BR112013000108B1 - composição detergente, seus usos, e processo para a limpeza de um substrato - Google Patents

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Abstract

COMPOSIÇÃO DETERGENTE, SEUS USOS, E PROCESSO PARA A LIMPEZA DE UM SUBSTRATO. Uma composição detergente que compreende ramnolipídeos e lipase, em que o percentual em peso do ramnolipídeo constituído de monoramnolipídeos é maior do que 50, preferivelmente maior do que 80, mais preferivelmente maior do que 90% em peso.

Description

Campo Técnico
[0001] Esta invenção refere-se a composições de limpeza que compreendem mono-ramnolipídeos em combinação com enzimas.
Antecedentes da Invenção
[0002] Ramnolipídeos são uma classe de glicolipídeos. Eles são constituídos de ramnose combinada com ácidos graxos beta-hidróxi. Ramnose é um açúcar. Ácidos graxos são ubíquos em animais e plantas. A extremidade de carboxila da extremidade do ácido graxo é conectada à ramnose. Ramnolipídeos são compostos de somente três elementos comuns; carbono, hidrogênio e oxigênio. Eles são um ácido cristalino. Ramnolipídeos podem ser produzidos por cepas da bactéria Pseudomonas aeruginosa. Há dois grupos principais de ramnolipídeos; mono-ramnolipídeos e di-ramnolipídeos.
[0003] Mono-ramnolipídeos têm um único anel de açúcar de ramnose. Um mono-ramnolipídeo típico produzido por P. aeruginosa é L-ramnosil-β- hidroxidecanoil-β-hidroxidecanoato (RhaCwCw). Ele pode referido como Rha- C10-C10, com uma fórmula de C26H48O9. Mono-ramnolipídeos têm um único anel de açúcar de ramnose. A denominação IUPAC é ácido 3-[3-[(2R,3R,4R,5R,6S)- 3,4,5-triidroxi-6-metiloxan-2-il]oxidecanoiloxi]decanoico.
[0004] Di-ramnolipídeos têm dois anéis de ramnose. Um di-ramnolipídeo típico é L-ramnosil-L-ramnosil-β-hidroxidecanoil-β-hidroxidecanoato (Rha2C10C10). Ele pode ser referido como Rha-Rha-C10-C10, com uma fórmula de C32H58O13. A denominação IUPAC é ácido 3-[3-[4,5-diidroxi-6-metil-3-(3,4,5-triidroxi-6- metiloxan-2-il)oxioxan-2-il]oxidecanoiloxi]decanoico.
[0005] Na prática uma variedade de outros componentes minoritários com diferentes combinações de comprimentos de cadeia de alquila, dependendo da fonte de carbono e da cepa bacteriana, existe em combinação com os ramnolipídeos mais comuns mencionados acima. A proporção de mono- ramnolipídeo e di-ramnolipídeo pode ser controlada pelo método de produção. Algumas bactérias somente produzem mono-ramnolipídeo, ver documento US5767090: Exemplo 1, algumas enzimas podem converter mono- ramnolipídeo em di-ramnolipídeo.
[0006] Em várias publicações mono-ramnolipídeos têm a notação Rha-, que pode ser abreviada como Rh ou RL2. Similarmente di-ramnolipídeos têm a notação Rha-Rha ou Rh-Rh- ou RL1. Por razões históricas “ramnolipídeo 2” é um mono-ramnolipídeo e “ramnolipídeo 1” é um di-ramnolipídeo. Isto leva a alguma ambiguidade no uso ou “RL1” e “RL2” na literatura. Por todo este relatório descritivo da patente, usamos os termos mono- e di-ramnolipídeo a fim de evitar esta possível confusão. Entretanto, se abreviaturas são usadas R1 é mono-ramnolipídeo e R2 é di-ramnolipídeo. Para mais informações sobre a confusão de terminologia na técnica prévia veja a introdução a US 4814272.
[0007] Os ramnolipídeos a seguir foram detectados como produzidos pelas bactérias a seguir: (C12:1, C14:1 indica cadeias de acil graxo com ligações duplas).
[0008] Ramnolipídeos produzidos por P. aeruginosa (mono-ramnolipídeos): Rha-C8-C10, Rha-C10-C8, Rha-Cw-Cw, Rha-Cw-C^ Rha-Cw-C12:1, Rha-C12- C10, Rha-C12:1-Cw. Ramnolipídeos produzidos por P. aeruginosa (di- ramnolipídeos): Rha-Rha-C8-C10, Rha-Rha-C8-C12:1, Rha-Rha-C10-C8, Rha-Rha- C10-C10, Rha-Rha-C10-C12:1, Rha-Rha-Cw-C12, Rha-Rha-Cw-Cw, Rha-Rha- C12:1-C12, Rha-Rha-C10-C14:1. Ramnolipídeos produzidos por P. aeruginosa (não identificados como mono- ou di-ramnolipídeos): C8-C8, C8-C10, C10-C8, C8-C12:1, C14. Ramnolipídeos produzidos por P. chlororaphis (mono-ramnolipídeos somente): Rha-Cw-Cs, Rha-Cw-Cw, Rha-Cw-Cw, Rha-Cw:1-Cw, Rha-C12-C12, Rha-C12:1-C12, Rha-C14-C10, Rha-C14:1-C10. Ramnolipídeos produzidos por Burkholdera pseudomallei (di-ramnolipídeos somente): Rha-Rha-Cu-Cu. Ramnolipídeos produzidos por Burkholdera (Pseudomonas) plantarii (di- ramnolipídeos somente): Rha-Rha-C14-C14.
[0009] Por causa dos ramnolipídeos serem produzidos em várias fórmulas químicas, cada com um HLB diferente, sabe-se que ramnolipídeos podem ser produzidos ou misturados para ter uma variação de propriedades de formação de espuma. Ramnolipídeos são um tensoativo aniônico tanto com extremidade hidrofílica quanto com extremidade lipofílica. Quando a concentração delas aumenta para um certo nível, sabe-se que os ramnolipídeos se juntam dentro de um líquido em uma micela.
[0010] Tem sido sugerido que ramnolipídeos com dois ácidos graxos mais curtos são mais ativos em reduzir a tensão superficial e como um emulsificador. Esses raros ramnolipídeos com uma única cadeia de ácidos graxos não são tão eficazes.
[0011] A bactéria Pseudomonas aeruginosa é encontrada naturalmente em solos, na água e nas plantas.
[0012] Metabolicamente, P. aeruginosa é quimioheterotrófica, geralmente aeróbica, utilizando uma grande variação de compostos orgânicos para fontes de carbono e nitrogênio.
[0013] Existe mais de 100 cepas de P. aeruginosa no arquivo da American Type Culture Collection (Coleção Americana de Tipos de Cultura) (ATCC). Existem também várias cepas que estão somente disponíveis para fabricantes de Ramnolipídeos comerciais. Adicionalmente existe a probabilidade de milhões de cepas isoladas por várias instituições de pesquisa ao redor do mundo. Algum trabalho tem sido feito para tipificá-los em grupos. Cada cepa tem características diferentes incluindo quanto ramnolipídeo é produzido, quais tipos de ramnolipídeos são produzidos, o que eles metabolizam e as condições em que eles crescem. Somente uma pequena percentagem das cepas tem sido extensivamente estudada.
[0014] Através de avaliação e seleção, cepas de P. aeruginosa podem ser isoladas para produzir ramnolipídeos em concentrações mais altas e mais eficientemente. Cepas podem também ser selecionadas para produzir menos subproduto e para metabolizar diferentes matérias-primas alimentícias ou poluentes. Essa produção é consideravelmente afetada pelo ambiente em que a bactéria é criada.
[0015] Vários documentos têm proposto usar Ramnolipídeos nas composições de detergentes.
[0016] O documento US 2004/0152613 A1 (Ecover), e também o documento EP1445302, descrevem composições incluindo aquelas tendo misturas de tensoativos de Ramnolipídeo e tensoativos convencionais sintéticos. No Exemplo 5, o sistema de tensoativos foi testado adicionando-o a um pó base de lavandeira convencional compreendendo formador de zeólito, mas não enzimas.
[0017] O documento US 5417879 A1 (Unilever) sugere um glicolipídeo micelar misto e uma composição de tensoativo lamelar, que pode ser glicolipídeo ou não. Composições são propostas para uso de 0,5 a 50 g/l. Exemplos usando Ramnolipídeo não utilizaram nenhuma enzima. Na coluna 12, linhas 24 a 25, menciona-se como possível combinar os biotensoativos com uma quantidade não descrita de enzima. Para chegar a uma combinação de enzima com Ramnolipídeo é necessário fazer diversas seleções a partir deste documento.
[0018] O documento US2006106120 descreve uma mistura de micro-organismo, biotensoativo e uma enzima de degradação plástica para a biorremediação de materiais feitos pelo homem. O biotensoativo pode ser um ramnolipídeo (par. 62). A enzima pode ser uma lipase (par. 64). Nenhuma preferência é dada para quaisquer componentes do ramnolipídeo. Nem ramnolipídeos nem lipases são exemplificados e ramnolipídeos não são especificamente reivindicados.
[0019] O documento US2004072713A (Unilever) descreve um artigo para uso em um processo enzimático de limpeza de tecido, o dito artigo contendo um ou mais tipos de micro-organismos inofensivos capazes de excretar enzimas úteis no dito processo de limpeza de tecido. É especialmente útil se, em adição às enzimas, os micro-organismos são também capazes de produzir outras entidades químicas que contribuam para o processo de limpeza, por exemplo, biotensoativos, por exemplo, lipopolissacarídeos como descrito no documento EP924221. Esses biotensoativos não são Ramnolipídeos. Os níveis de biotensoativos gerados foram realmente muito baixos e certamente não devem ter excedido 0,5 g/L. Os micro-organismos são ditos como sendo capazes de produzir e secretar enzimas úteis para lavanderia, tais como Oxidoredutases, Carbohidrases, Proteases, Lipases, Transferases e Glicosidases.
[0020] A capacidade de micróbios para co-gerar enzima e biotensoativos está descrita em “Lipase and biosurfactant production for utilisation in bioremediation of vegetable oils and hydrocarbon”. Martins VG et al (2008) Quimica Nova No 31 vol 8, 1942-1947. e em “Isolation and characterization of a lipid degrading bacterium and its application to lipid containing wastewater treatment”. Matsumiya Y. et al (2007) Journal of Bioscience and Bioengineering No 103, Vol 4, 325-330.
[0021] O documento US2006080785A (Nero) descreve a limpeza de tapete pela aplicação de uma composição de limpeza tendo biotensoativos e enzimas ao tapete; e limpeza do material com bonnet. As enzimas derivadas de Sea Kelp não são ainda especificadas. Ramnolipídeos de composição desconhecida são mencionados, mas não exemplificados.
Sumário da Invenção
[0022] De acordo com a presente invenção, é provida uma composição detergente com uma nova proporção de mono a di-ramnolipídeos em combinação com lipase. A quantidade de mono-ramnolipídeo presente é mais do que a quantidade de di-ramnolipídeo presente (se houver). Preferivelmente, pelo menos 80% em peso, mais preferivelmente pelo menos 90% em peso ou mesmo 100% em peso de ramnolipídeo na composição é mono-Ramnolipídeo.
[0023] A lipase é preferivelmente derivada de fontes fúngicas ou bacterianas. Por fontes bacterianas, incluímos a expressão de outros micróbios, como levedura, de genes que foram clonados de bactérias.
[0024] O ramnolipídeo está preferivelmente presente em uma quantidade a partir de 0,5 a 40% em peso. A lipase está preferivelmente presente em uma quantidade a partir de 0,0001 a 5% em peso.
[0025] A composição detergente é preferivelmente não formada. Isto é, formadores de zeólito, fosfato ou silicato estão ausentes.
[0026] A composição detergente é preferivelmente uma composição líquida de detergente e se o formador de ácido cítrico estiver presente, ele é limitado ao nível máximo de 2% em peso. A composição é especialmente útil como um detergente de lavanderia e pode ser usada com vantagem para lavagem em água de baixa dureza, menor que 15 °F. Um processo pelo qual a lavanderia e a composição são lavadas em água pré-amolecida é particularmente vantajosamente usado com as composições da invenção.
[0027] As composições são usadas para remover sujeiras gordurosas da roupa para lavar, especialmente de tecidos de algodão. A remoção de sujeiras de algodão é de preocupação maior porque muitas das remoções de sujeiras sofisticadas e tecnologias de liberação de sujeiras incluídas nos detergentes de lavanderia modernos trabalham melhor em tecidos de poliéster. Por conseguinte, é vantajoso combinar um sistema de detergente da presente invenção com um polímero poliéster de liberação de sujeira.
[0028] Usando mono-ramnolipídeos e lipase em uma composição detergente de acordo com a invenção leva a benefícios de limpeza aprimorados e possivelmente sinergias com tensoativos aniônicos sintéticos, por exemplo, tensoativo aniônico sintético sulfonado de C12-14 alquil benzeno. Este tensoativo é comumente empregado em composições detergentes de lavanderia e é tipicamente usado com um tensoativo não iônico, como o tensoativo não iônico etoxilado usado no documento US5417879. Por razões ambientais é desejável eliminar este tensoativo não iônico da composição. Os ramnolipídeos com proporção de mono a di-ramnolipídeo reivindicado proveem um substituto apropriado para o componente de tensoativo não iônico, especialmente quando usado para remover sujeiras gordurosas e particularmente quando usado para remover sujeiras de tecido de algodão. As composições são apropriadas para temperaturas de lavagem baixas e tempos de lavagem rápidos, que suportam economias de energia e tempo.
[0029] Uma sujeira de gordura preferida é gordura de carne bovina.
Descrição Detalhada da Invenção
[0030] Uma grande proporção de biotensoativos é gerada pela ação de bactérias em matérias-primas alimentícias renováveis e estão cada vez mais se tornando opções viáveis como substituições sustentáveis aos tensoativos sintéticos atuais. No atual portfólio de biotensoativos que são atualmente comercializados, Ramnolipídeos, formados pela degradação de óleos e gorduras por Pseudomonas Aeg, mostram benefícios de limpeza insuficientes, quando usados em concentrações de componentes geradas pelo processo de esgotamento bacteriano. Entretanto, quando os componentes de mono e di- ramnolipídeo dos ramnolipídeos expressos são extraídos de mono- ramnolipídeo e usados com resultados de limpeza e lipase superior. Além disso, ao produzir blendas e misturando com tensoativos aniônicos sintéticos, mais melhorias na detergência podem ser alcançadas. .
[0031] A composição detergente pode compreender outros ingredientes comumente encontrados em líquidos de lavanderia. Especialmente polímeros poliéster de liberação de sujeira, hidrótropos, opacificadores, corantes, perfumes, outras enzimas, outros tensoativos, microcápsulas de ingredientes como perfume ou aditivos de tratamento, suavizantes, polímeros para anti- redeposição de sujeira, alvejante, ativadores de alvejante e catalisadores de alvejantes, antioxidantes, agentes de controle de pH e tampões, agentes de espessamento, estruturantes externos para modificação de reologia, estímulos visuais, com ou sem ingredientes funcionais embutidos e outros ingredientes conhecidos dos técnicos no assunto. A composição é preferivelmente um líquido e é vantajosamente embalada tanto em uma garrafa de doses múltiplas quanto em uma bolsa de dose solúvel unitária.
ENZIMAS
[0032] Lipases apropriadas para uso nas composições da invenção incluem aquelas de origem bacteriana, fúngica ou levedura. Mutantes quimicamente modificados ou construídos de proteínas estão incluídos. Exemplos de lípases úteis incluem lipases de Humicola (sinônimo Thermomyces), por exemplo, de H. lanuginosa (T. lanuginosus) como descrito nos documentos EP 258 068 e EP 305 216 ou de H. insolens como descrito no documento WO 96/13580, uma lípase de Pseudomonas, por exemplo, de P. alcaligenes ou P. pseudoalcaligenes (EP 218 272), P. cepacia (EP 331 376), P. stutzeri (GB 1,372,034), P. fluorescens, Pseudomonas sp. cepa SD 705 (Documentos WO 95/06720 e WO 96/27002), P. wisconsinensis (Documento WO 96/12012), uma lípase de Bacillus, por exemplo de B. subtilis (Dartois et al. (1993), Biochemica et Biophysica Acta, 1131, 253-360), B. stearothermophilus (JP 64/744992) ou B. pumilus (Documento WO 91/16422).
[0033] Outros exemplos são variantes de lipase como aquelas descritas nos documentos WO 92/05249, WO 94/01541, EP 407 225, EP 260 105, WO 95/35381, WO 96/00292, WO 95/30744, WO 94/25578, WO 95/14783, WO 95/22615, WO 97/04079, WO 97/07202, US2008004186, US2006205628, US5869438, US6017866, US2002110854, US6939702, US2009221034, US200802425, US2004053360, US2005281912, US2006075518, US2005059130, US20041542180, US2003199069, WO98106215 e WO08088489.
[0034] Exemplos adicionais de lipases apropriadas são descritos e referenciados, mas não limitados àqueles em Juardo et al J Surfact Deterg (2007) 10: 61-70, Horchani et al J Molecular Catalysis: Enzymatic 56 (2009) 237-245, Aloulou et al Biochimica et Biophysica acta 1771 (2007) 1446-1456, Mogensen et al Biochemistry (2005) 44: 1719-1730, Nicanuzia dos Prazeres et al Brazilian J of Microbiology (2006) 37: 505-509, Fernandez-Lorente et al Biotechnology and Bioengineering, 97: vol2 242-250, Gilbert (1993) Enzima Microb. Technol. Vol 15 634-645, Bora and Kalita (2008) J of Chemical Technology and Biotechnology 83: 688-693, Liu et al (2009) Biochemical Engineering Journal 46: 265-270, Thirunavukarasu et al (2008) Process Biochemistry 43: 701-706, Saisubramanian et al (2008) Appl Biochem Biotechnol 150: 139-156, Joshi and Vinay (2007) Res J Biotech vol2 no2 50-56. Lipases de levedura como aquelas de Candida sp e de Cryptococcus sp são apropriadas.
[0035] Enzimas lipase preferidas comercialmente disponíveis incluem Lipolase™ e Lipolase Ultra™, Lipex™, Novozym 525L (Novozymes A/S).
[0036] A composição pode compreender uma cutinase classificada em EC 3.1.1.74. A cutinase usada de acordo com a invenção pode ser de qualquer origem. Preferivelmente, cutinases são de origem microbiana, em particular de origem bacteriana, ou fúngica ou de levedura.
[0037] Cutinases (Esterases) são enzimas que são capazes de degradar a cutina. Em uma realização preferida, a cutinase é derivada de uma cepa de Aspergillus, em particular Aspergillus oryzae, uma cepa de Alternaria, em particular Alternaria brassiciola, uma cepa de Fusarium, em particular Fusarium solani, Fusarium solani pisi, Fusarium roseum culmorum, ou Fusarium roseum sambucium, uma cepa de Helminthosporum, em particular Helminthosporum sativum, uma cepa de Humicola, em particular Humicola insolens, uma cepa de Pseudomonas, em particular Pseudomonas mendocina, ou Pseudomonas putida, uma cepa de Rhizoctonia, em particular Rhizoctonia solani, uma cepa de Streptomyces, em particular Streptomyces scabies, ou uma cepa de Ulocladium, em particular Ulocladium consortiale. Em uma realização mais preferida a cutinase é derivada de uma cepa de Humicola insolens, em particular a cepa Humicola insolens DSM 1800. Cutinase de Humicola insolens é descrita no documento WO 96/13580. A cutinase pode ser uma variante, como uma das variantes descritas nos documentos WO 00/34450 e WO 01/92502, que são aqui incorporadas por referência. Variantes de cutinase preferidas incluem variantes listadas no Exemplo 2 do documento WO 01/92502, o qual é aqui especificamente incorporado por referência.
[0038] Outras esterases apropriadas são aquelas descritas nos documentos US2002012959, WO09085743, WO09002480, US2002137177, US2003024009, US2010151542, US2003032161, US2002007518 e US2007167344. Isto também inclui a classe de enzima Transferase.
[0039] Cutinases comerciais preferidas incluem NOVOZYM™ 51032 (disponíveis de Novozymes A/S, Dinamarca).
[0040] A composição pode também compreender fosfolipase classificada como EC 3.1.1.4 e/ou EC 3.1.1.32. Como usado aqui, o termo fosfolipase é uma enzima que tem atividade para fosfolipídeos. Fosfolipídeos, como lecitina ou fosfatidilcolina, consistem de glicerol esterificado com dois ácidos graxos em posições externa (sn-1) e de meio (sn-2) e esterificada com ácido fosfórico na terceira posição; o ácido fosfórico, por sua vez, pode ser esterificado para um amino-álcool. Fosfolipases são enzimas que participam da hidrólise de fosfolipídeos. Diversos tipos de atividade de fosfolipase podem ser distinguidos, incluindo fosfolipases A1 e A2 que hidrolisam um grupo de acil graxo (nas posições sn-1 e sn-2, respectivamente) para formar lisofosfolipídeo; e lisofosfolipase (ou fosfolipase B) que pode hidrolisar o grupo acila graxo remanescente em lisofosfolipídeo. Fosfolipase C e fosfolipase D (fosfodiesterases) liberam diacilglicerol ou ácido fosfatídico, respectivamente.
[0041] O termo fosfolipase inclui enzimas com atividade de fosfolipase, por exemplo, fosfolipase A (A1 ou A2), atividade de fosfolipase B, atividade de fosfolipase C ou atividade de fosfolipase D. O termo “fosfolipase A” usado aqui em conexão com uma enzima da invenção é destinado a cobrir uma enzima com atividade de Fosfolipase A1 e/ou Fosfolipase A2. A atividade de fosfolipase pode ser provida por enzimas tendo outras atividades também, tais como, por exemplo, uma lipase com atividade de fosfolipase. A atividade de fosfolipase pode, por exemplo, ser de uma lipase com atividade secundária de fosfolipase. Em outras realizações da invenção a atividade de enzima de fosfolipase é provida por uma enzima tendo essencialmente somente atividade de fosfolipase e em que a atividade de enzima de fosfolipase não é uma atividade secundária.
[0042] A fosfolipase pode ser de qualquer origem, por exemplo, de origem animal (como, por exemplo, mamífero), por exemplo, do pâncreas (por exemplo, pâncreas bovino ou de porco), ou veneno de cobra ou veneno de abelha. Preferivelmente a fosfolipase pode ser de origem microbiana, por exemplo, de fungos filamentosos, levedura ou bactérias, como as do gênero ou espécies Aspergillus, por exemplo, A. niger; Dictyostelium, por exemplo, D. discoideum; Mucor, por exemplo, M. javanicus, M. mucedo, M. subtilissimus; Neurospora, por exemplo, N. crassa; Rhizomucor, por exemplo, R. pusillus; Rhizopus, por exemplo R. arrhizus, R. japonicus, R. stolonifer; Sclerotinia, por exemplo, S. libertiana; Trichophyton, por exemplo T. rubrum; Whetzelinia, por exemplo, W. sclerotiorum; Bacillus, por exemplo, B. megaterium, B. subtilis; Citrobacter, por exemplo, C. freundii; Enterobacter, por exemplo, E. aerogenes, E. cloacae Edwardsiella, E. tarda; Erwinia, por exemplo, E. herbicola; Escherichia, por exemplo, E. coli; Klebsiella, por exemplo, K. pneumoniae; Proteus, por exemplo, P. vulgaris; Providencia, por exemplo, P. stuartii; Salmonella, por exemplo S. typhimurium; Serratia, por exemplo, S. liquefasciens, S. marcescens; Shigella, por exemplo, S. flexneri; Streptomyces, por exemplo, S. violeceoruber; Yersinia, por exemplo, Y. enterocolitica. Desse modo, a fosfolipase pode ser fúngica, por exemplo, da classe Pyrenomycetes, como o gênero Fusarium, como uma cepa de F. culmorum, F. heterosporum, F. solani, ou uma cepa de F. oxysporum. A fosfolipase pode também ser de uma cepa de fungo filamentoso dentro do gênero Aspergillus, como uma cepa de Aspergillus awamori, Aspergillus foetidus, Aspergillus japonicus, Aspergillus niger ou Aspergillus oryzae.
[0043] Fosfolipases preferidas são derivadas de uma cepa de Humicola, especialmente Humicola lanuginosa. A fosfolipase pode ser uma variante, como uma das variantes descritas no documento WO 00/32758, que são aqui incorporadas por referência. Variantes de fosfolipase preferidas incluem variantes listadas no Exemplo 5 do documento WO 00/32758, que é aqui especificamente incorporada por referência. Em outra realização preferida a fosfolipase é uma descrita no documento WO 04/111216, especialmente as variantes listadas na tabela no Exemplo 1.
[0044] Em outra realização preferida a fosfolipase é derivada de uma cepa de Fusarium, especialmente Fusarium oxysporum. A fosfolipase pode ser a considerada no documento WO 98/026057 exibida em SEQ ID NO: 2 derivada de Fusarium oxysporum DSM 2672, ou variantes do mesmo.
[0045] Em uma realização preferida da invenção a fosfolipase é uma fosfolipase A1 (EC. 3.1.1.32). Em outra realização preferida da invenção a fosfolipase é uma fosfolipase A2 (EC.3.1.1.4.).
[0046] Exemplos de fosfolipases comerciais incluem LECITASE™ e LECITASE™ ULTRA, YIELSMAX, ou LIPOPAN F (disponíveis de Novozymes A/S, Dinamarca).
[0047] A composição pode ainda compreender outras enzimas intensificando a detergência da composição, tais como agentes amaciantes, uma amilase (por exemplo, Fungamyl(R) de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma lipase (por exemplo, Novocor(R) AD de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma celulase (por exemplo, Celluzyme(R), Carezyme(R), e/ou Celluclast(R), todas de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma xilanase (por exemplo, Biofeed(R) PLUS ou Shearzyme(TM) de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma beta-glucanase (por exemplo, Viscozyme(R) ou Ultraflo(TM) de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma pectinase (por exemplo, Pectinex(TM) Ultra de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma peroxidase (por exemplo, Guardzyme(TM) de Novo Nordisk A/S, Dinamarca), uma lacase (por exemplo, obtida de Myceliophthora ou Polyporus), um agente de intensificação para a peroxidase/lacase (por exemplo, PPT ou ácido metilsiríngico metilsiringato ou derivados dos mesmos) e/ou um tampão (por exemplo ácido cítrico).
[0048] A invenção será ainda descrita com referência aos exemplos não limitantes a seguir.
Exemplos Exemplo 1
[0049] Várias composições de Lipase e Ramnolipídeo foram examinadas para determinar sua capacidade para remover uma mancha de carne bovina colorida.
[0050] Soluções de lavagem foram preparadas dispersando lipase a uma concentração de 4 mg de proteína por litro com tensoativo de detergente na concentração requerida em tampão fosfato-salino (PBS) ajustado para pH 8 e 12° FH de dureza da água. Foram misturados 10 mL da solução de lavagem em frascos plásticos de 25 mL a 37 °C com agitação em 200 rpm em uma incubadora orbital por 30 minutos. Amostras de tecido (aproximadamente 1 cm2) de tecido de algodão manchados com gordura bovina colorida de Vermelho Sudão foram então adicionadas e os frascos retornados para a incubadora com agitação. As amostras de tecido foram removidas em intervalos de tempo calculados, enxaguadas em água fria e secas a 37 °C. A cor residual foi monitorada usando um Macbeth Colour Eye e comparada com tecidos manchados não tratados.
[0051] A enzima bacteriana é “Lipomax”, uma lipase variante M21L derivada de bactérias da lipase de Pseudomonas alcaligenes como descrito no documento WO 94/25578 para Gist-Brocades (M.M.M.J. Cox, H.B.M. Lenting, L.J.S.M. Mulleners and J.M. van der Laan).
[0052] Enzima fúngica é “Lipolase”, derivada de Humicola languginosa como descrito no documento EP 0 258 068 e disponível de NovoZymes A/S.
[0053] Detalhes dos tensoativos foram conforme a seguir: RL = Ramnolipídeo: um biotensoativo de origem bacteriana. Comercialmente disponível de Jeneil como RBR425 (25% de AM). A composição deste material foi analisada e fornecida na Tabela 3 abaixo.
[0054] Em adição ao Ramnolipídeo comercialmente fornecido, duas amostras adicionais foram feitas separando em frações ricas de R1 e R2. Essas frações foram também usadas em combinação com as lipases. Os dados de limpeza por 1 hora e 4 horas são fornecidos nas Tabelas 1 e 2.
Figure img0001
Figure img0002
[0055] Para nossa análise deste Ramnolipídeo na Tabela 3, uma quantidade conhecida de JBR425 foi acidificada para pH 3 usando 12 M de HCl e colocado em um refrigerador de um dia para outro. O sobrenadante foi depois extraído três vezes usando uma mistura de 2:1 de Clorofórmio e Etanol. O solvente foi depois removido por rotoevaporação e a mistura de ramnolipídeo isolada foi depois redissolvida em metanol..
[0056] O processo de separação e caracterização da mistura foi realizado usando um HPLC conectado a um Espectrômetro de Massa de Ionização por Eletrospray de armadilha de íons. O modo de ionização foi no modo negativo com uma faixa de varredura de 50-1200Da. A coluna usada para separar foi coluna Phenomenex luna C18 250 x 4,6mm 5 μm. A fase móvel: água (fase móvel A) e acetonitrila (fase móvel B) foram usadas para separar através de um gradiente de 60:40 (A:B) mudando para 30:70 (A:B) após 30 minutos. O sistema foi depois mantido por 5 minutos antes de retornar para as condições de partida todas em uma taxa de fluxo de 0,5 mL/min. O volume de injeção foi de 10 μl.

Claims (18)

1. Composição detergente caracterizada por compreender ramnolipídeos e lipase, em que o percentual em peso do ramnolipídeo constituído por mono-ramnolipídeos é maior do que 50% em peso.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo percentual em peso do ramnolipídeo constituído por mono-ramnolipídeos ser maior do que 80% em peso.
3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo percentual em peso do ramnolipídeo constituído por mono-ramnolipídeos ser maior do que 90% em peso.
4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por 100% em peso do ramnolipídeo ser mono- ramnolipídeo.
5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo ramnolipídeo estar presente em uma quantidade de 0,5% a 40% em peso.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pela lipase estar presente em uma quantidade de 0,0001% a 5% em peso.
7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por compreender ainda pelo menos 5% em peso de tensoativo aniônico sintético.
8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo tensoativo aniônico sintético compreender C12-14 alquilbenzeno sulfonato linear.
9. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por ter menos do que 2% de agente complexante de detergente.
10. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por ter mais tensoativo aniônico sintético do que ramnolipídeo.
11. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado por ser um líquido de lavagem compreendendo de 10% a 40% do tensoativo total.
12. Composição, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado por compreender menos do que ou igual a 2% de ácido cítrico.
13. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado por compreender ainda um polímero poliéster de liberação de sujeira substantivo.
14. Uso de uma composição, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado por ser para a lavagem em água com uma baixa dureza de água de menos do que 15 °F.
15. Uso de uma composição, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado por ser para remover sujeiras gordurosas da roupa para lavar.
16. Uso de uma composição, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelas sujeiras gordurosas serem removidas do tecido de algodão.
17. Uso de uma composição, de acordo com a reivindicação 15 ou 16, caracterizado pela sujeira gordurosa ser gordura bovina.
18. Processo para a limpeza de um substrato compreendendo as etapas de imersão do substrato em água adicionando uma composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, à água para formar um líquido de lavagem e a lavagem do substrato caracterizado pelo tempo do ciclo de lavagem ser menor do que 60 minutos, preferivelmente menor do que 30 minutos e a temperatura da água ser menor do que 35 °C.
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