BR112020001695A2 - compostos macrocíclicos e usos dos mesmos - Google Patents

Abstract

A presente revelação refere-se a determinados compostos macrocíclicos que inibem SRC e MET, e/ou CSF1R, composições farmacêuticas que contêm tais compostos, e métodos de uso de tais compostos para tratar câncer.

Description

“COMPOSTOS MACROCÍCLICOS E USOS DOS MESMOS” Referência Cruzada aos Pedidos Relacionados

[001] Este pedido reivindica prioridade disposta no título 35 do U.S.C. § 119(e) do Pedido Provisório nº de série U.S. 62/538.193 depositado em 28 de julho de 2017, e Pedido Provisório nº de série U.S. 62/700.990 depositado em 20 de julho de 2018, cujo conteúdo é incorporado ao presente documento a título de referência.

Campo da Técnica

[002] A presente revelação refere-se a determinados compostos macrocíclicos que inibem SRC e MET, e/ou CSF1R, composições farmacêuticas que contêm tais compostos, e métodos de uso de tais compostos para tratar câncer.

Antecedentes

[003] Proteína quinases são reguladores-chave para crescimento celular, proliferação e sobrevivência.

Alterações genéticas e epigenéticas se acumulam em células cancerígenas causando ativação anormal de vias de transdução de sinal que direcionam processos malignos. (Manning, G. et al, The protein kinase complement of the human genome.

Science 2002, 298, 1.912 a 1.934). A inibição farmacológica dessas vias de sinalização apresenta oportunidades de intervenção promissoras para terapias de câncer alvejadas.

(Sawyers, C. Targeted cancer therapy. Nature 2004, 432, 294 a 297).

[004] MET, também chamado de receptor de fator de crescimento de hepatócito (HGFR), foi constatado em 1984 (Cooper, C. S., et al Molecular cloning of a new transforming gene from a chemically transformed human cell line. Nature 1984, 311, 29 a 33). Fator de crescimento de hepatócito (HGF), também conhecido como fator de dispersão (SF), é o ligante natural de alta afinidade de MET (Bottaro DP et al.

Identification of the hepatocyte growth factor receptor as the c-met proto-oncogene product. Science. 1991, 251 (4995), 802–804). A via de sinalização de HGF/MET é implicada em crescimento invasivo durante processos de desenvolvimento de embrião, regeneração de órgão pós-natal, cicatrização de feridas e regeneração de tecido. No entanto, o eixo HGF/MET é frequentemente desviado por células cancerígenas para tumorigenêse, crescimento invasivo, e metástase (Boccaccio, C.; Comoglio, P. M. Invasive growth: a MET-driven generic programme for cancer and stem cells. Nat. Rev. Cancer 2006, 6, 637 a 645). Desregulações de MET e/ou HGF por mutações de ativação, amplificações de gene, superexpressão, e crescimento celular de influência de regulação de ciclo tanto autócrino quanto parácrino, proliferação, angiogênese, invasão, sobrevivência e metástase, causando tumorigenêse e progressão de tumor (Ma, PC et al. Expression and mutational analysis of MET in human solid cancers. Genes Chromosomes Cancer 2008, 47, 1.025 a 1.037). A superexpressão de MET e/ou HGF foi detectada em uma grande variedade de tumores sólidos tais como fígado, mama, pâncreas, pulmão, rins, bexiga, ovário, cérebro, próstata, e muitos outros, e é frequentemente associado a um fenótipo metastático e fraca prognose (Maulik, G., et al. Role of the hepatocyte growth factor receptor, MET, in oncogenesis and potential for therapeutic inhibition. Cytokine Growth Factor Rev. 2002, 13, 41 a 59). A amplificação de MET foi relatada em diferentes cânceres humanos incluindo carcinomas gastroesofageais, cânceres colorretais, NSCLC, meduloblastomas e glioblastomas (Smolen, G. A., et al.

Amplification of MET may identify a subset of cancers with extreme sensitivity to the selective tyrosine kinase inhibitor PHA-665752. Proc. Natl. Acad. Sci. EUA 2006, 103,

2.316 a 2.321). Um conjunto diverso de mutações de MET no domínio de tirosina quinase, juxtamembrana, e domínio extracelular de mutações tanto de linhagem germinativa quanto somáticas foram descritas em muitos tumores sólidos, incluindo carcinomas renais papilares humanos hereditários e esporádicos, câncer pulmonar, câncer ovariano, carcinomas hepatocelulares infantis, carcinoma de célula escamosa da cabeça e pescoço, e câncer gástrico (Ghiso, E.; Giordano, S.

Targeting MET: why, where and how? Curr. Opin. Pharmacol.

2013, 13, 511 a 518). A deleção de éxon 14 de MET representa uma classe inovadora de evento oncogênico acionável com impacto clínico potencial e aplicações terapêuticas em pacientes afetados por diferentes tipos de câncer (Pilotto S, MET exon 14 juxtamembrane splicing mutations: clinical and therapeutical perspectives for cancer therapy. Ann Transl Med. 2017 5(1):2). O estímulo autócrino ou parácrino é um mecanismo para ativação de MET aberrante. A ativação autócrina de MET desempenha uma função causal no desenvolvimento de melanoma maligno e aquisição do fenótipo metastático (Otsuka, T., et al. MET autocrine activation induces development of malignant melanoma and acquisition of the metastatic phenotype. Cancer Res. 1998, 58, 5.157 a

5.167). Para glioblastoma (GBM), a expressão autócrina de HGF correlacionada com níveis de fosforilação de MET em linhagens celulares autócrinas de HGF, e mostrou alta sensibilidade à inibição de MET in vivo, enquanto um ambiente parácrino de HGF poderia intensificar o crescimento de glioblastoma in vivo, mas não demonstrou sensibilidade à inibição de MET (Xie, Q., et al. Hepatocyte growth factor (HGF) autocrine activation predicts sensitivity to MET inhibition in glioblastoma. Proc. Natl. Acad. Sci. EUA, 2012, 109, 570 a 575). A expressão aberrante de HGF é um elemento crucial em patogênese de AML que causa ativação autócrina de MET em quase metade das linhagens celulares de AML e amostras clínicas (Kentsis, A., et al. Autocrine activation of the MET receptor tyrosine kinase in acute myeloid leukemia. Nat.

Med. 2012, 18, 1.118 a 1.122).

[005] A regulação ascendente de sinalização de HGF/MET foi frequentemente relatada como sinalização compensatória para conferir resistência para terapias alvejadas de quinase. A amplificação de MET foi detectada em 4% a 20% de pacientes com NSCLC com as mutações de EGFR que adquiriram resistência a tratamento com gefitinibe ou erlotinibe (Sequist, L. V., et al. Analysis of tumor specimens at the time of acquired resistance to EGFR-TKI therapy in 155 patients with EGFR-mutant lung cancers. Clin.

Cancer Res. 2013, 19, 2.240 a 2.247). A regulação ascendente de HGF ligante representa outro mecanismo de resistência de EGFR-TKI. A alta expressão de HGF foi constatada dentre espécimes clínicos com resistência adquirida que não têm uma mutação de T790M ou amplificação de MET assim como entre casos que exibiram resistência primária apesar de ter mutações de gene EGFR de ativação sensível a EGFR-TKI (Yano, S., et al. Hepatocyte growth factor induces gefitinib resistance of lung adenocarcinoma with epidermal growth factor receptor-activating mutations. Cancer Res. 2008, 68,

9.479 a 9.487). A amplificação de MET é associada à resistência adquirida a cetuximabe ou panitumumabe em pacientes com câncer colorretal metastático que não desenvolveram mutações de KRAS durante terapias anti-EGFR (Bardelli, A., et al. Amplification of the MET Receptor

Drives Resistance to Anti-EGFR Therapies in Colorectal Cancer. Cancer Discov. 2013, 3, 658 a 673). A resistência acionada por fator de crescimento a partir de microambiente tumoral representa um mecanismo comum potencial para inibidores de quinase anticâncer. A regulação ascendente de HGF estromal confere resistência ao ramurafenibe inibidor de BRAF em células de melanoma mutantes de BRAF (Straussman, R., et al. Tumour micro-environment elicits innate resistance to RAF inhibitors through HGF secretion. Nature 2012, 487, 500 a 504). Foi relatado que a ativação mediada por ligante de tirosina quinases receptoras alternativas foi observada em células cancerígenas originalmente dependentes tanto de MET, FGFR2, como de FGFR3, e RTKs das famílias HER e EGFR assim como compensadas por MET para perda um do outro (Harbinski, F., et al. Rescue screens with secreted proteins reveal compensatory potential of receptor tyrosine kinases in driving cancer growth. Cancer Discov. 2012, 2, 948 a 959).

Portanto, bloquear respostas celulares adaptativas que acionam expressão de ligante compensatória é necessária para alcançar efeitos antitumorais ideais e prolongados.

[006] Mutação de K-Ras oncogênica ocorre frequentemente em cânceres, incluindo cânceres pancreático, gástrico e pulmonar. Cânceres mutantes de K-Ras são mais dependentes de K-Ras em condições de cultura independentes de ancoragem do que em condições de cultura de camada única.

A expressão e sinalização de Met intensificas são essenciais para crescimento independente de ancoragem de células cancerígenas mutantes de K-Ras e sugere que inibidores farmacológicos de MET poderia ser eficaz para pacientes com tumor mutante de K-Ras (Fujita-Sato, S., et al. Enhanced MET Translation and Signaling Sustains K-Ras-Driven Proliferation under Anchorage-Independent Growth Conditions.

Cancer Res. 2015, 75, 2.851 a 2.862).

[007] Tirosina quinases citoplásmicas da família SRC (SFKs) exibem funções importantes em transdução de sinal induzida por um grande número de estímulos extracelulares que incluem fatores de crescimento e integrinas (Parsons, S.

J., et al. Src family kinases, key regulators of signal transduction. Oncogene, 2004, 23, 7.906 a 7.909). A Expressão elevada da SRC de tirosina quinase não-receptora e/ou atividade de quinase de SRC aumentada foi relatada em uma ampla variedade de cânceres humanos, incluindo cânceres de mama, cólon, pulmão, e cabeça e pescoço. A ativação aumentada de SRC e STAT3 foi relatada como associada a muitos cânceres epiteliais e ligados à expressão de um número de fatores de crescimento tais como vascular fator de crescimento endotelial e HGF. SRC e STAT3 pode atuar de modo cooperativo como reguladores a montante de expressão de HGF, resultando em estabelecimento de um ciclo autócrino de HGF, amplificação de sinal, e um fenótipo invasivo (Wojcik, E.

J., et al. Uma função de ativação inovadora de SRC e STAT3 na transcrição de HGF em células de carcinoma mamárias.

Oncogene. 2006, 25, 2.773 a 2.784). Portanto, alvejar via de sinalização de SRC/STAT3 pode ser eficaz para a interrupção de ciclos de HGF autócrinos em cânceres. Inibidores de EGFR têm resposta satisfatória somente em pacientes mutantes de EGFR com NSCLC. A ativação de EGFR de tipo selvagem de fenótipos invasivos se baseia amplamente em sinalização de EGFR-SRC-MET através de via independente de HGF (Dulak AM, et al. HGF-independent potentiation of EGFR action by MET.

Oncogene. 2011, 30, 3.625 a 3.635). Ligantes de EGFR induzem ao acúmulo de MET ativado, que começa em 8 h e continua por 48 h, causando um aumento de expressão de MET e fosforilação de resíduos de tirosina de MET críticos sem a ativação de proteína quinase (MAPK) ativada por mitógeno ou AKT. Essa sinalização lateral relacionada à transcrição de gene é associada à fosforilação de SRC prolongada, e a via de SRC é envolvida com comunicação de EGFR a MET. Embora EGFR seja superexpresso em cerca de 90% do carcinoma de célula escamosa de cabeça e pescoço (HNSCC), inibidores de EGFR desenvolvidos até então tinham limitada eficácia clínica. Por exemplo, a ativação independente de ligante de MET contribui especificamente para resistência de erlotinibe em HNSCC com SRC ativado, em que a ativação de MET é mais dependente de SRC do que de EGFR, fornecendo uma via de sobrevivência alternativa (Stabile, L. P., et al. c-SRC activation mediates erlotinib resistance in head and neck cancer by stimulating MET. Clin Cancer Res. 2012, 19, 1 a 13). A ativação aberrante de SRC foi demonstrada em inúmeros tumores epiteliais, incluindo HNSCC. A inibição de SRC resultou em uma redução universal e profunda de invasão e migração de linhagens celulares de HNSCC, mas produziu citotoxicidade em algumas das linhagens celulares de HNSCC. A ativação de MET prolongada media a resistência à inibição de SRC. Os efeitos citotóxicos sinérgicos de SRC e inibição de MET foram observados em linhagens celulares de HNCC (Sen, B., et al.

Distinct interactions between SRC and MET in mediating resistance to SRC inhibition in head and neck cancer. Clin Cancer Res. 2010, 17, 1 a 11).

[008] Foi relatado que ativação de MET induzida por cetuximabe causou resistência de cetuximabe em células cancerígenas de cólon Caco-2, e resistência de cetuximabe promovida por ativação de SRC interagindo com MET por meio de formação de complexo de MET/SRC/EGFR (Song N, et al.

Cetuximab-induced MET activation acts as a novel resistance mechanism in colon cancer cells. Int J Mol Sci. 2014, 15,

5.838 a 5.851). SRC é um transdutor a jusante principal de crescimento tumoral acionado por MET. A inibição de SRC em linhagens celulares de carcinoma gástrico dependentes de Met intensificou a sensibilidade de célula à inibição de MET que suporta o potencial terapêutico de tratamento combinatorial com inibidores de MET e SRC (Bertotti, A., et al. Inhibition of SRC impairs the growth of MET-addicted gastric tumors.

Clin Cancer Res. 2010, 16, 3.933 a 3.943). Embora a sinalização de HGF/MET seja implicada no desenvolvimento de câncer colorretal (CRC), foi demonstrado que a inibição de MET por si só tem eficácia limitada. A ativação de SRC foi essencial for ativação de MET dependente e independente de ligante. A inibição de MET e SRC combinados intensificou a inibição de proliferação celular e apoptose em células cancerígenas de cólon mutantes e de RAS de tipo selvagem (Song, N., et al. Dual inhibition of MET and SRC kinase activity as a combined targeting strategy for colon cancer.

Exp Ther Med etm.2017.4692).

[009] CSF1R, também conhecido como FMS, é um receptor para o fator 1 de estímulo de colônia, uma citocina que controla a produção, diferenciação e função de macrófagos. Inflamação não-solucionadora no microambiente tumoral é um marco de câncer e associada a macrófagos polarizados de M2. Macrófagos associados a tumor (TAMs) remetem com mais proximidade a macrófagos polarizados de M2, e exibem funções importantes em promover a proliferação, invasão, e metástase de câncer (Yang L, et al. Tumor- associated macrophages: from basic research to clinical application. J Hematol Oncol. 2017, 10, 58). A função promotora de tumor de TAMs é baseada em sua capacidade de secretar fatores proangiogênicos e de crescimento, assim como suprimir potencialmente função efetora de célula T liberando citocinas imunossupressivas e afetando seu metabolismo (Ries CH, et al.

Targeting tumor-associated macrophages with anti-CSF1R antibody reveals a strategy for cancer therapy.

Cancer Cell. 2014, 25, 846 a 859). Embora os anticorpos monoclonais anti-PD-1 (mAbs) que alvejam o ponto de verificação imune tenham demonstrado benefícios para o tratamento de determinados cânceres, esses fármacos nem sempre são eficazes.

Estudos recentes indicaram que a eficácia de mAbs anti-PD-1 foi impactada pela captação de células T CD8+ que se infiltram em tumor PD-1+ ligado a mAbs anti-PD-1 por macrófagos associados a tumor PD-1. Terapias de combinação projetadas para alvejar macrófagos tumorais e anti-PD-1, pode fornecer benefício adicional aumentando a entrega de fármaco de bloqueio de ponto de verificação imune às células T CD8+, intensificando assim a atividade de imunoterapia (Arlauckas SP, et al.

In vivo imaging reveals a tumor-associated macrophage-mediated resistance pathway in anti-PD-1 therapy.

Sci Transl Med. 2017, 9(389). pii:

eaal3604). A sobrevivência de TAMs é mediada por sinalização através de receptor de fator 1 estimulante de colônia

(CSF1R), e inibição de sinalização de CSF1R reduz TAMs e aumenta a razão de CD8/célula T CD4 em pacientes com tumores sólidos avançados. Portanto, alvejar sinalização de CSF1R que causa a modulação de TAMs é uma estratégia terapêutica promissora em vários tumores sólidos, como um agente único ou em combinação com padrão de agentes quimioterapêuticos de cuidado e imunoterapias. A coexpressão de CSF1R e CSF1 é mais frequentemente detectada em tumores invasivos. A ativação de CSF-1R autócrina induziu a hiperproliferação e interrupção de integridade juncional em estruturas acinares formadas por células epiteliais mamárias humanas em cultura tridimensional através de um mecanismo dependente de SRC (Wrobel CN, et al. Ativação de CSF1R autócrina promove interrupção dependente de SRC de arquitetura epitelial mamária. J Cell Biol. 2004, 165, 263 a 273). A inibição de CSF-1R e SRC pode se provar ser uma estratégia valiosa no tratamento de tumores invasivos. Tumor celular gigante tenosinovial (TGCT) ou sinovite vilonodular pigmentada (PVNS) é uma proliferação neoplástica clonal que surge a partir de células que superexpressam CSF1 que recrutam macrófagos policlônicos que portam CSF1R e formam a massa do tumor. A inibição de CSF1R com uso de inibidores de molécula pequena pode causar o aprimoramento na junta afetada (Ravi V, et al. Treatment of tenosynovial giant cell tumor and pigmented villonodular synovitis. Curr Opin Oncol. 2011, 23, 361 a 366).

[010] Em resumo, a ativação aberrante de via de

HGF/MET foi frequentemente encontrada em cânceres humanos por meio de superexpressão de proteína, mutação, amplificação de gene, e também regulação ascendente parácrina e autócrina. Adicionalmente, a ativação de sinalização de HGF/MET confere resistência a terapias de câncer. A ativação de SRC é implicada para ativação de MET dependente e independente de ligante. CSF1R desempenha uma função importante na regulação de macrófago associado a tumor. Portanto, a inibição de MET/SRC/CSF1R polifarmacológica tem grande potencial para intervenções terapêuticas em cânceres. Até o momento, compostos que inibem MET/SRC e/ou CSF1R foram elusivos. Sendo assim, há uma necessidade significativa não atendida.

Sumário

[011] Em um aspecto, a revelação se refere a um composto da Fórmula I

I

[012] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que

[013] X1 e X2 são, independentemente, –CR6R7-, S, S(O), S(O)2, O ou N(R8);

[014] R1 é H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C3- C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)C1-C6 alquila, - NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, - N(C1-C6 alquil)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, - N(C1-C6 alquil)S(O)NH2, N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1- C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)NH(C1- C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), N(C1- C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, SC1-C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-C6 alquila), - S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, -S(O)2N(C1-C6 alquila)2, P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3- C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros;

[015] cada R2 e R3 é, independentemente, H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3- C6 cicloalquila, C6-C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2- C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1- C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1- C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, N(C1C6 alquil)C(O)NHC1C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)C(O)N(C1- C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquil)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -NHS(O)2(C1-C6 alquila), - N(C1-C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, -NHS(O)2NH2, N(C1C6 alquil)S(O)NH2, N(C1- C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1-C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquil)S(O)N(C1C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, - C(O)OC1-C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), -C(O)N(C1- C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, -S(O)C1-C6 alquila, S(O)2C1- C6 alquila, -S(O)NH(C1-C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), -

S(O)N(C1-C6 alquila)2, S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros; ou R2 e R3 tomados em conjunto com os átomos de carbono aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma C5-C7 cicloalquila ou uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros; ou R2 e R4 tomados em conjunto com os átomos aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros;

[016] R4 é H, C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros é, independentemente, substituído opcionalmente por halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila monocíclica com 5 a 7 membros;

[017] R5 é H ou -NR6R7;

[018] cada R6, R7 e R8 são, cada um independentemente, selecionados a partir do grupo que consiste em H, C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila; em que cada átomo de hidrogênio em C1- C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6- C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2;

[019] R9 é H, flúor, cloro, bromo, -CN, -CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1- C6 alquila)2;

[020] R10 é H, flúor, cloro ou bromo; e

[021] n é 1 ou 2;

[022] desde que, quando R5 é H, R9 seja selecionado a partir do grupo que consiste em -CN, CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

[023] Em outro aspecto, a revelação se refere a uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e opcionalmente pelo menos um ou mais dentre um diluente farmaceuticamente aceitável, carreador ou excipiente.

[024] Em outro aspecto, a revelação é direcionada a um método de tratamento de câncer em um paciente que compreende,

[025] a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[026] Em outro aspecto, a revelação é direcionada a um método de tratamento de câncer em um paciente que compreende,

[027] a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R; e

[028] b. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades desse aspecto, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades desse aspecto, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I.

Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[029] Em outro aspecto, a revelação é direcionada a um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da

Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[030] Em outro aspecto, a revelação é direcionada a um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente.

Em algumas modalidades desse aspecto, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades desse aspecto, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[031] Em outro aspecto, a revelação é direcionada ao uso de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer in a paciente. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto é administrado em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades desse aspecto, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades desse aspecto, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[032] Em outro aspecto, a revelação é direcionada a uma composição que compreende um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade terapeuticamente eficaz, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto é administrado em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades desse aspecto, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades desse aspecto, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[033] Em ainda outro aspecto, a revelação refere- se a uma composição sinérgica de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, e um inibidor de EGFR, em que os dois componentes entram em contato entre si em um locus. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da Fórmula I.

[034] Modalidades, recursos e vantagens adicionais da revelação serão evidentes a partir da descrição detalhada a seguir e através da prática da revelação. Os compostos da presente revelação podem ser descritos como modalidades em qualquer uma das cláusulas enumeradas a seguir. Será entendido que qualquer uma das modalidades descritas no presente documento pode ser usada em conexão com quaisquer outras modalidades descritas no presente documento na extensão de que as modalidades não se contradizem.

[035] 1. Um composto da Fórmula I

I

[036] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que

[037] X1 e X2 são, independentemente, -CR6R7-, S, S(O), S(O)2, O ou N(R8);

[038] R1 é H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C3- C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)C1-C6 alquila, - NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, - N(C1-C6 alquil)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, - N(C1-C6 alquil)S(O)NH2, N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1- C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)NH(C1- C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), N(C1- C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, SC1-C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-C6 alquila), - S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, -S(O)2N(C1-C6 alquila)2, P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3- C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros;

[039] cada R2 e R3 é, independentemente, H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3- C6 cicloalquila, C6-C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2- C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1- C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1- C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, N(C1C6 alquil)C(O)NHC1C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)C(O)N(C1- C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquil)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -NHS(O)2(C1-C6 alquila), - N(C1-C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, -NHS(O)2NH2, N(C1C6 alquil)S(O)NH2, N(C1- C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1-C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquil)S(O)N(C1C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, - C(O)OC1-C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), -C(O)N(C1-

C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, -S(O)C1-C6 alquila, S(O)2C1- C6 alquila, -S(O)NH(C1-C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), - S(O)N(C1-C6 alquila)2, S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros; ou R2 e R3 tomados em conjunto com os átomos de carbono aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma C5-C7 cicloalquila ou uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros; ou R2 e R4 tomados em conjunto com os átomos aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros;

[040] R4 é H, C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros é, independentemente, substituído opcionalmente por halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila monocíclica com 5 a 7 membros;

[041] R5 é H ou -NR6R7;

[042] cada R6, R7 e R8 são, cada um independentemente, selecionados a partir do grupo que consiste em H, C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila; em que cada átomo de hidrogênio em C1- C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6- C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2;

[043] R9 é H, flúor, cloro, bromo, -CN, -CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1- C6 alquila)2;

[044] R10 é H, flúor, cloro ou bromo; e

[045] n é 1 ou 2;

[046] desde que, quando R5 é H, R9 seja selecionado a partir do grupo que consiste em -CN, CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

[047] 2. O composto, de acordo com a cláusula 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R5 é H.

[048] 3. O composto, de acordo com a cláusula 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R9 é - CN.

[049] 4. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R10 é F.

[050] 5. O composto, de acordo com a cláusula 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R5 é

NR6R7.

[051] 6. O composto, de acordo com a cláusula 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R6 e R7 são H.

[052] 7. O composto, de acordo com a cláusula 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R9 é CN.

[053] 8. O composto, de acordo com a cláusula 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R9 é CN.

[054] 9. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 5 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R10 é flúor.

[055] 10. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X1 é N(R8).

[056] 11. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R8 é C1C6 alquila, em que cada átomo de hidrogênio é, independentemente, substituído opcionalmente por flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila),

[057] -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, - C(O)NH(C1C6 alquila), ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

[058] 12. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R8 é etila, propila, iso-propila ou metilciclopropila.

[059] 13. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X2 é O.

[060] 14. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6-C10 arila, -C(O)OR7 ou -C(O)NR7R8; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1- C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, -NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, -N(C1-C6 alquil)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, - N(C1-C6 alquil)S(O)NH2, N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1- C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)NH(C1-

C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), N(C1- C6 alquil)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-C6 alquila), - S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1C6 alquila)2, -S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, e R3 é H.

[061] 15. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é C1-C6 alquila.

[062] 16. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas anteriores, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é metila.

[063] 17. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é H, e R3 é H, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6- C10 arila, -C(O)OR7 ou -C(O)NR7R8; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)C1-C6 alquila, -

NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, - N(C1-C6 alquil)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, - N(C1C6 alquil)C(O)OC1-C6 alquila, NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1-C6 alquil)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, - N(C1-C6 alquil)S(O)NH2, N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1- C6 alquila), -NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1- C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquil)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, - C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1- C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1- C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, - S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros.

[064] 18. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 e R3 são H.

[065] 19. O composto, de acordo com a cláusula 1, selecionado a partir do grupo que consiste em

, , , , , , , , ; e

[066] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[067] 20. Uma composição farmacêutica que compreende um composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 19, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um ou mais dentre um diluente farmaceuticamente aceitável, carreador ou excipiente.

[068] 21. Um método de tratamento de câncer em um paciente que compreende,

[069] a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R.

[070] 22. O método, de acordo com a cláusula 22, em que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 19.

[071] 23. O método, de acordo com a cláusula 21 ou 22, em que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[072] 24. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 21 a 23, que compreende adicionalmente

[073] b. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

[074] 25. O método, de acordo com a cláusula 24, em que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[075] 26. O método, de acordo com a cláusula 24, em que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[076] 27. O método, de acordo com a cláusula 26, em que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

[077] 28. O método, de acordo com a cláusula 24, em que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

[078] 29. O método, de acordo com a cláusula 28, em que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF- 06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[079] 30. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 24, 28 ou 29, em que o agente anticâncer adicional é gefitinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[080] 31. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 24, 28 ou 29, em que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[081] 32. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 24, 28 ou 29, em que o agente anticâncer adicional é erlotinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[082] 33. Um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente.

[083] 34. O composto, de acordo com a cláusula 33, em que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 19.

[084] 35. O composto, de acordo com a cláusula 33 ou 34, em que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[085] 36. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 to 35, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

[086] 37. O composto, de acordo com a cláusula 36, em que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[087] 38. O composto, de acordo com a cláusula 36, em que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[088] 39. O composto, de acordo com a cláusula 38, em que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

[089] 40. O composto, de acordo com a cláusula 36, em que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

[090] 41. O composto, de acordo com a cláusula 40, em que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF- 06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[091] 42. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 36, 40 ou 41, em que o agente anticâncer adicional é gefitinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[092] 43. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 36, 40 ou 41, em que o agente anticâncer adicional é osimertinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[093] 44. O composto, de acordo com qualquer uma das cláusulas 36, 40 ou 41, em que o agente anticâncer adicional é erlotinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[094] 45. Uso de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no preparo de um medicamento para uso no tratamento de câncer.

[095] 46. O uso, de acordo com a cláusula 45, em que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 19.

[096] 47. O uso, de acordo com a cláusula 45 ou 46, em que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[097] 48. O uso, de acordo com qualquer uma das cláusulas 45 a 47, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

[098] 49. O uso, de acordo com a cláusula 48, em que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[099] 50. O uso, de acordo com a cláusula 48, em que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[100] 51. O uso, de acordo com a cláusula 50, em que o anticorpo de EGFR cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

[101] 52. O uso, de acordo com a cláusula 48, em que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

[102] 53. O uso, de acordo com a cláusula 52, em que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe,

nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF- 06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[103] 54. O uso, de acordo com qualquer uma das cláusulas 48, 52 ou 53, em que o agente anticâncer adicional é gefitinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[104] 55. O uso, de acordo com qualquer uma das cláusulas 48, 52 ou 53, em que o agente anticâncer adicional é osimertinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[105] 56. O uso, de acordo com qualquer uma das cláusulas 48, 52 ou 53, em que o agente anticâncer adicional é erlotinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[106] 57. Uma composição que compreende um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em uma quantidade terapeuticamente eficaz, para uso no tratamento de câncer em um paciente.

[107] 58. A composição, de acordo com a cláusula 57, em que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 20.

[108] 59. A composição, de acordo com a cláusula 56 ou 57, em que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[109] 60. A composição, de acordo com qualquer uma das cláusulas 57 a 59, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

[110] 61. A composição, de acordo com a cláusula 60, em que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[111] 62. A composição, de acordo com a cláusula 60, em que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[112] 63. A composição, de acordo com a cláusula 62, em que o anticorpo de EGFR cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

[113] 64. A composição, de acordo com a cláusula 60, em que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

[114] 65. A composição, de acordo com a cláusula 64, em que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[115] 66. A composição, de acordo com qualquer uma das cláusulas 60, 64 ou 65, em que o agente anticâncer adicional é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[116] 67. A composição, de acordo com qualquer uma das cláusulas 60, 64 ou 65, em que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[117] 68. A composição, de acordo com qualquer uma das cláusulas 60, 64 ou 65, em que o agente anticâncer adicional é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[118] 69. Uma composição sinérgica de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, e um inibidor de EGFR, em que os dois componentes entram em contato entre si em um locus.

[119] 70. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 69, em que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 19.

[120] 71. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 69 ou 70, em que o locus é um paciente.

[121] 72. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 69 ou 70, em que o locus é um câncer.

[122] 73. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 72, em que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar,

glioblastoma, ou câncer de cabeça e pescoço.

[123] 74. A composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das cláusulas 69 a 73, em que o inibidor de EGFR é um anticorpo de EGFR.

[124] 75. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 74, em que o anticorpo de EGFR cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

[125] 76. A composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das cláusulas 69 a 73, em que o inibidor de EGFR é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

[126] 77. A composição sinérgica, de acordo com a cláusula 76, em que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[127] 78. A composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das cláusulas 69 a 73, 76 ou 77, em que o inibidor de EGFR é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[128] 79. A composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das cláusulas 69 a 73, 76 ou 77, em que o inibidor de EGFR é osimertinibe ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[129] 80. A composição sinérgica de acordo com qualquer uma das cláusulas 69 a 73, 76 ou 77, em que o inibidor de EGFR é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Breve descrição dos Desenhos

[130] A Figura 1 mostra uma imagem de gel de estudos de fosforilação de MET em células SNU-5 após 4 horas de incubação com o Composto 5. O gel mostra que o Composto 5 inibiu fosforilação de MET em células SNU-5.

[131] A Figura 2 mostra uma imagem de gel de estudos de fosforilação de MET e efetores a jusante em células MKN- 45 após 16 horas de incubação com o Composto 5. O gel mostra que o Composto 5 inibiu fosforilação de MET e efetores a jusante em células MKN-45.

[132] A Figura 3 é um gráfico que mostra os efeitos do Composto 5, capmatinibe, e AZD9291 em proliferação celular de HCC827. Uma forte atividade sinérgica foi observada na combinação de AZD9291 com o Composto 5 com um IC50 de 2 nM e Emax de 71% no ensaio de proliferação celular de HCC827. (▼) capmatinibe (IC50: >10.000 nM, % de Emax: -), (▲) Composto 5 (IC50: 3.000 nM, % de Emax: ), (■) AZD9291 (IC50: 5 nM (parcial), % de Emax: 47), (♦) capmatinibe (1 µM) + AZD9291 (IC50: 5 nM (parcial), % de Emax: 47), (●) Composto 5 (1 µM) + AZD9291 (IC50: 2 nM, % de Emax: 71).

[133] A Figura 4 mostra os efeitos do Composto 5,

capmatinibe, AZD9291 e combinações na apoptose de células HCC827 após 48 horas de incubação. Composto 5 sinergizado com AZD9291 para apoptose em linhagem celular de HCC827.

[134] A Figura 5 mostra um ensaio de cicatrização de feridas no qual o Composto 5 e capmatinib inibiram a migração celular de células MKN-45.

[135] A Figura 6 mostra um ensaio de cicatrização de feridas no qual o Composto 5 inibiu a migração celular de HCC827, e campmatinibe mostrou um efeito mínimo.

[136] A Figura 7 é um gráfico que mostra o efeito do Composto 5 em crescimento tumoral no modelo de xenoenxerto de MKN-45. (●) veículo, (■) Composto 5 em 3 mg/kg BID, (▲) Composto 5 em 10 mg/kg BID, (▼) Composto 5 em 30 mg/kg BID.

[137] A Figura 8 mostra o efeito do Composto 5 no peso corporal de camundongos que carregam tumores de xenoenxerto de MKN-45. (●) veículo, (■) Composto 5 em 3 mg/kg BID, (▲) Composto 5 em 10 mg/kg BID, (▼) Composto 5 em 30 mg/kg BID.

[138] A Figura 9 mostra uma imagem de gel de estudos de inibição de fosforilação de MET pelo Composto 5 no modelo de xenoenxerto de MKN-45.

[139] A Figura 10 é um quadro que mostra o efeito do Composto 5 na fosforilação de MET Y1234/1235 em tumores de MKN-45. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 4 h de 10 mg/kg, (▲) Composto 5 em 12 h de 10 mg/kg, (▼) Composto 5 em 4 h de

3 mg/kg, (♦) Composto 5 em 12 h de 3 mg/kg.

[140] A Figura 11 é um quadro que mostra a atividade antitumoral do Composto 5 em tumores LU2503 PDX. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[141] A Figura 12 é um quadro que mostra os pesos corporais dos camundongos que carregam tumores LU2503 PDX tratados com o Composto 5. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[142] A Figura 13 é um quadro que mostra a atividade antitumoral do Composto 5 em tumores BaF3 ETV6-CSF1R. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 5 mg/kg BID, (▲) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[143] A Figura 14 é um quadro que mostra os pesos corporais dos camundongos que carregam tumores LU25BaF3 ETV6-CSF1R tratados com o Composto 5. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 5 mg/kg BID, (▲) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[144] A Figura 15 é um quadro que mostra a atividade antitumoral do Composto 5 em modelo tumoral de camundongo sinérgico MC38. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[145] A Figura 16 é um quadro que mostra os pesos corporais dos camundongos que carregam modelo tumoral de camundongo sinérgico MC38 tratados com o Composto 5. (●) Veículo, (■) Composto 5 em 15 mg/kg BID.

[146] As Figuras 17A a 17G são gráficos que mostram análise FACS de amostras tumorais de cada grupo após o Dia

7 de tratamento com o Composto 5. A Figura 17A mostra % em células CD45+; células T CD8. A Figura 17B mostra % em células CD45+; células T CD4. A Figura 17C mostra % em células CD45+; T-Reg. A Figura 17D mostra % em células CD45+; MDSCs. A Figura 17E mostra % em células CD45+; TAMs. A Figura 17F mostra % em células CD45+; macrófago M1. 17G mostra % em células CD45+; macrófago M2.

[147] As Figuras 18A a 18G são gráficos que mostram análise FACS de amostras tumorais de cada grupo após o Dia 11 de tratamento com o Composto 5. A Figura 18A mostra % em células CD45+; células T CD4. A Figura 18B mostra % em células CD45+; células T CD8. A Figura 18C mostra % em células CD45+; T-Reg. A Figura 18D mostra % em células CD45+; MDSCs. A Figura 18E mostra % em células CD45+; TAMs. A Figura 18F mostra % em células CD45+; macrófago M1. 18G mostra % em células CD45+; macrófago M2.

[148] A Figura 19 é um quadro que mostra a eficácia in vivo do Composto 5 em modelo tumoral de camundongo sinérgico MC38 subcutâneo. (●) Veículo G1 +ISO IiG; (■) Composto 5; (▲) Anti-PD-1, (▼) Composto 5 + Anti-PD-1.

[149] A Figura 20 é um quadro que mostra os pesos corporais de camundongos que carregam modelo tumoral de camundongo sinérgico MC38 subcutâneo. (●) Veículo G1 +ISO IiG; (■) Composto 5; (▲) Anti-PD-1, (▼) Composto 5 + Anti- PD-1.

Descrição Detalhada

[150] Antes da presente revelação ser descrita adicionalmente, deve-se entender que esta revelação não se limita às modalidades particulares descritas, dessa forma, pode, obviamente, variar. Deve-se, ainda, entender que a terminologia usada neste documento é para o propósito de, apenas, descrever modalidades específicas e não se destina a ser limitadora, devido ao fato de que o escopo da presente revelação será limitado, apenas, pelas reivindicações anexas.

[151] A menos que definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado conforme é comumente entendido por uma pessoa com habilidade comum na técnica à qual esta revelação pertence. Todos os documentos de patente, pedidos, pedidos publicados e outras publicações citadas no presente documento estão incorporadas a título de referência em suas totalidades. Se uma definição apresentada nessa seção for contrária ou de outra forma inconsistente com uma definição apresentada em um documento de patente, pedido ou outra publicação que está incorporada no presente documento a título de referência, a definição apresentada nesta seção prevalece sobre a definição incorporada no presente documento a título de referência.

[152] Conforme usadas no presente documento e nas reivindicações anexas, as formas singulares “um”, “uma” e “o(a)” incluem referências plurais, a menos que o contexto indique claramente outra forma. Observa-se adicionalmente que as reivindicações podem ser elaboradas para excluir qualquer elemento opcional. Dessa forma, esta afirmação destina-se a servir como base antecedente para o uso de tal terminologia exclusiva como “somente”, “apenas” e similares em conexão com a citação de elementos da reivindicação ou o uso de uma limitação “negativa”.

[153] Conforme usado no presente documento, os termos “que inclui”, “que contém” e “que compreende” são usados em seu sentido aberto sem limitação.

[154] Para fornecer uma descrição mais concisa, algumas das expressões quantitativas dadas no presente documento não são qualificadas com o termo “cerca de”.

Entende-se que, se o termo “cerca de” for usado explicitamente ou não, toda quantidade dada no presente documento deve se referir ao valor real dado, e também deve significar se referir à aproximação para tal dado valor que seria razoavelmente inferido com base na habilidade comum na técnica, que inclui equivalentes e aproximações devido às condições experimentais e/ou de medição para tal dado valor.

Sempre que um rendimento é dado como uma porcentagem, tal rendimento se refere a uma massa da entidade para a qual o rendimento é dado com relação à quantidade máxima da mesma entidade que seria obtida sob as condições estequiométricas particulares. Concentrações que são dadas como porcentagens se referem às razões de massa, a menos que seja indicado de maneira diferente.

[155] Exceto se observado de outra forma, os métodos e técnicas das presentes modalidades são geralmente realizados de acordo com métodos convencionais bem conhecidos na técnica e conforme descrito em várias referências gerais e mais específicas que são citadas e abordadas ao longo do presente relatório descritivo.

Consultar, por exemplo, Loudon, Organic Chemistry, Quarta Edição, Nova Iorque: Oxford University Press, 2002, páginas 360 a 361, 1.084 a 1.085; Smith e March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Quinta Edição, Wiley-Interscience, 2001.

[156] A nomenclatura química para os compostos descritos no presente documento for geralmente derivada com o uso de ACD/Name 2014 (ACD/Labs) ou ChemBioDraw Ultra 13.0 (Perkin Elmer) comercialmente disponíveis.

[157] Observa-se que certos recursos da revelação, que são, a título de clareza, descritos no contexto de modalidades separadas, também podem ser fornecidos em combinação com uma única modalidade. Por outro lado, vários recursos da revelação, que são, a título de brevidade, descritos no contexto de uma única modalidade, também podem ser fornecidos separadamente ou em qualquer subcombinação adequada. Todas as combinações das modalidades que pertencem aos grupos químicos representados pelas variáveis são especificamente abrangidas pela presente revelação e são reveladas no presente documento como se toda e qualquer combinação estivesse individual e explicitamente revelada, ao ponto de tais combinações abrangerem compostos que são compostos estáveis (isto é, compostos que pode ser isolados, caracterizados e testados para atividade biológica).

Adicionalmente, todas as subcombinações dos grupos químicos listados nas modalidades que descrevem tais variáveis são também especificamente abrangidas pela presente revelação e são reveladas no presente documento como se toda e qualquer subcombinação de grupos químicos estivesse individual e explicitamente revelada no presente documento.

Definições

[158] Conforme usado no presente documento, o termo “alquila” inclui uma cadeia de átomos de carbono, que é opcionalmente ramificada e contém de 1 a 20 átomos de carbono. Deve-se entender, adicionalmente, que em determinadas modalidades, alquila pode ter, vantajosamente, comprimento limitado, que inclui C1-C12, C1-C10, C1-C9, C1-C8, C1-C7, C1-C6, e C1-C4, ilustrativamente, tais grupos alquila de comprimento particularmente limitado, que incluem C1-C8, C1-C7, C1-C6, e C1-C4, e semelhantes, podem ser denominados

“alquila inferior”. Grupos alquila ilustrativos incluem, porém sem limitação, metila, etila, n-propila, isopropila, nbutila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila, 2- pentila, 3-pentila, neopentila, hexila, heptila, octila e semelhantes. Alquila pode ser substituída ou não substituída. Grupos de substituinte típicos incluem cicloalquila, arila, heteroarila, heteroalicíclico, hidróxi, alcóxi, arilóxi, mercapto, alquiltio, ariltio, ciano, halo, carbonila, oxo, (=O), tiocarbonila, O-carbamila, N- carbamila, Otiocarbamila, N-tiocarbamila, C-amido, N-amido, C-carbóxi, O-carbóxi, nitro e amino, ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento.

Será entendido que “alquila” pode ser combinada com outros grupos, tais como aqueles fornecidos acima, para formar uma alquila funcionalizada. A título de exemplo, a combinação de um grupo “alquila”, conforme descrito no presente documento, com um grupo “carbóxi” pode ser denominado um grupo “carboxialquila”. Outros exemplos sem limitação incluem hidroxialquila, aminoalquila e semelhantes.

[159] Conforme usado no presente documento, o termo “alquenila” inclui uma cadeia de átomos de carbono, que é opcionalmente ramificada, e contém de 2 a 20 átomos de carbono, e também inclui pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono (isto é, C=C). Será entendido que nas determinadas modalidades, alquenila pode ser vantajosamente de comprimento limitado, que inclui C2-C12, C2-C9, C2-C8, C2- C7, C2-C6, e C2-C4. Ilustrativamente, tais grupos alquenila de comprimento particularmente limitado, que incluem C2-C8, C2-C7, C2-C6, e C2-C4 podem ser denominados alquenila inferior.

Alquenila pode ser não substituída ou substituída, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento. Grupos alquenila ilustrativos incluem, porém sem limitação, etenila, 1-propenila, 2-propenila, 1-, 2- ou 3butenila, e semelhantes.

[160] Conforme usado no presente documento, o termo “alquinila” inclui uma cadeia de átomos de carbono, que é opcionalmente ramificada, e contém de 2 a 20 átomos de carbono, e também inclui pelo menos uma ligação tripla de carbono-carbono (isto é, C≡C). Será entendido que nas determinadas modalidades, alquinila pode ser vantajosamente, cada uma, de comprimento limitado, que inclui C2-C12, C2-C9, C2-C8, C2-C7, C2-C6, e C2-C4. Ilustrativamente, tais grupos alquinila de comprimento particularmente limitado, que incluem C2-C8, C2-C7, C2-C6, e C2-C4 podem ser denominados alquinila inferior. Alquenila pode ser não substituída ou substituída, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento. Grupos alquenila ilustrativos incluem, porém sem limitação, etenila, 1-propinila, 2-propinila, 1-, 2- ou 3- butinila, e semelhantes.

[161] Conforme usado no presente documento, o termo “arila” se refere a um grupo monocíclico todo de carbono ou policíclico de anel fundido de 6 a 12 átomos de carbono que tem um sistema de pi-elétron completamente conjugado. Será entendido que em determinadas modalidades, arila pode ser vantajosamente de tamanho limitado, tal como C6-C10 arila.

Grupos arila ilustrativos incluem, porém sem limitação, fenila, naftilenila e antracenila. O grupo arila pode ser não substituído ou substituído, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento.

[162] Conforme usado no presente documento, o termo “cicloalquila” se refere a um anel monocíclico todo de carbono com 3 a 15 membros, que inclui um anel bicíclico fundido todo de carbono com 5 membros/6 membros ou 6 membros/6 membros, ou um grupo de anel fundido multicíclico (um sistema de anel “fundido” significa que cada anel no sistema compartilha um par adjacente de átomos de carbono com cada outro anel no sistema), em que um ou mais dos anéis pode conter uma ou mais ligações duplas, porém, a cicloalquila não contém um sistema de pi-elétron completamente conjugado. Será entendido que em determinadas modalidades, cicloalquila pode ser vantajosamente de tamanho limitado, tal como C3-C13, C3-C9, C3-C6 e C4-C6. Cicloalquila pode ser não substituída ou substituída, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento. Grupos cicloalquila ilustrativos incluem, porém sem limitação, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclopentadienila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo- heptila, adamantila, norbornila, norbornenila, 9H-fluoren- 9-ila e semelhantes. Exemplos ilustrativos de grupos cicloalquila mostrados nas representações gráficas incluem as seguintes entidades, na forma de porções químicas apropriadamente ligadas: , , , , , , , , , ,

[163] Conforme usado no presente documento, o termo “heterocicloalquila” se refere a um grupo de anel monocícliclo ou fundido que tem no anel (ou anéis) de 3 a 12 átomos de anel, em que pelo menos um átomo de anel é um heteroátomo, tais como nitrogênio, oxigênio ou enxofre, em que os átomos de anel restantes são átomos de carbono.

Heterocicloalquila pode conter opcionalmente 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos. Heterocicloalquila também pode ter uma ou mais ligações duplas, que incluem ligações duplas em nitrogênio (por exemplo, C=N ou N=N), porém, não contém um sistema de pi-elétron completamente conjugado. Será entendido que em determinadas modalidades, heterocicloalquila pode ser vantajosamente de tamanho limitado, tais como heterocicloalquila com 3 a 7 membros, heterocicloalquila com 5 a 7 membros e semelhantes. Heterocicloalquila pode ser não substituída ou substituída, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento. Grupos heterocicloalquila ilustrativos incluem, porém sem limitação, oxiranila, tianarila, azetidinila, oxetanila, tetra-hidrofuranila, pirrolidinila, tetra-hidropiranila, piperidinila, 1,4-dioxanila, morfolinila, 1,4-ditianila, piperazinila, oxepanila, 3,4-di- hidro-2H-piranila, 5,6di-hidro-2H-piranila, 2H-piranila, 1, 2, 3, 4-tetra-hidropiridinila e semelhantes. Exemplos ilustrativos de grupos heterocicloalquila mostrados nas representações gráficas incluem as seguintes entidades, na forma de porções químicas apropriadamente ligadas:

H H H H O N O N N N O NH O O, , , , , , HN NH, S, N , N , NH , NH , H O S O O O O O O O N S HN O S HN NH NH O O O NH , NH , NH , , , , , , , ,

[164] Conforme usado no presente documento, o termo “heteroarila” se refere a um grupo de anel monocíclico ou fundido de 5 a 12 átomos de anel que contém um, dois, três ou quatro heteroátomos de anel selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, sendo que os átomos de anel restantes são átomos de carbono, e também tem um sistema de pi-elétron completamente conjugado. Será entendido que em determinadas modalidades, heteroarila pode ser vantajosamente de tamanho limitado, tais como heteroarila com 3 a 7 membros, heteroarila com 5 a 7 membros e semelhantes. Heteroarila pode ser não substituída ou substituída, conforme descrito para a alquila ou conforme descrito nas várias modalidades fornecidas no presente documento. Grupos heteroarila ilustrativos incluem, porém sem limitação, pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, pirazolila, piridinila, pirimidinila,

quinolinila, isoquinolinila, purinila, tetrazolila, triazinila, pirazinila, tetrazinila, quinazolinila, quinoxalinila, tienila, isoxazolila, isotiazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, triazolila, benzimidazolila, benzoxazolila, benztiazolila, benzisoxazolila, benzisotiazolila e carbazoloila, e semelhantes. Exemplos ilustrativos de grupos heteroarila mostrados nas representações gráficas incluem as seguintes entidades, na forma de porções químicas apropriadamente ligadas:

H H O N S N N O O S S N N N N N N , , , N , , N, , N , , N , N N N N N S O N N , , , , N N , , , N N ,

[165] Conforme usado no presente documento, “hidróxi” ou “hidroxila” se refere a um grupo -OH.

[166] Conforme usado no presente documento, “alcóxi” se refere tanto a um grupo -O-(alquila) quanto a um grupo -O-(cicloalquila não substituída). Exemplos representativos incluem, porém sem limitação, metóxi, etóxi, propóxi, butóxi, ciclopropilóxi, ciclobutilóxi, ciclopentilóxi, ciclo-hexilóxi e semelhantes.

[167] Conforme usado no presente documento, “arilóxi” se refere a um grupo -O-arila ou -O-heteroarila.

Exemplos representativos incluem, porém sem limitação, fenóxi, piridinilóxi, furanilóxi, tienilóxi, pirimidinilóxi, pirazinilóxi e semelhantes.

[168] Conforme usado no presente documento, “mercapto” se refere a um grupo -SH.

[169] Conforme usado no presente documento, “alquiltio” se refere a um grupo -S-(alquila) ou -S- (cicloalquila não substituída). Exemplos representativos incluem, porém sem limitação, metiltio, etiltio, propiltio, butiltio, ciclopropiltio, ciclobutiltio, ciclopentiltio, ciclo-hexiltio e semelhantes.

[170] Conforme usado no presente documento, “ariltio” se refere a um grupo -S-arila ou -S-heteroarila.

Exemplos representativos incluem, porém sem limitação, feniltio, piridiniltio, furaniltio, tieniltio, pirimidiniltio e semelhantes.

[171] Conforme usado no presente documento, “halo” ou “halogênio” se refere a flúor, cloro, bromo ou iodo.

[172] Conforme usado no presente documento, “ciano” se refere a um grupo -CN.

[173] O termo “oxo” representa um carbonil- oxigênio. Por exemplo, uma ciclopentila substituída com oxo é ciclopentanona.

[174] Conforme usado no presente documento, “ligação” se refere a uma ligação covalente.

[175] O termo “substituído” significa que o grupo ou porção química especificada carrega um ou mais substituintes. O termo “não substituído” significa que o grupo especificado não carrega substituintes. Quando o termo “substituído” é usado para descrever um sistema estrutural, a substituição deve ocorrer em qualquer posição de valência permitida no sistema. Em algumas modalidades, “substituído” significa que o grupo ou porção química especificada carrega um, dois ou três substituintes. Em outras modalidades, “substituído” significa que o grupo ou porção química especificada carrega um ou dois substituintes. Em ainda outras modalidades, “substituído” significa que o grupo ou porção química especificada carrega um substituinte.

[176] Conforme usado no presente documento, “opcional” ou “opcionalmente” significa que o evento ou circunstância subsequentemente descrito pode, porém, não precisa, ocorrer, e que a descrição inclui casos em que o evento ou circunstância ocorre e casos em que o mesmo não ocorre. Por exemplo, “em que cada átomo de hidrogênio em C1- C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6-C10 arila, ou heteroarila mono- ou bicíclica é, independentemente, substituída opcionalmente por C1-C6 alquila” significa que uma alquila pode ser, porém, não precisa, estar presente em qualquer uma dentre a C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6-C10 arila, ou heteroarila mono- ou bicíclica através da substituição de um átomo de hidrogênio por cada grupo alquila, e a descrição inclui situações em que a C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2- C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6-C10 arila, ou heteroarila mono- ou bicíclica é substituída por um grupo alquila e situações em que a C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6-C10 arila, ou heteroarila mono- ou bicíclica não é substituída pelo grupo alquila.

[177] Conforme usado no presente documento, “independentemente” significa que o evento ou circunstância subsequentemente descrito deve ser lido sozinho com relação a outros eventos ou circunstâncias similares. Por exemplo, em uma circunstância em que diversos grupos hidrogênio equivalentes são substituídos opcionalmente por outro grupo descrito na circunstância, o uso de “independentemente opcionalmente” significa que cada caso de um átomo de hidrogênio no grupo pode ser substituído por outro grupo, em que os grupos que substituem cada um dos átomos de hidrogênio podem ser iguais ou diferentes. Ou, por exemplo, quando múltiplos grupos existem, todos podem ser selecionados a partir de um conjunto de possibilidades, o uso de “independentemente” significa que cada um dos grupos pode ser selecionado a partir do conjunto de possibilidades separado de qualquer outro grupo, e os grupos selecionados na circunstância podem ser iguais ou diferentes.

[178] Conforme usado no presente documento, o termo “sal farmaceuticamente aceitável” se refere àqueles sais cujos contraíons podem ser usados em produtos farmacêuticos.

Consultar, de modo geral, S.M. Berge, et al., “Pharmaceutical Salts,” J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1 a 19. Sais farmaceuticamente aceitáveis preferenciais são aqueles que são farmacologicamente eficazes e adequados para contato com os tecidos de indivíduos sem toxicidade, irritação ou resposta alérgica indevida. Um composto descrito no presente documento pode ter um grupo suficientemente ácido, um grupo suficientemente básico, ambos os tipos de grupos funcionais, ou mais do que um de cada tipo, e consequentemente pode reagir com diversas bases inorgânicas ou orgânicas, e ácidos inorgânicos e orgânicos, para formar um sal farmaceuticamente aceitável. Tais sais incluem:

[179] (1) sais de adição de ácido, que podem ser obtidos através da reação da base livre do composto parente com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico, e semelhantes, ou com ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido oxálico, (D) ou (L) ácido málico, ácido maleico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido salicílico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malônico e semelhantes; ou

[180] (2) sais formados quando um próton ácido presente no composto parente é substituído por um íon de metal, por exemplo, um íon de metal alcalino, um íon alcalino terroso ou um íon de alumínio; ou coordena com uma base orgânica, tais como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trimetamina, Nmetilglucamina e semelhantes.

[181] Sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos por aqueles especialistas na técnica, e qualquer tal sal farmaceuticamente aceitável pode ser contemplado em conexão com as modalidades descritas no presente documento.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sulfatos, pirossulfatos, bissulfatos, sulfitos, bissulfitos, fosfatos, mono-hidrogênio-fosfatos, di-hidrogênio-fosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, cloretos, brometos, iodetos, acetatos, propionatos,decanoatos, caprilatos, acrilatos, formatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos,

oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butino-1,4-dioatos, hexino1,6dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, metilsulfonatos, propilsulfonatos, besilatos, xilenossulfonatos, naftaleno-1-sulfonatos, naftaleno2sulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, γ-hidroxibutiratos, glicolatos, tartaratos e mandelatos. Listas de outros sais farmaceuticamente aceitáveis adequados são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª edição, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985.

[182] Para um composto de Fórmula I que contém um nitrogênio básico, um sal farmaceuticamente aceitável pode ser preparado por qualquer método adequado disponível na técnica, por exemplo, tratamento da base livre com um ácido inorgânico, tal como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfâmico, ácido nítrico, ácido bórico, ácido fosfórico e semelhantes, ou com um ácido orgânico, tal como ácido acético, ácido fenilacético, ácido propiônico, ácido esteárico, ácido láctico, ácido ascórbico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido isetiônico, ácido succínico, ácido valérico, ácido fumárico, ácido malônico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, ácido oleico, ácido palmítico, ácido láurico, um ácido piranosidílico, tal como ácido glucurônico ou ácido galacturônico, um alfa-hidroxiácido, tal como ácido mandélico, ácido cítrico ou ácido tartárico, um aminoácido, tal como ácido aspártico ou ácido glutâmico, um ácido aromático, tal como ácido benzoico, ácido 2-acetoxibenzoico, ácido naftoico ou ácido cinâmico, um ácido sulfônico, tal como ácido laurilsulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido metanossulfônico ou ácido etanossulfônico, ou qualquer mistura compatível de ácidos, tal como aquelas fornecidas como exemplos no presente documento, e qualquer outro ácido e mistura do mesmo que sejam consideros equivalentes ou substitutos aceitáveis à luz do nível ordinário de habilidade nessa tecnologia.

[183] A revelação também se refere a pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de Fórmula I e a métodos de tratamento que empregam tais pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis. O termo “pró-fármaco” significa um precursor de um composto designado que, após a administração a um indivíduo, rende o composto in vivo por meio de um processo químico ou fisiológico, tal como solvólise ou clivagem enzimática, ou sob condições fisiológicas (por exemplo, um pró-fármaco ao ser trazido ao pH fisiológico é convertido em um composto de Fórmula I). Um “pró-fármaco farmaceuticamente aceitável” é um pró-fármaco que não é tóxico, é biologicamente tolerável e, de outro modo, biologicamente adequado para administração ao indivíduo. Procedimentos ilustrativos para a seleção e preparação de derivados adequados de pró-fármaco são descritos, por exemplo, em “Design of Prodrugs”, ed. H.

Bundgaard, Elsevier, 1985.

[184] A presente revelação também se refere a metabólitos farmaceuticamente ativos de compostos de Fórmula I e a usos de tais metabólitos nos métodos da revelação. Um “metabólito farmaceuticamente ativo” significa um produto farmacologicamente ativo de metabolismo no corpo de um composto de Fórmula I, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Pró-fármacos e metabólitos ativos de um composto podem ser determinados com o uso de técnicas de rotina conhecidas ou disponíveis na arte. Consultar, por exemplo, Bertolini et al., J. Med. Chem. 1997, 40, 2.011 a 2.016; Shan et al., J.

Pharm. Sci. 1997, 86 (7), 765 a 767; Bagshawe, Drug Dev.

Res. 1995, 34, 220 a 230; Bodor, Adv. Drug Res. 1984, 13, 255 a 331; Bundgaard, Design of Prodrugs (Elsevier Press, 1985); e Larsen, Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (Krogsgaard-Larsen et al., edições, Harwood Academic Publishers, 1991).

[185] Qualquer fórmula representada no presente documento se destina a representar um composto dessa fórmula estrutural, assim como variações ou formas determinadas. Por exemplo, uma fórmula fornecida no presente documento destina-se a incluir uma forma racêmica ou um ou mais isômeros enantioméricos, diastereoméricos ou geométricos, ou uma mistura dos mesmos. Adicionalmente, qualquer fórmula fornecida no presente documento pretende se referir também a um hidrato, solvato ou polimorfo de tal composto, ou uma mistura dos mesmos. Por exemplo, será entendido que os compostos representados por uma fórmula estrutural que contém o símbolo “ ” incluem ambos os estereoisômeros para o átomo de carbono ao qual o símbolo “ ” está fixado, especificamente ambas as ligações “ ” e “ ” são abrangidas pelo significado de “ ”. Por exemplo, em algumas modalidades exemplificativas, determinados compostos fornecidos no presente documento podem ser descritos pela fórmula ,

[186] cuja fórmula será compreendida como abrangendo compostos que têm ambas as configurações estereoquímicas no átomo de carbono relevante.

Especificamente, nesse exemplo, as configurações podem ser descritas pelas fórmulas e .

[187] Qualquer fórmula fornecida no presente documento se destina também a representar formas não identificadas, assim como formas isotopicamente identificadas dos compostos. Compostos isotopicamente identificados têm estruturas representadas pelas fórmulas fornecidas no presente documento, exceto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número mássico selecionado. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos da revelação incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor, cloro e iodo, tais como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, 36Cl e 125I, respectivamente.

Tais compostos isotopicamente identificados são úteis em estudos metabólicos (de preferência, com 14C), estudos cinéticos de reação (com, por exemplo 2H ou 3H), técnicas de detecção e imageamento [tais como tomografia por emissão de pósitrons (PET) ou tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT)], incluindo ensaios de distribuição de fármaco ou substrato no tecido, ou no tratamento radioativo de pacientes. Adicionalmente, a substituição com isótopos mais pesados, tais como deutério (isto é, 2H), pode proporcionar determinadas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, aumento da meia-vida in vivo ou redução de requisitos de dosagem.

Compostos isotopicamente identificados desta revelação e pró-fármacos dos mesmos podem normalmente ser preparados realizando-se os procedimentos revelados nos esquemas ou nos exemplos e preparações descritos abaixo substituindo-se um reagente isotopicamente identificado prontamente disponível por um reagente não isotopicamente identificado.

[188] Qualquer dissubstituinte referido no presente documento se destina a abranger as várias possibilidades quando mais do que uma dentre tais possibilidades são permitidas. Por exemplo, referência ao dissubstituinte –A- B-, em que A ≠ B, refere-se no presente documento a tal dissubstituinte com A fixado a um primeiro membro substituído e B fixado a um segundo membro substituído, e também se refere a tal dissubstituinte com A fixado ao segundo membro substituído e B fixado ao primeiro membro substituído. O uso de “---“ em conexão com as várias fórmulas químicas fornecidas no presente documento para descrever as várias modalidades se refere a uma ligação covalente (também denominada ponto de fixação) do grupo ao qual “---“ com o restante da molécula.

Modalidades representativas

[189] Em algumas modalidades, os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ou ,

[190] em que R5 é -NR6R7; e R6 e R7 são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila e C3-C6 cicloalquila; em que cada átomo de hidrogênio em C1- C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila e C3-C6 cicloalquila é, independentemente, substituído opcionalmente por flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, - NH(C1C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, - C(O)NH(C1C6 alquila) ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

[191] Em algumas modalidades, os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ou .

[192] Em ainda outras modalidades, os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ou ,

[193] em que R9 é H, flúor, cloro, bromo, -CN, - CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2; e R10 é H, flúor, cloro ou bromo.

[194] Em ainda outras modalidades, os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ou ,

[195] em que R9 é flúor, cloro, bromo, -CN, - CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2; e R10 é flúor, cloro ou bromo.

[196] Em algumas modalidades, quando os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ,

[197] então, R9 na porção química da fórmula ou ,

[198] então, R9 é selecionado a partir do grupo que consiste em -CN, CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, - C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

[199] Em ainda outras modalidades, os compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula ou .

[200] Em ainda outras modalidades, compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula e uma porção química da fórmula . Em ainda outras modalidades, compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula e uma porção química da fórmula . Em ainda outras modalidades, compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula e uma porção química da fórmula . Em ainda outras modalidades, compostos descritos no presente documento compreendem uma porção química da fórmula e uma porção química da fórmula .

[201] Em algumas modalidades, X1 é -N(R8)-. Em algumas modalidades, X2 é -O-. Em algumas modalidades, X1 é -N(R8)- e X2 é -O-.

[202] Em algumas modalidades, R1 é C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C3- C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituído opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, - NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)NH2, - N(C1-C6 alquila)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -

NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, - N(C1-C6 alquila)S(O)NH2, N(C1-C6 alquila)S(O)2NH2, - NHS(O)NH(C1-C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1- C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1- C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquila)S(O)2NH(C1- C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, - C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, SC1-C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, - S(O)2N(C1-C6 alquila)2, P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros. Em algumas modalidades, R1 é H.

[203] Em algumas modalidades, R2 é C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6-C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituído opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, - NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, - NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)NH2, - N(C1C6 alquila)C(O)NHC1C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, -

N(C1C6 alquila)C(O)N(C1C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, - N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)S(O)(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, -NHS(O)2NH2, - N(C1C6 alquila)S(O)NH2, N(C1-C6 alquila)S(O)2NH2, - NHS(O)NH(C1-C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1- C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquila)S(O)2NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)S(O)N(C1C6 alquila)2, N(C1- C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, -C(O)OC1-C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, -S(O)C1-C6 alquila, S(O)2C1C6 alquila, -S(O)NH(C1-C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), -S(O)N(C1-C6 alquila)2, - S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros.

[204] Em algumas modalidades, R2 é C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6-C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituído opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila),

[205] -N(C1C6 alquila)2, -NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1- C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)NH2, N(C1C6 alquila)C(O)NHC1C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1- C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -NHS(O)2(C1-C6 alquila), - N(C1-C6 alquila)S(O)(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)2(C1- C6 alquila), -NHS(O)NH2, -NHS(O)2NH2, N(C1C6 alquila)S(O)NH2, N(C1-C6 alquila)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1-C6 alquila), - NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, - NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquila)S(O)2NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)S(O)N(C1C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, -C(O)OC1-C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1- C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, -S(O)C1- C6 alquila, S(O)2C1C6 alquila, -S(O)NH(C1-C6 alquila), - S(O)2NH(C1-C6 alquila), -S(O)N(C1-C6 alquila)2, S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, e R3 é H.

[206] Em algumas modalidades, R2 é C1-C6 alquila, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila é, independentemente, opcionalmente substituído por uma ou mais porções químicas selecionadas a partir do grupo que consiste em -F, -OH, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila) e -N(C1- C6 alquila)2. Em algumas modalidades, R2 é C1-C6 alquila, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila é,

independentemente, opcionalmente substituído por uma ou mais porções químicas selecionadas a partir do grupo que consiste em -F, -OH, OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), e -N(C1- C6 alquila)2 e R3 é H. Em algumas modalidades, R2 é metila.

Em algumas modalidades, R2 é metila, e R3 é H.

[207] Em algumas modalidades, R4 é H. Em algumas modalidades, R4 é C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros é, independentemente, substituído opcionalmente por halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila ou heterocicloalquila monocíclica com 5 a 7 membros.

[208] Em algumas modalidades, R8 é C1C6 alquila, em que cada átomo de hidrogênio é, independentemente, substituído opcionalmente por flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3- C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6- C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2. Em algumas modalidades, R8 é etila, propila, iso- propila ou metilciclopropila.

[209] Em outras modalidades, o composto de Fórmula I é selecionado a partir do grupo que consiste em (7S)-3-

amino-12-cloro-14-etil-11-fluoro-7-metil-6,7,13,14-tetra- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecin-4(5H)-ona, (7S)-14- etil-7-metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15- etenopirazolo[4,3-f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclo-tridecina- 12-carbonitrila, 14-etil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro- 1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila, (7S)-14-etil-11-fluoro-7-metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila, (7S)-3-amino-14-etil-11-fluoro-7-metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14- hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila, (7S)-3-amino-14-etil-7-metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3-f][1,4,8,10]- benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila, (7S)-3-amino- 14-(ciclopropilmetil)-11-fluoro-7-metil-4-oxo- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]-benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila, (7S)-3-amino-11-fluoro-7-metil-4-oxo-14-(propan-2-il)- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriaza-ciclotridecina-12-carbonitrila ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[210] O disposto a seguir representa modalidades ilustrativas de compostos da Fórmula I:

Cpd Estrutura Nome (7S)-3-amino-12-cloro-14-etil-11- fluoro-7-metil-6,7,13,14-tetra- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- -1 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decin-4(5H)-ona

(7S)-14-etil-7-metil-4-oxo- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15- etenopirazolo[4,3- 2 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

14-etil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- 3 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

(7S)-14-etil-11-fluoro-7-metil-4- oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro- 1,15-etenopirazolo[4,3- 4 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

(7S)-3-amino-14-etil-11-fluoro-7- metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- 5 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

(7S)-3-amino-14-etil-7-metil-4- oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro- 1,15-etenopirazolo[4,3- 6 f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

(7S)-3-amino-14- (ciclopropilmetil)-11-fluoro-7- metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- 7 hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

Cpd Estrutura Nome (7S)-3-amino-11-fluoro-7-metil-4- oxo-14-(propan-2-il)- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15- 8 etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila (7S)-3-amino-11-fluoro-7-metil-4- oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro- 9 1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila (7S)-3-amino-14-(2H5)etil-11- fluoro-7-metil-4-oxo- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15- 10 etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila (7R)-3-amino-14-etil-11-fluoro-7- metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa- 11 hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotri decina-12-carbonitrila

[211] Aqueles especialistas na técnica reconhecerão que as espécies listadas ou ilustradas no presente documento não são exaustivas e que espécies adicionais dentro do escopo desses termos definidos também podem ser selecionadas.

Composições Farmacêuticas

[212] Para propósitos de tratamento, as composições farmacêuticas que compreendem os compostos descritos no presente documento podem compreender, ainda, um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Um excipiente farmaceuticamente aceitável é uma substância que não é tóxica e, de outro modo, é biologicamente adequada para administração a um indivíduo. Tais excipientes facilitam a administração dos compostos descritos no presente documento e são compatíveis com o ingrediente ativo. Exemplos de excipientes farmaceuticamente aceitáveis incluem estabilizadores, lubrificantes, tensoativos, diluentes, anti-oxidantes, aglutinantes, agente corantes, agentes avolumadores, emulsificantes ou agentes modificadores de sabor. Em modalidades preferenciais, composições farmacêuticas de acordo com a descrição são composições estéreis. Composições farmacêuticas podem ser preparadas com o uso de técnicas de composição conhecidas ou que se tornaram disponíveis por aqueles especialistas na técnica.

[213] Composições estéreis são contempladas pela descrição, incluindo composições que estão de acordo com os regulamentos nacionais e locais que governam tais composições.

[214] As composições farmacêuticas e os compostos descritos no presente documento podem ser formulados como soluções, emulsões, suspensões ou dispersões em solventes ou carreadores farmacêuticos adequados, ou como pílulas, pastilhas, comprimidos, supositórios, sachês, drágeas, grânulos, pós, pós para reconstituição ou cápsulas juntamente com carreadores sólidos de acordo com métodos convencionais conhecidos na técnica para preparação de várias formas de dosagem. As composições farmacêuticas da descrição podem ser administradas por uma via de distribuição adequada, tal como vias orais, parenterais, retais, nasais, tópicas ou oculares, ou por inalação. De preferência, as composições são formuladas para administração intravenosa ou oral.

[215] Para administração oral, os compostos da descrição podem ser fornecidos em uma forma sólida, tal como uma pastilha ou cápsula, ou como uma solução, emulsão ou suspensão. Para preparar as composições orais, os compostos da descrição podem ser formulação de modo a render uma dosagem de, por exemplo, cerca de 0,1 mg a 1 g por dia, ou cerca de 1 mg a 50 mg por dia, ou cerca de 50 a 250 mg por dia ou cerca de 250 mg a 1 g por dia. Pastilhas orais podem incluir o ingrediente ativo (ou ingredientes ativos) misturado com excipientes farmaceuticamente aceitáveis compatíveis, tais como diluentes, agentes de desintegração, agentes aglutinantes, agentes lubrificantes, agentes adoçantes, agentes flavorizantes, agentes corantes e agentes conservantes. Cargas inertes adequadas incluem carbonato de sódio e cálcio, fosfato de sódio e cálcio, lactose, amido, açúcar, glicose, metilcelulose, estearato de magnésio, manitol, sorbitol e semelhantes. Excipientes orais líquidos exemplificativos incluem etanol, glicerol, água e semelhantes. Amido, polivinilpirrolidona (PVP), glicolato de amido de sódio, celulose microcristalina e ácido algínico são agentes de desintegração exemplificativos. Agentes aglutinantes podem incluir amido e gelatina. O agente lubrificante, se presente, pode ser estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Se desejado, as pastilhas podem ser revestidas com um material, tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila para retardar a absorção no trato gastrointestinal, ou podem ser revestidas com um revestimento entérico.

[216] As cápsulas para administração oral incluem cápsulas de gelatina duras e macias. Para preparar cápsulas de gelatina duras, o ingrediente ativo (ou ingredientes ativos) pode ser misturado com um diluente sólido, semissólido ou líquido. Cápsulas de gelatina macias podem ser preparadas misturando-se o ingrediente ativo com água, um óleo, tal como óleo de amendoim ou azeite de oliva, parafina líquida, uma mistura de mono e diglicerídeos de ácidos graxos de cadeia curta, polietilenoglicol 400 propilenoglicol.

[217] Líquidos para administração oral podem estar na forma de suspensões, soluções, emulsões ou xaropes, ou podem ser liofilizados ou apresentados como um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Tais composições líquidas podem opcionalmente conter: excipientes farmaceuticamente aceitáveis, tais como agentes de suspensão (por exemplo, sorbitol, metilcelulose, alginato de sódio, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio e semelhantes); veículos não aquosos, por exemplo, óleo (por exemplo, óleo de amêndoa ou óleo de coco fracionado), propilenoglicol, álcool etílico ou água; conservantes (por exemplo, p-hidroxibenzoato de metila ou propila ou ácido sórbico); agentes umectantes, tais como lecitina; e, se desejado, agentes flavorizantes ou corantes.

[218] Para uso parenteral, incluindo vias intravenosas, intramusculares, intraperitoneais, intranasais ou subcutâneas, os agentes da descrição podem ser fornecidos em soluções ou suspensões aquosas estéreis, tamponadas a um pH e isotonicidade adequados ou em óleo parenteralmente aceitável. Veículos aquosos adequados incluem solução de Ringer e cloreto de sódio isotônico. Tais formas podem ser apresentadas em forma de dose unitária, tal como ampolas ou dispositivos de injeção descartáveis, em formas de múltiplas doses, tais como frascos a partir dos quais a dose adequada pode ser extraída, ou em uma forma sólida ou pré-concentrado que pode ser usado para preparar uma formulação injetável. Doses de infusão ilustrativas variam de cerca de 1 a 1.000 μg/kg/minuto do agente misturado por adição com um carreador farmacêutico ao longo de um período que varia de diversos minutos a diversos dias.

[219] Para administração nasal, inalada ou oral, as composições farmacêuticas da invenção podem ser administradas com o uso, por exemplo, de uma formulação de aspersão que também contém um carreador adequado. As composições da invenção podem ser formuladas para administração retal como um supositório.

[220] Para aplicações tópicas, os compostos da presente descrição são, de preferência, formulados como cremes ou unguentos ou um veículo similar adequado para administração tópica. Para administração tópica, os compostos da invenção podem ser misturados por adição com um carreador farmacêutico a uma concentração de cerca de 0,1% a cerca de 10% do fármaco em relação ao veículo. Um outro modo de administração dos agentes da descrição pode utilizar uma formulação de emplastro para afetar a entrega transdérmica.

Métodos de tratamento

[221] Conforme usado no presente documento, os termos “tratar” ou “tratamento” abrangem tanto o tratamento “preventivo” como o “curativo”. O tratamento “preventivo” deve indicar um adiamento do desenvolvimento de uma doença, um sintoma de uma doença ou condição médica, suprimindo os sintomas que podem aparecer ou reduzindo o risco de desenvolvimento ou recorrência de uma doença ou sintoma. O tratamento “curativo” inclui reduzir a gravidade ou suprimir o agravamento de uma doença, sintoma ou afecção existente.

Assim, o tratamento inclui melhorar ou prevenir o agravamento dos sintomas da doença existentes, impedir a ocorrências de sintomas adicionais, melhorar ou prevenir as causas sistêmicas subjacentes dos sintomas, inibir o distúrbio ou a doença, por exemplo, deter o desenvolvimento do distúrbio ou doença, aliviar o distúrbio ou doença, provocar a regressão do distúrbio ou doença, aliviar uma condição causada pela doença ou distúrbio ou interromper os sintomas da doença ou distúrbio.

[222] O termo “indivíduo” se refere a um paciente mamífero em necessidade de tal tratamento, tal como um ser humano. Conforme usado no presente documento, “câncer” inclui qualquer câncer conhecido na técnica, particularmente aqueles cânceres em que SRC e MET e/ou CSF1R foram implicados na doença. Exemplos de tipos de câncer incluem, porém sem limitação, carcinomas, sarcomas, linfomas, doença de Hodgekin, melanomas, mesoteliomas, linfoma de Burkitt, carcinomas nasofaríngeos, leucemias e mielomas. Exemplos de cânceres específicos incluem, porém sem limitação, câncer bucal, câncer de tireoide, câncer endócrino, câncer de pele, câncer gástrico, câncer de esôfago, câncer de laringe, câncer pancreático, câncer de cólon, câncer de bexiga, câncer ósseo, câncer ovariano, câncer cervical, câncer uterino, câncer de mama, câncer testicular, câncer de próstata, câncer renal,

câncer retal, câncer de rim, câncer de fígado, glioblastoma, ou câncer de cabeça e pescoço, e cânceres de pulmão, tais como câncer pulmonar de células não pequenas, câncer pulmonar de células pequenas e semelhantes.

[223] Em um aspecto, os compostos e as composições farmacêuticas da descrição especificamente têm como alvo SRC e MET e/ou CSF1R. Assim, esses compostos e composições farmacêuticas podem ser usados para prevenir, reverter, retardar ou inibir a atividade de um ou mais dentre SRC e MET e/ou CSF1R. Em algumas modalidades, métodos de tratamento de câncer que compreendem administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe um ou mais dentre SRC e MET e/ou CSF1R são descritos no presente documento. Em outras modalidades, métodos para tratar câncer que compreendem a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, conforme descrito no presente documento, que inibe um ou mais dentre SRC e MET e/ou CSF1R são descritos. Em outras modalidades, métodos para tratar câncer que compreendem a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto conforme descrito no presente documento são descritos. Em outras modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[224] Em outras modalidades, a revelação é direcionada a um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[225] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada ao uso de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[226] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada ao uso de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no preparo de um medicamento para o tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[227] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada a uma composição que compreende um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade terapeuticamente eficaz, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

[228] Nos métodos inibitórios da descrição, uma “quantidade eficaz” significa uma quantidade suficiente para inibir o alvo. A medição de tal modulação de alvo pode ser realizada por métodos analíticos de rotina, tais como aqueles descritos abaixo. Tal modulação é útil em uma variedade de configurações, incluindo ensaios in vitro. Em tais métodos, a célula pode ser uma célula cancerígena com sinalização anormal devido à regulação ascendente, mutação, atividade aberrante e/ou alterações em SRC e MET e/ou CSF1R.

[229] Em métodos de tratamento de acordo com a descrição, uma “quantidade eficaz” significa uma quantidade ou dose suficiente para geralmente promover o benefício terapêutico desejado em indivíduos em necessidade de tal tratamento. Quantidades ou doses eficazes dos compostos da descrição podem ser estabelecidas por métodos de rotina, tais como modelagem, escalonamento de dose ou testes clínicos, levando-se em consideração fatores de rotina, por exemplo, o modo ou a via de administração ou distribuição de fármaco, a farmacocinética do agente, a gravidade e o curso da infecção, o estado de saúde, a condição e o peso do indivíduo e o julgamento do médico assistente. Uma dose exemplificativa está na faixa de aproximadamente cerca de 0,1 mg a 1 g por dia, ou cerca de 1 mg a 50 mg por dia, ou cerca de 50 a 250 mg por dia ou cerca de 250 mg a 1 g por dia. A dosagem total pode ser fornecida em unidades de dosagem únicas ou divididas (por exemplo, BID, TID, QID).

[230] Uma vez que o melhoramento da doença do paciente tenha ocorrido, a dose pode ser ajustada para tratamento preventivo ou de manutenção. Por exemplo, a dosagem ou a frequência de administração, ou ambas, podem ser reduzidas, em função dos sintomas, a um nível no qual o efeito terapêutico ou profilático desejado é mantido.

Obviamente, se os sintomas forem aliviados a um nível adequado, o tratamento pode cessar. Os pacientes podem, entretanto, precisar de tratamento intermitente a longo prazo, mediante qualquer recorrência de sintomas. Os pacientes também podem precisar de tratamento crônico a longo prazo.

Combinações de fármaco

[231] Os compostos da invenção descritos no presente documento podem ser usados em composições farmacêuticas ou métodos em combinação com um ou mais ingredientes ativos adicionais no tratamento das doenças e distúrbios descritos no presente documento. Outros ingredientes ativos adicionais incluem outros terapêuticos ou agentes que mitiga os efeitos adversos de terapias para os alvos de doença pretendidos. Tais combinações podem servira para aumentar a eficácia, melhorar outros sintomas da doença, diminuir um ou mais efeitos colaterais ou diminuir a dose necessária de um composto da invenção. Os ingredientes ativos adicionais podem ser administrados em uma composição farmacêutica separada de um composto da presente descrição ou podem ser incluídos com um composto da presente descrição em uma composição farmacêutica única. Os ingredientes ativos adicionais podem ser administrados simultaneamente, antes ou após a administração de um composto da presente descrição.

[232] Os agentes de combinação que incluem ingredientes ativos adicionais são aqueles que são conhecidos ou constatados como eficazes no tratamento das doenças e distúrbios descritos no presente documento, incluindo aqueles ativos contra outro alvo associado à doença. Por exemplo, as composições e formulações da descrição, assim como métodos de tratamento, podem compreender, ainda, outros fármacos ou farmacêuticos, por exemplo, outros agentes ativos úteis para o tratamento ou paliativos para as doenças-alvo ou sintomas ou condições relacionados. Tais agentes adicionais incluem, porém sem limitação, inibidores de quinase, tais como inibidores de EGFR (por exemplo, erlotinibe, gefitinibe), inibidores de Raf (por exemplo, vemurafenibe), inibidores de VEGFR (por exemplo, sunitinibe), inibidores de ALK (por exemplo, crizotinibe) agentes quimioterápicos padrão, tais como agentes alquilantes, antimetabólitos, antibióticos antitumorais, inibidores de topoisomerase, fármacos de platina, inibidores mitóticos, anticorpos, terapias hormonais ou corticoesteroides. Para indicações de dor, agentes de combinação adequados incluem anti-inflamatórios, tais como NSAIDs. As composições farmacêuticas da descrição podem compreender, ainda, um ou mais de tais agentes ativos, e métodos de tratamento podem compreender adicionalmente a administração de uma quantidade eficaz de um ou mais de tais agentes ativos.

[233] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada a um método de tratamento de câncer em um paciente que compreende a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R; e b. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de fígado, câncer pulmonar ou câncer de cabeça e pescoço.

[234] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada a um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de fígado, câncer pulmonar ou câncer de cabeça e pescoço.

[235] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada ao uso de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional para o tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de fígado, câncer pulmonar ou câncer de cabeça e pescoço. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[236] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada ao uso de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no preparo de um medicamento para o tratamento de câncer em um paciente em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades desse aspecto, o câncer é câncer gástrico, câncer de fígado, câncer pulmonar ou câncer de cabeça e pescoço. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[237] Em algumas modalidades, a revelação é direcionada a uma composição que compreende um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade terapeuticamente eficaz, para uso no tratamento de câncer em um paciente. Em algumas modalidades desse aspecto, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o câncer é câncer gástrico, câncer de fígado, câncer pulmonar ou câncer de cabeça e pescoço. Em algumas modalidades, o composto é administrado em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

[238] Em algumas modalidades, a revelação refere- se a uma composição sinérgica de um composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R, e um inibidor de EGFR, em que os dois componentes entram em contato entre si em um locus. Em algumas modalidades, o composto que inibe SRC e MET e/ou CSF1R é da Fórmula I. Em algumas modalidades, o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

Exemplos Síntese química

[239] Entidades químicas exemplificativas úteis nos métodos da descrição serão agora descritas com referência aos esquemas sintéticos ilustrativos para sua preparação geral abaixo e aos exemplos específicos que seguem. Os especialistas reconhecerão que, para obter os vários compostos no presente documento, os materiais de partida podem ser adequadamente selecionados de modo que os substituintes finais desejados substituintes sejam desenvolvidos através do esquema de reação com ou sem proteção conforme for adequado para rendimento do produto desejado. Alternativamente, pode ser necessário ou desejável empregar, no local do substituinte final desejado, um grupo adequado que pode ser desenvolvido através do esquema de reação e substituído conforme for adequado com o substituinte desejado. Além disso, um especialista na técnica reconhecerá que as transformações mostradas nos esquemas abaixo podem ser realizadas em qualquer ordem que seja compatível com a funcionalidade dos grupos pendentes específicos.

[240] ABREVIAÇÕES Os exemplos descritos no presente documento usam materiais, incluindo, porém sem limitação, aqueles descritos pelas seguintes abreviações conhecidas pelos especialistas na técnica: g grama eq equivalentes mmol milimol ml mililitros EtOAc acetato de etila

MHz megahertz ppm partes por milhão δ deslocamento químico s singleto d dupleto t tripleto q. quarteto quin quinteto br amplo m multipleto Hz hertz THF tetra-hidrofurano °C grais Celsius PE éter de petróleo EA acetato de etila Rf fator de retardo N Normal J constante de acoplamento DMSO-d6 sulfóxido de dimetila deuterado n-BuOH n-butanol DIEA n,n-di-isopropiletilamina TMSCl cloreto de trimetilsilila min minutos hr horas Me metila Et etila i-Pr isopropila TLC cromatografia de camada fina M molar Compost número de composto o n o

MS espectro de massa m/z razão entre massa e carga Ms metanossulfonila FDPP difenilfosfinato de pentafluorofenila Boc terc-butiloxicarbonila TFA ácido trifluoroacético Tos toluenossulfonila DMAP 4-(dimetilamino)piridina µM micromolar ATP adenosina trifosfato IC50 meia concentração inibitória máxima U/ml unidades de atividade por mililitro KHMDS bis(trimetilsilil)amida de potássio DIAD azodicarboxilato de di-isopropila MeTHF 2-metiltetra-hidrofurano MOM metoximetila DCM diclorometano DMF N,N-dimetilformamida DPPA difenil fosforil azida DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DIPEA N,N-di-isopropiletilamina Método geral A.

Preparação de 2-cloro-3-fluoro-6-hidroxibenzaldeído (A-1-4).

[241] Etapa 1. A uma solução de A-1-1 (20,00 g, 136,47 mmol, 1,00 eq.) e hidreto de sódio (6,55 g, 60% de pureza, 272,94 mmol, 2,00 eq.) em DMF (200,00 ml) foi adicionado MOMCl (21,97 g, 272,94 mmol, 20,73 ml, 2,00 eq.) a 0 °C sob N2. A mistura foi agitada a 25 °C por 10 horas. TLC (éter de petróleo/acetato de etila = 5/1) mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um novo ponto foi encontrado. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente em água (150 ml) e, então, diluída com água (150 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (150 ml), secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar A- 1-2 (20,00 g, 76,89% de rendimento) como um óleo incolor.

RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 7,11 (dd, J=2,8, 6,0 Hz, 1H), 7,04 (t, J=8,8 Hz, 1H), 6,90 (td, J=3,2, 9,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 3,47 (s, 3H).

[242] Etapa 2. A uma solução de A-1-2 (20,00 g, 104,93 mmol, 1,00 eq.) em THF (250,00 ml) foi adicionado n- BuLi (2,5 M, 125,92 ml, 3,00 eq.) a -65 °C sob N2. A mistura foi agitada a -65 °C por 2 horas. A mistura foi arrefecida bruscamente por DMF (76,69 g, 1,05 mol, 80,73 ml, 10,00 eq.) e a mistura foi agitada a -65 °C por 15 min sob N2. TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 3:1) mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um novo ponto foi encontrado. A mistura de reação foi diluída com água (300 ml) e extraída com acetato de etila (150 ml * 3). Então, as camadas orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 1/1) para gerar A-1-3 (4,80 g, 20,93% de rendimento) como um óleo incolor. RMN de 1H (400

MHz, CDCl3): 10,48 (s, 1H), 7,28 (t, J=8,8 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=4,0, 9,2 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 3,51 (s, 3H).

[243] Etapa 3. Uma solução de A-1-3 (4,00 g, 18,3 mmol, 1,00 eq.) em HCl/dioxano (40,0 ml) foi agitada a 25 °C por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com água (30,0 ml) e extraída com acetato de etila (25,0 ml × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (30,0 ml), secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar A-1-4 (2,50 g, 14,3 mmol, rendimento = 78,3%) como um sólido branco. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 11,68 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 7,37 - 7,32 (m, 1H), 6,91 (dd, J=4,0, 9,2 Hz, 1H).

Método geral B.

Preparação de 2-bromo-3-fluoro-6-hidroxibenzaldeído (A-2-4)

[244] Etapa 1. A uma solução de A-2-1 (30,0 g, 155 mmol, 1 eq.) em THF (300 ml) foi adicionado LDA (2 M, 116 ml, 1,5 eq.) a -78 °C e agitado por 1 hora, então, DMF (34,1 g, 466 mmol, 3 eq.) foi adicionado a -78 °C e agitado por 2 horas. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente pela adição de cloreto de amônio saturado (200 ml) a 0 °C, então, diluída com água (300 ml) e extraída com acetato de etila (1,00 l). A camada orgânica foi lavada em salmoura (200 ml), seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna para gerar A-2-2 (20,0 g, 90,5 mmol, rendimento = 58,2%) como um sólido amarelo. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,34 (s, 1H), 7,37-7,34 (m, 1H), 7,17-7,34 (m, 1H).

[245] Etapa 2. Uma solução de A-2-2 (20,0 g, 90,5 mmol, 1,00 eq.) em THF (100 ml) e metanol (240 ml) foi aquecida a 60 °C, então, uma solução de metilato de sódio (4,3 M, 25,3 ml, 1,2 eq.) em metanol foi adicionada e agitada a 60 °C por 12 horas. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente por adição de água (200 ml) e extraída com acetato de etila (500 ml). A camada orgânica foi lava em salmoura (100 ml), seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar A-2-3 (13,5 g, 57,9 mmol, rendimento = 64,0%) como um sólido amarelo. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,30 (s, 1H), 7,20 (dd, J=7,6, 9,2 Hz, 1H), 6,86 (dd, J=4,0, 9,2 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H).

[246] Etapa 3. A uma solução de A-2-3 (13,0 g, 55,8 mmol, 1,00 eq.) em DCM (150 ml) foi adicionado BBr3 (28,0 g, 112 mmol, 2,00 eq.) a -40 °C por gotejamento, então, a mistura foi agitada a 0 °C por 3 horas. A mistura de reação foi arrefecida bruscamente pela adição de metanol (20,0 ml) e solução de bicarbonato de sódio saturado (50,0 ml) a 0 °C, então, extraída com acetato de etila (300 ml). A camada orgânica foi lavada em salmoura (100 ml), seca em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar A-2-4 (10,5 g, 43,2 mmol, rendimento = 77,4%) como um sólido amarelo.

RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 11,78 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 7,32 (dd, J=7,6, 9,2 Hz, 1H), 6,96 (dd, J=4,0, 9,2 Hz, 1H).

Método Geral C.

Preparação de 2-amino-5-cloropirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato de etila (A-6-7).

Cl Cl Cl O H2N O

N O A-3-1A CN NH2NH2

O N O

CN O TEA, EtOH DMF HN A-3-1 H2N CCl3 NH2 A-3-2 A-3-3

[247] Etapa 1. A uma solução de A-3-1 (100 g, 884 mmol, 1,00 eq.) e A-3-1A (230 g, 1,59 mol, 1,80 eq.) em etanol (1,50 l), foi adicionado TEA (4,47 g, 44,2 mmol, 0,05 eq.) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C por 12 horas. O solvente foi removido para gerar o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para gerar A-3-2 (200 g, 738 mmol, rendimento = 83,5%) como um óleo branco-sujo.

RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,21 (br s, 1H), 6,95 (br s, 1H), 4,29 - 4,34 (m, 2H), 1,37 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[248] Etapa 2. A uma solução de etila A-3-2 (100 g, 388 mmol, 1,00 eq.) em DMF (500 ml), foi adicionado hidrato de hidrazina (311 g, 3,11 mol, 50,0% de pureza, 8,00 eq.).

A mistura foi agitada a 100 °C por 2 horas. O solvente foi removido e adicionado DCM (500 ml), a mistura resultante foi agitada por 12 horas. O sólido foi filtrado e lavado com DCM (200 ml) para gerar A-3-3 (60,0 g, 317 mmol, rendimento = 81,7%) como um sólido marrom. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,91 (s, 1H), 7,50 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,03 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,16 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[249] Etapa 3. A uma solução de etóxido de sódio recém-preparado (0,50 M, 2,35 l, 4,00 eq.) em etanol (200 ml), foi adicionado A-3-3 (50,0 g, 294 mmol, 1,00 eq.), então, A-3-3A (41,2 g, 294 mmol, 1,00 eq.) foi adicionado.

A mistura foi agitada a 90 °C por 9 horas. A torta do filtro e filtrada foi lavada com etanol (100 ml) para gerar o A-3- 4 (25,0 g, 113 mmol, rendimento = 38,3%) como um sólido marrom. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,71 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,57 - 5,46 (m, 3H), 4,15 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,25 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[250] Etapa 4. A uma solução de A-3-4 (18,0 g, 81,0 mmol, 1,00 eq.) em DCM (300 ml), foi adicionada trietilamina (20,5 g, 202 mmol, 2,50 eq.) a 0 °C, então, anidrido trifluoroacético (20,4 g, 97,2 mmol, 1,20 eq.) foi adicionado. A mistura foi agitada a 25 °C por 12 horas. O sólido foi coletado por filtração e lavado com DCM (100 ml) para gerar A-3-5 (18,0 g, 47,4 mmol, rendimento = 58,5%) como um sólido amarelo. LCMS:EW6129-170-P1D (M+1:319,1).

[251] Etapa 5. Uma solução de A-3-5 (18,0 g, 56,6 mmol, 1,00 eq.) em POCl3 destilado fresco (180 ml) foi agitada a 100 °C por 5 horas. A mistura foi vertida em água gelada (500 ml) a 0 °C, filtrada e a torta do filtro lavada com água (200 ml) e, então, coletada para gerar A-3-6 (15,0 g, 43,6 mmol, rendimento = 77,1%) como um sólido marrom escuro. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,93 (s, 1H), 9,31 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,2 Hz, 1H), 4,28 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,28 (br t, J=7,2 Hz, 3H).

[252] Etapa 6. A uma solução de A-3-6 (13,0 g, 38,6 mmol, 1,00 eq.) em n-butanol (150 ml) e acetonitrila (150 ml), foi adicionado carbonato de potássio (10,7 g, 77,2 mmol, 2,00 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C por 8 horas. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida por adição de água (200 ml) e extraída com diclorometano/metanol=10/1 (500 ml × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar o resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparatória (condição básica) para gerar o A-3-7 (4,8 g, 19,2 mmol, rendimento = 49,6%) como um sólido branco. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,23 (d, J=7,2 Hz, 1H), 6,74 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,44 (s, 2H), 4,37 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,37 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Método Geral D.

Preparação de 2-amino-5-((2-cloro-3-fluoro-6- hidroxibenzil)(etila)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-1)

[253] Etapa 1. Uma solução de A-1-4 (166 mg, 951 µmol, 1 eq.) e etilamina (129 mg, 2,85 mmol, 3,0 eq.) em metanol (4,8 ml) foi agitada por 1 hora a 65 °C. A mistura de reação foi resfriado até a temperatura ambiente e NaBH4 (53 mg, 1,4 mmol, 1,5 eq.) foi adicionado, a mistura de reação foi agitada a 25 °C por 30 min. A mistura foi bruscamente arrefecida com água (15 ml) e agitada por 5 min.

A mistura foi extraída com DCM (3 x 15 ml), seca com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (ISCO sistema, sílica (12 g), 0 a 100% de acetato de etila em hexano) forneceu C9H11OFClN (175,3 mg, 860,8 µmol, 90,5% de rendimento).

[254] Etapa 2. A uma mistura de A-4-1 (97,3 mg, 0,477 mmol, 1,15 eq.) e A-3-7 (100 mg, 0,415 mmol, 1,0 eq.)

em n-butanol (2,00 ml), foi adicionado DIEA (269 mg, 2,1 mmol, 5,00 eq.). A mistura foi aquecida a 85 °C e agitada por 20 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar o composto A-1 (146 mg, 357 µmol, rendimento = 86%,).

Método Geral E.

Preparação de 5-((2-ciano-6- hidroxibenzil)(etila)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-2)

[255] Etapa 1. A uma solução de A-5-1 (2,00 g, 9,95 mmol, 1,00 eq.) em DMF (20,00 ml), foi adicionado hidreto de sódio (796 mg, 19,9 mmol, 60% de pureza, 2,00 eq.) a 0 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 0 °C por 30 min, então, cloro(metoxi)metano (1,20 g, 14,92 mmol, 1,13 ml, 1,50 eq.) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 3 horas. Então, a mistura foi bruscamente arrefecida em água (100 ml) e extraída com acetato de etila (50,0 ml × 3). A camada orgânica foi lavada por salmoura (100 ml) e seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para gerar A-5-2 (2,70 g, bruto) como um sólido amarelo.

LCMS:EW6129-85-P1A(M+23:268,9).

[256] Etapa 2. A uma solução de A-5-2 (2,70 g, 11,0 mmol, 1,00 eq.) e etanamina (745 mg, 16,5 mmol, 1,08 ml, 1,50 eq.) em metanol (20,0 ml), foi adicionado acetato de sódio (1,08 g, 13,2 mmol, 1,20 eq.) em uma porção a 20 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 20 °C por 30 min, então, cianoboro-hidreto de sódio (1,04 g, 16,5 mmol, 1,50 eq.) foi adicionado e agitado a 20 °C por 15 horas. A mistura foi concentrada, diluída com água (30,0 ml) e extraída com acetato de etila (15,0 ml × 3). A camada orgânica combinada foi lavada por salmoura (30,0 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar A-5-3 (2,95 g, 10,7 mmol, rendimento = 97,6 %) como um sólido amarelo. LCMS:EW6129- 100-P1B(M+1:274).

[257] Etapa 3. A uma solução de A-5-3 (2,95 g, 10,7 mmol, 1,00 eq.) e A-5-3A (2,43 g, 10,7 mmol, 1,00 eq.) em n- BuOH (20,0 ml), foi adicionado DIEA (5,56 g, 43,0 mmol, 7,51 ml, 4,00 eq.) em uma porção a 20 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi aquecida a 95 °C e agitada por 2 horas. Então, a mistura foi diluída com água (50,0 ml) e extraída com acetato de etila (30,0 ml x 3). A camada orgânica foi lavada por salmoura (50,0 ml) e seca sobre sulfato de sódio anidro.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=5/1 a 1:1) para gerar A- 5-4 (1,66 g, 3,58 µmol, rendimento = 33,3%) como um sólido amarelo. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,32 - 8,28 (m, 2H), 7,30 - 7,28 (m, 1H), 7,17 (t, J=8,4 Hz, 1H), 7,14 - 7,08 (m, 1H), 6,55 (br s, 1H), 5,32 - 5,15 (m, 2H), 5,11 (s, 2H), 4,34 (q, J=7,2 Hz, 2H), 3,51 (s, 2H), 3,34 (s, 3H), 1,38 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,14 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[258] Etapa 4. A uma solução de A-5-4 (1,50 g, 3,24 mmol, 1,00 eq.) em DMF (20,0 ml) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (237 mg, 324 µmol, 0,10 eq.), Zn(CN)2 (570 mg, 4,86 mmol, 308 µl, 1,50 eq.) e Zn (10,6 mg, 162 µmol, 0,05 eq.) a 20 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi aquecida a 120 °C e agitada por 15 horas. A mistura foi diluída com água (100 ml) e extraída com acetato de etila (50,0 ml x 3). A camada orgânica foi combinada e lavada por salmoura (100 ml) e seca sobre sulfato de sódio anidro. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=10/1 a 1:1) para gerar A-5-5 (830 mg, 2,03 mmol, rendimento = 62,7 %) como um óleo amarelo. LCMS:EW6129-107- P1A(M+1:410,2).

[259] Etapa 5. Uma solução de A-5-5 (730 mg, 1,78 mmol, 1,00 eq.) em HCl/dioxano (30,0 ml) foi agitada a 20 °C por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para gerar A-2 (630 mg, 1,72 mmol, rendimento = 96,6%) como um sólido branco. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,84 (br s, 1H), 8,37 (d, J=7,6 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 1H), 7,24 - 7,20 (m, 2H), 6,44 (br d, J=7,6 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,43 (q, J=7,2 Hz, 2H), 3,72 - 3,67 (m, 2H), 1,40 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,34 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Método Geral F Preparação de 5-((2-bromo-3-fluoro-6- hidroxibenzil)(etila)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-3)

[260] Etapa 1. Uma solução de A-2-4 (3,00 g, 13,7 mmol, 1 eq.) e etanamina (1,24 g, 27,4 mmol, 2,00 eq.) em metanol (30,0 ml) foi agitada por 30 min a 25 °C e, então, NaBH4 (1,04 g, 27,4 mmol, 2,00 eq.) foi adicionado, a mistura de reação foi agitada a 25 °C por 12 horas. O solvente foi removido, e a mistura resultante foi diluída com água (20 ml), extraída com acetato de etila (100 ml). A camada orgânica foi lavada por salmoura (100 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para gerar A-6-1 (2,40 g, 8,71 mmol, rendimento = 63,6%) como um sólido branco. RMN de 1 (400 MHz, CDCl3) δ = 6,93 (t, J=8,4 Hz, 1H), 6,71 (dd, J=4,4, 8,4 Hz, 1H), 4,23 (s, 2H), 2,76 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,19 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[261] Etapa 2. A uma mistura de A-6-1 (1,20 g, 4,84 mmol, 1,00 eq.) e A-5-3A (1,31 g, 5,80 mmol, 1,20 eq.) em n- butanol (10,0 ml), foi adicionado DIEA (2,50 g, 19,4 mmol, 4,00 eq.) em uma porção a 25 °C sob proteção de N2. A mistura foi aquecida a 95 °C e agitada por 2 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar o composto A-3 (1,20 g, 2,37 mmol, rendimento = 49,0 %,) como um sólido branco. RMN de 1 (400 MHz, CDCl3) δ = 10,40 (s, 1H), 8,37 - 8,29 (m, 2H), 7,03 (dd, J=8,0, 8,8 Hz, 1H), 6,88 (dd, J=4,8, 8,8 Hz, 1H), 6,40 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,18 (br s, 2H), 4,40 (q, J=7,2 Hz, 2H), 3,65 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,38 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,31 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Método Geral G.

Preparação de 2-amino-5-((2-bromo-3-fluoro-6- hidroxibenzil)(etila)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-4)

[262] Etapa 1. A uma mistura de A-6-1 (0,30 g, 1,21 mmol, 1,00 eq.) e A-3-7 (349 mg, 1,45 mmol, 1,2 eq.) em n- butanol (5,00 ml), foi adicionado DIEA (625 mg, 4,84 mmol, 4,00 eq.) em uma porção a 25 °C sob proteção de N2. A mistura foi aquecida a 95 °C e agitada por 2 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar o composto A-4 (250 mg, 514 µmol, rendimento = 42,5%,) como um sólido branco amarelo. RMN de 1 (400 MHz, CDCl3) δ = (br s, 1H), 8,05 (d, J=7,6 Hz, 1H),

7,04 (dd, J=8,0, 8,8 Hz, 1H), 6,85 (dd, J=4,8, 8,8 Hz, 1H), 6,18 (d, J=7,8 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,16 (br s, 2H), 4,40 (q, J=7,2 Hz, 2H), 3,58 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,39 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,29 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[263] Preparação de 2-amino-5-((2-bromo-6- hidroxibenzil)(etil)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-5). Os métodos gerais F e G foram usados para produzir A-5 a partir de A-5-1 no método geral E.

[264] Preparação de 2-amino-5-((2-bromo-3-fluoro- 6-hidroxibenzil)(ciclopropilmetil)amino)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato de etila (A-6). O método geral D foi usado para produzir A-6.

[265] Preparação de 2-amino-5-((2-bromo-3-fluoro- 6-hidroxibenzil)(isopropil)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidina- 3-carboxilato de etila (A-7). O método geral D foi usado para produzir A-7.

Método Geral H.

[266] Preparação de 2-amino-5-{[(2-bromo-3-fluoro- 6-hidroxifenil)metil]amino}pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de etila (A-8)

[267] Etapa 1. A uma solução de A-2-4 (250 mg, 1,14 mmol) e cloro(metoxi)metano (119 mg, 1,48 mmol, 113 µl) em

THF (5,7 ml), foi adicionado DIEA (368 mg, 2,85 mmol) a -78

°C sob atmosfera de Ar.

A mistura foi amornada lentamente a

25 °C e agitada por 14 horas.

Então, a mistura foi bruscamente arrefecida em água (10 ml) e extraída com DCM (3 x 15 ml). A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada.

Cromatografia rápida

(sistema ISCO, sílica (12 g), 5 a 15% de acetato de etila em hexano) forneceu A-8-1 (96,6 mg, 32% de rendimento).

[268] Etapa 2. A uma solução de A-8-1 (96,6 mg, 0,367 mmol) e A-8-1A (111 mg, 0,918 mmol) em THF (1,0 ml), Me-THF (1,0 ml) e diglima (52 µl) foi adicionado Ti(OEt)4 (586 mg, 2,57 mmol, 538 µL) sob atmosfera de Ar. A mistura foi aquecida a 75 °C e agitada por 2 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e vertida em uma solução de MeOH:água a 5:1 (60 ml). A essa suspensão, foi adicionado celite e a mistura foi filtrada através de um leito de celite. O filtro de celite foi lavado com MeOH (50 ml) e acetato de etila (50 ml). Os filtrados combinados foram adicionados a água (100 ml) e a mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 75 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50,0 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 30% de acetato de etila em hexano) forneceu A-8-2 (101,6 mg, 75% de rendimento).

[269] Etapa 3. A uma solução de A-8-2 (101,6 mg, 0,28 mmol) e água (15,0 mg, 0,83 mmol) em THF (1,4 ml) a - 78 °C, foi adicionado NaBH4 (31,5 mg, 0,83 mmol) em uma porção. A mistura foi amornada lentamente a 25 °C e agitada por 14 horas. Então, a mistura foi resfriada a -20 °C e bruscamente arrefecida com água (10,0 ml) e extraída com DCM (3 x 15 ml). Os extratos combinados foram secos com Na2SO4, então, concentrados sob pressão reduzida.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 30 a 60% de acetato de etila em hexano) forneceu A-8- 3 (quantitativo).

[270] Etapa 4. A uma solução de A-8-3 (102 mg, 0,28 mmol, 1,00 eq.) em DCM (4,0 ml), foi adicionado HCl 4 M em dioxano (3,0 ml). A mistura de reação foi agitada a 25 °C por 1,5 hora, então, concentrada sob pressão reduzida. Os sólidos foram suspensos em DCM (5 ml) e solução saturada de bicarbonato (5 ml) foi adicionada e a mistura agitada por 5 min. A mistura foi extraída com DCM (3 x 15 ml). Os extratos combinados foram secos com Na2SO4, então, concentrados sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (4 g), 80 a 100% de acetato de etila em hexano) forneceu A- 8-4 (53,5 mg, 88% de rendimento).

[271] Etapa 5. O método geral G foi usado para produzir A-8 a partir de A-8-4.

Composto Estrutura MS m/z no A-1 408,1 A-2 366,1

Composto Estrutura MS m/z no

A-3 437,0

A-4 452,3

A-5 434,2

A-6 478,3

A-7 466,0

A-8 424,0

Método Geral H.

Preparação de (7S)-3-amino-12-cloro-14-etil-11-fluoro- 7-metil-6,7,13,14-tetra-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecin-4(5H)-ona (1).

[272] Etapa 1. A uma solução de fenol seco com azeótropo A-1 (50 mg, 0,12 mmol) e (2- hidroxipropil)carbamato de (R)-terc-butila (25,8 mg, 0,147 mmol) em diclorometano (300 µl), foi adicionado PPh3 (40,2 g, 0,153 mmol). A mistura foi agitada até ser completamente dissolvida, então, resfriada a 0 °C e DIAD (32,2 mg, 0,159 mmol, 31,3 µl) foi adicionado por gotejamento com mistura.

A mistura foi amornada a 35 °C e agitada por 1 hora.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 100% de acetato de etila em hexano) forneceu 1-1 impuro.

[273] Etapa 2. A uma solução de 1-7 (69,2 mg, 122 µmol) em MeOH (4 ml) e THF (2 ml) à temperatura ambiente,

foi adicionada solução aquosa de LiOH (2,0 M, 2 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C por 25 horas, resfriada a −20 °C, então, bruscamente arrefecida com solução aquosa de HCl (2,0 M) em ácido. A mistura foi extraída com DCM (3 x 5 ml), seca com Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e seca sob alto vácuo. O material bruto foi dissolvido em DCM (4 ml) seguido por adição de HCl em 1,4-dioxano (4 M, 3 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora, concentrada sob pressão reduzida e seca sob alto vácuo. O material bruto foi dissolvido em DMF (2,0 ml) e DCM (8,0 ml) e base de Hünig (158 mg, 1,22 mmol, 213 µl), então, FDPP (61,2 mg, 159 µmol) foi adicionado em uma porção. A reação foi agitada por 3 horas, então, bruscamente arrefecida com solução de Na2CO3 2 M (5 ml). A mistura foi agitada por 5 min, então, extraída com DCM (4 x 10 ml). Os extratos combinados foram secos com Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 7,5% de metanol em diclorometano) forneceu 1 (11,1 mg, 26,5 µmol, 21% de rendimento).

Método Geral I.

Preparação de (7S)-14-etil-7-metil-4-oxo- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila (2)

[274] Etapa 1. A uma solução de fenol seco com azeótropo A-2 (100 mg, 0,274 mmol) e (2- hidroxipropil)carbamato de (R)-terc-butila (95,9 mg, 0,547 mmol) em diclorometano (182 µl), foi adicionado PPh3 (144 mg, 0,547 mmol). A mistura foi agitada até ser completamente dissolvida, então, resfriada a 0 °C e DIAD (116 mg, 0,574 mmol, 113 µl) foi adicionado por gotejamento com mistura. A mistura foi amornada a 35 °C e agitada por 18 horas.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 80% de acetato de etila em hexano) forneceu 2-1. (81,1 mg, 155 µmol, 56% de rendimento).

[275] Etapa 2. A uma solução de 2-1 (81,1 mg, 155 µmol) em DCM (1,5 ml), foi adicionado HCl em 1,4-dioxano (4 M, 1,5 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por

1 hora, concentrada sob pressão reduzida e seca sob alto vácuo para fornecer 2-2.

[276] Etapa 3. A uma solução de 2-2 (65,6 mg, 155 µmol) em tolueno (3,1 ml), foi adicionado triemetilalumínio em THF (2 M, 465 µl). A mistura foi aquecida a 100 °C e agitada por 1 hora. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e bruscamente arrefecida com HCl aquoso 2,0 N (4 ml), diluída com água (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 10 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas com sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 10% de metanol em diclorometano) forneceu 2.

(29,0 mg, 77 µmol, 49% de rendimento).

[277] O Composto 3 foi preparado de acordo com o Método Geral I.

Método Geral J.

Preparação de (7S)-14-etil-11-fluoro-7-metil-4-oxo- 4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila (4).

[278] Etapa 1. A-3 foi convertido em 4-1 após a etapa 1 no método geral H.

[279] Etapa 2. 4-1 foi convertido em 4-2 após a etapa 2 no método geral H.

[280] Etapa 3. A uma mistura desgaseificada de 4- 2 (8,0 mg, 17,9 µmol), Zn(CN)2 (10,5 mg, 819,2 µmol), Zn (0,12 mg, 1,8 µmol) e dppf (3,96 mg, 7,14 µmol) em DMA (1,12 ml), foi adicionado Pd2(dba)3 (3,3 mg, 3,6 µmol). A mistura foi aquecida a 130 °C por 3 horas. A reação foi resfriada e água (3 ml) adicionada seguida por extração com diclorometano (3 x 3 ml). Os extratos combinados foram secos com Na2SO4, então, concentrados sob pressão reduzida.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (12 g), 0 a 5% de metanol em diclorometano) seguida por sistema ISCO de purificação em fase reversa, C18 (50 g, ouro), 0 a 100% de acetonitrila em água com 0,035% de TFA) forneceu 4 (6,7 g, 16,7 µmol, 95% de rendimento).

[281] Os compostos 5 a 9 foram preparados de acordo com o Método Geral I e J a partir de A-4 a A-8, respectivamente.

Método Geral K.

Preparação de 2-amino-5-[(4-metilbenzeno-1- sulfonil)oxi]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de terc-butila (A-10-5).

[282] Etapa 1. A uma solução de A-10-1 (1,58 kg, 15,0 mol, 1,60 L, 1,0 eq.) e trietilamina (82,2 g, 812 mmol, 113 ml, 0,054 eq.) em etanol (4,1 L), foi adicionado A-3-1A (3,80 kg, 26,30 mol, 2,64 l, 1,75 eq.) lentamente. A mistura foi agitada a 0 a 25 °C por 3 horas. A mistura foi concentrada para gerar produto bruto. O resíduo foi triturado com solvente de mistura (2,0 l × 3, PE:EA=5:1, V/V). Então, a mistura foi filtrada e a torta do filtro foi concentrada para gerar A-10-2 (2,78 kg, 9,74 mol, 65% de rendimento) como um sólido branco. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 10,20 (br s, 1H), 6,80 (br s, 1H), 1,55 (s, 9H).

[283] Etapa 2. A uma solução de A-10-2 (2,26 kg, 7,91 mol, 1,0 eq.) em dimetil formamida (4,1 l), foi adicionado NH2NH2•H2O (1,91 kg, 19,0 mol, 1,85 l, 50% em água, 2,40 eq.). A mistura foi agitada a 100 °C por 6 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada para gerar o composto A-10-3 (2,7 kg, bruto) como um óleo marrom escuro. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 5,29 (br s, 2H), 3,39 (br s, 2H), 1,47 (s, 9H).

[284] Etapa 3. A uma solução de A-10-3 (1.020 g, 3,70 mol, 1,0 eq.) e A-3-3A (480 g, 3,43 mol, 0,926 eq.) em t-BuOH (6,0 L), foi adicionado etóxido de sódio (1,02 kg, 15 mol, 4,05 eq. recém-preparado). A mistura foi agitada a 90 °C por 6 horas. A mistura foi dissolvida em água gelada (6,0 l) e bruscamente arrefecida por ácido acético (2 M, 2,5 l) para neutralizar o PH= 6 e extraída com diclorometano (3,5 l × 5). A camada orgânica foi lavada por salmoura (5,0 l × 3) e seca sobre sulfato de sódio anidro. O solvente foi concentrado para gerar o produto bruto, e o produto bruto foi triturado por solvente (3 l, PE:EA=1:1). A suspensão foi filtrada e a torta do filtro foi concentrada para gerar A- 10-4 (704 g, 2,68 mol, 72,31% de rendimento, 96% de pureza)

como um sólido amarelo. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 7,83 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,95 (d, J=8,0 Hz, 1H), 4,94 (br s, 2H), 1,62 (s, 9H).

[285] Etapa 4. A uma solução de A-10-4 (987 g, 3,79 mol, 1,0 eq.) em diclorometano (6,0 l,) foi adicionada trietilamina (1,51 kg, 14,9 mol, 2,08 l, 3,93 eq.) e cloreto de paratoluenossulfonila (750 g, 3,93 mol, 1,04 eq.). A mistura foi agitada a 0 °C a 25 °C por 5 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada para gerar o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em diclorometano (5,0 l) e lavado com água (4,0 l × 3). A camada orgânica foi concentrada para gerar o composto de produto A- 10-5 (1,14 kg, 2,80 mol, 73,79% de rendimento, 95,9% de pureza) como um sólido rosa. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ = 8,32 (d, J=7,2 Hz, 1H), 8,17 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 2H), 6,50 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,38 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,65 (s, 9H).

Método Geral L Preparação de (7S)-3-amino-14-(2H5)etil-11-fluoro-7- metil-4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15- etenopirazolo[4,3-f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina- 12-carbonitrila (10)

[286] Etapa 1. Uma solução de A-2-4 (1,0 g, 4,57 mmol), 10-1A (1,14 g, 4,79 mmol) e K2CO3 (1,89 g, 13,7 mmol) em DMF (15 ml) foi agitada por 3 horas a 25 °C. A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e água (75 ml) e ajustada até ser ácida com 20% de solução de ácido cítrico e agitada vigorosamente por 10 min. A camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 25 ml). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos com sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados até secar.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (80 g), 10 a 40%

de acetato de etila em hexano) forneceu 10-1 (1,70 g, 99% de rendimento).

[287] Etapa 2. Uma solução de 10-1 (4,09 g, 10,9 mmol) e 10-2A (1,8 g, 35,9 mmol) em metanol seco (54 ml) foi agitada por 1 hora a 50 °C. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e NaBH4 (822 mg, 21,7 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 14 horas, então, bruscamente arrefecida com água (75 ml). A mistura foi extraída com DCM (3 x 75 ml). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos com sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (40 g), 10 a 80% de acetato de etila em hexano) forneceu 10-2 (4,05 g, 90% de rendimento).

[288] Etapa 3. A uma mistura de A-10-5 (2,8 g, 6,92 mmol), 10-2 (2,98 g, 7,27 mmol) e peneira molecular (3 g) em n-butanol (10,0 ml), foi adicionado DIEA (4,47 g, 34,6 mmol).

A mistura foi aquecida a 90 °C e agitada por 26 horas. A reação foi resfriada e diluída com DCM (100 ml), então, filtrada através de celite. O filtrado foi lavado com solução de Na2CO3 1 M (50 ml), então, salmoura (50 ml) e seco com sulfato de sódio anidro, filtrado e concentrado.

Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (120 g), 0 a 60% de acetato de etila em diclorometano) forneceu 10-3 (4,07 g, 91% de rendimento).

[289] Etapa 4. A uma solução desgaseificada de 10-

3 (4,07 g, 6,33 mmol) em DMF (12,6 ml), foi adicionado CuCN (850 mg, 9,5 mmol). A mistura foi aquecida a 110 °C e agitada por 39 horas. A reação foi resfriada e diluída com DCM (15 ml), então, solução de NH4OH 6 M (50 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada vigorosamente por 15 min, então, extraída com DCM (4 x 35 ml) e os extratos combinados foram novamente misturados vigorosamente com uma solução de NH4OH 6 M (50 ml) por 30 min extraída com DCM (3 x 50 ml) e o tratamento repetido com solução de NH4OH mais 2 vezes. Os extratos combinados foram secos com salmoura (50 ml), então, Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (120 g), 20 a 60% de acetato de etila em diclorometano) seguida por purificação de fase reversa (sistema ISCO, C18 (50 g, ouro), 0 a 100% de acetonitrila em água com 0,035% de TFA, 6 injeções) forneceu 10-4 (2,82 g, 75% de rendimento).

[290] Etapa 5. A uma solução de 10-4 (2,82 mg, 4,80 mmol) em DCM (25 ml), foi adicionado HCl em 1,4-dioxano (4 M, 20 ml, 80 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas, concentrada sob pressão reduzida e seca sob alto vácuo. O material bruto foi dissolvido em DMF (10 ml) e DCM (60 ml) e base de Hünig (1,56 g, 120 mmol, 21 ml), então, FDPP (2,02 g, 5,27 mmol) foi adicionado em uma porção. A reação foi agitada por 87 horas, então, bruscamente arrefecida com solução de Na2CO3 2 M (100 ml). A mistura foi agitada por 5 min, então, extraída com DCM (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram lavados com solução de Na2CO3 2 M (100 ml), salmoura (100 ml) e secos com Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida. Cromatografia rápida (sistema ISCO, sílica (120 g), 1,25 a 6,25% de metanol em diclorometano) forneceu 10 (1,59 g, 79% de rendimento).

Método Geral M Preparação de (7R)-3-amino-14-etil-11-fluoro-7-metil- 4-oxo-4,5,6,7,13,14-hexa-hidro-1,15-etenopirazolo[4,3- f][1,4,8,10]benzoxatriazaciclotridecina-12-carbonitrila (11)

[291] Etapa 1. A uma solução de A-6-1 (438,42 g,

1,70 mol, 1,0 eq.) e A-10-5 (690 g, 1,70 mol, 1,0 eq.) em n-

BuOH (6,0 l), foi adicionada di-isopropiletilamina (742 g,

5,74 mol, 1,0 l, 3,38 eq.) e 4A MS (200 g). A mistura foi agitada a 90 °C por 8 horas.

TLC (PE:EA=1:1) mostrou que o composto 7 foi consumido e dois novos pontos foram encontrados.

A mistura foi filtrada a 50 °C e o filtrado foi bruscamente arrefecido com água (8,0 l) e extraída com acetato de etila (4,0 l × 3). A camada orgânica foi lavada com salmoura (4,0 l × 3), seca com sulfato de sódio anidro e concentrada para gerar o produto bruto.

A torta do filtro foi agitada em n-BuOH (2,0 l) a 90 °C por 1 hora, então,

filtrada a 50 °C, essa finalização foi repetida por três vezes até não permanecer nenhum produto desejado, que foi monitorado por TLC, então, o filtrado foi concentrado para gerar o produto bruto.

Todos os resíduos foram triturados com solvente de mistura [500 ml×3; acetato de etila:éter de petróleo=1:2 (v/v)] e o líquido mãe foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila=10/1 a 0:1) para gerar 11-1 (570 g, 1,10 mol, 65,1% de rendimento, 93,4% de pureza) como um sólido amarelo. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ = 10,31 (s, 1H), 8,02 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,02 (dd, J=8,0, 8,8 Hz, 1H), 6,82 (dd, J=4,8, 8,8 Hz, 1H), 6,14 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,17 (br s, 2H), 3,54 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,60 (s, 9H), 1,26 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[292] Etapa 2. A uma solução de 11-1 (8,00 g, 16,7 mmol, 1,00 eq.) em dimetil formamida (25,0 ml), foi adicionado cianeto cuproso (2,24 g, 24,9 mmol, 5,46 ml, 1,50 eq.). A mistura foi agitada a 130 °C por 10 horas. A mistura de reação foi adicionada a hidróxido de amônio (10,0 ml) e diluída com água (300 ml). Então, a mistura foi extraída com acetato de etila (300 ml × 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com cloreto de amônio saturado (100 ml × 5), secas com sulfato de sódio saturado, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparatória (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN];B%: 40% a 60%, 45 MIN; 70% min) para gerar 11-2 (2,00 g, 4,54 mmol, 27,2% de rendimento, 96,7% de pureza) como um sólido marrom. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,66 (br s, 1H), 8,38 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,31 (t, J=9,2 Hz, 1H), 7,16 (dd, J=4,8, 8,8 Hz, 1H), 6,52 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,96 (s, 2H), 4,94 (br s, 2H),

3,50 (br d, J=6,8 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,10 (t, J=6,8 Hz, 3H).

[293] Etapa 3. A uma solução de 11-2 (2,05 g, 4,81 mmol, 1,00 eq.) em dimetil formamida (20,0 ml), foi adicionado carbonato de potássio (1,66 g, 12,0 mmol, 2,50 eq.) e 11-2A (1,71 g, 7,21 mmol, 1,50 eq.). A mistura foi agitada a 30 °C por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com água (100 ml) e extraída com acetato de etila (100 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparatória (coluna: Phenomenex Gemini C18 250*50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v)-ACN];B%: 50% a 80%, 25 MIN, 80% min) para gerar 11-3 (1,80 g, 3,05 mmol, 63,4% de rendimento, 98,9% de pureza) como um sólido amarelo claro.

RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,36 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,52 - 7,40 (m, 2H), 6,96 (br s, 1H), 6,52 (br d, J=7,6 Hz, 1H), 5,93 (s, 2H), 5,12 - 4,91 (m, 2H), 4,58 - 4,44 (m, 1H), 3,44 (br s, 2H), 3,21 - 3,09 (m, 1H), 3,08 - 2,95 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,34 (s, 9H), 1,11 (d, J=6,4 Hz, 3H), 1,07 (t, J=6,8 Hz, 3H).

[294] Etapa 4. 11-3 foi convertido em 11 após a etapa 5 no Método Geral L.

MS RMN de 1H (300 MHz, Cpd Estrutura m/z DMSO-d6)  ppm 8,84 (t, J=4,68 Hz, 1 H) 8,35 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 7,18 - 7,30 (m, 1 H) 7,07 - 7,18 (m, 1 H) 6,48 (d, J=7,89 Hz, 1 H) 5,81 (s, 2 H) 5,55 (dd, J=15,04, 1,83 Hz, 1 419,1 1 H) 4,80 - 4,92 (m, 1 H) 3,97 - 4,13 (m, 2 H) 3,67 - 3,83 (m, 2 H) 3,22 - 3,29 (m, 1 H) 1,44 (d, J=6,05 Hz, 3 H) 1,18 (t, J=6,97 Hz, 3 H) 9,05 - 8,95 (m, 1H), 8,78 (d, J=7,9 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,49 (dd, J=2,6, 7,0 Hz, 1H), 7,40 - 7,29 (m, 2H), 6,95 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,51 (d, J=15,1 Hz, 2 377,2 1H), 5,02 - 4,86 (m, 1H), 4,39 - 4,13 (m, 2H), 3,90 - 3,74 (m, 2H), 3,32 - 3,21 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,2 Hz, 3H), 1,23 - 1,17 (m, 3H) 8,88 (dd, J=3,3, 5,8 Hz, 1H), 8,78 (d, J=7,9 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,51 (dd, J=3,0, 6,6 Hz, 1H), 7,41 - 7,33 (m, 2H), 6,95 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,54 (d, 3 363,2 J=15,1 Hz, 1H), 4,72 - 4,59 (m, 1H), 4,51 (ddd, J=5,3, 9,2, 11,6 Hz, 1H), 4,35 - 4,13 (m, 2H), 3,83 (dd, J=7,2, 15,3 Hz, 1H), 3,73 - 3,49 (m, 2H), 1,20 (t, J=7,0 Hz, 3H)

MS RMN de 1H (300 MHz, Cpd Estrutura m/z DMSO-d6)  ppm 8,93 (t, J=4,9 Hz, 1H), 8,80 (d, J=7,9 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,55 (dd, J=4,7, 9,4 Hz, 1H), 7,32 (t, J=8,9 Hz, 1H), 6,96 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,55 - 5,43 (m, 1H), 4 395,2 4,99 - 4,85 (m, 1H), 4,34 (d, J=15,3 Hz, 1H), 4,28 - 4,15 (m, 1H), 3,38 - 3,28 (m, 1H), 1,47 (d, J=6,1 Hz, 3H), 1,20 (t, J=7,0 Hz, 3H) 8,69 (t, J=5,00 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=7,61 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=9,49, 4,72 Hz, 1 H) 7,26 - 7,37 (m, 1 H) 6,60 (d, J=7,79 Hz, 1 H) 5,86 - 6,14 (m, 2 H) 5,45 (br d, J=15,41 Hz, 1 H) 5 410,2 4,85 - 4,97 (m, 1 H) 4,26 (d, J=15,50 Hz, 1 H) 4,02 - 4,17 (m, 1 H) 3,64 - 3,80 (m, 2 H) 3,23 - 3,35 (m, 1 H) 1,46 (d, J=6,24 Hz, 3 H) 1,17 (t, J=6,92 Hz, 3 H) 8,76 (t, J=4,86 Hz, 1 H) 8,39 (d, J=7,61 Hz, 1 H) 7,48 (dd, J=6,97, 2,75 Hz, 1 H) 7,29 - 7,37 (m, 2 H) 6,58 (d, J=7,79 Hz, 1 H) 5,48 (d, J=15,04 Hz, 1 H) 6 392,2 4,86 - 5,00 (m, 1 H) 4,21 (d, J=15,13 Hz, 1 H) 4,03 - 4,17 (m, 1 H) 3,68 - 3,83 (m, 2 H) 3,29 (dt, J=13,04, 5,03 Hz, 1 H) 1,47 (d, J=6,14 Hz, 3 H) 1,17 (t, J=6,97 Hz, 3 H)

MS RMN de 1H (300 MHz, Cpd Estrutura m/z DMSO-d6)  ppm 8,73 (t, J=5,09 Hz, 1 H) 8,39 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=9,49, 4,81 Hz, 1 H) 7,31 (t, J=8,89 Hz, 1 H) 6,71 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 5,45 - 5,57 (m, 1 H) 4,83 - 4,94 (m, 1 H) 4,38 (br d, J=15,13 Hz, 7 436,2 2 H) 4,22 (br dd, J=15,36, 5,64 Hz, 3 H) 3,73 (dt, J=13,53, 4,93 Hz, 1 H) 3,23 - 3,37 (m, 2 H) 1,47 (d, J=6,14 Hz, 3 H) 1,02 - 1,17 (m, 1 H) 0,43 - 0,57 (m, 3 H) 0,21 - 0,31 (m, 1 H) 8,39 - 8,51 (m, 2 H) 7,55 (dd, J=9,54, 4,68 Hz, 1 H) 7,28 (t, J=8,80 Hz, 1 H) 6,73 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 5,17 (br d, J=15,77 Hz, 1 H) 4,95 - 5,04 (m, 2 H) 4,48 (dt, J=13,02, 8 424,2 6,33 Hz, 2 H) 4,33 (br d, J=15,68 Hz, 1 H) 3,59 - 3,71 (m, 1 H) 3,30 (ddd, J=13,89, 6,05, 3,07 Hz, 1 H) 1,58 (d, J=6,51 Hz, 3 H) 1,48 (d, J=6,24 Hz, 3 H) 1,16 (d, J=6,33 Hz, 3 H)

MS RMN de 1H (300 MHz, Cpd Estrutura m/z DMSO-d6)  ppm 9,32 - 9,43 (m, 1 H) 8,65 (br t, J=5,41 Hz, 1 H) 8,25 (d, J=7,43 Hz, 1 H) 7,48 (dd, J=9,49, 4,81 Hz, 1 H) 7,28 - 7,40 (m, 1 H) 6,29 (d, J=7,34 Hz, 1 9 382,2 H) 5,15 (br dd, J=14,86, 2,66 Hz, 1 H) 4,66 - 4,79 (m, 1 H) 4,10 - 4,22 (m, 1 H) 3,77 - 3,87 (m, 1 H) 3,15- 3,25 (m, 1 H) 1,44 (d, J=6,05 Hz, 3 H) 8,69 (t, J=4,91 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 7,54 (dd, J=9,49, 4,81 Hz, 1 H) 7,23 - 7,39 (m, 1 H) 6,60 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 5,85 (s, 2 H) 5,44 (dd, 10 415,3 J=15,13, 1,38 Hz, 1 H) 4,82 - 5,00 (m, 1 H) 4,26 (d, J=15,22 Hz, 1 H) 3,70 (dt, J=13,64, 4,37 Hz, 1 H) 3,22 - 3,32 (m, 1 H) 1,46 (d, J=6,24 Hz, 3 H) 8,69 (br t, J=4,72 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=7,61 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=9,40, 4,72 Hz, 1 H) 7,31 (t, J=8,89 Hz, 1 H) 6,60 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 5,85 (s, 2 H) 5,44 (br d, J=15,31 Hz, 1 H) 11 410,1 4,83 - 5,00 (m, 1 H) 4,26 (br d, J=15,31 Hz, 1 H) 4,00 - 4,18 (m, 1 H) 3,61 - 3,81 (m, 2 H) 3,23 - 3,31 (m, 1 H) 1,46 (d, J=6,24 Hz, 3 H) 1,17 (t, J=6,88 Hz, 3 H)

[295] Preparação em larga escala do Composto 5

[296] O reator foi carregado com A-10-5 (1,0 eq), A-6-1 (1,1 eq), DIPEA (3,0 eq) e n-butanol (10 vol). A mistura resultante foi aquecida a 90 a 95 °C por 10 h. O progresso da reação foi monitorado por HPLC, 2% de A-10-5 revelou que a reação está completa. Após uma aprovação no teste IPC, a mistura de reação foi resfriada a 0 a 5 °C. A mistura de reação foi agitada por 2 horas. Os sólidos foram filtrados e lavados com MTBE frio (2 x 0,5 volume). Os sólidos foram secos em forno a vácuo a 40 a 50 °C até peso constante com rendimento de 2.950 g (75%) e 99,9% de pureza por HPLC.

[297] O reator foi carregado com 11-1 (1,0 eq), DMA (5 vol) e CuCN (2,5 eq). A mistura resultante foi aquecida a 90 a 100 °C por 92 horas. O progresso da reação foi monitorado por HPLC, NMT 2% de 11-1 revelou que a reação está completa. Após uma aprovação no teste IPC. A mistura de reação foi transferida para um 2º reator contendo DCM (46 l, 15 vol), Celite (3.073 g) a 35 a 40 °C. A mistura de reação foi agitada por 30 min a 20 a 30 °C. A mistura de reação foi filtrada através de leito de celite de 2,54 cm (uma polegada) e lavada com DCM (2 x 5 vol). O filtrado foi carregado com Celite (3.073 g), carvão vegetal (1.000 g) e tampão (H2O/NH4Cl/NH4OH, 9,4/4,0/3,8; 31 l, 10 v) para filtração. A mistura de reação foi agitada por 2 horas a 20 a 30 °C. A mistura de reação foi filtrada através de leito de celite de 2,54 cm (uma polegada) e lavada com DCM (2 x 5 vol). As camadas foram separadas, e a camada orgânica foi lavada com tampão (2 x 31 l, 2 x 10 v) e água (2 x 10 vol). O orgânico foi concentrado até volume mínimo e coevaporado com MTBE (2 x 5 vol). A mistura de reação foi resfriada a 15 a 30 °C e agitada por 4 horas. Os sólidos foram filtrados e lavados com metanol frio (2 x 1 volume). Os sólidos foram secos em forno a vácuo a 40 a 50 °C até peso constante com rendimento de 2310 g (82%) e 99% de pureza por HPLC.

[298] O reator foi carregado com 11-2 (1,0 eq), 10- 1A (1,15 eq), acetonitrila (5 vol) e DBU (2,5 eq). A mistura resultante foi agitada a 20 a 30 °C por 2 horas. O progresso da reação foi monitorado por HPLC, 1% de 11-2 revelou que a reação está completa. Após uma aprovação no teste IPC. O reator foi carregado com acetato de etila (10 vol) e 25% em peso de solução de ácido cítrico (10 vol). A mistura de reação foi agitada durante a noite, separou-se as camadas e extraiu-se novamente a camada aquosa com acetato de etila (10 volumes). A camada orgânica combinada foi concentrada até volume mínimo e coevaporada com DCM (2 x 5 vol).

Concentrado até a secura obteve-se 1.630 g (92%) e 99% de pureza por HPLC.

[299] O reator foi carregado com 5-A (1,0 eq), DCM (10 vol) e HCl 4 M em dioxano (10 eq). A mistura resultante foi agitada a 20 a 30 °C por 2 horas. O progresso da reação foi monitorado por HPLC, 1% de 5-A revelou que a reação está completa. Após uma aprovação no teste IPC. Os sólidos foram filtrados, lavados com MTBE (2 x 5 vol) e secou-se os sólidos em filtro com vácuo sob nitrogênio para obter rendimento com

1.450 g (Assume 100% 1.300 g) e 97% de pureza.

[300] O reator foi carregado com 5-B (1,0 eq), DIPEA (5,0 eq) e DCM (20 vol) e DMF (1 vol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante (15 a 30 °C) por 15 a 30 min. O reator foi carregado com FDPP (1,3 eq) em uma porção. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante (15 a 30 °C) durante a noite. O progresso da reação foi monitorado por HPLC, 1% de 5-B revelou que a reação está completa. Após uma aprovação no teste IPC. O reator foi carregado com solução de Na2CO3 1 M (10 volumes).

A mistura de reação foi agitada por 30 min. e separou-se as camadas. A camada orgânica foi lavada com solução de Na2CO3 1 M (10 volumes) e água (2 x 10 vol) e salmoura (50 volumes).

A camada orgânica foi concentrada até volume mínimo e coevaporada com metanol (2 x 5 vol). A camada orgânica foi seca com MgSO4 e carvão vegetal, e filtrou-se a camada orgânica através e papel GF e concentrou-se o orgânico até volume mínimo e o mesmo foi coevaporado com etanol (2 x 5 vol). Concentrou-se até secura e adicionou-se EtOH (2 l) e agitou-se à temperatura ambiente por 1 hora. Os sólidos foram filtrados e lavados com metanol frio (2 x 1 volume). Os sólidos foram secos em forno a vácuo a 40 a 50 °C até peso constante com rendimento de 850 g (86%).

[301] O reator foi carregado com bruto 5 (1,0 eq) e água (12 vol). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 3 dias. Os sólidos foram filtrados e lavados com água (2 x 1 volume). Os sólidos foram secos em forno a vácuo a 40 a 50 °C até peso constante com rendimento de 723 g (86%) e 98,7% de pureza por HPLC.

Ensaios biológicos Ensaios in vitro Materiais e Métodos Método de ensaio bioquímico de quinase

[302] O ensaio bioquímico de quinase foi realizado na Reaction Biology Corporation (www.reactionbiology.com, Malvern, PA) seguindo os procedimentos descritos na referência (Anastassiadis T, et al Nat Biotechnol. 2011, 29,

1.039). Pares específicos de quinase/substrato juntamente com cofatores necessários foram preparados em tampão de reação; Hepes 20 mM pH 7,5, MgCl2 10 mM, EGTA 1 mM, Brij35 a 0,02%, 0,02 mg/ml de BSA, Na3VO4 0,1 mM, DTT 2 mM, DMSO a 1% (para detalhes específicos de componentes individuais da reação de quinase consultar Tabela Suplementar 2). Os compostos foram entregues na reação, seguidos, ~ 20 minutos após, por adição de uma mistura de ATP (Sigma, St. Louis MO) e 33P ATP (Perkin Elmer, Waltham MA) até uma concentração final de 10 μM. As reações foram realizadas à temperatura ambiente por 120 min, seguido por marcação das reações em papel-filtro de troca iônica P81 (Whatman Inc., Piscataway, NJ). Fosfato não ligado foi removido por lavagem extensiva de filtros em ácido fosfórico a 0,75%. Após subtração do fundo derivado de reações de controle que contêm enzima inativa, os dados da atividade de quinase foram expressos como a porcentagem remanescente da atividade de quinase nas amostras de teste em comparação com as reações de veículo (sulfóxido de dimetila). Valores de IC50 e os ajustes de curva foram obtidos com o uso de Prism (GraphPad Software).

Linhagens celulares e cultura celular:

[303] Linhagem celular de câncer gástrico humano SNU-5, linhagens celulares de câncer pulmonar HCC827, H1975, linhagem celular de leucemia mieloide de camundongo M-NFS- 60 foram obtidas a partir de ATCC. As linhagens celulares Ba/F3, MKN-45 foram adquiridas a partir de DSMZ. A linhagem celular SNU-216 foi adquirida a partir de KCLB.

Clonagem e criação de linhagem celular estável Ba/F3

[304] O cDNA de TEL-CSF-1R foi sintetizado em GenScript e clonado em plasmídeo pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro (System Biosciences, Inc). Ba/F3 TEL-CSF1R foi gerado por transdução de células Ba/F3 com lentivírus contendo clone de cDNA de TEL-CSF1R. As linhagens celulares estáveis foram selecionadas por tratamento com puromicina, seguido por extração de IL-3. Resumidamente, 1X106 células Ba/F3 foram transduzidas com sobrenadante de lentivírus na presença de 8 µg/ml de sulfato de protamina. As células transduzidas foram subsequentemente selecionadas com 1 µg/ml de puromicina na presença de meio RPMI1640 contendo IL3, mais

FBS a 10%. Após 10 a 12 dias de seleção, as células sobreviventes foram, ainda, selecionadas quanto ao crescimento independente de IL3.

Ensaios de proliferação celular:

[305] Duas mil células por poço foram semeadas em uma placa branca de 384 poços por 24 h e, então, tratadas com compostos por 72 horas (37 °C, CO2 a 5%). A proliferação celular foi medida com o uso de ensaio de detecção de ATP com base em luciferase CellTiter-Glo (Promega) seguindo o protocolo do fabricante. As determinações de IC50 foram realizadas com o uso de software GraphPad Prism (GraphPad, Inc., San Diego, CA).

Imunoblotting para ensaios de fosforilação de quinase celular

[306] Linhagens celulares de carcinoma gástrico MKN-45, SNU-5 (ambas com superexpressão de MET), células HCC827 (portadoras de mutação endógena de EGFR delE1746_A750), células NCI-H1975 (portadora de mutações duplas endógenas de EGFR L858R/T790M) ou células SNU216 foram cultivadas em meio RPMI 1640, suplementado com soro fetal bovino a 10% e 100 U/ml de penicilina/estreptomicina. Meio milhão de células por poço foram semeadas em uma placa de 24 poços por 24 h e, então, tratadas com compostos por 4 horas.

As células foram coletadas após tratamento e lisadas em tampão de RIPA (Tris 50 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM, NP-40 a 1%,

Deoxicolato a 0,5%, SDS a 0,1%) suplementado com EDTA 10 mM,

1X Halt protease e inibidores de fosfatase (Thermo

Scientific). Lisados de proteína (aproximadamente 20 µg)

foram resolvidos em géis pré-moldados Bolt Bis-Tris 4 a 12%

com tampão de execução MES (Life Technologies), transferidos para membranas de nitrocelulose com o uso do sistema de transferência Trans-Blot Turbo (Bio-Rad) e detectados com anticorpos que têm como alvo MET fosforilado (Y1234/Y1235)

(Cell Signaling Technology), MET (Y1349), MET (Y1003), MET total (Cell Signaling Technology), EGFR fosforilado (Y1068)

e EGFR total (Cell Signaling Technology), STAT3 e STAT5 fosforilados, STAT3 total e STAT5 (Cell Signaling

Technology), AKT fosforilado (Cell Signaling Technology),

AKT total (Cell Signaling Technology), ERK fosforilado (Cell

Signaling Technology), ERK total (Cell Signaling

Technology), PLCγ2 fosforilado e PLCγ2 total (Cell Signaling

Technology), SRC Y416 fosforilado (Cell Signaling

Technology), SRC total (Cell Signaling Technology), paxilina

Y118 fosforilada (Cell Signaling Technology), paxilina total

(Cell Signaling Technology), PARP, actina (Cell Signaling

Technology). Os anticorpos foram tipicamente incubados durante a noite a 4 °C com agitação suave, seguido por lavagens e incubação com os anticorpos secundários conjugados a HRP adequados.

As membranas foram incubadas com substrato quimioluminescente por 5 min à temperatura ambiente (SuperSignal West Femto, Thermo Scientific). As imagens quimioluminescentes foram adquiridas com um sistema de imageamento C-DiGit (LI-COR Biosciences). A densidade relativa das bandas quimioluminescentes foi quantificada por meio do Image Studio Digits da LICOR. O valor de meia concentração inibitória (IC50) é calculado com o uso de análise de regressão não linear através do software GraphPad Prism (GraphPad, Inc., San Diego, CA).

Os ensaios de cicatrização de feridas por arranhão

[307] As células MKN-45 ou HCC827 foram semeadas em uma placa de 24 poços. Após 12 a 24 horas, monocamadas confluentes de células foram raspadas gentilmente com uma ponta de pipeta estéril para formar um arranhão. As placas foram lavadas com meio fresco, e as células foram incubadas com meio isoladamente ou meio contendo várias concentrações de compostos. Após 36 a 48 horas, as placas foram examinadas e registradas por uma microscopia EVOS FL (Life Technology) para monitorar a vedação da monocamada celular.

Métodos in vivo Linhagens celulares

[308] Células MKN-45 e Ba/F3 ETV6-CSF1R foram cultivadas com o uso de técnicas padrão em meio RPMI-1640 (Corning, Inc) com soro fetal bovino a 10% (Thermo Fisher Scientific, Inc) a 37 °C em uma atmosfera umidificada com CO2 a 5%. Para implantação, as células foram coletadas e peletizadas por centrifugação em 250 g por 2 minutos. As células foram lavadas uma vez e ressuspensas em meio livre de soro suplementado com matrigel a 50% (v/v).

Modelos de xenoenxerto subcutâneo em camundongos imunocomprometidos

[309] Camundongos sem pelo atímicos fêmeas (5 a 8 semanas de idade) foram obtidos junto à Charles River Laboratory e foram alojados em gaiolas descartáveis Innovive IVC em prateleiras ventiladas filtradas com HEPA com acesso ad libitum à ração para roedores e água. Cinco milhões de células em 100 µl de meio livre de soro suplementado com matrigel a 50% (Corning, Inc) foram implantadas subcutaneamente na região do flanco direito do camundongo.

O tamanho do tumor e o peso corporal foram medidos em dias designados. O tamanho de tumor foi medido com um calibrador eletrônico e o volume do tumor foi calculado como on produto do comprimento * largura2 * 0,5. Camundongos foram randomizados por tamanho de tumor em grupos de tratamento quando o volume do tumor alcançou cerca de 200 mm3, e o Composto 5 foi administrado oralmente (BID) em doses determinadas.

Processamento e imunoblotting de tumor para estudos farmacodinâmicos in vivo

[310] Camundongos portadores de tumores de xenoenxerto foram humanamente sacrificados, e os tumores foram ressecados e congelados rapidamente em nitrogênio líquido e armazenados a -80 °C. As amostras congeladas de tumor foram processadas a 4 °C em 1x tampão de lise celular (Cell Signaling Technologies) para extrair proteínas.

Amostras de carregamento de SDS foram preparadas adicionando-se um volume de 4X tampão de amostra de LDS (Life Technologies, Inc) a três volumes de lisado de proteína.

Amostras de proteína SDS de tumor foram processadas por SDS- PAGE e submetidas a imunoblotting com anticorpos anti-MET fosforilado de coelho, anti-MET de camundongo e anti-actina de camundongo (Cell Signaling Technologies). Os sinais de imunoblot foram detectados por C-DiGit Blot Scanner da LI- COR e a intensidade de sinal foi quantificada com o uso do software Image Studio Digit (LI-COR).

Modelo subcutâneo de xenoenxerto derivado de paciente em camundongos imunocomprometidos

[311] Camundongos sem pelo fêmeas BALB/c (6 a 7 semanas) foram obtidos junto à Beijing Anikeeper Biotech Co.

Ltd (Beijing, China). Tumores de modelo de xenoenxerto de tumor humano primário LU2503 foram desenvolvidos em camundongos de estoque. Fragmentos de tumor (2 a 3 mm de diâmetro) foram coletados dos camundongos de estoque e inoculados na parte traseira direita de cada camundongo para desenvolvimento de tumor. 16 camundongos foram envolvidos no estudo. Todos os animais foram aleatoriamente alocados nos

2 grupos de estudo diferentes. O tamanho do tumor e o peso corporal foram medidos em dias designados. O tamanho de tumor foi medido com o uso de um calibrador e o volume do tumor foi calculado como o produto do comprimento * largura2 * 0,5.

Os camundongos foram randomizados por tamanho de tumor em grupos de tratamento quando o volume do tumor alcançou cerca de 200 mm3, e o Composto 5 foi administrado por via oral (BID) em 15 mg/kg.

Modelo subcutâneo singênico MC38 em camundongos C57BL/6J

[312] Camundongos fêmeas C57BL/6J (6 semanas) foram adquiridos junto à Jackson Laboratory, e mantidos de acordo com as diretrizes para o cuidado e o uso de animais de laboratório. Meio milhão de células cancerígenas MC38 em 100 µl de meio livre de soro foi implantado subcutaneamente na região do flanco direito do camundongo. O tamanho do tumor e o peso corporal foram medidos em dias designados. O tamanho de tumor foi medido com um calibrador eletrônico e o volume do tumor foi calculado como o produto do comprimento * largura2 * 0,5. Os camundongos foram randomizados por tamanho de tumor em grupos de tratamento quando o volume do tumor alcançou cerca de 70 a 90 mm3. O controle de veículo, o Composto 5, o anticorpo PD-1 ou o Composto 5 mais o anticorpo PD-1 foram administrados por via oral (BID) em doses determinadas.

Estudos de biomarcador PD do modelo singênico MC38

[313] Tumores MC38 foram coletados no dia 7 e no dia 11. Os tumores coletados foram dissociados com o uso de MiltenyiGentleMax. Análise FACS de tumores foram realizadas para as células imunológicas associadas ao tumor, incluindo macrófagos associados ao tumor (TAM) e subtipos de TAM (M1 e M2), células supressoras derivadas de mieloide (MDSC), linfócitos T citotóxicos (CTL, isto é, células T CD8+), células T CD4+ e células T reguladoras (Treg).

Dados e Resultados: Atividades enzimáticas de quinase

[314] As atividades enzimáticas de inibição de quinase em concentração de ATP 10 µM foram determinadas na Biologia de Reação. Os resultados de IC50 foram sumarizados na Tabela 1.

Tabela 1.

Compost IC50 de IC50 de IC50 de c-FMS o no SRC de MET de (CSF1R) de quinase quinase quinase enzimáti enzimáti enzimática ca (nM) ca (nM) (nM) 1 ND* 20,4 ND 2 3,00 36,5 ND 3 97,1 110,0 ND 4 0,49 1,85 0,42 5 0,12 0,14 0,76 6 13,6 9,7 ND 7 0,70 2,2 ND 8 0,83 3,8 ND *ND = não determinado

Atividades de proliferação anti-celular

[315] As atividades de proliferação anti-celular contra linhagens celulares acionadas por MET e CSF1R foram conduzidas com MKN-45, SNU-5, células Ba/F3 TEL-CSF1R e M- NFS-60, respectivamente. Os resultados de IC50 foram sumarizados na Tabela 2 e Tabela 3.

Tabela 2.

Compost IC50 de MKN-45 IC50 de SNU- IC50 de Ba/F3 o no de 5 de TEL-CSF1R de proliferação proliferação proliferação celular de celular de celular de MET (nM) MET (nM) CSF1R (nM) 1 193 173,9 180,3 2 129 135,9 281,4 3 471 674,1 1740 4 12 5,8 98,1 5 0,2 0,17 19,3 6 58,3 36,8 187,7 7 17,7 1,0 108,1 8 1,0 1,0 39,0 9 297 10 0,2 11 251 Tabela 3.

M-NFS-60 CSF-1 (ng/ml) (IC50s nM) 0 0,3 1 3 10 30 100 Pexidartin <0,1 2 146,4 212,5 379,7 594,7 702,3 ibe (PLX-3397) Composto 5 0,3 3 11,6 78,2 84,1 180,8 174,5 Composto 5 inibiu a fosforilação de MET e sinalização a jusante

[316] A atividade de inibição farmacodinâmica do Composto 5 em MET e a sinalização a jusante correspondente em células acionadas por MET foram avaliadas, e os resultados foram mostrados nas Figuras 1 e 2. O Composto 5 provocou a supressão de autofosforilação de MET assim como a fosforilação a jusante de STAT3, ERK e AKT em IC50s de cerca de 1 a 3 nM em linhagens celulares SNU-5 e MKN-45 (Figuras 1 e 2).

Composto 5 sinergizado com AZD9291 em células HCC827

[317] A linhagem celular de câncer pulmonar HCC827 tem deleção do éxon 19 de EGFR endógeno com superexpressão de MET. O inibidor de EGFR AZD9291 mostrou um IC50 de 5 nM, entretanto, com uma inibição máxima de Emax de 47% em ensaio de proliferação celular. O inibidor seletivo de MET capmatinibe não é ativo no ensaio de proliferação celular de HCC827. A combinação de AZD9291 com capmatinibe mostrou um efeito similar ao AZD9291 isoladamente com um IC50 de 5 nM e Emax de 48%. O Composto 5 inibidor duplo de MET/SRC mostrou um IC50 de 3.000 nM no ensaio de proliferação celular de HCC827. Uma forte atividade sinérgica foi observada na combinação de AZD9291 com o Composto 5 com um IC50 de 2 nM e Emax de 71% no ensaio de proliferação celular de HCC827. Os resultados foram sumarizados na Figura 3. Composto 5 sinergizado com AZD9291 para apoptose na linhagem celular de HCC827 conforme mostrado na Figura 4.

Avaliação da inibição de migração do Composto 5

[318] O Composto 5 inibiu a migração de células MKN- 45 ou HCC827 após 36 a 48 horas de tratamento nos ensaios de cicatrização de feridas, enquanto o inibidor seletivo de MET capmatinibe apenas inibiu a migração de células MKN-45 e tem efeito mínimo em células HCC827. Os resultados foram apresentados nas Figuras 5 e 6 Estudos in vivo Eficácia antitumor do Composto 5 em modelos de tumor de xenoenxerto

[319] A eficácia antitumor do Composto 5 foi avaliada em diversos modelos de xenoenxerto de tumor que representam populações de câncer nas quais a desregulação de MET é implicada.

Modelo de adenocarcinoma gástrico de MKN-45

[320] A amplificação de gene Met em células MKN-45 é subjacente ao mecanismo molecular para crescimento tumoral. Camundongos sem pelo atímicos que portam tumores de MKN-45 (no tamanho médio de tumor de 210 mm3) foram dosados com Composto 5 oralmente BID por doze dias (Figura 7). O grupo de controle de camundongos foram administrados apenas com veículo. O volume do tumor (TMV) foi medido por calibrador nos dias indicados e é mostrado em média ± sem na Figura 7. Os TMVs médios são significativamente menores nos grupos tratados em comparação com aqueles do grupo de controle (p<0,05) conforme determinado por ANOVA de repetição bidirecional seguido por análise post hoc. A inibição do crescimento de Tumor (TGI) foi calculada como 100%*{1-[(TMVTratado; último dia de tratamento-TMVTratado; primeiro dia de tratamento)/(TMVControle no último dia de tratamento-TMVControle no primeiro dia de tratamento)]} quando TMVTratado; último dia de tratamento ≥ TMVTratado; primeiro dia de tratamento. No caso de TMVTratado, último dia de tratamento < TMVTratado; primeiro dia de tratamento, a regressão do tumor (REG) foi calculada como 100%*(1- TMVTratado; último dia de tratamento/TMVTratado; primeiro dia de tratamento). Nesse estudo, o Composto 5 demonstrou a capacidade para inibir o crescimento tumoral em 47% na dose de 3 mg/kg, BID. Quando dosado a 10 mg/kg, BID, e 30 mg/kg, BID, o tratamento do Composto 5 resultou em uma regressão tumoral de 6% e 44%, respectivamente. O tamanho do tumor foi reduzido em 5 de 10 camundongos tratados com o Composto 5 a 10 mg/kg, BID, e em 9 de 10 camundongos tratados com o Composto 5 a 30 mg/kg. O peso corporal dos camundongos foi medido nos dias designados dos camundongos conforme mostrado na Figura 8.

Inibição de atividade de MET em tumores de MKN-45 após administração oral do Composto 5

[321] Para avaliar o efeito do Composto 5 na inibição de fosforilação de MET, tumores de MKN-45 foram coletados a cada 0,5 hora após uma dose oral do Composto 5 a 10 mg/kg. O nível de fosforilação de MET foi determinado por imunoblotting combinado com quantificação de sinal pelo software Image Studio Digit. O Composto 5 inibiu a fosforilação de MET em 16% e 13% do nível de controle em Tyr-1234 e Tyr-1349, respectivamente (Figura 9). Em outro experimento, os tumores foram coletados após administração de dose repetida em 4 horas e 12 horas após a última dose do Composto 5. O nível de fosforilação de MET em Tyr-1234 foi determinado por ELISA. O Composto 5 inibiu a fosforilação de MET em 0,2% e 4,0% do nível de controle em 4 horas e 12 horas após a última dose de tratamento com 10 mg/kg do Composto 5; o Composto 5 inibiu a fosforilação de MET em 12,7% e 33,1% do nível de controle em 4 horas e 12 horas após a última dose de tratamento com 10 mg/kg do Composto 5 (Figura 10).

Modelos NSCLC de xenoenxerto derivado do paciente LU2503 (PDX)

[322] O LU2503 é um modelo PDX derivado de um paciente NSCLC e que abriga a amplificação de gene e a mutação de omissão do éxon 14 do gene Met. O tratamento de camundongos que portam tumores LU2503 com o Composto 5 em 15 mg/kg, BID, por 13 dias resultou em uma regressão de tumor de 85%, enquanto os tumores cresceram de 189 mm3 para 2.032 mm3 no grupo tratado com veículo (Figura 11). Nenhuma perda de peso corporal foi observada após 21 dias de tratamento BID com o Composto 5 em 15 mg/kg (Figura 12).

Inibição do crescimento de tumores de Ba/F3 ETV6-CSF1R

[323] No modelo com tumor de xenoenxerto de Ba/F3

ETV6-CSF1R, o crescimento de tumor é presumidamente dependente da atividade extópica de CSF1R. Camundongos SCID/Beige que portam tumores de Ba/F3 ETV6-CSF1R com tamanho médio de tumor de ~180 mm3) foram dosados com o Composto 5 por via oral, BID, por 10 dias (Figura 13). O grupo de controle de camundongos foram administrados apenas com veículo. O volume do tumor (TMV) foi medido por calibrador nos dias indicados e é mostrado em média ± sem na Figura 12.

Os TMVs médios são significativamente menores nos grupos tratados em comparação com aqueles do grupo de controle (p<0,05) conforme determinado por ANOVA de repetição bidirecional seguido por análise post hoc. O Composto 5 demonstrou a capacidade para inibir o crescimento tumoral em 44% e 67% na dose de 5 mg/kg, BID, e 15 mg/kg, BID, respectivamente. O peso corporal dos camundongos foi medido nos dias designados dos camundongos conforme mostrado na Figura 14.

A avaliação do marcador PD do Composto 5 no modelo de tumor subcutâneo de camundongo singênico MC38

[324] Efeitos anti-tumor do Composto 5 em tumores singênicos de MC38 foram analisados por volume do tumor. O volume médio do tumor do grupo de controle de veículo (G1) no dia 7 foi 696,3±299,7, enquanto o grupo tratado com o Composto 5 (G2) foi 473,5±170,4 mm3. No dia 11, o volume médio do tumor de G1 e G2 foram 1.142,6±290,0 e 610,4±151,8 mm3, respectivamente. No dia 11, o volume do tumor mostrou estatisticamente diferença significativa entre grupos de tratamento com p < 0,006, enquanto a diferença não foi estatisticamente significativa no Dia 7. O percentual da mudança do volume do tumor é mostrado na Figura 15. Nenhuma perda de peso corporal e anormalidade evidente foi observada em camundongos tratados com o Composto 5 em 15 mg/kg, BID, por 7 ou 11 dias, conforme mostrado na Figura 16.

[325] Análise FACS de tumores foram realizadas no dia 7 e no dia 11 para as células imunológicas associadas ao tumor, incluindo macrófagos associados ao tumor (TAM) e subtipos de TAM (M1 e M2), células supressoras derivadas de mieloide (MDSC), linfócitos T citotóxicos (CTL, isto é, células T CD8+), células T CD4+ e células T reguladoras (Treg). Dados são mostrados nas Figuras 17 e 18. No dia 7, não houve mudanças estatisticamente significativas nas populações de TAM, M1, M2, MDSC, CTL, células T CD4+ ou Treg em leucócitos associados ao tumor (populações de CD45+) entre os grupos de controle e tratados com Composto 5, embora haja uma tendência a uma redução em células TAM nos camundongos tratados com o Composto 5. No entanto, no dia 11, uma diminuição estatisticamente significativa de TAM na população total de leucócitos do tumor foi observada no grupo tratado com o Composto 5 em comparação com o grupo de controle, com um aumento concomitante nas populações de MDSC.

Análise adicional da subpopulação de TAM revelou um aumento em M1 TAM e uma diminuição em M2 TAM na população total de leucócitos de tumor em tumores no grupo tratado com o Composto 5 em comparação com o grupo de controle. Ao mesmo tempo, uma tendência de aumento de células CTL na população total de leucócitos de tumor e um aumento estatisticamente significativo de CTL na população de linfócitos CD3+ foram observados no grupo tratado com o Composto 5 em comparação com o grupo de controle, sem mudança estatisticamente significativa encontrada nas células T CD4+ ou células Treg.

Estudo de eficácia de combinação in vivo do Composto 5 com anticorpo PD-1 em modelos singênicos de MC38

[326] Efeitos anti-tumor do Composto 5 combinado com anticorpo PD-1 em tumores singênicos de MC38 foram analisados por volume do tumor. O volume médio do tumor do grupo de controle de veículo (G1) no dia 20 foi

1.938,58±729,41, do grupo tratado com o Composto 5 (G2) foi

1.220,03± 521,39 mm3, do grupo de tratamento com anticorpo PD-1 foi 821,24±767,16 e do tratamento com o Composto 5 mais anticorpo PD-1 foi 515,63±350,47. No dia 20, uma sinergia anti-tumor foi observada em comparação com o grupo de combinação para os grupos de Composto 5 ou tratados com anticorpo PD-1 isoladamente. Nenhuma perda de peso corporal e anormalidade evidente foi observada em camundongos tratados com Composto 5 e/ou anticorpo PD-1. Dados são mostrados nas Figuras 19 e 20.

Claims (80)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto da Fórmula I

I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X1 e X2 são, independentemente, -CR6R7-, S, S(O), S(O)2, O ou N(R8); R1 é H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C3C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, - NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1-C6 alquila, - N(C1-C6 alquil)C(O)C1-C6 alquila, -NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, -N(C1-C6 alquil)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -NHS(O)2(C1-C6 alquila), -

N(C1C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, -N(C1-C6 alquil)S(O)NH2, -

N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1-C6 alquila), -

NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -

NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquil)S(O)NH(C1-C6 alquila),

N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), N(C1-

C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, SC1-C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-C6 alquila), -

S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, -S(O)2N(C1-C6 alquila)2, P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-

C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros;

cada R2 e R3 é, independentemente, H, deutério, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila,

C6-C10 arila, -C(O)OR8 ou -C(O)NR8R9; em que cada átomo de hidrogênio em C1C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila,

C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente,

substituída opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN,

-OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -

NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, -

NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquil)C(O)NH2, -

N(C1C6 alquil)C(O)NHC1C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, -

N(C1C6 alquil)C(O)N(C1C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, -

N(C1C6 alquil)C(O)OC1-C6 alquila, -NHS(O)(C1-C6 alquila), -

NHS(O)2(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquil)S(O)(C1-C6 alquila),

N(C1C6 alquil)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, -NHS(O)2NH2, -

N(C1C6 alquil)S(O)NH2, N(C1-C6 alquil)S(O)2NH2, -NHS(O)NH(C1-

C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquil)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquil)S(O)2NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquil)S(O)N(C1C6 alquila)2, N(C1-

C6 alquil)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, -C(O)OC1-C6 alquila,

C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1-C6 alquila, -S(O)C1-C6 alquila, S(O)2C1C6 alquila, -S(O)NH(C1-C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), -S(O)N(C1-C6 alquila)2, -

S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a

7 membros; ou R2 e R3 tomados em conjunto com os átomos de carbono aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma C5-C7 cicloalquila ou uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros; ou R2 e R4 tomados em conjunto com os átomos aos quais os mesmos são fixados formam opcionalmente uma heterocicloalquila com 5 a 7 membros;

R4 é H, C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros é, independentemente,

substituído opcionalmente por halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), -N(C1-C6 alquila)2, -CO2H,

C(O)OC1C6 alquila, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), -C(O)N(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila ou heterocicloalquila monocíclica com 5 a 7 membros;

R5 é H ou -NR6R7;

cada R6, R7 e R8 são, cada um independentemente,

selecionados a partir do grupo que consiste em H, C1-

C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, e C3-C6 cicloalquila é, independentemente, substituída opcionalmente por deutério, flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6-

C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila), ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2;

R9 é H, flúor, cloro, bromo, -CN, -CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2;

R10 é H, flúor, cloro ou bromo; e n é 1 ou 2;

desde que, quando R5 é H, R9 seja selecionado a partir do grupo que consiste em -CN, CF3, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, C(O)NH(C1C6 alquila) e -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R5 é H.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R9 é -CN.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R10 é F.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R5 é NR6R7.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R6 e R7 são H.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R9 é CN.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R9 é CN.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R10 é flúor.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X1 é N(R8).

11. Composto, de acordo com a reivindicação 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R8 é C1C6 alquila, em que cada átomo de hidrogênio é, independentemente, substituído opcionalmente por flúor, cloro, bromo, -OH, CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, NH(C1- C6 alquila), -N(C1C6 alquila)2, C3C7 cicloalquila, heterocicloalquila com 3 a 7 membros, C6C10 arila, heteroarila com 5 a 7 membros, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, C(O)NH2, - C(O)NH(C1C6 alquila), ou -C(O)N(C1-C6 alquila)2.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R8 é etila, propila, iso-propila ou metilciclopropila.

13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X2 é O.

14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é C1-C6 alquila,

C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6-

C10 arila, -C(O)OR7 ou -C(O)NR7R8; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2C6 alquinila,

C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente,

substituído opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN,

-OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2,

NHC(O)C1-C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, -

NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, N(C1-C6 alquila)C(O)NH2, -

N(C1-C6 alquila)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2,

N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila,

N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, NHS(O)(C1-C6 alquila), -

NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)(C1-C6 alquila), -

N(C1C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, -

N(C1-C6 alquila)S(O)NH2, N(C1-C6 alquila)S(O)2NH2, -

NHS(O)NH(C1-C6 alquila), NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), NHS(O)N(C1-

C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1-

C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquila)S(O)2NH(C1-

C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, -

C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1-

C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1-

C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1C6 alquila)2, -

S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3-C6 cicloalquila ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros, e R3 é H.

15. Composto, de acordo com a reivindicação 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é C1-C6 alquila.

16. Composto, de acordo com a reivindicação 15, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é metila.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é H, e R3 é H, C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila, C6C10 arila, -C(O)OR7 ou -C(O)NR7R8; em que cada átomo de hidrogênio em C1-C6 alquila, C2C6 alquenila, C2-C6 alquinila, C3-C6 cicloalquila e C6-C10 arila é, independentemente, substituído opcionalmente por deutério, halogênio, -OH, -CN, -OC1-C6 alquila, -NH2, -NH(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)2, NHC(O)C1- C6 alquila, -N(C1-C6 alquila)C(O)C1-C6 alquila, -NHC(O)NH2, NHC(O)NHC1-C6 alquila, N(C1-C6 alquila)C(O)NH2, -N(C1-C6 alquila)C(O)NHC1-C6 alquila, NHC(O)N(C1-C6 alquila)2, N(C1C6 alquila)C(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHC(O)OC1-C6 alquila, N(C1C6 alquila)C(O)OC1-C6 alquila, NHS(O)(C1-C6 alquila), - NHS(O)2(C1-C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)(C1-C6 alquila), - N(C1-C6 alquila)S(O)2(C1-C6 alquila), -NHS(O)NH2, NHS(O)2NH2, -

N(C1-C6 alquila)S(O)NH2, N(C1-C6 alquila)S(O)2NH2, - NHS(O)NH(C1-C6 alquila), -NHS(O)2NH(C1-C6 alquila), - NHS(O)N(C1-C6 alquila)2, -NHS(O)2N(C1-C6 alquila)2, N(C1- C6 alquila)S(O)NH(C1-C6 alquila), N(C1-C6 alquila)S(O)2NH(C1- C6 alquila), N(C1C6 alquila)S(O)N(C1-C6 alquila)2, -N(C1-C6 alquila)S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -CO2H, C(O)OC1C6 alquila, - C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6 alquila), C(O)N(C1-C6 alquila)2, -SC1- C6 alquila, S(O)C1-C6 alquila, -S(O)2C1-C6 alquila, S(O)NH(C1- C6 alquila), -S(O)2NH(C1-C6 alquila), S(O)N(C1-C6 alquila)2, - S(O)2N(C1-C6 alquila)2, -P(C1-C6 alquila)2, -P(O)(C1-C6 alquila)2, C3C6 cicloalquila, ou heterocicloalquila com 3 a 7 membros.

18. Composto, de acordo com a reivindicação 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 e R3 são H.

19. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em

, ,

, ,

, ,

, ,

; e ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

20. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um ou mais dentre um diluente farmaceuticamente aceitável, carreador ou excipiente.

21. Método de tratamento de câncer em um paciente caracterizado pelo fato de que compreende, a. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R.

22. Método, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19.

23. Método, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

24. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 23, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente b. administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

25. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

26. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

27. Método, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

28. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

29. Método, de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

30. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

31. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

32. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

33. Composto caracterizado pelo fato de que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer em um paciente.

34. Composto, de acordo com a reivindicação 33, em que o composto é caracterizado pelo fato de que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19.

35. Composto, de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

36. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 33 a 35, caracterizado pelo fato de que está em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

37. Composto, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

38. Composto, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

39. Composto, de acordo com a reivindicação 38, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

40. Composto, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

41. Composto, de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

42. Composto, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

43. Composto, de acordo com as reivindicações 36, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

44. Composto, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

45. Uso de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,

caracterizado pelo fato de que é no preparo de um medicamento para uso no tratamento de câncer.

46. Uso, de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19.

47. Uso, de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

48. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 45 a 47, caracterizado pelo fato de que está em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

49. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

50. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

51. Uso, de acordo com a reivindicação 50, caracterizado pelo fato de que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

52. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

53. Uso, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

54. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

55. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

56. Uso, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o agente anticâncer adicional é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

57. Composição caracterizada pelo fato de que compreende um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em uma quantidade terapeuticamente eficaz, para uso no tratamento de câncer em um paciente.

58. Composição, de acordo com a reivindicação 57, caracterizada pelo fato de que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20.

59. Composição, de acordo com a reivindicação 56, caracterizada pelo fato de que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

60. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 57 a 59, caracterizada pelo fato de que está em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um agente anticâncer adicional.

61. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o pelo menos um agente anticâncer adicional é um inibidor de EGFR, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

62. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um anticorpo de EGFR.

63. Composição, de acordo com a reivindicação 62, caracterizada pelo fato de que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

64. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o agente anticâncer adicional é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

65. Composição, de acordo com a reivindicação 64, caracterizada pelo fato de que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

66. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o agente anticâncer adicional é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

67. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o agente anticâncer adicional é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

68. Composição, de acordo com a reivindicação 60, caracterizada pelo fato de que o agente anticâncer adicional é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

69. Composição sinérgica caracterizada pelo fato de que é de um composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R, e um inibidor de EGFR, em que os dois componentes entram em contato entre si em um locus.

70. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 69, caracterizada pelo fato de que o composto que inibe SRC e MET, e/ou CSF1R é da fórmula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19.

71. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 70, caracterizada pelo fato de que o locus é um paciente.

72. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 70, caracterizada pelo fato de que o locus é um câncer.

73. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 72, caracterizada pelo fato de que o câncer é câncer gástrico, câncer de cólon, câncer renal, câncer de fígado, câncer pulmonar, glioblastoma ou câncer de cabeça e pescoço.

74. Composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 69 a 73, caracterizada pelo fato de que o inibidor de EGFR é um anticorpo de EGFR.

75. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 74, caracterizada pelo fato de que o anticorpo de EGFR é cetuximabe, necitumumabe ou panitumumabe.

76. Composição sinérgica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 69 a 73, caracterizada pelo fato de que o inibidor de EGFR é um inibidor de molécula pequena de EGFR.

77. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 76, caracterizada pelo fato de que o inibidor de molécula pequena de EGFR é afatinibe, brigatinibe, canertinibe, dacomitinibe, erlotinibe, gefitinibe, HKI 357, lapatinibe, osimertinibe, naquotinibe, nazartinibe, neratinibe, olmutinibe, pelitinibe, PF-06747775, rociletinibe, vandetanibe ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

78. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 76, caracterizada pelo fato de que o inibidor de EGFR é gefitinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

79. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 76, caracterizada pelo fato de que o inibidor de EGFR é osimertinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

80. Composição sinérgica, de acordo com a reivindicação 76, caracterizada pelo fato de que o inibidor de EGFR é erlotinibe, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.