BG107825A - Нови производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин - Google Patents

Нови производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин Download PDF

Info

Publication number
BG107825A
BG107825A BG107825A BG10782503A BG107825A BG 107825 A BG107825 A BG 107825A BG 107825 A BG107825 A BG 107825A BG 10782503 A BG10782503 A BG 10782503A BG 107825 A BG107825 A BG 107825A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
aze
pab
compound
formula
och
Prior art date
Application number
BG107825A
Other languages
English (en)
Other versions
BG66261B1 (bg
Inventor
Tord Inghardt
Anders Johansson
Arne Svensson
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from SE0004458A external-priority patent/SE0004458D0/xx
Priority claimed from SE0100965A external-priority patent/SE0100965D0/xx
Priority claimed from SE0101239A external-priority patent/SE0101239D0/xx
Priority claimed from SE0102921A external-priority patent/SE0102921D0/xx
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of BG107825A publication Critical patent/BG107825A/bg
Publication of BG66261B1 publication Critical patent/BG66261B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/49—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C07C205/57—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups having nitro groups and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C205/59—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups having nitro groups and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C37/01—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring by replacing functional groups bound to a six-membered aromatic ring by hydroxy groups, e.g. by hydrolysis
    • C07C37/055—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring by replacing functional groups bound to a six-membered aromatic ring by hydroxy groups, e.g. by hydrolysis the substituted group being bound to oxygen, e.g. ether group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/16—Preparation of ethers by reaction of esters of mineral or organic acids with hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/18—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds
    • C07C41/26—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds by introduction of hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
    • C07C41/01—Preparation of ethers
    • C07C41/18—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds
    • C07C41/30—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds by increasing the number of carbon atoms, e.g. by oligomerisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/004—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reaction with organometalhalides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/27—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation
    • C07C45/29—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation of hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/45—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by condensation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/673—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by change of size of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C07C45/70—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction with functional groups containing oxygen only in singly bound form
    • C07C45/71—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction with functional groups containing oxygen only in singly bound form being hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/52—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings
    • C07C47/56—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing hydroxy groups
    • C07C47/565—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing hydroxy groups all hydroxy groups bound to the ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C47/00—Compounds having —CHO groups
    • C07C47/52—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings
    • C07C47/575—Compounds having —CHO groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/84—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/48—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/50—Mandelic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/56—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/734—Ethers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
    • C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
    • C07C69/738—Esters of keto-carboxylic acids or aldehydo-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/52—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D263/54—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles
    • C07D263/58—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

НОВИ ПРОИЗВОДНИ НА БАДЕМОВАТА КИСЕЛИНА И ТЯХНОТО ИЗПОЛЗВАНЕ
КАТО ИНХИБИТОРИ НА ТРОМБИН
Област на техниката
Това изобретение се отнася до нови фармацевтично приемливи съединения, по-специално до съединения, които са конкурентни инхибитори, и/или до съединения, които се
метаболизират до съединения, които са конкурентни инхибитори на трипсин-подобните серинпротеази, особено тромбин, тяхното използване като лекарствени фармацевтични състави, които ги съдържат и схеми средства, на синтез за тяхното получаване.
Предшестващо състояние на техниката
Кръвната коагулация е ключовият процес, включен както в хемостазата (т.е. предотвратяване загубата на кръв от увреден кръвоносен съд) така и в тромбозата (т.е. образуването на кръвен съсирек в кръвоносен съд, понякога водещ до обструкция на кръвоносния съд).
Коагулацията е резултатът от серии ензимни реакции. Един от основните етапи в тези серии от реакции е превръщането на проензима протромбин в активния ензим тромбин.
Известно е, че тромбинът изпълнява централна роля в коагулацията. Той активира тромбоцитите, при което те агрегират, превръща фибриногена във фибринови мономери, които полимеризират спонтанно във фибринови полимери, и активира фактор XIII, който от своя страна омрежва полимерите, при което се образува неразтворим фибрин. Освен това, тромбинът активира фактор V и фактор VIII което води до положителна обратна връзка генериране на тромбин от протромбин.
Чрез инхибиране агрегацията на тромбоцитите и образуването и омрежването на фибрин, се очаква ефективните инхибитори на тромбин да проявят антитромботична активност. Освен това, антитромботична активност се очаква да се повиши чрез ефективно инхибиране на положителния механизъм на обратната връзка.
Предшестващо ниво на техниката
Предходните разработки на инхибитори на тромбин с ниско молекулно тегло са описани от Claesson в Blood Coagul. Fibrinol. (1994) 5,411.
Blomback et al (в J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl. 107,59, (1969)) докладват за тромбинови инхибитори на базата на последователност от аминокиселини, намиращи се около мястото на разцепване на фибриногеновата Аа верига. Тези автори предполагат, че от дискутираните аминокиселинни последователности трипептидната секвенция Phe-Val-Arg (Р9— Р2-Р1, по-надолу наречена РЗ-Р2-Р1 последователност) би била най-ефективният инхибитор.
Инхибиторите на тромбин на база на дипептидилови производни с ос, ω-аминоалкил-гуанидин в позиция Р1 са известни от патент US No 4,346,078 и международна патентна заявка WO 93/11152. Докладвани са също така подобни, структурно сродни, дипептидилови производни. Международна заявка за патент WO 94/29336 например разкрива съединения с аминометилови бензамидини, циклени аминоалкилови амидини и циклени аминоалкилови гуанидини в позиция
Р1 (Международната заявка за патент WO 97/23499 разкрива пролекарства от някои от тези съединения);
Европейска заявка за патент 0 648 780, разкрива съединения например с циклен аминоалкилов гуанидини в позиция Р1.
Инхибиторите на тромбин на база на пептидилови производни, притежаващи също така циклени аминоалкилови гуанидини (напр. 3- или 4-аминометил-1-амидино- пиперидин) в позиция Р1 са известни от Европейска заявка за патент 0 468 231, 0 559 046 и 0 641 779.
Инхибиторите на тромбин на база на трипептидилови производни с аргининалдехид в позиция Р1 са разкрити найнапред в Европейска заявка за патент 0 185 390.
Неотдавна е докладвано за пептидилови производни на базата на аргинин-алдехид, модифициран в позиция РЗ.
Например, Международна заявка за патент
WO
93/18060 разкрива хидроксикиселини, Европейска заявка за патент 0
526 877 дес-аминокиселини, и Европейска заявка за патент
542 525 - 0-метил бадемови киселини в РЗ-позиция.
Известни са също така и инхибитори на серинпротеази (напр. тромбин) на база на електрофилни кетони в позиция
Р1. Например, Европейска заявка за патент 0 195 212 разкрива пептидилови α-кетоестери и амиди,Европейска заявка
за патент 0 362 002 - флуороалкиламидни кетони, Европейска заявка за патент 0 364 344 - α,β,δ-трикетосъеднения, и
Европейска заявка за патент 0 530 167 - а-алкоксикетонови производни на аргинин в позиция Р1.
Други, с различна структура инхибитори на трипсинподобните серинпротеази на база на С-терминални боратни производни на аргинин и техни изотиоурониеви аналози са известни от Европейска' заявка за патент 0 293 881.
Понастоящем, инхибиторите на тромбин на база на пептидилови производни са разкрити в Европейска заявка за патент 0 669 317 и Международна заявка за патент WO
95/35309, WO 95/23609, WO 96/25426, WO 97/02284, WO
97/46577, WO 96/32110, WO 96/31504, WO 96/03374, WO
98/06740, WO 97/49404, WO 98/57932, WO 99/29664, WO
00/35869 и WO 00/42059.
По-специално, WO 97/02284 и WO 00/42059 разкриват
инхибитори на тромбин със заместени бадемови киселини в позиция РЗ.
Остава, обаче, необходимостта от ефективни инхибитори на трипсин-подобните серинпротеази като тромбин. Съществува също така и нужда от съединения, които притежават благоприятен фармакокинетичен профил и са селективни инхибитори на тромбин над други серинови протеази, по специално включените в хемостазата. Съединенията, които проявяват конкурентна инхибираща активност по отношение на тромбин, се очаква да са особено полезни като антикоагуланти и следователно полезни в терапията на тромбоза и сродни заболявания.
Техническа същност на изобретението
Съгласно изобретението се осигурява съединение с
където
Ra означава -ОН или -СН2ОН ;
R1 означава най-малко един евентуален халогено заместител;
R2 означава един или два Ci-з-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители (т.е. R2 означава една или две флуороалкокси-С1-з) -групи) ;
Y означава -СН2- или — (СН2)2 — ; и
R3 означава фрагмент с формула I(i) или I (ii) :
Ki)
l(ii)
където
R4 означава Н или един или няколко флуоро-заместители; и един или два от Xi, Х2, Хз и Х4 означава -N-, а другите означават -СН-, или негово фармацевтично приемливо производно.
Терминът фармацевтично приемливи производни включва фармацевтично приемливи соли (напр. киселиноприсъединителни соли).
В края на заявката са дадени съкращения.
Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с формули
I(i) и I (ii) означават позицията на свързване на фрагментите.
Халогено-групи, които R1 може да означава, включват, флуоро, хлоро, бромо и йодо.
За да няма съмнение, при означенето на най-малко една евентуално халогено-група R1 може или да отсъства (и по такъв начин да е заместен с Н, така, че правилата за валентност да са спазени) или може да означава един или няколко халогенни атоми.
ч · 4
Когато R означава фрагмент с формула 1(1), в която R означава един или няколко флуоро-заместители, предпочитани съединения с формула I включват тези, в които R4 означава един флуоро-заместител във 2-ра или 3-та позиция, или два флуоро-заместители в във 2-ра и 5-та позиции или, предпочитане, във 2-ра и б-та позиции (където позициите заместителите са определени спрямо точката на свързване за на фрагмента с формула I(i) с останалата част на молекулата (т.е. с -NHCH2- групата)).
Когато
R3 означава фрагмент с формула предпочитани съединения с формула I включват тези, в които (а) единият от Х1, Х2,
Х3 и Х4 означава -N-, а другите означават -СН-; или (Ь) или Xi и Х3, или
Х2 и
Х4, и двата означават
-N-, а другите два (ако е подходящо) означават -СН-.
Предпочитани съединения с формула I включват тези, в които :
R1 означава един заместител флуоро, хлоро или бромо;
R2 означава С1-2-алкокси, заместен с един или няколко флуоро-заместители, като -OCHF2, -OCF3, -OCH2CF3, -OCH2CHF2, OCH2CH2F или -OCH(CH2F)2;
R3 означава фрагмент c формула I(i);
R4 означава H.
По-предпочитани съединения c формула I включват тези, в които:
Ra означава ОН;
R1 означава един хлорб-заместител;
R2 означава - OCF3, за предпочитане -OCH2CHF2, или за предпочитане - OCHF2, или -OCH2CH2F.·
Предпочитани точки на заместване на R1 и R2 на свързаната фенилова група на съединения с формула I включват двете мета-позиции спрямо точката на свързване на тази фенилова група с останалата част на молекулата (т.е. в
3-та и/или 5-та позиция (за предпочитане 3,5-заместване) спрямо въглеродния атом на който се намира а- или βхидроксигрупата на киселината).
Съединения с формула I които могат да се споменат включват тези, в които:
R2 означава един или два С1-2-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители; или
R2 означава един или два
С3-алкокси заместители, чиито алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители.
Съединения с формула I могат да се получат съгласно техниките, добре известни на специалистите в областта, например съгласно описаното по-долу.
Съгласно друг вариант на изобретението се осигурява метод за получаване на съединение с формула
I, който включва:
на съединение с формула II,
където Ra,
R1 и R2 са
II дефинирани както по-горе със съединение с формула III,
където Y и R3 са дефинирани както по-горе, например в присъствието на свързващо средство (напр. оксалилхлорид в
DMF, EDC, DCC, HBTU, HATU, РуВОР или TBTU), съответна база (напр. пиридин, DMAP, TEA, 2,4,6-колидин или DIPEA) и подходящ органичен разтворител (напр.
дихлорометан, ацетонитрил, EtOAc или DMF);
(ii) свързване на съединение с формула IV,
ОН
IV където Ra,
R1, R2 и Y са дефинирани както по-горе със съединение с формула V,
R3CH2NH2 V където R3 е дефиниран както по-горе, например при условията, описани в метод (i) по-горе;
(iii) за съединения с формула I, в която R1 не присъства, редукция на съответното съединение с формула 1а, както е дефинирано по-долу, в която R5 означава OR6 , където R5 и R6 са дефинирани по-долу, например чрез хидриране в присъствието на подходящ катализатор (напр. катализатор Pd/C (напр. 10% (w/w) Pd/C)) и подходящ разтворител (напр. нисш (напр. Ci-б) алкилов алкохол като етанол), и евентуално в присъствието на подходяща киселина (напр. оцетна киселина) и/или както е описано в Synth.Comm. (1998) 4351;
или (iv) взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или XVIB, както е дефинирано по-долу, с подходящ източник на амоняк (напр. амониев ацетат. или газ амоняк) при условия, известни на специалистите в областта, като например чрез взаимодействие на междинно съединение етилимидоат (получен при взаимодействие на съединение с формула XVIA или XVIB с НС1 (газ) в етанол) с газ амоняк в етанол, или при условията, описани в Tetrahedron Lett. 40, 7067 (1999), разкритията на този документ са включени за справка (например, за получаване на съединения с формула I, в която R означава фрагмент с формула I (ii, ) в която Х2 или Х4 означават N, взаимодействие на съответно съединение
с формула XVIB с амониев ацетат (напр. 1 до 30 еквивалента амониев ацетат) в присъствието на N-ацетил цистеин (напр. 1 до 30 еквивалента N-ацетил цистеин) и подходящ разтворител (напр. нисш алкилов (напр. Ci_6) алкохол като метанол) ) .
Съединения с формула II могат да се получат чрез известни и/или стандартни методи.
Например, съединения с формула II в която Ra означава ОН могат да се получат чрез взаимодействие на алдехид с формула VI,
VI
R2 където R1 и R2 са дефинирани както по-горе с:
(а) съединение с формула VII,
RCN VII където R означава Н или (CH3)3Si, например при стайна или повишена температура (напр. под 100° С) в присъствието на подходящ органичен разтворител (напр. хлороформ или метиленхлорид) и, ако е необходимо, в присъствието на подходяща база (напр. TEA) и/или подходяща система катализатори (напр. бензиламониев хлорид или цинков йодид, или при използване на хирален катализатор, например както
е описано в Chem. Rev., (1999) 99, 3649), последвано от
хидролиза при условия, които са добре известни на
специалистите в областта (напр. съгласно описаното по-
долу);
(Ь) NaCN или KCN, например в присъствието на NaHSO3 и вода, последвано от хидролиза;
(с) хлороформ, например при повишена температура (напр.
по-висока от стайна температура но под 100° С) присъствието на подходящ органичен разтворител (напр.
хлороформ) и, ако е необходимо, в присъствието на подходяща система катализатори (напр.
бензиламониев хлорид), последвано от хидролиза;
(d) съединение с формула VIII,
VIII където М означава Mg или Li, последвано от окислително разцепване (напр. озонолиза или с катализатор осмий или рутений), при условия които са добре известни на специалистите в областта; или (е) трие (метилтио)метан при условия, които са добре известни на специалистите в областта, последвано от хидролиза в присъствието на напр. на НдО и HBF4.
Съединения с формула II, в която Ra означава -СН2ОН могат да се получат чрез редукция на съединение с формула IX,
където R означава Ci-6-алкил или Ci-з-алкилфенил и R1 и R2 са дефинирани както по-горе, например при стайна температура или по-ниска в присъствието на подходящ редуктор (напр. натриев борохидрид) и подходящ органичен разтворител (напр.
метанол, етанол, THF или тяхна смес), последвано от хидролиза на получената междинно съединение, естер на тропинова
IXA където R, R1 и R2 са дефинирани както по-горе, при условия които са добре известни на специалистите в областта, например съгласно описаното по-долу. Специалистът ще прецени, че етапът на редукция и хидролиза могат да се проведат в един съд, например съгласно описаното по-долу.
Съединения с формула II, в която Ra означава -ОН може да се получи по алтернативен начин чрез окисление на съединение с формула IXB,
IXB
или на негово производно, което евентуално е защитено при вторичната хидроксилна група, където R1 и R2 са дефинирани както по-горе, в присъствието на подходящ окислител (напр. комбинация от подходящ свободен радикал окислител (като TEMPO) и подходящ хипохлорит (като натриев хипохлорит)) при условия, известни на специалистите в областта, например при температура в границите между -10° С и стайна температура, в присъствието на подходящ разтворител (напр. вода, ацетон или тяхна смес), подходяща сол (напр. халогенид на алкален метал като калиев бромид) и подходяща база (напр. карбонат на алкален метал или кисел карбонат като кисел натриев карбонат).
Енантиомерните форми на съединението с формула II, в която Ra означава -ОН (т.е. тези съединения, които имат различни конфигурации на заместители около С-атома аспрямо СО2Н групата) могат да се разделят чрез енантиомерно специфичен етап на дериватизация. Това може да се постигне, например чрез ферментен метод. Такъв един ферментен метод включва, например, трансестерификация на -ОН групата при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник (напр. при между 45 и 65° С) в присъствието на подходящ ензим (напр. Липаза PS Amano), подходящ естер (напр. винилацетат) и подходящ разтворител (напр. метил трет-бутилетер). Дериватизираният изомер може след това да се отдели от нереагиралия изомер, като се използват обичайни методи за разделяне (напр. хроматография).
Групи, добавени към съединения с формула II в в такъв етап на получаване могат да се отстранят или преди следващата реакция или в кой да е по-късен етап при синтеза на съединения с формула I. Допълнителните групи могат да се отделят, при използване на конвенционални методи (напр. за естери на сс-ОН групата, хидролиза при условия, известни на специалистите в областта (напр. при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник в присъствието на подходяща база (напр. NaOH) и подходящ разтворител (напр. МеОН, вода или тяхна смес)).
Енантиомерните форми на съединението с формула II, в която Ra означава -СН2ОН могат да се разделят чрез хирална хроматография (напр. хирална HPLC).
Съединения с формула III могат да се получат чрез купелуване на съединение с формула X,
където Y е дефиниран както по-горе със съединение с формула V, дефинирано по-горе, например при условия, подобни на описаните за получаване на съединения с формула I.
Съединения с формула IV могат да се получат чрез купелуване на съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула X, дефинирано по-горе, например при условия, подобни на описаните за получаване на съединения с формула I.
Съединения с формула VI могат да се получат чрез известни и/или стандартни методи. Например, те могат да се получат чрез:
(i) вкарване на метален атом (където металът може да е, например, алкален метал като Li или, за предпочитане, двувалентен метал като Mg) в съединение с формула XI,
където Hal означава халогенен атом, избран от Cl, Вг и I и R1 и R2 са дефинирани както по-горе, последвано от взаимодействие с подходящ източник на формиловата група (като Ν,Ν-диметилформамид), например при условия, описани по-долу;
(ii) редукция на съединение с формула XII,
където R1 и R2 са дефинирани както по-горе в присъствието на подходящ редуктор (напр. DIBAL-H); или (ill) окисление на съединение с формула XIII,
XIII
R2 където R1 и R2 са дефинирани както по-горе в присъствието на подходящ окислител (напр. МпО2, пиридиниев хлорохромат, комбинация от DMSO и оксалилхлорид, или S03 пиридин комплекс в DMSO).
Съединения с формула IX могат да се получат от съответния фенилацетат (който може,например, да се получи от съответния ацетофенон, както е описано в J. Am. Chem. Soc. 98,6750 (1976) или от съответния бензилцианид чрез стандартни хидролизни методи) чрез конвенционални методи, например аналогично на методите, описани в J. Org. Chem. 54,3831 (1989) и/или съгласно описаното по-долу. Съединения с формула IXB могат да се получат чрез дихидроксилиране на съответното съединение с формула XIIIA
XIIIA
R2
където R1 и R2 са дефинирани както по-горе, в присъствието на подходящо дихидроксилиращо средство (напр, реактив или реактивна смес, която осигурява 0s04, като AD-mix-α или, особено, AD-mix-β) , например при условия, известни на специалистите в областта, при температура в границите между -10° С и стайна температура, в присъствието на подходящ разтворител (напр. вода, трет-бутанол или
Когато се използват асиметрични окислители като AD-mix-a или AD-mix-β, този метод може да се използва за получаване на съединения с формула IXB, със специфични конфигурации от групи (т.е.
R или
S) при двата С-атома, с които са свързани първичната и вторичната хидроксилни групи.
Съединения с формула XIIIA могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула XI, дефинирано по-горе, с подходящ източник на винилов анион (напр. трибутил (винил) калай) при условия, известни на специалистите в областта, например при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник (напр. 50° С) в присъствието на подходящ разтворител (напр. толуен), подходящо свързващо средство (напр. паладиев (0) координационен комплекс като тетракис (трифенилфосфин) паладий(0)) и евентуално в присъствието на подходящ катализатор (напр.
2,6-ди-трет-бутил-4метилфенол).
Съединения с формули V, VII, VIII, X, XI, XII и XIII или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални методи за синтез, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещество, които се получават лесно, като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Съединения с формули la, XVIA и XVIB могат да се получат по методи
описани по-долу.
Заместителите при фениловия пръстен в съединения с
формули I, II, III, IV, V, VI, IX, IXA, IXB, XI, XII, XIII
и XIIIA могат да се вкарат и/или да се получат чрез
вътрешно превръщане като се използват методи, добре известни на специалистите в областта като се използват вътрешно превръщане на стандартни функционални групи, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие
Например, съединения с формули I,
II, IV,
VI,
IXA, XI,
XII и XIII могат да се получат от съответни съединения с формули XIVA, XIVB, XIVC, XIVD, XIVE,
XIVF, XIVG и XIVH, респективно,
Y и Hal където Ra, R, R1, R3, дефинирани както по-горе, например:
(ако е подходящо) ca (а) чрез взаимодействие с съответен флуориран халогеноалкан (напр. флуориран хлороалкан), напр. при стайна температура или по-висока (напр. при температура на варене под обратен хладник) в присъствието на подходяща база (напр. калиев трет-бутоксид, КОН или NaOH, например във воден разтвор) и подходящ органичен разтворител (напр. THF, хлороформ или изо-пропанол); или (Ь) чрез взаимодействие със съединение с формула XIVJ,
RxS(O)2ORy XIVJ където Rx означава С1_4-алкил, Сх-4-перфлуороалкил или фенил (евентуално заместен с метил, нитро или халогено) и Ry е
CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F или CH(CH2F)2, например в присъствието на подходяща база (напр. К2СО3) и подходящ разтворител (напр. DMF), например, в двата случая, съгласно описаното по-долу.
Специалистът ще прецени, че тази трансформация на функционални групи може да се проведе също така в по-ранен етап на общия синтез на съединения с формули II, IV, VI,
IXA, XI, XII и XIII (т.е. на подходящи прекурсори на съединения с формули XIVB, XIVC, XIVD,XIVE, XIVF, XIVG и XIVH, респективно).
Съединения с формули XIVA, XIVB, XIVC, XIVD, XIVE, XIVF, XIVG, XIVH и XIVJ или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални методи за синтез, в съответствие със стандартни методи, от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Например, съединения с формули
XIVA, XIVB,
XIVC, XIVD, XIVE, XIVF,
XIVG и XIVH могат да се получат чрез премахване на защитата от съответните защитени феноли (като защитната група може да бъде, например, метил, алил, бензил или съединения трет-бутил) при стандартни условия, с формула XIVD, в която R1 е
Освен това, един хлорозаместител могат да се получат от диили трихалогенозаместен бензен (напр. 1-Br, 3-С1,
5-Е-бензен, чрез заместване на флуорния атом с. метоксигрупа (напр. чрез взаимодействие с NaOMe в 1-метил-2-пиролидинон/метанол при повишена температура) заменяне на бромогрупата с формилова група (напр. както описано по-горе за получаване на съединения с формула след това деметилиране (напр.
при използване на
PhSH в 1-метил-2-пиролидинон в присъствието на К2СОз) ) .
Също така, съединения с формула I, в която R1 отсъства могат да се получат от съответни съединения с формула I (или чрез техни подходящи прекурсори), в която R1 означава халогено (като хлоро), например чрез хидриране при условия, известни на специалистите в областта.
Съединения с формула I могат да се изолират от техните реакционни смеси при използване на конвенционални методи.
В съответствие с настоящето изобретение, фармацевтично приемливи производни на съединения с формула I, включват също така защитени производни, и/или съединения действащи като пролекарства на съединения с формула I.
Съединения, който действат като пролекарства на съединенията с формула I и могат да се споменат, включват
За
1а където R3a означава фрагмент с формула I(iii) или I(iv):
l(iii)
N-R
l(iv) където R означава OR6 или C(O)OR7;
R6 означава Η, Ci-ю-алкил, С1_3-алкиларил или Ci-з-алкил оксиарил (като алкиловите части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, и ариловите части на последните две групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, избрани от
халогено, фенил, метил или метокси, като последните три
групи са също евентуално заместени с един или няколко
халогено заместители);
R7 означава Ci-ю-алкил (чиято последна група е
прекъсната евентуално с един или няколко кислородни атома), или Ci-з-алкиларил или С1_3-алкилоксиарил (като алкиловите
части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, и ариловите части на последните две групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, избрани от халогено, фенил, метил или метокси, като последните три групи са също евентуално заместени с един или няколко халогено заместители); и
Ra, R1, R2, Y, R4, Xi, Х2, Хз и Х4 са дефинирани както погоре, и техни фармацевтично приемливи производни.
Терминът фармацевтично приемливи производни на съединения с формула 1а включва фармацевтично приемливи соли (напр. киселиноприсъединителни соли).
Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с
формули I(iii) и I(iv) означават позицията на свързване на
фрагментите.
Алкилоксиарил-групи, които R6 и R7 могат да
представляват, включват алкилова и арилова група, свързана
чрез кислороден атом. Алкилариловите и алкилоксиариловите групи са свързани с останалата част на молекулата чрез алкиловата част на тези групи, чиито алкиови части могат да бъдат разклонени вериги (ако са достатъчно въглеродните атоми на брой (т.е. три)). Ариловите части на алкилариловите и алкилоксиариловите групи, които могат да z- -7 представляват R и R , или да бъдат заместени включват карбоксилни и хетероциклени ароматни групи, като фенил, нафтил, пиридинил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, индолил и бензофуранил и др.
Алкилови групи, които R6 и R7 могат да представляват, могат да са линейни или, при достатъчен брой въглеродни атоми (т.е. най-малко три), могат да са разклонени и/или циклени. Освен това, когато броят на въглеродните атоми е достатъчен (т.е. най-малко четири), такива алкилови групи могат също да бъдат частично циклени/ациклени. Такива алкилови групи могат да бъдат също наситени или, ако има достатъчен брой въглеродни атоми (т.е. най-малко два), могат да бъдат ненаситени.
Халогено групи с които R6 и R7 могат да бъдат заместени включват флуоро, хлоро, бромо и йодо.
Когато R5 означава C(O)OR7, предпочитаните R7 групи включват:
(а) линеен, разклонен или циклен С3-6-алкил, например С4_6 циклоалкил;
(Ь) Ci-2-алкиларилови групи, като бензил, евентуално заместени, както е показано по-горе.
Предпочитани съединения с формула 1а включват тези, в които R5 означава OR6.
Когато R означава OR6, предпочитаните R6 групи включват:
(a) Н;
(b) незаместен линеен или циклен Ci-8 (напр. Ci-б) -алкил, като линеен С1_3-алкил (напр. етил или особено метил), разклонен С3-8_алкил (напр. изо-пропил, изо-бутил или 4хептил) или циклен С4.7-алкил (т.е. С4-7-Циклоалкил, напр.
циклобутил или циклохексил);
(с) С1-3-алкилоксифенил (напр. С2-алкилоксифенил) , чиято фенилова група е евентуално заместена с един или няколко заместители както посочено по-горе (напр.
трифлуорометил);
(d) С1_2-алкиларил (напр. метиларил) , група е фенил, пиридинил, оксазолил или където ариловата изоксазолил, като последните три групи са евентуално заместени с един или няколко заместители, както е посочено по-горе (напр. метокси, метил, бромо и/или хлоро).
Предпочитани съединения с формула 1а включват тези, в които R5 означава OR6 и R6 означава линеен, разклонен (ако е подходящо), или циклен (ако е подходящо), Ci-6 (напр. Ci_4)
-алкил, като метил, етил, п-пропил, изо-пропил или циклобутил.
Съединения с формула 1а могат да се получат по един или няколко от следните методи:
(а) взаимодействие на съответно съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула XV, (Ь)
където Y и R
например условия, подобни на при описаните преди за синтез на съединения с формула I ;
(b) взаимодействие на съответно съединение с формула IV, дефинирано по-горе със съединение с формула XVI,
R3aCH2NH2 XVI където R3a е дефиниран както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I;
(c) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или
XVIB,
XVIA
XVIB където Ra, R1, R2, R4, Y, Xi, X2, Хз и X4 са дефинирани както по-горе, с хидроксиламин, например при условия, известни на специалистите в областта;
(d) за съединения с формула 1а, в която R5 означава OR6, взаимодействие на защитено производно на съответно съединение с формула I, което е, например, съединение с формула XVII,
XVII където R3b означава фрагмент с формула I(v) или I(vi):
l(v) ь
N—COORb <
nh2 l(vi) където Rb означава, например
-CH2CH2-Si (СНз) 3 ИЛИ бензил, или техен тавтомер, и Ra, R1,
R2, Y, R4, Χχ, Х2, Хз и X4 са дефинирани както по-горе - със съединение с формула
XVIII,
R6ONH2
XVIII където R6 е дефиниран както по-горе, или негова
киселиноприсъединителна сол, например при температура в границите между стайна и температура на кипене под обратен хладник, в присъствието на подходящ органичен разтворител (напр. THF, CH3CN, DMF или DMSO), последвано от отстраняване на -C(O)ORb група при условия, известни на специалистите в областта (напр. при взаимодействие с QF или TFA (напр. съгласно описаното по-долу));
(e) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съединение с формула XVII, дефинирано погоре, в която Rb означава бензил с хидроксиламин, или негова киселиноприсъединителна сол, например при условия които са добре известни на специалистите в областта;
(f) за съединения с формула 1а, в която R5 означава COOR7, взаимодействие на съответно съединение с формула I, дефинирано по-горе, със съединение с формула XIX,
LXCOOR7 XIX където L1 означава подходяща отцепваща се група, като халогено или нитрофенил (напр. 4-нитрофенил), и R7 е дефиниран както по-горе, например при или около стайна температура в присъствието на подходяща база (напр. NaOH, например във воден разтвор) и подходящ органичен разтворител (напр. метиленхлорид); или (д) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОСН3 или ОСН2СН3, взаимодействие на съответно съединение с формула 1а, в която R5 означава ОН с диметилсулфат или диетилсулфат, респективно, например в присъствието на подходяща база (напр. хидроксид на алкален метал като КОН (например във воден разтвор при напр. 50 тегл. %) ) и подходящ катализатор (напр. четвъртичен амониев халогенид като бензитриметиламониев хлорид (например в СН2С12 или THF разтвор при напр. 10 тегл. %) ) .
Вълнообразните линии при връзките във фрагментите с формули I (ν) и I(vi) означават позицията на свързване на фрагментите.
Съединения с формули XVIA и XVIB могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула XIXA или
XIXB,
XIXA
XIXB където R4, Y, Xi, Х2, Хз и Х4 са дефинирани както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди, за синтез на съединения с формула I.
Съединения с формули XVIA и XVIB могат да се получат по алтернативен начин чрез взаимодействие на съответно съединение с формула IV, дефинирано по-горе, със съединение с формула XIXC или XIXD,
CN
XIXD където R4, Xi, X2, Хз и X4 са дефинирани както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди, за синтез на съединения с формула I.
Съединения с формула XVII могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула II, дефинирано по-горе, със съединение с формула XX,
зь
О
XX
където Y и R3b са дефинирани както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I.
Алтернативно, съединения с формула XVII могат да се получат чрез взаимодействие на съответното съединение с формула I със съединение съответстващо на съединение с формула XIX, в която, вместо R7, присъства групата Rb, в която Rb е дефиниран както по-горе, например при условия, описани по-горе във връзка с получаване на съединения с формула 1а.
Съединения с формули XV и XX могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула X дефинирано по-горе с респективно съединение с формула XVI, дефинирано по-горе или съединение с формула XXI,
R3bCH2NH2
XXI където R3b е дефиниран както по-горе, например при условия, подобни на описаните преди за синтез на съединения с формула I.
Съединения с формула XVI, XVIII, XIX, XIXA, XIXB, XIXC, XIXD и XXI или се доставят от търговската мрежа, или са известни от литературата, или могат да се получат по аналогично на методите, описани тук, или по конвенционални
методи за синтез, в съответствие със стандартни методи от изходни вещества, които се получават лесно като се използват подходящи реактиви и условия на взаимодействие. Например, съединения с формули XIXA и XIXB могат да се получат чрез взаимодействие на съответно съединение с формула XIXC или XIXD (ако е подходящо) със съединение с формула X, например' при условия, подобни на описаните преди.
Съединения с формули I и 1а, · както са дефинирани погоре, и техните производни, се наричат тук по-долу съединения съгласно изобретението.
Предпочитани съединения на изобретението включват съединенията от примерите, описани по-долу. В този смисъл, съединения от изобретението, които могат да се споменат включват:
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) С (0) -Aze-Pab;
(5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) (S-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OEt) (5-OCHF?) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OnPr)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OiPr) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OH);
(5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (СООсПентил) ;
(5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab (Z);
(5-OCF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
(5-OCF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
(5-OCF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OCH2-3- (5-Meизоксазол));
Ph(З-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)С(0)-Aze-Pab (ОСН2-3-пиридин);
Ph (З-Cl) (5-OCF3)- (R)CH(OH)C (0) -Aze-Pab (OiBu) ;
Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OEt);
Ph(3-Cl) (5-OCF3) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OBn);
Ph(З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Осхексил);
Ph (З-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu);
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OCH2CH2OPh(3-CF3) ) ;
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OBn (4-C1) ) ;
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OBn (3-MeO) ) ;
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OBn(2-Br));
Ph (З-Cl) (5-0CF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OBn (4-Me) ) ;
Ph(З-Cl) (5-OCF3) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(О-4-хептил);
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (S) CH(CH2OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-0CF3) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
Ph (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;'
Ph (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)- (R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OMe) ;
Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OMe) ;
Ph(З-Cl) (5-OCH2F) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
Ph(3-Cl) (5-0CH2F) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe);
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
Ph (3-Br)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
Ph (3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (OMe);
Ph (З-Cl, 5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH) ;
Ph (З-Cl, 5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH) ;
Ph(З-Cl,5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Pro-Pab;
Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Pro-Pab (OMe) ;
Ph(З-Cl,5-OCHFa) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-NH-CH2-((2-амидино)-5пиридинил);
Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- ( (2метоксиамидино)-5-пиридинил);
Ph(3—Cl,5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-NH-CH2-((5-амидино)-2пиримидинил);
Ph(З-Cl,5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-NH-CH2-((5метоксиамидино)2-пиримидинил);
Ph (З-Cl,5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(3-F);
Ph(З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2, 6-flnF) ;
Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2, б-диИ) (OMe) ;
Ph(З-Cl,5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2, 5-flnF);и
Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (2,5-диР) (OMe) .
Съединенията съгласно изобретението могат да проявят тавтомерия. Всички тавтомерни форми и тяхната смес са включени в обхвата на изобретението.
Специфични тавтомерни форми, които могат да се споменат включват тези, които са свързани с позицията на двойната връзка в амидиновата група в съединение с формула 1а, и позицията на заместителя R5.
Съединения съгласно изобретението съдържат също така два или повече асиметрични въглеродни атоми и следователно могат да проявяват оптичен и/или диастереоизомерия.
Диастереоизомерите могат да се разделят при използване на конвенционални методи, напр. хроматография. Редицата стереоизомери могат да се изолират чрез разделяне на рацемична или друга смес на съединенията като се използват конвенционални техники, напр. HPLC. Алтернативно желаните оптични изомери могат да се получат чрез взаимодействие на съответните оптично активни изходни вещества при условия които няма да предизвикат рацемизация или епимеризация, или чрез дериватизиране, например с а хомохирална киселина, последвано от разделяне на диастереоизомерните производни чрез конвенционални начини (напр. HPLC, хроматография върху силикагел). Всички стереоизомери са включени в обхвата на изобретението.
Съединения съгласно изобретението, в които фрагмент
е в S-конфигурация се предпочитат.
Предпочитани съединения съгласно изобретението включват тези, в които структурният фрагмент
Е в R-конфигурация когато Ra означава -ОН или е в Sконфигурация когато Ra означава -СН2ОН.
Вълнообразните линии при връзките в по-горните два фрагмента означават позицията на свързване на фрагментите.
Съединения съгласно изобретението, които могат да се споменат, включват
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) -СН(OH)С(0)-AzeРаЬ(където, в този случай, Aze означава ацетидин-2карбоксилат (R)-и/или (S)-конформация), както еквивалентни съединения в които, вместо водороден атом амидино частта в РаЬ, присъства група
-0R6 (както дефинирано по-горе), в която R6 означава
Ci-з-алкил (т.е.
Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -СН(OH)С(0)-Aze-Pab(ОМе),
OCHF2)-CH(OH)С(0)-Aze-Pab(OEt), Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-CH (OH) C(0)-Aze-Pab(OnPr) или Ph (З-Cl)· (5-OCHF2) -CH (OH) C (0) -AzePab (OiPr)). Съединения съгласно изобретението, които могат да се споменат по-нататък включват тези, които не са специфичните съединения определени в предходното изречение.
Специалистите в областта ще оценят, че в описаните погоре и по-нататък методи функционалните групи на междинните съединения могат да се нуждаят от защита със защитни групи.
Функционални групи, които е желателно да се защитят включват хидрокси, амино и карбоксилна киселина. Подходящи защитни групи за хидрокси включват евентуално заместени и/или незаместени алкилови групи (напр. метил, алил, бензил или трет-бутил), триалкилсилилови или диарилалкилсилилови групи (напр. трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил) и тетрахидропиранил. Подходящи защитни групи за карбоксилна киселина включват Ci-6-алкилови или бензилови естери. Подходящи защитни групи за амино и амидино включват трет-бутилоксикарбонил, бензилоксикарбонил или 2-триметилсилилетоксикарбонил (Теос). Амидино азотни атоми могат да се защитят също с хидрокси или алкокси групи, и могат да бъдат както моно- така и ди-защитени.
Защитаването и премахването на защитата от функционалните групи може да стане преди или след купелуването, или преди или след кое да е друго взаимодействие в гореспоменатите схеми.
Защитните групи могат да се отстранят в съответствие с методи, които са добре известни на специалистите в областта и съгласно описаното по-долу.
Специалистите в областта ще преценят, че за да се получат съединения съгласно изобретението по алтернативен, и в някои случаи по-удобен начин, отделните етапи на метода споменати по-горе могат да се проведат в друг порядък,
и/или отделните реакции могат да се проведат в различна фаза на цялата схема (т.е. заместители могат да се добавят и/или да се извършат химически трансформации върху различни от споменатите по-горе междинни съединения заедно със специфично взаимодействие) . Това може да анулира, или да направи необходима необходимостта от защитни групи.
Начинът на получаване ще определи необходимостта и вида на защитните групи, както и последователността за осъществяване на синтеза.
Използването на защитни групи е описано пълно в Protective Groups in Organic Chemistry, под редакцията на J W F McOmie, Plenum Press (1973), и Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, T. W. Greene & P. G. M. Wutz, Wiley-Interscience (1999).
Защитени производни на съединения съгласно изобретението могат химически да се превърнат в съединения съгласно изобретението като се използват стандартни методи за премахване на защитата (напр. хидриране). Специалистът в областта ще прецени, че някои съединения с формула 1а могат също да се считат за защитени производни на съединения с формула I.
Използване в медицината и фармацията
Съединенията съгласно изобретението могат да притежават фармакологична активност.
Съединенията съгласно изобретението, които притежават такава активност включват, но не се ограничават със съединения с формула I.
Обаче, други съединения съгласно изобретението (включително съединенията с формула 1а) могат да не притежават такава активност, но. могат да се приложат парентерално или орално, и следователно могат да
метаболизират в тялото, при което да образуват съединения, които са фармакологично активни (включително, но без да се ограничават от съответните съединения с формула I). Подобни съединения (които също така включват съединения, които могат да притежават известна фармакологична активност, но тази активност е забележимо по-ниска отколкото тази на активните съединения до които те се метаболизират), могат следователно да се опишат като пролекарства на активните съединения.
По такъв начин, съединенията съгласно изобретението са полезни защото притежават фармакологична активност, и/или се метаболизират в тялото след орално или парентерално приложение, като се получават съединения, притежаващи фармакологична активност. Съединенията съгласно изобретението се считат следователно за лекарства.
Съгласно друг вариант на изобретението се осигуряват съединения ат изобретението за използване като лекарства.
По-специално, съединения съгласно изобретението са силни инхибитори на тромбин или като такива и/или (напр. в случай на пролекарства), метаболизират след прилагане при което образуват силни инхибитори на тромбин, например както е показано в описания по-долу тест.
Под пролекарство на инхибитор на тромбин се включват съединения, които образуват инхибитор на тромбин в експериментално значимо количество, и в рамките на определено време (напр. около 1 час), след орално или парентерално приложение (виж, например, тест Е по-долу) или алтернативно, след инкубиране в присъствието на чернодробни микрозоми (виж, например, тест G по-долу).
Очаква се следователно съединенията съгласно изобретението да са полезни при тези състояния, при които е необходимо инхибиране на тромбина и/или състояния, при
които се прилага антикоагуалантна терапия, включващи следните:
Лечение и/или профилактика на тромбоза и повишена съсирваемост в кръвта и/или тъканите на животни, включително човек. Известно е, че повишена съсирваемост може да доведе до тромбо-емболични заболявания. Състояния, свързани със повишена съсирваемост и тромбо-емболични заболявания, които могат да се споменат включват вродена или придобита резистентност към активирания протеин С, като например фактор V- мутация, и вроден или придобит дефицит на антитромбин III, протеин С, протеин S, хепарин кофактор II. Други състояния, които са известни, че са свързани с повишена съсирваемост и тромбо-емболично заболяване включват циркулиращи антифосфолипидни антитела (Lupus anticoagulant), хомоцистеинемия, хепарин индуцирана тромбоцитопения и дефекти във фибринолизата, както и синдроми на коагулация (напр. дисеминирана вътресъдова коагулация (DIC)) и съдови увреждания изобщо (напр. след хирургична намеса).
Лечението на състояния, при които има нежелан излишък на тромбин без признаци на повишена съсирваемост, например в нервнодегенеративни заболявания като болест на Alzheimer.
Специфични болестни състояния, които могат да се споменат включват терапията и/или профилактиката на венозна тромбоза (напр. DVT) и емболия на белите дробове, артериална тромбоза (напр. при инфаркт на миокарда, нестабилна ангина, удар на базата на тромбоза и тромбоза на периферните артерии), и системна емболия, обикновено от предсърдието по време на предсърдно мъждене (напр. неклапно предсърдно мъждене) или . от лявата камера след трансмурален миокардиален инфаркт, или вследствие на конгестивна сърдечна недостатъчност; профилактика на ре35 оклузия (т.е. тромбоза) след тромболиза, перкутанна транслуминална ангиопластика (РТА) и операции за поставяне на коронарен байпас; предотвратяване на ретромбоза след микрохирургия и съдова хирургия.
Освен това индикациите включват терапевтичното и/или профилактично лечение на дисеминирана вътресъдова коагулация, предизвикана от бактерия, многократна травма, интоксикация или кой да друг механизъм; антикагулантно лечение когато кръвта контакт с чужди повърхности в тялото като съдови присадки, съдови стентове, съдови
катетри, механични и биологични протезни клапи или всяко друго медицинско приспособление;
и антикоагулантно лечение когато кръвта е в контакт с медицински приспособления извън тялото като по време на кардиоваскуларна хирургия при използване на апарат сърце-бял дроб или в хемодиализата;
терапевтичното и/или профилактично лечение на идиопатичен и респираторен дистрес синдром при възрастни, белодробна фиброза след лъчево лечение или химиотерапия, септичен шок,
септицемия, възпалителни отговори, които включват, но не се ограничават с оток, акутна или хронична атеросклероза като заболяване на коронарните артерии и образуването на атеросклееротични плаки, заболяване на церебралните артерии, мозъчен инфаркт, церебрална тромбоза, церебрална емболия, заболяване на периферните артерии, исхемия, ангина (включително неустойчива ангина), увреждане след реперфузия, рестеноза след перкутанна транслуминална ангиопластика (РТА) и коронарен байпас.
Съединения съгласно изобретението, които инхибират трипсин и/или тромбин могат да бъдат също така полезни при лечение на панкреатит.
Съединенията съгласно изобретението следователно могат да се използват при терапевтичното и/или профилактично лечение на тези състояния.
Съгласно един друг вариант на се осигурява метод за лечение на настоящето изобретение, състояние, при което е необходимо инхибиране на тромбин, като този метод включва прилагане на терапевтично ефективно количество от съединение съгласно изобретението към пациент, страдащ от или податлив на такова състояние.
Съединенията съгласно изобретението се прилагат обикновено орално, интравенозно, субкутанно, букално, ректално, дермално, назално, през трахеята, чрез бронхите, чрез други парентерални пътища или чрез инхалация, под формата на фармацевтични препарати, включващи съединение съгласно изобретението или под формата на свободна база, или като фармацевтично приемлива нетоксична органична или неорганична киселиноприсъединителна сол във фармацевтично приемлива дозирана форма.
Предпочитани начини за прилагане на съединения съгласно изобретението са оралните.
Предпочитаните фармацевтични препарати включват фармацевтични състави с модифицирано освобождаване, включващи съединения съгласно изобретението. Терминът модифицирано освобождаване ще се разбере от специалиста в областта, че фармацевтичният състав включва всеки състав, в който началото и/или скоростта на освобождаване на лекарството (т.е. съединението съгласно изобретението) е изменено чрез фармацевтични манипулации, и следователно включва дефиницията дадена в United States
Pharmacopeia (USP XXII) на страници xliii xliv от предговорната/встъпителната част, в резултат документът със съответното разкритие е цинтиран тук за справка.
Подходящи формулировки с модифицирано освобождаване могат да се получат от специалист в съответствие със стандартните методи във фармацията (виж, например,
Pharmaceutisch Weekblad Scientific Edition, 6,57 (1984);
Medical Applications of Controlled Release, Vol II, eds.
Langer и Wise (1984) Bocaraton, Florida, при pages 1 to 34;
Industrial Aspects of Pharmaceutical
Pharmaceutical Press (1993) при
191 to 211 ofPharmaceutics s, pages
The ed. Sandel, Swedish to 104; и pages
Science of Dosage
Aulton (1988) (Churchill модифицирано освобождаване
Form Design, ed. Μ. E.
Livingstone)).
Препарати c предпочитано включват тези, в които подходящо съединение съгласно изобретението е закрепено в полимерна матрица. В това отношение, ние предпочитаме, формулировките, включващи съединения съгласно изобретението да се прилагат орално под формата на така наречената набъбваща система с модифицирано освобождаване, или система на желиращ матрикс с модифицирано освобождаване, в която съединението съгласно изобретението се осигурява заедно с полимер, който набъбва във водна среда (т.е. хидрофилен желиращ компонент).
По-специално ние предпочитаме съединенията съгласно изобретението да се формулират заедно в желиращ матриксен състав, включващ йота-карагинан и един или няколко неутрални желиращи полимери.
Йота-карагинан за предпочитане присъства в такива предпочитани препарати при ниво по-високо от 15 тегл.%. Предпочитано качество на йота-карагинан включва йотакарагинан за фармацевтични цели (от FMC Biopolymer), с вискозитет не по-малък от 5 сентипоаза (cps), за предпочитане в границите 5-10 cps (за 1.5% разтвор загрят до 82° С, след което вискозитетът се измерва при 75° С с вискозиметър Brookfield LV снабден с шпиндел №1 при скорост 30 rpm (об/мин№) , и йота-карагинан с техническа чистота (доставен от Fluka Biochemica), който за предпочитане има вискозитет не по-малък от 14 mPa.s, за 0.3 % воден разтвор, загрят до 20° С, след което вискозитетът се измерва като се използва вискозиметър с падащо топче, от типа Нааке, използван заедно с термостат Lauda СЗ и Накке Mess System III, и при използване на топчета от неръждаема а стомана със златно покритие с плътност 7.8 g/cm .
Неутрално желиращият полимер може да бъде един или смес от няколко, неутрални полимери с желиращи свойства и които имат доказана независима от pH разтворимост. Неутрално желиращият полимер е за предпочитане, във формулировката в количество по-високо от 10%, но за предпочитане повече от 20 тегл. %.
Подходящи неутрално желиращи полимери включват полиетиленоксид (РЕО), производни и членове на РЕО семейството (например, полиетиленгликол (PEG), за предпочитане който се намира естествено в твърдо състояние, с подходящо молекулно тегло или вискозитет). Ако се
използва като самостоятелен неутрално желиращ полимер, РЕО за предпочитане има молекулно тегло MW > 4 милиона (4М), съответстващо на воскозитет на воден разтвор в границите от 1650-5500 mPa.s (или 1650-5500 cps; измерено за 1% воден разтвор при 25° С, като се използва вискозиметър Brookfield RVF, със шпиндел No. 2, при 2 rpm) . Други примери за подходящи РЕО включват РЕО с MW около 5 милиона (5М) , съответстващо на вискозитета на воден разтвор в границите на 5500-7500 mPa.s, или MW на РЕО около 8 милиона (8М), съответстващо на вискозитета на воден разтвор в границите от 10000-15000 mPa.s. Тази област покрива стойността за типичен вискозитет (в cps), измерен при 25° С, оценен за
този полимер, в USP 24/NF 19, 2000, рр. 2285-2286. Ако PEG се използва като самостоятелен неутрално желиращ полимер за предпочитане той има високо молекулно тегло, например, MW от около 20000, съответстващо на граница на вискозитета от 2700-3500 mPa.s (или 2700-3500 cps), измерен, като се използва 50% воден разтвор (w/w) при 20° С, при използване на капилярен вискозиметър (Ubbelohde или еквивалентен). [Ref: European Pharmacopoeia 3rd Ed., 2000, Supplement, pp. 908-909. ]
Други подходящи желиращи полимери включват целулозни производни като хидроксипропилметилцелулоза (НРМС) или хидроксиетилцелулоза (НЕС) с подходящо високи вискозитети (напримерНРМС 10000 cps,HPMC 15000 cps,НЕС type ННили НЕС type Н). Когато се използва като самостоятелен неутрален полимер, хидроксипропилметилцелулозните полимери катоНРМС 10000 cps и НРМС 15000 cps имат респективно, привиден вискозитет 7500-14000 mPa.s (или 7500-14000 cps), и 11250-21000 mPa.s (или 11250-21000 cps), когато се измерва при 20° С с 2% (w/w) воден разтвор, изчислен по отношение на сухото вещество, при използване на капилярен вискозиметър (Ubbelohde или еквивалентен). Един вид хидроксиетилцелулозен полимер, например Natrosol 250
Pharma, type НН, от Hercules
Incorporated (Aquaion), показва обикновено вискозитет по
Brookfield от около
20,000 mPa.s, като се използва устройство
Brookfield
Synchro-Lectric
Model LVF, при концентрация на разтвор, шпиндел no. 4, скорост на шпиндела 30 rpm, фактор
200, 25°
C (Виж Natrosol Physical и Chemical Properties booklet,
Специфични формулировки, които могат да се споменат, включват тези, в които съединение съгласно изобретението е формулирано заедно с йота-карагинан и НРМС (10,000 cps) в съотношение 50:50 (тегл.%), или заедно с йота-карагинан и
РЕО 4М в съотношение 50:50 (тегл.%).
Предпочитани помощни вещества в такива формулировки са лубриканти, като натриев стеарилфумарат.
В зависимост от заболяването и пациента, който се лекува, и начина на прилагане, съставът може да се прилага при вариране на дозировката.
Съединенията съгласно изобретението могат също да се комбинират и/или да се прилагат заедно с кое да е антитромботично средство/а с различен механизъм на
действие, например едно или няколко от следните:
антитромбоцитните средства ацетилсалицилова киселина, тиклопидин и клопидогрел; инхибитори на тромбоксановия рецептор и/или инхибитори на синтетазата; антагонисти на фибриногеновия рецептор; простациклинови миметици; инхибитори на фосфодиестераза; антагонисти на ADP-рецептор (Р2Т); и инхибитори на карбоксипептидаза U (CPU).
Съединенията съгласно изобретението могат освен това да се комбинират и/или прилагат съвместно с тромболитици
като един или няколко от тъканен плазминогенен активатор (естествен, рекомбинантен или модифициран), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, анизоилиран плазминогенстрептокиназа активаторен комплекс (APSAC), плазминогенни активатори на животинска слюнчена жлеза, и др, при лечение на тромботични заболявания, по-специално инфаркт на миокарда.
Съгласно един друг вариант на изобретението се осигурява фармацевтичен състав, включващ съединение съгласно изобретението, смес с фармацевтично приемлив адювант, разредител или носител.
Подходящи дневни дози на съединенията съгласно изобретението при лечение на хора са около 0.001-100 mg/kg телесно тегло при орално приложение и 0.001-50 mg/kg телесно гело при парентерално приложение.
За да се избегне съмнение, терминът лечение включва лечение и/или профилактика.
Съединения съгласно изобретението имат предимството, че те могат да бъдат по-ефикасни, по-малко токсични, подълго действащи, да имат по-широк спектър на действие, да бъдат по-силно действащи, да имат по-малко странични ефекти, да се абсорбират по-лесно и/или да имат по добър фармакокинетичен профил (напр.
по-висока орална
биологическа достъпност и/или по-нисък клирънс) и/или имат други полезни фармакологични, физични или химични свойства спрямо съединенията, известни в областта. Съединенията съгласно изобретението могат да имат и предимството, че могат да се прилагат не толкова често както съединенията, известни в областта.
Биологични тестове
Могат да се използват следните методи за анализ
Тест А
Определяне на времето за образуване на тромбинов съсирек (ТТ)
Инхибиторният разтвор (25 pL) се инкубира с плазма (25 pL) за три минути. След това се прибавя човешки тромбин (Т 6769; Sigma Chem. Co или Hematologic Technologies) в буферен разтвор, pH 7.4 (25 цЬ, 4.0 NIH единици/mL) , и времето за образуване на съсирек се измерва в автоматично устройство (КС 10; Amelung).
Времето за образуване на тромбинов съсирек (ТТ) се изразява в абсолютни стойности (секунди) или като съотношение на ТТ без инхибитор (ТТО) спрямо ТТ с инхибитор (ТТ±) .
Последните съотношения (обхват 1-0) се нанасят спрямо концентрацията на инхибитор (log стойност) и се построяват сигмоидални криви доза-отговор съгласно уравнението където: a = максимален обхват,
т.е.
1;
наклона на кривата доза-отговор; и 1С5о концентрация на инхибитор, който удвоява времето за образуване на съсирек.
Изчисленията се правят на
PC, като се използва софтуерна
програма GraFit
Version 3, условия на уравнението: старт при 0, определяне на край (Erithacus
Software, Robin
Leatherbarrow, Imperial College of Science,
London, UK).
Тест В
Определяне на инхибирането на тромбин с хромогенен, роботизиран анализ
Силата на тромбиновия хромогенен субстратен метод, процесор с микроплаки (Rosys Switzerland), като се плата с половин обем ( използват
Costar, инхибитор се измерва с в Plato 3300 роботизиран AG, CH-8634 Hombrechtikon,
96-ямкови микротитърни
Cambridge, МА, USA; Cat No
3690) . Изходните разтвори на изследваното вещество в DMSO (72 μΐ), 0.1-1 mmol/L, се разреждат на серии 1:3 (24 + 48 gL) с DMSO, за да се получат десет различни концентрации, които се анализират при изследването. 2 цИ от изследваното вещество се разреждат с 124 μΠ буфер за анализ, прибавят се 12 μΠ хромогенен субстратен разтвор (S-2366, Chromogenix, Molndal, Sweden) в буфер за анализ и накрая - 12 μΠ разтвор на α-тромбин (човешки а-тромбин, Sigma Chemical Co. или Hematologic Technologies) в буфер за анализ и пробите се разбъркват. Крайните концентрации за анализ са: вещество за анализ 0.00068-13.3 pmol/L, S-2366 0.30 mmol/L, α-тромбин 0.020 NIHU/mL. Линейното абсорбционно нарастване по време на 40 минутна инкубация при 37° С се използва за изчисление на процента инхибиране на изследваните вещества, в сравнение с празни проби без инхибитор. Работната ICso стойност от робота, съответстваща на концентрацията на инхибитор, който предизвиква 50% инхибиране на тромбинова активност, се изчислява от логаритмичната концентрация спрямо кривата за % инхибиране.
Тест С
Определянето на константата на инхибиране Kj за човешки тромбин
Определянето на Κι-стойностите се извършва като се използва хромогенен субстратен метод, проведен при 37° С на центрофужен анализатор Cobas Bio (Roche, Basel, Switzerland). Остатъчната ензимна активност след инкубиране на човешки α-тромбин с различни концентрации на изследваното вещество се определя при три различни субстратни концентрации и се измерва като изменение на оптичната абсорбция при 405 пт.
Разтвори на изследваното вещество (100 цЬ; обикновено в буфер или физиологичен разтвор , съдържащ BSA 10 g/L) се смесват с 200 цЬ човешки α-тромбин (Sigma Chemical Co) в буфер за анализ (0.05 mol/L трис-HCl pH 7.4, йонна сила 0.15, регулирана с NaCl), съдържащ BSA (10 g/L), и се анализират като проби в Cobas Bio. Проба от 60 цИ, заедно с 20 цИ вода, се добавя към 320 цИ от субстрат S-2238 (Chromogenix AB, Mlndal, Sweden) в буфер за анализ, и се регистрира изменението в абсорбцията (VA/min. Крайните концентрации на S-2238 са 16,24 и 50 mol/L и на тромбин 0.125 NIH U/mL.
Скоростта на равновесната реакция се използва за да се построят диаграми на Dixon, т.е. диаграми на концентрацията на инхибитора спрямо 1/ (VA/min). За обратими, конкурентни инхибитори точките съответстващи на данните за различните субстратни концентрации обикновено образуват прави линии, които се пресичат при х = -Kj,.
Тест D
Определяне на активирано парциално тромбопластиново време (АРТТ)
АРТТ се определя в събрана нормална човешка цитратна плазма с реагент РТТ Automated 5q производство на Stago. Инхибиторите се добавят към плазмата (10 pL инхибиторен разтвор към 90 pL плазма) и се инкубира с АРТТ реагент за 3 минути, след което се добавят 100 μ L разтвор на калциев хлорид (0.025 М) и АРТТ се определя като се използва
анализатор за коагулация КС10 (Amelung) съгласно
инструкциите на производителя на реагента.
Времето на съсирване се изразява в абсолютни стойности
(секунди) или като съотношение на АРТТ без инхибитор (АРТТ0) към АРТТ с инхибитор (APTTjJ . Последните съотношения (обхват 1-0) се нанасят спрямо концентрацията на инхибитор (log стойности) и се построяват сигмоидалните криви доза-отговор съгласно уравнението у= а/ [1+ (x/IC50) S] където: а = максимален обхват, т.е. 1; s = наклон на кривата доза-отговор; и IC50 = концентрация на инхибитор, който удвоява времето на съсирване. Изчисленията се правят на PC като се използва софтуерна програма GraFit Version 3, условия на уравнението: начало при 0, край = 1 (Erithacus Software, Robin Leatherbarrow, Imperial College of Science, London, UK).
IC50APTT се определя като концентрацията на инхибитор в човешка плазма, която удвоява . активираното парциално тромбопластиново време.
Тест Е
Определяне на тромбиново време ex vivo
Инхибирането на тромбин след орално или парентерално прилагане на съединенията съгласно изобретението, разтворени в етанол: SolutolK:вода (5: 5:90), се изследва при плъхове в съзнание, на които един или два дена преди екперимента е поставен катетър за събиране на кръв. В деня на експеримента се взимат кръвни проби на определени периоди след прилагане на съединението в пластмасови епруветки, съдържащи 1 част разтвор на натриев цитрат (0.13 mol/ L) и 9 части кръв. Епруветките се центрофугират при което се получава плазма, бедна на тромбоцити.
цЬ от плаземните проби се утаяват с 100 цЬ студен ацетонитрил.
Пробите се центрофугират за 10 минути при 4000 об/мин. 75 цЬ от супернатантата се разрежда с 75 цЬ 0.2% мравчена киселина. 10 цЬ обеми от получените разтвори се анализират с LC-MS/MS и концентрациите на тромбиновия инхибитор се определят при използване на стандартни криви.
Тест F
Определяне на плазмен клиарънс в плъх
Плазменият клиарънс се измерва в женски плъхове
Sprague Dawley. Съединението се разтваря във вода и се
прилага като субкутанна болусна инжекция при доза от 4
цто1/кд. Кръвните проби се събират на интервали до 5 часа
след прилагането на лекарството. Кръвните проби се центрофугират и плазмата се отделя от кръвните клетки и се прехвърля във флакони, съдържащи цитрат (10% крайна концентрация) . 50 цЬ от плазмените проби се утаяват с 100 pL студен ацетонитрил. Пробите се центрофугират за 10 минути при 4000 об/мин. 75 цЬ от супернатантата се разрежда с 75 цЬ 0.2% мравчена киселина. Обеми от по 10 цЬ от получените разтвори се анализират с LC-MS/MS и концентрациите на тромбиновия инхибитор се определят като се използват стандартни криви. Площта под плазмения профил концентрация-време се оценява като се използва log/линейно
трапецовдно правило и се екстраполира безкрайност.
Плазменият клиарънс (CL) на съединението се определя след това като
CL = доза/AUC
Стойностите се дават в mL/min/kg.
Тест G
Определяне на стабилност in vitro
Чернодробни микрозоми се приготвят от плъхове SpragueDawley и от човешки черен дроб съгласно вътрешни SOPs. Съединенията се инкубират при 37°С при обща микрозомна концентрация на протеин от 3 mg/mL в 0.05 mol/L TRIS буфер при pH 7.4, в присъствието на кофакторите NADH (2.5 mmol/L) и NADPH (0.8 mmol/L). Началната концентрация на съединението е 5 или 10 μπιοΙ/L. За анализ се вземат проби до 60 минути след началото на инкубирането. Ензимната активност в взетата проба се прекъсва незабавно чрез добавяне на 20% миристинова киселина с обем, съответстващ на 3.3% от общия обем на пробата. Концентрацията на съединението, останало (FINAL CONC) в пробата от 60-ата минута се определя чрез LCMS, като се използва проба, взета при нулево време, като контрола (START CONC). % разграден тромбинов инхибитор се изчислява като:
100% х [START CONC]- [FINAL CONC] [START CONC]
Тест Η
Модел на артериална тромбоза
Съдово увреждане се предизвиква чрез прилагане на ферихлорид (FeC13) локално към сънната артерия. Плъховете се упояват с интраперитонеална инжекция от натриев пентобарбитал (80 mg/kg; Apoteksbolaget ; Umea, Sweden), последвано от непрекъсната инфузия (12 mg/kg/h) по време на експеримента. Температурата на плъховете се поддържа на 38° С по време на експеримента чрез външно загряване. Експериментът започва с 5 минутен контролен период. Пет о с.
минути по-късно, интравенозно се прилага човешки Iфибриноген (80 kBq; IM53; Amersham International, Buckinghamshire, UK) и се използва като маркер за сладващото включване на фибрин(оген) в тромба.
Проксималният край на сегмента от сънната артерия се поставя в пластмасова тръба (6 mm; Silastic ; Dow Coming, MI, USA) отворена по дължина, съдържаща, напоена c FeC13 (2 pL; 55% тегл/тегл; Merck, Darmstadt, Germany) филтърна хартия (диаметър 3 mm; IF ; Munktell, Grycksbo, Sweden). Лявата сънна артерия се оставя под действието на FeC13 за минути и след това се изважда от пластмасовата тръба и се потапя във физиологичен разтвор. Петдесет минути покъсно, сънната артерия се изважда и се измива във физиологичен разтвор. Вземат се контролни кръвни проби за определяне на кръвната 1251-активност, 10 минути след инжекцията на 1251-фибриноген, и в края на експеримента.
51
I-активността в контролните кръвни проби и съдовия сегмент се измерват с гама брояч (1282 Compugamma; LKB Wallac Оу, Turku, Finland) в същия ден, в който се провежда експериментът. Размерът на тромба се определя като количеството 1251-активност включено в съдовия сегмент спрямо 1251-активността в кръвта (cpm/mg) .
Общи експериментални детайли
TLC се провежда върху силикагел. Хирален HPLC анализ се провежда с колона 46 mm X 250 mm Chiralcel 0D с 5 cm
предпазна колона. Температурата на колоната се държи на 35°
С. Скоростта на потока е 1.0 mL/min. Използва се детектор на Gilson 115 UV при 228 nm. Подвижната фаза се състои от
хексан, етанол и трифлуороцетна киселина и подходящите съотношения са дадени за всеки компонент. Обикновено, продуктът се разтваря в минимално количество етанол и той се разрежда с подвижната фаза.
LC-MS/MS се провежда на уред НР-1100, снабден с СТСPAL инжектор и 5 цт, 4x100 mm ThermoQuest, Hypersil BDS С18 колона. Използва се API-3000 (Sciex) MS детектор. Скоростта на потока е 1.2 mL/min и подвижната фаза (градиент) се
състои от 10-90% ацетонитрил с 90-10% 4 mM воден амониев
ацетат, и двата съдържащи 0.2% мравчена киселина.
2Н NMR спектрите се записват като се използва
тетраметилсилан като вътрешен стандарт. 13С NMR спектрите се записват като се използват изброените деутерирани разтворители като вътрешен стандарт.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1
Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab(OcBu)
(i) З-Хлоро-5-метоксибензалдехид
3,5-Дихлороанизол (74.0 g, 419 mmol) в THF (200 mL) ce прибавя на капки към магнезий (14.2 g, 585 mmol, предварително измит ,с 0.5 N НС1) в THF (100 mL) при 25° С. След добавянето, на капки се прибавя 1,2-дибромоетан (3.9 д, 20.8 mmol). Получената тъмнокафява смес се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 3 часа. Сместа се охлажда до 0° С, и Ν, N-диметилформамид (60 mL) се прибавя в една порция. Сместа се разпределя между диетилов етер (3 х 4 00 mL) и 6N НС1 (500 mL) . Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (300 mL) , изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при
което се получава масло. След бърза хроматография (2x)
върху силикагел и елуиране с хексан: EtOAc (4: 1) се
получава съединението от подзаглавието (38.9 g, 54%) като
жълто масло.
1 Н NMR (300 MHz,CDCl3) 5 9. 90 (s, 1Н), 7.53 (s, 1Н) ,
7.38 (s, 1Н), 7.15 (s, 1Н) , 3.87 (s, ЗН)
(ϋ) З-Хлоро-5-хидроксибензалдехид
Разтвор на З-хлоро-5-метоксибензалдехид (22.8 д, 134 mmol; виж етап (i) по-горе) в СН2С12 (250 mL) се охлажда до
0° С. Борен трибромид (15.8 mL, 167 mmol) се прибавя на
капки за 15 мин. След разбъркване на реакционната смес в
продължение на 2 часа, се прибавя бавно Н2О (50 mL) . След
това разтворът се екстрахира с Et2O (2 X 100 mL).
Органичните фази се обединяват, изсушават се (Na2SO4) ,
филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан: EtOAc (4: 1) се получава съединението от подзаглавието (5.2 д, 25%).
A NMR (300 MHz, CDC13) 5 9.85 (s, 1H) , 7.35 (s, 1H) , 7.20 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.68 (s, 1H) (iii) З-Хлоро-5-дифлуорометоксибензалдехид
Разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (7.5g, 48 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 2-пропанол (250 mL) и 30% КОН (100 mL) се загрява до варене под обратен хладник. По време на разбъркване, CHC1F2 се барботира в реакционната смес в продължение на 2 часа. Реакционната смес се охлажда, подкислява се с IN НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 100 mL) . Органичните фази се измиват със солев разтвор (100 mL) , изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан: EtOAc (4: 1) се получава съединението от подзаглавието (4.6 д,.46%).
A NMR (300 MHz, CDCI3) 5 9.95 (s, 1Н) , 7.72 (s, 1H) ,
7.52 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.60 (t, JH-F = 71. 1 Hz, 1H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH(OTMS) CN
Разтвор на 3-хлоро-5-дифлуорометоксибензалдехид (4.6 g, 22.3 mmol; виж етап (iii) по-горе) в СН2С12 (200 mL) се охлажда до 0° С. Прибавят се Znl2 (1. 8 g, 5.6 mmol) и триметилсилил цианид (2.8 д, 27.9 mmol) и реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка в продължение на 15 часа. Сместа се концентрира частично във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието като течност, което се използва директно в етап (v) по-долу без допълнително пречистване или характеризиране.
(V) Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R, S)CH(OH)C(NH)OEt
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R, S)CH(OTMS)CN (6.82 g, отговарят на приблизително 22.3 mmol; виж етап (iv) по-горе) се прибавя на капки към HCl/EtOH (500 mL) . Реакционната смес се бърка 15 часа, след това се концентрира частично във вакуум при
което се получава съединението от подзаглавието като течност, което се използва в етап (vi) без допълнително пречистване или характеризиране.
(vi)Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S)CH(OH)C(O)OEt
Ph(З-Cl)(5-OCHF2)-5) CH (OH) C (NH) OEt (6.24 g, отговарят на приблизително 22.3 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в THF (250 mL) , 0. 5М H2SO4 (400 mL) се прибавя и реакционната смес се разбърква при 40° С в продължение на 65 часа, охлажда се и след това се концентрира частично във вакуум за да се отстрани по-голямата част от THF. След това реакционната смес се екстрахира с Et2O (3 х 100 mL) , изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието като твърдо вещество, което се използва в етап (vii) без допълнително пречистване или характеризиране.
. (vii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(O)OH
Разтвор на Ph(З-Cl) (5-OCHF2)-(R, S)CH(OH)C(0)OEt(6.25 g, отговаря приблизително на 22.3 mmol; виж етап (vi) по горе) в 2-пропанол (175 mL) и 20% КОН (350 mL) се разбърква при стайна температура 15 часа. След това взаимодействието се концентрира частично във вакуум за да се отстрани поголямата част от 2-пропанол. Останалата смес се подкислява с IM H2SO4, екстрахира се с Et2O (3 х 100 mL) , изсушават се (Na2SO4) и се концентрират във вакуум при което се получава твърдо вещество. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с СНС13 : МеОН: концентриран NH4OH (6: 3:1) се получава амониевата сол на съединението от подзаглавието. След това амониевата сол се разтваря в смес от EtOAc (75 mL) и Н20 (75 mL) и се подкислява се с 2N HCI. Органичната фаза се отделя и измива със солев разтвор (50 mL), изсушава се (Na2SO4) и се концентрира във вакуум, при което се
получава съединението от подзаглавието (3.2 g, 57% от етап
(iv) до (vii)).
7Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.38 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H),
7.15 (s, 1Н), 6.89 (t, JH-F = 71. 1 Hz, 1H) , 5.16 (s, 1H)
(viii)Ph(З-Cl)(5-OCHF?)- (R) CH (OH) C (0) OH (a) и Ph(3-
Cl) (5-OCHF2) - (S) CH (OAc)C(0)OH(b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH (OH) C (0) OH (3.2 g, 12.7 mmol; виж етап (vii) по-горе) и Липаза PSAmano (-2. 0 g) във винилацетат (125 mL) и МТВЕ (125 mL) се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 48 часа. Реакционната смес се охлажда, филтруват се през Celite (газ) и филтърната утайка се измива с EtOAc. Филтратът се концентрира във вакуум и се подлага на бърза хроматография върху силикагел при елуиране с СНС13:МеОН:концентриран NH40H (6: 3:1), при което се получава амониевата сол на съединенията от подзаглавията (а) и (Ь). Съединение (а) под формата на сол се разтваря в Н20, подкислява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc. Органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум при което се получава съединението от подзаглавието (а)(1.2 д, 37%).
За съединение от подзаглавие (а) ТН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.38 (s, 1Н) , 7.22 (s, 1H) ,
7.15 (s,lH), 6.89 (t, JH-F = 71. 1 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H) (ix)Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)OH (1.1 g, 4.4 mmol; виж етап (viii) по-горе) и Н-Aze-Pab(Teoc)(виж Международна заявка за патент W0 00/42059,2.6 д, 5.7 mmol) в DMF (50 mL) при 0° С се прибавя РуВОР (2.8 д, 5.3 mmol) и колидин (1.3 д, 10.6 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура допълнително още 15 часа. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография върху силикагел (3 х), елуира се първо с CHCl3:EtOH (9:1), след това с EtOAc: EtOH (20: 1) и накрая елуиране с СН2С12 : СН30Н (95: 5) при което се получава съединението от подзаглавието (1.0 д, 37%) като бяло твърдо вещество.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.79-7.85 (d, J= 8. 7 Hz, 2H) , 7.15-7.48 (m, 5H), 6.89 и 6.91 (t, JHF = 71. 1 Hz, 1H), 5. 12 и 5.20 (s, 1H), 4.75-4.85 (m, 1H), 3.97-4.55 (m, 6H) , 2.10-2.75 (m, 2H) , 1.051. 15 (m, 2H) ,
0.09 (s, 9H) MS (m/z) 611 (M + 1)+ (x)Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu,Teoc) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (0.051 g,
0.08 mmol; виж етап (ix) по-горе), се разтваря в 3 mL ацетонитрил и се прибавят 0.062 g (0.5 mmol) 0циклобутилхидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70° С в продължение на 4.5 часа. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и етилацетат. Водната фаза се екстрахира още два пъти с етилацетат и обединената органична фаза се измива с вода, солев разтвор, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Добив: 0.054 g (95%).
1H-NMR (400 MHz; CD3OD) : δ 8.66-8.50 (m, 1Η) , 7.45 (d, 2H) , 7.29 (m, ЗН) , 7.15 (m, 2Η) , 6.88 (t, 1H основен ротамер) , 6.85 (t, 1Η второстепенен ротамер) , 5.18 (s, 1H основен ротамер), 5.12 (s, 1H второстепенен ротамер), 5.16
(т, 1Н второстепенен ротамер), 4.78 (т, 1Н основен
ротамер), 4.70 (т, 1Н) , 4.50-4.30' (т, ЗН) , 4.19-3.93 (т,
ЗН) , 2.71-2.44 (т, 1Н) , 2.34-2.11 (т, 5Н) , 1.78 (т, 1Н) ,
1.62 (m, 1Н), 0. 96 (т, 2Н), 0.01 (s, 9Н)
(xi) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (OcBu)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu,Teoc) (0.054 g, 0.08 тто1;виж етап (x) по-горе), се разтваря в
0.5mL СН2С12 и 3mL TFA. Реакцията се оставя да протече за 60 минути. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства, като се използва препаративна HPLC. Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х), при което се получава 23 mg (54%) от съединението от заглавието.
MS (m/z) 536 (M-l)’ ; 538 (Μ + 1)+ XH-NMR (400 MHz; CD3OD) : δ 7.56 (d, 2H), 7.33 (m, 3H), 7.15 (m, 2H) , 6.89 (t, 1H основен ротамер), 6.86 (t, 1H второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1H основен ротамер; и m,
1H второстепенен ротамер), 5. 11 (s, 1H второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1H основен ротамер), 4.58 (m, 1H) , 4.42 © (m, 2H) , 4. 34 (m, 1H основен ротамер), 4.15 (m, 1H основен ротамер), 4.06 (m, 1H второстепенен ротамер), 3.97 (m, 1H второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1H второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1H основен ротамер), 2.33-2.25 (m, ЗН) , 2.01-2.20 (m, 2H) , 1.75 (m, 1H) , 1.59 (m, 1H) 13C-NMR (100 MHz;
CD3OD)(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.4,172.3,171.9,171.4,152.3
Пример 2
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)СН(OH)С(Q)-Aze-Pab(OH) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH, Teoc) © Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc) (0.148 g, 0.24 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) , се разтваря в 9 mL ацетонитрил и се прибавят 0.101 g (1.45 mmol) хидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70° С в продължение на 2.5 часа, филтруват се през Celite® и се изпаряват. Суровият продукт (0.145 д; 75% pure) се използва директно в следващия етап без допълнително пречистване.
(ii) Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OH) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (OH, Teoc) (0.145 g, 0.23 mmol; виж етап (i) по-горе), се разтваря в 0.5 mL СН2С12 и 9 mL TFA. Реакцията се оставя да протече за 60 минути. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства, като се
използва препаративна HPLC. Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х), при което се получава 72 mg (Добив за двата етапа 62%) от съединението от заглавието.
MS (m/z) 482 (Μ -1); 484(М+1) + 1H-NMR (400 MHz; CD3OD) : δ 7.58 (d, 2Η) , 7.33 (m, ЗН) ,
7.15 (m, 2Н) , 6.89 (t, 1Н основен ротамер) , 6.86 (t, 1Н второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н основен ротамер; и m,
1Н второстепенен ротамер), 5.12. (s, 1Н второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н основен ротамер), 4.42 (m, 2Н) , 4.34 (m, 1Н основен ротамер), 4.14 (m, 1Н основен ротамер), 4.06 (m, 1Н второстепенен ротамер), 3.,95 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н основен ротамер), 2.14 (m, 1Н второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.4, 172.3,
172.0,171.4 152.3, 152.1
Пример 3
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-Pab
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab(Теос) (0.045 g,
0.074 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе), се разтваря в 3 mL TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 час. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получава 0.043 g (100%) от съединението от подзаглавието като негова трифлуороацетатна сол.
1H-NMR (4 00 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.75 (m, 2Н) ,
7.55-7.5 (m, 2Н) , 7.35 (m, 1Н, основен ротамер), 7.31 (m,
1Н, второстепенен ротамер), 7.19 (m, 1Н, основен ротамер),
7.15 (m, 1Н), 7.12 (m, 1H, второстепенен ротамер), 6.89 (t, 1H, основен ротамер), 6.87 (t, 1H, второстепенен ротамер),
5.22 (m, 1H, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1H, основен
ротамер), 5.13 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.4 (m, 2Н) , 4.37 (m, 1Н, основен ротамер), 4.19 (m, 1Н, основен ротамер), 4.07 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.55 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m,
1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) 5 172. 6,172.5,172.0,171.7,167.0
MS (m/z) 465 (Μ -1)', 467 (Μ + 1) +
Пример 4
Ph (З-Cl) (5-OCHF2).- (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (СООсПентил)
Към разтвор на Ph(З-Cl) (5-OCHF2)-(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab x TFA (74 mg, 0.13 mmol; виж Пример 3 по-горе) и циклопентилхлороформат (44 mg, 0.30 mmol) в метиленхлорид (5 mL) се прибавя воден разтвор на NaOH (0.5 mL, 2М, 1 mmol). Сместа се разбърква при стайна температура и взаимодействието се следи с HPLC. След 2.5 часа, се прибавя вода и течните фази се разделят. Водната фаза се екстрахира два пъти с метиленхлорид. Обединените органични фази се изсушават (MgSO4) и се пречиства· върху силикагел (първо метиленхлорид, след това EtOAc).След отстраняване на разтворителите във вакуум, твърдата фаза се разтваря във вода/ацетонитрил и се изсушават при замръзване, при което се получава съединението от заглавието като бяло твърдо вещество. Добив: 33 mg (44%)
MS (m/z) 579 (Μ + 1)+ 3Η NMR (400ΜΗζ ; CD30D) : δ 7.79 (d, 2Η), 7.43-7.30 (m, 5Η) , 7.20 7.11 (m, 2Η), 6.90 (t, 1Η, основен ротамер), 6.87 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.19 (dd, 1H, второстепенен ротамер), 5. 18 (s, 1H, основен ротамер), 5.13 (m, 1H) ,
5.11 (s, ротамер)
1Н, второстепенен ротамер), ротамер) основен ротамер) , 4.06
1Н, второстепенен второстепенен ротамер), 2.52 (s, 1Н, основен ротамер), 4.16 второстепенен основен ротамер), 2 .
(s, 1Η, второстепенен ротамер) , 1.90 (m, 2Н) , 1.77 (m, 4Н) , (карбонил и/или amidine protons; 100 MHz) δ 173.6,173.1,
172.6,170.3, 165.6
Пример 5
Ph(З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Z)
Съединението от заглавието се получава съгласно процедурата, описана в Пример 4 по-горе като се изхожда от
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) С (0)-Aze-Pab х TFA (73 mg, 0.13 mmol; виж Пример 3 по-горе) и бензилхлороформат
0.21 mmol). Необходимо е допълнително пречистване
HPLC с
М амониев ацетат/MeCN
Подходящите фракции се концентрират във вакуум и се
Добив: 24mg екстрахират с EtOAc.
MS (m/z) 602 (Μ + 1)+
гН NMR (400MHz ; CD3OD): δ 7.80 (d, Η), 7.43-7.25 (m, 8H) ,
7.20 7.10 (m, 2H), 6.90 (t, 1H, основен ротамер) , 6.88 (t,
1H, второстепенен ротамер), 5. 18 (dd, 1H, второстепенен
ротамер) , 5.18 (s, 2H), 5.17 (s, 1H, ротамер), 5.1 1 (s, 1H,
ротамер), 4.78 (dd, 1H , основен ротамер), 4.45 (m, 2H) ,
4.34 (m, 1Н, основен ротамер ), 4.15 (s, 1H, основен
ротамер), 4.06 (s, 1H, второстепенен ротамер), 3.97 (s,
второстепенен
1Н, второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н, ротамер), 2.51 (s,
1Н, основен ротамер), основен ротамер), 2.15 (s, 1Н, второстепенен ротамер) 13CNMR (карбонил и/или амидинови протони; 100 ΜΗζ): δ
173.6,173.1, 172.6,170.5,164.9
Пример 6
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)С(0)-Aze-Pab x TFA (i)_____2-Нитро-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 3-трифлуорометоксибензоена киселина (49.0 д, 0.24 mol) в сярна киселина (500 mL) при по-малко от 0° С (баня лед-МеОН) се прибавя разтвор на калиев нитрат (31.3 д, 0.31 mol) в сярна киселина (200 mL) в продължение на 20 минути. Полученият разтвор се разбърква при 0° С в продължение на 2 часа, след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 18 часа. Реакционната смес се изсипва върху лед и полученият кисел разтвор се екстрахира с EtOAc (5х) . Обединените органични фази се измиват с Н2О (1х), солев разтвор (2х), Н2О (1х) и солев разтвор (1х), изсушават се (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (65.7 д) като твърдо вещество, онечистено с НОАс. Суровото съединение от подзаглавието се разтваря в EtOAc и толуен и се концентрира във вакуум, при което се получава свободно от НОАс твърдо вещество (58.4 д, 97%) , което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) : δ 10.10 (br s, 1H) , 8.02 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.54 (dd, 1H, J = 2 Hz, J = 8 Hz) (ii) 2-Амино-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-нитро-5-трифлуорометоксибензоена киселина (56.8 д, 0.23 mol; виж етап (i) по-горе) в EtOH (1000 mL) се прибавя 10% Pd/C (5.7 д) . Полученият разтвор се продухва с Н2 в продължение на -5 часа, филтрува се през Celite® концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (49.7 вещество, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
(m, 1Н) , 7.17 (d, 1Н,
2-Амино-3-хлоро-5-трифлуорометоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-амино-5-трифлуорометоксибензоена киселина (49.0 д, 0.22 mol; виж етап (ii) по-горе) в НОАс (1200 mL) се добавя бавно сулфурилхлорид (41.8 д, 0.31 mol). Наблюдава се отделяне на газ. Получената хетерогенна смес се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час. Допълнително количество НОАс (300 mL) се прибавя за да се улесни разбъркването разбъркване, последвано от сулфурилхлорид в порции по 5 mL докато изходното вещество свърши, което се установява на база на TLC анализ. Реакционната смес се концентрира във вакуум, при което се получава твърда фаза която се промива на ротационен изпарител с EtOAc (2х) , последвано от Et2O (lx) за да се отстрани НОАс. Получената твърда фаза се изсушава допълнително, при което се получава НС1 солта на суровото съединение от подзаглавието (60.5 д, 94%), което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CD30D) : δ 7.72 (s, 1Н) , 7. 44 (s,
1H), 7.22 (s, заменяеми) (iv)____З-Хлоро-5-трифлуоро-метоксибензоена киселина
Към разтвор на 2-амино-3-хлоро-5-трифлуорометоксибензоена киселина (60.5 д, отговарят на приблизително 0.22 mol; виж етап (iii) по-горе) в 1,4диоксан (1000 mL) се прибавя 6N НС1 (750 mL) . Органичната фаза се отделя като масло в разтвора. Диоксановият разтвор се охлажда до по-малко от 0° С (баня лед-МеОН) . Разтвор на натриев нитрит (18.2 в продължение на минути през допълнителна фуния.
Полученият разтвор се бърка в продължение на 45 мин.
Хипофосфорна киселина (221.5 mL от 50 тегл% в Н2О, 291.2 д,
2.20 mol) се прибавя бавно през допълнителна фуния.
Разтворът се разбърква при 0° С в продължение на 1.5 часа, след това се затопля до стайна температура (наблюдава се отделяне на се бърка в продължение на 18 часа.
Суровият разтвор се прехвърля в разделителна фуния и се екстрахира с Et2O (4х). Обединените органични фази се екстрахират с воден разтвор на NaHCO3 (Зх). Основната водна
фаза се подкислява внимателно с 6N
НС1 и се екстрахира с се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират получава суровото съединение от от 3-трифлуорометоксибензоена вещество което се използва допълнително пречистване.
XHNMR (300 MHz, CD3OD) : δ във вакуум, при което се подзаглавието киселина), като твърдо в следващия етап без (у) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензилов алкохол
Към разтвор на
З-хлоро-5-трифлуорометоксибензоена киселина д, 93.5 mmol;
виж етап (iv) по-горе) в безводен
THF (1200 mL) под
N2 атмосфера, при стайна температура се прибавя разтвор на комплекса BH3.THF (140 mL
1М в THF;
140.3 mmol). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 2 часа, охлажда се до стайна температура и се бърка в продължение внимателно се прекъсва с Н2О и се концентрира във вакуум за да се отстрани по-голямата част от THF. Остатъкът се разрежда с
EtOAc и органичните фази се измиват със солев разтвор (Зх), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от
подзаглавието (21.2 g, 100%) като масло, което се използва без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CDC13) : δ 7.33 (s, 1Н) , 7.17 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 2.05 (br s, 1H) (vi) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензалдехид
Разтвор на DMSO (16.1 g, 205.9 mmol) в безводен CH2CI2 (300 mL) охлажда се до -78° С. Оксалилхлорид (13.1 д, 103.0 mmol) се прибавя бавно чрез спринцовка (наблюдава се отделяне на газ). Полученият разтвор се разбърква при -78° С в продължение на 15 минути. Разтвор на З-хлоро-5трифлуорометокси-бензилов алкохол (21.2 д, 93.6 mmol; виж етап (ν) по-горе) в СН2С12 (200 mL) се прибавя през допълнителна фуния за период от 15 минути. Мътният разтвор се разбърква при -78° С в продължение на 4 0 минути и DIPEA (60.5 g, 468.0 mmol) се прибавя през допълнителна фуния за 10 минути. Полученият хомогенен разтвор се разбърква при 78° С в продължение на 1.5 часа, след това се затопля до стайна температура и се бърка 18 часа. Суровият разтвор се концентрира във вакуум, остатъкът се разрежда с EtOAc и измива с Н20 (lu) , 2N HCI (lu) , солев разтвор (1и), воден разтвор на NaHCO3 (1х) и солев разтвор (1х) . Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (19.9 д, 95%), което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CDC13) : δ 10. 00 (s, 1H) , 7.83 (s,
1H), 7.66 (s, 1H), 7.51 (s, 1H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R, S) CH (OTMS) CN
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензалдехид (19.9 g, 88.6 mmol; виж етап (vi) по-горе) в СН2С13 (600 mL) при 0° С се прибавя Znl2 (1.4 g, 4.4 mmol) и триметилсилил цианид (9.7 д, 97.5 mmol) . След разбъркване при 0° С в продължение на 1.5 часа и при стайна температура в продължение на 2 часа, TLC анализът показва само изходният материал. Znl2 се прибавя на порции докато реакцията протича (общо се прибавят над 30.0 g Znl2) . След разбъркване при стайна температура в продължение на 18 часа, реакцията се прекъсва с вода и органичните фази се разделят. Органичните фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (27.7 д, 96%) като течност, която се използва без допълнително пречистване.
3Н NMR (300 MHz, CDC13) : δ 7.43 (s, 1Н), 7.28 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 0.38 (s, 9H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R, S) CH (OH) C (0) OH
Суспензия от Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (R, S) CH (OTMS) CN (27.7 g, 85.6 mmol; виж етап (vii) по-горе) в концентрирана HCI (300 mL) се вари под обратен хладник в продължение на 3 часа.
Получената кафява хетерогенна смес се охлажда до стайна температура и се екстрахира с Et20 (2х). Първоначалните органични вещества се екстрахират с 2N NaOH (2х), след това основната фаза се подкислява с 2N НС1 и се екстрахира с
Et2O. Фазата с Et2O се изсушава (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (4.9 д, 21%) . TLC анализа на първоначалните органични вещества показва все още наличие на съединението от подзаглавието, поради което основната екстракция/-подкисляване се повтаря, като се използва 6N
NaOH, при което се получава допълнително сурово съединение от подзаглавието (2.8 д, 12%). TLC анализът на първоначалните органични вещества показва все още наличие на съединението от подзаглавието, така че органичните вещества се изсушават (Na2SO4) и се концентрират във вакуум, при което се получава натриевата сол на съединението от
подзаглавието (18.3 g) като масло. След това солта се разтваря отново в Et2O и органичните фази се подкисляват с 2N НС1 и измиват със солев разтвор. Получените органични фази се изсушават (Na^SOJ , обработват се с активен въглен, филтруват се през Celite® и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (14.3 д, 62%) като твърдо вещество което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
ΣΗ NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H) , 7.29 (s, 1H), 5.23 (s, 1H) (ix) Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)OH(a) и Ph(3-Cl)(5OCF3) (S)CH(OAc)C (0) OH (b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R, 5) СН (OH) С (0) ОН (7.7 9/
28.5 mmol; виж етап (viii) по-горе) и липаза PSAmano (3.8
д) в МТВЕ (100 mL) и винилацетат (50 mL) се разбърква при
60° C в продължение на 2 6 часа. Реакционната смес се охлажда и филтрува през Celite® (газ) и филтърната утайка се измива с EtOAc. Обединените органични фази се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13: МеОН:концентриран NH4OH (6:3:1) се получава смес от амониевите соли на подзаглавното съединение (а) и подзаглавното съединение (b) (6.7 д) и чиста амониева сол на подзаглавното съединение (а)(1.2 д) най-малко 95% енантомерно обогатена.
Съответните фракции се разтварят в Et2O и се измиват с 2N НС1 (1х) и солев разтвор (1х) , изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират, при което се получават съответните карбоксилни киселини (6.7 д и 1.1 д респективно). Тези фракции след това се разтварят поотделно и ако е необходимо се пречистват отново чрез хроматография върху силикагел елуиране с CHCI3: МеОН: концентриран NH4OH (6:3:1 или 75:20:5 или 145:45:10). Пречистеното подзаглавно
съединение (а) се подкислява с воден разтвор на НС1 или воден разтвор на лимонена киселина преди по-нататъшно използване. Амониевата сол на подзаглавното съединение (Ь) се използва без анализ.
За подзаглавното съединение (а) 3Н NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 7.53 (s, 1Н), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.23 (s, 1H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) : δ 174.9, 150.9, 145.4, 136.3,
126.8, 122.0, 120.6, 118.9, 72.9
MS (m/z) 269 (М-l)’ (x) Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)OH (0.73 g, 2.70 mmol ; виж етап (ix) по-горе) в DMF (40 mL) под азотна атмосфера се охлажда до 0° С. Към разтвора се прибавя НAze-Pab(Теос)(1.46 д, 3.24 mmol), колидин (0.82 д, 6.75 mmol) и РуВОР (1.83 д, 3.51 mmol).
Разтворът се разбърква при 0° С в продължение на 2 часа, загрява се до стайна температура и се бърка 18 часа, прекъсва се с вода и се концентрират във вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с Н2О (1 х), воден разтвор на NaHCO3 (lx), воден разтвор на лимонена киселина (1х) и солев разтвор (1х) , изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието.
След бърза хроматография върху силикагел (2х) елуиране с EtOAc: МеОН (30:1) след това СН2С12:МеОН (93:7) се получава съединението от подзаглавието (0.73 д, 43%) като пяна, която се натрошава.
3Н NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) : δ 7.78-7.82 (d, 2Н, J= 8 Hz), 7.25-7.54 (m, 5H) , 5.25 и 5.16 (s, 1Н) ,
5.22 и 4.79 (m, 1H), 3.92-4.58 (m, 6H), 2.20-2.76 (m, 2H), 1.04-1.13 (m, 2H), 0.08 (s, 9H)
MS (m/z) 629 (M + 1)+ (χi) Ph(З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab
Трифлуорооцетна киселина (1.0 mL) се прибавя при разбъркване към охладен лед/вода разтвор на Ph(3-Cl) (5OCF3) - (R) CH (OH) С (0) -Aze-Pab (Теос) (101 mg; 160 μπιοί; виж етап (х) по-горе), в метиленхлорид (10 mL) . Охлаждащата баня се отстранява след 1 час. След 1.5 часа при стайна температура се прибавя ацетонитрил (30 mL) и разтворителите се отстраняват внимателно при понижено налягане. Остатъкът се разтваря във вода и се изсушава при замразяване, при което се получава 90 mg (92%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
MS (m/z) 483 (М-l)'; 485 (М + 1)+ 2Н NMR (3 00 MHz; CD3OD) : (комплекс дължащ се на диастереоизомери/ротамери) : δ 7.70-7.80 (m, 2Н) , 7.45-7.58 (m, ЗН) , 7.24-7.38 (m, 2Н) , 5.26 (s, 1Н) , 5.17 (m, 1H, второстепенен ротамер), 4.82 (m, 1H, основен ротамер),
4.35-4.6 (m, ЗН) , 4.22 (m, 1H, основен ротамер), 3.92-4.12 (m, 2H, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.55 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1 Н, второстепенен ротамер) 13С NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) : δ 173. 7,173.4,173.0,172.8,168.1
Пример 7
Ph(3-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)С(0)-Aze-Pab(ОМе)
HATU (71 mg; 0.19 mmol) се прибавя при разбъркване към охлаждан с лед/вода разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCF3)(R) CH (OH) С (0) OH (39 mg; 0.14 mmol; виж Пример 6 (ix) погоре) в DMF (3mL). След 30 минути, се добавят разтвор на НAzePab(OMe) х 2НС1 (69 mg; 0.21 mmol; виж Международна заявка за патент W0 00/42059) и 2,4,6-колидин (0.080 mL;
0.58 mmol) в DMF (1.5 mL). Реакционната смес се оставя през нощта и температурата се оставя да се повиши бавно до стайна. Разтворителите се отделят във вакуум и суровият продукт се пречиства, като се използва HPLC с обърната фаза (ацетонитрил:0.1М воден разтвор на амониев ацетат), при което, след изсушаване при замразяване на съответните фракции, се получава съединението от заглавието (61 mg,
97%) като безцветно твърдо вещество.
MS (m/z) 513 (M-l)', 515 (M + 1)+
2H NMR ( 500 MHz; CD3OD) : δ 7.97 (bt, 1H) , 7.53 (d,
2H) , 7.27 (t, 1H) , 7.22 (d, 2H), 7,19 (t, 1H) , 7.11 (t,
2H) , 6.77 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.9 (bs, 3H), 4.81 (m,
2H) , 4.40 (m, 2H), 4.09 (m, 1H) 3. 87 (s, 3H), 2.58 (m,
1Н), 2.37 (m, 1Н) 13С NMR (125 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди) : δ 171.8, 169.9,156.8
Пример 8
Успореден синтез на алкоксиамидини
Този синтез се провежда в 96-ямков блок на Robbins.
Към ямките, съдържащи подходящо количество О-заместен хидроксиламин (дефиниран по-долу;
всички могат да се доставят от търговската мрежа или се получават като се използват добре известни методи от литературата) се прибавя разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (Teoc) (10 mg; 17 umol; виж Пример 6 (х) по-горе) в ацетонитрил (1.0 mL). Блокът се запечатва и реакционната смес се върти през нощта в пещ при
60° С.
След охлаждане и филтруване, твърдата фаза се измива с ацетонитрил (3
Обединените течни фракции се концентрират в вакуумна центрофуга.
етилацетат
Остатъкът се разпределя между вода (0.4 mL) и (0.4 mL). След приключване на екстракцията течност-течност, всичко се филтрува през колона
Hydromatrix™.
След трикратно измиване с етилацетат, обединените филтрати се концентрират във вакуумна центрофуга.
Премахването на защитата се провежда чрез добавяне на метиленхлорид (0.1 mL) и трифлуороцетна киселина (0.3 mL).
След разбъркване при стайна температура в продължение на 3 часа, разтворителите се отделят във
вакуум. Остатъкът се разпределя между наситен воден разтвор на натриев хидрогенкарбонат (0.5 mL) и етилацетат (0.5 mL). След екстракция, филтруване през Hydromatrix™ и концентриране (виж по-долу) остатъкът се разтваря в изопропанол/вода (7/3) (1 mL) . Около 2% от този разтвор се отстранява и се разрежда с изопропанол/вода (7/3) (1 mL) за
LC-MS анализ. След отстраняване на разтворителите във вакуум, твърдата фаза се прехвърля в 96-ямково плато, като се използва ацетонитрил и етилацетат за разтваряне на съединението. Разтворителите се изпаряват във вакуумна центрофуга, при което се получава следните титулни съединения:
Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-Pab (ОСН2-3- (5-Меизоксазол))(от 3-[(аминоокси)метил]-5-метилизоксазол х НС1 (18 mg; 0.11 mmol)) . Добив: 3.64mg (35%) (MS(m/z)596(M+l)+) ;
Ph(3-Cl) (5-OCF3)- (R)CH(OH)C(Ο)-Aze-Pab(OCH2-3пиридин)(от 3-[(аминоокси)метил]пиридин х 2 НС1 (19 mg; 96 μπιοί) . Добив: 5.14 mg (50%) (MS (m/z) 592 (Μ + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCFa)- (R) CH (OH) C(O) -Aze-Pab (OiBu) (от 0изобутил хидроксиламин x HC1 (17 mg; 14 0 μπιοί) . Добив: 4.4 mg (45%). MS (m/z) 557 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCFa)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OEt) (от 0-етил хидроксиламин x HC1 (14 mg; 140 μπιοί). Добив: 4.04 mg (42%) . MS (m/z) 529 (M+l)+) ;
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OBn) (от 0бензилхидроксиламин x HC1 (17 mg; 110 μπιοί) . Добив: 3.22 mg (29%) . MS (m/z) 591 (M + 1)+) ;
Ph(3-Cl) (5-0CF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(ОсХексил) (от 0циклохексил хидроксиламин х НС1 (15 mg; 99 μπιοί) . Добив: 2.9 mg (26%). MS (m/z) 583 (M + 1)+) ;
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OcBu) (от 0циклобутил хидроксиламин x HC1 (17 mg; 140 μπιοί). Добив: 3.3 mg (30%). MS (m/z) 555 (M + 1)+);
Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (R) CH (OH) C (Ο) -Aze-Pab (OCH2CH2OPh (3CF3))(от 0-[2-[3-(трифлуорометил)фенокси]етил] хидроксиламин х НС1 (24 mg; 93 μπιοί) . Добив: 6.52 mg (46%) . MS (m/z) 689 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OBn (4-C1) ) (от 0- (4-хлоробензил) хидроксиламин x HC1 (16 mg; 82 μπιοί) . Добив: 3.47 mg (29%). MS (m/z) 625 (M + 1)+);
Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(3-MeO))(от 0- (3-метоксибензил) хидроксиламин x HC1 (18 mg; 94 μπιοί) . Добив: 4.33 mg (36%). MS (m/z) 621 (M+l)+);
Ph(3-Cl) (5-0CF3) - (R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (OBn (2-Br) ) (от 0-(2-бромобензил) хидроксиламин x HC1 (23 mg; 96 μπιοί) . Добив:3.87 mg (30%). MS (m/z) 671 (M + 1)+);
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OBn(4-Me)) (от 0- (4-метилбензил) -хидроксиламин x HC1 (14 mg; 81 μπιοί) . Добив :2.91 mg (25%). MS (m/z) 605 (M + 1)+); и
Ph(3-Cl) (5-0CF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (0-4-хептил) (от 0-(4-хептил) хидроксиламин x HC1 (15 mg; 89 μπιοί) . Добив: 17 mg (100%). MS (m/z) 599 (M + 1)+).
Пример 9
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(5)CH(CHOH)C(0)-Aze-Pab x HOAc (i)_____3-Хлоро-5-метоксибензоена киселина
Магнезиеви стружки (Fluka purum за Grignard реакции) се обработват предварително по следния начин: Стружките се поставят в стъклена синтерована фуния и върху тях се изсипва 0.1 М хлороводородна киселина. Стружките се разбъркват със стъклена пръчка за няколко секунди и след това киселината се измива с 3 порции вода. Накрая, стружките се измиват с 2 порции ацетон и се поставят в буркан. Тетрахидрофуран (100 mL, 99.95%) се изсушава чрез добавяне на RedAl (1 g, 70 тегл.% в толуен). Предварително обработените магнезиеви стружки (5 д, 200 mmol) се поставят в облодънна колба, и се продухват с азот 3 пъти. Дихлороанизол (26 д, 146 mmol) се разтваря в THF (100 mL, RedAl-изсушен) и дибромоетан (1.8 д, 10 mmol) се прибавя. Реакционната смес се продухва с азот и след това се вари под обратен хладник в продължение на 2 часа. Загряването се прекъсва и на порции за 2 минути се прибавя сух лед (10 д).
Когато всичкият сух лед се разтвори, реакционната смес се изсипва в лед, съдържащ солна киселина (4 00 mL, 2 М) . След екстракция (етер, 300 mL) се получават 11.2 д, 60.2 mmol (Добив: 41%) от съединението от подзаглавието.
1H-NMR (500 MHz ; ацетон-de) : δ 7.57 (m, 1Η) , 7.49 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 3.91 (s, 3H) (ii) З-Хлоро-5-хидроксибензоена киселина
Алуминиев оксид (1.65 g, 60 mmol) и йод (21 g, 82 mmol) се варят под обратен хладник в толуен (200 mL) в продължение на 2 часа. След това,
3-хлоро-5-метоксибензоена киселина (11.2
60.2 mmol;
виж етап (i) по-горе) разтворена в толуен се прибавя, заедно с тетрабутиламониев йодид mmol) , и сместа се вари под обратен хладник в продължение на още часа.
охлаждане до стайна температура, екстракция се получават
8.7 д, 50 mmol (Добив: 83%) от съединението от подзаглавието.
ΊΟ
1H-NMR (300 MHz; ацетон-бб) : δ 9.27 (s, 1Η) , 7.48 (m,
1H) , 7.44 (m, 1H), 7.11 (m, 1H) (iii) З-Хлоро-5-дифлуорометоксибензоена киселина
З-Хлоро-5-хидроксибензоена киселина (6.4 g, 37.2 mmol; виж етап (ii) по-горе) разтворена в хлороформ (200 mL) се прехвърля в 500 mL тригърлена облодънна колба, снабдена с кондензатор за сух лед и входна тръба за газ.
Прибавя се натриев хидроксид (100 mL, 5 М)при интензивно разбъркване.
На порции се добавя хлородифлуорометан (Freon 22; 25 g, 290 mmol) през входа за газ при стайна температура. След 2 часа, реакцията завършва. След екстракция се получават 6.2 д, 28 mmol (Добив: 75%) от съединението от подзаглавието.
XH-NMR (500 MHz; ацетон-бб) : δ 7.87 (m, 1Н), 7.74 (m, 1H), 7.54 (m, 1H), 7.19 (t, 1H, JH-F 73 Hz) (iv) 3-Хлоро-5-дифлуорометокси-М-метокси-Мметилбензамид
З-Хлоро-5-дифлуорометоксибензоена киселина (1.8 g, 8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и оксалилхлорид (1.5 g, 11. 8 mmol) се разтварят в метиленхлорид (50 mL) . DMF (2 капки) се прибавя и реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 30 минути. След това с добавят N,0- диметилхидроксиламин (1 д, 10.2 mmol) и триетиламин (3 д, 30 mmol) и след още 10 минути разбъркване при стайна температура, реакционната смес се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в етер (100 mL) и вода (50 mL) . След разделяне, органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира. Този остатък се хроматографира върху силикагел (хексан/етилацетат 2:1) при което се получават 2 д, 7.5 mmol (93%) от съединението от подзаглавието.
^-NMR (400 MHz; CDClri : δ 7.54 (m, 1H), 7.37 (m, 1H),
7.27 (m, 1H), 6.53 (t, 1H, JH-F 73 Hz) (v)_____З-Хлоро-5-дифлуорометоксиацетофенон
3-Хлоро-5-дифлуорометокси-М-метокси-М-метилбензамид (2 g, 7.5 mmol; виж етап (iv) по-горе) се разтваря в етер (100 mL) и се охлажда под азот до -70° С. Метиллитий (7 mL, 11 mmol, 1.6Mb етер) се прибавя на капки със спринцовка при разбъркване към реакционната смес за 1 минута. Банята от сух лед се отстранява и сместа се оставя да достигне стайна
температура преди реакцията да се прекъсне с разтвор на амониев хлорид (50 mL, 5% NH4C1 във вода). Органичната фаза се измива със солев разтвор, изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан: етилацетат 2:1), при което се получават 1.5 д, 6.8 mmol (Добив: 90%) от съединението от подзаглавието.
1H-NMR (600 MHz; CDC13) : δ 7.77 (m, 1Η) , 7.59 (m, 1H) ,
7.35 (m, 1H) , 6.56 (t, 1H, JH-F 73 Hz), 2.60 (s, 3H) (vi) метилов естер на З-Хлоро-5-дифлуорометоксифенилоцетна киселина
З-Хлоро-5-дифлуорометоксиацетофенон (1.5 д, 6.8 mmol;
виж етап (ν) по-горе) се
Прибавя се разтваря в метиленхлорид (200 mL).
нитрат х ЗМеОН върху К-10 монтморилонит (6 д, 10 mmol (са 0.6 mmol/g) ; виж J.Am. Chem.
Soc., 98,
6750 (1976)) и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 20 часа. Сместа се филтрува и филтратът се измива с натриев бикарбонат (100 mL, 0.5 М), изсушава се над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан/етилацетат 2:1) при което се получават 1 g, 4 mmol (Добив: 56%) от съединението от подзаглавието.
A-NMR (500 MHz; CDCI3) : δ 7.14 (m, 1H) , 7.06 (m, 1H) , 6.96 (m, 1H) , 6.50 (t, 1H, Jh-f 73 Hz), 3.72 (s, 3H) , 3.60 (s, 1H) (vii)Метилов естер на α-формил(З-хлоро-5-дифлуорометоксифенил)оцетна киселина
Метилов естер на З-Хлоро-5-дифлуорометоксифенил-оцетна киселина (1 g, 4 mmol; виж етап (vi) по-горе) и метил формат (1 д, 16 mmol) се разтварят в етер (100 mL) и се охлажда в an ледена баня (около 2° С) . След това се прибавя фино нарязан натрий (180 mg, 7.8 mmol) и метанол (1 mL) и сместа се оставя в ледената баня при разбъркване цяла нощ. Прибавя се внимателно вода (100 mL) и фазите се разделят. Водната фаза се подкислява със солна киселина (2 М) до pH 1 и се екстрахира с етер (2 х 100 mL) . Екстрактът се изсушава над натриев сулфат, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се хроматографира върху силикагел (хексан: етилацетат (1: 1)), при което се получават 400 mg, 1.4 mmol (Добив: 36%) от съединението от подзаглавието.
A-NMR (400 MHz) : δ 12.10 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.11 (m, 1H) , 7.07 (m, 1H) , 6.94 (m, 1H) , 6.51 (t, 1H, JF-H 73),
3.83 (s, 3H) (viii) З-Хлоро-5-дифлуорометокситропова киселина
Метилов естер на α-Формил(3-хлоро-5-дифлуорометоксифенил)оцетна киселина (400 mg, 1.4 mmol; виж етап (vii) погоре) се разтваря в THF: метанол (50 mL, 9:1). Прибавя се натриев борохидрид и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 30 минути. Прибавя се вода и сместа се концентрира, при което се получава водна суспензия, която се разтваря в етилацетат и вода. Фазите се разделят и органичната фаза се измива с натриев хлорид (15% във вода), изсушава се върху натриев сулфат, филтрува се и
се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в метанол (30 mL) и се хидролизира с натриев хидроксид (1 mL, 10 М) при стайна температура в продължение на 10 минути. След екстракция се получават 180 mg, 0.68 mmol (Добив: 48%) от съединението от подзаглавието.
XH-NMR (500 MHz; CDC13) : δ 7.18 (m, 1Η) , 7.10 (m, 1H), 7.00 (m. 1H) , 6.50 (t, 1H, JF_H 73) , 4.11 (m, 1H) , 3.90 (m, 1H), 3.84 (m, 1H) (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab x HOAc
З-Хлоро-5-дифлуорометокситропова киселина (180 mg, 0.7 mmol; виж етап (viii) по-горе), Н-Aze-Pab (Teoc) x HCI (450 mg, 1 mmol) и PyBOP (530 mg, 1 mmol) се разтварят в DMF (10 mL), след което се прибавя DIPEA (550 mg, 3.9 mmol).
Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час преди да се разреди със солев разтвор (20 mL, 15% NaCl) и се екстрахира с етилацетат (40 mL) . Екстрактът се изсушава над натриев’сулфат, филтрува се и се изпарява до сухо. Остатъкът се разтваря в метиленхлорид (5 mL) и се прибавя трифлуороцетна киселина (5 mL). След 1 час при стайна температура, сместа от диастереоизомери се изпарява до сухо и остатъкът се хроматографира върху колона с обърната фаза (ацетонитрил: вода (30: 70), буфер: амониев
ацетат 0.1 М) . Изсушаване при замразяване води ДО
получаване на 36 mg, 0.067 mmol (Добив: 10. 4%) OT
съединението от заглавието.
MS (ES) 481 (М + 1)+
1H-NMR (400 MHz; CDC13) : δ 7.77 (d, 2H), 7.57 (d, 2H) ,
7.30 (m, 1Η), 7.13 (m, 2H) , 6.87 (t, 1H, JF_ h 73 Hz) , 4.76
(m, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.37 (m, 1H), 4.03 (m, 2H) , 3.82 (m,
1H) , 3.72 (m, 1H) , 2.53 (m, 1H) , 2 .28 (m, 1H) , 1.92 (s,
1,5Н) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 172.3, 171.9, 167.2
Пример 10
Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (S) CH (СН2ОН) С (0)-Aze-Pab x TFA (i) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензилмезилат
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензилов алкохол (6.1 g, 2 6.9 mmol; виж пример 6 (ν) по-горе) в
СН2С12 (250 mL) при 0° С под азотна атмосфера се прибавя DIPEA (4.2 g, 32.3 mmol) и метансулфонилхлорид (3.4 g, 29.6 mmol). Разтворът се разбърква при 0° С в продължение на 1.5 часа и се прекъсва с Н2О. Органичните фази се разделят и след това се измиват с Н2О (lx), IN НС1 (1х) , Н2О (1х) и воден разтвор на NaHCO3 (lx) и след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират, при което се получава съединението от подзаглавието (8.2 д, 99%) като масло.
гН NMR (300 MHz, CDC13) : δ Ί .37 (s, 1Η) , 7.28 (s, 1H), 7.18 (s, 1H) 5.23 (s, 2H), 3.07 (s, 3H) (ii) З-Хлоро-5-трифлуорометоксибензилцианид
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензил мезилат (8.2 g, 26.8 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMSO (50 mL) се прибавя натриев цианид (2.6 д, 53.6 mmol). Полученият хетерогенен разтвор се загрява до 50° С и се обработва с ултразвук в продължение на 1 час. Реакционната смес се охлажда и разпределя между Et2O и Н2О. Органичните фази се измиват с Н2О (2х) и солев разтвор (2х) . Обединените водни фази се екстрахират с Et2O (lx) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират при слабо загряване и частичен вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.3 д, 100%) червеникаво летливо масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
4H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.32 (s, 1H) , 7.24 (s, 1H) ,
7.12 (s, 1H), 3.78 (s, 2H) (iii) З-Хлоро-5-трифлуорометоксифенилоцетна киселина
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксибензилцианид (6.3 g, 26.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 2-пропанол (100 mL) се прибавя вода (200 mL) и калиев хидроксид (7.5 д, 133.5 mmol). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 18 часа, охлажда се до стайна температура, и 2-пропанолът се отстранява във вакуум. Водната фаза се измива с CH2CI2 (2х) и промивната течност се изхвърля. Основната водна фаза се подкислява с 2N НС1 и се екстрахира с CH2CI2 (Зх) . СН2С12 екстрактите се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.2 д, 76%) като масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
LH NMR (300 MHz, CDCI3) : δ 7.25 (s, 1Η) , 7.19 (s, 1H) ,
7.08 (s, 1H), 3.68 (s, 2H) (iv) Етил З-хлоро-5-трифлуорометоксифенилацетат
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуорометоксифенилоцетна киселина (5.2 g, 20.4 mmol; виж етап (iii) по-горе) в EtOH (600 mL) се прибавя сярна киселина (няколко капки). Разтворът се вари под обратен хладник в продължение на 18 часа, охлажда се до стайна температура, неутрализира се с твърд NaHCO3 и EtOH се отделя под вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc, разтвор на NaHCO3 фази се изсушават след това се измива (1х) и солев разтвор (Na2SO4), филтруват се с Н2О (1х), воден (1х) . Органичните и се концентрират във вакуум при което се получава съединението от подзаглавието (5.5 д, 96%) като масло, което се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.24 (s, 1H) , 7.16 (s, 1H) ,
7.07 (s, 1H) , 4.134.22 (q, J = 8 Hz, 2H) , 3.63 (s, 2H) ,
1.24-1.32 (t, J = 8 Hz, 3H)
(v)Ph(3-Cl) (5-OCF3)~ (R,S)CH(CHO)C(O)OEt
Към разтвор на етил З-хлоро-5-трифлуорометоксифенилацетат (4.5 g, 15.9 mmol; виж етап- (iv) по-горе) в безводен THF (400 mL) под азотна атмосфера при по-малко от 0° С (баня лед-МеОН) се прибавя натриев етоксид (4.5 д, 63.6 mmol) . Студеният разтвор се бърка в продължение на 40 минути и се прибавя етилформат (8.1 g, 111.3 mmol). Разтворът се разбърква при 0° С в продължение на 30 минути, затопля се до стайна температура и се бърка в продължение на 2 часа. След това, THF се отстранява във вакуум. Остатъкът се разрежда с Et2O и се екстрахира с Н2О (1х) и
0.5М NaOH (Зх). Водните екстракти се подкисляват с 2N НС1 и се екстрахират с СН2С12 (Зх) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), вакуум, при което филтруват се и се концентрират във се получава суровото съединение от подзаглавието (3.9
g). След бърза хроматография върху силикагел, елуиране с хексан: EtOAc (4: 1) се получава
61%) като масло.
3Н NMR (300 MHz, CDCI3, смес от изомери) : δ 12. 30 и
12.25 (s, 1Н), 7.39 и 7.34 (s, 1Н), 7.21 (s, 1Н), 7.17 (s,
1Н), 7.08 (s, 1Н), 4.274.37 (q, J= 8 Hz, 2Н), 1.28-1.38 (t,
J = 8 Hz, 3H) (vi) Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R, S) CH (CH2OH) C(0)OEt
Към разтвор на Ph(З-Cl) (5-OCF3)-(R, S)CH(CHO)C(Ο)OEt (3.0 g, 9.66 mmol; виж етап (v) по-горе) в МеОН (200 mL) при -10о°С С (баня лед-МеОН) се прибавя натриев борохидрид (0.7 g, 19.32 mmol) на порции за 5 мин.
Разтворът се разбърква при -10° С в продължение на 45 минути и се прибавя допълнително натриев борохидрид (0.4 д) .
След още минути, реакцията се прекъсва с воден разтвор на амониев хлорид, направен слабо кисел с 2N НС1 и МеОН се отстранява във вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с Н20 (1х), воден разтвор на NaHCO3 (lx) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан:EtOAc (5:1) се получава съединението от подзаглавието (2.0 д, 66%) като масло.
гН NMR (300 MHz, CDC13) : δ 7.26 (s, 1Н) , 7.19 (s, 1H),
ф 7.07 (s, 1Н), 4.16-4.28 (т, 2Н), 4.04-4.15 (т, 1Н) , 3.76-
3.94 (т, 2Н) , 2.33 (t, J= 6 Ηζ,ΙΗ), 1.18-1.30 (t, 7-8 Hz,
ЗН)
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R, S) CH(CH2OH) C (0) OH
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R,S)CH (CH2OH)C(0)OEt (2.0 g, 6.24 mmol; виж етап (vi) по-горе) в THF (50 mL) и H20 (25 mL) се прибавя литиев хидроксид монохидрат (0.5 д, 12.48 mmol). Разтворът се разбърква при стайна температура
за 1 час и THF се отстранява във вакуум. Остатъкът се
разрежда с Н2О след това се измива с СНС13 (2х) и
промивната течност се изхвърля. Основната водна фаза се
подкислява с 2N НС1 и се екстрахира с СНС13 (4х’ ) . СНС13
екстрактите се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (1.5 д) като масло. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:МеОН: концентриран NH4OH (градиент от 7.0:2.5:0.5 до 6:3:1) се получава амониевата сол на съединението от подзаглавието (1.1 д). Амониевата сол се разпределя между IN НС1 и СНС13. Органичните фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението
от заглавието (известно също така като З-хлоро-5трифлуорометокситропова киселина) като масло (1. 1 д, 62%).
2Н NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 7.41 (s, 1Н), 7.27 (s, 1H) ,
7.24 (s, 1H), 4.03 (m, 1H), 3. 75-3.87 (m, 2H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (5) CH (CH2OH) C (0)-AzePab(Teoc) (а) и Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (R) CH (CH2OH) C (0)-AzePab (Teoc) (b)
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-0CF3) - (R, S) CH (CH2OH) C (0) OH (0.65 g, 2.28 mmol; виж етап (vii) по-горе) в DMF при помалко от 0° С (баня лед-МеОН) се прибавя H-AzePab(Teoc)(0.90 д, 2.39 mmol), колидин (0.71 д, 5.70 mmol) и РуВОР (1.31 д, 2.51 mmol). Полученият разтвор се разбърква при по-малко от 0° С в продължение на 1 час, затопля се до стайна температура и се бърка в продължение на 1 час.
DMF след това се отделя под вакуум. Остатъкът се разрежда с EtOAc и се измива с разреден воден разтвор на НС1 (1х), солев разтвор (1х), воден разтвор на NaHCO3 (lx) и солев разтвор (1х). Органичните фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава суровото съединение от подзаглавието (2.1 д) каято смес от диастереоизомери. След бърза хроматография (Зх) върху силикагел и елуира се първо с EtOAc:МеОН (95:5) след това с СН2С12:МеОН (97:3) и накрая с СН2С12:МеОН (95: 5) се получават съединенията от подзаглавието диастереоизомер (а)(0.51 д, 35%) и диастереоизомер (Ь)(0.45 д, 31%) като трошлива пяна.
За подзаглавното съединение диастереоизомер (а)
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ
7.79-7.85 (d, J= 8 Hz, 2H) , 7.22-7.49 ι (m, 5H) , 5.17-4.77
(m, 1H), 4.53-4.18 (m, 4H) , 3.58-4.11 ι [m, 5H) , 2.47-2.73
(m, 1H) , 2.11-2.34 (m, 1H) , 1.08-1.12 ι !m, 2H) , 0.07 (s, 9H)
MS (m/z) 643 (M +1) +
(ix) Ph(З-Cl) (5-0CF?)-(S)CH(CH2OH) C(0)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S) CH (CH2OH)C (O)-Aze-Pab (Teoc) , (78 mg, 0.121 mmol; виж етап (viii) по-горе-диастереоизомер (а)), се разтваря в 5 mL трифлуорооцетна киселина. След 10 минути, взаимодействието завършва и разтворителят се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода и ацетонитрил, при което се получава желаното вещество. Добив: 70 mg (94%).
MS (m/z) 483 (M-l)' ; 485 (M +1)+
XH-NMR (400 MHz; D2O) ротамери 1:1:δ 8.83 (bt, 1H) , 7.79 (d,
1H), 7.72 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.43 (d, 2H) , 7.35 (m, 1H,
ротамер), 7.28 (m, 1H, ротамер), 7.20 (m, 1H, ротамер) ,
7.05 (m, 1H, ротамер), 5 .22 (m, 1H, ротамер) , 4.83 (m, 1H,
ротамер), 4.57 (m, 2H, ротамер), 4.38 (m, 2H, ротамер) ,
4.3-3.7 (m, 5H) , 2.77 (m, 1H, ротамер), 2.55 (m, 1H,
ротамер), 2.27 (m, 1Н) 13C-NMR (100 MHz; D20) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.9,172.2,172.0,171.8,166.9
Пример 11
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH2OH)C(O)-Aze-Pab (ОМе) (i) Ph(3-Cl) (5-OCF?)~ (S) CH (CH2OH)C (0)-Aze-Pab (OMe, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(-S)CH(CH2OH)C(O) -Aze-Pab(Teoc) (100 mg, 0.155 mmol; виж Пример 10 (viii) по-горе), се разтваря в 12 mL тетрахидрофуран. Добавя се О-метилхидроксиламин хидрохлорид (44 mg, 0.53 mmol), и реакционната смес се загрява при 50° С цяла нощ. Реакционната смес се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна HPLC (CH3CN/O.I М NH4OAc (70/30)). Съответните фракции се изпаряват и остатъкът се разтваря в малко количество ацетонитрил и вода и се изсушават при замразяване. Изсушаването при замразяване се повтаря веднъж. Добив: 80 mg (76%) чисто вещество.
XH-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.5-7.4 (m, ЗН) ,
7.35-7.2 (m, 4H) , 5.15 (m, 1H, второстепенен ротамер), 4.
(m, 1H, основен ротамер), 4.5-4.25 (m, ЗН), 4.2-3.95 (m, 4H) , 3.91 (b, 3H) , 3.9-3.6 (m, 2H) , 2.63 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1H, основен ротамер), 2.32.1 (m, 1H) , 0.95 (m, 2H) , 0.02 (s, 9H, основен ротамер),
0.01 (s, 9H, второстепенен ротамер) (ii) Ph(3-Cl) (5-QCF3)-(S)CH(CH2OH) C(0)-Aze-Pab(OMe)
Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab (OMe, Teoc) , (80 mg, 0.12 mmol; виж етап (i) по-горе), се разтваря в 1 mL метиленхлорид и се охлажда се в ледена баня. Трифлуорооцетна киселина, 3 mL, се прибавя и реакционната колба се държи в ледената баня за два часа. Сместа се изпарява и разтваря в етилацетат и се измива три пъти с воден разтвор на NaHCO3, след това, с вода и солев разтвор. Органичната фаза се изсушава (Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от малко количество ацетонитрил и вода. Добив: 60 mg (95%) чисто съединение от заглавието.
MS (m/z) 528 (M-l)‘ ; 531 (М + 1)+ XH-NMR (500 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.65-7.55 (m, ЗН, ротамери), 7.45 (m, 1Н, основен ротамер), 7.4-7.2 (m, 4Н) ,
5.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.74 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-4.3 (m, ЗН) , 4.05-3.95 (m, 2Н), 3.85 (m, 1Н, основен ротамер), 3.82 (s, ЗН, основен ротамер), 3.81(s,
ЗН, второстепенен ротамер), 3.73 (m, 1Н, основен ротамер),
3.67 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.62 (m,1Н, второстепенен ротамер), 2.63 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.50 (m, 1Н, основен ротамер), 2.24 (m,1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (125 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) 5 174.0,173.2,172.7,172.6,155.1
Пример 12
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab (ОМе) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-Pab (ОМе, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)С(0)-Aze-Pab(Teoc) (0.40 g, 0.65 mmol; виж Пример l(ix) по-горе), се разтваря в 20 mL ацетонитрил и се прибавя 0.50 g (6.0 mmol) 0-метил хидроксиламин хидрохлорид. Сместа се загрява при 70° С в продължение на 2 часа. Разтворителят се изпарява и
остатъкът се разпределя между вода и етилацетат. Водната фаза се екстрахира още два пъти с етилацетат и обединената изсушава се органична фаза се измива с вода, солев разтвор,
(Na2SO4), филтрува се и се изпарява. Добив: 0.41 д (91 %) .
3η-νμρ 1 (400 MHz; CDCI3) : δ 7.83 (bt, 1Н) , 7.57 (bs,
1Н) , 7.47 (d, 2H) , 7.30 (d, 2H) , 7.20 (m, 1H) , 7.14 (m,
1Н) , 7.01 (m, 1H) , 6.53 (t, 1H), 4.89 (s, 1H) , 4.87 (m,
1Н), 4.47 (m, 2H) , 4.4-4.2 (b, 1H) , 4.17-4.1 (m, 3H) , 3.95
(S, ЗН) , 3 .67 (m, 1H) , 2.68 (m, 1H) , 2.42 (m, 1H) 0.97 (m,
2Н) , 0.01 (s, 9H) .
(ii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe,Teoc) (0.40 д, 0.62 mmol; виж етап (i) по-горе), се разтваря в 5 mL TFA и се оставя да реагира за 30 мин.
TFA се изпарява остатъкът се разпределя между етилацетат и воден разтвор на
NaHCO3. Водната фаза се екстрахира още два пъти етилацетат и обединената органична фаза се измива с вода, солев разтвор, изсушава се (Na2SO4) филтрува се и се изпарява. Продуктът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил. Не е необходимо пречистване. Добив:
XH-NMR (600 MHz; CDC13) : δ 7.89 (bt, 1H) , 7.57 (d,
2Н) , 7.28 (d, 2H) , 7.18 (m, 1H) , 7.13 (m, 1H) , 6.99 (m,
1Н), 6.51 (t, 1H) , 4.88 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.80 (bs,
2Н) , 4.48 (dd , 1H) , 4.43 (dd, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.89 (s,
ЗН) , 3.68 ( m, 1H), 2.68 (m, 1H ), 2.40 (m, 1H)
13C-NMR (125 MHz; CDC1 3) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.9,170.8,152.7,152.6
MS (m/z) 495 (M-l)‘, 497 (Μ + 1) +
Пример 13
Ph (3-OCHF2) - (R) CH (OH) С (Ο)-Aze-Pab χ HOAc
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (OMe) (13 mg,
0.026 mmol; виж Пример 12 по-горе) се разтваря в абсолютен етанол (5 mL) и се прибавят 30 mg 10% Pd/C. Накрая се прибавя оцетна киселина (5 цИ) и сместа се хидрира при атмосферно налягане в продължение на 2 Oh. Сместа се филтрува през Celite , изпарява се и се пречиства чрез HPLC с обърната фаза (0.1М воден разтвор на амониев ацетат/MeCN). Съответните фракции се изсушават при замръзване, при което се получава съединението от заглавието като бяло твърдо вещество: 8.5 mg (66%).
XH-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.73-7.78 (m, 2Η) ,
7.55 (d, 2H) , 7.19-7.43 (m, ЗН) , 7.06-7.13 (m, 1H) ,6.83 (t, 1H, Jhf - 74Hz, основен ротамер) , 6.81 (t, 1H, основен ротамер), 5.20 (s, 1Η, основен ротамер), 5.19 (m,1Н, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1Н, основен ротамер), 4.4-4.6 (няколко пика, 2Н) , 4.35 (m, 1Н, основен ротамер), 4.08 (m,1Н) ,
3.99 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m,1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1. 89 (s, ЗН).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 173.7,172.9,168.3.
MS (m/z) 433 (M+l)+ ; 431 (M-l)Пример 14
Ph (3-OCF3) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab х TFA
Ph (З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C (0) -Aze-Pab x TFA (34 mg, 0.057 mmol, от Пример 6) се разтваря в 5 mL етанол и се прибавят 20 mg 10% Pd/C. Сместа се хидрира при атмосферно налягане цяла нощ. Сместа се филтрува през Celite®, изпарява се, и се изсушава при замразяване от вода/ацетонитрил.
1H-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m, 2Н) ,
7.55 (m, 2Н), 7.5-7.2 (m, 4Н), 5.24 (s, 1Н, основен ротамер), 5.23 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.77 (m, 1Н, основен ротамер), 4.64.45 (m, 2Н) , 4.36 (m, 1Н, основен ротамер), 4.08 (m, 1Н) , 3.99 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1H, основен ротамер), 2.30 (m, 1H, основен ротамер), 2.15 (m, 1 H, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 174.1,173.9,173.5,172.9,168.2.
19-F NMR (282 MHz; CD3OD) : -59.8 и -59.9 (3F, второстепенен и основен ротамер респективно), -77.4 (3F) показва, че солта е TFA.
MS (m/z) 451.3 (M+l)+
Пример 15
Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3)-(R)CH(OH)C(O) -Aze-Pab х TFA (i) З-Хлоро-5-трифлуороетоксибензалдехид
При разбъркване с магнитна бъркалка към разтвор на 3хлоро-5-хидроксибензалдехид (2.0 д, 12.8 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (2.3 д,
16.6 mmo1) в DMF (35 mL) под азот се прибавя 2,2,2-
трифлуороетил р-толуенсулфонат (4.2 д. 16.6 mmol) при
стайна температура. Сместа се загрява до 110° С в
продължение на 7 часа и след това се бърка цяла нощ при стайна температура.
Реакционната смес се охлажда до 0° С, изсипва се върху ледено студена 2 N НС1 (100 mL) и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 mL). Обединените органични екстракти се измиват с 0.5 N НС1 (2 х 50 mL) , изсушават се (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум.
Кафявото масло се хроматографира
върху силикагел и елуира с хексан:EtOAc (6:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.9 д,
61%) като жълто масло.
ХН NMR (300 MHz, CDC13) δ 9.44 (s, 1Н) , 7.56 (s, 1H) ,
7.33 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.42 (q, J=8Hz, 2H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3) - (R, S) CH(OTMS) CN
Към разтвор на З-хлоро-5-трифлуороетоксибензалдехид (5.2 g, 21.7 mmol; виж етап (i) по-горе) и цинков йодид (1.7 д, 5.4 mmol) в СН2С12 (200 mL) под азот се прибавя триметилсилилцианид (4.3 д, 43.3 mmol) на капки посредством
спринцовка при 0° С. Сместа се разбърква при 0° С В
продължение на 3 часа след това се разрежда с Н2О (150 mL) .
Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува
се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.9 д, 95%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
4Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.27 (s, 1Н) , 6.98 (s, 2H) ,
5.44 (s, 1Η), 4.38 (q, J= 8 Hz, 2H), 0.30 (s, 9 H) (iii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3) - (R, S) CH (OH) C (0) OH
Концентриран солна киселина (170 mL) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3) - (R, S)CH(OTMS)CN (6.9 g, 20.4 mmol; виж етап (ii) по-горе) и се бърка при 100° С в продължение на 1
час. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0° С и се прави алкална бавно с 3 N NaOH (300 mL).
Тази смес се измива с Et2O (2 х 100 mL) и водната фаза се подкислява с 2 N НС1 (50 mL) . След това водната фаза се екстрахира с EtOAc (2 х 100 mL) , изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.3 д, 92%) като светложълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1Н) , 7. 07 (s, 1H) , 7.02 (s, 1H), 5. 13 (s, 1H), 4.58 (q, J- 8 Hz, 2H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCH?CF3)-(R)CH(OH)C(0)OH (а) и Ph(3-
Cl) (5-OCH2CF3) - (S)CH(OAc)C(O)OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R, S) CH (OH) C (0) OH (7.06 g, 24.8 mmol ; виж етап (iii) по-горе) и липаза PSAmano (4.30 g) във винилацетат (250 mL) и МТВЕ (250 mL) се загрява при 70° С под азот в продължение на 4 0 часа. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, ензимът се отстранява чрез филтруване и измиване с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:МеОН:Et3N (92:6:2) се
получава триетиламинова сол на съединението от
подзаглавието (а)(3.02 д) като жълто масло. Солта от
подзаглавното съединение (а) се разтваря в Н2О (150 mL) ,
подкислява се с 2 N НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 75
mL). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (а) (2.18 д) като мръсно-бяло твърдо вещество. Освен това, триетиламиновата сол от подзаглавното съединение (Ь) (4.73 д) се получава от колонната хроматография, спомената по-горе.
Данни за подзаглавното съединение (а):
Т.т.: 98-103° С 2Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1Н) , 7.07 (s, 1H) ,
7. 02 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.58 (q, J= 8 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) δ 175.4,159.6, 144.6,136.2, 125.0 (q, J= 277 Hz), 121.8,115.9,113.1,73.3, 67.0 (q, J= 35 Hz)
HPLC Анализ: 98.6%, > 99% енантиомерно обогатен, Chiralcel OD Column (97:3:0.5 хексан: EtOH: TFA мобилна фаза) [ос] 25 D=-81.5° (c=1.0, МеОН)
APCI-MS: (M-l) = 283 m/z (v) Ph(3-Cl) (5-OCH2CF3) (R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (Ο) OH (0.50 g, 1.8 mmol; виж етап (iv) по-горе (съединение (a))) в DMF (20 mL) под азот се прибавя Н-Aze-Pab (Teoc) х HCI (1.03 g, 2.3 mmol), PyBOP (1.01 g, 1.9 mmol), и DIPEA (0.57 g, 4.4 mmol) при 0° C. Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура за 20 часа. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел и елуира първо с CHCl3:EtOH (10:1) и след това с EtOAc: EtOH (10:1), при което се получава съединението от подзаглавието (0.55 д, 48%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 90-95 С
Rf = 0.42 (10:1 CHCl3:EtOH) 2Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.787.81 (m, 2Н), 7.38-7.41 (m, 2Н) , 7.12-7.16 (m, 1Н) , 7.007.06 (m, 2H), 5.09-5.22 и 4.75-4.79 (m, 2Н) , 3. 94-4.61 (m, 8Н) , 2.09-2.75 (m, 2Н), 1.04-1.11 (m, 2Н), 0.70 (s, 9Н) APCI-MS: (Μ + 1) = 643 m/z (vi) Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-CI) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Teoc) (0.066 g, 0.103 mmol; виж етап (v) по-горе), се разтваря в 3 mL TFA и се оставя да реагира в продължение на 30 мин. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.060 g (94%) от съединението от заглавието под формата на трифлуороацетатна сол.
CD3OD) ротамери: δ
7.8-7.7 (m,
2Н) ,
7.2-7.0 (m,' m,
1Н, второстепенен ротамер) , 5.17 (s, 1Н, основен ротамер) ,
5.11
(s, 1Н, второстепенен ротамер),
4.81 ротамер) ,
4Н) , 4.37 (т,
1Н, ротамер),
1Н, основен
3.99 (m, 1Н, ротамер), 4.06 второстепенен (т,
1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 1 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.2,171.8,171.7,167.0.
MS (m/z) 499.3 (M+l)+
Пример 16
Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.48 g, 1.7 mmol; виж Пример 15 (iv) по-горе (съединение (а)) в DMF (20 mL) под азот се прибавя Н-Aze-Pab (OMe) х 2НС1 (0.74 g, 2.2 mmol), PyBOP (0.97 g, 1. 9 mmol), и DIPEA (0.55 g, 4.2 mmol) при 0° C. Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура в продължение на 20 часа. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (10:1) и след това
c EtOAc:EtOH (10:1), при което се получава съединението от заглавието (0.62 д, 69%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 75-80° С
Rf = 0. 43 (10:1 CHCl3:EtOH) 1Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.57-7.60 (m, 2Н) , 7.32-7.36 (m, 2Н) , 7.13-7.17 (m, 1Н) ,
7.00-7.06 (m, 2H) , 5.09-5.19 и 4.74-4.80 (m, 2Н), 3.93-4.62 (m, 6Н), 3.81 (s, ЗН), 2.10-2.73 (m, 2Н)
APCI-MS: (Μ + 1) - 529 m/z
Пример 17
Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab x TFA (i)_____2,2-дифлуороетилестер на метансулфонова киселина
При разбъркване с магнитна бъркалка към разтвор на 2,2-дифлуороетанол (1. 52 д, 18.5 mmol) в СН2С12 (20 mL) под азот се прибавя триетиламин (5.61 д, 55.5 mmol) и метансулфонилхлорид (2.54 д, 22.2 mmol) при 0° С. Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 1.5 часа, разрежда се с СН2С12 (50 mL), и се измива с 2 N НС1 (50 mL). Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (30 mL) и обединените органични екстракти се измива със солев разтвор (30 mL), изсушават се (Na2SO4), филтруват се, и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (2.52 д,
85%) като жълто масло, което се използва без допълнително
пречистване.
2Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.02 (tt, J= 3 Hz, J= 55 Hz,
1Н) , 4.39 (dt, J =3Hz, J=13Hz, 2H), 3.13 (s, 3H)
(ii) З-Хлоро-5-дифлуороетоксибензалдехид
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (1.50 д,
9.6 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (1.72 д, 12.5 mmol) в DMF (10 ml) под азот се прибавя
разтвор на 2,2-дифлуороетилов естер на метансулфонова киселина (2.0 д, 12.5 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMF (10 ml) на капки, при стайна температура. Сместа се загрява до 100° С в продължение на 6 часа и след това се бърка цяла нощ при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до 0° С, изсипва се в леденостудена 2 N НС1 (100 ml), и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml) . Обединените органични екстракти се измиват с 0.5 N НС1 (2 х 50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с хексан: EtOAc (5:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.35 д, 64%) като жълто масло.
гН NMR (300 MHz, CDC13) δ 9.92 (s, 1Н) , 7.52 (s, 1H) , 7.31 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H) , 6.12 (tt, J = 3 Hz, J = 55 Hz, 1H), 4.26 (dt, J= 3 Hz, J = 15 Hz, 2H) (iii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R, S)CH(OTMS)CN
Към разтвор на З-хлоро-5-дифлуороетоксибензалдехид (1.35 g, 6.1 mmol; виж етап (ii) по-горе) и цинков йодид (0.48 д, 1.5 mmol) в СН2С12 (50 ml) се прибавя триметилсилилцианид (1.21 д, 12.2 mmol) на капки при 0° С под азот. Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 3 часа, след това се разрежда с Н2О (50 ml). Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.85 д, 95%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.13 (s, 1Н) , 6.94 (s, 2H) ,
6.10 (tt, J = 3 Hz, J= 55 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H) , 4.20 (dt,
J= 3 Hz, J = 15 Hz, 2H), 0.28 (s, 9H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R, S) CH (OH) C (0) OH
Концентрирана солна киселина (60 ml) се прибавя към
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R, S) СН (OTMS) CN (1.85 g, 5.8 mmol; виж
етап (iii) по-горе) и се бърка при 100° С в продължение на 1 час. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0° С, алкализира с бавно с 3 N NaOH (~180 ml) и се измива с Et2O (2 х 75 ml) . Водната фаза се подкислява с 2 N НС1 (20 ml) и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml) . Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се, и се концентрират във вакуум при което се получава съединението от подзаглавието (1.50 д, 97%) като бледожълто твърдо вещество, което се използва без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.15 (s, IH) , 7.05 (s, IH) , 6.98 (s, IH) , 6.19 (tt, J= 4 Hz, J = 55 Hz, IH) , 5.12 (s, IH), 4.25 (dt, J= 4 Hz, J = 17 Hz, 2H) (v) Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (S) CH (OAc) C (0) OH (а) и Ph(3-
Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R, S) CH (OH) C (Ο) OH (3.90 g, 14.6 mmol; виж етап (iv) по-горе) и липаза PSAmano (2.50 g) във винилацетат (140 ml) и МТВЕ (140 ml) се
загрява при 7 0° С под азот в продължение на 40
часа.Реакционната смес се охлажда ДО стайна температура,
ензимът се отделя при филтруване и измиване с EtOAc, и
Филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:МеОН: Et3N (92:6:2) се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (Ь) (1.47 д) и солта се разтваря в Н20 (100 ml), подкислява се с 2 N НС1 и се екстрахира с EtOAc (2 х 75 ml) . Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (Ь) (1.00 д) като мръсно-бяло твърдо вещество.
Данни за подзаглавното съединение (Ь):
Т.т.: 103-106° С
Rf - 0. 39 (90:8:2 СНС13 :МеОН:Et3N) 2Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.13 (s, 1Н) , 7.04 (s, 1H) , 6.97 (s, 1H) , 6.17 (tt, J = 4 Hz, J = 55 Hz, 1H) , 5.12 (s, 1H) , 4.24 (dt, J - 4 Hz, J = 8 Hz, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD) δ 175.5, 160.3, 144.5, 136.1,
121.3, 115.7, 115.3, (t, J= 240 Hz), 112.9,73.4,68.6 (t, J = 29 Hz)
HPLC Анализ: 96.2%, > 95.0% енантиомерно обогатен,
ChiralPak AD колона (95:5:0.5 хексан:EtOH:TFA мобилна фаза) [ос]25 D=-84.0° (с=0.85 МеОН)
APCI-MS: (М-1) = 265 m/z (vi) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) С (О)-Aze-Pab (Теос)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.35-g, 1.3 mmol; виж етап (v) по-горе (съединение (b))) в DMF (18 ml) под азот се прибавят H-Aze-Pab (Теос) х НС1 (0.76 д, 1.7 mmol), РуВОР (0.75 д, 1.4 mmol), и DIPEA (0.43 д, 3.3 mmol) при 0° С. Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура в продължение на 20 часа. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (10:1), и след това с EtOAc:EtOH (10:1), при което се получава съединението от подзаглавието (0.69 д, 84%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 108-118° С
Rf = 0.48 (10:1 CHCl3:EtOH) 2Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.787.81 (m, 2Н) , 7.40-7.43 (m, 2Н) , 7.09-7.12 (m, 1Н) , 6.967.02 (m, 2H), 6.16 (t, J= 57 Hz,-1H), 5.09-5.20 и 4.75-4.80 (m, 2H) , 3.95-4.55 (m, 8H) , 2.10-2.75 (m, 2H) , (m, 2H) , 0.07 (s, 9H)
1.04-1.11
APCI-MS: (Μ + 1) = 625 m/z (vii) Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (Teoc) (0.086 g, 0. 138 mmol; виж етап (vi) по-горе) , се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 час. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получава 0.080 g (98%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m, 2H) ,
7.6-7.5 (m, 2H), 7.15-6.95 (m, ЗН), 6.35-5.95 (m, 1H), 5.20 (m, 1H, второстепенен ротамер), 5.14 (s, 1H, основен ротамер), 5.10 (s, 1H, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1H, основен ротамер), 4.6-4.0 (m, 6H), 2.70 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1H, основен ротамер), 2.29 (m, 1H, основен ротамер), 2.15 (m, 1H, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 174.0,173.8,173.4,172.9,168.2 MS (m/z) 481.2 (M+l)+
Пример 18
Ph(З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph ( З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.30 g, 1.7 mmol; виж Пример 17 (v) по-горе (съединение (b) ) ) в DMF (15 ml) под азот се прибавят H-Aze-Pab (ОМе) х 2НС1 (0.49 д, 1.5 mmol), РуВОР (0.65 д, 1.2 mmol), и DIPEA (0.36 д, 2.8 mmol) при 0° С. Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура в продължение на 20 часа. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира три пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (10:1), след това с
EtOAc:EtOH (10:1) и накрая с СНС13:МеОН (20:1), при което се получава съединението от заглавието (0.47 д, 81%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 65-75° С
Rf = 0. 37 (10:1 CHCl3:EtOH) ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.58-
7.60 (m, 2H) , 7 .32-7.35 (m, 2H), 7.09-7.12 (m, 1H) i, 6.96-
7.02 (m, 2H) , 6. 16 (t, J= 55 Hz, 1H), 5.08-5.18 и 4 .74-4.80
(m, 2H), 3.96- •4. 50 (m, 6H), 3.80 (s, 3H), 2.10-2 .75 (m, 2H)
APCI-MS: (M + 1) = 511 m/z .
Пример 19
Ph(3-Cl)(5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab х TFA (i) Ph(3-Cl) (5-TMSO)-(R,S) CH(OTMS)CN
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (9.8 g,
62.6 mmol; виж Пример 1 (ii) по-горе) и Znl2 (5.0 g, 15.7 mmol) в безводен CH2C12 (500 ml) при 0° C се прибавя триметилсилилцианид (13.7 g, 138 mmol).
Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Добавя се вода (250 ml), и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 300 ml) . Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (16.9 д, 83%) като жълто масло което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.42 (3:1 хексан:EtOAc) ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.06 (s, 1Н) , 6.86 (s, 2H) , 5.40 (s, 1Η), 0. 30 (s, 9H), 0.24 (s, 9 Η).
(ii) Ph(3-Cl)(5-OH)-(R,S)CH(OH)C(0)OH
Разтвор на Ph(З-Cl)(5-OTMS)-(R,S)CH(OTMS)CN (22.6 g,
68.8 mmol; виж етап (i) по-горе) в концентрирана НС1 (200
ml) се вари под обратен хладник под азот в продължение на 3 часа. Реакционната смес се охлажда до 0° С и се прави алкална бавно с 2N NaOH. Сместа се измива с Et2O (3 х 100 ml) за да се отстранят органичните онечиствания. Водната фаза се подкислява с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (9.3 д, 67%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.23 (6:3:1 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH) 2Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.05 (s, 1Н) , 6.94 (s, 1H) , 6.73 (s, 1H) , 5.03 (s, 1H) .
(iii) ______Ph(3-Cl) (5-OH)-(R,S)CH(OH)C(0)Oet
Към разтвор на Ph(З-Cl)(5-OH)-(R,S)CH(OH)C(0)OH (9.3 g, 4 6.0 mmol; виж етап (ii) по-гор.е) в абсолютен EtOH (200 ml) се прибавя концентрирана сярна киселина (0.25 ml) и реакционната смес се вари под обратен хладник, под азот в продължение на 4 часа.
Реакционната смес се охлажда до 0° С и се прибавя твърд NaHCO3, (0.2 g). Реакционната смес се концентрира във вакуум и се разпределя между наситен разтвор на NaHCO3 (100 ml) и Et2O (3 х 50 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.9 д, 65%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf = 0.62 (6: 3:1 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH).
2Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6. 99 (s, 1Н) , 6.81 (s, 2H) ,
5.07 (s, 1H), 4.164.32 (m, 2H), 1.23 (t, J= 7 Hz, 3H).
(iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R, S)CH(OH)C(0)OEt
Към разтвор на Ph(3-Cl)(5-ОН)-(R,S)СН(OH)С(0)OEt (6.1
g, 26.8 mmol; виж етап (iii) по-горе) в DMF (100 ml) в херметично затворен съд под азот при 0° С се прибавя цезиев карбонат (13.1 д, 40.2 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 15 минути, последвано от добавянето на калиев йодид (0.5 д, 2.7 mmol). Реакционната смес се охлажда до -7 8° С и хлорофлуорометан (18.4 д, 268 mmol) се барботира в съда. Запечатаният съд се оставя след това да се затопли до стайна температура и се бърка в продължение на 18 часа. Реакционната смес се охлажда до 0° С, внимателно се отваря за да се отстрани излишък от хлорофлуорометан, и се разпределя между Н2О (20 ml) и Et2O (3 х 50 ml) . Обединените органични фази се измиват със солев разтвор (2 х 50 ml) , изсушават се (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:EtOAc (градиент от 9:1 до 3:1) се получава съединението от подзаглавието (2.4 д, 35%) като светложълто масло.
Забележка: Съединението е слабо uv-видимо на TLC. Може да се визуализира при оцветяване на TLC с бромокрезол зелено.
Rf=0.46 (2:1 хексан:EtOAc)
7Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7 .21 (s, 1H) , 7.08 (s, 1H) ,
7.05 (s, 1Н) , 5.70 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.12 (d, J= 5 Hz,
1Н) , 3.80-4. 35 (m, 2Н) , 3.50 (d, J = 5 Hz, 1H) , 1.26 (t, J=
7 Hz, ЗН) .
(у) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R,S)CH(OH)C(O)OH
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH2F) -(R, S)СН(OH)C(0)OEt
(1.8 g, 6.8 mmo1; виж етап (iv) no-rope) в H2O:THF (30 mL,
1: 2) при 0° C под азот се прибавя литиев хидроксид
монохидрат (0.40 g, 10.3 mmol). Сместа се разбърква при 0°
С в продължение на 2 часа. Реакционната смес се концентрира във вакуум и се разпределя между Н20 (5 ml) и Et2O (2 х 20
ml). Водната фаза се подкислява внимателно с 0.2N НС1 при 0° С и се екстрахира с EtOAc (3 х 30 ml) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.4 д, 87%) като безцветно масло, което се втвърдява в бяло твърдо вещество при стоене.
Rf = 0.43 (6:2:1 СНС13 :МеОН:Et3N) ХН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H) , 7.17 (s, 1H) ,
7.07 (s, 1H), 5.78 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.13 (s, 1H).
(vi) Ph (З-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(0)OH (а) и Ph(3Cl) (5-OCH2F) -(S)CH(OAC)C(0)OH (b)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R, S)CH(OH)C(0)OH (3.2 g, 13.9 mmol; виж етап (v) по-горе) и липаза PSAmano (1.9 g) във винилацетат (150 ml) и МТВЕ (150 ml) се загрява при 70° С под азотна атмосфера в продължение на 3 дни. Реакционната смес се охлажда, филтруват се през Celite® и филтърната утайка се измива с EtOAc. Филтратът се концентрира във вакуум и се подлага на бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:MeOH:Et3N (15:1:0.5), при което се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (а)(0.50 д, 21%), което се използва без неутрализация. Освен това, се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (Ь)(0.46 д, 20%).
Данни за подзаглавното съединение (а):
Rf= 0.19 (15:1:0.5 СНС13:МеОН:Et3N) ХН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.26 (s, 1Н) , 7.18 (s, 1H) , 6.97 (s, 1H) , 5.74 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.17 (q, J= 7 Hz, 6H) , 1. 28 (t, J= 7 Hz, 9H) .
Данни за подзаглавното съединение (b)
Rf= 0.33 (15:1:0.5 CHC13:MeOH:Et3N)
NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.28 (s, 1H) , 7.19 (s, 1H) , 7.09 (s, 1H), 5.76 (d, JH-F = 54 Hz, 2H), 5.75 (s, 1H) , 3.17 (q, J= 7 Hz, 6H) , 2.16 (s, 3H), 1.28 (t, J = 7 Hz, 9H).
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCH2F) (R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc)
Към разтвор на триетиламиновата сол на Ph(3-Cl)(5OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.50 g, 1.50 mmol; виж етап (vi) по-горе) и Haze Pab(Teoc)-НС1 (0.87 g, 1.90 mmol) в сух DMF (15 ml) под азот при 0° C се прибавят РуВОР (0.85 g, 2.60 mmol) и DIPEA (0.48 g, 3.70 mmol). Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография два пъти върху силикагел и елуиране първо с CHCl3:EtOH (9:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), се получава съединението от подзаглавието (0.23 д, 26%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 88-92° С
Rf = 0.61 (9:1 CHCl3:EtOH) 4Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.81 (d, J= 8Hz, 2H); 7.40-7.42 (m, 2H), 7.06-7.23 (m, ЗН), 5.76 (d, JH-F = 51 Hz, 2H), 5.10-5.16 и 4.77-4.83 (m, 2H), 3.804.49 (m, 6H) , 2.30-2.53 (m, 2H) , 1.08 (t, J = 7 Hz, 2H) ,
0.08 (s, 9H) .
APCI-MS (M + 1) = 593 m/z (viii) Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (0.051 g, 0.086 mmol; виж етап (vii) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 20 мин. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил. Продуктът е с чистота 95% с 5% дефлуорометилиран материал. Опитите за пречистването му с препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc не са успешни, и материалът частично като ацетат се разтваря в 5 ml TFA, изпарява се и се изсушава при замразяване, при което се получават 26 mg (51%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол. Чистота: 95%.
1H-NMR (600 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m, 2H) , 7.6-7.5 (m, 2H) , 7.21 (s, IH, основен ротамер) , 7.17 (s, IH, второстепенен ротамер), 7.13 (s, 1H, основен ротамер),
7.09 (s, IH, второстепенен ротамер), 7.07 (m, IH, основен ротамер), 7.04 (m, IH, второстепенен ротамер), 5.73 (d, 2H) , 5.18 (m, IH, второстепенен ротамер), 5.16 (s, IH, основен ротамер), 5.09 (s, IH, второстепенен ротамер), 4.78 (m, IH, второстепенен ротамер), 4.56 (d, IH, основен ротамер), 4.50 (d, IH, второстепенен ротамер), 4.46 (d, IH, второстепенен ротамер), 4.45 (d, IH, основен ротамер), 4.35 (m, IH, основен ротамер), 4.14 (m, IH, основен ротамер),
4.05 (m, IH, второстепенен ротамер), 3.97 (m, IH, второстепенен ротамер), 2.68 (m, IH, второстепенен ротамер), 2.52 (m, IH, основен ротамер), 2.28 (m, IH, основен ротамер), 2.19 (m, IH, второстепенен ротамер).
13C-NMR (150 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 173.9,173.3,172.9,168.2.
ESI-MS+: (M+l) = 449 (m/z)
Пример 2 0
Ph(З-Cl) (5-OCH2F) -(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab(OMe)
Към разтвор на триетиламиновата Ph(3-Cl)(5-OCH2F)(R)СН(OH)С(0)OH (0.60 g, 1.80 mmol; виж Пример 19 (vi)) и Haze Pab (OMe) *2НС1 (0.79 g, 2.30 mmol) в DMF (15 ml) под азот при 0° C се прибавят РуВОР (1.04 g, 1.. 90 mmol) и DIPEA (0.58 g, 4.50 mmol). Реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Реакционната смес се концентрира във вакуум и след бърза хроматография три пъти върху силикагел се елуира първо с
CHCl3:EtOH (9:1) и след това два пъти с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от заглавието (0.22 д, 26%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 66-70° С
Rf= 0.45 (9:1 CHCl3:EtOH) 3Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.59 (d, J = 8Hz, 2H) , 7.32 (d, J = 7 Hz, 2H) , 7.06-7.23 (m, 3H) , 5.75 (s, JH-F = 54 Hz, 1H), 5.10-5.16 и 4.78-4.84 (m, 2H), 4.11-4.45 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H).
13C-NMR (150 MHz;CD3OD) : (карбонил и/или амидинови
въглероди, ротамери) δ 173. 0,170.8,170.7,152.5.
APCI-MS: (Μ + 1) = 479 m/z
Пример 21
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) С (0)-Aze-Pab χ TFA (ί)(2-Монофлуороетил)метансулфонат
При разбъркване с магнитна бъркалка към разтвор на 2флуороетанол (5.0 д, 78.0 mmol) в СН2С12 (90 ml) под азот при 0° С се прибавя триетиламин (23.7 д, 234 mmol) и метансулфонилхлорид (10.7 д, 93.7 mmol). Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 1.5 часа, разрежда се с СН2С12 (100 ml) и се измива с 2N НС1 (100 ml). Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (50 ml) и обединените органични екстракти се измива със солев разтвор (75 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (9.7 д, 88%) като жълто масло което се използва без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 4.76 (t, J 4 Hz, 1H) , 4.64 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.52 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.43 (t, J= 4 Hz, 1H), 3.09 (s, 3H) .
(ii) З-Хлоро-5-монофлуороетоксибензалдехид
100
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (8.2 д, 52.5 mmol, виж Пример 1 (ii) по-горе) и калиев карбонат (9.4 д, 68.2 mmol) в DMF (10 ml) под азот се прибавя разтвор на (2-монофлуороетил)метансулфонат (9.7 д, 68.2 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMF (120 ml) на капки при стайна температура. Сместа се загрява до 100° С в
продължение на 5 часа и след това се бърка цяла нощ при стайна температура. Реакционната смес се охлажда до 0° С, изсипва се в леденостудена 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc. Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с хексан:EtOAc (4:1), при което се получава съединението от подзаглавието (7.6 д,71 %) като жълто масло.
ХН NMR (300 MHz, CDC13) δ 9.92 (s, 1Н) , 7.48 (s, 1H) ,
7.32 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.87 (t, J=4 Hz, 1H), 4. 71 (t,
J = 3 Hz, 1H), 4.33 (t, J= 3 Hz, IH), 4.24 (t, J=3 Hz, 1H).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R, S) CH (OTMS) CN
Към разтвор на З-хлоро-5-монофлуороетоксибензалдехид
(7.6 g, 37.5 mmol; виж етап (ii) no-rope) и цинков йодид
(3.0 g, 9.38 mmol) в CH2C12 (310 ml ) се прибавя
триметилсилилцианид (7.4 g, 75.0 mmol) на капки при 0° С
под азот. Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 3 часа и при стайна температура цяла нощ. Реакционната смес се разрежда с Н2О (300 ml) , органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4), филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (10.6 д, 94%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване или анализ.
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R, S)CH(OH)C(O)OH
101
Концентрирана солна киселина (100 ml) се прибавя към Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R, S) CH (OTMS) CN (10.6 g, 5.8 mmol; виж етап (iii) по-горе) и разтворът се бърка при 100° С в продължение на 3 часа. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0° С, алкализира се бавно с 3N NaOH (~300 ml) и се измива с Et2O (3 х 200 ml). Водната фаза се подкислява с 2N HCI (80 ml) и се екстрахира с EtOAc (3 х 300 ml) . Обединените EtOAc екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (8.6 д, 98%) като бледожълто твърдо вещество, което се използва без допълнително пречистване.
Rf= 0.28 (90:8:2 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH)
A NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.09 (s, 1Н) , 7.02 (s, 1H) ,
6.93 (s, 1H) , 5.11 (s, 1H), 4.77-4.81 (m, 1H) , 4.62-4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H), 4.15-4.18 (m, 1H).
(iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(S)CH(OAc)C(O)OH (а) и
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R, S) CH (OH) C (0) OH (8.6 g, 34.5 mmol; виж етап (iv) по-горе) и липаза PSAmano (4.0 g) във винилацетат (250 ml) и МТВЕ (250 ml) се загряват при 70° С под азот в продължение на 3 дни
Реакционната смес се охлажда до стайна температура и ензимът се отделя чрез филтрация през Celite®. Филтърната утайка се измива с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:MeOH:Et3N (90:8:2) се получава триетиламиновата сол на подзаглавното съединение (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на подзаглавното съединение (Ь) (4.0 д) . Солта от подзаглавното съединение (Ь) се разтваря в Н20 (250 ml) , подкислява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml) . Обединените органични
102
екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (Ь)(2.8 д, 32%) като жълто масло.
Данни за подзаглавното съединение (Ь):
Rf=0.28 (90:8:2 СНС13:МеОН:концентриран NH4OH) :Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.09 (s, 1Н) , 7.02 (s, 1H) ,
6.93 (s, 1H) , 5.11 (s, 1H) , 4.77-4.81 (m, 1H) , 4.62-4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H), 4.15-4.18 (m, 1H) .
(vi) Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) OH (940 mg, 3.78 mmol; виж етап (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab (Teoc) *НС1 (2.21 g, 4.91 mmol), РуВОР (2.16 g, 4.15 mmol) и DIPEA (1.22 g, 9.45 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура в продължение на 4 часа. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc :EtOH (20:1), при което се получава съединението от подзаглавието (450 mg, 20%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 80-88° С
Rf=0.60 (10:1 CHC13:EtOH) 1Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ
7.79 (d, J = 8 Hz, 2Н) , 7.42 (d, J = 8 Hz, 2Н) , 7.05-7.08
(т, 1Н) , 6.93-6.99 (т, 2Н) , 5.08-5.13 (т, 1Н), 4.75-4.80
(т, 2Н) , 4.60-4.68 (т, 1Н) , 3.95-4.55 (т, 8Н) , 2.10-2.75
(m, 2Н), 1.05-1.11 (m, 2Н), 0.08 (s, 9Н).
APCI-MS: (М + 1) = 607 m/z.
(vii) Ph (З-Cl) (5-0CH2CH2F) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab x TFA
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Teoc) (0.357 g, 0.589 mmol; виж етап (vi) по-горе), се разтваря в 10 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 40 мин. TFA се
103
изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.33 g (93%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
1H-NMR (600 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m,2H) ,
7.54 (d, 2Η) , 7. 08 (s, 1H, основен ротамер), 7.04 (s,1H, второстепенен ротамер), 6.99 (s, 1H, основен ротамер),6.95 (s, 1H) , 6.92 (s, 1H, второстепенен ротамер), 5.18 (m,1H, второстепенен ротамер), 5.14 (s, 1H, основен ротамер),5.08 (s, 1H, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1H, основен ротамер), 4.73 (m, 1H), 4.65 (m, 1H) , 4.6-4.4 (m, 2H), 4.35 (m, 1H, основен ротамер), 4.21 (дублет от мултиплети;2Н) ,
4.12 (m, 1Н, основен ротамер), 4.06 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3. 99 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.69 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (150 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 172.8, 172.1,167.4.
ESI-MS+: (M+l) = 463 (m/z)
Пример 22
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) OH (818 mg, 3.29 mmol; виж Пример 21 (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab (OMe) *2НС1 (1.43 д, 4.27 mmol), РуВОР (1.89 д, 3.68 mmol) и DIPEA (1.06 д, 8.23 mmol) . Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc :EtOH (20:1), при
104 което се получава съединението от .заглавието (880 mg, 54%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 65-72° С
Rf= 0.60 (10:1 CHCl3:EtOH) гН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.58-
7.60 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.34 (d, J = 7 Hz, 2H) , 7.05-7.08
(m, 2H), 6.95-6.99 (m, 1H) , 5.08-5.13 (m, 1H) , 4.77-4.82
(m, 1H), 4.60-4.68 (m, 1H) , 3.99-4.51 (m, 7H), 3.82 (s,
3H) , 2.10-2.75 (in, 2H) .
13C-NMR (150 MHz;CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 173.3, 170.8,152.5.
APCI-MS: (М + 1) = 493 m/z.
Пример 2 3
Ph(3-Cl)(5-OCH(CH2F)2)-(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab x TFA (i)_____1,3-дифлуороизопропилметансулфонат
При разбъркване c магнитна бъркалка към разтвор на 1, З-дифлуоро-2-пропанол (7.0 д, 72.8 mmol) в СН2С12 (100 ml) под азот при 0° С се прибавя триетиламин (22.1 д, 219 mmol) и метансулфонилхлорид (10.0 д, 87.4 mmol). Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 3 часа. Сместа се измива с 2N НС1 (150 ml) и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (200 ml) и обединените органични екстракти се измива със солев разтвор (100 ml) , изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (11.5 д,
91%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
3Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 4.97-5.08 (m, 1H) , 4.75-4.77 (m,
2H), 4.594.61 (m, 2H), 3.12 (s, 3H).
(ii) Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) CHO
105
Към разтвор на З-хлоро-5-хидроксибензалдехид (8.0 д,
50.7 mmol; виж Пример 1(11) по-горе) и калиев карбонат (9.1 д, 66.0 mmol) в DMF (75 ml) под азот се прибавя разтвор на 1,3-дифлуороизопропилметансулфонат . (11.5 д, 66.0 mmol; виж етап (i) по-горе) в DMF (75 ml) на капки при стайна температура. Сместа се загрява до 110° С в продължение на 18 часа.
Реакционната смес се охлажда до 0° С, изсипва се в леденостудена 2N НС1 (200 ml) и се екстрахира с EtOAc (3 х 250 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. Кафявото масло се хроматографира върху силикагел и елуира с хексан:EtOAc (4:1), при което се получава съединението от подзаглавието (4.4 д, 37%) като жълто масло.
4Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 9.92 (s, 1Н) , 7.51 (s, 1H) , 7.36 (s, 1H) , 7.26 (s, 1H) , 4.70-4.89 (m, 3H) , 4.63-4.68 (m, 2H).
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R, S) CH (OTMS) CN
Към разтвор на Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) CHO (4.4 g, 18.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) и цинков йодид (1.5 g, 4.67 mmol) в СН2С12 (200 ml) при 0° С под азот се прибавя триметилсилилцианид (3.7 д, 37.3 mmol) на капки. Сместа се разбърква при 0° С в продължение на 3 часа и цяла нощ при стайна температура, след това се разрежда с Н2О (200 ml) . Органичната фаза се отделя, изсушава се (Na2SO4) , филтрува се и се концентрира във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.5 д, 87%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
3Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.12 (s, 1Н) , 7.00 (s, 2H) ,
5.42 (s, 1H), 4.704.80 (m, 3H), 4.59-4.64 (m, 2H), 0.26 (s, 9H) .
(iii) Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R, S) CH (OH) C (0) OH
106
Концентрирана солна киселина (50 ml) се прибавя към Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F) 2) (R, S) СН (OTMS) CN (5.5 д, 16.3 mmol; виж етап (iii) по-горе) и разтворът се бърка при 100° С в продължение на 1.5 часа. След охлаждане до стайна температура, реакционната смес се охлажда още до 0° С, алкализира се бавно с 3N NaOH (~200 ml) и се измива с Et2O (3 х 200 ml). Водната фаза се подкислява с 2N НС1 (75 ml) и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml) . Обединените EtOAc екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.6 д, 100%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
гН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.14 (s, IH) , 7.08 (s, IH) , 7.02 (s, IH) , 5.12 (s, IH) , 4.70-4.90 (m, 3H) , 4.52-4.67 (m, 2H).
(v) Ph(3-Cl) (5-OCH(CH2F)2)-(S)CH(OAc)C(O)OH (а) и Ph(3Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) OH (b)
Разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R, S) CH (OH) C (0) OH (4.6 g, 16.4 mmol; виж етап (iv) по-горе) и липаза PSAmano (3.0 g) във винилацетат (150 ml) и МТВЕ (150 ml) се загрява при 70° С под азот в продължение на 2.5 дни
Реакционната смес се охлажда до стайна температура, ензимът се отделя чрез филтрация през Celite®. Филтърната утайка се измива с EtOAc и филтратът се концентрира във вакуум. След хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13 :МеОН:Et3N (90:8:2) се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието' (а) като жълто масло. Освен това се получава триетиламиновата сол на съединението от подзаглавието (b)(2.2 д) и солта се разтваря в Н2О (100 ml), подкислява се с 2N НС1 и се екстрахира с EtOAc (3 х 200 ml).
107
Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (Ь) (1.4 д, 29%) като жълто масло.
Данни за подзаглавното съединение (Ь):
2Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.14 (s, 1Н) , 7.08 (s, 1H) ,
7.02 (s, 1H) , 5.12 (s, 1H) , 4.70-4.90 (m, 3H) , 4.52-4.67 (m, 2H) .
(vi) Ph(3-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) ~ (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) OH (824 mg, 2.94 mmol; виж етап (v) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab(Teoc)-НС1 (1.71 д, 3.81 mmol), РуВОР (1.68 д, 3.23 mmol) и DIPEA (949 mg, 7.34 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1),
и след това с EtOAc:EtOH (20: :1), при което се получава
съединението от подзаглавието I (720 mg, 38%) като трошлива
бяла пяна.
Т.т.: 78-84° С
Rf = 0.62 (10:1 CHCl3:EtOH)
LH NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.79
(d, J= 8Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.00-7.12 (т, ЗН),
5.08-5.20 (m, 1Н), 3.97-4.80 (m, 12H), 2.10-2.75 (m, 2H),
1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H) .
APCI-MS: (M + 1) = 639 m/z.
(vii) Ph(3-Cl) ('5-OCH (CH2F)2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab x
TFA
Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (Teoc) (0.129 g, 0.202 mmol; виж етап (vi) по-горе), се разтваря в ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 20 мин.
108
TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.123 g (100%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
1H-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m,2Н) ,
7.55 (d, 2Н) , 7.2-7.0 (m, ЗН) , 5. 18 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, основен ротамер), 5.08 (s,1Н, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер частично затъмнен от CD3OH пик), 4.75-4.4 (m, 7Н), 4.38 (ш, 1Н, основен ротамер), 4.15 (m, 1Н, основен ротамер), 4.13.9 (т, 2Н, 2 сигнала от второстепенен ротамер), 2.70(т,
1Н, второстепенен ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер),
2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD):(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.9,172.6,172.2,171.7,167.1.
ESI-MS+: (M+l) = 495 (m/z)
Пример 24
Ph(3-Cl) (5-ОСН (CH2F) 2) - (R) CH (OH) С (0)-Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на . Ph(З-Cl) (5-ОСН(CH2F)2) - (R) CH(OH)С (0) ОН
(513 mg, 1.83 mmo1; виж Пример 2 3 (v) по-горе) в DMF (30
ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab(OMe)«2НС1 (797
mg, 2.38 mmol), РуВОР (1.04 д, 2.01 mmol), и DIPEA (591 mg,
4.57 mmol) . Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава съединението от заглавието (370 mg, 39%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 58-63° С
109
Rf = 0.6β (10:1 CHC13:EtOH) XH NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.58-
7.60 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.00-7.12
(m, 3H) , 5.08-5.20 (m, 1H) , 4. 65-4.82 (m, ЗН) , 4.28-4.65
(m, SH) , 3.92-4.18 (m, 2H) , 3.82 (s, 3H) , 2.10 -2.75 (m,
2H) .
13C-NMR (150 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови
въглероди) δ 173.2, 170.8,152.5.
APCI-MS: (Μ + 1) = 525 m/z.
Пример 2 5
Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab x TFA (i) 1-Бромо-3-флуоро-5-бензилоксибензен
Натриев хидрид (60% дисперсия в масло, 24.0 д, 0.48 mol) се прибавя на порции при разбъркване към разтвор на безводен бензилалкохол (64.5 д, 0.60 mol) в THF (1.0 L) . След като сместа се бърка в продължение на 1 час, се прибавя на капки разтвор на 1-бромо-З,5-дифлуоробензен (76.8 д, 0.40 mmol) в THF (100 ml) в продължение на период от 1 час. Реакционната смес се бърка при стайна температура 2 дни. Добавя се вода (400 ml) и THF се отстранява във вакуум. Водната фаза се екстрахира с хексан (3x150 ml). Обединените органични екстракти се измиват след това с 2N NaOH (2 х 100 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (110.7 д, 98%) като светложълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf= 0.47 (хексан) ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.36-7.41 (m, SH) , 6.94 (bs,
1H), 6.87 (d, JH-F = 8 Hz, 1H), 6.63 (d, JH-F = 10 Hz, 1H), 5.03 (s, 2H).
(ii) З-Бромо-5-флуорофенол no
Към разтвор на 1-бромо-3-флуоро-5-бензилоксибензен (110. 0 д, 0.39 mol; виж етап (1) по-горе) и Ν,Νдиметиланилин (47 4.0 д, 3.92 mol) в безводен СН2С12 (1.0 L) при 0° С се прибавя алуминиев хлорид (156.0 д, 1.17 mol). След 10 минути, ледената баня се отстранява и разбъркването продължава 2 часа. Реакцията се прекъсва чрез внимателно прибавяне на 3N НС1 (600 ml). Фазите се разделят и водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 150 ml) . Обединените органични екстракти се измиват с 2N НС1 (250 ml) и Н20 (3 х 250 ml) . Към органичната фаза се прибавя 15% КОН (500 ml) ,
и фазите се разделят. Органичната фаза се екстрахира допълнително с 2 N КОН (2 х 70 ml) . Обединените водни фази се измиват с СН2С12 (3 х 100 ml) и след това се подкисляват с 4N HCI. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 125 ml) след това, обединените Et2O екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (69.0 д, 92%) като кафяво масло, което се използва без допълнително пречистване.
Т.т.: 33-35° С
Rf= 0.25 (СНС13) 2Н NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (s, 1H) , 6.90 (dd, JH-F = 11 Hz, J= 2 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.59 (dt, JH-F = 11 Hz,
J - 2 Hz, 1H).
APCI-MS: (M-l) = 189 m/z (iii) 1-Бромо-3-флуоро-5-дифлуорометоксибензен
Смес от З-бромо-5-флуорофенол (6.1 g, 31.0 mmol; виж етап (ii) по-горе) и хлородифлуорометан (13.0 g, 150.0 mmol) в i-PrOH (100 ml) и 30% KOH (80 ml) се загрява в херметично затворен съд в продължение на 18 часа при 80-85° С. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и фазите се разделят. Органичната фаза се концентрира във
Ill
вакуум, при което се получава безцветно масло. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 30 ml).
Суровото масло и обединените органични екстракти се измиват с 2N NaOH (3 х 30 ml) и Н2О (3 х 30 ml) . Органичните фази след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се през слой от силикагел и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (6.1 д, 79%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CDCla) δ 7.11-7.14 (m, 2Н) , 6.84 (dt, J = 9 Hz, J = 2 Hz, 1H), 6.50 (t, JH-F = 72 Hz, 1H).
(iv) 1-Флуоро-3-дифлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилстанан (7.0 g, 22.2 mmol) се прибавя към суспензия от 1-бромо-3-флуоро-5-дифлуорометоксибензен (4.9 д, 20.2 mmol; виж етап (ill) по-горе), дихлоробис (трифенилфосфин) паладий(II) (1.42 д, 2.02 mmol) и безводен литиев хлорид (0.90 д, 20.2 mmol) в THF (40 ml) под азот при 65° С и сместа се бърка в продължение на 5 часа. Реакционната смес се охлажда до 0° С и се прибавя IN NaOH (90 ml). Двуфазовата смес се бърка интензивно в продължение на 1 час, след това фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 70 ml) . Обединените органични фази се измиват с 2N NaOH (2 х 4 0 ml) и Н2О (40 ml), след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (2.2 д, 57%) като безцветно масло.
Rf= 0.47 (хексан) ХН NMR (300 MHz, CDCI3) 5 6.93-6.99 (m, 2Н) , 6.73-6.78 (m,
1Н), 6.67 (dd, J = 18 Hz, J = 11 Hz, 1H) , 6.51 (t, JH-F =
Hz, 1H), 5.77 (d, J=18 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 11 Hz, 1H).
112 (v) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)CH2OH
2-Метил-2-пропанол (140 ml), H2O (140 ml), и AD-mix-β (39. 2 g) се обединяват и охлаждат до 0° С. 1-Флуоро-Здифлуорометокси-5- винилбензен (5. 0 д, 26.4 mmol; виж етап (iv) по-горе) разтворен в малко количество 2-метил-2пропанол се прибавя наведнъж, и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0° С докато чрез TLC се докаже отсъствието на изходно вещество. Реакцията се прекъсва при 0° С чрез добавяне на натриев сулфит (42.0 д) и след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 60 мин. Реакционната смес се екстрахира с Et2O (3 х 120 ml). Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с СНС13:EtOAc (3: 2) се получава съединението от подзаглавието (5.8 д, 98%) като безцветно масло.
Rf= 0.41 (3:2 СНС13: EtOAc) ХН NMR (300 MHz, CDC13) δ 6.96-6.99 (m, 2H) , 6.77-6.82 (m,
1H), 6.51 (t, Jh-F = 73 Hz, 1H) , 4.79-4.85 (m, 1H) , 3.763.84 (m, 1H) , 3.58-3.66 (m, 1H) , 2.66 (d, J = 3 Hz, 1H) , 2.00 (t, J = 6 Hz, 1H).
HPLC Анализ: 89.2%, > 99% енантиомерно обогатен, ChiralPak AD колона (95:5 хексан:ЕбОН мобилна фаза).
(vi) Ph(3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) CH2OTBS
Разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) CH2OH (5.5 g, 24.7 mmol; виж етап (v) по-горе), 4-(диметиламино) пиридин (121 mg, 1.0 mmol) и триетиламин (3.0 д, 29.6 mmol) в безводен СН2С12 (100 ml) се охлажда до 0° С. 1.0 М разтвор на третбутилдиме тил силил хлорид в СН2С12 (26.0 mL, 26.0 mmol) се прибавя на капки, и реакционната смес се оставя да се затопли до стайна температура и се бърка цяла нощ. Прибавя се наситен разтвор на амониев хлорид (60 ml) и фазите се
113 разделят. Органичната фаза се измива с наситен разтвор на амониев хлорид (60 ml) и Н2О (2 х 3 5 ml) след това се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с СНС13: хексан (3:1) се получава съединението от подзаглавието (7.9 д, 85%) като жълто масло.
Rf = 0.47 (3:1 СНС1з: хексан) ΣΗ NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.95-6.98 (m, 2Η) , 6.76-6.79 (m,
1H), 6.51 (t, JH-F = 73 Hz, 1H) , 4.71-4.74 (m, 1H) , 3.75-
3.80 (m, 1H), 3.48-3.54 (m, 1H) , 2.99 (bs, 1H) , 0.91 (s,
9H) , 0.05 (S, 3H), 0.00 1 (s, 3H).
(vii) Ph (3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM)CH2OTBS
Към разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) CH2OTBS (7.9
g, 0.51 mmol; виж етап (vi) по-горе) и DIPEA (4.9 g, 48.1 mmol) в безводен CH2C12 (50 ml) при 0° C под азот се прибавя на капки 2-метоксиетоксиметилхлорид (6.6 д, 48.1 mmol). Сместа се бърка в продължение на 24 часа. Прибавя се наситен разтвор на амониев хлорид (70 ml) и фазите се разделят. Органичната фаза се измива с наситен разтвор на амониев хлорид (70 ml) и Н2О (3 х 60 ml) след това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (8.8 д, 99%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf= 0.41 (4:1 CHCl3:EtOAc)
2H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.20 (s, 1H), 7.06 (s, 1H) , 7. 02
(s, 1H) , 6.50 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 4.79-4.81 (m, 1H ),
4.66-4.68 (m, 2H) , 3.47-3.82 (m, 6H), 3.36 (s, 3H) , 0. 85
(s, 9H) , 0.01 (s, 3H), 0.00 (s, 3H)
(viii) Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) CH2OH
Към разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) CH2OTBS (9.3 g, 21.9 mmol; виж етап (vii) по-горе) в THF (60 ml) при
114 стайна температура се прибавя 1.0 М разтвор на тетрабутиламониев флуорид в THF (70.0 mL, 70.0 mmol) и сместа се разбърква цяла нощ под азот. Реакционната смес се концентрира във вакуум. Жълтият остатък се разтваря в Et2O (100 ml) и хексан (100 ml) и измива последователно с наситен разтвор на амониев хлорид (2 х 150 ml) и Н2О (3 х ml) . Органичната фаза се изсушава (Na2SO4) , филтрува се и се концентрира във вакуум.
След бърза хроматография върху
силикагел и елуиране с хексан:EtOAc (1:1) се получава съединението от подзаглавието (4.2 д, 62%) като жълто масло.
Rf = 0.42 (1:1 хексан:EtOAc)
A NMR (300 MHz, CDC13) δ 6.91-6.95 (m, 2Н) , 6.75-6.81 (m,
1Н) , 6.51 (t, JH-F = 73 Hz, 1H) , 4.80-4.82 (m, 1H) , 4.704.74 (m, 2H) , 3.88-3.93 (m, 1H) , 3.67-3.71 (m, 3H) , 3.533.56 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.96-2.99 (m, 1H).
(ix) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM)C(O)OH
Разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) CH2OH (4.2 g, 13.4 mmol ; виж етап (viii) по-горе) в ацетон (100 ml) се прибавя към воден разтвор на 5% разтвор на NaHCO3 (35 ml) . Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка се охлажда до 0° С и се прибавят калиев бромид (159 mg, 1.3 mmol) и 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободен радикал (2.2 д, 14.1 mmol). След това на капки в продължение на 20 минути се прибавя натриев хипохлорит (5.25%, 30 ml), като през това време сместа се бърка интензивно и поддържа при 0° С. След 1 час, се прибавят допълнително натриев хипохлорит (30 ml) и 5% разтвор на NaHCO3 (35 ml) и разбъркването продължава при 0° С в продължение на 2 часа. Ацетонът се отстранява във вакуум. Водната фаза се измива с Et2O (4 х 4 0 ml) . Водната фаза се подкислява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се
115 екстрахира с EtOAc (4 х 50 ml). Обединените EtOAc екстракти се измиват последователно с Н2О (4 х 30 ml) и след това със солев разтвор (60 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.3 д, 98%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
Rf=0.74 (8.0:1.5:0.5 СНС13 :МеОН:Et3N)
A NMR (300 MHz, ацетон-бб) δ 7.16-7.18 (m, 2Н), 7.16 (t, JH-F = 89 Hz, 1H), 7.00-7.03 (m, 1H) , 5.30 (s, 1H) ,
4.88 (d, J - 7 Hz, 1H) , 4.80 (d, J = 7 Hz, 1H) , 3.54-3.75 (m, 2H) , 3.46-3.49 (m, 2H), 3.28 (s, 3H) .
(x) Ph(3-F) (5-OCHF2)-(R) CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (Ο) OH (1.1 g, 3.4 mmol; виж етап (ix) по-горе) в DMF (20 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab (Теос) »НС1 (2.0 д, 4.4 mmol), РуВОР (1.9 д, 3.7 mmol) и DIPEA (1. 1 д, 8.4 mmol).
Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с
CHCl3:EtOH след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава
56%) като трошлива бяла пяна.
Rf= 0.65 (15:1 CHCl3:EtOH) от ротамери) δ 7.80комплексна смес
A NMR (300 MHz, CD3OD,
7.84 (m, 2H), 7.40- 7.46 (m, 2H), 6. 95-7.16 (m, 3H), 6 .92 и
6.88 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.28 и 5.08 (s, 1H) , 5.18· -5.22
и 4.70-4. 78 (m, 1H) , 4.50-4.75 (m, 1H), 4.30-4.49 (m, 2H) ,
4.21-4.26 (m, 3H) , 3.97-4.08 (m, 1H) , 3.35-3.72 (m, 6H) ,
3.30 (s, 3H) , 2.10 -2.75 (m, 2H) , 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08
(s, 9Н) .
(xi) Ph(3-F) (5-OCHF2)- (R)CH(OHjC(O) -Aze-Pab (Теос)
116
Смес от Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (0) -Aze-Pab (Teoc) (590 mg, 0.87 mmol; виж етап (x) по-горе) и въглероден тетрабромид (287 mg, 0.87 mmol) в 2-пропанол (20 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 1.5 часа. Сместа се концентрира във вакуум след това се разпределя между Н20 (50 ml) и EtOAc (3 х 50 ml) . Водната фаза се екстрахира с допълнително количество EtOAc (2 х 10 ml) . Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (30 ml), след това се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (60 mg, 12%) като трошлива бяла пяна.
Rf= 0.46 (15:1 СНС13: EtOH) 1Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.74 (d, J= 8Hz, 2H) , 7.35-7.37 (m, 2H) , 6.97-7.07 (m, 2Η) ,
6.80-6.84 (m, 1H) , 6.82 и 6.80 (t, JH-F = 73 Hz, 1H), 5.10 и 5. 06 (s, 1H), 4.68-4.70 (m, 1H), 3.974.60 (m, 6H), 2.102.75 (m, 2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
APCI-MS: (M + 1) = 595 m/z (xii) Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Teoc) (0.053 g, 0.089 mmol; виж етап (xi) по-горе), се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 80 минути при охлаждане в ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода/ацетонитрил, при което се получават 0.042 g (80%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.7-7.6 (m, 2H) , 7.5-7.4 (m, 2Η), 7.1-6.6 (m, 4H), 5.2-5.0 (m, 1Η плюс второстепенен ротамер от 1Н) , прибл. 4.8 (основен ротамер от предишен сигнал, замъглен от CD3OH сигнала), 4.6-4.3 (т, 2Н),4.26
117 (m, 1H, основен ротамер), 4.10 (m, 1H, основен ротамер),
3.96 (m, 1H, второстепенен ротамер), 3.89 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.60 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.44 (m, 1H, основен ротамер), 2.19 (m, 1H, основен ротамер), 2.05 (m, 1H, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 172.8, 172.0,167.0.
ESI-MS+: (M+l) = 451 (m/z)
Пример 2 6
Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) (i) Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (0)-Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (0) OH (1.0 g, 3.1 mmol; виж Пример 25 (ix) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab(ОМе)*2НС1 (1.4 д, 4.1 mmol), РуВОР (1.8 д, 3.4 mmol) и DIPEA (1.0 д, 7.8 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15: 1) и след това с EtOAc, при което се получава съединението от подзаглавието (1.5 д, 79%) като трошлива бяла пяна.
Rf - 0.24 (EtOAc) 7Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.587.62 (m, 2Н), 7.32-7.38 (m, 2Н), 7.03-7.16 (m, ЗН), 6.92 и
6.88 (d, JH-F = 73 Hz, 1H), 5. 27 и 5.08 (s, 1H) , 5.22-5.15 и 4.75-4.80 (m, 1H) , 4.38-4.65 (m, SH), 3.92-4.27 (m, 1H) ,
3.82 (s, 3H), 3.43-3.68 (m, 4H) , 3.29 (s, 3H) , 2.28 2.85 (m, 2H) .
(ii) Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (OMe)
Смес от Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (0)-AzePab (OMe) (828 mg, 2.33 mmol; виж етап (i) по-горе) и
118 въглероден тетрабромид (525 mg, 2.33 mmol) в 2-пропанол (20 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 8 часа и след това се бърка при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се разпределя между Н2О (70 ml) и EtOAc (50 ml) . Водната фаза се екстрахира с EtOAc (2 х 25 ml) . Обединените органични екстракти се измиват със солев разтвор (35 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от заглавието (520 mg, 74%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 73-81° С
Rf= 0.43 (15:1 CHCl3:EtOH)
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери ) δ 7.59
(d, J= 8Hz, 2Н) , 7.32-7.37 (m, 2H) , 7.05-7.14 ( m, 2Η),
6.87-6.92 (m, 1Η), 6.90 и 6.86 (t, JH-F = 73 Hz, 1Н ), 5.13-
5.18 и 4.75-4.85 (m, 2H), 4.15-4.45 (m, 4Н), 3.81 (s, ЗН),
2.10-2.75 (m, 2Н).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови
172.0, 171.4,153.9.
1) = 481 m/z въглероди) 5
APCI-MS:(М +
Пример 2 7 (5-OCH2F) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab χ TFA (i) 1,З-дибромо-5-бензилоксибензен
Натриев хидрид (9.9 g, 0.414 mol, 95% сух) се прибавя на порции при разбъркване към разтвор на бензилалкохол (41.0 д, 0.394 mol) в THF (1.0 L) при стайна температура под азотна атмосфера и се бърка в продължение на 1 час. Към този разтвор се прибавя на капки 1,З-дибромо-5-флуоробензен (100.0 д, 0.394 mol). След разбъркване цяла нощ, сместа се разпределя между Н2О (600 ml) и EtOAc (4 х 600 ml).
119
Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (101. 3 д, 75%) като жълто масло.
гН NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.30-7.48 (m, SH) , 7. 18 (s, 1H) , 7.06 (s, 2H),- 4.99 (s, 2H).
(ii) 3, 5-дибромофенол
Алуминиев хлорид (11.7 g, 87.6 mmol) се прибавя на
порции към разтвор на 1,З-дибромо-5-бензилоксибензен (10.0 д, 2 9.2 mmol; виж етап (i) по-горе) и N,N-диметиланилин (35.4 д, 292 mmol) в СН2С12 (100 ml) при стайна температура под азотна атмосфера. След 30 минути, сместа се разпределя
между IN НС1 (300 ml) и EtOAc (5 х 150 ml) . Обединените органични екстракти се измиват с наситен разтвор на ИаНСОз (150 ml) и солев разтвор (150 ml), изсушават се (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с хексан:EtOAc (9:1) се получава съединението от подзаглавието (6.1 д, 82%) като бяло твърдо вещество.
3Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.21 (s, 1Н) , 6.97 (s, 2H) ,
5.88 (bs, 1H).
(iii) 1,З-Дибромо-5-монофлуорометоксибензен
Към претеглен, облодънен автоклав 350 mL, съдържащ суспензия от 3, 5-дибромофенол (10.0 д, 39.7 mmol; виж етап (ii) по-горе) и CS2CO3 (20.7 д, 63.5 mmol) в DMF (150 ml) при -78° С се прибавя хлорофлуорометан чрез барботиране за минути през септум. Септумът · се заменя с тефлонова запушалка и след това съдът се затваря херметично и се оставя да се затопли до стайна температура, при което съдът се тегли и се определя съдържание от 9.0 g (131 mmol) хлорофлуорометан. Разтворът се загрява в маслена баня при
120
0° С цяла нощ. Съдът се охлажда до стайна температура, налягането се освобождава предпазливо и съдържанието се разрежда с вода (100 ml). Водната фаза се екстрахира с Et2O (3 х 200 ml), обединените органични фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (7.9 д, 71%) като бяло твърдо вещество.
2Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.40 (s, 1Н) , 7.18 (s, 2H) ,
5. 67 (d, JH-F = 53 Hz, 2H).
(iv) 1-Бромо-3-монофлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилкалай (10.0 g, 31.4 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 1, З-дибромо-5-монофлуорометоксибензен (8.5 д, 29.9 mmol; виж етап (iii) по-горе), тетракис (трифенилфосфин)паладий(0)(690 mg, 0. 599 mmol), и 2,6-дитрет-бутил-4-метилфенол (на върха на шпатулата) в толуен (100 ml) под азот. Сместа се разбърква при 70° С в продължение на 8 часа. Сместа се охлажда до 0° С и се прибавя IN NaOH (70 ml). След 1 час, сместа се екстрахира с СН2С12 (3 х 300 ml), след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан се получава съединението от подзаглавието (4.3 д,
57%) като безцветно масло.
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.30 (s, 1Н) , 7.16 (s, 1H) ,
7.01 (s, 1Н), 6.60 (dd, J= 6 Hz, J= 11 Hz, 1H), 5.74 (d, J
- 16 Hz, 1Н), 5.67 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 5. 32 (d, J= 8 Hz,
1Н) .
(v) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)CH2OH
2-Метил-2-пропанол (100 ml), H20 (100 ml), и AD-mix-β (27.5 g) се обединяват и охлаждат до 0° С. Наведнъж се прибавя 1-бромо-3-монофлуорометокси-5-винилбензен (4. 3 д,
121
17.3 mmol; виж етап (iv) по-горе) и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0° С докато TLC покаже отсъствие на изходно вещество. Реакцията се прекъсва при 0° С чрез добавяне на наситен разтвор на натриев сулфит (200 ml) и след това се затопля до стайна температура и се бърка в продължение на 60 мин. Реакционната смес се екстрахира с EtOAc (3 х 150 ml) . Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във
вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (4.9 д, 100%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
LH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7. 30 (s, 1Н) , 7.15 (s, 1H) , 7.11 (s, 1H) , 5.70 (d, JH-F = 53 Hz, 2H) , 4.62-4.70 (m,
1H), 3.52-3.70 (m, 2H).
HPLC Анализ: 92.1%, 96.9%' енантиомерно обогатен,
ChiralPak AD колона (95: 5 хексан: EtOH мобилна фаза).
(vi) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OMEM)CH2OTBS
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCH2F) - (R) CH (OH) CH2OH (4.9 g, 18. 6 mmol; виж етап (v) по-горе), 4-(диметиламино)-пиридин (453 mg, 3.71 mmol), и DIPEA (8.9 g, 93.0 mmol) в безводен СН2С12 (200 ml) се прибавя на капки 1.0 М разтвор на третбутилдиме тил силил хлорид в СН2С12 (22.3 mL, 22.3 mmol). Реакционната смес се бърка 10 часа при стайна температура. Към сместа се прибавят DIPEA (8.9 д, 93.0 mmol) и 2метоксиетоксиметилхлорид (13.9 g, 111 mmol) на капки. След 16 часа, допълнително се прибавя 2-метоксиетоксиметилхлорид (2.2 д) и Реакционната смес се бърка цяла нощ. Сместа се разрежда с Н2О (100 ml), и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (3 х 200 ml), обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и
122 елуиране с хексан: EtOAc (5:1) се получава съединението от подзаглавието (4.8 д, 55%) като безцветно масло.
2Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.29 (s, 1Н), 7.22 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.74 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 4.84 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.70-4.74 (m, 2H) , 3.50-3.91 (m, 6H), 3.42 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), 0.01 (s, 3H).
(vii)Ph(3-Br)(5-OCH2F)-(R)CH(OMEM)CH2OH
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OMEM)CH2OTBS (4.7 g, 10.1 mmol; виж етап (vi) по-горе) в THF (100 ml) се прибавя 1.0 M разтвор на тетрабутиламониев флуорид в THF (13.1 mL, 13.1 mmol) при стайна температура и сместа се разбърква 1 час. Сместа се разпределя между Н2О (100 ml) и EtOAc (3 х 100 ml) след това, обединените органични фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (3.3 д, 92%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
2Н NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 7.14 (s, 1H)
7.03 (s, 1Н) , 5.71 (d, Jn-F-53 Hz, 2H) , 4.80-4.82 (m, 1H)
4.58- -4.66 (m, 2H) , 3.71-3.77 (m, 1H) , 3.39-3.65 (m, 5H)
3.27 (s, 3H).
(viii) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OMEM)C(O)OH
Разтвор на Ph (3-Br) (5-OCH2F) - (R) CH (OMEM) CH2OH (2.1 g, 6.0 mmol; виж етап (vii) по-горе) в ацетон (40 ml) се прибавя към воден разтвор на 5% NaHCO3 (15 ml). Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка се охлажда до 0° С и се прибавят калиев бромид (70 mg, 0.60 mmol) и 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободен радикал (976 mg, 5.8 mmol). Натриев хипохлорит (5.25%, 15 ml) се добавя на капки за период от 10 минути, при интензивно разбъркване на сместа и поддържане на температура от 0° С. След 1 час се прибавят допълнително
123
натриев хипохлорит (10 ml) и NaHCO3 разтвор (20 ml) и разбъркването продължава при 0° С още 4 часа. Ацетонът се отстранява на ротационен изпарител. Водната фаза се разрежда с 10% NaHCO3 разтвор (30 ml) и се измива с Et2O (3 х 20 ml) . Водната фаза се подкислява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се екстрахира с EtOAc (3 х 40 ml) . Обединените EtOAc екстракти се измиват с Н2О (3 х 50 ml) и солев разтвор (50 ml), изсушават се (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (1.7 д, 78%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
A NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.38 (s, 1Н) , 7.25 (s, 1H) , 7. 18 (s, 1H), 5.76 (d, JH-F = 53 Hz, 2H) , 5.21 (s, 1H) , 4.83 (d, J= 7 Hz, 1H), 4.75 (d, J= 7 Hz, 1H), 3.62-3.78 (m, 2H), 3.48-3.52 (m, 2H), 3.32 (s, 3H).
(ix) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R) CH (OMEM)C(O)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCH2F) -(R)CH(OMEM)C(0)OH (1.0 g, 2.72 mmol; виж етап (viii) по-горе) в DMF (20 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab(Teoc).HCI (1.6 g, 3.5 mmol), PyBOP (1.6 g, 3.0 mmol), и DIPEA (880 mg, 6.81 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (15:1) и след това с EtOAc:EtOH (20:1), при което се получава подзаглавното съединение (1.2 д, 62%) като трошлива бяла пяна.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.80-7.84 (m, 2Н) , 7.40-7.46 (m, 2Н) , 7.13-7.32 (m, ЗН) , 5.84-5.87 (m, 1Н), 5.67-5.69 (m, 1H), 5.25 и 5.07 (s, 1H) , 5.18-5.23 и 4.80-4.88 (m, 1H), 3.97-4.79 (m, 8H), 3.60-3.71
124 (m, 2H) , 3.40-3.53 (m, 2H) , 3.32 (s, ЗН) , 2.10-2.75 (m,
2H), 1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
(x) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc)
Смес от Ph (3-Br) (5-OCH2F) - (R) CH (OMEM) C (0)-AzePab (Teoc) (347 mg, 0.478 mmol; виж етап (ix) по-горе) и въглероден тетрабромид (159 mg, 0.478 mmol) в 2-пропанол (10 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 1.5 часа. Сместа се концентрира във вакуум след това се разпределя между Н2О (20 ml) и EtOAc (3 х 30 ml) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (59 mg, 19%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 81-87° С
Rf= 0.58 (9:1 CHCl3:EtOH)
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.84
(d, J = 8Hz, 2H) , 7 . 40-7.48 (m, 2Н) 7.18-7.30 (m, ЗН),
5.80 (d, JH-F = 53 Hz, 2H), 5.21 и 5.15 (s, 1Н), 5.18· -5.24
и 4.80-4.88 (m, 1H) , 3 .98-4.54 (m, 6Н) , 2.10-2.70 (m, 2H) ,
1.05-1.11 (m, 2Н), 0.08 (s, 9Н).
APCI-MS: (Μ + 1) = 637 m/z (xi) Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab x TFA
Ph(3-Br) (5-OCH2F)-(R)CH(OH)C(Ο)-Aze-Pab (Teoc) (0.073 g, 0.11 mmol; виж етап (x) по-горе) , се разтваря в 5 ml TFA и се оставя да реагира за 90 минути при охлаждане на ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0. IM NH4OAc (30:70). Съответните фракции се изпаряват и се изсушават при замразяване от вода/ацетонитрил, при което се получават 49 mg (77%) от съединението от заглавието като ацетатна сол.
125 XH-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m,2H) ,
7.54 (m, 2H), 7.37 (s, IH, основен ротамер), 7. 33 (s, IH, второстепенен ротамер), 7.25-7.1 (m, 2H) , 5.75 (d,2H) ,
5.22 (m, IH, второстепенен ротамер), 5.18 (s, IH, основен ротамер), 5.11 (s, IH, второстепенен ротамер), 4.80 (m, IH, основен ротамер), 4.6-4.4 (m, 2H) , 4.37 (m, IH, основен ротамер), 4.16 (m, IH, основен ротамер), 4.1-3.9 (m,2H, два сигнала от второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен
ротамер), 1.89 (s, ЗН).
ESI-MS+ : (М+1) = 493/495 (m/z)
Пример 28
Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab х TFA (i)_____1, З-Дибромо-5-дифлуорометоксибензен
Към претеглен, облодънен автоклав 350 mL, съдържащ разтвор на 3,5-дибромофенол (10.0 д, 39.7 mmol; виж Пример 27 (ii) по-горе) в 2-пропанол (100 ml) и 30% КОН (80 ml) при -78° С се прибавя хлородифлуорометан чрез барботиране за 15 минути през септум. Септумът се заменя с тефлонова запушалка и съдът след това се затваря и се оставя да се затопли до стайна температура, при което съдът се тегли и се определя, че съдържа 12.0 g (138 mmol) хлородифлуорометан. Разтворът се вари под обратен хладник цяла нощ в маслена баня при 8 0° С. Съдът се охлажда до стайна температура, налягането се освобождава внимателно и съдържанието се разрежда с Н2О (200 ml) . Водната фаза се екстрахира с СНС13 (2 х 150 ml) , след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. Остатъкът се пречиства чрез дестилация с хладник Kugelrohr при 80° С при 0.2 mm Hg, при
126
което се получава съединението от подзаглавието (9.6 д, 80%) като бистра течност.
4Н NMR (300 MHz, CDC13) 7.55, (s, 1Н) , 7.26 (s, 2H) ,
6.52 (t, JH-F = 68 Hz, 1H).
(ii) 1-Бромо-3-дифлуорометокси-5-винилбензен
Три(бутил)винилкалай (10.5 g, 33.1 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 1,З-дибромо-5-дифлуорометоксибензен (9.1 д, 30.1 mmol; виж етап (i) по-горе), тетракис (трифенилфосфин)паладий(0)(700 mg, 0.60 mmol), и 2,6-дитрет-бутил-4-метилфенол (на върха на шпатулата) в толуен (125 ml) под азот. Сместа се разбърква при 50° С цяла нощ. Сместа се охлажда до 0° С и се прибавя IN NaOH (70 ml) . След 1 час, сместа се екстрахира с CH2CI2 (3 х 300 ml) , обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография
върху силикагел и елуиран' e c хексан ce получава
съединението от подзаглавието (5.1 g, 68%) като безцветно
масло.
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) 5 7.53 (s, 1H), 7.18 (s, 1H),
7.08 (s, 1Н) , 6.60 (dd, J = 6 Hz, J = 11 Hz, 1H) , 6.57 (t,
JH-F = 68 Hz, 1H) , 5.77 (d, J = 11 Hz, 1H), 5.36 (d, J= 8
Hz, 1Н) .
(iii) Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) СН2ОН
2-Метил-2-пропанол (150 ml), Н2О (150 ml), и AD-mix-β (27.8 g) се обединяват и охлаждат до 0° С. 1-Бромо-Здифлуорометокси-5- винилбензен (4.6 д, 18.6 mmol; виж етап (ii) по-горе) се прибавя наведнъж, и хетерогенната суспензия се бърка интензивно при 0° С докато чрез TLC се докаже отсъствие на изходно вещество, след това разтворът се затопля до стайна температура и се бърка цяла нощ.
Реакцията се прекъсва при 0° С чрез добавяне на наситен разтвор на натриев сулфит (300 ml) и след това се затопля
127 до стайна температура и се бърка в продължение на 60 мин.
Реакционната смес се екстрахира
200 ml) .
Обединените органични екстракти се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (5.0
95%) като безцветно масло, което се използва без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD) 5 7.43 (s,
7.23 (s, 1Н),
7.16
Hz,
1Н) ,
3.54-3.59 (m, 2Н).
HPLC
Анализ: 88.6%, 96.3% енантиомерно обогатен, ChiralPak
AD колона (95: 5 хексан: EtOH мобилна фаза).
(iv) Ph(3-Br) (5-OCHF2) -(R)CH(ОМЕМ)CH2OTBS
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)CH2OH (4.9 g,
17.3 mmol; виж етап (ill) по-горе), 4-(диметиламино) пиридин (420 mg,
3.5 mmol), и DIPEA (11.2 д, 86.3 mmol) в безводен СН2С12 (250 ml) се прибавя на капки 1.0 М разтвор на трет-бутилдиметилсилил хлорид в
СН2С12 (20.7 mL, 20.7 mmol). Реакционната смес се бърка цяла нощ при стайна температура. Към сместа се прибавя
DIPEA mmol) и 2-метоксиетоксиметилхлорид (12.9 д,
104 mmol) на капки.
След 3 дни, се прибавя допълнително количество
2смес се бърка цяла нощ. Сместа се разрежда с вода (250 ml) и фазите се разделят. Водната фаза се екстрахира с СН2С12 (2 х 250 ml), след това обединените органични фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хексан:
EtOAc (4:1) се получава съединението от подзаглавието (4.3 д, 51%) като безцветно масло.
128
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) 7. 40 (S, 1Н) , 7.25 (S,
7.08 (s, 1Н), 6.58 (t, JH-F = 75 Hz, 1Н) , 4.84 (d, J=
1Н) , 4.70-4.74 (т, 2Н) , 3.50-3. 91· (т, 6Н), 3.42 (S,
0.90 (s, 9Н), 0.12 (S, ЗН), 0.05 (s, ЗН)
Hz,
1H) ,
ЗН) , (v) Ph(3-Br) (S-OCHF2)-(R)CH(OMEM)CH2OH
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OMEM) CH2OTBS (3.3 g, 6.9 mmol; виж етап (iv) по-горе) в THF (60 ml) се прибавя 1.0 M разтвор на тетрабутиламониев флуорид в THF mmol) при стайна температура. Реакционната смес се бърка в продължение на 45 минути, след това сместа се разпределя между вода (150 ml) и EtOAc (2 х
Обединените органични фази се изсушават филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от подзаглавието (2.5 д, 98%) като жълто масло, което се използва без допълнително пречистване.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.35 (s, 1Н) , 7.21 (s, 1H) ,
7.08 (s, 1H) , 6.83 (t, JH-F = 73 Hz, 1H) , 4.73 (d, J = 7
Hz, 1H), 4.59-4.68 (m, 2H), 3.40-380 (m, 6H), 3.26 (s, 3H).
(vi) Ph (3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM)C(O)OH
Разтвор на Ph (3-Br) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) CH2OH (3.0 g, 8.1 mmol; виж етап (v) по-горе) в ацетон (60 ml) се прибавя към воден 5% разтвор на NaHCO3 (25 ml) . Тази хетерогенна смес, която се бърка с магнитна бъркалка, се охлажда до 0° С след това се прибавят калиев бромид (100 mg, 0.81 mmol) и
2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободен радикал (1.3 д, 8.5 mmol). След това на капки се добавя натриев хипохлорит (5.25%, 19 ml) за 10 минути при интензивно сместа бъркане на сместа и поддържане на температура от 0°
С. След 1 час, се добавят допълнително натриев хипохлорит (17 ml) и NaHCO3 разтвор (34 ml) и разбъркването продължава при 0° С още 4 часа. Ацетонът се отстранява на ротационен изпарител. Водната фаза се разрежда с 10% разтвор на NaHCO3
129
(30 ml) и се измива с Et2O (3 х 20 ml). Водната фаза се
подкислява до pH 3.5 с 10% лимонена киселина и се
екстрахира с EtOAc (3 х 40 ml) . Обединените EtOAc фази се
измиват с Н2О (3 х 50 ml) и солев разтвор (50 ml) и след
това се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум, при което се получава съединението от
подзаглавието (2.1 д, 66%) като безцветно масло, което се
използва без допълнително пречистване.
ХН NMR ( 300 MHz, CD3OD) δ 7.51 (s, 1H) , 7.32 (s, 1H) ,
7.24 (s, 1Н) , 6.88 (t, JH-F = 73 Hz, 1H) , 5.21 (s, 1H) ,
4.84 (d, J = 7 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 7 Hz, 1H), 3.62 -3.80
(m, 2Н), 3.48-3.52 (m, 2Н), 3.32 (s, ЗН).
(vii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH (OMEM) С(0)-Aze-Pab (Teoc)
Към разтвор на Ph (3-Br) (5-OCHF2)-(R)CH(OMEM)C(0)OH (1.0 g, 2.62 mmol; виж етап (vi) по-горе) в DMF (50 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab (Teoc) *НС1 (1.5 g, 3.38 mmol), РуВОР (1.5 g, 2.9 mmol) и DIPEA (840 mg, 6.50 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира върху силикагел и елуира с СНС1з:ЕбОН (15:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1.1 д, 59%) като трошлива бяла пяна.
4Н NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) 5
7.79-7.83 (m, 2H) , 7.26-7.52 (m, SH), 6.94 и 6. 91 (t, JH-F
= 73 Hz, 1H) , 5.27 и 5.07 (s, 1H) , 5.20-5 .23 и 4.80-4.88
(m, 1H) , 4.01- -4.79 (m, 8H) , 3. 60-3.71 (m, 2H) ! 3.40-3.53
(m, 2H) , 3.32 (s, 3H) , 2.10-2.75 (m, 2H) , 1. 05- -1.11 (m,
2H), 0.08 (s, 9H) .
(viii) Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab (Teoc)
Смес от Ph (3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OMEM) С (0)-AzePab(Teoc) (369 mg, 0.496 mmol; виж етап (vii) по-горе) и
130 въглероден тетрабромид (165 mg, 0.496 mmol) в 2-пропанол (10 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 12 часа. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н2О (15 ml) и EtOAc (5 х 20 ml) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4), филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с CHCl3:EtOH (15:1) се получава съединението от подзаглавието (134 mg, 41%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 92-98° С
Rf = 0.37 (9:1 CHCl3:EtOH) ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.807.86 (m, 2Н) , 7.40-7.48 (m, 2Н) 7.10-7.33 (m, ЗН) , 6.92 и
6.88 (t, JH-F = 73. Hz, 1Н), 5.18 и 5.11 (s, 1H) , 5.18-5.24 и 4.76-4.80 (m, 1H), 3.98-4.54 (m, 6H), 2.10-2.70 (m, 2H),
1.05-1.11 (m, 2H), 0.08 (s, 9H) .
APCI-MS: (M + 1) - 655 m/z (ix) Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C(O) -Aze-Pab x TFA
Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C(O) -Aze-Pab (Teoc) (0.081 g, 0.124 mmol; виж етап (viii) по-горе), се разтваря в 5 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 80 минути при охлаждане на ледена баня. TFA се изпарява и остатъкът се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (30:70). Съответните фракции се изпаряват и се изсушават при замразяване от вода/ацетонитрил, при което се получават mg (83%) от съединението от заглавието като ацетатна сол.
XH-NMR (300 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.8-7.7 (m, 2H) ,
7.6-7.4 (m, ЗН) , 7.3-7.2 (m, 2H) , 6.89 (t, 1H, основен ротамер), 6.87 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.23 (m, 1H, второстепенен ротамер), 5.21 (s, 1H, основен ротамер), 5.
(s, 1H, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1H, основен
131 ротамер), 4.6-4.4 (m, 2Н) , 4.38 (nt, 1Н, основен ротамер),
4.20 (m, 1Н, основен ротамер), 4.1-3.9 (m, 2Н, два сигнала от второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН) .
13C-NMR (75 MHz; CD3OD):(карбонил и/или амидинови въглероди) δ 172.0, 171.7,167.0.
MS (m/z) 511/513 (M+l)+
Пример 29
Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab (OMe) (i) Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) CH (OMEM) C (0)-Aze-Pab (OMe)
Към разтвор на Ph(3-Br) (5-OCHF2) - (R) СН (OMEM) С (0) OH (957 mg, 2. 48 mmol; виж Пример 28 (vi) по-горе) в DMF (30 ml) под азот при 0° С се прибавят HAze-Pab (ОМе) »2НС1 (1.1 д, 3.2 mmol), РуВОР (1.4 д, 2.7 mmol) и DIPEA (804 mg, 6. 2 mmol). Реакционната смес се бърка при 0° С в продължение на 2 часа и след това при стайна температура цяла нощ. Сместа се концентрира във вакуум и остатъкът се хроматографира два пъти върху силикагел, елуира се първо с CHCl3:EtOH (9:1) и след това с EtOAc:EtOH (15:1), при което се получава съединението от подзаглавието (1. 1 д, 72%) като трошлива бяла пяна.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.59-7.65 (m, 2Н) , 7.20-7.55 (m, 5Н) , 6.95 и 6.91 (t, JH-F = 73 Hz, 1Н) , 5.27 и 5.07 (s, 1H) , 5.18-5.23 и 4.75-4.84 (m, 1H), 3.87-4.89 (m, 6H) , 3.84 (s, 3H) , 3.60-3.71 (m,
2H), 3.40-3.53 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.10-2.75 (m, 2H).
(ii) Ph(3-Br) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (OMe)
Смес от Ph (3-Br) (5-OCHF2)-(R) CH (OMEM) C (0)-AzePab (OMe) (1.1 g, 1.8 mmol; виж етап (i) по-горе) и
132 въглероден тетрабромид (583 mg, 1.8 mmol) в 2-пропанол (30 ml) се вари под обратен хладник в продължение на 2.5 дни През това време се прибавя допълнително въглероден тетрабромид (5 порции от 50 mg на интервали за допълнително още 0.90 mmol) за да се осигури протичане на реакцията до край. Сместа се концентрира във вакуум, след това се разпределя между Н20 (50 ml) и
EtOAc (5 х 25 ml) . Обединените органични фази се изсушават (Na2SO4) , филтруват се и се концентрират във вакуум. След бърза хроматография върху силикагел елуиране с CHC13:EtOH (15:1) се получава съединението от заглавието (460 mg, 50%) като трошлива бяла пяна.
Т.т.: 71-75° С
Rf = 0.63 (9:1 CHCl3:EtOH)
хн NMR (300 MHz, CD3OD, комплексна смес от ротамери) δ 7.59
(d, J= 8Hz, 2H) , 7.20-7.54 (m, SH) , 6.90 и 6.87 (t, JH-F =
73 Hz, 1H) , 5.18 и 5.11 ( s, 1H), 4.76-4.80 (m, 1H), 3.98-
4.54 (m, 4Н), 3.82 (s, ЗН), 2.10-2.70 (m, 2Η).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD):(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.5, 172.1, 171.6, 154.1.
APCI-MS: (М + 1) = 542 m/z
Пример 3 0
Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab (ОН) (i) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R)CH (OH) С (0)-Aze-Pab (Z)
Boc-Aze-Pab(Z)(виж Международна заявка за патент WO 97/02284, 92 mg, 0. 197 mmol) се разтваря в 10 ml EtOAc наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 10 мин. Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2)-(R) СН(OH)С(0)ОН (50 mg, 0.188 mmol; виж Пример 17 (ν) по-горе), РуВОР (109 mg, 0.209 mmol) и накрая диизопропилетиламин (96 mg, 0.75 mmol) в 2 ml DMF. Сместа
133 се бърка в продължение на 2 часа и след това се изсипва в 50 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc: МеОН (9:1). Добив: 100 mg (87%).
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.85-7.75 (m, 2Н), 7.45-7.25 (m, 7Н) , 7.11 (m, 1Н, основен ротамер),
7.08 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.05-6.9 (m, 2Н), 6.13 (bt, 1Н) , 5.25-5.05 (m, ЗН) , 4.77 (m, 1H, частично закрит от CD3OH сигнал), 4.5-3.9 (m, 7Н) , 2.64 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.47 (m, 1Н, основен ротамер), 2.25 (m, 1Н, основен ротамер), 2.13 (m, 1 Н, второстепенен ротамер) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH)
Хидроксиламин хидрохлорид (65 mg, 0.94 mmol) и триетиламин (0.319 g, 3.16 mmol) се смесват в 8 ml THF и се обработват c ултразвук в продължение на 1 час при 40° С.
Добавя се Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -AzePab (Z)(96 mg, 0.156 mmol; виж етап (i) по-горе) c още 8 ml THF. Сместа се разбърква при 40° С в продължение на 4.5 дни. Разтворителят се изпарява и суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (40:60). Добив: 30 mg (38%). Чистота: 99%.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.6-7.55 (m, 2Н) , 7.357.3 (m, 2Н) , 7.12 (m, 1Н, основен ротамер),
7.09 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.05-6.9 (m, 2Н), 6.15 (триплет от мултиплети, 1Н), 5.15 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.13 (s, 1Н, основен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.77 (m,1Н, основен ротамер), 4.54.2 (m, SH) , 4.08 (т, 1Н, основен ротамер), 3.97 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.66 (m, 1Н, второстепенен
134 ротамер), 2.50 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) Ь 172.8, 172.2, 171.4, 159.1,
158.9, 154.2.
APCI-MS: (М + 1) = 497/499 m/z
Пример 31
Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH) (i) Ph(3-Cl) (S-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C(O) -Aze-Pab (Z)
Вос-Aze-Pab(Z)(130 mg, 0.279 mmol) се разтваря в 15 ml EtOAc наситен c HCI (газ) и се оставя да реагира в продължение на 10 мин. Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(З-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)-C(0)OH (63 mg, 0.188 mmol; виж Пример 21 (v) по-горе) в 3 ml DMF, РуВОР (147 mg, 0.279 mmol) и накрая диизопропилетиламин (134 mg, 1.03 mmol). Сместа се бърка в продължение на 130 минути и след това се изсипва в 75 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с
EtOAc/МеОН = 95/5. Добив: 119 mg (79%).
гН NMR (400 MHz, CDC1 3) δ 8.06 (bt, 1H) , 7.67 (d, 2H) ,
7.45-7.25 (m, SH) , 7.18 (d, 2H), 6.89 (m, 1H) , 6.84 (m,
1Н) , 6.76 (m, 1H) , 5.16 (s, 2H) , 4.84 (s, 1H) , 4.79 (m,
1Н), 4.66 (дублет от мултиплети, 2Н), 4.4-4.3 (m, 2Н), 4.10 (дублет от мултиплети, 2Н) , 4.02 (m, 1Н) , 3.67 (т, 1Н) ,
2.46 (т, 1Н), 2.28 (т, 1Н).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OH)
Хидроксиламин хидрохлорид (80 mg, 1.16 mmol) и триетиламин (0.392 g, 3.87 mmol) се смесват в 9 ml THF и се обработват c ултразвук в продължение на 1 час при 40° С.
135
Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Z) (96 mg, 0.156 mmol; виж етап (i) по-горе) се прибавя с още 9 ml THF. Сместа се разбърква при 40° С в продължение на 48 часа и 3 дни при стайна температура. Разтворителят се изпарява и суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN:0.1M NH4OAc (30:70). Добив: 72 mg (78%). Чистота: 100%.
ХН NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.6-7.55 (m, 2Н) , 7.357.25 (m, 4Н) , 7.07 (m, IH, основен ротамер) , 7.04 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.0-6.9 (М, 2h), 5.12 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.08 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 5.04 (s, 1Н), 4.78 (m, 1H, основен ротамер), 4.68 (дублет от мултиплети, 2 Н), 4.5-4.25 (т, ЗН), 4.20 (дублет от мултиплети, 2Н) 4.06 (m, 1Н, основен ротамер), 3.97 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 2.65 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н основен ротамер), 2.27 (m, 1Н, основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 172. 3,171.5,159.8,154.3
APCI-MS : (М + 1) - 479/481 m/z
Пример 32
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) -С (0) -Pro-Pab (i) Boc-Pro-Pab(Теос)
Boc-Pro-Pab(Z)(виж Международна заявка за патент WO 97/02284,15.0 g, 0.0321 mol) се разтваря в 150 ml етанол и се прибавят 200 mg 10% Pd/C (50% влага). Сместа се разбърква и хидрира при атмосферно налягане в продължение на 2 часа, филтрува се през Hyflo и се концентрира.
Продуктът се използва без допълнително пречистване. От този продукт се вземат 10 g (0.029.mol), които се разтварят в 300 ml THF. Прибавя се Теос-р- нитрофенил карбонат (10 д,
136
0.035 mol). За 3 минути се прибавя разтвор на калиев карбонат (5.2 д, 0.038 mol) в 50 ml вода и полученият разтвор се бърка в продължение на 3 дни, концентрира се и остатъкът се екстрахира с EtOAc три пъти. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел при използване на метиленхлорид:ацетон (4: 1). Добив: 9.8 д (69%).
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH)-С (0)-Pro-Pab (Теос)
Boc-Pro-Pab(Теос)(107 mg, 0.218 mmol; виж етап (i) погоре) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира за 10 мин.
Разтворителят се изпарява и остатъкът се смесва с Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (50 mg, 0.198 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) в 3 ml DMF, РуВОР (115 mg, 0.218 mmol) и накрая диизопропилетиламин (104 mg, 0.80 mmol). Сместа се бърка в продължение на 2 часа и след това се изсипва в 75 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc.
Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на
бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:MeOH (95:5).
Добив : 89 mg (72%) .
LH NMR ( 400 MHz, CDi 013) δ 7.54 (bt, 1H) , 7.47 (d, 2H)
7.12 (т, 1Н) , 7.08 (d, 2H) , 7.02 (m, 1H) , 6.95 (m, 1H)
6.50 (t, 1H) , 5.21 (s, 1H) , 4.42 (m, 1H) , 4.35- 4.15 (m
ЗН) , 3.59 (m, . 1H), 2.94 (m, 1H), 2. 1-1. 7 (m, 4H) , 1.06 (m
2Н) , 0.04 (s, 9H) .
(iii) Ph(3-Cl) (5-0C1 hf2)· - (R)CH(O: H) -C (0)-Pro-Pab x TFA
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Pro-Pab(Teoc) (85 mg,
0.136 mmol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 1 ml метиленхлорид и се охлажда на ледена баня. TFA (4 ml) се прибавя и реакционната смес се бърка в продължение на
137 мин. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез
замразяване от вода и ацетонитрил. Добив: 7 9 mg (92%) . Чистота: 94%.
1Н NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.85-7.7 (m, 2Н), 7.58 (d, 2Н, основен ротамер), 7.47 (d, 2Н, второстепенен ротамер), 7.35 (m, 1Н, основен ротамер), 7.27 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2.7.1 (m, 2Н) , 6.88 (t, 1Н) , 5.38 (s, 1Н, основен ротамер), 5.22 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.58 (d, 1Н), 4.5-4.2 (m, 2Н) , 3.83.5 (т, 1Н), 3.35 (т, 1Н), 2.2-1.8 (т, 4Н).
13C-NMR (100 MHz; CD3OD): (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 173.6, 171.1,167.0.
APCI-MS: (М + 1) = 481/483 m/z
Пример 33
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)СН(OH)-С(0)-Pro-Pab(ОМе) (i) 4-Азидометил-М-метокси-бензамидин
4-Азидометилбензонитрил (17.3 д, 0.109 mol; Nishiyama et al ; Chem. Lett.(1982) 1477) се разтваря в 500 ml толуен и 200 ml абсолютен етанол. Разтворът се охлажда до -10° С и НС1 (газ) се барбутира до насищане. Сместа се държи в хладилник в продължение на 2 дни след което по-голямата част от разтворителите са се изпарили. Прибавя се диетилов етер се прибавя и се отдекантира. Продуктът се разтваря отново в разтвор на О-метилхидроксиламин (10.5 д, 0.125 mol) и триетиламин (56 ml) в 2 00 ml метанол. Сместа се оставя да стои в продължение на 3 дни откъдето метанолът се изпарява с добавяне на EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, разреден НОАс и воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се разрежда с още EtOAc до общ обем от 500 mL.
138
Проба от 25 ml се изпарява до сухо. Остатъкът се състои от 932 mg.
Общ добив: 18.6 g (83%).
(ii) 4-Аминометил-М-метокси-бенз амидин
Към разтвор на 4-азидометил-11-метокси-бензамидин (11.3 g, 0.055 mol; виж етап (1) по-горе) в 200 ml етанол се прибавят 200 mg PtO2.
Сместа се хидрира с константно барботиране на водород в продължение на 4 часа и впоследствие се филтрува през Celite® и се изпарява. Добив: 7.34 g (74%).
(iii) Boc-Pro-Pab(OMe)
Към суспензия от Boc-Pro-OH (9.7 g, аминометил-N метокси-бензамидин (7.34 g, етап (ii) по-горе) и диметиламинопиридин
0.045 mol), 40.041 mol; виж (7. 8 д, 0.064 mol) в 300 ml ацетонитрил се прибавя база EDC (11.7 mL, 0.068 mol). Сместа се бърка в продължение на 18 часа, концентрира се и се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, 'воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (MgSO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с
EtOAc. Добив: 9. 73 g (63%).
(iv) H-Pro-Pab(OMe) χ 2 HC1
Boc-Pro-Pab (OMe) (9.7 g, 0.026 mol; виж етап (iii) погоре) се разтваря в 250 ml EtOAc. Леденостуденият разтвор се насища с НС1 (газ) чрез барботиране в продължение на 5 мин. Продуктът се утаява веднага и се прибавят 125 ml абсолютен етанол. Сместа се обработва с ултразвук докато по-голямата част от материала се втвърди. Прибавя се диетилов етер (200 ml) и суспензията се филтрува. Няколко бучки, които не са се втвърдили се обработват отново с абсолютен етанол и диетилов етер. Твърдото вещество се изсушава.
139
Добив: 7.57 g (86%) .
7Н NMR ( 400 MHz, CD3OD) δ 7.74 (d, 2H), 7.58 (d, 2H) , 4.55
(s, 2Н), 4.38 (m, 1Η), 3. 98 (s, 3H), 3.45-3.3 (m, 2H) , 2.50
(Itt, 1Н) , 2.15-2.0 (m, ЗН)
(V) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)-C(0)-Pro-Pab1 iOMe)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) С (0) OH (50 mg, 0.198 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), H-Pro-Pab(OMe)(76 mg, 0.218 mmol, виж етап (iv) по-горе) и РуВОР (115 mg, 0.218 mmol) се разтварят в 2 ml DMF.
Прибавя се диизопропилетиламин (104 mg, 0.80 mmol) и сместа се бърка в продължение на 2.5 часа. Сместа се изсипва в 50 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Остатъкът се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc: МеОН (95: 5). Добив: 37 mg (36%). Чистота : 98%.
1Н NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.60 (d,
2Н, основен ротамер), 7.57 (d, 2Н, второстепенен ротамер), 7.4-7.1 (m, 5Н), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.87 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.35 (s, 1Н, основен ротамер), 5.21 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.5-4.35 (m, 1Н и 2Н, основен ротамер), 4.3-4.25 (m, 2Н, второстепенен ротамер), 3.814 (s, ЗН, основен ротамер), 3.807 (s, ЗН, второстепенен ротамер), 3.75-3.5 (m, 1Н), 3.35 (т, 1Н), 2.21.8 (т, 4Н) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 173. 3, 173.2, 171.3,171.0,
153.9, 152.4
APCI-MS: (М + 1) = 511/513 m/z
Пример 3 4
140
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- ( (2амидино)-3- пиридинил)
(i) _____6-Цианоникотинова киселина
Към разтвор на никотиновата киселина се прибавя Nоксид (51 д, 0.37 mol) в 1.2 1 DMF, NaCN (54 g, 1.1 mol), последван от триетиламин (255 mL, 1.83 mol) и TMSCI (185 ml). Реакционната смес се бърка при 110° С в продължение на 10 часа, филтруват се и Филтратът се концентрира. Остатъкът се разтваря в 100 ml 2N НС1 и се екстрахира с метиленхлорид. Органичните фази се обединяват, концентрират се и се прекристализират от вода, при което се получават 12 g (22%) от продукта.
(ii) 5-(Хидроксиметил)пиридин-2-карбонитрил
Към разтвор на 6-цианоникотинова киселина (12д, 0. 081mol; виж етап (i) по-горе) в THF при 0° С, се прибавя Et3N (12.4 mL, 0.0892 mol) последван от етилхлороформат (8.53 mL, 0.0892 mol). Реакционната смес се бърка в продължение на 15 минути и се прибавя NaBH4 (6.14 g, 0.162 mol) . След това сместа се разбърква при стайна температура цяла нощ, прекъсва се с вода и се екстрахира с метиленхлорид. Органичната фаза се концентрира и се пречиства чрез колонна хроматография, при което се получава 4д (20%) алкохол.
(iii) 5-(Азидометил)пиридин-2-карбонитрил
141
5-(Хидроксиметил)пиридин-2-карбонитрил (4 g, 0.03 mol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 25 ml метиленхлорид и охлажда в ледена баня. На капки се прибавят мезилхлорид (2.32 mL, 0.0300 mol) и след това триетиламин (4.6 mL,0.033 mol) се прибавят на капки. Реакционната смес се бърка и след преработка на суровия мезилат се обработва с NaN3 (7.35 g, 0.113 mol) в 20 ml DMF. Реакционната смес се бърка при 40° С в продължение на 2 часа, разрежда се с вода и се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се концентрира, при което се получава 3.95д (83%) суров азид.
(iv)_______5- (трет-бутоксикарбониламинометил)пиридин-2карбонитрил
Към разтвор на 5-(азидометил)пиридин-2-карбонитрил (3.95 g, 0.0248 mol; виж етап (ill) по-горе) в 30 ml THF и 10 ml вода, се прибавя трифенилфосфин (7.8 g, 0.0298 mol) и получената смес се бърка в продължение на 24 часа.
След това, се прибавя триетиламин (3.8 mL, 0.027 mol), последван от Вос анхидрид (5.4 g, 0.025 mol) и се разбърква в продължение на 2 часа. Реакционната смес се разпределя между вода и етилацетат. Органичната фаза се концентрира и се пречиства чрез колонна хроматография, при което се получават 2.1 g (36%) от съединението от подзаглавието.
3Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.6 (s, 1Н) , 8. 0 (d, 1H) ,
8.9 (d, 1H), 4.1 (m, 2H), 1.4 (s, 9H) (v) 5-(Аминометил)пиридин-2-карбонитрил x 2 HC1
5-(трет-бутоксикарбониламинометил)пиридин-2карбонитрил (0.200 g, 0.86 mmol, виж етап (iv) по-горе) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 мин. Разтворителят се изпарява и се получават 0.175 g (99%) от съединението от подзаглавието под формата на неговата дихидрохлоридна сол.
142 XH NMR (500 MHz, D20) δ 8.79 (s, 1H) , 8.17 (d, 1H) ,
8.05 (d, 1H), 4.38 (s, 2H) (vi) Boc-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN)
Към смес от 5-(аминометил)пиридин-2-карбонитрил χ 2 HCI (0.175 g, 0.85 mmol; виж етап (v) по-горе), Boc-Aze-OH (0.201 g, 1.00 mmol) и TBTU (0.321 g, 1.00 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диметиламинопиридин (0.367 g, 3.00 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ и след това се изсипва във вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт започва да кристализира и се използва като такъв в следващия етап. Добив: 0.23 g (73%).
ХН NMR (500 MHz, CDC13) δ 8.66 (s, 1Н) , 8.2-7.8 (широк, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.65-4.5 (m, 2H) , 3.94 (m, 1H) , 3.81 (m, 1H) , 2.6.2. 35 (m, 2H) , 1.8 (широк, 1H), 1.45 (s, 9H) (vii) H-Aze-NH-CH2-5-Py(2-CN) x 2 HCI
Boc-Aze-NH-CH2-5-Py (2-CN) (0.23 g, 0.73 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 10 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 мин. Разтворителят се изпарява и се получават 0.21 g (100%) от съединението от подзаглавието под формата на неговата дихидрохлоридна сол.
ХН NMR (500 MHz, D2O) δ 8.64 (s, 1Н), 8.0-7.9 (m, 2H), 5.19 (m, 1H) , 4.65-4. 55 (m, 2H) , 4.20 (m, 1H) , 4.03 (m,
1H), 2.88 (m, 1H), 2.64 (m, 1H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH)-C (0)-Aze-NH~CH2-5Py(2-CN)
Към смес от H-Aze-NH-CH2-5-Py (2-CN) x 2 HC1 (0.206 g, 0.713 mmol; виж етап (vii) по-горе), Ph(3-Cl)(5-0CHF2)(R)CH(OH)C(0)OH (0.180 g, 0.713 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) и PyBOP (0.408 g, 0.784 mmol) в 5 ml DMF се
143 прибавя диметиламинопиридин (0.367 д, 3.00 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ и впоследствие се изсипва във вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc при което се
получава чисто вещество. Добив: 0.197 g ХН NMR (500 MHz, CDC13) δ 8.63 (m, (61%) .
1H) , 8.22 (bt, 1H) ,
7.78 (m, 1H) , 7.67 (m, 1H), 7.21 (m, 1H) , 7.16 (m, 1H) ,
7.04 (m, 1H) , 6.56 (t, 1H) , 4.97 (bd, 1H), 4.92 (m, 1H) ,
4.6-4 .5 (m, 2H) , 4.40 (bd, 1H), 4.18 (m, 1H), 3.80 (m, 1H) ,
2.69 (m, 1Н), 2.46 (т, 1Н), 1.92 (s, 1Н)
APCI-MS: (М + 1) = 451/453 m/z (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH)-С (0)-Aze-NH-CH2-( (2амидино)-5-пиридинил) х НОАс
Ph (З-Cl) (5-OCHF2).- (R) СН (OH) -С (0) -Aze-NH-CH2-5-Py (2CN) (0.200 g, 0.444 mmol; виж етап (viii) по-горе), амониев ацетат (1.00 g, 0.0130 mol) и N-ацетилцистеин (2.00 g, 0.0122 mol) в 10 ml метанол се загрява при 50° С в продължение на 2 дни. С помощта на препаративна RPLC с CH3CN: 0.1М NH4OAc (30: 79) и анализ на съответните фракции отново с CH3CN:0.1M NH4OAc (5:95-40:60) се получават 60 mg (26%) чисто съединение от заглавието като ацетатна сол след изсушаване при замразяване от вода и ацетонитрил. Чистота: 100%.
ХН NMR (500 MHz, D2O, смес от ротамери) δ 8.68 (s, 1Н,
основен ротамер), 8.62 (s, 1H, второстепенен ротамер),
8.05-7.9 (m, 2H), 7.33 (m, 1H, ротамер), 7.27 (m, 1H,
ротамер) , 7.22 (m, 1H, ротамер), 7.17 (m, 1H, ротамер),
7.01 (m, 1H, ротамер) , 6 .84 (t, 1H) , 5.32 ( s, 1H, основен
ротамер) , 5.20 (m, 1H, второстепенен ротамер) , 5.13 (s, 1H,
второстепенен ротамер), 4.88 (m, 1Н, основен ротамер),
144
4.65-4.55 (m, 2H, основен ротамер), 4.45-4.35 (m,1Н, ротамер плюс 1Н, второстепенен ротамер), 4.31 (d,1Н, второстепенен ротамер), 4.2-4.05 (m, 1Н плюс 1Н, ротамер),
2.80 (ш, 1Н, второстепенен ротамер), 2.61 (m, 1Н, основен ротамер), 2.33 (m, 1Н, основен ротамер), 2.24 (m,1Н, второстепенен ротамер), 1.93 (s, ЗН) 13C-NMR (100 MHz; D20) : (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 181.6, 173.3, 172.7, 172.6,
172.3, 162.6, 162.3
APCI-MS: (Μ + 1) = 468/470 mlz
Пример 35
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH2-( (2метоксиамидино)- 5-пиридинил)
(i)_____Boc-NH-CH2-[ (2- (амино (хидроксилимино)метил) )-5- пиридинил]
5-(трет-бутоксикарбониламинометил)пиридин-2-карбонитрил (1.00 д, 4.29 mmol; виж Пример 34 (iv) по-горе) се разтваря в 10 ml етанол и се прибавят хидроксиламин хидрохлорид (0.894 g, 0.0129 mol) и триетиламин (1.30 д, 0.0129 mol). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 6 дни. Сместа се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Добив: 0.96 g (84%).
145
XH NMR (400 MHz, ацетон-с!6) δ 9.01 (bs, 1Η) , 8.50 (bs, 1H), 7.87 (m, 1H) , 7.70 (m, 1H) , 6.58 (широк, 1H) , 5.70 (широк, 2H), 4.31 (d, 2H), 1.41 (s, 9H) (ii) Boc-Aze-NH-CH2- (2-(амидино)-5-пиридинил) x HOAc
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в Judkins et al, Synth: Comm. (1998) 4351. Суспензия от Boc-NH-CH2-[ (2-(амино (хидроксилимино) метил) ) -5пиридинил] (0.910 д, 3.42 mmol; виж етап (i) по-горе), оцетен анхидрид (0.35 mL, 3.7 mmol) и 0.35 g от 10% Pd/C (50% влага) в 100 ml оцетна киселина се хидрира при налягане от 5 атмосфери в продължение на 5 часа. Сместа се филтрува през Celite и се концентрират.
Остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получава 0.97 g (92%) от съединението от подзаглавието.
ХН NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.74 (s, 1Н) , 8.12 (d, 1H) , 7.98 (d, 1H), 4.38 (s, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.46 (s, 9H) (iii) _____Boc-NH-CH2- (2- (амино (триметилсилилетилимино) - метил)-5-пиридинил)
Към суспензия от Boc-NH-CH2-(2-(амидино)-5-пиридинил) х НОАс (0.96 д, 3.1 mmol; виж етап (ii) по-горе) в 75 ml THF се прибавя разтвор на калиев карбонат (1.07 д, 7.7 mmol) и Теос-р-нитрофенил карбонат (1.14д, 4.02 mmol) в 15 ml вода. Сместа се разбърква цяла нощ. Прибавя се излишък от глицин и калиев карбонат, и реакцията продължава 2 часа. THF се изпарява и остатъкът се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване.
ХН NMR (500 MHz, CDCI3) δ 9.31 (широк, 1Н) , 8.52 (s,
1Н), 8.41 (d, 1Н) , 8.35 (широк, 1Н) , 7.74 (d, 1Н) , 4.97
146 (широк, 1Н) , 4.39 (m, 2H) , 4.26 (m, . 2H) , 1. 46 (s, 9H) ,
1.14 (m, 2H), 0.07 (s, 9H) (iv) H2N-CH2- (2- (амино (триметилсилилетилимино)метил) -5пиридинил) х 2 НС1
Boc-NH-CH2- (2- (амино (триметилсилилетилимино)метил) -5пиридинил) (0.23 д, 0.58 mmol; виж етап (ill) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 мин. Разтворителят се изпарява и продуктът се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.21 g (98%) .
ХН NMR (500 MHz, D2O) 5 8. 89 (s, 1Н) , 8.25 (s, 2H) , 4.55 (m, 2H), 4.42 (s, 2H), 1.20 (m, 2H), 0.09 (s, 9H) (v) Boc-Aze-NH-CH2- (2- (амино (триметилсилилетилимино) - метил)-5-пиридинил)
Към разтвор на H2N-CH2- (2- (амино (триметилсилилетилимино) метил)-5-пиридинил) х 2 НС1 (0.21 д, 0.57 mmol; виж етап (iv) по-горе) ,
Boc-Aze-OH (0.127 д, 0.631 mmol), и
TBTU (233 mg, 0.726 mmol) ml DMF се прибавя диметиламинопиридин (269 mg,
2.20 mmo1).
Сместа се разбърква цяла нощ, изсипва се в
100 ml вода и се
екстрахира с EtOAc три пъти. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат и вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc, при което се получават 170 mg (56%) от желаното съединение.
ХН NMR (500 MHz, CDC13) δ 9.33 (широк, 1Н) , 8.54(s,
1Н), 8.41 (d, 1Н), 8.36 (широк, 1Н), 7.75 (m, 1Н), 4.72(т,
1Н), 4.56 (т, 2Н), 4.26 (т, 2Н) , 3.93 (т, 1Н) , 3.80(т,
1Н), 2.6-2.4 (т, 2Н), 1.42 (s, 9Н) , 1.14 (т, 2Н) , 0.07(s,
9Н) (vi) H-Aze-NH-CH2~ (2- (амино (триметилсилилетилимино) метил)-5 пиридинил) х 2 НС1
147
Boc-Aze-NH-CH2- (2-амино (триметилсилилетилимино) метил) 5-пиридинил) (170 mg, 0.356 mmol; виж етап (v) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се бърка в продължение на 30 мин. Разтворителят се изпарява и продуктът се използва без допълнително пречистване. Добив: 160 mg (100%).
ХН NMR (500 MHz, CD3OD) δ 9.00 (m, IH) , 8.84 (m, IH) ,
8.23 (d, 2H), 8.10 (m, IH) , 5.09 (m, IH) , 4.7-4.6 (m, 2H) , 4.51 (m, 2H) , 4.14 (m, IH) , 3.97 (m, IH) , 2.86 (m, IH) , 2. 58 (m, IH), 1.22 (m, 2H), 0.11 (s, 9H)
(vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- (2(амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил)
Към разтвор на H-Aze-NH-CH2-(2-(амино (триметилсилилетилимино) метил)-5-пиридинил) х 2 НС1 (160 mg, 0.462 mmol;
виж етап (vi) по-горе), Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) OH (131 mg, 0.462 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) и РуВОР (2 63 mg, 0.505 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диизопропилетиламин (0.30 mL, 1.71 mmol). Сместа се разбърква цяла нощ, изсипва се в 100 ml вода и се екстрахира три пъти с
EtOAc. Обединените органични фази се измиват с воден разтвор на натриев бикарбонат и вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:МеОН (95:5), при което се получава 148 mg (52%) от желаното съединение.
(viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-NH-CH2-(2(метокси-амино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил)
Суспензия от Ph(З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН(OH)-С(0)-Aze-NHCH2-(2-(метоксиамино(триметилсилилетилимино)метил)-5пиридинил)(148 mg, 0.242 mmol; виж етап (vii) по-горе) и 0метилхидроксиламин (202 mg, 2.42 mmol) в 10 ml ацетонитрил се загрява при 7 0° С в продължение на 3 часа. Сместа се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира
148 два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровото вещество се подлага на бърза хроматография върху силикагел с EtOAc:MeOH (95:5), при което се получават 44 mg (28%) чисто вещество.
3Н NMR (500 MHz, CD Cl3) δ 8.55 (m, 1H), 8.05 (bt, 1H) ,
7.70 (m, 1H), 7.58 (s, 1H) , 7.56 (d, 1H) , 7.22 (m, 1H),
7.16 (m, 1H), 7.03 (m, 1H) , 6.50 (t, 1H) , 4.92 (s, 1H),
4.89 (m, 1H) , 4.55-4 .45 (m, 2H), 4 .38 (широк, 1H) / 4. 24.1
(ш, ЗН) , 4.00 (s, 3H) , 3 .73 (m, 1H), 2. 69 (m, 1H), 2.44 (m,
1Н), 0.97 (m, 2H), 0. 02 (s, 9H)
(ix) Ph(3-C1) (5- OCHF2) - (R) CH (oh: )C(0)-Aze-NH -CH2- ( (2-
метокси-амидино)-5-пиридинил)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-NH-CH2- (2(метоксиамино(триметилсилилетилимино)метил)-5-пиридинил)(44 mg, 0.069 mmol; виж етап (viii) по-горе) се разтваря в 2 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 1 час.
TFA се изпарява и остатъкът се разпределя между EtOAc и воден разтвор на натриев бикарбонат. Водната фаза се екстрахира с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 30 mg
(88% ). Чистота : > 95%.
XH NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8.44 (m, 1H) , 8.03 (bt, 1H) ,
7.91 (in, 1H) , 7. 60 (m, 1H) , 7.19 (m, 1H) , 7.13 (m, 1H) ,
7.00 (m, 1H) , 6.52 (t, 1H) , 5.65.45 > (широк, 2H), 4.90 (s,
1H) , 4.89 (m, 1H), 4.55-4.4 (m, 2H), 4.27 (широк, 1H), 4.12
(m, 1H), 3.92 (s, 3 H) , 2.68 (m, 1H) , 2.41 (m, 1H),
13C-NMR (100 MHz; CDCI3) : (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 173.0, 170.9,152.6
APCI-MS: (М + 1) = 498/500 m/z
Пример 3 6
149
Ph(З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH~CH2- ( (5амидино)-2-пиримидинил)
(i) 2-Амино-2-иминоетилкарбамат«АСОН
N-Вос-аминоацетонитрил (40.2
257.4 mmol) и Nацетилцистеин (42. 0 g, 257.4 mmol) се разтварят в метанол на часа се пропуска амоняк. Разтворителят се отстранява във вакуум. След йонообменна хроматография (Amberlite
IRA-400 (АсОН)) и рекристализация от ацетон, съединението от подзаглавието като бяло твърдо вещество.
4.41 (s, 2Н) , 2.91 (d, J= 5.0 Hz,
9Н)
(ii)____________1, З-бис (диметиламино) -2-цианотриметиниев перхлорат
Разтвор на 3-диметиламиноакрилонитрил (25.0 д, 260.0 mmol) в хлороформ (75 ml) се прибавя на капки към разтвор на (хлорометилен)диметиламониев хлорид (50.0 g, 390.1 mmol) в хлороформ (175 ml) при 0° С. Реакционната смес се бърка допълнително 2 часа при 0° С, след това се оставя да се затопли до стайна температура цяла нощ, след това впоследствие се загрява в продължение на 8 часа при варене под обратен хладник. Разтворителят се отстранява във вакуум. Остатъкът се прибавя към смес от натриев перхлорат (110 g, 0.898 mmol) във вода (150 ml) и етанол (300 ml).
150
Сместа се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 15 минути, след това се охлажда и се оставя да престои една нощ в хладилник. Утайката се събира и рекристализира от етанол, при което се получават 23.8 g (52%) от съединението от подзаглавието като безцветни игли. Т.т.: 140-141° С ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8. 24 (s, 2Н) , 3.59 (s, 6H), 3.51 (s, 6Η) (iii) Boc-NH-CH2-(5-циано)-2-пиримидин
Смес от трет-бутил-2-амино-2-иминоетилкарбамат*АСОН
(5.0 д, 23.8 mmol; виж етап (i) бис(диметил-амино)-2-цианотриметиниев
23.8 mmol; виж етап (ii) по-горе) по-горе) и 1, перхлорат
3(6.0 д, в пиридин (300 ml) се разбърква под азот при 70-75° С в продължение на 16 часа и след това се загрява при варене под обратен хладник в продължение на 6 часа. Сместа се охлажда до стайна температура и разтворителят се отстранява във вакуум. Остатъкът се екстрахира с гореща смес (1:1) ОТ етилацетат и хлороформ, филтрува се през тънък, слой от силикагел и се концентрира, при което се получава суровият продукт. След бърза хроматография върху силикагел и елуиране с хлороформ се получават 4.0 g (71%) от съединението от заглавието като безцветно масло, което се втвърдява при стоене.
Т.т.: 86-87° С
Rf= 0.77 (силициев диоксид, 3:2 етилацетат/хлороформ) ХН NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.25 (s, 2H) , 7.39 (bt, 1Η) ,
4.39 (d, J= 6Hz, 2H), 1.38 (s, 9H).
13C NMR (750 MHz, DMSO-d6) δ 170.4, 160.3, 155.8, 115.2,
106.9, 80.0, 46.3, 28.1
APCI-MS: (M + 1) = 235 m/z (iv) Boc-Aze-NH-CH2- ( (5-циано) -2-пиримидинил)
151
Boc-NH-CH2-(5-циано)-2-пиримидин (1.14 д, 4.87 mmol;
виж етап (iii) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен оставя да реагира в продължение на 1 час и се концентрира.
Остатъкът се разтваря в 20 ml
DMF и се охлажда в ледена баня. Диизопропилетиламин mL,
0.020 (1.08 g, 5.37 mmol) и HATU (2.80 g,
5. 38 mmol) се прибавят и реакционната смес се разбърква при стайна температура цяла нощ. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на
CH3CN:0.1M NH4OAC (40: 60). Ацетонитрилът се изпарява и водната фаза се екстрахира три пъти
EtOAc. Обединените органични фази се изсушават (MgSO4) се изпаряват.
Добив : 1.12 g (72%).
ХН NMR (400 MHz, CDC13) (d,
2Н) ,
4. 74 (m, 1Н), 3.95 (m, 1H),
3.84 (m, 1Н), 2.6-2.4 (ш, (v) Boc-Aze-NH-CH2- ( (5-амидино)-2-пиримидинил) х НОАс
Разтвор на Boc-Aze-NH-CH2- ( (5-циано) -2пиримидинил) (0.83 д, 2.6 mmol; виж етап (iv) по-горе), Nацетилцистеин (0.43 д, 2.6 mmol) и амониев ацетат (0.60 д, 7.8 mmol) в 10 ml метанол се загрява при 60° С под азот в продължение на 2 дни. Разтворителят се изпарява и суровото вещество се пречиства чрез препаративна RPLC при използване
на градиент на CH3CN:0.1M NH4OAc (5:95 до 100:0). Желаните
фракции се изсушават чрез замразяване, при което се
получава 1.0 g (93%) от желаното съединение.
4Н NMR (300 MHz, D20, сигнали, засенчени от HDO
сигнала) δ 9.17 (s, 2Н ), 4. 1-3.9- (т, 2Н), 2.60 (т, 1Н) ,
2.29 (m, 1Н), 1.93 (s, ЗН), 1.44 (s, 9Н) (vi) Boc-Aze-NH-CH2- [ (5- (амино (триметилсилилетил имино)-метил))-2 пиримидинил]
152
Към суспензия от Boc-Aze-NH-CH2-((5-амидино)-2пиримидинил) х НОАс (0.95 д, 2.41 mmol; виж етап (v) погоре) в 50 ml THF се прибавя разтвор на Теос-р-нитрофенил карбонат (0. 85 д, 3.0 mmol) и калиев карбонат (1.0 д, 7.2 mmol) в 10 ml вода. Сместа се бърка в продължение на 24 часа, концентрира се и се разпределя между вода и метиленхлорид. Органичната фаза се измива два пъти с наситен разтвор на воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел с хептан: EtOAc (1 : 1). Добив: 1.04 g (90%).
гН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 9.16 (s, 2Н) , 4.80 (d, 2Н) ,
4.73 (m, 1Н), 4.26 (m, 2H) , 4.0-3.8 (m, 2H) , 2.6-2.4 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (m, 2H) , 0.07 (s, 9H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- [ (5(амино(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил]
Boc-Aze-NH-CH2- [ (5- (амино (триметилсилилетилимино) метил))-2-пиримидинил] (0.209 g, 0.437 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 25 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) и се оставя да реагира в продължение на 15 мин. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разтваря в 4 ml DMF. Ph(3-Cl)(5OCHF2)-(R)CH(OH)С(0)OH (0.100 g, 0.396 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), PyBOP (0.231 g, 0.444 mmol) и диизопропилетиламин (0.208 g, 1.61 mmol) се прибавят и сместа се бърка в продължение на 80 мин. Реакционната смес се изсипва в 100 ml вода и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на CH3CN: 0.1М NH4OAc (1 : 1). Добив: 63 mg (26%).
ХН NMR (400 MHz, CDCI3, смес от ротамери) δ 9.3 (широк, 1Н) , 9.03 (s, 2Н, второстепенен ротамер), 9.00 (s, 2Н,
153 основен ротамер), 8.25 (m, 1Н, основен ротамер), 7.9 (широк, 1Н) , 7.80 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-6.9 (ш, ЗН), 6.50 (t, 1Н), 5.14 (s, 1Н, второстепенен ротамер),
5.08 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 4.94 (s, 1Н, основен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.7-4.4 (m, 2Н) ,
4.33.9 (т, ЗН) , 3.74 (m, 1Н, основен ротамер), 2.7-2.1 (ш,
2Н), 1.03 (m, 2Н), 0.01 (s, 9Н) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)~ (R)СН(OH)С(0)-Aze-NH-CH2- ( (5амидино)-2-пиримидинил) х TFA
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-NH-CH2- [ (5- (амино-
(триметилсилилетилимино)метил))-2-пиримидинил]
0.034 mmol; виж метиленхлорид и се охлажда (21 mg, прибавя това се от вода ХН и сместа се бърка в по-горе) се разтваря в в ледена баня. TFA (2 продължение на минути
0.5 ml и след концентрира. Продуктът се изсушава и ацетонитрил. Добив: 20 mg (100%).
NMR засенчени ротамер), от
1Н, чрез замразяване
Чистота: 100%.
(400 MHz, CD3OD, смес
HDO сигнала) δ 9.08 (s, основен ротамер), 6.85
5.30 (m, 1Н, второстепенен второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, (m, 1Н, основен ротамер),
4.34 (т, от ротамери сигнали, второстепенен ротамер) основен ротамер),
1Н, ротамер),
4.21
1Н,
4.73 (т,
1Н, ротамер), 4.15-3.95 (т, 2Н, ротамери), 2.73
1Н, ротамер),
2.57 (т,
1Н, ротамер), 2.45-2.25 (т,
2Н, ротамери) 13C-NMR
MHz; CD3OD) :
(карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 173.0, 172.6,
172.1, 171.0, 163.4.
APCI-MS: (М + 1) = 469/471 m/z
Пример 37
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH2-( (5 метоксиамидино)-2-пиримидинил)
154
(i) ________Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- [ (5 (метоксиамино-(триметилсилилетилимино)метил))-2пиримидинил]
Суспензия от Ph(З-Cl) (5-OCHF2)-(R)СН(OH)С(0)-Aze-NHСН2-[(5-(амино(триметилсилилетилимино)метил))-2пиримидинил] (40 mg, 0.065 mmol; виж Пример 36 (vii) погоре) и О-метилхидроксиламин (33 mg, 0.4 0 mmol) в 3 ml ацетонитрил се загрява при 70° С в продължение на 3 часа. Сместа се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 33 mg (79%) .
2Н NMR (400 MHz, CDCI3, смес от ротамери) δ 8.76 (s 2Н, основен ротамер), 8.70 (s, 2Н, ротамер), 8.18 (m, 1Н) , 7.62 (s, 1Н) , 7.4-6.9 (т, 4Н) , 6.50 (bt, 1Н) , 5.3-4.5 (т, 4Н) , 4.2-4.05 (т, ЗН) , 3.96 (s, ЗН) , 3.68 (т, 1Н) , 2.8-2.2 (т,
2Н), 2.1 (широк, 1Н), 0.96 (т, 2Н), 0.01 (s, 9Н) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-NH~CH2-( (5метоксиамидино)-2-пиримидинил)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH2-[ (5(метоксиамино-(триметилсилилетилимино)метил))-2пиримидинил] (33 mg, 0.052 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 0.5 ml метиленхлорид и се охлажда в ледена баня. TFA (2 ml) се прибавя и сместа се бърка в продължение на 2 часа и след това концентрира. Продуктът се изсушава чрез
155 замръзване от вода и ацетонитрил.
Добив: 31 mg (81%) .
Чистота: 100%.
гН NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамер сигнали, (s,
2Н, ротамер),
2Н) ,
1Н, ротамер), 6.85 (t,
1Н, ротамер), 5.29 (т,
1Н, ротамер),
5.24 (s, 1H, ротамер),
5.20 (s, 1Н, ротамер),
4.75-4.55 (т,
2Н) ,
4.33 (m, 1H, ротамер), 4.19 (m, 1H, ротамер), 4.153.95 (m, 2Н, ротамери), 3.88 (s,
ЗН, ротамер), 3.86 (s, ЗН, ротамер), 2.72 (m, 1Н, ротамер)
2.45-2.25 (m, 2Н, ротамери) 13C-NMR (100 MHz; CD3OD) :
(карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 172. 8,
172.6, 172.1, 171.8,
167.8, 167.7,
155.1, 152.3, 152.1
APCI-MS: (М +
1) = 499/501 m/z
Пример 3 8
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) ~(R)CH (OH) С(0)-Aze-Pab (3-F)
(i) 2-Флуоро-4-винилбензонитрил
Разтвор на 4-бромо-2-флуоробензонитрил (4.92 g, 0.0246 mol), винилтрибутилкалай (0.78 g, 0.246 mol), и тетракистрифенилфосфин (0.67 g, 0.58 mmol) в 250 ml толуен се вари под обратен хладник под азот цяла нощ.
Разтворителят се изпарява и остатъкът се подлага на бърза хроматография върху силикагел с хептан:СН2С12 (1:1) до
156 чист СН2С12. Получава се безцветно масло, което кристализира. Добив: 3.0 g (82%).
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.56 (m, 1Н) , 7.3-7.2 (m,
2H), 6.69 (in, 1H) , 5.89 (d, 1H) , 5.51 (d, 1H) (ii) 2-Флуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
В охладен разтвор (-78° C) на 2-флуоро-4-винилбензонитрил (1.3 g, 8.8 mmol; виж етап (i) по-горе) в 4 0 ml CH2CI2 и 5 ml метанол се барбутира озон (50 L/h, 29 g/m3) в продължение на 30 мин. Впоследствие се барбутира аргон за да се отстрани излишният озон. Прибавя се натриев
борохидрид (0.67 д, 0.018 mol ) и охлаждащата ( баня се
отстранява. Сместа се разбърква и се оставя да реагира L В
продължение на 1 час. Сместа се изпарява и се прибавя 2М
НС1. Сместа се екстрахира два пъти с диетилов етер и
обединената етерна фракция се изсушава (Na2SO4) и се
изпарява. Суровият продукт кристализира Добив: 1.1 g
(81%) .
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7 .'59 (т, 1Н), 7.3- 7.2 (m,
2Н), 4.79 (d, 2Н), 2.26 (t, 1Н) (iii) 4-Циано-З-флуоробензилметансулфонат
2-Флуоро-4-хидроксиметилбензонитрил (1.3 д, 8.6 mmol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 50 ml СН2С12 и се охлажда в ледена баня.Прибавят се триетиламин (0.87 д, 8.6 mmol) и метансулфонилхлорид (0.99 д, 8.7 mmol). След разбъркване в продължение на 1.5 часа реакционната смес се измива с IM HCI. Органичната фаза се изсушава (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив на безцветно масло: 1.8 g (92%).
ХН NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.66 (m, 1Н) , 7.35-7.3 (m,
2H), 5.26 (s, 2H), 3.07 (s, 3H) (iv) 4-Азидометил-2-флуоробензонитрил
157
Към охладен с лед разтвор на 4-циано-З-флуоробензилметансулфонат (1.8 д, 7.9 mmol; виж етап (iii) по-горе) се прибавя натриев азид (0.80 д, 0.012 mol). Сместа се разбърква цяла нощ и след това се изсипва в 200 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединената етерна фаза се измива пет пъти с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровото безцветно масло може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.2 g (87%).
2Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.64 (m, 1Н) , 7.25-7.18 (m, 2Н),
4.47 (s, 2Н)
(у) 4-Аминометил-2-флуоробензбнитрил
Към
2.4 mmo1) тиофенол суспензия в 20 ml (1.07 д, mmol). След това флуоробензонитрил азидът е разтваря няколко реагирал
Органичната
Обединените от калаен (II) хлорид дихидрат ацетонитрил
9.7 mmol) и се прибавя при разбъркване се триетиламин (0.726 прибавя д, 7.17 разтвор на 4-азидометил-2(0.27 9 д, 1.58 mmol; виж етап (iv) помилилитра ацетонитрил. След 1.5 часа, и разтворителят се изпарява.
метиленхлорид и измива три фаза се екстрахира кисели водни фази се два измива пъти пъти
Остатъкът се с 2М NaOH.
с 1М НС1.
с метиленхлорид и след това се алкализира с 2М NaOH и се екстрахира три пъти с метиленхлорид. Органичната фаза изпарява, при което се получава
0.172 g подзаглавно съединение, което може да се използва без допълнително пречистване.
2Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ
1Н) , 7.3-7.2 (т,
2Н), 3.98 (s, 2Н), 1.55-1.35 (широк, 2Н) (vi) Boc-Aze-NHCH2-Ph(3-F, 4-CN)
Към охладен с лед разтвор на Boc-Aze-OH mmol) в 5 ml DMF се прибавя TBTU (0.50 д, 9.6 mmol) .
0.96
След минути друг разтвор, включващ 4-аминометил-2-флуоро158 бензонитрил (0.17 g, 0.81 mmol; виж етап (ν) по-горе) и се прибавя диизопропилетиламин (0.32 6 д, 2.53 mmol) в 7 ml DMF. Полученият разтвор се разбърква цяла нощ при стайна температура. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC при използване на CH3CN: 0. IM NH4OAc (50:50). При сушене чрез замразяване се получават 0.237 g (74%) от желаното подзаглавното съединение.
ХН NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.70 (m, 1Н) , 7.35-7.25 (m,
2H) , 4.65-4.35 (m, ЗН) , 4.0-3.85 (m, 2Η) , 2.51 (m, 1H) ,
2.19 (m, 1H), 1.40 (s, 9H) (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NHCH2~Ph (3-F, 4-CN)
Boc-Aze-NHCH2-Ph(3-F, 4-CN)(0.118 g, 0.354 mmol; от етап (vi) по-горе) се разтваря в 30 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) . Реакционната смес се бърка в продължение на 20 минути и се изпаряват. Полученият дихидрохлорид и HATU (0.152 g, 0.400 mmol) се разтварят в 5 ml DMF. Този разтвор се прибавя към охладен с лед разтвор на Ph (З-Cl) (5OCHF2) (R)СН(OH)С(0)ОН (0.101 g, 0.400 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе) в 5 ml DMF. Реакционната смес се бърка цяла нощ при стайна температура. Разтворителят се изпарява и съединението се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN: 0. IM NH4OAc (50:50). При сушене чрез замразяване се получават 0.130 g (77%) от желаното подзаглавно съединение.
ХН NMR (500 MHz, CD3OD смес от ротамери) δ 7.7-7.6 (m,
1Н), 7. 357 . 1 (т, 5Н), 6. 88 (t, 1Н, ротамер), 6.86 (t, 1Н,
ротамер ), 5.25-5 • 1 (т, 1Н плюс второстепенен ротамер от
следващия протон) |, 4.80 (т, 1Н, основен ротамер), 4.6- 4.4
(т, 2Н; ) , 4.36 (m, 1Н, основен ротамер), 4.18 (m, 1H,
основен ротамер), 4.07 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен
159
ротамер), 2.53 (m, 1Н, основен ротамер), 2.29 (m, 1Н, основен ротамер), 2.16 (m, 1Н, второстепенен ротамер) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (3-F)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NHCH2-Ph(3-F, 4CN) (0.130 g, 0.278 mmol; виж етап (vii) по-горе) се разтваря в 80 ml етанол, наситен с НС1 (газ) . Сместа се оставя да реагира при стайна температура цяла нощ. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разтваря повторно в 100 ml етанол, наситен с NH3 (газ) . Реакцията се оставя да протече бавно при стайна температура в продължение на два дни. Температурата се повишава до 50° С и взаимодействието продължава още 3 дни. Изходното вещество се изразходва и разтворителят се изпарява.
Продуктът се пречиства чрез препаративна RPLC и се изсушават при замръзване, при което се получават 17 mg (13%) от съединението от заглавието като НОАс сол.
2Н NMR (600 MHz, CD3OD смес от ротамери) δ 7.65-7.6 (m,
1H) , 7.47.3 (щ, ЗН), 7 .25-7.1 (т, 2Н) , 7.15-6.7 (m, 1Н) ,
5.25-5.1 (m, 1Н плюс второстепенен ротамер от следващия
протон), 4.8 (m, 1Н, основен ротамер частично скрит от
CD3OH), 4.6- -3.95 (m, 4Н) , 2 .69 (m, 1Н, второстепенен
ротамер), 2. 56 (m, 1H , основен ротамер), 2.28 (m, 1Н,
основен ротамер), 2.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.90
(s, ЗН)
13C-NMR (100 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови
въглероди, смес от ротамери) δ 180.6, 173.4, 173.1, 172.9,
164.5, 162.3, 159.8
APCI-MS: (Μ + 1) = 485/487 m/z
Пример 3 9
Ph(З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab(2, б-диН
160
(i)______2,6-дифлуоро-4[(метилсулфинил) (метилтио)метил] бензонитрил (Метилсулфинил)(метилтио)метан (7.26g, 0.0584 mol) се разтваря в 100 ml сух THF под аргон и се охлажда до -78° С. На капки при разбъркване се прибавя бутиллитий в хексан (16 ml 1.6М, 0.0256 mol). Сместа се бърка в продължение на 15 мин. Междувременно, разтвор на 3,4,-5-трифлуоробензонитрил (4.0 g, 0.025 mmol) в 100 ml сух THF се охлажда до -78° С под аргон и първият разтвор се прибавя през канила към последния разтвор в продължение на 35 мин. След 30 минути, охлаждащата баня се отстранява и когато реакционната смес достигне стайна температура се изсипва в 400 ml вода. THF се изпарява и останалата водна фаза се екстрахира три пъти с диетилов изсушава се гН NMR етер. Обединената етер фаза се измива с вода, се изпарява. Добив: 2.0 g (30%).
CDC13) δ 7.4-7.25 (m, 2Н) , 5.01 (s,
1Н, диастереоизомер) ,
2.49 (s,
ЗН, диастереоизомер),
2.34
ЗН, диастереоизомер), 1.72 (широк, 1Н) (ii) 2,6-дифлуоро-4-формилбензонитрил
2,6-Дифлуоро-4[(метилсулфинил)(метилтио)метил] бензонитрил (2.17 д, 8.32 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 90 ml THF и се прибавя 3.5 ml концентрирана сярна киселина. Сместа се оставя при стайна температура в i
161 продължение на 3 дни и впоследствие се изсипва в 450 ml вода. Екстрахира се три пъти с EtOAc и обединената етерна фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев бикарбонат и със солев разтвор, изсушава се (Na2SO4) и се изпаряват. Добив: 1.36 g (98%). Позицията на формиловата група се установява с 13С NMR. Сигналът на флуорираните
въглероди при 162.7 ppm показва очакваната схема на
купелуване с две свързващи константи при 2 60 Hz и 6.3 Hz
респективно , съответстващи на ипсо и мета връзка на
флуорните атоми.
A NMR (400 MHz, CDCI3) δ 10 .35 (s, 1Н) , 7.33 (т, 2Н)
(iii) 2,6-Дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
2,6-Дифлуоро-4-формилбензонитрил (1.36 д, 8.13 mmol; виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 25 ml метанол и се охлажда на ледена баня. Натриев борохидрид (0.307 д, 8.12 mmol) се прибавя на порции при разбъркване и реакционната смес се оставя в продължение на 65 мин. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между диетилов етер и воден разтвор на натриев бикарбонат. Етерната фаза се измива с допълнително воден разтвор на натриев бикарбонат и солев разтвор, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт кристализира бързо и може да се използва без допълнително пречистване. Добив : 1.24 g (90%).
3Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.24 (m, 2Н) , 4.81 (s, 2Н) ,
2.10 (широк, 1Н) (iv) 4-Циано-2,6-дифлуоробензилметансулфонат
Към охладен с лед разтвор на 2,6-дифлуоро-4хидроксиметилбензонитрил (1.24 д, 7.32 mmol; виж етап (iii) по-горе) и метансулфонилхлорид (0.93 д, 8.1 mmol) в 60 ml метиленхлорид се прибавя триетиламин (0.81 д, 8.1 mmol) при разбъркване. След 3 часа при 0° С, сместа се измива два пъти с IM НС1 и веднъж с вода, изсушава се (Na2SO4) и се
162 изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.61 g (89%).
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.29 (m, 2Н) , 5.33 (s, 2H) , 3.07 (s, ЗН) (v) 4-Азидометил-2,6-дифлуоробензонитрил
Смес от 4-циано-2,6-дифлуоробензилметансулфонат (1.61 д, 6.51 mmol; виж етап (iv) по-горе) и натриев азид (0.72 д, 0.0111 mol) в 10 ml вода и 20 ml DMF се разбърква при стайна температура цяла нощ. Получената смес впоследствие се изсипва в 200 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов с вода, етер. Обединените етерни фази се измиват пет пъти изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. За целите на
NMR се изпарява малка проба и веществото кристализира.
Остатъкът се изпарява внимателно но не до пълно изсъхване.
Добив (теоретичен 1.26 д) се счита приблизително за количествен на база на NMR и аналитична HPLC.
ХН NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.29 (m, 2Н) , 4.46 (s, 2H) (vi) 4-Аминометил-2,6-дифлуоробензонитрил
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в J.Chem. Res. (Μ)
Към суспензия от 520 ml вода се прибавя разтвор на натриев борохидрид (0.834 д, 0.0221
Наблюдава се известно газоотделяне. 4-Азидометил-2,6дифлуоробензонитрил (1.26 д, 6.49 mmol; виж етап (ν) погоре) се разтваря в 50 ml THF и се добавя към водната смес в ледена баня за 15 мин. Сместа се бърка в продължение на 4 часа, след което се добавят 20 ml 2М НС1 и сместа се филтрува се през Celite. Целитният филтър се промива с още вода и обединената водна фаза се измива с EtOAc и впоследствие се прави алкална с 2М NaOH. Екстрахира се три пъти с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива
163
с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Добив: 0.87 g (80%) .
ХН NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.20 (m, 2Н) , 3.96 (s, 2Н) ,
1.51 (широк, 2Н) (vii)____2, 6-Дифлуоро-4-трет-бутоксикарбониламинометилбензонитрил
Разтвор на 4-аминометил-2,6-дифлуоробензонитрил (0.876 д, 5.21 mmol; виж етап (vi) по-горе) се разтваря в 50 ml THF и се прибавя ди-трет-бутил бикарбонат (1.14 д, 5. 22 mmol) в 10 ml THF. Сместа се бърка в продължение на 3.5 часа. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива три пъти с 0.5 М НС1 и вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив : 1.38 g (99%) .
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.21 (m, 2Н) , 4.95 (широк, 1Н) ,
4.43 (широк, 2Н), 1.52 (s, 9Н) (viii) Boc-Pab(2,6-диЕ)(ОН)
Смес от 2,6-дифлуоро-4-трет-бутоксикарбонил-амино-
метилбензонитрил (1.38 д, 5.16 mmol; виж етап (vii) погоре), хидроксиламин хидрохлорид (1.08 д, 0.0155 mol) и триетиламин (1.57 д, 0.0155 mol) в 20 ml етанол се разбърква при стайна температура в продължение на 36 часа. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид. Органичната фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 1.43 g (92%). ХН NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.14 (m, 2Н) , 4.97 (широк, 1Н) , 4.84 (широк, 2Н), 4.40 (широк, 2Н), 1.43 (s, 9Н) (ix) Boc-Pab(2,6-диЕ) х НОАс
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан от Judkins et al, Synth. Comm. (1998) 4351. Boc164
Pab(2,6-flnF) (OH) (1.32 g, 4.37 mmol; виж етап (viii) погоре), оцетен анхидрид (0.477 g, 4.68 mmol) и 442 mg от 10% Pd/C (50% влага) в 100 ml оцетна киселина се хидрира при 5 atm налягане в продължение на 3.5 часа. Сместа се филтрува се през Celite, промива се с етанол и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замразяване от ацетонитрил и
вода и няколко капки етанол. Подзаглавното съединение може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0. 1.49 g (99%) .
ХН NMR (400 MHz, CD3OD) b 7.45 (m, 2Н) , 4.34 (s, 2Н) , 1.90 (s, ЗН) , 1.40 (s, 9Н) (х) Вос-РаЬ(2,б-диИ)(Теос)
Към разтвор на Вос-РаЬ (2, 6-диД) х НОАс (1.56 д, 5.49 mmol; виж етап (1х) по-горе) в 100 ml THF и 1 ml вода се прибавя 2(триметилсилил)етил р-нитрофенил карбонат (1.67 д,
5.89 mmol). Разтвор на калиев карбонат (1.57 д, 0.0114 mol)
в 20 ml вода се прибавя на капки за 5 мин. Сместа се разбърква цяла нощ. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев бикарбонат, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. След бърза хроматография върху силикагел с хептан/EtOAc = 2/1 се получават 1.71 g (73%) чисто съединение.
4Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.43 (m, 2Н) , 4.97 (широк, 1Н) ,
4.41 (широк, 2Н) , 4.24 (m, 2Н) , 1.41 (s, 9Н) , 1. 11 (т,
2Н), 0.06 (s, 9Н) (xi) Boc-Aze-Pab(2,б-диИ)(Teoc)
Boc-Pab(2,6-flnF) (Teoc) (1.009 g, 2.35 mmol; виж етап (x) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ). Сместа се оставя в продължение на 10 мин., изпарява се и се разтваря в 18 ml DMF, и след това се охлажда на
165 ледена баня. Прибавят се Boc-Aze-OH (0.450 g, 2.24 mmol), РуВОР (1.24 д, 2.35 mmol) и накрая диизопропилетиламин (1.158 д, 8.96 mmol).
Реакционната смес се бърка в продължение на 2 часа и след това се изсипва в 350 ml водаи се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват със солев разтвор, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза
хроматография върху силикагел c хептан:EtOAc (1:3) c
получават 1. 097 g (96%) от желаното съединение.
гН NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7.46 (m, 2H) , 4.65-4.5 (m, 3H)
4.23 (m, 2Н) , 3.87 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 2.45-2.3 (m, 2H)
1.40 (s, 9Н) , 1.10 (m, 2H), 0.05 (s, 9H)
(xii) Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze· -Pab (2,6
диР (Теос)
Boc-Aze-Pab(2,6-диЕ) (Теос) (0.256 g, 0.500 mmol; виж етап (xi) по-горе) се разтваря в 20 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) . Сместа се оставя за 10 мин. и се изпарява и се разтваря в 5 ml DMF. Добавят се Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)CH(OH)C(O)OH (0.120 д, 0.475 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), РуВОР (0.263 д, 0.498 mmol) и накрая диизопропилетиламин (0.245 д, 1.89. Реакционната смес се бърка в продължение на 2 часа и след това се изсипва в 350 ml вода и се екстрахира органични фази се измиват (Na2SO4) и се изпаряват.
три пъти с EtOAc. Обединените със солев разтвор, изсушават се
След бърза хроматография върху силикагел с EtOAc се получават 0.184 g (60%) от желаното подзаглавно съединение.
ХН NMR (400 MHz, CD3OD, смес от ротамери) δ 7.55-7.45 (m, 2Н), 7.32 (m, 1Н, основен ротамер), 7.27 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-7.1 (m, 2Н), 6. 90 (t, 1H, основен ротамер), 6.86 (t, 1H, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1H, основен ротамер), 5.12 (m, 1H, второстепенен
166
ротамер), 5.06 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, основен ротамер), 4.6-4.45 (m, 2Н), 4. 30 (m, 1Н, основен ротамер), 4.24 (m, 2Н), 4.13 (m, 1Н, основен ротамер), 4.04 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.95 (in, 1Н, второстепенен ротамер), 2.62 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н, основен ротамер), 2. 22 (m, 1Н, основен ротамер), 2.10 (m,
1Н, второстепенен ротамер), 1.07 (m, 2Н), 0.07 (m, 9Н) (xiii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2,6диИ)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (2,6flnF) (Teoc) (81 mg, 0.127 mmol; виж етап (xii) по-горе) се разтваря в 0.5 ml метиленхлорид и се охлажда на ледена баня. TFA (3 ml) се прибавя и реакционната смес се оставя за 75 мин. The TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замръзване от вода и ацетонитрил. Суровият продукт се пречиства чрез препаративна RPLC с CH3CN: 0. IM NH4OAc (35: 65) при което се получават 39 mg (55%) от съединението от заглавието под формата на НОАс сол, Чистота: 99%.
ХН NMR (400 MHz, CD3OD смес от ротамери) δ 7.5-7.4 (m,
2Н) , 7.32 (m, 1Н, основен ротамер), 7.28 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 7.2-7.1 (m, ЗН) 6.90 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, второстепенен ротамер), 5.15 (s, 1Н, основен ротамер), 5.14 (m, 1Н, второстепенен ротамер),
5.07 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.72 (m, 1Н, основен ротамер), 4.65-4.45 (m, 2Н), 4.30 (т, 1Н, основен ротамер), 4.16 (т, 1Н, основен ротамер), 4.03 (т, 1Н, второстепенен ротамер), 3.95 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.63 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.48 (m, 1Н, основен ротамер), 2.21 (m, 1Н, основен ротамер), 2.07 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 1.89 (s, ЗН) 13C-NMR (75 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери) δ 171. 9,
171.2, 165.0, 162.8, 160.4
167
APCI-MS: (Μ + 1) = 503/505 m/z.
Пример 4 0
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2, 6-диР (OMe)
(i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2, 6- ahF)(OMe,Teoc)
Смес от Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (2, 6диБ) (Teoc) (64 mg, 0.099 mmol; виж Пример 39 (xii) по-горе) и 0-метил хидроксиламин хидрохлорид (50 mg, 0.60 mmol) в 4 ml ацетонитрил се загрява при 70° С в продължение на 3 часа. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира два пъти с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 58 mg (87%).
ХН NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.90 (bt, 1Н) , 7.46 (m, 1H) , 7.25-6.95 (m, SH) , 6.51, t, 1H) , 4.88 (s, 1H) , 4.83 (m, 1H) , 4.6-4.5 (m, 2H) , 4.4-3.9 (m, 4H) , 3.95 (s, 3H) , 3.63 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 1.87 (широк, 1H), 0.98 (m, 2H), 0.01, s, 9H) (ii) ________Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2, 6- диБ)(OMe)
Ph(З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab (2,6-flnF) (OMe, Teoc) (58 mg, 0.086 mmol; виж етап (i) по-горе) се
168
разтваря в 3 ml TFA, охлажда се на ледена баня и се оставя да реагира в продължение на 2 часа. TFA се изпарява и остатъкът се разтваря в EtOAc. Органичната фаза се измива два пъти с воден разтвор на натриев карбонат и вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 42 mg (92%) от съединението от заглавието. Чистота: 94%.
4Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.95 (bt, 1Н) , 7.2-7.1 (m,
4H) , 6.99 (m, 1H), 6. 52 (t, 1H) , 4.88 (s, 1H) , 4.85-4.75 (m, 3H), 4.6-4.45 (m, 2H), 4.29 (широк, 1H), 4.09 (m, 1H) , 3.89 (s, 3H), 3.69 (m, 1H) , 2.64 (m, 1H) , 2.38 (m, 1H) , 1.85 (широк, 1H) 13C-NMR (100 MHz; CDC13) : (карбонил и/или амидинови въглероди) δ 172.1, 169.8, 151.9
APCI-MS: (Μ + 1) - 533/535 m/z
Пример 41
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (2,5-flnF)
(i)______2, 5-Дифлуоро-4 [ (метилсулфинил) (метилтио)метил] бензонитрил (Метилсулфинил)(метилтио)метан (3.16 g, 0.0255 mol) се разтваря в 50 ml сух THF под аргон и след това се охлажда до -78° С. При разбъркване се добавя на капки бутиллитий в хексан (16 ml 1.6М, 0.0256 mol). Сместа се бърка в продължение на 15 мин. Междувременно разтворът на 2,4,5
169 трифлуоробензонитрил (2.0 g; 0.013-mol) в 50 ml сух THF се охлажда до -78° С под аргон и първият разтвор се прибавя за 3-5 мин. през канюла към последния разтвор. След 30 минути, охлаждащата баня се отстранява и когато реакционната смес достигне стайна температура тя се изсипва в 200 ml вода.
THF се изпарява и останалата водна фаза се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединените етерни фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Суровият продукт започва да кристализира и може да се използва като такъв в следващия етап. Добив:
2.8 g
CDC13) δ 7.51-7.44 (m, 2Н, основен диастереоизомер),
7.39 (dd,
1Н, второстепенен диастереоизомер), 5. 00 (s,
1Н, второстепенен (s, 1 Н, основен диастереоизомер), степенен
2.56 (s,
1Н, основен
1Н, второстепенен диастереоизомер), 2.40 (s, 1Н, основен диастереоизомер) (ii) 2,5-Дифлуоро-4-формилбензонитрил
2,5-Дифлуоро-4[(метилсулфинил)(метилтио)метил]бензо нитрил (2.8 д, разтваря в 100 сярна киселина.
на
0.0107 mol; виж етап (i) по-горе) се ml THF и се прибавят 6.5 g концентрирана Сместа се оставя при стайна температура в 6 дни и впоследствие се изсипва в 500 ml вода. Екстрахира се три пъти с диетилов етер и обединената етерна фаза се измива няколко пъти с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт се подлага на бърза хроматография върху силикагел при използване на хептан:
EtOAc (8: 2). Добив: 1.2 д (67%). Позицията на формиловата група се установява чрез използване на 13С NMR. Сигналите на въглерода от флуорираните въглероди при 160.1 и 158.4 респективно, са дублети а не квартети, каквито щяха да бъдат ако формиловата група би била във 2-ра позиция.
170 гН NMR (300 MHz, CDC13) δ 10.36 (d, 1H) , 7.72 (dd, 1H), 7.54 (dd, 1H) (iii) 2,5-Дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил
2,5-Дифлуоро-4-формилбензонитрил (3.60 g, 0.0215 mol;
виж етап (ii) по-горе) се разтваря в 50 ml метанол и се охлажда на ледена баня. Натриев борохидрид (0.815 д, 0.0215
прибавя на порции при разбъркване и реакционната оставя в продължение на 45 мин. Прибавя се вода и след това внимателно се прибавя 2М НС1 докато се кисело pH. Сместа се екстрахира три пъти с етер и обединената етерна фаза се измива с вода, (Na2SO4) и се изпарява. Суровият продукт бързо и може да mol) се смес се (300 ml) постигне диетилов изсушава се кристализира пречистване.
Добив: 3.1 g (85%).
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.45 (s, 2Н), 2.10 (широк, 1Н) се използва без допълнително (dd, 1Н), 7.30 (dd, 1Н) , 4.85 (iv) 4-Циано-2,5-дифлуоробензилметансулфонат
Към охладен с лед разтвор на 2,5-дифлуоро-4-хидроксиметилбензонитрил (3.10 g, 0.0183 mol; виж етап (iii) по-
горе) и метансулфонилхлорид (2.21 g, 0.0192 mol) в 60 ml метиленхлорид се прибавя триетиламин (1.95 g, 0.0192 mol) при разбъркване. След 1.5 часа при 0° С сместа се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 4.5 g (99%).
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.45-7.35 (m, 2Н) , 5.32 (s, 2Н) ,
3.13 (s, ЗН) (у) 4-Азидометил-2,5-дифлуоробензонитрил
Смес от 4-циано-2, 5-дифлуоробензилметансулфонат (4.5 g, 0.0182 mol; виж етап (iv) по-горе) и натриев азид (2.0 g, 0.031 mol) в 20 ml вода и 40 ml DMF се разбърква при
171 стайна температура в продължение на 2 часа. Впоследствие се изсипва в 300 ml вода и се екстрахира три пъти с диетилов етер. Обединените етерни фази се измиват няколко пъти с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Малка проба се изпарява за целите на NMR и веществото кристализира. Остатъкът се изпарява внимателно, но не до пълно изсъхване. Добив (теоретичен 3.5 д) отговаря приблизително на количествения на база на NMR и аналитична HPLC.
ХН NMR (500 MHz, CDC13) δ 38 (dd, 1Н) , 7.32 (dd, 1H) , 4.54 (s, 2H)
(vi) 4-Аминометил-2,5-дифлуоробензонитрил
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан в J.Chem. Res. (Μ) (1992) 3128. Към суспензия от 300 mg 10% Pd/C (50% влага) в 20 ml вода се прибавя разтвор на натриев борохидрид (0.779 g, 0.0206 mol) в 20 ml вода.
Наблюдава се слабо отделяне на газ. 4-Азидометил-2, 5дифлуоробензонитрил (1.00 д, 5. 15 mmol; от етап (v) погоре) се разтваря в 60 ml THF и добавя към водна сме на ледена баня. Сместа се бърка в продължение на 1.5 часа след ml 2М НС1 и сместа което се прибавят филтрува през се
Celite. Филтърът Celite се изплаква с повече вода и
обединената водна фаза се измива с EtOAc и впоследствие се
алкализира с 2М NaOH. Екстрахира се три пъти с
метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с
вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпаряват.
Добив: 0.47 g (54%) .
ХН NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7. 39 (dd, 1Н) , 7.29 (dd, 1Н)
3.99 (s, 2H), 1.45 (широк, 2H) (vii) 2,5-Дифлуоро-4-трет--бутоксикарбониламинометилбензонитрил
Разтвор на 4-аминометил-2,5-дифлуоробензонитрил (0.46 д, 2.7 mmol; виж етап (vi) по-горе) и ди-трет-бутил
172
бикарбонат (0.60 g, 2.7 mmol) в 10 ml THF се разбърква цяла нощ. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Органичната фаза се измива с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.71 g (97%).
:Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 7.35-7.2 (m, 2Н) , 5.11 (широк triplet, 1Н), 4.38 (d, 2H), 1.45 (s, 9H) (viii) Boc-Pab(2,5-flnF)(OH)
Смес от 2,5-дифлуоро-4-трет—бутоксикарбониламинометилбензонитрил (0.70 g, 2.6 mmol; виж етап (vii) по-горе), хидроксиламин хидрохлорид (0.54 д, 7.8 mmol) и триетиламин (0.79 д, 7.8 mmol) в 10 ml етанол се разбърква при стайна температура в продължение на 6 дни. След това се разпределя между вода и метиленхлорид. Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване. Добив: 0.72 g (92%) .
2Н NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.27 (dd, 1Н) , 7.12 (dd, 1H) , 4.29 (s, 2H), 1.47 (s, 9H) (ix) Boc-Pab(2,5-flnF) x HOAc
Това взаимодействие се провежда съгласно метода, описан от Judkins et al, Synth. Comm. (1998) 4351. BocPab(2,5-flnF) (OH) (0.70 g, 2.3 mmol; виж етап (viii) погоре), оцетен анхидрид (0.25 g, 2.4 mmol) и 230 mg 10% Pd/C (50% влага) в 70 ml оцетна киселина се хидрира при 5 atm налягане в продължение на 2.5 часа. Сместа се филтрува през Celite и се изпарява. Остатъкът се изсушава чрез замръзване от ацетонитрил и вода. Продуктът може да се използва без допълнително пречистване в следващия етап. Добив: 0.80 g (100%) .
173
XH NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.49 (dd, 1H) , 7.31 (dd, 1H) , 4.33 (s, 2H), 1.91 (s, 3H), 1.46 (s, 9H) (x) Boc-Pab(2,5-flnF)(Teoc)
Към суспензия от Boc-Pab(2,5-flnF) x HOAc (0.80 g, 2.3 mmol; виж етап (ix) по-горе) в 50 ml THF се прибавя 2(триметилсилил)етил р-нитрофенил карбонат (0.85 д, 3.0 mmol). Разтвор на калиев карбонат (0.80 д, 5.8 mmol) в 10 ml вода се прибавя на капки. Сместа се разбърква цяла нощ. Излишъкът от Теос се неутрализира чрез добавяне на глицин (0.100 д) и калиев карбонат (0.75 д) към разтвора, като се оставя да реагира допълнително още 2 часа. THF се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и метиленхлорид.
Водната фаза се екстрахира с метиленхлорид и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се (Na2SO4) и се изпарява.
След бърза хроматография върху хептан:EtOAc (2:1) се получават 0.72 g силикагел с (72%) чисто съединение.
ХН NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.00 (dd, 1Н) , 7.15 (dd, 1H) , 4.98 (широк, 1H) , 4.36 (bd, 2H) , 4.24 (m, 2Η) , 1.45 (s, 9H), 1.12 (m, 2Η) , 0.07 (s, 9Н) (xi) H-Pab(2,5-диЕ)(Teoc) x 2 HC1
Boc-Pab(2,5-flnF) (Teoc) (0.38 g, 0.88 mmol; виж етап (x) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1 (газ) .
Сместа се оставя в продължение на 30 минути и се изпарява.
ХН NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.75-7.6 (m, 2Н) , 4.46 (m, 2H) ,
4.3 (s, 2Η) , 1.15 (m, 2Н), 0.07 (s, 9H) (xii) Boc-Aze-Pab(2,5-flnF)(Teoc)
При разбъркване към разтвор на Boc-Aze-OH (0.189 g, 0.94 mmol), H-Pab(2,5diF)(Teoc) x 2 HC1 (0.36 g, 0.89 mmol; виж етап (xi) по-горе) и PyBOP (0.54 g, 1.03 mmol) в 5 ml DMF се прибавя диизопропилетиламин (0.49 g, 3.8 mmol) и сместа се оставя да реагира цяла нощ. Полученото, след това
174
се изсипва във воден разтвор на натриев бикарбонат и се екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се измиват с вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с хептан:EtOAc (3: 7) се получава достатъчно чисто съединение. Добив: 0.25 g (48%) .
2Н NMR (500 MHz, CDC13) δ 7.98 (dd, 1Н), 7.13 (dd, 1H), 4.69 (m, 1H), 4.53 (m, 2H), 4.22 (m, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.79 (m, 1H) , 2.55-2.35 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H), 1.11 (m, 2H) , 0.06 (s, 9H) (xiii) Н-Aze-Pab(2,5-flnF)(Teoc) x 2 HC1
Boc-Aze-Pab(2,5-flnF) (Teoc) (0.25 g, 0.49 mmol; виж етап
(xii) по-горе) се разтваря в 50 ml EtOAc, наситен с НС1
(газ). Сместа се оставя за 30 мин. и се изпарява. Продуктът
се използва в следващия етап без допълнително пречистване.
Добив: 0.23 g (97%) .
rH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (dd, 1Н), 7.47 (dd, 1Н), 05.
14 (т, 1Н), 4. ,54 (m, 2Н), 4.48 (т, 2Н), 4.15 (m, 1Н), 3.96
(т, 1Н ), 2. 87 (т, 1Н), 2.56 (т, 1Н) , 1.17 (ш, 2Н), 0.05 (s,
9Н)
(xiv) . Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (2,5flnF) (Teoc)
Към разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.12 g, 0.47 mmol; виж Пример 1 (viii) по-горе), Н-Aze-Pab(2,5-
диЕ) (Теос) х 2 НС1 1 (0.23 д, 0.47 mmol; виж етап (xiii) по-
горе) и РуВОР (0.27 д, 0.52 mmol) в 10 ml DMF се прибавя
диизопропилетиламин (0.245 д, 1.90 mmo1) и сместа се
разбърква цяла нощ. Полученото се изсипва във вода и се
екстрахира три пъти с EtOAc. Обединените органични фази се
измиват c вода, изсушават се (Na2SO4) и се изпаряват. След бърза хроматография върху силикагел с EtOAc се получават
175
100 mg чиста фракция и 30 mg фракция с 90% чистота. Общ добив : 0. 13 g (41%) .
XH NMR (400 MHz, CDCI3) δ 9.80 (широк, IH), 8.05 (bt,
IH), 7.94 (dd, IH), 7. 20 (m, IH), 7.2-7.1 (m, 2H), 7.02 (m,
IH), 6.54 (t, IH), 4 . 93 (s, IH), 4.91 (m, IH) , 4.51 (m,
2H) , 4.28 (широк, IH), 4 . 23 (m, 2H), 4.13 (m, IH) ,
3.74 (m, IH), 2. 69 (m, IH) , 2.43 (m, IH) , 1.73 (широк,
IH) , 1.11 (m, 2H), 1. 11 (s, 9H)
(ху) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0)-Aze-Pab (2, 5-flnF)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2,5-flMF)-
(Teoc)(60 mg (0.093 mmol) от чистата фракция от етап (xiv) по-горе) се разтваря в 3 ml TFA и оставя при стайна температура в продължение на 1 час. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава чрез замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 55 mg (96%) от съединението от заглавието като негова трифлуороацетатна сол, Чистота : > 99%.
ХН NMR (500 MHz, CD3OD смес от ротамери) δ 7.55-7.3 (m, ЗН) , 7.2 7.1 (m, 2Н) , 6.88 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.22 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.20 (s, 1Н, основен ротамер), 5.13 (s, IH, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1Н, основен ротамер), 4.64.45 (m, 2Н) , 4.36 (m, 1Н, основен ротамер), 4.19 (m, IH, основен ротамер), 4.07 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 3.98 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.70 (m, 1Н, второстепенен ротамер), 2.54 (m, 1Н, основен ротамер), 2.28 (m, IH, основен ротамер), 2. 14 (m, 1Н, второстепенен ротамер) 13C-NMR (75 MHz; CD3OD) : (карбонил и/или амидинови въглероди, смес от ротамери)δ 173.0,172.6,172.1,172.0,162.4 APCI-MS: (М + 1) = 503/505 m/z.
Пример 42
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (2,5-диИ) (OMe)
176
(i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-AzePab (2, 5-flnF)(OMe,Teoc)
Смес от Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (2,5flnF) (Teoc) (40 mg, 0.062 mmol; виж Пример 41 (xiv) по-горе) и 0-метил хидроксиламин хидрохлорид (58 mg, 0.70 mmol) в 5 ml ацетонитрил се загрява при 70° С в продължение на 2 часа. Разтворителят се изпарява и остатъкът се разпределя между вода и EtOAc. Водната фаза се екстрахира с EtOAc и обединената органична фаза се измива с вода, изсушава се
(Na2SO4) и се изпарява. Продуктът може да се използва без
допълнително пречистване. Добив: 35 mg ( 84%) .
гН NMR (600 MHz, CDCI3) δ 7.99 (bt, 1H) , 7.72 (s, 1H) ,
7.20 (m, 1Н) 7.15-7.1 (m, 1Н), 7.07 (dd, 1H) , 7.01 (m, 1H),
6.53 (t, 1Н) , 4.90 (s, 1H), 4.88 m, 1H), 4.48 (m, 2H) , 4.2-
4.1 (m, ЗН) , 3. 95 (s, 3H) , 3.67 (m, 1H) , 2.68 (m, 1H) ,
2.41 (m, 1Н) , 0.97 (m, 2H), 0.07 (s, 9H)
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze -Pab ( 2,5-
диЕ) (ОМе)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) СН (OH) С (0) -Aze-Pab (2,5-flnF) (OMe,Teoc) (35 mg, 0.052 mmol; виж етап (i) по-горе) се разтваря в 3 ml TFA и се оставя да реагира в продължение на 30 мин. TFA се изпарява и остатъкът се изсушава при замразяване от вода и ацетонитрил, при което се получават 29 mg (99%) от съединението от заглавието. Чистота: 97%.
2Н NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.01 (bt, 1Н) , 7.45 (dd, 1H) , 7.20 (m, 1H) , 7.15 (m, 1H) , 7.09 (dd, 1H) , 7.02 (m, 1H) ,
177
6.54 (t, 1H) , 5.2-5.0 (m, 2H) , 4.95-4.85 (m, 2H) , 4.6-4.4
(m, 2H) , 4.25 (широк, 1H) , 4. 13 (m, 1H) , 3.90 (s, 3H),
3.71 (m, 1H) , 2.69 (m, 1H), 2.43 (m, 1H)
13C-NMR (75 MHz; CDC13) : (карбонил и/или амидинови
въглероди) δ 173.0, 170.9,152.6
APCI-MS: (Μ + 1) = 533/535 m/z.
Пример 4 3
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OEt) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(O)-Aze-Pab (OEt, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab (Teoc) (55 mg,
0.090 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) и О-етилхидроксиламин хидрохлорид (53 mg, 0.54 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60° С в продължение на 5 часа. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуира се с метиленхлорид-.метанол (95:5), при което се получават 55 mg (93%) от съединението от подзаглавието.
XH-NMR (400 MHz; CDC13) : δ 7.84 (bt, 1H), 7.59 (bs,
1H) , 7.47 (bd, 1H), 7.29 (bd, 1H) , 7.21 (m, 1H), 7.14 (m,
1H) , 7.02 (m, 1H) , 6.53 (t, 1H), 4.90 (s, 1H) , 4.86 (m,
1H) , 4.55-4.4 (m, 2H) , 4.25-4.1 (m, SH), 3.69 (m, 1H) ,
2.66 (m, 1H) , 2.41 (m, 1H) , 1.33 (t, 3H) , 0.98 (m, 2H) ,
0.02 (s, 9H)
(ii) Ph(3-Cl,5- -OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze- Pab(OEt)
Към леденостуден разтвор на Ph (З-Cl) (5-OCHF2) (R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab(OEt,Teoc) . (55 mg, 0.084 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 160 минути. Съединението се пречиства, като се използва препаративна HPLC.
178
Желаните фракции се обединяват и се изсушават при замръзване (2х) , при което се получават 20 mg (47%) от съединението от заглавието.
1H-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7.59
7.35
1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер),
5.18 (s, 1Н, основен ротамер), 5.18 второстепенен ротамер)
5.11 (s,lH, второстепенен ротамер),
4.77 (т,
4.5-4.3 (m, ЗН), 4.2-3.9
ЗН), 2.67 (т,
1Н, второстепенен ротамер), 2.52 основен ротамер),
2.28
основен ротамер),
2.15.
ротамер) 13C-NMR (100 MHz;CD3OD) :
(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 172.4,171.9,171.4,153.8,152.3
MS (m/z) 509 (М-l)', 511 (M + 1) +
Пример 44
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (OnPr) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C(O) -Aze-Pab (OnPr, Teoc)
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc) (53 mg, 0.087 mmol; виж Пример 1 (ix) ' по-горе) и O-n-пропилхидроксиламин хидрохлорид, 58 mg (0.52 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60° С в продължение на 5 часа. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуиране се с метиленхлорид:метанол (95:5), при което се получават 51 mg (88%) от съединението от подзаглавието.
^-NMR (400 MHz; CDC13) : δ 7.84 (m, 1H) , 7.59 (bs, 1H) , 7.47 (bd, 2H) , 7.28 (bd, 2H) , 7.21 (m, 1H) , 7.14 (m, 1H) , 7.02 (m, 1H), 6.53 (t, 1H) , 4.90 (s, 1H) , 4.85 (m, 1H) , 4.55-4.4 (m, 2H) , 4.2-4.05 (m, 5H)', 3.69 (m, 1H) , 2.65 (m,
179
1Н) , 2.41 (m, 1H) , 1.74 (m, 2H), . 1.05-0.95 (m, SH) , 0.03 (s, 9H) (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OnPr)
Към леденостуден разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OnPr,Teoc)(51 mg, 0.078 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 110 минути. Веществото се пречиства, като се използва препаративна HPLC. Желаните фракции се изпаряват и изсушават при замръзване, при което се получават 20 mg (47%) от съединението от заглавието.
XH-NMR (500 MHz; CD3OD) ротамери : δ 7.61 (bd, 2H) , 7.38 (m, 1H), 7.35 (bd, 2H), 7.22 (m, 1H, основен ротамер), 7.18 (m, 1H), 7.15 (m, 1H, второстепенен ротамер), 6.92 (t, 1H, основен ротамер), 6.89 (t, 1H, второстепенен ротамер),
5.20 (s, 1H, основен ротамер), 5.20 (m, 1H, второстепенен ротамер), 4.80 (m, 1H, основен ротамер), 4.5-4.4 (m, 2H, включващ второстепенен ротамер, съответстващ на основен при
4.37) ,
4.37 (щ, ротамер),
4.09
2Н) , 2.70 (т,
1Н, основен ротамер), 4.18 т, 1Н, основен (m, 1Н, второстепенен ротамер),
1Н, второстепенен ротамер), 2.54
3.99 (т, (m, 1Н, основен ротамер), 2.30 (m, 1Н, основен ротамер), 2.18 (т,
1Н, второстепенен ротамер), 1. 73 (m, 2Н), 1.01 (t, ЗН) 13C-NMR (125 MHz; CD3OD) :
(карбонил и/или амидинови въглероди, ротамери) δ 171.4, 153.8, 152.3
MS (m/z) 523 (М-l)’, 525 (Μ + 1)+
Пример 4 5
Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (Ο)-Aze-Pab (OiPr) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OiPr, Teoc)
Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (Teoc) (50 mg,
0.082 mmol; виж Пример 1 (ix) по-горе) и 0-изо-пропил180 хидроксиламин хидрохлорид, 55 mg (0.49 mmol) се разтварят в 4 ml THF. Сместа се разбърква при 60° С в продължение на 5 часа. Разтворителят се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел, елуира се с метиленхлорид: метанол (95:5), при което се получават 46 mg (84%) от съединението от подзаглавието.
ΧΗ-ΝΜ R (400 MHz; CDC13) : δ 7.84 (m, 1H) , 7.57 (bs, 1H)
7.48 (bd, 2H), 7.29 (bd, 2H), 7.21 (m, 1H), 7.14 (m, 1H)
7.02 (m, 1H) , 6.53 (t, 1H) , 4.91 (s, 1H), 4.87 (m, 1H)
4.55- -4.45 (m, 2H) , 4.42 (m, 1H) , 4. 2-4.1 (m, 3H), 3.69 (m
1H) , 2.66 (m, 1H) , 2. 42 (m, 1H) , 1.30 (d, 6H) , 0.98 (m
2H) , 0.02 (s, 9H)
(ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH (OH) С (0)-Aze-Pab (OiPr)
Към леденостуден разтвор на Ph(3-Cl)(5-OCHF2)(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab(OiPr,Teoc)(46 mg, 0.069 mmol; виж етап (i) по-горе) в 0.5 ml метиленхлорид се прибавят 3 ml TFA. Сместа се разбърква (ледена баня) в продължение на 150 минути. Веществото се пречиства, като се използва препаративна HPLC.
Желана фракция се изпарява и се изсушава при замръзване (2х), при което се получават 22 mg (58%) от съединението от заглавието.
XH-NMR (400 MHz; CD3OD) ротамери: δ 7. 59 (d, 2H), 7.35 (m, 1Η), 7.32 (d, 2H), 7.19 (m, 1Η, основен ротамер), 7.15 (m, 1Н),, 7.12 (m, 1Η, второстепенен ротамер), 6.89 (t, 1Н, основен ротамер), 6.86 (t, 1Н, второстепенен ротамер), 5.18 (s, 1Н, основен ротамер), 5.18' (m, 1Н, второстепенен ротамер), 5.12 (s, 1Н, второстепенен ротамер), 4.78 (m, 1Н, основен ротамер), 4.5-3.9 (m, 5Н), 2.67 (m, 1H, второстепенен ротамер), 2.52 (m, 1H, основен ротамер), 2.28 (m, 1H, основен ротамер), 2.15 (m, 1H,. второстепенен ротамер), 1.26 (d, 6H)
181 13C-NMR (100 MHz;
въглероди, ротамери)
CD3OD) :
δ 171.9, (карбонил и/или амидинови
171.4, 153.6.
MS (m/z) 523 (М-l)’, 525 (Μ + 1) +
Пример 4 6
Заглавните съединения от примери 3, 6, 9, 10, 13 до
15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 28, 32, 34, 36, 38, 39 и 41 се изследват в тест А по-горе и се установява че проявят 1С5оТТ стойности от по-малки от 3.5 μΜ. Тези от примери 3, 6, 9,
10, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 27, 32, 34 и 39 показват стойности от по-малко от 0.02 μΜ; тези от примери 25 и 28 по-малко от 0.03 μΜ, това от Пример 14 по-малко от 0.04 рМ ; и those от примери 38 и 41 по-малко от 0.15 μΜ.
Пример 4 7
Заглавните съединения от примери 3, 6, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 28, 32 и 34 се изпитват в тест D по-горе и при което се установи, че притежават 1С50АРТТ стойност от по-малка от 1 μΜ.
Пример 4 8
Заглавните съединения от примери 1, 2, 4, 5, 7, 12,
16, 18, 20, 22, 24, 26, 29, 30, 33 и 43 до 45 се изпитват в тест Е по-горе и при което се установи, че проявят орална и/или парентерална бионаличност в плъх като съответният активен инхибитор (свободен амидин).
Пример 4 9
Заглавните съединения от примери 1, 2, 7, 8, 11, 12,
16, 18, 20, 22, 24, 26, 29, 33, 37, 40, 43 и 45 се изпитват в тест G по-горе и се установи, че се превръщат в
182 съответния активен инхибитор (свободен амидин) в чернодробни микрозоми от хора и от плъхове.
Съкращения
Ас = ацетил
АсОН = оцетна киселина
APCI = атмосферно налягане химическа йонизация (спрямо MS)
API = атмосферно налягане йонизация (спрямо MS) aq. - воден разтвор на
AUC = площ под кривата
Aze = (S)-ацетидин-2-карбоксилат (ако не е посочено друго)
AzeOH= ацетидин-2-карбоксилна киселина
Вп = бензил
Вос = трет-бутилоксикарбонил
BSA = телешки серумен албумин
Ви = бутил
Bzl = бензил
CI = химическа йонизация (спрямо MS) d = ден (и)
DCC = дициклохексил карбодиимид
DIBAL-H= ди-изобутилалуминиев хидрид
DIPEA= диизопропилетиламин
DMAP 4-(NN-диметиламино)пиридин
DMF = диметилформамид
DMSO = диметилсулфоксид
DVT = тромбоза на вътрешни вени
EDC =1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид
е. е. = енантиомерен излишък
Et = етил етер = диетилов етер
EtOAc = етилацетат
183
EtOH - етанол
Et2O = диетилов етер h = час(d)
HATU = 0-(азабензотриазол-1-ил)-N,Ν,Ν',Ν'-тетраметилурониев хексафлуорофосфат
HBTU =[Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметил-О-(бензотриазол-1-ил)урониев хексафлуорофосфат]
НС1 = солна киселина, хлороводороден газ или хидрохлоридна сол (в зависимост от контекста)
Hex = - хексан
НОАс = оцетна киселина
HPLC = високоефективна течна хроматография
LC = течна хроматография
Ме = метил
МЕМ = метоксиетоксиметил
МеОН = метанол
Min = минута (и)
MS - мас спектроскопия
МТВЕ = метил трет-бутил етер
NADH = никотинамид аденин динуклеотид, редуцирана форма
NADPH= никотинамид аденин динуклеотид фосфат, редуцирана форма
ΝΙΗ = - National Institute of Health (US)
NIHU = National Institute of Health единици
NMR = - ядрен магнитен резонанс
ОАс = = ацетат
РаЬ = рага-амидобензиламино
Н-РЬ = рага-амидинобензиламин
Ph = фенил
Рг = пропил
Pro = (S)-пролинил
РуВОР=(бензотриазол-1-илокси)трипиролидинофосфониев
184 хексафлуорофосфат
QF = тетрабутиламониев флуорид
RedAl = натриев бис (2-метоксиетокси)алуминиев хидрид
RPLC = високоефективна течна хроматография с обърната фаза rt/RT = стайна температура
SOPs = стандартни работни процедури
TBTU = [Ν,Ν,Ν',N'-тетраметил-О-(бензотриазол-1-ил)урониев тетрафлуороборат]
TEA = триетиламин
Теос = 2-(триметилсилил) етоксикарбонил
TEMPO = 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси свободен радикал
TFA = трифлуороцетна киселина
THF = тетрахидрофуран
ТНР = тетрахидропиранил
TLC = тънкослойна хроматография
TMSC1 = триметилсилил хлорид
TMSCN = триметилсилил цианид
UV = ултравиолет
Z = бензилоксикарбонил
Префиксите n, s, i и t имат обичайните значения: нормален, вторичен, изо и третичен. Префиксът с означава цикло.
Патентни претенции

Claims (46)

  1. Патентни претенции
    1. Съединение с формула I където
    Ra означава-ОН или -СН2ОН ;
    R1 означава един или няколко евентуални халогено заместители;
    R2 означава един или два Ci_3 алкокси заместители, чийто алкилови части са заместени от своя страна с един или няколко флуоро-заместители;
    Y означава -СН2- или -(СН2)2-; и
    R3 означава фрагмент с формула I(i) или I(ii) :
    Ki) където
    R4 означава Н или един или няколко флуоро-заместители; и един или два от Хх, Х2, Хз и Х4 представляват -N-, а другите означават -СН-, или негово фармацевтично приемливо производно.
  2. 2. Съединение съгласно претенция 1, където R1 означава един заместител флуоро, хлоро или бромо.
    186
  3. 3. Съединение съгласно претенция 2, където
    R1 означава хлоро.
  4. 4. Съединение съгласно коя да е от предходните претенции, където
    R2 означава -OCHF2, ~OCF3,
    -OCH2CF3, ' OCH2CHF2, -OCH2CH2F или -ОСН (CH2F) 2.
  5. 5.
    Съединение съгласно претенция 4, където
    R2 означава
    -OCHF2,
    -OCH2CHF2 или -OCH2CH2F.
  6. 6.
    Съединение съгласно коя да е от предходните претенции, където R3 означава фрагмент формула
    Н.
  7. 7. Съединение съгласно претенция
    6, където
    R4 означава
  8. 8. Съединение съгласно претенция
    6, където, когато R4 означава един или няколко флуоро-заместители, той означава един флуоро-заместител в 2- или З-позиция, или два флуорозаместители в 2- и 5-позиции или в 2и 6-позиции.
  9. 9. Съединение съгласно претенция
    8, където R4 означава един флуоро-заместител в 2-позиция или два флуорозаместители в 2- и 6-позиции.
  10. 10.
    Съединение съгласно коя да от предходните претенции, където Ra означава ОН.
  11. 11.
    Съединение съгласно коя да от предходните претенции, където местата на заместване на
    R1 и R2 на съответната фенилова група на съединението формула I са едната или двете от двете мета-позиции спрямо точката на свързване на тази фенилова група с останалата част на молекулата.
  12. 12. Фармацевтично приемливо производно на съединение с формула I съгласно коя да е от претенциите 1 до 11, което производно съединение е съединение с формула 1а,
    187 la където R3a означава фрагмент с формула I(iii) или I(iv):
    l(iii) х3-х4 l(iv)
    N-R където R5 означава OR6 или С(0)OR7 ;
    R6 означава Η, Ci-ю-алкил, С1-3-алкиларил или С1_3-алкилоксиарил (като алкиловите части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, а ариловите части на последните две групи са евентуално заместени халогено, групи са с един или няколко фенил, метил или заместители, избрани от метокси, като последните три също евентуално заместени с един или няколко халогено заместители);
    R7 означава Ci-ю-алкил (чиято последна група е прекъсната евентуално с един или няколко кислородни атома) или Ci_3алкиларил или С1-3-алкилоксиарил (алкиловите части на последните две групи са прекъснати евентуално с един или няколко кислородни атома, две групи са евентуално заместители, избрани от метокси, като последните а ариловите части на последните заместени с един или няколко халогено, фенил, метил или три групи са също евентуално заместени с един или няколко.халогенозаместители); и
    188
    Ra, R1, R2, Y, R4, Xlz X2, X3 и X4 са, както са дефинирани в коя да е от претенциите 1 до 11 (както е подходящо), или негово фармацевтично приемливо производно.
  13. 13. Съединение съгласно претенция 12, къдетоR означава OR6.
  14. 14. Съединение съгласно претенция 13, къдетоR означава Н или незаместен линеен,·разклонен или циклен С2-8 -алкил.
  15. 15. Съединение съгласно претенция 14, къдетоR означава Н или С1_6-алкил.
  16. 16. Съединение съгласно претенция 14, къдетоR означава линеен С1_3-алкил, разклонен С3-8~алкил или циклен С4-1 -алкил.
  17. 17. Съединение съгласно претенция 15 или претенция
    16, където R6 означава метил, етил, η-пропил, изо-пропил или циклобутил.
  18. 18. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до
    17, където фрагментът е в S-конфигурация.
  19. 19. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до
    18, където фрагментът
    R2
    189 е в R-конфигурация, когато Ra означава -ОН или е в Sконфигурация, когато Ra означава -СН2ОН.
  20. 20. Съединение съгласно претенция 1, което е:
    Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -(R)СН(OH)С(0)-Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCF3) - (S) CH (CH2OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph(3-OCHF2) -(R) CH(OH)-CO-Aze-Pab;
    Ph (3-OCF3) -(R)CH(OH)-CO-Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-0CH2CF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph(3-Cl) (5-OCH2F) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph (3-F) (5-OCHF?) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab;
    Ph(3-Br) (5-0CH2F)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
    Ph(3-Br) (5-0CHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab;
    Ph(З-Cl, (5-0CHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Pro-Pab;
    Ph(З-Cl,5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-NH-CH2-((2-амидино)-5 пиридинил);
    Ph(З-Cl, (5-OCHF2) - (R) CH(OH)C(0)-Aze-NH~CH2-((5-амидино)-2 пиримидинил);
    Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (3-F) ;
    Ph(З-Cl,5-0CHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2,6-flnF) ;
    Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2, 5-flnF) .
    Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OEt) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OnPr) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OiPr);
    Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu);
    Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OH) ;
    Ph(З-Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(СООсПентил);
    190
    Ph (З-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (Z) ;
    Ph(З-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe) ;
    Ph (З-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OCH2-3-(5-Meизоксазол));
    Ph (З-Cl) (5-0CF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OCH2-3-пиридин) ;
    Ph(З-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OiBu);
    Ph(3-Cl) (5-OCF3) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OEt);
    Ph(3-Cl) (5-OCF3) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (OBn) ;
    Ph(З-Cl) (5-0CF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(ОсХексил);
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OcBu);
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (OCH2CH2OPh (3-CF3) ) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (OBn (4-C1) ) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0) -Aze-Pab (OBn (3-MeO) ) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C(0)-Aze-Pab (OBn (2-Br) ) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCF3) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OBn(4-Me));
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab(О-4-хептил);
    Ph(3-Cl) (5-OCF3)-(S)CH(CH20H)C(0)-Aze-Pab(OMe);
    Ph (З-Cl) (5-OCH2CF3) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph (З-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph(3-Cl) (5-OCH2F) -(R) CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe);
    Ph (З-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph (З-Cl) (5-OCH (CH2F) 2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph (3-F) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OMe) ;
    Ph(3-Br) (5-OCHF2) -(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(OMe);
    Ph (З-Cl, 5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH) ;
    Ph (З-Cl, 5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (OH) ;
    Ph(З-Cl,5-OCHF2) -(R) CH(OH)C(0)-Pro-Pab(OMe);
    Ph (З-Cl, 5-OCHFz) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- ( (2-метоксиамидино)-5-пиридинил);
    Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-NH-CH2- ( (5-метоксиамидино)2-пиримидинил);
    Ph (З-Cl, 5-0CHF2) - (R) CH (OH) C (0)-Aze-Pab (2, 6-flnF) (OMe); или
    191
    Ph (З-Cl, 5-OCHF2) - (R) CH (OH) С (0)-Aze-Pab (2,5-flnF) (OMe) .
  21. 21. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва съединение съгласно коя да.е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно в смес с фармацевтично приемливо помощно средство, разредител или носител.
  22. 22. Състав съгласно претенция 21, характеризиращ се с това, че помощното средство, разредителят и/или носителят предизвиква модифицирано освобождаване на съединение.
    23. Състав съгласно претенция 21 или претенция 22 • характеризиращ с това, че е пригоден за орално приложение. 24 . Състав съгласно претенция 22 или претенция 23
    характеризиращ се с това, че е под формата на желираща матрична модифицирано освобождаваща система, включваща хидрофилен желиращ компонент и активна съставка.
  23. 25. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за използване като фармацевтичен препарат.
  24. 26. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за използване при лечение на състояние, където е необходимо инхибиране на тромбин.
  25. 27. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до
    20 или негово фармацевтично приемливо производно за използване при лечение на състояние, където има показание за антикоагулантно лечение.
  26. 28. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за използване при лечение на тромбоза.
  27. 29. Съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за използване като антикоагулант.
    192
  28. 30. Използване на съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно като активна съставка за производство на лекарство за лечение на състояние, при което е необходимо инхибиране на тромбин.
  29. 31. Използване на съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно като активна съставка за производство на лекарство за лечение на състояние, при което има показание за антикоагулантно лечение.
  30. 32. Използване съгласно претенция 30 или претенция
    31, където състоянието е тромбоза.
  31. 33. Използване съгласно претенция 30 или претенция
    31, където състоянието е повишена съсирваемост в кръвта и/или тъканите.
  32. 34. Използване на съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно като активна съставка за производството на антикоагулант.
  33. 35. Използване на терапевтично ефективно количество от съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за лечение на състояние, при което е необходимо инхибиране на тромбин.
  34. 36. Използване на терапевтично ефективно количество от съединение съгласно коя да е от претенциите 1 до 20 или негово фармацевтично приемливо производно за лечение на състояние, при което има показание за антикоагулантно лечение.
    193
  35. 37. Използване съгласно претенция 35 или претенция
    36, където състоянието е тромбоза.
  36. 38. Използване съгласно претенция 35 или претенция
    36, където състоянието е повишена съсирваемост в кръвта и/или тъканите.
  37. 39. Метод за получаване на съединение с формула I съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че включва:
    (i) свързване на съединение с формула II, където Ra, R1 и R2 са дефинирани както в претенция 1 със съединение с формула III, където Y и R3 са дефинирани както в претенция 1;
    (ii) свързване на съединение с формула IV, където Ra, R1, R2 и Y са дефинирани както в пртенция 1 със съединение с формула V,
    R3CH?NH? V
    194 където R3 е дефиниран както в претенция 1;
    (iii) за съединения с формула I в която R1 не означава една или няколко халогеногрупи, редукция на съответното съединение с формула 1а съгласно претенция 12, в която R5 означава OR6 , където R5 и R6 са дефинирани както в претенция 12;
    (iv) взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или XVIB съгласно 47 с източник на амоняк;
    (v) взаимодействие на съединение с формула XIVA, където Ra
    XIVA в претенция
    a) съответен флуориран халогеноалкан; или
    b) за съединения с формула I, в която R2 означава -OCH2CF3,
    -OCH2CHF2, -OCH2CH2F или -OCH(CH2F)2, съединение с формула
    XIVJ,
    RxS(O)2ORy XIVJ където Rx означава С1_4-алкил, С1_4-перфлуороалкил или фенил (евентуално заместен с метил, нитро или халогено) и Ry означава -CH2CF3, -CH2CHF2, -CH2CH2F или -CH(CH2F)2 ;
    (vi) за съединения с формула I, в която R1 не означава една или няколко халогеногрупи, хидриране на съответно съединение с формула I, в която R1 означава една или няколко халогеногрупи; или
    195 отстраняване на защитната група от защитено производно на съединение съгласно претенция претенция 1.
  38. 40. Съединение формула II съгласно претенция 39 или негово защитено производно.
  39. 41.
    Съединение съгласно претенция
    40, където съединението е в R-конфигурация (спрямо въглеродния атом, към който е свързан Ra), когато Ra означава -ОН, или е в Sконфигурация, когато Ra означава -СНгОН.
  40. 42. Съединение с формула IV съгласно претенция 39 или негово защитено производно.
  41. 43. Съединение с формула VIa,
    VI3 където R1 означава халогено, a R2 е дефиниран както в претенция 1, или негово защитено производно.
  42. 44. Съединение с формула 1Ха,
    н 1 0 II Y^OR ] 1Ха πι/\ R R където R означава Ci-б-алкил или Ci-з-алкилфенил, R1 означава халогено и R' 2 е дефиниран както в претенция 1, или
    негово защитено производно.
  43. 45. Съединение с формула 1ХАа,
    196
    IXAa където R е дефиниран както в претенция 44, R1 означава халогено и R2 е дефиниран както в претенция 1, или негово защитено производно.
  44. 46. Съединение с формула XIVBa,
    XIVBa или негово фенол-О-защитено производно, където R1 означава халогено и Ra е дефиниран както в претенция 1.
    47. Метод за получаване на съединение с формула 1а съгласно претенция 12, характеризиращ се с това, че включва: (а) взаимодействие на съответно съединение с формула II
    съгласно претенция 39 със съединение с формула XV,
    XV където Y е дефиниран както в претенция 1, a R3a е дефиниран както в претенция 12;
    (Ь) взаимодействие на съответно съединение с формула IV съгласно претенция 39 със съединение с формула XVI,
    197
    R3aCH2NH2 XVI където R3a е дефиниран както в претенция 12;
    (с) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съответно съединение с формула XVIA или
    XVIB,
    XVIA
    XVIB където Ra, R1, R2, R4, Y, Х2, Х2, Хз и Х4 са дефинирани както в претенция 1, с хидроксиламин;
    (d) за съединения с формула 1а, в която R5 означава OR6, взаимодействие на съединение с формула XVII,
    XVII където R3b означава фрагмент с формула I (ν) или I(vi):
    198 l(v) l(vi) където Rb означава -CH2CH2-Si (CH3) 3 . или бензил, или негов тавтомер, и Ra, R1, R2, Y, R4, Хх, Х2, Х3 и Х4 са дефинирани както в претенция 1, със съединение с формула XVIII,
    R6ONH2 XVIII където R6 е дефиниран както в претенция 12, или с негова киселиноприсъединителна сол, последвано от отстраняване на -С (0) ОИь-групата;
    (e) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОН, взаимодействие на съединение с формула XVII, дефинирана погоре, в която Rb означава бензил, с хидроксиламин или негова киселиноприсъединителна сол;
    (f) за съединения с формула 1а, в която R5 означава COOR7, взаимодействие на съответно съединение с формула I съгласно претенция 1 със съединение с формула XIX,
    LXCOOR7 XIX където L1 означава отцепваща се група, a R7 е дефиниран както в претенция 12; или (д) за съединения с формула 1а, в която R5 означава ОСН3 или ОСН2СН3, взаимодействие на съответно съединение с формула 1а, в която R5 означава ОН, с диметилсулфат или диетилсулфат, респективно.
  45. 48. Съединение с формула XVIA или XVIB съгласно претенция 47, или негово защитено производно.
  46. 49. Съединение с формула XVII съгласно претенция 47, или негово защитено производно.
BG107825A 2000-12-01 2003-05-19 Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин BG66261B1 (bg)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE0004458A SE0004458D0 (sv) 2000-12-01 2000-12-01 Pharmaceutically useful compounds
SE0100965A SE0100965D0 (sv) 2001-03-19 2001-03-19 Pharmaceutically-useful compounds
SE0101239A SE0101239D0 (sv) 2001-04-06 2001-04-06 Pharmaceutically useful compounds
SE0102921A SE0102921D0 (sv) 2001-08-30 2001-08-30 Pharmaceutically useful compounds
PCT/SE2001/002657 WO2002044145A1 (en) 2000-12-01 2001-11-30 New mandelic acid derivatives and their use as throbin inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG107825A true BG107825A (bg) 2004-02-27
BG66261B1 BG66261B1 (bg) 2012-10-31

Family

ID=27484527

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107825A BG66261B1 (bg) 2000-12-01 2003-05-19 Производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин

Country Status (30)

Country Link
US (4) US20070218136A1 (bg)
EP (2) EP2186800A1 (bg)
JP (3) JP4177101B2 (bg)
KR (4) KR100947296B1 (bg)
CN (1) CN1291975C (bg)
AR (2) AR035216A1 (bg)
AT (1) ATE461171T1 (bg)
AU (2) AU2007203520B2 (bg)
BG (1) BG66261B1 (bg)
BR (1) BR0115861A (bg)
CA (1) CA2436220C (bg)
CY (1) CY1113487T1 (bg)
CZ (1) CZ303708B6 (bg)
DE (1) DE60141603D1 (bg)
DK (1) DK1347955T3 (bg)
EE (1) EE05382B1 (bg)
ES (1) ES2341318T3 (bg)
HK (1) HK1057214A1 (bg)
HU (1) HU228814B1 (bg)
IL (1) IL156096A0 (bg)
IS (1) IS2755B (bg)
MX (1) MXPA03004794A (bg)
MY (1) MY136133A (bg)
NO (3) NO325228B1 (bg)
NZ (1) NZ526205A (bg)
PL (1) PL207045B1 (bg)
PT (1) PT1347955E (bg)
SI (1) SI1347955T1 (bg)
SK (1) SK287692B6 (bg)
WO (1) WO2002044145A1 (bg)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201661D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201662D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Pharmaceutical combination
SE0201658D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Immediate release pharmaceutical formulation
SE0201659D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
KR101106631B1 (ko) 2003-02-13 2012-01-20 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 대사 질환의 치료용 화합물
GB0306615D0 (en) * 2003-03-22 2003-04-30 Astrazeneca Ab New use
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0303220D0 (sv) * 2003-11-28 2003-11-28 Astrazeneca Ab New process
US7550499B2 (en) 2004-05-12 2009-06-23 Bristol-Myers Squibb Company Urea antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
MX2007008434A (es) 2005-01-19 2007-07-25 Squibb Bristol Myers Co Derivados de 2-fenoxi-n-(1,3,4-tiadizol-2il)piridin-3-amina y compuestos relacionados como inhibidores del receptor p2y1 para el tratamiento de trastornos tromboembolicos.
GB0503672D0 (en) * 2005-02-23 2005-03-30 Astrazeneca Ab New process
GB0510546D0 (en) * 2005-05-24 2005-06-29 Astrazeneca Ab New process
WO2007002635A2 (en) 2005-06-27 2007-01-04 Bristol-Myers Squibb Company C-linked cyclic antagonists of p2y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
WO2007002634A1 (en) 2005-06-27 2007-01-04 Bristol-Myers Squibb Company Carbocycle and heterocycle antagonists of p2y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
ES2360818T3 (es) 2005-06-27 2011-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Miméticos de urea lineal antagonistas del receptor p2y, útiles en el tratamiento de afecciones trombóticas.
US7728008B2 (en) 2005-06-27 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company N-linked heterocyclic antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
KR20080089453A (ko) 2006-01-25 2008-10-06 웰스태트 테러퓨틱스 코포레이션 물질대사 장애의 치료용 화합물
US7820721B2 (en) 2006-01-25 2010-10-26 Wellstat Therapeutics Corporation Compounds for the treatment of metabolic disorders
EP1978948A4 (en) 2006-02-02 2010-06-16 Wellstat Therapeutics Corp COMPOUNDS FOR THE TREATMENT OF METABOLISM DISORDER
WO2007103996A1 (en) 2006-03-09 2007-09-13 Bristol-Myers Squibb Company 2-(aryloxy)acetamide factor viia inhibitors useful as anticoagulants
EP2061756B1 (en) 2006-06-08 2013-09-25 Bristol-Myers Squibb Company 2-aminocarbonylphenylamino-2-phenilacetamides as factor viia inhibitors useful as anticoagulants
DE102006033572A1 (de) 2006-07-20 2008-01-24 Bayer Cropscience Ag N'-Cyano-N-halogenalkyl-imidamid Derivate
US7960569B2 (en) 2006-10-17 2011-06-14 Bristol-Myers Squibb Company Indole antagonists of P2Y1 receptor useful in the treatment of thrombotic conditions
TW200827336A (en) * 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
JP5342450B2 (ja) 2006-12-15 2013-11-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 第ＸＩａ因子インヒビターとしてのアリールプロピオンアミド、アリールアクリルアミド、アリールプロピンアミド、またはアリールメチルウレアアナログ
PE20081775A1 (es) 2006-12-20 2008-12-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos macrociclicos como inhibidores del factor viia
BRPI0810462A2 (pt) 2007-04-23 2014-10-14 Sanofi Aventis Derivados de quinolina-carboxamida como antagonistas de p2y12
TW200900033A (en) * 2007-06-21 2009-01-01 Wen-Qing Li Automatic brewing machine
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
EP2238128B1 (en) 2007-12-26 2012-08-22 Sanofi Heterocyclic pyrazole-carboxamides as p2y12 antagonists
EP3786165A1 (en) 2010-02-11 2021-03-03 Bristol-Myers Squibb Company Synthetic intermediates for producing macrocycles as factor xia inhibitors
TW201319068A (zh) 2011-08-05 2013-05-16 必治妥美雅史谷比公司 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑
TW201311689A (zh) 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
ES2579832T3 (es) 2011-10-14 2016-08-17 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituida como inhibidores del factor XIa
CA2851810C (en) 2011-10-14 2020-01-07 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tetrahydroisoquinoline compounds as factor xia inhibitors
ES2699226T3 (es) 2011-10-14 2019-02-08 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de tetrahidroisoquinolina sustituidos como inhibidores del factor XIa
EA025392B1 (ru) 2012-08-03 2016-12-30 Бристол-Маерс Сквибб Компани Дигидропиридон р1 в качестве ингибиторов фактора xia
EA028581B1 (ru) 2012-08-03 2017-12-29 Бристол-Маерс Сквибб Компани ДИГИДРОПИРИДОН Р1 В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ФАКТОРА XIa
GB2510407A (en) * 2013-02-04 2014-08-06 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Aqueous suspensions of kallikrein inhibitors for parenteral administration
WO2014160668A1 (en) 2013-03-25 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroisoquinolines containing substituted azoles as factor xia inhibitors
RS57659B1 (sr) 2014-01-31 2018-11-30 Bristol Myers Squibb Co Makrociklusi sa heterocikličnim p2' grupama kao inhibitori faktora xia
NO2760821T3 (bg) 2014-01-31 2018-03-10
NO2721243T3 (bg) 2014-10-01 2018-10-20
US10160750B2 (en) 2015-06-19 2018-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles as factor XIa inhibitors
WO2017019821A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Bristol-Myers Squibb Company Factor xia new macrocycle bearing a non-aromatic p2' group
EP3331872B1 (en) 2015-08-05 2019-09-25 Bristol-Myers Squibb Company Novel substituted glycine derived fxia inhibitors
CN105294520A (zh) * 2015-11-23 2016-02-03 大连九信生物化工科技有限公司 一种2-（2’,2’-二氟乙氧基）-6-三氟甲基苯基丙基硫醚的合成工艺
KR20180117156A (ko) 2016-03-02 2018-10-26 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인자 XIa 억제 활성을 갖는 디아미드 마크로사이클
CN106674085B (zh) * 2016-12-20 2020-06-23 苏州汉德创宏生化科技有限公司 N-1,3-二氟异丙基-4-氨基哌啶类化合物的合成方法
EP3877380A1 (en) 2018-11-05 2021-09-15 Syngenta Participations Ag Pesticidally active azole-amide compounds
EP4010333A1 (en) 2019-08-09 2022-06-15 Kalvista Pharmaceuticals Limited Plasma kallikrein inhibitors

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
JPS57149217A (en) 1981-03-11 1982-09-14 Kaken Pharmaceut Co Ltd Slow-releasing pharmaceutical preparation
HU192646B (en) 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
ZA86746B (en) 1985-02-04 1986-09-24 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
US5187157A (en) 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
US4792452A (en) 1987-07-28 1988-12-20 E. R. Squibb & Sons, Inc. Controlled release formulation
US5538847A (en) * 1989-07-17 1996-07-23 Tropix, Inc. Chemiluminescent 1,2-dioxetanes
EP0362002B1 (en) 1988-09-01 1995-07-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
ZA897515B (en) 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
IT1229491B (it) 1988-12-28 1991-09-03 Roussel Maestretti S P A Ora R Derivati della 1,2,5,6-tetraidropiridina, loro procedimento di preparazione e loro impiego come sostanze medicinali
TW201303B (bg) 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
CA2075154A1 (en) 1991-08-06 1993-02-07 Neelakantan Balasubramanian Peptide aldehydes as antithrombotic agents
SE9102462D0 (sv) 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
US5169638A (en) 1991-10-23 1992-12-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. Buoyant controlled release powder formulation
NZ245039A (en) 1991-11-12 1994-12-22 Lilly Co Eli N-phenylalanyl and n-phenylglycyl derivatives of the dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acid and l-arginine aldehyde; anti-blood clotting compositions
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
CA2131367A1 (en) 1992-03-04 1993-09-16 Sandor Bajusz New anticoagulant peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same as well as a process for the preparation thereof
TW223629B (bg) 1992-03-06 1994-05-11 Hoffmann La Roche
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9301912D0 (sv) 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra Process for the production of aminoalkylguandines
EP0648780A1 (en) 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
TW394760B (en) 1993-09-07 2000-06-21 Hoffmann La Roche Novel Carboxamides, process for their preparation and pharmaceutical composition containing the same
CA2140598C (en) * 1994-01-27 2010-03-09 Masahiro Ohshima Prolineamide derivatives
US5707966A (en) 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951617B (en) 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5561146A (en) 1994-06-10 1996-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
US5498724A (en) 1994-06-28 1996-03-12 Aktiebolaget Astra Pyrazoleamidine compounds
US5510369A (en) 1994-07-22 1996-04-23 Merck & Co., Inc. Pyrrolidine thrombin inhibitors
NZ302649A (en) * 1995-02-17 2000-01-28 Basf Ag Dipeptide amidine derivatives, preparation and pharmaceutical compositions thereof
US5874298A (en) * 1995-02-17 1999-02-23 Nps Pharmaceuticals, Inc. Insecticidal toxins from Bracon hebetor nucleic acid encoding said toxin and methods of use
US5710130A (en) 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5695781A (en) 1995-03-01 1997-12-09 Hallmark Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulation containing three different types of polymers
US6083532A (en) 1995-03-01 2000-07-04 Duramed Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulation containing three different types of polymers and tablet formed therefrom
AU698911B2 (en) 1995-04-04 1998-11-12 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5629324A (en) 1995-04-10 1997-05-13 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TWI238827B (en) 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
SE9601556D0 (sv) 1996-04-24 1996-04-24 Astra Ab New pharmaceutical formulation of a thrombin inhibitor for parenteral use
SE9602263D0 (sv) * 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US5863929A (en) 1996-06-25 1999-01-26 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
DE19632772A1 (de) 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Benzamidine
SE9603724D0 (sv) 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
AR013084A1 (es) * 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
IT1297461B1 (it) 1997-10-29 1999-12-17 Ciocca Maurizio Preparazione di compresse a rilascio controllato a base di complessi tra carragenano e farmaci basici solubili
SE9704401D0 (sv) 1997-11-28 1997-11-28 Astra Ab Matrix pellets for greasy, oily or sticky drug substances
SE9704543D0 (sv) * 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
US6174913B1 (en) * 1998-06-05 2001-01-16 The University Of North Carolina At Chapel Hill Naphtho- and dihydrobenzo-thiophene derivatives as cytotoxic antitumor agents
SE9802938D0 (sv) * 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802974D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab New crystalline forms
SE9802973D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
WO2000042059A1 (en) * 1999-01-13 2000-07-20 Astrazeneca Ab New amidinobenzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
US6758430B1 (en) * 1999-02-16 2004-07-06 Aesop, Inc. Method of winding motors and other electric machines to reduce AC losses
SE9902550D0 (sv) * 1999-07-02 1999-07-02 Astra Ab New crystalline forms
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
SE0102921D0 (sv) * 2001-08-30 2001-08-30 Astrazeneca Ab Pharmaceutically useful compounds
US6287599B1 (en) 2000-12-20 2001-09-11 Shire Laboratories, Inc. Sustained release pharmaceutical dosage forms with minimized pH dependent dissolution profiles
AR034517A1 (es) * 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
US6811794B2 (en) 2001-12-20 2004-11-02 Shire Laboratories, Inc. Sustained release pharmaceutical dosage forms with minimized pH dependent dissolution profiles
SE0201658D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Immediate release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7781424B2 (en) 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0303220D0 (sv) 2003-11-28 2003-11-28 Astrazeneca Ab New process
GB0503672D0 (en) 2005-02-23 2005-03-30 Astrazeneca Ab New process
GB0510546D0 (en) 2005-05-24 2005-06-29 Astrazeneca Ab New process
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms

Also Published As

Publication number Publication date
EP1347955A1 (en) 2003-10-01
HK1057214A1 (en) 2004-03-19
EE200300259A (et) 2003-08-15
IL156096A0 (en) 2003-12-23
NZ526205A (en) 2005-04-29
US7803954B2 (en) 2010-09-28
PT1347955E (pt) 2010-05-21
DK1347955T3 (da) 2010-06-07
EE05382B1 (et) 2011-02-15
US20070218136A1 (en) 2007-09-20
KR100947296B1 (ko) 2010-03-16
IS6828A (is) 2003-05-27
US20100087651A1 (en) 2010-04-08
US7645751B2 (en) 2010-01-12
PL362917A1 (en) 2004-11-02
HUP0302487A2 (hu) 2003-11-28
NO325228B1 (no) 2008-03-03
MXPA03004794A (es) 2003-09-10
US20070202174A1 (en) 2007-08-30
KR20090023745A (ko) 2009-03-05
SK6512003A3 (en) 2003-11-04
IS2755B (is) 2011-09-15
CY1113487T1 (el) 2016-06-22
KR100914537B1 (ko) 2009-09-02
JP2008156362A (ja) 2008-07-10
AU2007203520B2 (en) 2010-12-09
US20080090800A1 (en) 2008-04-17
KR20080059681A (ko) 2008-06-30
KR20030051894A (ko) 2003-06-25
JP2008138009A (ja) 2008-06-19
SI1347955T1 (sl) 2010-07-30
BR0115861A (pt) 2003-09-23
CN1291975C (zh) 2006-12-27
EP2186800A1 (en) 2010-05-19
KR100914535B1 (ko) 2009-09-02
NO20080031L (no) 2003-07-25
CA2436220C (en) 2010-04-13
JP4177101B2 (ja) 2008-11-05
BG66261B1 (bg) 2012-10-31
NO20032465D0 (no) 2003-05-30
SK287692B6 (sk) 2011-06-06
AU2002218618A1 (en) 2002-06-11
AR035216A1 (es) 2004-05-05
ES2341318T3 (es) 2010-06-18
KR100914016B1 (ko) 2009-08-28
HU228814B1 (hu) 2013-05-28
EP1347955B1 (en) 2010-03-17
AU2007203520A1 (en) 2007-08-16
NO20080030L (no) 2003-07-25
CZ20031514A3 (cs) 2003-08-13
CZ303708B6 (cs) 2013-03-27
AR072331A2 (es) 2010-08-25
CA2436220A1 (en) 2002-06-06
JP2004520290A (ja) 2004-07-08
HUP0302487A3 (en) 2009-08-28
CN1487919A (zh) 2004-04-07
PL207045B1 (pl) 2010-10-29
NO20032465L (no) 2003-07-25
AU2007203509A1 (en) 2007-08-16
DE60141603D1 (de) 2010-04-29
MY136133A (en) 2008-08-29
WO2002044145A1 (en) 2002-06-06
ATE461171T1 (de) 2010-04-15
KR20080064204A (ko) 2008-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG107825A (bg) Нови производни на бадемовата киселина и тяхното използване като инхибитори на тромбин
US7129233B2 (en) Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AU2001280395B2 (en) New amidino derivatives and their use as thrombin inhibitors
KR20040029091A (ko) 신규한 만델산 유도체 및 이것의 트롬빈 억제제로서의 용도
RU2300521C2 (ru) Новые производные миндальной кислоты и их применение в качестве ингибиторов тромбина
AU2002218618B2 (en) New mandelic acid derivatives and their use as throbin inhibitors
AU2002324410B2 (en) New mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AU2002324410A1 (en) New mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
TW200306975A (en) New mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
ZA200300258B (en) New amidino derivatives and their use as thrombin inhibitors.