BR112015028399B1

BR112015028399B1 - Derivados 11-hidroxila de ácidos biliares e conjugados de aminoácido dos mesmos como moduladores de receptor farnesoide x, composição farmacêutica e uso dos referidos derivados

Info

Publication number: BR112015028399B1
Application number: BR112015028399-3A
Authority: BR
Inventors: Roberto Pellicciari
Original assignee: Intercept Pharmaceuticals, Inc
Priority date: 2013-05-14
Filing date: 2014-05-14
Publication date: 2021-11-16
Also published as: EP3360881A1; ME03082B; HRP20180931T1; PL3360882T3; PL3360881T3; ES2936638T3; CN105377870B; PL2997035T3; GT201500324A; BR112015028399A2; EP3360881B1; IL272718A; EP3848038A1; US11000532B2; IL272718B; LT2997035T; CY1122614T1; KR102229952B1; EA030152B1; DK2997035T3

Abstract

derivados 11-hidroxila de ácidos biliares e conjugados de aminoácido dos mesmos como moduladores de receptor farnesoide x, composição farma-cêutica e uso dos referidos derivados. a presente invenção refere-se a um composto de fórmula (i) (i) ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que r1 é um grupo hidróxi e r2, r3, r4, r5 e r6 são conforme descritos no presente docu-mento. a presente invenção refere-se, de modo geral, a agonistas fxr seletivos e a métodos para produzir e usar os mesmos.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADO

[0001] Este pedido reivindica a prioridade e o benefício do docu mento no de série U.S. 61/823.169, depositado em 14 de maio de 2013, cujo conteúdo completo é incorporado no presente documento a título de referência.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] FXR é um membro da família de receptor nuclear de fatores de transcrição ativados por ligante que inclui os receptores para os hormônios de esteroide, retinoide e tireoide (D.J. Mangelsdorf, et al., Cell 83:841 a 850 (1995)). As análises Northern e in situ mostram que FXR é mais abundantemente expresso no fígado, intestino, rim e su- prarrenal (B.M. Forman, et al., Cell 81:687 a 693 (1995) e W. Seol, et al., Mol. Endocrinnol. 9:72 a 85 (1995)). O FXR liga-se ao DNA como um heterodímero com o receptor de ácido 9-cis retinoico (RXR). O FXR de rato é ativado por concentrações micromolares de farnesoides tais como hormônio juvenil e farnesol (B.M. Forman, et al., Cell 81:687 a 693 (1995)). Entretanto, esses compostos falharam em ativar o FXR de camundongo e humano, deixando a natureza dos ligantes de FXR endógenos em dúvida. Diversos ácidos biliares de ocorrência natural (por exemplo, ácido quenodesoxicólico (CDCA), ácido deoxicólico (DCA), ácido litocólico (LCA) e os conjugados de taurina e glicina dos mesmos) servem como ligantes de FXR e se ligam a e ativam FXR a concentrações fisiológicas (WO 00/37077).

[0003] Os ácidos biliares são metabólitos de colesterol que são formados no fígado e secretados no duodeno do intestino, em que os mesmos têm um papel importante na solubilização e absorção de vitaminas e lipídios dietéticos. A maioria dos ácidos biliares (~95%) é subsequentemente reabsorvida no íleo e retornada para o fígado por meio do sistema circulatório enteroepático. A conversão do colesterol em ácidos biliares no fígado é sob a regulação de retroalimentação: os ácidos biliares regulam ascendentemente a transcrição do citocromo P450 7a (CYP7a), que codifica a enzima que catalisa a etapa de limitação de taxa na biossíntese de ácido biliar. Sugere-se que FXR está envolvido na repressão da expressão de CYP7a por ácidos biliares (D.W. Russell, Cell 97:539 a 542 (1999)). No íleo, os ácidos biliares induzem a expressão da proteína de ligação de ácido biliar intestinal (IBABP), que liga ácidos biliares com alta afinidade e pode estar envolvida em seu tráfego e absorção celular. Demonstra-se que os ácidos biliares mediam seus efeitos na expressão de IBABP através da ativação de FXR, que se liga a um elemento de resposta do tipo IR-1 que é conservado nos promotores de gene IBABP de camundongo, rato e humano. Assim, FXR está envolvido tanto na estimulação (IBABP) quanto na repressão (CYP7a) dos genes alvos envolvidos na homeostase de colesterol e ácido biliar. Consequentemente, há uma necessidade de moduladores de FXR adequados para o desenvolvimento de fármaco. A presente invenção aborda esta necessidade.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0004] A invenção fornece compostos e métodos para preparar esses compostos. Especificamente, a invenção fornece um composto de fórmula I:

[0005] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em que R1, R2, R3, R4, R5 e R6 são conforme descritos no presente documento. Os compostos da invenção são úteis para tratar e prevenir doenças e afecções.

[0006] A invenção também fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto da invenção ou um conjugado de ami- noácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e car- reador ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0007] A invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção de uma doença e afecção que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a doença ou afecção é mediada por FXR.

[0008] A invenção também fornece a fabricação de um medica mento para tratar ou prevenir uma doença ou afecção (por exemplo, uma doença ou afecção mediada por FXR), em que o medicamento compreende um composto da invenção ou um conjugado de aminoá- cido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0009] A invenção também fornece uma composição para o uso em um método para tratar ou prevenir uma doença ou afecção (por exemplo, uma doença ou afecção mediada por FXR), em que a composição compreende um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00010] A não ser que definido de outro modo, todos os termos científicos e técnicos usados no presente documento têm o mesmo significado conforme comumente entendido por um versado na técnica ao qual esta invenção pertence. No relatório descritivo, as formas singulares também incluem o plural, a não ser que o contexto claramente determine de outro modo. Embora os métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles aqui descritos possam ser usados na prática ou nos testes da presente invenção, os métodos e materiais adequados são descritos abaixo. Todas as publicações, pedidos de patente, patentes e outras referências mencionados no presente documento são incorporados a título de referência. As referências citadas no presente documento não são admitidas como sendo técnica anterior à invenção reivindicada. No caso de algum conflito, prevalecerá o presente relatório descritivo, incluindo as definições. Além disso, os materiais, métodos, e exemplos são apenas ilustrativos e não se destinam a ser limi- tantes.

[00011] Outras características e vantagens da invenção serão aparentes a partir da descrição detalhada e reivindicações a seguir.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[00012] A Figura 1 é um gráfico que mostra a atividade de um composto da invenção e um composto de comparação em um ensaio de transativação em células HEK293T.

[00013] A Figura 2 é uma séria de gráficos que mostram a falta de atividade de TGR5 de um composto da invenção em células de ente- roendocrina humanas que expressam TGR5 a um nível fisiológico (A) e em células de ovário de hamster chinês (CHO) que superexpressam TGR5 (B).

[00014] A Figura 3 é uma série de gráficos que mostram a atividade de um composto da invenção e outros compostos de comparação na regulação da expressão de OSTα (A), OSTβ (B), BSEP (C), MRP2 (D), CYP7A1 (E), SHP (F), FGF-19 (G) e UGT2B4 (H).

[00015] A Figura 4 é uma série de gráficos que mostram a atividade de um composto da invenção e outros compostos de comparação na regulação de PLTP envolvida no metabolismo de lipídio (A), SREBP- 1C (B), APOCII (C) e PPARy (D).

[00016] A Figura 5 é um gráfico que mostra a regulação de um composto da invenção e outros compostos de comparação no gene de PEPCK.

[00017] A Figura 6 é um gráfico que mostra a medição de ATP em células HepG2, tratadas com as concentrações indicadas de um composto da invenção por 4 h.

[00018] A Figura 7 é uma série de gráficos que mostram o efeito colerético do composto 100 para administração id e iv (A), a secreção do composto 100 ao longo do tempo para administração id e iv (B) e a concentração plasmática do composto 100 ao longo do tempo (C).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO COMPOSTOS DA INVENÇÃO

[00019] A presente invenção refere-se a um composto de fórmula I:

[00020] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em que:

[00021] R1 é hidroxila;

[00022] R2 é hidrogênio, hidroxila, alquila ou halogênio, em que a dita alquila é não substituída ou substituída por um ou mais Ra;

[00023] R3 é hidrogênio, hidroxila, alquila ou halogênio, em que a dita alquila é não substituída ou substituída por um ou mais Rb;

[00024] R4 é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila ou halogênio, em que a dita alquila é não substituída ou substituída por um ou mais Rc;

[00025] Ra, Rb e Rc são, cada um, independentemente halogênio ou hidroxila;

[00026] R5 é hidroxila, OSO3H, OSO3-, OCOCH3, OPO3H, OPO32- ou hidrogênio; e

[00027] R6 é hidroxila, OSO3H, OSO3-, OCOCH3, OPO3H, OPO32- ou hidrogênio;

[00028] ou considerados em conjunto R5 e R6 com o átomo de carbono ao qual estão ligados, formam uma carbonila.

[00029] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula II:

[00030] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo.

[00031] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula III:

[00032] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo.

[00033] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula IV:

[00034] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo.

[00035] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto é o composto (por exemplo, o composto nativo ou o composto na forma de não sal, não solvatada e não conjugada).

[00036] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto é o sal farmaceuti- camente aceitável.

[00037] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto é o conjugado de aminoácido.

[00038] Em um aspecto, o conjugado de aminoácido é um conjugado de glicina. Em um aspecto, o conjugado de aminoácido é um conjugado de taurina. Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, em que um dentre R2 ou R3 é hidroxila ou ha- logênio e o R2 ou R3 restante é hidrogênio ou alquila não substituída. Em um aspecto, um dentre R2 ou R3 é hidroxila e o R2 ou R3 restante é hidrogênio.

[00039] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, em que um dentre R5 ou R6 é hidroxila e o R5 ou R6 restante é hidrogênio.

[00040] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R2 é hidroxila ou halogênio. Em um aspecto, R2 é hidroxila. Em outro aspecto, R2 é halogênio.

[00041] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R3 é hidrogênio ou alquila não substituída. Em um aspecto, R3 é hidrogênio. Em outro aspecto, R3 é metila.

[00042] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R2 é hidroxila e R3 é hidrogênio.

[00043] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R5 é hidroxila.

[00044] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R6 é hidrogênio.

[00045] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R2 e R5 são, cada um, hidroxila e R3 e R6 são, cada um, hidrogênio.

[00046] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R4 é alquila ou hidrogênio. Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que R4 é alquila não substituída. Em um aspecto, R4 é metila, etila, propila ou butila. Em um aspecto, R4 é metila ou etila. Em um aspecto, R4 é metila. Em um aspecto, R4 é etila.

[00047] Em um aspecto, a presente invenção refere-se ao composto

[00048] ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo.

[00049] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto é um agonista FXR. Em um aspecto, o composto da invenção é um agonista FXR altamente potente. Por exemplo, o composto da invenção ativa FXR a uma concentração abaixo de 1 μM, abaixo de 0,8 μM, abaixo de 0,6 μM, abaixo de 0,4 μM ou abaixo de 0,2 μM (por exemplo, conforme medido por um ensaio AlphaScreen), em comparação a 15 μM para CDCA. Por exemplo, o composto da invenção ativa FXR a uma concentração abaixo de 0,2 μM (por exemplo, conforme medido por um ensaio AlphaScreen). Por exemplo, o composto da invenção ativa FXR com uma EC50 abaixo de 1 μM, abaixo de 0,8 μM, abaixo de 0,6 μM, abai- xo de 0,4 μM ou abaixo de 0,2 μM (por exemplo, conforme medido por um ensaio AlphaScreen), em comparação a 8,9 μM para CDCA. Por exemplo, o composto da invenção ativa FXR com uma EC50 abaixo de 0,2 μM (por exemplo, conforme medido por um ensaio AlphaScreen).

[00050] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto não é ativo contra receptores nucleares. Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto não ativa TGR5 (por exemplo, conforme medido por um ensaio HTR-FRET TGR5, em que o TGR5 é ou expresso a um nível fisiológico ou supe- rexpresso).

[00051] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto induz apoptose.

[00052] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto não mostra nenhum efeito citotóxico em células de fígado HepG2 humanas (por exemplo, conforme medido por um ensaio LDH ou um ensaio ATP intracelular).

[00053] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto não inibe uma ou mais formas iso de CYP450 selecionadas dentre CYP1A2, CYP3A4 (substrato verde), CYP3A4 (substrato azul), CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 e CYP2E1. Por exemplo, os compostos da invenção têm uma IC50 maior do que 10 μM conforme medido pelo ensaio de inibição de CPY450.

[00054] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula I, II, III ou IV, em que o composto não inibe o canal de potássio ERG humano.

[00055] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um método para sintetizar um composto da invenção ou um conjugado de ami- noácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00056] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um kit que contém um ou mais compostos da invenção ou um conjugado de ami- noácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, o kit contém adicionalmente um ingrediente farmaceuti- camente aceitável.

[00057] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica que compreende um composto da invenção e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00058] Um problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é a identificação de compostos inovadores que são agonistas do receptor farnesoide X (FXR) de hormônio nuclear, que representa um alvo atraente para o tratamento de doenças hepáticas crônicas e metabólicas. É bem conhecido que ácidos biliares naturais modulam não apenas diversos receptores de hormônio nuclear, mas são também agonistas para o receptor acoplado à proteína G (GPCR) TGR5. A seletividade pode ser um problema para os compostos de fármaco direcionados à modulação de um receptor de hormônio nuclear. É, portanto, um objetivo da presente invenção fornecer um composto que seja um agonista FXR específico, por exemplo, um composto que não mostra nenhuma atividade contra outros receptores nucleares ou um com-posto que não ativa o GPCR de ácido biliar TGR5. Outros problemas no desenvolvimento de um composto de fármaco incluem um perfil farmacocinético, problemas de segurança tais como toxicidade (por exemplo, fígado) e interações de fármaco-fármaco indesejáveis. Consequentemente, os objetivos adicionais da presente invenção são fornecer compostos que não sofrem dos problemas técnicos mencionados anteriormente, isto é, um composto que tem um perfil farmacoci- nético adequado, um composto que não exerce um efeito citotóxico em células, um composto que não inibe as enzimas do citocromo P450 e/ou um composto que não inibe hERG.

[00059] A patente e a literatura científica referidas no presente documento estabelecem conhecimento que está disponível àqueles versados na técnica. As patentes expedidas, pedidos e referências que são citados no presente documento são incorporados por meio deste a título de referência na mesma extensão como se cada um fosse específica e individualmente indicado para ser incorporado a título de referência. No caso de inconsistências, a presente revelação prevalecerá.

[00060] Para propósitos da presente invenção, as definições a seguir serão usadas (a não ser que expressamente determinado de outra maneira).

[00061] Os termos químicos gerais usados por todo o documento têm seus significados usuais. Por exemplo, o termo alquila refere-se a um grupo hidrocarboneto saturado ramificado ou não ramificado. O termo "n-alquila" refere-se a um grupo alquila não ramificado. O termo "alquila Cx-Cy" refere-se a um grupo alquila que tem entre x e y átomos de carbono, inclusive, no grupo hidrocarboneto ramificado ou não ramificado. A título de ilustração, mas sem limitação, o termo "alquila C1-C8" refere-se a uma porção química de hidrocarboneto de cadeia normal ou ramificada que tem 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono. "C1-C6" refere-se a uma porção química de hidrocarboneto de cadeia normal ou ramificada que tem 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. "Alquila C1-C4" refere-se a uma porção química de hidrocarboneto de cadeia normal ou ramificada que tem 1, 2, 3, ou 4 átomos de carbono, incluindo metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila e terc-butila. O termo "n-alquila C1-C4" refere-se a porções de hidrocarboneto de cadeia normal que têm de 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono incluindo metila, etila, n-propila e n-butila. O termo "cicloalqui- la C3-C6" refere-se à ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclohexila. O termo "cicloalquila C3-C7" também inclui cicloheptila. O termo "ci- cloalquila C3-C8" também inclui ciclooctila. Cicloalquilalquila refere-se a porções de cicloalquila ligadas através de uma cadeia de ligante de alquila como, por exemplo, mas sem limitação, ciclopropilmetila, ciclo- propiletila, ciclopropilpropila, ciclopropilbutila, ciclobutilmetila, ciclobuti- letila, ciclobutilpropila, ciclopentilmetila, ciclopentiletila, ciclopentilpropi- la, cicloexilmetila, cicloexiletila e cicloexilpropila. Cada grupo alquila, cicloalquila e cicloalquilalquila pode ser opcionalmente substituído conforme especificado no presente documento.

[00062] O termo "cicloalquenila C4-C8" refere-se a anéis de ciclobu- tenila, ciclopentila, cicloexenila, cicloeptenila e ciclooctenila que têm um ou mais sítios de insaturação, por exemplo, uma ou mais ligações duplas.

[00063] O termo "halogênio" refere-se a flúor, cloro, bromo ou iodo.

[00064] O termo "hidroxila" significa OH.

[00065] Será entendido que "substituição" ou "substituído por" inclui a condição implícita de que tal substituição está em conformidade com a valência permitida do átomo substituído e substituinte e que a substituição resulta em um composto estável, por exemplo, que não passa espontaneamente por transformação tal como por redisposição, cicli- zação, eliminação, etc. Conforme usado no presente documento, o termo "substituído" é contemplado para incluir todos os substituintes permissíveis dos compostos orgânicos a não ser que especificado de outra maneira. Em um aspecto amplo, os substituintes permissíveis incluem substituintes acíclicos e cíclicos, ramificados e não ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, aromáticos e não aromáticos de compostos orgânicos. Os substituintes permissíveis podem ser um ou mais e iguais ou diferentes para compostos orgânicos apropriados. Para os propósitos desta invenção, os heteroátomos tais como nitrogênio podem ter substituintes de hidrogênio e/ou quaisquer substituin- tes permissíveis dos compostos orgânicos descritos no presente do- cumento que satisfazem as valências dos heteroátomos. Essa invenção não deve ser limitada de qualquer maneira pelos substituintes permissíveis dos compostos orgânicos.

[00066] O termo "farmacêutico" ou "farmaceuticamente aceitável" quando usado no presente documento como um adjetivo significa substancialmente não tóxico e substancialmente não deletério ao receptor.

[00067] Por "formulação farmacêutica" entende-se adicionalmente que o carreador, solvente, excipiente e sal devem ser compatíveis com o ingrediente ativo da formulação (por exemplo, um composto da invenção). É entendido por aqueles versados na técnica que os termos "formulação farmacêutica" e "composição farmacêutica" são geralmente intercambiáveis, e os mesmos são assim usados para os propósitos deste pedido.

[00068] Os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados de acordo com a invenção serão prontamente determinados por um versado na técnica e incluirão, por exemplo, sais básicos tais como sais alcalinos ou alcalino-terrosos feitos de alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio e zinco ou sais orgânicos feitos de N,N’- dibenziletilenodiamina, clorprocaína, colina, dietanolamina, etilenodia- mina, meglumina (N-metilglucamina) e procaína. Os sais com aminas farmaceuticamente aceitáveis tais como lisina, arginina, trometamina, trietilamina e similares podem também ser usados. Tais sais dos compostos da invenção podem ser preparados com o uso de técnicas con-vencionais a partir do composto da invenção reagindo-se, por exemplo, a base apropriada com o composto da invenção.

[00069] Quando usados em medicamentos, os sais de um composto da invenção devem ser farmaceuticamente aceitáveis, mas os sais farmaceuticamente inaceitáveis podem ser convenientemente usados para preparar a base livre correspondente ou sais farmaceuticamente aceitáveis da mesma.

[00070] Conforme usado no presente documento, o termo "conjugado de aminoácido" refere-se um conjugado de um composto da invenção com qualquer aminoácido adequado. Em um aspecto, qualquer conjugado de aminoácido adequado de um composto da invenção terá a vantagem adicionada da integridade intensificada em fluidos intestinais ou biliares. A presente invenção abrange os conjugados de glicina e taurina de qualquer um dos compostos da invenção. Por exemplo, os conjugados de glicina e taurina de um composto de fórmula I têm a fórmula a seguir:

[00071] Em um aspecto, os conjugados de glicina e taurina de um composto da invenção podem ser um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. Os conjugados de aminoácido dos compostos da invenção podem ser preparados de acordo com os métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, o ácido livre pode também ser acoplada ao ami- noácido de glicina ou taurina com o uso de condições de acoplamento de peptídeo padrão.

[00072] Em um aspecto, o sal de sódio do conjugado de taurina do composto 100 pode ser preparado conforme segue.

[00073] O composto 100 é tratado com uma base (por exemplo, Et3N) e taurina em um solvente prótico polar (por exemplo, EtOH). A mistura resultante pode ser tratada com um reagente de acoplamento (por exemplo, DMT-MM (cloreto de 4-(4,6-Dimetóxi-1,3,5-triazin-2-il)-4- metilmorfolínio)). A mistura de reação pode ser concentrada e dissolvida em uma base (por exemplo, 3% em p/v de solução aquosa de Na- OH). A mistura de reação resultante pode ser extraída com um solvente orgânico (por exemplo, AcOEt). A fase aquosa pode ser concentrada e filtrada em uma almofada de sílica, eluindo primeiro com, por exemplo, H2O (até um pH neutro) e, então, com, por exemplo, H2O/MeOH 80:20 em v/v para gerar conjugado de taurina do composto 100. Os aminoácidos adequados incluem, porém, sem limitação, glicina e taurina.

[00074] Alguns dos compostos da presente invenção podem existir em formas não solvatadas assim como solvatadas tais como, por exemplo, hidratos.

[00075] A presente invenção fornece métodos para a síntese dos compostos da invenção descritos no presente documento. A presente invenção também fornece métodos detalhados para a síntese de vários compostos revelados da invenção de acordo com os esquemas a seguir conforme mostrado nos exemplos.

[00076] Os processos sintéticos da invenção podem tolerar uma ampla variedade de grupos funcionais, portanto, os vários materiais de partida substituídos podem ser usados. Os processos geralmente fornecem o composto final desejado no ou próximo ao final do processo geral, embora possa ser desejável, em determinadas ocorrências, converter adicionalmente o composto em um pró-fármaco, éster ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00077] Os compostos da invenção podem ser preparados em uma variedade de modos com o uso de materiais de partida comercialmen- te disponíveis, compostos conhecidos na literatura ou a partir de in-termediários prontamente preparados, empregando-se métodos e pro-cedimentos sintéticos padrão ou conhecidos por aqueles versados na técnica ou que serão aparentes ao versado na técnica em luz dos ensinamentos no presente documento. Os métodos e procedimentos sintéticos padrão para a preparação de moléculas orgânicas e manipulações e transformações de grupos funcionais podem ser obtidas a partir da literatura científica relevante ou a partir de livros-texto padrão no campo. Embora não limitado a qualquer uma ou diversas fontes, os textos clássicos tais como Smith, M. B., March, J., March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5a edição, John Wiley & Sons: Nova York, 2001; e Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edição, John Wiley & Sons: Nova York, 1999 incorporados a título de referência no presente documento são úteis e livros-texto de referência reconhecidos conhecidos por aqueles versados na técnica. As descrições a seguir dos métodos sintéticos são projetadas para ilustrar, mas não limitar os procedimentos gerais para a preparação dos compostos da presente invenção.

[00078] Todas as abreviações usadas neste pedido são encontradas em "Protective Groups in Organic Synthesis" por John Wiley & Sons, Inc ou MERCK INDEX por MERCK & Co., Inc ou outros livros de química ou catálogos de produtos químicos por um fornecedor de produtos químicos tal como Aldrich ou de acordo com o uso conhecido na técnica.

[00079] Reagentes e condições: a) 1) MeOH, p-TSA, ultrassom, 3 horas, quantitativo; 2) Ac2O, NaHCO3, THF, refluxo 12 horas, 85%; b) PCC, CH2Cl2, 6 h, 62%; c) Ac2O, Bi(OTf)3, CH2Cl2, 1 hora, 91%; d) Br2, Benzeno, 30 °C de um dia para o outro, 74%; e) NaBH4, NaOAc, Pyr, t.a. 2 dias, 80%; f) HI 57%, AcOH, t.a. 30 min; g) CrO3, AcOH, t.a. 45 min; h) poeira de Zn, NaOAc, refluxo 20 min; i) NaOH 2M, MeOH, t.a. de um dia para o outro, 65% do composto 5; 1) NaBH4, THF/H2O 4: 1, 70%; m) Na(s), sec-BuOH, 50 °C, 70%.

[00080] A síntese baseia-se no uso do ácido 6a-etil-cólico (6-ECA, 1) como material de partida que foi preparado com o uso dos métodos conhecidos na técnica. 6-ECA (1) foi tratado com p-TSA em MeOH sob irradiação por ultrassom para gerar o éster metílico correspondente, que foi seletivamente protegido na posição C3 por refluxo com Ac2O na presença de NaHCO3 em THF para render o composto 2. Tratar o composto 2 com PCC em CH2Cl2 à temperatura ambiente seguido pelo tratamento com Ac2O, Bi(OTf)3 em CH2Cl2 à temperatura ambiente rendeu o intermediário 3 ,7a-diacetóxi-12-oxo-5P-colan- 24-oato de metila (composto 3; cerca de 48% do composto 2).

[00081] O tratamento do composto 3 com Br2 em benzeno, por exemplo, por 12 horas rendeu o composto 4. A reação do composto 4 com NaBH4 e NaOAc em piridina recentemente destilada gerou o epóxido 11β-12β correspondente (composto 5), em cerca de 59% de rendimento após a purificação com gel de sílica. A reação do composto 5 com HI em AcOH à temperatura ambiente rendeu o intermediário de haloidrina que foi, então, oxidado na posição C11 com CrO3 em AcOH para gerar o composto 6. A reação do composto 6 com pó de Zn em AcOH fervente e hidrólise alcalina (NaOH/MeOH) rendeu o ácido 3a,7a-hidróxi-12-ceto-513-colan-24-oico (composto 7; cerca de 65% de rendimento do composto 5).

[00082] O composto 7 foi reduzido de modo estereoseletivo na carbonila C11 com o uso de NaBH4 em uma mistura de THF/H2O= (4: 1, em v/v) para gerar ácido 3 ,7α, 11β-triidr0xi-6a-etil-5β-colan-24-oico (composto 100; cerca de 27% do composto 3), após a purificação cromatográfica para render o composto 100. Alternativamente, o composto 7 foi reduzido com sódio em sec-BuOH a 50 °C para gerar o composto 101 (cerca de 70% de rendimento), após a purificação.

[00083] "Solvato" significa uma forma de adição de solvente que contém quantidades estequiométricas ou não estequiométricas de solvente. Alguns compostos têm uma tendência a capturar uma razão molar fixa de moléculas de solvente no estado sólido cristalino formando, assim, um solvato. Se o solvente for água, o solvato formado é um hidrato; quando o solvente é álcool, o solvato formado é um alcoo- lato. Os hidratos são formados pela combinação de uma ou mais mo- léculas de água com uma das substâncias nas quais a água retém seu estado molecular como H2O, sendo que tal combinação tem a capacidade de formar um ou mais hidratos.

[00084] O termo "solvente adequado" refere-se a qualquer solvente ou mistura de solvente inerte à reação em andamento que solubiliza suficientemente os reagentes para render um meio dentro do qual efetua a reação desejada.

[00085] Os compostos descritos no presente documento podem ter centros assimétricos. Os compostos da presente invenção que contêm um átomo assimetricamente substituído podem ser isolados em formar opticamente ativas ou racêmicas. É bem conhecido na técnica como preparar as formas opticamente ativa, tal como pela resolução das formas racêmicas ou pela síntese de materiais de partida opticamente ativos. Muitos isômeros geométricos de olefinas, ligações duplas de C=N e similares podem também estar presentes nos compostos descritos no presente documento e todos tais isômeros estáveis são contemplados na presente invenção. Os isômeros geométricos cis e trans dos compostos da presente invenção são descritos e podem ser isolados como uma mistura de isômeros ou como formas isoméricas separadas. Todas as formas quirais, racêmicas e isoméricas geométricas de uma estrutura são pretendidas, a não ser que a forma estereoquí- mica ou isomérica seja especificamente indicada. Todos os processos usados para preparar os compostos da presente invenção e intermediários feitos nos mesmos são considerados parte da presente inven-ção. Todos os tautômeros dos compostos mostrados ou descritos são também considerados parte da presente invenção. Ademais, a invenção também inclui metabólitos dos compostos descritos no presente documento.

[00086] A invenção também engloba compostos isotopicamente identificados que são idênticos àqueles citados nas fórmulas da inven- ção, mas pelo fato de que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa mais comumente encontrado em natureza. Os exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, flúor, tais como 3H, 11C, 14C, 2H e 18F.

[00087] Os compostos da presente invenção e os sais farmaceuti- camente aceitáveis, solvatos ou conjugados de aminoácido dos mesmos que contêm os isótopos mencionados anteriormente e/ou outros isótopos de outros átomos são abrangidos pelo escopo da presente invenção. Os compostos isotopicamente identificados da presente invenção, por exemplo, aqueles nos quais os isótopos radioativos tais como 3H e 14C são incorporados, são úteis em ensaios de distribuição de tecido de substrato e/ou fármaco. Os isótopos titulados, isto é, 3H e carbon-14, isto é, 14C, são particularmente preferenciais por sua facilidade de preparação e detectabilidade. Os isótopos 11C e 18F são particularmente úteis em PET (tomografia por emissão de pósitrons). A PET é útil no imageamento cerebral. Adicionalmente, a substituição com isótopos mais pesados, como deutério, isto é, 2H pode render determinadas vantagens terapêuticas resultantes da maior estabilidade metabólica, por exemplo, meia-vida in vivo aumentada ou exigências de dosagem reduzidas e, portanto, pode ser preferencial em algumas circunstâncias. Os compostos isotopicamente identificados desta invenção podem ser geralmente preparados através de tecnologias conhecidas na técnica, tal como pela execução dos procedimentos revelados nos Esquemas e/ou nos Exemplos abaixo, substituindo-se um reagente isotopicamente identificado prontamente disponível por um reagente não isotopicamente identificado. Em uma modalidade, os compostos da invenção, sais, hidratos, solvatos ou conjugados de aminoácido dos mesmos são não isotopicamente identificados.

[00088] Quando qualquer variável (por exemplo, Rx) ocorre mais do que uma vez em qualquer constituinte ou fórmula para um composto, sua definição em cada ocorrência é independente de sua definição em cada outra ocorrência. Assim, por exemplo, se um grupo for mostrado como sendo substituído por uma ou mais porções químicas de Rx, então, Rx em cada ocorrência é selecionado independentemente da definição de Rx. Também, combinações de substituintes e/ou variáveis são permissíveis, mas apenas se tais combinações resultarem em compostos estáveis dentro de uma valência normal do átomo designado.

[00089] Conforme usado no presente documento, o termo "tratar", "que trata" ou "tratamento" significa diminuir os sintomas, marcadores e/ou quaisquer efeitos negativos de uma afecção em qualquer grau apreciável em um indivíduo que tem atualmente a afecção. Em algumas modalidades, o tratamento pode ser administrado a um indivíduo que exibe apenas sinais iniciais da afecção para o propósito de diminuir o risco de desenvolver a doença ou afecção.

[00090] Conforme usado no presente documento, o termo "prevenir", "prevenção" ou "que previne" refere-se a qualquer método para prevenir parcial ou completamente ou atrasar o início de um ou mais sintomas ou características de uma doença, distúrbio e/ou afecção. A prevenção pode ser administrada a um indivíduo que não exibe sinais de uma doença ou afecção.

[00091] Conforme usado no presente documento, "indivíduo" significa um humano ou animal (no caso de um animal, mais tipicamente um mamífero). Em um aspecto, um indivíduo é um humano. Tal indivíduo pode ser considerado como precisando do tratamento com um agonista FXR.

[00092] Conforme usado no presente documento, "insaturado" refere-se aos compostos ou estruturas que têm pelo menos um grau de insaturação (por exemplo, pelo menos uma ligação dupla ou tripla).

[00093] Conforme usado no presente documento, o termo "um composto da invenção" inclui um composto de qualquer uma das fórmulas I, II, III ou IV ou qualquer composto explicitamente revelado no presente documento.

[00094] Conforme usado no presente documento, o receptor de far- nesoide X ou FXR refere-se a todas as formas mamíferas de tal receptor incluindo, por exemplo, isoformas de emenda alternativas e isoformas de ocorrência natural (consulte, por exemplo, Huber et al., Gene 290:35 a 43 (2002)). As espécies de FXR representativas incluem, sem limitação, FXR de rato (n° de Acesso ao GenBank NM 021745), FXR de camundongo (n° de Acesso ao GenBank NM 009108) e FXR humano (n° de Acesso ao GenBank NM 005123).

[00095] Conforme usado no presente documento, o Composto A é

[00096] que é também conhecido como ácido obeticólico, INT-747, 6ECDCA, ácido 6-alfa-etil quenodesoxicólico ou ácido 6α-etil-3α,7α- diidr0xi-5β-colan-24-oico.

[00097] Conforme usado no presente documento, o Composto B é

[00098] que é também conhecido como INT-767 ou sal de 6α-etil- 3α,7α,23-triidr0xi-24-nor-5β-colan-23-sulfato sódico.

[00099] Conforme usado no presente documento, o Composto C é

[000100] que é também conhecido como INT-777 ou ácido 6α-etil- 23(S)-metil- 3α,7α,12α trihidr0xi-5β-colan-24-oico.

[000101] Conforme usado no presente documento, o Composto D é

[000102] que é também conhecido como ácido 6α-etil-23(R)-metil quenodesoxicólico e S-EMCDCA.

[000103] Conforme usado no presente documento, o Composto E é

[000104] Conforme usado no presente documento, o ácido cólico é

[000105] que é também conhecido como CA

[000106] Conforme usado no presente documento, o ácido quenode- soxicólico é

[000107] que é também conhecido como CDCA.

[000108] Conforme usado no presente documento, o ácido ursode- soxicólico é

[000109] que é também conhecido como UDCA.

[000110] Conforme usado no presente documento, o ácido tauro- quenodesoxicólico é

[000111] que é também conhecido como TCDCA.

[000112] Conforme usado no presente documento, o ácido taurour- sodesoxicólico é

[000113] que é também conhecido como TUDCA.

[000114] Conforme usado no presente documento, o ácido litocólico é

[000115] que é também conhecido como LCA.

MÉTODOS DA INVENÇÃO

[000116] Os compostos da invenção são úteis na terapia em indivíduos tais como mamíferos, incluindo humanos. Particularmente, os compostos da invenção são úteis em um método para tratar um prevenir uma doença ou afecção em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a doença ou afecção é mediada por FXR (por exemplo, FXR desempenha um papel na iniciação ou progresso da doença ou afecção). Em um aspecto, a doença ou afecção é mediada pela atividade de FXR diminuída. Em um aspecto, a doença ou afecção é selecionada dentre doença cardiovascular, doença hepática crônica, distúrbio de lipídio, doença gastrointestinal, doença renal, doença metabólica, câncer e doença neurológica.

[000117] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença cardiovascular em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença cardiovascular. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença cardiovascular. Em um aspecto, a doença cardiovascular é selecionada dentre aterosclerose, arteriosclerose, dislipidemia, hipercolesterolemia, hiperlipidemia, hiperlipoprotei- nemia e hipertrigliceridemia.

[000118] O termo "hiperlipidemia" refere-se à presença de um nível anormalmente elevado de lipídios no sangue. A hiperlipidemia pode aparecer em pelo menos três formas: (1) hipercolesterolemia, isto é, um nível elevado de colesterol; (2) hipertrigliceridemia, isto é, um nível elevado de triglicerídeo; e (3) hiperlipidemia combinada, isto é, uma combinação de hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia. O termo "dislipidemia" refere-se a níveis anormais de lipoproteínas no plasma sanguíneo incluindo ambos os níveis reduzidos e/ou elevados de lipo- proteínas (por exemplo, níveis elevados de LDL, VLDL e níveis reduzidos de HDL).

[000119] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método selecionado dentre reduzir os níveis de colesterol ou modular o metabolismo de colesterol, catabolismo, absorção de colesterol dietético e inverter o transporte de colesterol em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000120] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença que afeta os níveis de colesterol, trigli- cerídeo ou ácido biliar em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000121] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar reduzir os triglicerídeos em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000122] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir um estado de doença associado a um nível de colesterol elevado em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar um estado de doença associado a um nível de colesterol elevado em um indivíduo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir um estado de doença associado a um nível de colesterol elevado em um indivíduo. Em um aspecto, o estado de doença é selecionado dentre doença da artéria coronária, angina pectoris, doença da artéria carótida, derrames, arteriosclerose cerebral e xantoma.

[000123] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir um distúrbio de lipídio em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar um distúrbio de lipídio. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir um distúrbio de lipídio.

[000124] Os distúrbios de lipídio são o termo para as anormalidades de colesterol e triglicerídeos. As anormalidades de lipídios são associadas a um risco aumentado para doença vascular e especialmente ataques cardíacos e derrames. As anormalidades em distúrbios de lipídio são uma combinação de predisposição genética assim como a natureza da absorção dietética. Muitos distúrbios de lipídio são associados a ter sobrepeso. Os distúrbios de lipídio podem também ser associados a outras doenças incluindo diabetes, a síndrome metabólica (algumas vezes chamada de síndrome de resistência à insulina), hipo- tiroidismo ou o resultado de determinadas medicações (tais como aquelas usadas para regimes antirrejeição em pessoas que fizeram transplantes).

[000125] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir um ou mais sintomas de uma doença que afeta o metabolismo de lipídio (isto é, lipodistrofia) em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de amino- ácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar um ou mais sintomas de uma doença que afeta o metabolismo de lipídio. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir um ou mais sintomas de uma doença que afeta o metabolismo de lipídio.

[000126] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para diminuir o acúmulo de lipídio em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000127] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença hepática crônica em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença hepática crônica. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença hepática crônica. Em um aspecto, a doença hepática crônica é selecionada dentre cirrose biliar primária (PBC), xantomatose cerebrotendinosa (CTX), colangite esclerosante primária (PSC), colestase induzida por fármaco, colestase intra- hepática de gravidez, colestase associada à nutrição parenteral (PNAC), colestase associada à sepse ou crescimento excessivo de bactérias, hepatite autoimune, hepatite viral crônica, doença hepática alcoólica, doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), esteato- hepatite não alcoólica (NASH), doença do enxerto versus hospedeiro associada a transplante de fígado, regeneração hepática de transplante de doador vivo, fibrose hepática congênita, coledocolitiase, doença hepática granulomatosa, malignidade intra ou extra-hepática, síndrome de Sjogren, Sarcoidose, doença de Wilson, doença de Gaucher, he- mocromatose e deficiência de alfa 1-antitripsina.

[000128] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir um ou mais sintomas da colestase, incluindo complicações da colestase, em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar um ou mais sintomas da colestase. Em um aspecto, a invenção refere-se à prevenção de um ou mais sintomas da colestase.

[000129] A colestase é tipicamente causada por fatores dentro do fígado (intra-hepático) ou fora do fígado (extra-hepático) e leva à acumulação de sais biliares, bilirubina de pigmento biliar e lipídios na corrente sanguínea em vez de serem eliminados normalmente. A coles- tase intra-hepática é distinguida pelo bloqueio espalhado de pequenos dutos ou por distúrbios, tal como hepatite, que prejudicam a capacidade do corpo de eliminar a bile. A colestase intra-hepática pode também ser causada por doença hepática alcoólica, cirrose biliar primária, câncer que se espalhou (metastizado) a partir de outra parte do corpo, colangite esclerosante primária, cálculo biliar, cólica biliar e colecistite aguda. A mesma pode também ocorrer como uma complicação de cirurgia, lesão séria, fibrose cística, infecção ou alimentação intravenosa ou ser induzida por fármaco. A colestase pode também ocorrer como uma complicação da gravidez e se desenvolve frequentemente durante o segundo e terceiro trimestres.

[000130] A colestase extra-hepática é mais frequentemente causada por coledocolitiase (Pedras do Duto Biliar), estenose biliar benigna (estreitamento não canceroso do duto comum), colangiocarcinoma (carcinoma ductal) e carcinoma pancreático. A colestase extra-hepática pode ocorrer como um efeito colateral de quaisquer medicações.

[000131] Um composto da invenção pode ser usado para tratar ou prevenir um ou mais sintomas da colestase intra-hepática ou extra- hepática, incluindo, sem limitação, artesia biliar, colestase obstétrica, colestase neonatal, colestase induzida por drogas, colestase decorrente de infecção por hepatite C, doença hepática colestática crônica, tal como cirrose biliar primária (PBC) e colangite esclerosante primária (PSC).

[000132] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para intensificar a regeneração do fígado em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, o método é intensificar a regeneração do fígado para o transplante de fígado.

[000133] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir a fibrose em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar a fibrose. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir a fibrose.

[000134] Consequentemente, conforme usado no presente documento, o termo fibrose refere-se a todos os distúrbios fibróticos reco- nhecidos, incluindo fibrose devido às afecções ou doenças patológicas, fibrose devido a trauma físico ("fibrose traumática"), fibrose devido a danos por radiação e fibrose devido à exposição a compostos quimi- oterápicos. Conforme usado no presente documento, o termo "fibrose de órgão" inclui, porém, sem limitação, fibrose hepática, fibrose dos rins, fibrose dos pulmões e fibrose do intestino. "Fibrose traumática" inclui, porém, sem limitação, fibrose secundária à cirurgia (cicatriz cirúrgica), trauma físico acidental, queimaduras e cicatriz hipertrófica.

[000135] Conforme usado no presente documento, "fibrose hepática" inclui a fibrose hepática devido a qualquer causa, incluindo, porém, sem limitação, fibrose hepática induzida por vírus tal como esta devido ao vírus da hepatite B ou C; exposição ao álcool (doença hepática alcoólica), determinados compostos farmacêutico incluindo, porém, sem limitação, metotrexato, alguns agentes quimioterapêuticos e ingestão crônica de arsênios ou vitamina A em megadoses, estresse oxidativo, radioterapia contra câncer ou determinados produtos químicos industriais incluindo, porém, sem limitação, tetracloreto de carbono e dimeti- lnitrosamina; e doenças tais como cirrose biliar primária, colangite es- clerosante primária, fígado gorduroso, obesidade, esteato-hepatite não alcoólica, fibrose cística, hemocromatose, hepatite autoimune, e estea- to-hepatite. A terapia atual na fibrose hepática é primariamente direci-onada à remoção do agente causal, por exemplo, removendo-se ferro em excesso (por exemplo, no caso de hemocromatose), diminuir a carga viral (por exemplo, no caso de hepatite viral crônica) ou eliminar ou diminuir a exposição a toxinas (por exemplo, no caso da doença hepática alcoólica). Fármacos anti-inflamatórios tais como corticoste- roides e colquicina são também conhecidos para o uso no tratamento da inflamação que pode levar à fibrose hepática.

[000136] Conforme é conhecido na técnica, a fibrose hepática pode ser clinicamente classificada em cinco estágios de gravidade (S0, S1, S2, S3 e S4), usualmente com base no exame histológico de um espécime de biópsia. S0 indica nenhuma fibrose, enquanto que S4 indica cirrose. Embora vários critérios para o estadiamento da gravidade da fibrose hepática existam, geralmente, os estágios iniciais da fibrose são identificados por áreas localizadas distintas de cicatrização em um portal (zona) do fígado, enquanto que os últimos estágios da fibrose são identificados fibrose em ponte (cicatriz que atravessa as zonas do fígado).

[000137] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir a fibrose de órgão em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a fibrose é fibrose hepática.

[000138] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença gastrointestinal em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença gastrointestinal. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença gastrointestinal. Em um aspecto, a doença gastrointestinal é selecionada dentre doença inflamatória intestinal (IBD), síndrome do intestino irritável (IBS), crescimento excessivo de bactérias, má absorção, colite pós-radiação e colite microscópica. Em um aspecto, a doença inflamatória intestinal é selecionada dentre doença de Crohn e colite ulcerativa.

[000139] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença renal em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença renal. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença renal. Em um aspecto, a doença é selecionada dentre nefropatia diabética, glomeruloesclerose segmental focal (FSGS), nefroesclerose hipertensiva, glomerulonefrite crônica, glomerulopatia crônica de transplante, nefrite interticial crônica e doença renal policística.

[000140] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença metabólica em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de amino- ácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença renal. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença renal. Em um aspecto, a doença metabólica é selecionada dentre resistência à insulina, hiperglicemia, diabetes mellitus, di- abesidade e obesidade. Em um aspecto, a diabetes mellitus é diabetes tipo I. Em um aspecto, a diabetes mellitus é diabetes tipo II.

[000141] A diabetes mellitus, comumente chamada de diabetes, refere-se a uma doença ou afecção que é geralmente distinguida por defeitos metabólicos na produção e utilização da glicose que resultam na falha em manter níveis de açúcar no sangue apropriados no corpo.

[000142] No caso da diabetes tipo II, a doença é distinguida pela resistência à insulina, na qual a insulina perde sua capacidade de exercer seus efeitos biológicos através de uma ampla faixa de concentrações. Essa resistência à responsividade de insulina resulta na ativação de insulina insuficiente da absorção de glicose, oxidação e armazenamento em músculo e a repressão de insulina inadequada da lipólise em tecido adiposo e da produção de glicose e secreção no fígado. A afecção resultante é glicose no sangue elevada, que é chamada "hi- perglicemia". A hiperglicemia não controlada é associada à mortalidade aumentada e prematura devido a um risco aumentado de doenças microvasculares e macrovasculares, incluindo retinopatia (deficiência ou perda da visão devido a danos de vasos sanguíneos nos olhos); neuropatia (danos dos nervos e problemas de pé devido a danos de vasos sanguíneos no sistema nervoso); e nefropatia (doença renal devido a danos de vasos sanguíneos nos rins), hipertensão, doença cerebrovascular e doença cardíaca coronariana. Portanto, o controle da homeostase de glicose é uma abordagem criticamente importante para o tratamento de diabetes.

[000143] A resistência à insulina foi hipotetizada para unificar o agrupamento de hipertensão, intolerância à glicose, hiperinsulinemia, níveis aumentados de triglicerídeos e colesterol HDL diminuído e obesidade central e geral. A associação da resistência à insulina à intolerância à glicose, um aumento no triglicerídeo plasmático e uma diminuição nas concentrações de colesterol de lipoproteína de alta densidade, hipertensão, hiperuricemia, partículas de lipoproteína de alta densidade menores mais densas e níveis de circulação maiores do inibidor-1 de ativador de plasminogênio foi referida como "Síndrome X". Consequentemente, os métodos para tratar ou prevenir quaisquer distúrbios relacionados à resistência à insulina incluindo o agrupamento de estados de doença, afecções ou distúrbios que constituem a "Síndrome X" são fornecidos. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir a síndrome metabólica em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar a sín- drome metabólica. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir a síndrome metabólica.

[000144] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir câncer em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar câncer. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir. Em um aspecto, o câncer é câncer colorretal.

[000145] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir cálculo biliar em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar cálculo biliar. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir cálculo biliar.

[000146] Um cálculo biliar é uma concreção cristalina formada dentro da vesícula biliar pelo acréscimo de componentes biliares. Esses cálculos são formados na vesícula biliar, mas podem passar distalmente para outras partes do trato biliar tal como o duto cístico, duto biliar comum, duto pancreático ou a ampola de Vater. Raramente, em casos de inflamação grave, cálculos biliares podem erodir através da vesícula biliar no intestino aderente causando potencialmente uma obstrução chamada de íleo do cálculo biliar. A presença de cálculos biliares na vesícula biliar pode levar à colecistite aguda, uma afecção inflamatória distinguida pela retenção da bile na vesícula biliar e frequentemente a infecção secundária por micro-organismos intestinais, predominantemente as espécies de Escherichia coli e Bacteroides. A presença de cálculos biliares em outras partes do trato biliar pode causar a obstrução dos dutos biliares, o que pode levar a sérias afecções tais como colangite ou pancreatite ascendente.

[000147] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir a doença de cálculo biliar de colesterol em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença de cálculo biliar de colesterol. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença de cálculo biliar de colesterol.

[000148] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar ou prevenir uma doença neurológica em um indivíduo que compreende administrar ao indivíduo que precisa do mesmo uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou um conjugado de amino- ácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para tratar uma doença neurológica. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para prevenir uma doença neurológica. Em um aspecto, a uma doença neurológica é derrame.

[000149] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método conforme descrito no presente documento e ainda em que o composto é administrado por uma via selecionada dentre oral, parenteral, intramuscular, intranasal, sublingual, intratraqueal, inalação, ocular, vaginal, retal e intracerebroventricular. Em um aspecto, a via é oral.

[000150] Em um aspecto, o composto utilizado em um ou mais dos métodos descritos no presente documento é um agonista FXR. Em um aspecto, o composto é um agonista FXR seletivo. Em um aspecto, o composto não ativa TGR5. Em um aspecto, o composto não ativa outros receptores nucleares envolvidos em trajetórias metabólicas (por exemplo, conforme medido por um ensaio AlphaScreen). Em um as- pecto, tais outros receptores nucleares envolvidos em trajetórias metabólicas são selecionados dentre LXRβ, PXR, CAR, PPARα, PPARδ, RARα, VDR, TR, PR, RXR, GR e ER. Em um aspecto, o composto induz a apoptose.

[000151] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método para regular o nível de expressão de um ou mais genes envolvidos na ho- meostase de ácido biliar.

[000152] Em um aspecto, a invenção refere-se a um método de regular ascendentemente o nível de expressão de um ou mais genes selecionados dentre CYP7α1 e SREBP-1C em uma célula administrando-se à célula um composto da invenção. Em um aspecto, a invenção refere-se a um método de regular descendentemente o nível de expressão de um ou mais genes selecionados dentre OSTα, OSTβ, BSEP, SHP, UGT2B4, MRP2, FGF-19, PPARY, PLTP, APOCII e PEPCK em uma célula administrando-se à célula um composto da invenção.

[000153] A invenção também se refere à fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir uma doença ou afecção (por exemplo, uma doença ou afecção mediada por FXR), em que o medicamento compreende um composto da invenção ou um conjugado de aminoá- cido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se à fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir qualquer uma das doenças ou afecções descritas no presente documento acima, em que o medicamento compreende um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000154] A invenção também se refere a uma composição para o uso em um método para tratar ou prevenir uma doença ou afecção (por exemplo, uma doença ou afecção mediada por FXR), em que a composição compreende um composto da invenção ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em um aspecto, a invenção refere-se a uma composição para o uso em um método para tratar ou prevenir qualquer uma das doenças ou afecções descritas no presente documento acima, em que a composição compreende um composto da invenção ou um conjugado de ami- noácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. FORMULAÇÕES

[000155] Os métodos da invenção compreendem a etapa de administrar uma quantidade eficaz de um composto da invenção. Conforme usado no presente documento, o termo uma "quantidade eficaz" refere-se a uma quantidade de um composto da invenção que é suficiente para alcançar o efeito determinado. Consequentemente, uma quantidade eficaz de um composto da invenção usada em um método para a prevenção ou tratamento de doenças ou afecções mediadas por FXR será uma quantidade suficiente para prevenir ou tratar a doença ou afecção mediada por FXR.

[000156] Similarmente, uma quantidade eficaz de um composto da invenção para o uso em um método para a prevenção ou tratamento de uma doença hepática colestática ou aumento de fluxo biliar será uma quantidade suficiente para aumentar o fluxo biliar para o intestino.

[000157] A quantidade do composto da invenção que é exigida para alcançar o efeito biológico desejado dependerá de vários fatores tal como o uso para o qual o mesmo é pretendido, os meios de administração e o receptor e será, em última análise, a critério do médico assistente ou veterinário. Geralmente, espera-se que uma dose diária típica para o tratamento de uma doença e afecção mediada por FXR, por exemplo, se situe na faixa de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 100 mg/kg. Essa dose pode ser administrada como uma única dose unitária ou como di-versas doses unitárias separadas ou como uma infusão contínua. Dosagens similares seriam aplicáveis para o tratamento de outras doen- ças, afecções e terapias incluindo a prevenção e o tratamento de doenças hepáticas colestáticas.

[000158] Assim, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende, como ingrediente ativo, um composto da invenção juntamente e/ou em mistura por adição com pelo menos um diluente ou carreador farmacêutico. Essas composições farmacêuticas podem ser usadas na prevenção ou tratamento das doenças ou afecções anteriores.

[000159] O carreador deve ser farmaceuticamente aceitável e deve ser compatível com, isto é, não ter um efeito prejudicial sobre os outros ingredientes na composição. O carreador pode ser um sólido ou líquido e é preferencialmente formulado como uma formulação de dose unitária, por exemplo, um tablete que pode conter de 0,05 a 95% em peso do ingrediente ativo. Se desejado, outros ingredientes fisiolo- gicamente ativos podem também ser incorporados nas composições farmacêuticas da invenção.

[000160] As formulações possíveis incluem aquelas adequadas para administração oral, sublingual, bucal, parenteral (por exemplo, subcutânea, intramuscular ou intravenosa), retal, tópica incluindo transdér- mica, intranasal e inalação. Os meios mais adequados de administração para um paciente particular dependerão da natureza e gravidade da doença ou afecção sendo tratada ou da natureza da terapia sendo usada e da natureza do composto ativo, mas, quando possível, a administração oral é preferencial para a prevenção e tratamento de doenças e afecções mediadas por FXR. As formulações adequadas para administração oral podem ser fornecidas como unidades distintas, tais como tabletes, cápsulas, hóstias, comprimidos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do composto ativo; como pós ou grânulos; como soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; ou como emulsões de óleo em água ou água em óleo.

[000161] As formulações adequadas para administração bucal ou sublingual incluem comprimidos que compreendem o composto ativo e, tipicamente, uma base saborizada, tal como açúcar e acácia ou tra- gacanto e pastilhas que compreendem o composto ativo em uma base inerte, tal como gelatina e glicerina ou acácia sacarose.

[000162] As formulações adequadas para a administração parenteral compreendem tipicamente soluções aquosas estéreis que contêm uma concentração predeterminada do composto ativo; a solução é, de preferência, isotônica com o sangue do receptor pretendido.

[000163] As formulações adicionais adequadas para a administração parenteral incluem formulações que contêm cossolventes e/ou agentes complexantes fisiologicamente adequados tais como tensoativos e ci- clodextrinas. As emulsões de óleo em água são também formulações adequadas para formulações parenterais. Embora tais soluções sejam administradas, de preferência, por via intravenosa, as mesmas podem também ser administradas por injeção subcutânea ou intramuscular.

[000164] As formulações adequadas para a administração retal são, de preferência, fornecidas como supositórios de dose unitária que compreendem o ingrediente ativo em um ou mais carreadores sólidos que formam a base de supositório, por exemplo, manteiga de cacau.

[000165] As formulações adequadas para aplicação tópica ou intranasal incluem pomadas, cremes, loções, pastas, géis, aspersões, aerossóis e óleos. Os carreadores adequados para tais formulações incluem vaselina, lanolia, polietilenoglicóis, álcoois e combinações dos mesmos.

[000166] As formulações da invenção podem ser preparadas por qualquer método adequado, tipicamente pela mistura por adição uniforme e íntima do composto ativo com líquidos ou carreadores sólidos finamente divididos ou ambos, nas proporções exigidas e, então, se necessário, pela conformação da mistura resultante no formato desejado.

[000167] Por exemplo, um tablete pode ser preparado comprimindose uma mistura íntima que compreende um pó ou grânulos do ingrediente ativo e um ou mais ingredientes opcionais, tais como um ligante, lubrificante, diluente inerte ou agente de dispersão ativo em superfície ou moldando uma mistura íntima do ingrediente ativo em pó e diluente líquido inerte.

[000168] As formulações adequadas para a administração por inalação incluem poeiras ou pulverizações que podem ser geradas por meio de vários tipos de insufladores, nebulizadores ou aerossóis pressurizados de dose medida.

[000169] Para a administração pulmonar por meio da boca, o tamanho de partícula do pó ou gotículas está tipicamente na faixa de 0,5 a 10 μm, de preferência 1 a 5 μm, para garantir a entrega para a árvore brônquica. Para a administração nasal, um tamanho de partícula na faixa de 10 a 500 μm é preferencial para garantir a retenção na cavidade nasal.

[000170] Os inaladores de dose medida são dispensadores de aerossol pressurizado, que contêm tipicamente uma formulação de solução ou suspensão do ingrediente ativo em um propelente liquefeito. Durante o uso, esses dispositivos descarregam a formulação através de uma válvula adaptada para entregar um volume medido, tipicamente de 10 a 150 μl, para produzir uma aspersão de partícula fina que contém o ingrediente ativo. Os propelentes adequados incluem determinados compostos de clorofluorocarbono, por exemplo, diclorodifluo- rometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano e misturas dos mesmos. A formulação pode conter adicionalmente um ou mais cos- solventes, por exemplo, tensoativos de etanol, tais como ácido oleico ou trioleato de sorbitano, antioxidantes e agentes flavorizantes adequados.

[000171] Os neubulizadores são dispositivos comercialmente dispo níveis que transformam soluções ou suspensões do ingrediente ativo em uma pulverização de aerossol terapêutica ou por meio da aceleração de um gás comprimido, tipitamente ar ou oxigênio, através de um orifício venturi estreito ou por meio da agitação ultrassônica. As formulações adequadas para o uso em nebulizadores consistem no ingrediente ativo em um carreador líquido e compreendem até 40% em p/p da formulação, de preferência, menos do que 20% em p/p. O carrea- dor é tipicamente água ou uma solução alcoólica aquosa diluída, de preferência, tornada isotônica com fluidos corporais pela adição de, por exemplo, cloreto de sódio. Os aditivos opcionais incluem conservantes se a formulação não for preparada estéril, por exemplo, hidróxi- benzoato de metila, antioxidantes, agentes flavorizantes, óleos voláteis, agentes de tamponamento e tensoativos.

[000172] As formulações adequadas para a administração por insuflação incluem pós finamente triturados que podem ser entregues por meio de um insuflador ou tomados na cavidade nasal da maneira de uma aspiração. No insuflador, o pó é contido em cápsulas ou cartuchos, tipicamente feitos de gelatina ou plástico, que são ou perfurados ou abertos in situ e o pó entregue por ar puxado através do dispositivo mediante inalação ou por meio de uma bomba operada manualmente. O pó empregado no insuflador consiste apenas no ingrediente ativo ou em uma mescla em pó que compreende o ingrediente ativo, um diluen- te em pó adequado, tal como lactose, e um tensoativo opcional. O ingrediente ativo compreende tipicamente de 0,1 a 100 em p/p da formulação.

[000173] Adicionalmente aos ingredientes especificamente mencionados acima, as formulações da presente invenção podem incluir outros agentes conhecidos por aqueles versados na técnica de farmácia, considerando o tipo de formulação em questão. Por exemplo, as formulações adequadas para administração oral podem incluir agentes flavorizantes e as formulações adequadas para a administração intranasal podem incluir perfumes.

[000174] Os Exemplos a seguir são ilustrativos e não devem ser interpretados de modo a limitar de qualquer modo o escopo da invenção. EXEMPLOS

[000175] Geralmente, o potencial de um composto da invenção como um candidato de fármaco pode ser testado com o uso de vários ensaios conhecidos na técnica. Por exemplo, para a validação in vitro para FXR: sua atividade e seletividade podem ser avaliadas com o uso de AlphaScreen (ensaio bioquímico); a expressão de gene pode ser avaliada com o uso de RT-PCR (gene alvo de FXR); e a citotoxicidade (por exemplo, HepG2) pode ser avaliada com o uso do teor de ATP, liberação de LDH e ativação de Caspase-3. Para a validação in vitro para TGR5: sua atividade e seletividade podem ser avaliadas com o uso de HTR-FRET (ensaio baseado em célula); a expressão de gene pode ser avaliada com o uso de RT-PCR (gene alvo de TGR5 (isto é, cFOS)); e a citotoxicidade (por exemplo, HepG2) pode ser avaliada com o uso do teor de ATP, liberação de LDH e ativação de Caspase-3. As propriedades de ADME (absorção, distribuição, metabolismo e excreção) /farmacocinéticos e a validação in vivo dos compostos da invenção podem também ser estudadas com o uso de métodos conhecidos na técnica. Exemplo 1: Síntese dos Compostos 100 e 101

[000176] Os compostos 100 e 101 foram sintetizados de acordo com o esquema abaixo. Esquema 1

[000177] Reagentes e condições: a) 1) MeOH, p-TSA, ultrassom, 3 horas, quantitativo; 2) Ac2O, NaHCO3, THF, refluxo 12 horas, 85%; b) PCC, CH2Cl2, 6 h, 62%; c) Ac2O, Bi(OTf)3, CH2Cl2, 1 hora, 91%; d) Br2, Benzeno, 30 °C de um dia para o outro, 74%; e) NaBH4, NaOAc, Pyr, t.a. 2 dias, 80%; f) HI 57%, AcOH, t.a. 30 min; g) CrO3,, AcOH, t.a. 45 min; h) poeira de Zn, NaOAc, refluxo 20 min; i) NaOH 2M, MeOH, t.a. de um dia para o outro, 65% do composto 5; 1) NaBH4, THF/H2O 4: 1, 70%; m) Na(s), sec-BuOH, 50 °C, 70%.

[000178] A síntese baseia-se no uso do ácido 6a-etil-cólico (6-ECA, 1) como material de partida que foi preparado com o uso dos métodos conhecidos na técnica. 6-ECA (1) foi tratado com p-TSA em MeOH sob irradiação por ultrassom para gerar o éster metílico correspondente, que foi seletivamente protegido na posição C3 por refluxo com Ac2O na presença de NaHCO3 em THF para render o composto 2. Tratar o composto 2 com PCC em CH2Cl2 à temperatura ambiente seguido pelo tratamento com Ac2O, Bi(OTf)3 em CH2Cl2 à temperatura ambiente rendeu o intermediário 3α ,7α -diacet0xi-12-oxo-5β-colan- 24-oato de metila (composto 3; cerca de 48% do composto 2).

[000179] O tratamento do composto 3 com Br2 em benzeno, por exemplo, por 12 horas rendeu o composto 4. A reação do composto 4 com NaBH4 e NaOAc em piridina recentemente destilada gerou o epóxido 11β-12β correspondente (composto 5), em cerca de 59% de rendimento após a purificação com gel de sílica. A reação do composto 5 com HI em AcOH à temperatura ambiente rendeu o intermediário de haloidrina que foi, então, oxidado na posição C11 com CrO3 em AcOH para gerar o composto 6. A reação do composto 6 com pó de Zn em AcOH fervente e hidrólise alcalina (NaOH/MeOH) rendeu o ácido 3α,7α-hidr0xi-12-ceto-513-colan-24-oico (composto 7; cerca de 65% de rendimento do composto 5).

[000180] O composto 7 foi de modo estereoseletivo reduzido na carbonila C11 com o uso de NaBH4 em uma mistura de THF/H2O= (4: 1, em v/v) para gerar ácido 3 ,7α, 11β-triidr0xi-6α-etil-5β-colan-24-oico (composto 100; cerca de 27% do composto 3), após a purificação cromatográfica para render o composto 100. Alternativamente, o composto 7 foi reduzido com sódio em sec-BuOH a 50 °C para gerar o composto 101 (cerca de 70% de rendimento), após a purificação. Exemplo 2: O composto 100 é um agonista FXR específico potente

[000181] No núcleo, os receptores nucleares ligados por ligante (NRs) modulam o início da transcrição interagindo diretamente com o maquinário transcricional basal ou contatando os fatores de ponte chamados coativadores (Onate SA, et al., Science 1995; 270: 1354 a 1357; Wang JC, et al., J Biol Chem 1998; 273:30 847 a 30 850; Zhu Y, et al., Gene Expr 1996; 6: 185 a 195). A interação dependente de li- gante de NRs com seus coativadores ocorre entre a função de ativa- ção 2 (AF-2), localizada no domínio de ligação por ligante de receptor (LBD) e as caixas de receptor nuclear (caixa de NR) localizadas nos coativadores (Nolte RT, et al., Nature 1998; 395: 137 a 143. Diversas linhas de evidência demostraram que a sequência de peptídeos LXXLL presente na caixa de NR representa um motivo de assinatura que facilita a interação de diferentes proteínas com a região AF-2 (Heery DM, et al., Nature 1997; 387:733 a 736; Torchia J, et al., Nature 1997; 387:677 a 684).

[000182] AlphaScreen foi usado com o objetivo de identificar novos moduladores aproveitando-se da interação bimolecular que prevalece entre FXR e o motivo LXXLL presente na caixa de NR do coativador de receptor de esteroide 1 (SRC-1).

[000183] FXR-LBD-GST humano foi incubado com concentrações crescentes dos ligantes indicados na presença do peptídeo de LXXLL SRC-1 biotinilado. O sinal de AlphaScreen aumenta quando o complexo receptor-coativador é formado. Os valores de EC50 foram 8,9 μM para ácido quenodesoxicólico (CDCA; que é um controle positivo), 0,16 μM para o Composto A, e 0,16 μM para o Composto 100. Esses resultados são a média ± S.D. de amostras triplicadas de um experimento representativo de três realizados. O ensaio AlphaScreen é um ensaio muito robusto e reproduzível, conforme mostrado pelo fator Z’ de 0,84 (Zhang JH, et al., J Biomol Screen 1999; 4:67 a 73). Assim, o composto 100 é um agonista FXR altamente potente.

[000184] Ademais, os dados na tabela abaixo mostram que o composto 100 é seletivo para FXR humano e não é ativo para TGR5 humano. Tabela 1

[000185] Adicionalmente, com o uso do ensaio AlphaScreen, foi demonstrado que o composto 100 ativa especificamente FXR e não ativa 13 outros receptores nucleares envolvidos em trajetórias metabólicas. Tabela 2

*: agonista inverso. Valores para o Composto B tomados a partir de Rizzo G., et al., Mol. Pharm., 2010; 78: 617 a 630.

[000186] A ativação de FXR pelo composto 100 foi também testada em ensaios de transativação com base em célula com o uso da linhagem celular HEK293T transfectada com a quimera Gal4-FXR-LBD e o sistema (UAS)5-Luc (Figura 1). A ativação de FXR pelo Composto 100 foi comparável a esta induzida pelo Composto A indicando que esses compostos são agonistas FXR potentes em ensaios baseados em célula. A Figura 1 é um gráfico que mostra a atividade do Composto 100 em comparação ao Composto A em um ensaio de transativação em células HEK293T. NT são células transfectadas por vetor de FXR sem a exposição ao Composto A ou Composto 100. Os valores são representados em μM.

[000187] Os ácidos biliares (BAs) modulam não apenas diversos receptores de hormônio nuclear, mas também são agonistas para o receptor acoplado à proteína G (GPCR) TGR5 (Makishima M, et al., Science 1999; 284: 1362 a 1365; Parks DJ, et al., Science 1999; 284: 1365 a 1368; Maruyama T, et al., Biochem Biophys Res Commun 2002; 298:714 a 719; Kawamata Y, et al., J Biol Chem 2003; 278:9435 a 9440). A sinalização por meio de FXR e TGR5 modula diversas trajetórias metabólicas, regulando não apenas a síntese de BA e a recircu- lação enteroepática, mas também a homeostase de energia, glicose, colesterol e triglicerídeo. Para avaliar a capacidade de um composto da invenção para ativar TGR5, o Composto 100 e outros compostos de comparação foram triados para um aumento de cAMP intracelular como uma leitura para a ativação de TGR5. As células NCI-H716 de enteroendocrina humanas que expressam constitutivamente TGR5 foram expostas a concentrações crescentes do Composto 100 e os níveis de cAMP intracelular foram medidos por TR- FRET. O ácido li- tocólico (LCA) foi usado como controle positivo.

[000188] Conforme mostrado na Figura 2A, o Composto 100 não induz a atividade de TGR5 em células que expressam o receptor fisiolo- gicamente na medida em que nenhuma alteração no nível de cAMP intracelular foi observada. Para avaliar adicionalmente se o Composto 100 poderia ligar TGR5, uma linhagem celular clonal que superexpres- sa TGR5 foi exposta a diferentes concentrações do Composto 100. Os resultados ilustrados na Figura 2B mostram que mesmo com a supe- rexpressão do receptor TGR5, o Composto 100 não tinha nenhum efeito relevante. A Figura 2A é um gráfico que mostra a atividade de TGR5 do Composto 100 (nenhuma atividade) e LCA em células de enteroendocrina humanas que expressam TGR5 no nível fisiológico. Os resultados são mostrados como a média ± S.D. de amostras triplicadas de um experimento representativo de três realizados. A Figura 2B é um gráfico que mostra a atividade de TGR5 do Composto 100 (nenhuma atividade) e LCA em células de ovário de hamster chinês (CHO) que superexpressam TGR5. Exemplo 3: Genes alvo de FXR modulados pelo Composto 100

[000189] Para avaliar a capacidade do Composto 100 de modular genes alvo de FXR, ensaios RT-PCR quantitativos foram realizados. As células HepG2 foram selecionadas como uma linhagem celular relevante para determinar se um composto da invenção pode regular a rede genética de FXR endógeno. A capacidade de um composto da invenção de induzir genes alvo de FXR foi avaliada isolando-se o RNA total das células tratadas de um dia para o outro com 1 μM dos compostos A, B e 100. O Composto A é estabelecido como um agonista seletivo FXR potente e o Composto B é estabelecido como um agonis- ta FXR/TGR5 potente duplo. O perfil de ativação de gene do Composto 100 em células HepG2 foi comparado aos perfis dos compostos A e B. (Pellicciari, R, et al., J Med Chem. 2002; 15 de agosto; 45: 3569 a 3572; Rizzo, G, et al., Mol. Pharm., 2010; 78: 617-630).

[000190] FXR regula a expressão de diversos genes alvo envolvidos na homeostase de BA. Em resumo, FXR desempenha um papel central em diversas trajetórias metabólicas incluindo, isto é, metabolismo de lipídios, metabolismo de ácidos biliares e metabolismo de carboidratos. Em relação ao perfilamento de expressão de gene, os genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo de lipídio incluem, por exemplo, APOCII, APOE, APOAI, SREBP-1C, VLDL-R, PLTP e LPL; os genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo de ácidos biliares incluem, por exemplo, OSTα/β, BSEP, MRP2, SHP, CYP7A1, FGF19, SULT2A1 e UGT2B4; e os genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo de carboidratos incluem, por exemplo, PGC1a, PEPCK e GLUT2.

[000191] Conforme mostrado nas Figuras 3A a 3H, a ativação de Composto 100 do FXR reprime indiretamente a expressão das enzimas biossintéticas de BA CYP7A1 aumentando-se os níveis do receptor nuclear SHP no fígado e intestino e aumentando o nível de FGF19 (Goodwin, B, et al., Mol. Cell 2000; 6: 517 a 526). O FXR ativado por Composto 100 também regula positivamente a expressão dos genes que codificam proteínas envolvidas no transporte de BA, incluindo BSEP e OSTα e OSTβ. Os BAs recentemente sintetizados são conjugados com taurina ou glicina e, então, ativamente secretados na vesícula biliar, FXR regula ambos esses processos críticos. Os BAs conju- gados monoaniônicos e dianiônicos são, então ativamente secretados na vesícula biliar por BSEP e pela proteína relacionada a múltiplos fármacos 2 (MRP2), respectivamente. Esses transportadores que pertencem à família de transportadores ABC e são ambos induzidos por FXR no nível transcricional. A regulação desses transportadores ABC é de importância crítica a fim de evitar a acumulação de BA no fígado e uma lesão hepática consequente (Schinkel AH, et al., Mammalian drug efflux transporters of the ATP binding cassette (ABC) family: an overview. Adv Drug Deliv Rev. 2012; 13 de setembro).

[000192] A Figura 3 é uma série de gráficos que mostram a atividade do Composto 100 e outros compostos de comparação na regulação da expressão de OSTα (A), OSTβ (B), BSEP (C), MRP2 (D), CYP7A1 (E), SHP (F), FGF-19 (G) e UGT2B4 (H). Note nas Figuras 3A a 3H, o eixo geométrico y exibe modulação na expressão relativa a células não tratadas. Os dados foram normalizados em relação a B2M. As barras de erro exibem o erro padrão das três réplicas.

[000193] A ativação de FXR contribui para o transporte de colesterol inverso, um processo que resulta na entrega de colesteril de tecidos periféricos para o fígado para o descarte biliar e eliminação fecal consequente (Lambert, G, et al., J Biol Chem 2003; 278, 2563 a 2570). Nesse cenário metabólico, FXR regula a expressão da proteína de transferência de fosfolipídios (PLTP), responsável pela transferência de fosfolipídios e colesterol de LDL para HDL, lipoproteínas hepáticas, tais como ApoE, ApoC-I, ApoC-IV e receptor sequestrante Bl(SRBl), que está envolvido na absorção hepática de HDL.

[000194] O FXR controla o metabolismo de triglicerídeos (TG) regulando-se a lipogênese de novo hepática e espaçamento de triglicerí- deos. Mediante a ativação pelo Composto 100, FXR regula descendentemente a expressão de SREBP-lc, um fator de transcrição que desempenha um papel crítico na estimulação da síntese de ácido gra- xo e lipogênese (Figuras 4A a 4D) (Landrier, JF, et al., J Clin Invest 2004; 113, 1408 a 1418). Adicionalmente à redução da lipogênese de novo, a ativação de FXR também modula o espaçamento de TG. Esse efeito de redução de TG adicional do FXR é explicado no nível molecular pela indução de genes chave, tais como Apo-C-Il LPL e receptor de VDL (Kast, HR, et al., Mol Endocrinol 2001; 15, 1720 a 1728).

[000195] A Figura 4 é uma série de gráficos que mostram a atividade do Composto 100 e outros compostos de comparação na regulação de PLTP envolvida no metabolismo de lipídio (A), SREBP-1C (B), APOCII (C) e PPARY (D). Note nas Figuras 4A a 4D, o eixo geométrico y exibe modulação na expressão relativa a células não tratadas. Os dados foram normalizados em relação a B2M. As barras de erro exibem o erro padrão das três réplicas.

[000196] O FXR pode também ter um papel no metabolismo de carboidratos. (Ma K, et al., J Clin Invest. 2006; 116: 1102 1109). A regulação de gene PEPCK foi estudada (Figura 5) com o uso do Composto 100. A Figura 5 é um gráfico que mostra a regulação do Composto 100 e outros compostos de comparação no gene de PEPCK. O eixo geométrico y exibe modulação na expressão relativa a células não tratadas. Os dados foram normalizados em relação a B2M. As barras de erro exibem o erro padrão das três réplicas.

[000197] Coletivamente, os estudos de expressão de genes mostraram que o Composto 100 modula os mesmos genes alvo de FXR que o Composto A ou B (consulte também a Tabela 3). Tabela 3

Exemplo 4: O composto 100 não exerce efeitos citotóxicos em células HepG2.

[000198] Para avaliar a citotoxicidade in vitro do Composto 100, dois métodos de ensaio diferentes foram empregados. Os ensaios avaliaram a disponibilidade celular medindo-se os níveis de ATP e citotoxici- dade medindo-se a liberação de LDH. O nucleotídeo de Trifosfato de Adenosina (ATP) representa a fonte de energia no nível molecular básico, na medida em que o mesmo é uma molécula multifuncional que é usada em cada célula como uma coenzima e é uma parte integral do DNA mitocondrial (Kangas L, et al., Medical Biology, 1984; 62, 338 a 343; Crouch SPM, et al., J. Immunol. Methods, 1993; 160, 81 a 88; Petty RD, et al., J. Biolumin. Chemilumin. 1995; 10, 29 a 34). O mesmo tem sido chamado de "unidade molecular de circulação" quando se trata da transferência de energia intracelular. Isso é para garantir o papel importante do ATP no metabolismo e uma queda no teor de ATP é a primeira etapa na revelação de danos celulares (Storer RD, et al., Mutation Research, 1996; 368, 59 a 101; Cree IA, Andreotti PE., Toxicology in Vitro, 1997; 11, 553 a 556).

[000199] A viabilidade celular foi determinada como medida do ATP intracelular em relação ao tempo de exposição e concentração dos compostos de teste (Sussman, NL.; Promega Cell Notes, edição 3, 2002).

[000200] A Figura 6 é um gráfico que mostra a medição de ATP em células HepG2, tratadas com as concentrações indicadas dos compostos por 4 horas. Demonstrou-se que todas as células na presença de diferentes concentrações do composto 100 eram viáveis como células tratadas apenas com o veículo, isto é, todas as células tratadas com o Composto 100 permanecem viáveis (100%). LCA, um ácido biliar cito- tóxico bem conhecido, foi usado como comparador e Tamoxifeno foi usado como controles positivos para os ensaios.

[000201] Um método adicional para determinar a viabilidade das células é detectar a integridade da membrana que define a compartimen- talização celular. A medição do vazamento de componentes para fora do citoplasma, em membranas celulares danificadas, indica a perda da integridade de membrana e a liberação de LDH é o método usado para determinar a toxicidade comum em células. As células HepG2 foram tratadas com o Composto 100, diluições em série foram realizadas, as diluições de LCA foram adicionadas às células plaqueadas como controle de ensaio juntamente com as células não tratadas e nenhuma célula. O ensaio foi realizado em triplicata para cada concentração de composto de teste.

[000202] Os resultados mostram que o Composto 100 não induz qualquer efeito de citotoxicidade em células HepG2. O Ácido Litocólico aumentou a liberação de LDH a 70 μM enquanto o Tamoxifeno de controle exerceu os efeitos de citotoxidade a aproximadamente 25 μM (consulte a Tabela 4). Tabela 4

Exemplo 5: O Composto 100 não inibe as enzimas P450 de cito- cromo.

[000203] Para avaliar o potencial do Composto 100 para interações de fármaco-fármaco, as seis principais isoformas CYP450 (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, CYP3A4) foram investigadas. (Obach, RS, et al., J Pharmcol Exp Ther, 2006; 316(1): páginas 336 a 348).

[000204] Para determinar a interação entre o Composto 100 e as enzimas P450 de citocromo, o Composto 100 foi analisado por sua capacidade de inibir (ou não) a produção de um sinal fluorescente, com o uso de proteínas CYP450 recombinantes (baculosomes; Invitrogen), substratos e inibidores (Bidstrup, TB, et al., Br J Clin Pharmacol, 2003; 56(3): páginas 305 a 314). Como um controle positivo, um inibidor seletivo para cada isoforma de CYP450 foi testado na mesma placa (Tabela 5). Tabela 5

IC50 > 10 μM significa que o composto não inibe CYP450. Os resultados obtidos demonstram que o Composto 100, como os Compostos A e B, não inibe as enzimas P450 de Citocromo testadas, mostrando que o Composto 100 não é susceptível de ser influenciado pelos efeitos de interação de fármaco-fármaco. (Rizzo, G, et al., Mol Pharm, 2010; 78: 617 a 630). Exemplo 6: O Composto 100 não inibe o canal de potássio ERG humano

[000205] Para determinar a função de canal de íon, o ensaio de Polarização de Fluorescência de hERG Predictor™ foi empregado na medida em que o mesmo fornece um método eficaz para uma determinação inicial da propensão dos compostos de teste de bloquear o canal hERG (Dorn, A, et al. J Biomol Screen, 2005; 10(4): 339 a 347). O ensaio baseia-se na suposição de que a atividade de canal de potássio hERG contribui para a potencial de membrana em repouso em células permanentemente transfectadas e, assim, um bloco dos canais hERG deve resultar em uma despolarização da membrana celular. O ensaio foi designado para identificar bloqueadores de canal hERG potenciais produzindo-se dados que se correlacionam precisamente aos estudos de eletrofisiologia patch-clamp. Os resultados do ensaio Predictor demonstram uma alta correlação àqueles obtidos a partir das técnicas de patch clamp (Tabela 6) (Dorn, A, et al. J Biomol Screen, 2005; 10(4): 339 a 347). Tabela 6

[000206] A Tabela 6 mostra a comparação dos valores IC50 gerados com o ensaio de Polarização de Fluorescência de hERG Predictor™ aos valores IC50 relatados a partir dos ensaios de deslocamento de radioligante e patch-clamp.

[000207] As preparações de membrana a partir de células de ovário de hamster chinês estavelmente transfectadas com canal de potássio hERG foram usadas para avaliar o efeito inibidor potencial do Composto 100 nesse canal com o uso do ensaio de polarização de fluorescência Predictor. A redução da polarização de membrana como um resultado da inibição do canal de potássio hERG é diretamente correlacionada a uma redução da polarização de fluorescência (FP). Os resultados mostram que, como os Compostos A e B, o Composto 100 não bloqueia ou inibe o canal de potássio hERG.

[000208] O ensaio foi realizado em triplicata com o uso de uma resposta à dose de 16 pontos do composto de teste e dos controles positivos E-4031 e Tamoxifeno. Um IC50 de 15 nM (ΔmP = 163) para E- 4031 e 1,4 μM (ΔmP = 183) para Tamoxifeno foram obtidos. A janela de ensaio maior do que 100 mP (milipolarização) é considerada boa. O valor Z’ foi 0,78 indicando um excelente ensaio. As curvas de regressão não linear foram obtidas pela análise GraphPad Prism (GraphPad Software Inc.) para calcular os valores IC50.

[000209] Em resumo, a sinalização através de FXR modula uma va- riedade de trajetórias metabólicas, assim, os moduladores de FXR seletivos são candidatos atraentes para o tratamento de uma faixa de doenças crônicas que afetam o fígado, rim, assim como doenças metabólicas. Os resultados nos exemplos descritos no presente documento caracterizam o Composto 100, como um agonista FXR potente e específico.

[000210] Notavelmente, embora tenha ativado potencialmente o FXR, o Composto 100 não mostrou nenhuma atividade contra outros receptores nucleares e não ativou o GPCR TGR5 de ácido biliar. Adicionalmente à alta seletividade de receptor nuclear, o Composto 100 possui um perfil farmacológico adequado para um candidato de fárma- co. O Composto 100 não mostra nenhum efeito citotóxico em células de fígado HepG2 humanos, indicando uma falta de toxicidade do fígado e não inibe qualquer uma das enzimas CYP450 testadas, indicando que o Composto 100 é desprovido de risco de interação de fármaco- fármaco significativo. Ademais, o Composto 100 não inibe o canal de potássio ERG humano

[000211] A seletividade e a potência combinadas do Composto 100 juntamente com suas propriedades do tipo fármaco favoráveis, particularmente, um excelente perfil de segurança, tornam o Composto 100 um candidato atraente para tratar e prevenir a doença. Exemplo 7: Propriedades físico-químicas do Composto 100

[000212] As propriedades físico-químicas do Composto 100 tais como solubilidade em água, concentração crítica de micelas, tensão superficial e LogPA foram determinadas com o uso dos métodos conhecidos na técnica. Essas propriedades do Composto 100 foram comparadas a análogos naturais e sintéticos (Tabela 7). Tabela 7

[000213] aWs: solubilidade em água refere-se ao BA como uma espécie protonada e, portanto, não avaliado para o Composto B, TCDCA e TUDCA que são altamente solúveis (hs);

[000214] bCMC: Concentração Crítica de Micela determinada em uma solução de água e NaCl a 0,15 M;

[000215] cSTcmc: Tensão Superficial a CMC em solução de água e NaCl a 0,15 M;

[000216] dLogPA-: coeficiente de separação de 1-octanol e água dos ácidos biliares estudados como espécies ionizadas; Exemplo 8: Farmacocinética e metabolismo em rato com fístula biliar após ADMINISTRAÇÃO id e iv: in vivo

[000217] Os modelos in vivo, ratos, receberam uma dose única do Composto 100 a 1 μmol/min/Kg.1 hora (consulte as Figuras 7A, 7B e 7C). A Figura 7A é um gráfico que mostra o efeito colerético do Composto 100 para administração id e iv. A Figura 7B é um gráfico que mostra a secreção do Composto 100 ao longo do tempo para administração id e iv. A Figura 7C é um gráfico que mostra a concentração plasmática do Composto 100 ao longo do tempo. EQUIVALENTES

[000218] Aqueles versados na técnica reconhecerão, ou serão capazes de determinar, usando não mais que a experimentação de rotina, muitos equivalentes para as modalidades e métodos específicos des- critos no presente documento. Tais equivalentes se destinam a serem abrangidos pelo escopo da presente invenção.

[000219] Todas as patentes, pedidos de patente e referências de literatura citados no presente documento são expressamente incorporados por meio deste a título de referência.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula I:

ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, em que: R1 é hidroxila; R2 é hidrogênio, hidroxila, C1-C6 alquila ou halogênio, em que a dita C1-C6 alquila é não substituída ou substituída com um ou mais Ra; R3 é hidrogênio, hidroxila, C1-C6 alquila ou halogênio, em que a dita C1-C6 alquila é não substituída ou substituída com um ou mais Rb; R4 é C1-C6 alquila, C2-C6 alquenila, C2-C6 alquinila ou halo- gênio, em que a dita C1-C6 alquila é não substituída ou substituída com um ou mais Rc; Ra, Rb e Rc são, cada um, independentemente, halogênio ou hidroxila; R5 é hidroxila, OSO3H, OSO3-, OCOCH3, OPO3H2, OPO32- ou hidrogênio; e R6 é hidroxila, OSO3H, OSO3-, OCOCH3, OPO3H2, OPO32- ou hidrogênio; ou, considerados em conjunto R5 e R6 com o átomo de carbono ao qual estão ligados, formam uma carbonila.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R2 é hidroxila e R3 é hidrogênio.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que R5 é hidroxila e R6 é hidrogênio.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que R2 e R5 são, cada um, hi- droxila, e R3 e R6 são, cada um, hidrogênio.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que R4 é C1-C6 alquila.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R4 é etila.

8. Composto, caracterizado pelo fato que apresenta a fórmula a seguir:

9. Composto, caracterizado pelo fato que apresenta a fórmula a seguir:

10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um conjugado de aminoácido, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuti- camente aceitável.

11. Uso de um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de ser para fabricar uma composição farmacêutica para tratar ou prevenir uma doença ou condição mediada por FXR em um indivíduo.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a dita doença ou condição mediada por FXR é selecionada dentre uma doença cardiovascular, doença hepática crônica, distúrbio lipídico, doença gastrointestinal, doença renal, doença metabólica, câncer e doença neurológica.

13. Uso de um composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a doença de fígado crônica é selecionada de cirrose biliar primária (PBC), xantomatose cerebrotendinosa (CTX), colangite esclerosante primária (PSC), colestase induzida por drogas, colestase intra-hepática da gravidez, colestase associada à nutrição parenteral (PNAC), supercrescimento bacteriano ou colestase associada à sepse, hepatite viral crônica , doença hepática alcoólica, doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), esteatohepatite não alcoólica (NASH), doença do hospedeiro enxerto associada a transplante de fígado, regeneração hepática de transplante de doador vivo, fibrose hepática congênita, coledocolitíase, doença hepática gra- nulomatosa, malignidade intra ou extra-hepática síndrome, sarcoidose, doença de Wilson, doença de Gaucher, hemocromatose e deficiência de alfa 1-antitripsina.

14. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença de fígado crônica é cirrose biliar primária (PBC).

15. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença de fígado crônica é doença hepática alcoólica.

16. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença de fígado crônica é esteatohepatite não alcoólica (NASH).

17. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença de fígado crônica é doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD).

18. Uso de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a doença gastrintestinal é selecionada de doença inflamatória do intestino (IBD), síndrome do intestino irritável (IBS), su- percrescimento bacteriano, má absorção, colite pós-radiação, colite microscópica, doença de Crohn e colite ulcerativa.

19. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a referida doença ou condição mediada por FXR é fibrose devido a condições patológicas ou doenças, fibrose devido a trauma físico, fibrose devido a danos por radiação, fibrose devido à exposição a quimioterápicos, fibrose hepática, fibrose dos rins, fibrose do pulmão ou fibrose do intestino, ou fibrose devido a uma doença selecionada de cirrose biliar primária, colangite esclerosante primária, fígado gorduroso, obesidade, esteatohepatite não alcoólica, fibrose cística, hemocromatose, hepatite autoimune e esteatohepatite, fibrose secundária a cicatriz cirúrgica, trauma físico acidental, queimaduras ou cicatrizes hipertróficas.

20. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a referida doença ou condição mediada por FXR é um ou mais sintomas de colestase intra-hepática ou colestase extra- hepática selecionada de atresia biliar, colestase obstétrica, colestase neonatal, colestase induzida por drogas e colestase decorrente de infecção por hepatite C.