环碳原子可以任选地被氧代或硫代(例如C(O)或C(S))取代。环烷基基团还包括亚环烷基。实例环烷基基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己二烯基、环庚三烯基、降冰片基、降蒎烷基、降蒈烷基等。在一些实施方案中，环烷基为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环戊基或金刚烷基。在一些实施方案中，环烷基具有6-10个成环碳原子。在一些实施方案中，环烷基为金刚烷基。环烷基的定义中还包括具有一个或多个芳族环的部分，所述芳族环与环烷基环稠合(即与之共有键)，例如，环戊烷、环己烷等的苯并或噻吩衍生物。包含稠合芳族环的环烷基可以通过任意成环原子连接，包括稠合芳族环的成环原子。
如本申请中所用，“卤代”或“卤素”是指F、Cl、Br或I或其同位素。在一些实施方案中，卤代或卤素为F、Cl或Br或其同位素。优选地，卤代或卤素为F或18F。
如本申请中所用，术语“Cn-m卤代烷基”单独地使用或与其他术语联用是指具有一个卤原子至2s+1个卤原子(它们可以相同或不同)的烷基，其中“s”为烷基上的碳原子数，其中烷基具有n至m个碳原子。在一些实施方案中，卤代烷基仅被氟化。在一些实施方案中，烷基具有1-6、1-4或1-3个碳原子。
如本申请中所用，“HET”是指杂芳基和杂环烷基。
如本申请中所用，“杂芳基”是指单环或多环芳族杂环，其具有至少一个选自硫、氧和氮的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有1、2、3或4个选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基部分上的任意成环N可以为N-氧化物。在一些实施方案中，杂芳基具有5-10个环原子和1、2、3或4个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有5-6个环原子和1或2个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基为5元或6元杂芳基环。5元杂芳基环为具有5个环原子的环的杂芳基，其中一个或多个(例如1、2或3个)环原子独立地选自N、O和S。示例性的5元环杂芳基为噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,3,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。6元杂芳基环为具有6个环原子的杂芳基，其中一个或多个(例如1、2或3个)环原子独立地选自N、O和S。示例性的6元环杂芳基为吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基和哒嗪基。
如本申请中所用，“杂环烷基”是指非芳族单环或多环杂环，其具有一个或多个选自O、N或S的成环杂原子。杂环烷基中包括单环4元、5元、6元和7元杂环烷基基团。杂环烷基基团还可以包括螺环。实例杂环烷基基团包括吡咯烷-2-酮、1,3-异噁唑烷-2-酮、吡喃基、四氢吡喃、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吗啉代、硫代吗啉代、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吡咯烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、氮杂环庚基、苯并氮杂
Figure BDA0002699152330000311
等。杂环烷基的成环碳原子和杂原子可以任选地被氧代或硫代取代(例如C(O)、S(O)、C(S)或S(O)2等)。杂环烷基可以通过成环碳原子或成环杂原子连接。在一些实施方案中，杂环烷基包含0-3个双键。在一些实施方案中，杂环烷基包含0-2个双键。杂环烷基的定义中还包括具有一个或多个与环烷基环稠合的(即与之共有键)芳族环的部分，例如哌啶、吗啉、吖庚因等的苯并或噻吩衍生物。包含稠合芳族环的杂环烷基可以通过任意的成环原子连接，包括稠合芳族环的成环原子。在一些实施方案中，杂环烷基具有4-10、4-7或4-6个环原子与1或2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子，并且具有一个或多个氧化的环成员。
如本申请中所用，术语“羟基”是指式-OH的基团。
如本申请中所用，措词“任选取代的”是指未取代或取代的。如本申请中所用，术语“取代的”是指氢原子被除去且被取代基替代。应当理解，指定原子上的取代受到化合价限制。
如本申请中所用，术语“氧代”是指双键合的氧(即＝O)。
在某些位置上，定义或实施方案是指特定的环(例如氮杂环丁烷环，萘环等)。除非另有说明，否则这些环可以连接至任何环成员，只要不超过原子的化合价即可。例如，氮杂环丁烷环可以连接在环的任何位置，而吡啶-3-基环则连接在3-位。
本申请中所用的术语“化合物”是指包括式I-VIII所示的所有立体异构体、几何异构体、互变体和同位素。除非另有说明，否则本申请通过名称或结构鉴定为一种特定的互变异构形式的化合物旨在包括其他互变异构形式。
本申请中提供的化合物还包括互变异构形式。互变异构形式由单键与相邻双键的交换以及质子的伴随迁移引起。互变异构形式包括质子变质互变异构体，其为具有相同实验式和总电荷的异构体质子化状态。实例质变互变异构体包括酮-烯醇对，酰胺-酰亚胺酸对，内酰胺-内酰胺对，烯胺-亚胺对和环状形式，其中质子可占据杂环系统的两个或多个位置，例如1H-和3H-咪唑，1H-、2H-和4H-1,2,4-三唑，1H-和2H-异吲哚和1H-和2H-吡唑。互变异构形式可以处于平衡或通过适当的取代而空间锁定成一种形式。
除非特别定义，否则本申请中提供的化合物还可以包括在中间体或最终化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括原子数相同但质量数不同的那些原子。除非另有说明，否则当一个原子被指定为同位素或放射性同位素(例如氘、[11C]、[18F])时，该原子应理解为构成该同位素或放射性同位素的量至少大于该同位素或放射性同位素的自然丰度。例如，当一个原子被指定为“D”或“氘”时，该位置应理解为氘的丰度比氘的自然丰度(为0.015％)大至少3000倍(即至少掺入45％的氘)。
所有式I-VIII化合物或其药学上可接受的盐可以与其他物质例如水和溶剂(例如水合物和溶剂化物)一起存在或可以将其分离。
在一些实施方案中，化合物的制备可以包括添加酸或碱以影响例如所需反应或盐形式(例如酸加成盐)形成的催化。
实例酸可以为无机酸或有机酸，并且包括，但不限于强酸和弱酸。某些实例的酸包括盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，对甲苯磺酸，4-硝基苯甲酸，甲磺酸，苯磺酸，三氟乙酸和硝酸。一些弱酸包括，但不限于乙酸，丙酸，丁酸，苯甲酸，酒石酸，戊酸，己酸，庚酸，辛酸，壬酸和癸酸。
实例碱包括氢氧化锂，氢氧化钠，氢氧化钾，碳酸锂，碳酸钠，碳酸钾和碳酸氢钠。一些实例强碱包括，但不限于氢氧化物，醇盐，金属酰胺，金属氢化物，金属二烷基酰胺和芳基胺，其中；醇盐包括甲基、乙基和叔丁基氧化物的锂、钠和钾盐；金属酰胺包括氨基钠、氨基钾和氨基锂；金属氢化物包括氢化钠、氢化钾和氢化锂；并且金属二烷基酰胺包括，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、三甲基甲硅烷基和环己基取代的酰胺的锂、钠和钾盐。
在一些实施方案中，本申请中提供的化合物或其盐基本上是分离的。所谓“基本上分离”是指该化合物与形成或检测到该化合物的环境至少部分分离或基本上分离。部分分离可以包括例如富含本申请中提供的化合物的组合物。基本上分离可以包含含有至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、至少约97％或至少约99％重量的本申请中提供的化合物或其盐的组合物。分离化合物及其盐的方法是本领域的常规方法。
如本申请中所用，表述“环境温度”和“室温”或“rt”在本领域中是可以理解的，并且通常指的是例如反应温度的温度，该温度为约反应所处的室内的温度。例如，反应在约20℃至约30℃的温度下进行。
本申请中所用的措词“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适合与人和动物的组织接触而使用而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症、与合理的获益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
本申请还包括本申请中所述的化合物的药学上可接受的盐。如本申请中所用，“药学可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有的酸或碱部分转化为其盐形式而被修饰。药学上可接受的盐的例子包括，但不限于碱性残基(例如胺)的无机或有机酸盐；酸性残基例如羧酸的碱金属或有机盐等。本申请的药学上可接受的盐包括例如由无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐。本申请的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法由包含碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，可以通过将这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适合的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应制备这类盐；通常，优选非水介质，例如醚，乙酸乙酯，醇(例如甲醇，乙醇，异丙醇或丁醇)或乙腈(MeCN)。适合的盐的清单在Remington's PharmaceuticalSciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1985，p.1418和Journal ofPharmaceutical Science，66，2(1977)中找到。用于制备盐形式的常规方法描述在例如Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection and Use，Wiley-VCH，2002中。
使用方法
本申请还提供了使用式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐使粒酶B成像的方法。
在一些实施方案中，该成像方法在细胞、组织、细胞样品、组织样品或受试者中进行。
如本申请中所用，术语“受试者”是指任意的动物，包括哺乳动物和无脊椎动物。例如小鼠、大鼠、其它啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马、灵长类、鱼和人。在一些实施方案中，受试者为人。在一些实施方案中，受试者为小鼠。在一些实施方案中，受试者为鱼(例如斑马鱼)。
在一些实施方案中，该方法包括给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该方法为体外方法。在一些实施方案中，该方法为体内方法。
本申请还提供了使细胞或组织中的粒酶B成像的方法，它包括：
i)使细胞或组织接触有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使细胞或组织成像，由此使细胞或组织中的粒酶B显像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了使细胞或组织样品中的粒酶B成像的方法，它包括：
i)使细胞样品或组织样品接触有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使细胞样品或组织样品成像，由此使细胞样品或组织样品中的粒酶B显像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了使受试者的粒酶B成像的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，并且
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此使受试者中的粒酶B显像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了使细胞或组织样品中的免疫应答成像的方法，它包括：
i)使细胞或组织样品接触有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使细胞或组织样品成像，由此使细胞或组织样品中的免疫应答显像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了使受试者中的免疫应答成像的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此使受试者中的免疫反应显像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了监测受试者的疾病治疗的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使受试者成像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
本申请还提供了监测对受试者的疾病治疗中免疫应答的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，和
ii)用适合的成像技术使受试者成像，其中：
式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
在一些实施方案中，本申请中提供的方法还包括在成像前等待足以允许式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐在与疾病相关的细胞或组织部位(例如受试者中的细胞或组织部位)蓄积的时间。
在一些实施方案中，本申请中所述的方法还包括在成像前等待足以使式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐在与疾病相关的细胞或组织部位(例如受试者中的细胞或组织部位)上结合粒酶B的时间。
在一些实施方案中，足够的时间为约30秒至约24小时，例如，约30秒至约24小时，约30秒至约12小时，约30秒至约6小时，约30秒至约2小时，约30秒至约1小时，约30秒至约30分钟，约30秒至约10分钟，约10分钟至约24小时，约10分钟至约12小时，约10分钟至约6小时，约10分钟至约2小时，约10分钟至约1小时，约10分钟至约30分钟，约30分钟至约24小时，约30分钟至约12小时，约30分钟至约6小时，约30分钟至约2小时，约30分钟至约1小时，约1小时至约24小时，约1小时至约12小时，约1小时至约6小时，约1小时至约2小时，约2小时至约24小时，约2小时至约12小时，约2小时至约6小时，约6小时至约24小时，约6小时至约12小时或约12小时至约24小时。
在一些实施方案中，适合的成像技术为非侵入式成像技术。在一些实施方案中，适合的成像技术为最小侵入性成像技术。如本申请中所用，术语“最小侵入性成像技术”包含使用应用内部探针或通过注射器注射式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐或放射性示踪剂的成像技术。
实例成像技术包括，但不限于荧光团成像、x-射线成像、磁共振成像(MRI)、超声成像、光声成像、温度记录图成像、DSA体层摄影数字减影血管造影成像、超声心动图成像、正电子发射体层摄影(PET)成像、使用计算机体层摄影(CT)成像的PET、PET-MRI、单光子发射计算体层摄影(SPECT)和超声成像。在一些实施方案中，适合的成像技术选自PET成像、PET-CT、PET-MRI和SPECT。
在一些实施方案中，适合的成像技术选自正电子发射体层摄影(PET)成像、使用计算机体层摄影成像的正电子发射体层摄影术(PET)和使用磁共振成像(MRI)的正电子发射体层摄影术(PET)。在一些实施方案中，适合的成像技术为选择的正电子发射体层摄影术(PET)成像。
在一些实施方案中，本申请中所述的疾病选自自身免疫疾病、炎性疾病、皮肤病、癌症和心血管疾病。
在一些实施方案中，所述的疾病为癌症。在一些实施方案中，所述的癌症包含实体瘤。在一些实施方案中，所述的癌症为血癌(例如白血病、淋巴瘤等)。在一些实施方案中，所述的癌症选自脑癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、肺癌、淋巴瘤、黑素瘤、膀胱癌、肾细胞癌、多发性骨髓瘤、胰腺癌和前列腺癌。在一些实施方案中，所述的癌症选自多毛细胞白血病、卡波西肉瘤、滤泡淋巴瘤、慢性髓样白血病、皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、T细胞幼淋巴细胞白血病、典型霍金奇淋巴瘤、B细胞非霍金奇淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、急性髓性白血病、骨髓增生异常综合征、原发性骨髓纤维化、原发性血小板增多症后骨髓纤维化、真性红细胞增多症后骨髓纤维化、黑素瘤、肾细胞癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、膀胱上皮癌、食管癌、胃食管癌、胃癌、多发性骨髓瘤、结肠癌、肾癌、头颈部鳞状细胞癌、上皮卵巢癌(EOC)、原发性腹膜癌、输卵管癌、HER2+乳腺癌、ER+/PR+/HER2-乳腺癌、三阴性乳腺癌、胃癌、胰腺癌、膀胱癌、梅克尔细胞、鼻咽癌、肾上腺皮质癌、脑膜瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、尤因肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、平滑肌肉瘤、外周原发性神经外胚层瘤、子宫鳞状细胞癌、阴道鳞状细胞癌和外阴鳞状细胞癌。在一些实施方案中，所述的癌症为结肠癌。
在一些实施方案中，所述的疾病选自移植物抗宿主病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、桥本甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、I型糖尿病、眼色素层炎、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓炎、肾小球肾炎、风湿热、感染后血管球性肾炎、银屑病、异位性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、脉管炎、红斑、皮肤嗜酸性细胞增多症、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与贝切特病相关的眼色素层炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦溃疡、巩膜炎、格雷夫斯眼病、伏格特-小柳-原田三氏综合征、结节病、花粉过敏、可逆阻塞性气道疾病、支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、慢性或难治性哮喘、迟发性哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、局部缺血和血栓形成导致的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠疾病、坏死性小肠结肠炎、与热烧伤相关的肠损害、腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增多症、克罗恩病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、古德帕斯彻氏综合征、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、多发性肌炎、格-巴二氏综合征、梅尼埃病、多神经炎、多神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯红细胞再生障碍、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼细胞贫血、红细胞发生不能、骨质疏松症、肉瘤样病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肌炎、寻常性白斑病、寻常鳞癣、光敏性敏感性、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥样硬化、主动脉炎综合征、结节性多发性动脉炎、心肌病、硬皮病、韦格纳坏死性肉芽肿、干燥综合征、肥胖病、嗜曙红细胞筋膜炎、牙龈、牙周组织、牙槽骨、牙骨质损害、肾小球肾炎、男性型秃发、通过防止拔毛的老年性脱发、通过提供毛发发生和/或促进毛发发生和毛发生长的老年性脱发、肌营养不良症、脓皮病、赛杂瑞综合征、阿狄森病、器官的缺血性再灌注损伤、移植病、缺血性疾病、内毒素性休克、假膜性结肠炎、因药物或放射导致的结肠炎、缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、因肺-氧或药物导致的毒素病、肺癌、肺气肿、白内障、铁尘肺、色素性视网膜炎、老年性黄斑变性、玻璃体瘢痕、角膜碱烧伤、多形红斑皮炎、线性IgA大疱性皮炎和充血性皮炎、牙龈炎、牙周炎、脓毒症、胰腺炎、衰老、癌发生、癌转移和低气压病、组胺或白三烯-C4释放伴发病、贝切特病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬变、硬化性胆管炎、部分肝切除、急性肝坏死、因毒素导致的坏死、病毒性肝炎、休克、缺氧症、B-病毒性肝炎、非甲/非乙型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝功能衰竭、暴发性肝功能衰竭、迟发性肝功能衰竭、慢加急性肝衰竭、巨细胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、老年性痴呆、创伤、慢性细菌感染、淋巴样来源的恶性肿瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞淋巴瘤。
在一些实施方案中，所述的疾病选自系统性红斑性狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠疾病、胆汁性肝硬化、眼色素层炎、多发性硬化、克罗恩病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、结节病、银屑病、自身免疫性肌炎、韦格纳肉芽肿病、鱼鳞病、格雷夫斯眼病、哮喘、硬皮病和干燥综合征。
在一些实施方案中，所述的疾病选自骨髓排斥、器官移植排斥和移植物抗宿主病。
如本申请中所用，措词“治疗有效量”是指式I-VIII的活性化合物或其药学上可接受的盐或药用物质引起研究人员、兽医、医生或其他临床人员寻求的组织、系统、动物、个体或人体中的生物或药物响应的量。
在一些实施方案中，施用于受试者或个体的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的剂量为约1微克至约2克，例如，约1微克至约2克，约1微克至约1000毫克，约1微克至约500毫克，约1微克至约100毫克，约1微克至约50毫克，约1微克至约1毫克，约1微克至约500微克，约1微克至约100微克，约1微克至约10微克，约10微克至约2克，例如，约10微克至约2克，约10微克至约1000毫克，约10微克至约500毫克，约10微克至约100毫克，约10微克至约50毫克，约10微克至约1毫克，约10微克至约500微克，约10微克至约100微克，约100微克至约2克，例如，约100微克至约2克，约100微克至约1000毫克，约100微克至约500毫克，约100微克至约100毫克，约100微克至约50毫克，约100微克至约1毫克，约100微克至约500微克，约500微克至约2克，例如，约500微克至约2克，约500微克至约1000毫克，约500微克至约500毫克，约500微克至约100毫克，约500微克至约50毫克，约500微克至约1毫克，约1毫克至约2克，约1毫克至约1000毫克，约1毫克至约500毫克，约1毫克至约100毫克，约1毫克至50毫克或约50毫克至约500毫克。
如本申请中所用，术语“治疗”是指如下所述的一种或多种：(1)抑制疾病；例如，抑制正在经历或表现出该疾病、病症或障碍的病理学或症状学的个体中的疾病、病症或障碍(即，阻止病理学和/或症状学进一步发展)；以及(2)改善疾病；例如，改善正在经历或表现出该疾病、症状或障碍的病理学或症状学的个体中的疾病、症状或障碍(即，逆转病理学和/或症状学)，例如降低疾病的严重性或减轻或缓解疾病的一种或多种症状。
联合疗法
当用于治疗疾病的方法中时，本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐可以与本申请中提供的另外药剂的一种或多种联合施用。实例治疗剂包括，但不限于抗炎药、类固醇、免疫治疗剂、化疗剂和治疗性抗体。
在一些实施方案中，治疗剂的施用诱导细胞或组织样品或受试者的免疫应答。在一些实施方案中，所述的治疗剂为式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含放射性同位素(例如治疗性放射性同位素)。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含毒性放射性同位素。
毒性放射性同位素的实例包括，但不限于α发射体(例如211At、212Pb、212Bi、213Bi、225Ac、227Th)和β发射体(例如90Y、131I和77Lu)。在一些实施方案中，毒性放射性同位素为β发射体。
在一些实施方案中，毒性放射性同位素为β发射体，其选自90Y、131I和177Lu。在一些实施方案中，毒性放射性同位素为α发射体。
在一些实施方案中，毒性放射性同位素为α发射体，其选自211At、212Pb、212Bi、213Bi、225Ac、227Th。
本申请还提供了治疗受试者的疾病的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含无毒性显像剂(例如无毒性放射性同位素)；且
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此治疗受试者的疾病。
本申请还提供了治疗受试者的疾病的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含非治疗性显像剂(例如非治疗性放射性同位素)；且
ii)用适合的成像技术使受试者成像，由此治疗受试者的疾病。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含无毒性放射性同位素，其选自3H、11C、14C、18F、35S、52Fe、58Co、64Cu、68Ga、76Br、77Br、89Zr、111In、123I、124I、125I、131I、186Re、188Re、201Tl。
在一个优选的实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含18F。
在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含毒性放射性同位素，其选自211At、212Pb、212Bi、213Bi、225Ac、227Th、90Y、131I和177Lu。
在一些实施方案中，在步骤i)之前，将受试者鉴别和/或诊断为患有待治疗的疾病。在一些实施方案中，将受试者在步骤ii)之后确定和/或诊断为患有待治疗的疾病。例如，待治疗的疾病选自：自身免疫性疾病、炎性疾病、皮肤病、癌症和心血管疾病。
在一些实施方案中，在步骤i)之前，已经用一种或多种免疫治疗剂对受试者进行治疗。在一些实施方案中，已确定该疾病对在步骤i)之前施用的一种或多种免疫治疗剂具有抗药性。
在一些实施方案中，该方法还包括：
iii)在施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐之后施用一种或多种免疫治疗剂。在一些实施方案中，将步骤i)-iii)重复多次。
在一些实施方案中，待治疗的疾病选自如本申请中所述的自身免疫性疾病、炎性疾病、皮肤病、癌症和心血管疾病。在一些实施方案中，所述的疾病为本申请中所述的癌症。
在一些实施方案中，将式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用于受试者。
在一些实施方案中，本申请中提供的方法还包括在步骤i)之前施用治疗剂。在一些实施方案中，本申请中所述的方法还包括在步骤ii)之后施用治疗剂。
在一些实施方案中，本申请中提供的方法还包括下列步骤：
iii)在步骤ii)之后施用治疗有效量的治疗剂；以及
iv)重复本申请中提供的方法的步骤i)和ii)。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可解释的盐以外的化合物。
在一些实施方案中，将步骤i)-iv)重复多次。
在一些实施方案中，将本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种另外治疗剂根据给药方案在一段时间期限内施用。在一些实施方案中，在施用有效量的本申请中提供的式I-VIII化合物或其药学上可接受的盐后，用适当的成像技术使细胞、细胞样品、组织、组织样品或受试者成像。在一些实施方案中，在给予另外的治疗剂后，用适当的成像技术使细胞、细胞样品、组织、组织样品或受试者成像。
在一些实施方案中，本申请提供了治疗受试者的疾病的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含无毒性显像剂(例如无毒性放射性同位素)；
ii)用适合的成像技术使受试者成像；
iii)对受试者施用治疗剂，由此治疗受试者的疾病。
在一些实施方案中，本申请提供了治疗受试者的疾病的方法，它包括：
i)给受试者施用有效量的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，其中式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的R1、R2、R5和R9的至少一个包含非治疗性显像剂(例如非治疗性放射性同位素)；
ii)用适合的成像技术使受试者成像；
iii)对受试者施用治疗剂，由此治疗受试者的疾病。
在一些实施方案中，该方法还包括在步骤iii)之前测定式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐结合是否结合被治疗的受试者的细胞或组织。在一些实施方案中，该方法还包括在施用步骤iii)之前测定式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐是否结合粒酶B。
在一些实施方案中，在步骤i)之前，已将受试者鉴别和/或诊断为患有待治疗的疾病。在一些实施方案中，在步骤ii)之后将受试者鉴别和/或诊断为患有待治疗的疾病。
在一些实施方案中，在步骤i)之前，已经用一种或多种免疫治疗剂对受试者进行治疗。在一些实施方案中，已确定该疾病对在步骤i))之前施用的一种或多种免疫治疗剂具有抗性。
在一些实施方案中，该方法还包括：
iv)在步骤iii)的治疗剂施用之后施用一种或多种免疫治疗剂。在一些实施方案中，将步骤i)-iv)重复多次。
在一些实施方案中，将另外的治疗剂以治疗有效量施用于受试者。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为抗体。用于联合疗法的实例抗体包括，但不限于曲妥珠单抗(例如抗HER2)、雷珠单抗(例如抗VEGF-A)、贝伐珠单抗(例如抗VEGF)、帕木单抗(例如抗EGFR)、西妥昔单抗(例如抗EGFR)、Rituxan(抗CD20)、定向于c-MET的抗体和粒酶B的抗体抑制剂(例如克隆GB11、克隆GrB-7和NCL-L-Gran-B)。伊匹木单抗(抗CTLA-4)、纳武单抗(抗PD-1)、派姆单抗(抗PD-1)、阿替利珠单抗(抗PD-1)、依洛珠单抗(抗SLAM7)和达雷木单抗(抗CD38)。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为类固醇。实例类固醇包括皮质类固醇，例如可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙和泼尼松。在一些实施方案中，另外的活性剂为皮质类固醇。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为抗炎化合物。实例抗炎化合物包括阿司匹林、水杨酸胆碱、塞来考昔、双氯芬酸钾、双氯芬酸钠、双氯芬酸钠与米索前列醇、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、酮洛芬、甲氧胺苯酸钠、甲芬那酸、萘丁美酮、萘普生、萘普生钠、奥沙普秦、吡罗昔康、罗非昔布、双水杨酯、水杨酸钠、舒林酸、托美丁钠和伐地考昔。
在一些实施方案中，治疗剂为化疗剂。实例化疗剂包括，但不限于细胞生长抑制剂、顺铂、多柔比星、泰索、依托泊苷、伊立替康、托泊替康、紫杉醇、多西他赛、埃博霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH 66336、R115777、L778,123、BMS214662、吉非替尼、盐酸厄洛替尼、针对EGFR的抗体、甲磺酸伊马替尼、内含子、阿糖胞苷、吉西他滨、乌拉莫司汀、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三乙烯三聚氰胺、三亚乙基硫代磷胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、亚叶酸、喷司他丁、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光辉霉素、喷司他丁、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17α-炔雌醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸甲雄烷酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟基孕酮、氨鲁米特、雌氮芥、甲孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、长春瑞滨、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬、六甲蜜胺、贝伐珠单抗、百克沙、万珂、泽瓦林、三氧化二砷、希罗达、长春瑞滨、卟菲尔钠、爱必妥、脂质体、噻替派、六甲蜜胺、美法仑、曲妥珠单抗、氟维司群、依西美坦、异环磷酰胺、利妥昔单抗、C225、阿仑珠单抗、氯法拉滨、克拉立滨、阿非科林、舒尼替尼、达沙替尼、替扎他滨、Sml 1、triapine、didox、trimidox、amidox、3-AP、MDL-101,731、苯达莫司汀、奥法木单抗和GS-1101(也称作CAL-101)。
在一些实施方案中，化疗剂选自烷化剂(例如白消安、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺(cytoxan)、达卡巴嗪、异环磷酰胺、氮芥(氮芥)和美法仑)、亚硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀和链佐星)、三嗪(例如达卡巴嗪)、抗代谢药(例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿糖胞苷(Ara-C)、氟达拉滨、吉西他滨和甲氨蝶呤)、嘌呤类似物(例如6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤和喷司他丁(2-脱氧肋间型霉素))、有丝分裂抑制剂(例如多西他赛、依托泊苷(VP16)、替尼泊苷、紫杉醇、泰素、长春碱、长春新碱和长春瑞滨)、抗肿瘤抗生素(例如博来霉素、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、丝裂霉素、普卡霉素和伊达比星)、铂化疗剂(例如顺铂和卡铂)、蒽二酮类(例如米托蒽醌)、毒素(例如蓖麻蛋白A-链(Burbage，Leukemia research，21.7(1997)：681-690)、白喉毒素A(Massuda等人，Proceedings of the National Academy ofSciences，94.26(1997)：14701-14706；Lidor，American journal of obstetrics andgynecology，177.3(1997)：579-585)，百日咳毒素A亚单位、产肠毒素大肠杆菌毒素A亚单位、霍乱毒素A亚单位和假单胞菌属毒素c-末端)和基因疗法载体(例如信号转导蛋白(例如Src、Abl和Ras)、Jun、Fos和Myc)。
在一些实施方案中，所述的治疗剂为免疫治疗剂。免疫治疗剂通常会触发免疫效应细胞和分子以靶向并破坏细胞(例如癌细胞)。免疫效应物可以是例如对细胞(例如肿瘤细胞)表面上的标志物具有特异性的抗体。单独的抗体可以充当治疗的效应子，或者可以募集其他细胞来实现细胞杀伤。各种效应细胞包括，但不限于细胞毒性T细胞和NK细胞。
实例免疫治疗剂包括，但不限于硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、环孢菌素、达克珠单抗、英夫利昔单抗、甲氨蝶呤、他克莫司、免疫刺激剂(例如IL-2、IL-4、IL-12、GM-CSF、肿瘤坏死因子；干扰素α、β和γ；F42K和其他细胞因子类似物；趋化因子，例如MIP-1、MIP-1β、MCP-1、RANTES、IL-8；或生长因子，例如FLT3配体)、抗原肽、多肽或蛋白质或自体或同种异体肿瘤细胞组合物(参见，例如Ravindranath&Morton，International reviews ofimmunology，7.4(1991)：303-329)、激素疗法、肾上腺皮质类固醇、孕激素(例如己酸羟孕酮、醋酸甲羟孕酮和醋酸甲地孕酮)、雌激素(例如己烯雌酚和炔雌醇)、抗雌激素药(例如丙酸睾酮和氟甲睾酮)、抗雄激素药(例如氟他胺)和促性腺素释放素类似物(例如亮丙瑞林)。另外的免疫治疗剂为本领域已知的，且可以在例如Rosenberg等人New England Journalof Medicine，319.25(1988)：1676-1680；以及Rosenberg等人Annals of surgery，210.4(1989)：474)中找到。
本申请中提供的治疗剂可在宽剂量范围内有效，并且通常以有效量施用。但是，应当理解，实际施用的治疗剂的量通常将由临床医师根据相关情况，包括要成像的病症、选择的施用途径、实际施用的化合物、个体受试者的年龄、体重和反应、个体症状的严重程度等来确定。
药物组合物
当用作药物时，本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐和治疗剂可以以药物组合物形式施用。这些组合物可以如本申请中所述制备，或者在其它方面，可以通过不同途径施用，这取决于是期望局部治疗还是全身治疗并且取决于待治疗的区域。
可以局部施用(包括经皮，表皮，眼部和粘膜施用，包括鼻内、阴道和直肠施用)，肺部施用(例如，通过吸入或吹入粉末或气雾剂，包括通过喷雾器；气管内或鼻内施用)，口服或肠胃外施用。
肠胃外施用包括静脉内，动脉内，皮下，腹膜内，肌内或注射或输注；或颅内(例如鞘内或脑室内施用)。肠胃外施用可以是单次推注剂量的形式，或者可以为例如通过连续的灌注泵。
在一些实施方案中，本申请中提供的式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐适合于胃肠外施用。在一些实施方案中，式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐适合于静脉内施用。
用于局部施用的药物组合物和制剂可以包括透皮贴剂，软膏，洗剂，霜剂，凝胶，滴剂，栓剂，喷雾剂，液体和粉末。常规的药用载体、水性、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必需的或期望的。
在一些实施方案中，本申请中提供的药物组合物适合于胃肠外施用。在一些实施方案中，本申请中提供的药物组合物适合于静脉内施用。
还提供了药物组合物，其包含本申请中提供的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分与一种或多种药学上可接受的载体(赋形剂)。
在制备本申请中提供的药物组合物的过程中，将活性成分典型地与赋形剂混合，用赋形剂稀释或以例如胶囊、香囊、纸或其他容器形式封装在这种载体中。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体材料，其充当活性成分的媒介物、载体或介质。
因此，药物组合物可以是片剂，丸剂，粉剂，锭剂，药囊，扁囊剂，酏剂，混悬剂，乳剂，溶液，糖浆，气雾剂(以固体或液体介质形式)，软膏剂，软和硬明胶胶囊，栓剂，无菌注射液和无菌包装粉末。
适合的赋形剂的一些实例包括，但不限于乳糖，右旋糖，蔗糖，山梨醇，甘露糖醇，淀粉，阿拉伯胶，磷酸钙，藻酸盐，黄蓍胶，明胶，硅酸钙，微晶纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素，水，糖浆和甲基纤维素。药物制剂可另外包括，但不限于润滑剂，例如滑石粉，硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化和助悬剂；防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；矫味剂或它们的组合。
套装产品
本申请还提供了包含式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐的套装产品。在一些实施方案中，该套装产品还包含本申请中提供的一种或多种另外的治疗剂。
在一些实施方案中，该套装产品包含本申请中提供的化合物的一种或多种成分(例如一种或多种显像剂、一种或多种螯合剂、一种或多种连接基或式I-VIII的化合物或其药学上可接受的盐，它们结合粒酶B)。
在一些实施方案中，套装产品的各个成分(存储在套装产品中的单独容器中(例如，单独的小瓶中)。在一些实施方案中，套装产品的成分可以以含水介质或冻干形式包装。
在一些实施方案中，套装产品还包含说明书，例如，作为插入物或标签，指示要所施用的组合物的量、施用指南和/或套装产品成分混合以制备式I-VIII的化合物或药学可接受的盐的指南。在一些实施方案中，说明书还包含用于执行本申请中提供的一种或多种方法的说明。
如果期望，本申请中提供的套装产品可以进一步包括一种或多种常规药物套装产品成分，例如，具有一种或多种药学上可接受的载体的容器，另外的容器等，这对于本领域技术人员而言是非常明显的。
可以使用下文提供的人粒酶B生化测定法测试上述式I-VIII的化合物。
测定参数：
表1.具体测定参数。
酶：粒酶B(人淋巴细胞) 5nM
底物：Ac-IETD-AFC 200μM
化合物与酶一起温育 30min
测定温度 22℃
读出时间 60min
标准抑制剂 C006
读数计 EnVision多模式平板读数计2104
材料：
1.粒酶B(人淋巴细胞)酶：Enzo Lifesciences，目录号ALX-200-602-C010
2.底物(Ac-IETD-AFC)：Enzo Lifesciences，目录号ALX-260-110-M010
3.标准抑制剂(化合物20-异构体3)：Synthesized internally in TCG
4.二甲亚砜(DMSO)：Sigma-Aldrich，目录号41639
5.HEPES：GibCo、目录号15630-080
6.氯化钙：Sigma-Aldrich，目录号C-5080
7.蒸馏水：GibCo，目录号15230-162
8.牛血清白蛋白(BSA)：Sigma-Aldrich，目录号A3059
9.黑色透明底PDL板(384孔)：Greiner bio-one，目录号781946
10.聚丙烯板(384孔)：Corning，目录号3657
测定缓冲液组成：
表2.具体测定缓冲液组成
Figure BDA0002699152330000501
化合物制备物：
1.将DMSO加到相应的化合物小瓶中，制成10mM化合物储备溶液，将其储存在-20℃下。
2.融化10mM化合物储备溶液，通过添加45μl DMSO至5μl 10mM化合物储备溶液中制备1mM DMSO储备溶液。
3.通过添加10μl 1mM DMSO储备溶液至21.6μl DMSO中连续稀释1mM DMSO储备溶液(3.16倍)，充分混合。然后将10μl得到的溶液加到21.6μl DMSO中，充分混合。持续该过程以产生标准抑制剂的11个稀释点和用于在384孔聚丙烯板中测定化合物的8个稀释点。
4.将2μl每种稀释液调配在准备好测定的板中。
5.然后在准备好测定的板中通过将48μl测定缓冲液添加至2μl化合物中将每个孔稀释25倍。
酶制备物：
1.将提供的粒酶B(人淋巴细胞)酶重构为1mg/ml(约31.25μM)，将1μl等分部分保存在-80℃下。
2.通过添加包含0.1％BSA的49μl测定缓冲液将1μl等分部分稀释至625nM，适度混合。
3.通过添加包含0.1％BSA的测定缓冲液制备10nM酶工作储备溶液。
底物制备物：
1.通过添加DMSO重构提供的底物(Ac-IETD-AFC)以制成10mM储备溶液，将其等分保存在-80℃下。
2.通过添加DMSO制备4mM底物储备溶液。
3.通过添加测定缓冲液制备底物工作储备溶液即800μM。
测定方案：
1.根据板图将10μl连续稀释的化合物工作储备溶液(起始剂量40μM)从准备好测定的板添加至测定板中。
2.将阳性对照(40μM标准抑制剂)和阴性对照(4％DMSO缓冲液)加到相应的孔中。
3.将20μl酶工作储备溶液加到测定板中并且适度混合。
4.将板在22℃温育30min，并且以130g旋转1分钟。
5.温育后，将10μl底物工作储备溶液加到相应的孔中并且混合(底物添加后将测定板维持在黑暗中)。
6.将板在22℃温育60min并且以130g旋转1分钟。
7.在EnVision多模式平板读数计中60分钟后进行荧光读数(RFU)(Ex：400nm/Em：505nm)。
最终测定浓度：
表3.具体最终测定浓度
试剂 终浓度 添加的体积
化合物/标准品/对照 从10μM开始，3.16倍顺序稀释 10μl
酶 5nM 20μl
底物 200μM 10μl
数据分析：
1.在Microsoft excel中通过用分别设定为100％和0％效果的阳性和阴性对照进行归一化，分析RFU读数以计算抑制百分比。
2.通过将分析后的数据置于GraphPad prism 5.0软件中生成图以得到各化合物的IC50值。
另外，如下文所提供，还使用肝微粒体在代谢稳定性测定法中测试了上述式I-VIII的化合物。
实验概述
表4.实验方案概述
测试系统 代谢稳定性
测试 1μM，n＝2
肝微粒体 人/大鼠/小鼠肝微粒体(0.4mg/ml)
辅因子 NADPH再生系统(NRS)
温育 0和30min或0、5、10、20、30和60分钟与NRS，37℃
检测 LC-MS/MS
参比 阿替洛尔、普萘洛尔、双氯芬酸、维拉帕米
数据 ％母体化合物残留/T-半衰期/清除率
方案
缓冲液pH7.4：制备1(M)KH2PO4和1(M)K2HPO4。用1(M)KH2PO4滴定1(M)K2HPO4，得到pH7.40。用水稀释该缓冲液10倍(30ml缓冲液+270ml水)，得到100mM磷酸盐缓冲液。使用5(N)HCl或5(N)NaOH调整pH至7.40±0.02。
NADPH再生系统(NRS)：制备在缓冲液中包含13mM NADP、33mM葡糖-6-磷酸、33mMMgCl2和4U/ml葡糖-6-磷酸脱氢酶的溶液。
肝微粒体(LM)混悬液：融化在冰上的LM小瓶，然后将1.0ml LM(20mg/ml)与19ml缓冲液混合[最终LM浓度：1mg/ml]。
LM+NRS混悬液：5.0ml NRS与20ml LM混悬液混合[最终LM浓度：0.8mg/ml]
系统适用性标准：分子量为686.2的合成化合物用作系统适用性标准。将该化合物溶于冰冷的乙腈中，得到0.1μg/ml的浓度，并储存在4℃下。
化合物稀释：
化合物储备溶液：10mM的DMSO溶液
子储备溶液(100μM)：4μl 10mM化合物储备溶液+398μl乙腈
工作平板(2μM)：10μl 100μM子储备溶液+490μl缓冲液
测定方法
在37℃温育全部塑料材料(包括尖端)过夜。
使用前在37℃温育LM缓冲液和NRS 15分钟。
添加40μl缓冲液至空白板的孔中。
添加40μl化合物(来自工作板)至0、5、10、20、30和60分钟板。
通过在每个板中添加40μl LM+NRS混悬液启动反应。
通过在指定的时间点添加240μl包含系统适用性标准的冰冷乙腈终止反应。对于T＝0，在添加LM+NRS之前添加240μl包含系统适用性标准的冰冷乙腈。
离心(3500rpm，20分钟和15℃)板。
将110μl上清液与110μl水混合且使用LC-MS/MS定量化合物在溶液中的量。
计算
在t＝x分钟的％残留＝100×([LC-MS/MS分析物的峰面积]t＝x分钟)/([LC-MS/MS分析物的峰面积]t＝0分钟)
T1/2＝ln 2/-(ln(％残留)的斜率对时间图)＝分钟
Figure BDA0002699152330000541
对于按比例的CLint和预期的CL，使用相关的生理参数(如果适用)。
注意，在本测定法中：
(1)LM来源：
人LM：Corning，目录号25117
大鼠LM：Corning，目录号452501
小鼠LM：Xenotech，目录号M1000
(2)方案中提及的体积为代表值，并可以根据测试化合物的数量的不同而变化。
(3)推定该化合物在测定系统/缓冲液中化学稳定。本研究没有任何有关化学稳定性或不稳定性的信息。
可以使用不同的测试浓度、LM浓度或时间点进行上述代谢稳定性测定法。
无需进一步阐述，认为本领域技术人员基于以上描述可以在最完全程度上最大程度地利用本公开。因此，以下具体实施例应解释为仅仅是举例说明，而不是以任何方式限制本公开的其余部分。本申请中引用的所有出版物均通过引用以其全文并入本申请。
下表中显示的是某些示例性化合物的结构和名称。发现这些化合物不同程度地抑制粒酶B，如下表5中包括的它们的IC50值所示。在表中的符号中，“++++”表示IC50值为0.001-0.300μM，“+++”表示IC50值为0.301-1.000μM，“++”表示IC50值为1.001-5μM，“+”表示IC50值大于5μM，且“nd”表示未测定。
表5.化合物和IC50值
Figure BDA0002699152330000551
Figure BDA0002699152330000561
Figure BDA0002699152330000571
Figure BDA0002699152330000581
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Figure BDA0002699152330000611
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Figure BDA0002699152330000711
Figure BDA0002699152330000721
Figure BDA0002699152330000731
Figure BDA0002699152330000741
Figure BDA0002699152330000751
Figure BDA0002699152330000761
Figure BDA0002699152330000771
Figure BDA0002699152330000781
Figure BDA0002699152330000791
Figure BDA0002699152330000801
Figure BDA0002699152330000811
Figure BDA0002699152330000821
下面描述的是用于合成上述示例性化合物的方法。
除非另有说明，否则所有试剂和溶剂均购自商业来源，且未进一步纯化即被使用。所有反应均在干燥的氮气或氩气气氛中进行，并使用Merck硅胶60F254玻璃支撑板通过薄层色谱法(TLC)监测。通过Merck硅胶60(0.040-0.063mm，230-400目)进行了柱色谱法。通过Varian Mercury-300和Varian Mercury-400光谱仪测量了1H NMR和13C NMR光谱，并且化学位移(δ)以相对于溶剂峰的共振的百万分份数(ppm)形式记录。用以下缩写报告多重性：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，quin(五重峰)，m(多重峰)或br(宽峰)。通过HPHewlett Packard1100系列测定了低分辨率质谱。
实施例1：具有碳环核的化合物的合成
遵循以下方案合成了含碳环核的式I化合物。
方案-1[中心骨架的合成，参照-WO/9501353A1]：
Figure BDA0002699152330000831
一般说明：Friedel Craft环化[步骤-4]对水分敏感，且酰氯制备，随后添加AlCl3应在氩气气氛中谨慎进行。报告了初始中间体的SOR值，交叉检查。在分离化合物7期间，应在冷却条件下调节pH值，以避免在酸性条件下N-boc脱保护的可能性。
实验：
(S)-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案1，步骤-1]：在室温向1(30.0g，184mmol)在MeOH(300mL)中的混悬液中滴加硫酸(22.5mL)。添加后，将得到的混合物在80℃搅拌16h。完成后，真空除去溶剂，用15％NaOH水溶液中和残余物。然后用EtOAc(2x 150mL)萃取该反应混合物。再用1N NaOH水溶液、盐水(100mL)洗涤合并的有机部分，干燥(MgSO4)，过滤，加压蒸发，得到化合物2(29g，89％)，为浅棕色胶状液体。1H NMR相符。
(S)-1-[(S)-3-羧基-2-(2,2,2-三氟-乙酰基氨基)-丙酰基]-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案1，步骤-2]：在0-5℃向2(25.00g，130.9mmol)在乙酸乙酯[1.2L]中的澄清溶液中加入11(30.38g，144.0mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物，使得到的粗产物进行柱色谱法，进行10-25％EtOAc/己烷梯度洗脱。浓缩洗脱液，与甲苯共沸，得到化合物3(50.0g，98.4％)，为灰白色松软固体。质量[ESI]：m/z 388.3[M++1]。
(2S,5S)-4,7-二氧代-5-(2,2,2-三氟-乙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案1，步骤-3]：向搅拌的3[10.0g，25.8mmol]在DCE[120mL，新鲜蒸馏的]中的溶液中滴加草酰氯[8.85mL，103mmol]，然后添加催化量的DMF，将得到的反应混合物在室温搅拌2h。完成后[通过TLC监测，用MeOH淬灭]，减压浓缩反应混合物。用DCE[250mL]稀释由此得到的粗酰氯，然后滴加AlCl3[16.40g，116.2mmol]，维持外部温度在0-5℃。添加后，将反应混合物中50℃搅拌16h。完成后[通过TLC监测，40％EtOAc/己烷，Rf 0.5]，用水使反应混合物淬灭，用DCM萃取。再用饱和碳酸氢钠溶液和盐水溶液洗涤有机层。然后干燥有机部分(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物(20-50％EtOAc/己烷，SiO2)，得到期望的化合物4a[1.70g，18.6％，非极性化合物]，为白色固体；以及2.5g不期望的异构体4b[极性化合物]。质量[ESI]：m/z 370.28[M++1]。
(2S,5S)-4-氧代-5-(2,2,2-三氟-乙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案1，步骤-4]：向4a[5.20g，14.1mmol]在AcOH[300mL]中的溶液中加入Pd-C[5g，50％湿]，将得到的混悬液在帕尔摇瓶中在50psi H2压力中氢化16h。完成后[30％EtOAc/己烷，Rf 0.5]，减压浓缩反应混合物，用EtOAc稀释得到的粗产物，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到化合物5(5.0g，99.8％)，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 356.3[M+-1]。
(2S,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸的合成[方案1，步骤-5&6]：将化合物5[5.00g，14.0mmol]溶于THF[140mL]，向其中加入LiOH[3.54g，84.3mmol]在水[70mL]中的溶液，然后将该反应混合物在室温搅拌2h。完成后，减压浓缩反应混合物，用1N HCl水溶液酸化残余物至pH～5。然后向该反应混合物中加入碳酸钠[4.46g，42.1mmol]，搅拌5min，然后添加Boc-酸酐[3.87mL，42.1mmol]在二噁烷[100mL]中的溶液，持续搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物，用水稀释得到的粗产物，使用1N HCl水溶液在冰冷条件下[外部温度不应>5-7℃]谨慎地将该反应混合物的pH调整至～3。即刻用EtOAc萃取反应混合物，再用水、盐水洗涤有机部分，干燥有机部分(MgSO4)，减压浓缩，得到期望的化合物7(4.8g，98.6％)，为棕色固体。质量[ESI]：m/z 346.38[M++1]。
[(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基}-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案1，步骤-7]：在室温向搅拌的化合物7(4.65g，13.4mmol)在DMF(20mL)中的溶液中加入化合物14(3.60g，26.90mmol)，hunig碱(12.04mL，67.19mmol)。最终在冰冷条件下一次加入EDC.HCl(3.94g，20.6mmol)和HOBT(2.36g，17.5mmol)，将该反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS监测]，用乙酸乙酯稀释反应混合物，用过量水洗涤。然后用Na2CO3饱和水溶液(50mL)和盐水洗涤有机层。干燥有机部分(MgSO4)，浓缩，得到粗物质。通过柱色谱法纯化粗产物(30-60％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物8(3.21g，55.8％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 426.46[M++1]。
(2S,5S)-5-氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案1，步骤-8]：向搅拌的化合物8(3.21g,3.28mmol)在DCM(4mL)中的溶液中加入50％TFA的DCM溶液(10mL)，将得到的反应混合物在室温搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，蒸发反应混合物至干，得到粗中心骨架(1.6g)，为黄色半固体。质量[ESI]：m/z 326.35[M++1]。
N-((S)-2,5-二氧代-四氢-呋喃-3-基)-2,2,2-三氟-乙酰胺的合成[方案1，步骤-9]：向9(10.0g，75.1mmol)在TFA(30mL)中的混悬液加入TFAA[10][29.45mL，210.4mmol"]，维持外部温度低于-10℃。添加后，保持反应混合物在冷条件下剧烈搅拌半小时。然后将反应混合物在45℃搅拌2h。最终使反应混合物达到室温，搅拌16h。完成后，用丙酮稀释反应混合物，减压浓缩。将得到的固体与己烷一起研磨，得到化合物11(15g，95％)，为白色固体。1HNMR相符。
(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-1，步骤-10]：向搅拌的12[5.00g，32.3mmol]在DMF：MeOH[90：10mL]中的溶液中加入三甲基甲硅烷基叠氮化物[5.56mL，48.4mmol]，然后添加CuI[0.31g，1.61mmol]，将得到的反应混合物在95℃在密封试管中搅拌12h。完成后，使反应混合物分配在EtOAc与水之间，分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。用DCM稀释得到的粗产物，通过烧结玻璃过滤不溶部分，减压浓缩滤液，得到化合物13(5.4g，84％)，为黄色粘性液体。1H NMR相符。
C-(1H-[1,2,3]三唑-4-基)-甲胺的合成[方案-1，步骤-11]：将13[8.00g，40.4mmol]在4(M)HCl的二噁烷溶液[120mL]中的溶液在室温搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物，将得到的粗产物与己烷一起研磨，得到粗化合物14(5.35g)，为灰白色固体[HCl盐]。质量[ESI]：m/z 98.11[M++1]。
方案-2：
Figure BDA0002699152330000871
一般说明：所有最终化合物均通过RP制备型HPLC纯化，但是，由于溶解度差，最终步骤的收率非常低，用RP也难以分离异构体。
(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸甲酯的合成[方案2，步骤-12]：向搅拌的化合物16(0.50g，2.60mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入化合物15(0.52g，2.86mmol)、EDC.HCl(0.65g，3.38mmol)、HOBT(0.53g，3.90mmol)、DIPEA(2.4mL，13mmol)，将该反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC监测(30％EtOAc-己烷，Rf-0.3)]，使反应混合物分配在DCM(50mL)与水(30mL)之间。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩。通过色谱法纯化粗产物(0-20％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物17(490mg，收率：55.8％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 557.64[M++1]。
(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸的合成[方案2，步骤-13]：在冰冷条件下向搅拌的化合物3(490mg，1.53mmol)在THF(5mL)：水(1mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(90.0mg，2.29mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌3h。完成后[使用LC-MS监测]，浓缩反应混合物，用水[50mL]稀释得到的粗产物，用EtOAc[50mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc萃取[50mLX2]。用盐水[30mL]洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到酸C006(390mg，收率：定量]。质量[ESI]：m/z 557.64[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案2，步骤-14]：向搅拌的酸A(224mg，0.73mmol)和中心骨架(200mg，0.61mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入DIPEA(0.5mL，3.06mmol)，然后添加TBTU(295mg，0.68mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。反应完成时(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到两种异构体[较快移动的异构体28mg和较慢移动的异构体5mg]，较快移动的异构体为生物有效的，即期望的C006(29mg)，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 613.74[M++1]
酰胺化的一般条件，最终酰胺化：按照与用于C006相同的条件合成了下述化合物。
(2S,5S)-5-[2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-乙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C001]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。完成后，用冷水[50mL]稀释反应混合物，将所得浅棕色沉淀物通过烧结玻璃过滤。将固体进一步与戊烷研，真空干燥，得到C001[15mg，11.85％]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 557.64[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C002]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到16mg较快洗脱的和主要的C002异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 571.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C003]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5mg较快洗脱的和主要的C003异构体，为白色固体，0.08mg较慢洗脱的异构体还分离了。质量[ESI]：m/z599.72[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-苯基-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C004]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12mg较快洗脱的和主要的C004异构体，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 647.76[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-4-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C005]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12mg较快洗脱的和主要的C005的异构体[异构体1]，为白色固体；以及2.5mg较慢洗脱的异构体[异构体2]C005。质量[ESI]：m/z 613.74[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-羟基-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C007]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到1mg较快洗脱的C007的异构体[异构体1]，为白色固体；以及19mg较慢洗脱的C007异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 587.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-2-苯基-乙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C009]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到14mg较快洗脱的C009的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 633.73[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-羟基-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C010]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到33.4mg较快洗脱的C010的异构体[异构体1]，为淡黄色固体。质量[ESI]：m/z 663.76[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-氟-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C011]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15mg较快洗脱的C011的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 665.75[M++1]。
(2S,5S)-4-氧代-5-(2-苯基乙酰基氨基-乙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C012]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg C012，为白色固体。质量[ESI]：m/z501.55[M++1]。
(2S,5S)-4-Oxo-5-((S)-2-苯基乙酰基氨基-丙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C013]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到21mg较快洗脱的C013异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 515.58[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-丁酰基氨基)-4-oxo-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C014]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到7.7mg较快洗脱的C014的异构体[异构体1]，为白色固体；以及5.7mg较慢洗脱的C014的异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-4-氧代-5-((S)-3-苯基-2-苯基乙酰基氨基-丙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C015]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的C015的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 591.68[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-4-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C016]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到10.9mg较快洗脱的C016的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 557.66[M++1]。
(2S,5S)-5-((2S,3S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C017]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5.3mg较快洗脱的C017的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 557.66[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-3-羟基-2-苯基乙酰基氨基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C018]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到14mg较慢洗脱的C018的异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 531.58[M++1]。
(2S,5S)-4-氧代-5-((S)-2-苯基-2-苯基乙酰基氨基-乙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C020]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到14mg较快洗脱的C020的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 577.65[M++1]。
(2S,5S)-4-氧代-5-((S)-2-苯基-2-苯基乙酰基氨基-乙酰基氨基)-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C021]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到20mg较快洗脱的C021的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 607.67[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-3-(4-氟-苯基)-2-苯基乙酰基氨基-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C022]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到36mg较快洗脱的C022的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 609.67[M++1]。
(2S,5S)-5-(2-乙酰基氨基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C023]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到35mg的C023，为白色固体。质量[ESI]：m/z425.45[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C024]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到14.2mg较快洗脱的C024的异构体[异构体1]，为白色固体；以及1.2mg较慢洗脱的C024的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 439.48[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C025]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到21mg较快洗脱的C025的异构体[异构体1]。质量[ESI]：m/z 467.53[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-苯基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C026]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到21mg较快洗脱的C026的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 515.58[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-4-甲基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C027]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到7.4mg较快洗脱的C027的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 481.56[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C028]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到18.5mg较快洗脱的C028的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 481.56[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-羟基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C029]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到14mg较慢洗脱的C029的异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 455.48[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-2-苯基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C031]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到1.3mg较快洗脱的和主要的异构体C031，为白色固体。质量[ESI]：m/z 501.55[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-乙酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C032]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到3.2mg较快洗脱的和主要的异构体C032，为白色固体。质量[ESI]：m/z 531.58[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-乙酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C033]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到10mg较快洗脱的和主要的异构体C033，为白色固体。质量[ESI]：m/z 533.57[M++1]。
(2S,5S)-5-(2-苯甲酰基氨基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C034]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到10mg C034，为白色固体。质量[ESI]：m/z487.52[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C035]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到9.6mg较快洗脱的和主要的异构体C035，为白色固体。质量[ESI]：m/z501.55[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C036]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15mg较快洗脱的和主要的C036的异构体[异构体1]，为白色固体；以及8mg较慢洗脱的C036的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 529.60[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-苯基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C037]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到22.1mg较快洗脱的和主要的C037的异构体[异构体1]，为白色固体；以及1.1mg较慢洗脱的C037的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 577.65[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-4-甲基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C038]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到10mg较快洗脱的和主要的C038的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C039]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15mg较快洗脱的和主要的C039的异构体[异构体1]，为白色固体；以及13mg较慢洗脱的C039的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 577.65[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-羟基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C040]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到13mg较慢洗脱的C040的异构体。质量[ESI]：m/z 517.55[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C042]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的和主要的C042的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 593.65[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C043]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15mg较快洗脱的和主要的C043的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 595.64[M++1]。
(2S,5S)-5-(2-甲基-2-苯基乙酰基氨基-丙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C044]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg C044，为白色固体。质量[ESI]：m/z 529.60[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C045]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到11mg较快洗脱的和主要的C045的异构体[异构体1]，为白色固体；以及4mg较慢洗脱的C045的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z515.58[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3,3-二甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C046]：向搅拌的酸C046(80.1mg，0.341mmol)和中心骨架(150mg，0.341mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.237mL，1.36mmol)，然后添加PyBOP(266mg，0.511mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。反应完成时(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到10mg较快洗脱的和主要的C046的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(4-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C047]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到3.1mg较快洗脱的和主要的C047的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 547.59[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(3-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C048]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到16.5mg较快洗脱和主要的C048的异构体[异构体1]，为白色固体；以及5mg较慢洗脱的C048的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 547.59[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C049]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到6.1mg较快洗脱的和主要的C049的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 547.59[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-3-甲基-2-(2-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C050]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到4.3mg较快洗脱的和主要的C050的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-3-甲基-2-(3-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C051]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到4.8mg较快洗脱的和主要的C051的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-3-甲基-2-(4-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C052]：按照与用于C006的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到3.5mg较快洗脱的和主要的C052的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-((2S,3R)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C053，]：向搅拌的酸C053(107mg，0.455mmol)和中心骨架(200mg，0.455mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.396mL，2.27mmol)，然后添加BOP(301mg，0.682mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。反应完成时(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到10mg较快洗脱的和主要的C053的异构体[异构体1]，为白色固体；以及3.7mg较慢洗脱的C053的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 543.63[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3R)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C054]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到7mg较快洗脱的和主要的C054的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 613.74[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-4,4,4-三氟-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C055]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5mg较快洗脱的和主要的C055的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 583.58[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-4,4,4-三氟-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C056]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15.2mg较快洗脱的和主要的C056的异构体，为白色固体，还分离了0.4mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z529.58[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C057]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到50mg较快洗脱的和主要的C057的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 485.52[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C058]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到9.2mg较快洗脱的和主要的C058的异构体，为白色固体，还分离了3.8mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z543.60[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C059]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到21mg较快洗脱的和主要的C059的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 499.55[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C060]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到6.5mg较快洗脱和主要的C060的异构体，为白色固体，还分离了2.1mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z573.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(3-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C061]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到15mg较快洗脱的和主要的C061的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 573.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C062]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到21mg较快洗脱的和主要的C062的异构体，为白色固体；以及7mg较慢洗脱的C062的异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 573.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C063]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到7mg较快洗脱的和主要的C063的异构体，为白色固体，还分离了0.4mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z573.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(3-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C064]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到9mg较快洗脱的C064的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.63[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C065]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到18mg较快洗脱的C065的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.63[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C066]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C066的异构体[异构体1]。质量[ESI]：m/z 544.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-3-羰基)-氨基]-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C067]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到13mg较快洗脱的C067的异构体[异构体1]，为灰白色固体，和5mg较慢洗脱的C067的异构体[异构体2]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 544.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C068]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到9mg较快洗脱的C068的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 544.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(S)-3-甲基-2-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-丁酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C069]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C069的异构体[异构体1]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 530.59[M++1]。
(2S,5S)-5-{(S)-3-甲基-2-[(吡啶-3-羰基)-氨基]-丁酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C070]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的C070的异构体[异构体1]，为白色固体；以及15mg较慢洗脱的C070的异构体[异构体-2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 530.59[M++1]。
(2S,5S)-5-{(S)-3-甲基-2-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-丁酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C071]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到9mg较快洗脱的C071的异构体[异构体1]，为白色固体；以及5mg较慢洗脱的C071的异构体[异构体-2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 530.59[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-乙基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C072]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到26mg较快洗脱的C072的异构体[异构体1]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 627.77[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-乙基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C073]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到17mg较快洗脱的C073的异构体[异构体1]，为白色固体，和6mg较慢洗脱的C073的异构体[异构体-2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 557.66[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-乙基-戊酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C074]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的C074的异构体[异构体1]，为白色固体；以及10mg较慢洗脱的C074的异构体[异构体-2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 495.59[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-2-环戊基-乙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C075]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到26mg较快洗脱的C075的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 625.76[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-2-环戊基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C076]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到8mg较快洗脱的C076的异构体[异构体1]，为白色固体；以及15mg较慢洗脱的C076的异构体[异构体-2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 555.64[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-2-环戊基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C077]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到32mg较快洗脱的C077的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 493.56[M++1]。
(2S,5S)-5-[(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-2-环己基-乙酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C078]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到16mg较快洗脱的C078的异构体[异构体1]，为白色固体；以及6mg较慢洗脱的C078的异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 639.78[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-2-环己基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C079]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5mg较快洗脱的C079的异构体[异构体1]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 569.67[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-2-环己基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C080]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C080的异构体[异构体1]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 507.6[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-2-环丙基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C081]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到18mg较快洗脱的C081的异构体[异构体1]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 465.52[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-2-环丙基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C082]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到11mg较快洗脱的C082的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 527.59[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-2-环丁基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C083]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C083的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 479.54[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-苯甲酰基氨基-2-环丁基-乙酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C084]：按照与用于C053的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到36mg较快洗脱的C084的异构体[异构体1]，为白色固体；以及5.6mg较慢洗脱的C084的异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 541.61[M++1]。
酸对应物合成的一般条件：
按照方案-2合成酸对应物：
(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-乙酸(酸C001)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C001(0.32g，99％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.29[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-丙酸(酸C002)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C002(0.28g，89％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z263.32[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C003)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C003(0.20g，70％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 291.37[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-苯基-丙酸(酸C004)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C004(0.17g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 339.4[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-4-甲基-戊酸(酸C005)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C005(0.31g，93％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 305.4[M++1]。
(S)-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-苯基-乙酸(酸C009)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C009(0.31g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 325.39[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C010)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C010(0.40g，87％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 355.4[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C011)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C011(0.40g，86％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 357.41[M++1]。
苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C012)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C012(0.52g，85％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 193.20[M++1]。
(S)-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(酸C013)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C013(0.66g，99％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-丁酸(酸C014)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C014(0.60g，91％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-3-苯基-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(酸C015)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C015(0.16g，88％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 283.33[M++1]。
(S)-4-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酸(酸C016)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C016(0.22g，91％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(2S,3S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酸(酸C017)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C017(0.56g，77％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(S)-3-羟基-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(酸C018)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C018(0.12g，56％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 223.23[M++1]。
(S)-苯基-苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C020)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C020(0.54g，80％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 269.30[M++1]。
(S)-苯基-苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C021)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C021(0.68g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 299.33[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C022)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C022(0.80g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z287.33[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-苯基-丙酸(酸C026)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C026(0.40g，66％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C032)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C032(0.50g，62％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z223.23[M++1]。
苯甲酰基氨基-乙酸(酸C034)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C034(0.35g，75％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 179.18[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-丙酸(酸C035)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C035(0.38g，77％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 193.20[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-丁酸(酸C036)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C036(0.40g，85％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 221.26[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-苯基-丙酸(酸C037)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C037(0.38g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 269.30[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-4-甲基-戊酸(酸C038)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C038(0.56g，59％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酸(酸C039)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C039(0.80g，89％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-羟基-丙酸(酸C040)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C040(0.13g，60％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 209.20[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C042)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C042(0.80g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z285.30[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C043)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C043(0.60g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z287.29[M++1]。
2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-2-甲基-丙酸(酸C044)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C044(0.45g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 277.34[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-丁酸(酸C045)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C045(0.38g，84％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3,3-二甲基-丁酸(酸C046)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C046(0.28g，81％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-(4-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C047)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C047(0.28g，81％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-2-(3-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C048)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C048(0.63g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C049)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C049(0.39g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-3-甲基-2-(2-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酸(酸C050)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C050(0.50g，95％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z235.25[M++1]。
方案-3[C030的合成]：
Figure BDA0002699152330001071
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-戊二酸1-苄酯5-乙酯的合成[方案-3，步骤-15]：向搅拌的化合物18(2.50g，7.41mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入化合物K2CO3(2.04g，14.8mmol)，然后加入EtI(1.19mL，14.8mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过监测和TLC LC-MS(40％EtOAc-己烷，Rf-0.6)]，使反应混合物分配在EtOAc(75mL)与冷水(100mL)之间。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到化合物19(2.3g，收率：89％)，为棕色半固体。质量[ESI]：m/z 365.43[M++1]。
(S)-2-氨基-戊二酸1-苄酯5-乙酯的合成[方案3，步骤-16]：在0℃在惰性气氛中向19[2.3g，6.29mmol]在二噁烷[10mL]中的溶液中加入4(M)HCl在二噁烷[5mL]。然后将得到的混合物在rt再搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，用饱和Na2CO3溶液中和反应混合物，使其分配在EtOAc(50mL)与水(75mL)之间。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到化合物20(1.5g，收率：90％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 265.31[M++1]。照此不经进一步纯化使用粗酯。
(S)-2-乙酰基氨基-戊二酸1-苄酯5-乙酯的合成[方案3，步骤-17]：在室温向搅拌的化合物20(1.50g，5.65mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入AcOH(0.286g，4.99mmol)、hunig碱(4.35mL，25.0mmol)。最终，在冰冷条件下一次性加入EDC.HCl(1.24g，6.49mmol)和HOBT(1.01g，7.49mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC监测]，用DCM稀释反应混合物，用过量水洗涤。然后用水和盐水洗涤有机层。干燥有机部分(MgSO4)，浓缩，得到粗物质。使粗物质通过柱色谱法纯化(25-35％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物21(0.60g，39％)，为无色半固体。质量[ESI]：m/z 307.35[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-戊二酸5-乙酯的合成[方案3，步骤-18]：向搅拌的化合物21(0.600g，1.37mmol)在EtOH(10mL)中的溶液中加入Pd/C粉末(180mg，50％湿)，将得到的反应混合物在H2气囊压力气氛中在室温搅拌16h。然后使反应混合物通过硅藻土床，减压浓缩滤液部分，得到化合物22(0.29g，98％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-4-乙酰基氨基-4-{(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基氨基甲酰基}-丁酸乙酯的合成[方案3，步骤-19]：向搅拌的化合物22(74mg，0.34mmol)和中心骨架(150mg，0.341mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入DIPEA(0.36mL，2.0mmol)，然后添加TBTU(164mg，0.511mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。反应完成时(通过LC-MS和TLC证实)，用DCM稀释反应混合物，用过量水洗涤。然后用水和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，浓缩，得到粗物质。使粗物质通过柱色谱法纯化(1-5％MeOH-DCM，SiO2)，得到化合物23(80mg，39％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 525.57[M++1]。
(S)-4-乙酰基氨基-4-{(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基氨基甲酰基}-丁酸(C030)的合成[方案3，步骤-20]：向搅拌的化合物23(80mg，0.15mmol)在THF(3mL)：水(1mL)：MeOH(1mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(25.5mg，0.609mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16小时。完成后[使用LC-MS和TLC监测(5％MeOH-DCM，Rf-0.1)]，浓缩反应混合物，用水稀释得到的粗产物，用EtOAc[15mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc萃取[10mLX2]，减压浓缩。使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到5mg较慢洗脱的C030异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 497.51[M++1]。
(S)-4-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-4-{(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基氨基甲酰基}-丁酸(C008)的合成：按照与用于酸C030的相同方案合成了该化合物.制备型HPLC纯化得到1.2mg较快洗脱的C008异构体[异构体1]，为白色固体；以及5mg较慢洗脱的C008异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 629.70[M++1]。
(S)-4-{(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基氨基甲酰基}-4-苯基乙酰基氨基-丁酸(C019)的合成：按照与用于酸C030的相同方案合成了该化合物.制备型HPLC纯化得到2mg较慢洗脱的C019异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 573.61[M++1]。
(S)-4-苯甲酰基氨基-4-{(2S,5S)-4-氧代-2-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-5-基氨基甲酰基}-丁酸(C041)的合成：按照与用于酸C030的相同方案合成了该化合物.制备型HPLC纯化得到3mg较慢洗脱的C0041异构体[异构体2]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.59[M++1]。
酸对应物合成的通用条件：
按照与方案-2步骤12和13中所提及的相同方案合成了下面提及的酸对应物。
(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-乙酸(酸C001)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C001(0.32g，99％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.29[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-丙酸(酸C002)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C002(0.28g，89％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z263.32[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C003)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C003(0.20g，70％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 291.37[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-苯基-丙酸(酸C004)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C004(0.17g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 339.4[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-4-甲基-戊酸(酸C005)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C005(0.31g，93％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 305.4[M++1]。
(S)-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-苯基-乙酸(酸C009)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C009(0.31g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 325.39[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C010)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C010(0.40g，87％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 355.4[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C011)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C011(0.40g，86％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 357.41[M++1]。
苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C012)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C012(0.52g，85％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 193.20[M++1]。
(S)-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(酸C013)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C013(0.66g，99％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-丁酸(酸C014)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C014(0.60g，91％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-3-苯基-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(酸C015)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C015(0.16g，88％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 283.33[M++1]。
(S)-4-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酸(酸C016)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C016(0.22g，91％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(2S,3S)-3-甲基-2-苯基乙酰基氨基-戊酸(酸C017)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C017(0.56g，77％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(S)-苯基-苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C020)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C020(0.54g，80％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 269.30[M++1]。
(S)-苯基-苯基乙酰基氨基-乙酸(酸C021)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C021(0.68g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 299.33[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C022)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C022(0.80g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z287.33[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-苯基-丙酸(酸C026)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C026(0.40g，66％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-乙酰基氨基-苯基-乙酸(酸C031)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C031(0.50g，76％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 193.2[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C032)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C032(0.50g，62％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z223.23[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C033)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C033(0.6g，70％)，为白色固体。将粗酸照此不经进一步纯化使用。质量[ESI]：m/z225.21[M++1]。
苯甲酰基氨基-乙酸(酸C034)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C034(0.35g，75％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 179.18[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-丙酸(酸C035)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C035(0.38g，77％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 193.20[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-丁酸(酸C036)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C036(0.40g，85％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 221.26[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-苯基-丙酸(酸C037)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C037(0.38g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 269.30[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-4-甲基-戊酸(酸C038)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C038(0.56g，59％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酸(酸C039)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C039(0.80g，89％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酸(酸C042)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C042(0.80g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z285.30[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-(4-氟-苯基)-丙酸(酸C043)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C043(0.60g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z287.29[M++1]。
2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-2-甲基-丙酸(酸C044)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C044(0.45g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 277.34[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-丁酸(酸C045)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C045(0.38g，84％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 207.23[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3,3-二甲基-丁酸(酸C046)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C046(0.28g，81％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-2-(4-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C047)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C047(0.28g，81％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-2-(3-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C048)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C048(0.63g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C049)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C049(0.39g，82％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z239.25[M++1]。
(S)-3-甲基-2-(2-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酸(酸C050)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C050(0.50g，95％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z235.25[M++1]。
(S)-3-甲基-2-(3-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酸(酸C051)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C051(0.65g，86％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(S)-3-甲基-2-(4-甲基-苯甲酰基氨基)-丁酸(酸C052)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C052(0.60g，95％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(2S,3R)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酸(酸C053)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C053(0.63g，95％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z235.29[M++1]。
(2S,3R)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸(酸C054)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C054(0.43g，90％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 305.40[M++1]。
(S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C057)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C057(0.76g，99％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z177.18[M++1]。
(2S,3S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸(酸C059)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C059(0.80g，98％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 191.20[M++1]。
(2S,3S)-2-(2-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酸(酸C060)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C060(0.63g，88％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 265.31[M++1]。
(2S,3S)-2-(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酸(酸C061)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C061(0.63g，83％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 265.31[M++1]。
(2S,3S)-2-(3-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酸(酸C062)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C062(0.70g，93％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 265.31[M++1]。
(S)-2-(2-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C063)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C063(0.46g，81％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 251.28[M++1]。
(S)-2-(3-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C064)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C064(0.43g，61％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 251.28[M++1]。
(S)-2-(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-丁酸(酸C065)的合成：按照与用于酸C006的相同方案合成了该化合物，得到酸C065(0.58g，96％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 251.28[M++1]。
方案-4[酸C025的合成]：
Figure BDA0002699152330001151
(S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酸苄酯的合成[方案-4，步骤-21]：向搅拌的化合物24(3.79g，9.99mmol)和AcOH(0.50g，8.33mmol)在DCM(15ml)中的溶液中加入EDC.HCl(2.075g,10.82mmol)、HOBT(1.69g，12.5mmol)、DIPEA(7.25ml，41.6mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtAOc[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和50-60％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂出得到的粗产物，得到化合物25，为灰白色固体(1.50g，72.3％)。质量[ESI]：m/z 250.3[M++1]
(S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酸(酸C025)的合成[方案-4，步骤-22]：向搅拌的化合物25(1.50g，6.04mmol)在EtOH(25ml)中的溶液中加入Pd/C粉末(400mg，50％湿)，将得到的反应混合物在H2气囊压力气氛中在室温搅拌16h。然后通过硅藻土床过滤反应混合物，减压浓缩滤液部分，得到酸C025(0.50g，52％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
乙酰基氨基-乙酸(酸C023)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C023(0.25g，62％)，为灰白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-2-乙酰基氨基-丙酸(酸C024)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C024(0.21g，89％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1HNMR相符]。
(S)-2-乙酰基氨基-4-甲基-戊酸(酸C027)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C027(0.65g，98％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-戊酸(酸C028)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C028(0.45g，40％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-羟基-丙酸(酸C029)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C029(0.45g，85％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-戊酸(酸C066)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C066(0.57g，68％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-3-羰基)-氨基]-戊酸(酸C067)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C067(0.14g，97％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-3-甲基-2-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-戊酸(酸C068)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C068(0.65g，99％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-3-甲基-2-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-丁酸(酸C069)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C069(0.70g，98％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-3-甲基-2-[(吡啶-3-羰基)-氨基]-丁酸(酸C070)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C070(0.16g，90％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(S)-3-甲基-2-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-丁酸(酸C071)的合成：按照与用于酸C025的相同方案合成了该化合物，得到酸C071(0.71g，99％)，为白色固体。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
方案-5：[酸C007的合成]
Figure BDA0002699152330001171
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-羟基-丙酸叔丁酯的合成[方案-5，步骤-23]：向搅拌的商品氨基酯(26)(432mg，2.19mmol)和苯并噻吩2-乙酸(300mg，1.56mmol)在DCM(15ml)中的溶液中加入EDC.HCl(389mg，2.03mmol)，HOBT(316mg，2.34mmol)，DIPEA(1.36ml，7.80mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtOAc[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和50-60％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂纯化得到的粗产物，得到化合物27，为灰白色固体(400mg，76.4％)。质量[ESI]：m/z 335.41[M++1]
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-羟基-丙酸(酸C007)的合成[方案-5，步骤-24]：向搅拌的中间体(27)(150mg，0.45mmol)在DCM(6ml)中的溶液中加入TFA(2mL)，将得到的反应混合物在惰性气氛中在室温搅拌1h。然后减压浓缩该反应混合物，用正戊烷洗涤，得到酸C007(130mg，TFA盐)，为粘性固体。[1H NMR相符]。
方案-6[酸C040的合成]：
Figure BDA0002699152330001181
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-羟基-丙酸苄酯的合成[方案-6，步骤-25]：向搅拌的L-丝氨酸苄酯(28)(1.33g，5.73mmol)和苯甲酸(2a)(0.50g，4.09mmol)在DCM(15ml)中的溶液中加入EDC.HCl(1.02g，5.32mmol)、HOBT(0.830g，6.14mmol)、DIPEA(3.57ml，20.46mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtAOc[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和50-60％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂出得到的粗产物，得到(29)(1.00g，81.6％)，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 369.44[M++1]
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-羟基-丙酸的合成[方案-6，步骤-26]：在冰冷条件下向搅拌的化合物29(300mg，1.00mmol)在THF(6mL)：甲醇(2mL)：水(2mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(96.1mg，4.01mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌3小时。完成后[使用LC-MS监测]，浓缩反应混合物，用水[50mL]稀释得到的粗产物，用EtOAc[50mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc萃取[50mLX2]。用盐水洗涤合并的有机层[30mL]，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到酸C040(125mg，59.6％]。质量[ESI]：m/z279.32[M++1]。
(S)-3-羟基-2-苯基乙酰基氨基-丙酸(C018)的合成：按照与用于酸C040的相同方案合成了该化合物，得到酸C018(0.12g，56.1％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 223.23[M++1]。
方案-7[酸C082的合成]：
Figure BDA0002699152330001191
在0-5℃(S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酸苄酯的合成[方案7，步骤-27]：向搅拌的化合物30(400mg，3.47mmol)在MeOH[10mL]中的溶液中加入乙酰氯[3.72mL，52.1mmol]，搅拌45分钟。然后使温度升至50℃，将反应混合物搅拌16h。完成后[使用TLC监测]，分配反应混合物，用饱和碳酸钠[100mL]碱化，用EtOAc萃取[3x100 mL]。分离合并的有机部分，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到180mg化合物31，为黄色固体。[1H NMR相符]。
(S)-苯甲酰基氨基-环丙基-乙酸甲酯的合成[方案7，步骤-28]：向搅拌的商品氨基酯(31)(180mg，1.39mmol)和苯甲酸(170mg，1.39mmol)在DCM(10ml)中的溶液中加入EDC.HCl(347mg，1.81mmol)、HOBT(282mg，2.09mmol)、DIPEA(1.21ml，6.97mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在DCM[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和10-20％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂纯化得到的粗产物，得到化合物32(80mg，24％)，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 233.26[M++1]
(S)-苯甲酰基氨基-环丙基-乙酸的合成[方案7，步骤29]：在冰冷条件下向搅拌的化合物32(80mg，1.53mmol)在THF：水：MeOH{10mL，3：1：1]中的溶液中加入LiOH.H2O(40mg，1.0mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌3h。完成后，用1(N)HCl水溶液将反应混合物酸化至pH 2-3，用EtOAc萃取[50mLX2]。用盐水洗涤合并的有机层[30mL]，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到酸C082(65mg，86％)。质量[ESI]：m/z 219.23[M++1]。
(S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-乙基-戊酸(酸C072)的合成：按照与用于酸C082的相同方案合成了该化合物，得到酸C072(0.20g，84％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 319.43[M++1]。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-乙基-戊酸(酸C073)的合成：按照与用于酸C082的相同方案合成了该化合物，得到酸C073(0.13g，76％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(S)-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-环戊基-乙酸(酸C075)的合成：按照与用于酸C082的相同方案合成了该化合物，得到酸C075(0.35g，91％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 317.41[M++1]。
(S)-苯甲酰基氨基-环戊基-乙酸(酸C076)的合成：按照与用于酸C082的相同方案合成了该化合物，得到酸C076(0.50g，81％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 247.30[M++1]。
(S)-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-环己基-乙酸(酸C078)的合成：按照与用于酸C082的相同方案合成了该化合物，得到酸C078(0.76g，92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 331.44[M++1]。
(S)-苯甲酰基氨基-环丙基-乙酸(酸C084)的合成：按照与用于酸C080的相同方案合成了该化合物，得到酸C084(0.07g，86％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 219.24[M++1]。
方案-8[酸C081的合成]：
Figure BDA0002699152330001201
(S)-氨基-环丙基-乙酸的合成[方案8，步骤-30]：在0-5℃下向搅拌的化合物33(300mg，2.60mmol)在2(M)NaOH水溶液[8mL]中的溶液中加入boc酸酐(0.72mL，3.1mmol)。然后将反应混合物逐步温热至室温，搅拌16h。完成后，用1(N)HCl水溶液将反应混合物的pH调整至3-4，即刻用EtOAc[3x50 mL]萃取反应混合物。分离有机层；干燥[MgSO4]，浓缩，得到化合物34[280mg，49.9％]，为灰白色固体。[1H NMR相符]。
(S)-叔丁氧基羰基氨基-环丙基-乙酸苄酯的合成[方案8，步骤-31]：向搅拌的化合物34(280mg，1.30mmol)在丙酮(10mL)中的溶液中加入K2CO3(435mg，3.15mmol)，随后在室温在氩气气氛中缓慢地添加BnBr(389mg，2.28mmol)。然后将得到的反应混合物逐步温热至回流，搅拌16h。完成时(通过TLC和LCMS证实)，蒸发反应混合物至干，使其分配在水[50mL]与EtOAc(3x50 mL)之间。分离有机层，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和0-10％EtOAc-己烷作为洗脱液纯化得到的粗产物，得到化合物35[270mg，67.9％]，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 305.36[M++1]。
(S)-氨基-环丙基-乙酸苄酯的合成[方案8，步骤-32]：在室温在氩气气氛中向搅拌的化合物35(280mg，0.917mmol)在3mL二噁烷中的溶液中加入6mL 4(M)HCl的二噁烷溶液，在室温搅拌2h。完成后(通过TLC和LCMS证实)，用饱和Na2CO3水溶液[50mL]碱化反应混合物，用EtOAc(3x 75mL)萃取。分离有机层，用水[50mL]、盐水[50mL]洗涤，然后干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物36[180mg，95.6％]，为黄色液体。质量[ESI]：m/z 205.25[M++1]。
(S)-氨基-环丙基-乙酸苄酯的合成[方案8，步骤-33]：在室温在氩气气氛中向搅拌的化合物36(130mg，0.633mmol)在10mL DCM中的溶液中加入Et3N(0.15mL，1.07mmol)。将得到的混合物冷却至0℃，将Ac2O(0.15mL,1.6mmol)缓慢地加到反应混合物中。添加后，将反应混合物温热至室温，搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC证实]，使反应混合物分配在水[100mL]与DCM[3x 75mL]之间。分离有机层；用盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，蒸发。通过柱色谱法纯化得到的粗产物(洗脱液：30-60％EtOAc-己烷，吸附剂硅胶-100-200目)，得到化合物37[80mg，51％]，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 247.29[M++1]。
(S)-氨基-环丙基-乙酸苄酯的合成[方案8，步骤-34]：向搅拌的化合物37(90mg，0.36mmol)在8mL EtOH中的溶液中加入50mg 10％重量的Pd/C(湿)粉末，将得到的混悬液在H2气囊压力气氛中在室温搅拌13h。完成后(通过TLC证实)，通过硅藻土床过滤反应混合物，再用EtOAc[50mL]和EtOH[50mL]洗涤床。减压浓缩滤液，得到酸C081[60mg，粗化合物]，为灰白色胶状物。[1H NMR相符]。
(S)-苯甲酰基氨基-环丙基-乙酸(酸C083)的合成：按照与用于酸C081的相同方案合成了该化合物，得到酸C083(0.07g，86％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 219.24[M++1]。
方案-9[酸C077的合成]：
Figure BDA0002699152330001221
(S)-氨基-环戊基-乙酸苄酯的合成[方案9，步骤-35]：在rt在氮气气氛中向搅拌的化合物38(500mg，3.49mmol)在10mL苯中的溶液中加入p-TsOH(721mg，4.19mmol)和苄醇(1.08mL，10.5mmol)。然后将得到的反应混合物加热至回流，在相同条件下持续16h。完成后(通过TLC和LCMS证实)，减压浓缩反应混合物，使得到的粗产物分配在水[10mL]与EtOAc(3x75mL)之间。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗化合物39[750mg]，为淡黄色液体。[1H NMR相符]。
(S)-氨基-环戊基-乙酸苄酯的合成[方案9，步骤-36]：向搅拌的化合物39(450mg，1.93mmol)，AcOH(0.11mL，1.93mmol)和HOBt(391mg，2.89mmol)在15mL DCM中的溶液中滴加DIPEA(1.68mL，9.64mmol)，在0℃在惰性气氛中搅拌10min。向得到的混合物中加入EDC-HCl(480.667mg，2.507mmol)，将该反应体系在rt搅拌16h。完成后(通过TLC和LCMS证实)，使反应混合物分配在水[100mL]与DCM[3x 70mL]之间。分离有机层，用盐水洗涤[50mL]，干燥[MgSO4]，浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物(洗脱液：20-30％EA-己烷，吸附剂SiO2)，得到化合物40[350mg，65.9％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z275.34[M++1]。
(S)-乙酰基氨基-环戊基-乙酸的合成[方案9，步骤-37]：向搅拌的化合物40(350mg，1.27mmol)在5mL EtOH中的溶液中加入80mg 10％重量Pd/C(湿)粉末，将得到的混悬液在H2气囊压力气氛中在室温搅拌13h。完成后(通过TLC证实)，通过硅藻土床过滤反应混合物，再用EtOAc[50mL]和EtOH[50mL]洗涤床。减压浓缩滤液，得到酸C077[200mg,粗化合物]，为白色固体。[1H NMR相符]。
(S)-乙酰基氨基-环己基-乙酸(酸C080)的合成：按照与用于酸C077的相同方案合成了该化合物，得到酸C080(151mg，99.5％)，为白色固体。[1H NMR相符]。
方案10[合成酸C074]：
Figure BDA0002699152330001231
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-乙基-戊酸的合成[方案10，步骤-38]：在0-5℃下向搅拌的化合物41(200mg，1.38mmol)在2(M)NaOH水溶液[4mL]中的溶液中加入boc酸酐(0.38mL，1.65mmol)。然后使反应混合物逐步温热至室温，搅拌16h。完成后，使用1(N)HCl水溶液将该反应混合物的pH调整至3-4，即刻用EtOAc[3x50 mL]萃取反应混合物。分离有机层；干燥[MgSO4]，浓缩，得到化合物42[250mg，74％]，为灰白色固体。[1H NMR相符]。
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-乙基-戊酸苄酯的合成[方案10，步骤-39]：向搅拌的化合物42(250mg，1.02mmol)在丙酮(5mL)中的溶液中加入K2CO3(341mg，2.47mmol)，然后在室温在氩气气氛中缓慢添加BnBr(0.21mL，1.78mmol)。然后使得到的反应混合物逐步温热至回流，搅拌16h。完成时(通过TLC和LCMS证实)，蒸发反应混合物至干，分配在水[50mL]与EtOAc(3x50 mL)之间。分离有机层，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物使用硅胶100-200目作为吸附剂和0-10EtOAc-己烷作为洗脱液，得到化合物43[200mg，51.5％]，为灰白色胶状物。质量[ESI]：m/z 335.45[M++1]。
(S)-2-氨基-3-乙基-戊酸苄酯的合成[方案10，步骤-40]：在室温在氩气气氛中向搅拌的化合物43(0.20g 0.60mmol)在3mL二噁烷中的溶液中加入6mL 4(M)HCl的二噁烷溶液，在室温搅拌2h。完成后(通过TLC和LCMS证实)，用饱和Na2CO3水溶液[50mL]碱化反应混合物，用EtOAc(3x 75mL)萃取。分离有机层，用水[50mL]、盐水[50mL]洗涤，然后干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物44[200mg]，为HCl盐。质量[ESI]：m/z 235.33[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-乙基-戊酸苄酯的合成[方案10，步骤-41]：向搅拌的化合物44(200mg，0.85mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入化合物AcOH(0.05mL，0.85mmol)、EDC.HCl(212mg，1.11mmol)、HOBT(172mg，1.28mmol)、DIPEA(0.74mL，1.25mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC监测(30％EtOAc-己烷，Rf-0.3)]，使反应混合物分配在DCM(50mL)与水(30mL)之间。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩。通过色谱法纯化粗产物(0-20％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物45(100mg，收率：42.4％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 277.37[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-乙基-戊酸的合成[方案10，步骤-42]：向搅拌的化合物45(100mg，0.36mmol)在5mL EtOH中的溶液中加入30mg10％重量Pd/C(湿)粉末，将得到的混悬液在H2气囊压力下在室温搅拌13h。完成后(通过TLC证实)，使反应混合物通过硅藻土床，用EtOAc[50mL]和EtOH[50mL]进一步洗涤床。减压浓缩滤液，得到酸C074[30mg，67.5％]，为灰白色胶状物。[1H NMR相符]。
方案-11[酸C055的合成]
Figure BDA0002699152330001251
(Z)-4,4,4-三氟-2-甲酰基氨基-3-甲基-丁-2-烯酸甲酯的合成[方案-11，步骤-43]：在-60℃在惰性气氛中向搅拌的无水NaOtBu(2.13gm，22.2mmol)在THF(20ml)中的溶液中滴加甲基-2-异氰酰基乙酸酯(1.83ml，20.2mmol)在5ml THF中的溶液，历时5min，在相同温度下将该反应混合物搅拌30min。此后，在-60℃将在5ml THF中的化合物46(2.33ml，25.6mmol)加到反应混合物中，将该反应混合物再搅拌1小时，然后使温度逐步增加至室温。完成后[通过TLC(40％EtOAc-己烷，Rf-0.4)和LC-MS监测]；用1(N)HCl水溶液使反应混合物淬灭至pH 4-5，将该混合物搅拌1小时。然后使反应混合物分配在EtOAc[5x 50mL]与水[75mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物，使用硅胶100-200目作为吸附剂和20-30％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物47(1.4g，33％)，为无色油状物。质量[ESI]：m/z 211.14[M++1]。
4,4,4-三氟-2-甲酰基氨基-3-甲基-丁酸甲酯的合成[方案11，步骤-44]：向混悬的化合物47(1.40g，6.63mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中10％Pd/C粉(750mg，湿)，将该反应混合物经历帕尔摇瓶55Psi H2压力16h。完成后[通过TLC(70％EtOAc-己烷，Rf-0.1)和LC-MS监测]，使该反应混合物通过硅藻土床，减压浓缩滤液部分，得到化合物48(1.2g，85％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 213.16[M++1]。
4,4,4-三氟-2-甲酰基氨基-3-甲基-丁酸甲酯(HCl盐)的合成[方案-11，步骤-45]：向搅拌的化合物48(1.00g，4.68mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入浓HCl(0.187ml，6.09mmol)，将该反应混合物在55℃在惰性气氛中加热4小时。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，减压蒸发该反应混合物，得到固体物质，用乙醚洗涤，得到粗化合物49(1.1g)，为HCl盐。
2-苯甲酰基氨基-4,4,4-三氟-3-甲基-丁酸甲酯的合成[方案11，步骤-46]：向搅拌的苯甲酸(0.10g，0.82mmol)和化合物49(0.17g，0.90mmol)在DCM(4mL)中的溶液中加入DIPEA(0.71mL，4.1mmol)，然后添加HOBT(0.15g，1.1mmol)和EDC.HCl(0.24g，1.3mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC监测(30％EtOAc-己烷，Rf-0.4)]，使反应混合物分配在DCM(25mL)与水(15mL)之间。分离有机层，用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物(30％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物51(0.15mg，收率：62％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 289.26[M++1]。
2-苯甲酰基氨基-4,4,4-三氟-3-甲基-丁酸的合成[方案11，步骤-47]：向搅拌的化合物50(0.15g 0.51mmol)在THF(3mL)：MeOH(1mL)：H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(64.1mg，1.54mmol)，将得到的反应混合物在环境温度搅拌3小时。完成后[通过LC-MS监测]，减压蒸发甲醇。用水[25mL]稀释得到的粗产物，用EtOAc[25mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc[25mLX2]萃取。用水和盐水洗涤合并的有机层，用固体无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到酸C055(13mg，收率：92％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z275.23[M++1]。
方案-12[酸C058的合成]
Figure BDA0002699152330001271
(2-氟-乙氧基)-乙酸苄酯的合成[方案12，步骤-48]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的化合物51(0.26mL，4.37mmol)在5mL THF中的溶液中逐步加入NaH(60％，262mg，6.55mmol)，在相同温度下搅拌10min。将化合物52(0.69mL，4.36mmol)加到该反应混合物中，在10-15℃搅拌10min。TLC分析后[10％EtOAc/己烷、Rf 0.5，总反应时间：最长15-20min]，减压浓缩反应混合物，使得到的粗产物分配在EtOAc[150mL]与水[100mL]之间。分离有机部分，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，在2-8％EtOAc/己烷梯度洗脱下纯化由此得到的粗产物，得到期望的化合物，即化合物53(350mg，35.3％)，为无色液体。质量[ESI]：m/z 212.22[M++1]
(2-氟-乙氧基)-乙酸的合成[方案12，步骤-49]：向搅拌的化合物53(1.6g，7.539mmol)在10mL EtOH中的溶液中加入10％Pd/C(480mg，湿)粉末，将得到的反应混合物在H2气囊压力下在室温搅拌16h。然后使反应混合物通过C盐，减压浓缩滤液部分，得到化合物54(830mg，90％)，为浅棕色胶状液体。[1H NMR相符]
2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酸苄酯的合成[方案12，步骤-50]：向搅拌的化合物54(415mg，3.40mmol)、化合物55(1.34g，3..40mmol)和HOBt(689mg，5.10mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入DIPEA(2.96mL，16.99mmol)，在0℃在惰性气氛中搅拌10min。向得到的混合物中加入EDC.HCl(847mg，4.42mmol)，在室温持续反应16h。反应完成时(通过TLC和LCMS证实)，用DCM(2x10 mL)萃取该混合物，用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。通过柱色谱法纯化(10-35％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物56(670mg，63.2％)，为无色液体。质量[ESI]：m/z 325.38[M++1]
2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酸的合成[方案12，步骤-51]：向搅拌的化合物56(400mg，1.23mmol)在EtOH(8mL)中的溶液中加入和10％Pd/C(湿)(120mg,)粉末，将得到的反应混合物在H2气囊压力下在室温搅拌16h。然后使反应混合物通过硅藻土床，减压浓缩滤液部分，得到酸C058(270mg，93.3％)，为灰白色胶状液体。[1H NMR相符]。
(S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-丁酸(酸C056)的合成：按照与用于C058的相同方案合成了该化合物，得到酸C056(0.45g，97％)，为灰白色胶状物。[1H NMR相符]。
方案-13[C086的合成]
Figure BDA0002699152330001281
(2S,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案13，步骤-52]：向搅拌的化合物7(10.0g，28.9mmol)在DMF(30.0mL)中的溶液中加入K2CO3(11.98g，86.71mmol)，然后缓慢添加MeI(3.60mL，57.8mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS和TLC监测(20％EtOAc-己烷，Rf-0.7)]，使反应混合物分配在EtOAc(150mL)与水(75mL)之间。分离有机层，用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过色谱法纯化得到的粗产物(洗脱液0-10％EtOAc-己烷，吸附剂-SiO2)，得到化合物57(8.0g，77％)，为白色固体。[1H NMR相符]。
(2S,5S)-5-氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯(TFA盐)的合成[方案13，步骤-53]：在室温在氩气气氛中向搅拌的化合物57(5.00g，13.9mmol)在5mL DCM中的溶液中加入15mL TFA：DCM(1：1)，搅拌2h。反应完成时[通过LC-MS和TLC证实(20％EtOAc-己烷，Rf-0.1)]，减压浓缩反应混合物，与甲苯一起共沸(3-4次)，得到化合物58(5.50g，粗化合物)，为棕色胶状物。质量[ESI]：m/z 260.28[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案13，步骤-54]：向搅拌的化合物58(200mg，0.77mmol)和酸C086(134mg，0.85mmol)在2mL DMF中的溶液中滴加DIPEA(0.80mL，4.62mmol)，然后添加BOP试剂(680mg，1.54mmol)，在室温搅拌16h。完成后[用TLC监测]，使反应混合物分配在EtOAc(50mL)与水(50mL)之间。分离有机层，用水和盐水洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物59(0.18g，收率：58.3％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z401.47[M++1]。
(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸的合成[方案13，步骤-55]：在冰冷条件下向化合物59(180mg，0.45mmol)中THF：MeOH：水(6：2：2ml)中的溶液中加入LiOH.H2O(75mg，1.80mmol)，将得到的溶液在室温搅拌3h。完成后[用LC-MS监测]，浓缩反应混合物，用水[20mL]稀释得到的粗产物，用EtOAc[20mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc[50mLX2]萃取。用盐水[30mL]洗涤合并的有机层，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物60[140mg，收率-80.5％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 387.44[M++1]。
{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-乙酸甲酯的合成[方案13，步骤-56]：向搅拌的化合物60(140mg，0.36mmol)和氨基-乙酸甲酯(49.7mg，0.40mmol)在1.5mL DMF中的溶液中滴加DIPEA(0.38mL，2.17mmol)，然后在氩气气氛中在室温添加BOP试剂(319mg，0.72mmol)，搅拌16h。完成后(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到较快移动的异构体C086[25mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 458.52[M++1]。
(R)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯[C088]的合成：按照与用于酸C086的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12mg较快洗脱的主要C088异构体[12mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 472.55[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯[C090]的合成：按照与用于酸C086的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12mg较快洗脱的主要C090异构体[12mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 472.55[M++1]。
2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-3-羟基-丙酸甲酯[C091]的合成：按照与用于酸C086的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的C091作为主要异构体[4mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 488.55[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-琥珀酸二甲酯[C093]的合成：按照与用于酸C086的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的作为主要异构体的C093[20mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 530.58[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-戊二酸二甲酯[C095]的合成：按照与用于酸C086的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到4.5mg较快洗脱的C095主要异构体[4.5mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 544.61[M++1]。
方案-14[C085的合成]
Figure BDA0002699152330001311
{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-乙酸[C085]的合成：在0C向搅拌的C086(100mg，0.26mmol)在THF：甲醇：H2O＝3：1：1(5ml)中的溶液中加入LiOH.H2O(16.3mg，0.39mmol)，将该反应混合物在室温搅拌3h。根据LCMS，SM耗尽，形成期望的产物。反应完成时(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到较快移动的作为主要异构体C085[7mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 444.49[M++1]。
(R)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-丙酸[C087]的合成：按照与用于C085的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快移动的C087作为主要异构体[7.7mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 458.52[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-丙酸[C089]的合成：按照与用于C085的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的作为主要异构体的C089[3.8mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 458.52[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-琥珀酸[C092]的合成：按照与用于C085的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的作为主要异构体的C092[10mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 502.53[M++1]。
(S)-2-{[(2S,5S)-5-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基]-氨基}-戊二酸[C094]的合成：按照与用于C085的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的作为主要异构体的C094[10mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 502.53[M++1]。
方案-15[C104的合成]：
Figure BDA0002699152330001321
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸甲酯的合成[方案-15，步骤-58]：向搅拌的化合物58(4.00g，10.7mmol)，酸C104(2.52g，10.7mmol)在10mL DMF中的溶液中滴加DIPEA(9.28mL，53.5mmol)，在室温搅拌在惰性气氛中10min。然后将BOP(9.46g，21.4mmol)加到该反应混合物中，在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(70％EtOAc-己烷，Rf-0.3)和LC-MS证实]，使反应混合物分配在EtOAc(150mL)与水(75mL)之间。分离有机层，盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过色谱法纯化得到的粗产物(50-75％EtOAc-己烷，SiO2)，得到化合物61(3.25g，77.1％)，为灰白色固体。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸的合成[方案-15，步骤-59]：在冰冷条件下向搅拌的化合物61(3.90g，8.18mmol)在THF(24mL)：MeOH(8mL)：水(8mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(343mg，2.29mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌2小时。完成后[通过LC-MS和TLC监测10％MeOH-DCM，Rf-0.2]。浓缩反应混合物，用水[50mL]稀释，用EtOAc[50mL]洗涤。分离水层，用1(N)HCl水溶液酸化至pH 2-3，用EtOAc[50mLX2]萃取。用盐水洗涤合并的有机层，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物62(3.2g，84％)，为白色固体。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-吡咯-2-基甲基)-酰胺(C104)的合成[方案-15，步骤-60]：向搅拌的化合物62(100mg，0.216mmol)和胺C104(26.6mg，0.238mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.23mL，1.3mmol)，然后添加BOP(191mg，0.432mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后(通过LC-MS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到20mg较快洗脱的主要异构体C104[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z541.63[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(呋喃-2-基甲基)-酰胺[C105“”]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到25mg较快洗脱的C105的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 542.61[M++1]
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噻吩-2-基甲基)-酰胺[C106“”]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C106的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 558.68[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-吡咯-3-基甲基)-酰胺[C107“”]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C107的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 541.63[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(呋喃-3-基甲基)-酰胺[C108“”]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C108的异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 542.61[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噻吩-3-基甲基)-酰胺[C109]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的主要C109异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 558.68[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(3H-咪唑-4-基甲基)-酰胺[C110]：的合成按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到25mg较快洗脱的主要C110异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 542.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噁唑-5-基甲基)-酰胺[C111]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的主要C111异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.60[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噻唑-5-基甲基)-酰胺[C112]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的主要C112异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.66[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噁唑-4-基甲基)-酰胺[C114]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到45mg较快洗脱的主要C114异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.60[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(噻唑-4-基甲基)-酰胺[C115]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到35mg较快洗脱的主要C115异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.66[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-吡唑-4-基甲基)-酰胺[C116]：的合成按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到20mg较快洗脱的主要C116异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 542.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(异噁唑-4-基甲基)-酰胺[C117]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的主要C117异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.60[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(异噻唑-4-基甲基)-酰胺[C118]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的主要C118异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.66[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C119]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到40mg较快洗脱的C119主要异构体，为白色固体；以及5mg较慢洗脱的C119异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z 573.66[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸[2-(3H-[1,2,3]三唑-4-基)-乙基]-酰胺[C120]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的主要C120异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 557.63[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺[C121]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到25mg较快洗脱的主要C121异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 553.64[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(吡啶-3-基甲基)-酰胺[C122]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到20mg较快洗脱的主要C122异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 553.64[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(吡啶-4-基甲基)-酰胺[C123]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到25mg较快洗脱的主要C123异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 553.64[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸2-甲基-苄基酰胺[C127]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到111mg较快洗脱的主要C127异构体，为白色固体，还分离了20mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z 566.68[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸3-甲基-苄基酰胺[C128]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到130mg较快洗脱的主要C128异构体，为白色固体；以及10mg较慢洗脱的C128异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z566.68[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸4-甲基-苄基酰胺[C129]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到36mg较快洗脱的主要C129异构体，为白色固体；以及10mg较慢洗脱的C129异构体[异构体2]。质量[ESI]：m/z566.68[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸2-氯-苄基酰胺[C130]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到25mg较快洗脱的主要C130异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 587.10[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸3-氯-苄基酰胺[C131]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到45mg较快洗脱的主要C131异构体，为白色固体，还分离了3mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z 587.10[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸4-氯-苄基酰胺[C132]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到90mg较快洗脱的主要C132异构体，为白色固体，还分离了2mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z 587.10[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(吡啶-3-基甲基)-酰胺[C133]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到32mg较快洗脱的主要C133异构体，为白色固体，还分离了8mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z621.53[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(2H-吡唑-3-基甲基)-酰胺[C149]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到32mg较快洗脱的主要C149异构体，为白色固体，还分离了8mg较慢洗脱的异构体。质量[ESI]：m/z542.62[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(2H-[1,2,4]三唑-3-基甲基)-酰胺[C163]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到30mg较快洗脱的主要C163异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 543.60[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(5-羟基-2H-[1,2,4]三唑-3-基甲基)-酰胺[C164]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到8.5mg较快洗脱的主要C164异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.60[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(3-氟-丙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C145]的合成：按照与用于C104的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到39mg较快洗脱的主要C145异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 559.60[M++1]。
方案-16：[C162的合成]
Figure BDA0002699152330001391
(2S,3S)-2-(2-1H-苯并咪唑-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸苄酯的合成[方案-16，步骤-77]：向搅拌的化合物80(甲苯磺酸盐)(536mg，1.36mmol)、化合物79(200mg，1.13mmol)和HOBt(230mg，1.70mmol)在5mL DCM中的溶液中滴加DIPEA(0.99mL，5.7mmol)，在0℃在惰性气氛中搅拌10min。然后将EDC-HCl(283mg，1.48mmol)加到该反应混合物中，在室温搅拌16h。完成后[通过TLC证实(70％EtOAc-己烷，Rf-0.4)和LC-MS]，使反应混合物分配在水(70mL)与DCM(3x60mL)之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物(洗脱液：30-65％EtOAc-己烷，SiO2)，得到化合物81(210mg，48.8％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 379.45[M++1]。
(2S,3S)-2-(2-1H-苯并咪唑-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸的合成[方案-16，步骤-78]：向搅拌的化合物81(210mg，0.553mmol)在4mL EtOH中的溶液中加入65mg 10％重量的Pd/C(湿)粉末，将得到的混悬液在常规氢气压力下(气囊)搅拌在室温16h。完成后[通过TLC(70％EtOAc-己烷，Rf-0.1和LC-MS证实]，使反应混合物通过硅藻土床，减压浓缩滤液部分，得到化合物82(0.15g，94％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 379.45[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-1H-苯并咪唑-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰的合成胺[方案-16，步骤-79]：向搅拌的82(72mg，0.325mmol)和中心骨架(100mg，0.227mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.198mL，1.14mmol)，然后添加BOP试剂(201mg，0.454mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[用LC-MS监测]，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到20mg较快洗脱的主要C162异构体[异构体1]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 597.68[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-1H-吲哚-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：[(C161)]的合成：按照与用于C162的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到20mg较快洗脱的主要C161异构体[异构体1]，为淡橙色固体。质量[ESI]：m/z 596.69[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：[(C158)]的合成：按照与用于C162的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到7mg较快洗脱的主要C158异构体[异构体1]，为淡橙色固体。质量[ESI]：m/z 613.74[M++1]。
(2S,5S)-5-[(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-2-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：[(C160)]的合成：按照与用于C162的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到8mg较快洗脱的主要C160异构体[异构体1]，为淡橙色固体。质量[ESI]：m/z 598.65[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：[(C140)]的合成：按照与用于C162的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5.1mg较快洗脱的主要C140异构体[异构体1]，为淡黄色固体。质量[ESI]：m/z 562.59[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[(6-氟-吡啶-4-羰基)-氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：[(C141)]的合成：按照与用于C162的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5mg较快洗脱的主要C141异构体[异构体1]，为淡黄色固体。质量[ESI]：m/z 562.59[M++1]。
方案-17：[C171的合成]
Figure BDA0002699152330001411
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸的合成[方案-17，步骤-80]：向搅拌的62(100mg，0.22mmol)在DCM(3ml)中的溶液中加入N-羟基琥珀酰亚胺(24.8mg，0.22mmol)，然后添加EDC.HCl(124.2mg，0.648mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌2h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水(50mL)与DCM(2x 50mL)之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到化合物83(70mg，58％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z560.58[M++1]
{[((2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基)-氨基]-甲基}-膦酸(C171)的合成[方案-17，步骤-81]向搅拌的化合物83(50.0mg，0.09mmol)在1mL DMF中的溶液中加入氨基甲基-膦酸(9.91mg，0.09mmol)和KHCO3(22.0mg，0.22mmol)在水(1mL)中的溶液。然后将该反应混合物在室温搅拌16h。完成后(通过LCMS证实)，使粗反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到较快移动的主要异构体C171[12mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z556.53[M++1]。
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(5-羟基-2H-吡唑-3-基甲基)-酰胺[C166]的合成：按照与用于C171的相同方案合成了该化合物，然而，在最终的步骤中，用DIPEA(5eq)替代KHCO3，仅将DMF用作溶剂。制备型HPLC纯化得到较快洗脱的主要异构体C166[12mg]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 558.62[M++1]。
方案-18[C170的合成]：
Figure BDA0002699152330001421
(2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1，2，4，5，6，7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基甲基)-酰胺的合成[方案-18，步骤-82]：向搅拌的62(100mg，0.216mmol)和84(46mg，0.24mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.23mL，1.3mmol)，然后添加BOP试剂(191mg，0.432mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。然后使反应混合物分配在EtOAc[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物85[100mg，粗]，为灰白色固体。1H NMR相符。
{[((2S,5S)-5-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-羰基)-氨基]-甲基}-硼酸(C170)的合成[方案-18，步骤-83]：向搅拌的85(100mg，0.166mmol)在THF[2mL]中的溶液中缓慢地加入水[1mL]、NaIO4(106mg，0.498mmol)，在室温搅拌3小时。然后将(1M)HCl水溶液[0.34mL]加到该反应混合物中，搅拌1小时。使反应混合物分配在EtOAc[150mL]与水[100mL]之间，分离有机层，干燥[MgSO4]，浓缩。通过反相制备型HPLC纯化得到的粗产物，得到5mg C170，为白色固体。质量[ESI]：m/z 520.35[M+-1]。
方案-19[C147&C148的合成]：
Figure BDA0002699152330001431
(2S,5S)-5-氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺(C147)的合成[方案-1，步骤-8]：C147实际上为来自方案1[步骤-8]的中心骨架。通过RP制备型HPLC进一步纯化100mg粗化合物，得到15mg C147，为白色固体。质量[ESI]：m/z 326.35[M+-1]。
(2S,5S)-5-乙酰基氨基-4-氧代-1,2,4,5,6,7-六氢-吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-2-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺(C148)的合成[方案-19，步骤-84]：向搅拌的84(100mg，0.227mmol)在DCM[5mL]中的溶液中缓慢地加入TEA(0.08mL，0.6mmol)，然后添加乙酐(0.02mL，0.22mL)，在室温搅拌16h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物直接进行RP制备型HPLC纯化，得到20mg C148，为白色固体。质量[ESI]：m/z368.38[M++1]。
实施例2：具有含氧核的化合物的合成
氧杂-吖庚因酮中心骨架的合成：
方案-20：含氧化合物的合成
Figure BDA0002699152330001441
一般说明：我们已经在吲哚至二氢吲哚的还原反应[方案-20，步骤-8]后分离了两种异构体，然而，对于分离的异构体，绝对立体化学未知。我们单独推进两种异构体[极性和非极性]，直至最终的酰胺化。由非极性异构体合成的最终化合物在所述测定法中总是有效。我们在所述实验中捕获了用于上部异构体[非极性]转化的方案且下部异构体[极性]的转化遵循类似物方案。
实验：
1-氟-3-碘-2-硝基-苯的合成[方案-20，步骤-1]：在60℃向预先加热的碘[244.23g，1923.1mmol]和叔丁腈[114.2ml，961.5mmol]在MeCN(300mL)中的溶液中加入化合物1[30.00g，192.3mmol]在MeCN(300mL)中的溶液。将该反应混合物在60℃再搅拌2h，在室温再搅拌16h。完成后[通过TLC监测[10％EtOAc-己烷，Rf＝0.5]，在冰冷条件下用饱和Na2S2O3水溶液[300mL]使该混合物淬灭，用EtOAc[3x500 mL]萃取。干燥合并的有机层(Na2SO4)，过滤，减压浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化残余物，使用0-3％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物2[39g，76％]，为黄色固体。[1H NMR相符]。
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3-碘-2-硝基-苯氧基)-丙酸的合成[方案-20，步骤-2]：向搅拌的NaH(50％)[3.60g，74.9mmol]在DMF[60mL]中的混悬液中缓慢地加入化合物3[15.3g，74.9mmol]在DMF[30mL]中的溶液中，维持外部温度低于-10℃。添加后，保持反应混合物在冷条件下剧烈搅拌半小时。在冷条件下将化合物2[20.0g，74.9mmol]在DMF[30mL]中的溶液缓慢地加到该反应混合物中，添加后，使反应混合物在室温温热，搅拌16h。然后用水[500mL]使该反应混合物淬灭，用EtOAc[2x100 mL]萃取水性部分。分离有机部分；在冰冷条件下用1N HCl水溶液将水性部分的pH缓慢地调整至2-3，即刻用EtOAc[2x300mL]萃取。分离有机部分，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到7.2g化合物，还回收了4.15g未反应的原料；在相同条件下进一步处理该物质，得到8.5g化合物4[总计16.1g，47.6％]。质量[ESI]：m/z 452.21[M+-1]
(S)-3-(2-氨基-3-碘-苯氧基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸的合成[方案-20，步骤-3，]：向搅拌的4[16.1g，35.6mmol]在AcOH[105mL]中的溶液中加入Fe粉[19.89g，356.2mmol]，将得到的不均匀混合物在80℃回流3.5h。完成后，使反应混合物分配在EtOAc[2x500 mL]与水[500mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。将得到的粗产物进一步与甲苯一起共沸，得到5[13.2g，87.8％]，为棕色松软固体。质量[ESI]：m/z 422.22[M++1]。
((S)-1-碘-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-4]：在室温在惰性气氛中向搅拌的化合物5[13.2g，31.3mmol]在DMSO[130mL]中的溶液中加入DIPEA[8.42mL，46.9mmol]，然后在冰冷条件下分2部分加入HATU[13.0g，34.4mmol]。在室温搅拌16h。完成后[通过TLC监测(30％EtOAc-己烷，Rf＝0.5)和LC-MS]，用EtOAc[3x100 mL]萃取反应混合物，用过量水[150mL]和盐水[100ml]洗涤。干燥合并的有机部分(Na2SO4)，过滤，减压浓缩，得到粗反应混合物。使得到的粗产物进行柱色谱[使用硅胶100-200目，在5-10％EtOAc-己烷]梯度洗脱条件下，得到化合物6[8.30g，65.6％]，为浅棕色固体。质量[ESI]：m/z 404.21[M++1]。
{(S)-1-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基]-8-氧代-6,7,8,9-四氢-5-氧杂-9-氮杂-苯并环庚烯-7-基}-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-5]：用氩气吹扫搅拌的化合物6[8.30g，20.5mmol]在DMF[35mL]中的溶液10min。在氩气气氛中向得到的混合物中加入化合物B[17.46g，102.7mmol]、TEA[10.1mL，71.9mmol]、CuI[0.39g，2.10mmol]和Pd(PPh3)2Cl2[1.4g，2.1mmol]，搅拌16h。完成后[通过TLC(20％EtOAc-己烷，Rf＝0.4)和LC-MS监测]，用水[300mL]稀释该反应混合物，用EtOAc[3x100 mL]萃取，干燥合并的有机部分(Na2SO4)，过滤，减压浓缩，得到粗反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在0-6％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物7[7.40g，80.6％]，为深红色半固体。质量[ESI]：m/z 446.62[M++1]。
[(S)-1-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-9-氧代-8,9-二氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基]-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-6]：用氩气吹扫搅拌的化合物7[6.60g，16.6mmol]在DCM[660mL]中的溶液10min。在冰冷条件下向得到的混合物中逐步加入Gold催化剂(Cas no：866641-66-9)[1.14g，1.50mmol]，在0℃搅拌6h。然后在接下来的16h将该反应混合物保持在冷藏箱中。完成后[通过TLC(10％EtOAc-己烷，Rf＝0.3)和LC-MS监测]，减压浓缩该反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在0-5％EtOAc-己烷的梯度洗脱条件下]，得到化合物8[2.00g，30.3％]，为胶状液体，还回收了2.5g未反应的原料[化合物7]。质量[ESI]：m/z 446.62[M++1]。
[(S)-1-羟基甲基-9-氧代-8,9-二氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基)]-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-7]：在0℃向搅拌的化合物8[3.7g，8.3mmol]在EtOH[45mL]中的溶液中加入对甲苯磺酸吡啶鎓[0.62g，2.50mmol]，使反应混合物达到室温，搅拌16h。LC-MS和TLC分析后[20％EtOAc-己烷，Rf＝0.2]，再向该反应混合物中加入对甲苯磺酸吡啶鎓[0.62g，2.50mmol]，在室温再搅拌30h。完成后[通过TLC(20％EtOAc-己烷，Rf-0.7)和LC-MS监测]，将反应混合物浓缩至干。使粗产物分配在水[50mL]与EtOAc[3x75mL]之间。分离有机层，用盐水洗涤[50mL]，干燥(MgSO4)，过滤，减压浓缩，得到粗反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在20-30％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物9[2.20g，79.8％]，为松软固体。质量[ESI]：m/z 332.36[M++1]。
((1S,8S)-1-羟基甲基-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-8]：用氩气吹扫搅拌的化合物9[2.20g，6.60mmol]在EtOH[40mL]中的溶液10分钟。然后将880mg Pd/C粉末[10％重量，湿]加到该反应混合物中，将得到的混悬液在H2气囊压力下在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(30％EtOAc-己烷，Rf＝0.4&0.3)和LC-MS监测]，使该混合物通过硅藻土床，用EtOH[40mL]洗涤，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在20-35％EtOAc-DCM梯度洗脱下]，得到～化合物10[1.07g，48.3％，无极性斑点；绝对立体化学未知]，为白色松软固体，和～化合物11[[500mg，极性斑点；绝对立体化学未知]。我们继续分离上部的异构体和下部的异构体，然而，得自上部的异构体的最终化合物具有生物活性。质量[ESI]：m/z 334.38[M++1]。
(1S,8S)-8-叔丁氧基羰基氨基-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸的合成[方案-20，步骤-9]：在室温向搅拌的化合物10(和11)[1.00g，2.99mmol]在ACN[12mL]和DMF[4mL]中的溶液中逐步加入NMO[1.4g，12mmol]和TPAP[105mg，0.29mmol]，搅拌2h。完成后[通过LC-MS监测]，蒸发溶剂至干。用EtOAc[50mL]稀释得到的粗反应混合物，用1(N)HCl水溶液酸化。分离有机部分，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到～化合物12[1.00g，收率：95.9％]，为松软的灰白色固体。[绝对立体化学未知]质量[ESI]：m/z348.36[M++1]。
{(1S,8S)-9-氧代-1-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂苯并[cd]甘菊环-8-基}-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-20，步骤-10]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的～化合物12[1.00g，2.99mmol]和胺A的HCl盐[442mg，3.28mmol]在DMF[10mL]中的溶液中加入DIPEA[3.21mL，17.9mmol]。在0℃向得到的反应混合物中一次性加入BOP试剂[2.64g，5.97mmol]，最终在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(100％EtOAc-Rf-0.5)和LC-MS监测]，用水[500mL]稀释反应混合物，用EtOAc[3x75 mL]萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，减压浓缩，得到粗反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在50-70％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到～化合物14[0.54g，42.2％]，为白色固体。[绝对立体化学未知]质量[ESI]：m/z 428.45[M++1]。
(1S,8S)-8-氨基-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案-20，步骤-11]：在0℃向搅拌的化合物14[0.54g，1.26mmol]在DCM[3mL]中的溶液中加入TFA在DCM(1：1)[8mL]中的溶液，将得到的反应混合物在室温搅拌3h。完成后[通过LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物，将得到的产物与甲苯一起共沸，得到粗化合物16[TFA盐(550mg)，粗化合物]，为棕色半固体。质量[ESI]：m/z 328.33[M++1]。
(2S,3S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酸甲酯的合成[方案-20，步骤-13]：向搅拌的化合物18[0.50g，4.09mmol]和L-异亮氨酸甲酯.HCl[1.04g，5.73mmol]在DCM[20mL]中的溶液中加入DIPEA[3.56mL，129mmol]、HOBT[829.84mg，6.14mmol]和EDC.HCl[1.02g，5.32mmol]，维持外部温度在5-10℃下。然后将该反应混合物在室温搅拌16h。完成后[用LCMS和TLC监测(30％EtOAc-己烷，Rf-0.4)]，使反应混合物分配在EtOAc[100mL]与水[50mL]之间，分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物，使用硅胶100-200目作为吸附剂和25-35％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物18[0.95g，94％]，为无色半固体。质量[ESI]：m/z 249.31[M++1]。
(2S,3S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酸的合成[方案-20，步骤-14]：向搅拌的化合物19[955mg，3.83mmol]在THF：水：MeOH[10mL,以3：1：1之比]中的溶液中加入LiOH.H2O[367mg，15.3mmol]，在环境温度搅拌16h。完成后[用LCMS和TLC监测(5％MeOH-DCM、Rf＝0.2)]，浓缩反应混合物，用1(N)HCl水溶液酸化得到的粗产物至pH 2-3，用EtOAc萃取[2x50mL]。再用盐水[30mL]洗涤有机部分，分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩，得到酸A[802mg，90.0％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 235.29[M++1]。
(1S,8S)-8-((2S,3S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-戊酰基氨基)-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案-20，步骤-12]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的～化合物16[350mg，0.79mmol]和酸A[205mg，0.870mmol]在DMF[3mL]中的溶液中加入DIPEA[0.4mL，3.16mmol]。向得到的反应混合物中加入TBTU[381mg，1.19mmol]，在RT下搅拌16h。完成后[通过LC-MS监测]，通过RP制备型HPLC纯化反应混合物，得到30mg异构体1[较快移动的化合物]和10mg异构体2[较慢移动的化合物]。较快移动的主要异构体为生物有效的。质量[ESI]：m/z 545.60[M++1]。
表6.具有含氧三环的化合物清单：
Figure BDA0002699152330001491
Figure BDA0002699152330001501
酰胺化最终酰胺化的一般条件：按照与对合成C096所提及的相同方案合成了上面提及的化合物，并且通过RP制备型HPLC纯化了全部化合物。
(1S,8S)-8-((2S,3S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-戊酰基氨基)-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C097]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12mg较快洗脱的和主要的C097异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 484.3[M++1]。
(1S,8S)-8-[(2S,3S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C098]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到12.4mg较快洗脱的和主要的C098异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 501.52[M++1]。
(1S,8S)-8-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C099]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到13mg较快洗脱的和主要的C099异构体，为白色固体；以及0.3mg较慢洗脱的作为异构体2的异构体。质量[ESI]：m/z 545.56[M++1]。
(1S,8S)-8-((S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C100]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到5.1mg较快洗脱的和主要的C100异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 531.56[M++1]。
(1S,8S)-8-((S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C101]的合成(：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到18mg较快洗脱的和主要的C101异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 469.49[M++1]。
(1S,8S)-8-[(S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C102]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到16mg较快洗脱的和主要的C102异构体，为白色固体。质量[ESI]：m/z 487.48[M++1]。
(1S,8S)-8-[(S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酰基氨基]-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C103]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到20mg较快洗脱的和主要的异构体C103-异构体1和10mg较慢洗脱的异构体C103-异构体2，为白色固体。质量[ESI]：m/z 531.54[M++1]。
(1S,8S)-8-[(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酰基氨基]-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-氧杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C146]的合成：按照与用于C096的相同方案合成了该化合物。制备型HPLC纯化得到3mg较快洗脱的C146异构体[异构体-1]，为白色固体；以及5mg较慢洗脱的异构体[异构体-2]C103，为白色固体。质量[ESI]：m/z 531.54[M++1]。
酸对应物合成的通用条件：
(i)按照与方案-20步骤-13和步骤-14中提及的相同方案合成了C100和C146的酸对应物。
(ii)C099的酸对应物的合成方案如下所述。对于C103的酸对应物的合成，遵循了相同方案。
(iii)C101的酸对应物的合成方案如下所述。对于C097、C098和C102的酸对应物的合成，遵循了相同方案。
(S)-2-苯甲酰基氨基-3-甲基-丁酸[酸C100，]的合成：按照与用于酸C096的相同方案合成了该化合物，得到酸C100[400mg，85.0％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 221.26[M++1]。
(2S,3S)-2-(2-苯并[b]噻吩-3-基-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸的合成[酸C146，“LNB no-12169，Page no-7”]：按照与用于酸C096的相同方案合成了该化合物，得到酸C146[390mg，定量]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 305.39[M++1]。
方案-21：[酸C099的合成]
Figure BDA0002699152330001531
(2-氟-乙氧基)-乙酸苄酯的合成[方案-21，步骤-15]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的化合物20(0.26mL，4.37mmol)在5mL THF中的溶液中加入NaH(60％，262mg，6.55mmol)，在相同温度搅拌10min。将化合物21(0.69mL，4.36mmol)加到该反应混合物中，在10-15℃搅拌10min。TLC分析后[10％EtOAc/己烷，Rf 0.5，总反应时间：最长15-20min]，减压浓缩反应混合物，使得到的粗产物分配在EtOAc[150mL]与水[100mL]之间。分离有机部分，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，在2-8％EtOAc/己烷梯度下纯化由此得到的粗产物，得到期望的化合物，即化合物22(350mg，35.3％)，为无色液体。质量[ESI]：m/z212.22[M++1]
(2-氟-乙氧基)-乙酸的合成[方案-21，步骤-16]：向搅拌的化合物22(1.6g，7.539mmol)在10mL EtOH中的溶液中加入Pd/C(480mg，10％)粉末，将得到的反应混合物在H2气囊压力下在室温搅拌16h。然后使反应混合物通过硅藻土床过滤，减压浓缩滤液，得到化合物23(830mg，90％)，为浅棕色胶状液体。[1H NMR相符]
2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酸苄酯的合成[方案-21，步骤-17]：向搅拌的化合物23(415mg，3.40mmol)、化合物24(1.34g，3..40mmol)和HOBt(689mg，5.10mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入DIPEA(2.96mL，16.99mmol)，在0℃在惰性气氛中搅拌10min。向得到的混合物中加入EDC.HCl(847mg，4.42mmol)，在室温持续反应16h。反应完成时(通过TLC和LCMS证实)，用DCM(2x10 mL)萃取该混合物，用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。然后通过柱色谱法纯化(10-35％EtOAc/己烷，SiO2)，得到化合物25(670mg，63.2％)，为无色液体。质量[ESI]：m/z 325.38[M++1]
2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酸的合成[方案-21，步骤-18]：向搅拌的化合物25(400mg，1.23mmol)在EtOH(8mL)中的溶液中加入10％Pd/C(湿)(120mg)粉末，将得到的反应混合物在H2气囊压力下在室温搅拌16h。然后使该反应混合物通过硅藻土床过滤，减压浓缩滤液部分，得到酸C099(270mg，93.3％)，为灰白色胶状液体。质量[ESI]：m/z 235.25[M++1]
(S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-丁酸的合成[酸C103]：按照与用于酸C099的相同方案合成了该化合物，得到酸C103[450mg，97.4％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 221.23[M++1]。
方案-22：[酸C101的合成]
Figure BDA0002699152330001541
(S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酸苄酯的合成[方案-22，步骤-19]：向搅拌的商品氨基酯(1a)(3.79g，9.99mmol)和AcOH(0.50g，8.33mmol)在DCM(15ml)中的溶液中加入EDC.HCl(2.075g,10.82mmol)，HOBT(1.69g，12.5mmol)，DIPEA(7.25ml，41.6mmol)，将得到的反应混合物在室温搅拌16h。完成后[使用TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtAOc[200mL]与水[100mL]之间。分离有机层，干燥(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法，使用硅胶100-200目作为吸附剂和50-60％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂出得到的粗产物，得到化合物27，为灰白色固体(1.50g，72.3％)。质量[ESI]：m/z 250.3[M++1]。
(S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-丁酸的合成[方案-22，步骤-20]：向搅拌的中间体(3a)(1.50g，6.04mmol)在EtOH(25ml)中的溶液中加入Pd-C粉末(400mg，50％湿)，将得到的反应混合物在H2气囊压力下在室温搅拌16h。然后使反应混合物通过硅藻土床，减压浓缩滤液部分，得到酸C101(0.50g，52％)。将粗酸原样使用，未经进一步纯化。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-戊酸[酸C098]的合成：按照与用于酸C101的相同方案合成了该化合物，得到酸C098[800mg，98.1％]，为白色固体。[1H NMR相符]。
(2S,3S)-2-乙酰基氨基-3-甲基-戊酸[酸C097]的合成：按照与用于酸C101的相同方案合成了该化合物，得到酸C097[450mg，40.1％]，为白色固体。[1H NMR相符]。
(S)-2-(2-氟-乙酰基氨基)-3-甲基-丁酸[酸C102]的合成：按照与用于酸C101的相同方案合成了该化合物，得到酸C102[758mg，99.3％]，为白色固体。[1H NMR相符]。
实施例3：具有含硫核的化合物的合成
方案-23[C172的合成]：
Figure BDA0002699152330001561
一般说明：在吲哚至二氢吲哚的还原反应[步骤-8]后，我们不能分离非对映异构体，且我们继续使用化合物10和11的非对映异构体混合物，直至最终步骤，根据反相制备型HPLC，我们能够分离C172的两种异构体。由于基于“S”的三环中的原子优先级改变，所以三环核的立体化学为S，R而不是S，S。
1-氟-3-碘-2-硝基-苯的合成[方案-23，步骤-1]：在60℃将化合物1[30.0g，192mmol]在MeCN[300mL]中的溶液中加到预先加热的碘[244.2g，1923mmol]和三叔丁腈[114mL，961mmol]在MeCN[300mL]中的溶液中。将该反应混合物在60℃再搅拌2h，然后在室温再搅拌16h。完成后[通过TLC监测]，用饱和Na2S2O3水溶液[300mL]使反应混合物淬灭，维持外部温度低于10℃，用EtOAc[3x500 mL]萃取。干燥有机层[MgSO4]，减压浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，使用0-3％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物2[39g，收率：76％]，为黄色固体。(1H NMR相符)。
(R)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3-碘-2-硝基-苯基硫烷基)-丙酸的合成[方案-23，步骤-2]：在室温在氩气气氛中将NaHCO3[5.70g，67.8mmol]加到搅拌的化合物3[5.00g，22.6mmol]在水(30mL)中的溶液中，搅拌10分钟。最终，将化合物2[4.22g，15.8mmol]在EtOH(40mL)中的溶液中加到该反应混合物中，在80℃搅拌4h。完成后，蒸发溶剂，用水[200mL]稀释粗产物，用Et2O[200mL]萃取。分离有机部分；在冰冷条件下使用1(N)HCl水溶液将水性部分的pH调整至2-3，即刻用EtOAc[2x100 mL]萃取。分离有机部分，干燥[Na2SO4]，减压浓缩，得到化合物4[4.5g，43％]。质量[ESI]：m/z 468.27[M++1]。
(R)-3-(2-氨基-3-碘-苯基硫烷基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸的合成[方案-23，步骤-3]：向搅拌的4[4.50g，9.61mmol]在AcOH[40mL]中的溶液中加入Fe粉末[5.36g，96.1mmol]，将得到的反应混合物在80℃回流4h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtOAc[2x200mL]与水[150mL]之间。分离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩。将得到的粗产物再与甲苯一起共沸，得到化合物5[4.0g，95％]，为浅棕色固体。质量[ESI]：m/z 438.29[M++1]。
((R)-6-碘-4-氧代-2,3,4,5-四氢-苯并[b][1,4]噻庚因-3-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-4]：在室温在惰性气氛中向搅拌的化合物5[8.00g，18.3mmol]在DMSO[30mL]中的溶液中加入DIPEA[4.77mL，27.4mmol]。向得到的反应混合物分2部分加入HATU[7.64g，20.1mmol]，最终在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(40％EtOAc-己烷，Rf＝0.4)和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水[500mL]与EtOAc[3x100mL]之间。分离有机层，用盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目作为吸附剂，在梯度洗脱下0-20％EtOAc-己烷]，得到化合物6[3.6g，46％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 420.27[M++1]。
{(R)-6-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基]-4-氧代-2,3,4,5-四氢-苯并[b][1,4]噻庚因-3-基}-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-5]：用氩气吹扫搅拌的化合物6[3.56g，8.47mmol]在DMF[15mL]中的溶液10分钟。在氩气气氛中向得到的混合物加入TBDMS保护的炔丙醇[7.20g，42.4mmol]、TEA[4.13mL，29.7mmol]、CuI[161mg，0.847mmol]和Pd(PPh3)2Cl2[595mg，0.847mmol]，在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(30％EtOAc-己烷，Rf＝0.6)和LC-MS监测]，用过量水[300mL]稀释反应混合物，用EtOAc[3x100 mL]萃取。干燥有机层(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[0-9％EtOAc-己烷梯度洗脱，吸附剂SiO2]，得到化合物7[3.1g，79％]，为深红色胶状液体。质量[ESI]：m/z 462.69[M++1]。
[(R)-1-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-9-氧代-8,9-二氢-7H-6-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基]-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-6]：用氮气给化合物7[160mg，0.346mmol]在DCM[13mL]中的溶液脱气10分钟。在冰冷条件下向得到的混合物中逐步加入Gold催化剂[26.7mg，0.035mmol]，在0℃搅拌6小时。然后在接下来的72h将该反应混合物保持在冷藏箱中。完成后[通过TLC监测(20％EtOAc-己烷，Rf＝0.6)和LC-MS]，过滤反应混合物，然后减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在5％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物8[110mg，68.7％]，为白色固体。质量[ESI]：m/z462.69[M++1]。
((R)-1-羟基甲基-9-氧代-8,9-二氢-7H-6-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-7]：在0℃向搅拌的化合物8[100mg，0.216mmol]在EtOH[3mL]中的溶液中加入对甲苯磺酸吡啶鎓[21.8mg，0.087mmol]，然后将反应混合物在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(50％EtOAc-己烷、Rf＝0.2和LC-MS监测]，浓缩反应混合物至干。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[在0-50％EtOAc-己烷梯度洗脱下，SiO2]，得到化合物9[50mg，66％]，为松软固体。质量[ESI]：m/z 348.42[M++1]。
((1S,8R)-1-羟基甲基-9-氧代-1,2,8,9-四氢-7H-6-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-8]：用氩气给化合物9[1.20g，3.44mmol]在EtOH[100mL]中的溶液脱气15分钟。然后将232mg Pd/C粉末[10％重量，湿]加到反应混合物中，在40psi氢气压力下在帕尔摇瓶中将得到的混悬液搅拌6小时。完成后[通过TLC(50％EtOAc-己烷，Rf＝0.2)和LC-MS监测]，使反应混合物通过硅藻土床，用EtOH[3x10 mL]洗涤，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶作为吸附剂，在30-60％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物10和化合物11的非对映异构体混合物[840mg，非对映异构体混合物]。质量[ESI]：m/z 350.44[M++1]。
(1S,8R)-8-叔丁氧基羰基氨基-6,6,9-三氧代-1,2,6,7,8,9-六氢-6λ*6*-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸的合成[方案-23，步骤-9]：在室温向搅拌的化合物10&化合物11)[50mg，0.14mmol]在ACN[0.5mL]中的溶液中逐步加入NMO[67.5mg，0.576mmol]和TPAP[5.06mg，0.014mmol]，搅拌2小时。完成后[通过TLC(20％EtOAc-己烷、Rf＝0.1)和LC-MS监测]，蒸发溶剂至干。用EtOAc[30mL]稀释得到的粗产物，用(1N)HCl水溶液酸化至pH＝2。分离有机部分，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到化合物12和化合物13的非对映异构体混合物[50mg，88％，绝对立体化学未知]，为松软固体。质量[ESI]：m/z 396.42[M++1]。
{(1S,8R)-6,6,9-三氧代-1-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,6,7,8,9-六氢-6λ*6*-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-8-基}-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-23，步骤-10]：在0℃向搅拌的化合物12&化合物13[0.590g，1.49mmol]在DMF[6mL]中的溶液中加入胺A的HCl盐[220mg，1.64mmol]、DIPEA[1.60mL，8.94mmol]和BOP试剂[1.32g，2.98mmol]，将得到的反应混合物在室温搅拌16小时。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水[50mL]与EtOAc[3x25 mL]之间。分离有机层，与盐水洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[在90-92％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物14和化合物15[140mg，19.7％,绝对立体化未知]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 476.51[M++1]。
(1S,8R)-8-氨基-6,6,9-三氧代-1,2,6,7,8,9-六氢-6λ*6*-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案-23，步骤-11]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的化合物14和化合物15[140mg，0.327mmol]在DCM[0.5mL]中的溶液中加入TFA的DCM溶液(1：1)[1.5mL]。将得到的反应混合物在室温搅拌2小时。完成后[通过TLC监测(EtOAc、Rf＝0.1)和LC-MS]，减压浓缩反应混合物，将得到的产物与甲苯一起共沸，得到化合物16和化合物17[123mg，粗TFA盐]，为胶状液体。质量[ESI]：m/z 376.39[M++1]。
(1S,8R)-8-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-6,6,9-三氧代-1,2,6,7,8,9-六氢-6λ*6*-硫杂-9a-氮杂-苯并[cd]甘菊环-1-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺[C172]的合成[方案-23，步骤-12]：向搅拌的化合物16&化合物17[TFA盐][144mg，0.294mmol]和酸A(69.1mg，0.294mmol]在1.5mL DMF中的溶液中加入DIPEA[0.263mL，1.47mmol]，然后添加BOP试剂[260mg，0.588mmol]，将得到的反应混合物在环境温度下搅拌16h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到9mg C172-异构体1[较快移动的异构体]，为白色固体；以及5mg C172-异构体2[较慢移动的异构体]，为白色固体。尽管我们在本申请中画出了(S，S)构型，但是绝对立体化学未知。质量[ESI]：m/z 593.63[M++1]。
实施例4：具有含氮核的化合物的合成
方案-24[C143的合成]：
Figure BDA0002699152330001611
一般说明：在吲哚至二氢吲哚还原反应后我们分离了两种异构体，然而，对于分离的异构体绝对立体化学未知。我们继续使用两种异构体至最终步骤。我们在本实验中捕获了上部的异构体[非极性]的转化方案，类似方案用于转化下部的异构体[极性]。
实验：
1-氟-3-碘-2-硝基-苯的合成[方案-24，步骤-1]：在60℃将化合物1[30.0g，192mmol]在MeCN[300mL]中的溶液加到预先加热的碘[244.2g，1923mmol]和叔丁腈[114mL，961mmol]在MeCN[300mL]中的溶液中。将该反应混合物在60℃再搅拌2h，然后在室温再搅拌16h。完成后[通过TLC监测]，用饱和Na2S2O3水溶液[300mL]使反应混合物淬灭，维持外部温度低于10℃，用EtOAc[3x500 mL]萃取。干燥有机层[MgSO4]，减压浓缩。使粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，使用0-3％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物2[39g，收率：76％]，为黄色固体。(1H NMR相符)
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3-碘-2-硝基-苯基氨基)-丙酸的合成[方案-24，步骤-2]：在冰冷条件下将K2CO3[5.20g，37.7mmol]加到搅拌的化合物3[7.0g，34mmol]在EtOH(230mL)中的混悬液中。添加后，保持反应混合物在冷条件下剧烈搅拌半小时。最终，在0℃将化合物2[9.16g，34.3mmol]逐步加到该反应混合物中，添加后，使反应混合物达到室温，在80℃搅拌40h。完成后，蒸发EtOH，用水[200mL]稀释粗产物，用Et2O[200mL]萃取。分离有机部分；在冰冷条件下使用1(N)HCl水溶液将水性部分的pH调整至2-3，即刻用EtOAc[2x200mL]萃取。分离有机部分，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物4[10.6g，68.4％]，为深红色松软固体。质量[ESI]：m/z 451.21[M+-1]。
(S)-3-(2-氨基-3-碘-苯基氨基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸的合成[方案-24，步骤-3]：向搅拌的4[10.6g，23.5mmol]在AcOH[70mL]中的溶液中加入Fe粉末[13.1g，235mmol]，将得到的反应混合物在80℃回流3.5h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtOAc[2x300 mL]与水[300mL]之间。离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩。将得到的粗产物再与甲苯一起共沸，得到化合物5[8.96g，90.5％]，为棕色松软固体。质量[ESI]：m/z421.23[M++1]。
((S)-9-碘-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b][1,4]二吖庚因-3-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-24，步骤-4]：在室温在惰性气氛中向搅拌的化合物5[8.76g，20.8mmol]中DMSO[87mL]中的溶液中加入DIPEA[5.59mL，31.2mmol]。在冰冷条件下向得到的反应混合物中分2部分加入HATU[8.70g，22.9mmol]，最终在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(30％EtOAc-己烷，Rf＝0.5)和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水[500mL]与EtOAc[3x100 mL]之间。分离有机层，用盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目作为吸附剂，在10-20％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物6[4.9g，59％]，为浅棕色固体。质量[ESI]：m/z 403.21[M++1]。
{(S)-9-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基]-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b][1,4]二吖庚因-3-基}-氨基甲酸叔丁酯[方案-24，步骤-5]：用氩气吹扫搅拌的化合物6[4.41g，10.9mmol]在DMF[18mL]中的溶液10分钟。在氩气气氛中向得到的混合物中加入TBDMS保护的炔丙醇[9.28g，54.6mmol]、TEA[5.37mL，38.21mmol]、CuI[208mg，1.09mmol]和Pd(PPh3)2Cl2[766mg，1.09mmol]，在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(20％EtOAc-己烷，Rf＝0.4)和LC-MS监测]，用水[300mL]稀释反应混合物，用EtOAc[3x100 mL]萃取。干燥有机层(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[10-14％EtOAc-己烷梯度洗脱，吸附剂SiO2]，得到化合物7[4.0g，82.21％]，为深红色半固体。质量[ESI]：m/z 445.62[M++1]。
[(S)-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基]-氨基甲酸叔丁酯i)[方案-24，步骤-6]：用氮气给化合物7[4.0g，8.9mmol]在DCM[400mL]中的溶液脱气10分钟。在冰冷条件下向得到的混合物中逐步加入Gold催化剂[0.69g，0.89mmol]，在0℃搅拌6小时。然后在接下来的16h将该反应混合物保持在冷藏箱中。完成后[通过TLC(10％EtOAc-己烷、Rf＝0.2)和LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在0-9％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到环化的中间体(1.50g，37.4％)，为胶状液体，还回收了800mg未反应的原料。
((S)-6-羟基甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基)-氨基甲酸叔丁酯i)[方案-24，步骤-7]：在0℃向澄清的化合物8(1.20g，2.61mmol)在乙醇(5mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸吡啶鎓(197mg，0.78mmol)。使反应混合物缓慢地升至室温，在室温搅拌16h。LCMS显示原料完全耗尽。此外，再向其中加入另一部分对甲苯磺酸吡啶鎓(197mg，0.78mmol)，搅拌16h。完成后，除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯。用盐水溶液、水洗涤有机溶液，然后用MgSO4干燥。蒸发溶剂，得到粗产物。使粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，使用42％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱溶剂，得到期望的产物，为松软固体(750mg，86.6％)。质量[ESI]：m/z 331.37[M++1]
((3S,6S)-6-羟基甲基-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基)-氨基甲酸叔丁酯[方案-24，步骤-8]：将化合物9(750mg，2.17mmol)溶于15ml乙醇，与232mg披钯碳(湿10％)混合，将该混合物在室温在氢气气氛中(气囊压力)搅拌2h。使该反应混合物通过C盐，用乙醇洗涤3次(5mL)。浓缩滤液，得到粗产物。使粗产物通过硅胶色谱法纯化，使用15％乙酸乙酯的DCM溶液作为洗脱溶剂，得到期望的产物，为松软固体。下一步针对上部的异构体。确切的立体化学未知。得到上部的异构体，为主要的(260mg，35.9％)，和下部的异构体，称作次要化合物。质量[ESI]：m/z 333.39[M++1]
(3S，6S)-3-叔丁氧基羰基氨基-6-羟基甲基-4-氧代-3,4,6,7-四氢-2H-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-1-甲酸苄酯：[方案-24，步骤-9]向搅拌的～化合物10(160mg，0.48mmol)在THF(1.6ml)中的溶液中加入K2CO3(66.3mg，0.48mmol)，然后加入H2O(1ml)。最终，在冰冷条件下加入Cbz氯化物(0.08ml，0.58mmol)。将得到的混合物在室温搅拌16h。过夜后，对该反应混合物的LCMS分析显示原料尚未完全耗尽。因此，再加入66.3mg K2CO3和0.08ml Cbz氯化物，持续反应过夜。完成后(通过LCMS证实)，用EtOAc(150mL)稀释得到的混合物，用水(100mL)洗涤。分离有机层，干燥[Na2SO4]，浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目作为吸附剂和30-53％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂]，得到～化合物12，为松软固体(140mg，62.3％)。质量[ESI]：m/z 467.53[M++1]
(3S,6S)-3-叔丁氧基羰基氨基-4-氧代-3,4,6,7-四氢-2H-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-1,6-二甲酸1-苄酯：[方案-24，步骤-10]在冰冷条件下向搅拌的～化合物12(140mg，0.30mmol)在ACN(3.5ml)中的溶液中逐步加入NMO(141mg,1.20mmol)和TPAP(10.5mg，0.03mmol)。将得到的混合物在RT搅拌2h。完成后(通过LCMS监测证实)，蒸发溶剂，用水稀释，在冰冷条件下用1N HCl酸化至pH＝3-4。用乙酸乙酯稀释合并的有机层，用水洗涤。分离有机层，用干燥Na2SO4，浓缩，得到～化合物14(144mg，99.9％)，为松软固体。质量[ESI]：m/z 481.51[M++1]
(3S,6S)-3-叔丁氧基羰基氨基-4-氧代-6-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-3,4,6,7-四氢-2H-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-1-甲酸苄酯[方案-24，步骤-11]：在0℃向搅拌的～化合物14(160mg，0.33mmol)和三唑胺的HCl盐(49.0mg,0.37mmol)在DMF(2.0ml)中的溶液中加入hunig碱(0.35ml，1.99mmol)。最终，在冰冷条件下逐步加入BOP试剂(294mg，0.67mmol)，将该反应混合物在室温搅拌16h。完成后(通过LCMS监测)，用乙酸乙酯(40mL)稀释反应混合物，用过量水(4x30mL)洗涤，用Na2SO4干燥有机部分，蒸发，得到粗物质。使粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，使用0-1％MeOH-DCM作为洗脱溶剂，得到～化合物16(100mg，53.6％)，为白色固体。质量[ESI]：m/z 561.60[M++1]
(3S，6S)-3-氨基-4-氧代-6-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-3,4,6,7-四氢-2H-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-1-甲酸苄酯(TFA盐)[方案-24，步骤-12]：在冰冷条件下向搅拌的～化合物16(100mg 0.18mmol)在1.5ml DCM中的溶液中加入2.15mlDCM的TFA溶液(1：1)。将得到的混合物搅拌3小时。反应完成后(通过LCMS监测)，减压除去TFA。将残余物与甲苯一起共沸，得到化合物18，为TFA盐(82.2mg，100％)。质量[ESI]：m/z461.48[M++1]
(3S,6S)-3-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-6-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺：i)[方案-24，步骤-13]在0℃向搅拌的化合物18(82.2mg，0.18mmol)和酸A(41.9mg，0.18mmol)在DMF(0.8ml)中的溶液中加入Hunig碱(0.19ml，1.07mmol)。最终，在冰冷条件下逐步加入BOP试剂(157.5mg，0.357mmol)，将该反应混合物在室温搅拌16h。16h后，当原料尚未完全耗尽时，再加入22mg酸A、80mg BOP和0.1ml DIPEA，使反应再持续进行16小时。完成后(通过LCMS监测)，在冰冷条件下用乙酸乙酯(40ml)稀释反应混合物，用过量水(3x20ml)洗涤，分离有机层，用Na2SO4干燥，蒸发，得到130mg粗酰胺化产物。质量[ESI]：m/z678.73[M++1]
ii)[]将酰胺化产物(121mg，0.18mmol)溶于10ml乙醇，加入50mg 10％披钯碳(湿)，将得到的混悬液在氢气气囊压力下搅拌16h。完成后(通过LCMS监测)，通过C盐过滤反应混合物，用乙酸乙酯洗涤3次(50mL)。浓缩滤液，使得到的粗产物进行制备型HPLC纯化，得到3mg较快洗脱的C143异构体，为灰白色固体。质量[ESI]：m/z 544.59[M++1]。
方案-25[C144的合成]：
Figure BDA0002699152330001661
一般说明：在吲哚至二氢吲哚还原反应后我们分离了两种异构体，然而，对于分离的异构体绝对立体化学未知。我们继续使用两种异构体至最终步骤。我们在本实验中捕获了上部的异构体[非极性]的转化方案，类似方案用于转化下部的异构体[极性]。
实验：
1-氟-3-碘-2-硝基-苯的合成[方案-25，步骤-1]：在60℃将化合物1[30.0g，192mmol]在MeCN[300mL]中的溶液中加到预先加热的碘[244.2g，1923mmol]和叔丁腈[114mL，961mmol]在MeCN[300mL]中的溶液中。将该反应混合物在60℃再搅拌2h，然后在室温再搅拌16h。完成后[通过TLC监测]，用饱和Na2S2O3水溶液[300mL]使反应混合物淬灭，维持外部温度低于10℃，用EtOAc[3x500 mL]萃取。干燥有机层[MgSO4]，减压浓缩。使粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，使用0-3％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物2[39g，收率：76％]，为黄色固体。(1H NMR相符)
(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3-碘-2-硝基-苯基氨基)-丙酸的合成[方案-25，步骤-2]：在冰冷条件下将K2CO3[5.20g，37.7mmol]加到搅拌的化合物3[7.0g，34mmol]在EtOH(230mL)中的混悬液中。添加后，保持反应混合物在冷条件下剧烈搅拌半小时。最终，在0℃将化合物2[9.16g，34.3mmol]逐步加到该反应混合物中，添加后，使反应混合物达到室温，在80℃搅拌40h。完成后，蒸发EtOH，用水[200mL]稀释粗产物，用Et2O[200mL]萃取。分离有机部分；在冰冷条件下使用1(N)HCl水溶液将水性部分的pH调整至2-3，即刻用EtOAc[2x200mL]萃取。分离有机部分，干燥[MgSO4]，减压浓缩，得到化合物4[10.6g，68.4％]，为深红色松软固体。质量[ESI]：m/z 451.21[M+-1]。
(S)-3-(2-氨基-3-碘-苯基氨基)-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸[的合成方案-25，步骤-3]：向搅拌的4[10.6g，23.5mmol]在AcOH[70mL]中的溶液中加入Fe粉末[13.1g，235mmol]，将得到的反应混合物在80℃回流3.5h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物分配在EtOAc[2x300 mL]与水[300mL]之间。离有机层，用硫酸钠干燥，减压浓缩。将得到的粗产物再与甲苯一起共沸，得到化合物5[8.96g，90.5％]，为棕色松软固体。质量[ESI]：m/z421.23[M++1]。
((S)-9-碘-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b][1,4]二吖庚因-3-基)-氨基甲酸叔丁酯的合成[方案-25，步骤-4]：在室温在惰性气氛中向搅拌的化合物5[8.76g，20.8mmol]中DMSO[87mL]中的溶液中加入DIPEA[5.59mL，31.2mmol]。在冰冷条件下向得到的反应混合物中分2部分加入HATU[8.70g，22.9mmol]，最终在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(30％EtOAc-己烷，Rf＝0.5)和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水[500mL]与EtOAc[3x100 mL]之间。分离有机层，用盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目作为吸附剂，在10-20％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到化合物6[4.9g，59％]，为浅棕色固体。质量[ESI]：m/z 403.21[M++1]。
{(S)-9-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基]-2-氧代-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b][1,4]二吖庚因-3-基}-氨基甲酸叔丁酯[方案-25，步骤-5]：用氩气吹扫搅拌的化合物6[4.41g，10.9mmol]在DMF[18mL]中的溶液10分钟。在氩气气氛中向得到的混合物中加入TBDMS保护的炔丙醇[9.28g，54.6mmol]、TEA[5.37mL，38.21mmol]、CuI[208mg，1.09mmol]和Pd(PPh3)2Cl2[766mg，1.09mmol]，在室温搅拌16h。完成后[通过TLC(20％EtOAc-己烷，Rf＝0.4)和LC-MS监测]，用水[300mL]稀释反应混合物，用EtOAc[3x100 mL]萃取。干燥有机层(MgSO4)，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[10-14％EtOAc-己烷梯度洗脱，吸附剂SiO2]，得到化合物7[4.0g，82.21％]，为深红色半固体。质量[ESI]：m/z 445.62[M++1]。
[(S)-6-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基]-氨基甲酸叔丁酯i)[方案-25，步骤-6]：用氮气给化合物7[4.0g，8.9mmol]在DCM[400mL]中的溶液脱气10分钟。在冰冷条件下向得到的混合物中逐步加入Gold催化剂[0.69g，0.89mmol]，在0℃搅拌6小时。然后在接下来的16h将该反应混合物保持在冷藏箱中。完成后[通过TLC(10％EtOAc-己烷、Rf＝0.2)和LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶100-200目，在0-9％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到环化的中间体(1.50g，37.4％)，为胶状液体，还回收了800mg未反应的原料。
ii)向澄清的环化中间体[1.5g，3.4mmol]在MeCN[25mL]和DMF[10mL]中的溶液中加入碳酸钾[0.69g，5.05mmol]，然后在冰冷条件下在密封试管中滴加碘甲烷[0.63mL，10.1mmol]，搅拌16h。LC-MS分析后，再向该反应混合物中加入碘甲烷[1.26mL，10.1mmol]，在环境温度再搅拌48h。完成后，用EtOAc[200mL]稀释反应混合物，用水[150mL]、然后用盐水溶液[100mL]洗涤。分离有机层，用MgSO4干燥，浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，使用0-4％EtOAc-己烷作为洗脱溶剂，得到化合物8[0.9g，58％]，为胶状液体。质量[ESI]：m/z459.65[M++1]。
((S)-6-羟基甲基-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基)-氨基甲酸叔丁酯[方案-25，步骤-7]：在0℃向搅拌的化合物8[0.9g，1.9mmol]在EtOH[10mL]中的溶液中加入对甲苯磺酸吡啶鎓[0.15g，0.59mmol]，然后将反应混合物在室温搅拌16h。LC-MS和TLC分析后[20％EtOAc-己烷，Rf＝0.2]，再向反应混合物中加入另一部分对甲苯磺酸吡啶鎓[0.15g，0.59mmol]，在室温再搅拌30h。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，将反应混合物浓缩至干。然后使粗产物分配在EtOAc[3x75 mL]与水[100mL]之间。分离有机层，用盐水洗涤[50mL]，干燥[MgSO4]，浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[在30-42％EtOAc-己烷梯度洗脱下，SiO2]，得到化合物9[0.58g，85.6％]，为松软固体。质量[ESI]：m/z 345.39[M++1]。
((3S,6S)-6-羟基甲基-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基)-氨基甲酸叔丁酯[方案-25，步骤-8]：用氩气给化合物9[0.58g，1.68mmol]在EtOH[20mL]中的溶液脱气10分钟。然后向该反应混合物中加入232mg Pd/C粉末[10％重量，湿]，将得到的混悬液在H2气囊压力下搅拌2h。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，使反应混合物通过硅藻土床，用EtOH[3x10 mL]洗涤，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[使用硅胶作为吸附剂，在10-18％EtOAc-DCM梯度洗脱下]，得到～化合物10[0.24g，无极性斑点；绝对立体化学未知]，为白色松软固体，和～化合物11[0.15g，极性斑点；绝对立体化学未知]。我们继续单独地使用上部异构体和下部异构体，然而，绝对立体化学未知。质量[ESI]：m/z 347.4[M++1]。
(3S,6S)-3-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-6-甲酸[方案-25，步骤-9]：在室温向搅拌的～化合物10[0.24g，0.69mmol]在MeCN[2.7mL]和DMF[1mL]中的溶液中逐步加入NMO[324mg，2.76mmol]和TPAP[24.3mg，0.07mmol]，在室温搅拌2小时。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，蒸发溶剂至干。用EtOAc[50mL]稀释得到的粗产物，用(1N)HCl水溶液酸化。分离有机部分，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到～化合物12[0.249g，粗化合物，绝对立体化学未知]，为浅棕色松软固体。质量[ESI]：m/z 361.39[M++1]。
{(3S,6S)-1-甲基-4-氧代-6-[(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-氨基甲酰基]-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-3-基}-氨基甲酸叔丁酯[方案-25，步骤-10]：在0℃向搅拌的～化合物12[0.25g，0.69mmol]在DMF[2.5mL]中的溶液中加入胺A的HCl盐[102mg，0.76mmol]、DIPEA[0.74mL，4.15mmol]和BOP试剂[0.61g，1.38mmol]，将得到的反应混合物在室温搅拌16小时。完成后[通过TLC和LC-MS监测]，使反应混合物分配在水[250mL]与EtOAc[3x75 mL]之间。分离有机层，用盐水[50mL]洗涤，干燥[MgSO4]，减压浓缩。通过柱色谱法纯化得到的粗产物[在50-70％EtOAc-己烷梯度洗脱下]，得到～化合物14[100mg，32.5％，绝对立体化学未知]，为白色固体。质量[ESI]：m/z 441.48[M++1]。
(3S,6S)-3-氨基-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-6-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案-25，步骤-11]：在0℃在氩气气氛中向搅拌的～化合物14[100mg，0.227mmol]在DCM[0.2mL]中的溶液中加入TFA的DCM溶液(1：1)[1mL]。将得到的反应混合物在室温搅拌3小时。完成后[通过LC-MS监测]，减压浓缩反应混合物，将得到的残余物与甲苯一起共沸，得到～化合物16[100mg，粗TFA盐]，为棕色半固体。质量[ESI]：m/z 341.36[M++1]。
(3S,6S)-3-{(2S,3S)-2-[2-(2-氟-乙氧基)-乙酰基氨基]-3-甲基-戊酰基氨基}-1-甲基-4-氧代-1,2,3,4,6,7-六氢-[1,4]二吖庚因并[3,2,1-hi]吲哚-6-甲酸(1H-[1,2,3]三唑-4-基甲基)-酰胺的合成[方案-25，步骤-12]：向搅拌的～化合物16[TFA盐][100mg，0.22mmol]和酸A(51.64mg，0.22mmol]在1mL DMF中的溶液中加入DIPEA[0.197mL，1.09mmol]，然后添加BOP试剂[194mg，0.44mmol]，将得到的反应混合物在环境温度搅拌16h。完成后[通过LC-MS监测]，使反应混合物进行反相制备型HPLC纯化，得到9mg C144-异构体1[较快移动的异构体]，为白色固体；以及5.5mg C144-异构体2[较慢移动的异构体]，为白色固体。尽管我们在本申请中画出了(S，S)构型，但是绝对立体化学未知。质量[ESI]：m/z558.60[M++1]。
步骤-8后分离的极性异构体也按照相同方案进行，且RP制备型HPLC纯化得到C144的另外两种异构体[5.9mg(较快移动的异构体，即异构体3)和1.2mg(较慢移动的异构体，即异构体4)]。
实施例5：化合物在微粒体稳定性测定中的评价
在上文提供的微粒体稳定性测定法中测试了本公开的某些化合物。结果如下表7中所示。
表7.人微粒体中的化合物稳定性
Figure BDA0002699152330001711
Figure BDA0002699152330001721
Figure BDA0002699152330001731
Figure BDA0002699152330001741
a符号“++++”表示0.001-0.300μM的IC50值。
bHLM表示人肝微粒体；符号“***”表示71-100％的剩余百分比，“**”表示31-70％的剩余百分比，且“*”表示0-30％的剩余百分比。
另外的实施方案
本说明书中公开的全部特征可以以任意的组合合并。本说明书中公开的每个特征可以被用于相同、等同或相似目的可替代选择特征替代。因此，除非另有明确说明，否则所公开的每个特征仅为通常一系列等同或相似特征的实例。
此外，从上述描述中，本领域技术人员可以易于在不脱离其精神和范围的情况下确定本公开的主要特征，可以对本公开做出不同的改变和变型以使其适应不同的用途和条件。因此，另外的实施方案也在权利要求的范围内。

Claims (40)

1.式I的化合物：
Figure FDA0002699152320000011
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1、2或3；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且各自C6-10芳基和HET任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4，条件是当X为CH2时，R1和R2的至少一个为-NR10R12，且R10和R12的至少一个为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
2.权利要求1的化合物，其中X为CH2。
3.权利要求2的化合物，其中R1为-NR10R12。
4.权利要求2的化合物，其中R2为C1-6烷基。
5.权利要求2的化合物，其中R3、R6、R7、R8和R8’各自为H。
6.权利要求2的化合物，其中R9为HET。
7.权利要求2的化合物，其中R1为-NR10R12；R2为C1-6烷基；R3、R6、R7、R8和R8’各自为H；且R9为HET。
8.权利要求7的化合物，其中R1为-NR10R12，其中R10为H，且R12为-C(O)C1-4烷基。
9.权利要求7的化合物，其中R1为-NR10R12，其中R10为H，且R12为-C(O)C6-10芳基或-C(O)HET。
10.权利要求7的化合物，其中R2为丁基。
11.权利要求7的化合物，其中R9为单环杂芳基。
12.权利要求7的化合物，其中R1为-NR10R12，其中R10为H，且R12为-C(O)C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基或-C(O)HET；R2为丁基；且R9为单环杂芳基。
13.权利要求12的化合物，其中R2为
Figure FDA0002699152320000041
且R9为
Figure FDA0002699152320000042
Figure FDA0002699152320000043
14.权利要求2的化合物，其中该化合物为如下化合物之一：
Figure FDA0002699152320000044
15.权利要求1的化合物，其中X为O。
16.权利要求15的化合物，其中R1为-NR10R12；R2为C1-6烷基；R3、R6、R7、R8和R8’各自为H；且R9为HET。
17.权利要求16的化合物，其中R1为-NR10R12，其中R10为H，且R12为-C(O)C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基或-C(O)HET；R2为丁基；且R9为单环杂芳基。
18.权利要求17的化合物，其中R2为
Figure FDA0002699152320000051
且R9为
Figure FDA0002699152320000052
Figure FDA0002699152320000053
19.权利要求15的化合物，其中该化合物为如下化合物之一：
Figure FDA0002699152320000054
20.权利要求1的化合物，其中X为NR4，其中R4为H或C1-4烷基。
21.权利要求20的化合物，其中R1为-NR10R12；R2为C1-6烷基；R3、R6、R7、R8和R8’各自为H；且R9为HET。
22.权利要求21的化合物，其中R1为-NR10R12，其中R10为H，且R12为-C(O)C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基或-C(O)HET；R2为丁基；且R9为单环杂芳基。
23.权利要求22的化合物，其中R2为
Figure FDA0002699152320000061
且R9为
Figure FDA0002699152320000062
Figure FDA0002699152320000063
24.权利要求20的化合物，其中该化合物为如下化合物之一：
Figure FDA0002699152320000064
25.式II的化合物：
Figure FDA0002699152320000065
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1、2或3；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4，条件是当X为CH2时，R1和R2的至少一个为-NR10R12，且R10和R12的至少一个为-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基或-C(O)HET；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
26.式III的化合物：
Figure FDA0002699152320000081
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且各自C6-10芳基和HET任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
27.式IV的化合物：
Figure FDA0002699152320000101
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
28.式V的化合物：
Figure FDA0002699152320000121
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中各自C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基，其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
29.式VI的化合物：
Figure FDA0002699152320000141
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，
其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
30.式VII的化合物：
Figure FDA0002699152320000161
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
31.式VIII的化合物：
Figure FDA0002699152320000181
或其药学上可接受的盐或其立体异构体或互变体，其中：
m为0、1或2；
n为1或2；
R1和R2各自独立地选自：氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C6-10芳基、HET和-NR10R12，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素和羟基，且C6-10芳基和HET各自任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
或R1和R2可以与它们所连接的碳原子一起形成5-6元环烷基或5-6元杂环烷基，它们各自可以任选地被1、2或3个R10基团取代；
R3和R7各自独立地选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
X选自CH2、O、S、SO2和NR4；
R4选自H、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R5、R6、R8’和R8各自独立地选自氢、卤素、COOH、羟基、OC1-4烷基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R9为COOR13、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、-B(OR13’)2、-PO(OR13”)2或HET，其中HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自氧代、卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基和卤素基团；
HET各是独立选择的单环或双环5-10元杂芳基或单环或双环5-10元杂环烷基，其中HET各自包含1、2、3或4个选自O、S和N的杂原子，且任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-O-C1-4卤代烷基、卤素、羟基和氧代基团；
R11选自氢、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R12选自氢、C1-4烷基、-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基、-C(O)HET和-C(O)C1-4烷基；其中C1-4烷基任选地被1、2或3个卤素基团取代；其中-C(O)C1-4烷基任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2、HET、-O-C1-4烷基和C6-10芳基；其中-O-C1-4烷基可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、氧代、-N(R11)2和C6-10芳基；其中C6-10芳基可以任选地被1、2或3个卤素基团取代，且其中-C(O)C6-10芳基、-C(O)C6-10环烷基和-C(O)HET可以任选地被1、2或3个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-O-C1-4烷基、-OC1-4卤代烷基和卤素基团；且
R13、R13’和R13”各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6环烷基和HET，其中R1、R2、R5和R9的至少一个任选地包含显像剂。
32.根据权利要求1-31的化合物，其中R1、R2、R5和R9的至少一个包含显像剂。
33.根据权利要求32的化合物，其中所述的显像剂选自PET显像剂、SPECT显像剂和计算机体层摄影显像剂。
34.根据权利要求32的化合物，其中所述的显像剂选自顺磁性离子、x-射线显像剂、荧光团和放射性同位素。
35.根据权利要求1-31的化合物，其中R1、R2、R5和R9的至少一个包含放射性同位素。
36.根据权利要求35的化合物，其中所述的放射性同位素为18F。
37.根据权利要求1-31的化合物，其中R1、R2、R5和R9的至少一个包含PET显像剂。
38.根据权利要求37的化合物，其中所述的PET显像剂包含18F。
39.药物组合物，它包含权利要求1-38的化合物和药学上可接受的载体。
40.治疗有需要的受试者的免疫调节异常的方法，该方法包括对所述患者施用治疗所述免疫调节异常有效量的权利要求1-38的化合物。
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