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"Procédé de préparation d'intermédiaires utiles dans la synthèse de benzothiazépines"
La présente invention concerne un procedé de préparation d'esters de l'acide (2R, 3S)-3-(4-methoxy- phenyDglycidique et elle concerne en particulier un procedé de preparation d'esters de l'acide (2R, 3S) -3- (4- méthoxyphényl)giycidique par transestèrification enzymatique de mélanges enantiomeres.
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Les esters de l'acide < 2R, 3S)-3- < 4méthaxyphenyl) glycidique au acide (2R, 3S)- < -2, 3-époxv-3- (4-méthoxyphenyl) propionique sont des intermediaires utilisables pour la synthese de la (+) - (2S, 3S) -3aCétyloxy-5-[2- (diméthylamino) éthylJ-2, 3-dihydro-2- (4méthoxyphényl) -l, 5-benzothiazèpine-4C5H) -one, medicamen.. ayant une activité de vasodilatation des coronaires connu sous le nom de di1tiazem (Merck Index, XI Ed., No.
3188, page 505).
La préparation du diltiazem, en partant des esters de l'acide 3- (4-méthoxyphenyl) glycidique, peut être effectuée selon la littérature par plusieurs procédés.
Des exemples en sont donnes dans le brevet britannique NO 1 236 467, dans les brevets européens NO 127882 et NO 158340 et dans la demande de brevet britannique NO 2 167 063, tous au nom de Tanabe Seiyaku Co. Ltd.
Pour préparer le diltiazem, il est necessaire d'effectuer un dédoublement optique.
Il est évident pour l'homme du métier qu'il est économiquement plus facile d'effectuer une étape de dédoublement ä un stade précoce du processus car la valeur économique du produit sur lequel on effectue le
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dédoubleient esT : inferieure et l'iscere indesire a en.
. cnsequence un prix Interieur.
11 61 : dcnc avantaaux que les es'cers da l'3. cide 3-'4-. athaxyphenyl) ? lyc : idiau6-soiem saus une fre'eure sur le plan enanlicssra ca. r de tels cmpcses son la-5 premiere intermediaires optiquesr actif da la synthese.
On ccrnnail, plusieur procades pour la prepara-cion d'stera de l'acide 3- (4-sathoxyphenyl) lycidiue so'- :'= une fcrme pure'sur le plan enanticere.
--crme zure-3ur",-e-iia-1 La plupart de ces prccedes prérJcit ' détcuolement d'un melange race : nique de l'acide 3- 4iBethoxyphnylglycidique avee des bases cptiquement actives e l'es-carificatian ultarieura de l'acide aptiqueiem : actif (deanda da braver japcnais 61/145l60 au ncm de Nippon Cheniiphar Co. Ll ; C. A. lS. : 32eoCu).
Cependant o cannait les difficultes d'applicaticn.
! es d4-fficul-täs industrielle de ces procedes da dedcublean. En iai'c, il est necessaire d'effecuer la separaticn, 1'isGleiaen et la purification. des sels diastereoisomsre, dans des conditions controlees e il ost necesaaire d < a rscuperer la base cptiquement activs gan. eraleinen. t tres ccüteusa.
En cutre, dans le cas specifique concerne par l'invention, on renccntre le problème de l'insabilit élevée de l'acide 3- (4.-methoxyphenyl) glycidique qui peut entraîner des troubles importants au cours des diverses étapes du procede de dedoublement.
Les dedoubleients enymicues d'esters de structures variées scnt ccnnus de manière generale (Angew. Chem.
Int. Ed. Bngl., 2A.. 617, 1985 et 1, 695, 1989).
Cependant, pcur autant que le depcsant le sache, les transesterif Italiens ensymatiques enaBLticsa-ecives d'esters de l'acide 3- (4-methoxyphenyl) glycidique u de SB5 analcgues n'cnt jaais ete dries.
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I1 a maintenant été trouve, et ceci constitue l'objet de la-presente invention, un procedé de preparation
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d'esters de l'acide C2R, 3S)-3- < 4-methoxvphényl)- glycldicue de formule
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dans laquelle R est un groupement alkyle en Cl-Ca lineaire ou ramifie ; un groupement cyclaalkyle en Ce-Ce ou un groupement 2,2-diméthyl-1, 3-dioxolanne-4-methyle;
procédé qui consiste à soumettre a une transestérification enzymatique enantiosélective un melange d'ester methylique ou d'ester éthylique de l'acide (2R, 3S)-3-(4-méthoxyphényl) glycidique (I, R=CH3, C2Hs) et de son énantiomère (2S, 3R) (ent-1), en
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utilisant un alcool qui est différent de l'alcool estérifiant le composé I et le composé ent-I et qui est choisi parmi les alcools aliphatiques en Cm-Ce linéaires ou ramifiés, les alcools cycloaliphatiques en Cs-Cs ou le 2,2-diméthyl-1, 3-dioxolanne-4-méthanol, éventuellement en presence d'un solvant ou d'un mélange de solvants approprié, et ä separer de l'ester transestérifié de l'ester non transestérifié.
Le procédé faisant l'objet de la présente invention permet la préparation d'intermédiaires utilisables pour la synthèse de composés ayant une activité de vasodilatation des coronaires.
Les enzymes utilisables pour la reaction de transestérification peuvent être de nature différente.
En particulier, on peut utiliser des lipases d'origine animale ou microbienne au des enzymes protéolytiques comme, par exemple, l'α-chymotrypsine.
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Parsi les lipases d'criie aniiale utilisables dans le pncade da la präsente inven. tiaii. =n peut citer les lipases de feie et de pancreas de ocrc.
Pami les lipases d'crig'i. e nicrobiene, =n peu* citer les lipases de microcrgaise Cadd, ju-cr', r-e ¯a F, seudc.-ncnas et. As pe. rz ! 1 1 uz.
Des exemples des a 1cccll-=. apprcprie saut : l'eth. an. cl, le n.-propanol. le 2-prcpancl, l- n.-butar. =l, le le 2-zenta-. ic) 1,'-e le 2-butano-Ltlene'cn. y-t.--pr'Q'pamn-t -e 11-emaiilt- e 2-pentanol, le 3-pe. tan. ol, 1s n-hexacl. le n-heptanol, le 2-heptanol, le n-octanal, le 2-cctanol, le cyclchexanol, le cyclcpentancl et le 2, 2-dimethyl-l, 3dinxolanne-4-m6thancl.
En particulier, le n-butanol, le 2-butancl. le cylohexanol, le n.-cctan. ol et le 2, 2-diis. ethyl-1, 3e 1-3 2, 2-d h 1, diQxolann. e-4-méthanol sont les alcools prefers.
Les lipases et les enzymes prGtolitiques agissent sur des substrats cppcses au pcit de vue enantioniere.
3n particulier, dans le melanxe enanticere de composés I et ent-I (R=methyle, ethyle). l'ensyse pancreatique, 1'ec-chyBLatrypsi. e. transesterifie l'ester ayant la configuration (2R, 3S) desiree, c'est-a-dire le compose I, alars que la lipase transesterifie l'enan. tiain. ere (2S, 3R), c'est-a-dire le copcse ent-1.
Le choix da l'agent de trasesterificaticn < alc==l) a utiliser dépend de la nature du groupemeni R (méthyle cu éthyle) dans le mélange en. an. tiemère de depart.
En fait, selen le praced faisant l'objet de l'inveiitia'n., seul un enantiomere est trasestérifie tandis qua l'autre dameure inchange.
En ccnseque'n. ce, pour separer l'ester transesterifie da celui neu transesterifie la fin de la reaction da --. L R=-. nethyle, c-a transesiarification., quad R=ethyle, cn peut utiliser tzus 18, 5 alccis i. diques ci-dessus, alors cue lorsque R=ethyle, cn peut utiliser tcu2 les hcmcicgues "-Cus las bLcmclc% Zues superieurs de l'ethancl. La reactian de
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transesterification est effectuee en mettant le nielange enantiomère du compose I e-c du compose enc (R=methyle. ethyle) en contact avec l'en¯-yme et avec l'alcool approprie.
Par ailleurs, l'enzyme peut etre immobi 1 i seesur des supports appropriés selon des techniques classiaues.
Des exemples des supports appropries sont les resines absorbantes, les polymeres de type acrylate. : es matériaux poreux, la gélose ou la Celite.
De preference, on utilise un autre solvant ou solange de sol vants appropriè comme par exemple l'hexane, le cyclohexane, le toluene, le benzène, la méthyléthylcetone, l'éther diéthylique. : la reaction. de transestérification est effectuee avec une lipase.
A la fin de la réaction de transesterification, les deux esters sont separés selon des techniques ccnnues.
On peut par exemple utiliser la cristallisation, la chromatographie ou l'extraction avec un solvant ou un melange de solvants approprié.
Des exemples des solvants appropries pour l'extraction sont l'hexane ou ses mélanges avec l'acétate d'éthyle, le méthanol et l'acétonitrile.
Les conditions de mise en oeuvre de la reaction de transestérification sont celles normalement utilisees pendant les réactions enzymatiques.
De telles conditions tiennent compte des intervalles de pH et de temperature dans lesquels chaque enzyme fonctionne.
En général, ces intervalles sont compris entre 6-11 unites de pH et entre O'C et 70 C respectivement.
De préférence, le procédé de la présente invention est mis en oeuvre ä un pH compris entre 6 et 8 et ä une température comprise entre 20 et 60*C.
A la fin du processus, les enzymes conservent la plus grande part de leur activité et elle peuvent donc être utilisées ä nouveau pour plusieurs cycles.
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De preference. an raison de la rande dispcnibilite 'sur le =arche a des prix faibles, cn u-ilise ians la prccede faisant l'bjet de la presen e inven* : in des lipases d'crig-ie ni'crbienne er en particulier des lipases prcvenant da Cadd cvnd-ac-e ou l'a-chysstrypsi.
Le procede faisant l'ooje de la prssene i'n. ven-icn permet de preparer lss compcses de fcrmule 1 avec da br-ns-3- une bcns rendemen et : un. e purete en. a. n. ticier elevee ei : de recuperer egaleen. l'énanticis. ere nan rechenhé.
11 as-c donc possible d'eifecuer sa racemisation cu inversicn de configuration pour augmenter las rendements globaux du procede.
En au-cre, l'enzyme uilisee conserve son acivite eny'ms.'cique et en ccnséquenc slls ? eut etrs u" : ilisee a 'n. c. uveau plusieurs fois.
Si en 1e desire, le ccspcse I peu etre en. c=re purifie par crisallisatian. A ce e'gard. eil a rcuve de z-i a- : rcu,-e de fan urpreate que, lorsque les compcses de fcrule 1 oin : un. rapport d'eiiaiitiameres d'au moins environ 30 : 20, leur cristallisaticn fournil des compc. =es I avec une purete enantiomere superieure et ceci est independant de la source du melange. En particulier. en pariat da 4 composés de formule I avec un rappcrt d'enantiomeres d'environ SO : 20, on obliegt par une simple cristallisation un rapport d'enanticnares de'35 : 5.
Les solvants convenant pcur la cristallisation sai les alcools Interieurs comme par exeple le metnanc:, l'éthane1, le propanol, le butancl.
C'est dcnc un autre but de la prasents inventin de fournir un precede permettant d'anelicrer la purete enantiomere d'esters de l'acide (2R, 3S)-3- (4méthcxyphényDglycidique ayant un rappcrt d'eanticeres d'au moins 80 : 20, cui csnsisa a critalli-ser ces esers avec un scivant apprcpri.
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Pour mieux illustrer la présente invention sans toutefois la limiter, on donne les exemples suivants.
Exemple 1 Transestérification de l'ester methylique de l'acide trans-3- (4-méthoxyphényl) glycidique racém1que avec de la lipase de Candida cylindracea et du n-butanol.
On dissout 10 g de l'ester methylique de l'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique racemique dans un melange constitue par 250 ml d'hexane et 60 ml de n-butanol.
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A cette solution, on ajoute 30 g de lipase de Candida cylindracea (SIGMA Chemical Co. Ltd. ; TYPE VII).
On laisse la suspension ä 25"C pendant 26 heures sous agitation magnétique.
On filtre ensuite la lipase et on évapore le solvant sous pression réduite.
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On obtient 10 g d'une huile qui ä l'analyse par HPLC (colonne Chiracell OD ; 250 me ; diamètre interne 4, 6 mm, 10 jim, Daicel Chemical Industries Ltd) se révele être constituée par 4, 94 g d'ester methylique d'acide trans- 3- (4-méthoxyphényl) glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R, 3S) : < 2S, 3R) =72 : 28 et par 3. 49 g d'ester butylique d'acide trans-3- (4-methoxyphenyl)- glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R, 3S) : (2S, 3R) =22 : 78
Le mélange ainsi obtenu constitué par les esters méthylique et butylique est séparé par chromatogrpahie sur gel de silice (éluant hexane : acétate d'éthyle=7 : 3).
On obtient ainsi 4, 3 g de l'ester méthylique de l'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R,3S) : (2S,#R) = 72:28 et 3, 1 g de l'ester butylique de l'acide trans-3- (4-methoxyphenyl)- glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R,3S):(2S,3R)=22:78.
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E :,-ez-n7z1-3 2 Exe : rrr : : : la 2 dp-la Transesterifiaicii de l'eer nethylique de l'acid 't : ra. s-3- < . 4-nie* ; h. c : xyphenyl) glycidique racemiue avec de la lipase de Cadjda cydracea et du n-butancl.
On effectue la reacticn d'ne lEanire siilaire a celle decrite dans l'exemple l mais en utiliss. n." : le quatites et ccnditions-suivantes : celle 2 g d'ester ehylique d'a. cide tr-a. . s-'3- < 4methoxvph. en. yDglycidique racenique - ', 6 da lipasa de Crdd yidrcea AjMLANO ? ha. r.
Cc. L-U'".) - 46 ml d'hexa. ne - 9 ml de n-butanol - temperature de 27*C Apres envirn 4, 5 h, le gelange aisi c-cen-u se révèle à l'analyse par HPLC e* : re coutiue ? ar 43% d'ester methylique d'acide tra : ls-3-C4-méthcxyphènyl) glycidique avec un rappcrt d'eiian." : io'mere-3 (2R, 3S) : (2S, 3R) =39 : 11 e-, par 57% d'eser bu-cyLique d'acide trans-3- (4-méthoxyphényl) glycidique avec uri. rapport d'énanticmeres (2R, 3S) : < 2S, 3R) =21 : 79 Exemple 3 Transesterification de l'eser methylique de l'acide trans-3- (4-ethcxyphenyl) glycidique raémiaue avec de la lipase de canwdA cy] snc-aces e- -u n-sutanclX Cn effectue la reacticn d'une maniere similaire ä cells décrite dans l'exemple l mais en utilisan" : les quanites e canditicns suivan." : 3s ; 0, 2 g d'eser nehylique de l'acide trans-3- (4Biéthoxyphényl) glycidique racemique (A. MANO Pharm.
- 0, 4Q g de lipase de Cadd cydrcaa (AMANO Phar.
Ca. Ltd.) - 0, ml d'hexane 0, 9 ml de n-buacl - temperature de 32*C
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Après environ 3, 5 heures, le melange ainsi obtenu se révèle ä l'analyse par HPLC être un mélange de 50% d'ester methylique d'acide trans-3-(4-methoxyphenyl)0 glycidique avec un rapport d'énaniomeres (2R,3S) : (2S,3R) = 72:28 et de 50% d'ester butylique d'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R,3S) : (2S,3R) = 30,6 : 69,4.
Exemple 4 Transestérification de l'ester méthylique de l'acide trans-3-(4-methoxyphényl)glycidique racémique avec de la lipase de Candida cylindracea et du n-butanol
On effectue la réaction d'une manière similaire à celle décri te dans l'exemple 3 mais en utilisant 4, 6 ml de cyclohexane a la place de l'hexane. Apres environ 3 h, le mélange ainsi obtenu se revele ä l'analyse par HPLC être constitué par 42,3% d'ester methylique d'acide trans-3- (4-méthoxyphenyl) glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R,3S) : (2S,3R) = 83,3 : 16,7 et par 57, 7% d'ester butylique d'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'énantiomeres (2R,3S):(2S,3R)=24,7:75,3.
Exemple 5 Transestérification de l'ester méthylique de l'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique racémique avec de la lipase de Candida cylindracea et du cyclohexanol
On effectue la réaction d'une : manière similaire a celle décrite dans l'exemple 1 mais en utilisant des substances et conditions suivantes : - 0, 2 g de l'ester méthylique de l'acide trans-3- (4- méthoxyphényl)glycidique racémique - 0,46 g de lipase de Candida cylindracea (AMANO Pharm.
Co. Ltd) - 4, 6 ml d'hexane - 0, 9 ml de cyclohexanol - température de 32*C
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Après enviroa 4,5 h, le mélange ainsi obtanu se révèle a. l'analyse par HPLC avcir un titre de @5% et être constitué par 48,6% d'ester methylique de l'acide
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tran. s-3- < 4-methcxyphenyl) glycidique avec un rappcr d'enanticmeres (2R, 3S) : (2S, 3R) =a7, 2 : i2. 3 e pa. r 51, 4- d'ester cyclchexylique de l'acide trans-3- (4- méthoxyphényl) glycidique.
On separe les esters méthylique et cyclchexylique par
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chromatographie sur cclon. ne de gel de ilice et l'n. cris1 : allise dans l'éthanal l'es'ter methylue (2R, 3S) : (2S, 3R) =37 : 13 pcur obteir l'ester ethylique de l'acide (2R, 38) -3- (4-methexyphényl) glyciique pur sur le plan enantiomere (exces d'eiiaiitioniere superieur a 99%), Exemple 6 Transestérif1catin de l'ester methylique de l'acide trans-3-(4-methoxyphényl)glycidique racemique avec de la lipase de Candida cylindracea et du (¯)2-butanol.
On effectue la réaction d'une maniére similaire à
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celle décrie dan. s l'exemple l mais on utilisant 0, 9 ml de (+) 2-butanol au lieu du cyclohexanol.
Après environ 9 h, le le ainsi cbtenu se revele ä l'analyse par HPLC avoir u itre de 79% et e- : re constitué de 62, 4% d'ester methylique d'acide trans-3- (4-méthoxyphényl) glycidique avec un rappcrt d'énantiomères (2R,3S) : (2S,3R) = 77:23 et de 37,6% d'ester 2-butylique de l'acide trans-3-(4-methoxyphényl)glycidique.
Exemple 7 transestérification de l'ester methylique de l'acide
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trans-3- (4-iaLethcxyphenyl) glycidique racáique avec de la lipase de Candd cy2ncrcea 6T du () 2-butanol. li-Dasi-a de ez r-u
On effectue la reaction. d'une manière similaire à celle decrite dans l'exemple l mais en u-cilisant les
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substancas et ccnditiaiis suivantes : - 2 g d'es-ar Esa-chylique d'acide trans-3- < 4mäthcxypheiiyDg'lycidique racesique
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- 2 g de lipase de Candida cylindracea (AMANO Pharm.
Co. Ltd.
- 25 ml de cyclohexane - 15 ml de () 2-butanal - temperature de 40 C.
Après environ 12 h, le melange ainsi obtenu se révele ä l'analyse par HPLC avoir un titre de 80% et être constitue de 70% de l'ester methylique de l'acide trans- 3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport
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d'énantiomeres (2R, 3S) : < 2S, 3R) =67, 6 : 32, 4 et de 30% d'ester 2-butylique d'acide trans-3-(4-methoxyphényl)glycidique.
Exemple 8 Transestérification de l'ester méthylique de l'acide trans-3-(4-methoxyphényl)glycidique racémique avec de la lipase de Candida cylindracea et du ( : t) 2-butanol dans une colonne.
On remplit une colonne chromatographique d'un diamètre interne de 2 cm avec un mélange constitue par 10 g de lipase de Candida cylindracea (AMANO Pharm. Co.
Ltd. ) et de 12, 6 g de Celite.
On élue la colonne avec une solution de (+52-butanoyl dans 200 ml de cyclohexane (rapport volumique 30 : 200) sous pression faible d'azote.
On fait percoler dans la colonne, toujours sous faible pression d'azote, une solution de 2 g d'ester methylique d'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique racémique dans 230 ml d'un mélange () 2- butanol : cyclohexane = 30 : 200 en rapport volumique.
L'eluat est réintroduit 7 fois dans la colonne.
A la fin, le melange ainsi obtenu est analysé par HPLC selon ce qui est décrit dans l'exemple 1.
Titre de 90% - 70% d'éther méthylique d'acide trans-3-(4- méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'enantiomeres (2R,3S) : (2S,3R) = 69, 7:30, 3
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- 30% d'ester 2-butylique d'acide trans-3- (4methoxyphenyDglycidique.
Exemple 9 Transeterification de fester methylique de l'acide 3-Vec trans-3- (4-methcxypheiiyl) glycidique racemicue avec de la lipase da C < and. : da eyJ'Ynd-race. a et du n-octanol On effectue : a réaction de la menie saniere que cells decrite dars l'exemule l mais en. utilisan les substances et conditicns suivantes : - 1 g d'e'3ter méthylicue de L'acide tr3. n. s-3- < 4mèthcxyphényl) glycidique racémiue - 3 g de lipase de Canda cydrace SIGXA Cheical Co.
Ltd. ; TYPE VII) - 40 ml d'hexane cl mol de methylethylcetone - 5 m1 de n-cctanol - temperature ce 24 C Après environ 30 ndnutes, le n. elan- ainsi cbtenu-se revele a l'analyse par HPLC etre ccstitue par ol, l d'ester méthylique d'acide trans-3- {4-méthcxyphenyl) glycidique avec un rappcrt d'en. a. n. ticiceres (2R, 3S) : (2S, 3R) =72 : 28 et par 33, 9% d'ester cctyLique d'acide trans-3- (4-méthcxyphenyl) glycidique avec un. rappcrt d'enan. tiomeres < 2R, 3S) : (2S, 3R) =19, 8 : 80, 2.
Exemple 10 Transestérificaticn de l'ester methylique de l'acide trans-3- (4-methoxyphényl) glycidique racémique avec da la lipase de Candida cy2ndrce et du 2, 2-dimethyl-l, 3dicxolanne-4-méthanol On effectue la reaction d'une Ban. ière similaire celle decrite dans l'exempla l mai er utilisant le substances et conditions suivantes. : - 0, 2 g d'ester methylique d'aeida tran. s-3- (4lEBthcxyphen. yDglycidique - 0, 46 g da lipase de Cjcid cy2drcea - 2 ml d'hexane
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- 2 ml d'éther diéthylique - 1 ml de 2, 2-dimethyl-1, 3-dioxolanne-4-méthanol - temperature de 26"C
Après environ 13, 5 h, le mélange ainsi obtenu se révèle à l'analyse par HPLC etre constitue par 76,9% d'ester méthylique d'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'enantiomères
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< : 2R, 3S) :
(2S, 3R) =ei. 5 : 38, 5 et par 23, 1% d'ester 2, 2diméthyl-1, 3-dioxolanne-4-méthylique d'acide trans-3- (4méthoxyphényl) glycidique.
Exemple 11 Transestérification de l'ester methylique de l'acide trans-3-(4-méthoxyphenyl)glycidique racémique avec de la lipase de Candida cylindracea et du 2,2-dimethyl-1,3- dioxolanne-4-méthanol
On effectue la réaction d'une manière similaire à celle décri te dans l'exemple 1 mais en utilisant les substances et les conditions suivantes :
- 0, 2 g d'ester méthylique d'acide trans-3- (4- méthoxyphényl)glycidique racémique - 0,46 g de lipase de Candida cylindracea - 4 ml de cyclohexane
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- 1, 5 ml de 2, 2-diméthyl-1, 3-dioxolanne-4-méthanol - température de 33*C
Apres environ 9, 5 heures, le melange ainsi obtenu se révèle à l'analyse par HPLC être constitue par 54, 4% d'ester methylique d'acide trans-3- (4-methoxyphenyl)- glycidique avec un rapport d'enantiomeres
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(2R, 3S) :
(2S, 3R) =72, 9 : 27, 1 et par 45, 6% d'ester 2, 2diméthyl-1, 3-dioxolanne-4-méthylique d'acide trans-3- (4méthoxyphényl) glycidique.
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Exemple 12
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Transesterifica'cicn. de l'ester methylique de l'acide 'rans-3- < '4- ethcxyphenyl) g'lycidique racemique avec de l'a-chymctrypsine et du n-bu'canol.
On dissout 10 g d'ester me'hylique de l'acide trans- 3- (4meT : hcxyphenyl) glycidique racemique dans 200 ml de n-butancl.
A cette solution, cn. ajoute 413 ml de tamcon de phosphate ä pH 7, 4 constitué pa. r une solution p d'hydroxyde de sodium 0, 1K et par une oLuticn de phosphate monopota3sique 0, 2X.
A la solution ainsi obtenue, on ajoute 9,2 # d'cc-chymotrypsine (SCLAVO S. p.A.).
On laisse le melange & 25"C pendant 4, 5 h scus agitation magnetique. On separe les phases et on extrait la phase aqueuse avec du chlorure de methylene
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(2 x 150 ml). On évapcre sous pression reduite les extraits organiques recueillis.
On obtient 10 g d'une huile qui, ä l'analyse par H. ? LC (colcnne Chiracell OD, 250 mm, diametre interne 4, # mm, 10 m. Daicel Chemical Industries Ltd.), se revele etre constituée par 4,8 g d'ester mthylique d'acide trans-3-
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(4-methoxyphenyl) glycidique avec un rappcr d'enan-ciomeres (2R, 3S) : < 2S, 3R) =30 : 70 eT. par 4, 44 g d'ester butylique d'acide trans-3- (4-methoxy ? henyl)glycidique avec un rappor-c d'enanticmeres (2R, 3S) : (2S, 3R) =77 : 23.
On separe le melange d'esters methylique et butylique par Chromatographie sur gel de silice (eluani : hexane : acetate d'éthyle=7 : 3).
On obtient ainsi 4, 7 g d'ester methylique d'acide trans-3-(4-méthoxyphényl)glycidique avec un rapport d'énantiomères (2R,3S) : (2S,3R) = 30:70 et 4,03 g d'ester butylique d'acide trans-3-(4-méth@xyphényl)glycidique avec un rapper-t d'énantiomères (2R,3S) : (2S,3R) = 78:22.