BR112018015483B1

BR112018015483B1 - Formulações farmacêuticas sólidas estáveis que contêm 2-(2-nitro-4-trifluorometil- benzoil)-1,3 -ciclo-hexanodiona

Info

Publication number: BR112018015483B1
Application number: BR112018015483-0A
Authority: BR
Inventors: Chiara Conti; Salvatore Agostino Giammillari; Giuseppe Maccari
Original assignee: Dipharma S.A.
Priority date: 2016-02-11
Filing date: 2017-02-09
Publication date: 2021-02-02
Also published as: RU2702746C1; US20190160014A1; CN108495623B; EP3413876B1; JP2019504846A; ES2751746T3; EP3413876A1; US10888527B2; JP6827474B2; AU2017216633A1; WO2017137468A1; CN108495623A; BR112018015483A2; ITUB20160650A1

Abstract

Trata-se de formas de dosagem de fármaco altamente estáveis. A invenção também contempla as ditas formas de dosagem de fármaco altamente estáveis para o tratamento de doenças em que a inibição de 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase 5 resultará na melhoria da saúde do paciente.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção refere-se a formas de dosagem de fármaco altamente estáveis que compreendem um composto suscetível à degradação, notavelmente induzida por temperatura, e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0002] Mais especificamente, a invenção se refere ao inibidor de 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase (HPPD) 2-(2-nitro-4- trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclo-hexanodiona, também conhecido como nitisinona ou NTBC.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0003] A NTBC é um fármaco comercializado pela Swedish Orphan Biovitrum International AB com o nome comercial Orfadin® e é usado para tornar mais lentos os efeitos de tirosinemia hereditária tipo 1 (HT-1) em pacientes adultos e pediátricos. Foi aprovado pela FDA e EMA em janeiro de 2002 e fevereiro de 2005, respectivamente.

[0004] A doença HT-1 ocorre devido a uma deficiência da enzima final da trajetória catabólica de tirosina fumarilacetoacetato hidrolase. NTBC é um inibidor competitivo de 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase (HPPD), uma enzima que precede a fumarilacetoacetato hidrolase. Ao inibir o catabolismo normal de tirosina em pacientes com HT-1, NTBC impede o acúmulo dos intermediários tóxicos maleilacetoacetato e fumarilacetoacetato que, em pacientes com HT-1, são convertidos nos metabólitos tóxicos succinilacetona e succinilacetoacetato, sendo que o primeiro inibe a trajetória de síntese de porfirina, que leva ao acúmulo de 5- aminolevulinato.

[0005] A utilidade de NTBC no tratamento de doenças adicionais também foi documentada. Uma lista não abrangente é relatada doravante no presente documento.

[0006] O documento no WO2011106655 relata um método para aumentar as concentrações plasmáticas de tirosina em um sujeito que sofre de albinismo oculocutâneo/ocular, sendo que o método compreende administrar ao sujeito uma composição farmaceuticamente aceitável que compreende NTBC na faixa entre cerca de 0,1 mg/kg/dia e cerca de 10 mg/kg/dia. O documento no US8354451B2 relata novos métodos de se combater infecções microbianas devido aos fungos ou bactérias por meio de administração a um sujeito de uma quantidade terapeuticamente ativa de NTBC.

[0007] O documento no WO2010054273 revela composições que contêm NTBC e métodos para o tratamento e/ou prevenção de síndrome das pernas inquietas (RLS).

[0008] O documento no EP1853241B1 reivindica o uso de NTBC no tratamento de uma doença neurodegenerativa, notavelmente doença de Parkinson.

[0009] Introne W.J., et al. revelaram a utilidade de nitisinona no tratamento de alcaptonúria (Introne W.J., et al., Molec. Genet. Metab., 2011, 103, 4, 307).

[0010] É bem conhecido que um dos problemas da formulação de fármaco atual (isto é, cápsulas de Orfadin®) é sua estabilidade química. De fato, mesmo que o Orfadin® tenha que ser armazenado em um refrigerador a uma temperatura que varia de 2 °C a 8 °C, sua vida útil é de apenas 18 meses. Depois da primeira abertura, a estabilidade em uso é um período único de 2 meses a uma temperatura não acima de 25 °C; depois disso, o mesmo deve ser descartado. Será evidente que tais condições de armazenamento têm um impacto na cadeia de distribuição do remédio, em termos de custo e também em termos de logística para o paciente. Portanto, há uma necessidade urgente de mais formulações estáveis, tanto do ponto de vista da cadeia de fornecimento logístico quanto do ponto de vista da colaboração do paciente.

[0011] A utilidade de Orfadin® no tratamento de doenças em que os produtos da ação de HPPD estão envolvidos (por exemplo, HT-1) foi descrita notavelmente no documento no EP0591275B1. A síntese de NTBC também é descrita nessa patente. Dentre as formulações farmacêuticas adequadas descritas no presente documento, os Requerentes mencionaram várias composições convencionais, tais como comprimidos, pastilhas, cápsulas duras ou macias, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós ou grânulos dispersíveis, xaropes ou elixires. Formulações parenterais (por exemplo, solução aquosa ou oleosa estéril para dosagem intravenosa, subcutânea, intramuscular ou intravascular), ou formulações retais, tais como um supositório, são também descritas. O documento no EP0591275B1 relatou 3 exemplos específicos de formulações, sendo que dois são comprimidos e um na forma de cápsulas. A última forma de dosagem continha 2% de ingrediente ativo, 0,3% de um lubrificante (isto é, estearato de magnésio), sendo que o resto é lactose Ph.Eur presente como um diluente. Aquelas cápsulas foram depois usadas para estudos in vivo.

[0012] O documento no WO2015101794, depositado em o nome de Cycle Pharmaceuticals LTD, relata formulação de comprimido de NTBC, sendo que a dita formulação alegadamente confere maior estabilidade em relação àquela da formulação de cápsula de Orfadin®. Os Requerentes também indicaram que uma das maiores falhas do produto comercial atualmente disponível reside nos problemas de estabilidade térmica, notavelmente através da formação de um produto ciclizado indesejado chamado 6-trifluorometil-3,4-di- hidro-2H-xanteno-1,9-diona ou oxotetra-hidroxantona. O Requerente identificou adicionalmente o lubrificante estearato de magnésio (não presente na formulação de cápsula de Orfadin®) como um fator de aceleração da instabilidade de NTBC. O pedido sugeriu adicionalmente não usar qualquer íon metálico ou qualquer amido na formulação. Em particular, o Requerente revelou que amido promove a formação das impurezas ciclizadas indesejadas de oxotetra-hidroxantona. O presente pedido de patente sugeriu também formulação de comprimido como preferencial. Como um lubrificante, ácidos graxos que contêm de 20 a 22 átomos de carbono foram preferidos, mais preferencialmente, a gordura da composição consiste em dibehenato de glicerol (por exemplo, Compritol®888). Foi sugerido que esse componente, em associação com lactose, pode ainda intensificar a estabilidade da formulação, impedindo a formação do produto ciclizado indesejado.

[0013] O documento no WO2012177214, depositado em o nome de Swedish Orphan Biovitrum International AB, revela suspensões líquidas orais de nitisinona que contêm tampão de ácido cítrico como um estabilizador.

[0014] O documento no WO2013181292 depositado em o nome de Biotie Therapies Inc., e agora abandonado, revelou formulações farmacêuticas de nitisinona, as quais alega-se serem estabilizadas para armazenamento a longo prazo. Dentre uma longa lista de estabilizadores hipotéticos, os Requerentes sugerem ácidos dicarboxílicos e tricarboxílicos como os ácidos orgânicos particularmente preferenciais, que são selecionados a partir do grupo que consiste de ácidos cítrico, pirúvico, succínico, fumárico, málico, oxaloacético, cis-aconítico, isocítrico e a-cetoglutárico. Os estudos de estabilidade de uma formulação de comprimido obtidos a partir de um processo de granulação a úmido para permitir distribuição uniforme dos vários ingredientes foram realizados em condições aceleradas. Os Requerentes sugeriram que a presença de ácido cítrico permitiu a estabilização da formulação.

[0015] Contudo, até o presente momento, apesar dos inúmeros esforços, nenhuma formulação de NTBC satisfaz completamente os requisitos de estabilidade e/ou padrão de conformidade para os pacientes. Portanto, há uma necessidade médica não atendida de formulações estáveis a longo prazo.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[0016] A presente invenção se refere a uma composição farmacêutica altamente estável de modo durável que compreende 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclo-hexanodiona como o ingrediente ativo, um estabilizador e pelo menos um excipiente.

[0017] Embora sem a intenção de se ater a qualquer teoria, acredita-se que a estabilidade melhorada da formulação seja devido à presença de ácido esteárico.

[0018] Foi constatado agora que formular nitisinona com ácido esteárico como um estabilizador gera, surpreendentemente, composições farmacêuticas altamente estáveis mesmo à temperatura ambiente por um longo período de tempo.

[0019] Em uma modalidade preferencial, tal formulação compreende amido pré-gelatinizado ou lactose como excipiente, ou uma mistura dos mesmos.

[0020] Em uma modalidade preferencial, tal formulação está na forma de cápsulas de gelatina duras.

[0021] Se a utilidade de ácido esteárico como um lubrificante em formulação de fármaco já é conhecida há muito tempo, seu uso como um estabilizador de nitisinona nunca foi mencionado ou sugerido. Além disso, contrariamente ao sugerido na técnica anterior, amido como um diluente não é incompatível com a integridade de nitisinona se ácido esteárico estiver também presente na composição farmacêutica.

[0022] Em uma modalidade preferencial da presente invenção, amido pré-gelatinizado é usado como um diluente e ácido esteárico como um estabilizador.

[0023] Em outra modalidade preferencial da presente invenção, lactose é usada como um diluente e ácido esteárico como um estabilizador.

[0024] Em uma modalidade preferencial adicional da presente invenção, uma mistura de lactose e amido pré-gelatinizado é usada como um diluente e ácido esteárico como um estabilizador. Em tal formulação, a razão de amido pré-gelatinizado/lactose varia preferencialmente de 5/95 a 95/5.

[0025] Em uma modalidade ainda preferencial da presente invenção, a porcentagem de cada ingrediente em p/p é conforme se segue: de 2 a 5%, de 93 a 97% e de 0,5 a 5%, sendo que tais porcentagens estão relacionadas à nitisinona, diluente (isto é, amido pré-gelatinizado ou lactose) e ácido esteárico, respectivamente.

[0026] Em uma modalidade preferencial da presente invenção, ácido esteárico está presente a uma concentração de até 1% em p/p ± 10%.

[0027] Em uma modalidade com ainda mais preferência da presente invenção, a porcentagem de cada ingrediente em p/p é conforme se segue: 3,57%, 95,34% e 1,09%, sendo que tais porcentagens estão relacionadas a nitisinona, diluente (isto é, amido pré-gelatinizado ou lactose) e ácido esteárico, respectivamente.

[0028] Em uma modalidade ainda mais preferencial da presente invenção, as formulações farmacêuticas objeto da presente invenção podem estar em quatro diferentes forças em relação à quantidade do ingrediente ativo nitisinona, sendo que as ditas forças são 2 mg, 5 mg, 10 mg e 20 mg.

[0029] A formulação farmacêutica da presente invenção é útil como um medicamento devido a suas propriedades de inibição de 4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase para o tratamento de distúrbios em que tal inibição resulta na melhoria da saúde do paciente. Em particular, pacientes que sofrem de HT-1, ou de albinismo oculocutâneo/ocular, ou de infecções microbianas devido a fungos ou bactérias, ou de síndrome das pernas inquietas, ou de doença neurodegenerativa, notavelmente doença de Parkinson, podem ser tratados.

[0030] Em uma modalidade preferencial da presente invenção, a formulação farmacêutica serve para tratar pacientes que sofrem de HT-1.

[0031] Em geral, a formulação farmacêutica da presente invenção é administrada em uma “quantidade terapeuticamente eficaz”. A quantidade da formulação farmacêutica de fato administrada tipicamente será determinada por um médico, à luz das circunstâncias relevantes, incluindo a afecção a ser tratada, qualquer outro fármaco em potencial que o paciente estiver usando, a idade, o sexo, o peso corporal e a resposta do paciente individual, a gravidade dos sintomas do paciente e similares.

[0032] Em geral, uma dose eficaz será de 0,5 mg/kg/dia a 2 mg/kg/dia, preferencialmente 1 mg/kg/dia a 1,5 mg/kg/dia. Tal dose diária pode ser dividida em duas doses iguais e tomadas duas vezes ao dia, aproximadamente na mesma hora em cada dia.

[0033] Em uma modalidade preferencial, a dose diária é dividida em duas doses iguais.

[0034] O ajuste de dose será feito de acordo com o monitoramento de nível de succinilacetona e alfa-fetoproteínas na urina e valores de teste da função hepática.

[0035] Será verificado que pacientes com HT-1 estão sob uma dieta restrita de fenilalanina e tirosina, ao mesmo tempo em tratamento com a formulação farmacêutica da presente invenção.

[0036] A expressão "% em p/p" se refere à porcentagem de uma substância presente na formulação farmacêutica em uma base de peso por peso (isto é, 1 g/100 g é equivalente a 1% em p/p).

[0037] A expressão “aproximadamente no mesmo momento” significa ± 30 min antes ou depois do momento de administração usual.

[0038] As expressões “altamente estável” e/ou “estável de modo durável” significam que a integridade química do ingrediente ativo é de pelo menos 95% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0039] Em uma modalidade, a dita integridade química é de pelo menos 96% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0040] Em outra modalidade, a dita integridade química é de pelo menos 97% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0041] Em uma modalidade preferencial, a dita integridade química é de pelo menos 98% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0042] Em uma modalidade ainda preferencial, a dita integridade química é de pelo menos 99% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0043] Outra modalidade da invenção contempla a integridade química da forma de dosagem de fármaco depois de três meses de armazenamento a 25 °C e 60% de UR.

[0044] Na dita modalidade, a dita integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 95% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0045] Em uma modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 96% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0046] Em outra modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 97% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0047] Em uma modalidade ainda preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 98% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0048] Em uma modalidade ainda preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 99% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 25 °C e 60% de UR.

[0049] Outra modalidade da invenção contempla a integridade química da forma de dosagem de fármaco depois de um mês de armazenamento a 40 °C e 75% de UR.

[0050] Na dita modalidade, a dita integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 95% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0051] Em uma modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 96% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0052] Em outra modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 97% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0053] Em uma modalidade ainda preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 98% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0054] Em uma modalidade ainda mais preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 99% depois de um mês de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0055] Outra modalidade da invenção contempla integridade química da forma de dosagem de fármaco depois de três meses de armazenamento a 40 °C e 75% de UR.

[0056] Na dita modalidade, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 95% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0057] Em uma modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 96% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0058] Em outra modalidade preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 97% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0059] Em uma modalidade ainda preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 98% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0060] Em uma modalidade ainda preferencial, a integridade química da forma de dosagem de fármaco é de pelo menos 99% depois de três meses de armazenamento da forma de dosagem de fármaco a 40 °C e 75% de UR.

[0061] 3 impurezas foram detectadas em condições de armazenamento em estresse e foram quimicamente caracterizadas como sendo ácido 4-(trifluorometil)salicílico, 6-trifluorometil-3,4-di-hidro-2H-xanteno- 1,9-diona e 1,3-ciclo-hexanodiona. As mesmas são adicionalmente indicadas como Imp-1, Imp-2 e Imp-3. Tais impurezas foram anteriormente reportadas no documento no W02015101794.

[0062] Apresenta-se que teste a 40 °C e 75% de UR por um tempo curto, tal como seis meses, é considerado indicativo de estabilidade a 25 °C (isto é, temperatura ambiente) por um período de tempo mais longo (quinze a dezoito meses).

DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0063] Figura 1A: quantidade de Imp-2 a partir de exemplos de viabilidade 1 a 3 por um período de 3 meses em condições de estabilidade aceleradas.

[0064] Figura 1B: quantidade de Imp-2 a partir de exemplos de viabilidade 4 a 9 por um período de 3 meses em condições de estabilidade aceleradas.

[0065] Figura 2A: quantidade total de impurezas a partir de exemplos de viabilidade 1 a 3 por um período de 3 meses em condições de estabilidade acelerada.

[0066] Figura 2B: quantidade total de impurezas a partir dos exemplos de viabilidade 4 a 9 por um período de 3 meses em condições de estabilidade aceleradas.

[0067] Figura 3A: quantidade de Imp-2 a partir dos exemplos de viabilidade 1 a 3 por um período de 3 meses em condições de estabilidade a longo prazo.

[0068] Figura 3B: quantidade de Imp-2 a partir dos exemplos de viabilidade 4 a 9 por um período de 3 meses em condições de estabilidade a longo prazo.

[0069] Figura 4A: quantidade total de impurezas a partir dos exemplos de viabilidade 1 a 3 por um período de 3 meses em condições de estabilidade a longo prazo.

[0070] Figura 4B: quantidade total de impurezas a partir dos exemplos de viabilidade 4 a 9 por um período de 3 meses em condições de estabilidade a longo prazo. EXEMPLOS

[0071] Nove formulações farmacêuticas, conforme revelado na Tabela 1, foram testadas conforme relatado nos exemplos de viabilidade 1 a 9. TABELA 1

MATERIAL USADO: INGREDIENTE FARMACÊUTICO ATIVO

[0072] Nitisinona foi obtida seguindo-se o procedimento descrito no documento no EP0805791B1. Sua pureza química 5 (isto é, 99,95%) foi avaliada por meio de HPLC em uma detecção de comprimento de onda de 235 nm. DILUENTE

[0073] Amido pré-gelatinizado: (Amido 1500®; Colorcon, Eighenmann & Veronelli)

[0074] Monohidrato de lactose: (Lactopress® seco por aspersão; DFE Pharma)

[0075] Fosfato de cálcio dibásico anidro (DLCAFOS®, Budenheim) LUBRIFICANTE:

[0076] Ácido esteárico (Ácido esteárico 50, Carlo Erba)

[0077] Estearato de magnésio (grau vegetal, Ligamed MF-3-V, Peter Greven Holanda) EXEMPLOS DE VIABILIDADE FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[0078] O protocolo geral para se obter as formulações farmacêuticas de viabilidade exemplificadas é descrito abaixo no presente documento.

[0079] Nitisinona (2,5 mg) e diluente (269,75 mg) foram misturados em Turbula® a 23 rpm por 3 minutos. O lubrificante (2,75 mg) foi então adicionado e a mistura foi continuada por mais um minuto na mesma velocidade de mistura (isto é, 23 rpm). Em casos em que nenhum lubrificante foi adicionado, a quantidade de diluente foi ajustada para 272,5 mg e a duração da etapa de mistura, ajustada para 4 minutos.

[0080] Cápsulas de gelatina duras de tamanho 2 foram, então, preenchidas por meio de uma máquina de preenchimento OSZ/150 Zuma semiautomática com 275 mg de mistura que contém 2,5 mg de nitisinona, 1% em p/p de lubrificante (se presente), sendo que o resto é o material diluente. CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO

[0081] Cápsulas foram armazenadas em três diferentes condições atmosféricas (isto é, temperatura e Umidade Relativa (UR)) conforme relatado abaixo.

[0082] • Condição 1 (estudo de estabilidade refrigerada) 5 °C/

[0083] • Condição 2 (estudo de estabilidade a longo prazo) 25 °C/60% de UR

[0084] • Condição 3 (estudo de estabilidade acelerado) 40 °C/75% de UR

[0085] Métodos analíticos apropriados foram desenvolvidos para avaliar completamente o perfil de impureza das formulações farmacêuticas em vários pontos no tempo, conforme relatado abaixo.

[0086] As formulações farmacêuticas dos exemplos de viabilidade foram obtidas com o uso do protocolo geral relatado acima no presente documento, selecionando-se os ingredientes apropriados. Durante os estudos de viabilidade, a quantidade total de impurezas foi considerada e os resultados são retratados nas Figuras 1A, 1B, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A e 4B. MÉTODOS ANALÍTICOS

[0087] Fase de dissolução (DP): CH3CN/H2O: 1/1

[0088] Coluna: Sunfire C18 5 μm, 250 x 4,6 mm

[0089] Fluxo: 1 ml/min

[0090] Volume de injeção: 10 μl

[0091] Comprimento de onda de detector: 235 nm

[0092] Temperatura de coluna: 35 °C

[0093] Condições de eluição para impurezas 1 e 2 (isto é, Imp-1 e Imp-2)

[0094] Eluente A: CH3CN

[0095] Eluente B: CH3CO2NH4 0,02 M GRADIENTE-1:

[0096] Tempo de execução: 35 mn, tempo transcorrido após: 11 min

[0097] Condições de eluição para impureza 3 (isto é, Imp-3)

[0098] Eluente C: CH3CN

[0099] Eluente D: H3PO4 0,1% GRADIENTE-2:

[0100] Tempo de execução: 25 min, tempo transcorridos após: 1 min MÉTODO DE DISSOLUÇÃO SOLUÇÃO DE TESTE

[0101] 50 mg de nitisinona formulada para ser analisada são dissolvidos em 2 ml de CH3CN em um frasco volumétrico de 50 ml. A dita solução é então ajustada para 50 ml por adição da quantidade de DP exigida. SOLUÇÃO DE REFERÊNCIA A

[0102] 10 mg de nitisinona (padrão de referência) e 15 mg de cada um dentre Imp-1 e Imp-2 são dissolvidos em 2 ml de CH3CN em um frasco volumétrico de 100 ml. A dita solução é então ajustada para 100 ml por adição da quantidade de DP exigida. Um mililitro da solução obtida desse modo é então diluído até 100 ml com 99 ml de DP.

[0103] A solução de referência contém 0,10% de nitisinona e 0,15% de cada uma das impurezas. SOLUÇÃO DE REFERÊNCIA B

[0104] 15 mg de Imp-3 são dissolvidos em um frasco volumétrico de 100 ml com DP até 100 ml. Um mililitro da solução obtida desse modo é então diluído até 100 ml com 99 ml de DP.

[0105] A solução de referência contém 0,15% de Imp- 3.

[0106] Formulações que contêm fosfato de cálcio dibásico como um diluente (isto é, exemplos de viabilidade 1 a 3) resultaram-se instáveis, visto que permitem rapidamente a formação da impureza ciclizada mesmo depois de um mês, a 40 °C/75% de UR ou também a 25 °C/60% de UR, mesmo se em menor escala. Isso é destacado nas Figuras 1A e 3A, respectivamente. É interessante notar que as formulações que contêm fosfato de cálcio dibásico têm menos tendência à formação do produto de degradação ciclizado se nenhum lubrificante estiver presente, em que ácido esteárico demonstra ainda um efeito negativo em relação à formação de oxotetra- hidroxantona (isto é, Figura 1A). Ao se procurar por quaisquer impurezas que se formam durante as condições de armazenamento, fica evidente que nenhuma das formulações de exemplos de viabilidade 1 a 3 são adequadas, visto que, depois de 3 meses, aproximadamente 40 a 50% de impurezas são formadas a 40 °C/75% de UR (isto é, Figura 2A), enquanto mais que 10% de nitisinona é degradada depois de 3 meses a 25 °C/60% de UR (Figura 4A).

[0107] A formulação que contém lactose (isto é, exemplos de viabilidade 4 a 6) resultou-se em extremamente estável quando também compreendia ácido esteárico. O estearato de magnésio teve uma influência negativa ao considerar a formação de oxotetra-hidroxantona tanto em estudos de estabilidade acelerado quanto em a longo prazo (isto é, Figura 1B e 3B, respectivamente). Essa tendência pode também ser observada ao considerar todas as impurezas formadas durante armazenamento, independentemente das condições usadas (isto é, Figura 2B e 4B). Surpreendentemente, a presença de ácido esteárico melhorou imensamente a estabilidade de formulação de nitisinona/lactose (exemplo de viabilidade 6 versus exemplos de viabilidade 4 e 5 nas Tabelas 1B, 2B, 3B e 4B).

[0108] Formulações que contêm amido pré- gelatinizado (isto é, exemplos de viabilidade 7 a 9) resultaram-seextremamente estáveis quando também compreendiam ácido esteárico, sendo que a formação de oxotetra-hidroxantona é bastante limitada. De fato, surpreendentemente, a quantidade de oxotetra-hidroxantona foi reduzida em mais de 11 vezes em experimentos de estabilidade acelerados (exemplo de viabilidade 6 versus exemplo de viabilidade 5, Figura 1B). O nível de qualquer das outras impurezas também permaneceu em um nível extremamente baixo, mesmo em condições de estabilidade aceleradas (isto é, 0,34% depois de 3 meses a 40 °C/75% de UR).

[0109] Começando com formulações promissoras dos exemplos de viabilidade 6 e 9, experimentos adicionais foram conduzidos para se identificar formulações com perfil de estabilidade adicionalmente melhorados. As composições químicas ilustradas nos exemplos 1 a 3, derivados do exemplo de viabilidade 9, mostraram um perfil de estabilidade extremamente alto. EXEMPLOS 1 a 3

MISTURA

[0110] Para batelada em larga escala, a nitisinona é colocada em uma bolsa de polietileno de baixa densidade (LDPE) junto de 25% da quantidade total do diluente e misturada por 1 min a 10 rpm para gerar a “pré- mistura 1”. Depois disso, outros 25% da quantidade total do diluente é adicionado à “pré-mistura 1” e misturada novamente nas mesmas condições, conforme previamente, para gerar a “pré-mistura 2”. A última é então transferida para um misturador bicônico junto dos 50% restantes da quantidade total do diluente e ácido esteárico é então adicionado. Toda a mistura é então misturada por 10 min ± 2 min. PREENCHIMENTO DE CÁPSULAS

[0111] Cápsulas de tamanho 2 (para as cápsulas de força de 10 mg) e tamanho 3 (para as cápsulas de força de 2 e 5 mg) foram preenchidas com o uso de uma máquina de preenchimento IN-CAP automática (Bonapace). TESTE DE DISSOLUÇÃO

[0112] Tal teste foi realizado em um vaso que contém 900 ml de um tampão de pH 6,8 produzido a partir de KH2PO4 e NaOH em água deionizada. ESTABILIDADE

[0113] A estabilidade de cápsulas de foça de 10 mg (isto é, exemplo l) foi analisada a fim de se avaliar completamente o perfil de impurezas da formulação farmacêutica em vários pontos no tempo. O método analítico usado é relatado abaixo. MÉTODO ANALÍTICO

[0114] Fase de dissolução (DP): CH3CN/MeOH: 65/35

[0115] Coluna: Phenomenex Synergi 4pm™ Hydro- RP 80A 100 x 4,6 mm

[0116] Fluxo: 1,5 ml/min

[0117] Volume de injeção: 10 μl;

[0118] Comprimento de onda de detector: 255 nm e 310 nm

[0119] Temperatura de coluna: 30 °C

[0120] Eluente A: CH3CN

[0121] Eluente B: Solução de tampão de acetato pH 3 GRADIENTE:

TABELA 2

TABELA 3

TABELA 4

[0122] Conforme será compreendido pelo indivíduo versado a partir dos resultados relatados nas Tabelas 2 a 4, tal formulação é altamente estável ao longo do tempo, independentemente das condições de armazenamento. Além disso, a impureza usual 6-trifluorometil-3,4-di-hidro-2H- xanteno-1,9-diona (isto é, Imp-2) está abaixo de 0,05%.

Claims

1. Formulação farmacêutica sólida estável caracterizada pelo fato de que contém 2-(2-nitro-4- trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclo-hexanodiona como um ingrediente farmaceuticamente ativo, amido pré-gelatinizado e ácido esteárico.

2. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a quantidade de ácido esteárico representa de 0,5 a 5% em p/p da quantidade total dos ingredientes.

3. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a quantidade de ácido esteárico representa 1% em p/p ± 10% da quantidade total dos ingredientes.

4. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que a integridade química de 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclo-hexanodiona é de pelo menos 95% depois de três meses de armazenamento a 25 °C, mais preferencialmente de pelo menos 97% depois de três meses de armazenamento a 25 °C, ainda mais preferencialmente de pelo menos 98% depois de três meses de armazenamento a 25 °C, com maior preferência de pelo menos 99% depois de três meses de armazenamento a 25 °C.

5. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a quantidade da principal impureza não excede 0,20% depois de três meses de armazenamento a 40 °C/75% de UR.

6. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que é na forma de uma cápsula de gelatina, em que a quantidade de 2-(2-nitro-4- trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclo-hexanodiona é tipicamente 2 mg, 5 mg, 10 mg ou 20 mg.

7. Formulação farmacêutica sólida estável, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a cápsula de gelatina é uma cápsula de gelatina rígida.