AT315374B - Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons - Google Patents

Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons

Info

Publication number
AT315374B
AT315374B AT785172A AT785172A AT315374B AT 315374 B AT315374 B AT 315374B AT 785172 A AT785172 A AT 785172A AT 785172 A AT785172 A AT 785172A AT 315374 B AT315374 B AT 315374B
Authority
AT
Austria
Prior art keywords
sep
violamycin
antibiotic
aglycone
culture
Prior art date
Application number
AT785172A
Other languages
English (en)
Inventor
Werner Fleck
Dietrich Strauss
Wolfgang Koch
Peter Kramer
Helmut Prauser
Original Assignee
Dl Veb Jenapharm
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dl Veb Jenapharm filed Critical Dl Veb Jenapharm
Priority to AT785172A priority Critical patent/AT315374B/de
Application granted granted Critical
Publication of AT315374B publication Critical patent/AT315374B/de

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C17/00—Preparation of halogenated hydrocarbons
    • C07C17/093—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens
    • C07C17/16—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens of hydroxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C17/00—Preparation of halogenated hydrocarbons
    • C07C17/093—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens
    • C07C17/20—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens of halogen atoms by other halogen atoms
    • C07C17/202—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens of halogen atoms by other halogen atoms two or more compounds being involved in the reaction
    • C07C17/208—Preparation of halogenated hydrocarbons by replacement by halogens of halogen atoms by other halogen atoms two or more compounds being involved in the reaction the other compound being MX
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C245/00—Compounds containing chains of at least two nitrogen atoms with at least one nitrogen-to-nitrogen multiple bond
    • C07C245/12—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom
    • C07C245/14—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom having diazo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/56—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds from heterocyclic compounds
    • C07C45/57—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds from heterocyclic compounds with oxygen as the only heteroatom
    • C07C45/58—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds from heterocyclic compounds with oxygen as the only heteroatom in three-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/52—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen
    • C07C57/58—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/52—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen
    • C07C57/58—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings
    • C07C57/60—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen containing six-membered aromatic rings having unsaturation outside the rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/64—Acyl halides
    • C07C57/76—Acyl halides containing halogen outside the carbonyl halide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/56—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/48—Compounds containing oxirane rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/32—Oxygen atoms
    • C07D307/33—Oxygen atoms in position 2, the oxygen atom being in its keto or unsubstituted enol form
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5407—Acyclic saturated phosphonium compounds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description


   <Desc/Clms Page number 1> 
 



   Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung eines bisher unbekannten Pigmentantibioticums mit cancerostatischer, virostatischer und insbesondere mit neuartiger und überraschender Wirksamkeit gegen verschiedeneErreger von Mycoplasma-Infektionen, das als Violamycin bezeichnet wird. Gegen Tumorkrankheiten und durch Viren hervorgerufene Krankheiten bei Mensch und Nutztier gibt es nur wenige bzw. unzureichende Mittel. 



   Es ist ein Nachteil, dass die gegen Mycoplasma-Erkrankungen eingesetzten Chemotherapeutica keine bakterizide Wirkung auf die Erreger zeigen. 



   Zweck der Erfindung ist die Herstellung eines Heilmittels gegen Tumor-, Virus- und Mycoplasma-Krankheiten. 



   Ihr liegt die Aufgabe zugrunde, ein geeignetes Herstellungsverfahren anzugeben. 



   Es wurde gefunden, dass in den Fermentationslösungen des Stammes IMET JA 6844 ein für die Therapie von neoplastischen, viralen und insbesondere durch Mycoplasme hervorgerufenen Erkrankungen geeignetes neues Antibioticum, das als Violamycin bezeichnet wurde, in guter Ausbeute gebildet wird und unter den im folgenden beschriebenen Verfahrensbedingungen isoliert werden kann. 



   Der Mikroorganismus zur Gewinnung des Violamycins ist in der Stammsammlung des Zentralinstituts für Mikrobiologie und experimentelle Therapie, Jena, der Deutschen Akademie der Wissenschaften zu Berlin unter der Stammsammlungs-Nummer IMET JA 6844 hinterlegt. Der Wildtyp des Bildners wurde 1958 aus einer Erdprobe von derSchwellenburg beiElxleben (Erfurt) isoliert. Der Stamm gehört zur Gattung Streptomyces und entspricht der Diagnose von Streptomyces violaceus (Rossi-Doria 1891,   Kraszilnikov   1941, Waksman 1953), wie sie nach Untersuchung des Neo-Typ-Stammes ISP 5082   (= INMI-1,   RIA 656, ATCC 15888) im Internationalen
Streptomyces Project von Shirling und Gottlieb   (Int. J. syst. Bact. 19 : 497 [1969])   gegeben wird.

   Der Stamm hat folgende Merkmale : Das Substratmycel ist auf den verschiedenen Medien und zu verschiedenen Zeiten rot, violett oder blau gefärbt. Das Pigment, das auch in die Agar-Medien diffundieren kann, hat Indikatoreigen- schaften : sauer-rot, alkalisch-blau. Das Luftmycel ist blassrosa, rosa oder graurosa gefärbt. Die Sporenket- ten sind in mehr oder weniger regelmässigen, meist offenen Spiralen an zum Teil langen Haupthyphen ange- ordnet. Die Sporenoberfläche ist stachelig. Auf Pepton bzw. Tyrosin-halogen Medien diffundiert ein braunes bis blauschwarzes Pigment in den Agar. Der Stamm wächst auf Basalmedium mit Zusatz von   D-Glucose,     L-Arabinose,   D-Xylose, m-Inosit, D-Mannit, D-Fructose, Rhamnose, Saccharose und Raffinose. 



   Das erfindungsgemässe Verfahren besteht darin, dass unter aeroben Kulturbedingungen in einem flüssigen
Nährmedium mit entsprechenden Kohlenstoff- und Stickstoffquellen sowie Mineralsalzen der Streptomyces violaceus-Stamm IMET JA 6844 oder seine Mutanten und Varianten gezüchtet werden. Die Züchtung wird in geeigneten Nährmedien bei einer Temperatur von 25 bis   37 C   während 2 bis 6 Tagen unter Belüftung und Rührung   durchgeführt. Nach Abtrennen des Mycels   aus der Kulturlösung wird das Antibioticum Violamycin mit organischen Lösungsmitteln aus dem Kulturfiltrat und Mycel extrahiert.

   Die Extrakte werden bis zur wässerigen
Phase konzentriert, und aus den Rohkonzentraten wird das Antibioticum erneut in die organische Phase überführt und aus den Extraktkonzentraten durch Ausfällen mit einer Fraktion niedrigsiedender Kohlenwasserstoffe gewonnen und durch geeignete chromatographische Verfahren gereinigt. 



   Die Kultivierung des Stammes IMET JA 6844 sowie seiner Mutanten und Varianten erfolgt unter aeroben Bedingungen. An Erde lyophil getrocknetes Sporenmaterial des Stammes wird in geeignete Agarnährböden und nachfolgend in flüssige, vorher sterilisierte   Nährmedien   geimpft und das entstehende Mycel wird in an sich bekannter Weise bei einer Temperatur zwischen 25 und   370C   (vorzugsweise 28 C) über einen Zeitraum von 2 bis 6 Tagen (vorzugsweise 4 Tagen) bei einer Acidität, die zu Beginn des Fermentationsprozesses zwischen PH 6, 2   7. 0   und am Ende zwischen PH 7, 5 und 8, 4 liegt, kultiviert. Das Nährmedium besteht aus Kohlenstoff- und Stickstoffquellen sowie aus anorganischen Salzen. Als Kohlenstoffquellen können Stärke, Glucose, Glycerin, Mannit, Dextrin, Saccharose, Sojaöl und Sojamehl verwendet werden.

   Als Stickstoffquellen können ausser den oben erwähnten stickstoffhaltigen Substraten auch Trockenhefe, Fleischpepton und Casein in Frage kommen. 



   Gute   Fermentationsergebnisse   können bei Zusatz von Mineralsalzen erzielt werden. Letztere begünstigen den Verlauf der Fermentation je nach dem verwendeten Nährmedium. In komplexen Medien, die verschiedene Mehle enthalten, haben sich Zusätze von Kalziumkarbonat, Na-Phosphat bzw. K-Phosphat als vorteilhaft erwiesen. Die Fermentation des Bildners kann in Steilbrustflaschen und Rundkolben verschiedenen Inhalts, im Glasfermenter sowie in V2A-Tanks durchgeführt werden. 



   Die Isolierung des Pigment-Antibioticums Violamycin wird in der Weise durchgeführt, dass das Antibioticum aus dem Kulturfiltrat mit organischen, mit Wasser nicht oder wenig mischbaren, und aus dem Mycel mit organischen, mit Wasser mischbaren Lösungsmittel extrahiert, nach Konzentrieren der Extrakte in die wässerige 
 EMI1.1 
 Wasser nicht mischbaren Lösungsmitteln erneut extrahiert und aus den Extraktkonzentraten durch Versetzen mit Petroläther oder Benzin unter Rühren ausgefällt, vom Lösungsmittel durch Filtration befreit in Chloroform gelöst, vom unlöslichen Rückstand filtriert, die Lösung mit Wasser gewaschen, erneut konzentriert und durch Versetzen mit Petroläther die Fraktion A gefällt und in niederen Alkoholen gelöst,

   säulenchromatographisch gereinigt und in den biologisch inaktiven Chromophor Violamycinon A und den biologisch aktiven Antibiotica- 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 
 EMI2.1 
 

 <Desc/Clms Page number 3> 

 mitTabelle 1 
 EMI3.1 
 
<tb> 
<tb> Testorganismus <SEP> Minimale <SEP> Hemmkonzentration
<tb> bakteriostatisch <SEP> (y/ml) <SEP> bakterizid <SEP> y/ml
<tb> Violamycin <SEP> Violamycin
<tb> AB <SEP> AB <SEP> 
<tb> Mycoplasma
<tb> gallisepticum
<tb> Stamm <SEP> S <SEP> 6 <SEP> 0, <SEP> 03 <SEP> 0, <SEP> 15 <SEP> 0,76 <SEP> 0, <SEP> 76 <SEP> 
<tb> Mycoplasma
<tb> hyperhinis <SEP> 0, <SEP> 15 <SEP> 0, <SEP> 15 <SEP> 19, <SEP> 0 <SEP> 0, <SEP> 76 <SEP> 
<tb> 
 
Die in Tabelle 1 aufgeführten Resultate zeigen, dass Violamycin A gegen M.

   gallisepticum (Stamm S 6) stärker bakteriostatisch wirksam ist als Violamycin B, dafür aber Violamycin B eine stärkere bakterizide Aktivität gegen   M :   hyperhinis entfaltet als Violamycin A. Beide Violamycine unterscheidensich von den bisher bekannten Naturstoffen mit Wirksamkeit gegen Mycophasmen durch ihre mehrhundertfach stärkere bakterizide Wirkung. Eine derartige biologische Aktivität gegen Vertreter der Mycoplasmen, die bei Nutztieren Krankheitssymptome hervorrufen können, ist bisher für Anthracyclin-Antibiotica nicht beschrieben und überraschend. 



   Das neue Antibioticum Violamycin und seine Derivate können als potentielle Chemotherapeutica gegen Mycoplasmen-Erkrankungen von Mensch und Nutztier, gegen Tumor- sowie Viruskrankheiten eingesetztwerden. 



    Die folgenden Beispiele dienen dazu, die Erfindung zu erläutern, ohne sie hierauf zu beschränken. 



  Beispiel l : Zwei 500 cm@-Steilbrustflaschen enthalten je 80 cm des folgenden Vorzuchtmediums :    
 EMI3.2 
 
<tb> 
<tb> Glucose <SEP> 1, <SEP> 5 <SEP> 0/0 <SEP> 
<tb> Sojamehl <SEP> 1, <SEP> 5 <SEP> % <SEP> 
<tb> Na-Chlorid <SEP> 0, <SEP> 5 <SEP> 0/0 <SEP> 
<tb> Ca- <SEP> Karbonat <SEP> 0, <SEP> 1 <SEP> 0/0 <SEP> 
<tb> primäres <SEP> K-Phosphat <SEP> 0, <SEP> 030/0
<tb> in <SEP> Leitungswasser.
<tb> 
 



   Sterilisation : 35 min bei 110 C. Nach Sterilisation liegt die Acidität bei PH   6, 3.   



   Jede Steilbrustflasche wird mit einer Sporen- und Mycelsuspension beimpft, welche mit steriler, isotonischer Kochsalzlösung von einer im Reagenzglas auf folgendem Anzucht-Nährboden gezüchteten, 10 bis 14 Tage alten Kultur des Violamycin-Bildners hergestellt wird : 
 EMI3.3 
 
<tb> 
<tb> Hafermehl <SEP> 10/0
<tb> Haferflocken, <SEP> gemahlen <SEP> 1%
<tb> Agar-Agar <SEP> 2%
<tb> in <SEP> Leitungswasser.
<tb> 
 



   Sterilisation : 35 min bei 120 C, natursauer. 



   Die beimpften Vorzuchtkulturen werden 48 h bei   28 C   auf einem Schüttgerät mit einer Frequenz von   180 Umdr/min bebrütet. 8 cm3 einer so bebrüteten Vorzuchtkultur dienen zur Beimpfung von 500 cm3-Steilbrustflaschen, die je 80 cm3 des folgenden Produktions-Mediums enthalten :    
 EMI3.4 
 
<tb> 
<tb> Glucose <SEP> 2. <SEP> CJ1/o <SEP> 
<tb> Sojamehl <SEP> 2, <SEP> CJ1/o <SEP> 
<tb> Na-Chlorid <SEP> 0, <SEP> ff'/o <SEP> 
<tb> Ca-Karbonat <SEP> 0.3%
<tb> in <SEP> Leitungswasser.
<tb> 
 



   Sterilisation : 35 min bei 115 C. Die   Acidität   beträgt nach Sterilisation PH 6, 3. Die Temperatur während der Fermentation liegt bei   280C   und die Schüttelfrequenz bei 180 Umdr/min. 



    Nach 72stündiger Fermentation wird der höchste Gehalt an Violamycin erreicht (125 y/cm3). Die AktivitätsbestimmungerfolgtmitHilfeeiner Reihe bekannter undneuer mikrobiologischerAgardiffusions-Testverfahren.    

 <Desc/Clms Page number 4> 

 



  Bei letzteren dient die Hemmwirkung des Violamycins auf die Vermehrung bakterieller Viren in ihren Wirtszellen als Massstab für die Aktivität des Antibioticums (Flock, W. 1968, Allg. Mikrobiol. 8 (2), 139). 



     Beispiel 2 :   Man verfährt wie in Beispiel 1 mit dem Unterschied, dass das Produktionsmedium folgende Zusammensetzung hat : 
 EMI4.1 
 
<tb> 
<tb> Glucose <SEP> 1 <SEP> 0/0 <SEP> 
<tb> Stärke <SEP> 1 <SEP> 0/0
<tb> Sojamehl <SEP> 1 <SEP> 0/0
<tb> Bäckerhefe <SEP> 0, <SEP> 5 <SEP> 
<tb> Na-Chlorid <SEP> 0, <SEP> 510
<tb> Ca-Karbonat <SEP> 0, <SEP> 310 <SEP> 
<tb> in <SEP> Leitungswasser.
<tb> 
 



   Sterilisation : 40 min bei 116 C. Die Acidität liegt nach dem Sterilisieren bei PH 6, 2. Der höchste Gehalt an Violamycin wird nach 90 h erreicht (100   y /cm3).   



   Beispiel 3 : Mit einer Kultur des Violamycin-Bildners von einem festen Nährboden, wie im Beispiel 1 beschrieben, beimpft man 80 cm3 des im Beispiel 1   angeführten   flüssigen Vorzucht-Mediums, welches in einer 
 EMI4.2 
 einer Schüttelfrequenz von 180 Umdr/min, ehe die so erhaltenen 400 cm3 Kulturbrühe zur Beimpfung von 20   l   des im Beispiel 1 beschriebenen   Produktionsmediums   dienen. Letzteres ist in einem 32   1-Glasfermenter   ent- 
 EMI4.3 
 auf PH 5, 0 eingestellt und nach Separieren des Mycels werden 18   l   Kulturfiltrat erhalten. Der Butanolextrakt des Kulturfiltrates wird im Vakuum auf 1 : 10 des Ausgangsvolumens eingeengt und mit dem Butanolextrakt des Mycelextraktkonzentrates vereinigt. Zuvor wird das Mycel mit Methanol zweimal im Verhältnis 1 : 6 ausgerührt.

   Die vereinigten Extrakte werden unter vermindertem Druck bis auf 1/20 des Methanolvolumens eingeengt und die dabei entstehende   wässerige Lösung   wird mit Butanol erschöpfend extrahiert. Die vereinten Butanolextrakte werden zusammen mit dem Butanolextrakt des Kulturfiltrates auf 1/25 des Kulturlösungsvolumens ge-   bracht. Aus dem Endkonzentrat   werden unter Zufügen des 3fachen Volumens an Petroläther 300 g biologisch aktives Rohprodukt (A 6844) pro m3 Kulturlösung erhalten. 



   B e i s p i e l 4: Das Verfahren unterscheidetsich von demjenigen des Beispiels 3 dadurch, dass der ViolamycinBildner nach Vorzucht in einem 2 1-Glaskolben anstatt in einem 32   1-Glasfermenter   in einem 400 1-V2A-Tank überimpft wird, der das im Beispiel 1 beschriebene Produktionsmedium   enthält. DieRührgeschwindigkeitbeträgt   280 Umdr/min und die Luftzufuhr wird auf 400 l/min eingestellt. 



   Aus 300 1 Kulturlösung werden nach dem in Beispiel 3 beschriebenen Verfahren 300 g Rohprodukt A 6844/m 3 gewonnen. Das Rohprodukt A 6844 wird für die Gewinnung der biologisch aktiven Komplexe Violamycin A und B benutzt. 



     Beispiel 5 :   200 g Rohprodukt A   6844 werden in   5   l   Chloroform suspendiert und nach   1stündigem   Rühren wird die Lösung vom unlöslichen Rückstand abgetrennt. Die Chloroformlösung wird 5-bis 6mal mit der Hälfte des Volumens Wasser gewaschen und dadurch von wasserlöslichen Pigmenten vollständig befreit. Nach dem Trocknen wird die Chloroformlösung unter vermindertem Druck auf 1/50   desAusgangsvolumens   konzentriert und mit der 10fachen Menge an Petroläther verrührt. Dabei fällt die biologisch aktive Violamycin-Fraktion A aus. Die Fraktion A wird abfiltriert, mit reinem Petroläther gewaschen und unter vermindertem Druck im Exsikkator über konz. Schwefelsäure getrocknet. Die Ausbeute an Fraktion A beträgt 16 g. 



   Die Violamycin-Fraktion A wird säulenchromatographisch in das Antibioticum Violamycin A und den biologisch inaktivenChromophorkomplex Violamycin A getrennt. Aus 10 g Violamycin-Fraktion A werden 5 g Violamycin A erhalten. 



   Die Violamycin-Fraktion B ist aus dem Waschwasser des Chloroformextraktes nach Einstellen der Acidität auf pH 8, 5 durch Butanolextraktion zu gewinnen. Nach Konzentrieren der Butanolextrakte und nach deren Verrühren mit Petroläther wird der entstehende Niederschlag abfiltriert und getrocknet. Die Ausbeute an ViolamycinFraktion B beträgt 25 g pro 200 g Rohprodukt A 6844. 



   Die Fraktion B lässt sich analog zu Fraktion A in das Antibioticum Violamycin B und den biologisch inaktivenChromophorkomplex Violamycinon B trennen. Aus 10 g der Fraktion B werden 9, 5 g des Antibioticums Violamycin B erhalten. 

 <Desc/Clms Page number 5> 

 



  Literatur 
 EMI5.1 
 
<tb> 
<tb> Bekannte <SEP> Antibiotica <SEP> Dazugehörige <SEP> Literatur
<tb> der <SEP> Anthracyclinreihe <SEP> Chromophore
<tb> Rhodomycin <SEP> A <SEP> ss-Rhodomycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 84 <SEP> [1951], <SEP> S.700
<tb> Rhodomycin <SEP> B <SEP> ss-Rhodomycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 88 <SEP> [1955], <SEP> S. <SEP> 1455 <SEP> 
<tb> Isorhodomycin <SEP> A <SEP> ss-Isorhodomycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 98 <SEP> [1965], <SEP> S. <SEP> 3145 <SEP> 
<tb> Isorhodomycin <SEP> B <SEP> ss-Isorhodomycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> :

   <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 98 <SEP> [1965], <SEP> S. <SEP> 3145 <SEP> 
<tb> y-Rhodomycin <SEP> I, <SEP> n, <SEP> III, <SEP> IV <SEP> y-Rhodomycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Natwiss. <SEP> Bd. <SEP> 48 <SEP> [1961]. <SEP> 8. <SEP> 717 <SEP> 
<tb> y-Isorhodomycin <SEP> y-Isorhodomycinon <SEP> Bowio <SEP> u. <SEP> Johnson <SEP> : <SEP> J. <SEP> chem.
<tb> 



  Soc. <SEP> (London) <SEP> [1964], <SEP> S. <SEP> 3927 <SEP> 
<tb> Pyrromycin <SEP> e-Pyrromycinon <SEP> Brockmann <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 92 <SEP> [1959], <SEP> S. <SEP> 1904 <SEP> 
<tb> Cinerubin <SEP> A <SEP> e-Pyrromycinon <SEP> Ettlinger <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 92 <SEP> [1959], <SEP> S.1867
<tb> Cinerubin <SEP> B <SEP> #-Pyrromycinon <SEP> Ettlinger <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Chem. <SEP> Ber. <SEP> Bd. <SEP> 92 <SEP> [1959], <SEP> S. <SEP> 1867 <SEP> 
<tb> Rutilantin <SEP> e-Pyrromycinon <SEP> QMis <SEP> u. <SEP> Sutherland <SEP> : <SEP> 
<tb> Tetrahedron <SEP> Letters <SEP> 1959
<tb> Mycetin <SEP> unsicher <SEP> Jakubov <SEP> et <SEP> al. <SEP> : <SEP> 
<tb> Antibiotiki <SEP> Bd.8 <SEP> [1965], <SEP> S.771
<tb> Violarin <SEP> unsicher <SEP> Soleveva <SEP> :

   <SEP> 
<tb> (Vaccinocidin) <SEP> Antibiotiki <SEP> Bd. <SEP> 9 <SEP> [1964], <SEP> S. <SEP> 596
<tb> Germanova <SEP> : <SEP> 
<tb> AntibiotikiBd. <SEP> 9 <SEP> [1964], <SEP> S. <SEP> 997 <SEP> 
<tb> 
 
Es ist darüber hinaus ausgeschlossen worden, dass die von   R. Hütter in"Systematik   der Streptomyceten unter   besonderer Berücksichtigung der von ihnen gebildeten Antibiotika", BibliothecaMicrobiologica, Fase. 6,   S. Karger AG-Basel 1967, angeführten Antibiotica aus Str. violaceus mit Violamycin identisch sind. 



   Brit. Patentschrift Nr. 708, 749.

Claims (1)

  1. PATENTANSPRUCH : Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines-Aglycons durch Züchtung eines Streptomyceten unter aeroben Kulturbedingungen in einem flüssigen Nährmedium mit entsprechenden KohlenStoff- und Stickstoffquellen sowie Mineralsalzen, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t, dass Streptomyces violaceus IMET JA 6844 oder seine Mutanten und Varianten eingesetzt werden, die Züchtung in geeigneten Nährmedien bei Temperaturen von 25 bis 370C während 2 bis 6 Tagen unter Belüftung und Rührung durchgeführtwird, das gebildete Antibioticum durch Extraktion aus dem Kulturfiltrat und dem Mycel gewonnen, gereinigt und in seine Komponenten getrennt wird.
AT785172A 1972-09-05 1972-09-13 Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons AT315374B (de)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT785172A AT315374B (de) 1972-09-05 1972-09-13 Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2243554A DE2243554A1 (de) 1972-09-05 1972-09-05 Antibiotikum violamycin, dessen aglycon sowie verfahren zu ihrer herstellung
AT785172A AT315374B (de) 1972-09-05 1972-09-13 Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons

Publications (1)

Publication Number Publication Date
AT315374B true AT315374B (de) 1974-05-27

Family

ID=5855528

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
AT785172A AT315374B (de) 1972-09-05 1972-09-13 Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons

Country Status (7)

Country Link
AT (1) AT315374B (de)
CS (1) CS171514B1 (de)
DE (1) DE2243554A1 (de)
DK (1) DK140899B (de)
FI (1) FI50965C (de)
NO (1) NO137904C (de)
SU (1) SU663724A1 (de)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI119993B (fi) 2007-07-13 2009-05-29 Matti Jaervinen Suksivoide ja voidepinnoite

Also Published As

Publication number Publication date
FI50965C (fi) 1976-09-10
FI50965B (de) 1976-05-31
DE2243554A1 (de) 1974-03-14
NO137904B (no) 1978-02-06
SU663724A1 (ru) 1979-05-25
DK140899C (de) 1980-05-19
DK140899B (da) 1979-12-03
NO137904C (no) 1978-05-16
CS171514B1 (en) 1976-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2839668C2 (de)
DE2336811C2 (de) Antibiotikum A-2315, Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung
AT315374B (de) Verfahren zur Gewinnung des neuen Antibioticums Violamycin sowie seines Aglycons
CH634853A5 (de) Schwefelhaltige metabolite, ihre herstellung und verwendung in arznei- und futtermitteln.
DE2817113A1 (de) Hydroxynovobiocinartige verbindungen und verfahren zu ihrer herstellung
AT285817B (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen antibiotischen Komplexes
CH581189A5 (en) Antibiotic violamycin - with antitumour, virucidal and antimycoplasma activity
AT266316B (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotikums
AT200258B (de) Verfahren zur Herstellung neuer Antibiotika
DE1467761A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines Antibiotikums
AT221228B (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotikums
DE939397C (de) Verfahren zur Herstellung und Gewinnung eines Produktes mit antiviraler Aktivitaet
DE2035655A1 (de) Janiemycin und Verfahren zu seiner Herstellung
CH655109A5 (de) Physiologisch aktive substanzen ss 12538, verfahren zu deren herstellung und neuer, diese substanzen produzierender mikroorganismus.
DE1492137C (de) Verfahren zur Herstellung von Oxy tetracyclin auf biologischem Weg
DE1792589A1 (de) Antibiotikum Tetramycin
AT200259B (de) Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotikums
AT267056B (de) Verfahren zur Gewinnung eines Gemisches neuer Antibiotika
AT341081B (de) Verfahren zur herstellung von neuen antibiotika oder eines synergistischen antibiotischen gemisches derselben
DE834582C (de) Verfahren zur Herstellung eines Antibiotikums
EP0022425A2 (de) Antibiotika, Verfahren und Zwischenprodukte zu deren Herstellung und deren Verwendung als pharmazeutische Präparate
DE2608337A1 (de) Neue organische verbindung, ihre herstellung und verwendung
DE1037069B (de) Herstellung des Antibiotikums E-129
CH632009A5 (en) Process for the preparation of a novel antibiotic
DE1138510B (de) Herstellung und Gewinnung des Antibiotikums Rufomycin

Legal Events

Date Code Title Description
A1Z Withdrawn