BR112012026767B1 - composto, sal farmaceuticamente aceitável de um composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto ou sal - Google Patents

Abstract

composto, sal farmaceuticamente aceitável de um composto, composição farmacêutica, método para tratar ou previnir distúrbios, e, uso de um composto ou sal. são descritos compostos de fórmula (i) e métodos para tratar distúrbios metabólicos.

Description

“COMPOSTO, SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEL DE UM COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO OU SAL”

Campo da Invenção

A presente invenção se refere a compostos que são úteis no tratamento e na prevenção de distúrbios metabólicos, incluindo diabetes melito (Tipo I e Tipo II), obesidade, e distúrbios relacionados, e também inclui métodos para preparar os compostos, composições farmacêuticas contendo os compostos, e usos terapêuticos para referidos compostos.

Fundamentos da Invenção

Mais de 200 milhões de pessoas em todo o mundo têm diabetes. A Organização Mundial da Saúde estima que 1.1 milhão de pessoas morreu de diabetes em 2005 e projeta que por todo o mundo mortes por diabetes dobrarão entre 2005 e 2030. Novos compostos químicos que tratam efetivamente diabetes poderiam economizar milhões de vidas humanas.

O diabetes se refere a distúrbios metabólicos que resultam na incapacidade do corpo em regular efetivamente níveis de glicose. Aproximadamente 90% de todos os casos de diabetes são um resultado do diabetes do diabetes do tipo 2 enquanto que os 10% restantes são um resultado do diabetes do tipo 1, diabetes gestacional, e diabetes latente autoimune no adulto (LADA, latent autoimmune diabetes in adults). Todas as formas de diabetes resultam em níveis elevados de glicose no sangue e, se deixadas não tratadas cronicamente, podem aumentar o risco de complicações macrovasculares (doença cardíaca, acidente vascular, outras formas de doença cardiovascular) e microvasculares [falência renal (nefropatia), cegueira da retinopatia diabética, lesão nervosa (neuropatia diabética)].

O diabetes do tipo 1, também conhecido como diabetes juvenil ou diabetes melito dependente de insulina [IDDM, insulin-dependent diabetes mellitus], pode ocorrer em qualquer idade, porém é mais frequentemente diagnosticado em crianças, adolescentes, ou adultos jovens. Diabetes do tipo 1 é causado pela destruição autoimune de células beta produtoras de insulina, resultando em uma incapacidade a produzir suficiente insulina. A insulina controla níveis de glicose no sangue ao promover o transporte da glicose do sangue para o interior de células para uso de energia. Produção insuficiente de insulina levará à menor reabsorção de glicose em células e resultará no acúmulo de glicose na corrente sanguínea. A falta de glicose disponível em células eventualmente levará ao início de sintomas do diabetes do tipo 1: poliúria (urinação frequente), polidipsia (sede), fome constante, perda de peso, alterações da visão, e fadiga. Dentro de 5-10 anos de ser diagnosticado com diabetes do tipo 1, células beta produtoras de insulina do pâncreas do paciente são completamente destruídas, e o corpo não pode mais produzir insulina. Como um resultado, pacientes com diabetes do tipo 1 necessitarão de administração diária de insulina durante o restante de suas vidas.

Diabetes do tipo 2, também conhecido como diabetes melito não dependente de insulina (NIDDM, non-insulin dependent diabetes mellitus) ou diabetes na fase adulta, ocorre quando o pâncreas produz insuficiente insulina e/ou tecidos se tomam resistentes a níveis normais ou elevados de insulina (resistência à insulina), resultando em níveis excessivamente elevados de glicose no sangue. Múltiplos fatores podem levar à resistência à insulina incluindo níveis cronicamente elevados de glicose no sangue, genética, obesidade, falta de atividade física, e aumento da idade. Diferentemente do diabetes do tipo 1, sintomas do diabetes do tipo 2 são mais silentes, e como um resultado, a doença pode não ser diagnosticada até vários anos após o início com uma prevalência de pico em adultos próximos da idade de 45 anos. Infelizmente, a incidência de diabetes do tipo 2 em crianças está crescendo.

O objetivo primário do tratamento de diabetes do tipo 2 consiste em obter e manter o controle glicêmico para reduzir o risco de complicações microvasculares (neuropatia diabética, retinopatia, ou nefropatia) e macrovasculares (doença cardíaca, acidente vascular, outras formas de doença cardiovascular). Normas correntes para o tratamento de diabetes do tipo 2 da American Diabetes Association (ADA) e da European Association for the Study of Diabetes (EASD) [Diabetes Care, 2008, 31 (12), 1] delineiam modificação do estilo de vida incluindo perda de peso e atividade física incrementada como uma abordagem terapêutica primária para o controle do diabetes do tipo 2. No entanto, esta abordagem sozinha falha na maior parte dos pacientes dentro do primeiro ano, levando médicos a prescrever medicações ao longo do tempo. A ADA e EASD recomendam metformina, um agente que reduz a produção de glicose hepática, como uma droga de Tier la; no entanto, um número significativo de pacientes que tomam metformina pode experimentar efeitos secundários gastrintestinais e, em raros casos, acidose láctica potencialmente fatal. Recomendações para a classe tier 1b de drogas incluem sulfoniluréias, que estimulam a secreção de insulina pancreática via modulação da atividade de canal de potássio, e insulina exógena. Embora ambas as drogas reduzam rapidamente e efetivamente os níveis de glicose no sangue, a insulina requer de 1 a 4 injeções por dia e ambos os agentes podem ocasionar ganho de peso indesejado e hipoglicemia potencialmente fatal. Recomendações de tier 2a incluem agentes mais novos, como tiazolidinadionas (TZDs pioglitazona e rosiglitazona), que incrementam a sensibilidade à insulina por parte do músculo, fígado e gordura, e também análogos de GLP-1, que aumentam a secreção de insulina mediada por glicose pós-prandial a partir de células beta pancreáticas. Embora TZDs apresentem controle robusto, durável de níveis de glicose no sangue, efeitos adversos incluem ganho de peso, edema, fraturas ósseas em mulheres, exacerbação de falência cardíaca congestiva, e risco potencial incrementado de eventos cardiovasculares isquêmicos. Análogos de GLP-1 também controlam efetivamente os níveis de glicose no sangue, no entanto, este classe de drogas requer injeção e muitos pacientes se queixam de náusea. A adição mais recente para a lista de drogas de tier 2 são os inibidores de DPP-4, que, como análogos de GLP-1, incrementam a secreção de insulina mediada por glicose a partir de células beta. Infelizmente, inibidores de DPP4 controlam apenas modestamente os níveis de glicose no sangue, e a segurança de longo prazo de inibidores de DPP-4 ainda resta por ser solidamente estabelecida. Outras drogas menos prescritas para diabetes do tipo 2 incluem inibidores de a-glicosidase, glinidas, e análogos de amilina. Claramente são necessárias novas drogas com perfis aperfeiçoados de eficácia, durabilidade e efeitos secundários, para pacientes com diabetes do tipo 2.

GLP-1 e GIP são peptídeos, conhecidos como incretinas, que são secretados por células L e K, respectivamente, do trato gastrintestinal para a corrente sanguínea após a ingestão de nutrientes. Esta resposta fisiológica importante serve como o mecanismo primário de sinalização entre a concentração de nutrientes (glicose/gordura) no trato gastrintestinal e outros órgãos periféricos. Quando da secreção, ambos os peptídeos circulantes iniciam sinais em células beta do pâncreas para intensificar a secreção de insulina estimulada com glicose, que, por sua vez, controla concentrações de glicose na corrente sanguínea (para publicações ver: Diabetic Medicine 2007, 24(3), 223; Molecular and Cellular Endocrinology 2009, 297(1-2), 127; Experimental and Clinical Endocrinology & Diabetes 2001, 109(Supl. 2), S288).

A associação entre os hormônios de incretina GLP-1 e GIP e o diabetes do tipo 2 foi explorada extensivamente. A maior parte dos estudos indicam que o diabetes do tipo 2 está associado com um defeito adquirido na secreção de GLP-1 e também na ação de GIP (ver Diabetes 2007, 56(8), 1951 e Current Diabetes Reports 2006, 6(3), 194). O uso de GLP-1 exógeno para o tratamento de pacientes com diabetes do tipo 2 é severamente limitado devido a sua rápida degradação pela protease DPP-4. Peptídeos multiplamente modificados foram projetados como miméticos de GLP-1 que são resistentes a DPP-4 e mostram meias-vidas mais longas do que GLP-1 endógeno. Agentes com este perfil que mostraram ser altamente efetivos para o tratamento de diabetes do tipo 2 incluem exenatida e liraglutida, no entanto, estes agentes requerem injeção. Agentes orais que inibem DPP-4, como sitagliptina vildagliptina, e saxagliptina, elevam o GLP-1 intacto e controlam modestamente os níveis de glicose circulante (ver Pharmacology & Therapeutics 2010, 125(2), 328; Diabetes Care 2007, 30(6), 1335; Expert Opinion on Emerging Drugs 2008, 13(4), 593). Novas drogas orais que aumentam a secreção de GLP-1 seriam desejáveis para o tratamento do diabetes do tipo 2.

Já se mostrou que ácidos biliares aumenta a secreção de peptídeos do trato gastrintestinal. Ácidos biliares são liberados da vesícula biliar no intestino delgado após cada refeição para facilitar a digestão de nutrientes, em particular gordura, lipídeos, e vitaminas solúveis em lipídeos. Ácidos biliares também funcionam como hormônios que regulam a homeostase do colesterol, energia, e homeostase da glicose via receptores nucleares (FXR, PXR, CAR, VDR) e o receptor acoplado à proteína G TGR5 (para publicações ver: Nature Drug Discovery 2008, 7, 672; Diabetes, Obesity and Metabolism 2008, 10, 1004). TGR5 é um membro da subfamília de GPCRs tipo Rhodopsin (Classe A) que é expressa no intestino, doença da vesícula biliar, tecido adiposo, fígado, e regiões selecionadas do sistema nervoso central. TGR5 é ativado por múltiplos ácidos biliares com ácidos litocólico e desoxicólico como os ativadores mais potentes (Journal of Medicinal Chemistry 2008, 51(6), 1831). Ambos os ácidos, desoxicólico e litocólico aumentam a secreção de GLP-1 de uma linha de células enteroendócrina STC-1, em parte através de TGR5 (Biochemical and Biophysical Research Communications 2005, 329, 386). Mostrou-se que um agonista de TGR5 sintético INT-777 aumenta a secreção de GLP-1 intestinal in vivo em camundongos (Cell Metabolism 2009, 10, 167). Mostrou-se que sais biliares promovem a secreção de GLP-1 a partir de células L colônicas em um modelo de colo de rato perfimdido vascularmente (Journal of Endocrinology 1995, 145(3), 521) bem como o GLP-1, peptídio YY (PYY), e neurotensina em um modelo de ileo de rato perfundido vascularmente (Endocrinology 1998, 139(9), 3780). Em humanos, a infusão de desoxicolato no colo sigmóide produz um aumento rápido de marcado responsivo à dose das concentrações de enteroglucagônio e PYY no plasma (Gut 1993, 34(9), 1219). Agentes que aumentam o ácido biliar colônico e ileal ou as concentrações de sal biliar aumentarão a secreção do peptídio do intestino incluindo, embora sem limitação, GLP-1 e PYY.

Ácidos biliares são sintetizados a partir do colesterol no fígado, depois sofrem conjugação do ácido carboxílico com a funcionalidade amina da taurina e glicina. Ácidos biliares conjugados são secretados na doença da vesícula biliar onde ocorre acúmulo até a refeição ser consumida. Ao comer a doença da vesícula biliar se contrai e esvazia seu conteúdo no duodeno, onde os ácidos biliares conjugados facilitam a absorção do colesterol, gordura, e vitaminas solúveis em gordura no intestino delgado proximal (para publicações ver: Frontiers in Bioscience 2009, 14, 2584; Clinical Pharmacokinetics 2002, 41(10), 751; Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 2001, 32, 407). Ácidos biliares conjugados continua a escoar através do intestino delgado até o íleo distai onde 90 % são reabsorvidos nem enterócitos via o transportador de ácido biliar dependente de sódio apical (ASBT [apical sodium-dependent bile acid transporter}, também conhecido como iBAT). Os 10 % remanescentes são conjugados aos ácidos biliares por meio de bactérias intestinais no íleo terminal e colo de que 5 % são então passivamente reabsorvidos no colo e os 5 % restantes são excretados em fezes. Ácidos biliares que são reabsorvidos pelo ASBT no íleo são então transportados para a veia portal para recirculação até o fígado.

Este processo altamente regulado, denominado recirculação enteropática, é importante para a manutenção do volume total de ácido biliar no corpo porque a quantidade de ácido biliar que é sintetizada no fígado é equivalente à quantidade de ácidos biliares que são excretados em fezes. O rompimento farmacológico da reabsorção do ácido biliar com um inibidor de ASBT leva a concentrações incrementadas de ácidos biliares no colo e fezes, em que uma consequência fisiológica é a conversão incrementada de colesterol hepático a ácidos biliares para compensar a perda fecal de ácidos biliares. Muitas companhias farmacêuticas buscaram este mecanismo como uma estratégia para diminuir o colesterol no soro em pacientes com dislipidemia/hipercolesterolemia (para uma publicação ver: Current Medicinal Chemistry 2006, 13, 997). Importante frisar que o aumento, mediado por inibidor de ASBT, na concentração colônica de ácido biliar/sal biliar também aumentará o GLP-1, PYY, GLP-2 intestinal, e outra secreção de hormônio peptídico do intestino. Assim, inibidores de ASBT poderíam ser úteis para o tratamento de diabetes do tipo 2, diabetes do tipo 1, dislipidemia, obesidade, síndrome do intestino curto, constipação crônica idiopática, síndrome do intestino irritável (IBS, irritable bowel syndrome), doença de Crohn, e artrite.

Determinadas 1,4-tiazepinas são reveladas, por exemplo no WO 94/18183 e WO 96/05188. Estes compostos são tidos como úteis como inibidores da reabsorção do ácido biliar ileal (ASBT, ileal bile acid reuptake inhibitors').

Sumário da Invenção

Resumidamente, em um aspecto, a presente invenção revela composto de Fórmula I

em que R¹ é H, Cl, Br, N(CH₃)₂, ou metóxi;

R² é H ou OH;

cadaR³ é independentemente Ci-galquila;

X é CH₂, C(O), ou CH=CH;

Q é Co-6alquila;

R⁴ é OH, SO3H, CO2H, PO3H2, CONR⁵R⁵, NR⁵R⁵; ou NHC(O)CH2NR⁵R⁵;

cada R⁵ é independentemente H, OH, Ci_6alquila, Co. 6alquilCO2H, C0.6alquilSO3H, Co_6alquilP03H2, C(O)C0-6alquilCO2H, C(O)C0. 6alquilSO3H, C(O)C0-6alquilPO3H2, ou CH(R⁷)C0.₆alquilCO₂H; e

R⁷ é C₀-₆alquilCO₂H, C₀.₆alquilOH, C₀.₆alquilSO₃H, ou C_o. ₆alquilPO₃H₂.

Em um aspecto, a presente invenção revela sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de Fórmula I.

Em um aspecto, a presente invenção revela composições farmacêuticas compreendendo um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Em um aspecto, a presente invenção revela um método para tratar ou prevenir distúrbios metabólicos, incluindo diabetes melito (Tipo I e Tipo II), obesidade, e distúrbios relacionados em um humano, compreendendo a administração de um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Descrição Detalhada da Invenção

De preferência, R¹ é metóxi.

De preferência, R é H.

De preferência, cada R³ é independentemente C₂.₄ alquila. Da forma mais preferível, cada R³ é independentemente etila ou n-butila.

Quando os grupos R³ são diferentes, o carbono ao qual são ligados é quiral. Nesses compostos quirais, a estereoquímica preferida naquele átomo de carbono é R.

O átomo de carbono a que o anel fenila não substituído está ligado é quiral. A estereoquímica preferida naquele átomo de carbono é R.

De preferência, X é CH₂ ou C(O). Da forma mais preferível X é CH₂.

De preferência Q é C₀.₂alquila. Da forma mais preferível Q é um Coalquila (i.e. ausente).

De preferência, R⁴ é PO₃H₂ ou NR⁵R⁵. Da forma mais preferível R⁴ é NR⁵R⁵.

De preferência, um R⁵ é H e o outro é OH, metila, Cp 4alquilCO2H, Co-2alquilS03H, Ci.2alquilPO3H2, C(O)CO2H, C(O)Cp 2alquilSO3H, C(O)Ci_2alquilPO3H2, ou CH(R⁷) C0-ialquilCO₂H. Da forma mais preferível, um R⁵ é H e o outro é CH2CO2H, CH2SO3H, CH2CH2SO3H, ou CH(R⁷)C0.ialquilCO₂H.

De preferência, R⁷ é Co-ialquilC02H ou C0.2alquilSO3H. Da forma mais preferível R⁷ é Co-ialquilC02H.

Como usado aqui, “alquila” pode ser alquila de cadeia reta ou ramificada, exceto se claramente indicado de outra forma.

Para uma revisão de sais farmaceuticamente aceitáveis vantajosos ver, por exemplo, Berge et al, J. Pharm, Sei., 66, 1-19, 1977. Em uma concretização, sais de adição de ácido são selecionados dentre o cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, bissulfato, nitrato, fosfato, fosfato de hidrogênio, acetato, benzoato, succinato, sacarato, fumarato, maleato, lactato, citrato, tartarato, gluconato, camsilato, metanossulfonato, etanossulfonato, benzenossulfonato, p-toluenossulfonato e pamoato. Em uma concretização, sais de adição de base incluem sais metálicos (como sódio, potássio, alumínio, cálcio, magnésio e zinco) e sais de amônio (como sais de isopropilamina, dietilamina, dietanolamina). Outros sais (como trifluoroacetatos e oxalatos) podem ser usados na fabricação de compostos de fórmula (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e são incluído no escopo da invenção. Sais de adição de ácido e de base podem ser preparados pelo químico versado, tratando-se um composto de fórmula (I) com o ácido ou base apropriado em um solvente vantajoso, seguido de cristalização e filtração.

O método de tratar ou prevenir distúrbios metabólicos pode compreender a administração de um composto ou sal desta invenção sozinho como monoterapia. Os compostos e sais desta invenção também podem ser usados em combinação com outros agentes terapêuticos. Agentes vantajosos para uso em combinação com os compostos e sais desta invenção incluem, por exemplo, intensificadores da sensibilidade à insulina, inibidores da absorção de glicose, biguanidas, intensificadores da secreção de insulina, ou metformina.

Exemplos

Os compostos desta invenção podem ser preparados por meio de uma variedade de métodos, incluindo métodos sintéticos convencionais bem conhecidos. Métodos sintéticos gerais ilustrativos são apresentados abaixo e, então prepara-se compostos específicos da invenção nos exemplos de trabalho.

Em todos os esquemas descritos abaixo, usa-se grupos protetores para grupos sensíveis ou reativos onde necessário de acordo com princípios gerais da química sintética. Grupos protetores são manipulados de acordo com métodos convencionais da síntese orgânica (T.W. Green e P.G.M. Wuts, (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, incorporado por referência com relação aos grupos protetores). Estes grupos são removidos em um estágio conveniente da síntese do composto síntese usando métodos que são facilmente compreensíveis para aqueles com prática na arte. A seleção de processos e também as condições de reação e a ordem de sua execução devem ser consistentes com a preparação de compostos da presente invenção. Compostos da invenção podem ser facilmente preparados de acordo com os Esquemas de 1 até 9 por aqueles com prática na arte.

Como ilustrado no Esquema 1, diversos intermediários chave podem ser preparados a partir de (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina 1,1-dióxido (Brieaddy, L.E. WO9605188, 1996). Desmetilação mediada com ácido de Lewis, seguida de reação com anidrido tríflico proporcionou um triflato intermediário (A). Reação de A com monóxido de carbono e catalisador de paládio em MeOH resultou em éster intermediário (B). Reação de A na presença de cianeto e catalisador de paládio resultou em nitrila intermediária (C), que foi reduzido com hidreto de diisobutilalumínio (DiBAL-H) dando o intermediário aldeído (D) ou submetido a hidrogenação na presença de e ácido resultou em origem ao intermediário aminometila (E).

Esquema 1: Preparação de intermediários chave

Compostos da invenção podem ser preparados como no

Esquema 2. Sujeição do intermediário aldeído (D) a condições de aminação redutiva com uma amina substituída seguida de, se necessário, desproteção com ácido, base ou funcionalização (oxidação) resultou em origem a exemplos de 8-aminometila exemplos (F). Altemativamente, o Intermediário (E) foi acilado com cloretos de ácido de cloroalquila, depois submetido a reação com vários nucleófilos incluindo sulfito, fosfito, hidróxido, e aminas substituídas seguido de, se requerido, desproteção de um grupo protetor dando exemplos de 8-aminometila acilada exemplos (F). Terceiro e quarto procedimentos para preparar compostos de 8-aminometila da invenção 5 envolveram reação do Intermediário (E) com brometos funcionalizados na presença de base ou paraformaldeído e trietilfosfito dando outros compostos de 8-aminometila substituída (F).

Esquema 2: Preparação de compostos de aminometila substituída

1) R5R5NH

NaHB(OAc)₃

2) desproteção ou oxidação

1)^CI

R^sBr, base

2) Nucleófilos [SO/·, (EtO^P, -OH, HNR5R5]

3) desproteção

F

paraformaldeído

HP(OXOEt)₂

Compostos da invenção podem ser preparados como no

Esquema 3. Intermediário éster (B) foi saponificado em condições básicas dando ácido carboxílico (G) que então foi submetido a condições convencionais de acoplamento de amida na presença de uma amina substituída dando exemplos de amida (H). Intermediário éster (B) também foi reduzido com DiBAL-H a álcool (I) que então foi convertido a brometo (J). 15 Brometo (J) foi reagido com vários nucleófilos (sulfito, fosfito, hidróxido, aminas) seguido, se necessário, de desproteção dando exemplos (K).

Esquema 3: Preparação dos exemplos de éster intermediário (B)

Compostos da invenção podem ser preparados como no

Esquema 4 a partir do intermediário triflato (A). Sujeição do intermediário (A) um uma reação de Heck resultou em éster insaturado (L) que foi saponificado a ácido insaturado (M). Éster (L) foi submetido a condições de 5 hidrogenação seguido de saponificação dando ácido (N). A formação de amida convencional com aminas substituídas resultou em exemplos de amida (O). A redução de ácido (N) com borano, seguida de mesilação ou formação de brometo resultou em compostos (P), que foram reagidos com vários nucleófilos (cianeto, dietil fosfíto, hidróxido, sulfito) depois, se necessário, 10 hidrolisados, oxidados, ou desprotegidos dando exemplos (Q).

Esquema 4: Preparação de exemplos de intermediário triflato (A)

Compostos da invenção podem ser preparados como no

Esquema 5. O intermediário aldeído (D) foi convertido a fosfonato insaturado (R) que então foi desprotegido com TMSBr dando exemplo de ácido fosfônico insaturado (S). Fosfonato (R) foi submetido a hidrogenação, depois 5 desprotegido com TMSBr dando exemplo de ácido fosfônico saturado (T).

Esquema 5: Preparação de derivados de ácido alquilfosfônico

T

Compostos da invenção podem ser preparados como no

Esquema 6. Composto J (do Esquema 3) foi oxidado ao derivado de Nhidroxila que foi submetido a trietilfosfito seguido de desproteção dando N10 hidroxila exemplar (U). Nitrila Intermediária (C) foi oxidada, depois a nitrila foi reduzida a um aldeído (V), que então foi submetida a aminas substituídas em condições de aminação redutiva dando exemplos (W). Composto X (preparado como no Esquema 2) foi oxidado, reduzido, e desprotegido dando exemplo de N-hidroxila (Y).

Esquema 6: Preparação de exemplos de N-hidroxilamina

J (esquema 3)

Compostos da invenção podem ser preparados como ilustrado no Esquema 7. Nitrila intermediária (C) foi oxidado a uma imina, depois a nitrila foi reduzida a um aldeído usando DiBAL-H, que foi submetido a redução com borano, reação com trietil fosfato, e desproteção dando o C(5) bfenila exemplar (AA). Composto Z foi oxidado com periodinano de DessMartin, depois submetido a aminas substituídas em condições de aminação redutiva seguido, se necessário, desproteção a exemplos adicionais (BB).

Esquema 7: Preparação de epímero β de C5

Compostos da invenção podem ser preparados como ilustrado no Esquema 8. Conversão de norleucina a um etil éster seguido de formação de imina com benzaldeído e alquilação com iodobutano resultou em um 5 composto intermediário (CC). Hidrólise da imina seguido de redução com LAH e formação de sulfato resultou em intermediário aminossulfato (DD). Acilação de 2-bromo-l,4-bis(metilóxi)benzeno com benzoila cloreto seguido de desmetilação seletiva resultou em um intermediário fenol. Acilação seguida de rearranjo de Newman-Kwart resultou em Intermediário (EE). 10 Desproteção de vaso único de (EE) e alquilação com aminossulfato (DD) resultou em origem ao produto (FF). Ciclização intramolecular a uma imina seguida de carbonilação mediada com paládio resultou em um intermediário éster, que foi reduzido com LAH dando intermediário (GG). Redução da imina seguida de oxidação do sulfeto resultou em intermediário (HH). 15 Conversão de (HH) aos exemplos da invenção (II e JJ) podería ser realizada de acordo com a química ilustrada nos Esquemas 2 e 3, respectivamente.

Esquema 8: Preparação de exemplos de C(3)-dibutila

OH 3) NaH, iodobutano

1) EtOH, SOCI;

2) benzaldeído

OEt

Ph

CC

DD

O^«^Etí

II JJ

Compostos da invenção podem ser preparados como ilustrado no Esquema 9. Desmetilação de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina 1,1-dióxido (Brieaddy, L.E.

WO9605188, 1996) seguido de formação de triflato e aminação mediada com paládio resultou em derivado (KK). Desmetilação, formação de triflato, e cianato mediada com paládio resultou em origem a uma nitrila (LL). Redução da nitrila com DiBAL-H a um aldeído (MM) seguido de sujeição a aminas substituídas em condições de aminação redutiva e, se necessário, desproteção exemplar (NN).

Esquema 9: Preparação de exemplos de 7-N,N-dimetila

1) aici₃

2) Tip

3) Zn(CN)2

Pd₂(dba)3

DIBAL-H

Abreviaturas

HATU	hexafluorofosfato de 1,1,3,3-tetrametil urônio
DCM	diclorometano
DCE	1,2-dicloroetano
DIPEA	diisopropiletilamina
DME	1,2-dimetoxietano
DMF	ΛζΑ-dimetilformamida
DMSO	dimetilsulfóxido
Et2O	dietil éter
EtOAc	acetato de etila
EtOH	etanol
h	hora
HOAc	ácido acético
MeCN	acetonitrila
MeOH	metanol
MTBE	metil t-butil éter
NMP	N-metilpirrolidinona
PhH	benzeno
PhMe	tolueno
THF	tetra-hidrofurano

I. Preparação de intermediários

Intermediários la e lb: (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5 fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol-l,l-dióxido (la) e (3Ã,57?)-3butil-3 -etil-8-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-7-ol 1,1dióxido (lb)

Método 1: Uma solução de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3etil-7,8-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina (200 g, 479 mmol) (preparado como em Brieaddy, L.E. WO9605188, 1996) em DCE (11) foi saturada com HCl(g) depois tratada com cloreto de alumínio (200 g, 1,5 mol) de uma só vez. A mistura de reação foi agitada enquanto se resfriava lentamente à temperatura ambiente depois agitada durante 2,5 h. A mistura de reação foi adicionada a uma mistura de gelo-H₂O com agitação vigorosa. A mistura bifásica foi tratada com HC1 1 N (-200 ml) depois as fases foram separadas após agitação durante 30 min. A fase orgânica foi isolada, lavada duas vezes com HC1 diluído (1,5 1 H₂0/~200 ml HC1 1 N), seca sobre MgSCL, filtrada, e concentrada à aridez dando uma mistura regioisomérica de produtos 7-OH e 8-OH (185 g, 458 mmol, 96 % de rendimento) como uma espuma branca. RMN Ή indicou uma mistura a 47:53 de 7/8-fenóis, respectivamente. Os regioisômeros foram separados por meio de cromatografia quiral [fase estacionária polímero (CSP)-celulose tris(3,5-diclorofenilcarbamato) imobilizado sobre silica (CHIRALPAK IC®, 20 microns, 20 cm x 25 cm), DCM e isopropanol (98/2 vol/vol) como fase móvel] dando intermediários la e lb:

Intermediário lb (pico a eluir mais rápido): 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-8-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4 benzotiazepin-7-ol (86,3 g, sólido branco, pureza = 98,2 %): RMN *H (400 MHz, DMSO-40 δ ppm 0,74 (t, .7=7,0 Hz, 3 H), 0,79 (t, .7=7,4 Hz, 3 H), 0,94 - 1,28 (m, 4 H), 1,30 - 1,53 (m, 2 H), 1,64 - 1,81 (m, 1 H), 1,91 - 2,10 (m, 1 H), 2,45 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 3,04 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,49 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,80 (s, 3 H), 5,85 (d, .7=10,0 Hz, 1 H), 6,06 (s, 1 H), 7,19 - 7,52 (m, 6 H), 9,93 (s, 1 H)

Intermediário la (pico a eluir mais devagar): 1,1-dióxido de (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-ol (72,5 g) como um sólido branco: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,1 Hz, 3 H), 0,79 (t, .7=7,5 Hz, 3 H), 0,95-1,28 (m, 4 H), 1,31-1,53 (m, 2 H), 1,64-1,76 (m, 1 H), 1,98-2,10 (m, 1 H), 2,43 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 3,06 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,42 (s, 3 H), 3,49 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 5,85 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 6,04 (s, 1 H), 7,24-7,35 (m, 1 H), 7,35-7,48 (m, 5 H), 9,72 (s, 1 H).

Método 2: Uma solução agitada de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (1250 g, 2,99 mol) em 1,2-dicloroetano (6 1) foi saturada com gás de HC1 à temperatura ambiente (a temperatura interna aumentou para 39°C durante esta etapa). Borbulhamento de gás de HC1 através da solução foi prosseguido durante 5 min após atingir 39°C. Adicionou-se cloreto de alumínio (1250 g, 9,37 mol) foi adicionado em porções ao longo de 40 min com algum resfriamento externo enquanto se mantinha a temp, da reação entre 38-42°C. A mistura de reação foi agitada durante 2 h e então despejada lentamente sobre 10 kg de gelo/água. Duas bateladas adicionais de 1250 g e 500 g de 1,1dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro1,4-benzotiazepina foram processados com cloreto de alumínio e HC1 de uma maneira similar. As três misturas de reação extintas com gelo/água (7,19 mol combinados teóricos) foram combinadas e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH₂C1₂ (3 1) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3 x 4 1) e concentradas até que o produto começou a cristalizar. A mistura foi diluída com heptano e envelhecida com agitação. O precipitado foi recolhido por meio de filtração, seco ao ar durante 2 dias e então seco em uma estufa a vácuo a 55°C durante 48 h dando uma mistura a aprox. 9:8 de 1,1-dióxido de (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol e 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3etil-8-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4-benzotiazepin-7-ol (2,8 kg). Purificação da mistura de acordo com o procedimento no Método 1 resultou em 1235 gramas de 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol como um sólido branco.

Método 3: Uma solução de 1,1-dióxido de (3Á,5Ã)-3-butil-3etil-7,8-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (11,1 kg, 26,58 mol) em DCE (69,7 kg) foi tratada com água (0,48 kg, 26,67 mol) depois a temperatura foi ajustada em 35^o- 40°C. A solução foi carregada com cloreto de oxalila (3,4 kg, 26,78 mol) e agitada durante trinta minutos. Em seguida a solução foi carregada sucessivamente com tricloreto de alumínio (3,6 kg, 26,9 mol; 3,6 kg, 26,9 mol; 1,8 kg, 13,4 mol; 1,8 kg, 13,4 mol, 0,9 kg, 6,8 mol) permitindo-se trinta minutos entre as cargas. A mistura de reação foi agitada em 35^o- 40°C até que a reação se completasse. A reação foi extinta por meio de adição lenta da solução de reação à água (119 kg). A fase orgânica foi separada, depois extraída adicionalmente duas vezes com água (60 kg) e uma vez com uma solução saturada de cloreto de sódio (30 kg). A solução de dicloroetano da mistura de produto foi concentrada até uma massa final de 39 kg. Esta solução foi usada como a solução de alimentação para cromatografia preparativa como descrito no Método 1.

Frações com o produto desejado foram parcialmente concentradas a um volume de aproximadamente 12 1. As soluções foram então ainda mais concentradas por meio de destilação atmosférica a uma temperatura interna do vaso de 80°C. Ao resinar, ocorreu cristalização. A pasta fluida inicial foi diluída com água (6-12 1) e agitada durante duas horas. O produto foi recolhido por meio de filtração, lavado com água (4 1) depois seco a 60°C sob vácuo até uma massa constante. Dos acima indicados, obteve-se 4,1 kg (10,22 mol) de 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-8(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-7-ol (Intermediário 1b) e 3,9 kg (9,72 mol) de 1,1-dióxido de (3Ã,5i?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol (Intermediário la).

A reciclagem do intermediário 1b a 1,1-dióxido de (37?,57?)-3butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina: Uma solução de 1,1-dióxido de (37?,5Ã)-3-butil-3-etil-8-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-7-ol (4,1 kg 10,22 mol) em acetona (19,7 kg) foi tratada com carbonato de potássio (3,84 kg) e ajustada em 25^o30°C. Carregou-se iodeto de metila (5,84 kg, 41,14 mol) e a reação foi mantida a 25°- 30°C até completar-se. A reação foi concentrada a ~ 8 1 de volume total por meio de destilação, depois carregou-se dicloroetano (31 kg). A reação foi extraída duas vezes com água (20,8 kg) e realizou-se uma carga adicional de dicloroetano (26 kg). A solução produto foi concentrada a ~23 1 para formar uma solução vantajosa para redesproteção a intermediários la e lb como descrito acima no Método 3.

Intermediário 2: Trifluorometanossulfonato de (3Á,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-ila

Método 1: A uma solução em DCM de 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-ol (105 g, 26 mmol) e piridina (27,3 ml, 34 mmol) resfriada a 0°C sob nitrogênio adicionou-se anidrido trifluorometanossulfônico (57,1 ml, mmol) lentamente ao longo de 30 min enquanto se mantinha uma temperatura interna entre 5-10°C. Uma vez completa a adição a reação foi agitada aé TLC e LCMS indicarem conversão completa ao produto. H₂O (250 ml) foi adicionado lentamente à mistura, e a mistura foi agitada durante 10 min após o que as camadas foram separadas. A aquosa foi extraída mais uma vez com DCM, e as orgânicas combinadas foram lavadas com 10 % de HC1, salmoura, depois secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas a meio volume. Adicionou-se hexanos até que a solução se tomasse turva, e começou a ocorrer cristalização. Os sólidos foram então filtrados da solução dando os compostos titulares (134,6 g, 95 %) como um sólido branco que foi usado sem purificação adicional: RMN Ή (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,76-0,96 (m, 6 H), 1,03-1,40 (m, 4 H), 1,40-1,67 (m, 4 H), 1,77-1,97 (m, 1 H), 2,10-2,28 (m, 1 H), 3,07 (d, 7=14,8 Hz, 1 H), 3,48 (d, 7=14,9 Hz, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 6,09 (s, 1 H), 6,34 (s, 1 H), 7,32-7,50 (m, 5 H), 7,96 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 536 (M+H)⁺.

Método 2: Piridina (441 ml, 5,45 mol) foi adicionada a uma suspensão agitada de 1,1-dióxido de (37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol (1099 g, 2,72 mol) em Z-butil metil éter (161) com resfriamento a 15°C. Adicionou-se anidrido tríflico puro (1076 g, 3,81 mol) por gotejamento ao longo de 45 min enquanto se mantinha a temperatura de reação entre 14-16°C. Após a adição, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Adicionou-se lentamente água (6 1) e a mistura foi agitada rapidamente durante 15 min. As camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com uma proporção a 1:1 de água/salmoura (5 1), seca sobre MgSO₄ e filtrada. O filtrado foi concentrado para remover a maior parte do Z-butil metil éter (cerca de 13-14 1 foram removidos). A pasta fluida resultante foi filtrada e a torta de filtração foi lavada com heptano. Secagem adicional da torta de filtração em um vácuo de um dia para o outro a 40°C resultou em trifluorometanossulfonato de (3R,5R)~

3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-ila como um sólido branco-sujo (1342 g). Uma segunda colheita de produto foi obtida do licor-mãe (63 g). O rendimento combinado foi de 1405 g.

Método 3: Um reator foi carregado com 2,75 kg (6,8 mol) de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-ol-1,1-dióxido, 19,9 kg de 1,4-dioxano, 1,08 kg (13,6 mol) de piridina a 25°C e agitado a esta temperatura até se dissolver. Em seguida, a solução foi resfriada a cerca de 10°C após o que se adicionou anidrido tríflico 10 (2,8 kg, 9,9 mol) a uma taxa tal que a temperatura interna fosse de aproximadamente 5-15°C. A mistura de reação foi agitada a esta temperatura durante cerca de 45 minutos. A temperatura da camisa foi então elevada a cerca de 25°C, e a reação foi agitada a esta temperatura até completar. Adicionou-se então tolueno (16,3 kg) e 10 % de salmoura (8,3 1) no reator, e a 15 mistura foi agitada durante pelo menos 5 minutos antes de descansar durante mais 5 minutos. A camada aquosa foi removida. Adicionou-se água (8,3 kg), e a mistura foi agitada durante cerca de 5 minutos antes de descansar durante pelo menos 10 minutos. A camada aquosa foi removida, e repetiu-se a lavagem com água. Após a remoção da camada aquosa, a camada orgânica foi 20 reduzida a cerca de 111 por meio de destilação a vácuo. Adicionou-se heptano (18,8 kg), e o volume total foi novamente reduzido por meio de destilação a vácuo a cerca de 14 1. Adicionou-se mais 4 kg de heptanos, e a mistura foi resfriada lentamente a cerca de 5°C de um dia para o outro. O produto foi recolhido por meio de filtração e lavado duas vezes com heptanos (3,6 kg e 25 4,0 kg). A torta foi seca sob um lençol de N₂ depois seca em vácuo (~60°C) dando 3,47 kg (95 %) de trifluorometanossulfonato de (37?,5Ã)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-ila.

Intermediário 3: 1,1-dióxido de metil (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carboxilato

Em um tubo de reação contendo trifluorometanossulfonato de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-ila (0,103 g, 0,192 mmol), Pd₂(dba)₃ (0,011 g, 0,012 mmol), dppf (0,013 g, 0,024 mmol), e trietilamina (0,040 ml, 0,288 mmol) em DMF (1 ml) borbulhou-se gás monóxido de carbono durante um período de 15 min. Adicionou-se MeOH anidro (0,039 ml, 0,962 mmol), e o vaso de reação foi fechado hermeticamente sob uma atmosfera de monóxido de carbono, depois aquecida a 70°C de um dia para o outro. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, e os conteúdos foram diluídos com Et₂O depois despejados em H₂O. As camadas foram separadas, a aquosa extraída mais uma vez com Et₂O, e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas. O material bruto foi cromatografado em sílica-gel usando hexanos/EtOAc dando o composto titular (0,080 g, 91 %) como um sólido branco: RMN ^JH (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 0,75-0,96 (m, 6 H), 0,99-1,36 (m, 4 H), 1,36-1,59 (m, 5 H), 1,86 (ddd, .7=14,4, 12,0, 4,4 Hz, 1 H), 2,07-2,23 (m, 1 H), 3,02 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,45 (d, .7=14,9 Hz, 1 H), 3,57 (s, 3 H), 3,86 (s, 3 H), 6,08 (s, 1 H), 6,27 (s, 1 H), 7,29-7,48 (m, 5 H), 8,52 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 446 (M+H)⁺.

Intermediário 4: 1,1-dióxido de ácido (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carboxílico

H₂O (0,333 ml), MeOH (0,333 ml), e THF (1 ml) foram adicionados a 1,1-dióxido de metil (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxilato (0,046 g, 0,103 mmol) juntamente com LiOH (0,013 g, 0,310 mmol), e a mistura foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente para hidrolisar ao ácido benzóico. A mistura foi concentrada a meio volume, depois adicionou-se HC1 6 N. A mistura foi extraída com EtOAc (2X), lavada com salmoura, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada em vácuo dando o composto titular (0,039 g, 86 %): RMN ’H (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 0,67-0,99 (m, 6 H), 0,99-1,64 (m, 7 H), 1,87 (t, J=11,8 Hz, 1 H), 2,08-2,29 (m, 1 H), 3,09 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,46 (d, .7=14,9 Hz, 1 H), 3,70 (br. s., 3 H), 6,11 (br. s., 1 H), 6,33 (br. s., 1 H), 7,30-7,60 (m, 5 H), 8,73 (br. s., 1 H); ES-LCMS m/z 432 (M+H)⁺.

Intermediário 5: [(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metanol

HO

A uma solução em DCM (2 ml) de 1,1-dióxido de metil (3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carboxilato (0,275 g, 0,617 mmol) a 0°C sob nitrogênio adicionou-se uma solução IM de DIBAL-H em tolueno (1,3 ml, 1,30 mmol). A reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 1,5 h, depois adicionou-se MeOH seguido de H₂O. A mistura de reação foi concentrada, depois redissolvida em EtOAc. As camadas foram separadas, a camada aquosa foi extraída mais uma vez com EtOAc, depois as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas. Cromatografia em silica usando hexanos/EtOAc resultou no composto titular (0,238 g, 91 %): RMN ^]H (400 MHz, CDCf) δ ppm 0,760,93 (m, 6 H), 1,04-1,36 (m, 6 H), 1,36-1,59 (m, 6 H), 1,76-1,93 (m, 1 H),

2,05-2,24 (m, 2 Η), 3,02 (d, 7=14,8 Hz, 1 Η),3,42 (d, 7=14,8 Hz, 1 Η), 3,54 (s, 3 Η), 4,65 (qd, 7=13,2, 6,3 Hz, 2 H), 6,07 (br. s., 1 H), 6,17 (s, 1 H), 7,29-7,50 (m, 5 H), 8,03 (s, 2 H) ; ES-LCMS m/z 418 (M+Hf.

Intermediário 6: (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila-1,1 -dióxido

Método 1: Uma mistura de trifluorometanossulfonato (3R,5R)~ 3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4benzotiazepin-8-ila (0,535 g, 1,0 mmol), Pd₂(dba)₃ (0,055 g, 0,06 mmol), DPPF (0,066 g, 0,12 mmol), pó de zinco (0,004 g, 0,06 mmol) e Zn(CN)₂ (0,117 g, 0,99 mmol) em DMF (10 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 15 min sob um fluxo de nitrogênio. A reação foi aquecida a 80°C e agitada durante 8 h. Após resfriar a mistura à temperatura ambiente, DMF foi removido em vácuo, adicionou-se Et₂O, e as orgânicas foram lavadas com NH4OH(aq) 2 N seguido de salmoura. As orgânicas foram secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas. O resíduo foi triturado com hexanos/EtOAc, e recolheu-se um sólido branco por meio de filtração dando o composto titular (0,386 g, 92 %): RMN *H (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 0,73-0,97 (m, 6 H), 0,981,62 (m, 8 H), 1,77-1,92 (m, 1 H), 2,08-2,24 (m, 1 H), 3,01 (d, 7=14,9 Hz, 1 H), 3,45 (d, 7=14,9 Hz, 1H), 3,62 (s, 3 H), 6,08 (br. s., 1 H), 6,26 (s, 1 H), 7,32-7,49 (m, 5 H), 8,28 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 413 (M+Hf.

Método 2: Uma solução de trifluorometanossulfonato de (37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-ila (1,346 kg, 2,51 mol) em DMF (2,5 1) foi carregada com Zn(CN)₂ (440 g, 3,75 mol) e a mistura agitada foi desgaseificada passando-se N₂ através da mistura durante 60 min. Adicionou-se água (25 ml) e continuou28 se aplicando gás desgaseificante durante 30 min. Adicionou-se DPPF (14,5 g,

26,16 mmol) e Pd₂(dba)₃ (10,5 g, 11,47 mmol) e a mistura de reação foi aquecida a 80-85°C com desgaseificação continuada. A reação foi considerada completa após 2 h a esta temperatura. Após resfriamento da 5 mistura de reação a 60°C, adicionou-se tolueno (500 ml) e a mistura foi agitada de um dia para o outro com resfriamento à temperatura ambiente.

Adicionou-se tolueno (8 1) e a mistura foi lavada com água (4x2 1). A fase orgânica foi seca sobre MgSO₄ e filtrada e o filtrado foi agitado sobre resina PL-BnSH (460 g, para aglutinar impurezas de metais pesados) durante 3 dias.

A resina foi removida por meio de filtração e o filtrado foi concentrado até cristalização do produto. Adicionou-se heptano (12 1) e coletou-se os sólidos resultantes por meio de filtração e lavados com heptano. Os sólidos brancos foram secos ainda mais sob vácuo dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (1,010 kg).

Método 3: Trifluorometanossulfonato de (3Ã,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8ila (2160 g, 4,05 mol) e cianeto de zinco (266 g, 2,23 mol) foram colocados em um reator seguido de água (1084 ml) e N-metilpirrolidinona (10830 ml).

O conteúdo é colocado sob nitrogênio depois evacuado três vezes. A reação foi aquecida a 100°C e tratada com uma pasta fluida de acetato de paládio (4,8 g, 0,02 mol) e l,l'-Bis(difenilfosfino)ferroceno (15,7 g, 0,03 mol) em NMP (50 ml). A reação foi imediatamente tratada com polimetil-hidrossiloxano (PMHS, 22 g) em NMP (50 ml) e mantida a 100°C durante aproximadamente uma hora quando análise por HPLC indicou que a reação estava completa. A reação foi resfriada a aproximadamente 3 5 °C e tratada com uma solução preparada de água (8685 g), hidróxido de amônio (1958 g) e etanol (17130 g) ao longo de aproximadamente dez minutos. A pasta fluida resultante foi aquecida a aprox. 80°C para dissolver. A solução foi resfriada a 20°C ao longo de aproximadamente 60 minutos e mantida a 20°C durante aproximadamente 90 minutos. Os sólidos foram filtrados, lavados com uma solução preparada de 50 % etanol/água (4330 ml) seguido de heptano (4300 ml), e secos. Os sólidos foram secos em uma estufa a vácuo a 50°C dando 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbonitrila (1482 g, 89 %).

Intermediário 7: (3Ã,5R)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-1,1 -dióxido

O

Imidazol (0,153 g, 0,563 mmol) foi dissolvido em DCM (2 ml), e a solução foi resfriada a 0°C. Adicionou-se Trifenilfosfino (0,295 g, 1,126 mmol) seguido de bromo (0,058 ml, 1,126 mmol). Uma solução de [(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro1,4-benzotiazepin-8-il]metanol (0,235 g, 0,563 mmol) em DCM (1 ml) foi adicionada lentamente a 0°C. A reação foi agitada em 0°C durante 2 h seguido de adição de Na₂SO₃(aq), e a mistura resultante foi separada. A camada orgânica foi seca (Na₂SO₄), filtrada através de um leito de sílica, e concentrada dando um óleo espesso que solidificou após descansar dando o composto titular (0,265 g, 84 %): RMN Ή (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 0,730,95 (m, 6 H), 1,02-1,36 (m, 5 H), 1,38-1,65 (m, 5 H), 1,76-1,92 (m, 1 H), 2,08-2,23 (m, 1 H), 3,02 (d, 7=14,8 Hz, 1 H), 3,43 (d, 7=14,8 Hz, 1 H), 3,57 (s, 3 H), 4,38-4,56 (m, 2 H), 6,06 (s, 1 H), 6,16 (s, 1 H), 7,28-7,45 (m, 5 H), 8,05 (s, 1 H); LC-MS m/z 480 (M+Hf, LC-MS 482 (M+H+2)⁺.

Intermediário 8: 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila 1,1 -dióxido

N.

^Os ,⁰ 's'-.

1,1-Dióxido de (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (6,00 g, 14,54 mmol) dissolvido em DCM (100 ml) foi tratado com m-CPBA (2,51 g, 11,20 mmol) com agitação a 22°C durante 3 h. Adicionou-se mais m-CPBA (0,77 g, 3,44 mmol), e a mistura foi agitada durante mais 2 h. A mistura de reação foi tratada com 10 % de Na₂SO₃ depois vigorosamente agitada durante 1 h. A camada orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado em 330 g sílica-gel eluindo-se com de 10 a 60 % de EtOAc/hexanos dando material de partida de nitrila recuperado (1,33 g, 3,23 mmol, 22,2 % de rendimento) e o desejado 1,1-dióxido de (3R,5R)-3butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbonitrila (impuro) (1,99 g, 31,9 % de rendimento): RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,78 (t, 7=7,1 Hz, 3 H), 0,85 (t, 7=7,2 Hz, 3 H), 1,05-1,37 (m, 4 H), 1,38-1,51 (m, 1 H), 1,57-1,70 (m, 1 H), 1,78-1,89 (m, 1 H), 2,01-2,12 (m, 1 H), 3,40-3,53 (m, 2 H), 3,56 (s, 3 H), 6,28 (s, 1 H), 6,39 (s, 1 H), 7,34-7,58 (m, 5 H), 8,16 (s, 1 H),

8,26 (s, 1 H).

Intermediário 9: 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído o o o

Método 1: 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (7,42 g, 17,99 mmol) dissolvido em DCM (150 ml) foi tratado com IM de DIBAL-H em tolueno (36,0 ml, 36,0 mmol) a 0°C com agitação durante 1 h após o que LCMS indicou conversão completa. A mistura de reação foi despejada em uma mistura de gelo/HCl 1 N e agitada vigorosamente durante 1 h. A fase orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada dando um 5 sólido amarelo. O produto bruto foi dissolvido em 80 ml de EtOAc quente a que se adicionou 250 ml de hexanos até se tomar turva. A mistura foi deixada resfriar lentamente à temperatura ambiente e depois resfriada em um banho de gelo. O precipitado resultante foi removido por filtração, lavado com 20 % de EtOAc/hexanos frio, e seco ao ar dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil10 7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (4,00 g, 53,5 % de rendimento) como um sólido cristalino branco. O licormãe foi concentrado à aridez, e o resíduo foi purificado em 120 g de sílica-gel eluindo com de 20 a 40 % de EtOAc/hexanos dando produto adicional como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-í/g) δ ppm 0,74 (t, .7=7,0 Hz, 3 15 H) 0,81 (t, .7=7,4 Hz, 3 H) 0,96-1,29 (m, 4 H) 1,33-1,54 (m, 2 H) 1,68-1,81 (m, 1 H) 2,01-2,13 (m, 1 H) 2,80 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 3,13 (d, /=15,0 Hz, 1 H) 3,58 (s, 3 H) 3,63 (d, .7=15,0 Hz, 1 H) 5,98 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 6,27 (s, 1 H) 7,32-7,40 (m, 1 H) 7,40-7,49 (m, 4 H) 8,23 (s, 1 H) 10,27 (s, 1 H); LC-MS (ES⁺) m/z 416,3 [M+H].

Método 2: Uma solução 1,5 M de Dibal-H em tolueno (1,467

1, 2,20 mol) foi adicionada ao longo de 50 min a uma solução agitada de 1,1dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbonitrila (673,3 g, 1,63 mol) em CTUChpA 1) enquanto se mantinha a temp, da reação abaixo de 0°C. A mistura de reação foi agitada 25 durante 30 min com resfriamento a -10°C. A mistura de reação foi extinta por meio de adição muito lenta de HC1 1M (8 1) ao longo de 1,25 h enquanto se mantinha a temperatura de reação abaixo de +15°C (cuidado: adição dos primeiros 500 ml de HC1 é muito exotérmica!). Adicionou-se tolueno (7 1) e a mistura foi agitada durante 3 h. A fase aquosa foi removida e a camada orgânica foi lavada com HC1 1M (5 1). As camadas aquosas combinadas foram extraídas com CH₂C1₂ (2,5 1) e as camadas de CH₂C1₂ e CH₂Cl₂/tolueno foram combinadas e lavadas com 10 % de Na₂CO₃ (5 1), secas sobre MgSO₄, filtradas e parcialmente concentradas até formar-se uma pasta fluida espessa. A pasta fluida foi diluída com heptano (2-3 volumes) e envelhecida com agitação durante 15 min. Os sólidos foram recolhidos por meio de filtração e lavados com heptano. A torta de filtração foi seca ao ar durante 3 h e então seca em uma estufa a vácuo de um dia para o outro a 50°C dando 1,1-dióxido de (37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbaldeído como um sólido branco (533 g).

Método 3: 1,1-dióxido de (3Á,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (2402 g, 5,82 mol) e tolueno (20714g) foram adicionados em um reator e isto foi agitado a 40°C para formar uma solução. Em seguida, a solução foi resfriada a aproximadamente -35°C e tratada com uma solução de DIBAL-H (1,5 M em tolueno, 4472 g, 7,85 mol) enquanto se mantinha a temperatura interna em menos de -30°C. A reação foi agitada em aproximadamente -30°C durante uma hora até o completamento e então extinta por meio de adição lenta de solução de HC1 1 N (aproximadamente 40 kg) até pH 1,0. A reação foi aquecida a aproximadamente 30°C e agitada durante uma hora. A agitação foi interrompida e a camada aquosa inferior foi separada, e a orgânica foi lavada mais duas vezes com solução de HC1 1 N (7200 ml cada) enquanto se mantinha a temperatura em aproximadamente 40°C. As camadas aquosas foram combinadas e retrolavadas com tolueno (4126 g). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com cloreto de sódio aquoso saturado (9000 ml) e então evaporadas sob pressão reduzida a aproximadamente 12 litros. O solvente foi ainda mais evaporado sob pressão atmosférica a um volume final de aproximadamente 7 litros e tratado com heptanos (16420 g). O conteúdo foi resfriado a aproximadamente 15 °C e agitado durante aproximadamente duas horas. Os sólidos foram fragmentados manualmente e enxaguados do reator com heptanos (2 x 3260 g) e recolhidos por meio de filtração. O material sólido recolhido foi lavado com mais heptanos (3180 g) depois seco a 50°C dando 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (2128 g, 88 %). Intermediário 10: dimetil 3-({[(32?,5Ã)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)1, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)pentanodioato

1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (298 mg, 0,691 mmol) e 3-aminopentanodioato de dimetila (181 mg, 1,036 mmol) (preparado como em Journal of the American Chemical Society 2005, 127, 247) foram combinados em DCM (4 ml) e agitados durante 30 min. A mistura de reação foi tratada com NaHB(OAc)₃ (293 mg, 1,381 mmol) e agitado a 22°C durante 16 h sendo que após este tempo LCMS mostrou estar completa. A mistura foi diluída com DCM, lavada duas vezes com H₂O, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado em 40 g de sílica-gel eluindo com de 20 a 100 % de EtOAc/hexanos dando dimetil 3-({[(37?,5Ã)-3-butil-3etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodioato (304 mg, 0,515 mmol, 74,5 % de rendimento) como um óleo âmbar: LC-MS (ES⁺) m/z 591,3 [M+H]. Intermediário 11: dietil {(E)-2-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1- dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]etenil} fosfonato

Metanodiilbis(fosfonato) de tetraetila (645 mg, 2,24 mmol) dissolvido em THF (7 ml) foi tratado com NaH (83 mg, 2,075 mmol, dispersão a 60 % em óleo) com agitação a 22°C durante 30 min. Adicionou-se

1,1 -dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-

1.4- benzotiazepina-8-carbaldeido (300 mg, 0,722 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h à temperatura ambiente sendo que após este tempo LCMS indicou conversão completa. A mistura foi extinta com H₂O, repartida entre EtOAc e salmoura, e as fases foram separadas. A fase orgânica foi seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada a um óleo. O resíduo foi purificado em 40 g de sílica-gel eluindo com de 40 a 100 % de EtOAc/hexanos dando dietil {(E)2-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-

1.4- benzotiazepin-8-il]etenil}fosfonato (342 mg, 86 % de rendimento) como um óleo transparente: LC-MS (ES⁺) m/z 550,4 [M+H].

Intermediário 12: dimetil N-{[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-cistinato

1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (231 mg, 0,556 mmol) e dimetil L-cistinato (95 mg, 0,278 mmol) foram combinados em DCM (8 ml) e tratados com TEA (0,077 ml, 0,556 mmol) à temperatura ambiente durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (295 mg, 1,390 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h. A mistura foi repartida entre DCM e NaHCO₃ saturado, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas a um óleo transparente. O material bruto foi purificado em 40 g de silica eluindo-se com de 20 a 100 % de EtOAc/hexanos dando dimetil N{[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-cistinato (167 mg, 45,0 % de rendimento): RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,67-0,88 (m, 12 H) 0,96-1,29 (m, 8 H) 1,32-1,53 (m, 4 H) 1,66-1,80 (m, 2 H) 2,00-2,13 (m, 2 H) 2,54 (d, 7=10,0 Hz, 2 H) 2,57-2,70 (m, 2 H) 2,93-3,13 (m, 6 H) 3,42 (s, 7 H) 3,46-3,78 (m, 13 H) 5,94 (d, 7=9,6 Hz, 2 H) 6,07 (s, 2 H) 7,26-7,36 (m, 2 H) 7,37-7,46 (m, 8 H) 7,87-8,01 (m, 2 H); LC-MS (ES⁺) m/z 668,22 [M+H].

Intermediário 13: 1,1 -dimetiletil N- {[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-Lmetioninato

Uma pasta fluida de 1,1-dimetiletil L-metioninato (218 mg, 0,902 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada com TEA (126 μΐ, 0,902 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo adicionou-se

1,1 -dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,602 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,203 mmol), e a mistura de reação foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente em que após este tempo LCMS indicou conversão ao produto desejado. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi purificado em 40 g de silica eluindo com de 20 a 60 % de EtOAc/hexanos dando 1,1 -dimetiletil N- {[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}-Lmetioninato como um sólido branco (270 mg, 74 % de rendimento): RMN 'H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,98-1,28 (m, 4 H) 1,36 (s, 9 H) 1,38-1,53 (m, 2 H) 1,65-1,85 (m, 3 H) 2,03 (s, 3 H) 2,03-2,13 (m, 1 H) 2,33-2,43 (m, 1 H) 2,53 (br. s., 2 H) 2,55 (d, 7=4,3 Hz, 1 H) 3,03 (d, 7=14,8 Hz, 1 H) 3,09-3,17 (m, 1 H) 3,43 (s, 3 H) 3,52 (d, 7=14,8 Hz, 1 H) 3,62 (br. s, 2 H) 5,93 (d, 7=9,6 Hz, 1 H) 6,07 (s, 1 H) 7,25-7,36 (m, 1 H) 7,36-7,47 (m, 4 H) 7,94 (s, 1 H); LC-MS (ES⁺) m/z 605,3 [M+H],

Intermediário 14: 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído]

1,1-Dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (1,99 g, 4,64 mmol) dissolvido em DCM (25 ml) foi tratado com DIBAL-H 1M em tolueno (5,34 ml, 5,34 mmol) a 0°C por gotejamento com agitação durante 1 h. Adicionou-se uma segunda porção de DIBAL-H 1M (5,34 ml, 5,34 mmol), e a mistura foi agitada adicionalmente durante 2 h a 0°C em que após este tempo LCMS indicou conversão ao produto. Adicionou-se HC1 1 N (10 ml) à mistura e a mistura foi agitada vigorosamente durante 16 h. A fase orgânica foi isolada, e a fase aquosa foi extraída três vezes com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas à aridez. O resíduo foi purificado sobre 40 g de sílica-gel eluindo com de 10 a 50 % de EtOAc/hexanos dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4hidróxi-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8carbaldeído (1,42 g, 70,9 % de rendimento) como uma espuma branca: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7_Ô) δ ppm 0,78 (t, 7=7,1 Hz, 3 H), 0,85 (t, 7=7,3 Hz, 3 H), 1,02-1,38 (m, 4 H), 1,38-1,52 (m, 1 H), 1,56-1,73 (m, 1 H), 1,78-1,91 (m, 1 H), 2,01-2,15 (m, 1 H), 3,39-3,51 (m, 2 H), 3,55 (s, 3 H), 6,31 (s, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 7,32-7,75 (m, 5 H), 8,20 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 10,26 (s, 1 H). LCMS (ES⁺) m/z 432,2 [M+H].

Intermediário 15: {[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil2,3,4,5 -tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amina

Uma mistura de 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (468 mg, 1,134 mmol) e 10 % de paládio sobre carbono (60,4 mg, 0,567 mmol) em etanol (20 ml) recebeu adição de ácido clorídrico (0,279 ml, 3,40 mmol) e hidrogenada a 40 psi [276 kPa] de um dia para o outro, depois filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado via HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) dando o composto titular (621 mg, 79 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 8,07 - 8,46 (br.s, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,31 - 7,57 (m, 5H), 6,27 (s, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,12 - 4,27 (m, 1H), 3,98 - 4,12 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,38 - 3,48 (m, 1H), 3,29 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,14 - 2,38 (m, 1H), 1,80 - 1,99 (m, 1H), 1,44 - 1,75 (m, 2H), 1,14 - 1,38 (m, 3H), 0,97 - 1,15 (m, 1H), 0,90 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 417 (M+H)⁺·

Intermediário 16: N-{[(3Á,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil38

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-2-cloroacetamida

A uma solução gelada de {[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)- l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (50 mg, 0,120 mmol) em DCM (6 ml) adicionou-se piridina (0,097 ml, 1,20 mmol) e cloreto de cloroacetila (0,048 ml, 0,60 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro depois concentrada sob pressão reduzida dando um óleo amarelo claro. O composto titular bruto (55 mg, 92 %) foi usado sem purificação adicional: RMN Ή (CDC1₃) Ô ppm 7,27 - 7,45 (m, 5H), 6,91 - 7,13 (m, 1H), 6,17 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 4,44 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,05 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 3,53 (s, 3H), 3,37 (s, 1H), 3,02 (s, 2H), 2,09 - 2,24 (m, 1H), 1,69 - 1,90 (m, 1H), 0,99 - 1,60 (m, 6H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,80 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 494 (M+H)⁺.

Intermediário 17: (2E)-3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]-2-propenoato de etila

Em um tubo selado, uma solução de trifluorometanossulfonato de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-ila (3,5 g, 6,53 mmol) em DMF (30 ml) foi tratada com trietilamina (4,55 ml, 32,7 mmol), seguido de etil acrilato (3,56 ml, 32,7 mmol) e cloreto de bis(trifenilfosfino)paládio(II) (0,459 g, 0,653 mmol). A mistura de reação foi agitada em 120°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente e repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel (EtOAc: hexanos = 1:6 a 2:1) resultou no composto titular (3,06 g, 94 %) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃): δ ppm 8,21 (s, 1H), 7,85 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,30 - 7,48 (m, 5H), 6,56 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,19 (s, 1H), 6,06 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,18 - 4,30 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 3,44 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,02 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,08 - 2,26 (m, 1H), 1,76 - 1,93 (m, 1H), 1,38 - 1,54 (m, 3H), 1,28 - 1,35 (m, 3H), 1,03-1,21 (m, 2H), 0,88 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z

486 (M+J/)⁺.

Intermediário 18: 3-aminopentanodioato de dietila

ONO

EtO OEt

A uma solução de ácido β-glutâmico (500 mg, 3,40 mmol) em

EtOH (10 ml) adicionou-se cloreto de tionila (0,992 ml, 13,59 mmol) por gotejamento. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre DCM e solução saturada de carbonato de potássio. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida dando o composto titular (702 mg, 97 %) como um óleo incolor: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 4,04 - 4,27 (m, 4H), 3,46 - 3,74 (m, 1H), 2,24 - 2,60 (m, 4H), 1,09 - 1,29 (m, 6H).

Intermediário 19: 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-8-(3-bromopropil)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5 -fenil-2,3,4,5 -tetra-hidro-1,4-benzotiazepina

Br'

A uma solução de 3-[(3/?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l40 dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]-l-propanol (84,2 mg, 0,189 mmol) em THF (5 ml) adicionou-se trifenilfosfino (99 mg, 0,378 mmol) e tetrabrometo de carbono (125 mg, 0,378 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 10:90 a 50:50) resultou no composto titular (78 mg, 80 %) como um óleo transparente: ES-LCMS m/z 508 (M+Hf.

Intermediário 20: metanossulfonato de 3-[(3Á,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propila

A uma solução gelada de 3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-1 propanol (250 mg, 0,561 mmol) em DCM (10 ml) adicionou-se trietilamina (0,235 ml, 1,683 mmol) e cloreto de metanossulfonila (0,048 ml, 0,617 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida dando o produto titular (280 mg, 91 %) como um sólido amarelo claro: RMN ^!H (CDC1₃) δ ppm 7,82 (s, 1H), 7,27 - 7,52 (m, 5H), 6,11 (s, 1H), 6,01 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,04 - 4,26 (m, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,31 - 3,43 (m, 1H), 2,85 - 3,07 (m, 4H), 2,46 - 2,78 (m, 4H), 1,73 - 2,27 (m, 4H), 1,35 - 1,61 (m, 4H), 0,97 - 1,34 (m, 8H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,80 (t, J = 6,8 Hz, 3H). Intermediário 21: 4-[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]butanonitrila

A uma solução de metanossulfonato de 3-[(3R,5R)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propila (90 mg, 0,172 mmol) em DMSO (5 ml) adicionou-se cianeto de sódio (16,84 mg, 0,344 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C durante o fim de semana e repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 10:90 a 1:1) resultou no composto titular (76 mg, 95 %) como um sólido branco: RMN *H (CDC1₃) δ ppm 7,81 (s, 1H), 7,26 - 7,48 (m, 5H), 6,12 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 3,40 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,01 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 2,64 - 2,80 (m, 2H), 2,29 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,08 - 2,21 (m, 1H), 1,75 - 1,98 (m, 3H), 1,37 1,51 (m, 2H), 0,99 - 1,35 (m, 4H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,80 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 455 (M+H)⁺.

Intermediário 22: 1,1-dióxido de (3R,5R)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3-dihydro-l,4-benzotiazepin-4(577)-ol

1,1-dióxido de (3Ã,5R)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (627 mg, 1,305 mmol) dissolvido em DCM (20 ml) foi tratado com m-CPBA (292 mg, 1,305 mmol) com agitação a 0°C durante 1 h em que após este tempo LCMS indicou conversão completa ao produto. A mistura de reação foi tratada com 10 % de Na₂SO₃ com agitação vigorosa durante 15 min, diluída com DCM, e a fase orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez.

O resíduo foi purificado sobre 40 g de sílica-gel eluindo com DCM dando

1,1 -dióxido de (3R,5Ã)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3diidro-l,4-benzotiazepin-4(5H)-ol (621 mg, 96 % de rendimento) como uma espuma branca: RMN *H (400 MHz, DMSO-Jg) δ ppm 0,79 (t, 7=7,1 Hz, 3 Η), 0,85 (t, 7=7,3 Hz, 3 Η), 1,04-1,37 (m, 4 Η), 1,37-1,49 (m, 1 Η), 1,58-1,71 (m, 1 Η), 1,77-1,89 (m, 1 Η), 2,01-2,14 (m, 1 Η), 3,36-3,44 (m, 2 Η), 3,453,55 (m, 3 Η), 4,69 (s, 2 Η), 6,15 (s, 1 Η), 6,35 (s, 1 Η), 7,30-7,72 (m, 5 Η), 7,98 (s, 1 Η), 8,10 (s, 1 H); LC-MS (ES⁺) m/z 496,1, 498,1 [M+H], Intermediário 23: {[(3R,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} fosfonato de dietila

1,1-dióxido de (3R,57?)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-l,4-benzotiazepin-4(5H)-ol (171 mg, 0,344 mmol) dissolvido em tolueno (10 ml) foi tratado com trietil fosfito (1,189 ml, 6,80 mmol) depois aquecido em refluxo durante 16 h. A mistura de reação foi lavada com H₂O, seca sobre MgSO₄, filtrada e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado por meio de RP-HPLC (30 X 150 mm, coluna Cl8 5um H₂O Sunfire Column; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 15 a 100 %) dando dietil {[(3R,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfonato (48,5 mg, 25,4 % de rendimento) como um óleo transparente: RMN ’H (400 MHz, DMSO-7₆) □ ppm 0,79 (t, 7=6,6 Hz, 3 H), 0,82-0,93 (m, 3 H), 1,04-1,71 (m, 12 H), 1,912,02 (m, 1 H), 2,02-2,13 (m, 1 H), 3,13-3,28 (m, 2 H), 3,29-3,40 (m, 2 H), 3,41 (s, 3 H), 3,95 (m, 7=7,2, 7,2, 7,2, 7,2, 2,5 Hz, 4 H), 6,12 (s, 1 H), 6,286,38 (m, 1 H), 7,31-7,39 (m, 1 H), 7,42 (t, 7=7,4 Hz, 2 H), 7,46-7,60 (m, 2 H),

7,82 (d, .7=1,8 Hz, 1 Η), 7,99-8,08 (m, 1 H); LC-MS (ES⁺) m/z 554,31 [M+H]. Intermediários 24: [({[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} imino) dimetanodiil]bis(fosfonato) de tetraetila

{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l , l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (155 mg, 0,37 mmol) foi combinada com ácido tósico (catalítica) em tolueno (20 ml) e concentrada à aridez para remover por azeotropismo qualquer H₂O residual. Adicionou-se paraformaldeído (11,2 mg, 0,37 mmol) e tolueno (5 ml), e a mistura foi aquecida a 75°C com agitação vigorosa durante 30 minutos em que após este tempo adicionou-se dietil fosfito (0,048 ml, 0,37 mmol). Após 30 m em THF (20 ml) foi adicionada à mistura, e a mistura de reação homogênea resultante foi agitada de um dia para o outro a 75°C. A mistura foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (30 X 150 coluna Sunfire em condições ácidas· MeCN + 0,05 % de TFA e H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 30 % a 100 % ao longo de 10 minutos, de 100 % a 100 % a 12 minutos) dando [({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} imino)dimetanodiil]bis(fosfonato) de tetraetila (49,7 mg, 18,6 % de rendimento) como um óleo amarelo: LC-MS (ES⁺) m/z ΊΥ1,4 [M+H].

Intermediário 25: dietil [({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino) metil]fosfonato q 9

{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (45,8 mg, 0,110 mmol) foi combinada com paraformaldeído (3,47 mg, 0,110 mmol) e dietil fosfito (0,014 ml, 0,11 mmol) em THF (4 ml) e agitada durante 16 h a 75°C em que após este tempo todo o solvente se foi, e LCMS indicou <20 % de conversão. O THF foi substituída e adicionou-se mais dietil fosfito (0,043 ml, 0,330 mmol), e a mistura foi aquecida durante mais 24 h a 75°C em que após este tempo LCMS indicou ~50 % de conversão. Adicionou-se mais dietil fosfito (0,150 ml, 1,16 mmol) e o aquecimento foi continuado durante 24 h em que após este tempo LCMS indicou 70 % de completamento. Adicionou-se mais paraformaldeído (1,651 mg, 0,055 mmol) e o aquecimento foi continuado durante 24 h em que após este tempo LCMS indicou conversão completa de material de partida a produtos mono- e di-substituídos. A mistura foi concentrada à aridez e purificada em 24 g de sílica-gel eluindo com de 0 a 20 % de MeOH/DCM dando o desejado dietil [({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)metil]fosfonato (36,3 mg, 58,3 % de rendimento) como um óleo transparente: LC-MS (ES⁺) m/z 567,30 [M+H].

Intermediário 26: [(3Ã,55)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2.3.4.5- tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metanol

Etapa 1: A uma solução gelada de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8 carbonitrila (2,37 g, 5,74 mmol) em DCM (50 ml) adicionou-se DDQ (1,956 g, 8,62 mmol). A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 72 h. A mistura de reação foi repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca, (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc/hexanos = 1:4 a 3:1), seguida de purificação adicional usando sílicagel (MeOH:DCM = 0:100 a 5:95) resultou em 1,1-dióxido de (3Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (1,42 g, 59 %) como um sólido branco: RMN *H (CDC1₃) δ ppm 8,27 (s, 1H), 7,60 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,44 - 7,54 (m, 1H), 7,35 - 7,45 (m, 2H), 6,77 (s, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,63 - 3,86 (m, 3H), 1,02 - 1,76 (m, 8H), 0,89 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 411 (M+Ηγ.

Etapa 2: A uma solução gelada de 1,1-dióxido de (3Ã)-3-butil3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-l ,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (1,32 g, 3,22 mmol) em DCM (30 ml) adicionou-se por gotejamento DIBAL-H (6,43 ml, 6,43 mmol) como uma solução 1M em tolueno. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, tratada com solução de ácido clorídrico IN, e agitada durante 1 h após o que as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM, e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida dando 1,1-dióxido de (3Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (1,0 g, 75 %) como um sólido branco: RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 10,48 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,59 - 7,68 (m, 2H), 7,43 - 7,52 (m, 1H), 7,34 - 7,43 (m, 2H), 6,80 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,63 - 3,83 (m, 2H), 0,99 - 1,36 (m, 5H), 0,88 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 414 (M+H)⁺.

Etapa 3: A uma solução de 1,1-dióxido de (37?)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (720 mg, 1,741 mmol) em THF (20 ml) adicionou-se complexo borano-THF (3,48 ml, solução 1 M em THF, 3,48 mmol) por gotejamento. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro, depois a 40°C durante mais 24 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, extinta com MeOH, agitada durante 30 min, e concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se MeOH várias vezes e isto foi evaporado sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 20:80 a 50:50) resultou no composto titular (306 mg, 42 %) como um sólido branco: RMN ^!H (CDCI3) δ ppm 8,05 (s, 1H), 7,30 - 7,53 (m, 5H), 6,18 (s, 1H), 6,08 (br. s., 1H), 4,53 - 4,82 (m, 2H), 3,56 (s, 3H), 3,43 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,38 (dd, J = 14,7, 7,4 Hz, 1H), 2,14 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 1,71 - 1,87 (m, 1H), 1,44 - 1,57 (m, 2H), 1,09 - 1,42 (m, 5H), 0,91 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,79 (t, J = 7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 418 (M+7/)⁺·

Intermediário 27: 1,1-dióxido de (3Ã,5S)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído

kJ

A uma solução de [(3Ã,5»S)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metanol (460 mg, 1,102 mmol) em DCM (10 ml) adicionou-se periodinano de Dess-Martin (491 mg, 1,157 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h e filtrada através de um leito de sílica-gel. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida dando o composto titular (391 mg, 85 % de rendimento) como um sólido branco: RMN ^!H (CDCI3) δ ppm 10,35 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,33 - 7,52 (m, 5H), 6,30 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,47 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,40 (dd, J - 14,9, 7,4 Hz, 1H), 1,83 (dd, J = 14,9, 7,4 Hz, 1H), 1,11 - 1,47 (m, 5H), 0,91 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,78 (t, J - 7,4 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 416 (M+H)⁺.

Intermediário 28: hidrogeno sulfato de 2-amino-2-butil-hexanosila

\. nh₂ yL /0^ /OH /7^ Λ __/ O O

Etapa 1: A uma pasta fluida agitada de norleucina (100 g, 762 mmol) em EtOH (715 ml) a 0°C adicionou-se cloreto de tionila (58,4 ml, 800 mmol) ao longo ode 1 h mantendo-se uma temperatura de <5°C. A reação foi deixada aquecer lentamente a 25°C e agitada de um dia para o outro. A solução foi aquecida a 65°C durante 3 h depois concentrada sob pressão reduzida dando cloridrato de etil norleucinato (149 g, 761 mmol, 100 % de rendimento) como um sólido branco após secagem a 50°C sob alto vácuo durante 15 h.

Etapa 2: Uma pasta fluida de sal de cloridrato de etil norleucinato (149 g, 761 mmol) em DCM (1352 ml) a 25°C foi tratada com MgSO₄ (92 g, 761 mmol) seguido de TEA (223 ml, 1599 mmol) por gotejamento ao longo de 1 h. Após agitação durante 1 h, adicionou-se benzaldeído (77 ml, 761 mmol) via funil de adição durante 30 min seguido de mais MgSO₄, (92 g, 761 mmol). A pasta fluida foi agitada a 25°C durante 60 h depois filtrada [e] lavada com DCM. O filtrado foi concentrado em vácuo depois triturado com MTBE. A mistura foi filtrada, e o sólido foi lavado com MTBE. O filtrado foi concentrado em vácuo dando um óleo amarelo claro (>95 % de rendimento).

Etapa 3: Uma mistura de NaH (16,53 g, 413 mmol) em DMF (293 ml) a 25°C foi agitada durante 10 min depois resfriada a 0°C após o que se adicionou uma solução de etil N-(fenilmetilideno)norleucinato (81,8 g, 331 mmol) em DMF (58,5 ml) via cânula por gotejamento. A reação foi aquecida a 25°C e agitada durante 2 h. Uma solução de iodobutano (44,6 ml, 364 mmol) em DMF (29,3 ml) foi adicionada via cânula, e a mistura de reação foi agitada a 25°C durante 20 h. A reação foi despejada em NH₄C1 saturado (250 ml) e MTBE (250 ml), depois agitada durante 10 min. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com MTBE (lx). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo dando um óleo amarelo com >95 % de rendimento.

Etapa 4: 2-butil-N-(fenilmetilideno)norleucinato de etila puro (112,3 g, 370 mmol) foi tratado com HC1 1 N (444 ml, 444 mmol) e agitado a 25°C durante 30 min. A reação foi lavada com hexanos (2 x 200 ml) depois a camada aquosa foi resfriada a 0°C e ajustada em pH 12 com uma combinação de NaOH 3N e 6N. A mistura aquosa foi extraída com MTBE (4x) depois as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo dando 2-butilnorleucinato de etila (74 g, 93 % de rendimento) como um óleo amarelo.

Etapa 5: Uma solução de 2-butilnorleucinato de etila (37 g, 172 mmol) em THF (275 ml) a 25°C foi tratada com 2M de LAH (86 ml, 172 mmol) via um funil de adição ao longo de 30 min. A mistura de reação foi aquecida a 65°C e agitada durante 2 h, depois deixada retomar à temperatura ambiente enquanto era agitada de um dia para o outro. A reação foi resfriada a 0°C depois tratada sequencialmente com H₂O (7,82 ml), 15 % de NaOH (7,82 ml), e H₂O (23,5 ml). A mistura foi agitada durante 2 h depois filtrada e lavada com THF. O filtrado foi concentrado em vácuo dando 2-amino-2-butil1-hexanol (29,8 g, >95 % de rendimento) como um óleo amarelo espesso que solidificou ao descansar.

Etapa 6: Uma solução de 2-amino-2-butil-l-hexanol (62,8 g, 362 mmol) em EtOAc (454 ml) a 25°C foi tratada com ácido clorossulfônico (29,1 ml, 435 mmol). A reação foi aquecida a 40°C e agitada durante 3 h, depois resfriada a 25°C. A mistura espessa foi colocada em um refrigerador de um dia para o outro, depois filtrada lavando-se com EtOAc frio. O sólido foi seco dando hidrogênio sulfato de 2-amino-2-butil-hexanosila como um sólido branco com >50 % de rendimento: RMN 'H (D₂O) δ ppm 3,92 (s, 2H), 1,42 - 1,65 (m, 4H), 1,02 - 1,25 (m, 8H), 0,72 (t, J = 6,7 Hz, 6H).

Intermediário 29: S-[5-bromo-4-(metilóxi)-2-(fenilcarbonil) fenil] dietiltiocarbamato

Etapa 1: A uma solução de 2-bromo-l,4-bis(metilóxi)benzeno (203 g, 934 mmol) e cloreto de benzoíla (125 ml, 1074 mmol) em DCM (800 ml) a 5°C adicionou-se ácido tríflico (83 ml, 934 mmol) ao longo de 1 h. A mistura de reação foi deixada aquecer à temperatura ambiente e depois lentamente aquecida até refluxo delicado, e agitada durante 48 h. A mistura de reação foi resfriada, e adicionou-se MeOH (20 ml) e continuou-se agitando durante 30 min. A mistura de reação foi despejada em H₂O e gelo e agitada durante 1 h. As camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com H₂O, secas sobre MgSO₄, e concentradas a um sólido laranja. Adicionou-se MTBE (500 ml) e a mistura foi agitada de um dia para o outro. O sólido resultante foi filtrado, enxaguado com uma proporção de 1:1 de MTBE/hexanos e seco ao ar dando [4-bromo-2,5-bis(metilóxi)fenil](fenil) metanona (210,6 g, 70 %) como um sólido cinza claro: RMN *H (DMSO-d₆) δ ppm 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,62 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,42 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,59 (s, 3H).

Etapa 2: Uma solução de [4-bromo-2,5-bis(metilóxi)fenil] (fenil)metanona (290 g, 0,903 mol) em DCM (1,5 1) foi adicionada por gotejamento ao longo de 1 h a uma solução agitada de BC1₃ 1M em DCM (1,13 1, 1,13 mol) enquanto se mantinha a temperatura de reação abaixo de 5°C. A mistura de reação foi agitada em ou abaixo de 0°C durante 30 min e então extinta por meio de adição lenta de MeOH (500 ml) ao longo de 30 min a 10°C. Adicionou-se HC1 2N (1 1) a 15°C ao longo de 30 min. As camadas foram separadas, e a fase orgânica foi concentrada por meio de rotovap a aproximadamente 500 ml diluída com hexanos. Os cristais amarelos resultantes foram recolhidos por meio de filtração e secos a o ar dando [4bromo-2-hidróxi-5-(metilóxi)fenil](fenil)metanona (258 g, 93 %): RMN ^!H (CDC1₃) δ ppm 11,67 (s, 1H), 7,64 - 7,72 (m, 2H), 7,59 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 7,33 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 3,71 (s, 3H)

Etapa 3: t-butóxido de potássio sólido (116 g, 1,03 mol) foi adicionado de maneira fracionada a uma solução agitada de [4-bromo-2hidróxi-5-(metilóxi)fenil](fenil)metanona (253,33 g, 0,825 mol) em DMF (800 ml) enquanto se mantinha a temperatura interna abaixo de 20°C. Manteve-se a agitação com resfriamento durante 15 min até que a temperatura interna fosse de ca. 0°C. O banho de resfriamento foi removido e a agitação foi prosseguida durante 30 min com aquecimento a 6°C de temperatura interna. Uma solução de cloreto de ΛζΑ-dietil tiocarbamoila (150 g, 0,99 mol) em DMF (300 ml) foi então adicionada em um fluxo lento ao longo de 5 min. A mistura escura resultante foi então aquecida a 60°C e mantida durante 3 h. A mistura foi diluída com MTBE (1,5 1) e H₂O (1,5 1) depois agitada rapidamente. As camadas foram separadas, e a fase aquosa foi extraída com MTBE (1,5 1). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaOH 0,2N (2 x 1,5 1) e uma vez com salmoura (1 1). A fase orgânica vermelha escura foi seca sobre MgSO₄, filtrada e concentrada a 1 1 de uma pasta fluida espessa, extração com heptano. Os sólidos foram recolhidos por meio de filtração e lavagem com heptano e secos ao ar dando D-[5-bromo-4(metilóxi)-2-(fenilcarbonil)fenil] dietiltiocarbamato (301,3 g, 86 %) como um sólido laranja claro: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,81 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,52 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,36 - 7,45 (m, 3H), 7,00 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,63 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,22 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,06 (q, 6H)

Etapa 4: Uma mistura agitada de D-[5-bromo-4-(metilóxi)-2(fenilcarbonil)fenil] dietiltiocarbamato (301 g, 0,71 mol) em difenil éter (1 1) foi aquecida gradualmente a 215°C de temperatura interna ao longo ode lhe mantida a esta temperatura durante 3,5 h. A solução escura foi resfriada a 100°C e tratada com Darco G-60 (20 g). A mistura foi resfriada adicionalmente a 70°C com agitação e filtrada através de celite e lavagem com heptano. O filtrado foi diluído com heptano (4 1) com resfriamento a 5°C e envelhecido a 0°C ao longo de 30 min. O sobrenadante foi removido por meio de decantação, e os sólidos remanescentes foram triturados com hexanos. Os sólidos remanescentes foram dissolvidos em DCM e concentrados em vácuo a um sólido que foi triturado com hexanos e recolhido por meio de filtração. O material foi seco sob alto vácuo dando *S'-[5-bromo-4(metilóxi)-2-(fenilcarbonil)fenil] dietiltiocarbamato (224 g, 74 %) como um sólido cinza escuro: RMN *H (CDCI3) δ ppm 7,72 - 7,82 (m, 3H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 6,90 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,15-3,29 (br. s., 2H), 3,02-3,15 (br. s., 2H), 0,68 - 1,09 (m, 6H).

Intermediário______30: [2- [(2-amino-2-butil-hexanosyl)tio] -4-bromo-5 (metilóxi)fenil] (fenil)metanona

Uma suspensão de S-[5-bromo-4-(metilóxi)-2-(fenilcarbonil) fenil]dietiltiocarbamato (Intermediário 29) (15 g, 35,5 mmol) em EtOH (75 ml) foi tratada com 6M KOH (23,68 ml, 142 mmol) depois aquecida em refluxo durante 3 h. A reação foi diluída com mais EtOH (200 ml) depois aquecida a 70°C durante 15 h. A reação foi concentrada até [formar-se] um óleo vermelho espesso. Em um frasco separado, o hidrogênio sulfato de 2amino-2-butil-hexanosila (9,90 g, 39,1 mmol) foi dissolvido em H₂O (25 ml) depois aquecido a 85°C após o que a solução de tiofenolato em H₂O foi adicionada via pipeta. Tiofenolato residual foi transferido com mínimo EtOH e H₂O. A mistura de reação foi agitada em 85°C durante 15 h depois resfriada à temperatura ambiente. A reação foi despejada em H₂O e extraída com DCM (3X). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo dando um óleo vermelho espesso. O resíduo foi purificado via cromatografia em sílica-gel usando DCM/MeOH com 1 % de NHiOH (gradiente de 100/0 % a 90:10 ao longo de 30 min) dando [2-[(2-amino-2-butil-hexanosil)tio]-4-bromo-5(metilóxi)fenil](fenil)metanona (16,3 g, 96 % de rendimento) como um óleo vermelho espesso: RMN 'H (CDC1₃) δ ppm 7,76 - 7,83 (m, 3H), 7,60 (t, J — 7,4 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 6,84 (s, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,81 (s, 2H), 0,78 - 1,55 (m, 18H); LC-MS (ES⁺) m/z 478,2 [M+H], 480,2 [M+H].

Intermediário_______31: [2-[(2-amino-2-butil-hexanosil)tio]-4-bromo-5(metilóxi)fenil] (fenil)metanona

Uma solução de [2-[(2-amino-2-butil-hexanosil)tio]-4-bromo5-(metilóxi)fenil](fenil)metanona (16,3 g, 34,1 mmol) em tolueno (341 ml) foi tratada com ácido cítrico (0,327 g, 1,703 mmol) depois aquecida em refluxo durante 15 h. A reação foi equipada com uma armadilha Dean-Stark depois aquecida a 130°C durante 10 h após o que se adicionou mais ácido cítrico (325 mg). A agitação foi continuada a 130°C durante 15 h depois adicionou-se mais ácido cítrico (100 mg) e a agitação a 130°C foi continuada durante 10 h. A reação foi concentrada em vácuo depois purificada por meio de cromatografia em SiO₂ usando hexanos:EtOAc (de 100:0 a 80:20) como eluente dando 8-bromo-3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-1,4benzotiazepina (10 g, 63,7 % de rendimento) como um óleo que solidificou a um sólido cor de cobre ao descansar: RMN ^!H (CDC1₃) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,53 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,30 - 7,44 (m, 3H), 6,59 (s, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,23 (s, 2H), 1,16 - 1,66 (m, 12H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 6H); LC-MS (ES⁺) m/z 460,2 [M+H], 462,2 [M+H].

Intermediário 32: metila 3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-1,4-

Monóxido de carbono foi borbulhado através de uma mistura de 8-bromo-3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-l,4-benzotiazepina (Intermediário 31) (10 g, 21,72 mmol), Pd(OAc)₂ (0,488 g, 2,172 mmol), e dppp (0,896 g, 2,172 mmol) em DMSO (71,6 ml) durante 15 min. A mistura de reação foi tratada com MeOH (3,51 ml, 87 mmol) e TEA (4,54 ml, 32,6 mmol) depois aquecida a 70°C durante 3 h em que após este tempo adicionou-se mais MeOH (3,51 ml, 87 mmol). Aquecimento sob atmosfera de CO foi continuada durante 39 h. A mistura de reação foi diluída com MTBE depois filtrada através de um plugue de celite e lavagem com MTBE. O filtrado foi despejado em H₂O depois a camada aquosa separada foi extraída com MTBE (lx). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado via de sinalização cromatografia em SiO₂ usando hexanos:EtOAc (de 100:0 a 60:40) como eluente dando 3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3diidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxilato de metila (86 % de rendimento) como um óleo laranja claro: RMN 'H (CDC1₃) δ ppm 8,01 (s, 1H), 7,53 (d, J — 6,8 Hz, 2H), 7,30 - 7,44 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,22 (s, 2H), 1,14 - 1,65 (m, 12H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 6H); LC-MS (ES⁺) m/z 440,3 [M+H].

Intermediário 33: [3,3-dibutil-7-(metiloxi)-5-fenil-2,3-diidro-l ,4benzotiazepin-8-il]metanol

HO

Uma solução de 3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro-l,4benzotiazepina-8-carboxilato de metila (8,2 g, 18,65 mmol) em THF (34,0 ml) a 25°C foi tratada com LAH 2M em THF (13,99 ml, 28,0 mmol) por gotejamento. A reação foi agitada durante 15 min depois extinta com H₂O (1,1 ml), 15 % NaOH (1,1 ml), e H₂O (3,4 ml). Após agitação durante 30 min, a reação foi filtrada através de um leito de celite e lavagem com THF. O filtrado foi concentrado em vácuo dando [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3diidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metanol (7,7 g, 100 % de rendimento): RMN ’H (CDC1₃) δ ppm 7,49 - 7,59 (m, 3H), 7,30 - 7,42 (m, 3H), 6,58 (s, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,22 (s, 2H), 1,13 - 1,65 (m, 12H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 6H); LC-MS (ES⁺) m/z 412,3 [M+H].

Intermediário 34: [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-il]metanol

HO

Uma solução de [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3-diidro1,4-benzotiazepin-8-il]metanol (7,7 g, 18,71 mmol) em THF (51,1 ml) a 25°C foi tratada com BH3.THF (20,58 ml, 20,58 mmol) por gotejamento depois a reação foi agitada durante 2 h. A reação foi extinta com MeOH (30 ml) depois concentrada sob pressão reduzida dando uma espuma branca bruta. Purificação do resíduo por meio de cromatografia em SiO₂ usando gradiente de 6:l/hexanos:EtOAc a 2:l/hexanos:EtOAc resultou em uma mistura de material de partida não reagido e produto (aproximadamente 85.15, respectivamente). Este material foi novamente submetido a condições idênticas e purificado de uma maneira similar dando [3,3-dibutil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metanol (6,56 g, 85 % de rendimento) contendo 5-10 % imina: RMN 'H (CDC1₃) δ ppm 7,50 (s, 1H), 7,24 - 7,47 (m, 5H), 6,09 (s, 1H), 5,78 (s, 1H), 4,59 (d, J = 3,1 Hz, 2H), 3,49 (s, 3H), 2,76 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 2,50 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 2,01 - 2,24 (m, 2H), .08 - 1,72 (m, 10H), 0,90 (t, J = 6,9 Hz, 3H), 0,85 (t, J = 7,2 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 414,3 [M+H],

Intermediário 35: [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro- 1,4-benzotiazepin-8-il]metanol

Uma solução de [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metanol (6,56 g, 15,86 mmol) em TFA (52,4 ml) a 25°C foi tratada com 30 % de H₂O₂ (3,24 ml, 31,7 mmol), e a reação foi agitada durante 1 h. Após resfriamento em um banho de gelo, adicionou-se H₂O (300 ml) e THF (120 ml) seguido de 15 % de NaOH depois NaOH 6N até a solução atingir pH 12. Após agitação durante 1 h, adicionou-se uma solução de 10 % de Na₂SO₃ (60 ml), e a solução foi agitada aé cessar o borbulhamento. A reação foi tratada com DCM, e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2x) depois as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em SiO₂ usando um gradiente de DCM/MeOH (de 100:0 a 95:5) dando [3,3dibutil-7-(metilóxi)-1, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin8-il]metanol (6,7 g, 95 % de rendimento) como um sólido branco. O material continha 10-15 % de imina: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 8,05 (s, 1H), 7,29 - 7,49 (m, 5H), 6,19 (s, 1H), 6,08 (br. s., 1H), 4,56 - 4,76 (m, 2H), 3,56 (s, 3H), 3,44 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,07 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,05 - 2,30 (m, 1H), 1,85 (m, 1H), 1,02 - 1,64 (m, 10H), 0,91 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 446,3 [M+H].

Intermediário 36: 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldefdo

Uma solução de [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metanol (415 mg, 0,931 mmol) em DCM (9313 μΐ) a 25°C foi tratada com periodinano de Dess-Martin (415 mg, 0,978 mmol) e agitada durante 1 h. A reação foi filtrada através de um fino leito de SiO₂ lavando-se com EtOAC, depois o filtrado foi concentrado em vácuo dando um sólido branco. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em SiO2 usando gradiente de hexanos/EtOAc dando 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbaldeído (310 mg, 75 % de rendimento) como um sólido branco: RMN (CDC1₃) δ ppm 10,35 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,32 - 7,56 (m, 5H), 6,30 (s, 1H), 6,13 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,47 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,05 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,12 - 2,29 (m, 1H), 1,78 - 1,92 (m, 1H), 1,03 - 1,61 (m, 10H), 0,91 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7,1 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 444,2 [M+H].

Intermediário 37: {[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfonato de dietila

Etapa 1: Uma solução de imidazol (306 mg, 4,49 mmol) em DCM (2,7 ml) a 0°C foi tratada com trifenilfosfmo (589 mg, 2,244 mmol) seguido de Br₂ (116 μΐ, 2,244 mmol). Após agitação durante 5 min, uma solução de [3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidrol,4-benzotiazepin-8-il]metanol (Intermediário 35) (500 mg, 1,122 mmol) em DCM (2,7 ml) foi adicionada lentamente, depois a reação foi agitada em 0°C durante 2 h. A reação foi tratada com 10 % de Na₂SO₃ aq., as camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO4), filtradas através de um leito de SiO₂, e concentradas em vácuo dando 1,1-dióxido de 8-(bromometil)-3,3-dibutil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (571 mg, >99 % de rendimento).

Etapa 2: Uma solução de 1,1-dióxido de 8-(bromometil)-3,3dibutil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina (571 mg, 1,123 mmol) em tolueno (5,3 ml) a 25°C foi tratada com trietil fosfito (295 μΐ, 1,684 mmol) depois aquecida em refluxo durante 18 h. A reação foi concentrada em vácuo a um óleo, depois purificada por meio de cromatografia em SiO₂ usando 4:l/EtOAc:hexanos a 100 % de EtOAc dando {[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}fosfonato de dietila (285 mg, 44,9 % de rendimento): RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 7,99 (d, J — 2,7 Hz, 1H), 7,29 - 7,68 (m, 5H), 6,16 (s, 1H), 6,06 (br. s, 1H), 3,95 - 4,18 (m, 4H), 3,53 (s, 3H), 3,43 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,15 - 3,26 (m, 2H), 3,04 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,09 2,30 (m, 1H), 1,79 - 1,94 (m, 1H), 1,04 - 1,63 (m, 16H), 0,92 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,1 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 566,4 [M+H].

Intermediário 38: trifluorometanossulfonato de (3R,5R)-3-butil-3-etil-8(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-7-ila

Uma solução de (3R,5R)-3-butil-3-etil-8-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-7-ol 1,1-dióxido (9,24 g, 22,90 mmol) e piridina dissolvida em DCM (300 ml) foi tratada com anidrido tríflico (4,64 ml, 27,5 mmol) dissolvido em DCM (80 ml) por gotejamento com agitação e resfriamento em um banho de gelo. A mistura de reação foi deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada durante 1 h em que após este tempo LCMS indicou conversão completa. A mistura de reação foi lavada duas vezes com HC1 diluído, seca sobre MgSO₄, filtrada e concentrada a uma espuma laranja: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H), 0,81 (t, 7=7,3 Hz, 3 H), 0,94 - 1,29 (m, 4 H), 1,47 (q, J=7,3 Hz, 2 H), 1,67 - 1,80 (m, 1 H), 1,95 - 2,07 (m, 1 H), 2,80 (d, 7=9,6 Hz, 1 H), 3,27 (d, 7—15,2 Hz, 1 H), 3,76 (d, 7=15,2 Hz, 1 H), 3,99 (s, 3 H), 5,86 (d, 7=9,6 Hz, 1 H), 6,34 (s, 1 H), 7,27 - 7,52 (m, 5 H), 7,79 (s, 1 H).

Intermediário 39: 1,1-dióxido de (3R,5Ã)-3-butil-3-etil-A,A-dimetil-8(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-7-amina

Trifluorometanossulfonato de (3R,5R)-3-butil-3-etil-8(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-7-ila (5,57 g, 10,40 mmol), Pd₂(dba)₃ (0,286 g, 0,312 mmol), 2-bifenilil-di-tbutilfosfino (0,372 g, 1,248 mmol), e K₃PO₄ (2,318 g, 10,92 mmol) foram combinados em 1,2-dimetoxietano (DME) (10 ml) e agitados durante 10 min enquanto se purgava com N₂. Adicionou-se 2M de dimetilamina em THF (40 ml, 80 mmol), e a mistura foi aquecida durante 16 h a 100°C em um banho de óleo, em que após este tempo LCMS indicou >90 % de conversão com significativa formação de fenol. A mistura de reação foi filtrada através Celite, e o filtrado foi concentrado à aridez. O resíduo foi repartido entre DCM e NaHCO₃ aq., e a fase orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado sobre 330 g de sílicagel eluindo com de 20 a 40 % de EtOAc/hexanos dando 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7V,A-dimetil-8-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-7-amina (3,12 g, 7,25 mmol, 69,7 % de rendimento) como um sólido branco: RMN *H (400 MHz, DMSO-tíQ δ ppm 0,68 - 0,87 (m, 6 H), 0,96 - 1,29 (m, 4 H), 1,33 - 1,54 (m, 2 H), 1,64 - 1,83 (m, 1 H), 2,00 - 2,12 (m, 1 H), 2,46 (d, 7=10,0 Hz, 1 H), 2,53 (s, 6 H), 3,06 (d, 7=14,6 Hz, 1 H), 3,51 (d, 7=14,6 Hz, 1 H), 3,82 (s, 3 H), 5,85 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 7,26 - 7,34 (m, 1 H), 7,34 - 7,46 (m, 5 H); LC-MS (ES⁺) m/z 431,33 [M+H]. Intermediário 40: 1,1-dióxido de (3Ã,5R)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-ol

(3R, 5R)-3-butil-3-etil-A,7V-dimetil-8-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-7-amina 1,1-dióxido (5,25 g, 12,19 mmol) dissolvido em DCM (100 ml) foi tratado com cloreto de alumínio (6,50 g, 48,8 mmol) durante 2 h a 23°C em que após este tempo LCMS indicou conversão completa mas com formação de subproduto significativo. A mistura foi extinta com gelo H₂O, e a mistura foi agitada vigorosamente durante 15 min. A mistura foi extraída quatro vezes com DCM, e as orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas à aridez. O pH da fase aquosa foi ajustado em 13 com NaOH 6N, a mistura foi extraída quatro vezes com DCM, e as orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas à aridez. Os extratos com pH 1 (1,47 g) e extratos com pH 13 (1,01 g) foram combinados e purificados em 220 g de sílica-gel eluindo com de 15 a 45 % de EtOAc/hexanos dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-ol (1,76 g, 4,22 mmol, 34,7 % de rendimento) como um vidro cor de cobre. RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,69 - 0,83 (m, 6 H), 0,96 - 1,28 (m, 4 H), 1,31 -1,54 (m, 2 H), 1,65 - 1,77 (m, 1 H), 2,00 - 2,12 (m, 1 H), 2,38 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 3,04 (d, 7=14,8 Hz, 1 H), 3,33 (s, 6 H), 3,45 (d, 7=14,8 Hz, 1 H), 5,80 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 7,23 - 7,33 (m, 1 H), 7,33 - 7,52 (m, 5 H), 9,81 (s, 1 H). LC-MS (ES') m/z 415,18 [M-l]; LCMS (ES⁺) m/z 417,20 [M+H].

Intermediário 41: trifluorometanossulfonato de (3R,5R)-3-butil-7(dimetilamino)-3-etil-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-ila

F

A uma solução de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-7(dimetilamino)-3-etil-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4-benzotiazepin-8-ol (1,24 g, 2,98 mmol) em DCM (10 ml) a 22°C adicionou-se piridina (0,602 ml, 7,44 mmol), seguido de anidrido tríflico (0,603 ml, 3,57 mmol), e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi lavada duas vezes com H₂O, e a camada orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado sobre 330 g de sílica eluindo com DCM dando trifluorometanossulfonato de (3Ã,5Ã)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepin-8-ila (1,42 g, 2,59 mmol, 87 % de rendimento) como uma espuma branca: LC-MS (ES⁺) m/z 549,17 [M+H].

Intermediário 42: 1,1-dióxido de (3Á,5Ã)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila o o

Trifluorometanossulfonato de (3Ã,5Ã)-3-butil-7(dimetilamino)-3-etil-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-ila (1,42 g, 2,59 mmol) dissolvido em DMF (5 ml) foi combinado com dicianozinco (0,456 g, 3,88 mmol), Pd₂(dba)3 (0,012 g, 0,013 mmol), e DPPF (0,016 g, 0,028 mmol) e purgado com N₂. A mistura foi aquecida a 80°C durante 16 h em que após este tempo LCMS indicou ~25 % de conversão. A mistura de reação foi purgada durante 1 h com N₂, adicionou-se mais dicianozinco (0,456 g, 3,88 mmol), Pd₂(dba)₃ (0,036 g, 0,039 mmol), e DPPF (0,050 g, 0,091 mmol), e a mistura foi purgada mais 30 min com N₂. A mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 40 h, em que após este tempo LCMS indicou significativa formação de subproduto. A mistura foi repartida entre EtOAc/H₂O e filtrada através de Celite. A fase orgânica foi isolada, lavada com H₂O e salmoura, seca sobre MgSO₄, filtrada e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado sobre 120 g de silica-gel eluído com de 20 a 100 % de EtOAc/hexanos dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina8-carbonitrila (contaminado com fenol) (340 mg, 0,799 mmol, 30,9 % de rendimento: LC-MS (ES') m/z 424,18 [M-l], LC-MS (ES⁺) m/z 426,35 [M+H].

Intermediário 43: 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5 fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeido

1,1-dióxido de (37?,5Ã)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbonitrila (340 mg, 0,799 mmol) dissolvido em tolueno (5 ml) foi tratado com DIBAL-H IM em tolueno (0,919 ml, 0,919 mmol) a 0°C e agitado durante 1 h. A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro em que após este tempo LCMS indicou ~20 % de conversão. Adicionou-se mais DIBAL-H 1M (131 mg, 0,919 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente em que após este tempo LCMS indicou >80 % de conversão. A mistura de reação foi diluída com DCM e extinta com HC1 1 N. As fases foram separadas, e a fase aquosa foi extraída duas vezes com DCM. As orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas à aridez. O resíduo foi purificado sobre 40 g de sílica-gel eluída com de 20 a 40 % de EtOAc/hexanos dando 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3butil-7-(dimetilamino)-3 -etil-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8carbaldeído (40 mg, 0,093 mmol, 11,7 % de rendimento): RMN Ή (400 MHz, DMSO-<7₆) δ ppm 0,74 (t, .7=6,9 Hz, 3 H), 0,80 (t, .7=7,4 Hz, 3 H), 0,93 - 1,27 (m, 4 H), 1,29 - 1,55 (m, 2 H), 1,64 - 1,82 (m, 1 H), 2,01 - 2,21 (m, 1 H), 2,64 - 2,73 (m, 1 H), 2,75 (s, 6 H), 3,06 (d, .7=14,8 Hz, 1 H), 3,56 (d, .7=14,6 Hz, 1 H), 5,85 - 5,93 (m, 1 H), 6,04 (s, 1 H), 7,26 - 7,52 (m, 5 H), 8,21 (s, 1 H), 9,94 (s, 1 H).

Intermediário 44: 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-A-metil-A,7bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxamida

A uma solução de 1,1-dióxido de ácido (37?,5Ã)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carboxílico (Intermediário 4, 174 mg, 0,403 mmol) em ΛζΑ-dimetilformamida (5 ml) adicionou-se cloridrato de N,O-dimetil-hidroxilamina (59,0 mg, 0,605 mmol), DIEA (0,282 ml, 1,613 mmol) e HATU (307 mg, 0,806 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação via cromatografia em SiO₂ (EtOAc:Hex = de 1:3 a 3:1) resultou no composto titular (168 mg, 95 % puro, 83 %) como um óleo amarelo claro: ES-LCMS m/z

475 (M+Hf.

Intermediário 45: dietil {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metilideno} propanodioato

A uma solução de 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (Intermediário 9, 109 mg, 0,262 mmol) em tolueno (3 ml) adicionou-se dietil malonato (0,048 ml, 0,315 mmol) e piperidina (0,013 ml, 0,131 mmol). A mistura de reação foi agitada em 100°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação via cromatografia em SiO₂ (EtOAc/Hex = 10:90 a 80:20) resultou no composto titular (146 mg, 90 % puro, 90 %) como um óleo amarelo claro: ES-LCMS m/z 558 (A/+H)⁺.

Intermediário 46:

EtO.

EtO.

EtO.

A uma solução de dietil malonato (0,096 ml, 0,628 mmol) em etanol (3 ml) adicionou-se etóxido de sódio (0,254 ml, 0,681 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min e tratada com uma solução de dietil {[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metilideno}propanodioato (Intermediário 45, 146 mg, 0,262 mmol) em etanol (2 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, acidificada com ácido acético a pH 3-4 e parcialmente concentrada sob pressão reduzida para se remover os solventes orgânicos sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre água e diclorometano. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca, (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:Hex=l:5 a 2:1) resultou no composto titular (78, 120 mg, 84 % puro, 53 %) como um óleo incolor: RMN Ή (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 7,97 (s, 1H), 7,26 - 7,48 (m, 5H), 6,08 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,43 (br s, 1H), 4,04 - 4,20 (m, 6H), 3,86 - 4,03 (m, 4H), 3,37 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,90 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,07 - 2,23 (m, 2H), 2,04 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 1,74 - 1,90 (m, 1H), 1,34 - 1,54 (m, 2H), 1,17 - 1,27 (m, 8H), 0,97 - 1,10 (m, 6H), 0,66 - 0,92 (m, 6H); ES-LCMS m/z 718 (M+H)⁺.

Intermediário 47: dimetil 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] carbonil} amino)pentanodioato

MeOOC

1,1-Dióxido de ácido (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carboxílico (Intermediário 4, 100 mg, 0,232 mmol) em diclorometano (5 ml) recebeu a adição de DIPEA (0,202 ml, 1,159 mmol) e HATU (88 mg, 0,232 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min, seguido de adição de dimetil 3-aminopentanodioato (81 mg, 0,463 mmol), e agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi então repartida entre água e diclorometano. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SC>4), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel usando MeOH:DCM=0:100 a 10:90 resultou no composto titular (212 mg, 63 % puro, 98 %): ES-LCMS m/z 589 (M+H)+. Intermediário 48: Dimetil 3-aminopentanodioato o nh₂ o

Dimetil (2Z)-3-amino-2-pentenodioato (613 g, 3,54 mol) foi adicionado em porções a TF A (3,15 1) com agitação enquanto se mantinha a temperatura de reação abaixo de 30°C com resfriamento externo. Após a maior parte dos sólidos ter dissolvido adicionou-se 1M de BH₃-THF (1,53 1, 1,53 mol) por gotejamento ao longo de 1 h enquanto se mantinha a temperatura de reação entre 18-21 °C. A mistura de reação foi resfriada a 10°C e extinta por meio de adição de água por gotejamento (500 ml) ao longo de 5 min enquanto se mantinha a temperatura de reação entre 10-15°C. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e depois filtrada. O filtrado foi concentrado para se remover a maior parte do TFA, e o material resultante foi dissolvido em CH₂C1₂ (4 1). A solução de CH₂C1₂ foi adicionada lentamente a uma solução agitada de K3PO4 (3 kg) em água (3 1) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada rapidamente durante 10 min. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH₂C1₂ (2 1). As camadas de CH₂C1₂ combinadas foram secas sobre MgSO₄, filtradas e concentradas dando dimetil 3-aminopentanodioato (568 g) como um líquido dourado: RMN Ή (DMSO-d₆) δ ppm 3,56 (s, 6 H), 3,35 (m, 1 H), 2,42 (dd, J=16Hz, J=5,3 Hz, 2 H), 2,29 (dd, J=16 Hz, J=8 Hz, 2 H), 1,93 (br s, 2 H). Intermediário 49: Dimetil 3-aminopentanodioato (sal de ácido acético) o nh₃ ⁺ o ch₃co₂·

Uma solução de dimetil 3-aminopentanodioato (568 g, 3,24 mol) em í-butil metil éter (2,3 1) foi resfriada em um banho de gelo e ácido acético glacial (195, 3,24 mol) foi adicionada por gotejamento enquanto se mantinha a temp, da reação em cerca de 15°C. A mistura resultante foi semeada com uma pequena quantidade do produto cristalino desejado e agitada durante 90 min com resfriamento a 5°C. O precipitado resultante foi recolhido por meio de filtração e lavado com uma proporção de 1:1 de í-butil metil éter/heptano. A torta de filtração foi seca sob vácuo dando o sal de ácido acético de dimetil 3-aminopentanodioato como um sólido branco-sujo (640 g): RMN *H (DMSO-d₆) δ ppm 5,30 (br s, 3 H), 3,56 (s, 6 H), 3,36 (m, 1 H), 2,44 (dd, J=16, J=5, 2 H), 2,31 (dd, J=16, J=8, 2 H), 1,86 (s, 3 H).

Intermediário 50: Dimetil 3 -( {[(3R,5R)-3 -butil-3 -etil-7-(metilóxi)-1,1dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)pentanodioato

Ácido acético glacial (420 g, 6,99 mol) foi adicionado a uma mistura agitada de 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (857 g, 2,06 mol) em iPrOAc (8 1) seguido de adição do sal de ácido acético de dimetil 3aminopentanodioato (645 g, 2,74 mol). Triacetoxiboroidreto de sódio (656 g, 3,09 mol) foi adicionado em porções ao longo de 45 min enquanto se mantinha a temperatura de reação abaixo de 22°C. APOS 1 h, a mistura de reação foi lavada com água (8 1) e 10 % de Na₂CO₃ (8 1). A fase orgânica foi seca sobre MgSO₄, filtrada e concentrada dando dimetil 3({[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidrol,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodioato como um óleo (1,2 kg):

RMN Ή (DMSO-d₆) δ ppm 7,90 (s, 1 H), 7,42-7,34 (m, 4 H), 7,34-7,26 (m, 1 H), 6,04 (s, 1 H), 5,91 (d, J=9,87 Hz, 1 H), 3,67-3,53 (m, 3 H), 3,55 (s, 3 H), 3,54 (s, 3 H), 3,50 (d, J=15 Hz, 1 H), 3,40 (s, 3 H), 3,23 (m, 1 H), 3,01 (d, J=15 Hz, 1 H), 2,58-2,39 (m, 4 H), 2,03 (m, 1 H), 2,16 (br s, 1 H), 1,76-1,66 (m, 1 H), 1,50-1,30 (m, 2 H), 1,27-0,96 (m, 4 H), 0,77 (t, J=7,5 Hz, 3 H), 0,73 (t, J=7,0 Hz, 3 H).

II. Preparação de compostos da invenção

Exemplo 1: ácido 3-({[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]carbonil}amino)-2,2- dimetilpropanóico

HO

Etapa 1: A uma solução em DMF (0,5 ml) de 1,1-dióxido de ácido (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carboxílico (0,025 g, 0,058 mmol) e etil 3-amino-2,2dimetilpropanoato (preparado como descrito na US-2.370.015) (0,009 g,

0,064 mmol) a 0°C adicionou-se HATU (0,024 g, 0,064 mmol) seguido de

DIEA (0,012 ml, 0,070 mmol). A reação foi agitada durante 10 min depois aquecida à temperatura ambiente. Após lha reação foi concentrada a meio volume, e adicionou-se H₂O (3 ml). O precipitado foi filtrado e seco, depois usado sem purificação adicional na etapa seguinte.

Etapa 2: O material foi dissolvido em THF (0,500 ml), e adicionou-se H₂O (0,250 ml) juntamente com um excesso de LiOH (7 mg, 0,174 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h depois concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em silica usando DCM/MeOH dando o composto titular (0,020 g, 63 %): RMN *H (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 8,71 (s, 1 H) 8,13 (br. s., 1 H) 7,27-7,52 (m, 5 H) 6,21 (br. s., 1 H) 6,08 (br. s., 1 H) 3,31-3,70 (m, 7 H) 3,11 (br. s., 1 H) 2,18 (br. s., 1 H) 1,83 (br. s, 1 H) 0,99-1,65 (m, 12 H) 0,71-0,96 (m, 6 H); LC-MS m/z 531 (M+/7)⁺.

Exemplo 2: ácido ({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]carbonil} amino) metanossulfônico

Preparado de maneira análoga ao Exemplo 1 etapa 1 via acoplamento HATU amida usando ácido aminometanossulfônico (0,013 g, 0,116 mmol) e 1,1-dióxido de ácido (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxílico (50 mg, 0,12 mmol) dando o composto titular (45 mg, 73 %): RMN ’Η (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 8,47 (s, 1 H) 8,28 (parcialmente resolvido t, 7=5,72 Hz, 1 H) 7,47 (d, 7=3,62 Hz, 5 H) 6,29 (br. s., 1 H) 6,02 (br. s., 1 H) 3,43-4,72 (m, 6 H + H₂O) 3,22 (br. s., 1 H) 2,14 (br. s., 1 H) 1,80 (br. s., 1 H) 1,45 (br. s., 2 H) 0,93-1,32 (m, 5 H) 0,63-0,93 (m, 6 H); ES-LCMS m/z 525 (M+H)⁺.

Exemplo 3: trifluoroacetato de ácido 2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)

1, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] carbonil} amino)etanossulfônico

preparado de maneira análoga ao Exemplo 1 etapa 1 via acoplamento de amida HATU usando taurina (0,014 g, 0,116 mmol) e 1,1dióxido de ácido (3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxílico (0,050 g, 0,116 mmol). Purificação via RP-HPLC (coluna 30x150 H₂O Sunfire Cl8 Column) usando MeCN/H₂O 10-100 % com 0,1 % de TFA como fase móvel ao longo de 8 min resultou no composto titular (0,015 g, 19 %): RMN 'H (400 MHz, MeOH-J₄) δ ppm 8,74 (s, 1 H) 7,48-7,72 (m, 5 H) 6,68 (s, 1 H) 6,47 (s, 1 H) 4,02 (d, 7=15,83 Hz, 1 H) 3,75-3,83 (m, 2 H) 3,72 (s, 3 H) 3,55 (d, 7=15,83 Hz, 1 H) 2,91-3,02 (m, 2 H) 2,77 (br. s, 1 H) 2,13 (br. s., 2 H) 1,66 (s, 1 H) 1,43 (d, 7=6,55 Hz, 3 H) 1,02 (parcialmente separado t, 7=7,48 Hz, 4 H) 0,91 (t, 7=7,13 Hz, 3 H); ESLCMS m/z 539 (M+H)⁺.

Exemplo 4: cloridrato de ácido 2,2'-({[(3Á,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] carbonil} imino)diacético

HO

Preparado de maneira análoga ao Exemplo 1 via acoplamento de amida HATU usando dietiliminoacetato (0,022 g, 0,116 mmol) e 1,1dióxido de ácido (37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepina-8-carboxílico (0,050 g, 0,116 mmol) seguido de

LiOH (10 mg, 0,24 mmol) condições de hidrólise dando o composto titular (0,045 g, 63 %): RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 12,76 (br. s., 2 H) 7,73 (s, 1 H) 7,22-7,60 (m, 5 H) 6,15 (s, 1 H) 5,97 (br. s., 1 H) 4,15 (br. s., 2 H) 3,86 (br. s., 2 H) 3,01-3,53 (m, 4 H + H₂O) 2,08 (br. s., 1 H) 1,66-1,91 (m, 1 H) 0,95-1,63 (m, 7 H) 0,64-0,92 (m, 6 H); ES-LCMS m/z 547 (M+H)⁺.

Exemplo 5: sal de trifluoroacetato de ácido [(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metanossulfônico

HO.

A uma solução de (3Ã,5Ã)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7 (metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-1,1 -dióxido (0,100 g, 0,21 mmol) em 1,4-dioxano (1 ml) adicionou-se uma solução de sulfito de sódio (131 mg, 1,04 mmol) em H₂O (1 ml). A mistura foi agitada sob refluxo de um dia para o outro, depois concentrada sob vácuo, e a mistura de reação bruta foi lavada com HC1 1 N. O sobrenadante foi decantado deixando um sólido borrachoso branco que foi triturado com DCM e hexanos dando um sólido que foi recolhido via filtração. Purificação foi realizada usando HPLC prep. Agilent (Cl 8 empacotamento com MeCN, H₂O com 0,1 % de TF A como a fase móvel) dando o composto titular (83 mg, 66 %) como um sal de trifluoroacetato: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 8,17 (br. s., 1 H) 7,59 (br. s., 5 H) 6,33 (br. s., 2 H) 3,14-4,46 (m, 6 H + H₂O) 2,02 (br. s, 2 H) 1,60 (br. s., 1 H) 1,33 (br. s, 3 H) 0,62-1,13 (m, 7 H); ES-LCMS m/z 482 (M+H)⁺. Exemplo 6: sal de cloridrato de {[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} fosfônico

HO Ι-

Ό

Etapa 1: Preparado de maneira análoga ao Exemplo 5 via alquilação usando trietil fosfito (0,352 ml, 2,01 mmol) e 1,1-dióxido de (37?,52?)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro1,4-benzotiazepina (0,920 g, 1,92 mmol) em tolueno (10 ml).

Etapa 2: O éster de fosfonato da etapa precedente foi dissolvido em 2 ml de HC1 6 N e 1 ml de EtOH, depois aquecido em refluxo durante 6 h. A reação foi resfriada, depois concentrada. O resíduo foi dissolvido em EtOH depois concentrado dando o composto titular (0,86 g, 85 %) como um sal de cloridrato: RMN 'H (400 MHz, MeOH-7₄) δ ppm 8,04 (d, 7=2,34 Hz, 1 H) 7,57 (s, 5 H) 6,46 (s, 1 H) 6,36 (s, 1 H) 3,79 (d, 7=15,51 Hz,

H) 3,58 (s, 3 H) 3,45 (d, 7=15,51 Hz, 1 H) 3,16-3,25 (m, 1 H) 2,99-3,12 (m,

H) 2,68 (br. s., 1 H) 1,97 (dd, 7=14,15, 7,12 Hz, 2 H) 1,64 (dd, 7=14,15, 7,32 Hz, 1 H) 1,23-1,46 (m, 3 H) 0,98 (t, 7=7,41 Hz, 4 H) 0,89 (t, 7=6,88 Hz,

H); ES-LCMS m/z 482 (M+H)¹.

Exemplo 7: sal de cloridrato de 2,2'-({[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il] metil} imino)diacético

OH

Etapa 1: A uma solução em MeCN de (37?,57?)-8(bromometil)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-1,1-dióxido (77 mg, 0,16 mmol) adicionou-se ácido dietil iminodiacético (33 m , 0,18 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 65°C durante 4 h depois concentrada e concentrada a um óleo espesso. Cromatografia sobre silica usando hexanos/EtOAc resultou em um óleo transparente.

Etapa 2: H₂O e THF foram adicionados ao produto da etapa 1 juntamente com LiOH (15 mg, 0,36 mmol), e a mistura foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente para hidrolisar o ácido diacético. A mistura de reação foi concentrada a meio volume, e adicionou-se HC1 1 N para acidificar o conteúdo da reação, depois as orgânicas foram extraias 2x DCM. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas. O resíduo foi triturado (DCM/EtOAc), filtrado, e seco. O material foi redissolvido em DCM/EtOAc/MeOH, depois concentrado a um sólido e mantido sob N₂ de um dia para o outro para secar. O composto titular foi obtido como um sal de cloridrato como um sólido branco. (45 mg, 47 % em 2 etapas): RMN *H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 12,36 (br. s., 2 H) 8,03 (s, 1 H) 7,16-7,55 (m, 5 H) 6,09 (s, 1 H) 5,95 (br. s., 1 H) 3,81 (br. s., 2 H) 3,16-3,59 (m, 26 H) 3,07 (d, 7=14,83 Hz, 1 H) 2,51 (br. s., 14 H) 2,08 (br. s., 1 H) 1,75 (br. s., 1 H) 0,98-1,56 (m, 8 H) 0,62-0,90 (m, 6 H); ES-LCMS m/z 533 (M+J7)⁺.

Exemplo 8: (3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carboxamida-1,1 -dióxido

Uma mistura de (37?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbonitrila-1,1 -dióxido (3 8 mg, 0,092 mmol) e K₂CO₃ (25 mg, 0,184 mmol) em DMSO (1 ml) foi resfriada a 0°C, e 30 % peso/peso H₂O₂ (0,016 ml, 0,153 mmol) foram adicionados por gotejamento. A mistura resultante foi aquecida à temperatura ambiente, depois agitada durante 2 h. Adicionou-se H₂O, depois o precipitado resultante foi filtrado e seco dando o composto titular (40 mg, 95 %): RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 7,81 (s, 1 H) 6,51-6,76 (m, 5 H) 5,58 (s, 1 H) 5,31 (s, 1 H) 2,85 (s, 3 H) 2,74 (d, 7=14,92 Hz, 1 H) 2,36 (d, 7=14,92 Hz, 1 H) 1,87 (s, 2 H) 1,41-1,55 (m, 1 H) 0,96-1,13 (m, 1 H) 0,75-0,91 (m, 1 H) 0,61-0,75 (m, 1 H) 0,25-0,59 (m, 4 H) 0,13 (t, 7=7,37 Hz, 3 H) 0,03 (t, 7=6,82 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 431 (M+Hf.

Exemplo 9: sal de amônio do ácido (2E)-3-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-2propenóico

HO.

A uma solução de (2£)-3-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-2-propenoato de etila (300 mg, 0,618 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (15 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (74,0 mg, 3,09 mmol), e a mistura resultante de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover os solvente orgânicos. A camada aquosa resultante foi acidificada a pH 1 com ácido clorídrico IN, depois a camada aquosa foi extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com H₂O, salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,5 % de NH₃-H₂O) resultou no composto titular (201 mg, 65 %, como um sal de amônio) como um sólido branco: RMN ^!H (MeOH-d₄): δ ppm 8,06 (s, 1H), 7,27 - 7,48 (m, 5H), 6,30 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,65 (s, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,49 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,07 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,52 - 2,76 (m, 4H), 2,11 - 2,28 (m, 1H), 1,69 - 1,84 (m, 1H), 1,56 (s, 1H), 1,42 (s, 1H), 1,04 - 1,33 (m, 4H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz,

3H), 0,78 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 458 (M+H)⁺.

Exemplo 10: ácido 3-[(37?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanóico

HO.

Etapa 1: Uma mistura de (2E)-3-[(37?,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-2propenoato de etila (0,27 g, 0,556 mmol) e 10 % de Pd/C (0,012 g) em EtOH (10 ml) à temperatura ambiente foi hidrogenada sob uma atmosfera de hidrogênio a 1 atmosfera de um dia para o outro. A mistura de reação foi filtrada através de terra de diatomáceas e lavada com EtOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida dando 3-[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanoato de etila (182 mg, 57 %) como um óleo transparente: ES-LCMS m/z 488 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de 3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanoato de etila (172 mg, 0,353 mmol) em uma mistura a 1:1:2 de THF/MeOH/H₂O (12 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (84 mg, 3,53 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois parcialmente concentrada sob pressão reduzida par remover solventes orgânicos. A camada aquosa resultante foi então acidificada a pH 12 com ácido clorídrico IN e extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida dando o composto titular (149 mg, 87 %) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃): δ ppm 7,85 (s, 1H), 7,41 (d, J = 7,0 Hz, 5H), 5,97 6,32 (m, 2H), 3,50 (s, 3H), 3,41 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,78 - 2,95 (m, 2H),

2,48 - 2,66 (m, 2H), 2,09 - 2,39 (m, 1H), 1,77 - 1,97 (m, 1H), 1,13-1,38 (m,

5H), 0,98 - 1,14 (m, 1H), 0,88 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H);

ES-LCMS m/z 458

Exemplo 11: 3-[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-jV-(metilsulfonil) propanamida

A uma solução de ácido 3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em uma mistura a 2:1 de DCM/THF (6 ml) adicionou-se EDC (25,03 mg, 0,131 mmol), DMAP (15,95 mg, 0,131 mmol) e metanossulfonamida (12,42 mg, 0,131 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (25 mg, 34 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN 'Η (CDC1₃) δ ppm 7,84 (s, 1H), 7,44 - 7,65 (m, 5H), 6,61 (s, 2H), 6,39 (s, 1H), 3,84 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,43 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,05 - 3,20 (m, 1H), 2,73 - 2,85 (m, 1H), 2,46 - 2,67 (m, 2H), 2,25 - 2,39 (m, 1H), 2,06 - 2,20 (m, 1H), 1,69 - 1,96 (m, 2H), 1,26 - 1,48 (m, 3H), 0,94 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 537 (M+Hf.

Exemplo 12: 3-[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-7V-hidroxipropanamida

A uma solução de ácido 3-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanóico (50,1 mg, 0,109 mmol) em THF (5 ml) adicionou-se EDC (41,8 mg, 0,218 mmol), DMAP (39,9 mg, 0,327 mmol) e cloridrato de hidroxilamina (37,9 mg, 0,545 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre H₂O e DCM e a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (24 mg, 35 %, sal de TFA) como um sólido branco: RMN ^]Η (CDC1₃): δ ppm 7,74 - 7,85 (m, 1H), 7,40 - 7,68 (m, 5H), 6,60 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 3,84 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,51 - 3,63 (m, 3H), 3,46 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 2,84 - 3,05 (m, 1H), 2,45 - 2,79 (m, 2H), 2,23 - 2,42 (m, 1H), 1,69 - 2,23 (m, 4H), 1,28 - 1,52 (m, 3H), 0,92 - 1,13 (m, 4H), 0,76 - 0,92 (m, 3H); ES-LCMS m/z 475 (M+Hf.

Exemplo 13: ácido ({3-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]propanoil}amino) metanossulfônico

o

A uma solução de ácido 3-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em uma mistura a 2:1 de DCM/THF (6 ml) adicionou-se EDC (62,6 mg, 0,326 mmol), DMAP (39,9 mg, 0,326 mmol) e EDC (62,6 mg, 0,326 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (11,4 mg, 18 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^!H (CDC1₃) δ ppm 7,85 (s, 1H), 7,35 - 7,77 (m, 5H), 6,51 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 3,85 (d, J = 15,2 Hz, 2H), 3,67 (s, 3H), 3,21 - 3,50 (m, 2H), 2,92 (br. s., 1H), 2,58 - 2,80 (m, 2H), 2,12 - 2,52 (m, 2H), 1,69 - 1,97 (m, 2H), 1,31 (m, 3H), 0,63 - 0,99 (m, 6H); ES-LCMS m/z 553 (M+H)⁺.

Exemplo 14: N- {3-[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, 1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]propanoil}glicina

HO.

Etapa 1: A uma solução de ácido 3-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em DCM (4 ml) adicionou-se DIPEA (0,095 ml, 0,544 mmol), HATU (124 mg, 0,326 mmol) e cloridrato de glicina metil éster (19,39 mg, 0,218 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel (MeOH:DCM — 0:100 a 10:90) resultou em A-{3-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanoil}glicinato de metila (45 mg, 76 %) como um óleo transparente: ES-LCMS m/z 531

Etapa 2: A uma solução de N-{3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanoil}glicinato de metila (43 mg, 0,081 mmol) em uma mistura a 2:1:1 de THF/MeOH/H₂O (8 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (1,941 mg, 0,081 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois parcialmente concentrada para remover os solventes orgânicos. A camada aquosa resultante foi diluída com H₂O e acidificada a pH 1 com ácido clorídrico IN. A camada aquosa foi extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 10:90) resultou no produto titular (21 mg, 47 %) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,83 (s, 1H), 7,31 - 7,62 (m, 5H), 6,02 - 6,37 (m, 3H), 3,89 (br. s., 2H), 3,49 (s, 3H), 3,34 - 3,44 (m, 1H), 3,14 - 3,33 (m, 1H), 3,02 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 2,70 - 2,90 (m, 1H), 2,27 - 2,66 (m, 3H), 1,76 -

1,96 (m, 1H), 0,49 - 0,93 (m, 13H); ES-LCMS m/z 515

Exemplo 15: sal de trifluoroacetato de ácido 2-({3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanoil} amino)etanossulfônico

A uma solução de ácido 3-[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em uma mistura a 2:1 de DCM/THF (6 ml) adicionou-se EDC (25,03 mg, 0,131 mmol), DMAP (15,95 mg, 0,131 mmol) e taurina (16,34 mg, 0,131 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (4,6 mg, 7 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 7,40 - 8,17 (m, 6H), 6,59 (br. s., 1H), 6,46 (br. s., 1H), 5,79

6,18 (m, 1H), 3,05 - 4,00 (m, 7H), 1,68 - 2,97 (m, 12H), 1,34-1,38 (m, 3H), 0,62 - 1,12 (m, 6H); ES-LCMS m/z 567 (M+Hf.

Exemplo 16: 7V-{3-[(37?,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanoil} -2-metilalanina

HO.

Etapa 1: A uma solução de ácido 3-[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em DCM (4 ml) adicionou-se DIPEA (0,057 ml, 0,326 mmol), HATU (62,0 mg, 0,163 mmol) e cloridrato de metil alfaaminoisobutirato (20,05 mg, 0,131 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 10:90) resultou no metil N-{3-[(3Á,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propanoil} -2metilalaninato (56,8 mg, 89 %) como um óleo transparente: ES-LCMS m/z 559

Etapa 2: A uma solução de metil N-{3-[(3Á,57?)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanoil}-2-metilalaninato (54 mg, 0,097 mmol) em uma mistura a 2:1:1 de THF/MeOH/H₂O (8 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (23,15 mg, 0,966 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos. A camada aquosa resultante foi diluída com H₂O e acidificada a pH 1 com ácido clorídrico IN. A camada aquosa foi extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH:DCM= 0:100 a 10:90) resultou no composto titular (40 mg, 72 %) como um sólido branco: RMN ’Η (CDC1₃) δ ppm 7,82 (s, 1H), 7,29 7,55 (m, 5H), 6,11 (s, 1H), 6,01 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,38 (d, J = 14,8 Hz, 2H), 3,06 (d, J = 14,8 Hz, 2H), 2,84 - 2,99 (m, 3H), 2,78 (s, 1H), 2,37 - 2,55 (m, 2H), 2,17 (br. s., 1H), 1,83 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,00 - 1,34 (m, 9H), 0,86 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,80 (t, J = 7,1 Hz, 4H); ES-LCMS m/z 545 (M+//)⁺·

Exemplo 17: sal de trifluoroacetato de ácido 3-({3-[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanoil} amino)pentanodióico

HO,C.

HO.

Etapa 1: A uma solução de ácido 3-[(3Ã,5J?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanóico (100 mg, 0,218 mmol) em DCM (6 ml) adicionou-se DIPEA (0,190 ml, 1,088 mmol) e ELATU (165 mg, 0,435 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min, depois tratada com dietil 3-aminopentanodioato (66,3 mg, 0,326 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel (EtOAcrhexanos = 1:3 a 3:1) resultou em dietil 3-({3-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanoil}amino)pentanodioato (137 mg, 96 %) como um óleo incolor: ESLCMS m/z 645 (M+/7)⁺.

Etapa 2: A uma solução de dietil 3-({3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanoil}amino)pentanodioato (137mg, 0,212 mmol) em uma mistura a

1:1:1 de THF/MeOH7H₂O (6 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (25,4 mg, 1,062 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, acidificada com ácido acético a pH 3-4, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no produto titular (92 mg, 60 %, sal de TF A) como sólido branco: RMN ^]H (MeOH-d₄) δ ppm 7,90 (s, 1H), 7,48 - 7,62 (m, 5H), 6,44 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 4,33 - 4,48 (m, 1H), 3,81 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,46 (d, J = 15,6 Hz, 2H), 2,78 - 3,03 (m, 2H), 2,60 - 2,75 (m, 1H), 2,48 - 2,58 (m, 4H), 2,37 - 2,46 (m, 2H), 1,86 - 2,13 (m, 2H), 1,49 - 1,67 (m, 1H), 1,33-1,39 (m, 3H), 0,96 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,87 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 589 (Àf+/7)⁺·

Exemplo 18: ácido 2,2'-({3-[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]propanoil}imino)diacético

HO.

HO.

Etapa 1: A uma solução de ácido 3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] propanóico (50 mg, 0,109 mmol) em uma mistura a 2:1 de DCM/THF (6 ml) adicionou-se DMAP (39,9 mg, 0,326 mmol), EDC (62,6 mg, 0,326 mmol) e dietil 2,2'-iminodiacetato (41,2 mg, 0,218 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois repartida entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 10:90 a 50:50) resultou em dietil 2,2'-({3[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidrol,4-benzotiazepin-8-il]propanoil}imino)diacetato (44,8 mg, 65 %) como um óleo transparente: ES-LCMS m/z 631 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de dietil 2,2'-({3-[(3Ã,57?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanoil}imino)diacetato (44,8 mg, 0,071 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (9 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (85 mg, 3,55 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, acidificada com ácido clorídrico IN a pH 1 e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no produto titular (23 mg, 53 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,84 (s, 1H), 7,61 - 7,75 (m, 2H), 7,37 - 7,59 (m, 3H), 6,54 (br. s., 1H), 6,42 (s, 1H),

3.96 - 4,25 (m, 2H), 3,72 - 3,88 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 3,23 - 3,70 (m, 11H),

2.97 - 3,13 (m, 1H), 2,50 - 2,95 (m, 2H), 2,31 - 2,48 (m, J = 14,1 Hz, 1H), 1,69 - 2,09 (m, 3H), 0,55 - 1,45 (m, 8H); ES-LCMS m/z 575 (M+H/.

Exemplo 19: 3-[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-1 -propanol

A uma solução gelada de ácido 3-[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propanóico (100 mg, 0,218 mmol) em THF (5 ml) adicionou-se complexo borano-THF (0,653 ml, 0,653 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois extinta por meio de adição de MeOH por gotejamento. A mistura de reação foi agitada durante 30 min, depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recolhido com MeOH e evaporado novamente sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado usando sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 10:90) resultou no composto titular (96 mg, 94 %) como um óleo incolor: RMN ’Ή (CDC1₃) δ ppm 7,84 (s, 1H),

7,26 - 7,48 (m, 5H), 6,11 (s, 1H), 6,01 (s, 1H), 3,58 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,48 (s, 3H), 3,40 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,00 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,56 - 2,75 (m, 2H), 2,02 - 2,25 (m, 1H), 1,69 - 1,92 (m, 3H), 0,99 - 1,52 (m, 14H), 0,86 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,80 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 446 (M+H)⁺.

Exemplo 20: ácido 3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] -1 -propanossulfônico

A uma solução de 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-8-(3-bromopropil)3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (70 mg, 0,138 mmol) em uma mistura a 1:1 de EtOH/H₂O (10 ml) adicionou-se sulfito de sódio (868 mg, 6,88 mmol). A mistura de reação foi agitada em refluxo de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e parcialmente concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos. Depois a camada aquosa foi acidificada a pH 1 com ácido clorídrico IN. A camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. Purificação em sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 20:80) resultou no composto titular (27,2 mg, 38 %) como um sólido branco: RMN ^!H (CDC1₃) δ ppm (br. s., 1H), 7,16 - 7,60 (m, 5H), 6,06 (br. s., 2H), 2,33 - 3,63 (m, 14H), 0,47 - 2,26 (m, 12H); ES-LCMS m/z 510 (M+H)⁺.

Exemplo 21: sal de trifluoroacetato de ácido {3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propil} fosfônico

Etapa 1: A uma solução de dietilfosfito (119 mg, 0,859 mmol) em THF (5 ml) adicionou-se hidreto de sódio (27,5 mg, 0,687 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 min, seguido de adição por gotejamento de metanossulfonato de 3-[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]propila (90 mg, 0,172 mmol) em THF (5 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre ácido clorídrico IN e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO4), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 10:90 a 100:0) resultou em dietil {3-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]propil}fosfonato (55 mg, 53 %) como um sólido branco: ES-LCMS m/z 566 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de dietil {3-[(3Á,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8iljpropil}fosfonato (50 mg, 0,088 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se bromotrimetilsilano (0,115 ml, 0,884 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (25 mg, 43 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 7,90 (s, 1H), 7,39 - 7,60 (m, 5H), 6,42 (s, 1H), 6,32 (s, 1H), 3,79 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,37 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,73 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,51 - 2,66 (m, 1H), 1,75 - 2,10 (m, 4H), 1,48 - 1,72 (m, 3H), 1,20 - 1,45 (m, 3H), 0,99 - 1,13 (m, 1H), 0,95 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 510 (M+H)⁺.

Exemplo 22: sal de trifluoroacetato de ácido 2-({3-[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-

A uma solução de metanossulfonato de 3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]propila (90 mg, 0,172 mmol) em DMF (5 ml) adicionou-se carbonato de potássio (238 mg, 1,719 mmol) e taurina (108 mg, 0,859 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, acidificada com ácido clorídrico IN a pH 1 e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN7H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (22 mg, 15 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^ΓΗ (MeOH-d₄) δ ppm 7,42 - 7,65 (m, 5H), 6,48 (s, 1H), 6,34 (s, 1H), 3,77 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,47 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,95 - 3,12 (m, 4H), 2,51 - 2,88 (m, 3H), 1,84 - 2,11 (m, 4H), 1,54 - 1,69 (m, 7,4 Hz, 1H), 1,23 1,45 (m, 3H), 1,00 - 1,10 (m, 1H), 0,95 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,87 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 553 (M+//)⁺.Exemplo 23: sal de trifluoroacetato de ácido 4-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidrol,4-benzotiazepin-8-il]butanóico

Uma mistura de 4-[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]butanonitrila (40 mg, 0,088 mmol) e 37 % de ácido clorídrico (4 ml) foi agitada a 100°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se MeOH para transferir o resíduo para um frasco, e a solução foi concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RPHPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFAMeCN) resultou em quantidade em traço de ácido desejado. A maior parte foi o metil éster do ácido, que foi hidrolisado na presença de excesso de hidróxido de lítio. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂0 com 0,05 % de TF A) resultou no composto titular (10 mg, 18 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,87 (s, 1H), 7,41 - 7,65 (m, 5H), 6,59 (s, 1H), 6,32 (s, 1H), 3,65 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,45 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 2,83 - 2,97 (m, 1H), 2,40 - 2,66 (m, 2H), 2,26 - 2,38 (m, 1H), 1,62 - 2,25 (m, 5H), 1,26 - 1,47 (m, 3H), 0,96 (t, J = 7,4 Hz, 4H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ESLCMS m/z

474

Exemplo 24: sal de trifluoroacetato de ácido 4-[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]butanamida

A uma solução de 4-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]butanonitrila (40 mg, 0,088 mmol) em DMSO (4 ml) adicionou-se carbonato de potássio (48,6 mg, 0,352 mmol). O frasco de reação foi imerso em um banho de H₂O gelado, e adicionou-se peróxido de hidrogênio (0,449 ml, 4,40 mmol) por gotejamento. A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 2 h. Adicionou-se H₂O, e os sólidos recolhidos por meio de filtração. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (32 mg, 58 %, sal de TFA) como um sólido branco: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 7,76 (s, 1H), 7,25 - 7,51 (m, 5H), 6,17 (s, 1H), 6,01 (s, 1H), 3,40 - 3,55 (m, 4H), 3,06 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,48 - 2,69 (m, 2H), 2,07 - 2,29 (m, 3H), 1,67 - 1,91 (m, 3H), 1,49 - 1,64 (m, 1H), 1,35 - 1,48 (m, 1H), 0,99 - 1,34 (m, 5H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 475 (Àf+/7)⁺.

Exemplo 25: A-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}glicina

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (8,35 g, 20,09 mmol) em DCE (300 ml) adicionou-se glicinato de 1,1dimetiletila (3,95 g, 30,1 mmol) e ácido acético (5,75 ml, 100 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois tratada com NaHB(OAc)₃ (10,65 g, 50,2 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois tratada com solução aquosa de carbonato de sódio e agitada durante 1 h. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc/hexanos = 20:80 a 60:40) resultou em 1,1-dimetiletil N-{[(3R,5Ã)-3butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il] metil}glicinato (8,0 g, 71 %) como um sólido branco; RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,98 (s, 1H), 7,30 - 7,48 (m, 5H), 6,17 (s, 1H), 6,08 (s, 1H), 3,78 (s, 2H), 3,54 (s, 3H), 3,43 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,29 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 3,03 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 2,10 - 2,24 (m, 1H), 1,78 - 1,92 (m, 2H),

1,39 - 1,57 (m, 12H), 1,03 - 1,38 (m, 5H), 0,90 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 531 (M+H/.

Etapa 2: A uma mistura de 1,1-dimetiletil N-{[(37?,57?)-3-butil3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin8-il]metil}glicinato (6,7 g, 12,62 mmol) em 1,4-dioxano (5 ml) adicionou-se cloreto de hidrogênio 4N em 1,4-dioxano (95 ml, 379 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h, depois concentrada. O resíduo foi recolhido em H₂O (200 ml), e a solução foi ajustada em pH 4-5 com ácido acético. O precipitado branco foi recolhido via filtração. Adicionou-se acetonitrila, e a mistura foi aquecida ao refluxo para dissolver todos os sólidos, resfriada à temperatura ambiente e armazenada durante 2 dias sem cristais. A solução foi então evaporada sob pressão reduzida até sólidos se precipitarem da solução. A mistura foi então aquecida para dissolver todos os sólidos, depois deixada descansar durante 30 min. Sólidos foram recolhidos por meio de múltiplas filtrações, combinados, e secos sob alto vácuo a 50°C durante 3 h dando o composto titular (5,0 g, 82 %) como um sólido branco: RMN Ή (MeOH-d₄) δ ppm 8,06 (s, 1H), 7,25 - 7,50 (m, 5H), 6,30 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,58 (s, 3H), 3,50 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,42 (s, 2H), 3,08 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,12 - 2,31 (m, 1H), 1,67 - 1,86 (m, 1H), 1,49 - 1,64 (m, 1H), 1,34 - 1,48 (m, 1H), 1,01 - 1,34 (m, 4H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 475 (M+H)⁺.

Exemplo 26: ácido 3-({[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)pentanodióico ho₂c

Método 1, Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)

3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8carbaldeído (683 mg, 1,644 mmol) em 1,2-dicloroetano (20 ml) adicionou-se dietil 3-aminopentanodioato (501 mg, 2,465 mmol) e ácido acético (0,188 ml, 3,29 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois tratada com NaHB(OAc)₃ (697 mg, 3,29 mmol). A mistura de reação foi então agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e extinta com solução aquosa de carbonato de potássio. A mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida dando dietil 3-({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodioato (880 mg, 88 %) como um óleo amarelo claro: MS-LCMS m/z 603 (M+H)⁺.

Método 1, Etapa 2: A uma solução de dietil 3-({[(37?,57?)-3butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodioato (880 mg, 1,460 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (30 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (175 mg, 7,30 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Adicionouse H₂O e MeCN para dissolver o resíduo. A solução foi acidificada com ácido acético a pH 4-5, parcialmente concentrada para remover MeCN sob pressão reduzida, e deixada descansar durante 30 min. O precipitado branco foi recolhido por meio de filtração e seco sob pressão reduzida a 50°C de um dia para o outro dando o composto titular (803 mg, 100 %) como um sólido branco: RMN Ή (MeOH-d₄) δ ppm 8,05 (s, 1H), 7,27 - 7,49 (m, 5H), 6,29 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,25 (s, 2H), 3,60 - 3,68 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,47 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,09 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,52 - 2,73 (m, 4H), 2,12 - 2,27 (m, 1H), 1,69 - 1,84 (m, 1H), 1,48 - 1,63 (m, 1H), 1,05 - 1,48 (m, 5H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 547 (M+Hf.

Método 2: Uma solução de dimetil 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil90

7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)pentanodioato (~ 600 g) em THF (2,5 1) e MeOH (1,25 1) foi resfriada em um banho de gelo e adicionou-se uma solução de NaOH (206 g, 5,15 mol) em água (2,5 1) por gotejamento ao longo de 20 min (10-22°C temperatura de reação). Após agitação 20 min, a solução foi concentrada (para remover THF/MeOH) e acidificada a pH~4 com HC1 concentrado. O produto precipitado foi envelhecido com agitação, recolhido por meio de filtração e seco ao ar de um dia para o outro. Uma segunda batelada de 600 g de dimetil 3-({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)pentanodioato foi saponificada de uma maneira similar. Os produtos brutos combinados (~2 mol, teórico) foram suspensos em CH₃CN (8 1) e água (4 1) e a mistura agitada foi aquecida a 65°C. Formou-se uma solução que foi resfriada a 10°C ao longo de 2 h enquanto se semeava algumas vezes com uma amostra autêntica do produto cristalino desejado. A pasta fluida resultante foi agitada a 10°C durante 2 h, e o sólido foi recolhido por meio de filtração. A torta de filtração foi lavada com água e seca ao ar de um dia para o outro. Secagem adicional a um peso constante em uma estufa a vácuo a 55°C resultou em ácido 3({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico cristalino como um sólido branco (790 g).

Método 3: 1,1-dióxido de (3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (1802 gramas, 4,336 mol) e dimetil 3-aminopentanodioato (1334 gramas, 5,671 mol) foram tomados em pasta fluida em iPrOAc (13,83 kg). Uma atmosfera de nitrogênio foi aplicada no reator. À pasta fluida a 20°C adicionou-se ácido acético glacial (847 ml, 14,810 mol), e a mistura foi agitada até se observar a dissolução completa. Em seguida adicionou-se triacetoxiboroidreto de sódio sólido (1424 gramas, 6,719 mol) à reações ao longo de um período de 7 minutos. A reação foi mantida a 20°C durante um total de 3 horas, em que neste momento análise por LC de uma amostra indicou o consumo completo do 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído. Em seguida, adicionou-se água (20,36 kg) e salmoura (4,8 kg) no reator. O conteúdo do reator foi agitado durante 10 minutos e, depois deixado descansar durante 10 minutos. A camada aquosa de fundo foi depois removida e descartada. Uma solução previamente preparada de bicarbonato de sódio aquoso a 10 % (peso/peso) (22,5 1) foi adicionada no reator. O conteúdo foi agitado durante 10 minutos e, depois deixado descansar durante 10 minutos. A camada aquosa de fundo foi então removida e descartada. Adicionou-se no reator uma segunda lavagem de 10 % (peso/peso) de bicarbonato de sódio aquoso (22,5 1). O teor do reator foi agitado durante 10 minutos e deixado descansar durante 10 minutos. A camada aquosa de fundo foi depois removida e descartada. O conteúdo do reator foi depois reduzido a um óleo sob destilação a vácuo. Ao óleo adicionou-se THF (7,15 kg) e MeOH (3,68 kg). O conteúdo do reator foi aquecido a 55°C e agitada vigorosamente até se observar a dissolução completa. O conteúdo do reator foi resfriado depois a 25°C após o que adicionou-se uma solução aquosa de NaOH previamente preparada [6,75 kg de água e 2,09 kg de NaOH (50 % peso/peso solução)] com aplicação de resfriamento na camisa. O conteúdo do reator foi mantido abaixo de 42°C durante a adição da solução de NaOH. A temperatura foi reajustada a 25°C após a adição de NaOH, e a reação foi agitada durante 75 minutos antes de análise por HPLC indicar que a reação estava completa. Adicionou-se heptano (7,66 kg) no reator, e o conteúdo foi agitado durante 10 minutos e, depois deixado descansar durante 10 minutos. A camada aquosa foi recolhida em um garrafao de nalgene limpo. A camada de heptano foi removida do reator e descartada. A solução aquosa foi então reconduzida ao reator, e o reator foi preparado para destilação com vácuo. Aproximadamente 8,5 litros de destilado foram recolhidos durante a destilação a vácuo. O vácuo foi liberado do reator, e a temperatura do conteúdo foi reajustado em 25°C. Adicionou-se uma solução de HC1 1 N (30,76 kg) no reator ao longo de um período de 40 minutos. A pasta fluida resultante foi agitada a 25°C durante 10 horas, depois resfriada a 5°C ao longo de um período de 2 horas. A pasta fluida foi mantida a 5°C durante 4 horas antes que o produto fosse recolhido em uma cartucho filtrante por meio de filtração com vácuo. A torta de filtração foi depois lavada com água fria (5°C) (6 kg). A torta de produto foi seca ao ar no cartucho filtrante sob vácuo durante aproximadamente 72 horas. O produto foi então transferido para as três bandejas e seco em uma estufa a vácuo a 50°C durante 79 horas. A temperatura da estufa a vácuo foi então elevada a 65°C durante mais 85 horas. O produto foi recarregado como uma única batelada dando 2568 gramas (93,4 % de rendimento) de ácido 3({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico de grau intermediário como um sólido branco-sujo.

Ácido 3 -({[(3Ã, 5R)-3 -butil-3 -etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico de grau intermediário foi dissolvido (4690 g) em uma mistura de ácido acético glacial (8850 g) e água purificada (4200 g) a 70°C. A solução resultante foi transferida através de um filtro de polimento de 5 microns enquanto se mantinha a temperatura acima de 30°C. O reator e filtro foram enxaguados com uma mistura de ácido acético glacial (980 g) e água purificada (470 g). A temperatura da solução foi ajustada em 50°C. Adicionou-se água purificada filtrada (4230 g) à solução. A solução turva foi então semeada com ácido 3({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico cristalino (10 g). Enquanto se mantinha a temperatura em 50°C, carregou-se água purificada filtrada na pasta fluida a uma taxa controlada (11030 g ao longo de 130 minutos). Adicionou-se então mais água purificada filtrada à pasta fluida a uma taxa controlada mais rápida (20740 g ao longo de 100 minutos). Realizou-se uma carga final de água purificada filtrada (3780 g) à pasta fluida. A pasta fluida foi então resfriada a 10°C a uma taxa linear ao longo de 135 minutos. Os sólidos foram filtrados sobre papel filtrante tipo pele de tubarão para remover o licor-mãe. A torta foi então enxaguada com acetato de etila filtrado (17280 g), depois os licores de lavagem foram removidos por meio de filtração. A torta úmida resultante foi isolada em bandejas e seca sob vácuo a 50°C durante 23 horas. A temperatura foi elevada então a 60°C e a secagem foi prosseguida durante mais 24 horas dando ácido 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)pentanodióico cristalino (3740 g, 79,7 % de rendimento) como um sólido branco.

Uma pasta fluida deste ácido 3-({[(32?,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8iljmetil} amino)pentanodióico cristalino (3660 g) e água purificada filtrada (3,6 1) adicionou-se ácido acético glacial filtrado (7530 g). A temperatura foi elevada a 60°C e observou-se dissolução plena. A temperatura foi reduzida a 55°C, filtrou-se, e tratou-se com água purificada (3,2 1). A solução foi semeada depois com ácido 3-({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)pentanodióico cristalino (18 g) dando uma pasta fluida. Agua purificada filtrada foi carregada em uma pasta fluida a uma taxa controlada (9 1 ao longo de 140 minutos). Adicionou-se mais água purificada filtrada, depois adicionou-se isto à pasta fluida a uma taxa controlada mais rápida (181 ao longo de 190 minutos). A pasta fluida foi resfriada depois a 10°C a uma taxa linear durante 225 minutos. Os sólidos foram filtrados sobre papel filtrante tipo pele de tubarão para remover o licor-mãe. A torta foi enxaguada depois com água purificada filtrada (18 1), e os licores de lavagem foram removidos por meio de filtração. A torta úmida resultante foi isolado em bandejas e seca sob vácuo a 60°C durante 18,5 horas dando um ácido 3({[(37?,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico cristalino (3330 g, 90,8 % de rendimento) como um sólido branco que foi analisado quanto à cristalinidade como resumido abaixo.

Exemplo 27: sal de trifluoroacetato de ácido 2V-{[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} -L-aspártico

/

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (33 mg, 0,079 mmol) em 1,2-dicloroetano (3 ml) adicionou-se dimetil Laspartato (12,80 mg, 0,079 mmol) e NaHB(OAc)₃ (33,7 mg, 0,159 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois tratada com solução aquosa de carbonato de potássio. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) duas vezes resultou em dimetil N-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-L-aspartato (21 mg, 46 %) como um óleo incolor: ES-LCMS m/z 561

Etapa 2: A uma solução de dimetil N-{[(37?,5R)-3-butil-3-etil

7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8il]metil}-L-aspartato (21 mg, 0,037 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (3 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (17,94 mg, 0,749 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, tratada com ácido trifluoroacético, e concentrada a 1 ml. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (25,4 mg, 89 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^]H (MeOH-d₄) δ ppm 8,10 (s, 1H), 7,32 - 7,56 (m, 5H), 6,40 (s, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,38 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 4,19 (dd, J = 6,8, 4,3 Hz, 1H), 3,55 - 3,66 (m, 4H), 3,23 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,88 - 3,13 (m, 2H), 2,38 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 1,79 - 1,95 (m, 1H), 1,62 - 1,77 (m, 1H), 1,42 - 1,58 (m, 1H), 1,03 - 1,40 (m, 4H), 0,91 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 533 (M+Ηγ.

Exemplo 28: sal de trifluoroacetato de ácido A-{[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-D-aspártico

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3 etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (33 mg, 0,079 mmol) em 1,2-dicloroetano (3 ml) adicionou-se dimetil Daspartato (12,80 mg, 0,079 mmol) e NaHB(OAc)₃ (33,7 mg, 0,159 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois tratada com uma solução aquosa de carbonato de potássio. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA) resultou em dimetil N{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5 -tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-D-aspartato (22 mg, 48 %) como um óleo incolor: ES-LCMS m/z 561 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de dimetil N-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-D-aspartato (22 mg, 0,039 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (3 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (18,79 mg, 0,785 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, tratada com ácido trifluoroacético, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA) resultou no composto titular (10,9 mg, 37 %, sal de TFA) como um sólido branco: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 8,10 (s, 1H), 7,33 - 7,54 (m, 5H),

6.42 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,31 - 4,45 (m, 2H), 4,13 - 4,24 (m, 1H), 3,58 3,67 (m, 4H), 2,92 - 3,14 (m, 2H), 1,80 - 1,96 (m, 1H), 1,58 - 1,78 (m, 1H),

1.43 - 1,57 (m, 1H), 1,04 - 1,41 (m, 4H), 0,91 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 533 (M+H)⁺.

Exemplo 29: sal de trifluoroacetato de ácido A-{[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} -A-metil-P-alanina ^H0^ o.P

N

I

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (37?,5R)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (200 mg, 0,481 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 ml) adicionou-se 1,1dimetiletil β-alaninato (175 mg, 0,963 mmol) e ácido acético (0,276 ml, 4,81 mmol). Após 1 h de agitação adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,203 mmol) à mistura de reação. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois tratada com uma solução aquosa de carbonato de sódio. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O, salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida dando 1,1 -dimetiletil N- {[(3R,5R)-3 -butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}-β-alaninato (210 mg, 80 %) como um óleo: ES-LCMS m/z 559

Etapa 2: A 1,1-dimetiletil N-{[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1, l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-β-alaninato (210 mg, 0,289 mmol) adicionou-se cloreto de hidrogênio 4N (3,61 ml, solução 4N em 1,4-dioxano, 14,46 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no composto titular (143 mg, 82 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN (CDC1₃) δ ppm 8,13 (s, 1H), 7,35 - 7,62 (m, 5H), 6,35 (s, 1H), 6,24 (s, 1H), 4,12 - 4,42 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,33 - 3,52 (m, 2H), 3,25 (br. s., 2H), 2,79 (br. s., 2H), 2,35 (br. s., 1H), 1,89 - 2,10 (m, 1H), 1,68 - 1,82 (m, 1H), 1,51 - 1,68 (m, 1H), 1,18 - 1,46 (m, 3H), 1,00 - 1,17 (m, 1H), 0,92 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 503 (M+H)⁺.

Exemplos 30 e 31: sal de trifluoroacetato de ácido 4-({[(3R,5R)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)butanóico e sal de trifluoroacetato de ácido l-{[(3R,5R)-3butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepin-8-il]metil}-2-pirrolidinona

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (37?,57?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (200 mg, 0,481 mmol) em 1,2-dicloroetano (5 ml) adicionou-se metil 4aminobutanoato (111 mg, 0,722 mmol) e ácido acético (0,276 ml, 4,81 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, tratada com NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,203 mmol), e agitada durante 1 h. A mistura de reação foi tratada com solução aquosa de carbonato de sódio e extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com H₂O, salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:Hexanos = 20:80 a 60:40) resultou em ácido 4-({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)butanóico (210 mg, 83 %) como um óleo amarelo claro: ES-LCMS m/z 517 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de ácido 4-({[(37?,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)butanóico (210 mg, 0,406 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (3 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (9,73 mg, 0,406 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no sal de trifluoroacetato do Exemplo 30 (45,6 mg, 44 %) como um sólido branco: RMN *H (DMSO-d₆) δ ppm 8,67 (br. s., 2H), 8,09 (s, 1H), 7,30 - 7,56 (m, 5H), 6,18 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,16 (br. s., 2H), 3,63 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,09 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,88 - 3,01 (m, 2H), 2,33 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,99-2,15 (m, 1H), 1,67 - 1,90 (m, 3H),

1,35 - 1,61 (m, 2H), 0,96 - 1,32 (m, 4H), 0,81 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,76 (t, J = 6,6 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 503 (M+H)⁺ e Exemplo 31 (47,8 mg, 48 %) sal de trifluoroacetato como um sólido branco: RMN ’Η (DMSO-d₆) δ ppm 7,69 (s, 1H), 7,30 - 7,61 (m, 5H), 6,22 (br. s., 1H), 6,04 (br. s., 1H), 4,23 - 4,44 (m, 2H), 3,49 (s, 3H), 2,12 - 2,34 (m, 3H), 1,75 - 2,02 (m, 3H), 1,35 - 1,74 (m, 2H), 1,11 - 1,34 (m, 3H), 0,94 - 1,10 (m, 1H), 0,64 - 0,89 (m, 6H); ES-LCMS m/z 485

Exemplo 32: sal de trifluoroacetato de 2V-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} -2-metilalanina

HO.

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3Ã,5J?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (200 mg, 0,481 mmol) em 1,2-dicloroetano (300 ml) adicionou-se metil 2metilalaninato (113 mg, 0,963 mmol) e ácido acético (0,138 ml, 2,406 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,203 mmol), e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Adicionou-se solução aquosa de carbonato de sódio à mistura de reação que então foi extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com H₂O, salmoura saturada, seca, (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:Hexanos = 20:80 a 60:40) resultou em metil N-{[(3R,5R)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-2-metilalaninato (230 mg, 91 %): ES-LCMS m/z 517 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de metil N-{[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8

100 il]metil}-2-metilalaninato (230 mg, 0,245 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (15 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (5,6 mg, 0,245 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois parcialmente concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos. O resíduo foi acidificado com ácido trifluoroacético. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (102 mg, 66 %, sal de TFA) como um sólido branco: RMN Ή (DMSO-d₆) δ ppm 8,10 (s, 1H), 7,28 - 7,55 (m, 5H), 6,18 (s, 1H), 6,00 (s, 1H), 4,14 (d, J = 17,6 Hz, 2H), 3,64 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,13 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,46 - 2,55 (m, 1H), 2,00 - 2,23 (m, 1H), 1,70 - 1,86 (m, 1H), 1,35 - 1,49 (m, 1H), 0,98 - 1,31 (m, 4H), 0,82 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,77 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 503 (M+H)⁺.

Exemplo 33: sal de trifluoroacetato de ácido [2-({[(37?,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)etil] fosfônico

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3R,57?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (50 mg, 0,120 mmol) em 1,2-dicloroetano (3 ml) adicionou-se dietil (2aminoetil)fosfonato (109 mg, 0,602 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 3 h, depois tratada com NaHB(OAc)₃ (128 mg, 0,602 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, depois tratada com H₂O e ácido clorídrico IN solução. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN)

101 resultou em dietil [2-({[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tefra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)etil]fosfonato (70 mg, 71 %) como um sólido branco: ES-LCMS m/z 581

Etapa 2: A uma solução de dietil [2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)etil]fosfonato (70 mg, 0,121 mmol) em DCM (3 ml) adicionou-se bromotrimetilsilano (0,065 ml, 0,499 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Adicionouse mais bromotrimetilsilano (0,16 ml, 1,21 mmol). A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro, concentrada sob pressão reduzida e tratada com H₂O. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no produto titular (51 mg, 55 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ^]H (MeOH-d₄) δ ppm 8,09 (s, 1H), 7,30 - 7,53 (m, 5H), 6,39 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,12 - 4,35 (m, 2H), 3,57 - 3,65 (m, 4H), 3,14 - 3,24 (m, 3H), 2,23 - 2,40 (m, 1H), 1,76 - 2,06 (m, 3H), 1,59 - 1,75 (m, 1H), 1,38 - 1,55 (m, 1H), 1,00 - 1,38 (m, 4H), 0,90 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 525 (M+H)⁺.

Exemplo 34: sal de trifluoroacetato de [2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)etil]fosfonato de etil hidrogênio

A uma solução {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (50 mg, 0,120 mmol) em DMF (4 ml) adicionou-se carbonato de potássio (49,8 mg, 0,360 mmol) e dietil (2-bromoetil)fosfonato (17,65 mg, 0,072 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 90°C de um dia para o outro, resfriada à

102 temperatura ambiente, e concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se ao resíduo ácido trifluoroacético, e a solução foi concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no produto titular (34 mg, 95 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN Ή (MeOH-d₄) δ ppm 8,04 (s, 1H), 7,27 - 7,59 (m, 5H), 6,38 (s, 1H), 6,04 - 6,21 (m, 2H), 3,88 - 4,24 (m, 4H), 3,50 - 3,68 (m, 4H), 3,16 - 3,35 (m, 3H), 2,20 - 2,49 (m, 1H), 1,78 - 1,95 (m, 1H), 1,60 - 1,75 (m, 1H), 1,41 1,58 (m, 1H), 1,01 - 1,36 (m, 7H), 0,89 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 553 (M+H)⁺.

Exemplo 35: sal de amônio do ácido 2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)etanossulfônico

A uma solução de {[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amina (100 mg, 0,240 mmol) em DMF (4 ml) adicionou-se sal de sódio do ácido 2bromoetano sulfônico (25,3 mg, 0,120 mmol). A mistura de reação foi agitada em 70°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, acidificada com ácido trifluoroacético, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA), seguido de purificação adicional com RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,5 % de hidróxido de amônio em H₂O) resultou no composto titular (27,6 mg, 54 %, sal de amônio) como um sólido branco: RMN *H (MeOH-d₄) δ ppm 8,03 (s, 1H), 7,19 - 7,54 (m, 5H), 6,30 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,20 (s, 2H), 3,58 (s, 3H), 3,49 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,30 - 3,38 (m, 2H), 2,96 - 3,15 (m, 3H), 2,09 - 2,31 (m, 1H), 1,71 - 1,88 (m, J = 5,1 Hz, 1H), 1,49 - 1,70 (m, 1H), 1,34 - 1,49 (m,

103

1H), 1,05 - 1,32 (m, 4H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 6,6 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 525 (M+Ηγ.

Exemplo 36: sal de trifluoroacetato de ácido 2,2'-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} imino)dietanossulfônico

A uma solução de {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (25 mg, 0,060 mmol) em DMF (2 ml) adicionou-se sal de sódio do ácido 2bromoetano sulfônico (127 mg, 0,600 mmol). A mistura de reação foi agitada em 70°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, acidificada a pH 3-4 com ácido acético, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no produto titular (13 mg, 24 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN (Moondr δ ppm 8,23 (s, 1H), 7,42 - 7,80 (m, 5H), 6,68 (s, 1H), 6,53 (s, 1H), 4,72 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 3,41 3,83 (m, 8H), 2,60 - 2,85 (m,lH), 1,85 - 2,27 (m, 2H), 1,57 - 1,80 (m, 1H), 1,22 - 1,53 (m, 3H), 0,71 - 1,17 (m, 7H); ES-LCMS m/z 633

Exemplo 37: ácido 2-({[(3Ã,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)-2oxoetanossulfônico

A uma solução de N-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-2

104 cloroacetamida (55 mg, 0,112 mmol) em uma mistura a 1:1 de etanol/H₂O (6 ml) adicionou-se sulfito de sódio (141 mg, 1,115 mmol). A mistura de reação foi agitada em 80°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, acidificada com ácido acético a pH 3-4, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 30:70) resultou no composto titular (32 mg, 52 %) como um sólido branco-sujo: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 7,94 (s, 1H), 7,16 - 7,68 (m, 5H), 6,28 (br. s., 1H), 6,06 (br. s., 1H), 4,39 (br. s., 2H), 3,63 - 3,78 (m, 2H), 3,43 - 3,59 (m, 4H), 2,06 2,49 (m, 1H), 1,01 - 1,94 (m, 7H), 0,89 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 6,6 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 539 (M+H)⁺.

Exemplo 38: sal de trifluoroacetato de ácido [2-({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]fosfônico

Etapa 1: Uma mistura de A-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-2-cloroacetamida (82 mg, 0,166 mmol) e trietil fosfito (2,9 ml, 16,63 mmol) foi agitada a 135°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e concentrada sob pressão reduzida. O dietil [2-({[(37?,5Ã)-3-butil3 -etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin8-il]metil} amino)-2-oxoetil]fosfonato bruto (99 mg, 98 %) foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: ES-LCMS m/z 595 (M+JTf.

Etapa 2: A uma solução de dietil [2-({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] metil}amino)-2-oxoetil]fosfonato (99 mg, 0,166 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se bromotrimetilsilano (0,065 ml, 0,499 mmol), e a mistura de

105 reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Adicionouse mais bromotrimetilsilano (0,216 ml, 1,66 mmol), e a mistura de reação foi agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi então concentrada sob pressão reduzida e tratada com H₂O. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no composto titular (69 mg, 63 %, sal de TF A) como um sólido branco-cinza: RMN Ή (MeOH-d₄) δ ppm 8,01 (s, 1H), 7,35 - 7,75 (m, 5H), 6,51 (s, 1H), 6,42 (s, 1H), 4,43 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 3,85 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,66 (br. s., 1H), 3,61 (s, 3H), 2,57 - 2,87 (m, 3H), 1,96 - 2,13 (m, 2H), 1,56 - 1,75 (m, 1H), 1,22 - 1,49 (m, 3H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,89 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ESLCMS m/z 539

Exemplo 39: sal de trifluoroacetato de JV-[2-({[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)-2-oxoetil] glicina

Etapa 1: A uma solução de N-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-2-cloroacetamida (50 mg, 0,101 mmol) em DMF (3 ml) adicionouse carbonato de potássio (56,1 mg, 0,406 mmol), sal de cloridrato de metil éster de glicina (63,7 mg, 0,507 mmol) e iodeto de potássio (67,3 mg, 0,406 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH: DCM = 0:100 a 20:80) resultou em metil N-[2-({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8

106 il]metil}amino)-2-oxoetil]glicinato (50 mg, 90 %) como um óleo incolor: ESLCMS m/z 546 (M+77)⁺.

Etapa 2: A uma solução de metil N-[2-({[(37?,57?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]glicinato (50 mg, 0,092 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (9 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (54,9 mg, 2,291 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos, e acidificada com ácido trifluoroacético. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no composto titular (15 mg, 21 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 7,90 (s, 1H), 7,25 - 7,57 (m, 5H), 6,33 (s, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,89 (d, J = 5,9 Hz, 3H), 3,61 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,27 - 2,49 (m, 1H), 1,79 - 1,98 (m, 1H), 1,62 - 1,79 (m, 1H), 1,42 - 1,58 (m, 1H), 1,17 - 1,38 (m, 3H), 0,99 - 1,17 (m, 1H), 0,90 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 532 (M+H)⁺.

Exemplo 40: sal de trifluoroacetato de ácido (2-{[2-({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]amino}etil)fosfônico

Etapa 1: A uma solução de 7V-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-2-cloroacetamida (50 mg, 0,101 mmol) em DMF (3 ml) adicionouse carbonato de potássio (28,0 mg, 0,203 mmol) e dietil (2aminoetil)fosfonato (20,21 mg, 0,112 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro. Adicionou-se iodeto de potássio (33,7 mg,

107

0,203 mmol), e a mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 20:80) resultou em dietil (2-{[2-({[(3Ã,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]amino} etil)fosfonato (27 mg, 40 %) como um óleo incolor: ES-LCMS m/z

638 (M+H)⁺.

Etapa 2: A uma solução de dietil (2-{[2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]amino}etil)fosfonato (25 mg, 0,039 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se bromotrimetilsilano (0,102 ml, 0,784 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, concentrada sob pressão reduzida, e acidificada com ácido clorídrico IN. O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por meio de RPHPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A resultou no composto titular (15 mg, 46 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN ’H (MeOH-d₄) δ ppm 7,96 (s, 1H), 7,33 - 7,61 (m, 5H), 6,41 (s, 1H), 6,22 (s, 1H), 4,25 - 4,50 (m, 2H), 3,75 - 3,84 (m, 2H), 3,69 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,34 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,05 - 3,22 (m, 2H), 2,42 - 2,65 (m, 1H), 1,71 - 2,02 (m, 4H), 1,51 1,69 (m, 1H), 1,14 - 1,44 (m, 4H), 0,97 - 1,14 (m, 1H), 0,92 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 582 (M+Hf.

Exemplo 41: sal de trifluoroacetato de ácido 3-{[2-({[(3Ã,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)-2-oxoetil]amino}pentanodióico

HO.

108

Etapa 1: A uma solução de A-{[(37?,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-2-cloroacetamida (55 mg, 0,112 mmol) em DMF (3 ml) adicionouse carbonato de potássio (61,7 mg, 0,446 mmol) e iodeto de potássio (74,1 mg, 0,446 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e repartida entre H₂O e EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (MeOH:DCM = 0:100 a 10:90) resultou em dietil 3-{[2-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)-2-oxoetil]aminoJpentanodioato (75 mg, 100 %) como um óleo amarelo: ES-LCMS m/z 660 (M+H)

Etapa 2: A uma solução de dietil 3-{[2-({[(37?,5Ã)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il] metil}amino)-2-oxoetil]aminoJpentanodioato (73,9 mg, 0,112 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O 6 ml) adicionou-se hidróxido de lítio (134 mg, 5,60 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, acidificada com ácido acético, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,05 % de TF A) resultou no composto titular (20 mg, 21 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN *H (MeOH-d₄) δ ppm 7,95 (s, 1H), 7,34 - 7,66 (m, 5H),

6.45 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 4,41 (d, J = 3,3 Hz, 2H), 3,82 - 4,00 (m, 3H), 3,74 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,46 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 2,85 (d, J = 5,7 Hz, 3H), 2,45 - 2,72 (m, 2H), 1,77 - 2,11 (m, 2H), 1,49 - 1,72 (m, 1H), 1,24 -

1.45 (m, 3H), 0,97 - 1,13 (m, 1H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 604 (M+H)⁺.

Exemplo 42: sal de amônio de 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)-3oxo-1 -propanossulfônico

109

Etapa 1: A uma solução gelada de {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amina (150 mg, 0,233 mmol) em DCM (10 ml) adicionou-se piridina (0,132 ml, 1,629 mmol) e cloreto de 3-cloropropanoíla (0,045 ml, 0,465 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h, depois repartida entre H₂O e DCM. Purificação via sílica-gel (MeOH:DCM=0:100 a 3:97) resultou em A-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-3-cloropropanamida (105 mg, 89 %) como um óleo incolor: ESLCMS m/z 508

Etapa 2: A uma solução de N-{[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-3-cloropropanamida (150 mg, 0,296 mmol) em uma mistura a 1:1 de etanol/H₂O (10 ml) adicionou-se sulfito de sódio (186 mg, 1,479 mmol). A mistura de reação foi agitada em 60°C de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, acidificada com ácido acético, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (MeCN/H₂O com 0,5 % NH4OH) resultou no composto titular (27 mg, 15 %, sal de NH₃) como um sólido branco: RMN 'H (MeOH-d^ δ ppm 8,31 - 8,49 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,13 - 7,55 (m, 5H), 6,20 (s, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,18 - 4,37 (m, 2H), 3,51 (s, 3H), 3,44 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,95 - 3,11 (m, 3H), 2,57 - 2,73 (m, 2H), 2,08 - 2,31 (m, 1H), 1,67 - 1,85 (m, 1H), 1,48 - 1,66 (m, 1H), 1,32 - 1,46 (m, 1H), 1,03 - 1,32 (m, 4H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 6,8 Hz, 3H); ESLCMS m/z 553 (Àf+#)⁺.

Exemplo 43: ácido 3-({[(37?,5ό)-3-6ηΐΐ1-3-6ίϋ-7-^6ίΐ1όχι)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino) pentanodióico

110

Etapa 1: Uma solução de 1,1-dióxido de (3R,5S)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (100 mg, 0,241 mmol) e dimetil 3-aminopentanodioato (63,2 mg, 0,361 mmol) em 1,2-dicloroetano (4 ml) foi agitada durante 30 min, depois tratada com ácido acético (0,069 ml, 1,203 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h, tratada com NaHB(OAc)₃ (102 mg, 0,481 mmol), agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, e extinta com solução aquosa de carbonato de sódio 2N. Após agitação durante 30 min, a mistura foi extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc/hexanos = 1:4 a 1:1) resultou em dimetil 3-({[(3R,5S)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)pentanodioato (92,7 mg, 67 %) como um óleo incolor: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,99 (s, 1H), 7,21 - 7,52 (m, 5H), 6,12 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 3,74 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 3,66 (s, 6H), 3,50 (s, 3H), 3,23 - 3,44 (m, 2H), 3,05 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 6,2 Hz, 4H), 2,26 - 2,44 (m, 1H), 1,67 1,87 (m, 2H), 1,03 - 1,56 (m, 7H), 0,89 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,76 (t, J = 7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 575 (M+7T)⁺.\

Etapa 2: A uma solução de dimetil 3-({[(3R,5S)-3-butil-3-etil7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5 -fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}amino)pentanodioato (92 mg, 0,160 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de THF/MeOH/H₂O (6 ml) adicionou-se monoidrato de hidróxido de lítio (67,2 mg, 1,601 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois parcialmente concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos. A fase aquosa foi

111 ajustada em pH 5 com ácido clorídrico IN. Um precipitado branco foi recolhido por meio de filtração e seco ao ar dando o composto titular (42 mg, 45 %) como um sólido branco: RMN 'H (DMSO-dg) δ ppm 7,94 (s, 1H), 7,41 (d, J = 4,3 Hz, 4H), 7,26 - 7,38 (m, 1H), 6,10 (s, 1H), 5,93 (br. s., 1H), 3,80 (s, 2H), 3,55 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,57 - 2,76 (m, 1H), 2,31 - 2,47 (m, 3H), 2,04 - 2,21 (m, 1H), 1,55 - 1,82 (m, 1H), 1,07 - 1,51 (m, 7H), 0,86 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,66 (t, J = 7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 547 (M+Hf.

Exemplo 44: sal de trifluoroacetato de #-{[(3R,5S)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} glicina

Etapa 1: A uma solução de 1,1-dióxido de (3R,55)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (100 mg, 0,241 mmol) em 1,2-dicloroetano (4 ml) adicionou-se 1,1-dimetiletil glicinato (47,3 mg, 0,361 mmol) e ácido acético (0,069 ml, 1,203 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, tratada com NaHB(OAc)₃ (102 mg, 0,481 mmol), e agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi adicionada de solução aquosa de carbonato de sódio 2M e extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura saturada, secas (Na₂SO₄), filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAc:hexanos = 1:4 a 1:1) resultou em 1,1-dimetiletil N-{[(3R,5S)-3-butil3-etil-7-(metilóxi)-l, 1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin8-il]metil} glicinato (35,8 mg, 28,0 %) como um óleo incolor: RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 7,97 (s, 1H), 7,30 - 7,58 (m, 6H), 6,15 (s, 1H), 6,07 (s, 1H), 3,77 (s, 2H), 3,52 (s, 3H), 3,42 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 3,27 (s, 2H), 3,06 (d, J =

112

14,7 Hz, 1H), 2,26 - 2,48 (m, 1H), 1,72 - 1,92 (m, 2H), 1,06 - 1,41 (m, 8H), 0,90 (t, J = 6,2 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 531 (M+H)⁺.

Etapa 2: Uma mistura de 1,1-dimetiletil N-{[(3R,5S)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}glicinato (34,0 mg, 0,064 mmol) foi tratada com cloreto de hidrogênio 4N em 1,4-dioxano (1,600 ml, 6,40 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RP-HPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (35 mg, 77 %, sal de TFA) como um sólido branco: RMN Ή (DMSO-d₆) Ô ppm 9,01 - 9,40 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 7,17 - 7,56 (m, 5H), 6,16 (s, 1H), 5,95 (br. s., 1H), 4,10 - 4,31 (m, 2H), 3,84 (br. s., 2H), 3,62 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 3,56 - 3,72 (m, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,11 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 2,09 - 2,26 (m, 1H), 2,07 (s, 1H), 1,62 - 1,84 (m, 1H), 1,00 - 1,56 (m, 6H), 0,86 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,68 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 475

Exemplo 45: sal de trifluoroacetato de ácido {[(3R,5ó)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}fosfônico

Etapa 1: A uma solução gelada de imidazol (130 mg, 1,916 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se trifenilfosfino (251 mg, 0,958 mmol) seguido de adição por gotejamento de bromo (0,049 ml, 0,958 mmol). Uma solução de [(3R,5S)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metanol (200 mg, 0,479 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionada lentamente. A mistura de reação foi agitada em 0°C durante 2 h. Adicionou-se solução aquosa de sulfito de sódio, e a mistura

113 resultante foi separada. A camada aquosa foi extraída com DCM, e as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na₂SO₄) , filtradas e concentradas. Purificação usando sílica-gel (EtOAc/hexanos=l:10 a 1:2) resultou em 1,1-dióxido de (3Ã,5ó)-8-(bromometil)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (149 mg, 64 %) como um sólido branco: RMN ’H (CDCI3) δ ppm 8,06 (s, 1H), 7,28 - 7,54 (m, 5H), 6,17 (s, 1H), 6,07 (s, 1H), 4,38 - 4,62 (m, 2H), 3,58 (s, 3H), 3,44 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,09 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,38 (dd, J = 14,9, 7,4 Hz, 1H), 1,81 (dd, J = 14,7, 7,4 Hz, 1H), 1,11 - 1,59 (m, 8H), 0,91 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,78 (t, J = 7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 482 (M+Hf.

Etapa 2: A uma solução de 1,1-dióxido de (37?,5<S)-8(bromometil)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina (149 mg, 0,310 mmol) em tolueno (10 ml) adicionou-se trietil fosfito (0,163 ml, 0,930 mmol). A mistura de reação foi aquecida em refluxo de um dia para o outro, resfriada à temperatura ambiente, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação usando sílica-gel (EtOAcrhexanos — 50:50 a 100:0) resultou em dietil {[(3R,55)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfonato (132 mg, 79 %) como um óleo transparente: RMN 'H (CDCI3) δ ppm 7,97 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,28 - 7,50 (m, 5H), 6,13 (s, 1H), 6,04 (s, 1H), 3,88 - 4,25 (m, 5H), 3,51 (s, 3H), 3,40 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,10 - 3,27 (m, 2H), 3,03 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,37 (dd, J = 14,6, 7,4 Hz, 1H), 1,79 (dd, J = 14,6, 7,4 Hz, 1H), 1,41 1,58 (m, 2H), 1,10 - 1,40 (m, 12H), 0,89 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,75 (t, J = 7,2 Hz, 3H)

Etapa 3: A uma solução gelada de dietil {[(3Ã,5S)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metilJfosfonato (132 mg, 0,246 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se bromotrimetilsilano (0,159 ml, 1,228 mmol). A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente, agitada de um dia para o outro, e

114 concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre H₂O e DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na2SO4), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação por meio de RPHPLC (eluindo com MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFAMeCN) resultou no composto titular (49 mg, 32 %, sal de TF A) como um sólido branco: RMN Ή (CDC1₃) δ ppm 7,87 (br. s., 1H), 7,31 - 7,70 (m, 5H), 5,95 - 6,46 (m, 2H), 3,46 - 3,62 (m, 3H), 3,20 - 3,43 (m, 2H), 2,38 - 2,90 (m, 2H), 1,76 (br. s., 1H), 1,07 - 1,53 (m, 5H), 0,96 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,81 (t, J =

7,2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 482 (M+Hf.

Exemplo 46: N-{ [(3R,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} glicina

1,1-Dióxido de (37?,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (410 mg, 0,95 mmol) e 1,1-dimetiletil glicinato (187 mg, 1,43 mmol) foram combinados em DCM (210 ml) e agitados durante 30 min à temperatura ambiente. A mistura foi tratada com NaEÍB(OAc)₃ (403 mg, 1,90 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 2 dias à temperatura ambiente em que após este tempo LCMS indicou conversão ao produto desejado. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi purificado sobre 40 g de silica eluindo com de 20 a 60 % de EtOAc/hexanos dando o intermediário tbutil éster como um óleo transparente: LC-MS (ES⁺) m/z 547,40 [M+H].

O intermediário foi dissolvido em dietil éter (20 ml) e tratado com HC1 4N em dioxano (20 ml, 66 mmol) à temperatura ambiente. A

115 mistura foi agitada de um dia para o outro em que após este tempo a mistura foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 150 Sunfire; 47,5 ml/min; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TF A) dando N-{ [(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}glicina (306 mg, 65,6 % de rendimento) como um sólido branco: RMN ’H (400 MHz, DMSO-Jg) 5 ppm 0,79 (t, 7=7,0 Hz, 3 H), 0,86 (t, J=7,3 Hz, 3 H), 1,01-1,53 (m, 5 H), 1,58-1,72 (m, 1 H), 1,78-1,92 (m, 1 H), 1,96-2,15 (m, 1 H), 3,28-3,45 (m, 2 H), 3,45 (s,

H), 3,74 (s, 1 H), 3,80-4,31 (m, 4 H), 6,18 (s, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 7,33-7,40 (m, 1 H), 7,44 (t, 7=7,4 Hz, 2 H), 7,47-7,69 (m, 2 H), 8,04 (s, 1 H), 8,14 (s, 1

H), 9,19 (br. s., 1 H), 9,34 (br. s., 1 H) (um próton extra foi observado); LCMS (ES') m/z 489,4 [M-l]; LC-MS (ES⁺) m/z 491,3 [M+H].

Exemplo 47: ácido (20)-2-( {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1, 1-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)-4(metilsulfonil)butanóico

1,1 -dimetiletil N- {[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1- dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-Lmetioninato (270 mg, 0,45 mmol) dissolvido em TFA (3,4 ml, 44,6 mmol) foi resfriado em um banho de gelo e tratado por meio de adição de H₂O₂ por gotejamento (100 μΐ, 0,982 mmol). A mistura foi deixada aquecer a 22°C e foi agitada de um dia para o outro em que após este tempo LCMS indicou conversão completa ao produto desejado com uma quantidade muito pequena de impureza de sulfóxido. A mistura de reação foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC dando ácido (2S)-2-({[(37?,57?)-3-butil-3etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8

116 il]metil}amino)-4-(metilsulfonil)butanóico (207 mg, 80 % de rendimento) como um sólido branco: RMN ’Η (400 MHz, DMSO-Tg) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,97-1,28 (m, 4 H) 1,32-1,54 (m, 2 H) 1,681,80 (m, 1 H) 1,88-2,13 (m, 3 H) 2,59 (d, 1 H) 2,98 (s, 3 H) 3,06 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,11-3,27 (m, 3 H) 3,44 (s, 3 H) 3,55 (d, 7=15,0 Hz, 1 H) 3,66-3,74 (m, 1 H) 3,76-3,86 (m, 1 H) 5,94 (d, 7=9,2 Hz, 1 H) 6,10 (s, 1 H) 7,27-7,37 (m, 1 H) 7,37-7,47 (m, 4 H) 8,00 (s, 1 H) (2 prótons não observados);LC-MS (ES⁺) m/z 581,3 [M+H].

Exemplo 48: A-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-7V-hidroxiglicma

1,1 -dimetiletil N- {[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1- dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}glicinato (80 mg, 0,15 mmol) dissolvido em DCM (5 ml) foi tratado com m-CPBA (33,8 mg, 0,15 mmol), depois agitado a 22°C durante 16 h. A mistura foi diluída com DCM e agitada com Na₂SO₃ aquoso a 10 % durante 15 min. A fase orgânica foi isolada, seca sobre MgSO₄, filtrada, e concentrada à aridez. O resíduo foi purificado sobre 40 g de silica eluindo com de 30 a 100 % de EtOAc/hexanos dando dois produtos separados que não foram caracterizados adicionalmente. Ambos os produtos foram convertidos separadamente ao composto titular usando o procedimento abaixo.

O primeiro produto (35 mg, 0,064 mmol) dissolvido em DCM (1,5 ml) e MeOH (1,5 ml) foi tratado com ácido acético (0,011 ml, 0,20 mmol) e NaCNBH₄ (12 mg, 0,19 mmol) a 22°C durante 2 h em que após este tempo LCMS indicou conversão plena ao intermediário t-Bu-éster. Adicionou-se ácido trifluoroacético (4,95 pL, 0,064 mmol), e a mistura foi agitada a 22°C durante 16 h em que após este tempo LCMS indicou

117 conversão aos produtos com MW = 474 e 490. A mistura de reação foi concentrada à aridez e o resíduo foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 50 Sunfire column a 55 ml/min; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como os eluentes; de 10 % a 100 % ao longo de 8 minutos) dando N-{ [(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}-N-hidroxiglicina (18,9 mg, 60,0 % de rendimento): LC-MS (ES) m/z 489,2 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z 490,9 [M+H]. A RMN 'H do material foi não interpretável devido às propriedades físicas do composto titular.

O segundo produto (15 mg, 0,028 mmol) foi submetido a condições semelhantes dando o composto titular que foi idêntico ao composto titular preparado acima: LC-MS (ES’) m/z 489,1 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z

491,2 [M+H].

Exemplo 49: sal de amônio de A-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-Ametilglicina

Uma pasta fluida de 1,1-dimetiletil N-metilglicinato.HCl (164 mg, 0,902 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada com TEA (0,126 ml, 0,90 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo se adicionou 1,1-dióxido de (3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,60 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,20 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente em que após este tempo LCMS indicou conversão ao produto desejado. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A

118 fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi purificado sobre 40 g de silica eluindo com de 20 a 60 % de EtOAc/hexanos dando o intermediário t-butila éster (196 mg) como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,97-1,27 (m, 4 H) 1,33-1,55 (m, 2 H) 1,42 (s, 9 H) 1,67-1,79 (m, 1 H) 2,00-2,11 (m, 1 H) 2,26 (s, 3 H) 2,60 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 3,06 (d, 7=14,8 Hz, 1 H) 3,20 (s, 2 H) 3,42 (s, 3 H) 3,53 (d, 7=14,8 Hz, 1 H) 3,57-3,68 (m, 2 H) 5,93 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,29-7,37 (m, 1 H) 7,41 (d, 7=4,3 Hz, 4 H) 7,95 (s, 1 H).

O éster foi dissolvido em dietil éter (20 ml) e tratado com HC1 4N em dioxano (20 ml, 80 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada de um dia para o outro em que após este tempo LCMS indicou ~80 % de conversão ao ácido. A mistura de reação foi agitada mais 24 h em que após este tempo LCMS indicou conversão completa. A mistura foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 100 XBridge; Acetonitrila + 0,2 % de NH₄OH e H₂O +0,2 % de NH₄OH foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 70 % ao longo de 8 minutos, de 100 % a 100 % a 10 minutos) dando N-{[(3Á,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} -Nmetilglicina (130 mg, 44,2 % de rendimento) sal de amônio como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,96-1,28 (m, 4 H) 1,32-1,53 (m, 2 H) 1,68-1,80 (m, 1 H) 1,99-2,11 (m, 1 H) 2,30 (s, 3 H) 2,62 (d, 7=9,4 Hz, 1 H) 3,07 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,24 (s, 2 H) 3,42 (s, 3 H) 3,54 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,69 (s, 2 H) 5,93 (d, 7=8,2 Hz, 1 H) 6,10 (s, 1 H) 7,33 (dq, 7=8,5, 4,2 Hz, 1 H) 7,41 (d, 7=4,3 Hz, 4 H) 7,98 (s, 1 H) (próton de COOH não observado); LC-MS (ES⁺) m/z

489,3 [M+H].

Exemplo 50: sal de trifluoroacetato de ácido 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4

119 hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil} amino)pentanodióico

Dimetil 3-({ [(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino) pentanodioato (304 mg, 0,52 mmol) dissolvido em THF (5 ml) foi tratado com 1M de LiOH (5,15 ml, 5,15 mmol) à temperatura ambiente depois vigorosamente agitado durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada para remover o THF, e a porção aquosa remanescente foi tratada com HC1 1 N até que o material iniciasse precipitação (pH = 5). A mistura borrachosa foi extraída três vezes com DCM, e as orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas à aridez. O resíduo foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 150 Sunfire a 47,5 ml/min; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 80 % ao longo de 10 minutos) dando ácido 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4hidróxi-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico (273,5 mg, 94 % de rendimento) como um sólido branco. RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,79 (t, 7=7,1 Hz, 3 H), 0,85 (t, 7=7,4 Hz, 3 H), 1,06-1,37 (m, 4 H), 1,37-1,50 (m, 1 H), 1,58-1,71 (m, 1 H), 1,78-1,93 (m, 1 H), 2,00-2,14 (m, 1 H), 2,672,88 (m, 4 H), 3,16 (s, 1 H), 3,26-3,45 (m, 2 H), 3,46 (s, 3 H), 3,71-3,85 (m, 1 H), 4,26 (br. s., 2 H), 6,16 (s, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 7,32-7,40 (m, 1 H), 7,44 (t, 7=7,5 Hz, 2 H), 7,46-7,65 (m, 2 H), 8,05 (s, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,62 (br. s., 2 H), 12,92 (br. s., 2 H) (2 prótons extra observados). LC-MS (ES’) m/z 561,20 [M-l],

Exemplo 51: sal de bis-amônio do ácido {2-[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7

120 (metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]etil}fosfônico

Dietil {(E)-2-[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, 1 -dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]etenil}fosfonato (240 mg, 0,44 mmol) dissolvido em EtOH (20 ml) foi tratado com 10 % de paládio sobre carbono (46,5 mg, 0,44 mmol) sob um balão de gás hidrogênio a 23°C de um dia para o outro. O catalisador foi removido por filtração, e o filtrado foi concentrado à aridez dando o intermediário fosfonato como um óleo transparente. O resíduo foi dissolvido em DCM (10 ml) e tratado com bromotrimetilsilano (0,227 ml, 1,75 mmol) durante 16 h a 23°C com agitação. A mistura de reação foi concentrada à aridez, depois purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador NH4OH a 0,2 %, de 10 a 80 a 100 % ao longo de 8 min) dando ácido {2[(37?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]etil}fosfônico (88 mg, 40,7 % de rendimento) sal de bis-amônio como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,70-0,85 (m, 6 H) 0,97-1,30 (m, 4 H) 1,29-1,64 (m, 4 H) 1,67-1,81 (m, 1 H) 2,00-2,12 (m, 1 H) 2,58 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 2,63-2,79 (m, 2 H) 3,05 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,39 (s, 3 H) 3,50 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 5,92 (d, 7=9,6 Hz, 1 H) 6,05 (s, 1 H) 7,26-7,36 (m, 1 H) 7,36-7,46 (m, 4 H) 7,65 (s, 1 H) (prótons de ácido fosfônico não observados); LC-MS (ES⁺) m/z 496,3 [M+H].

Exemplo 52: sal de bis-amônio de A-{[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-serina

121

Uma pasta fluida de 1,1-dimetiletil L-serinato.HCl (238 mg, 1,20 mmol) em DCM (8 ml) foi tratada com TEA (0,168 ml, 1,20 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo se adicionou

1,1-dióxido de (37?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,60 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (319 mg, 1,504 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi tratado com HC1 4N em dioxano (10 ml, 40,0 mmol) a 22°C com agitação de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada à aridez, depois purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador NH₄OH a 0,2 %, de 10 a 70 a 100 % ao longo de 8 min) dando N-{[(3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l, l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-serina (194 mg, 63,9 % de rendimento) sal de bis-amônio como um sólido branco: RMN ’H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,96-1,29 (m, 4 H) 1,32-1,54 (m, 2 H) 1,66-1,82 (m, 1 H) 1,98-2,13 (m, 1 H) 2,62 (d, 7=9,6 Hz, 1 H) 3,06 (d, 7=15,0 Hz, 1 H) 3,16 (t, 7=5,2 Hz, 1 H) 3,45 (s, 3 H) 3,56 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,65 (qd, 7=11,1, 5,2 Hz, 2 H) 3,79-3,94 (m, 2 H) 5,02 (br. s., 1 H) 5,94 (d, 7=9,6 Hz, 1 H) 6,10 (s, 1 H) 7,28-7,37 (m, 1 H) 7,37-7,47 (_m, 4 H) 8,02 (s, 1 H) (2 substituíveis não observados); LC-MS (ES⁺) m/z 505,3 [M+H].

Exemplo 53: sal de bis-amônio de A-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l

122 dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-cistina

Dimetil N-{ [(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-cistinato (167 mg, 0,25 mmol) dissolvido em THF (5 ml) foi tratado com IM de LiOH (5 ml, 5,0 mmol), depois vigorosamente agitado durante 1 h. A mistura foi neutralizada com HC1 1 N (5 ml) e concentrada para remover o THF. O resíduo foi extraído duas vezes com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas à aridez. Uma porção do resíduo foi purificada por meio de RP-HPLC (coluna de 30 X 100 XBridge; MeCN + 0,2 % de NH₄OH e H₂O +0,2 % de NH₄OH foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 70 % ao longo de 8 minutos) dando N-{[(3Ã,5Ã)-3-butil3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin8-il]metil}-L-cistina (20,5 mg, 0,032 mmol, 12,81 % de rendimento) como um sólido branco: LC-MS (ES ) m/z 638,25 [M-l]; LC-MS (ES⁺) m/z 640,27 [M+H].

Exemplo 54: ácido {[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-1,1dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfônico

Dietil {[(3Ã,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfonato (48,5 mg, 0,088 mmol) dissolvido em DCM (1 ml) foi tratado com bromo(trimetil)silano (67,1 mg, 0,44 mmol) à temperatura ambiente durante

123

h. A mistura de reação foi concentrada à aridez, depois purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 75 Sunfire a 55 ml/min; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 80 % ao longo de 11 minutos) dando ácido {[(3R,5R)-3-butil-3-etil-4-hidróxi7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}fosfônico (35,3 mg, 81 % de rendimento) como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,79 (t, 7=7,3 Hz, 3 H), 0,82-0,94 (m, 3 H), 1,05-1,52 (m, 5 H), 1,55-1,67 (m, 1 H), 1,77-2,02 (m, 1 H), 2,02-2,15 (m, 1 H), 2,83-3,10 (m, 2 H), 3,26-3,43 (m, 2 H), 3,38 (s, 3 H), 3,96 (s, 0 H), 6,09 (s, 1 H), 6,33 (s, 1 H), 7,30-7,38 (m, 1 H), 7,42 (t, 7=7,6 Hz, 2 H), 7,457,58 (m, 2 H), 7,84 (d, 7=2,5 Hz, 1 H), 8,00-8,05 (m, 1 H); LC-MS (ES') m/z 496-38 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z 498,18 [M+H].

Exemplo 55: sal de bis-amônio do ácido {(£)-2-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]etenil}fosfônico

Dietil {(E)-2-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]etenil}fosfonato (95 mg, 0,173 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml) e tratado com bromotrimetilsilano (0,090 ml, 0,69 mmol) a 22°C de um dia para o outro com agitação. A mistura de reação foi concentrada à aridez, e o produto bruto foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador NH4OH a 0,2 %, de 10 a 50 a 100 % ao longo de 8 min) dando ácido {(E)-2-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]etenil}fosfônico (51 mg, 59,8 % de rendimento) sal de bis-amônio como um sólido branco: RMN ^JH (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,76 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,81 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,98

124

1,30 (m, 4 Η) 1,31-1,55 (m, 2 Η) 1,67-1,81 (m, 1 Η) 2,00-2,14 (m, 1 Η) 2,65 (d, 7=10,2 Hz, 1 Η) 3,08 (d, 7=14,9 Hz, 1 Η) 3,43 (s, 3 Η) 3,55 (d, 7=14,9 Hz, 1 Η) 5,94 (d, 7=10,0 Hz, 1 Η) 6,10 (s, 1 Η) 6,31 (dd, 7=17,4, 13,9 Hz, 1 H) 7,13 (dd, 7=19,3, 17,8 Hz, 1 H) 7,28-7,37 (m, 1 H) 7,42 (d, 7=4,5 Hz, 4 H) 7,93 (s, 1 H) (prótons ácidos não observados). Grande constante de acoplamento (17,57 Hz) sugere isômero E; LC-MS (ES⁺) m/z 494,3 [M+H]. Exemplo 56: sal de amônio de JV-{[(32?,5R)-3-butil-3-etil-7-(metil0xi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} -L-treonina

HO,

Uma pasta fluida de 1,1-dimetiletil L-treoninato (255 mg, 1,20 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada com TEA (0,168 ml, 1,20 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo se adicionou

1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,602 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,20 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas dando o intermediário éster como um óleo transparente. O resíduo foi tratado com HC1 4N em 1,4-dioxano (10 ml, 40,0 mmol) à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi concentrada à aridez, depois purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador NH4OH a 0,2 %, de 10 a 70 a 100 % ao longo de 10 min) dando N-{[(3Ã,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-treonina (188 mg, 60,2 % de rendimento) sal de amônio como um sólido branco: RMN ’H (400

125

MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,971,28 (m, 4 H) 1,16 (d, 7=6,4 Hz, 3 H) 1,33-1,54 (m, 2 H) 1,68-1,79 (m, 1 H) 2,00-2,12 (m, 1 H) 2,59 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 2,96 (d, 7=4,7 Hz, 1 H) 3,06 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,44 (s, 3 H) 3,54 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,67-3,93 (m, 3 H) 5,94 (d, 7=9,4 Hz, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,29-7,37 (m, 1 H) 7,37-7,46 (m, 4 H) 8,03 (s, 1 H) (3 prótons substituíveis não observados); LC-MS (ES⁺) m/z

O. ,OH _ _

519,3 [M+H]. _

Exemplo 57: sàLjâíe^^^^o^Hç_l^-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1dióxido-5-fenil-2,3,4,^l5-tetra4iiÍro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-D-prolina

O

1,1-Dimetiletil D-prolinato (206 mg, 1,20 mmol) e 1,1 -dióxido de (32?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,60 mmol) foram combinados em DCM (5 ml), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (319 mg, 1,50 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 3 dias à temperatura ambiente. A mistura foi repartida entre DCM e H₂O, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente.

O resíduo foi tratado com TFA (4 ml, 51,9 mmol) à temperatura ambiente durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada à aridez, depois purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 100 XBridge; MeCN + 0,1 % NH₄OH e H₂O +0,1 % NH₄OH foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 70 % ao longo de 8 minutos) dando sal de amônio de 1{[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-D-prolina (333 mg, >99 % de rendimento) como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H), 0,81 (t, 7=7,4 Hz, 3 H), 0,95-1,31 (m, 4 H), 1,34-1,56 (m, 2 H), 1,67-2,14 (m, 5 H), 2,36-2,47 (m, 1 H), 2,58-2,81 (m, 1 H), 3,06 (d, 7=15,0

126

Hz, 1 Η), 3,14-3,27 (m, 1 Η), 3,35-3,47 (m, 1 Η), 3,49 (s, 3 Η), 3,62 (d, 7=15,0 Hz, 1 Η), 4,17-4,30 (m, 1 Η), 4,36 (d, 7=13,1 Hz, 1 Η), 4,50 (d, 7=13,1 Hz, 1 Η), 5,96 (br. s., 1 Η), 6,17 (s, 1 Η), 7,31-7,55 (m, 5 Η), 8,09 (s, 1 Η), 9,84 (br. s., 1 H); LC-MS (ES^-) m/z 513,6 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z 515,3 [M+H].

Exemplo 58: sal de amônio de A²-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-lisina

Uma pasta fluida de 1,1-dimetiletil #-{[(l,l-dimetiletil)óxi] carbonil}-L-lisinato.HCl (890 mg, 2,63 mmol) em DCM (10 ml) foi tratada com TEA (0,380 ml, 2,73 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo se adicionou 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (600 mg, 1,444 mmol), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (765 mg, 3,61 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi tratado com HC1 4N em 1,4-dioxano (10 ml, 40,0 mmol) a 22°C com agitação de um dia para o outro. A mistura foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador de NH4OH a 0,2 %, de 10 a 80 a 100 % ao longo de 10 min) dando A²-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} -L-lisina (297 mg, 37,7 % de rendimento) sal de amônio como uma espuma rosa: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 Η) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3

127

Η) 0,97-1,60 (m, 12 Η) 1,67-1,80 (m, 1 Η) 1,99-2,14 (m, 1 Η) 2,54 (d, 7=9,8 Hz, 1 Η) 2,64-2,78 (m, 3 Η) 3,06 (d, 7=14,9 Hz, 1 Η) 3,41 (s, 3 Η) 3,50 (dd, 7=15,0, 9,3 Hz, 2 Η) 3,65 (d, 7=15,0 Hz, 1 Η) 5,94 (d, 7=9,6 Hz, 1 Η) 6,06 (s, 1 Η) 7,32 (dq, 7=8,5, 4,2 Hz, 1 H) 7,41 (d, 7=4,5 Hz, 4 H) 7,99 (s, 1 H) (4 prótons substituíveis prótons não observados); LC-MS (ES ) m/z 546,4 [M+H].

Exemplo 59: sal de amônio de 2V²-{[(37?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-ó-fenil-l^^^-tetra-hidro-LÚ-benzotiazepin-S-iljmetil}-#,#dimetil-L-lisina

Uma pasta fluida de A^X-dimetil-L-lisina (250 mg, 1,187 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada com TEA (0,165 ml, 1,19 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min, em que após este tempo se adicionou

1,1-dióxido de (3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,60 mmol) e THF (3,00 ml), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (255 mg, 1,203 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente. A mistura de reação foi repartida entre DCM e H₂O, e as fases foram isoladas. Enquanto que a fase orgânica mostrou um mix de aldeído e álcool por meio de LCMS, a fase aquosa mostrou presença do produto desejado. A fase aquosa foi isolada, e o pH foi ajustado em 10 com Na₂CO₃ 1M aq. A camada aquosa foi extraída cinco vezes com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas à aridez dando o produto bruto como um óleo castanho. O material bruto foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30x100 XBridge, MeCN/H₂O contendo tamponador de NH₄OH a 0,2 %, de 10 a 80 a 100 % ao longo de 10 min)

128 dando sal de amônio de À/²-{[(3jR,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-A⁶,A⁶-dimetil-Llisina (23,5 mg, 6,8 % de rendimento) como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,981,66 (m, 12 H) 1,68-1,80 (m, 1 H) 1,99-2,09 (m, 1 H) 2,11 (s, 6 H) 2,14-2,23 (m, 2 H) 2,58 (d, 7=9,8 Hz, 1 H) 2,99-3,09 (m, 2 H) 3,43 (s, 3 H) 3,54 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,59-3,83 (m, 2 H) 5,94 (d, 7=9,4 Hz, 1 H) 6,09 (s, 1 H) 7,28-7,38 (m, 1 H) 7,38-7,46 (m, 4 H) 8,02 (s, 1 H) (2 prótons substituíveis não observados); LC-MS (ES⁺) m/z 574,4 [M+H].

Exemplos 60 e 61: sal de tetra-amônio de [({[(3Ã,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}imino)dimetanodiil]bis(ácido fosfônico) e sal de triamônio do ácido [({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}{[(etilóxi)(hidróxi)fosforil]metil}amino)metil] fosfônico

HO

Tetraetil [({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5 fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}imino)dimetanodiil]bis (fosfonato) (100 mg, 0,14 mmol) dissolvido em DCM (5 ml) foi tratado com bromo(trimetil)silano (171 mg, 1,116 mmol) a 23°C de um dia para o outro. A mistura foi concentrada à aridez, e o produto bruto foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 100 XBridge em condições básicas; MeCN +0,1 % NH4OH e H₂O +0,1 % ΝΉ4ΟΗ foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 55 % ao longo de 6 minutos, de 100 % a 100 % a 8 minutos) dando [({[(3Á,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro129

1,4-benzotiazepin-8-il]metil}imino)dimetanodiil]bis(ácido fosfônico) (45,4 mg, 53,8 % de rendimento) sal de tetra-amônio: RMN (400 MHz, DMSOd₆) δ ppm 0,75 (t, 7=6,9 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,5 Hz, 3 H) 0,97-1,29 (m, 4 H) 1,32-1,55 (m, 2 H) 1,68-1,81 (m, 1 H) 1,98-2,14 (m, 1 H) 2,58-2,77 (m, 5 H) 3,09 (d, 7=14,8 Hz, 1 H) 3,41 (s, 3 H) 3,52 (d, 7=15,0 Hz, 1 H) 3,75-3,96 (m, 2 H) 5,94 (d, 7=8,6 Hz, 1 H) 6,08 (s, 1 H) 7,25-7,37 (m, 1 H) 7,36-7,49 (m, 4 H) 7,90 (s, 1 H) (prótons de ácido fosfônico não observados); LC-MS (ES⁺) m/z 605,2 [M+H]) e ácido [({[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} {[(etilóxi)(hidróxi) fosforil]metil}amino)metil]fosfônico (10,8 mg, 12,2 % de rendimento) sal de triamônio: (RMN ^!H (400 MHz, DMSO-cQ δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,96-1,28 (m, 4 H) 1,08 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 1,31-1,54 (m, 2 H) 1,68-1,80 (m, 1 H) 1,99-2,11 (m, 1 H) 2,61-2,79 (m, 5 H) 3,06 (d, /=14,9 Hz, 1 H) 3,41 (s, 3 H) 3,53 (d, 7=14,9 Hz, 1 H) 3,64-3,76 (m, 2 H) 3,76-3,93 (m, 2 H) 5,94 (d, 7=9,6 Hz, 1 H) 6,08 (s, 1 H) 7,26-7,36 (m, 1 H) 7,36-7,48 (m, 4 H) 7,94 (s, 1 H) (prótons de ácido fosfônico não observados); LC-MS (ES⁺) m/z 633,3 [M+H]).

Exemplo 62: sal de trifluoroacetato de ácido [({[(37?,5Á)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l ,4-benzotiazepin-8il] metil} amino)metil] fosfônico

Dietil [({[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)metil] fosfonato (36,3 mg, 0,064 mmol) dissolvido em DCM (1 ml) foi tratado com bromo(trimetil)silano (100 mg, 0,65 mmol) a 23°C durante 18 h. A mistura foi concentrada à aridez, e o produto bruto foi purificado por meio de RP

130

HPLC (coluna 30 X 75, C18, 5um H₂O Sunfire Column a 55 ml/min; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 10 a 100 ao longo de 8 min., de 100 a 100 um 10 min) dando ácido [({[(3R,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)metil]fosfônico (6,0 mg, 18,4 % de rendimento) sal de trifluoroacetato como um vidro branco: RMN ^!H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,81 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,951,32 (m, 4 H) 1,33-1,56 (m, 2 H) 1,68-1,80 (m, 1 H) 1,98-2,12 (m, 1 H) 2,632,73 (m, 1 H) 3,00-3,13 (m, 2 H) 3,48 (s, 3 H) 3,57-3,66 (m, 2 H) 4,14-4,30 (m, 2 H) 5,86-6,02 (m, 1 H) 6,15 (s, 1 H) 7,31-7,50 (m, 5 H) 8,10 (s, 1 H) (3 prótons substituíveis não observados); LC-MS (ES) m/z 509,5 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z 511,2 [M+H].

Exemplo 63: sal de amônio de l-{[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}-L-prolina

1,1-Dimetiletil L-prolinato.HCl (206 mg, 1,203 mmol) e 1,1dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carbaldeído (250 mg, 0,60 mmol) foram combinados em DCM (5 ml), e a mistura foi agitada durante 1 h. Adicionou-se NaHB(OAc)₃ (319 mg, 1,504 mmol), e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi tratado com HC1 4N em 1,4-dioxano (10 ml, 40,0 mmol) à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30

131

X 100 XBridge column; MeCN + 0,2 % de NH₄OH e H₂O +0,2 % de NH4OH foram usados como o sistema solvente; de 10 % a 70 % ao longo de 8 minutos, de 100 % a 100 % a 10 minutos) dando l-{[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}-L-prolina (260 mg, 84 % de rendimento) sal de amônio como um sólido branco: RMN 'H (400 MHz, DMSO-Jg) δ ppm 0,75 (t, 7=7,0 Hz, 3 H) 0,80 (t, 7=7,4 Hz, 3 H) 0,96-1,29 (m, 4 H) 1,32-1,53 (m, 2 H) 1,64-1,94 (m, 4 H) 1,99-2,16 (m, 2 H) 2,62 (d, 7=10,0 Hz, 1 H) 2,98-3,12 (m, 2 H) 3,26-3,37 (m, 2 H) 3,44 (s, 3 H) 3,55 (d, 7=15,0 Hz, 1 H) 3,82 (d, 7=14,1 Hz, 1 H) 3,894,00 (m, 1 H) 5,94 (d, 7=9,2 Hz, 1 H) 6,10 (s, 1 H) 7,27-7,37 (m, 1 H) 7,42 (d, 7=4,5 Hz, 4 H) 7,99 (s, 1 H) (próton de COOH não observado); LC-MS (ES⁺) m/z 513,5 [M+H].

Exemplo 64: ácido ({[(3R,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)(oxo)acético

Etapa 1: Uma solução de {[(3Ã,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil}amina (77 mg, 0,19 mmol) em DCM (924 μΐ) a 0°C foi tratada com Et₃N (56,7 μΐ, 0,407 mmol) seguido de metil cloro(oxo)acetato (18,7 μΐ, 0,203 mmol). A reação foi agitada durante 30 min, depois aquecida a 25°C e agitada durante mais 1 h. LCMS indicou 92:8/prod:SM. Adicionou-se mais cloreto de ácido (2 ul), depois isto foi agitado a 25°C durante 2 h. A reação foi diluído com DCM e H₂O, as camadas foram separadas, e a camada aquosa extraída com DCM (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo dando metil ({[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l

132 dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)(oxo) acetato (93 mg, 100 % de rendimento) que foi usado tal qual na etapa seguinte: RMN Ή (CDC1₃) δ 7,96 (s, 1H), 7,28-7,54 (m, 6H), 6,18 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,48 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,41 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,96-3,10 (m, 2H), 2,06-2,22 (m, 1H), 1,76-1,90 (m, 1H), 1,031,58 (m, 6H), 0,88 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 503 [M+H].

Etapa 2: Uma solução de metil ({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)(oxo)acetato (93 mg, 0,185 mmol) em THF (694 μΐ) e H₂O (231 μΐ) a 0°C foi tratada com LiOH 1M aq. (204 μΐ, 0,204 mmol). A reação foi agitada em 0°C durante 60 min, depois aquecida a 25°C e agitada durante 1 h. A reação foi diluída com EtOAc e acidificada com HC1 diluído. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo. Triturou-se o resíduo com hexanos/Et₂O, depois isto foi recolhido como um sólido branco por meio de filtração. Obteve-se ácido ({[(3/?,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)(oxo)acético (79 mg, 87 % de rendimento) como um sólido branco: RMN Ή (DMSO-d₆) δ ppm 9,37 (br. s., 1H), 7,75 (br. s., 1H), 7,27-7,65 (m, 5H), 6,17 (br. s., 1H), 5,92 (br. s., 1H), 4,16 - 4,38 (m, 2H), 3,48 (m 4H), 3,03 (br s, 1H), 1,95 - 2,26 (m, 1H), 1,62 - 1,88 (m, 1H), 0,94 - 1,61 (m, 6H), 0,46 - 0,95 (m, 6H)^; LCMS (ES⁺) m/z 489 [M+H],

Exemplo 65: sal de trifluoroacetato de ácido 3-({[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} amino)pentanodióico

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Etapa 1: Uma solução de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (150 mg, 0,338 mmol) e dimetila 3-aminopentanodioato (89 mg, 0,507 mmol) em

1,2-dicloroetano (DCE) (3,36 ml) foi tratada com ácido acético (19,36 μΐ, 0,338 mmol) e agitada a 25°C durante 1 h. A reação foi tratada com NaHB(OAc)₃ (71,7 mg, 0,338 mmol), depois agitada durante 15 h. A reação foi tratada com mais NaHB(OAc)₃ (71,7 mg, 0,338 mmol), depois agitada durante 4 h. A reação foi despejada em DCM e Na₂CO₃ aq. a 10 %_; As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com DCM (2x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia preparativa em SiO₂ usando hexanos:EtOAc como eluente dando dimetil 3-({[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro- l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodioato (142 mg, 69,7 % de rendimento).

Etapa 2: Uma solução de dimetil 3-({[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino) pentanodioato (140 mg, 0,232 mmol) em THF (1,05 ml) e H₂O (348 μΐ) a 25°C foi tratada com LiOH IN (929 μΐ, 0,929 mmol), depois agitada durante 4 h. THF foi removido sob pressão reduzida, depois o resíduo foi lipofilizado a um sólido branco. O material foi purificado via purificação por RP-HPLC (coluna 30 X 150 mm, Cl8 5um H₂O Sunfire Column; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 10 a 100 % ao longo de 10 min.) dando ácido 3-({[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-

1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} amino)

134 pentanodióico (81 mg, 50,6 % de rendimento) sal de trifluoroacetato como um sólido branco amorfo: RMN ^JH (DMSO-dô) δ ppm 12,79 (br. s., 1H), 8,75 (br. s, 1H), 8,48 (br. s., 1H), 8,10 (s, 1H), 7,28 - 7,56 (m, 5H), 6,17 (s, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,27 (br. s., 2H), 3,69 - 3,80 (m, 1H), 3,62 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,10 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 2,62 - 2,89 (m, 4H), 2,07 (br. s., 1H), 1,76 (br. s, 1H), 0,99-1,55 (m, 10H), 0,86 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,76 (t, J = 6,9 Hz, 3H); LC-MS (ES⁺) m/z 575,1 [M+H].

Exemplo 66: sal de trifluoroacetato de 7V-{[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} glicina

Etapa 1: Uma solução de 1,1-dióxido de 3,3-dibutil-7(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (150 mg, 0,338 mmol) e 1,1-dimetiletil glicinato (44,4 mg, 0,338 mmol) em 1,2dicloroetano (DCE) (3,36 ml) foi tratada com ácido acético (19,36 μΐ, 0,338 mmol) e agitada a 25°C durante 1 h. A reação foi tratada com NaHB(OAc)₃ (71,7 mg, 0,338 mmol), depois agitada durante 5 h. Adicionou-se mais NaHB(OAc)₃ (71,7 mg, 0,338 mmol), depois a agitação foi prosseguida a 25°C durante 4 h. A reação foi despejada em DCM e Na₂CO₃ aq. a 10 %, As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com DCM (2x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (MgSO₄), filtradas, e concentradas em vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia preparativa em SiO₂ usando hexanos:EtOAc como eluente dando 1,1 -dimetiletil N-{[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} glicinato (100 mg, 52,9 % de rendimento).

Etapa 2: Uma solução de 1,1-dimetiletil N-{[3,3-dibutil-7

135 (metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil} glicinato (130 mg, 0,233 mmol) em DCM (2 ml) a 25°C foi tratada com excesso de HC1 4M em 1,4-dioxano (3,53 ml, 116 mmol), depois agitada durante 15 h. A reação foi concentrada em vácuo, depois o resíduo foi triturado com Et₂O. Um sólido branco foi recolhido por meio de filtração, depois purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 150 mm, C18 5 um H₂O Sunfire Column; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O + 0,05 % de TFA como o sistema solvente; de 10 a 100 % ao longo de 10 min.) dando N-{[3,3dibutil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin8-il]metil}glicina (70 mg, 48,8 % de rendimento) sal de trifluoroacetato como um sólido branco amorfo: RMN 'H (DMSO-dg) δ ppm 13,72 (br. s., 1H), 8,76 - 9,61 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 7,26 - 7,52 (m, 5H), 6,17 (s, 1H), 5,75 - 6,04 (br s, 1H), 4,05 - 4,28 (m, 2H), 3,84 (br. s., 2H), 3,63 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,10 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 1,99 - 2,15 (m, 1H), 1,64 - 1,84 (m, 1H), 0,99 - 1,52 (m, 10H), 0,87 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 0,75 (t, J = 6,9 Hz, 3H); LCMS (ES⁺) m/z 503,1 [M+H].

Exemplo 67: sal de trifluoroacetato de ácido {[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,ldióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil} fosfônico

Uma solução de dietil {[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]metil} fosfonato (200 mg, 0,354 mmol) em DCM (6,9 ml) a 25°C foi tratada com TMSBr (213 μΐ, 1,640 mmol), depois agitada a 25°C durante 15 h. A reação foi concentrada em vácuo, depois triturada com Et₂O/hexanos. Um sólido branco foi recolhido por meio de filtração que foi purificado via RP-HPLC preparativa (coluna 30 X 150 mm, Cl8 5um H₂O Sunfire Column; MeCN + 0,05 % de TFA & H₂O

136 + 0,05 % de TFA foram usados como o sistema solvente; de 10 a 80 % ao longo de 12 min.) dando ácido {[3,3-dibutil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}fosfônico (60 mg, 27,2 % de rendimento) sal de trifluoroacetato como um sólido branco: RMN ^]H (CDC1₃) δ ppm 7,87 (br. s., 1H), 7,50-7,73 (m, 5H), 6,58 (s, 1H), 6,50 (s, 1H), 3,89 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,34-3,66 (m, 3H), 2,83 - 3,06 (m, 1H), 2,44 2,75 (m, 1H), 1,18-2,02 (m, 10H), 0,74 - 1,04 (m, 6H); LC-MS (ES⁺) m/z 510,4 [M+H].

Exemplo 68: sal de trifluoroacetato de A-([(3Ã,5Á)-3-butil-7-(dimetilamino)3-etil-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8il]metil}glicina

1,1-Dióxido de (3R,5R)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (22 mg, 0,051 mmol) e 1,1-dimetiletil glicinato (33,7 mg, 0,257 mmol) foram combinados em DCM (4 ml) e agitados durante 1 h à temperatura ambiente. A mistura foi tratada com NaHB(OAc)₃ (76 mg, 0,359 mmol), depois agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. A mistura de reação foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi purificado sobre 4 g de sílica-gel eluindo com de 30 a 100 % de EtOAc/hexanos dando o intermediário t-butil éster (18 mg, 0,033 mmol, 64,2 % de rendimento) como um óleo transparente. LC-MS (ES⁺) m/z 544,34 [M+H]. O éster foi tratado com HC1 4N em 1,4-dioxano (1,283 ml, 5,13 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada de um dia para o outro, depois concentrada à aridez. O

137 material foi purificado por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 75 Sunfire; 55 ml/min; de 10 % a 100 % de MeCN em H₂O com 0,05 % de tamponador TFA ao longo de 8 minutos) dando sal de trifluoroacetato N-{[(3Ã,57?)-3-butil-7(dimetilamino)-3-etil-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}glicina (17,1 mg, 0,024 mmol, 46,5 % de rendimento) como um óleo transparente: RMN Ή (400 MHz, DMSO-J₆) δ ppm 0,77 (t, 7=7,0 Hz, 3 H), 0,82 (t, J=7,3 Bz, 3 H), 0,94 - 1,30 (m, 4 H), 1,36 - 1,63 (m, 2 H), 1,70 - 1,86 (m, 1 H), 2,02 - 2,20 (m, 1 H), 2,44 (s, 6 H), 3,16 (s, 1 H), 3,56 - 3,80 (m, 1 H), 3,91 (br. s, 2 H), 4,14 - 4,40 (m, 2 H), 5,94 (br. s., 1 H), 6,27 (s, 1 H), 7,16 - 7,65 (m, 5 H), 8,13 (s, 1 H), 9,35 (br. s., 2 H) (próton de amina não observado); LC-MS (ES') m/z 486,4 [M-l]. LCMS (ES⁺) m/z 488,3 [M+H].

Exemplo 69: sal de bis-amônio do ácido 3-({[(3Ã,5Ã)-3-butil-7(dimetilamino)-3-etil-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico

1,1-Dióxido de (3Ã,5Ã)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina-8-carbaldeído (22 mg, 0,051 mmol) e dimetil 3-aminopentanodioato (45,0 mg, 0,257 mmol) foram combinados em DCM (4 ml) e agitados durante 1 h à temperatura ambiente. A mistura foi tratada com NaHB(OAc)₃ (76 mg, 0,359 mmol), depois agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. A mistura foi repartida entre DCM e salmoura, e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM, e as fases orgânicas foram combinadas, secas sobre MgSO₄, filtradas, e concentradas a um óleo transparente. O resíduo foi purificado sobre 40 g de silica eluído com de 30 a 100 % de EtOAc/hexanos dando o intermediário bis

138 metil éster como um óleo transparente. LC-MS (ES⁺) m/z 588,29 [M+H], O éster foi dissolvido em TEIF (0,5 ml) e tratado com LiOH 1M (0,513 ml, 0,513 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada de um dia para o outro. A mistura foi concentrada à aridez e purificada por meio de RP-HPLC (coluna 30 X 100 XBridge a 55 ml/min; de 10 % a 100 % de MeCN em H₂O com 0,1 % de tamponador NH4OH ao longo de 8 minutos) dando sal de bisamônio do ácido 3-({[(3R,5R)-3-butil-7-(dimetilamino)-3-etil-l,l-dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]metil}amino)pentanodióico (11,2 mg, 0,019 mmol, 36,7 % de rendimento) como um sólido branco: RMN ’H (400 MHz, DMSO-7₆) δ ppm 0,75 (t, 7=7,1 Hz, 3 H), 0,79 (t, 7=7,6 Hz, 3 H), 0,94 - 1,29 (m, 4 H), 1,31 - 1,52 (m, 2 H), 1,65 - 1,82 (m, 1 H), 1,66 - 1,83 (m, 1 H), 1,96 - 2,15 (m, 1 H), 2,26 - 2,40 (m, 4 H), 2,47 (s, 6 H), 2,60 (d, 7=9,8 Hz, 1 H), 3,06 (d, 7=14,9 Hz, 1 H), 3,16 (t, 7=6,2 Hz, 1 H), 3,52 (d, 7=15,0 Hz, 1 H), 3,78 (s, 2 H), 5,88 (d, 7=9,6 Hz, 1 H), 6,11 (s, 1 H), 7,26 7,35 (m, 1 H), 7,35 - 7,48 (m, 4 H), 7,94 (s, 1 H) (prótons do ácido não observados); LC-MS (ES’) m/z 558,3 [M-l]. LC-MS (ES⁺) m/z 560,2 [M+H].

Exemplo 70: ácido 3-({ [(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepin-8-il]carbonil}amino)pentanodióico

HOOC.

HOOC.

Dimetil 3-({[(37?,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]carbonil} amino)pentanodioato (Intermediário 47, 212 mg, 0,227 mmol) em uma mistura a 1:1:1 de metanol/água/tetra-hidrofurano (15 ml) foi adicionado de monoidrato de hidróxido de lítio (28,6 mg, 0,681 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro e parcialmente concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi então ajustado em pH = 2 usando ácido

139 clorídrico IN e repartido entre água e diclorometano. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO4), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (Coluna do meio: Gilson 845Z Prep. System; Sunfire C18 5μΜ, 30x150 mm; Método: 10-100 % de MeCN/H₂O com 0,05 % de TFA ao longo de 10 min, 45 ml/min, λ = 220, 254 nm) resultou no composto titular como um sólido amarelo claro (61 mg, 95 % puro, 38 %) como um sal de TFA: RMN Ή (400 MHz, DMSO-dg) δ 8,40 8,55 (m, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,24 - 7,55 (m, 5H), 6,17 - 6,28 (m, 1H), 5,86 6,05 (m, 1H), 4,46 - 4,63 (m, 1H), 3,47 - 3,70 (m, 4H), 3,06 - 3,20 (m, 1H), 2,52 - 2,61 (m, 4H), 1,97 - 2,23 (m, 1H), 1,66 - 1,88 (m, 1H), 1,34 - 1,61 (m, 2H), 0,95 - 1,34 (m, 4H), 0,68 - 0,89 (m, 6H); ES-LCMS m/z 561 (M+J7)⁺.

Exemplo 71: l-[(3R,5R)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-1,1 -dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il] etanona

A uma solução gelada de 1,1-dióxido de (3R,5R)-3-butil-3-etilN-metil-N,7-bis(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepina-8carboxamida (Intermediário 44, 160 mg, 0,337 mmol) em tetra-hidrofurano (5 ml) adicionou-se brometo de metilmagnésio (0,337 ml, 1,011 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, tratada com uma solução saturada de cloridrato de amônio, e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura saturada, seca (Na₂SO₄), filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. Purificação via cromatografia em SiO₂ (MeOH:DCM = 0:100 a 3:97) resultou no composto titular (78 mg, 94 % puro, 50 %) como um sólido branco: RMN 'H (400 MHz, CDC1₃) δ ppm 8,43 (s, 1H), 7,30 - 7,51 (m, 5H), 6,25 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,43 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 3,00 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 2,54 (s, 2H), 2,11 - 2,26 (m, J = 4,1

140

Hz, 1H), 1,77 - 1,93 (m, 1H), 1,57 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 1,38 - 1,51 (m, 2H), 1,01 - 1,35 (m, 5H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H); ESLCMS m/z 430 (M+H)⁺.

Exemplo 72: ácido 3-[(3Ã,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-l,l-dióxido-5-fenil-

2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]pentanodióico

Uma mistura de tetraetil 2-[(3Á,57?)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-1,4-benzotiazepin-8-il]-1,1,3,3propanotetracarboxilato (Intermediário 46, 120 mg, 0,167 mmol) e 37 % de ácido clorídrico (3 ml) foi agitada em refluxo durante 20 h. LC-MS mostrou que não restou qualquer material de partida, porém, ao invés, uma mistura de tri-ácido e di-ácido. Adicionou-se mais ácido clorídrico a 37 % (3 ml), e a mistura de reação foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, depois concentrada sob pressão reduzida. Purificação com HPLC (eluindo com MeCN/água com 0,05 % de TFA-H₂O e 0,05 % de TFA-MeCN) resultou no composto titular (76 mg, 95 % puro, 68 %) como um sólido branco: RMN Ή (400 MHz, DMSOd₆) δ ppm 12,14 (br. s, 2H), 7,78 (br. s., 1H), 6,98 - 7,66 (m, 5H), 5,58 - 6,41 (m, 1H), 3,55 - 3,82 (m, 2H), 3,46 (s, 3H), 2,59 (d, J = 7,2 Hz, 4H), 0,95 2,26 (m, 7H), 0,68 - 0,92 (m, 6H); ES-LCMS m/z 518 (M+H)⁺.

Exemplo 73: ácido 2-((3R,5Ã)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro- 1,4-benzotiazepina-8-carboxamido)acético

141

A uma solução em DMF solução de 1,1-dióxido de ácido (32?,5Á)-3-butil-3-etil-7-(metilóxi)-5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4benzotiazepina-8-carboxílico (Intermediário 4, 0,025 g, 0,058 mmol) e cloridrato de metil éster de glicina (0,008 g, 0,064 mmol) a 0°C adicionou-se HATU (0,024 g, 0,064 mmol) seguido de DIPEA (0,009 g, 0,070 mmol). A reação foi agitada durante 10 min e, depois aquecida à temperatura ambiente. Após lha reação foi concentrada a meio volume e adicionou-se água (3 ml). O precipitado foi filtrado, seco, e usado sem purificação adicional. O material foi dissolvido em THF (0,500 ml) e adicionou-se H₂O (0,250 ml) seguido de LiOH (0,007 g, 0,174 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h, depois concentrado em vácuo. O resíduo foi cromatografado via cromatografia em SiO₂ usando DCM/MeOH dando o composto titular com 90 % de pureza: RMN Ή (400 MHz, MeOH-^ δ ppm 8,63 (s, 1 Η), 7,38 - 7,58 (m, 5 Η), 6,46 (br. s., 1 H), 6,20 (br. s., 1 H), 4,04 - 4,21 (m, 2 H), 3,68 (s, 3 H), 2,39 (br. s., 1 H), 1,90 (br. s, 1 H), 1,75 (br. s., 1 H), 1,52 (br. s., 1 H), 1,05 - 1,43 (m, 6 H), 0,94 (t, 7=7,46 Hz, 3 H), 0,84 (t, 7=6,98 Hz, 3 H); ESLCMS m/z 489 (M+//)⁺.

Método para a determinação da cristalinidade:

Realizou-se análise de calorimetria diferencial de varredura usando um DSC TA Instruments Q1000 DSC. Uma amostra foi carregada em uma panela de alumínio não vedada hermeticamente e escaneada sob purga com nitrogênio a 10°C/min. A análise termogravimétrica foi realizada usando um equipamento TA instruments Q5000 TGA. A amostra foi carregada em uma panela de platina e escaneada desde a temperatura ambiente até passar pelo início da decomposição a 10°C/min.

Uma amostra do Exemplo cristalino final 26 do Método 3 apresentou um início de decomposição a aproximadamente 207°C. TGA confirmou que a endotermia da DSC deveu-se à decomposição ao invés de uma fusão verdadeira. Não se observou por TGA perda de peso significativa

142 (menos de 0,5 % peso/peso) antes da decomposição.

Uma amostra do Exemplo cristalino final 26 do Método 3 apresentou significativos picos de difração no padrão de difração de raio-X (PXRD) em valores em dois teta em graus e espaçamento d em Angstroms em parênteses de 4,9 (18), 5,3 (17), 9,8 (9,0), 12,0 (7,4), 13,2 (6,7), 18,5 (4,8), 19,8 (4,5), 21,1 (4,2).

Uma varredura de difração de raio-X em pó foi obtida enchendo-se um capilar de vidro com 1 mm com a amostra. A varredura de PXRD foi coletada usando um difrátômetro PANalytical X’Pert Pro MPD equipado com um tubo de raio-X de cobre, um espelho elíptico de feixe incidente e um detector PANalytical X’celerator. Pó de silício (NIST 640b) foi usado como um padrão interno para corrigir, se necessário, para erros 2teta experimentais. Adicionalmente, uma varredura de ângulo baixo de faixa curta foi comparada com a de uma varredura positiva de ângulo baixo de faixa curta para avaliar o erro em 2teta para os picos de difração mais baixos observados (próximo de 5 graus 2teta) e também para verificar se o capilar estava alinhado apropriadamente no feixe de raio-X. A difração de dados foi coletada de 3,5 a 90 graus 2teta. Uma varredura separada de um capilar enchido com amostra pura (sem padrão interno) foi coletada de 3,5 a 50 graus 2teta.

Método para a determinação da inibição de iBAT humano:

Na preparação para medição da absorção de ácido biliar para o interior de células expressando o cotransportador de ácido biliar ileal (iBAT, ileal bile acid cotransporter), células HEK293 foram cultivadas em DMEM/F12 suplementado com FBS a 10 %. Vinte e quatro horas antes de realizar um experimento células foram colhidas quando a uma confluência de 80-90 %. Células foram semeadas em placas revestidas com poli-d-lisina a 50.000 células por poço, e vírus Bacman iBAT humano foi adicionado de tal forma que cada poço contém 3,67 x 10e6 pfu (73,4 pfu/célula). Cada placa de

143 ensaio foi coberta com Breathe Easy Seal e colocada em uma incubadora durante 24 horas de forma a permitir a expressão do transportador.

No dia do experimento de absorção adicionou-se 10 mM de HEPES a solução salina balanceada de Hank, e o pH foi ajustado em 7,4 com TRIS (HBSSH). O tamponador de ensaio foi preparado adicionando-se 100 pM de [³H]-taurocolato e 10 μΜ de taurocolato frio à temperatura ambiente HBSSH. Preparou-se um tamponador de lavagem separado adicionando-se 10 μΜ de taurocolato frio a HBSSH (—30 ml por placa de ensaio) e colocado sobre gelo. Usando DMSO a 100 %, curvas de diluição de 3 vezes, 8 pontos, para cada composto de teste foram preparadas partindo de 200 μΜ. De maneira análoga, preparou-se curva dose-resposta de 8 pontos a partir do composto de controle 1,1-dióxido de [(3R,5R)-3-butil-3-etil-7,8-bis(metilóxi)5-fenil-2,3,4,5-tetra-hidro-l,4-benzotiazepina (Brieaddy, L.E. WO9605188, 1996)] partindo de 1,8 mM. Placas de drogas foram criadas adicionando-se 3 μΐ de cada concentração em uma placa de 96 poços com fundo em V, depois diluiu-se 60 vezes com 177 μΐ de tamponador de ensaio. Placas foram removidas da incubadora e deixadas resfriar à temperatura ambiente. O meio foi aspirado, e poços foram lavados uma vez com 300 μΐ HBSSH. 50 μΐ de cada concentração de curva dose-resposta foram adicionados em triplicata por coluna nas placas de ensaio, reservando a coluna 10 para o controle (tamponador de ensaio + 1,67 % de DMSO) e colunas 11 e 12 para o composto de controle. Placas foram incubadas à temperatura ambiente durante 90 minutos, depois as placas foram aspiradas, depois lavadas IX com 300 μΐ de tamponador de lavagem. Adicionou-se 220 μΐ de Microscint 20 em cada poço, e as placas foram fechadas hermeticamente. A quantidade de [³H]taurocolato no lisado de células foi quantificada usando um contador de cintilação de microplacas no dia seguinte.

O percentual de inibição de absorção foi determinado usando a fórmula a seguir para cada concentração de droga: 100*(l-((Tl-C2) / (Cl 144

C2))); em que TI é a cpm média para o composto de teste, Cl é a cpm média observada na ausência de qualquer inibição adicionado, e C2 é cpm média observada na presença de uma substância conhecida por eliciar 100 % de inibição da absorção (30 μΜ de composto de controle). IC50’s podem ser 5 geradas usando a fórmula, y = (Vmax * χ^Λη) / (Κ^Λη + χ^Λη).

Os compostos da invenção foram testados no ensaio acima e os resultados encontram-se resumidos abaixo onde cada número é uma média de pelo menos 2 pontos de dados.

Composto

iBAT IC50 (nM)

Exemplo 1 Exemplo 2 Exemplo 3 Exemplo 4 Exemplo 5 Exemplo 6 Exemplo 7 Exemplo 8 Exemplo 9 Exemplo 10 Exemplo 11 Exemplo 12 Exemplo 13 Exemplo 14 Exemplo 15 Exemplo 16 Exemplo 17 Exemplo 18 Exemplo 19 Exemplo 20 Exemplo 21 Exemplo 22 Exemplo 23 Exemplo 24 Exemplo 25 Exemplo 26 Exemplo 27 Exemplo 28 Exemplo 29 Exemplo 30 Exemplo 31 Exemplo 32 Exemplo 33 Exemplo 34 Exemplo 35 Exemplo 36 Exemplo 37 Exemplo 38 Exemplo 39

32 11 2 2540 4 23 145 73 3 17 20 68 167 276 504 731 3330 728 622 4 51 2440 2 73 6 43 47 55 367 1287 407 190 2698 2790 54 365 9 249 619

145

Exemplo 40

Exemplo 41

Exemplo 42

Exemplo 43

Exemplo 44

Exemplo 45

Exemplo 46

Exemplo 47

Exemplo 48

Exemplo 49

Exemplo 50

Exemplo 51

Exemplo 52

Exemplo 53

Exemplo 54

Exemplo 55

Exemplo 56

Exemplo 57

Exemplo 58

Exemplo 59

Exemplo 60

Exemplo 61

Exemplo 62

Exemplo 63

Exemplo 64

Exemplo 65

Exemplo 66

Exemplo 67

Exemplo 68

Exemplo 69

Exemplo 70

Exemplo 71

Exemplo 72

Exemplo 73

4670

3330

128

7679

648

1950

124

131

425

751

1458

3326

3330

3360

3900

8992

337

100

100 >3000 não testado

Claims (6)

1. Composto, caracterizado pelo fato de compreender

2. Composto, caracterizado pelo fato de compreender

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que referido composto é cristalino.

4. Sal farmaceuticamente aceitável de um composto, caracterizado pelo fato de que referido composto é como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3.

5. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto ou um sal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4.

6. Uso de um composto ou um sal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção de diabetes melito (Tipo I e Tipo II) ou obesidade.