BR102014007948A2

BR102014007948A2 - composição de mistura compreendendo rhamnolipídeos

Info

Publication number: BR102014007948A2
Application number: BR102014007948A
Authority: BR
Inventors: Christian Hartung; Fabien Cabirol; Martin Schilling; Petra Allef; Steffen Schaffer
Original assignee: Evonik Industries Ag
Priority date: 2013-04-02
Filing date: 2014-04-02
Publication date: 2015-12-08
Also published as: DE102013205756A1; EP2786743A1; US20140296168A1; CA2847899C; CA2847899A1; JP2014201589A; JP6516412B2; US10292924B2; CN104095765B; CN104095765A; BR102014007948B1; EP2786743B1

Abstract

composição de mistura compreendendo rhamnolipídeos. a invenção refere-se a uma composição de mistura compreendendo rhamnolipídeos, a um processo para sua preparação, ao seu uso para produzir formulações e a formulações que compreendem essa composição de mistura.

Description

COMPOSIÇÃO DE MISTURA COMPREENDENDO RHAMNOLIPÍDEOS

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A invenção refere-se a uma composição de mistura que compreende rhamnolipídeos, a um processo para a sua preparação, a sua utilização para a produção de formulações e a formulações compreendendo essa composição de mistura.

TÉCNICA ANTERIOR

[002] Rhamnolipídeos são glicolípídeos que são produzidos na natureza livre a partir de bactérias, por exemplo, Pseudomonas aeruginosa. Os microrganismos usualmente produzem misturas de rhamnolipídeos que compreendem mono e di-rhamnolípídeos que têm uma ou duas unidades de ramnose por molécula e podem conter cadeias de lipideos de diferente comprimento.

[003] EP 153.634 descreve uma composição de mistura com uma relação em peso quase equilibrada de mono - a di-rhamnolipídeos.

[004] Da mesma forma, EP 0.499.434 descreve, no Exemplo 3, composições de rhamnolipídeos com uma relação em peso equilibrado dos dois componentes.

[005] EP 2.410.039 descreve composições de limpeza que compreendem mono- e di-rhamnolipídeos com uma relação em peso de 95:5 a 45:55.

[006] A caracterização das atividades de superfície de di- rhamnolipídeos puros, mono-rhamnolipídeos puros e misturas dos mesmos estão descritas, por exemplo, em Chen et al., Solutlon self-assembly and adsorption at the air-water interface of the monorhamnose and dirhamnose rhamnolipids and theír mixtures, Langmuir . 2010 07 de dezembro; 26 ¢23:18281-92.

[007] Uma desvantagem dos rhamnolipídeos até então conhecida preparáveis por processos fermentativos simples é a sua fração relativamente pequena de di-rhamnolipídeos.

[008] Em adição a isso, estas composições de rhamnolipideo frequentemente compreendem rhamnolipídeos com somente uma cadeia acila como subproduto indesejável.

[009] Composições de di-rhamnolipídeos puro purificadas por fracionamento são caracterizadas sob uso como cosmético por uma sensação de pele seca, áspera.

[0010] Era um objetivo da invenção fornecer composições que tenham boas propriedades de espuma e, além disso, tenham uma sensação de leveza na pele quando usadas em composições de cuidados da pele ou composições de limpeza de pele.

Descrição da invenção [0011] Surpreendentemente, revelou-se que a composição da mistura descrita a seguir é capaz de alcançar o objetivo endereçado pela invenção.

[0012] Por conseguinte, a presente invenção fornece composições de mistura que compreendem certos rhamnolipídeos em relações em peso definidas.

[0013] A invenção ainda fornece um processo para preparar as composições de mistura de acordo com a invenção utilizando células geneticamente modificadas.

[0014] A presente invenção ainda fornece formulações que compreendem as composições da mistura de acordo com a invenção.

[0015] Uma vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é a sua excelente estabilidade da espuma sob condições aquosas.

[0016] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é seu excelente volume da espuma em condições aquosas.

[0017] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é seu comportamento de formação de espuma excepcional.

[0018] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é sua simples capacidade de formular em todos os sistemas de tensoativo aquoso desej ados.

[0019] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é sua boa capacidade de se espessar com espessantes convencionais nas formulações.

[0020] Uma outra vantagem é a sua boa capacidade para lavar a pele e cabelo.

[0021] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é a sua maciez e boa compatibilidade fisiológica, em particular caracterizada por um alto valor no teste de hemólise (RBC).

[0022] Uma outra vantagem é a sua boa sensação da pele durante e após a lavagem.

[0023] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é que elas deixam para trás um toque suave da pele após a lavagem.

[0024] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é que elas deixam uma sensação de suavidade da pele após a lavagem.

[0025] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com o invenção é que elas têm um efeito sobre-engordurante na pele.

[0026] Uma outra vantagem das composições da mistura de acordo com a invenção é que elas podem ser sintetizadas essencialmente livres de óleo, [0027] Em contexto com a presente invenção, o termo "rhamnolipídeo" é entendido como significando em particular compostos da fórmula geral (I) ou seus sais, fórmula (I) onde m = 2, 1 ou 0, η = 1 ou 0, R1 e R2 = radical orgânico idêntico independentemente um do outro ou diferente tendo 2 a 24, de preferência 5 a 13 átomos de carbono, em particular, radical alquila opcionalmente ramificado, opcionalmente substituído, em particular hidróxi-substituído, opcionalmente insaturado, em particular, opcionalmente mono-, di- ou tri-insaturado, preferivelmente aquele selecionado de um grupo consistindo de pentenila, heptenila, nonenila, undecenila e tridecenila e (CH2) o—CH3 em que o = 1 a 23, de preferência de 4 a 12.

[0028] Em conexão com a presente invenção, o termo "di-rhamnolipídeo" é entendido como significando compostos da fórmula geral {I) ou seus sais, em que n = 1.

[0029] Em contexto com a presente invenção, o termo "mono-rhamnolipídeo" é entendido como significando os compostos da fórmula geral (I) ou seus sais, em que n = 0.

[0030] Rhamnolipídeos distintos são abreviados de acordo com a seguinte nomenclatura:"diRL-CXCY" é entendido como significando di-rhamnolipideos de fórmula geral (I), em que um dos radicais R1 e R2 = (CH2)o-CH3, onde o = X-4 e o radical remanescente R1 ou R2 = {CH2)o-CH3, onde o = Y-4.

[0031] "MonoRL-CXCY" é entendido como significando mono-rhamnolipideos de fórmula geral (I) em que um dos radicais R1 e R2 = (CH2)0-CH3, onde o = X-4 e os radicais restantes R1 ou R2 = (CH2)o-CH3, onde o = Y-4.

[0032] A nomenclatura utilizada, portanto, não faz diferença entre "CXCY" e "CYCX".

[0033] Para rhamnolipídeos em que m = 0, monoRL-CX ou diRL-CX é utilizado consequentemente.

[0034] Se um dos índices acima mencionados X e/ou Y é fornecido com "Z", então isso significa que o respectivo radical R1 e/ou R2 = um radical de hidrocarboneto não substituído, não ramificado com X-3 ou Y-3 átomos de carbono, tendo ligações duplas Z.

[0035] Em conexão com a presente invenção, o "pH" é definido como o valor que é medido para uma substância correspondente a 25°C depois de agitar durante cinco minutos utilizando um elétrodo de pH calibrado de acordo com a norma ISO 4319 (1977).

[0036] Em conexão com a presente invenção, o termo "meio aquoso" é entendido como significando uma composição que compreende pelo menos 5% em peso de água, com base na composição total em consideração.

[0037] A menos que indicado de outra forma, todos os percentuais mencionados (%) são percentuais em massa.

[0038] A presente invenção fornece uma composição de mistura que compreende rhamnolipideos, caracterizada em que a composição da mistura compreende 51% em peso a 95% em peso, de preferência 70% em peso a 90% em peso, particularmente de preferência 75% em peso a 85% em peso, de diRL-ClOClO e 0,5% em peso a 9% em peso, de preferência 0,5% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência de 0,5% em peso a 2% em peso de monoRL-ClOClO, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes, com a condição de que a relação em peso de di-rhamnolipideos para mono-rhamnolipídeos é maior que 91:9, de preferência maior que 97:3, particularmente de preferência maior que 98:2.

[0039] Uma composição de mistura preferida de acordo com a invenção é caracterizada em que composição de mistura compreende 0,5% em peso a 15% em peso, de preferência 3% em peso a 12% em peso, particularmente de preferência de 5% em peso a 10% em peso, de diRL-C10C12:1, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes.

[0040] Uma composição da mistura ainda mais preferida de acordo com a invenção é caracterizada em que composição de mistura compreende 0,5 a 25% em peso, de preferência 5% em peso a 15% em peso, particularmente de preferência de 7% em peso a 12% em peso, de diRL-C10C12, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipídeos presentes.

[0041] É também preferível se a composição da mistura de acordo com a invenção compreender 0,1% em peso a 5% em peso, de preferência 0,5% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência de 0,5% em peso a 2% em peso de monoRL-C10C12 e/ou, de preferência, e 0,1% em peso a 5% em peso, de preferência 0,5% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência de 0,5% em peso a 2% em peso de monoRL-C10C12:1, em que os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipídeos presentes.

[0042] Pode ser vantajoso e, por conseguinte, é preferido que a composição da mistura de acordo com a invenção compreenda 0,1% em peso a 25% em peso, de preferência 2% em peso a 10% em peso, especialmente de preferência 4% em peso a 8% em peso de diRL-C8C10, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes.

[0043] Uma composição de mistura particularmente preferida de acordo com a invenção é caracterizada em que a composição de mistura compreende 0,5% em peso a 15% em peso, de preferência 3% em peso a 12% em peso, especialmente de preferência de 5% em peso a 10 % em peso de diRL-C10C12: 1, 0,5 a 25% em peso, de preferência 5% em peso a 15% em peso, particularmente de preferência 7% em peso a 12 % em peso de diRL-ClOCl2, 0,1% em peso a 5% em peso, de preferência 0,5% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência de 0,5% em peso a 2% em peso de monoRL-Cl 0C12 e 0, 1% em peso a 5% em peso, de preferência 0,5% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência 0,5% em peso a 2% em peso, de monoRL-C10C12 :1, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes.

[0044] Além e acima disso, é preferível que a composição da mistura de acordo com a invenção compreenda rhamnolipideos de fórmula monoRL-CX ou diRL-CX em pequenas quantidades apenas. Em particular, a composição da mistura de acordo com a invenção compreende de preferência entre 0% em peso a 5% em peso, de preferência 0% em peso a 3% em peso, particularmente de preferência, 0% em peso a 1% em peso, de diRLClO, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes, e o termo "0% em peso" é para ser entendido como significando nenhuma quantidade detectável.

[0045] A composição da mistura de acordo com a invenção compreende preferivelmente pelo menos 60% em peso, de preferência pelo menos 80% em peso, particularmente de preferência pelo menos 90% em peso, em particular pelo menos 95% em peso de rhamnolipideos, onde os percentuais em peso se referem à substância seca da composição total da mistura.

[0046] É preferível, de acordo com a invenção que as composições de mistura de acordo com a invenção sejam essencialmente livres de óleo graxo (acilgliceróis líquidos a 20°C) e, por conseguinte, compreendam, em particular, menos do que 0,5% em peso, em particular menos do que 0,1% em peso, particularmente, de preferência nenhuma quantidade detectável de um óleo graxo, com base na composição total da mistura.

[0047] As composições de mistura de acordo com a invenção podem ser preparadas misturando as substâncias puras, caso em que as substâncias puras podem ser purificadas a partir de misturas de rhamnolipideos convencionalmente preparados. Processos de purificação correspondentes são, por exemplo, cristalizações seletivas e métodos cromatográficos. Processos correspondentes estão descritos em Heyd et al., Development and trends of biosurfactant analysis and purification uslng rhamnolipids as na example, Anal Bioanal Chem. 2008 jul; 391 (5):1579- 90.

[0048] Em particular, os processos descritos abaixo, que são igualmente objetos da presente invenção, são adequados para a preparação de composições de mistura de acordo com a invenção.

[0049] O processo de acordo com a invenção compreende as etapas de processo: Ia)fornecer uma célula de Pseudomonas putida que tenha sido geneticamente modificada de tal forma que ela super-expresse em cada caso pelo menos um gene do grupo rhlA, rhlB e rhlC, lia)contatar a célula de acordo com a invenção com um meio compreendendo uma fonte de carbono, Illa)cultivar a célula sob condições que permitam a célula formar rhamnolipideo a partir de uma fonte de carbono e IVa)opcionalmente isolar os rhamnolipideos formados, caracterizado pelo fato de o gene rhlC é mais super-expresso em comparação com rhlB, em particular pelo menos 1,5 vezes mais, de preferência, pelo menos duas vezes mais, particularmente preferivelmente pelo menos 10 vezes mais.

[0050] A intensidade relativa da super-expressão acima descrita pode ser determinada, por exemplo, com a ajuda de RT-PCR, em que a quantidade de RNAm formado é determinada para o respectivo gene.

[0051] A pessoa versada na técnica pode obter uma regulação da intensidade da expressão de uma forma orientada, por exemplo, através da seleção de promotores, ou através da utilização de promotores indutiveis em combinação com uma quantidade de indutor, ou então por meio de multiplicações de genes.

[0052] Um processo alternativo igualmente preferido de acordo com a invenção compreende as etapas de processo: Ib)fornecer uma célula de Pseudomonas putida que tenha sido geneticamente modificada de tal forma que ela tenha em cada caso pelo menos um gene exógeno do grupo rhlA , rhlB e rhlC dos quais pelo menos um está sob o controle de um promotor indutivel, Ilb)contatar a célula de acordo com a invenção com e cultivá-la com um meio que compreende pelo menos uma fonte de carbono enquanto obtém uma densidade celular de 1 a 30 g de massa seca celular por L de caldo de fermentação, preferivelmente 2 a 20 de massa seca celular por L de caldo de fermentação, particularmente preferivelmente 5 a 15 g da massa seca celular por L de caldo de fermentação, Illb)induzir pelo menos um promotor indutivel e cultivar a célula sob condições que permitam que a célula forme um rhamnolipideo a partir da fonte de carbono e IVb)opcionalmente isolar os rhamnolipideos formados.

[0053] Em conexão com a presente invenção, o termo "promotor índuzível" é entendido como significando um promotor que muda a sua atividade mudando o meio que envolve célula. As mudanças podem incluir mudanças, por exemplo, de temperatura e mudanças de concentração de certas substâncias.

[0054] Em conexão com a presente invenção, o termo "induzir pelo menos um promotor indutível" deve ser entendido como significando que a atividade do promotor indutivel é aumentada mudando o meio que envolve a célula.

[0055] Promotores indutiveis adequados em conexão com a presente invenção são, por exemplo, promotores que são induzidos através da adição de indutores químicos (por exemplo, lactose, IPTG, diciclopropil cetona, tetraciclina, doxiciclina, propionato, cumato, benzoato, arabinose, ramnose, ácido nicotínico, etc), que são induzidos por condições ambientais alteradas (por exemplo, ocorrência de deficiência de fosfato ou de enxofre, temperaturas ou pH alterados, etc), ou que são induzidos por certos estados fisiológicos (por exemplo, certas densidades celulares ou taxas de crescimento ou fases).

[0056] Promotores indutiveis utilizados particularmente preferivelmente no processo são selecionados a partir do grupo de promotores induzíveis por diciclopropil cetona, tetraciclina, doxiciclina, propionato, cumato, benzoato, deficiência de fosfato, deficiência de enxofre ou uma taxa de crescimento reduzida.

[0057] Os genes rhlA, rhlB e rhlC em ambos os processos de acordo com a invenção são, de preferência, selecionados daqueles de P. aeruginosa.

[0058] Os dois processos de acordo com a invenção preferivelmente não são realizados como a biotransformação; isso significa que os rhamnolipídeos não são formados a partir de ácidos graxos ou compostos contendo ácido graxo tais como, por exemplo, gorduras e óleos, que são introduzidos no processo externamente, mas que as fontes de carbono especificadas nos processos são, em particular, para ser entendidas como significando aquelas que contêm, predominantemente, pelo menos, um composto contendo carbono, com exceção de ácidos graxos ou compostos contendo ácido graxo.

[0059] As composições de mistura de acordo com a invenção podem ser vantajosamente incorporadas em formulações cosméticas, em particular.

[0060] Por conseguinte, uma outra reivindicação da presente invenção é o uso das composições da mistura de acordo com a invenção para a produção de formulações, em particular, formulações cosméticas, e também formulações, em particular, formulações cosméticas que compreendem a composição da mistura de acordo com a invenção.

[0061] Além das composições da mistura de acordo com a invenção, as formulações preferidas de acordo com a invenção compreendem pelo menos um outro tensoativo, sendo possível utilizar, por exemplo, tensoativos aniônicos, não iônicos, catiônicos e/ou anfotéricos. De preferência, a partir de um ponto de vista de aplicações relacionadas, é dada preferência às misturas de tensoativos aniônicos e não iônicos. 0 teor total de tensoativo da formulação aquosa é, de preferência, 5 a 60% em peso e particularmente de preferência de 15 a 40% em peso, com base na formulação total.

[0062] Os tensoativos não iônicos utilizados são preferencialmente alcoxilados, vantajosamente etoxilados, em particular álcoois primários tendo de preferência 8 a 18 átomos de carbono e, em média, 1 a 12 moles de óxido de etileno (EO) por mol de álcool, no qual o radical do álcool pode ser linear ou de preferência metil-ramifiçados na posição 2 ou pode conter radicais metil-ramifiçados e lineares em uma mistura, como estão geralmente presentes em radicais de oxo álcoois. Em particular, no entanto, os álcoois etoxilados com radicais lineares de álcoois de origem nativa tendo 12 a 18 átomos de carbono, por exemplo, de coco, palma, gordura de sebo ou oleil álcool e, em média, 2 a 8 EO por mol de álcool são preferidos. Os álcoois etoxilados preferidos incluem, por exemplo, álcoois C i2 — C14 com 3 EO, 4 EO ou 7 EO, álcool C9-Cai com 7 EO, álcoois C13-C15 com 3 EO, 5 EO, 7 EO ou 8 EO, álcoois C12-C18 com 3 EO, 5 EO ou 7 EO e misturas dos mesmos, tais como misturas de álcool C12-C14 com 3 EO e álcool C12-C18 com 7 EO. Os graus declarados de etoxilação são valores médios estatísticos que podem ser um inteiro ou uma fração de um produto especifico. Álcoois etoxilados preferidos possuem uma distribuição de homólogos estreita.

[0063] Em adição a estes tensoativos não iônicos, é também possível o uso de álcoois graxo com mais de 12 EO. Exemplos destes é o álcool graxo de sebo com 14 EO, 25 EO, 30 ou 40 EO, Tensoativos não iônicos que contêm grupos EO e PO (óxido de propileno) juntos na molécula também podem ser usados. Nesse contexto, é possível utilizar copolímeros em blocos com unidades de bloco de EO-PO ou unidades de bloco de PO-EO, mas também copolímeros de EO-PO-EO ou copolímeros de PO-EO-PO.

[0064] Certamente é também possível o uso de tensoativos não iônicos alcoxilados misturados em que as unidades de OE e PO não estão distribuídas em blocos, mas aleatoriamente. Tais produtos podem ser obtidos como resultado da ação simultânea de óxido de etileno e óxido de propileno em álcoois graxos.

[0065] Além disso, alquilglicosídeos podem também ser utilizados como outros tensoativos não iônicos.

[0066] Uma outra classe, de tensoativos não iônicos preferivelmente utilizados, que são utilizados ou como o único tensoativo não iônico ou em combinação com outros tensoativos não iônicos, são alcoxilados, de preferência ésteres de alquila de ácido graxo etoxilados ou etoxilados e propoxilados, de preferência com 1 a 4 átomos de carbono na cadeia alquila, em particular ésteres de rnetila de ácido graxo, como são descritos, por exemplo, no pedido de patente japonês JP 58/217598, ou os quais são de preferência preparados pelo processo descrito no pedido de patente internacional WO-A-90/13S33 .

[0067] Tensoativos não iônicos do tipo de óxido de amina, por exemplo, óxido de N-cocoalquil-N,N-dimetilamina e óxido de N-seboalquil-N,N-dihidroxietilamina, e do tipo de alcanolamida de ácido graxo também podem ser adequados. A quantidade destes tensoativos não iônicos é de preferência não mais do que a dos álcoois graxos etoxilados, em particular, não mais do que metade dos mesmos.

[0068] Outros tensoativos adequados são as amidas de ácido polihidroxi graxo; as amidas de ácido polihidroxi graxo são substâncias que podem geralmente ser obtidas pela aminação redutora de um açúcar redutor com amônia, uma alquilamina ou uma alcanolamina e subsequente acilação com um ácido graxo, um éster de alquila de ácido graxo ou um cloreto de ácido graxo.

[0069] Os tensoativos aniônicos usados são, por exemplo, aqueles do tipo sulfonato e sulfato. Os tensoativos apropriados do tipo sulfonato aqui são preferivelmente alquilbenzenosulfonatos C9-C13, olefinsulfonatos, ou seja, misturas de alceno- e hidroxialcanosulfonatos, e também disulfonatos, como são obtidos, por exemplo, a partir de mono-olefinas C12-C18 com ligação dupla terminal ou interna por sulfonação com trióxido de enxofre gasoso e subsequente hidrólise ácida ou alcalina dos produtos de sulfonação. Também adequados são alcanosulfonatos que são obtidos a partir de alcanos C12-Cia, por exemplo, por sulfocloração ou sulfoxidação com hidrólise ou neutralização subsequentes. Do mesmo modo, os ésteres de α-sulfo ácidos graxos (éster de sulfonatos), por exemplo, ésteres de metila α-sulfonados de coco hidrogenado, semente de palma ou ácidos graxos de sebo, também são adequados.

[0070] Outros tensoativos aniônicos apropriados são os ésteres de glicerol de ácido graxo sulfatados. Ésteres de glicerol de ácido graxo são para ser entendidos como significando que o mono-, di- e triésteres, e também misturas dos mesmos, como são obtidos na preparação pela esterif icação de um monoglicerol com 1 a 3 mol de ácido graxo ou na transesterificação de triglicerideos com 0,3 a 2 mol de glicerol. Ésteres de glicerol de ácido graxos sulfatados preferidos aqui são os produtos de sulfatação de ácidos graxos saturados tendo 6 a 22 átomos de carbono, por exemplo, de ácido capróico, ácido caprilico, ácido cáprico, ácido mirístico, ácido láurico, ácido palmitico, ácido esteárico ou ácido beênico.

[0071] Sulfatos de alq(en)ila preferidos são o metal alcalino e, em particular, os sais de sódio do semi-ésteres de ácido sulfúrico dos álcoois graxos C12-C18, por exemplo, de álcool graxo de coco, álcool graxo de sebo, álcool laurilico, miristico, cetílico ou oxo-álcoois Ci0-C2o e aqueles semi-ésteres de álcoois secundários com estes comprimentos de cadeia. Além disso, é dada preferência sulfatos de alqu(en)ila de comprimento de cadeia específica que contém um radical alquila de cadeia reta sintético preparado em uma base petroquímica, e que têm um comportamento de degradação análogo aos compostos adequados com base em matérias-primas químicas graxas. Do ponto de vista da lavagem, os sulfatos de alquila C12-Ci6 e sulfatos de alquila C12-C18 e também sulfatos de alquila C14-C18 são preferidos. Sulfatos de 2,3-alquila, que são preparados, por exemplo, de acordo com os relatórios das patentes norte-americanas 3.234.258 e 5.075.041 e podem ser obtidos como produtos comerciais da Shell Oil Company sob o nome DAN®, são também tensoativos aniônicos adequados.

[0072] Os mono-ésteres de ácido sulfúrico de álcoois C7-C20 cadeia linear ou ramificada etoxilados com 1 a 6 mol de óxido de etileno, tais como álcoois Cg-Cn 2-metil-ramifiçados tendo em média 3,5 moles de óxido de etileno (EO) ou álcoois graxos C12-C18 com 1 a 4 EO, também são adequados. Em razão do seu comportamento de muita formação de espuma, eles são utilizados em composições de limpeza apenas em quantidades relativamente pequenas, por exemplo, em quantidades de 1 a 5% em peso.

[0073] Outros tensoativos aniônicos adequados são também os sais do ácido alquilsulfossucinico, os quais são também referidos como sulfossucinatos ou como ésteres de ácido sulfossucinico e constituem os mono-ésteres e/ou di-ésteres do ácido sulfossuccinico com álcoois, de preferência, álcoois graxos e em particular os álcoois graxos etoxilados. Sulfossucinatos preferidos contêm radicais de álcoois graxos Ca-Cie ou misturas dos mesmos. Sulfossucinatos particularmente preferidos contêm um radical de álcool graxo que é derivado de álcoois graxos etoxilados. Neste contexto, sulfossucinatos cujos radicais de álcool graxo são derivados de álcoois graxos etoxilados com uma distribuição de homólogos estreita são particularmente preferidos por sua vez. É igualmente também possível a utilização de ácido alqu(en)ilsucínico tendo de preferência 8 a 18 átomos de carbono na cadeia alqu(en)ila ou sais do mesmo.

[0074] Tensoativos aniônicos particularmente preferidos são sabões. Também adequados são sabões de ácido graxos saturados e insaturados, tais como os sais do ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido erúcico (hidrogenado) e ácido beênico, e também misturas derivadas de sabão, em particular, de ácidos graxos naturais, por exemplo, coco, semente de palma, óleo de oliva ou ácido graxo de sebo.

[0075] Os tensoativos aniônicos, incluindo os sabões, podem estar na forma de seus sais de sódio, potássio ou amônio, assim como sais solúveis de bases orgânicas, tais como mono-, di- ou trietanolamina. De preferência, os tensoativos aniônicos estão na forma de seus sais de sódio ou potássio, em particular na forma de sais de sódio.

[0076] Tensoativos anfotéricos que podem ser utilizados de acordo com a invenção são os compostos tensoativos que carregam pelo menos um grupo amônio quaternário e pelo menos um grupo -COO" - ou -SO~3 na molécula. Tensoativos anfotéricos particularmente preferidos, neste contexto, são tensoativos de betaina tais como alquil- ou alquilamidopropilbetainas. Em particular, betainas, tais como os N-alquil-N,N-dimetilamônio glicinatos, por exemplo, o cocoalquildimetilamônio glicinato, N-acilaminopropil-N,N-dimetilamônio glicinatos, por exemplo, o cocoacilaminopropildimetilamônio glicinato, a alquildimetilacetobetaina C12-C18, a cocoamidopropildimetilacetobetaina, 2-alquil-3-carboximetil-3-hidroxietilimidazolinas e sulfobetainas tendo em cada caso 8 a 18 átomos de carbono no grupo alquila ou acila e também o cocoacilaminoetilhidroxietilcarboximetil glicinato são preferidos aqui. Um tensoativo zwiteriônico particularmente preferido é a N,N-dimetil-N-(lauroilamidopropil) amônioacetobetaina conhecida sob o nome INCI cocoamidopropil betaina.

[0077] Outros tensoativos anfotéricos adequados são formados pelo grupo de amfoacetatos e amfodiacetatos, em particular, por exemplo, coco- ou laurilamfoacetatos ou -diacetatos, o grupo de amfopropionatos e amfodipropionatos, e o grupo de tensoativos à base de aminoácidos, tais como acilglutamatos, em particular, cocoilglutamato dissódico e cocoilglutamato de sódio, acilglicinatos, em particular, cocoilglicinatos, e acilsarcosinatos, em particular, lauril sarcossinato de amônio e cocoilsarcosinato de sódio.

[0078] Além disso, as formulações de acordo com a invenção podem compreender pelo menos um componente adicional selecionado a partir do grupo de emolientes, emulsionantes, espessantes/reguladores de viscosidade /estabilizadores, filtros fotoprotetores de UV, antioxidantes, hidrótropos (ou polióis), sólidos e cargas, formadores de filme, aditivos perolados, desodorante e ingredientes ativos antitranspirantes, repelentes de insetos, agentes autobronzeadores, conservantes, condicionadores, perfumes, corantes, absorventes de odor, ingredientes ativos cosméticos, ' aditivos de cuidados, agentes sobre-engordurantes, solventes.

[0079] Substâncias que podem ser utilizadas como representantes exemplares dos grupos individuais são conhecidas da pessoa versada na técnica e podem ser encontradas, por exemplo, no pedido alemão DE 102.008.001.788,4. Esse pedido de patente é aqui incorporado por referência e, portanto, faz parte da descrição.

[0080] No que se refere a outros componentes opcionais e as quantidades destes componentes usados, é feita referência expressa aos manuais relevantes conhecidos da pessoa versada na técnica, por exemplo, K. Schrader, "Grundlagen und Rezepturen der Kosmetika [Fundamentos e formulações cosméticas]", 2aedição, página 329-341, Hüthig Buch Verlag Heidelberg.

[0081] As quantidades dos respectivos aditivos dependem do uso pretendido.

[0082] As formulações típicas de guia para as respectivas aplicações são conhecidas da técnica anterior e estão contidas, por exemplo, nas brochuras dos fabricantes dos respectivos materiais de base e ingredientes ativos. Estas formulações existentes podem ser geralmente adotadas inalteradas. Se necessário, no entanto, as modificações desejadas podem ser realizadas sem complicações por meio de experimentos simples para os propósitos de adaptação e otimização.

[0083] As composições de mistura de acordo com a invenção e as formulações de acordo com a invenção que compreende a composição de mistura de acordo com a invenção podem vantajosamente ser utilizadas para a limpeza de superfícies. Nessa forma de uso de acordo com a invenção, a superfície é de preferência a superfície de um ser vivo, em particular, de uma pessoa, com tais superfícies particularmente preferivelmente sendo selecionada da pele e cabelo.

[0084] Os exemplos listados a seguir descrevem a presente invenção por meio de exemplo sem qualquer intenção de limitar a invenção, o escopo de aplicação do qual surge a partir de toda a descrição e as reivindicações, para as modalidades especificadas nos exemplos.

[0085] As figuras a seguir fazem parte da descrição: Figura 1: Comportamento de formação da espuma mostrado com medição SITA Exemplos: Exemplo 1: Preparação de diRL-ClOClO e monoRL- CIO-CIO

[0086] A preparação das várias formas de RL puro ocorre por meio de eromatografia em coluna preparativa. Para isso, 750 g de um gel de silica 60 (200-500 pm; 35-70 mesh; Sigma - Aldrich, Alemanha) são suspensos em acetato de etila saturado-água (acidificado com 1% em peso de ácido acético) e vertidos para uma coluna (diâmetro = 65 mm, nivel máximo de enchimento = 600 mm, 1 L de reservatório de solvente) 2 a 3 cm de areia do mar tratada com ácido (Riedel de Haen, Seelze, Alemanha) foram revestidas como camada protetora sobre a fase estacionária. O eluente utilizado é igualmente acetato de etila saturado-água que compreende 1% em peso de ácido acético. Uma mistura de RL comercialmente disponível (JBR 505, Jeneil Riossurfatantes, ~5% em peso de concentração de rhamnolipídeo total) é liofilizada.

[0087] 10 g da mistura de RL liofilizada são dissolvidos em 5% em peso de concentração no eluente. A solução é colocada em uma coluna preparada. A vazão do eluente é ajustada a 15 ml/min. O eluato é recolhido em frações de 100 ml e analisadas por meio de eromatografia em camada fina e HPLC. As várias formas de RL podem ser separadas desse modo. Frações de composição idêntica são combinadas e o solvente é removido em um evaporador rotativo. Em seguida, o resíduo é dissolvido em água, liofilizado e utilizado na forma de pó para os testes de aplicação. A fim de obter quantidades adequadas, esse procedimento é realizado várias vezes. A pureza das frações resultantes é determinada como sendo > 99 %, em peso por meio de 1H-RMN e HPLC.

Exemplo 2: Preparação de uma mistura de diRL-ClOClO e monoRL-Cl0C10 [0088] As formas de RL puro descritas no Exemplo 1 são misturadas na forma de pó em uma relação de diRL-ClOClO para monoRL-Cl0C10 de 91,5:2,5.

Exemplo 3: Preparação de rhamnolipideos com rhlABC de P. aeruginosa PAOl em P.putida, onde a expressão do gene que codifica a rhamnosiltransferase RhlC é muitas vezes maior do que a do gene que codifica rhamnosiltransferase rhlB.

[0089] A fim de preparar rhamnolipideos com rhlABC de P. aeruginosa PAOl em uma cepa de P. putída na qual a expressão do gene que codifica a rhamnosiltransferase RhlC ocorre a uma extensão muito maior do que aquela do gene que codifica para rhamnosiltransferase RhlB, o plasmídeo pBBRlMCS2-Plac-rhlABC-T-Ptac-rhlC-T (SEQ ID n°: 1) é construído. Por isso, os seguintes fragmentos de DNA foram sintetizados: Genes rhlA, rhlB e rhlC de P. aeruginosa PAOl, seguido por um terminador, seguido pelo promotor tac sintético, seguido pelo gene rhlC de P. aeruginosa PAOl e um terminador, flanqueado por um sitio de restrição HindlII (extremidade 5') ou sitio de restrição Bsu36I (extremidade 3') (Seq ID n° 2) .

[0090] Os vetores fornecidos pelo fornecedor de síntese de DNA e que contém o fragmento de DNA sintetizado são clivados com HindIII e Ssu36I e ligados ao vetor de pBBRlMCS-2 (SEQ ID 3), igualmente clivado com HindIII e .Bsu36l, por meio de um Kit de ligação Fast Link (Epicentre Technologies; Madison, WI, EUA). O vetor alvo resultante pBBRlMCS-2-PIac-rhlABC-T-Ptac-rhlC-T (pBBRlMCS-2 com o fragmento sintetizado Seq ID n° 2) tem um tamanho de 9336 pares de bases.

[0091] A transformação de Pseudomonas putida KT2440 com o vetor pBBRlMCS2-Plac-rhlABC- T-Ptac-rhlC-T (SEQ ID n° : 1) ocorre tal como descrito acima (Iwasaki et al .

Biosci. Biotech. Biochem. 1994. 58 (5) :851-854) . O DNA do plasmideo de 10 clones em cada caso é isolado e analisado. A cepa resultante que carrega o plasmideo é chamada P. putida KT2440 pBBRlMCS2-Plac-rhlABC~T-Ptac-rhlC-T.

[0092] A cepa recombinante de P. putida KT2440 PBBR1MCS2- Plac-rhlABC-T-Ptac-rhlC-T é cultivada em placas de LB-agar-canamicina (50 pg/ ml).

[0093] Para a produção dos rhamnolipideos, o meio referido a seguir como meio M9 é utilizado. Esse meio consiste de 2% (p/v) de glucose, 0,3% (p/v) de KH2PO4, 0,679% de Na2HP04, 0,05% (p/v) de NaCl, 0,2% (p/v) de NH4CI, 0,049% (p/v) MgS04 x 7 H20 e 0,1 % (p/v) de uma solução com elementos-traço. Isso consiste de 1,78% (p/v) de FeS04 x 7 H20, 0,191% (p/v) de MnCl2 x 7 H20, 3,65% (p/v) HC1, 0,187% (p/v) de ZnS04 x 7 H20, 0, 084%(v/v) de Na-EDTA x 2 H20, 0,03% (v/v) de H3BO3, 0, 025% (p/v) de Na2Mo04 x 2 H20 e 0,47% (p/v) de CaCl2 x 2 H20. O pH do meio é ajustado para 7,4 com 2OH e o meio é , por conseguinte, esterilizado por meio de autoclave (121°C, 20 minutos) . O ajuste do pH durante a cultura não é necessário.

[0094] Para investigar a produção de ramnolipideo no frasco de agitar, primeiramente uma pré-cultura é preparada. Por isso, uma colônia de uma cepa recentemente semeada em placa de LB-agar é usada e 10 ml de meio LB é inoculada em um balão Erlenmeyer de 100 ml. Todas as cepas de P. putida recombinantes são cultivadas em meio LB as quais 50 pg/ml de canamicina é adicionado. As cepas de P. putida são cultivadas durante a noite a 30°C e 200 rpm.

[0095] As pré-culturas são utilizadas para inocular 50 ml de meio M9 ( + 50 pg/ml de canamicina) em um balão Erlenmeyer de 250 ml (partindo de OD600 0, 1) . As culturas são cultivadas a 200 rpm e 30°C. Após 24 h, uma amostra de 1 ml de caldo da cultura é removida a partir do frasco de cultura.

Fermentação e purificação [0096] üm meio mineral (M9) é igualmente utilizado para a cultura principal. A fermentação seguindo ínoculação com 10% em volume de pré-cultura e o consumo de glicose inicialmente introduzida ocorre com a limitação de carbono através de uma alimentação de glicose em um fermentador de 2 litros com um volume operacional de 1,2 1. A alimentação de glicose ocorre por referência ao sinal de oxigênio dissolvido. O oxigênio dissolvido é regulado a uma saturação de 20% através da velocidade de agitação. 0 pH é regulado para 7 através de um eletrodo de pH e adição de NH4SO<3. A fermentação é conduzida ao longo de 4 dias para uma biomassa seca de 15g/l. A concentração de rhamnolipideo foi verificada por HPLC e é 9, 8 g/1. Após a separação das células por meio de centrifugaçâo a 10 000 g, o caldo de fermentação é ajustado para um pH de 4,0 pela adição de HCl concentrado. A extração é então efetuada com o mesmo volume de acetato de etila. A fase orgânica contendo o rhamnolipideo é separada e processada. O pH da solução é ajustado para pH 7 pela adição de KOH 50% em peso (aq) . Isso resulta na formação de duas fases liquidas. A fase inferior contém os rhamnolipídeos livres de impurezas lipofilicas e hidrofilicas em alta pureza. A composição da mistura de RL não é influenciada como um resultado disso. A fase inferior é retirada e o solvente é removido em grande parte em um evaporador rotativo. Água é então adicionada novamente e a solução de RL aquosa é liofilizada. 0 pó resultante é analisado por meio de HPLC e caracterizado como para aplicação.

Quantificação de rhamnolipídeos [0097] A preparação da amostra para análise cromatográfica seguinte ocorre da seguinte forma. Uma pipeta de deslocamento (Combitip) é utilizada para introduzir inicialmente 1 ml de acetona em um recipiente de reação de 2 ml, e o recipiente de reação é fechado imediatamente para minimizar a evaporação. Segue-se a adição de 1 ml de caldo de cultura. Após o vórtex a mistura do caldo de cultura/ acetona é centrifugada durante 3 minutos a 13 000 rpm, e 800 μΐ do sobrenadante é transferido para um recipiente do HPLC.

[0098] Para os propósitos de detecção e quantificação de rhamnolipídeos, um detector de espalhamento de luz evaporativo (SEDEX LT-ELSD modelo 85LT é usado . A medição real é realizada por meio de Agilent Technologies da série 1200 (Santa Clara , Califórnia) e a coluna de rápida resolução Zorbax SB-C8 (4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Agilent) . O volume de injeção é de 5 μΐ e o tempo de execução do método é 20 minutos. A fase móvel utilizada é TFA 0,1% aquoso (ácido trifluoroacético, solução A) e metanol (solução B). A temperatura da coluna é 40°C. Servindo como detectores são o ELSD (temperatura do detector 60°C) e o DAD (arranjo de diodos, 210 nm) . O gradiente usado no método é: [0099] A composição de rhamnolipídeo de P. putida KT2440 pBBRlMCS2-Plac-rhlABC-T-Ptac-rhlC-T obtida com o processo descrito acima compreende: diRL-ClOClO 81% em peso diRL-C10C12 10% em peso diRL-C10C12:1 8% em peso monoRL-ClOClO 1% por peso resultando em uma relação em peso de di-rhamnolipídeos de mono-rhamnolipideos de 99:1.

Exemplo 4: Testando o desempenho de cuidado da pele e propriedades da espuma por meio de um teste de lavagem das mãos [00100] Para avaliar o desempenho de cuidado da pele e as propriedades da espuma dos Exemplos de Produto 2 e 3 de acordo com a invenção em composições aquosas de tensoativo (formulações de tensoativo), testes de lavagem das mãos sensoriais em comparação com composições de rhamnolipídeo conhecidas foram realizados.

[00101] Um grupo de 10 avaliadores treinados lavaram suas mãos em uma forma definida durante esse teste de lavagem das mãos e avaliaram as propriedades da espuma e sensação nas mãos por referência a uma escala de classificação de 1 (ruim) a 5 (muito bom) . Os produtos utilizados foram testados em cada caso em uma formulação de tensoativo padronizada (Tabela 1).

[00102] A formulação de tensoativo sem a adição de um tensoativo secundário foi utilizada como formulação de controle de formulações de tensoativo A. Formulações de tensoativo B e C são os produtos de comparação não de acordo com a invenção e formulações de tensoativo D e E são as composições de acordo com a invenção (Tabela 1).

[00103] Tabela 1: Formulações de teste para o teste de lavagem das mãos (dados em % em peso).

[00104] Tabela 2 mostra os resultados do teste de lavagem das mãos.

[00105] É evidente a partir dos resultados das medições na Tabela 2 que as composições D e E de acordo com a invenção utilizando exemplos de produto 2 e 3 têm uma melhor sensação na pele durante a lavagem com a formulação e surpreendentemente também um melhor comportamento de formação de espuma e cremosidade aumentada da espuma em comparação com o controle A e as composições de comparação B e C de acordo com a técnica anterior. Além disso, é evidente que as composições D e E de acordo com a invenção foram avaliadas como sendo melhores do que as formulações de comparação para a sensação na pele (a suavidade da pele e a maciez da pele), depois de lavar e secar.

[00106] Ao contrário das expectativas, uma certa baixa fração de mono-rhamnolipideo no biotensoativo exibiu uma influência positiva sobre o comportamento da espuma e sensação na pele nas presentes formulações.

Exemplo 5: Testando as propriedades da espuma por meio de avaliador de espuma SITA

[00107] A capacidade de soluções de tensoativo para espuma é um parâmetro importante. Propriedades de aplicação podem ser inferidas a partir deste. A rápida formação de espuma um grande volume de espuma são esperados em muitas aplicações de bons tensoativos. Um método para avaliar esse parâmetro é baseado em um avaliador de espuma SITA R-2000 da SITA Messtechnik GmbH. Aqui, o ar é introduzido dentro de um determinado volume de uma solução de tensoativo através de um disco de dispersão e o volume total de liquido e espuma resultante é medido ao longo do período por meio de sondas na espuma.

[00108] Três preparações de rhamnolipideo diferentes foram medidas em tal um instrumento em pH = 6 e uma concentração total de rhamnolipideo de 0,5% em peso. A composição das frações de rhamnolipideo é listada na tabela a seguir: E09-S6 diRL-Cl0C10 Jeneil diRL-C8C10 21% em peso 0% em peso 2,1% em peso monoRL~C8C10 0,9% em peso 0% em peso 1,9% em peso diRL-ClOClO 65% em peso 100% em peso 46,2% em peso monoRL-ClOClO 1,6% em peso 0% em peso 29,8% em peso diRL-C10C12 6,0% em peso 0% em peso 7,8% em peso monoRL-C10C12 0% em peso 0% em peso 5,6% em peso diRL-C10C12:1 5,6% em peso 0% em peso 3,1% em peso monoRL-C10C12 : 1 0% em peso 0% em peso 3,1% em peso [00109] Uma composição de acordo com a invenção, E09-S6, que foi obtida pela fermentação, diRL-ClOClO puro e um produto disponível comercialmente de Jeneil foram investigados.

[00110] As medições no que se refere à capacidade de formação de espuma foram realizadas a uma temperatura de 30°C com um volume de liquido de 300 ml e uma velocidade de agitação de 1500 rpm.

[00111] Figura 1 mostra que a capacidade de formação de espuma de E09 S6 foi consideravelmente melhor do que aquelas das outras amostras, isto é, o volume máximo de espuma foi obtido mais rapidamente.

RE IVINDICAÇÕE S

Claims

1. Composição de mistura que compreende rhamnolipídeos, caracterizada pelo fato de que a composição de mistura compreende: 51% em peso a 95% em peso de diRL-ClOClO e 0,5% em peso a 9% em peso de monoRL-ClOClO, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes, com a condição de que a relação em peso de di- rhamnolipideos para mono-rhamnolipídeos é maior que 91:9, de preferência maior que 97:3, particularmente preferivelmente maior que 98:2.

2. Composição de mistura, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição de mistura compreende: 0,5% em peso a 15% em peso de diRL-C10C12:1 onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes.

3. Composição de mistura, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a composição de mistura compreende: 0,5 a 25 % em peso de diRL-C10C12, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipideos presentes.

4. Composição da mistura, de acordo com pelo menos uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que a composição mistura compreende: 0,1% em peso a 5% em peso de monoRL-C10C12 e/ou, de preferência, e 0,1% em peso a 5% em peso de monoRL-ClOC12:1, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipídeos presentes.

5. Composição da mistura, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende: 0,5% em peso a 15% em peso de diRL-C10C12:1, 0,5 a 25% em peso de diRL-C10C12, 0,1% em peso a 5% em peso de monoRL-C10C12 e 0,1% em peso a 5% em peso de monoRL-C10C12:1, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipídeos presentes.

6. Composição da mistura, de acordo com pelo menos uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que a composição mistura compreende: 0% em peso a 5% em peso de diRLClO, onde os percentuais em peso referem-se à soma de todos os rhamnolipídeos presentes.

7. Composição da mistura, de acordo com pelo menos uma das reivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que a composição de mistura compreende pelo menos 60% em peso, de preferência pelo menos 80% em peso, particularmente de preferência pelo menos 90% em peso de rhamnolipídeos, onde os percentuais peso referem-se a substância seca da composição total da mistura.

8. Processo que compreende as etapas do processo: Ia)fornecer uma célula de Pseudomonas putida que tenha sido geneticamente modificada de tal forma que ela super-expresse em cada caso pelo menos um gene do grupo rhlA , rhlB e rhlC, lia)contatar a célula de acordo com a invenção com um meio compreendendo uma fonte de carbono, Illa)cultivar a célula sob condições que permitem a célula formar ramnolipídeo a partir de uma fonte de carbono e IVa)opcionalmente isolar os rhamnolipídeos formados, caracterizado pelo fato de o gene rhlC é mais super-expresso em comparação com rhlB.

9. Processo, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas do processo: Ib)fornecer uma célula de Pseudomonas putida que tenha sido geneticamente modificada de tal forma que ela tenha em cada caso pelo menos um gene exógeno do grupo rhlA , rhlB e rhlC dos quais pelo menos um está sob o controle de um promotor indutivel, Ilb)contatar a célula de acordo com a invenção com e cultivá-la com um meio que compreende pelo menos uma fonte de carbono enquanto obtém uma densidade celular de 1 a 30 g de massa seca celular por L de caldo de fermentação, Illb) induzir pelo menos um promotor indutivel e cultivar a célula sob condições que permitam que a célula forme um rhamnolipideo a partir da fonte de carbono e IVb)opcionalmente isolar os rhamnolipideos formados.

10. Uso de uma composição de mistura de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que é para produção de formulações.

11. Formulação, caracterizada pelo fato de que compreende uma composição de mistura definida em pelo menos uma das reivindicações 1 a 7.

12. Uso de uma composição de mistura definida em pelo menos uma das reivindicações 1 a 7 ou de uma formulação de acordo com a reivindicação 11, caracterizado de pelo fato de que é para limpeza de uma superfície.