WO2022107942A1 - 자외선 및 미세먼지 차단용 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents

자외선 및 미세먼지 차단용 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDF

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WO2022107942A1
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신영상
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Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition containing an extract of Shanghai mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom, and a method for preparing the same, and to a cosmetic composition for protecting skin from fine dust and ultraviolet rays.
  • the skin is the primary protective organ that prevents the harm of external factors that impair the homeostasis of our body. In other words, although it performs external chemical, physical, and biological barrier functions, it is damaged because it is in contact with various environmental factors.
  • Major external stress factors include ultraviolet rays, fine dust, yellow dust, and sudden changes in temperature and humidity.
  • Fine dust is considered to be the biggest harmful factor to health. Fine dust enters the body not only through the respiratory system but also through the skin. Fine dust containing heavy metals and environmental hormones breaks down the skin barrier and penetrates into the body. In addition, fine dust with a diameter of 0.01 mm can easily pass through pores with a diameter of 2 to 5 times.
  • the fine dust passed in this way can cause an inflammatory reaction and damage the skin barrier, exacerbating dry skin and atopic dermatitis.
  • PAH attached to fine dust can increase the number of pigment spots on the face by proliferating melanocytes.
  • PAHs polycyclic aromatic hydrocarbons
  • VOCs volatile organic compounds
  • Aldehydes aldehydes
  • HAPs hazardous air pollutants
  • AHR aryl hydrocarbon receptor
  • AHRR AHR-repressor
  • PAHs such as Benzo[ ⁇ ]pyrene, an AHR activator
  • UVAs can cause goat acne, pigmentation, keratosis, skin cancer, and exacerbate autoimmune diseases.
  • Korean Patent Publication No. 10-1873218 Holy basil, peppermint, and neem extract mixture containing extracts of neem as an active ingredient, skin irritation and skin irritation caused by fine dust.
  • a composition for alleviating inflammation and the like are disclosed.
  • Sanghwang mushroom is also called woody mud mushroom, and it is registered under the name of Sangmoki ( ⁇ ) in Donguibogam. It is known for its excellent anticancer effect. It is grown in large quantities as a valuable medicinal material in Korea. It has a clear, pure taste and is excellent for eating. In addition, in relation to antioxidant efficacy, it has been reported that it exhibits superior efficacy than existing antioxidants in suppressing the generation of free radicals that are harmful to the human body to prevent skin aging. In addition, shiitake mushrooms and oyster mushrooms have also been reported to have anticancer effects. In the present invention, it was reported that these compound mushrooms have a stronger anti-fine dust and skin protection effect from ultraviolet rays.
  • Korean Patent Registration No. 10-2018883 discloses 'a cosmetic raw material composition containing fermented bokbunja by mycelium of Sangha mushroom and a functional cosmetic composition comprising the same'
  • Korean Patent Registration No. 10-1677362 discloses Sanghwang mushroom A cosmetic composition containing a fermented product of the extract is disclosed.
  • the present inventors conducted research to discover domestic native plant materials for protecting the skin from fine dust, and finally selected Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom through the primary screening. Extracts prepared by subcritical extraction after ultra-high pressure pre-treatment of these mushroom complexes greatly enhance the inhibitory effect of melanin induced by ultraviolet rays and fine dust, and also improve skin hyperpigmentation, inhibit skin cell damage, and enhance skin barrier activity. It was confirmed that the present invention was completed.
  • the present invention provides a composition for inhibiting damage to skin cells by fine dust by regulating the expression level of a specific gene in skin cells damaged by fine dust to a normal level.
  • the present invention inhibits skin melanin production due to ultraviolet rays and fine dust, improves skin hyperpigmentation, strengthens skin barrier and increases moisturizing power. provided for a different purpose.
  • the cosmetic composition that protects the skin from fine dust and ultraviolet rays according to the present invention and exhibits a skin protection effect such as an excellent melanin suppression effect is characterized in that it comprises a shiitake mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom extract.
  • Sanghwang mushroom, shiitake mushroom, and oyster mushroom extract according to the present invention are safe as they are manufactured from natural materials, and have excellent skin hyperpigmentation improvement activity due to fine dust and ultraviolet rays, so as to improve skin hyperpigmentation and strengthen skin barrier It can be usefully used as a cosmetic for
  • One aspect of the present invention for achieving the above object is to provide a cosmetic composition for skin protection against fine dust and ultraviolet rays, comprising the extract of shiitake mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom.
  • the Sangha mushroom of the present invention all of the Sanghwang mushroom belonging to the genus Muddy mushroom of the Pine scale mushroom family can be used. It is preferable to use wild-caught Sanghwang mushroom, and it is particularly preferable to use wild-caught Sanghwang mushroom that is native to Korea.
  • all shiitake mushrooms belonging to the genus oyster mushroom and pine mushroom genus can be used. It is preferable to use wild shiitake mushrooms, and it is particularly preferable to use wild shiitake mushrooms that are native to Korea.
  • oyster mushroom all oyster mushrooms belonging to the basidiomycetes pleuridium oysteraceae can be used. It is preferable to use wild oyster mushrooms, and it is particularly preferable to use wild oyster mushrooms that are native to Korea.
  • the extraction method and conditions of the natural extract are not particularly limited, and well-known techniques may be appropriately used for the preparation of the extract.
  • the extraction method there may be mentioned a solution obtained by extraction from a natural material using hot water extraction, reflux extraction, etc., but is not limited thereto, and a filtration process for removing solids after extraction may be further performed.
  • the extraction temperature and extraction time are not significantly limited, and in the case of the extraction temperature, a temperature sufficient to minimize the destruction of nutrients is good, and examples thereof include 30 to 70° C. and 0.1 to 10 hours. However, this is only described as a specific example, and the present invention is not limited thereto.
  • a supercritical extract is prepared for the preparation of such extracts of Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom.
  • the Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom are dried and then pulverized to prepare a powder.
  • polyhydric alcohols such as isopropyl alcohol, propylene glycol and butylene glycol can be used, and 1,3-butylene glycol and ethanol are mixed in the same mass ratio and stirred to form a single phase, which is then cosolvent. It is preferable to use it as
  • the supercritical fluid extraction used in the present invention can be carried out by a conventional method using carbon dioxide, and specifically, it is preferably carried out as follows.
  • the crushed mushrooms and cosolvent are mixed and stirred.
  • the mixing ratio is the most excellent in terms of yield to use the crushed mushroom and the cosolvent in a mass ratio of 1:2.5 to 6.5, preferably in a mass ratio of 1:4.
  • the mixture is put into a supercritical extraction tank, carbon dioxide is supplied to the extraction tank using a high-pressure gas pump, and then the pressure is increased.
  • the temperature inside the extraction tank is raised to 40° C. and maintained.
  • the extract is discharged using a pressure regulator attached to the outlet side.
  • a pressure regulator By controlling the temperature of the pressure regulator, carbon dioxide is transferred to solid dry ice due to the pressure and temperature drop of the discharge, thereby preventing the clogging of the tube at the final outlet.
  • this temperature about 60 degreeC is preferable.
  • the released extract is decompressed to atmospheric pressure to separate carbon dioxide and mushroom extract, carbon dioxide is released into the atmosphere, and the mushroom extract is recovered. The above process may be repeated several times to increase the yield of the extract.
  • the genes in skin cells affected by the expression level of fine dust include IL1B (NM_000576), IL-36G (NM_019618), S100A7 (NM_002963), LCE3D (NM_032563) , PTGS2 (NM_000963), XDH (NM_000379), and the like. Therefore, if the expression level of these genes is controlled to a normal level, damage to skin cells can be suppressed.
  • the genes whose expression level is increased by fine dust used in the present invention are as follows [Table 1].
  • Name means genebank accession ID of NCBI
  • Gene Symbol means official gene symbol
  • Gene title means the name of each gene.
  • Analysis of the expression level of the gene or protein is performed by microarray, PCR, NGS (Nest Generation Sequencing), Western blot, Northern blot, ELISA, radioimmunoassay, radioimmunodiffusion method, tissue immunostaining, immunoprecipitation assay, etc. It can be analyzed using a variety of analytical methods known in the art.
  • the cosmetic composition for anti-fine dust of the present invention is an external skin ointment, cream, softening lotion, nourishing lotion, pack, essence, hair tonic, shampoo, conditioner, hair conditioner, hair treatment, gel, skin lotion, skin softener, skin toner , Astringent, Lotion, Milk Lotion, Moisture Lotion, Nourishing Lotion, Massage Cream, Nourishing Cream, Eye Cream, Moisture Cream, Hand Cream, Foundation, Nourishing Essence, Sunscreen, Soap, Cleansing Foam, Cleansing Lotion, Cleansing Cream, Body Lotion And it may have a formulation selected from the group consisting of a body cleanser, but is not limited thereto.
  • the composition of each of these formulations may contain various bases and additives necessary and appropriate for the formulation of the formulation, and the types and amounts of these components can be easily selected by those skilled in the art.
  • the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, vegetable fiber, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc acid may be used as a carrier component.
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component.
  • a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 ,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan.
  • the formulation of the present invention is a suspension
  • a carrier component water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.
  • a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.
  • the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent
  • Ether sulfate, alkylamidobetaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, linolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like may be used.
  • the present invention relates to a cosmetic comprising the anti-fine dust cosmetic composition.
  • the mushroom and cosolvent mixture was put into a supercritical extraction tank having an internal volume of 1.5 L, and the extraction tank was sealed. After supplying carbon dioxide to the extraction tank using a high-pressure gas pump and increasing the pressure, the supply of carbon dioxide was stopped when the pressure in the extraction tank reached 300 atmospheres. Using a PID temperature controller, the temperature inside the extraction tank was raised to 40° C. at a rate of 0.5/min using a hot wire wrapped around the outside of the extraction tank. The pressure of the extraction tank due to the temperature rise was maintained at 300 atmospheres while partially discharging carbon dioxide using a pressure regulator attached to the outlet of the extraction tank.
  • the temperature and pressure of the extraction tank were maintained at 40° C. and 300 atmospheres for 30 minutes.
  • the high-pressure gas pump was restarted and carbon dioxide was continuously supplied to the extraction tank at a flow rate of 12 L/min.
  • the extract was released using a pressure regulator attached to the outlet, and the temperature of the pressure regulator was maintained at 60°C.
  • the released extract was reduced to atmospheric pressure to separate carbon dioxide and mushroom extract, and carbon dioxide was released into the atmosphere.
  • the separated mushroom extract was recovered using a glass collector.
  • the B16F10 cell line was cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS, and inoculated at a cell concentration of 2 ⁇ 104 in 96 well plates, respectively, and cultured at 37°C in a 5% CO2 incubator for 24 hours. After incubation, the medium was removed, the plate was put in a UV irradiator (BLX-312, Vilber Lourmal, France), and ultraviolet rays were irradiated with a light intensity of 30 mJ/cm2 using a UV lamp, and fine dust was treated at a concentration of 50 ⁇ g/ml.
  • BLX-312 BLX-312, Vilber Lourmal, France
  • B16F10 cells were inoculated into a 24 well plate at a cell concentration of 4 ⁇ 105, respectively, and cultured at 37°C in a 5% CO2 incubator for 24 hours. After culture, the medium was removed and washed once with PBS (phosphate buffered saline), and 1 ml of PBS was added to each well. The plate was placed in a UV irradiator, and UV light was irradiated using a UV lamp at a light intensity of 30 mJ/cm2, and fine dust was treated at a concentration of 50 ⁇ g/ml. Preparations and Examples of the present invention were added to the medium at 1% and 2%, respectively, and the cells were treated and then cultured for 72 hours. As a positive control, arbutin was used and the sample was replaced once daily.
  • PBS phosphate buffered saline
  • the Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom extract showed better melanin production inhibitory efficacy compared to the Sanghwang mushroom, shiitake mushroom, and oyster mushroom alone.
  • B16F10 cells were incubated in 24 wells to check the mRNA expression inhibitory effect of MC1R, a UV receptor related to melanin production, and AhR, a fine dust receptor known to be induced by environmental toxic substances, polycyclic aromatic hydrocarbons, and bacteria under UV irradiation and fine dust treatment conditions.
  • MC1R a UV receptor related to melanin production
  • AhR a fine dust receptor known to be induced by environmental toxic substances, polycyclic aromatic hydrocarbons, and bacteria under UV irradiation and fine dust treatment conditions.
  • Each plate was inoculated at a cell concentration of 3 ⁇ 106 and cultured for 24 hours at 37°C in a 5% CO2 incubator. After incubation, the medium was removed, washed once with phosphate buffered saline (PBS), and 1 ml of PBS was added to each well.
  • PBS phosphate buffered saline
  • the plate was placed in a UV irradiator, and ultraviolet rays were irradiated with a light quantity of 30 mJ/cm2 using a UV lamp, and fine dust was treated at a concentration of 50 ⁇ g/ml.
  • the extracts of Preparation Examples and Examples were added to the medium at 1% and 2%, respectively, and the cells were treated and then cultured for 24 hours.
  • B16F10 cells were recovered using Trizol reagent (invitrogen, USA), mRNA was extracted, and cDNA was synthesized through a series of processes.
  • the MC1R and AhR gene regions were amplified from the synthesized cDNA and the gene expression level was confirmed through electrophoresis.
  • the gene amplification was performed using a thermal cycler (GenePro, Hangzhou bioer tech., CHINA), 10x taq polymerase buffer, 10 mM dNTP, After mixing 10 pmol primer and taq polymerase, add distilled water to adjust to 50 ⁇ l, 95°C 5 minutes 1 cycle/95°C 1 minute/51°C 2 minutes/72°C 1 minute 28 cycles Amplification, reaction conditions at 72°C for 5 minutes was performed with Each primer sequence is shown in Table 5. MC1R and AhR expression levels were corrected by dividing the expression levels by each ⁇ -actin expression level, and the results are shown in Table 6 below.
  • MC1R F CCT CTG CCT CAA GGG TGC TG R: TCA ACA GTG GAG CTG AGG ACG AhR F: GGT GCC TGC TGG ATA ATT CAT CTG R: TCG TCC TTC TTC ATC CGT CAG TG ⁇ -Actin F: TGG AAT CCT GTG GCA TCC ATG AAA R: TAAA ACG CAG CTC AGT AAC AGT CCG
  • the extracts of Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom effectively inhibited the increase in mRNA expression of MC1R and AhR caused by ultraviolet light and fine dust in the B16F10 cell line, compared to the extract alone.
  • the extracts from Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom showed superior mRNA regulation effect on MC1R and AHR compared to the control group, suppressing skin hyperpigmentation caused by ultraviolet rays and fine dust, and alleviating toxins from heavy metal-derived reactions. could check
  • Hyaluronic acid is a glycoside-type high molecular compound with a molecular weight of 200,000 to 400,000. It is synthesized mainly by hyaluronic acid synthase (HAS) of keratinocytes and fibroblasts and accumulated in the extracellular matrix. , a decrease in HA causes skin aging such as wrinkle formation, atrophy of the epidermis, a decrease in the number of skin bonds, and a decrease in skin elasticity.
  • HAS hyaluronic acid synthase
  • Example 1 Example 2
  • Example 3 Example 4
  • Example 5 Example 6
  • Example 7 EGCG 10 ⁇ g/mL 198 99.3 100 143.1 120.1 108.1 106.3 123.2 122.1 105.1 105.6 250 150.2 122.2 110.2 108.1 126.3 125.3 107.2 500 153.2 125.3 112.8 110.7 129.2 128.2 110.8
  • the hyaluronic acid production amount of the Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom extract increased by 53.9 ng/mL compared to the control group (C, control; 99.3ng/mL) at the concentration of 500 ⁇ g/mL, and the control group EGCG showed an increase rate of 6.3 ng/mL at 10 ⁇ g/mL.
  • Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom extract showed an increase in the production of high hyaluronic acid (HA), confirming the excellent effect of Sanghwang mushroom, shiitake mushroom and oyster mushroom.
  • HA hyaluronic acid

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Abstract

본 발명에 따른 미세먼지 및 자외선에 의한 피부손상 케어용 조성물은 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 포함하고, 천연성분을 주성분으로 하여 피부에 자극을 주지 않으면서도 미세먼지 및 자외선으로 인한 피부 자극 및 중금속 피해를 완화할 수 있는 효과가 있으며, 피부를 보호 할 수 있는 효과가 있다.

Description

자외선 및 미세먼지 차단용 조성물 및 이의 제조 방법
본 발명은 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 함유하는 화장료 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것으로, 미세먼지 및 자외선으로부터 피부를 보호하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 우리 몸의 항상성을 저해하는 외부 요인의 위해를 막아주는 일차적인 보호기관이다. 즉, 외부의 화학적, 물리적, 생물학적 장벽기능을 수행하고 있으나 다양한 환경적 요인과 접촉하고 있기 때문에 손상을 받게 된다. 외부의 주요 스트레스 요인으로는 자외선, 미세먼지, 황사, 급격한 온도 및 습도 변화 등을 들 수 있다.
최근 미세먼지는 건강에 가장 큰 유해요인으로 여겨지고 있다. 미세먼지는 호흡기뿐만 아니라 피부를 통해서도 몸 속에 침입한다. 중금속, 환경호르몬 등을 함유한 미세먼지는 이 같은 피부장벽을 무너뜨리고 체내에 침투한다. 또한, 지름이 0.01㎜ 안팎인 미세먼지는 지름이 2~5배인 모공도 손쉽게 통과한다.
이렇게 통과된 미세먼지는 염증반응을 일으키고 피부장벽에 손상을 주어 피부건조 및 아토피피부염을 악화시킬 수 있다. 또한 미세먼지에 붙은 PAH가 멜라닌세포를 증식시켜 얼굴에 색소반점을 증가시킬 수 있다.
뿐만 아니라 대기 중 미세먼지 내 유기성분들을 포함한 탄소 입자는 미세먼지 질량 농도의 20-90%를 차지하고 있는 주요 구성요소인데, 이 중 다환방향족탄화수소류(PAHs), 휘발성유기화합물(VOCs), 알데하이드류(Aldehydes) 3가지가 주로 대기오염물질 중 인체에 독성이 강한 것으로 알려져 있다. 이 중 특히 PAHs는 19세기 후반 석탄 사업장 노동자들에 대한 높은 피부암 발병률이 밝혀진 이후 현재까지 유해대기오염물질(HAPs: hazardous air pollutants)의 중요한 지표이다. 피부세포에서 aryl hydrocarbon receptor(AHR)와 AHR-repressor(AHRR)의 발현은 장벽 기관과 피부 세포에서 두드러지게 높은데, AHR의 역할로는 xenobiotic metabolizing enzymes(XME)의 유도를 조절하고, 상피 장벽의 수용력을 강화시키며, 발달 및 기능에 관여한다. PAH의 피부독성에 관한 보고는 그들이 강력한 AHR 리간드임을 발견한 것보다 훨씬 전에 발표되었다. 인체에서 AHR 활성제인 Benzo[α]pyrene과 같은 PAHs가 피부에 노출되면 염소좌창, 색소 침착, 각화증, 피부암을 유발할 수 있으며 자가 면역 질환을 악화시킬 수 있다.
이에 따라 최근 미세먼지 차단, 미세먼지 클렌징 등의 보호 효과가 있는 ‘안티폴루션’ 화장품의 사용이 급증하고 있다. 특히 천연물 소재의 다양한 생리활성 기능에 많은 관심을 가지게 되면서 기능성 제품의 원료로 천연물을 사용하고 있다.
식물 추출물을 이용하는 항미세먼지용 화장료 조성물 기술로는, 국내의 경우 대한민국 등록특허공보 제10-1873218호「홀리바질, 박하, 님나무 추출 혼합물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지에 의한 피부자극 및 피부염증 완화용 조성물」등이 개시되어 있다.
상황버섯은 일명 목질진흙버섯으로 불리우며, 동의보감에서는 상목이(桑木耳)라는 이름으로 등록되어 있는데 항암효과가 뛰어난 것으로 알려져 있으며, 귀중한 약재로서 한국에서 대량으로 재배되는데 약용하기 위해 달이면 노란색이거나 연한 노란색으로 맑게 나타나며, 맛이 순수하고 담백하여 식용에도 탁월하다. 또한 항산화 효능과 관련하여 인체에 유해한 Free Radical의 생성을 억제하는데 있어서 기존 항산화제보다 탁월한 효능을 발휘하여 피부노화를 방지하는 것으로 보고된 바 있다. 또한 표고버섯 및 느타리버섯 역시 항암효과가 있는 것으로 보고된 바 있는데 본 발명에서는 이들의 복합 버섯류가 더욱 강력한 항미세먼지 및 자외선으로부터의 피부 보호 효과가 있는 것을 보고하게 되었다.
종래, 대한민국 등록특허 제10-2018883호에는 '상황버섯 균사체에 의한 복분자 발효물을 포함하는 화장품 원료 조성물 및 이를 포함하는 기능성 화장료 조성물'이 개시되어 있으며, 대한민국 등록특허 제10-1677362호에는 상황버섯 추출물의 발효물을 함유하는 화장료 조성물이 개시되어 있다.
본 발명자들은 미세먼지로부터 피부를 보호하기 위한 국내 자생 식물소재를 발굴하고자 연구를 진행하였으며, 1차 스크리닝을 통해 최종적으로 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯을 선택하였다. 이들 버섯 복합류를 초고압 전처리한 후 아임계 추출하여 제조되는 추출물은 자외선 및 미세먼지로 유발된 멜라닌의 억제 효과가 크게 증진되고, 또한 피부 과색소침착 개선, 피부세포 손상 억제, 피부장벽 강화 활성이 나타나는 것을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯을 추출하여 제조한 상황버섯 외 버섯 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 일 측면에서, 미세먼지에 의해 손상된 피부 세포에서 특정 유전자의 발현량을 정상 수준으로 조절함으로써, 미세먼지에 의한 피부 세포의 손상을 억제하는 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 일 측면에서, 자외선 및 미세먼지로 인한 피부 멜라닌 생성을 억제하며, 피부 과색소침착 개선, 피부장벽 강화 및 보습력 증가 활성이 우수한 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.
본 발명에 따른 미세먼지 및 자외선으로부터 피부를 보호하여 우수한 멜라닌 억제 효과 등의 피부보호효과를 나타내는 화장료 조성물은 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물은 천연소재로 제조되어 안전하며, 미세먼지 및 자외선에 의한 피부 과색소침착(hyperpigmentation) 개선 활성이 우수하여 피부 과색소침착 개선용, 피부장벽 강화용 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 포함하는, 미세먼지 및 자외선에 대한 피부보호용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 상황버섯으로는, 소나무 비늘 버섯과의 진흙버섯속에 속하는 모든 상황버섯을 사용할 수 있다. 자연산 상황버섯을 사용하는 것이 바람직하고, 한국 내에 자생하는 자연산 상황 버섯을 사용하는 것이 특히 바람직하다.
표고버섯은 주름버섯속 느타리버섯과 잣버섯속에 속하는 모든 표고버섯을 사용할 수 있다. 자연산 표고버섯을 사용하는 것이 바람직하고, 한국 내에 자생하는 자연산 표고버섯을 사용하는 것이 특히 바람직하다.
느타리버섯은 담자균류 주름버섯목 느타리과에 속하는 모든 느타리버섯을 사용할 수 있다. 자연산 나타리버섯을 사용하는 것이 바람직하고, 한국 내에 자생하는 자연산 느타리버섯을 사용하는 것이 특히 바람직하다.
상기 천연 추출물의 추출 방법 및 조건은 크게 제한되지 않으며, 추출물의 제조를 위하여는 공지 기술을 적절히 사용해도 무방하다. 추출 방법의 일 예로, 열수추출, 환류추출 등을 이용하여 천연재료로부터 추출하여 얻은 용액을 들 수 있으나, 이에 제한되지 않음은 물론이며, 추출 후 고형물 제거를 위한 여과 과정을 더 거칠 수 있다. 추출 온도 및 추출 시간도 크게 제한되지 않고, 추출 온도의 경우 영양 성분의 파괴를 최소화할 수 있을 정도의 온도가 좋으며, 일 예로 30 내지 70℃ 및 0.1 내지 10 시간을 들 수 있다. 하지만 이는 구체적인 일 예로서 설명된 것일 뿐, 본 발명이 이에 제한되어 해석되는 것은 아니다.
또 다른 일례로 본 발명에서는 이러한 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물의 제조를 위하여 초임계 추출물을 제조한다.
초임계 추출물을 제조하기 위해서는, 먼저 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯을 건조시킨 후 분쇄하여 분말로 제조한다.
추출용매로는, 이소프로필알콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜 등의 다가 알콜류를 사용할 수 있으며, 1,3-부틸렌글리콜과 에탄올을 같은 질량비로 혼합한 후 교반하여 단일상이 되도록 하고 이를 공용매로 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 사용되는 초임계 유체 추출은 이산화탄소를 이용한 통상적인 방법으로 실시할 수 있으며, 구체적으로 다음과 같이 실시하는 것이 바람직하다.
분쇄된 버섯과 공용매를 혼합하여 교반한다. 혼합비율은 분쇄된 버섯과 공용매를 1:2.5~6.5의 질량비이며, 바람직하게는 1:4의 질량비로 사용하는 것이 수율 면에서 가장 우수하다. 이어서, 이 혼합물을 초임계 추출조에 투입하고, 고압용 기체펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급한 후 압력을 높인다. 이어서, 추출조 내부의 온도를 40℃ 까지 승온시키고 이를 유지시킨다. 그리고 나서, 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하면서, 출구 쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물을 방출시킨다. 압력조절기의 온도를 조절하여, 방출물의 압력 및 온도강하로 인해 이산화탄소가 고체 드라이아이스로 전이되어 최종 출구쪽의 튜브가 막히는 현상을 방지한다. 이 온도는 60℃ 정도가 바람직하다. 방출된 추출물은 상압으로 감압되어 이산화탄소와 버섯 추출물이 분리되며, 이산화탄소는 대기로 방출되고 버섯 추출물은 회수된다. 추출물의 수율을 높이기 위해 상기 과정을 수회 반복할 수 있다.
상기와 같이 제조된, 본 발명에 따른 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 초임계 추출물은, 화장수, 영양화장수, 영양크림, 에센스, 팩, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 마사지 크림 등의 피부탄력, 주름개선 및 미백 관련 화장료에 첨가할 수 있으며, 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20.0 중량%로 첨가하는 것이 바람직하다. 0.01 중량% 미만이면 효능이 지나치게 미미하고, 20.0 중량% 초과이면 화장료로서의 사용감이 떨어져 로션 등의 묽은 제품에는 사용하기에 부적합하다.
이하 실시예 및 비교예, 제조예, 시험예는 본 발명을 더욱 상세하게 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.
발명의 효과에 있어서는 일 측면에서 구체적으로, 본 발명에서 미세먼지에 의해 발현량이 영향을 받는 피부 세포 내 유전자로는 IL1B(NM_000576), IL-36G(NM_019618), S100A7(NM_002963), LCE3D(NM_032563), PTGS2(NM_000963), XDH(NM_000379) 등을 포함한다. 따라서 이들 유전자의 발현량을 억제하여 정상 수준으로 조절한다면 피부 세포의 손상을 억제할 수 있다.
본 발명에서 사용되는, 미세먼지에 의해 발현량이 증가되는 유전자는 아래 와 같은데[표 1], 이들 표에서 Name은 NCBI의 genebank accession ID를 의미하는 것이고, Gene Symbol은 공식 유전자 심볼을 의미하며, Gene title은 각 유전자의 이름을 의미한다.
증가유전자
Name GeneSymbol Gene title
NM_002963 S100A7 S100 calcium binding protein A7
NM_032563 LCE3D late cornified envelope 3D
NM_019618 IL36G interleukin 36, gamma
NM_000576 IL1B interleukin 1, beta
NM_000963 PTGS2 Cyclooxygenase-2 (COX-2)
NM_000379 XDH XDH xanthine dehydrogenase
상기 유전자 또는 단백질의 발현량 분석은 마이크로어레이, PCR, NGS(Nest Generation Sequencing; 차세대 염기서열분석), 웨스턴 블럿, 노던 블럿, ELISA, 방사선 면역 분석, 방사 면역 확산법, 조직면역 염색, 면역침전분석법 등 당업계에 공지된 다양한 분석 방법을 이용하여 분석될 수 있다.
본 발명의 항미세먼지용 화장료 조성물은 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 항미세먼지 화장료 조성물을 포함하는 화장품에 관한 것이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예만으로 한정되는 것은 아니다.
[실시예1~7]
(자연산 상황버섯, 표고버섯, 및 느타리버섯의 초임계 추출물의 제조)
자연산 상황버섯으로서, 한반도 지역에서 자생한 목질 진흙버섯(P. linteus) 또는 낙엽진흙버섯(P. pini), 자연산 표고버섯 및 느타리버섯을 햇빛이 쪼이지 않는 서늘한 곳에서 중량의 변화가 없을 때까지 건조시킨 후, 동량 혼합하여 기계적인 방법으로 직경 1cm 이하의 크기로 분쇄하였다. 또한, 1,3-부틸렌글리콜과 에탄올을 같은 질량비율로 혼합한 후 교반시켜 단일상의 공용매를 제조하였다.
분쇄된 버섯과 공용매를 1:4의 질량비로 혼합하여 30분간 교반시킨 후, 버섯과 공용매 혼합물을 내부 용적 1.5ℓ의 초임계 추출조에 투입하고 추출조를 밀봉하였다. 고압용 기체펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급하고 압력을 높인 뒤, 추출조의 압력이 300기압에 달하면 이산화탄소의 공급을 중단하였다. PID 온도제어기를 이용하여 추출조 외부를 감싸고 있는 열선을 이용하여 추출조 내부의 온도를 0.5 /min 속도로 40℃ 까지 승온시켰다. 승온으로 인한 추출조의 압력은 추출조의 출구에 부착된 압력조절기를 이용하여 이산화탄소를 일부 배출하며 압력을 300기압으로 유지시켰다. 또한, 추출조의 온도와 압력을 40℃, 300기압으로 30분간 유지시켰다. 고압용 기체 펌프를 재가동하여 12ℓ/min의 유량으로 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하였다. 동시에 출구쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물을 방출시키되, 압력조절기의 온도를 60℃로 유지시켰다. 방출된 추출물은 상압으로 감압되어 이산화탄소와 버섯 추출물이 분리되었고 이산화탄소는 대기로 방출되었다. 분리된 버섯 추출물을 유리 포집기를 이용하여 회수하였다. 상기 공정 중, 추출조 내부의 온도를 0.5 ℃/min 속도로 40℃까지 승온시키는 공정으로부터 분리된 버섯 추출물을 회수하는 공정까지를 수회 반복하여 10시간 동안 수행 후, 추출을 종료하고, 얻어진 추출물을 시료로 사용하였다(S1).상황버섯(S2), 표고버섯(S3), 느타리버섯(S4)을 단독 또는 상황+표고(S5), 상황+느타리(S6)로 제조한 것은 괄호안에 기재된 것과 같다(표 2).
상황버섯 표고버섯 느타리버섯
실시예 1 ○ ○ ○
실시예 2 ○ - -
실시예 3 - ○ -
실시예 4 - - ○
실시예 5 ○ ○ -
실시예 6 ○ - ○
실시예 7 - ○ ○
[실험예 1] 자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서의 세포독성 여부 확인
세포 독성 여부를 확인하기 위해 B16F10 세포주를 10% FBS를 첨가한 DMEM 배지에 배양하였으며, 96 well plate에 각각 2×104의 세포 농도로 접종하여 37℃ 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 UV 조사기(BLX-312, Vilber Lourmal, France) 안에 plate를 넣고 UV lamp를 이용하여 30 mJ/cm2의 광량으로 자외선을 조사하였으며, 미세먼지를 50 μg/ml의 농도로 처리하였다. 미세먼지는 디메틸설폭시드에 희석하여 사용하였다(Urban particulate matter NIST SRM 1648a, Sigma-Aldrich, USA). 상기 실시예에서 제조한 시료를 농도가 0.1, 1.0 또는 2.0%가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 처리하여 24시간 배양한 후에 3-[4,5-dimethylthiazol-2yl]-2,5-diphenyltetrazoliumboromide (MTT, Sigma, USA) 용액을 각 well에 100 ㎖씩 첨가한 후 (3 ㎎/㎖) 4시간 동안 더 배양하였다. 이후 상층액을 제거하고, 150 ㎕의 디메틸설폭시드를 첨가한 후, 30분간 shaking하여 생성된 formazan을 녹여 multimicroplate reader(Molecular device Spectra max190)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기의 표 3에 나타내었다.
구분 세포생존률 (%)
B16F10
0.5 % 1.0 % 2.0 %
자외선/미세먼지 × 123 129 125
대조군(자외선/미세먼지 ○) 100 100 100
실시예 1 101 100 101
실시예 2 100 101 102
실시예 3 98 98 96
실시예 4 99 100 99
실시예 5 100 99 98
실시예 6 101 99 99
실시예 7 98 99 96
상기 표 3의 결과에서 보는 바와 같이, 자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 적용한 시료는 모든 농도에서 모두 95% 이상의 세포생존율을 나타냄에 따라 B16F10의 세포 독성에는 영향을 미치지 않는 것을 확인하였다.
[실험예 2]자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서의 멜라닌 생성 저해 여부 확인
자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서의 멜라닌 생성 억제 효능을 확인해보기 위해 B16F10 세포를 24 well plate에 각각 4×105의 세포 농도로 접종하여 37℃ 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 PBS(phosphate buffered saline)으로 1회 세척한 후, PBS를 각 well에 1 ml 씩 넣었다. UV 조사기 안에 plate를 넣고 UV lamp를 이용하여 30mJ/cm2의 광량으로 자외선을 조사하였으며, 미세먼지를 50 μg/ml의 농도로 처리하였다. 본 발명 의 제조예 및 실시예를 각각 1% 및 2%로 배지에 첨가하여 세포에 처리한 후 72시간 동안 배양하였다. 양성 대조군으로는 arbutin을 사용하였으며 샘플은 매일 1회 교체하였다.
멜라닌 생성률을 확인하기 위해 배지를 제거하고 세포를 PBS로 1회 세척하였다. 이후 1 N의 NaOH를 각 well에 500 μl 씩 첨가하고 30분간 shaking하여 생성된 멜라닌을 녹여 multimicroplate reader를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 하기의 표 4에 나타내었다.
구분 멜라닌 생성률 (%)
B16F10
1.0% 2.0 %
자외선/미세먼지 × 49
대조군(자외선/미세먼지 ○) 100
실시예 1 62 58
실시예 2 76 72
실시예 3 93 91
실시예 4 95 96
실시예 5 73 69
실시예 6 77 69
실시예 7 89 85
상기 표 4의 결과에서 보는 바와 같이, 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물 은 상황버섯, 표고버섯, 느타리버섯 단독과 비교하여 더 우수한 멜라닌 생성 억제 효능을 나타내었다.
이는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물의 경우 단독의 경우에 비하여 자외선과 미세먼지로 인해 발생하는 피부 과색소침착(hyperpigmentation)을 개선하는 효과가 우수하다는 것을 나타낸다.
[실험예 3] 자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서의 멜라닌 생성 관련 MC1R 및 중금속 독성완화 관련 AhR mRNA 발현 억제 여부 확인
자외선 조사 및 미세먼지 처리 조건에서 멜라닌 생성과 관련된 자외선 수용체인 MC1R과 환경 독성 물질이나 다환 방향족탄화수소, 박테리아 등에 의하여 유도된다고 알려진 미세먼지 수용체인 AhR의 mRNA 발현 억제 효능을 확인해보기 위해 B16F10 세포를 24 well plate에 각각 3×106의 세포 농도로 접종하여 37℃ 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 phosphate buffered saline(PBS)으로 1회 세척한 후 PBS를 각 well에 1 ml 씩 넣었다. UV 조사기 안에 plate를 넣고 UV lamp를 이용하여 30 mJ/cm2의 광량으로 자외선을 조사하였으며, 미세먼지를 50 μg/ml의 농도로 처리하였다. 상기 제조예 및 실시예의 추출물을 각각 1% 및 2%로 배지에 첨가하여 세포에 처리한 후 24시간 동안 배양하였다.
이후 Trizol reagent(invitrogen, USA)를 이용하여 B16F10 세포를 회수하여 mRNA를 추출하여 일련의 과정을 거쳐 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA로부터 MC1R 및 AhR 유전자 부위를 증폭시켜 전기영동을 통해 유전자 발현량을 확인하였으며, 유전자 증폭은 thermal cycler (GenePro, Hangzhou bioer tech., CHINA)를 사용하여 10x taq polymerase buffer, 10 mM dNTP, 10 pmol primer , taq polymerase를 혼합하고 증류수를 더하여 50 μl로 조정 후 95℃ 5분 1 cycle/95℃ 1분/51℃ 2분/72℃ 1분 28 cycle 증폭, 72℃에서 5분간 반응하는 조건으로 수행하였다. 각각의 primer sequence는 표 5에 나타내었다. MC1R와 AhR 발현량은 각각의 β-actin 발현량으로 나누어 그 값을 보정하였으며, 그 결과는 하기의 표 6에 나타내었다.
Gene Sequence (5'→3')
MC1R F: CCT CTG CCT CAA GGG TGC TG
R: TCA ACA GTG GAG CTG AGG ACG
AhR F: GGT GCC TGC TGG ATA ATT CAT CTG
R: TCG TCC TTC TTC ATC CGT CAG TG
β-Actin F: TGG AAT CCT GTG GCA TCC ATG AAA
R: TAAA ACG CAG CTC AGT AAC AGT CCG
구분 mRNA 발현량
MC1R / β-actin AhR / β-actin
1.0 % 2.0 % 1.0 % 2.0 %
자외선/미세먼지 × 1.00
대조군(자외선/미세먼지 ○) 5.56 3.23
실시예 1 4.53 3.95 2.81 2.53
실시예 2 5.17 4.54 3.12 2.98
실시예 3 5.43 5.34 3.18 3.11
실시예 4 5.45 5.32 3.21 3.10
실시예 5 5.03 4.84 3.00 2.85
실시예 6 5.02 4.76 3.03 2.81
실시예 7 5.33 5.22 3.10 3.02
상기 표 6의 결과에서 보는 바와 같이, 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물은 단독 추출물과 비교해 볼 때, B16F10 세포주에서 자외선과 미세먼지에 의한 MC1R 및 AhR의 mRNA 발현 증가를 효과적으로 억제하였다. 결과적으로, 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물은 대조군과 비교 시, MC1R 및 AHR에 대한 mRNA 조절 효과가 우수하여, 자외선과 미세먼지로 인한 피부 과색소 침착억제 및 중금속 유래반응의 독소완화 효과를 확인할 수 있었다.
[실험예 4]Hyaluronic acid 생성량 확인
Hyaluronic acid(HA)는 분자량이 20-40만에 이르는 배당체 형태의 고분자화합물로써 주로 각질형성세포(keratinocyte) 및 섬유아세포(fibroblast)의 hyaluronic acid synthase(HAS)에 의하여 합성되어 세포외기질에 축적되며, HA의 감소는 주름형성, 표피의 위축, 피부 결합수 감소, 피부의 탄력 저하 등 피부노화의 원인이 된다.
Keratinocyte인 HaCaT에서 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물이 hyaluronic acid(HA) 생성량을 증가하는지 확인하기 위해 ELISA kit로 측정하였고, 그 결과는 표 7와 같다. 표 7에서 N(normal)은 BP(Benzo[α]pyrene) 미자극 그룹이고, C(control)은 BP(Benzo[α]pyrene) 자극 그룹이다.
N C 구분 (μg/mL) 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 실시예 6 실시예 7 EGCG 10μg/mL
198 99.3 100 143.1 120.1 108.1 106.3 123.2 122.1 105.1 105.6
250 150.2 122.2 110.2 108.1 126.3 125.3 107.2
500 153.2 125.3 112.8 110.7 129.2 128.2 110.8
표 7에서 확인할 수 있듯이, 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물은 hyaluronic acid의 생성량을 500 μg/mL 농도에서 대조군 대비(C, control;99.3ng/mL) 53.9 ng/mL 증가하였으며, 대조군인 EGCG는 10μg/mL의 경우 6.3ng/mL의 증가율을 보였다.
결과적으로, 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물은 높은 Hyaluronic acid(HA) 생성의 증가를 보여 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯의 우수한 효과를 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (8)

  1. 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 포함하며, 미세먼지 및 자외선에 의한 피부손상 케어용 조성물.
  2. 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 포함하며, 미세먼지 및 자외선에 의한 피부손상 케어용 화장료 조성물.
  3. 상황버섯, 표고버섯 추출물을 포함하며, 미세먼지 및 자외선에 의한 피부손상 케어용 조성물.
  4. 상황버섯, 느타리버섯 추출물을 포함하며, 미세먼지 및 자외선에 의한 피부손상 케어용 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항에 있어서, 상기 추출물은 조성물 전체 중량 중 0.001 내지 5 중량%로 포함되는 피부손상 케어용 조성물.
  6. A)상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯을 또는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯에 추출용매를 가한 것을 비닐 파우치에 넣어 밀봉하고 40~50℃, 60~80 MPa 조건의 물로 100~120분 동안 가압 처리하는 초고압 전처리 단계;
    (B)추출용매를 가하여 120~200℃, 압력 0.1~15 MPa의 조건에서 10~30분간 추출하는 아임계 추출 단계;
    (C)여과하는 단계를 포함하는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물의 제조방법
  7. 제6항에 있어서, 상기 (A) 또는 (B)단계에서 추출용매로는 물, 탄소수 1 내지 4의 무수알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드, 디메치콘, 미네랄오일, 사이클로메치콘, 옥틸도데칸올, 세틸에칠헥사노에이트, 트리에칠헥사노인, 이소프로필미리스테이트 및 식물성 오일로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 것이 사용되는 것임을 특징으로 하는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물의 제조방법.
  8. 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯을 40~50℃, 60~80 MPa 조건의 물로 100~120분 동안 가압 처리하는 초고압 전처리 후, 상기 전처리된 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯에 용매를 가하여 120~200℃, 0.1~15 MPa 조건에서 10~30분 동안 아임계 추출하여 제조되는 상황버섯, 표고버섯 및 느타리버섯 추출물을 유효성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~15 중량% 함유하는 화장료 조성물.
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