BG66261B1 - Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин - Google Patents

Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин Download PDF

Info

Publication number
BG66261B1
BG66261B1 BG107825A BG10782503A BG66261B1 BG 66261 B1 BG66261 B1 BG 66261B1 BG 107825 A BG107825 A BG 107825A BG 10782503 A BG10782503 A BG 10782503A BG 66261 B1 BG66261 B1 BG 66261B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
mmol
rotamer
nmr
mhz
mixture
Prior art date
Application number
BG107825A
Other languages
English (en)
Other versions
BG107825A (bg
Inventor
Tord Inghardt
Anders Johansson
Arne Svensson
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from SE0004458A external-priority patent/SE0004458D0/xx
Priority claimed from SE0100965A external-priority patent/SE0100965D0/xx
Priority claimed from SE0101239A external-priority patent/SE0101239D0/xx
Priority claimed from SE0102921A external-priority patent/SE0102921D0/xx
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of BG107825A publication Critical patent/BG107825A/bg
Publication of BG66261B1 publication Critical patent/BG66261B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/49—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C07C205/57—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups having nitro groups and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C205/59—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups having nitro groups and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/01—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring by replacing functional groups bound to a six-membered aromatic ring by hydroxy groups, e.g. by hydrolysis
    • C07C37/055—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring by replacing functional groups bound to a six-membered aromatic ring by hydroxy groups, e.g. by hydrolysis the substituted group being bound to oxygen, e.g. ether group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/16—Preparation of ethers by reaction of esters of mineral or organic acids with hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/18—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds
    • C07C41/26—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds by introduction of hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/18—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds
    • C07C41/30—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds by increasing the number of carbon atoms, e.g. by oligomerisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/004—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reaction with organometalhalides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/27—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation
    • C07C45/29—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation of hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/45—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by condensation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/673—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by change of size of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C07C45/70—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction with functional groups containing oxygen only in singly bound form
    • C07C45/71—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction with functional groups containing oxygen only in singly bound form being hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/52—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings
    • C07C47/56—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing hydroxy groups
    • C07C47/565—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing hydroxy groups all hydroxy groups bound to the ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/52—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings
    • C07C47/575—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/84—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/48—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/50—Mandelic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/56—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/734—Ethers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/738—Esters of keto-carboxylic acids or aldehydo-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/52—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D263/54—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles
    • C07D263/58—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Осигурява се съединение с формула I@където Rа, R1, R2, Y и R3 имат значенията, дадени в описанието, и негови фармацевтично приемливи производни (включително пролекарства), които съединения и производни са полезни като (или са полезни като пролекарства на) конкурентни инхибитори на трипсинподобни протеази като тромбин и като такива са полезни при лечението на състояния, при които е необходимо инхибиране на тромбин (например тромбоза), или като антикоагуланти.

Description

Област на техниката
Това изобретение се отнася до нови фармацевтично приемливи съединения, по-специално до съединения, които са конкурентни инхибитори, и/или до съединения, които се метаболизират до съединения, които са конкурентни инхибитори на трипсинподобните серинпротеази, особено тромбин, тяхното използване като лекарствени средства, фармацевтични състави, които ги съдържат и схеми на синтез за тяхното получаване.
Предшестващо състояние на техниката
Кръвната коагулация е ключовият процес, включен както в хемостазата (т.е. предотвратяване загубата на кръв от увреден кръвоносен съд), така и в тромбозата (т. е. образуването на кръвен съсирек в кръвоносен съд, понякога водещ до обструкция на кръвоносния съд).
Коагулацията е резултатът от серии ензимни реакции. Един от основните етапи в тези серии от реакции е превръщането на проензима протромбин в активния ензим тромбин.
Известно е, че тромбинът изпълнява централна роля в коагулацията. Той активира тромбоцитите, при което те агрегират, превръща фибриногена във фибринови мономери, които полимеризират спонтанно във фибринови полимери, и активира фактор XIII, който от своя страна омрежва полимерите, при което се образува неразтворим фибрин. Освен това, тромбинът активира фактор V и фактор VIII, което води до “положителна обратна връзка” генериране на тромбин от протромбин.
Чрез инхибиране агрегацията на тромбоцитите и образуването и омрежването на фибрин, се очаква ефективните инхибитори на тромбин да проявят антитромботична активност. Освен това, антитромботична активност се очаква да се повиши чрез ефективно инхибиране на положителния механизъм на обратната връзка.
Предшестващо ниво на техниката
Предходните разработки на инхибитори на тромбин с ниско молекулно тегло са описани от Claesson в Blood Coagul. Fibrinol. (1994) 5, 411.
Blomback et al (в J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl. 107, 59, (1969)) докладват затромбинови инхибитори на базата на последователност от аминокиселини, намиращи се около мястото на разцепване на фибриногеновата Аалфа верига. Тези автори предполагат, че от дискутираните аминокиселинни последователности трипептидната секвенция Phe-Val-Arg (Р9-Р2-Р1, по-надолу наречена РЗ-Р2-Р1 последователност) би била най-ефективният инхибитор.
Инхибиторите на тромбин на база на дипептидилови производни с алфа,омега-аминоалкил-гуанидин в позиция Р1 са известни от патент US No 4,346,078 и международна патентна заявка WO 1993/011152. Докладвани са също така подобни, структурно сродни, дипептидилови производни. Международна заявка за патент WO 1994/029336 например разкрива съединения с аминометилови бензамидини, циклени аминоалкилови амидини и циклени аминоалкилови гуанидини в позиция Р1 (Международната заявка за патент WO 1997/023499 разкрива пролекарства от някои от тези съединения); Европейска заявка за патент 0 648 780, разкрива съединения например с циклен аминоалкилов гуанидин в позиция Р1.
Инхибиторите на тромбин на база на пептидилови производни, притежаващи също така циклени аминоалкилови гуанидини (напр. 3- или 4-аминометил-1-амидино-пиперидин) в позиция Р1 са известни от Европейска заявка за патент 0 468 231, 0 559 046 и 0 641 779.
Инхибиторите на тромбин на база на трипептидилови производни с аргининалдехид в позиция Р1 са разкрити най-напред в Европейска заявка за патент 0 185 390.
Неотдавна е докладвано за пептидилови производни на базата на аргинин-алдехид, модифициран в позиция РЗ. Например, Международна заявка за патент WO 1993/018060 разкрива хидроксикиселини, Европейска заявка за патент 0 526 877 - дес-аминокиселини, и Европейска заявка за патент 0 542 525 - О-метил бадемови киселини в РЗ-позиция.
Известни са също така и инхибитори на серинпротеази (напр. тромбин) на база на електрофилни кетони в позиция Р1. Например, Европейска заявка за патент 0 195212 разкрива
66261 Bl пептидилови алфа-кетоестери и амиди, Европейска заявка за патент 0 362 002 - флуороалкиламидни кетони, Европейска заявка за патент 0 364 344 - алфа,бета,делта-трикетосъеднения, и Европейска заявка за патент 0 530 167 - алфаалкоксикетонови производни на аргинин в позиция Р1.
Други, с различна структура инхибитори на трипсинподобните серинпротеази на база на С-терминални боратни производни на аргинин и техни изотиоурониеви аналози са известни от Европейска заявка за патент 0 293 881.
Понастоящем, инхибиторите на тромбин на база на пептидилови производни са разкрити в Европейска заявка за патент 0 669 317 и Международна заявка за патент WO 1995/035309, WO1995/023609, WO1996/025426, WO1997/002284, WO 1997/046577, WO1996/032110, WO1996/031504, WO1996/003374, WO1998/006740, WO1997/049404, WO1998/057932, WO1999/029664, WO 2000/035869 и WO 2000/-42059.
По-специално, WO 1997/002284 и WO 2000/042059 разкриват инхибитори на тромбин със заместени бадемови киселини в позиция РЗ.
Остава, обаче, необходимостта от ефективни инхибитори на трипсин-подобните серинпротеази като тромбин. Съществува също така и нужда от съединения, които притежават благоприятен фармакокинетичен профил и са селективни инхибитори на тромбин над други серинови протеази, по-специално включените в хемостазата. Съединенията, които проявяват конкурентна инхибираща активност по отношение на тромбин, се очаква да са особено полезни като антикоагуланти и следователно полезни в терапията на тромбоза и сродни заболявания.
Техническа същност на изобретението
Съгласно изобретението се осигурява съединение с формула I
където
Ra означава -ОН или -СН2ОН;
R1 означава най-малко един евентуален халогено заместител;
R2 означава един или два С 3-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители (т.е. R2 означава една или две флуороалкокси-С, 3)-групи);
Y означава -СН2- или -(СН2)2-; и
R2 означава фрагмент с формула I(i) или 1(H):
R4
1(0 l(ii) където
R4 означава Н или един или няколко флуоро-заместители; и един или два от Х|5 Х2, X и Х4 означава -N-, а другите означават -СН-, или негово фармацевтично приемливо производно.
Терминът “фармацевтично приемливи производни” включва фармацевтично приемливи соли (напр. киселинно присъединителни соли).
В края на заявката са дадени съкращения. Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с формули I(i) и 1(й) означават позицията на свързване на фрагментите.
Халогено-групи, които R1 може да означава, включват, флуоро, хлоро, бромо и йодо. За да няма съмнение, при означението на наймалко една евентуално халогено-група R’ може или да отсъства (и по такъв начин да е заместен с Н, така, че правилата за валентност да са спазени) или може да означава един или няколко халогенни атоми.
Когато R3 означава фрагмент с формула I(i), в която R4 означава един или няколко флуоро-заместители, предпочитани съединения с формула 1 включват тези, в които R4 означава един флуоро-заместител във 2-ра или 3-та позиция, или два флуоро-заместители във 2-ра и 5-та позиции или, за предпочитане, във 2-ра и 6-та позиции (където позициите на заместители
66261 Bl те са определени спрямо точката на свързване с фрагмента с формула I(i) с останалата част на молекулата (т.е. с -NHCH2-rpynaTa)).
Когато R3 означава фрагмент с формула 1(H), предпочитани съединения с формула I 5 включват тези, в които или:
(a) единият от Хр Х2, Х3 и Х4 означава -N- , а другите означават -СН-; или (b) или X! и Х3, или Х2 и Х4, и двата означават -N-, а другите два (ако е подходящо) озна- 10 чават -СН-.
Предпочитани съединения с формула I включват тези, в които:
R1 означава един заместител флуоро, хлоро или бромо; 15
R2 означава Ct 2-алкокси, заместен с един или няколко флуоро-заместители, като -OCHF2, -OCF3, -OCH2CF3, -OCH2CHF2, -OCH2CH2F или -OCH(CH2F)2;
R3 означава фрагмент c формула I(i); 20
R4 означава H.
По-предпочитани съединения c формула I включват тези, в които:
Ra означава OH;
R1 означава един хлоро-заместител; 25
R2 означава -OCF3, за предпочитане -OCH2CHF2, или за предпочитане -OCHF2 или -осн2сн2е
Предпочитани точки на заместване на R1 и R2 на свързаната фенилова група на съединения 30 с формула I включват двете мета-позиции спрямо точката на свързване на тази фенилова група с останалата част на молекулата (т.е. в 3-та и/или 5-та позиция (за предпочитане 3,5-заместване) спрямо въглеродния атом, на който се намира ал- 35 фа- или бета-хидроксигрупата на киселината).
Съединения с формула I, които могат да се споменат включват тези, в които:
R2 означава един или два С( 2-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени 40 от своя страна с един или няколко флуорозаместители; или
R2 означава един или два С3-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители. 45 Съединения с формула I могат да се получат съгласно техниките, добре известни на специалистите в областта, например съгласно описаното по-долу.
Съгласно друг вариант на изобретението 50 се осигурява метод за получаване на съединение с формула I, който включва:
i) свързване на съединение с формула II,
където Ra, R1 и R2 са дефинирани както по-горе със съединение с формула III,
\_^R3
III където Y и R3 са дефинирани както погоре, например в присъствието на свързващо средство (напр. оксалилхлорид в DMF, EDC, DCC, HBTU, HATU, РуВОР или TBTU), съответна база (напр. пиридин, DMAP, TEA, 2,4,6колидин или DIPEA) и подходящ органичен разтворител (напр. дихлорометан, ацетонитрил, EtOAc или DMF);
(Н) свързване на съединение с форму-
IV където Ra, R1, R2 и Y са дефинирани както по-горе със съединение с формула V, r3ch2nh2 V където R3 е дефиниран както по-горе, например при условията, описани в метод (i) погоре;
(iii) за съединения с формула I, в която R1 не присъства, редукция на съответното съединение с формула 1а, както е дефинирано по-долу,
66261 Bl в която R5 означава OR6, където R5 и R6 са дефинирани по-долу, например чрез хидриране в присъствието на подходящ катализатор (напр. катализатор Pd/C (напр. 10% (w/w) Pd/C)) и подходящ разтворител (напр. нисш (напр. С, 6) алкилов алкохол като етанол), и евентуално в присъствието на подходяща киселина (напр. оцетна киселина) и/или както е описано в Synth. Comm. (1998) 4351; или (iv) взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или XV1B, както е дефинирано по-долу, с подходящ източник на амоняк (напр. амониев ацетат или газ амоняк) при условия, известни на специалистите в областта, като например чрез взаимодействие на междинно съединение етилимидоат (получен при взаимодействие на съединение с формула XV1A или XVIB с НС1 (газ) в етанол) с газ амоняк в етанол, или при условията, описани в Tetrahedron Lett. 40, 7067 (1999), разкритията на този документ са включени за справка (например, за получаване на съединения с формула I, в която R3 означава фрагмент с формула I (й,) в която Х2или Х4 означават N, взаимодействие на съответно съединение с формула XVIB с амониев ацетат (напр. 1 до 30 еквивалента амониев ацетат) в присъствието на N-ацетил цистеин (напр. 1 до 30 еквивалента N-ацетил цистеин) и подходящ разтворител (напр. нисш алкилов (напр. С, 6) алкохол като метанол)).
Съединения с формула II могат да се получат чрез известни и/или стандартни методи.
Например, съединения с формула II, в която Ra означава ОН могат да се получат чрез взаимодействие на алдехид с формула VI,
където R1 и R2 са дефинирани както погоре с:
(а) съединение с формула VII,
R”CN VII където R” означава Н или (CH3)3Si, например при стайна или повишена температура (напр. под 100°С) в присъствието на подходящ органичен разтворител (напр. хлороформ или метиленхлорид) и, ако е необходимо, в присъствието на подходяща база (напр. TEA) и/или подходяща система катализатори (напр. бензиламониев хлорид или цинков йодид, или при използване на хирален катализатор, например както е описано в Chem. Rev., (1999) 99, 3649), последвано от хидролиза при условия, които са добре известни на специалистите в областта (напр. съгласно описаното по-долу);
(b) NaCN или KCN, например в присъствието на NaHSO3 и вода, последвано от хидролиза;
(c) хлороформ, например при повишена температура (напр. по-висока от стайна температура, но под 100°С) в присъствието на подходящ органичен разтворител (напр. хлороформ) и, ако е необходимо, в присъствието на подходяща система катализатори (напр. бензиламониев хлорид), последвано от хидролиза;
(d) съединение с формула VIII,
VIII където М означава Mg или Li, последвано от окислително разцепване (напр. озонолиза или с катализатор осмий или рутений), при условия, които са добре известни на специалистите в областта; или (e) трис(метилтио)метан при условия, които са добре известни на специалистите в областта, последвано от хидролиза в присъствието напр. на HgO и HBF4.
Съединения с формула П, в която Ra означава -СН2ОН могат да се получат чрез редукция на съединение с формула IX,
където R означава С, -алкил или С, -ал1-6 1-3 килфенил и R1 и R2 са дефинирани както по-горе,
66261 Bl например при стайна температура или по-ниска в присъствието на подходящ редуктор (напр. натриев борохидрид) и подходящ органичен разтворител (напр. метанол, етанол, THF или тяхна смес), последвано от хидролиза на получената междинно съединение, естер на тропинова киселина с формула IXA,
където R, R1 и R2 са дефинирани както погоре, при условия, които са добре известни на специалистите в областта, например съгласно описаното по-долу. Специалистът ще прецени, че етапът на редукция и хидролиза могат да се проведат в един съд, например съгласно описаното по-долу.
Съединения с формула II, в която Ra означава -ОН може да се получи по алтернативен начин чрез окисление на съединение с формула
или на негово производно, което евентуално е защитено при вторичната хидроксилна група, където R1 и R2 са дефинирани както погоре, в присъствието на подходящ окислител (напр. комбинация от подходящ свободен радикал окислител (като TEMPO) и подходящ хипохлорит (като натриев хипохлорит)) при условия, известни на специалистите в областта, например при температура в границите между -10°С и стайна температура, в присъствието на подходящ разтворител (напр. вода, ацетон или тяхна смес), подходяща сол (напр. халогенид на алкален метал като калиев бромид) и подходяща база (напр. карбонат на алкален метал или кисел карбонат като кисел натриев карбонат).
Енантиомерните форми на съединението с формула II, в която Ra означава -ОН (т. е. тези съединения, които имат различни конфигурации на заместители около С-атома алфа- спрямо СО2Н групата) могат да се разделят чрез енантиомерно специфичен етап на дериватизация. Това може да се постигне, например чрез ферментен метод. Такъв един ферментен метод включва, например, трансестерификация на -ОН групата при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник (напр. при между 45 и 65°С) в присъствието на подходящ ензим (напр. Липаза PS Amano), подходящ естер (напр. винилацетат) и подходящ разтворител (напр. метил третбутилетер). Дериватизираният изомер може след това да се отдели от нереагиралия изомер, като се използват обичайни методи за разделяне (напр. хроматография).
Групи, добавени към съединения с формула II в в такъв етап на получаване могат да се отстранят или преди следващата реакция или в кой да е по-късен етап при синтеза на съединения с формула I. Допълнителните групи могат да се отделят, при използване на конвенционални методи (напр. за естери на алфа-ОН групата, хидролиза при условия, известни на специалистите в областта (напр. при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник в присъствието на подходяща база (напр. NaOH) и подходящ разтворител (напр. МеОН, вода или тяхна смес)).
Енантиомерните форми на съединението с формула II, в която Ra означава -СН2ОН могат да се разделят чрез хирална хроматография (напр. хирална HPLC).
Съединения с формула III могат да се получат чрез купелуване на съединение с форму-
където Y е дефиниран както по-горе със
66261 Bl съединение c формула V, дефинирано по-горе, например при условия, подобни на описаните за получаване на съединения с формула I.
Съединения с формула IV могат да се получат чрез купелуване на съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула X, дефинирано по-горе, например при условия, подобни на описаните за получаване на съединения с формула I.
Съединения с формула VI могат да се получат чрез известни и/или стандартни методи. Например, те могат да се получат чрез:
(i) вкарване на метален атом (където металът може да е, например, алкален метал като Li или, за предпочитане, двувалентен метал като Mg) в съединение с формула XI,
където Hal означава халогенен атом, избран от С1, Вг и I и
R1 и R2 са дефинирани както по-горе, последвано от взаимодействие с подходящ източник на формиловата група (като Ν,Νдиметилформамид), например при условия, описани по-долу;
(ii) редукция на съединение с формула XII,
където R1 и R2 са дефинирани както погоре в присъствието на подходящ редуктор (напр. DIBAL-H); или (iii) окисление на съединение с формула
където R1 и R2 са дефинирани както погоре в присъствието на подходящ окислител (напр. МпО2, пиридиниев хлорохромат, комбинация от DMSO и оксалилхлорид, или SO, пиридин комплекс в DMSO).
Съединения с формула IX могат да се получат от съответния фенилацетат (който може, например, да се получи от съответния ацетофенон, както е описано в J. Am. Chem. Soc. 98, 6750 (1976) или от съответния бензилцианид чрез стандартни хидролизни методи) чрез конвенционални методи, например аналогично на методите, описани в J. Org. Chem. 54, 3831 (1989) и/или съгласно описаното по-долу. Съединения с формула IXB могат да се получат чрез дихидроксилиране на съответното съединение с формула ХША
където R1 и R2 са дефинирани както погоре, в присъствието на подходящо дихидроксилиращо средство (напр. реактив или реактивна смес, която осигурява OsO4, като AD-mixалфа или, особено, AD-mix-бета), например при условия, известни на специалистите в областта, при температура в границите между -10°С и стайна температура, в присъствието на подходящ разтворител (напр. вода, трет-бутанол или тяхна смес). Когато се използват асиметрични окислители като AD-mix-алфа или AD-mix-бета, този метод може да се използва за получаване на съединения с формула IXB, със специфични конфигурации от групи (т. е. R или S) при двата Сатома, с които са свързани първичната и вторичната хидроксилни групи.
Съединения с формула ХША могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула XI, дефинирано по-горе, с подходящ източник на винилов анион (напр. трибутил (винил) калай) при условия, известни на специалистите в областта, например при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник (напр. 50°С) в присъствието на подходящ разтворител (напр. толуен), подходящо свързващо средство (напр.
66261 Bl паладиев (0) координационен комплекс като тетракис (трифенилфосфин) паладий(О)) и евентуално в присъствието на подходящ катализатор (напр. 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол).
Съединения с формули V, VII, VIII, X, XI, 5 ХП и XIII или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални методи за синтез, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещества, които се получават лесно, като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Съединения с формули la, XVIA и XVIB могат да се получат по методи описани по-долу.
Заместителите при фениловия пръстен в съединения с формули I, 11, III, IV, V, VI, IX, IXA, IXB, XI, XII, XIII и ХША могат да се вкарат и/или да се получат чрез вътрешно превръщане като се използват методи, добре известни на специалистите в областта като се използват вътрешно превръщане на стандартни функционални групи, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие.
Например, съединения с формули I, II, IV, VI, IXA, XI, XII и XIII могат да се получат от съответни съединения с формули XIVA, XIVB, X1VC, XIVD, X1VE, XIVF, XIVG и XIVH, респективно,
XIVB
XIVC
XIVD
XIVE
Hal
66261 Bl където Ra, R, R1, R3, Y и Hal (ако e подходящо) са дефинирани както по-горе, например:
(a) чрез взаимодействие със съответен флуориран халогеноалкан (напр. флуориран хлороалкан), напр. при стайна температура или по-висока (напр. при температура на варене под обратен хладник) в присъствието на подходяща база (напр. калиев трет-бутоксид, КОН или NaOH, например във воден разтвор) и подходящ органичен разтворител (напр. THF, хлороформ или изопропанол); или (b) чрез взаимодействие със съединение с формула XIVJ,
RxS(O)2ORy XIV J където R* означава С, 4-алкил, Ц 4-перфлуороалкил или фенил (евентуално заместен с метил, нитро или халогено) и Ry е CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F или CH(CH2F)2, например в присъствието на подходяща база (напр. К2СО3) и подходящ разтворител (напр. DMF), например, в двата случая, съгласно описаното по-долу.
Специалистът ще прецени, че тази трансформация на функционални групи може да се проведе също така в по-ранен етап на общия синтез на съединения с формули II, IV, VI, IXA, XI, XII и XIII (т. е. на подходящи прекурсори на съединения с формули XIVB, XIVC, XIVD, X1VE, XIVF, XIVG и XIVH, респективно).
Съединения с формули XIVA, XIVB, XIVC, XIVD, XIVE, XIVF, XIVG, X1VH и XIVJ или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални методи за синтез, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Например, съединения с формули XIVA, XIVB, XIVC, XIVD, XIVE, XIVF, XIVG и XIVH могат да се получат чрез премахване на защитата от съответните защитени феноли (като защитната група може да бъде, например, метил, алил, бензил или трет-бутил) при стандартни условия. Освен това, съединения с формула XIVD, в която R1 е един хлоро-заместител могат да се получат от ди- или трихалогенозаместен бензен (напр. 1-Вг, З-Cl, 5-Р-бензен, чрез заместване на флуорния атом с метоксигрупа (напр. чрез взаимодействие с NaOMe в 1-метил-2-пиролидинон/метанол при повишена температура), заменяне на бромогрупата с формилова група (напр. както е описано по-горе за получаване на съединения с формула VI), и след това деметилиране (напр. при използване на PhSH в 1-метил-2-пиролидинон в присъствието на К2СО3)).
Също така, съединения с формула I, в която R1 отсъства могат да се получат от съответни съединения с формула 1 (или чрез техни подходящи прекурсори), в която R1 означава халогено (като хлоро), например чрез хидриране при условия, известни на специалистите в областта.
Съединения с формула I могат да се изолират от техните реакционни смеси при използване на конвенционални методи.
В съответствие с настоящото изобретение, фармацевтично приемливи производни на съединения с формула I, включват също така “защитени” производни, и/или съе шия действащи като пролекарства на съединения с формула I.
Съединения, които действат като пролекарства на съединенията с формула I и могат да се споменат, включват съединения с формула 1а,
където R3a означава фрагмент с формула I (iii) или I (iv):
Ι(ίν)
66261 Bl където R означава OR6 или C(O)OR7;
R6 означава H, C, 10-алкил, Cj 3-алкиларил или Ct 3-алкилоксиарил (като алкиловите части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, и ариловите части на последните две групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, избрани от халогено, фенил, метил или метокси, като последните три групи са също евентуално заместени с един или няколко халогено заместители);
R7 означава ]0-алкил (чиято последна група е прекъсната евентуално с един или няколко кислородни атома), или С13-алкиларил или С3 3-алкилоксиарил (като алкиловите части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, и ариловите части на последните две групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, избрани от халогено, фенил, метил или метокси, като последните три групи са също евентуално заместени с един или няколко халогено заместители); и
Ra, R’, R2, Y, R4, X,, Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както по-горе, и техни фармацевтично приемливи производни.
Терминът “фармацевтично приемливи производни” на съединения с формула 1а включва фармацевтично приемливи соли (напр. киселинно присъединителни соли).
Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с формули I(iii) и I(iv) означават позицията на свързване на фрагментите.
Алкилоксиарил-групи, които R6 и R7 могат да представляват, включват алкилова и арилова група, свързана чрез кислороден атом. Алкилариловите и алкилоксиариловите групи са свързани с останалата част на молекулата чрез алкиловата част на тези групи, чиито алкилови части могат да бъдат разклонени вериги (ако са достатъчно въглеродните атоми на брой (т.е. три)). Ариловите части на алкилариловите и алкилоксиариловите групи, които могат да представляват R6 и R7, или да бъдат заместени включват карбоксилни и хетероциклени ароматни групи, като фенил, нафтил, пиридинил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, индолил и бензофуранил и др.
Алкилови групи, които R6 и R7 могат да представляват, могат да са линейни или, при достатъчен брой въглеродни атоми (т.е. най-малко три), могат да са разклонени и/или циклени. Освен това, когато броят на въглеродните атоми е достатъчен (т.е. най-малко четири), такива алкилови групи могат също да бъдат частично циклени/ациклени. Такива алкилови групи могат да бъдат също наситени или, ако има достатъчен брой въглеродни атоми (т.е. най-малко два), могат да бъдат ненаситени.
Халогено групи, с които R6 и R7 могат да бъдат заместени включват флуоро, хлоро, бромо и йодо.
Когато R5 означава C(O)OR7, предпочитаните R7 групи включват:
(a) линеен, разклонен или циклен С алкил, например С4 6-циклоалкил;
(b) С 2-алкиларилови групи, като бензил, евентуално заместени, както е показано по-горе.
Предпочитани съединения с формула 1а включват тези, в които R5 означава OR6.
Когато R означава OR6, предпочитаните R6 групи включват:
(a) Н;
(b) незаместен линеен или циклен С| 8 (напр. С, ) -алкил, като линеен Ц 3-алкил (напр. етил или особено метил), разклонен С3 8-алкил (напр. изо-пропил, изо-бутил или 4-хептил) или циклен С4 7-алкил (т.е. С4 7-циклоалкил, напр. циклобутил или циклохексил);
(c) С, 3-алкилоксифенил (напр. С2-алкилоксифенил), чиято фенилова група е евентуално заместена с един или няколко заместители както е посочено по-горе (напр. трифлуорометил);
(d) С] 2-алкиларил (напр. метиларил), където ариловата група е фенил, пиридинил, оксазолил или изоксазолил, като последните три групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, както е посочено по-горе (напр. метокси, метил, бромо и/или хлоро).
Предпочитани съединения с формула 1а включват тези, в които R5 означава OR6 и R6 означава линеен, разклонен (ако е подходящо), или циклен (ако е подходящо), С _6 (напр. С14)алкил, като метил, етил, η-пропил, изопропил или циклобутил.
Съединения с формула 1а могат да се получат по един или няколко от следните методи:
(а) взаимодействие на съответно съеди
66261 Bl нение c формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула XV, (Ь)
о където Y и R3a са дефинирани както погоре, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I;
(b) взаимодействие на съответно съединение с формула IV, дефинирано по-горе със съединение с формула XVI,
R3aCH2NH2 XVI където R3a е дефиниран както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I;
(c) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или XVIB,
където Ra, R1, R2, R4, Y, Хр Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както по-горе, с хидроксиламин, например при условия, известни на специалистите в областта;
(d) за съединения с формула 1а, в която R5 означава OR6, взаимодействие на защитено производно на съответно съединение с формула I, което е, например, съединение с формула
XVII,
Rx 0 JLn
XVII
>2
където R3b означава фрагмент с формула 1 (v) или I (vi):
където Rb означава, например -CH2CH2-Si (СН3)3 или бензил, или техен тавтомер, и Ra, R1, R2, Y, R4, Хр Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както погоре - със съединение с формула XVIII, ronh2 XVIII където R6 е дефиниран както по-горе, или негова киселинно присъединителна сол, например при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник, в присъствието на подходящ органичен разтворител (напр. THF, CH3CN, DMF или DMSO), последвано от отстраняване на -C(O)ORb група при условия, известни на специалистите в областта (напр. при взаимодействие с QF или TFA (напр. съгласно описаното по-долу));
(e) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съединение с формула XVII, дефинирано по-горе, в която Rb означава бензил с хидроксиламин, или негова киселинно присъединителна сол, например при условия, които са добре известни на специалистите в областта;
(f) за съединения с формула 1а, в която R5 означава COOR7, взаимодействие на съответно съединение с формула I, дефинирано по-горе, със съединение с формула XIX,
L’COOR7 XIX където L1 означава подходяща отцепваща се група, като халогено или нитрофенил (напр. 4-нитрофенил), и R7 е дефиниран както по-горе, например при или около стайна температура в присъствието на подходяща база (напр. NaOH, например във воден разтвор) и подходящ органичен разтворител (напр. метиленхлорид); или (g) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОСН3 или ОСН2СН3, взаимодействие на съответно съединение с формула 1а, в която R5 означава ОН с диметилсулфат или диетилсулфат, респективно, например в присъствието на подходяща база (напр. хидроксид на
66261 Bl алкален метал като КОН (например във воден разтвор при напр. 50 тегл. %)) и подходящ катализатор (напр. четвъртичен амониев халогенид като бензилтриметиламониев хлорид (например в СН2С12 или THF разтвор при напр. 10 тегл. %)).
Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с формули I (v) и I (vi) означават позицията на свързване на фрагментите.
Съединения с формули XVIA и XVIB могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула II, дефинирано погоре, със съединение с формула XIXA или XIXB,
където R4, Y, X], Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди, за синтез на съединения с формула I.
Съединения с формули XVIA и XVIB могат да се получат по алтернативен начин чрез взаимодействие на съответно съединение с формула IV, дефинирано по-горе, със съединение с формула XIXC или XIXD,
където R4, X , Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди, за синтез на съединения с формула I.
Съединения с формула XVII могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула XX,
О където Y и R3b са дефинирани както погоре, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I.
Алтернативно, съединения с формула XVII могат да се получат чрез взаимодействие на съответното съединение с формула I със съединение съответстващо на съединение с формула XIX, в която, вместо R7, присъства групата Rb, в която Rb е дефиниран както по-горе, например при условия, описани по-горе във връзка с получаване на съединения с формула 1а.
Съединения с формули XV и XX могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула X дефинирано по-горе с респективно съединение с формула XVI, дефинирано по-горе или съединение с формула XXI, R3bCH2NH2 XXI където R3b е дефиниран както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула 1.
Съединения с формула XVI, XVIII, XIX, XIXA, XIXB, XIXC, XIXD и XXI или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат по аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални методи за синтез, в съответствие със стандартни методи от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Например, съединения с формули XIXA и XIXB могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула XIXC или XIXD (ако е подходящо) със съединение с формула X, например при условия, подобни на описаните преди.
Съединения с формули I и 1а, както са дефинирани по-горе, и техните производни, се наричат тук по-долу “съединения съгласно изобретението”.
66261 Bl
Предпочитани съединения на изобретението включват съединенията от примерите, описани по-долу. В този смисъл, съединения от изобретението, които могат да се споменат включват:
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab;
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Cl) (S-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OEt);
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) Aze-Pab (OnPr);
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OiPr);
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OcBu);
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OH);
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (СООсПентил);
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Z);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab;
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C (O)-AzePab (ОСН2-3-(5-Ме-изоксазол));
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C (O)-AzePab (ОСН2-3-пиридин);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OiBu);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (OEt);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn);
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C (O)-AzePab (Осхексил);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (OcBu);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (OCH2CH2OPh(3-CF3));
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (0Bn(4-Cl));
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (ОВп(З-МеО));
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (0Bn(2-Br));
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (OBn (4-Me));
Ph (3-C1) (5-0 C F3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(0-4-хептил);
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(S)CH(CH2OH) C (0)Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH) C (0)Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(S) CH (CH2OH) C (0)Aze-Pab (OMe);
Ph(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab;
Ph(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF,)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH (OH) C(0)- AzePab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH (OH) C (O)-AzePab (OMe);
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Cl)(5-OCH(CH2F)2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F)2)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab (OMe);
Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab;
Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab;
Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab;
Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe);
Ph(3-Cl, 5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (OH);
Ph (З-Cl, 5-OCH2CH2F)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab (OH);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-ProPab;
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-ProPab (OMe);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (0)14
66261 Bl
е в S-конфигурация се предпочитат.
Предпочитани съединения съгласно изобретението включват тези, в които структурният фрагмент
Аге-ПН-СН2-((2-амидино)-5-пиридинил);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O)-Aze1ЧН-СН2-((2-метоксиамидино)-5-пиридинил);
Ph(3-CI, 5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O)-Aze1ЧН-СН2-((5-амидино)-2-пиримидинил);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-((5-метоксиамидино)-2-пиримидинил);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (3-F);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (2,6-ahF);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O)-AzePab (2,6-ahF) (OMe);
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O)-AzePab (2,5-ahF); и
Ph(3-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (2,5-ahF) (OMe).
Съединенията съгласно изобретението могат да проявят тавтомерия. Всички тавтомерни форми и тяхната смес са включени в обхвата на изобретението.
Специфични тавтомерни форми, които могат да се споменат включват тези, които са свързани с позицията на двойната връзка в амидиновата група в съединение с формула 1а, и позицията на заместителя R5.
Съединения съгласно изобретението съдържат също така два или повече асиметрични въглеродни атоми и следователно могат да проявяват оптичен и/или диастереоизомерия.
Диастереоизомерите могат да се разделят при използване на конвенционални методи, напр. хроматография. Редицата стереоизомери могат да се изолират чрез разделяне на рацемична или друга смес на съединенията като се използват конвенционални техники, напр. HPLC. Алтернативно желаните оптични изомери могат да се получат чрез взаимодействие на съответните оптично активни изходни вещества при условия, които няма да предизвикат рацемизация или епимеризация, или чрез дериватизиране, например с а хомохирална киселина, последвано от разделяне на диастереоизомерните производни чрез конвенционални начини (напр. HPLC, хроматография върху силикагел). Всички стереоизомери са включени в обхвата на изобретението.
Съединения съгласно изобретението, в които фрагмент
Е в R-конфигурация, когато Ra означава ОН или е в S-конфигурация, когато Ra означава -СН2ОН.
Вълнообразните линии, при връзките в погорните два фрагмента означават позицията на свързване на фрагментите.
Съединения съгласно изобретението, които могат да се споменат, включват Ph (3-CI) (5-OCHF2) -СН(ОН) С (O)-Aze-Pab (където, в този случай, Aze означава ацетидин-2-карбоксилат (т.е. в (R)- и/или (8)-конформация), както и еквивалентни съединения, в които вместо водороден атом в амидино частта в РаЬ, присъства група -OR6 (както е дефинирано погоре), в която R6 означава Cj 3-алкил (т.е. Ph(3Cl) (5-OCHF2)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe), Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt), Ph(3-Cl) (5-OCHFJ-CH (OH) C-(O)-Aze-Pab (OnPr) или Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-CH (OH) C (0)Aze-Pab (OiPr)). Съединения съгласно изобретението, които могат да се споменат по-нататък включват тези, които не са специфичните съединения определени в предходното изречение.
Специалистите в областта ще оценят, че в описаните по-горе и по-нататък методи функционалните групи на междинните съединения могат да се нуждаят от защита със защитни групи.
Функционални групи, които е желателно да се защитят включват хидрокси, амино и кар15
66261 Bl боксилна киселина. Подходящи защитни групи за хидрокси включват евентуално заместени и/ или незаместени алкилови групи (напр. метил, алил, бензил или трет-бутил), триалкилсилилови или диарилалкилсилилови групи (напр. третбутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил) и тетрахидропиранил. Подходящи защитни групи за карбоксилна киселина включват С, -алкилови или бензилови естери. Подходящи защитни групи за амино и амидино включват трет-бутилоксикарбонил, бензилоксикарбонил или 2-триметилсилилетоксикарбонил (Теос). Амидино азотни атоми могат да се защитят също с хидрокси или алкокси групи, и могат да бъдат както моно- така и дизащитени.
Защитаването и премахването на защитата от функционалните групи може да стане преди или след купелуването, или преди или след кое да е друго взаимодействие в гореспоменатите схеми.
Защитните групи могат да се отстранят в съответствие с методи, които са добре известни на специалистите в областта и съгласно описаното по-долу.
Специалистите в областта ще преценят, че за да се получат съединения съгласно изобретението по алтернативен, и в някои случаи по-удобен начин, отделните етапи на метода споменати по-горе могат да се проведат в друг порядък, и/ или отделните реакции могат да се проведат в различна фаза на цялата схема (т.е. заместители могат да се добавят и/или да се извършат химически трансформации върху различни от споменатите по-горе междинни съединения заедно със специфично взаимодействие). Това може да анулира, или да направи необходима необходимостта от защитни групи.
Начинът на получаване ще определи необходимостта и вида на защитните групи, както и последователността за осъществяване на синтеза.
Използването на защитни групи е описано пълно в “Protective Groups in Organic Chemistry”, под редакцията на J W F McOmie, Plenum Press (1973), и “Protective Groups in Organic Synthesis”, 3rd edition, T. W. Greene & P. G. M. Wutz, Wiley-Interscience (1999).
Защитени производни на съединения съгласно изобретението могат химически да се пре върнат в съединения съгласно изобретението като се използват стандартни методи за премахване на защитата (напр. хидриране). Специалистът в областта ще прецени, че някои съединения с формула 1а могат също да се считат за “защитени производни” на съединения с формула I.
Използване в медицината и фармацията
Съединенията съгласно изобретението могат да притежават фармакологична активност.
Съединенията съгласно изобретението, които притежават такава активност включват, но не се ограничават със съединения е формула I.
Обаче, други съединения съгласно изобретението (включително съединенията с формула 1а) могат да не притежават такава активност, но могат да се приложат парентерално или орално, и следователно могат да метаболизират в тялото, при което да образуват съединения, които са фармакологично активни (включително, но без да се ограничават от съответните съединения е формула I). Подобни съединения (които също така включват съединения, които могат да притежават известна фармакологична активност, но тази активност е забележимо по-ниска отколкото тази на “активните” съединения, до които те се метаболизират), могат следователно да се опишат като “пролекарства” на активните съединения.
По такъв начин, съединенията съгласно изобретението са полезни защото притежават фармакологична активност, и/или се метаболизират в тялото след орално или парентерално приложение, като се получават съединения, притежаващи фармакологична активност. Съединенията съгласно изобретението се считат следователно за лекарства.
Съгласно друг вариант на изобретението се осигуряват съединения от изобретението за използване като лекарства.
По-специално, съединения съгласно изобретението са силни инхибитори натромбин или като такива и/или (напр. в случай на пролекарства), метаболизират след прилагане, при което образуват силни инхибитори на тромбин, например както е показано в описания по-долу тест.
Под “пролекарство на инхибитор на тромбин” се включват съединения, които образуват инхибитор на тромбин в експериментално значимо количество, и в рамките на определено вре
66261 Bl ме (напр. около 1 h), след орално или парентерално приложение (виж, например, тест Е подолу) или алтернативно, след инкубиране в присъствието на чернодробни микрозоми (виж, например, тест G по-долу).
Очаква се следователно съединенията съгласно изобретението да са полезни при тези състояния, при които е необходимо инхибиране на тромбина и/или състояния, при които се прилага антикоагулантна терапия, следните:
Лечение и/или профилактика на тромбоза и повишена съсирваемост в кръвта и/или тъканите на животни, включително човек. Известно е, че повишена съсирваемост може да доведе до тромбо-емболични заболявания. Състояния, свързани с повишена съсирваемост и тромбоемболични заболявания, които могат да се споменат включват вродена или придобита резистентност към активирания протеин С, като например фактор V-мутация, и вроден или придобит дефицит на антитромбин III, протеин С, протеин S, хепарин кофактор II. Други състояния, които са известни, че са свързани с повишена съсирваемост и тромбо-емболично заболяване включват циркулиращи антифосфолипидни антитела (Lupus anticoagulant), хомоцистеинемия, хепарин индуцирана тромбоцитопения и дефекти във фибринолизата, както и синдроми на коагулация (напр. дисеминирана вътресъдова коагулация (DIC)) и съдови увреждания изобщо (напр. след хирургична намеса).
Лечението на състояния, при които има нежелан излишък на тромбин без признаци на повишена съсирваемост, например в нервнодегенеративни заболявания като болест на Alzheimer.
Специфични болестни състояния, които могат да се споменат включват терапията и/или профилактиката на венозна тромбоза (напр. DVT) и емболия на белите дробове, артериална тромбоза (напр. при инфаркт на миокарда, нестабилна ангина, удар на базата на тромбоза и тромбоза на периферните артерии), и системна емболия, обикновено от предсърдието по време на предсърдно мъждене (напр. неклапно предсърдно мъждене) или от лявата камера след трансмурален миокардиален инфаркт, или вследствие на конгестивна сърдечна недостатъчност; профилактика на реоклузия (т.е. тромбоза) след тромболиза, перкутанна транслуминална ангиопластика (РТА) и операции за поставяне на коронарен байпас; пре дотвратяване на ретромбоза след микрохирургия и съдова хирургия.
Освен това индикациите включват терапевтичното и/или профилактично лечение на дисеминирана вътресъдова коагулация, предизвикана от бактерия, многократна травма, интоксикация или кой да е друг механизъм; антикогулантно лечение когато кръвта е в контакт с чужди повърхности в тялото като съдови присадки, съдови стентове, съдови катетри, механични и биологични протезни клапи или всяко друго медицинско приспособление; и антикоагулантно лечение когато кръвта е в контакт с медицински приспособления извън тялото като по време на кардиоваскуларна хирургия при използване на апарат сърце-бял дроб или в хемодиализата; терапевтичното и/или профилактично лечение на идиопатичен и респираторен дистрес синдром при възрастни, белодробна фиброза след лъчево лечение или химиотерапия, септичен шок, септицемия, възпалителни отговори, които включват, но не се ограничават с оток, акутна или хронична атеросклероза като заболяване на коронарните артерии и образуването на атеросклеротични плаки, заболяване на церебралните артерии, мозъчен инфаркт, церебрална тромбоза, церебрална емболия, заболяване на периферните артерии, исхемия, ангина (включително неустойчива ангина), увреждане след реперфузия, рестеноза след перкутанна транслуминална ангиопластика (РТА) и коронарен байпас.
Съединения съгласно изобретението, които инхибират трипсин и/или тромбин могат да бъдат също така полезни при лечение на панкреатит.
Съединенията съгласно изобретението следователно могат да се използват при терапевтичното и/или профилактично лечение на тези състояния.
Съгласно един друг вариант на настоящото изобретение, се осигурява метод за лечение на състояние, при което е необходимо инхибиране на тромбин, като този метод включва прилагане на терапевтично ефективно количество от съединение съгласно изобретението към пациент, страдащ от или податлив на такова състояние.
Съединенията съгласно изобретението се прилагат обикновено орално, интравенозно, субкутанно, букално, ректално, дермално,
66261 Bl назално, през трахеята, чрез бронхите, чрез други парентерални пътища или чрез инхалация, под формата на фармацевтични препарати, включващи съединение съгласно изобретението или под формата на свободна база, или като фармацевтично приемлива нетоксична органична или неорганична киселинно присъединителна сол във фармацевтично приемлива дозирана форма.
Предпочитани начини за прилагане на съединения съгласно изобретението са оралните.
Предпочитаните фармацевтични препарати включват фармацевтични състави с модифицирано освобождаване, включващи съединения съгласно изобретението. Терминът “модифицирано освобождаване” ще се разбере от специалиста в областта, че фармацевтичният състав включва всеки състав, в който началото и/или скоростта на освобождаване на лекарството (т.е. съединението съгласно изобретението) е изменено чрез фармацевтични манипулации, и следователно включва дефиницията дадена в United States Pharmacopeia (USP XXII) на страници xliii и х 1 iv от предговорната/встъпителната част, в резултат документът със съответното разкритие е цитиран тук за справка.
Подходящи формулировки с модифицирано освобождаване могат да се получат от специалист в съответствие със стандартните методи във фармацията (виж, например, Pharmaceutisch Weekblad Scientific Edition, 6, 57 (1984); Medical Applications of Controlled Release, Vol II, eds. Langer и Wise (1984) Bocaraton, Florida, при pages 1 to 34; Industrial Aspects of Pharmaceuticals, ed. Sandel, Swedish Pharmaceutical Press (1993) при pages 93 to 104; и pages 191 to 211 of “Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design”, ed. Μ. E. Aulton (1988) (Churchill Livingstone)).
Препарати c предпочитано модифицирано освобождаване включват тези, в които подходящо съединение съгласно изобретението е закрепено в полимерна матрица. В това отношение, ние предпочитаме, формулировките, включващи съединения съгласно изобретението да се прилагат орално под формата на така наречената “набъбваща” система с модифицирано освобождаване, или система на “желиращ матрикс” с модифицирано освобождаване, в която съединението съгласно изобретението се осигурява заедно с полимер, който набъбва във водна среда (т.е. “хидрофилен желиращ компонент”).
По-специално предпочитаме съединенията съгласно изобретението да се формулират заедно в желиращ матриксен състав, включващ йота-карагинан и един или няколко неутрални желиращи полимери.
Йота-карагинан за предпочитане присъства в такива предпочитани препарати при ниво повисоко от 15 тегл. %. Предпочитано качество на йота-карагинан включва йота-карагинан за фармацевтични цели (от FMC Biopolymer), с вискозитет не по-малък от 5 сентипоаза (cps), за предпочитане в границите 5-10 cps (за 1.5% разтвор загрят до 82°С, след което вискозитетът се измерва при 75°С с вискозиметър Brookfield LV снабден с шпиндел № 1 при скорост 30 rpm (об/ min), и йота-карагинан с техническа чистота (доставен от Fluka Biochemica), който за предпочитане има вискозитет не по-малък от 14 mPa.s, за 0.3 % воден разтвор, загрят до 20°С, след което вискозитетът се измерва като се използва вискозиметър с падащо топче, от типа Нааке, използван заедно с термостат Lauda СЗ и Накке Mess System Ill, и при използване на топчета от неръждаема стомана със златно покритие с плътност 7.8 g/cm3.
Неутрално желиращият полимер може да бъде един или смес от няколко, неутрални полимери с желиращи свойства и които имат доказана независима от pH разтворимост. Неутрално желиращият полимер е за предпочитане, във формулировката в количество по-високо от 10%, но за предпочитане повече от 20 тегл. %.
Подходящи неутрално желиращи полимери включват полиетиленоксид (РЕО), производни и членове на РЕО семейството (например, полиетиленгликол (PEG), за предпочитане който се намира естествено в твърдо състояние, с подходящо молекулно тегло или вискозитет). Ако се използва като самостоятелен неутрално желиращ полимер, РЕО за предпочитане има молекулно тегло MW ? 4 милиона (4М), съответстващо на вискозитет на воден разтвор в границите от 16505500 mPa.s (или 1650-5500 cps; измерено за 1% воден разтвор при 25 °C, като се използва вискозиметър Brookfield RVF, с шпиндел No. 2, при 2 rpm). Други примери за подходящи РЕО включват РЕО с MW около 5 милиона (5М), съответстващо на вискозитета на воден разтвор в границите на 5500-7500 mPa.s, или MW на РЕО
66261 Bl около 8 милиона (8М), съответстващо на вискозитета на воден разтвор в границите от 1000015000 mPa.s. Тази област покрива стойността за типичен вискозитет (в cps), измерен при 25°С, оценен за този полимер, в USP 24/NF 19, 2000, рр. 2285-2286. Ако PEG се използва като самостоятелен неутрално желиращ полимер за предпочитане той има високо молекулно тегло, например, MW от около 20000, съответстващо на граница на вискозитета от 2700-3500 mPa.s (или 2700-3500 cps), измерен, като се използва 50% воден разтвор (w/w) при 20°С, при използване на капилярен вискозиметър (Ubbelohde или еквивалентен). [Ref: European Pharmacopoeia 3rd Ed., 2000, Supplement, pp. 908-909.]
Други подходящи желиращи полимери включват целулозни производни като хидроксипропилметилцелулоза (НРМС) или хидроксиетилцелулоза (НЕС) с подходящо високи вискозитети (например “НРМС 10000 cps”, “НРМС 15000 cps”, “НЕС type НН” или “НЕС type Н”). Когато се използва като самостоятелен неутрален полимер, хидроксипропилметилцелулозните полимери като “НРМС 10000 cps” и “НРМС 15000 cps” имат респективно, привиден вискозитет 7500-14000 mPa.s (или 7500-14000 cps), и 1 125021000 mPa.s (или 11250-21000 cps), когато се измерва при 20°С с 2% (w/w) воден разтвор, изчислен по отношение на сухото вещество, при използване на капилярен вискозиметър (Ubbelohde или еквивалентен). Един вид хидроксиетилцелулозен полимер, например “Natrosol 250 Pharma, type НН”, от Hercules Incorporated (Aquaion), показва обикновено вискозитет по Brookfield от около 20,000 mPa.s, като се използва устройство Brookfield Synchro-Lectric Model LVF, при концентрация на 1 % разтвор, шпиндел по. 4, скорост на шпиндела 30 rpm, фактор 200, 25°С (Виж Natrosol Physical и Chemical Properties booklet, 33.007-Еб (1993), p. 21).
Специфични формулировки, които могат да се споменат, включват тези, в които съединение съгласно изобретението е формулирано заедно с йота-карагинан и НРМС (10,000 cps) в съотношение 50:50 (тегл.%), или заедно с йотакарагинан и PEG 4М в съотношение 50:50 (тегл.%).
Предпочитани помощни вещества в такива формулировки са лубриканти, като натриев стеарил фумарат.
В зависимост от заболяването и пациента, който се лекува, и начина на прилагане, съставът може да се прилага при вариране на дозировката.
Съединенията съгласно изобретението могат също да се комбинират и/или да се прилагат заедно с кое да е антитромботично средство/а с различен механизъм на действие, например едно или няколко от следните: антитромбоцитните средства ацетилсалицилова киселина, тиклопидин и клопидогрел; инхибитори на тромбоксановия рецептор и/или инхибитори на синтетазата; антагонисти на фибриногеновия рецептор; простациклинови миметици; инхибитори на фосфодиестераза; антагонисти на ADP-рецептор (Р2Т); и инхибитори на карбоксипептидаза U (CPU).
Съединенията съгласно изобретението могат освен това да се комбинират и/или прилагат съвместно с тромболитици като един или няколко от тъканен плазминогенен активатор (естествен, рекомбинантен или модифициран), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, анизоилиран плазминоген-стрептокиназа активаторен комплекс (APSAC), плазминогенни активатори на животинска слюнчена жлеза, и др., при лечение на тромботични заболявания, по-специално инфаркт на миокарда.
Съгласно един друг вариант на изобретението се осигурява фармацевтичен състав, включващ съединение съгласно изобретението, в смес с фармацевтично приемлив адювант, разредител или носител.
Подходящи дневни дози на съединенията съгласно изобретението при лечение на хора са около 0.001-100 mg/kg телесно тегло при орално приложение и 0.001-50 mg/kg телесно тегло при парентерално приложение.
За да се избегне съмнение, терминът “лечение” включва лечение и/или профилактика.
Съединенията съгласно изобретението имат предимството, че те могат да бъдат поефикасни, по-малко токсични, по-дълго действащи, да имат по-широк спектър на действие, да бъдат по-силно действащи, да имат по-малко странични ефекти, да се абсорбират по-лесно и/или да имат по-добър фармакокинетичен профил (напр. по-висока орална биологическа достъпност и/или по-нисък клирънс)и/ или имат други полезни фармакологични, фи
66261 Bl зични или химични свойства спрямо съединенията, известни в областта. Съединенията съгласно изобретението могат да имат и предимството, че могат да се прилагат не толкова често както съединенията, известни в областта.
Биологични тестове
Могат да се използват следните методи за анализ
Тест А
Определяне на времето за образуване на тромбинов съсирек (ТТ)
Инхибиторният разтвор (25 (microl) се инкубира с плазма (25 microl) за 3 min. След това се прибавя човешки тромбин (Т 6769; Sigma Chem. Co или Hematologic Technologies) в буферен разтвор, pH 7.4 (25 microl, 4.0 NIH единици/ml), и времето за образуване на съсирек се измерва в автоматично устройство (КС 10; Amelung).
Времето за образуване на тромбинов съсирек (ТТ) се изразява в абсолютни стойности (секунди) или като съотношение на ТТ без инхибитор (ТТ0) спрямо ТТ с инхибитор (ТТ).
Последните съотношения (обхват 1-0) се нанасят спрямо концентрацията на инхибитор (log стойност) и се построяват сигмоидални криви доза-отговор съгласно уравнението у = а/[1 + (x/IC50)s] където: а = максимален обхват, т. е. 1; s = наклона на кривата доза-отговор; и 1С50 = концентрация на инхибитор, който удвоява времето за образуване на съсирек. Изчисленията се правят на PC, като се използва софтуерна програма GraFit Version 3, условия на уравнението: старт при 0, определяне на край = 1 (Erithacus Software, Robin Leatherbarrow, Imperial College of Science, London, UK).
ТестВ
Определяне на инхибирането на тромбин с хромогенен, роботизиран анализ
Силата на тромбиновия инхибитор се измерва с хромогенен субстратен метод, в Plato 3300 роботизиран процесор с микроплаки (Rosys AG, CH-8634 Hombrechtikon, Switzerland), като се използват 96-ямкови микротитърни плата с половин обем (Costar, Cambridge, МА, USA; Cat No 3690). Изходните разтвори на изследваното вещество в DMSO (72 microl), 0.1-1 mmol/1, се разреждат на серии 1:3 (24 + 48 microl) с DMSO, за да се получат десет различни концентрации, които се анализират при изследването. 2 microl от изследваното вещество се разреждат със 124 microl буфер за анализ, прибавят се 12 microl хромогенен субстратен разтвор (S-2366, Chromogenix, Molndal, Sweden) в буфер за анализ и накрая - 12 microl разтвор на алфа-тромбин (човешки алфа-тромбин, Sigma Chemical Co. или Hematologic Technologies) в буфер за анализ и пробите се разбъркват. Крайните концентрации за анализ са: вещество за анализ 0.0006813.3 micromol/в, S-2366 0.30 mmol/1, алфа-тромбин 0.020 NIHU/ml. Линейното абсорбционно нарастване по време на 40-минутна инкубация при 37°С се използва за изчисление на процента инхибиране на изследваните вещества, в сравнение с празни проби без инхибитор. Работната IC стойност от робота, съответстваща на концентрацията на инхибитор, който предизвиква 50% инхибиране натромбинова активност, се изчислява от логаритмичната концентрация спрямо кривата за % инхибиране.
Тест С
Определянето на константата на инхибиране К. за човешки тромбин
Определянето на К-стойностите се извършва като се използва хромогенен субстратен метод, проведен при 37°С на центрофужен анализатор Cobas Bio (Roche, Basel, Switzerland). Остатъчната ензимна активност след инкубиране на човешки алфа-тромбин с различни концентрации на изследваното вещество се определя при три различни субстратни концентрации и се измерва като изменение на оптичната абсорбция при 405 nm.
Разтвори на изследваното вещество (100 microl; обикновено в буфер или физиологичен разтвор, съдържащ BSA 10 g/I) се смесват с 200 microl човешки алфа-тромбин (Sigma Chemical Co) в буфер за анализ (0.05 mol/1 трис-HCl pH 7.4, йонна сила 0.15, регулирана с NaCl), съдържащ BSA (10 g/Ι), и се анализират като проби в Cobas Bio. Проба от 60 microl, заедно с 20 microl вода, се добавя към 320 microl от субстрат S-2238 (Chromogenix AB, mlndal, Sweden) в буфер за анализ, и се регистрира изменението в абсорбцията (VA/min. Крайните концентрации на S-2238 са 16,24 и 50 mol/1 и на тромбин 0.125 NIH U/ml.
Скоростта на равновесната реакция се използва, за да се построят диаграми на Dixon,
66261 Bl
т.е. диаграми на концентрацията на инхибитора спрямо 1/ (VA/min). За обратими, конкурентни инхибитори точките съответстващи на данните за различните субстратни концентрации обикновено образуват прави линии, които се пресичат при х = -К.
Тест D
Определяне на активирано парциално тромбопластиново време (АРТТ)
АРТТ се определя в събрана нормална човешка цитратна плазма с реагент РТТ Automated 5q производство на Stago. Инхибиторите се добавят към плазмата (10 micro] инхибиторен разтвор към 90 microl плазма) и се инкубира с АРТТ реагент за 3 min, след което се добавят 100 microl разтвор на калциев хлорид (0.025 М) и АРТТ се определя като се използва анализатор за коагулация КС 10 (Amelung) съгласно инструкциите на производителя на реагента.
Времето на съсирване се изразява в абсолютни стойности (секунди) или като съотношение на АРТТ без инхибитор (АРТТ) към АРТТ с инхибитор (АРТТ.). Последните съотношения (обхват 1 -0) се нанасят спрямо концентрацията на инхибитор (log стойности) и се построяват сигмоидалните криви доза-отговор съгласно уравнението у = a/[l+(x/IC50)s] където: а = максимален обхват, т. е. 1; s = наклон на кривата доза-отговор; и 1С50 = концентрация на инхибитор, който удвоява времето на съсирване. Изчисленията се правят на PC като се използва софтуерна програма GraFit Version 3, условия на уравнението: начало при 0, край = 1 (Erithacus Software, Robin Leatherbarrow, Imperial College of Science, London, UK).
1C5O АРТТ се определя като концентрацията на инхибитор в човешка плазма, която удвоява активираното парциално тромбопластиново време.
Тест Е
Определяне на тромбиново време ex vivo
Инхибирането натромбин след орално или парентерално прилагане на съединенията съгласно изобретението, разтворени в етанол: SolutolKmoaa (5:5:90), се изследва при плъхове в съзнание, на които един или два дена преди експеримента е поставен катетър за събиране на кръв. В деня на експеримента се взимат кръвни проби на определени периоди след прилагане на съединението в пластмасови епруветки, съдържащи 1 част разтвор на натриев цитрат (0.13 mol/ 1) и 9 части кръв. Епруветките се центрофугират, при което се получава плазма, бедна на тромбоцити.
microl от плазмените проби се утаяват със 100 microl студен ацетонитрил.
Пробите се центрофугират за 10 min при 4000 об/min. 75 microl от супернатантата се разрежда със 75 microl 0.2% мравчена киселина. 10 microl обеми от получените разтвори се анализират с LC-MS/MS и концентрациите на тромбиновия инхибитор се определят при използване на стандартни криви.
Тест F
Определяне на плазмен клиарънс в плъх
Плазменият клиарънс се измерва в женски плъхове Sprague Dawley. Съединението се разтваря във вода и се прилага като субкутанна болусна инжекция при доза от 4 (micromol/kg. Кръвните проби се събират на интервали до 5 h след прилагането на лекарството. Кръвните проби се центрофугират и плазмата се отделя от кръвните клетки и се прехвърля във флакони, съдържащи цитрат (10% крайна концентрация). 50 microl от плазмените проби се утаяват със 100 microl студен ацетонитрил. Пробите се центрофугират за 10 min при 4000 об/min. 75 microl от супернатантата се разрежда със 75 microl 0.2% мравчена киселина. Обеми от по 10 microl от получените разтвори се анализират с LC-MS/ MS и концентрациите натромбиновия инхибитор се определят като се използват стандартни криви. Площта под плазмения профил концентрация-време се оценява като се използва log/ линейно трапецовидно правило и се екстраполира безкрайност.
Плазменият клиарънс (CL) на съединението се определя след това като
CL = доза/AUC
Стойностите се дават в ml/min/kg.
Тест G
Определяне на стабилност in vitro
Чернодробни микрозоми се приготвят от плъхове Sprague-Dawley и от човешки черен дроб съгласно вътрешни SOPs. Съединенията се инкубират при 37°С при обща микрозомна концентрация на протеин от 3 mg/ml в 0.05 mol/1 TRIS буфер при pH 7.4, в присъствието на кофакторите NADH (2.5 mmol/ί) и NADPH (0.8
66261 Bl mmol/1). Началната концентрация на съединението е 5 или 10 micromol/1. За анализ се вземат проби до 60 min след началото на инкубирането. Ензимната активност в взетата проба се прекъсва незабавно чрез добавяне на 20% миристинова киселина с обем, съответстващ на 3.3% от общия обем на пробата. Концентрацията на съединението, останало (FINAL CONC) в пробата от 60-ата минута се определя чрез LCMS, като се използва проба, взета при нулево време, като контрола (START CONC). % разграден тромбинов инхибитор се изчислява като:
100% X [START CONC]- [FINAL CONC]
ISTARTCONC]
ТестН
Модел на артериална тромбоза
Съдово увреждане се предизвиква чрез прилагане на ферихлорид (FeCl3) локално към сънната артерия. Плъховете се упояват с интраперитонеална инжекция от натриев пентобарбитал (80 mg/kg; Apoteksbolaget; Umea, Sweden), последвано от непрекъсната инфузия (12 mg/kg/ h) по време на експеримента. Температурата на плъховете се поддържа на 38°С по време на експеримента чрез външно загряване. Експериментът започва с 5-минутен контролен период. 5 min по-късно, интравенозно се прилага човешки 1251-фибриноген (80 kBq; IM53; Amersham International, Buckinghamshire, UK) и се използва като маркер за следващото включване на фибрин(оген) в тромба.
Проксималният край на сегмента от сънната артерия се поставя в пластмасова тръба (6 mm; Silastic; Dow Coming, MI, USA) отворена по дължина, съдържаща, напоена c FeCl3 (2 microl; 55% тегл/тегл; Merck, Darmstadt, Germany) филтърна хартия (диаметър 3 mm; IF; Munktell, Grycksbo, Sweden). Лявата сънна артерия се оставя под действието на FeCl3 за 10 min и след това се изважда от пластмасовата тръба и се потапя във физиологичен разтвор. 50 min по-късно, сънната артерия се изважда и се измива във физиологичен разтвор. Вземат се контролни кръвни проби за определяне на кръвната 1251-активност, 10 min след инжекцията на |251фибриноген, и в края на експеримента. 25|1-активността в контролните кръвни проби и съдовия сегмент се измерват с гама брояч (1282
Compugamna; LKB Wallac Оу, Turku, Finland) в същия ден, в който се провежда експериментът. Размерът на тромба се определя като количеството 1251-активност включено в съдовия сегмент спрямо 1251-активността в кръвта (cpm/mg).
Общи експериментални детайли
TLC се провежда върху силикагел. Хирален HPLC анализ се провежда с колона 46 mm X 250 nun Chiralcel OD c 5 cm предпазна колона. Температурата на колоната се държи на 35°С. Скоростта на потока е 1.0 ml/min. Използва се детектор на Gilson 115 UV при 228 nm. Подвижната фаза се състои от хексан, етанол и трифлуороцетна киселина и подходящите съотношения са дадени за всеки компонент. Обикновено, продуктът се разтваря в минимално количество етанол и той се разрежда с подвижната фаза.
LC-MS/MS се провежда на уред HP-1100, снабден с СТС-PAL инжектор и 5 microm, 4х 100 mm ThermoQuest, Hypersil BDS Cl8 колона. Използва се API-3000 (Sciex) MS детектор. Скоростта на потока е 1.2 ml/min и подвижната фаза (градиент) се състои от 10-90% ацетонитрил с 90-10% 4 тМ воден амониев ацетат, и двата съдържащи 0.2% мравчена киселина.
Ή NMR спектрите се записват като се използва тетраметилсилан като вътрешен стандарт. 13С NMR спектрите се записват като се използват изброените деутерирани разтворители като вътрешен стандарт.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) С (0)-AzePab (OcBu) (i) З-Хлоро-5-метоксибензалдехид
3,5-Дихлороанизол (74.0 g, 419 mmol) в THF (200 ml) се прибавя на капки към магнезий (14.2 g, 585 mmol, предварително измит с 0.5 N НС1) в THF (100 ml) при 25°С. След добавянето, на капки се прибавя 1,2-дибромоетан (3.9 g, 20.8 mmol). Получената тъмнокафява смес се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 3 h. Сместа се охлажда до 0°С, и Ν,Νдиметилформамид (60 ml) се прибавя в една порция. Сместа се разпределя между диетилов етер (3 х 400 ml) и 6N НС1 (500 ml). Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (300 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се
66261 Bl получава масло. След бърза хроматография (2х) върху силикагел и елуиране с хексан: EtOAc (4:1) се получава съединението от подзаглавието (38.9 g, 54%) като жълто масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.90 (s, 1Н), 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 3.87 (s, 3H).
(ii) 3 -Хлоро-5 -хидроксибензалдехид
Разтвор на З-хлоро-5-метоксибензалдехид (22.8 g, 134 mmol; виж етап (i) по-горе) в СН2С12 (250 ml) се охлажда до 0°С. Борен трибромид (15.8 ml, 167 mmol) се прибавя на капки за 15 min. След разбъркване на реакционната смес в продължение на 2 h, се прибавя бавно Н2О (50 ml). След това разтворът се екстрахира с Et2O (2 х 100 ml). Органичните фази се обединяват, изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан: EtOAc (4:1) се получава съединението от подзаглавието (5.2 g, 25%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.85 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.68 (s, 1H) (iii) 3 -Хлоро-5-дифлуорометоксибензаддехид
Разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (7.5 g, 48 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 2пропанол (250 ml) и 30% КОН (100 ml) се загрява до варене под обратен хладник. По време на разбъркване, CHC1F2 се барботира в реакционната смес в продължение на 2 h. Реакционната смес се охлажда, подкиселява се с IN НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 100 ml). Органичните фази се измиват със солев разтвор (100 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан:ЕЮАс (4:1) се получава съединението от подзаглавието (4.6 g, 46%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.95 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.60 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OTMS) CN Разтвор на З-хлоро-5-дифлуорометокси- бензалдехид (4.6 g, 22.3 mmol, виж етап (iii) погоре) в СН2С12 (200 ml) се охлажда до 0°С. Прибавят се Znl2 (1.8 g, 5.6 mmol) и триметилсилил цианид (2.8 g, 27.9 mmol) и реакционната смес се оставя да се затопли до стайна темпера тура и се бърка в продължение на 15 h. Сместа се концентрира частично във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието като течност, което се използва директно в етап (v) по-долу без допълнително пречистване или характеризиране.
(v) Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R,S) CH (OH) C (NH) OEt
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OTMS)CN (6.82 g, отговарят на приблизително 22.3 mmol; виж етап (iv) по-горе) се прибавя на капки към HCl/EtOH (500 ml). Реакционната смес се бърка 15 h, след това се концентрира частично във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието като течност, което се използва в етап (vi) без допълнително пречистване или характеризиране.
(vi) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OH) C(O)OEt
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-5)CH(OH)C(NH)OEt (6.24 g, отговарят на приблизително 22.3 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в THF (250 ml), 0.5М H2SO4 (400 ml) се прибавя и реакционната смес се разбърква при 40°С в продължение на 65 h, охлажда се и след това се концентрира частично във вакуум, за да се отстрани по-голямата част от THF. След това реакционната смес се екстрахира с Et2O (3 х 100 ml), изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието като твърдо вещество, което се използва в етап (vii) без допълнително пречистване или характеризиране.
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C (О)ОН
Разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH (OH)C(O)OEt (6.25 g, отговаря приблизително на 22.3 mmol; виж етап (vi) по-горе) в 2-пропанол (175 ml) и 20% КОН (350 ml) се разбърква при стайна температура 15 h. След това взаимодействието се концентрира частично във вакуум, за да се отстрани по-голямата част от 2-пропанол. Останалата смес се подкиселява с 1М H2SO4, екстрахира се с Et2O (3 х 100 ml), изсушават се (Na2SO4) и се концентрират във вакуум, при което се получава твърдо вещество. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с СНС13: МеОН : концентриран NH4OH (6 : 3 : 1) се получава амониевата сол на съединението от подзаглавието. След това амониевата сол
66261 Bl се разтваря в смес от EtOAc (75 ml) и Н2О (75 ml) и се подкиселява се с 2N НС1, Органичната фаза се отделя и измива със солев разтвор (50 ml), изсушава се (Na2SO4) и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (3.2 g, 57% от етап (iv) до (vii)).
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.38 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) C(O)OH (а) и Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(S)CH(OAc)C (O)OH (b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH (OH)C(O)OH (3.2 g, 12.7 mmol; виж етап (vii) по-горе) и Липаза PS “Amano” (-2.0 g) във винилацетат (125 ml) и МТВЕ (125 ml) се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 48 h. Реакционната смес се охлажда, филтруват се през Celite (газ) и филтърната утайка се измива с EtOAc. Филтратът се концентрира във вакуум и се подлага на бърза хроматография върху силикагел при елуиране е СНС13:МеОН: концентриран NH4OH (6:3:1), при което се получава амониевата сол на съединенията от подзаглавията (а) и (Ь). Съединение (а) под формата на сол се разтваря в Н2О, подкиселява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc. Органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (а) (1.2 g, 37%).
За съединение от подзаглавие (а)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.38 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H) (ix) Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (Ο) -Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH (OH) C (Ο) OH (1.1 g, 4.4 mmol; виж етап (viii) по-горе) и Н-Аге-РаЬ(Теос)(виж Международна заявка за патент WO 2000/042059, 2.6 g, 5.7 mmol) в DMF (50 ml) при 0°С се прибавя РуВОР (2.8 g, 5.3 mmol) и колидин (1.3 g, 10.6 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура допълнително още 15 h. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография върху силикагел (3 х), елуира се първо с CHCl3:EtOH (9:1), след това е EtOAc:EtOH (20:1) и накрая елуиране с СН2С12: СН3ОН (95:5), при което се получава съединението от подзаглавието (1.0 g, 37%) като бяло твърдо вещество.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.79-7.85 (d, J = 8.7 Hz, 2Н), 7.15-7.48 (m, 5Н), 6.89 и 6.91 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1Н), 5.12 и 5.20 (s, 1H), 4.75-4.85 (m, 1H), 3.974.55 (m, 6H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.051. 15 (m, 2H), 0.09 (s, 9H) MS (m/z) 611 (M + 1)+ (x) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab (OcBu, Teoc)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(Teoc) (0.051 g, 0.08 mmol; виж етап (ix) погоре), се разтваря в 3 ml ацетонитрил и се прибавят 0.062 g (0.5 mmol) О-циклобутилхидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70°С в продължение на 4.5 h. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и етилацетат. Водната фаза се екстрахира още два пъти е етилацетат и обединената органична фаза се измива с вода, солев разтвор, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Добив: 0.054 g (95%).
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD): делта 8.668.50 (m, 1Н), 7.45 (d, 2H), 7.29 (m, 3H), 7.15 (m, 2H), 6.88 (t, 1H основен ротамер), 6.85 (t, 1H второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1H основен ротамер), 5.12 (s, 1H второстепенен ротамер), 5.16 (m, 1H второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1H основен ротамер), 4.70 (m, 1H), 4.50-4.30 (m, 3H), 4.19-3.93 (m, 3H), 2.71-2.44 (m, 1H), 2.342.11 (m, 5H), 1.78 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 0.96 (m, 2H), 0.01 (s, 9H).
(xi) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (OcBu)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OcBu, Teoc) (0.054 g, 0.08 mmol; виж етап (x) по-горе), се разтваря в 0.5 ml СН2С12 и 3 ml TFA. Реакцията се оставя да протече за 60 min. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства, като се използва препаративна HPLC. Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х), при което се получава 23 mg (54%) от съединението от заглавието.
MS (m/z) 536 (M-l)’; 538 (М + 1)+
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD): делта 7.56 (d, 2Н), 7.33 (m, ЗН), 7.15 (m, 2Н), 6.89 (t, 1Н основен ротамер), 6.86 (t, 1Н второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н основен ротамер; и m, 1Н второстепенен ротамер), 5.11 (s, 1Н второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н основен ротамер), 4.58
66261 Bl (m, 1H), 4.42 (tn, 2H), 4.34 (m, 1H основен ротамер), 4.15 (m, 1H основен ротамер), 4.06 (m, 1Н второстепенен ротамер), 3.97 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н основен ротамер), 2.332.25 (m, ЗН), 2.01-2.20 (m, 2Н), 1.75 (m, 1Н), 1.59 (m, 1H) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.4, 172.3, 171.9, 171.4, 152.3
Пример 2
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) СН (OH) C (O)-AzePab (OH) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (OH, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (0.148 g, 0.24 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе), се разтваря в 9 ml ацетонитрил и се прибавят 0.101 g (1.45 mmol) хидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70°С в продължение на 2.5 h, филтруват се през Celite® и се изпаряват. Суровият продукт (0.145 g; 75% pure) се използва директно в следващия етап без допълнително пречистване.
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) СН (OH) С (0)Aze-Pab (OH)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OH, Teoc) (0.145 g, 0.23 mmol; виж етап (i) по-горе), се разтваря в 0.5 ml СН2С12 и 9 ml TFA. Реакцията се оставя да протече за 60 min. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства, като се използва препаративна HPLC. Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х), при което се получава 72 mg (Добив за двата етапа 62%) от съединението от заглавието.
MS (m/z) 482 (М-1)-; 484(М+1)+
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD): делта 7.58 (d, 2Н), 7.33 (m, ЗН), 7.15 (m, 2Н), 6.89 (t, 1Н основен ротамер), 6.86 (t, 1Н второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н основен ротамер; и m, 1Н второстепенен ротамер), 5.12 (s, 1Н второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н основен ротамер), 4.42 (т, 2Н), 4.34 (т, 1Н основен ротамер), 4.14 (т, 1Н основен ротамер), 4.06 (т, 1Н второстепенен ротамер), 3.95 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н основен ротамер), 2.14 (m, 1Н второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.4, 172.3, 172.0, 171.4, 152.3, 152.1
Пример 3
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)Aze-Pab
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (0.045 g, 0.074 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 h. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получава 0.043 g (100%) от съединението от подзаглавието като негова трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.75 (m, 2Н), 7.55-7^5 (т, 2Н), 7.35 (т, 1Н, основен ротамер), 7.31 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 7.19 (m, 1Н, основен ротамер), 7.15 (m, 1Н), 7.12 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.87 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.22 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, основен ротамер), 5.13 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.64.4 (m, 2Н), 4.37 (т, 1Н, основен ротамер), 4.19 (т, 1Н, основен ротамер), 4.07 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.55 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта
172.6, 172.5, 172.0, 171.7, 167.0
MS (m/z) 465 (М-1)-, 467 (М + 1)+ Пример 4
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(СООсПентил)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCHF2)(R)CH(OH) С (O)-Aze-Pab х TFA (74 mg, 0.13 mmol; виж Пример 3 по-горе) и циклопентилхлороформат (44 mg, 0.30 mmol) в метиленхлорид (5 ml) се прибавя воден разтвор на NaOH (0.5 ml, 2М, 1 mmol). Сместа се разбърква при стайна температура и взаимодействието се следи с HPLC. След 2.5 h, се прибавя вода и течните фази се разделят. Водната фаза се екстрахира два пъти с метиленхлорид. Обединените органични фази се изсушават (MgSO4) и се пречиства върху силикагел (първо метиленхлорид, след това EtOAc). След отстраняване на разтворителите във вакуум, твърдата фаза се разтваря във вода/ацетонитрил и се изсушават при замръзване, при което се получава съединени
66261 Bl ето от заглавието като бяло твърдо вещество. Добив: 33 mg (44%)
MS (m/z) 579 (Μ + 1)+
Ή NMR (400 MHz; CD3OD): делта 7.79 (d, 2H), 7.43-7.30 (m, 5H), 7.20 7.11 (m, 2H), 6.90 (t, 1H, основен ротамер), 6.87 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.19 (dd, 1H, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1H, основен ротамер), 5.13 (m, 1H), 5.11 (s, 1H, второстепенен ротамер), 4.78 (dd, 1H, основен ротамер), 4.45 (m, 2H), 4.35 (m, 1H, основен ротамер), 4.16 (s, 1H, основен ротамер), 4.06 (s, 1H, второстепенен ротамер), 3.97 (s, 1H, второстепенен ротамер), 2.68 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.52 (s, 1H, основен ротамер), 2.28 (s, 1H, основен ротамер), 2.16 (s, 1H, второстепенен ротамер), 1.90 (m, 2H), 1.77 (m, 4H), 1.61 (m, 2H) 3C NMR (карбонил и/или amidine protons; 100 MHz) делта 173.6, 173.1,
172.6, 170.3, 165.6
Пример 5
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (Z)
Съединението от заглавието се получава съгласно процедурата, описана в Пример 4 погоре като се изхожда от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab х TFA (73 mg, 0.13 mmol; виж Пример 3 по-горе) и бензилхлороформат (35 mg, 0.21 mmol). Необходимо е допълнително пречистване с HPLC с обърната фаза (0.1 М амониев ацетат/MeCN 40/60). Подходящите фракции се концентрират във вакуум и се екстрахират с EtOAc. Добив: 24 mg (32%).
MS (m/z) 602 (Μ + 1)+
Ή NMR (400 MHz; CD3OD): делта 7.80 (d, H), 7.43-7.25 (m, 8H), 7.20 7.10 (m, 2H), 6.90 (t, 1H, основен ротамер), 6.88 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.18 (dd, 1H, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 2H), 5.17 (s, 1H, ротамер), 5.11 (s, 1H, ротамер), 4.78 (dd, 1H, основен ротамер), 4.45 (m, 2H), 4.34 (m, 1H, основен ротамер), 4.15 (s, 1H, основен ротамер), 4.06 (s, 1H, второстепенен ротамер), 3.97 (s, 1H, второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.51 (s, 1H, основен ротамер), 2.27 (s, 1H, основен ротамер), 2.15 (s, 1H, второстепенен ротамер) 13C NMR (карбонил и/или амидинови протони; 100 MHz): делта 173.6, 173.1, 172.6, 170.5, 164.9
Пример 6
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab x TFA (i) 2-Нитро-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 3-трифлуорометоксибензоена киселина (49.0 g, 0.24 mol) в сярна киселина (500 ml) при по-малко от 0°С (баня ледМеОН) се прибавя разтвор на калиев нитрат (31.3 g, 0.31 mol) в сярна киселина (200 ml) в продължение на 20 min. Полученият разтвор се разбърква при 0°С в продължение на 2 h, след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 18 h. Реакционната смес се изсипва върху лед и полученият кисел разтвор се екстрахира с EtOAc (5х). Обединените органични фази се измиват с Н2О (1х), солев разтвор (2х), Н2О (1х) и солев разтвор (1х), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (65.7 g) като твърдо вещество, онечистено с НОАс. Суровото съединение от подзаглавието се разтваря в EtOAc и толуен и се концентрира във вакуум, при което се получава свободно от НОАс твърдо вещество (58.4 g, 97%), което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 10.10 (br s, 1H), 8.02 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.54 (dd, 1H, J = 2 Hz, J = 8 Hz) (й)2-Амино-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-нитро-5-трифлуорометоксибензоена киселина (56.8 g, 0.23 mol; виж етап (i) по-горе) в EtOH (1000 ml) се прибавя 10% Pd/C (5.7 g). Полученият разтвор се продухва с Н2 в продължение на 5 h, филтрува се през Celite® и концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (49.7 g, 98%) като твърдо вещество, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): делта 7.66 (m, 1H), 7.17 (d, 1H, J = 8 Hz), 6.77 (d, 1H, J = 8 Hz) (iii) 2-Амино-3-хлоро-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-амино-5-трифлуорометоксибензоена киселина (49.0 g, 0.22 mol; виж етап (п) по-горе) в НОАс (1200 ml) се добавя бавно сулфурилхлорид (41.8 g, 0.31 mol).
66261 Bl
Наблюдава се отделяне на газ. Получената хетерогенна смес се разбърква при стайна температура в продължение на 1 h. Допълнително количество НОАс (300 ml) се прибавя, за да се улесни разбъркването, последвано от сулфурилхлорид в порции по 5 ml докато изходното вещество свърши, което се установява на база на TLC анализ. Реакционната смес се концентрира във вакуум, при което се получава твърда фаза която се промива на ротационен изпарител с EtOAc (2х), последвано от Et2O (lx), за да се отстрани НОАс. Получената твърда фаза се изсушава допълнително, при което се получава НС1 солта на суровото съединение от подзаглавието (60.5 g, 94%), което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): делта 7.72 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.22 (s, заменяеми) (iv) З-Хлоро-5-трифлуоро-метоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-амино-3-хлоро-5-трифлуоро-метоксибензоена киселина (60.5 g, отговарят на приблизително 0.22 mol; виж етап (iii) по-горе) в 1,4-диоксан (1000 ml) се прибавя 6N НС1 (750 ml). Органичната фаза се отделя като масло в разтвора. Диоксановият разтвор се охлажда до по-малко от 0°С (баня лед-МеОН). Разтвор на натриев нитрит (18.2 g, 0.26 mol) в Н2О (250 ml) се прибавя в продължение на 15 min през допълнителна фуния. Полученият разтвор се бърка в продължение на 45 min. Хипофосфорна киселина (221.5 ml от 50 тегл. % в Н2О, 291.2 g, 2.20 mol) се прибавя бавно през допълнителна фуния. Разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 1.5 h, след това се затопля до стайна температура (наблюдава се отделяне на газ) и се бърка в продължение на 18 h. Суровият разтвор се прехвърля в разделителна фуния и се екстрахира с Et2O (4х). Обединените органични фази се екстрахират с воден разтвор на NaHCO3 (Зх). Основната водна фаза се подкиселява внимателно с 6N НС1 и се екстрахира с СН2С12 (Зх). The СН2С12 екстрактите се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (26.5 g, 46% от 3-трифлуорометоксибензоена киселина), като твърдо вещество, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD,OD): делта 7.98 (s,
1H), 7.83 (s, 1H), 7.58 (s, 1H) (v) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензилов алкохол
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензоена киселина (22.5 g, 93.5 mmol; виж етап (iv) по-горе) в безводен THF (1200 ml) под N2 атмосфера, при стайна температура се прибавя разтвор на комплекса BH3.THF (140ml IM в THF; 140.3 mmol). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 2 h, охлажда се до стайна температура и се бърка в продължение на 18 h, внимателно се прекъсва с Н2О и се концентрира във вакуум, за да се отстрани по-голямата част от THF. Остатъкът се разрежда с EtOAc и органичните фази се измиват със солев разтвор (Зх), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (21.2 g, 100%) като масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 7.33 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 2.05 (br s, 1H) (у1)3-Хлоро-5-трифлуорометоксибензалдехид
Разтвор на DMSO (16.1 g, 205.9 mmol) в безводен CH2Cl2(300 ml) се охлажда до -78°С. Оксалилхлорид (13.1 g, 103.0 mmol) се прибавя бавно чрез спринцовка (наблюдава се отделяне на газ). Полученият разтвор се разбърква при -78°С в продължение на 15 min. Разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометокси-бензилов алкохол (21.2 g, 93.6 mmol; виж етап (v) по-горе) в СН2С12 (200 ml) се прибавя през допълнителна фуния за период от 15 min. Мътният разтвор се разбърква при -78°С в продължение на 40 min и DIPEA (60.5 g, 468.0 mmol) се прибавя през допълнителна фуния за 10 min. Полученият хомогенен разтвор се разбърква при -78°С в продължение на 1.5 h, след това се затопля до стайна температура и се бърка 18 h. Суровият разтвор се концентрира във вакуум, остатъкът се разрежда с EtOAc и измива с Н2О (lu), 2N НС1 (1и), солев разтвор (lu), воден разтвор на NaHCO3 (lx) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (19.9 g, 95%), което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
66261 Bl
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 10.00 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (s, 1H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S)CH (OTMS)CN Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензалдехид (19.9 g, 88.6 mmol; виж етап (vi) по-горе) в СН2С12 (600 ml) при 0°С се прибавя Znl2 (1.4 g, 4.4 mmol) и триметилсилил цианид (9.7 g, 97.5 mmol). След разбъркване при 0°С в продължение на 1.5 h и при стайна температура в продължение на 2 h, TLC анализът показва само изходният материал. Znl2 се прибавя на порции докато реакцията протича (общо се прибавят над 30.0 g Znl2). След разбъркване при стайна температура в продължение на 18 h, реакцията се прекъсва с вода и органичните фази се разделят. Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (27.7 g, 96%) като течност, която се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 7.43 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 0.38 (s, 9H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S) CH (OH) C (Ο) OH
Суспензия от Ph (З-Cl) (5-OCF3)(R,S)CH(OTMS)CN (27.7 g, 85.6 mmol; виж етап (vii) по-горе) в концентрирана НС1 (300 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 3 h. Получената кафява хетерогенна смес се охлажда до стайна температура и се екстрахира с Et2O (2х). Първоначалните органични вещества се екстрахират с 2N NaOH (2х), след това основната фаза се подкиселява с 2N НС1 и се екстрахира с Et2O. Фазата с Et2O се изсушава (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (4.9 g, 21%). TLC анализа на първоначалните органични вещества показва все още наличие на съединението от подзаглавието, поради което основната екстракция/-подкиселяване се повтаря, като се използва 6N NaOH, при което се получава допълнително сурово съединение от подзаглавието (2.8 g, 12%). TLC анализът на първоначалните органични вещества показва все още наличие на съединението от подзаглавието, така че органичните вещества се изсушават (Na2SO4) и се концентрират във вакуум, при което се получава натриевата сол на съединението от подзаглавието (18.3 g) като масло. След това солта се разтваря отново в Et2O и органичните фази се подкиселяват с 2N НС1 и измиват със солев разтвор. Получените органични фази се изсушават (Na2SO4), обработват се с активен въглен, филтруват се през Celite® и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (14.3 g, 62%) като твърдо вещество, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): делта 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.23 (s, 1H) (ix) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)OH (а) и Ph(3-Cl)(5-OCF3) (S)CH(OAc)C(O)OH (b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,5)CH(OH) C(O)OH (7.7 g, 28.5 mmol; виж етап (viii) погоре) и липаза PS “Amano” (3.8 g) в MTBE (100 ml) и винилацетат (50 ml) се разбърква при 60°C в продължение на 26 h. Реакционната смес се охлажда и филтрува през Celite® (газ) и филтърната утайка се измива с EtOAc. Обединените органични фази се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:МеОН:концентриран ΝΗ40Η (6:3:1) се получава смес от амониевите соли на подзаглавното съединение (а) и подзаглавието съединение (b) (6.7 g) и чиста амониева сол на подзаглавното съединение (а) (1.2 g) най-малко 95% енантомерно обогатена.
Съответните фракции се разтварят в Et2O и се измиват с 2N НС1 (1х) и солев разтвор (1 х), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират, при което се получават съответните карбоксилни киселини (6.7 g и 1.1 g респективно). Тези фракции след това се разтварят поотделно и ако е необходимо се пречистват отново чрез хроматография върху силикагел елуиране с СНС1,:МеОН:концентриран NH4OH (6:3:1 или 75:20:5 или 145:45:10). Пречистеното подзаглавно съединение (а) се подкиселява с воден разтвор на НС1 или воден разтвор на лимонена киселина преди по-нататъшно използване. Амониевата сол на подзаглавното съединение (Ь) се използва без анализ.
За подзаглавното съединение (а)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): делта 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.23 (s, 1H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD): делта 174.9, 150.9, 145.4, 136.3, 126.8, 122.0, 120.6, 118.9,
66261 Bl
72.9
MS (m/z) 269 (М-l)’ (x) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(Teoc)
Разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH) C (0) OH (0.73 g, 2.70 mmol; виж етап (ix) погоре) в DMF (40 ml) под азотна атмосфера се охлажда до 0°С. Към разтвора се прибавя H-AzePab(Teoc) (1.46 g, 3.24 mmol), колидин (0.82 g, 6.75 mmol) и РуВОР (1.83 g, 3.51 mmol).
Разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 2 h, загрява се до стайна температура и се бърка 18 h, прекъсва се с вода и се концентрират във вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с Н2О (1 х), воден разтвор на NaHCO3 (lx), воден разтвор на лимонена киселина (1х) и солев разтвор (1х), изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието.
След бърза хроматография върху силикагел (2х) елуиране с EtOAc: МеОН (30:1) след това СН2С12:МеОН (93:7) се получава съединението от подзаглавието (0.73 g, 43%) като пяна, която се натрошава.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери): делта 7.78-7.82 (d, 2Н, J = 8 Hz), 7.257.54 (m, 5Н), 5.25 и 5.16 (s, 1Н), 5.22 и 4.79 (т, 1Н), 3.92-4.58 (т, 6Н), 2.20-2.76 (т, 2Н), 1.041.13 (т, 2Н), 0.08 (s, 9Н)
MS (m/z) 629 (Μ + 1)+ (xi) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab
Трифлуорооцетна киселина (1.0 ml) се прибавя при разбъркване към охладен лед/вода разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Теос) (101 mg; 160 micromol; виж етап (х) по-горе), в метиленхлорид (10 ml). Охлаждащата баня се отстранява след 1 Ь. След 1.5 h при стайна температура се прибавя ацетонитрил (30 ml) и разтворителите се отстраняват внимателно при понижено налягане. Остатъкът се разтваря във вода и се изсушава при замразяване, при което се получава 90 mg (92%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
MS (m/z) 483 (М-l)’; 485 (М + 1)+
Ή NMR (300 MHz; CD3OD): (комплекс дължащ се на диастереоизомери/ротамери): делта 7.70-7.80 (m, 2Н), 7.45-7.58 (т, ЗН), 7.24-7.38 (т, 2Н), 5.26 (s, 1Н), 5.17 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 4.82 (m, 1Н, основен ротамер)/ 4.35-
4.6 (т, ЗН), 4.22 (т, 1Н, основен ротамер), 3.924.12 (т, 2Н, второстепенен ротамер), 2.70 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.55 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13С NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери): делта
173.7, 173.4, 173.0, 172.8, 168.1
Пример 7
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe)
HATU (71 mg; 0.19 mmol) се прибавя при разбъркване към охлаждан с лед/вода разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)OH (39 mg; 0.14 mmol; виж Пример 6 (ix) по-горе) в DMF (3 ml). След 30 min се добавят разтвор на H-AzePab(OMe) х 2НС1 (69 mg; 0.21 mmol; виж Международна заявка за патент WO 2000/ 042059) и 2,4,6-колидин (0.080 ml; 0.58 mmol) в DMF (1.5 ml). Реакционната смес се оставя през нощта и температурата се оставя да се повиши бавно до стайна. Разтворителите се отделят във вакуум и суровият продукт се пречиства, като се използва HPLC с обърната фаза (ацетонитрил :0. 1М воден разтвор на амониев ацетат), при което, след изсушаване при замразяване на съответните фракции, се получава съединението от заглавието (61 mg, 97%) като безцветно твърдо вещество.
MS (m/z) 513 (М-l)’, 515 (М+1)+
Ή NMR (500 MHz; CD3OD): делта 7.97 (bt, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.22 (d, 2H), 7.19 (t, 1H), 7.11 (t, 2H), 6.77 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.9 (bs, 3H), 4.81 (m, 2H), 4.40 (m, 2H), 4.09 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.58 (m, 1H), 2.37 (m, 1H) 13C NMR (125 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди): делта 171.8, 169.9,
156.8
Пример 8
Успореден синтез на алкоксиамидини
Този синтез се провежда в 96-ямков блок на Robbins. Към ямките, съдържащи подходящо количество О-заместен хидроксиламин (дефиниран по-долу; всички могат да се доставят от търговската мрежа или се получават като се използват добре известни методи от литературата) се прибавя разтвор на Ph(3-Cl) (5OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (10 mg;
66261 Bl umol; виж Пример 6 (x) по-горе) в ацетонитрил (1.0 ml). Блокът се запечатва и реакционната смес се върти през нощта в пещ при 60°С. След охлаждане и филтруване, твърдата фаза се измива с ацетонитрил (3 х 0.3 ml). Обединените течни фракции се концентрират във вакуумна центрофуга. Остатъкът се разпределя между вода (0.4 ml) и етилацетат (0.4 ml). След приключване на екстракцията течност-течност, всичко се филтрува през колона Hydromatrix™. След трикратно измиване е етилацетат, обединените филтрати се концентрират във вакуумна центрофуга. Премахването на защитата се провежда чрез добавяне на метиленхлорид (0.1 ml) и трифлуороцетна киселина (0.3 mi). След разбъркване при стайна температура в продължение на 3 h, разтворителите се отделят във вакуум. Остатъкът се разпределя между наситен воден разтвор на натриев хидрогенкарбонат (0.5 ml) и етилацетат (0.5 ml). След екстракция, филтруване през Hydromatrix™ и концентриране (виж по-долу) остатъкът се разтваря в изопропанол/вода (7/3) (1 ml). Около 2% от този разтвор се отстранява и се разрежда с изопропанол/вода (7/3) (1 ml) за LC-MS анализ. След отстраняване на разтворителите във вакуум, твърдата фаза се прехвърля в 96-ямково плато, като се използва ацетонитрил и етилацетат за разтваряне на съединението. Разтворителите се изпаряват във вакуумна центрофуга, при което се получава следните титулни съединения:
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(ОСН2-3-(5-Ме-изоксазол)) (от 3-[(аминоокси)метил]-5-метилизоксазол х НС1 (18 mg; 0.11 mmol)). Добив: 3.64 mg (35%) (MS (m/z) 596 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(ОСН2-3-пиридин) (от 3-[(аминоокси)метил]пиридинх 2 НС1 (19 mg; 96 micromol). Добив: 5.14 mg (50%) (MS (m/z) 592 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OiBu) (от О-изобутил хидроксиламин x HC1 (17 mg; 140 micromol). Добив: 4.4 mg (45%). MS (m/z) 557 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OEt) (от О-етил хидроксиламин x HC1 (14 mg; 140 micromol). Добив: 4.04 mg (42%). MS (m/z) 529 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn) (от О-бензилхидроксиламин x HC1 (17 mg; 110 micromol). Добив: 3.22 mg (29%). MS (m/z) 591 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(ОсХексил) (от О-циклохексил хидроксиламин х НС1 (15 mg; 99 micromol). Добив: 2.9 mg (26%). MS (m/z) 583 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OcBu) (от О-циклобутил хидроксиламин x HC1 (17 mg; 140 micromol). Добив: 3.3 mg (30%). MS (m/z) 555 (M + 1)+);
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (OCH2CH2OPh (3-CF3)) (от О-[2-[3-(трифлуорометил)фенокси]етил] хидроксиламин х НС1 (24 mg; 93 micromol). Добив: 6.52 mg (46%). MS (m/z) 689 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn (4-C1)) (от 0-(4-хлоробензил)хидроксиламин x HC1 (16 mg; 82 micromol). Добив: 3.47 mg (29%). MS (m/z) 625 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn(3-MeO)) (от 0-(3-метоксибензил)хидроксиламин x НС1 (18 mg; 94 micromol). Добив: 4.33 mg (36%). MS (m/z) 621 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn(2-Br)) (от О-(2-бромобензил) хидроксиламин x HC1 (23 mg; 96 micromol). Добив: 3.87 mg (30%). MS (m/z) 671 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OBn(4-Me)) (от О-(4-метилбензил)-хидроксиламин x HC1 (14 mg; 81 micromol). Добив: 2.91 mg (25%). MS (m/z) 605 (M + 1)+); и
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(О-4-хептил) (от О-(4-хептил) хидроксиламин х НС1 (15 mg; 89 micromol). Добив: 17 mg (100%). MS (m/z) 599 (M + 1)+).
Пример 9
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(5) CH(CHOH)C(O)Aze-Pab x HOAc (i) З-Хлоро-5-метоксибензоена киселина
Магнезиеви стружки (Fluka purum за Grignard реакции) се обработват предварително по следния начин. Стружките се поставят в стъклена синтерована фуния и върху тях се изсипва 0.1 М хлороводородна киселина. Стружките се разбъркват със стъклена пръчка за няколко секунди и след това киселината се измива с 3 порции вода. Накрая, стружките се измиват с 2 порции ацетон и се поставят в буркан. Тетрахидрофуран (100 ml, 99.95%) се изсушава чрез добавяне на RedAl (1 g, 70 тегл. % в толуен).
66261 Bl
Предварително обработените магнезиеви стружки (5 g, 200 mmol) се поставят в облодънна колба, и се продухват с азот 3 пъти. Дихлороанизол (26 g, 146 mmol) се разтваря в THF (100 ml, RedAlизсушен) и дибромоетан (1.8 g, 10 mmol) се прибавя. Реакционната смес се продухва с азот и след това се вари под обратен хладник в продължение на 2 h. Загряването се прекъсва и на порции за 2 min се прибавя сух лед (10 g). Когато всичкият сух лед се разтвори, реакционната смес се изсипва в лед, съдържащ солна киселина (400 ml, 2 М). След екстракция (етер, 300 ml) се получават 11.2 g, 60.2 mmol (Добив: 41%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (500 MHz; ацетон-бб): делта 7.57 (m, 1Н), 7.49 (т, 1Н), 7.23 (т, 1Н), 3.91 (s, ЗН) (и) З-Хлоро-5-хидроксибензоена киселина
Алуминиев оксид (1.65 g, 60 mmol) и йод (21 g, 82 mmol) се варят под обратен хладник в толуен (200 ml) в продължение на 2 h. След това, З-хлоро-5-метоксибензоена киселина (11.2 g, 60.2 mmol; виж етап (i) по-горе) разтворена в толуен (50 ml) се прибавя, заедно с тетрабутиламониев йодид (1.5 g, 4 mmol), и сместа се вари под обратен хладник в продължение на още 2 h. След охлаждане до стайна температура, екстракция се получават 8.7 g, 50 mmol (Добив: 83%) от съединението от подзаглавието.
' H-NMR (300 MHz; ацетон-бб): делта 9.27 (s, 1Н), 7.48 (m, 1Н), 7.44 (т, 1Н), 7.11 (т, 1Н) (ш)3-Хлоро-5-дифлуорометоксибензоена киселина
З-Хлоро-5-хидроксибензоена киселина (6.4 g, 37.2 mmol; виж етап (Н) по-горе) разтворена в хлороформ (200 ml) се прехвърля в 500 ml тригърлена облодънна колба, снабдена с кондензатор за сух лед и входна тръба за газ.
Прибавя се натриев хидроксид (100 ml, 5 М) при интензивно разбъркване.
На порции се добавя хлородифлуорометан (Freon 22; 25 g, 290 mmol) през входа за газ при стайна температура. След 2 h, реакцията завършва. След екстракция се получават 6.2 g, 28 mmol (Добив: 75%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (500 MHz; ацетон-бб): делта 7.87 (m, 1Н), 7.74 (т, 1Н), 7.54 (т, 1Н), 7.19 (t, 1Н, JH-F 73 Hz) (i v) 3 -Хлоро-5 -дифлуорометокси-N-метокCH-N-метилбензамид
З-Хлоро-5-дифлуорометоксибензоена киселина (1.8 g, 8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и оксалилхлорид (1.5 g, 11.8 mmol) се разтварят в метиленхлорид (50 ml). DMF (2 капки) се прибавя и реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 30 min. След това се добавят Ν,Ο-диметилхидроксиламин (1 g, 10.2 mmol) и триетиламин (3 g, 30 mmol) и след още 10 min разбъркване при стайна температура, реакционната смес се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в етер (100 ml) и вода (50 ml). След разделяне, органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Този остатък се хроматографира върху силикагел (хексан/ етилацетат 2:1), при което се получават 2 g, 7.5 mmol (93%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.54 (m, 1Н), 7.37 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 6.53 (t, IH, JHF 73 Hz) (у)3-Хлоро-5-дифлуорометоксиацетофеHOH
З-Хлоро-5-дифлуорометокси-М-метоксиN-метилбензамид (2 g, 7.5 mmol; виж етап (iv) по-горе) се разтваря в етер (100 ml) и се охлажда под азот до -70°С. Метиллитий (7 ml, 11 mmol, 1.6 М в етер) се прибавя на капки със спринцовка при разбъркване към реакционната смес за 1 min. Банята от сух лед се отстранява и сместа се оставя да достигне стайна температура преди реакцията да се прекъсне с разтвор на амониев хлорид (50 ml, 5% NH4C1 във вода). Органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан:етилацетат 2:1), при което се получават 1.5 g,
6.8 mmol (Добив: 90%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (600 MHz; CDC13): делта 7.77 (m, 1Н), 7.59 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 6.56 (t, 1H, JHF 73 Hz), 2.60 (s, 3H) (vi) метилов естер на З-Хлоро-5-дифлуорометоксифенил-оцетна киселина
З-Хлоро-5-дифлуорометоксиацетофенон (1.5 g, 6.8 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в метиленхлорид (200 ml). Прибавя се талиев (III) нитрат х ЗМеОН върху К-10 монтмо
66261 Bl рилонит (6 g, 10 mmol (са 0.6 mmol/g); виж J. Am. Chem. Soc., 98, 6750 (1976)) и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 20 h. Сместа се филтрува и филтратът се измива с натриев бикарбонат (100 ml, 0.5 М), изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан/етилацетат 2:1), при което се получават 1 g, 4 mmol (Добив: 56%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (500 MHz; CDC13): делта 7.14 (m, 1Н), 7.06 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 6.50 (t, 1H, JH F 73 Hz), 3.72 (s, 3H), 3.60 (s, 1H) (vii) Метилов естер на алфа-формил (3хлоро-5-дифлуорометоксифенил)оцетна киселина
Метилов естер на З-Хлоро-5-дифлуорометоксифенил-оцетна киселина (1 g, 4 mmol; виж етап (vi) по-горе) и метил формат (1 g, 16 mmol) се разтварят в етер (100 ml) и се охлажда в an ледена баня (около 2°С). След това се прибавя фино нарязан натрий (180 mg, 7.8 mmol) и метанол (1 ml) и сместа се оставя в ледената баня при разбъркване цяла нощ. Прибавя се внимателно вода (100 ml) и фазите се разделят. Водната фаза се подкиселява със солна киселина (2 М) до pH 1 и се екстрахира с етер (2 х 100 ml). Екстрактът се изсушава над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан:етилацетат (1:1)), при което се получават 400 mg, 1.4 mmol (Добив: 36%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (400 MHz): делта 12.10 (d, 1Н), 7.32 (d, 1Н), 7.11 (m, 1Н), 7.07 (т, 1Н), 6.94 (т, 1Н), 6.51 (t, 1Н, JF H 73), 3.83 (s, ЗН) (vii i) 3 -Хлоро-5-дифлуорометокситропова киселина
Метилов естер на алфа-формил (3-хлоро5-дифлуорометокси-фенил)оцетна киселина (400 mg, 1.4 mmol; виж етап (vii) по-горе) се разтваря в ТНР:метанол (50 ml, 9:1). Прибавя се натриев борохидрид и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 30 min. Прибавя се вода и сместа се концентрира, при което се получава водна суспензия, която се разтваря в етилацетат и вода. Фазите се разделят и органичната фаза се измива с натриев хлорид (15% във вода), изсушава се върху натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в метанол (30 ml) и се хидролизира с натриев хидроксид (1 ml, 10 М) при стайна температура в продължение на 10 min. След екстракция се получават 180 mg, 0.68 mmol (Добив: 48%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (500 MHz; CDC13): делта 7.18 (m, 1Н), 7.10 (m, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.50 (t, 1H, Jf H 73), 4.11 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.84 (m, 1H) (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(S)CH(CH2OH) C (O)-Aze-Pab x HOAc
З-Хлоро-5-дифлуорометокситропова киселина (180 mg, 0.7 mmol; виж етап (viii) погоре), H-Aze-Pab(Teoc) x HC1 (450 mg, 1 mmol) и PyBOP (530 mg, 1 mmol) се разтварят в DMF (10 ml), след което се прибавя DIPEA (550 mg,
3.9 mmol).
Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 h преди да се разреди със солев разтвор (20 ml, 15% NaCl) и се екстрахира с етилацетат (40 ml). Екстрактът се изсушава над натриев сулфат, филтрува се и се изпарява до сухо. Остатъкът се разтваря в метиленхлорид (5 ml) и се прибавя трифлуороцетна киселина (5 ml). След 1 h при стайна температура, сместа от диастереоизомери се изпарява до сухо и остатъкът се хроматографира върху колона с обърната фаза (ацетонитрил:вода (30:70), буфер: амониев ацетат 0.1 М). Изсушаване при замразяване води до получаване на 36 mg, 0.067 mmol (Добив: 10.4%) от съединението от заглавието.
MS (ES) 481 (М + 1)+
Ή-NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.77 (d, 2Н), 7.57 (d, 2Н), 7.30 (m, 1Н), 7.13 (m, 2H), 6.87 (t, 1H, JFH 73 Hz), 4.76 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.37 (m, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.82 (m, 1H), 3.72 (m, 1H), 2.53 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 1.92 (s, 1,5 H) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 172.3, 111.9, 167.2
Пример 10
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH)C(O)Aze-Pab х TFA (i) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензилмезилат
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензилов алкохол (6.1 g, 26.9 mmol; виж пример 6 (v) по-горе) в СН2С12 (250 ml) при 0°С под азотна атмосфера се прибавя DIPEA (4.2 g,
66261 Bl
32.3 mmol) и метансулфонилхлорид (3.4 g, 29.6 mmol). Разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 1.5 h и се прекъсва с Н2О. Органичните фази се разделят и след това се измиват с Н2О (lx), IN НС1 (1х), Н2О (1х) и воден разтвор на NaHCO3 (lx) и след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират, при което се получава съединението от подзаглавието (8.2 g, 99%) като масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 7.37 (s, 1Н), 7.28 (s, 1H), 7.18 (s, 1H) 5.23 (s, 2H), 3.07 (s, 3H) (ii) 3 -Хлоро-5 -трифлуорометоксибензилцианид
Към разтвор на 3-хлоро-5-трифлуорометоксибензил мезилат (8.2 g, 26.8 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMSO (50 ml) се прибавя натриев цианид (2.6 g, 53.6 mmol). Полученият хетерогенен разтвор се загрява до 50 °C и се обработва с ултразвук в продължение на 1 h. Реакционната смес се охлажда и разпределя между Et2O и Н2О. Органичните фази се измиват с Н2О (2х) и солев разтвор (2х). Обединените водни фази се екстрахират с Et2O (1 х). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират при слабо загряване и частичен вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.3 g, 100%) червеникаво летливо масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.32 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 3.78 (s, 2H) (iii) З-Хлоро-5-трифлуорометоксифенилоцетнакиселина =
Към разтвор на 3 -хлоро-5 -трифлуорометоксибензилцианид (6.3 g, 26.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 2-пропанол (100 ml) се прибавя вода (200 ml) и калиев хидроксид (7.5 g, 133.5 mmol). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 18 h, охлажда се до стайна температура, и 2-пропанолът се отстранява във вакуум. Водната фаза се измива с СН2С12 (2х) и промивната течност се изхвърля. Основната водна фаза се подкиселява с 2N НС1 и се екстрахира с СН2С12 (Зх). СН2С12 екстрактите се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.2 g, 76%) като масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 7.25 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.68 (s, 2H) (iv) Етил З-хлоро-5-трифлуорометоксифенилацетат
Към разтвор на 3-хлоро-5-трифлуорометоксифенилоцетна киселина (5.2 g, 20.4 mmol; виж етап (iii) по-горе) в EtOH (600 ml) се прибавя сярна киселина (няколко капки). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 18 h, охлажда се до стайна температура, неутрализира се с твърд NaHCO3 и EtOH се отделя под вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc, след това се измива с Н2О (1х), воден разтвор на NaHCO3 (lx) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.5 g, 96%) като масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.24 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.134.22 (q, J = 8 Hz, 2H), 3.63 (s, 2H), 1.24-1.32 (t, J = 8 Hz, 3H) (v) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S)CH(CHO) C(O)OEt
Към разтвор на етил З-хлоро-5-трифлуорометоксифенил-ацетат (4.5 g, 15.9 mmol; виж етап (iv) по-горе) в безводен THF (400 ml) под азотна атмосфера при по-малко от 0°С (баня лед-МеОН) се прибавя натриев етоксид (4.5 g,
63.6 mmol). Студеният разтвор се бърка в продължение на 40 min и се прибавя етилформат (8.1 g, 111.3 mmol). Разтворът се разбърква при 0°С в продължение на 30 min, затопля се до стайна температура и се бърка в продължение на 2 h. След това, THF се отстранява във вакуум. Остатъкът се разрежда с Et2O и се екстрахира с Н2О (1х) и 0.5М NaOH (Зх). Водните екстракти се подкиселяват с 2N НС1 и се екстрахират с СН2С12 (Зх). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (3.9 g). След бърза хроматография върху силикагел, елуиране с хексан:ЕЮАс (4:1) се получава съединението от подзаглавието (3.0 g, 61 %) като масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13, смес от изомери): делта 12.30 и 12.25 (s, 1Н), 7.39 и 7.34 (s, 1Н), 7.21 (s, 1Н), 7.17 (s, 1Н), 7.08 (s, 1Н), 4.274.37 (q, J= 8 Hz, 2Н), 1.28-1.38 (t, J = 8 Hz, ЗН)
66261 Bl (vi) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S)CH(CH2OH) C(O)OEt
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCF3)(R,S)CH(CHO)C(O)OEt (3.0 g, 9.66 mmol; виж етап (v) по-горе) в MeOH (200 ml) при -10°C C (баня лед-MeOH) се прибавя натриев борохидрид (0.7 g, 19.32 mmol) на порции за 5 min. Разтворът се разбърква при -10°С в продължение на 45 min и се прибавя допълнително натриев борохидрид (0.4 g). След още 15 min, реакцията се прекъсва с воден разтвор на амониев хлорид, направен слабо кисел с 2N НС1 и МеОН се отстранява във вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с Н2О (1х), воден разтвор на NaHCO3 (lx) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан:EtOAc (5:1) се получава съединението от подзаглавието (2.0 g, 66%) като масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13): делта 7.26 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.16-4.28 (m, 2H), 4.04-4.15 (m, 1H), 3.76-3.94 (m, 2H), 2.33 (t, J = 6 Hz, 1H), 1.18-1.30 (t, 7-8 Hz, 3H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S)CH(CH2OH) C(O)OH
Към разтвор наРЬ(3-С1) (5-OCF3)-(R,S)CH (CH2OH) C (Ο) OEt (2.0 g, 6.24 mmol; виж етап (vi) по-горе) в THF (50 ml) и H2O (25 ml) се прибавя литиев хидроксид монохидрат (0.5 g, 12.48 mmol). Разтворът се разбърква при стайна температура за 1 h и THF се отстранява във вакуум. Остатъкът се разрежда с Н2О, след това се измива с СНС13 (2х) и промивната течност се изхвърля. Основната водна фаза се подкиселява с 2N НС1 и се екстрахира с СНС13 (4х). СНС13 екстрактите се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (1.5 g) като масло. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:МеОН: концентриран NH4OH (градиент от 7.0:2.5:0.5 до 6:3:1) се получава амониевата сол на съединението от подзаглавието (1.1 g). Амониевата сол се разпределя между IN НС1 и СНС13. Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от заглавието (известно също така като З-хлоро-5-трифлуорометокситропова киселина) като масло (1. 1 g, 62%).
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): делта 7.41 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.75-3.87 (m, 2H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(5)CH(CH2OH) C(O)-Aze-Pab(Teoc) (а) и Ph(3-Cl) (5-OCFQ(R)CH(CH2OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc)(b)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCF3)(R,S)CH(CH2OH) C(O)OH (0.65 g, 2.28 mmol; виж етап (vii) по-горе) в DMF при по-малко от 0°С (баня лед-MeOH) се прибавя H-AzePab(Teoc) (0.90 g, 2.39 mmol), колидин (0.71 g, 5.70 mmol) и РуВОР (1.31 g, 2.51 mmol). Полученият разтвор се разбърква при по-малко от 0°С в продължение на 1 h, затопля се до стайна температура и се бърка в продължение на 1 h.
DMF след това се отделя под вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с разреден воден разтвор на НС1 (1х), солев разтвор (1 х), воден разтвор на NaHCO3 (1 х) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (2.1 g), като смес от диастереоизомери. След бърза хроматография (Зх) върху силикагел и елуира се първо с EtOAc:MeOH (95:5) след това е СН2С12:МеОН (97:3) и накрая с СН2С12:МеОН (95:5) се получават съединенията от подзаглавието диастереоизомер (а) (0.51 g, 35%) и диастереоизомер (Ь) (0.45 g, 31 %) като трошлива пяна.
За подзаглавното съединение диастереоизомер (а)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.79-7.85 (d, J = 8 Hz, 2Н), 7.22-7.49 (m, 5Н), 5.17-4.77 (m, 1Н), 4.534.18 (m, 4H), 3.58-4.11 (m, 5H), 2.47-2.73 (m, 1H), 2.11-2.34 (m, 1H), 1.08-1.12 (m, 2H), 0.07 (s, 9H)
MS (m/z) 643 (M + 1)+ (ix) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH) C(O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH) C (0)Aze-Pab (Teoc), (78 mg, 0.121 mmol; виж етап (viii) по-горе - диастереоизомер (а)), се разтваря в 5 ml трифлуорооцетна киселина. След 10 min взаимодействието завършва и разтворителят се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода и ацетонитрил, при което се по
66261 Bl лучава желаното вещество. Добив: 70 mg (94%).
MS (m/z) 483 (M-l)-; 485 (M+l)+ 1H-NMR (400 MHz; D2O) ротамери 1:1: делта 8.83 (bt, 1Н), 7.79 (d, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.35 (m, 1H, ротамер), 7.28 (m, 1H, ротамер), 7.20 (m, 1H, ротамер), 7.05 (m, 1H, ротамер), 5.22 (m, 1H, ротамер), 4.83 (m, 1H, ротамер), 4.57 (m, 2H, ротамер), 4.38 (m, 2H, ротамер), 4.3-3.7 (m, 5H), 2.77 (m, 1H, ротамер), 2.55 (m, 1H, ротамер), 2.27 (m, 1H) 13C-NMR(100 MHz; О2О):(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.9,
172.2, 172.0, 171.8, 166.9
Пример 11
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH)C(O)Aze-Pab(OMe) (i) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH) C(O)Aze-Pab (OMe, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(-S)CH(CH2OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (100 mg, 0.155 mmol; виж Пример 10 (viii) по-горе), се разтваря в 12 ml тетрахидрофуран. Добавя се О-метилхидроксиламин хидрохлорид (44 mg, 0.53 mmol), и реакционната смес се загрява при 50°С цяла нощ. Реакционната смес се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна HPLC (CH3CN/0.1 М NH4OAc (70/30)). Съответните фракции се изпаряват и остатъкът се разтваря в малко количество ацетонитрил и вода и се изсушават при замразяване. Изсушаването при замразяване се повтаря веднъж. Добив: 80 mg (76%) чисто вещество.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.5-7.4 (m, ЗН), 7.35-7.2 (т, 4Н), 5.15 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 4.74 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-4.25 (m, ЗН), 4.2-3.95 (т, 4Н), 3.91 (Ь, ЗН), 3.9-3.6 (т, 2Н), 2.63 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н, основен ротамер), 2.3-2.1 (m, 1Н), 0.95 (m, 2Н), 0.02 (s, 9Н, основен ротамер), 0.01 (s, 9Н, второстепенен ротамер) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH)C(O)Aze-Pab (OMe)
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH)C(O)Aze-Pab (OMe, Teoc), (80 mg, 0.12 mmol; виж етап (i) по-горе), се разтваря в 1 ml метиленхлорид и се охлажда в ледена баня. Трифлуорооцетна киселина, 3 ml, се прибавя и реакционната колба се държи в ледената баня за 2 h. Сместа се изпарява и разтваря в етилацетат и се измива три пъти с воден разтвор на NaHCO3, след това с вода и солев разтвор. Органичната фаза се изсушава (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от малко количество ацетонитрил и вода. Добив: 60 mg (95%) чисто съединение от заглавието.
MS (m/z) 528 (M-l)-; 531 (Μ + 1)+
Ή-NMR (500 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.65-7.55 (m, ЗН, ротамери), 7.45 (m, 1Н, основен ротамер), 7.4-7.2 (m, 4Н), 5.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.74 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-4.3 (m, ЗН), 4.05-3.95 (m, 2Н), 3.85 (m, 1Н, основен ротамер), 3.82 (s, ЗН, основен ротамер), 3.81 (s, ЗН, второстепенен ротамер), 3.73 (m, 1Н, основен ротамер), 3.67 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.62 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.63 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н, основен ротамер), 2.24 (m, 1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (125 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 174.0, 173.2, 172.7, 172.6, 155.1
Пример 12
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (OMe, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (0.40 g, 0.65 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе), се разтваря в 20 ml ацетонитрил и се прибавя 0.50 g (6.0 mmol) О-метил хидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70°С в продължение на 2 h. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и етилацетат. Водната фаза се екстрахира още два пъти с етилацетат и обединената органична фаза се измива с вода, солев разтвор, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Добив: 0.41 g (91 %).
Ή-NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.83 (bt, 1Н), 7.57 (bs, 1H), 7.47 (d, 2H), 7.30 (d, 2H), 7.20 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.01 (m, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.47 (m, 2H), 4.4-4.2 (b, 1H), 4.17-4.1 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.67 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 0.97 (m, 2H), 0.01 (s, 9H).
(ii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab (OMe)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (OMe, Teoc) (0.40 g, 0.62 mmol; виж етап
66261 Bl (i) по-горе), се разтваря в 5 ml TFA и се оставя да реагира за 30 min. TFA се изпарява и остатъкът се разпределя между етилацетат и воден разтвор на NaHCO3. Водната фаза се екстрахира още два пъти с етилацетат и обединената органична фаза се измива с вода, солев разтвор, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Продуктът се изсушава чрез замръзване от вода/ ацетонитрил. Не е необходимо пречистване. Добив: 0.28 g (85%).
Ή-NMR (600 MHz; CDC13): делта 7.89 (bt, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.28 (d, 2H), 7.18 (m, 1H), 7.13 (m, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.51 (t, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.80 (bs, 2H), 4.48 (dd, 1H), 4.43 (dd, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.68 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.40 (m, 1H).
13C-NMR (125 MHz; CDC13): (карбонил и/ или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.9, 170.8, 152.7, 152.6
MS (m/z) 495 (M-l)-, 497 (М + 1)+
Пример 13
Ph(3-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab х НОАс
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe) (13 mg, 0.026 mmol; виж Пример 12 по-горе) се разтваря в абсолютен етанол (5 ml) и се прибавят 30 mg 10% Pd/C. Накрая се прибавя оцетна киселина (5 microl) и сместа се хидрира при атмосферно налягане в продължение на 20 h. Сместа се филтрува през Celite®, изпарява се и се пречиства чрез HPLC е обърната фаза (0.1М воден разтвор на амониев ацетат/ MeCN). Съответните фракции се изсушават при замръзване, при което се получава съединението от заглавието като бяло твърдо вещество: 8.5 mg (66%).
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.73-7.78 (m, 2Н), 7.55 (d, 2Н), 7.19-7.43 (m, ЗН), 7.06-7.13 (m, 1Н), 6.83 (t, 1H, JHF= 74 Hz, основен ротамер), 6.81 (t, 1H, основен ротамер), 5.20 (s, 1H, основен ротамер), 5.19 (m, 1H, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1H, второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1Н, основен ротамер), 4.4-
4.6 (няколко пика, 2Н), 4.35 (m, 1Н, основен ротамер), 4.08 (m, 1Н), 3.99 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН).
I3C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови. въглероди, ротамери) делта 173.7, 172.9, 168.3.
MS (m/z) 433 (M+l)+; 431 (М-1)‘
Пример 14
Ph(3-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab х TFA
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab х TFA (34 mg, 0.057 mmol, от Пример 6) се разтваря в 5 ml етанол и се прибавят 20 mg 10% Pd/C. Сместа се хидрира при атмосферно налягане цяла нощ. Сместа се филтрува през Celite®, изпарява се и се изсушава при замразяване от вода/ацетонитрил.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.55 (т, 2Н), 7.5-7.2 (т, 4Н), 5.24 (s, 1Н, основен ротамер), 5.23 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н, основен ротамер), 4.64.45 (m, 2Н), 4.36 (т, 1Н, основен ротамер), 4.08 (т, 1Н), 3.99 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (т, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 174.1, 173.9, 173.5, 172.9, 168.2.
I9F NMR (282 MHz; CD3OD): -59.8 и -59.9 (3F, второстепенен и основен ротамер респективно), -77.4 (3F) показва, че солта е TFA.
MS (m/z) 451.3 (M+l)+
Пример 15
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab х TFA (i) 3 -Хлоро-5 -трифлуороетоксибензалдехид
При разбъркване с магнитна бъркалка към разтвор на 3-хлоро-5-хидроксибензалдехид (2.0 g, 12.8 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (2.3 g, 16.6 mmol) в DMF (35 ml) под азот се прибавя 2,2,2-трифлуороетил р-толуенсулфонат (4.2 g, 16.6 mmol) при стайна температура. Сместа се загрява до 110°С в продължение на 7 h и след това се бърка цяла нощ при стайна температура.
Реакционната смес се охлажда до 0°С, изсипва се върху леденостудена 2 N НС1 (100 ml) и се екстрахира е EtOAc (2 х 75 ml). Обединените органични екстракти се измиват с 0.5 N НС1 (2 х 50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се
66261 Bl хроматографира върху силикагел и елуира с хексан:ЕЮАс (6:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.9 g, 61%) като жълто масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.44 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.42 (q, J = 8 Hz, 2H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R,S)CH(OTMS)CN Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуороеток- сибензалдехид (5.2 g, 21.7 mmol; виж етап (i) по-горе) и цинков йодид (1.7 g, 5.4 mmol) в СН2С12 (200 ml) под азот се прибавя триметилсилилцианид (4.3 g, 43.3 mmol) на капки посредством спринцовка при 0°С. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 h и след това се разрежда с Н2О (150 ml). Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.9 g, 95%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.27 (s, 1H), 6.98 (s, 2H), 5.44 (s, 1H), 4.38 (q, J = 8 Hz, 2H), 0.30 (s, 9H) (iii) Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3)-(R,S) CH (OH) C(O)OH
Концентрирана солна киселина (170 ml) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R,S)CH (OTMS)CN (6.9 g, 20.4 mmol; виж етап (ii) погоре) и се бърка при 100°С в продължение на 1 h. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0°С и се прави алкална бавно с 3 N NaOH (300 ml).
Тази смес се измива с Et2O (2 х 100 ml) и водната фаза се подкиселява с 2 N НС1 (50 ml). След това водната фаза се екстрахира е EtOAc (2 х 100 ml), изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.3 g, 92%) като светложълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.18 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.58 (q, J = 8 Hz, 2H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R)CH(OH) C(O)OH (а) и Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(S)CH(OAc) C(O)OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3)(R,S)CH(OH)C(O)OH (7.06 g, 24.8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и липаза PS “Amano” (4.30 g) във винилацетат (250 ml) и MTBE (250 ml) се загрява при 70°С под азот в продължение на 40 h. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, ензимът се отстранява чрез филтруване и измиване с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:MeOH:Et3N (92:6:2) се получава триетиламинова сол на съединението от подзаглавието (а) (3.02 g) като жълто масло. Солта от подзаглавието съединение (а) се разтваря в Н2О (150 ml), подкиселява се с 2 N НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (а) (2.18 g) като мръснобяло твърдо вещество. Освен това, триетиламиновата сол от подзаглавното съединение (Ь) (4.73 g) се получава от колонната хроматография, спомената по-горе.
Данни за подзаглавното съединение (а): Т.т.: 98-103°C
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.18 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.58 (q, J = 8 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) делта 175.4, 159.6, 144.6, 136.2, 125.0 (q, J = 277 Hz), 121.8, 115.9, 113.1, 73.3, 67.0 (q, J = 35 Hz)
HPLC Анализ: 98.6%, > 99% енантиомерно обогатен, Chiralcel OD Column (97:3:0.5 xeKcaH:EtOH:TFA мобилна фаза) [алфа]25 0= -81.5° (c=1.0, MeOH) APCI-MS: (M-l) = 283 m/z (v) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3) (R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3)(R)CH(OH) C (O)OH (0.50 g, 1.8 mmol; виж етап (iv) по-горе (съединение (а))) в DMF (20 ml) под азот се прибавя H-Aze-Pab (Teoc) х НС1 (1.03 g, 2.3 mmol), PyBOP (1.01 g, 1.9 mmol), и DIPEA (0.57 g, 4.4 mmol) при 0°C. Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура за 20 h. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел и елуира първо с CHCl3:EtOH (10:1) и след това с EtOAc:EtOH (10:1), при което се получава съединението от подзаглавието (0.55 g, 48%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 90-95°С
66261 Bl
Rf= 0.42 (10:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.78-7.81 (m, 2Н), 7.387.41 (m, 2Н), 7.12-7.16 (т, 1Н), 7.00-7.06 (т, 2Н), 5.09-5.22 и 4.75-4.79 (т, 2Н), 3. 94-4.61 (т, 8Н), 2.09-2.75 (т, 2Н), 1.04-1.11 (т, 2Н), 0.70 (s, 9Н)
APCI-MS: (М + 1) = 643 m/z (vi) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R)CH(OH) C(O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(Teoc) (0.066 g, 0.103 mmol; виж етап (v) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 30 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.060 g (94%) от съединението от заглавието под формата на трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (т, 2Н), 7.6-7.5 (т, 2Н), 7.2-7.0 (т, ЗН), 5.21 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.17 (s, 1Н, основен ротамер), 5.11 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.81 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.4 (m, 4Н), 4.37 (т, 1Н, основен ротамер), 4.16 (т, 1Н, основен ротамер), 4.06 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.99 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (т, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта
172.2, 171.8, 171.7, 167.0.
MS (m/z) 499.3 (M+l)+
Пример 16
Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3)-(R) СН (OH) С (О)Aze-Pab (ОМе)
Към разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCH2CF3)(R)CH (ОН)С(О)ОН (0.48 g, 1.7 mmol; виж Пример 15 (iv) по-горе (съединение (а)) в DMF (20 ml) под азот се прибавя H-Aze-Pab(OMe) х 2НС1 (0.74 g, 2.2 mmol), РуВОР (0.97 g, 1.9 mmol), и DIPEA (0.55 g, 4.2 mmol) при 0°C. Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура в продължение на 20 h. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (10:1) и след това с EtOAc:EtOH (10:1), при което се получава съединението от заглавието (0.62 g, 69%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 75-80°С
Rf= 0.43 (10:1 СНС13:ЕЮН)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.57-7.60 (m, 2Н), 7.327.36 (m, 2Н), 7.13-7.17 (m, 1Н), 7.00-7.06 (m, 2H), 5.09-5.19 и 4.74-4.80 (m, 2Н), 3.93-4.62 (m, 6Н), 3.81 (s, ЗН), 2.10-2.73 (m, 2Н)
APCI-MS: (Μ + 1) = 529 m/z
Пример 17
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab x TFA (i) 2,2-дифлуороетилестер на метансул фонова киселина
При разбъркване с магнитна бъркалка към разтвор на 2,2-дифлуороетанол (1.52 g, 18.5 mmol) в СН2С12 (20 ml) под азот се прибавя триетиламин (5.61 g, 55.5 mmol) и метансулфонилхлорид (2.54 g, 22.2 mmol) при 0°С. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 1.5 h, разрежда се с СН2С12 (50 ml), и се измива с 2 N НС1 (50 ml). Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (30 ml) и обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (30 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се, и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (2.52 g, 85%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6.02 (tt, J = 3 Hz, J = 55 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 3Hz, J = 13 Hz, 2H), 3.13 (s, 3H) (ii) З-Хлоро-5-дифлуороетоксибензалдеХИД
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (1.50 g, 9.6 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (1.72 g, 12.5 mmol) в DMF (10 ml) под азот се прибавя разтвор на 2,2-дифлуороетилов естер на метансулфонова киселина (2.0 g, 12.5 mmol; виж етап (i) по-горе) bDMF (10 ml) на капки, при стайна температура. Сместа се загрява до 100°С в продължение на 6 h и след това се бърка цяла нощ при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до 0°С, изсипва се в леденостуцена 2 N НС1 (100 ml), и се екстрахира с EtOAc (2x75 ml). Обединените органични екстракти се измиват с 0.5 N HCI (2 х 50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с
66261 Bl хексан:ЕЮАс (5:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.35 g, 64%) като жълто масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.92 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.12 (tt, J = 3 Hz, J = 55 Hz, 1H), 4.26 (dt, J = 3 Hz, J = 15 Hz, 2H) (iii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)(R,S)CH(OTMS)CN
Към разтвор на З-хлоро-5-дифлуороетоксибензалдехид (1.35 g, 6.1 mmol; виж етап (ii) по-горе) и цинков йодид (0.48 g, 1.5 mmol) в СН2С12 (50 ml) се прибавя триметилсилилцианид (1.21 g, 12.2 mmol) на капки при 0°С под азот. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 h, след това се разрежда с Н2О (50 ml). Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.85 g, 95%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.13 (s, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.10 (tt, J = 3 Hz, J = 55 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.20 (dt, J = 3 Hz, J = 15 Hz, 2H), 0.28 (s, 9H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R,S)CH(OH) C(O)OH
Концентрирана солна киселина (60 ml) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)(R,S)CH(OTMS)CN (1.85 g, 5.8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и се бърка при 100°С в продължение на 1 h. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0°С, алкализира се бавно с 3 N NaOH (—180 ml) и се измива с Et2O (2 х 75 ml). Водната фаза се подкиселява с 2 N НС1 (20 ml) и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се, и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.50 g, 97%) като бледожълто твърдо вещество, което се използва без допълнително пречистване.
Н NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.15 (s, 1Н), 7.05 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.19 (tt, J = 4 Hz, J = 55 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.25 (dt, J = 4 Hz, J = 17 Hz, 2H) (v) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(S)CH(OAc) С(О)ОН (а) и Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH) C(O)OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) (R,S)CH(OH)C(O)OH (3.90 g, 14.6 mmol; виж етап (iv) по-горе) и липаза PS “Amano” (2.50 g) във винилацетат (140 ml) и MTBE (140 ml) ce загрява при 70°C под азот в продължение на 40 h. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, ензимът се отделя при филтруване и измиване с EtOAc, и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с CHCI3:MeOH:Et3N (92:6:2) се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (b) (1.47 g) и солта се разтваря в Н2О (100 ml), подкиселява се с 2 N НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (b) (1.00 g) като мръснобяло твърдо вещество.
Данни за подзаглавното съединение (Ь): Т.т.: 103-106°С
Rf = 0.39 (90:8:2 CHCl3:MeOH:Et3N)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.13 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.17 (tt, J - 4 Hz, J = 55 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.24 (dt, J = 4 Hz, J = 8 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) делта 175.5,
160.3, 144.5, 136.1, 121.3, 115.7, 115.3, (t, J = 240 Hz), 112.9, 73.4, 68.6 (t, J = 29 Hz)
HPLC Анализ: 96.2%, > 95.0% енантиомерно обогатен, ChiralPak AD колона (95:5:0.5 хексан:ЕЮН:ТРА мобилна фаза) [алфа]25 D = -84.0° (с = 0.85 МеОН) APCI-MS: (M-l) = 265 m/z (vi) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH) C(O)-Aze-Pab(Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)(R)CH(OH) C(O) OH (0.35 g, 1.3 mmol; виж етап (v) по-горе (съединение (b))) в DMF (18 ml) под азот се прибавят H-Aze-Pab (Теос) х НС1 (0.76 g, 1.7 mmol), РуВОР (0.75 g, 1.4 mmol), и DIPEA (0.43 g, 3.3 mmol) при 0°C. Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура в продължение на 20 h. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с С НС 13 :EtOH (10:1), и след това с EtOAc:EtOH (10:1), при което се получава съединението от подзаглавието (0.69
66261 Bl g, 84%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 108-118°С
Rf= 0.48 (10:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.78-7.81 (m, 2Н), 7.407.43 (m, 2Н), 7.09-7.12 (m, 1Н), 6.96-7.02 (m, 2H), 6.16 (t, J = 57 Hz, -1H), 5.09-5.20 и 4.75-
4.80 (m, 2H), 3.95-4.55 (m, 8H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.04-1.11 (m, 2H), 0.07 (s, 9H)
APCI-MS:(M + 1) = 625 m/z (vii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (0.086 g, 0.138 mmol; виж етап (vi) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 h. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/-ацетонитрил, при което се получава 0.080 g (98%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.6-7.5 (т, 2Н), 7.15-6.95 (т, ЗН), 6.35-5.95 (т, 1Н), 5.20 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.14 (s, 1Н, основен ротамер), 5.10 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.0 (m, 6Н), 2.70 (т, 1Н, второстепенен ротамер)/ 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 174.0, 173.8, 173.4, 172.9, 168.2
MS (m/z) 481.2 (M+l)+
Пример 18
Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (Ο) -Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)(R)CH(OH)C(O)OH (0.30 g, 1.7 mmol; виж Пример 17 (v) по-горе (съединение (b))) в DMF (15 ml) под азот се прибавят H-Aze-Pab(OMe) х 2НС1 (0.49 g, 1.5 mmol), РуВОР (0.65 g, 1.2 mmol), и DIPEA (0.36 g, 2.8 mmol) при 0°C. Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура в продължение на 20 h. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира три пъти върху силикагел, елуира се първо с СНС13 :EtOH (10:1), след това с EtOAc:EtOH (10:1) и накрая с СНС13:МеОН (20:1), при което се получава съединението от заглавието (0.47 g, 81%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 65-75°С
Rf= 0.37 (10:1 СНС13:ЕЮН)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.58-7.60 (m, 2Н), 7.327.35 (m, 2Н), 7.09-7.12 (m, 1Н), 6.96-7.02 (m, 2H), 6.16 (t, J= 55 Hz, 1H), 5.08-5.18 и 4.74-4.80 (m, 2H), 3.96-4.50 (m, 6H), 3.80 (s, 3H), 2.10-
2.75 (m, 2H)
APC1-MS: (M+ 1) = 511 m/z.
Пример 19
Ph(3 -Cl) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab x TFA (i) Ph(3-Cl)(5-TMSO)-(R,S)CH(OTMS)CN Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибен- залдехид (9.8 g, 62.6 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и Znl2 (5.0 g, 15.7 mmol) в безводен СН2С12 (500 ml) при 0°С се прибавя триметилсилилцианид (13.7 g, 138 mmol). Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Добавя се вода (250 ml), и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 300 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (16.9 g, 83%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.42 (3:1 хексан:ЕЮАс)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.06 (s, 1H), 6.86 (s, 2H), 5.40 (s, 1H), 0. 30 (s, 9H), 0.24 (s, 9H).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OH)-(R,S)CH(OH)C(O)OH Разтвор на Ph(3-Cl) (5-OTMS)-(R,S)CH (OTMS)CN (22.6 g, 68.8 mmol; виж етап (i) погоре) в концентрирана НС1 (200 ml) се вари под обратен хладник под азот в продължение на 3 h. Реакционната смес се охлажда до 0°С и се прави алкална бавно с 2N NaOH. Сместа се измива с Et2O (3x100 ml), за да се отстранят органичните онечиствания. Водната фаза се подкиселява с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (9.3 g, 67%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf=0.23 (6:3:1 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH)
66261 Bl
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.05 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.03 (s, 1H).
(iii) Ph(3-Cl) (5-OH)-(R,S)CH(OH)C(O)Oet
Към разтвор на Ph(3-Cl)(5-OH)(R,S)CH(OH)C(O)OH (9.3 g, 46.0 mmol; виж етап (ii) по-горе) в абсолютен EtOH (200 ml) се прибавя концентрирана сярна киселина (0.25 ml) и реакционната смес се вари под обратен хладник, под азот в продължение на 4 h.
Реакционната смес се охлажда до 0°С и се прибавя твърд NaHCO3, (0.2 g). Реакционната смес се концентрира във вакуум и се разпределя между наситен разтвор HaNaHCO3 (100 ml) и Et2O (3 х 50 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.9 g, 65%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.62 (6:3:1 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6. 99 (s, 1H), 6.81 (s, 2H), 5.07 (s, 1H), 4.164.32 (m, 2H), 1.23 (t, J = 7 Hz, 3H).
(iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R,S)CH(OH) C(O)OEt
Към разтвор на Ph(3-Cl)(5-OH)-(R,S)CH (OH)C(O)OEt(6.1 g, 26.8 mmol; виж етап (iii) погоре) в DMF (100 ml) в херметично затворен съд под азот при 0°С се прибавя цезиев карбонат (13.1 g, 40.2 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 15 min, последвано от добавянето на калиев йодид (0.5 g, 2.7 mmol). Реакционната смес се охлажда до -78°С и хлорофлуорометан (18.4 g, 268 mmol) се барботира в съда. Запечатаният съд се оставя след това да се затопли до стайна температура и се бърка в продължение на 18 h. Реакционната смес се охлажда до 0°С, внимателно се отваря, за да се отстрани излишък от хлорофлуорометан, и се разпределя между Н2О (20 ml) и Et2O (3 х 50 ml). Обединените органични фази се измиват със солев разтвор (2 х 50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:ЕЮАс (градиент от 9:1 до 3:1) се получава съединението от подзаглавието (2.4 g, 35%) като светложълто масло.
Забележка: Съединението е слабо uv-видимо на TLC. Може да се визуализира при оцве тяване на TLC с бромокрезол зелено.
Rf= 0.46 (2:1 хексан:ЕЮАс)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.21 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.70 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.12 (d, J = 5 Hz, 1H), 3.80-4.35 (m, 2H), 3.50 (d, J = 5 Hz, 1H), 1.26 (t, J = 7 Hz, 3H).
(v) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R,S)CH(OH) C(O)OH
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2F)-(R,S) CH (OH) C (Ο) OEt (1.8 g, 6.8 mmol; виж етап (iv) по-горе) в H2O:THF (30 ml, 1:2) при 0°C под азот се прибавя литиев хидроксид монохидрат (0.40 g, 10.3 mmol). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 2 h. Реакционната смес се концентрира във вакуум и се разпределя между Н2О (5 ml) и Et2O (2 х 20 ml). Водната фаза се подкиселява внимателно с 0.2N НС1 при 0°С и се екстрахира с EtOAc (3 х 30 ml). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.4 g, 87%) като безцветно масло, което се втвърдява в бяло твърдо вещество при стоене.
Rf=0.43 (6:2:1 CHCl3:MeOH:Et3N)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.24 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.78 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.13 (s, 1H).
(vi) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C (O)OH (а) и Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(S)CH(OAC)C (O)OH (b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCH2F) - (R,S) CH (OH) C (Ο) OH (3.2 g, 13.9 mmol; виж етап (v) по-горе) и липаза PS “Amano” (1.9 g) във винилацетат (150 ml) и МТВЕ (150 ml) се загрява при 70°С под азотна атмосфера в продължение на 3 дни. Реакционната смес се охлажда, филтруват се през Celite® и филтърната утайка се измива с EtOAc. Филтратът се концентрира във вакуум и се подлага на бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:MeOH:Et3N (15:1:0.5), при което се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (а) (0.50 g, 21 %), което се използва без неутрализация. Освен това, се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (Ь) (0.46 g, 20%).
Данни за подзаглавното съединение (а):
R = 0.19 (15:1:0.5 CHCl3:MeOH:Et3N)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.26 (s,
66261 Bl
1H), 7.18 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.74 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.17 (q, J = 7 Hz, 6H), 1.28 (t, J = 7 Hz, 9H).
Данни за подзаглавното съединение (b)
Rf= 0.33 (15:1:0.5 CHCl3:MeOH:Et3N)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.28 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.76 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.75 (s, 1H), 3.17 (q, J = 7 Hz, 6H), 2.16 (s, 3H), 1.28 (t, J = 7 Hz, 9H).
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCH2F) (R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на триетиламиновата сол на Ph(3-Cl)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.50 g, 1.50 mmol; виж етап (vi) по-горе) и Haze Pab (Teoc)-HCl (0.87 g, 1.90 mmol) в сух DMF (15 ml) под азот при 0°С се прибавят РуВОР (0.85 g, 2.60 mmol) и DIPEA (0.48 g, 3.70 mmol). Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография два пъти върху силикагел и елуиране първо с CHCl3:EtOH (9:1) и след това с EtOA:EtOH (20:1), се получава съединението от подзаглавието (0.23 g, 26%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 88-92°С
Rf=0.61 (9:1 СНС13:ЕЮН) !Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.81 (d, J = 8Hz, 2Н); 7.40-7.42 (m, 2Н), 7.06-7.23 (m, ЗН), 5.76 (d, JH-F = 51 Hz, 2H), 5.10-5.16 и 4.77-4.83 (m, 2Н), 3.80-4.49 (m, 6Н), 2.30-2.53 (m, 2Н), 1.08 (t, J = 7 Hz, 2H), 0.08 (s, 9H).
APCI-MS (M + 1) = 593 m/z (viii) Ph(3-Cl)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(Teoc) (0.051 g, 0.086 mmol; виж етап (vii) no-rope), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 20 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил. Продуктът е с чистота 95% с 5% дифлуорометилиран материал. Опитите за пречистването му с препаративна RPLC с CH3CN:0.1М NH4OAc не са успешни, и материалът частично като ацетат се разтваря в 5 ml TFA, изпарява се и се изсушава при замразяване, при което се получават 26 mg (51 %) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол. Чистота: 95%.
Ή-NMR (600 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.6-7.5 (т, 2Н), 7.21 (s, 1Н, основен ротамер), 7.17 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 7.13 (s, 1Н, основен ротамер), 7.09 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 7.07 (m, 1Н, основен ротамер), 7.04 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.73 (d, 2Н), 5.18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.16 (s, 1Н, основен ротамер), 5.09 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.56 (d, 1Н, основен ротамер), 4.50 (d, 1Н, второстепенен ротамер), 4.46 (d, 1Н, второстепенен ротамер), 4.45 (d, 1Н, основен ротамер), 4.35 (m, 1Н, основен ротамер), 4.14 (m, 1Н, основен ротамер), 4.05 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.97 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.68 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, 1Н, основен ротамер), 2.19 (τη, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта
173.9, 173.3, 172.9, 168.2.
ESI-MS+: (М+1) = 449 (m/z)
Пример 20
Ph(3-Cl)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe)
Към разтвор натриетиламиновата Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.60 g, 1.80 mmol; виж Пример 19 (vi)) и Haze Pab(OMe).2HCl (0.79 g, 2.30 mmol) в DMF (15 ml) под азот при 0°C се прибавят РуВОР (1.04 g, 1.90 mmol) и DIPEA (0.58 g, 4.50 mmol). Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография три пъти върху силикагел се елуира първо с CHCl3:EtOH (9:1) и след това два пъти с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от заглавието (0.22 g, 26%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 66-70°С
Rf= 0.45 (9:1 CHCl,:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.59 (d, J = 8Hz, 2H), 7.32 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.06-7.23 (m, 3H), 5.75 (s, JH-F = 54 Hz, 1H), 5.10-5.16 и 4.78-4.84 (m, 2H), 4.11-4.45 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H).
,3C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта
66261 Bl
173.0, 170.8, 170.7, 152.5.
APCI-MS: (M + 1) = 479 m/z
Пример 21
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab x TFA (i) (2-Монофлуороетил)метансулфонат
При разбъркване е магнитна бъркалка към разтвор на 2-флуороетанол (5.0 g, 78.0 mmol) в СН2С12 (90 ml) под азот при 0°С се прибавя триетиламин (23.7 g, 234 mmol) и метансулфонилхлорид (10.7 g, 93.7 mmol). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 1.5 h, разрежда се с СН2С12 (100 ml) и се измива с 2N НС1 (100 ml). Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (50 ml) и обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (75 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (9.7 g, 88%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 4.76 (t, J = 4 Hz, 1H), 4,64 (t, J = 4 Hz, 1H), 4.52 (t, J = 4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 4 Hz, 1H), 3.09 (s, 3H).
(ii) З-Хлоро-5-монофлуороетоксибензалдехид
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (8.2 g, 52.5 mmol, виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (9.4 g, 68.2 mmol) в DMF (10 ml) под азот се прибавя разтвор на (2монофлуороетил)метансулфонат (9.7 g, 68.2 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMF (120 ml) на капки при стайна температура. Сместа се загрява до 100°С в продължение на 5 h и след това се бърка цяла нощ при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до 0°С, изсипва се в леденостудена 2N НС1 и се екстрахира с ЕЮАс. Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с хексан:ЕЮАс (4:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.6 g, 71 %) като жълто масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.92 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.32 (s, 1H),.7.21 (s, 1H), 4.87 (t, J = 4 Hz, 1H), 4. 71 (t, J = 3 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 3 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 3 Hz, 1H).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R,S)CH (OTMS)CN
Към разтвор на З-хлоро-5-монофлуоро етоксибензалдехид (7.6 g, 37.5 mmol; виж етап (ii) по-горе) и цинков йодид (3.0 g, 9.38 mmol) в СН2С12 (310 ml) се прибавя триметилсилилцианид (7.4 g, 75.0 mmol) на капки при 0°С под азот. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 h и при стайна температура цяла нощ. Реакционната смес се разрежда с Н2О (300 ml), органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (10.6 g, 94%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване или анализ.
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R,S) CH (OH)C(O) OH
Концентрирана солна киселина (100 ml) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)(R,S)CH(OTMS)CN (10.6 g, 5.8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и разтворът се бърка при 100°С в продължение на 3 h. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0°С, алкализира се бавно с 3N NaOH (-300 ml) и се измива с ΕζΟ (3 х 200 ml). Водната фаза се подкиселява с 2N НС1 (80 ml) и се екстрахира с ЕЮАс (3 х 300 ml). Обединените EtOAc екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (8.6 g, 98%) като бледожълто твърдо вещество, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.28 (90:8:2 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.09 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.77-
4.81 (m, 1H), 4.62-4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H), 4.15-4.18 (m, 1H).
(iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(S)CH (OAc)C(O)OH (а) и Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)(R)CH(OH)C(O)OH (b)
Разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R,S) CH(OH)C (Ο) OH (8.6 g, 34.5 mmol; виж етап (iv) no-rope) и липаза PS “Amano” (4.0 g) във винилацетат (250 ml) и MTBE (250 ml) се загряват при 70°C под азот в продължение на 3 дни. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и ензимът се отделя чрез филтрация през Celite®. Филтърната утайка се измива с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране
66261 Bl c CHCl3:MeOH:Et3N (90:8:2) се получаватриетиламиновата сол на подзаглавното съединение (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на подзаглавното съединение (Ь) (4.0 g). Солта от подзаглавното съединение (Ь) се разтваря в Н2О (250 ml), подкиселява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (b) (2.8 g, 32%) като жълто масло.
Данни за подзаглавното съединение (Ь):
Rf = 0.28 (90:8:2 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.09 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.77-
4.81 (m, 1H), 4.62-4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H), 4.15-4.18 (m, 1H).
(vi) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) 5-OCH2CH2F)(R)CH(OH)C(O) OH (940 mg, 3.78 mmol; виж етап (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab(Teoc).HCl (2.21 g, 4.91 mmol), РуВОР (2.16 g, 4.15 mmol) и DIPEA (1.22 g, 9.45 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура в продължение на 4 h. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от подзаглавието (450 mg, 20%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 80-88°С
Rf= 0.60 (10:1 СНС13:ЕЮН)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.79 (d, J = 8 Hz, 2Н), 7.42 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.05-7.08 (m, 1H), 6.936.99 (m, 2H), 5.08-5.13 (m, 1H), 4.75-4.80 (m, 2H), 4.60-4.68 (m, 1H), 3.95-4.55 (m, 8H), 2.10-
2.75 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APCI-MS: (M + 1) = 607 m/z.
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R) CH (OH) C (O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab (Teoc) (0.357 g, 0.589 mmol; виж етап (vi) по-горе), се разтваря в 10 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 40 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръз ване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.33 g (93%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (600 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.54 (d, 2Н), 7.08 (s, 1Н, основен ротамер), 7.04 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 6.99 (s, 1Н, основен ротамер), 6.95 (s, 1Н), 6.92 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.14 (s, 1Н, основен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.73 (m, 1Н), 4.65 (т, 1Н), 4.6-4.4 (т, 2Н), 4.35 (т, 1Н, основен ротамер), 4.21 (дублет от мултиплети; 2Н), 4.12 (m, 1Н, основен ротамер), 4.06 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.99 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.69 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 172.8, 172.1,
167.4.
ESI-MS+: (M+l) = 463 (m/z)
Пример 22
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OMe)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)(R)CH(OH)C(O)OH (818 mg, 3.29 nmol; виж Пример 21 (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab(OMe).2HCl (1.43 g, 4.27 mmol), РуВОР (1.89 g, 3.68 mmol) и DIPEA (1.06 g, 8.23 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc :EtOH (20:1), при което се получава съединението от заглавието (880 mg, 54%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 65-72°С
Rf= 0.60 (10:1 CHCI3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.58-7.60 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.05-7.08 (m, 2H), 6.95-6.99 (m, 1H), 5.08-5.13 (m, 1H), 4.77-4.82 (m, 1H), 4.60-4.68 (m, 1H), 3.99-4.51 (m, 7H),
3.82 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H).
,3C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 173.3, 170.8,
66261 Bl
152.5.
APCI-MS: (M + 1) = 493 m/z.
Пример 23
Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F)2)-(R)CH (OH) C (0) -Aze-Pab x TFA (i) 1,3-дифлуороизопропилметансулфонат
При разбъркване c магнитна бъркалка към разтвор на 1,3-дифлуоро-2-пропанол (7.0 g, 72.8 mmol) в СН2С12 (100 ml) под азот при 0°С се прибавя триетиламин (22.1 g, 219 mmol) и метансулфонилхлорид (10.0 g, 87.4 mmol). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 h. Сместа се измива с 2N НС1 (150 ml) и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (200 ml) и обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (100 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (11.5 g, 91%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
ΉNMR (300 MHz, CDC13) делта4.97-5.08 (m, 1Н), 4.75-4.77 (m, 2H), 4.594.61 (m, 2H), 3.12 (s, 3H).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)CHO
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (8.0 g, 50.7 mmol; виж Пример 1 (ii) погоре) и калиев карбонат (9.1 g, 66.0 mmol) в DMF (75 ml) под азот се прибавя разтвор на 1,3-дифлуороизопропилметансулфонат (11.5 g, 66.0 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMF (75 ml) на капки при стайна температура. Сместа се загрява до 110°С в продължение на 18 h.
Реакционната смес се охлажда до 0°С, изсипва се в леденостудена 2N НС1 (200 ml) и се екстрахира с EtOAc (3 х 250 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с хексан:ЕЮАс (4:1), при което се получава съединението от подзаглавието (4.4 g, 37%) като жълто масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.92 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.70-
4.89 (m, 3H), 4.63-4.68 (m, 2H).
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)-(R,S)CH (OTMS)CN
Към разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCH(CH2F)2) CHO (4.4 g, 18.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) и цинков йодид (1.5 g, 4.67 mmol) в СН2С12 (200 ml) при 0°С под азот се прибавя триметилсилил цианид (3.7 g, 37.3 mmol) на капки. Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 3 h и цяла нощ при стайна температура, след това се разрежда с Н2О (200 ml). Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.5 g, 87%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.12 (s, 1H), 7.00 (s, 2H), 5.42 (s, 1H), 4.704.80 (m, 3H), 4.59-4.64 (m, 2H), 0.26 (s, 9H).
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F)2)(R,S)CH(OH)C(O)OH
Концентрирана солна киселина (50 ml) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F)2) (R,S) CH(OTMS)CN (5.5 g, 16.3 mmol; виж етап (iii) по-горе) и разтворът се бърка при 100°С в продължение на 1.5 h. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0°С, алкализира се бавно с 3N NaOH (-200 ml) и се измива с Et2O (3 х 200 ml). Водната фаза се подкиселява с 2N НС1 (75 ml) и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml). Обединените EtOAc екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.6 g, 100%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.14 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.70-
4.90 (m, 3H), 4.52-4.67 (m, 2H).
(v) Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)-(S)CH (OAc)C(O)OH (а) и Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)(R)CH(OH)C(O)OH (b)
Разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)(R,S)CH(OH)C(O)OH (4.6 g, 16.4 mmol; виж етап (iv) по-горе) и липаза PS “Amano” (3.0 g) във винилацетат (150 ml) и MTBE (150 ml) се загрява при 70°С под азот в продължение на 2.5 дни.
Реакционната смес се охлажда до стайна температура, ензимът се отделя чрез филтрация през Celite®. Филтърната утайка се измива с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:MeOH:Et3N (90:8:2) се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на съединението от
66261 Bl подзаглавието (b) (2.2 g) и солта се разтваря в Н2О (100 ml), подкиселява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml).
Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (b) (1.4 g, 29%) като жълто масло.
Данни за подзаглавното съединение (Ь):
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.14 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.70-
4.90 (m, 3H), 4.52-4.67 (m, 2H).
(vi) Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F)2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)(R)CH(OH)C(O)OH (824 mg, 2.94 mmol; виж етап (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab (Teoc)-HCl (1.71 g, 3.81 mmol), PyBOP (1.68 g, 3.23 mmol) и DIPEA (949 mg, 7.34 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1), и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от подзаглавието (720 mg, 38%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 78-84°С
Rf= 0.62 (10:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.79 (d, J = 8Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.00-7.12 (m, 3H), 5.085.20 (m, 1H), 3.97-4.80 (m, 12H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APC1-MS: (M + 1) = 639 m/z.
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)- (R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab x TFA
Ph (З-Cl) (5-OCH(CH2F)2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (Teoc) (0.129 g, 0.202 mmol; виж етап (vi) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 20 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.123 g (100%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.55 (d, 2Н), 7.2-7.0 (т, ЗН),
5.18 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, основен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер частично затъмнен от CD30H пик), 4.75-4.4 (m, 7Н), 4.38 (т, 1Н, основен ротамер), 4.15 (т, 1Н, основен ротамер), 4.1-3.9 (т, 2Н, 2 сигнала от второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта
172.9, 172.6, 172.2, 171.7, 167.1.
ESI-MS+: (М+1) = 495 (m/z)
Пример 24
Ph(3-Cl)(5-OCH(CH2F)2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OMe)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)(R)CH(OH)C(O)OH (513 mg, 1.83 mmol; виж Пример 23 (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab (ОМе).2НС1 (797 mg, 2.38 mmol), PyBOP (1.04 g, 2.01 mmol), и DIPEA (591 mg, 4.57 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc.’EtOH (20:1), при което се получава съединението от заглавието (370 mg, 39%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 58-63°С
Rf= 0.66 (10:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.58-7.60 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.00-7.12 (m, 3H), 5.08-5.20 (m, 1H), 4.65-4.82 (m, 3H), 4.28-4.65 (m, SH), 3.92-4.18 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.10-
2.75 (m, 2H).
13C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 173.2, 170.8,
152.5.
APCI-MS: (М + 1) = 525 m/z.
Пример 25
Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab х TFA (i) 1 -Бромо-З-флуоро-5-бензилоксибензен Натриев хидрид (60% дисперсия в масло, 24.0 g, 0.48 mol) се прибавя на порции при разбъркване към разтвор на безводен бензилалкохол (64.5 g, 0.60 mol) в THF (1.0 1). След като
66261 Bl сместа се бърка в продължение на 1 h, се прибавя на капки разтвор на 1-бромо-3,5-дифлуоробензен (76.8 g, 0.40 mmol) в THF (100 ml) в продължение на период от 1 h. Реакционната смес се бърка при стайна температура 2 дни. Добавя се вода (400 ml) и THF се отстранява във вакуум. Водната фаза се екстрахира с хексан (3x150 ml). Обединените органични екстракти се измиват след това с 2N NaOH (2 х 100 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (110.7 g, 98%) като светложълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.47 (хексан).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.36-7.41 (m, SH), 6.94 (bs, 1H), 6.87 (d, JH-F = 8 Hz, 1H), 6.63 (d, JH-F = 10 Hz, 1H), 5.03 (s, 2H).
(ii) З-Бромо-5-флуорофенол
Към разтвор на 1-бромо-3-флуоро-5-бензилоксибензен (110.0 g, 0.39 mol; виж етап (i) по-горе) и Ν,Ν-диметиланилин (474.0 g, 3.92 mol) в безводен СН2С12 (1.01) при 0°С се прибавя алуминиев хлорид (156.0 g, 1.17 mol). След 10 min, ледената баня се отстранява и разбъркването продължава 2 h. Реакцията се прекъсва чрез внимателно прибавяне на 3N НС1 (600 ml). Фазите се разделят и водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 150 ml). Обединените органични екстракти се измиват с 2N НС1 (250 ml) и Н20 (3 х 250 ml). Към органичната фаза се прибавя 15% КОН (500 ml), и фазите се разделят. Органичната фаза се екстрахира допълнително с 2 N КОН (2 х 70 ml). Обединените водни фази се измиват с СН2С12 (3 х 100 ml) и след това се подкиселяват с 4N НС1. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 125 ml) след това, обединените Et2O екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (69.0 g, 92%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Т.т.: 33-35°С
Rf=0.25 (СНС13) ’HNMR(300 MHz, DMSO-d6) делта 10.38 (s, 1Н), 6.90 (dd, JH-F = 11 Hz, J = 2 Hz, 1H), 6.81 (s, lH),6.59(dt, JH-F = 11 Hz, J = 2 Hz, 1H).
APCI-MS: (M-l)= 189 m/z (iii) 1 -Бромо-З-флуоро-5-дифлуорометоксибензен
Смес от З-бромо-5-флуорофенол (6.1 g, 31.0 mmol; виж етап (ii) по-горе) и хлородифлуорометан (13.0 g, 150.0 mmol) в i-PrOH (100 ml) и 30% КОН (80 ml) се загрява в херметично затворен съд в продължение на 18 h при 8085°С. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и фазите се разделят. Органичната фаза се концентрира във вакуум, при което се получава безцветно масло. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3x30 ml).
Суровото масло и обединените органични екстракти се измиват с 2N NaOH (3x30 ml) и Н2О (3 х 30 ml). Органичните фази след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се през слой от силикагел и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.1 g, 79%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.11-7.14 (m, 2Н), 6.84 (dt, J = 9 Hz, J = 2 Hz, 1H), 6.50 (t, JH-F = 72 Hz, 1H).
(iv) 1 -Флуоро-З-дифлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилстанан (7.0 g, 22.2 mmol) се прибавя към суспензия от 1-бромо-З-флуоро-5-дифлуорометоксибензен (4.9 g, 20.2 mmol; виж етап (iii) по-горе), дихлоробис (трифенилфосфин) паладий(П) (1.42 g, 2.02 mmol) и безводен литиев хлорид (0.90 g, 20.2 mmol) в THF (40 ml) под азот при 65°С и сместа се бърка в продължение на 5 h. Реакционната смес се охлажда до 0°С и се прибавя IN NaOH (90 ml). Двуфазовата смес се бърка интензивно в продължение на 1 h, след това фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 70 ml). Обединените органични фази се измиват с 2N NaOH (2 х 40 ml) и Н2О (40 ml), след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (2.2 g, 57%) като безцветно масло.
Rf = 0.47 (хексан)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6.93-6.99 (m, 2Н), 6.73-6.78 (m, 1Н), 6.67 (dd, J = 18 Hz, J = 11 Hz, 1H), 6.51 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 11 Hz, 1H).
(v) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)CH2OH 2-Метил-2-пропанол (140 ml), H2O (140 ml), и AD-mix-бета (39.2 g) се обединяват и ox
66261 Bl лаждат до 0°С. 1-Флуоро-З-дифлуорометокси5-винилбензен (5.0 g, 26.4 mmol; виж етап (iv) по-горе) разтворен в малко количество 2-метил2-пропанол се прибавя наведнъж, и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0°С докато чрез TLC се докаже отсъствието на изходно вещество. Реакцията се прекъсва при 0°С чрез добавяне на натриев сулфит (42.0 g) и след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 60 min. Реакционната смес се екстрахира с Et2O (3 х 120 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOAc (3:2) се получава съединението от подзаглавието (5.8 g, 98%) като безцветно масло.
Rf=0.41 (3:2 CHCl3:EtOAc)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6.96-6.99 (m, 2H), 6.77-6.82 (m, 1H), 6.51 (t, Jh-F = 73 Hz, 1H), 4.79-4.85 (m, 1H), 3.76-3.84 (m, 1H), 3.583.66 (m, 1H), 2.66 (d, J = 3 Hz, 1H), 2.00 (t, J = 6 Hz, 1H).
HPLC Анализ: 89.2%, > 99% енантиомерно обогатен, ChiralPak AD колона (95:5 хексан:ЕЮН мобилна фаза).
(vi) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) CH2OTBS
Разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)(R)CH(OH)CH2OH (5.5 g, 24.7 mmol; виж етап (v) по-горе), 4-(диметиламино) пиридин (121 mg, 1.0 mmol) и триетиламин (3.0 g, 29.6 mmol) в безводен СН2С12 (100 ml) се охлажда до 0°С. 1.0 М разтвор на трет-бутилдиметилсилил хлорид в СН2С12 (26.0 ml, 26.0 mmol) се прибавя на капки, и реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Прибавя се наситен разтвор на амониев хлорид (60 ml) и фазите се разделят. Органичната фаза се измива с наситен разтвор на амониев хлорид (60 ml) и Н2О (2x35 ml) след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с СНС13:хексан (3:1) се получава съединението от подзаглавието (7.9 g, 85%) като жълто масло.
Rf = 0.47 (3:1 СНС13:хексан)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6.95-6.98 (m, 2H), 6.76-6.79 (m, 1H), 6.51 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 4.71-4.74 (m, 1H), 3.75-3.80 (m, 1H),
3.48-3.54 (m, 1H), 2.99 (bs, 1H), 0.91 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), 0.00 (s, 3H).
(vii) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM) ch2otbs
Към разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)(R)CH(OH)CH2OTBS (7.9 g, 0.51 mmol; виж етап (vi) по-горе) и DIPEA (4.9 g, 48.1 mmol) в безводен CH2C12 (50 ml) при 0°C под азот се прибавя на капки 2-метоксиетоксиметилхлорид (6.6 g, 48.1 mmol). Сместа се бърка в продължение на 24 h. Прибавя се наситен разтвор на амониев хлорид (70 ml) и фазите се разделят. Органичната фаза се измива с наситен разтвор на амониев хлорид (70 ml) и Н2О (3 х 60 ml), след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (8.8 g, 99%) като жълто масло,, което се използва без допълнително пречистване.
Rf=0.41 (4:1 СНС13:ЕЮАс)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.20 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.50 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 4.79-4.81 (m, 1H), 4.66-4.68 (m, 2H), 3.47-3.82 (m, 6H), 3.36 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.01 (s, 3H), 0.00 (s, 3H).
(viii) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM) CH2OH
Към разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R) CH(OMEM)CH2OTBS (9.3 g, 21.9 mmol; виж етап (vii) по-горе) в THF (60 ml) при стайна температура се прибавя 1.0 М разтвор на тетрабутиламониев флуорид в THF (70.0 ml, 70.0 mmol) и сместа се разбърква цяла нощ под азот. Реакционната смес се концентрира във вакуум. Жълтият остатък се разтваря в Et2O (100 ml) и хексан (100 ml) и измива последователно с наситен разтвор на амониев хлорид (2 х 150 ml) и Н2О (3 х 70 ml). Органичната фаза се изсушава (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:ЕЮАс (1:1) се получава съединението от подзаглавието (4.2 g, 62%) като жълто масло.
Rf = 0.42 (1:1 хексан:ЕЮАс)
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 6.91 -6.95 (m, 2Н), 6.75-6.81 (m, 1Н), 6.51 (t, JH-F =73 Hz, 1H), 4.80-4.82 (m, 1H), 4.70-4.74 (m, 2H), 3.883.93 (m, 1H), 3.67-3.71 (m, 3H), 3.53-3.56 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.96-2.99 (m, 1H).
(ix) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM)
66261 Bl
C(O)OH
Разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH (ОМЕМ)СН2ОН (4.2 g, 13.4 mmol; виж етап (viii) по-горе) в ацетон (100 ml) се прибавя към воден разтвор на 5% разтвор наЯаНСО3 (35 ml). Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка се охлажда до 0°С и се прибавят калиев бромид (159 mg, 1.3 mmol) и 2,2,6,6-тетраметил1-пиперидинилокси, свободен радикал (2.2 g, 14.1 mmol). След това на капки в продължение на 20 min се прибавя натриев хипохлорит (5.25%, 30 ml), като през това време сместа се бърка интензивно и поддържа при 0°С. След 1 h се прибавят допълнително натриев хипохлорит (30 ml) и 5% разтвор HaNaHCO3 (35 ml) и разбъркването продължава при 0°С в продължение на 2 h. Ацетонът се отстранява във вакуум. Водната фаза се измива с Et2O (4 х 40 ml). Водната фаза се подкиселява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се екстрахира с EtOAc (4 х 50 ml). Обединените EtOAc екстракти се измиват последователно с Н2О (4x30 ml) и след това със солев разтвор (60 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.3 g, 98%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf= 0.74 (8.0:1.5:0.5 CHCl3:MeOH:Et3N)
Ή NMR (300 MHz, ацетон-бб) делта 7.16-
7.18 (m, 2H), 1.16 (t, JH-F = 89 Hz, 1H), 7.007.03 (m, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.88 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.54-3.75 (m, 2H), 3.463.49 (m, 2H), 3.28 (s, 3H).
(x) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH (OMEM) C (O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)(R)CH(OMEM)C(O)OH (1.1 g, 3.4 mmol; виж етап (ix) по-горе) в DMF (20 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab (Teoc).HCl (2.0 g, 4.4 mmol), PyBOP (1.9 g, 3.7 mmol) и DIPEA (1.1 g, 8.4 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.3 g, 56%) като трошлива бяла пяна.
Rf= 0.65 (15:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.80-7.84 (m, 2Н), 7.407.46 (m, 2Н), 6.95-7.16 (m, ЗН), 6.92 и 6.88 (t, JH-F = 73 Hz, 1Н), 5.28 и 5.08 (s, 1Н), 5.18-5.22 и 4.70-4.78 (m, 1H), 4.50-4.75 (m, 1H), 4.304.49 (m, 2H), 4.21-4.26 (m, 3H), 3.97-4.08 (m, 1H), 3.35-3.72 (m, 6H), 3.30 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
(xi) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(Teoc)
Смес от Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab (Teoc) (590 mg, 0.87 mmol; виж етап (x) по-горе) и въглероден тетрабромид (287 mg, 0.87 mmol) в 2-пропанол (20 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 1.5 h. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н2О (50 ml) и EtOAc (3 х 50 ml). Водната фаза се екстрахира с допълнително количество EtOAc (2x10 ml). Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (30 ml), след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (60 mg, 12%) като трошлива бяла пяна.
Rf= 0.46 (15:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.74 (d, J = 8Hz, 2H), 7.35-7.37 (m, 2H), 6.97-7.07 (m, 2H), 6.80-6.84 (m, 1H), 6.82 и 6.80 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.10 и 5.06 (s, 1H), 4.68-4.70 (m, 1H), 3.974.60 (m, 6H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APCI-MS:(M+ 1) = 595 m/z (xii) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab x TFA
Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Teoc) (0.053 g, 0.089 mmol; виж етап (xi) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 80 min при охлаждане в ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ ацетонитрил, при което се получават 0.042 g (80%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
Ή-NMR (300 MHz; CD,OD) ротамери: делта 7.7-7.6 (m, 2Н), 7.5-7.4 (т, 2Н), 7.1-6.6 (т, 4Н), 5.2-5.0 (т, 1Н плюс второстепенен ротамер от 1Н), прибл. 4.8 (основен ротамер от предишен сигнал, замъглен от CD3OH сигнала),
66261 Bl
4.6-4.3 (m, 2H), 4.26 (m, 1H, основен ротамер), 4.10 (m, 1H, основен ротамер), 3.96 (m, 1H, второстепенен ротамер), 3.89 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.60 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.44 (m, 1H, основен ротамер), 2.19 (m, 1H, основен ротамер), 2.05 (m, 1H, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 172.8, 172.0, 167.0.
ESI-MS+: (М+1) = 451 (m/z)
Пример 26
Ph (3-F) (5-OCHF2)-(R) СН (OH) С (О)Aze-Pab (ОМе) (i) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH (ОМЕМ) С (O)-Aze-Pab (ОМе)
Към разтвор на Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R) СН(ОМЕМ)С (Ο) ОН (1.0 g, 3.1 mmol; виж Пример 25 (ix) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab (ОМе).2НС1 (1.4 g, 4.1 mmol), РуВОР (1.8 g, 3.4 mmol) и DIPEA (1.0 g, 7.8 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc, при което се получава съединението от подзаглавието (1.5 g, 79%) като трошлива бяла пяна.
Rf = 0.24 (EtOAc)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.58-7.62 (m, 2Н), 7.327.38 (m, 2Н), 7.03-7.16 (m, ЗН), 6.92 и 6.88 (d, JH-F = 73 Hz, 1Н), 5.27 и 5.08 (s, 1H), 5.22-5.15 и 4.75-4.80 (m, 1H), 4.38-4.65 (m, SH), 3.92-4.27 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.43-3.68 (m, 4H), 3.29 (s, 3H), 2.28 2.85 (m, 2H).
(ii) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OMe)
Смес от Ph(3-F)(5-OCHF2)-(R)CH(OMEM) C(O)-Aze-Pab(OMe) (828 mg, 2.33 mmol; виж етап (i) по-горе) и въглероден тетрабромид (525 mg, 2.33 mmol) в 2-пропанол (20 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 8 h и след това се бърка при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се разпределя между Н2О (70 ml) и EtOAc (50 ml). Водната фаза се екстрахира с EtOAc (2 х 25 ml). Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (35 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от заглавието (520 mg, 74%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 73-81 °C
Rf= 0.43 (15:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.59 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.32-7.37 (m, 2H), 7.05-7.14 (m, 2H), 6.87-6.92 (m, 1H), 6.90 и 6.86 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.13-
5.18 и 4.75-4.85 (m, 2H), 4.15-4.45 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 172.0,171.4,
153.9.
APCI-MS: (М + 1) = 481 m/z
Пример 27
Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab х TFA (i) 1,3-дибромо-5-бензилоксибензен
Натриев хидрид (9.9 g, 0.414 mol, 95% сух) се прибавя на порции при разбъркване към разтвор на бензилалкохол (41.0 g, 0.394 mol) в THF (1.0 1) при стайна температура под азотна атмосфера и се бърка в продължение на 1 h. Към този разтвор се прибавя на капки 1,3-дибромо5-флуоробензен (100.0 g, 0.394 mol). След разбъркване цяла нощ, сместа се разпределя между Н20(600 ml) и EtOAc (4 х 600 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (101.3 g, 75%) като жълто масло.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.30-7.48 (m, SH), 7. 18 (s, 1H), 7.06 (s, 2H), 4.99 (s, 2H).
(ii) 3,5-дибромофенол
Алуминиев хлорид (11.7 g, 87.6 mmol) се прибавя на порции към разтвор на 1,3-дибромо5-бензилоксибензен (10.0 g, 29.2 mmol; виж етап (i) по-горе) и Ν,Ν-диметиланилин (35.4 g, 292 mmol) в СН2С12 (100 ml) при стайна температура под азотна атмосфера. След 30 min, сместа се разпределя между IN НС1 (300 ml) и EtOAc (5 х 150 ml). Обединените органични екстракти се измиват с наситен разтвор HaNaHCO3(150 ml) и солев разтвор (150 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум.
66261 Bl
След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан :ЕЮАс (9:1) се получава съединението от подзаглавието (6.1 g, 82%) като бяло твърдо вещество.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.21 (s, 1H), 6.97 (s, 2H), 5.88 (bs, 1H).
(iii) 1,3-Дибромо-5-монофлуорометоксибензен
Към претеглен, облодънен автоклав 350 ml, съдържащ суспензия от 3,5-дибромофенол (10.0 g, 39.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) и Cs2CO3 (20.7 g, 63.5 mmol) в DMF (150 ml) при -78°C се прибавя хлорофлуорометан чрез барботиране за 5 min през септум. Септумът се заменя с тефлонова запушалка и след това съдът се затваря херметично и се оставя да се затопли до стайна температура, при което съдът се тегли и се определя съдържание от 9.0 g (131 mmol) хлорофлуорометан. Разтворът се загрява в маслена баня при 70°С цяла нощ. Съдът се охлажда до стайна температура, налягането се освобождава предпазливо и съдържанието се разрежда с вода (100 ml). Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 200 ml), обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (7.9 g, 71%) като бяло твърдо вещество.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.40 (s, 1H), 7.18 (s, 2H), 5.67 (d, JH-F = 53 Hz, 2H).
(iv) 1 -Бромо-З-монофлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилкалай (10.0 g, 31.4 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 1,3-дибромо-5-монофлуорометоксибензен (8.5 g, 29.9 mmol; виж етап (iii) по-горе), тетракис (трифенилфосфин)паладий(О) (690 mg, 0.599 mmol), и 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол (на върха, на шпатулата) в толуен (100 ml) под азот. Сместа се разбърква при 70°С в продължение на 8 h. Сместа се охлажда до 0°С и се прибавя 1N NaOH (70 ml). След 1 h сместа се екстрахира с СН2С12 (3 х 300 ml), след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (4.3 g, 57%) като безцветно масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.30 (s,
1H), 7.16 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.60 (dd, J = 6 Hz, J = 11 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 16 Hz, 1H), 5.67 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 5.32 (d, J = 8 Hz, 1H).
(v) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)CH2OH 2-Метил-2-пропанол (100 ml), H2O (100 ml), и AD-mix-бета (27.5 g) се обединяват и охлаждат до 0°С. Наведнъж се прибавя 1-бромоЗ-монофлуорометокси-5-винилбензен (4.3 g, 17.3 mmol; виж етап (iv) по-горе) и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0°С докато TLC покаже отсъствие на изходно вещество. Реакцията се прекъсва при 0°С чрез добавяне на наситен разтвор на натриев сулфит (200 ml) и след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 60 min. Реакционната смес се екстрахира с EtOAc (3 х 150 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.9 g, 100%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.30 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.70 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 4.62-4.70 (m, 1H), 3.52-3.70 (m, 2H).
HPLC Анализ: 92.1 %, 96.9% енантиомерно обогатен, ChiralPak AD колона (95:5 хексан:ЕЮН мобилна фаза).
(vi) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH (ОМЕМ) CH2OTBS
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCH2F)(R)CH(OH)CH2OH (4.9 g, 18.6 mmol; виж етап (v) по-горе), 4-(диметиламино)-пиридин (453 mg, 3.71 mmol), и DIPEA (8.9 g, 93.0 mmol) в безводен CH2C12 (200 ml) се прибавя на капки 1.0 М разтвор на трет-бутилдиметилсилил хлорид в СН2С12 (22.3 ml, 22.3 mmol). Реакционната смес се бърка 10 h при стайна температура. Към сместа се прибавят DIPEA (8.9 g, 93.0 mmol) и 2-метоксиетоксиметилхлорид(13.9g, 111 mmol) на капки. След 16 h, допълнително се прибавя 2-метоксиетоксиметилхлорид (2.2 g) и реакционната смес се бърка цяла нощ. Сместа се разрежда с Н2О (100 ml), и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (3 х 200 ml), обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:EtOAc (5:1) се получава съединението от подзаглавието (4.8 g,
66261 Bl
55%) като безцветно масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.29 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.74 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 4.84 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.70-4.74 (m, 2H), 3.50-3.91 (m, 6H), 3.42 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), 0.01 (s, 3H).
(vii) Ph(3-Br) (5-OCH2F)(R)CH(OMEM)CH2OH
Към разтвор на Ph(3-Br)(5-OCH2F)(R)CH(OMEM) CH2OTBS (4.7 g, 10.1 mmol; виж етап (vi) по-горе) в THF (100 ml) се прибавя 1.0 M разтвор натетрабутиламониев флуорид в THF (13.1 ml, 13.1 mmol) при стайна температура и сместа се разбърква 1 h. Сместа се разпределя между Н2О (100 ml) и EtOAc (3 х 100 ml) след това, обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (3.3 g, 92%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.22 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.71 (d, Jn-F-53 Hz, 2H), 4.80-4.82 (m, 1H), 4.58-4.66 (m, 2H), 3.71-3.77 (m, 1H), 3.39-3.65 (m, 5H), 3.27 (s, 3H).
(viii) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)C (OMEM) C(O)OH
Разтвор на Ph(3-Br) (5-OCH2F)(R)CH(OMEM) CH2OH (2.1 g, 6.0 mmol; виж етап (vii) по-горе) в ацетон (40 ml) се прибавя към воден разтвор на 5% NaHCO3 (15 ml). Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка се охлажда до 0°С и се прибавят калиев бромид (70 mg, 0.60 mmol) и 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободен радикал (976 mg, 5.8 mmol). Натриев хипохлорит (5.25%, 15 ml) се добавя на капки за период от 10 min, при интензивно разбъркване на сместа и поддържане на температура от 0°С. След 1 h се прибавят допълнително натриев хипохлорит (10 ml) и NaHCO3 разтвор (20 ml) и разбъркването продължава при 0°С още 4 h. Ацетонът се отстранява на ротационен изпарител. Водната фаза се разрежда с 10% NaHCO3 разтвор (30 ml) и се измива с Et2O (3 х 20 ml). Водната фаза се подкиселява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се екстрахира с EtOAc (3 х 40 ml). Обединените EtOAc екстракти се измиват с Н2О (3 х 50 ml) и солев разтвор (50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.7 g, 78%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.38 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7. 18 (s, 1H), 5.76 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 5.21 (s, 1H), 4.83 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.62-3.78 (m, 2H), 3.483.52 (m, 2H), 3.32 (s, 3H).
(ix) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OMEM) C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCH2F)(R)CH(OMEM)C(O)OH (1.0 g, 2.72 mmol; виж етап (viii) по-горе) в DMF (20 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab (Teoc).HCl (1.6 g, 3.5 mmol), PyBOP (1.6 g, 3.0 mmol), и DIPEA (880 mg, 6.81 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава подзаглавното съединение (1.2 g, 62%) като трошлива бяла пяна.
‘Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.80-7.84 (m, 2Н), 7.407.46 (т, 2Н), 7.13-7.32 (т, ЗН), 5.84-5.87 (т, 1Н), 5.67-5.69 (т, 1Н), 5.25 и 5.07 (s, 1Н), 5.185.23 и 4.80-4.88 (т, 1Н), 3.97-4.79 (т, 8Н), 3.603.71 (т, 2Н), 3.40-3.53 (т, 2Н), 3.32 (s, ЗН), 2.10-2.75 (т, 2Н), 1.05-1.11 (т, 2Н), 0.08 (s, 9Н).
(x) Ph (З-Вг) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (Teoc)
Смес от Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (347 mg, 0.478 mmol; виж етап (ix) по-горе) и въглероден тетрабромид (159 mg, 0.478 mmol) в 2-пропанол (10 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 1.5 h. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н2О (20 ml) и EtOAc (3x30 ml). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (59 mg, 19%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 81-87°С
Rf= 0.58 (9:1 СНС13:ЕЮН)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.84 (d, J = 8Hz, 2H),
66261 Bl
7.40-7.48 (m, 2H), 7.18-7.30 (m, 3H), 5.80 (d, JHF = 53 Hz, 2H), 5.21 и 5.15 (s, 1H), 5.18-5.24 и 4.80-4.88 (m, 1H), 3.98-4.54 (m, 6H), 2.10-2.70 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APCI-MS: (M + 1) = 637 m/z (xi) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab x TFA
Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(Teoc) (0.073 g, 0.11 mmol; виж етап (x) погоре), се разтваря в 5 ml TFA и се оставя да реагира за 90 min при охлаждане на ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (30:70). Съответните фракции се изпаряват и се изсушават при замразяване от вода/ацетонитрил, при което се получават 49 mg (77%) от съединението от заглавието като ацетатна сол.
Ή-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.54 (т, 2Н), 7.37 (s, 1Н, основен ротамер), 7.33 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 7.25-7.1. (m, 2Н), 5.75 (d, 2Н), 5.22 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н, основен ротамер), 5.11 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.4 (m, 2Н), 4.37 (т, 1Н, основен ротамер), 4.16 (т, 1Н, основен ротамер), 4.1-3.9 (т, 2Н, два сигнала от второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН).
ES1-MS+: (М+1) = 493/495 (m/z)
Пример 28
Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab х TFA (i) 1,3-Дибромо-5-дифлуорометоксибензен
Към претеглен, облодънен автоклав 350 ml, съдържащ разтвор на 3,5-дибромофенол (10.0 g, 39.7 mmol; виж Пример 27 (И) по-горе) в 2-пропанол (100 ml) и 30% КОН (80 ml) при -78°С се прибавя хлородифлуорометан чрез барботиране за 15 min през септум. Септумът се заменя с тефлонова запушалка и съдът след това се затваря и се оставя да се затопли до стайна температура, при което съдът се тегли и се определя, че съдържа 12.0 g (138 mmol) хлородифлуорометан. Разтворът се вари под обратен хладник цяла нощ в маслена баня при 80°С. Съдът се охлажда до стайна температура, налягането се освобождава внимателно и съдържанието се разрежда с Н2О (200 ml). Водната фаза се екстрахира с СНС13 (2 х 150 ml), след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Остатъкът се пречиства чрез дестилация с хладник Kugelrohr при 80°С при 0.2 mm Hg, при което се получава съединението от подзаглавието (9.6 g, 80%) като бистра течност.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) 7.55 (s, 1H),
7.26 (s, 2H), 6.52 (t, JH-F = 68 Hz, 1H).
(ii) 1 -Бромо-З-дифлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилкалай (10.5 g, 33.1 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 1,3-дибромо-5-дифлуорометоксибензен (9.1 g, 30.1 mmol; виж етап (i) по-горе), тетракис (трифенилфосфин)паладий(О) (700 mg, 0.60 mmol), и 2,6-дитрет-бутил-4-метилфенол (на върха на шпатулата) в толуен (125 ml) под азот. Сместа се разбърква при 50°С цяла нощ. Сместа се охлажда до 0°С и се прибавя IN NaOH (70 ml). След 1 h, сместа се екстрахира с СН2С12 (3 х 300 ml), обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (5.1 g, 68%) като безцветно масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.53 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.60 (dd, J = 6 Hz, J = 11 Hz, 1H), 6.57 (t, JH-F = 68 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 11 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 8 Hz, 1H).
(iii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) CH2OH
2-Метил-2-пропанол (150 ml), H2O (150 ml), и AD-mix-бета (27.8 g) се обединяват и охлаждат до 0°С. 1-Бромо-3-дифлуорометокси-5винилбензен (4.6 g, 18.6 mmol; виж етап (и) погоре) се прибавя наведнъж, и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0°С докато чрез TLC се докаже отсъствие на изходно вещество, след това разтворът се затопля до стайна температура и се бърка цяла нощ. Реакцията се прекъсва при 0°С чрез добавяне на наситен разтвор на натриев сулфит (300 ml) и след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 60 min. Реакционната смес се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието
66261 Bl (5.0 g, 95%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.43 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.86 (t, JH-F = 75 Hz, 1H), 4.64-4.67 (m, 1H), 3.54-3.59 (m, 2H).
HPLC Анализ: 88.6%, 96.3% енантиомерно обогатен, ChiralPak AD колона (95:5 хексан:ЕЮН мобилна фаза).
(iv) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM) CH2OTBS
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCHF2)(R)CH(OH)CH2OH (4.9 g, 17.3 mmol; виж етап (iii) по-горе), 4-(диметиламино) пиридин (420 mg, 3.5 mmol), и DIPEA (11.2 g, 86.3 mmol) в безводен CH2C12 (250 ml) се прибавя на капки 1.0 М разтвор на трет-бутилдиметилсилил хлорид в СН2С12 (20.7 ml, 20.7 mmol). Реакционната смес се бърка цяла нощ при стайна температура. Към сместа се прибавя DIPEA (11.2 g, 86.3 mmol) и 2-метоксиетоксиметилхлорид (12.9 g, 104 mmol) на капки.
След 3 дни, се прибавя допълнително количество 2-метоксиетоксиметилхлорид (3.3 g) и реакционната смес се бърка цяла нощ. Сместа се разрежда с вода (250 ml) и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 250 ml), след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:ЕЮАс (4:1) се получава съединението от подзаглавието (4.3 g, 51 %) като безцветно масло.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) 7.40 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.58 (t, JH-F = 75 Hz, 1H), 4.84 (d, J= 7 Hz, 1H), 4.70-4.74 (m, 2H), 3.50-3.91 (m, 6H), 3.42 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.12 (s, 3H), 0.05 (s, 3H).
(v) Ph(3-Br) (S-OCHF2)-(R)CH(OMEM) CH,OH
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCHF2)(R)CH(OMEM) CH2OTBS (3.3 g, 6.9 mmol; виж етап (iv) по-горе) в THF (60 ml) се прибавя 1.0 M разтвор натетрабутиламониев флуорид в THF (9.0 ml, 9.0 mmol) при стайна температура. Реакционната смес се бърка в продължение на 45 min, след това сместа се разпределя между вода (150 ml) и EtOAc (2 х 120 ml). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (2.5 g, 98%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.35 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.83 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.59-4.68 (m, 2H), 3.40-380 (m, 6H), 3.26 (s, 3H).
(vi) Ph(3-Br) (5-OCHF2)- (R)CH(OMEM)C(O)OH
Разтвор на Ph(3-Br)(5-OCHF2)-(R)CH (OMEM)CH2OH (3.0 g, 8.1 mmol; виж етап (v) по-горе) в ацетон (60 ml) се прибавя към воден 5% разтвор на NaHCO3 (25 ml). Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка, се охлажда до 0°С, след това се прибавят калиев бромид (100 mg, 0.81 mmol) и 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободен радикал (1.3 g, 8.5 mmol). След това на капки се добавя натриев хипохлорит (5.25%, 19 ml) за 10 min при интензивно бъркане на сместа и поддържане на температура от 0°С. След 1 h, се добавят допълнително натриев хипохлорит (17 ml) и NaHCO3 разтвор (34 ml) и разбъркването продължава при 0°С още 4 h. Ацетонът се отстранява на ротационен изпарител. Водната фаза се разрежда с 10% разтвор на NaHCO3 (30 ml) и се измива с Et2O (3 х 20 ml). Водната фаза се подкиселява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се екстрахира с EtOAc (3 х 40 ml). Обединените EtOAc фази се измиват с Н2О (3 х 50 ml) и солев разтвор (50 ml) и след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (2.1 g, 66%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.88 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.84 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.62-3.80 (m, 2H), 3.48-3.52 (m, 2H), 3.32 (s, 3H).
(vii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH (OMEM) C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCHF2)(R)CH(OMEM)C(O)OH (1.0 g, 2.62 mmol; виж етап (vi) по-горе) в DMF (50 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab(Teoc).HCl (1.5 g, 3.38 mmol), РуВОР (1.5 g, 2.9 mmol) и DIPEA (840 mg, 6.50 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира
66261 Bl върху силикагел и елуира е CHCl3:EtOH (15:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.1 g, 59%) като трошлива бяла пяна.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.79-7.83 (m, 2Н), 7.267.52 (т, SH), 6.94 и 6.91 (t, JH-F = 73 Hz, 1Н),
5.27 и 5.07 (s, 1H), 5.20-5.23 и 4.80-4.88 (m, 1H), 4.01-4.79 (m, 8H), 3.60-3.71 (m, 2H), 3.40-3.53 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H), 1.051.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
(viii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(Teoc)
Смес от Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab (Teoc) (369 mg, 0.496 mmol; виж етап (vii) по-горе) и въглероден тетрабромид (165 mg, 0.496 mmol) в 2-пропанол (10 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 12 h. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н2О (15 ml) и EtOAc (5 х 20 ml). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране е CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (134 mg, 41 %) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 92-98°С
Rf= 0.37 (9:1 CHCl3:EtOH)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.80-7.86 (m, 2Н), 7.407.48 (m, 2Н), 7.10-7.33 (m, ЗН), 6.92 и 6.88 (t, JH-F = 73. Hz, 1Н), 5.18 и 5.11 (s, 1H), 5.18-5.24 и 4.76-4.80 (m, 1H), 3.98-4.54 (m, 6H), 2.10-2.70 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APC1-MS: (M + 1) = 655 m/z (ix) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (0)Aze-Pab x TFA
Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Teoc) (0.081 g, 0.124 mmol; виж етап (viii) по-горе), се разтваря в 5 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 80 min при охлаждане на ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1MNH4OAc (30:70). Съответните фракции се изпаряват и се изсушават при замразяване от вода/ацетонитрил, при което се получават 59 mg (83%) от съединението от заглавието като ацетатна сол.
Ή-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.8-7.7 (m, 2Н), 7.6-7.4 (т, ЗН), 7.3-7.2 (т, 2Н), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.87 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.23 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.21 (s, 1Н, основен ротамер), 5.13 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (т, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.4 (m, 2Н), 4.38 (т, 1Н, основен ротамер), 4.20 (т, 1Н, основен ротамер), 4.1-3.9 (т, 2Н, два сигнала от второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН).
I3C-NMR(75 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди) делта 172.0, 171.7, 167.0.
MS (m/z) 511/513 (M+l)+
Пример 29
Ph (З-Вг) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (ОМе) (i) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM) C(O)-Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCHF2)(R)CH(OMEM)C(O)OH (957 mg, 2.48 mmol; виж Пример 28 (vi) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0°С се прибавят HAze-Pab(OMe).2HCl (1.1 g, 3.2 mmol), РуВОР (1.4 g, 2.7 mmol) и DIPEA (804 mg, 6.2 mmol). Реакционната смес се бърка при 0°С в продължение на 2 h и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо е CHCl3:EtOH (9:1) и след това е EtOAc:EtOH (15:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.1 g, 72%) като трошлива бяла пяна.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.59-7.65 (m, 2Н), 7.207.55 (т, 5Н), 6.95 и 6.91 (t, JH-F = 73 Hz, 1Н),
5.27 и 5.07 (s, 1H), 5.18-5.23 и 4.75-4.84 (m, 1H), 3.87-4.89 (m, 6H), 3.84 (s, 3H), 3.60-3.71 (m, 2H), 3.40-3.53 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.102.75 (m, 2H).
(ii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OMe)
Смес от Ph(3-Br)(5-OCHF2)-(R)CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab (OMe) (1.1 g, 1.8 mmol; виж етап (i) по-горе) и въглероден тетрабромид (583 mg, 1.8 mmol) в 2-пропанол (30 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 2.5 дни. През това време се прибавя допълнително въглероден тетрабромид (5 порции от 50 mg на интервали за допълнително още 0.90 mmol), за
66261 Bl да се осигури протичане на реакцията до край. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н2О (50 ml) и EtOAc (5 х 25 ml). Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с СНС13 :EtOH (15:1) се получава съединението от заглавието (460 mg, 50%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 71-75°C
Rf=0.63 (9:1 СНС13:ЕЮН)
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) делта 7.59 (d, J = 8 Hz, 2Н), 7.20-7.54 (m, SH), 6.90 и 6.87 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.18 и 5.11 (s, 1H), 4.76-4.80 (m, 1H), 3.98-
4.54 (m, 4H), 3.82 (s, 3H), 2.10-2.70 (m, 2H).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.5, 172.1, 171.6, 154.1.
APCI-MS: (М + 1) = 542 m/z
Пример 30
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OH) (i) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C (O)-Aze-Pab(Z)
Вос-Аге-РаЬ(г)(виж Международна заявка за патент WO 1997/002284, 92 mg, 0.197 mmol) се разтваря в 10 ml EtOAc наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 10 min. Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)(R)CH(OH)C(O)OH (50 mg, 0.188 mmol; виж Пример 17 (v) по-горе), PyBOP (109 mg, 0.209 mmol) и накрая диизопропилетиламин (96 mg, 0.75 mmol) в 2 ml DMF. Сместа се бърка в продължение на 2 h и след това се изсипва в 50 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел е EtOAc:MeOH (9:1). Добив: 100 mg (87%).
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.85-7.75 (m, 2Н), 7.45-7.25 (m, 7Н), 7.11 (m, 1Н, основен ротамер), 7.08 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.05-6.9 (m, 2Н), 6.13 (bt, 1Н), 5.25-5.05 (m, ЗН), 4.77 (m, 1H, частично закрит от CD3OH сигнал), 4.5-3.9 (m, 7Н), 2.64 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.47 (m, 1Н, основен ротамер), 2.25 (m, 1Н, основен ротамер), 2.13 (m, 1Н, второстепенен ротамер) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C (O)-Aze-Pab(OH)
Хидроксиламин хидрохлорид (65 mg, 0.94 mmol) и триетиламин (0.319 g, 3.16 mmol) ce смесват в 8 ml THF и се обработват c ултразвук в продължение на 1 h при 40°C. Добавя ce Ph(3Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (Z) (96 mg, 0.156 mmol; виж етап (i) по-горе) c още 8 ml THF. Сместа се разбърква при 40°C в продължение на 4.5 дни. Разтворителят се изпарява и суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (40:60). Добив: 30 mg (38%). Чистота: 99%.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.6-7.55 (m, 2Н), 7.357.3 (m, 2Н), 7.12 (m, 1Н, основен ротамер), 7.09 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.05-6.9 (m, 2Н), 6.15 (триплет от мултиплети, 1Н), 5.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.13 (s, 1Н, основен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-4.2 (m, SH), 4.08 (т, 1Н, основен ротамер), 3.97 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) b 172.8, 172.2, 171.4, 159.1, 158.9, 154.2.
APCI-MS: (М + 1) = 497/499 m/z
Пример 31
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R) CH (OH) C (Ο) -Aze-Pab (OH) (i) Ph(3-Cl) (S-OCH2CH2F)-(R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab (Z)
Boc-Aze-Pab(Z) (130 mg, 0.279 mmol) ce разтваря в 15 ml EtOAc наситен c HC1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 10 min. Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)-C(O)OH (63 mg, 0.188 mmol; виж Пример 21 (v) по-горе) в 3 ml DMF, PyBOP (147 mg, 0.279 mmol) и накрая диизопропилетиламин (134 mg, 1.03 mmol). Сместа се бърка в продължение на 130 min и след това се изсипва в 75 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc/
66261 Bl
MeOH = 95/5. Добив: 119 mg (79%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 8.06 (bt, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.45-7.25 (m, SH), 7.18 (d, 2H), 6.89 (m, 1H), 6.84 (m, 1H), 6.76 (m, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.84 (s, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.66 (дублет от мултиплети, 2H), 4.4-4.3 (m, 2Н), 4.10 (дублет от мултиплети, 2Н), 4.02 (m, 1Н), 3.67 (т, 1Н), 2.46 (т, 1Н), 2.28 (т, 1Н).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH) C(O)-Aze-Pab(OH)
Хидроксиламин хидрохлорид (80 mg, 1.16 mmol) и триетиламин (0.392 g, 3.87 mmol) се смесват в 9 ml THF и се обработват с ултразвук в продължение на 1 h при 40°С.
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(Z) (96 mg, 0.156 mmol; виж етап (i) погоре) се прибавя с още 9 ml THF. Сместа се разбърква при 40°С в продължение на 48 h и 3 дни при стайна температура. Разтворителят се изпарява и суровият продукт се пречиства чрез преnapaTHBHaRPLC с CH3CN:0.1MNH4OAc (30:70). Добив: 72 mg (78%). Чистота: 100%.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.6-7.55 (m, 2Н), 7.357.25 (т, 4Н), 7.07 (т, 1Н, основен ротамер), 7.04 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 7.0-6.9 (М, 2h), 5.12 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 5.04 (s, 1Н), 4.78 (m, 1H, основен ротамер), 4.68 (дублет от мултиплети, 2Н), 4.5-4.25 (т, ЗН), 4.20 (дублет от мултиплети, 2Н), 4.06 (m, 1Н, основен ротамер), 3.97 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.65 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 172.3, 171.5, 159.8, 154.3.
APC1-MS: (М + 1) = 479/481 m/z
Пример 32
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)-ProPab (i) Boc-Pro-Pab (Teoc)
Boc-Pro-Pab(Z) (виж Международна заявка за патент WO 1997/002284,15.0 g, 0.0321 mol) се разтваря в 150 ml етанол и се прибавят 200 mg 10% Pd/C (50% влага). Сместа се разбърква и хидрира при атмосферно налягане в продължение на 2 h, филтрува се през Hyflo и се концентрира.
Продуктът се използва без допълнително пречистване. От този продукт се вземат 10 g (0.029 mol), които се разтварят в 300 ml THF. Прибавя се Теос-р-нитрофенил карбонат (10 g, 0.035 mol). За 3 min се прибавя разтвор на калиев карбонат (5.2 g, 0.038 mol) в 50 ml вода и полученият разтвор се бърка в продължение на 3 дни, концентрира се и остатъкът се екстрахира с EtOAc три пъти. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел при използване на метиленхлорид:ацетон (4:1). Добив: 9.8 g (69%).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)Pro-Pab(Teoc)
Boc-Pro-Pab (Teoc) (107 mg, 0.218 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира за 10 min.
Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) С(О)ОН (50 mg, 0.198 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) в 3 ml DMF, РуВОР (115 mg, 0.218 mmol) и накрая диизопропилетиламин (104 mg, 0.80 mmol). Сместа се бърка в продължение на 2 h и след това се изсипва в 75 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:MeOH (95:5). Добив: 89 mg (72%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.54 (bt, 1Н), 7.47 (d, 2H), 7.12 (m, 1H), 7.08 (d, 2H), 7.02 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.50 (t, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.35-4.15 (m, 3H), 3.59 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.1-1.7 (m, 4H), 1.06 (m, 2H), 0.04 (s, 9H).
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)Pro-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-ProPab(Teoc) (85 mg, 0.136 mmol; виж етап (ii) погоре) се разтваря в 1 ml метиленхлорид и се охлажда на ледена баня. TFA (4 ml) се прибавя и реакционната смес се бърка в продължение на 90 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил. Добив: 79 mg (92%). Чистота: 94%.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.85-7.7 (m, 2Н), 7.58 (d, 2Н,
66261 Bl основен ротамер), 7.47 (d, 2Н, второстепенен ротамер), 7.35 (m, 1Н, основен ротамер), 7.27 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2.7.1 (m, 2Н), 6.88 (t, 1Н), 5.38 (s, 1Н, основен ротамер)/ 5.22 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.58 (d, 1Н), 4.54.2 (m, 2Н), 3.8-3.5 (т, 1Н), 3.35 (т, 1Н), 2.21.8 (т, 4Н).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) делта 173.6,171.1, 167.0.
APCI-MS: (М + 1) = 481/483 m/z Пример 33
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)-ProPab(OMe) (1)4-Азидометил-1\[-метокси-бензамидин 4-Азидометилбензонитрил (17.3 g, 0.109 mol; Nishiyamaet al.; Chem. Lett.(1982) 1477) ce разтваря в 500 ml толуен и 200 ml абсолютен етанол. Разтворът се охлажда до -10°С и НС1 (газ) се барботира до насищане. Сместа се държи в хладилник в продължение на 2 дни, след което по-голямата част от разтворителите са се изпарили. Прибавя се диетилов етер и се отдекантира. Продуктът се разтваря отново в разтвор на О-метилхидроксиламин (10.5 g, 0.125 mol) и триетиламин (56 ml) в 200 ml метанол. Сместа се оставя да стои в продължение на 3 дни, откъдето метанолът се изпарява с добавяне на EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, разреден НОАс и воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се разрежда с още EtOAc до общ обем от 500 ml.
Проба от 25 ml се изпарява до сухо. Остатъкът се състои от 932 mg.
Общ добив; 18.6 g (83%).
(ii) 4-Аминометил-М-метокси-бензамидин Към разтвор на 4-азидометил-М-метокси- бензамидин (11.3 g, 0.055 mol; виж етап (i) погоре) в 200 ml етанол се прибавят 200 mg PtO2.
Сместа се хидрира с константно барботиране на водород в продължение на 4 h и впоследствие се филтрува през Celite® и се изпарява. Добив: 7.34 g (74%).
(iii) Boc-Pro-Pab(OMe)
Към суспензия от Boc-Pro-OH (9.7 g, 0.045 mol), 4-аминометил-Ь1-метокси-бензамидин (7.34 g, 0.041 mol; виж етап (ii) по-горе) и диметиламинопиридин (7.8 g, 0.064 mol) в 300 ml ацетонитрил се прибавя база EDC (11.7 ml, 0.068 mol). Сместа се бърка в продължение на h, концентрира се и се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (MgSO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc. Добив: 9.73 g (63%).
(iv) H-Pro-Pab(OMe) х 2 НС1
Boc-Pro-Pab(OMe) (9.7 g, 0.026 mol; виж етап (iii) по-горе) се разтваря в 250 ml EtOAc. Леденостуденият разтвор се насища с НС1 (газ) чрез барботиране в продължение на 5 min. Продуктът се утаява веднага и се прибавят 125 ml абсолютен етанол. Сместа се обработва с ултразвук докато по-голямата част от материала се втвърди. Прибавя се диетилов етер (200 ml) и суспензията се филтрува. Няколко бучки, които не са се втвърдили се обработват отново с абсолютен етанол и диетилов етер. Твърдото вещество се изсушава. Добив: 7.57 g (86%).
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) делта 7.74 (d, 2Н), 7.58 (d, 2Н), 4.55 (s, 2Н), 4.38 (m, 1Н), 3.98 (s, ЗН), 3.45-3.3 (m, 2H), 2.50 (m, 1H), 2.15-2.0 (m, 3H) (v) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH)-C(O)Pro-Pab (OMe)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (50 mg, 0,198 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), H-Pro-Pab(OMe) (76 mg, 0.218 mmol, виж етап (iv) по-горе) и PyBOP (115 mg, 0.218 mmol) се разтварят в 2 ml DMF.
Прибавя се диизопропилетиламин (104 mg, 0.80 mmol) и сместа се бърка в продължение на 2.5 h. Сместа се изсипва в 50 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Остатъкът се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:MeOH (95:5). Добив: 37 mg (36%).. Чистота : 98%.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.60 (d, 2Н, основен ротамер), 7.57 (d, 2Н, второстепенен ротамер), 7.4-7.1 (т, 5Н), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.87 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.35 (s, 1Н, основен ротамер), 5.21 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.5-4.35 (m, 1Н и 2Н, основен ротамер), 4.3-4.25 (m, 2Н, второстепенен ротамер), 3.814 (s, ЗН, основен ротамер), 3.807 (s, ЗН, второстепенен ротамер), 3.75-3.5 (m, 1Н), 3.35 (т, 1Н), 2.21.8 (т, 4Н).
66261 Bl ,3C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 173.3, 173.2, 171.3, 171.0, 153.9, 152.4.
APCI-MS: (М + 1) = 511/513 m/z
Пример 34
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeМН-СН2-((2-амидино)-8-пиридинил)
(i) 6-Цианоникотинова киселина
Към разтвор на никотинова киселина се прибавя N-оксид (51 g, 0.37 mol) в 1.2 1 DMF, NaCN (54 g, 1.1 mol), последван от триетиламин (255 ml, 1.83 mol) и TMSCI (185 ml). Реакционната смес се бърка при 110°С в продължение на 10 h, филтруват се и филтратът се концентрира. Остатъкът се разтваря в 100 ml 2N НС1 и се екстрахира с метиленхлорид. Органичните фази се обединяват, концентрират се и се прекристализират от вода, при което се получават 12 g (22%) от продукта.
(п) 5-(Хидроксиметил)пиридин-2-карбонитрил
Към разтвор на 6-цианоникотинова киселина (12 g, 0.081 mol; виж етап (i) по-горе) в THF при 0°С, се прибавя Et3N (12.4 ml, 0.0892 mol), последван от етилхлороформат (8.53 ml, 0.0892 mol). Реакционната смес се бърка в продължение на 15 min и се прибавя NaBH4 (6.14 g, 0.162 mol). След това сместа се разбърква при стайна температура цяла нощ, прекъсва се с вода и се екстрахира с метиленхлорид. Органичната фаза се концентрира и се пречиства чрез колонна хроматография, при което се получава 4 g (20%) алкохол.
(ш)5-(Азидометил)пиридин-2-карбонитрил 5-(Хидроксиметил)пиридин-2-карбонитрил (4 g, 0.03 mol; виж етап (й) по-горе) се разтваря в 25 ml метиленхлорид и охлажда в ледена баня. На капки се прибавят мезилхлорид (2.32 ml, 0.0300 mol) и след това триетиламин (4.6 ml, 0.033 mol) се прибавят на капки. Реакционната смес се бърка и след преработка на суровия мезилат се обработва с NaN3 (7.35 g, 0.113 mol) в ml DMF. Реакционната смес се бърка при 40°С в продължение на 2 h, разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се концентрира, при което се получава 3.95 g (83%) суров азид.
(iv) 5-(трет-бутоксикарбониламинометил)пиридин-2-карбонитрил
Към разтвор на 5-(азидометил)пиридин2-карбонитрил (3.95 g, 0.0248 mol; виж етап (iii) по-горе) в 30 ml THF и 10 ml вода, се прибавя трифенилфосфин (7.8 g, 0.0298 mol) и получената смес се бърка в продължение на 24 h.
След това се прибавя триетиламин (3.8 ml, 0.027 mol), последван от Вос анхидрид (5.4 g, 0.025 mol) и се разбърква в продължение на 2 h. Реакционната смес се разпределя между вода и етилацетат. Органичната фаза се концентрира и се пречиства чрез колонна хроматография, при което се получават 2.1 g (36%) от съединението от подзаглавието.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 8.6 (s, 1H), 8.0 (d, 1H), 8.9 (d, 1H), 4.1 (m, 2H), 1.4 (s, 9H) (v) 5-(Аминометил)пиридин-2-карбонитрил x 2 НС1
5-(трет-бутоксикарбониламинометил)пиридин-2-карбонитрил (0.200 g, 0.86 mmol, виж етап (iv) по-горе) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 min. Разтворителят се изпарява и се получават 0.175 g (99%) от съединението от подзаглавието под формата на неговата дихидрохлоридна сол.
Ή NMR (500 MHz, D2O) делта 8.79 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 4.38 (s, 2H) (vi) Boc-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN)
Към смес от 5-(аминометил)пиридин-2карбонитрил х 2 НС1 (0.175 g, 0.85 mmol; виж етап (v) по-горе), Boc-Aze-OH (0.201 g, 1.00 тто1)иТВТи (0.321 g, 1.00 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диметиламинопиридин (0.367 g, 3.00 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ и след това се изсипва във вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт започва да кристализира и се използва като такъв в следващия етап. Добив: 0.23 g (73%).
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 8.66 (s,
66261 Bl
1H), 8.2-7.8 (широк, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.65-4.5 (m, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.81 (m, 1H), 2.6.2. 35 (m, 2H), 1.8 (широк, 1H), 1.45 (s, 9H) (vii) H-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN) x 2 HC1
Boc-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN) (0.23 g, 0.73 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 min. Разтворителят се изпарява и се получават 0.21 g (100%) от съединението от подзаглавието под формата на неговата дихидрохлоридна сол.
Ή NMR (500 MHz, D2O) делта 8.64 (s, 1Н), 8.0-7.9 (m, 2H), 5.19 (m, 1H), 4.65-4.55 (m, 2H),
4.20 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.64 (m, 1H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN)
Към смес от H-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN) x 2 HC1 (0.206 g, 0.713 mmol; виж етап (vii) погоре), Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.180 g, 0.713 mmol; виж Пример 1 (viii) погоре) и PyBOP (0.408 g, 0.784 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диметиламинопиридин (0.367 g, 3.00 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ и впоследствие се изсипва във вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc, при което се получава чисто вещество. Добив: 0.197 g (61%).
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 8.63 (m, 1H), 8.22 (bt, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.67 (m, 1H),
7.21 (m, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.56 (t, 1H), 4.97 (bd, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.6-4.5 (m, 2H), 4.40 (bd, 1H), 4.18 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.46 (m, 1H), 1.92 (s, 1H)
APCI-MS: (M + 1) = 451/453 m/z (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)Аге-ИН-СН2-((2-амидино)-5-пиридинил) x HOAc
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)-C(O)-AzeNH-CH2-5-Py(2-CN) (0.200 g, 0.444 mmol; виж етап (viii) по-горе), амониев ацетат (1.00 g, 0.0130 mol) и N-ацетилцистеин (2.00 g, 0.0122 mol) в 10 ml метанол се загрява при 50°С в продължение на 2 дни. С помощта на препаративна RPLC с CH CN : 0.1MNH4OAc (30:79) и анализ на съответните фракции отново с CH3CN:0.1M
NH4OAc (5:95-40:60) се получават 60 mg (26%) чисто съединение от заглавието като ацетатна сол след изсушаване при замразяване от вода и ацетонитрил. Чистота: 100%.
Ή NMR (500 MHz, D2O, смес от ротамери) делта 8.68 (s, 1Н, основен ротамер), 8.62 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 8.05-7.9 (т, 2Н), 7.33 (т, 1Н, ротамер), 7.27 (т, 1Н, ротамер), 7.22 (т, 1Н, ротамер), 7.17 (т, 1Н, ротамер), 7.01 (т, 1Н, ротамер), 6.84 (t, 1Н), 5.32 (s, 1Н, основен ротамер), 5.20 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.13 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.88 (m, 1Н, основен ротамер), 4.65-
4.55 (m, 2Н, основен ротамер), 4.45-4.35 (m, 1Н, ротамер плюс 1Н, второстепенен ротамер), 4.31 (d, 1Н, второстепенен ротамер), 4.2-4.05 (m, 1Н плюс 1Н, ротамер), 2.80 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.61 (m, 1Н, основен ротамер), 2.33 (m, 1Н, основен ротамер), 2.24 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.93 (s, ЗН) 13C-NMR(100 MHz; D2O): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 181.6, 173.3, 172.7, 172.6, 172.3, 162.6, 162.3
APCI-MS: (М + 1) = 468/470 mlz
Пример 35
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-((2-метоксиамидино)-5-пиридинил)
(i) Вос-МН-СН2-[(2-(амино(хидроксилимино)метил))-5-пиридинил]
-(трет-бутоксикарбонил аминометил)пиридин-2-карбонитрил (1.00 g, 4.29 mmol; виж Пример 34 (iv) по-горе) се разтваря в 10 ml етанол и се прибавят хидроксиламин хидрохлорид (0.894 g, 0.0129 mol), и триетиламин (1.30 g, 0.0129 mol). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 6 дни. Сместа се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Добив: 0.96 g (84%).
‘Н NMR (400 MHz, ацетон-йб) делта 9.01
66261 Bl (bs, 1H), 8.50 (bs, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 6.58 (широк, 1H), 5.70 (широк, 2H), 4.31 (d, 2H), 1.41 (s, 9H) (ii) Boc-Aze-NH-CH2-(2-(aMHflHHo)-5пиридинил) x HOAc
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в Judkins et al., Synth: Coim. (1998) 4351. Суспензия от Boc-NH-CH2-[(2(амино(хидроксилимино)метил))-5-пиридинил] (0.910 g, 3.42 mmol; виж етап (i) по-горе), оцетен анхидрид (0.35 ml, 3.7 mmol) и 0.35 gOT 10% Pd/C (50% влага) в 100 ml оцетна киселина се хидрира при налягане от 5 атмосфери в продължение на 5 h. Сместа се филтрува през Celite и се концентрират.
Остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получава 0.97 g (92%) от съединението от подзаглавието.
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта 8.74 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 4.38 (s, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.46 (s, 9H) (iii) Вос-Ь1Н-СН2-(2-(амино(триметилсилилетилимино)-метил)-5-пиридинил)
Към суспензия от Вос-ЬШ-СН2-(2-(амидино)-5-пиридинил) х НОАс (0.96 g, 3.1 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 75 ml THF се прибавя разтвор на калиев карбонат (1.07 g, 7.7 mmol) и Теос-р-нитрофенил карбонат (1.14 g, 4.02 mmol) в 15 ml вода. Сместа се разбърква цяла нощ. Прибавя се излишък от глицин и калиев карбонат, и реакцията продължава 2 h. THF се изпарява и остатъкът се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 9.31 (широк, 1Н), 8.52 (s, 1H), 8.41 (d, 1H), 8.35 (широк, 1H), 7.74 (d, 1H), 4.97 (широк, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.26 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.14 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (iv) Н2Н-СН2-(2-(амино (триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) x 2 HC1
Вос-МН-СН2-(2-(амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) (0.23 g, 0.58 mmol; виж етап (iii) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 min. Разтворителят се изпарява и продуктът се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.21 g (98%).
Ή NMR (500 MHz, D2O) делта 8.89 (s, 1H), 8.25 (s, 2H), 4.55 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 1.20 (m, 2H), 0.09 (s, 9H) (у)Вос-Аге-МН-СН,-(2-(амино(триметилсилилетилимино)-метил)-5-пиридинил)
Към разтвор на Н2Н-СН2-(2-(амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) х 2 НС1 (0.21 g, 0.57 mmol; виж етап (iv) по-горе), Boc-Aze-OH (0.127 g, 0.631 mmol), и TBTU (233 mg, 0.726 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диметиламинопиридин (269 mg, 2.20 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ, изсипва се в 100 ml вода и се екстрахира с EtOAc три пъти. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат и вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc, при което се получават 170 mg (56%) от желаното съединение.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 9.33 (широк, 1Н), 8.54 (s, 1H), 8.41 (d, 1H), 8.36 (широк, 1H), 7.75 (m, 1H), 4.72 (m, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.26 (m, 2H), 3.93 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 2.6-2.4 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.14 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (vi) Н-Аге-1МН-СН2-(2-(амино(триметилсилилетилимино)-метил)-5-пиридинил) x 2 HC1
Вос-Аге-ЛН-СН2-(2-амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) (170 mg, 0.356 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 min. Разтворителят се изпарява и продуктът се използва без допълнително пречистване. Добив: 160 mg (100%).
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта 9.00 (m, 1H), 8.84 (m, 1H), 8.23 (d, 2H), 8.10 (m, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.7-4.6 (m, 2H), 4.51 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2. 58 (m, 1H), 1.22 (m, 2H), 0.11 (s, 9H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-НН-СН2-(2-(амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил)
Към разтвор на H-Aze-NH-CH2-(2-(aMHно(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) х 2 НС1 (160 mg, 0.462 mmol; виж етап (vi) по-горе), Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(О)ОН (131 mg, 0.462 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) и РуВОР (263 mg, 0.505 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диизопропилетиламин (0.30 ml, 1.71 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ, из
66261 Bl сипва се в 100 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат и вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAciMeOH (95:5), при което се получава 148 mg (52%) от желаното съединение.
(viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-НН-СН2-(2-(метокси-амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил)
Суспензия от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)(R)CH(OH)-C(O)-Aze-NH-CH2-(2-(MeTOKCHaMHно(триметилсилилетилимино)метил)-5пиридинил) (148 mg, 0.242 mmol; виж етап (vii) по-горе) и О-метилхидроксиламин (202 mg, 2.42 mmol) в 10 ml ацетонитрил се загрява при 70°С в продължение на 3 h. Сместа се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровото вещество се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:MeOH (95:5), при което се получават 44 mg (28%) чисто вещество.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 8.55 (m, 1H), 8.05 (bt, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.58 (s, 1H),
7.56 (d, 1H), 7.22 (m, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 6.50 (t, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.55-4.45 (m, 2H), 4.38 (широк, 1H), 4.24.1 (m, 3H), 4.00 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 0,97 (m, 2H), 0.02 (s, 9H) (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-МН-СН2-((2-метоксиамидино)-5-пиридинил)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-(2-(метоксиамино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил) (44 mg, 0.069 mmol; виж етап (viii) по-горе) се разтваря в 2 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 h.
TFA се изпарява и остатъкът се разпределя между EtOAc и воден разтвор на натриев бикарбонат. Водната фаза се екстрахира с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 30 mg (88%). Чистота: > 95%.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 8.44 (m, 1H), 8.03 (bt, 1H), 7.91 (m, 1H), 7. 60 (m, 1H), 7.19 (m, 1H), 7.13 (m, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.52 (t, 1H), 5.65.45 (широк, 2H), 4.90 (s, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.55-4.4 (m, 2H), 4.27 (широк, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.68 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 13C-NMR (100 MHz; CDC13): (карбонил и/ или амидинови въглероди) делта 173.0, 170.9, 152.6
APCI-MS: (М + 1) = 498/500 m/z Пример 36
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-((5-амидино)-2-пиримидинил)
(1)2-Амино-2-иминоетилкарбамат.АСОН
N-Вос-аминоацетонитрил (40.2 g, 257.4 mmol) и N-ацетилцистеин (42. 0 g, 257.4 mmol) се разтварят в метанол (300 ml) при 60°С и в продължение на 18 h се пропуска амоняк. Разтворителят се отстранява във вакуум. След йонообменна хроматография (Amberlite IRA-400 (АсОН)) и рекристализация от ацетон, се получават 28.4 g (53%) от съединението от подзаглавието като бяло твърдо вещество.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 4.41 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 4.01 (s, 2H), 2.91 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.01 (s, 3H), 1.46 (s, 9H) (ii) 1,З-бис (диметиламино)-2-цианотриметиниев перхлорат
Разтвор на 3-диметиламиноакрилонитрил (25.0 g, 260.0 mmol) в хлороформ (75 ml) се прибавя на капки към разтвор на (хлорометилен)диметиламониев хлорид (50.0 g, 390.1 mmol) в хлороформ (175 ml) при 0°С. Реакционната смес се бърка допълнително 2 h при 0°С, след това се оставя да се затопли до стайна температура цяла нощ, след това впоследствие се загрява в продължение на 8 h при варене под обратен хладник. Разтворителят се отстранява във вакуум. Остатъкът се прибавя към смес от натриев перхлорат (110 g, 0.898 mmol) във вода (150 ml) и етанол (300 ml).
Сместа се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 15 min, след това се охлажда и се оставя да престои една нощ в хладилник. Утайката се събира и рекристализира от етанол, при което се получават 23.8 g (52%) от
66261 Bl съединението от подзаглавието като безцветни игли.
Т.т.: 140-141°С
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 8.24 (s, 2H), 3.59 (s, 6H), 3.51 (s, 6H) (ш)Вос-НН-СН2-(5-циано)-2-пиримидин
Смес от трет-бутил-2-амино-2-иминоетилкарбамат.АСОН (5.0 g, 23.8 mmol; виж етап (i) по-горе) и 1,3-бис(диметиламино)-2-цианотриметиниев перхлорат (6.0 g, 23.8 mmol; виж етап (ii) по-горе) в пиридин (300 ml) се разбърква под азот при 70-75°С в продължение на 16 h и след това се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 6 h. Сместа се охлажда до стайна температура и разтворителят се отстранява във вакуум. Остатъкът се екстрахира с гореща смес (1:1) от етилацетат и хлороформ, филтрува се през тънък слой от силикагел и се концентрира, при което се получава суровият продукт. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хлороформ се получават 4.0 g (71%) от съединението от заглавието като безцветно масло, което се втвърдява при стоене.
Т.т.: 86-87°С
Rf = 0.77 (силициев диоксид, 3:2 етилацетат/хлороформ)
Ή NMR (300 MHz, DMSO-d6) делта 9.25 (s, 2H), 7.39 (bt, 1H), 4.39 (d, J= 6Hz, 2H), 1.38 (s, 9H).
13C NMR (750 MHz, DMSO-d6) делта 170.4, 160.3, 155.8, 115.2, 106.9, 80.0, 46.3, 28.1
APCI-MS: (M + 1) = 235 m/z (iv) Вос-Аге-МН-СН2-((5-циано)-2-пиримидинил)
Вос-ИН-СН2-(5-циано )-2-пиримидин (1.14 g, 4.87 mmol; виж етап (iii) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 1 h и се концентрира. Остатъкът се разтваря в 20 ml DMF и се охлажда в ледена баня. Диизопропилетиламин (3.5 ml, 0.020 mol), Boc-Aze-OH (1.08 g, 5.37 mmol) и HATU (2.80 g, 5.38 mmol) се прибавят и реакционната смес се разбърква при стайна температура цяла нощ. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на CH3CN:0.1 М NH4OAc (40:60). Ацетонитрилът се изпарява и водната фаза се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се изсушават (MgSO4) и се изпаряват. Добив: 1.12 g (72%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 8.95 (s, 2H), 4.82 (d, 2H), 4.74 (m, 1H), 3.95 (m, 1H),
3.84 (m, 1H), 2.6-2.4 (m, 2H), 1.47 (s, 9H) (v) Вос-Аге-НН-СН2-((5-амидино)-2пиримидинил) x НОАс
Разтвор на Boc-Aze-NH-CH2-((5-miaHo)2-пиримидинил) (0.83 g, 2.6 mmol; виж етап (iv) по-горе), N-ацетилцистеин (0.43 g, 2.6 mmol) и амониев ацетат (0.60 g, 7.8 mmol) в 10 ml метанол се загрява при 60°С под азот в продължение на 2 дни. Разтворителят се изпарява и суровото вещество се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на градиент на CH3CN :0.1М NH4OAc (5:95 до 100:0). Желаните фракции се изсушават чрез замразяване, при което се получава 1.0 g (93%) от желаното съединение.
Ή NMR (300 MHz, D2O, сигнали, засенчени от HDO сигнала) делта 9.17 (s, 2Н), 4.13.9 (m, 2Н), 2.60 (т, 1Н), 2.29 (т, 1Н), 1.93 (s, ЗН), 1.44 (s, 9Н) (vi) Вос-Аге-НН-СН2-[(5-(амино(триметилсилилетилимино)-метил))-2 пиримидинил]
Към суспензия от Boc-Aze-NH-CH2-((5амидино)-2-пиримидинил) х НОАс (0.95 g, 2.41 mmol; виж етап (v) по-горе) в 50 ml THF се прибавя разтвор на Теос-р-нитрофенил карбонат (0. 85 g, 3.0 mmol) и калиев карбонат (1.0 g, 7.2 mmol) в 10 ml вода. Сместа се бърка в продължение на 24 h, концентрира се и се разпределя между вода и метиленхлорид. Органичната фаза се измива два пъти с наситен разтвор на воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с хептан:ЕЮАс (1:1). Добив: 1.04 g (90%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 9.16 (s, 2H), 4.80 (d, 2H), 4.73 (m, 1H), 4.26 (m, 2H), 4.0-3.8 (m, 2H), 2.6-2.4 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-МН-СН2-[(5-(амино(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил]
Вос-Аге4ЧН-СН2-[(5-(амино(триметилсилилетилимино)-метил))-2-пиримидинил] (0.209 g, 0.437 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 15 min. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разтваря в 4 ml DMF. Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH
66261 Bl (0.100 g, 0.396 mmol; виж Пример 1 (viii) погоре), PyBOP (0.231 g, 0.444 mmol) и диизопропилетиламин (0.208 g, 1.61 mmol) се прибавят и сместа се бърка в продължение на 80 min Реакционната смес се изсипва в 100 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на CH3CN:0.1MNH4OAc(1 : 1). Добив: 63 mg (26%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13, смес от ротамери) делта 9.3 (широк, 1Н), 9.03 (s, 2Н, второстепенен ротамер), 9.00 (s, 2Н, основен ротамер), 8.25 (m, 1Н, основен ротамер), 7.9 (широк, 1Н), 7.80 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-6.9 (т, ЗН), 6.50 (t, 1Н), 5.14 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 5.08 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.94 (s, 1Н, основен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.7-
4.4 (m, 2Н), 4.33.9 (т, ЗН), 3.74 (т, 1Н, основен ротамер), 2.7-2.1 (т, 2Н), 1.03 (т, 2Н), 0.01 (s, 9Н) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)А2е-МН-СН2-((5-амидино)-2-пиримидинил) х TFA
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-НН-СН2-[(5-(амино-(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил] (21 mg, 0.034 mmol; виж етап (vii) по-горе) се разтваря в 0.5 ml метиленхлорид и се охлажда в ледена баня. TFA (2 ml) се прибавя и сместа се бърка в продължение на 60 min и след това се концентрира. Продуктът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил. Добив: 20 mg (100%). Чистота: 100%.
‘Н NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери сигнали, засенчени от HDO сигнала) делта 9.08 (s, 2Н), 7.4-7.1 (т, ЗН), 6.88 (t, 1Н, основен ротамер), 6.85 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.30 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.22 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, основен ротамер), 4.73 (m, 1Н, основен ротамер), 4.34 (m, 1Н, ротамер), 4.21 (m, 1Н, ротамер), 4.153.95 (m, 2Н, ротамери), 2.73 (m, 1Н, ротамер),
2.57 (m, 1Н, ротамер), 2.45-2.25 (m, 2Н, ротамери) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 173.0, 172.6, 172.1, 171.0, 163.4.
APCI-MS: (М + 1) = 469/471 m/z
Пример 37
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-((5-метоксиамидино)-2-пиримидинил)
(i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)А2е-НН-СН2-[(5-(метоксиамино-(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил]
Суспензия от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(ОН)С(О)-А2е-МН-СН2-[(5-(амино(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил] (40 mg, 0.065 mmol; виж Пример 36 (vii) по-горе) и О-метилхидроксиламин (33 mg, 0.40 mmol) в 3 ml ацетонитрил се загрява при 70°С в продължение на 3 h. Сместа се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 33 mg (79%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13, смес от ротамери) делта 8.76 (s 2Н, основен ротамер), 8.70 (s, 2Н, ротамер), 8.18 (m, 1Н), 7.62 (s, 1Н), 7.46.9 (т, 4Н), 6.50 (bt, 1Н), 5.3-4.5 (т, 4Н), 4.24.05 (т, ЗН), 3.96 (s, ЗН), 3.68 (т, 1Н), 2.8-2.2 (т, 2Н), 2.1 (широк, 1Н), 0.96 (т, 2Н), 0.01 (s, 9Н) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Аге-НН-СН2-((5-метоксиамидино)-2-пиримидинил)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeНН-СН2-[(5-(метоксиамино-(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил] (33 mg, 0.052 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 0.5 ml метиленхлорид и се охлажда в ледена баня. TFA (2 ml) се прибавя и сместа се бърка в продължение на 2 h и след това концентрира. Продуктът се изсушава чрез замръзване от вода и ацетонитрил. Добив: 31 mg (81%). Чистота: 100%.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамер сигнали, засенчени от HDO сигнала) делта 8.96 (s, 2Н, ротамер), 8.94 (s, 2Н, ротамер), 7.464
66261 Bl
7.3 (m, 1H), 7.2-7.1 (m, 2H), 6.88 (t, 1Н,ротамер),
6.85 (t, 1H, ротамер), 5.29 (m, 1H, ротамер), 5.24 (s, 1H, ротамер), 5.20 (s, 1H, ротамер), 4.75-4.55 (m, 2H), 4.33 (m, 1H, ротамер), 4.19 (m, 1H, ротамер), 4.15-3.95 (m, 2H, ротамери), 3.88 (s, ЗН, ротамер), 3.86 (s, ЗН, ротамер), 2.72 (m, 1H, ротамер), 2.56 (m, 1H, ротамер), 2.45-2.25 (m, 2H, ротамери) ,3C-NMR(100 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 172. 8, 172.6, 172.1, 171.8, 167.8, 167.7, 155.1, 152.3, 152.1
APCI-MS: (М + 1) = 499/501 m/z
Пример 38
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (Ο) -Aze-Pab (3-F)
(i) 2-Флуоро-4-винилбензонитрил
Разтвор на 4-бромо-2-флуоробензонитрил (4.92 g, 0.0246 mol), винилтрибутилкалай (0.78 g, 0.246 mol), и тетракис-трифенилфосфин (0.67 g, 0.58 mmol) в 250 ml толуен се вари под обратен хладник под азот цяла нощ.
Разтворителят се изпарява и остатъкът се подлага на бърза хроматография върху силикагел с хептан :СН2С12 (1:1) до чист СН2С12. Получава се безцветно масло, което кристализира. Добив: 3.0 g (82%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 1.56 (m, 1H), 7.3-7.2 (m, 2H), 6.69 (m, 1H), 5.89 (d, 1H), 5.51 (d, 1H) (ii) 2-Флуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
В охладен разтвор (-78°С) на 2-флуоро-4винилбензонитрил (1.3 g, 8.8 mmol; виж етап (i) по-горе) в 40 ml СН2С12 и 5 ml метанол се барботира озон (50 1/h, 29 g/m3) в продължение на 30 min. Впоследствие се барботира аргон, за да се отстрани излишният озон. Прибавя се натриев борохидрид (0.67 g, 0.018 mol) и охлаждащата баня се отстранява. Сместа се разбърква и се оставя да реагира в продължение на 1 h. Сместа се изпарява и се прибавя 2М НС1. Сместа се екстрахира два пъти с диетилов етер и обединената етерна фракция се изсушава (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт кристализира. Добив: 1.1 g (81%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.59 (m, 1H), 7.3-7.2 (m, 2H), 4.79 (d, 2H), 2.26 (t, 1H) (ш)4-Циано-3-флуоробензилметансулфонат
2-Флуоро-4-хидроксиметилбензонитрил (1.3 g, 8.6 mmol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 50 ml СН2С12 и се охлажда в ледена баня. Прибавят се триетиламин (0.87 g, 8.6 mmol) и метансулфонилхлорид (0.99 g, 8.7 mmol). След разбъркване в продължение на 1.5 h реакционната смес се измива с 1М НС1. Органичната фаза се изсушава (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив на безцветно масло:
1.8 g (92%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 1.66 (m, 1H), 7.35-7.3 (m, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.07 (s, 3H) (iv) 4-Азидометил-2-флуоробензонитрил
Към охладен c лед разтвор на 4-циано-Зфлуоробензил-метансулфонат (1.8 g, 7.9 mmol; виж етап (iii) по-горе) се прибавя натриев азид (0.80 g, 0.012 mol). Сместа се разбърква цяла нощ и след това се изсипва в 200 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединената етерна фаза се измива пет пъти с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровото безцветно масло може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.2 g (87%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.64 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 2H), 4.47 (s, 2H) (v) 4-Аминометил-2-флуоробензонитрил
Към суспензия от калаен(П) хлорид дихидрат (0.45 g, 2.4 mmol) в 20 ml ацетонитрил при разбъркване се прибавя тиофенол (1.07 g, 9.7 mmol) и триетиламин (0.726 g, 7.17 mmol). След това се прибавя разтвор на 4-азидометил2-флуоробензонитрил (0.279 g, 1.58 mmol; виж етап (iv) по-горе) в няколко милилитра ацетонитрил. След 1.5 h, азидът е реагирал и разтворителят се изпарява. Остатъкът се разтваря в метиленхлорид и измива три пъти с 2М NaOH. Органичната фаза се екстрахира два пъти с 1М НС1. Обединените кисели водни фази се измиват с метиленхлорид и след това се алкализира
66261 Bl c 2M NaOH и се екстрахира три пъти с метиленхлорид. Органичната фаза се изсушава (Na2SO4) и се изпарява, при което се получава 0.172 g (72%) от желаното подзаглавие съединение, което може да се използва без допълнително пречистване.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.58 (m, 1H), 7.3-7.2 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 1.55-1.35 (широк, 2H) (vi) Boc-Aze-NHCH2-Ph(3-F, 4-CN)
Към охладен c лед разтвор на Boc-AzeОН (0.194 g, 0.96 mmol) в 5 ml DMF се прибавя TBTU (0.50 g, 9.6 mmol). След 30 min друг разтвор, включващ 4-аминометил-2-флуоро-бензонитрил (0.17 g, 0.81 mmol; виж етап (v) погоре) и се прибавя диизопропилетиламин (0.326 g, 2.53 mmol) в 7 ml DMF. Полученият разтвор се разбърква цяла нощ при стайна температура. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на CH3CN:0.1M NH4OAc (50:50). При сушене чрез замразяване се получават 0.237 g (74%) от желаното подзаглавно съединение.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD) делта 7.70 (m, 1H), 7.35-7.25 (m, 2H), 4.65-4.35 (m, 3H), 4.0-
3.85 (m, 2H), 2.51 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.40 (s, 9H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-NHCH2-Ph (3-F, 4-CN)
Boc-Aze-NHCH2-Ph (3-F, 4-CN) (0.118 g, 0.354 mmol; от етап (vi) по-горе) се разтваря в 30 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Реакционната смес се бърка в продължение на 20 min и се изпарява. Полученият дихидрохлорид и HATU (0.152 g, 0.400 mmol) се разтварят в 5 ml DMF. Този разтвор се прибавя към охладен с лед разтвор на Ph(3-Cl) (5OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.101 g, 0.400 mmol; виж Пример 1 (viii) погоре) в 5 ml DMF. Реакционната смес се бърка цяла нощ при стайна температура. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (50:50). При сушене чрез замразяване се получават 0.130 g (77%) от желаното подзаглавно съединение.
Ή NMR (500 MHz, CD3OD смес от ротамери) делта7.7-7.6 (m, 1Н), 7.357.1 (т, 5Н),
6.88 (t, 1Н, ротамер), 6.86 (t, 1Н, ротамер), 5.255.1 (m, 1Н плюс второстепенен ротамер от следващия протон), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер),
4.6-4.4 (m, 2Н), 4.36 (т, 1Н, основен ротамер), 4.18 (т, 1Н, основен ротамер), 4.07 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1Н, второстепенен ротамер) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(3-F)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeNHCH2-Ph(3-F, 4-CN) (0.130 g, 0.278 mmol; виж етап (vii) по-горе) се разтваря в 80 ml етанол, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя да реагира при стайна температура цяла нощ. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разтваря повторно в 100 ml етанол, наситен с NH3 (газ). Реакцията се оставя да протече бавно при стайна температура в продължение на два дни. Температурата се повишава до 50°С и взаимодействието продължава още 3 дни. Изходното вещество се изразходва и разтворителят се изпарява.
Продуктът се пречиства чрез препаративна RPLC и се изсушават при замръзване, при което се получават 17 mg (13%) от съединението от заглавието като НОАс сол.
Ή NMR (600 MHz, CD3OD смес от ротамери) делта 7.65-7.6 (m, 1Н), 7.47.3 (т, ЗН), 7.25-7.1 (т, 2Н), 7.15-6.7 (т, 1Н), 5.25-5.1 (т, 1Н плюс второстепенен ротамер от следващия протон), 4.8 (m, 1Н, основен ротамер частично скрит от CD3OH), 4.6-3.95 (m, 4Н), 2.69 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.56 (m, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.90 (s, ЗН) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 180.6, 173.4, 173.1, 172.9, 164.5, 162.3,
159.8
APCI-MS: (М + 1) = 485/487 m/z
Пример 39
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-
Pab (2,6-диЕ) ο ,, F
Ο M >=\ ,NH
-d M-
ίίΊ F
OCHFj
66261 Bl
i) 2,6-дифлуоро-4[(метилсулфинил)(метилтио)метил] бензонитрил (Метилсулфинил)(метилтио)метан (7.26 g, 0.0584 mol) се разтваря в 100 ml сух THF под аргон и се охлажда до -78°С. На капки при разбъркване се прибавя бутиллитий в хексан (16 ml 1.6 М, 0.0256 mol). Сместа се бърка в продължение на 15 min. Междувременно, разтвор на
3,4,5-трифлуоробензонитрил (4.0 g, 0.025 mmol) в 100 ml сух THF се охлажда до -78 °C под аргон и първият разтвор се прибавя през канюла към последния разтвор в продължение на 35 min. След 30 min, охлаждащата баня се отстранява и когато реакционната смес достигне стайна температура се изсипва в 400 ml вода. THF се изпарява и останалата водна фаза се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединената етер фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 2.0 g (30%).
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 7.4-7.25 (m, 2H), 5.01 (s, 1H, диастереоизомер), 4.91 (s, 1H, диастереоизомер), 2.88 (s, 3H, диастереоизомер), 2.52 (s, ЗН, диастереоизомер), 2.49 (s, ЗН, диастереоизомер), 2.34 (s, 3H, диастереоизомер), 1.72 (широк, 1H) (п)2,6-дифлуоро-4-формилбензонитрил
2.6- Дифлуоро-4-[(метилсулфинил)(метилтио)метил] бензонитрил (2.17 g, 8.32 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 90 ml THF и се прибавя 3.5 ml концентрирана сярна киселина. Сместа се оставя при стайна температура в продължение на 3 дни и впоследствие се изсипва в 450 ml вода. Екстрахира се три пъти с EtOAc и обединената етерна фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев бикарбонат и със солев разтвор, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 1.36 g (98%). Позицията на формиловата група се установява с 13С NMR. Сигналът на флуорираните въглероди при 162.7 ppm показва очакваната схема на купелуване с две свързващи константи при 260 Hz и 6.3 Hz респективно, съответстващи на ипсо и мета връзка на флуорните атоми.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 10.35 (s, 1H), 7.33 (m, 2H) (ш)2,6-Дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
2.6- Дифлуоро-4-формилбензонитрил (1.36 g, 8.13 mmol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 25 ml метанол и се охлажда на ледена баня.
Натриев борохидрид (0.307 g, 8.12 mmol) се прибавя на порции при разбъркване и реакционната смес се оставя в продължение на 65 min. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между диетилов етер и воден разтвор на натриев бикарбонат. Етерната фаза се измива с допълнително воден разтвор на натриев бикарбонат и солев разтвор, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт кристализира бързо и може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.24 g (90%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.24 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 2.10 (широк, 1H) (iv) 4-Циано-2,6-дифлуоробензилметансулфонат
Към охладен с лед разтвор на 2,6-дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил (1.24 g, 7.32 mmol; виж етап (iii) по-горе) и метансулфонилхлорид (0.93 g, 8.1 mmol) в 60 ml метиленхлорид се прибавя триетиламин (0.81 g, 8.1 mmol) при разбъркване. След 3 h при 0°С, сместа се измива два пъти с IM НС1 и веднъж с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.61 g (89%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.29 (m, 2H), 5.33 (s, 2H), 3.07 (s, 3H) (v) 4-Азидометил-2,6-дифлуоробензонитрил
Смес от 4-циано-2,6-дифлуоробензилметансулфонат (1.61 g, 6.51 mmol; виж етап (iv) по-горе) и натриев азид (0.72 g, 0.0111 mol) в 10 ml вода и 20 ml DMF се разбърква при стайна температура цяла нощ. Получената смес впоследствие се изсипва в 200 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединените етерни фази се измиват пет пъти с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. За целите на NMR се изпарява малка проба и веществото кристализира. Остатъкът се изпарява внимателно, но не до пълно изсъхване. Добив (теоретичен 1.26 g) се счита приблизително за количествен на база на NMR и аналитична HPLC.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.29 (m, 2H), 4.46 (s, 2H) (vi) 4-Аминометил-2,6-дифлуоробензонитрил
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в J. Chem. Res. (Μ) (1992) 3128. Към суспензия от 520 mg 10% Pd/C (50%
66261 Bl влага) в 20 ml вода се прибавя разтвор на натриев борохидрид (0.834 g, 0.0221 mol) в 20 ml вода. Наблюдава се известно газоотделяне. 4Азидометил-2,6-дифлуоробензонитрил (1.26 g, 6.49 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в 50 ml THF и се добавя към водната смес в ледена баня за 15 min. Сместа се бърка в продължение на 4 h, след което се добавят 20 ml 2М НС1 и сместа се филтрува се през Celite. Целитният филтър се промива с още вода и обединената водна фаза се измива с EtOAc и впоследствие се прави алкална с 2М NaOH. Екстрахира се три пъти с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 0.87 g (80%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.20 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 1.51 (широк, 2H) (vii) 2,6-Дифлуоро-4-трет-бутоксикарбониламинометил-бензонитрил
Разтвор на 4-аминометил-2,6-дифлуоробензонитрил (0.876 g, 5.21 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 50 ml THF и се прибавя ди-трет-бутил бикарбонат (1.14 g, 5.22 mmol) в 10 ml THF. Сместа се бърка в продължение на
3.5 h. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива три пъти с 0.5 М НС1 и вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.38 g (99%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.21 (m, 2H), 4.95 (широк, 1H), 4.43 (широк, 2H), 1.52 (s, 9H) (viii) Вос-РаЬ(2,6-диЕ) (OH)
Смес от 2,6-дифлуоро-4-трет-бутоксикарбонил-амино-метилбензонитрил (1.38 g, 5.16 mmol; виж етап (vii) по-горе), хидроксиламин хидрохлорид (1.08 g, 0.0155 mol) и триетиламин (1.57 g, 0.0155 mol) в 20 ml етанол се разбърква при стайна температура в продължение на 36 h. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид. Органичната фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.43 g (92%).
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта Ί. 14 (m, 2H), 4.97 (широк, 1Н), 4.84 (широк, 2Н), 4.40 (широк, 2Н), 1.43 (s, 9Н) (ix) Boc-Pab (2,6-диЕ) х НОАс
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан от Judkins et al., Synth. Comm. (1998) 4351. Вос-РаЬ(2,6-диР) (OH) (1.32 g, 4.37 mmol; виж етап (viii) по-горе), оцетен анхидрид (0.477 g, 4.68 mmol) и 442 mg от 10% Pd/C (50% влага) в 100 ml оцетна киселина се хидрира при 5 atm налягане в продължение на 3.5 h. Сместа се филтрува през Celite, промива се с етанол и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замразяване от ацетонитрил и вода и няколко капки етанол. Подзаглавното съединение може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.1.49 g (99%).
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) b 7.45 (m, 2H), 4.34 (s, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.40 (s, 9H) (x) Boc-Pab(2,6-nnF) (Teoc)
Към разтвор на Boc-Pab (2,6-диЕ) x НОАс (1.56 g, 5.49 mmol; виж етап (ix) по-горе) в 100 ml THF и 1 ml вода се прибавя 2-(триметилсилил)етил р-нитрофенил карбонат (1.67 g, 5.89 mmol). Разтвор на калиев карбонат (1.57 g, 0.0114 mol) в 20 ml вода се прибавя на капки за 5 min. Сместа се разбърква цяла нощ. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. След бърза хроматография върху силикагел с хептан/EtOAc = 2/1 се получават 1.71 g (73%) чисто съединение.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.43 (m, 2H), 4.97 (широк, 1Н), 4.41 (широк, 2Н), 4.24 (m, 2Н), 1.41 (s, 9Н), 1.11 (m, 2Н), 0.06 (s, 9Н) (xi) Вос-Аге-РаЬ(2,6-диЕ)(Теос)
Boc-Pab(2,6-flnF) (Teoc) (1.009 g, 2.35 mmol; виж етап (x) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя в продължение на 10 min, изпарява се и се разтваря в 18 ml DMF, и след това се охлажда на ледена баня. Прибавят се Boc-Aze-OH (0.450 g, 2.24 mmol), PyBOP (1.24 g, 2.35 mmol) и накрая диизопропилетиламин (1.158 g, 8.96 mmol).
Реакционната смес се бърка в продължение на 2 h и след това се изсипва в 350 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с хептан:ЕЮАс (1:3) се получават 1.097 g (96%)
66261 Bl от желаното съединение.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 7.46 (m, 2Н), 4.65-4.5 (m, ЗН), 4.23 (m, 2Н), 3.87 (m, 1Н), 3.74 (m, 1H), 2.45-2.3 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.10 (m, 2H), 0.05 (s, 9H) (xii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (2,6-диР) (Teoc)
Boc-Aze-Pab(2,6-flnF) (Teoc) (0.256 g, 0.500 mmol; виж етап (xi) по-горе) се разтваря в 20 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя за 10 min и се изпарява и се разтваря в 5 ml DMF. Добавят се Ph(3-Cl) (5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)OH (0.120 g, 0.475 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), РуВОР (0.263 g, 0.498 mmol) и накрая диизопропилетиламин (0.245 g, 1.89). Реакционната смес се бърка в продължение на 2 h и след това се изсипва в 350 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с EtOAc се получават 0.184 g (60%) от желаното подзаглавно съединение.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) делта 7.55-7.45 (m, 2Н), 7.32 (т, 1Н, основен ротамер), 7.27 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-7.1 (m, 2Н), 6. 90 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, основен ротамер), 5.12 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.06 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.45 (m, 2Н), 4.30 (т, 1Н, основен ротамер), 4.24 (т, 2Н), 4.13 (т, 1Н, основен ротамер), 4.04 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.95 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.62 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н, основен ротамер), 2.22 (m, 1Н, основен ротамер), 2.10 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.07 (т, 2Н), 0.07 (m, 9Н) (xiii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(2,6-flnF)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (2,6-диР) (Teoc) (81 mg, 0.127 mmol; виж етап (xii) по-горе) се разтваря в 0.5 ml метиленхлорид и се охлажда на ледена баня. TFA (3 ml) се прибавя и реакционната смес се оставя за 75 min. The TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода и ацетонитрил. Суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN : 0.1М NH4OAc (35:65), при което се получават 39 mg (55%) от съединението от заглавието под формата на НОАс сол, чистота: 99%.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD смес от ротамери) делта 7.5-7.4 (m, 2Н), 7.32 (т, 1Н, основен ротамер), 7.28 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-7.1 (т, ЗН), 6.90 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, основен ротамер), 5.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.07 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, основен ротамер), 4.65-
4.45 (m, 2Н), 4.30 (т, 1Н, основен ротамер), 4.16 (т, 1Н, основен ротамер), 4.03 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.95 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.63 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н, основен ротамер), 2.21 (m, 1Н, основен ротамер), 2.07 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН) 13C-NMR (75 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 171.9, 171.2, 165.0, 162.8, 160.4
APCI-MS: (М + 1) = 503/505 m/z.
Пример 40
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(2,6-flnF) (ОМе)
(i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(2,6-flnF) (OMe, Teoc)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) C(O)-Aze-Pab(2,6-flHF) (Teoc) (64 mg, 0.099 mmol; виж Пример 39 (xii) по-горе) и О-метил хидроксиламин хидрохлорид (50 mg, 0.60 mmol) в 4 ml ацетонитрил се загрява при 70°С в продължение на 3 h. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 58 mg (87%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 7.90 (bt, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.25-6.95 (m, SH), 6.51, t, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.83 (m, 1H), 4.6-4.5 (m, 2H), 4.4-3.9 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 3.63 (m, 1H), 2.67
66261 Bl (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 1.87 (широк, 1H), 0.98 (m, 2H), 0.01 (s, 9H) (ii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) C (O)-Aze-Pab (2,6-диР) (OMe)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (2,6-диР)-(ОМе, Teoc) (58 mg, 0.086 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 3 ml TFA, охлажда се на ледена баня и се оставя да реагира в продължение на 2 h. TFA се изпарява и остатъкът се разтваря в EtOAc. Органичната фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев карбонат и вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 42 mg (92%) от съединението от заглавието. Чистота: 94%.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.95 (bt, 1H), 7.2-7.1 (m, 4H), 6.99 (m, 1H), 6. 52 (t, 1H),
4.88 (s, 1H), 4.85-4.75 (m, 3H), 4.6-4.45 (m, 2H), 4.29 (широк, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.69 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 1.85 (широк, 1H) 13C-NMR (100 MHz; CDC13): (карбонил и/ или амидинови въглероди) делта 172.1, 169.8,
151.9
APCI-MS: (М + 1) = 533/535 m/z
Пример 41
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (2,5-диР)
(i) 2,5-Дифлуоро-4-[(метилсулфинил)(метилтио)метил] бензонитрил (Метилсулфинил)(метилтио)метан (3.16 g, 0.0255 mol) се разтваря в 50 ml сух THF под аргон и след това се охлажда до -78°С. При разбъркване се добавя на капки бутиллитий в хексан (16 ml 1.6М, 0.0256 mol). Сместа се бърка в продължение на 15 min. Междувременно разтворът на 2,4,5-трифлуоробензонитрил (2.0 g; 0.013 mol) в 50 ml сух THF се охлажда до 78°С под аргон и първият разтвор се прибавя за 3-5 min през канюла към последния разтвор.
След 30 min, охлаждащата баня се отстранява и когато реакционната смес достигне стайна температура тя се изсипва в 200 ml вода. THF се изпарява и останалата водна фаза се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединените етерни фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт започва да кристализира и може да се използва като такъв в следващия етап. Добив: 2.8 g (84%).
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 7.51 -7.44 (m, 2H, основен диастереоизомер), 7.39 (dd, 1 Η, второстепенен диастереоизомер), 5. 00 (s, 1Н, второстепенен диастереоизомер), 4.92 (s, 1Н, основен диастереоизомер), 2.59 (s, ЗН, второстепенен диастереоизомер), 2.56 (s, 1Н, основен диастереоизомер), 2.46 (s, 1Н, второстепенен диастереоизомер), 2.40 (s, 1Н, основен диастереоизомер) (П)2,5-Дифлуоро-4-формилбензонитрил
2.5- Дифлуоро-4-[(метилсулфинил)(метилтио)метил]бензонитрил (2.8 g, 0.0107 mol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 100 ml THF и се прибавят 6.5 g концентрирана сярна киселина. Сместа се оставя при стайна температура в продължение на 6 дни и впоследствие се изсипва в 500 ml вода. Екстрахира се три пъти с диетилов етер и обединената етерна фаза се измива няколко пъти с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел при използване на хептан:ЕЮАс (8:2). Добив: 1.2 g (67%). Позицията на формиловата група се установява чрез използване на ,3С NMR. Сигналите на въглерода от флуорираните въглероди при 160.1 и 15 8.4 респективно, са дублети а не квартети, каквито щяха да бъдат ако формиловата група би била във 2-ра позиция.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 10.36 (d, 1H), 7.72 (dd, 1H), 7.54 (dd, 1H) (ш)2,5-Дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
2.5- Дифлуоро-4-формилбензонитрил (3.60 g, 0.0215 mol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 50 ml метанол и се охлажда на ледена баня. Натриев борохидрид (0.815 g, 0.0215 mol) се прибавя на порции при разбъркване и реакционната смес се оставя в продължение на 45 min. Прибавя се вода (300 ml) и след това внимателно се прибавя 2М НС1 докато се постигне кисело pH. Сместа се екстрахира три пъти с ди
66261 Bl етилов етер и обединената етерна фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт кристализира бързо и може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 3.1 g (85%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.45 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 4.85 (s, 2H), 2.10 (широк, 1H) (iv) 4-Циано-2,5-дифлуоробензилметансулфонат
Към охладен с лед разтвор на 2,5-дифлуоро-4-хидрокси-метилбензонитрил (3.10 g, 0.0183 mol; виж етап (iii) по-горе) и метансулфонилхлорид (2.21 g, 0.0192 mol) в 60 ml метиленхлорид се прибавя триетиламин (1.95 g, 0.0192 mol) при разбъркване. След 1.5 h при 0°С сместа се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 4.5 g (99%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.45-7.35 (m, 2H), 5.32 (s, 2H), 3.13 (s, 3H) (у)4-Азидометил-2,5-дифлуоробензонитрил
Смес от 4-циано-2,5-дифлуоробензилметансулфонат (4.5 g, 0.0182 mol; виж етап (iv) погоре) и натриев азид (2.0 g, 0.031 mol) в 20 ml вода и 40 ml DMF се разбърква при стайна температура в продължение на 2 h. Впоследствие се изсипва в 300 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединените етерни фази се измиват няколко пъти с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Малка проба се изпарява за целите на NMR и веществото кристализира. Остатъкът се изпарява внимателно, но не до пълно изсъхване. Добив (теоретичен 3.5 g) отговаря приблизително на количествения на база на NMR и аналитична HPLC.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 38 (dd, IE), 7.32 (dd, 1H), 4.54 (s, 2H) (vi) 4-Аминометил-2,5-дифлуоробензонитрил
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в J. Chem. Res. (Μ) (1992) 3128. Към суспензия от 300 mg 10% Pd/C (50% влага) в 20 ml вода се прибавя разтвор на натриев борохидрид (0.779 g, 0.0206 mol) в 20 ml вода. Наблюдава се слабо отделяне на газ. 4Азидометил-2,5-дифлуоробензонитрил (1.00 g, 5.15 mmol; от етап (v) по-горе) се разтваря в 60 ml THF и се добавя към водна сме на ледена баня. Сместа се бърка в продължение на 1.5 h, след което се прибавят 10 ml 2М НС1 и сместа се филтрува през Celite. Филтърът Celite се изплаква с повече вода и обединената водна фаза се измива с EtOAc и впоследствие се алкализира с 2М NaOH. Екстрахира се три пъти с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 0.47 g (54%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.39 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 3.99 (s, 2H), 1.45 (широк, 2H) (vii) 2,5-Дифлуоро-4-трет-бутоксикарбониламинометил-бензонитрил
Разтвор на 4-аминометил-2,5-дифлуоробензонитрил (0.46 g, 2.7 mmol; виж етап (vi) погоре) и ди-трет-бутил бикарбонат (0.60 g, 2.7 mmol) в 10 ml THF се разбърква цяла нощ. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0:71 g (97%).
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 7.35-7.2 (m, 2H), 5.11 (широк triplet, 1H), 4.38 (d, 2H),
1.45 (s, 9H) (viii) Вос-РаЬ(2,5-диР) (OH)
Смес от 2,5-дифлуоро-4-трет-бутоксикарбониламинометил-бензонитрил (0.70 g, 2.6 mmol; виж етап (vii) по-горе), хидроксиламин хидрохлорид (0.54 g, 7.8 mmol) и триетиламин (0.79 g, 7.8 mmol) в 10 ml етанол се разбърква при стайна температура в продължение на 6 дни. След това се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.72 g (92%).
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта 7.27 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.29 (s, 2H), 1.47 (s, 9H) (ix) Boc-Pab (2,5-диР) x HOAc
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан от Judkins et al., Synth. Comm. (1998) 4351. Вос-РаЬ(2,5-диЕ) (OH) (0.70 g, 2.3 mmol; виж етап (viii) no-rope), оцетен анхидрид (0.25 g, 2.4 mmol) и 230 mg 10% Pd/C (50% влага) в 70 ml оцетна киселина се хидрира при 5 atm налягане в продължение на
66261 Bl
2.5 h. Сместа се филтрува през Celite и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от ацетонитрил и вода. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване в следващия етап. Добив: 0.80 g (100%).
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта 7.49 (dd, 1H), 7.31 (dd, 1H), 4.33 (s, 2H), 1.91 (s, 3H),
1.46 (s, 9H) (x) Boc-Pab(2,5-flnF) (Teoc)
Към суспензия от Вос-РаЬ(2,5-диР) х НОАс (0.80 g, 2.3 mmol; виж етап (ix) по-горе) в 50 ml THF се прибавя 2-(триметилсилил)етил р-нитрофенил карбонат (0.85 g, 3.0 mmol). Разтвор на калиев карбонат (0.80 g, 5.8 mmol) в 10 ml вода се прибавя на капки. Сместа се разбърква цяла нощ. Излишъкът от Теос се неутрализира чрез добавяне на глицин (0.100 g) и калиев карбонат (0.75 g) към разтвора, като се оставя да реагира допълнително още 2 h. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. След бърза хроматография върху силикагел с хептан:ЕЮАс (2:1) се получават 0.72 g (72%) чисто съединение.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 8.00 (dd, 1Н), 7.15 (dd, 1H), 4.98 (широк, 1H), 4.36 (bd, 2H), 4.24 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.12 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (xi) H-Pab (2,5-диР) (Teoc) x 2 HC1
Boc-Pab (2,5-ahF) (Teoc) (0.38 g, 0.88 mmol; виж етап (x) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя в продължение на 30 min и се изпарява.
Ή NMR (500 MHz, CD3OD) делта 7.75-
7.6 (m, 2H), 4.46 (m, 2H), 4.3 (s, 2H), 1.15 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (xii) Вос-Аге-РаЬ(2,5-диР)(Теос)
При разбъркване към разтвор на Boc-AzeОН (0.189 g, 0.94 mmol), H-Pab(2,5diF)(Teoc) х 2 НС1 (0.36 g, 0.89 mmol; виж етап (xi) по-горе) и РуВОР (0.54 g, 1.03 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диизопропилетиламин (0.49 g, 3.8 mmol) и сместа се оставя да реагира цяла нощ. Полученото, след това се изсипва във воден разтвор на натриев бикарбонат и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с хептан:ЕЮАс (3:7) се получава достатъчно чисто съединение. Добив: 0.25 g (48%).
Ή NMR (500 MHz, CDC13) делта 7.98 (dd, 1H), 7.13 (dd, 1H), 4.69 (m, 1H), 4.53 (m, 2H), 4.22 (m, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 2.552.35 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.11 (m, 2H), 0.06 (s, 9H) (xiii) Н-Аге-РаЬ(2,5-диР)(Теос) x 2 HCI
Boc-Aze-Pab(2,5-flHF) (Teoc) (0.25 g, 0.49 mmol; виж етап (xii) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя за 30 min и се изпарява. Продуктът се използва в следващия етап без допълнително пречистване. Добив: 0.23 g (97%).
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) делта 7.59 (dd, 1H), 7.47 (dd, 1H), 05.14 (m, 1H), 4.54 (m, 2H), 4.48 (m, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.56 (m, 1H), 1.17 (m, 2H), 0.05 (s, 9H) (xiv) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (2,5-ahF) (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)OH (0.12 g, 0.47 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), H-Aze-Pab(2,5-flnF) (Teoc) x 2 HCI (0.23 g, 0.47 mmol; виж етап (xiii) по-горе) и РуВОР (0.27 g, 0.52 mmol) в 10 ml DMF се прибавя диизопропилетиламин (0.245 g, 1.90 mmol) и сместа се разбърква цяла нощ. Полученото се изсипва във вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с EtOAc се получават 100 mg чиста фракция и 30 mg фракция с 90% чистота. Общ добив: 0.13 g (41%).
Ή NMR (400 MHz, CDC13) делта 9.80 (широк, 1H), 8.05 (bt, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.2-7.1 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 6.54 (t, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.91 (m, 1H), 4.51 (m, 2H), 4.28 (широк, 1H), 4.23 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 1.73 (широк, 1H), 1.11 (m, 2H), 1.11 (s, 9H) (xv) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(2,5-flnF)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeРаЬ(2,5-диР)-(Теос) (60 mg (0.093 mmol) от чистата фракция от етап (xiv) по-горе) се разтваря в 3 ml TFA и се оставя при стайна температура в продължение на 1 h. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 55 mg (96%)
66261 Bl от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол, Чистота: > 99%.
Ή NMR (500 MHz, CD3OD смес от ротамери) делта 7.55-7.3 (т, ЗН), 7.2-7.1 (т, 2Н),
6.88 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.22 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, основен ротамер), 5.13 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.45 (m, 2Н), 4.36 (т, 1Н, основен ротамер), 4.19 (т, 1Н, основен ротамер), 4.07 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (75 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, смес от ротамери) делта 173.0, 172.6, 172.1, 172.0, 162.4
APCI-MS: (М +1) = 503/505 m/z
Пример 42
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R) СН (OH) C (0)Aze-Pab (2,5-диР) (OMe)
(i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)AzePab(2,5-flnF)-(OMe, Teoc)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH) C(O)-Aze-Pab (2,5-ahF) (Teoc) (40 mg, 0.062 mmol; виж Пример 41 (xiv) по-горе) и О-метил хидроксиламин хидрохлорид (58 mg, 0.70 mmol) в 5 ml ацетонитрил се загрява при 70°С в продължение на 2 h. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 35 mg (84%).
Ή NMR (600 MHz, CDC13) делта 7.99 (bt, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.20 (m, 1H) 7.15-7.1 (m, 1H), 7.07 (dd, 1H), 7.01 (m, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.48 (m, 2H), 4.2-4.1 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.67 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 0.97 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (2,5-диР) (OMe)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (2,5-диР) (OMe, Teoc) (35 mg, 0.052 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 30 min. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава при замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 29 mg (99%) от съединението от заглавието. Чистота: 97%.
Ή NMR (300 MHz, CDC13) делта 8.01 (bt, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.15 (m, 1H), 7.09 (dd, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.54 (t, 1H), 5.2-5.0 (m, 2H), 4.95-4.85 (m, 2H), 4.6-4.4 (m, 2H), 4.25 (широк, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.71 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.43 (m, 1H) 13C-NMR (75 MHz; CDC13): (карбонил и/ или амидинови въглероди) делта 173.0, 170.9,
152.6
APCI-MS: (М + 1) = 533/535 m/z.
Пример 43
Ph(3 -Cl) (5 -OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (OEt) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OEt, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Teoc) (55 mg, 0.090 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) и О-етилхидроксиламин хидрохлорид (53 mg, 0.54 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60°С в продължение на 5 h. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуира се с метиленхлорид:метанол (95:5), при което се получават 55 mg (93%) от съединението от подзаглавието.
Ή NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.84 (bt, 1H), 7.59 (bs, 1H), 7.47 (bd, 1H), 7.29 (bd, 1H),
7.21 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.55-4.4 (m, 2H), 4.25-4.1 (m, SH), 3.69 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 1.33 (t, 3H), 0.98 (m, 2H), 0.02 (s, 9H) (ii) Ph (З-Cl, 5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OEt)
Към леденостуден разтвор на Ph(3-Cl) (5OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (OEt, Teoc) (55 mg, 0.084 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 160 min. Съединението се пречиства, като се из
66261 Bl ползва препаративна HPLC.
Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х), при което се получават 20 mg (47%) от съединението от заглавието.
Ή-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.59 (bd, 2Н), 7.35 (m, 1Н), 7.32 (bd, 2Н), 7.257.1 (т, 2Н), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н, основен ротамер), 5.18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.11 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н), 4.5-4.3 (т, ЗН), 4.2-3.9 (т, ЗН), 2.67 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (т, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.28 (t, ЗН) l3C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/ или амидинови въглероди, ротамери) делта 172.4, 171.9, 171.4, 153.8, 152.3
MS (m/z) 509 (Μ - 1)', 511 (Μ + 1)+
Пример 44
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OnPr) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab(OnPr,zTeoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Teoc) (53 mg, 0.087 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) и O-n-пропил-хидроксиламин хидрохлорид, 58 mg (0.52 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60°С в продължение на 5 h. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуира се с метиленхлорид:метанол (95:5), при което се получават 51 mg (88%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.84 (m, 1Н), 7.59 (bs, 1H), 7.47 (bd, 2Hb 7.28 (bd, 2H),
7.21 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.55-4.4 (m, 2H), 4.2-4.05 (m, 5H), 3.69 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 1.74 (m, 2H), 1.05-0.95 (m, SH), 0.03 (s, 9H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OnPr)
Към леденостуден разтвор на Ph(3-Cl) (5OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (OnPr, Teoc) (51 rag, 0.078 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 110 min. Веществото се пречиства, като се използва препаративна HPLC. Желаните фракции се изпаряват и изсушават при замръзване, при което се получават 20 mg (47%) от съединението от заглавието.
Ή-NMR (500 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.61 (bd, 2Н), 7.38 (m, 1Н), 7.35 (bd, 2Н), 7.22 (т, 1Н, основен ротамер), 7.18 (т, 1Н), 7.15 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 6.92 (t, 1Н, основен ротамер), 6.89 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, основен ротамер), 5.20 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-4.4 (m, 2Н, включващ второстепенен ротамер, съответстващ на основен при 4.37), 4.37 (m, 1Н, основен ротамер), 4.18 (m, 1Н, основен ротамер), 4.09 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.99 (m, 2Н), 2.70 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.73 (m, 2Н), 1.01 (t, ЗН) 13C-NMR (125 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 171.4, 153.8, 152.3
MS (m/z) 523 (М-1)-, 525 (Μ + 1)+
Пример 45
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OiPr) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OiPr, Teoc)
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab (Teoc) (50 mg, 0.082 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) и О-изопропил-хидроксиламин хидрохлорид, 55 mg (0.49 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60°С в продължение на 5 h. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуира се с метиленхлорид:метанол (95:5), при което се получават 46 mg (84%) от съединението от подзаглавието.
Ή-NMR (400 MHz; CDC13): делта 7.84 (m, 1Н), 7.57 (bs, 1H), 7.48 (bd, 2H), 7.29 (bd, 2H),
7.21 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.55-4.45 (m, 2H), 4.42 (m, 1H), 4.2-4.1 (tn, 3H), 3.69 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 2. 42 (m, 1H), 1.30 (d, 6H), 0.98 (m, 2H), 0.02 (s, 9H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab (OiPr)
Към леденостуден разтвор на Ph(3-Cl)(5OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (OiPr, Teoc)
66261 Bl (46 mg, 0.069 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 150 min. Веществото се пречиства, като се използва препаративна HPLC.
Желаната фракция се изпарява и се изсушава при замръзване (2х), при което се получават 22 mg (58%) от съединението от заглавието.
'H-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: делта 7.59 (d, 2Н), 7.35 (m, 1Н), 7.32 (d, 2H), 7.19 (m, 1H, основен ротамер), 7.15 (m, 1 Η), 7.12 (m, 1H, второстепенен ротамер), 6.89 (t, 1H, основен ротамер), 6.86 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1H, основен ротамер), 5.18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.12 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1Н, основен ротамер), 4.53.9 (m, 5Н), 2.67 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.26 (d, 6Н) l3C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) делта 171.9, 171.4, 153.6.
MS (m/z) 523 (M-l)-, 525 (Μ + 1)+
Пример 46
Заглавните съединения от примери 3,6,9, 10, 13 до 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 28, 32, 34, 36, 38, 39 и 41 се изследват в тест А по-горе и се установява, че проявяват 1С50ТТ стойности от по-малки от 3.5 microM. Тези от примери 3, 6, 9, 10, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 27, 32, 34 и 39 показват стойности от по-малко от 0.02 microM; тези от примери 25 и 28 - по-малко от 0.03 microM, това от Пример 14 по-малко от 0.04 рМ; и those от примери 38 и 41 по-малко от 0.15 microM.
Пример 47
Заглавните съединения от примери 3, 6, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 28, 32 и 34 се изпитват в тест D по-горе и при което се установи, че притежават IC50 АРТТ стойност от по-малка от 1 microM.
Пример 48
Заглавните съединения от примери 1,2,4, 5, 7, 12, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 29, 30, 33 и 43 до 45 се изпитват в тест Е по-горе и при което се установи, че проявяват орална и/или парентерална бионаличност в плъх като съответният активен инхибитор (свободен амидин).
Пример 49
Заглавните съединения от примери 1,2,7, 8, 11, 12, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 29,33,37,40, 43 и 45 се изпитват в тест G по-горе и се установи, че се превръщат в съответния активен инхибитор (свободен амидин) в чернодробни микрозоми от хора и от плъхове.
Съкращения
Ас = ацетил
АсОН = оцетна киселина
APCI = атмосферно налягане химическа йонизация (спрямо MS)
API = атмосферно налягане йонизация (спрямо MS) aq. = воден разтвор на
AUC = площ под кривата
Aze = (8)-ацетидин-2-карбоксилат (ако не е посочено друго)
AzeOH = ацетидин-2-карбоксилна киселина
Вп = бензил
Вос = трет-бутилоксикарбонил
BSA = телешки серумен албумин
Ви = бутил
Bzl = бензил
CI = химическа йонизация (спрямо MS) d = ден (и)
DCC = дициклохексил карбодиимид
DIBAL-H=ди-изобутилалуминиев хидрид
DIPEA = диизопропилетиламин
DMAP 4-(П,П-диметиламино)пиридин
DMF = диметилформамид
DMSO = диметилсулфоксид
DVT = тромбоза на вътрешни вени
EDC = 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид
е. е. = енантиомерен излишък
Et = етил етер = диетилов етер
EtOAc = етилацетат
EtOH = етанол
Et2O = диетилов етер h = час (d)
HATU = О-(азабензотриазол-1-ил)Ν,Ν ,Ν ’ ,Ν ’ -тетраметилурониев хексафлуорофосфат
HBTU = [N,N,N’,N’-TeTpaMeTwi-O-(6eH3OTриазол-1 -ил)урониев хексафлуорофосфат]
НС1 = солна киселина, хлороводороден газ или хидрохлоридна сол (в зависимост от контекста)
66261 Bl
Hex = хексан
HOAc = оцетна киселина
HPLC = високоефективна течна хроматография
LC = течна хроматография
Ме = метил
МЕМ = метоксиетоксиметил
МеОН = метанол
Min = минута (и)
MS = масспектроскопия
МТВЕ = метил трет-бутил етер
NADH = никотинамид аденин динуклеотид, редуцирана форма
NADPH = никотинамид аденин динуклеотид фосфат, редуцирана форма
NIH = National Institute of Health (US) NIHU = National Institute of Health единици NMR = ядрен магнитен резонанс OAc = ацетат
Pab = рага-амидобензиламино
H-Pb = рага-амидинобензиламин
Ph = фенил
Pr = пропил
Pro = (8)-пролинил
PyBOP = (бензотриазол-1-илокси) трипиролидинофосфониев хексафлуорофосфат
QF = тетрабутиламониев флуорид
RedAl = натриев бис(2-метоксиетокси)алуминиев хидрид
RPLC = високоефективна течна хроматография с обърната фаза rt/RT = стайна температура
SOPs = стандартни работни процедури
TBTU = [N,N,N’,N’-TeTpaMeTwi-O-(6eH3OTриазол-1 -ил)урониев тетрафлуороборат]
TEA = триетиламин
Теос = 2-(триметилсилил) етоксикарбонил
TEMPO = 2,2,6,6-тетраметил-1 -пиперидинилокси свободен радикал
TFA = трифлуороцетна киселина
THF = тетрахидрофуран
ТНР = тетрахидропиранил
TLC = тънкослойна хроматография
TMSC1 = триметилсилил хлорид
TMSCN = триметилсилил цианид
UV = ултравиолет
Z = бензилоксикарбонил
Префиксите n, s, i и t имат обичайните значения: нормален, вторичен, изо и третичен. Префиксът с означава цикло.

Claims (10)

  1. Патентни претенции
    1. Съединение, избрано измежду:
    Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe) с формула
    Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OH) с формула или Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Aze-Pab с формула или тяхна фармацевтично приемлива сол.
  2. 2. Съединение съгласно претенция 1, избрано измежду:
    Ph(3 -С 1)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe);
    Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OH) или
    Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab.
  3. 3. Съединение Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe) съгласно претенция 1 или негова фармацевтично приемлива сол.
  4. 4. Съединение Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe) съгласно претенция 1,2 или 3.
  5. 5. Съединение Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab съгласно претенция 1 или 2.
  6. 6. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва кое да е от съедине
    66261 Bl нията съгласно претенция 1 или негова фармацевтично приемлива сол, в смес с фармацевтично приемливо помощно средство, разредител или носител.
  7. 7. Фармацевтичен състав съгласно претен- 5 ция 6, характеризиращ се с това, че включва съединението съгласно претенция 3, негова фармацевтично приемлива сол, в смес с фармацевтично приемливо помощно средство, разредител или носител. 10
  8. 8. Съединение съгласно коя да е от претенциите от 1 до 5 или негова фармацевтично приемлива сол за използване като фармацевтичен препарат.
  9. 9. Съединение съгласно коя да е от претенциите от 1 до 5 или негова фармацевтично приемлива сол, за използване при лечение на тромбоза.
  10. 10. Съединение съгласно коя да е от претенциите от 1 до 5 или негова фармацевтично приемлива сол, за използване като антикоагулант.
BG107825A 2000-12-01 2003-05-19 Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин BG66261B1 (bg)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE0004458A SE0004458D0 (sv) 2000-12-01 2000-12-01 Pharmaceutically useful compounds
SE0100965A SE0100965D0 (sv) 2001-03-19 2001-03-19 Pharmaceutically-useful compounds
SE0101239A SE0101239D0 (sv) 2001-04-06 2001-04-06 Pharmaceutically useful compounds
SE0102921A SE0102921D0 (sv) 2001-08-30 2001-08-30 Pharmaceutically useful compounds
PCT/SE2001/002657 WO2002044145A1 (en) 2000-12-01 2001-11-30 New mandelic acid derivatives and their use as throbin inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG107825A BG107825A (bg) 2004-02-27
BG66261B1 true BG66261B1 (bg) 2012-10-31

Family

ID=27484527

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107825A BG66261B1 (bg) 2000-12-01 2003-05-19 Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин

Country Status (30)

Country Link
US (4) US20070218136A1 (bg)
EP (2) EP2186800A1 (bg)
JP (3) JP4177101B2 (bg)
KR (4) KR100947296B1 (bg)
CN (1) CN1291975C (bg)
AR (2) AR035216A1 (bg)
AT (1) ATE461171T1 (bg)
AU (2) AU2007203520B2 (bg)
BG (1) BG66261B1 (bg)
BR (1) BR0115861A (bg)
CA (1) CA2436220C (bg)
CY (1) CY1113487T1 (bg)
CZ (1) CZ303708B6 (bg)
DE (1) DE60141603D1 (bg)
DK (1) DK1347955T3 (bg)
EE (1) EE05382B1 (bg)
ES (1) ES2341318T3 (bg)
HK (1) HK1057214A1 (bg)
HU (1) HU228814B1 (bg)
IL (1) IL156096A0 (bg)
IS (1) IS2755B (bg)
MX (1) MXPA03004794A (bg)
MY (1) MY136133A (bg)
NO (3) NO325228B1 (bg)
NZ (1) NZ526205A (bg)
PL (1) PL207045B1 (bg)
PT (1) PT1347955E (bg)
SI (1) SI1347955T1 (bg)
SK (1) SK287692B6 (bg)
WO (1) WO2002044145A1 (bg)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201661D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201662D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Pharmaceutical combination
SE0201658D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Immediate release pharmaceutical formulation
SE0201659D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
KR101106631B1 (ko) 2003-02-13 2012-01-20 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 대사 질환의 치료용 화합물
GB0306615D0 (en) * 2003-03-22 2003-04-30 Astrazeneca Ab New use
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0303220D0 (sv) * 2003-11-28 2003-11-28 Astrazeneca Ab New process
US7550499B2 (en) 2004-05-12 2009-06-23 Bristol-Myers Squibb Company Urea antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
MX2007008434A (es) 2005-01-19 2007-07-25 Squibb Bristol Myers Co Derivados de 2-fenoxi-n-(1,3,4-tiadizol-2il)piridin-3-amina y compuestos relacionados como inhibidores del receptor p2y1 para el tratamiento de trastornos tromboembolicos.
GB0503672D0 (en) * 2005-02-23 2005-03-30 Astrazeneca Ab New process
GB0510546D0 (en) * 2005-05-24 2005-06-29 Astrazeneca Ab New process
WO2007002635A2 (en) 2005-06-27 2007-01-04 Bristol-Myers Squibb Company C-linked cyclic antagonists of p2y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
WO2007002634A1 (en) 2005-06-27 2007-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Carbocycle and heterocycle antagonists of p2y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
ES2360818T3 (es) 2005-06-27 2011-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Miméticos de urea lineal antagonistas del receptor p2y, útiles en el tratamiento de afecciones trombóticas.
US7728008B2 (en) 2005-06-27 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company N-linked heterocyclic antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
KR20080089453A (ko) 2006-01-25 2008-10-06 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 물질대사 장애의 치료용 화합물
US7820721B2 (en) 2006-01-25 2010-10-26 Wellstat Therapeutics Corporation Compounds for the treatment of metabolic disorders
EP1978948A4 (en) 2006-02-02 2010-06-16 Wellstat Therapeutics Corp COMPOUNDS FOR THE TREATMENT OF METABOLISM DISORDER
WO2007103996A1 (en) 2006-03-09 2007-09-13 Bristol-Myers Squibb Company 2-(aryloxy)acetamide factor viia inhibitors useful as anticoagulants
EP2061756B1 (en) 2006-06-08 2013-09-25 Bristol-Myers Squibb Company 2-aminocarbonylphenylamino-2-phenilacetamides as factor viia inhibitors useful as anticoagulants
DE102006033572A1 (de) 2006-07-20 2008-01-24 Bayer Cropscience Ag N'-Cyano-N-halogenalkyl-imidamid Derivate
US7960569B2 (en) 2006-10-17 2011-06-14 Bristol-Myers Squibb Company Indole antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
TW200827336A (en) * 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
JP5342450B2 (ja) 2006-12-15 2013-11-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 第ＸＩａ因子インヒビターとしてのアリールプロピオンアミド、アリールアクリルアミド、アリールプロピンアミド、またはアリールメチルウレアアナログ
PE20081775A1 (es) 2006-12-20 2008-12-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos macrociclicos como inhibidores del factor viia
BRPI0810462A2 (pt) 2007-04-23 2014-10-14 Sanofi Aventis Derivados de quinolina-carboxamida como antagonistas de p2y12
TW200900033A (en) * 2007-06-21 2009-01-01 Wen-Qing Li Automatic brewing machine
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
EP2238128B1 (en) 2007-12-26 2012-08-22 Sanofi Heterocyclic pyrazole-carboxamides as p2y12 antagonists
EP3786165A1 (en) 2010-02-11 2021-03-03 Bristol-Myers Squibb Company Synthetic intermediates for producing macrocycles as factor xia inhibitors
TW201319068A (zh) 2011-08-05 2013-05-16 必治妥美雅史谷比公司 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑
TW201311689A (zh) 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
ES2579832T3 (es) 2011-10-14 2016-08-17 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituida como inhibidores del factor XIa
CA2851810C (en) 2011-10-14 2020-01-07 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
ES2699226T3 (es) 2011-10-14 2019-02-08 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituidos como inhibidores del factor XIa
EA025392B1 (ru) 2012-08-03 2016-12-30 Бристол-Маерс Сквибб Компани Дигидропиридон р1 в качестве ингибиторов фактора xia
EA028581B1 (ru) 2012-08-03 2017-12-29 Бристол-Маерс Сквибб Компани ДИГИДРОПИРИДОН Р1 В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ФАКТОРА XIa
GB2510407A (en) * 2013-02-04 2014-08-06 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Aqueous suspensions of kallikrein inhibitors for parenteral administration
WO2014160668A1 (en) 2013-03-25 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroisoquinolines containing substituted azoles as factor xia inhibitors
RS57659B1 (sr) 2014-01-31 2018-11-30 Bristol Myers Squibb Co Makrociklusi sa heterocikličnim p2' grupama kao inhibitori faktora xia
NO2760821T3 (bg) 2014-01-31 2018-03-10
NO2721243T3 (bg) 2014-10-01 2018-10-20
US10160750B2 (en) 2015-06-19 2018-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles as factor XIa inhibitors
WO2017019821A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Bristol-Myers Squibb Company Factor xia new macrocycle bearing a non-aromatic p2' group
EP3331872B1 (en) 2015-08-05 2019-09-25 Bristol-Myers Squibb Company Novel substituted glycine derived fxia inhibitors
CN105294520A (zh) * 2015-11-23 2016-02-03 大连九信生物化工科技有限公司 一种2-（2’,2’-二氟乙氧基）-6-三氟甲基苯基丙基硫醚的合成工艺
KR20180117156A (ko) 2016-03-02 2018-10-26 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인자 XIa 억제 활성을 갖는 디아미드 마크로사이클
CN106674085B (zh) * 2016-12-20 2020-06-23 苏州汉德创宏生化科技有限公司 N-1,3-二氟异丙基-4-氨基哌啶类化合物的合成方法
EP3877380A1 (en) 2018-11-05 2021-09-15 Syngenta Participations Ag Pesticidally active azole-amide compounds
EP4010333A1 (en) 2019-08-09 2022-06-15 Kalvista Pharmaceuticals Limited Plasma kallikrein inhibitors

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
JPS57149217A (en) 1981-03-11 1982-09-14 Kaken Pharmaceut Co Ltd Slow-releasing pharmaceutical preparation
HU192646B (en) 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
ZA86746B (en) 1985-02-04 1986-09-24 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
US5187157A (en) 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
US4792452A (en) 1987-07-28 1988-12-20 E. R. Squibb & Sons, Inc. Controlled release formulation
US5538847A (en) * 1989-07-17 1996-07-23 Tropix, Inc. Chemiluminescent 1,2-dioxetanes
EP0362002B1 (en) 1988-09-01 1995-07-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
ZA897515B (en) 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
IT1229491B (it) 1988-12-28 1991-09-03 Roussel Maestretti S P A Ora R Derivati della 1,2,5,6-tetraidropiridina, loro procedimento di preparazione e loro impiego come sostanze medicinali
TW201303B (bg) 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
CA2075154A1 (en) 1991-08-06 1993-02-07 Neelakantan Balasubramanian Peptide aldehydes as antithrombotic agents
SE9102462D0 (sv) 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
US5169638A (en) 1991-10-23 1992-12-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. Buoyant controlled release powder formulation
NZ245039A (en) 1991-11-12 1994-12-22 Lilly Co Eli N-phenylalanyl and n-phenylglycyl derivatives of the dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acid and l-arginine aldehyde; anti-blood clotting compositions
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
CA2131367A1 (en) 1992-03-04 1993-09-16 Sandor Bajusz New anticoagulant peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same as well as a process for the preparation thereof
TW223629B (bg) 1992-03-06 1994-05-11 Hoffmann La Roche
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9301912D0 (sv) 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra Process for the production of aminoalkylguandines
EP0648780A1 (en) 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
TW394760B (en) 1993-09-07 2000-06-21 Hoffmann La Roche Novel Carboxamides, process for their preparation and pharmaceutical composition containing the same
CA2140598C (en) * 1994-01-27 2010-03-09 Masahiro Ohshima Prolineamide derivatives
US5707966A (en) 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951617B (en) 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5561146A (en) 1994-06-10 1996-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
US5498724A (en) 1994-06-28 1996-03-12 Aktiebolaget Astra Pyrazoleamidine compounds
US5510369A (en) 1994-07-22 1996-04-23 Merck & Co., Inc. Pyrrolidine thrombin inhibitors
NZ302649A (en) * 1995-02-17 2000-01-28 Basf Ag Dipeptide amidine derivatives, preparation and pharmaceutical compositions thereof
US5874298A (en) * 1995-02-17 1999-02-23 Nps Pharmaceuticals, Inc. Insecticidal toxins from Bracon hebetor nucleic acid encoding said toxin and methods of use
US5710130A (en) 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5695781A (en) 1995-03-01 1997-12-09 Hallmark Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulation containing three different types of polymers
US6083532A (en) 1995-03-01 2000-07-04 Duramed Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulation containing three different types of polymers and tablet formed therefrom
AU698911B2 (en) 1995-04-04 1998-11-12 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5629324A (en) 1995-04-10 1997-05-13 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TWI238827B (en) 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
SE9601556D0 (sv) 1996-04-24 1996-04-24 Astra Ab New pharmaceutical formulation of a thrombin inhibitor for parenteral use
SE9602263D0 (sv) * 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US5863929A (en) 1996-06-25 1999-01-26 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
DE19632772A1 (de) 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Benzamidine
SE9603724D0 (sv) 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
AR013084A1 (es) * 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
IT1297461B1 (it) 1997-10-29 1999-12-17 Ciocca Maurizio Preparazione di compresse a rilascio controllato a base di complessi tra carragenano e farmaci basici solubili
SE9704401D0 (sv) 1997-11-28 1997-11-28 Astra Ab Matrix pellets for greasy, oily or sticky drug substances
SE9704543D0 (sv) * 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
US6174913B1 (en) * 1998-06-05 2001-01-16 The University Of North Carolina At Chapel Hill Naphtho- and dihydrobenzo-thiophene derivatives as cytotoxic antitumor agents
SE9802938D0 (sv) * 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802974D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab New crystalline forms
SE9802973D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
WO2000042059A1 (en) * 1999-01-13 2000-07-20 Astrazeneca Ab New amidinobenzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
US6758430B1 (en) * 1999-02-16 2004-07-06 Aesop, Inc. Method of winding motors and other electric machines to reduce AC losses
SE9902550D0 (sv) * 1999-07-02 1999-07-02 Astra Ab New crystalline forms
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
SE0102921D0 (sv) * 2001-08-30 2001-08-30 Astrazeneca Ab Pharmaceutically useful compounds
US6287599B1 (en) 2000-12-20 2001-09-11 Shire Laboratories, Inc. Sustained release pharmaceutical dosage forms with minimized pH dependent dissolution profiles
AR034517A1 (es) * 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
US6811794B2 (en) 2001-12-20 2004-11-02 Shire Laboratories, Inc. Sustained release pharmaceutical dosage forms with minimized pH dependent dissolution profiles
SE0201658D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Immediate release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7781424B2 (en) 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0303220D0 (sv) 2003-11-28 2003-11-28 Astrazeneca Ab New process
GB0503672D0 (en) 2005-02-23 2005-03-30 Astrazeneca Ab New process
GB0510546D0 (en) 2005-05-24 2005-06-29 Astrazeneca Ab New process
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms

Also Published As

Publication number Publication date
EP1347955A1 (en) 2003-10-01
HK1057214A1 (en) 2004-03-19
EE200300259A (et) 2003-08-15
IL156096A0 (en) 2003-12-23
NZ526205A (en) 2005-04-29
US7803954B2 (en) 2010-09-28
PT1347955E (pt) 2010-05-21
DK1347955T3 (da) 2010-06-07
EE05382B1 (et) 2011-02-15
US20070218136A1 (en) 2007-09-20
KR100947296B1 (ko) 2010-03-16
IS6828A (is) 2003-05-27
US20100087651A1 (en) 2010-04-08
US7645751B2 (en) 2010-01-12
PL362917A1 (en) 2004-11-02
HUP0302487A2 (hu) 2003-11-28
NO325228B1 (no) 2008-03-03
MXPA03004794A (es) 2003-09-10
US20070202174A1 (en) 2007-08-30
KR20090023745A (ko) 2009-03-05
SK6512003A3 (en) 2003-11-04
IS2755B (is) 2011-09-15
CY1113487T1 (el) 2016-06-22
KR100914537B1 (ko) 2009-09-02
JP2008156362A (ja) 2008-07-10
BG107825A (bg) 2004-02-27
AU2007203520B2 (en) 2010-12-09
US20080090800A1 (en) 2008-04-17
KR20080059681A (ko) 2008-06-30
KR20030051894A (ko) 2003-06-25
JP2008138009A (ja) 2008-06-19
SI1347955T1 (sl) 2010-07-30
BR0115861A (pt) 2003-09-23
CN1291975C (zh) 2006-12-27
EP2186800A1 (en) 2010-05-19
KR100914535B1 (ko) 2009-09-02
NO20080031L (no) 2003-07-25
CA2436220C (en) 2010-04-13
JP4177101B2 (ja) 2008-11-05
NO20032465D0 (no) 2003-05-30
SK287692B6 (sk) 2011-06-06
AU2002218618A1 (en) 2002-06-11
AR035216A1 (es) 2004-05-05
ES2341318T3 (es) 2010-06-18
KR100914016B1 (ko) 2009-08-28
HU228814B1 (hu) 2013-05-28
EP1347955B1 (en) 2010-03-17
AU2007203520A1 (en) 2007-08-16
NO20080030L (no) 2003-07-25
CZ20031514A3 (cs) 2003-08-13
CZ303708B6 (cs) 2013-03-27
AR072331A2 (es) 2010-08-25
CA2436220A1 (en) 2002-06-06
JP2004520290A (ja) 2004-07-08
HUP0302487A3 (en) 2009-08-28
CN1487919A (zh) 2004-04-07
PL207045B1 (pl) 2010-10-29
NO20032465L (no) 2003-07-25
AU2007203509A1 (en) 2007-08-16
DE60141603D1 (de) 2010-04-29
MY136133A (en) 2008-08-29
WO2002044145A1 (en) 2002-06-06
ATE461171T1 (de) 2010-04-15
KR20080064204A (ko) 2008-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG66261B1 (bg) Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин
US7129233B2 (en) Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
KR100928285B1 (ko) 신규한 만델산 유도체 및 이것의 트롬빈 억제제로서의 용도
RU2300521C2 (ru) Новые производные миндальной кислоты и их применение в качестве ингибиторов тромбина
AU2002218618B2 (en) New mandelic acid derivatives and their use as throbin inhibitors
RU2341516C2 (ru) Новые производные миндальной кислоты и их применение в качестве ингибиторов тромбина
AU2002324410A1 (en) New mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
TW200306975A (en) New mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
ZA200300258B (en) New amidino derivatives and their use as thrombin inhibitors.
MXPA04001825A (es) Derivados de acido mandelico nuevos y su uso como inhibidores de trombina.